EA013689B1

EA013689B1 - Антагонисты мускариновых ацетилхолиновых рецепторов

Info

Publication number: EA013689B1
Application number: EA200702619A
Authority: EA
Inventors: Якоб Буш-Петерсен; Майкл Р. Палович; Цзехун Вань; Хунсин Янь; Чунцзе Чжу
Original assignee: Глэксо Груп Лимитед
Priority date: 2003-10-14
Filing date: 2004-10-12
Publication date: 2010-06-30
Also published as: EP1677795B1; OA13316A; CA2542657A1; JP2011162556A; CN101230061A; AP2007004238A0; CA2542657C; NO20062042L; UA89734C2; CY1111364T1; HRP20110232T1; EA009899B1; AP1828A; DE602004030930D1; AP2007004239A0; MA28110A1; EA200600773A1; EA200702619A1; AR046103A1; IL188112A

Abstract

В настоящем изобретении описываются антагонисты мускариновых ацетилхолиновых рецепторов и способы их использования.

Description

Настоящее изобретение относится к новым производным соединений 8-азониабицикло[3,2,1]октанов, фармацевтическим композициям, способам их изготовления и их применению для лечения заболеваний, опосредованных М₃ мускариновыми ацетилхолиновыми рецепторами.

Холинергические нейроны периферической и центральной нервной системы высвобождают ацетилхолин, который воздействует на множество различных биологических процессов путем взаимодействия с двумя главными классами ацетилхолиновых рецепторов, представленных никотиновыми и мускариновыми ацетилхолиновыми рецепторами. Мускариновые ацетилхолиновые рецепторы (тАСЬЕк) принадлежат к суперсемейству рецепторов с иммобилизованным С-белком, имеющему семь трансмембранных доменов. Существует пять подтипов тАСЬЕк, обозначаемых М₁-М₅, и каждый из подтипов представляет собой продукт отдельного гена. У каждого из этих пяти подтипов проявляются уникальные фармакологические свойства. Мускариновые ацетилхолиновые рецепторы широко распространены в органах позвоночных животных, и эти рецепторы могут являться медиаторами или торможения, или возбуждения. Например, в гладкой мускулатуре дыхательных путей, мочевого пузыря и желудочнокишечного тракта М₃ тАСЬЕк вызывают реакции сокращения. Обзор этих данных можно прочитать в (Вго\\п. 1989, 247).

При некоторых различных патофизиологических состояниях отмечается дисфункция мускариновых ацетилхолиновых рецепторов. Например, состояние воспаления при астме и хронической обструктивной болезни легких (СОРЭ) ведет к потере у М₂ мускариновых ацетилхолиновых ауторецепторов функции торможения парасимпатических нервов, иннервирующих гладкие мышцы легких, что вызывает увеличение высвобождения ацетилхолина с последующей вагусной стимуляцией. Такая дисфункция тАСЬЕк приводит к повышенной реактивности дыхательных путей, вызванной усилением стимуляции М3 тАСЬЕк (Со51с11о. Еуапк, с1 а1., 1999, 72) (МтсИс. Ьаттега, с1 а1., 1989, 248). Аналогично, состояние воспаления желудочно-кишечного тракта при воспалительной болезни кишечника (ΙΒΌ) приводит к М₃тАСЬЕк-опосредованной гиперкинезии (Ορτίηκ, Меует, е1 а1., 2000, 245). Также выявлялось недержание мочи вследствие гиперсократимости, вызванной усилением стимуляции М₃ тАСЬЕк (Недбе & Ед1еп, 1999, 251). Таким образом, идентификация подтип-селективных антагонистов тАСЬЕк может быть полезной для лечения этих тАСЬЕк-опосредованных болезней.

Несмотря на большое количество доказательств в поддержку использования антимускариновых рецепторов для лечения ряда клинических состояний, в клинике применяется относительно мало антимускариновых соединений. Таким образом, существует потребность в новых соединениях, способных вызывать блокаду М₃ тАСЬЕк. Соединения, являющиеся ингибиторами связывания тАСЬЕк, могут иметь эффект при состояниях, связанных с усилением стимуляции М₃ тАСЬЕк, таких как астма, СОРЭ, ΙΒΌ и недержание мочи.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение касается способа лечения заболевания, опосредованного мускариновыми ацетилхолиновыми рецепторами (тАСЬЕк), в котором ацетилхолин связывается с М₃ тАСЬЕк, при этом способ содержит введение эффективного количества соединения формулы (I) или формулы (II) [кроме соединения формулы (ΙΙ), где Е2 и Е3 представляют собой 2-тиофен и Е4 представляет собой -ОС(О)СН3], или их фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также относится к способу ингибирования связывания ацетилхолина его рецепторами у млекопитающих, нуждающихся в таком лечении, который включает введение вышеупомянутому млекопитающему эффективного количества соединения формулы (I) или формулы (II).

Настоящее изобретение также относится к новым соединениям формулы (I) или формулы (II) и фармацевтическим композициям, содержащим соединения формулы (I) или формулы (II) и фармацевтический носитель или разбавитель.

в которых обозначенный атом водорода Н находится в экзо-положении;

Е1^- представляет собой анион, связанный с положительным зарядом атома N. Е1^- может представлять собой хлорид, бромид, йодид, сульфат, бензолсульфонат и толуолсульфонат, но не ограничивается вышеперечисленным;

Е2 и Е3 независимо выбраны из группы, состоящей из прямой или разветвленной цепи групп низших алкилов (предпочтительно от 1 до 6 атомов углерода), циклоалкильных групп (имеющих от 5 до 6 атомов углерода), циклоалкил-алкила (имеющего 6-10 атомов углерода), гетероциклоалкила (имеющего

- 1 013689

5-6 атомов углерода) и N или О в качестве гетероатома, гетероциклоалкил-алкила (имеющего 6-10 атомов углерода) и N или О в качестве гетероатома, арила, необязательно замещенного арила, гетероарила и необязательно замещенного гетероарила;

К4 выбран из группы, состоящей из (С₁-С₆)алкила, (С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₃-С₇)гетероциклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₇)гетероциклоалкила, арила, гетероарила, (С₁-С₆) алкил-арила, (С₁-С₆)алкил-гетероарила, -ОК5, -СН₂ОК5, -СН₂ОН, -СУ -СЕ₃, -СН₂О(СО)К6, -СО₂К7, -0Η₂ΝΗ₂, -СН;\(Н7)УО;Н5. -8О;\(Н7)(Н8). -СОуК7)(К8), -СН₂уК8)СО(К6), -СН_;\(Н8)8О_;(Н6). -СН₂уК8)СО₂(К5), -СН^(К8)СОМН(К7);

К5 выбран из группы, состоящей из (С₁-С₆)алкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₁-С₆)алкил (С₃-С₇)гетероциклоалкила, (С₁ -С₆)алкил-арила, (С₁ -С₆)алкил-гетероарила;

К6 выбран из группы, состоящей из (С₁-С₆)алкила, (С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₃-С₇)гетероциклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₇)гетероциклоалкила, арила, гетероарила, (С₁-С₆) алкил-арила, (С₁ -С₆)алкил-гетероарила;

К7 и К8 независимо выбраны из группы, состоящей из Н, (С₁-С₆)алкила, (С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₃С₇)гетероциклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₇)гетероциклоалкила, (С₁-С₆) алкил-арила и (С₁-С₆)алкил-гетероарила.

Подходящие фармацевтически приемлемые соли известны специалистам в данной области техники и включают основные соли неорганических и органических кислот, таких как соляная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, метансульфокислота, этансульфокислота, уксусная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, молочная кислота, щавелевая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, бензойная кислота, салициловая кислота, фенилуксусная кислота и миндальная кислота. Кроме того, фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) или формулы (II) могут также образовываться с фармацевтически приемлемым катионом. Подходящие фармацевтически приемлемые катионы известны специалистам в данной области техники и включают щелочные, щелочно-земельные, аммониевые и четверичные аммониевые катионы.

Следующие термины, используемые в настоящем изобретении, означают галогены представляют собой все галогены, включая хлор, фтор, бром и йод;

С_1-10алкил или алкил представляет собой функциональную группу в виде как прямой, так и разветвленной цепи, имеющей от 1 до 10 атомов углерода, если длина цепи не ограничена иначе, включающей метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил и т.п., но не ограниченной этим;

циклоалкил приводится в настоящем изобретении для обозначения циклической функциональной группы, предпочтительно имеющей от 3 до 8 атомов углерода, включающей циклопропил, циклопентил, циклогексил, и т.п., но не ограничивается этим;

алкенил приводится в настоящем изобретении для обозначения функциональной группы прямой или разветвленной цепи, имеющей от 2 до 10 атомов углерода, если длина цепи не ограничена иначе, включающей винил, 1-пропенил, 2-пропенил, 2-метил-1-пропенил, 1-бутенил, 2-бутенил и т.п., но не ограничивается этим;

арил представляет собой фенил и нафтил;

гетероарил (самостоятельно или в любой комбинации, такой как гетероарилокси или гетероарилалкил) представляет собой 5-10-членную систему ароматических колец, в которой одно или более колец содержит один или более гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О или 8, таких как пиррол, пиразол, фуран, тиофен, хинолин, изохинолин, хиназолинил, пиридин, пиримидин, оксазол, тетразол, тиазол, тиадиазол, триазол, имидазол или бензимидазол, но не ограничивается этим;

гетероциклический (самостоятельно или в любой комбинации, такой как гетероциклоалкил) представляет собой насыщенные или частично ненасыщенные 4-10-членные кольцевые системы, в которых одно или более колец содержит один или более гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О или 8; таких как пирролидин, пиперидин, пиперазин, морфолин, тетрагидропиран, тиоморфолин или имидазолидин, но не ограничивается этим. Кроме того, сера может быть необязательно окислена до сульфона или сульфоксида;

арилалкил, или гетероарилалкил, или гетероциклоалкил приводится в настоящем изобретении для обозначения С_1-10алкила, как указано выше, присоединенного к арильной, гетероарильной или гетероциклической функциональной группе, если не указано иное;

сульфинил представляет собой оксид 8(О) соответствующего сульфида, термин тио относится к сульфиду, и термин сульфонил относится к полностью окисленной функциональной группе 8(О)₂;

в которой две функциональные группы К₁ (или две функциональные группы Υ) могут вместе образовывать насыщенное или ненасыщенное 5- или 6-членное кольцо приводится в настоящем изобретении для обозначения ароматической кольцевой системы, такой как нафталин, или обозначает фенильную функциональную группу, присоединенную к 6-членному частично насыщенному или ненасыщенному кольцу, такую как С₆-циклоалкенильную функциональную группу, то есть гексен, или С₅циклоалкенильную функциональную группу, такую как циклопентен.

Предпочтительные соединения, полезные для настоящего изобретения, включают

- 2 013689 (эндо)-3-(2-метокси-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид; 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионитрил;

(эндо)-8-метил-3-(2,2,2-трифенил-этил)-8-азабицикло[3,2,1]октан; 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионамид; 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионовую кислоту; (эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид; (эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан бромид; 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропан-1-ол;

Ы-бензил-3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионамид; (эндо)-3-(2-карбамоил-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид; 1-бензил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевину; 1-этил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевину; Ы-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]ацетамид; Ы-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]бензамид; 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дитиофен-2-ил-пропионитрил;

(эндо)-3-(2-циано-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид; Ы-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]бензолсульфонамид; [3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевину;

М-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]метансульфонамид и (эндо)-3-{2,2-дифенил-3-[(1-фенил-метаноил)амино]пропил}-8,8-диметил-8-азонийбицикло [3,2,1]октан бромид.

Более предпочтительные соединения настоящего изобретения включают (эндо)-3-(2-метокси-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид; (эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид; (эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан бромид; (эндо)-3-(2-карбамоил-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид; (эндо)-3-(2-циано-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид и (эндо)-3-{2,2-дифенил-3-[(1-фенил-метаноил)амино]пропил}-8,8-диметил-8-азонийбицикло [3,2,1]октан бромид.

Способы получения Получение

Получение соединений формулы (I) и формулы (II) можно осуществлять с применением способов синтеза, некоторые из которых показаны далее на схемах. Синтез, осуществленный по этим схемам, применяется для получения соединений формулы (I) и формулы (II), имеющих ряд различающихся К1, К.2, К3 и К4, которые вступают в реакцию с заместителями, соответствующим образом защищенными, для достижения совместимости с реакциями настоящего изобретения. В этом случае последующее снятие защитных групп предоставляет соединениям возможность в целом раскрыть их природу. Ряд показанных схем содержат соединения только формулы (II), тем не менее, они приводятся лишь для иллюстрации.

Схема I представляет общий способ получения. Синтез начинают с соединения 1. Восстановление с алюмогидридом лития (БАН) дает спирт 2. Замещение йодом дает соединение 3. Реакция связывания с анионом, полученная из НСК2(К3)(К4), дает затем соединение 4, которое легко превращается в аммониевую соль 5.

Схема I

Более конкретный способ получения, приводящий к соединению с формулой (II), приводится на схеме II. Алкилирование сложного эфира НС(Рй)₂СО₂СН₃ соединением 3 дает соединение 6. Гидролиз соединения 6 приводит к образованию кислоты 7. Опосредованная 1,3-дициклогексилкарбодиимидом (ОСС) конденсация кислоты с спиртом (К7)ОН приводит к образованию затем сложного эфира 8. Конденсацией кислоты 7 с амином (Κ7)(Κ8)ΝΗ в подходящих условиях для связывания амида, хорошо из

- 3 013689 вестных специалистам в данной области техники, получают амид 9, такой как 1-(3-диметиламинопропил)3-этилкарбодиимид гидрохлорид (ЕЭС-НС1) и 1-гидроксибензотриазол гидрат (НОВ!). Восстановлением полученного спирта 6 получают соединение 10. Реакция соединения 10 с хлорангидридом кислоты (К6)СОС1 или кислотой (К6)СО₂Н приводит к образованию сложного эфира 11. Алкилирование соединения 10 с подходящими реагентами, такими как (К.5) бром, дает затем соединение 12.

Соединения со структурами, сходными с соединениями 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12, превращали в соответствующие аммониевые соли путем реакции с подходящими реагентами, такими как МеВг и Ме1 (не показанными на схеме). В некоторых способах получения использовали способы введения и снятия защит ных групп.

Схема II

Более конкретный способ получения соединений формулы (II) приведен на схеме III. Алкилирование Ηί.'(Ρ1ι)₂ί.'Ν с соединением 3 дает нитрил 13. Гидролиз соединения 13 как в присутствии оснований (например, ΝαΟΗ и Н₂О₂), так и присутствии кислот (например, Н₂8О₄), дает амид 14. Восстановление соединения 13 приводит к получению амина 15, который преобразуется в амид 16, карбамид 17, сульфонамид 18 и мочевину 19. Конденсацией соединения 15 с альдегидом (К8)СН(О) с последующим восстановлением с помощью NаВН(ΟΑс)з, получают амин 20, который легко превращается в амид 21, карбамид 22, мочевину 23 и сульфонамид 24.

Соединения со структурами, сходными с соединениями 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 и 24, превращали в соответствующие аммониевые соли путем реакции с подходящими реагентами, такими как МеВг и МеI (не показанными на схеме). В некоторых способах получения использовали подходящие способы введения и снятия защитных групп.

- 4 013689

Схема III

23

Более конкретный способ получения соединений формулы (II) приведен на схеме IV. Алкилирование соединения 25 с помощью (К5)Вт приводит к получению соединения 26. Реакция 25 с реагентом Лоуссона (Ьа\\'С550п'5 геадеи!) дает соединение 27. Окисление соединения 27 с помощью 8О₂С1₂ и ΚΝΟ₃дает соединение 28, которое превращается или в соединение 29, или в сульфонамид 30.

Соединения со структурами, сходными с соединениями 26, 27, 29 и 30, легко превращали в соответствующие аммониевые соли путем реакции с подходящими реагентами, такими как МеВг и ΜеI (не показанными на схеме). В некоторых способах получения использовали подходящие способы введения и снятия защитных групп.

Схема IV

зо

Примеры синтеза

Нижеследующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение, но никаким образом не ограничивают его объем.

- 5 013689

Пример 1.

(Эндо)-3-(2-метокси-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид.

К раствору 2-(8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-1,1-дитиофен-2-ил-этанола (полученного в соответствии с И82800482) (212 мг, 0,64 ммоль) в 5 мл метиленхлорида и йодметана (0,40 мл, 6,4 ммоль) добавляли 50%-ный водный гидроксид калия (0,25 мл, 3,2 ммоль) и тетрабутиламмония хлорид (5 мг, 3 мол.%). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 дней. Каждый день добавляли дополнительное количество 0,2 мл йодметана и 0,1 мл гидроксида калия. После этого реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разводили метиленхлоридом и промывали водой. Водный слой экстрагировали с метиленхлоридом и объединенные органические слои промывали с солевым раствором, обезвоженным Мд8О₄, и выпаривали в вакууме. Сырой продукт перекристаллизовывали из метиленхлорида/этилацетата до получения 109 мг указанного в заголовке соединения со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) жидкостная хроматография - масс-спектрометрия, отношение массы к заряду т/ζ 362 (М)⁺.

Пример 2.

3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло [3,2,1]окт-3 -ил)-2,2-дифенил-пропионитрил.

2а). Получение ((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)метанола.

Смесь 1,1-диметилэтил(эндо)-3-(гидроксиметил)-8-азабицикло[3,2,1]октан-8-карбоксилата (0,50 г, 2,05 ммоль) и ЫЛ1Н₄ (6,16 мл, 1,0 М в тетрагидрофуране (ТГФ), 6,16 ммоль) нагревали при 80°С в микроволновом реакторе в течение 60 мин. Затем раствор смешивали с насыщенным раствором №ь8О₄. фильтровали через целит и выпаривали до получения указанного в заголовке соединения (0,31 г, 97%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 156 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (СБС1з) δ 1,28 (с, 1Н), 1,59 (м, 4Н), 1,90 (м, 1Н), 2,13 (м, 4Н), 2,32 (с, 3Н), 3,17 (с, 2Н), 3,59 (д, 2Н).

2Ь). Получение (эндо)-3-йодметил-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана.

Раствор йода (6,67 г, 25,8 ммоль) и ((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)метанола (2,0 г, 12,9 ммоль) в СН₂С1₂ (120 мл) смешивали с РРй₃ (на смоле, 8,6 г, 3 ммоль/г, 25,8 ммоль). Получаемую смесь перемешивали в течение 17 ч, фильтровали и выпаривали до получения указанного в заголовке соединения (2,63 г, 77%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 266 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (СБС1з) δ 2,05 (м, 4Н), 2,39 (м, 3Н), 2,79 (д, 3Н), 2,98 (м, 2Н), 3,45 (д, 2Н), 3,81 (с, 2Н).

2с). Получение 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионитрил.

Раствор (эндо)-3-йодметил-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана (1,06 г, 4,0 ммоль) и Ρ1ι₂ί.Ήί.’Ν (2,32 г, 12,0 ммоль) в диметилформамиде (ДМФ) (20 мл) смешивали с ΝαΗ (0,288 г, 12,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 мин. Фильтрацию и очистку осуществляли путем обращенно-фазной жидкостной хроматографии высокого разрешения ВЭЖХ (Οίίδοη), с получением указанного в заголовке соединения (1,16 г, 93%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 331 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (СПС1₃) δ 1,64 (м, 2Н), 2,14 (м, 1Н), 2,26 (м, 2Н), 2,34 (м, 2Н), 2,52 (м, 2Н), 2,75 (м, 5Н), 3,83 (с, 2Н), 7,39 (д, 10Н).

- 6 013689

Пример 3.

(Эндо)-8-метил-3-(2,2,2-трифенил-этил)-8-азабицикло[3,2,1]октан.

Раствор трифенилметана (0,276 г, 1,13 ммоль) в ТГФ (0,5 мл) смешивали с н-ВиЫ (0,706 мл, 1,6 М в гексане, 1,13 ммоль). Раствор перемешивали в течение 10 мин и добавляли раствором (эндо)-3-йодметил8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана (100 мг, 0,377 ммоль) в ДМФ (1,0 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 мин, смешивали с Н₂О (0,1 мл), выпаривали и фильтровали. Затем осуществляли очистку путем обращенно-фазной ВЭЖХ (СИкои.), с получением указанного в заголовке соединения (23,8 мг, 17%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 382 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (СПС1₃) δ 1,07 (д, 2Н), 2,12 (м, 1Н), 2,22 (м, 4Н), 2,31 (м, 2Н), 2,65 (д, 3Н), 2,97 (д, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 7,21 (м, 3Н), 7,30 (д, 12Н).

Пример 4.

3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло [3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионамид.

Раствор 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионитрила (53 мг, 0,16 ммоль) в СН₂С1₂ (0,25 мл) смешивали с Н₂8О₄ (0,28 мл, 96%) и перемешивали при 40°С в течение 30 ч. Затем смесь выливали на лед, нейтрализовали ΝΗ₃·Η₂Ο, выделяли с помощью ЕЮАс и выпаривали. Полученный остаток растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) и фильтровали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (Сйкои) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (17,2 мг, 30%) со следующими показателями: масс-спектрометрия М8 (Е8) т/ζ 347 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (СПС1₃) δ 1,31 (д, 2Н), 1,98 (м, 1Н), 2,28 (м, 4Н), 2,39 (м, 2Н), 2,67 (д, 3Н), 2,79 (д, 2Н), 3,66 (с, 2Н), 5,82 (с, шир., 1Н), 6.88 (с, шир., 1Н), 7,37 (м, 10Н).

Пример 5.

3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло [3,2,1]окт-3 -ил)-2,2-дифенил-пропионовая кислота.

В раствор 2-[(3-эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил]-1,1-дифенилэтанола (100 мг, 1,56 ммоль) в НСООН (0,25 мл) быстро добавляли Н₂8О₄ (2,73 мл, 90%) при 0°С. Реакционную пробирку немедленно закупоривали и сохраняли в холодильнике при -20°С в течение 7 дней. Раствор выливали на лед, нейтрализовали с ΝΗ₃·Η₂Ο, выделяли с помощью ЕЮАс и выпаривали. Полученный остаток растворяли в ДМСО и фильтровали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (Сйкои) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (52 мг, 48%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 350 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (МеОЭ) δ 1,39 (д, 2Н), 1,86 (м, 1Н), 1,97 (м, 2Н), 2,30 (м, 4Н), 2,69 (с, 3Н), 2,84 (д, 2Н), 3,69 (с, 2Н), 7,28 (м, 2Н), 7,36 (м, 8Н).

Пример 6.

I н

(Эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан бромид.

- 7 013689

Раствор 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил]-2,2-дифенил-пропионитрила (310 мг, 0,938 ммоль) в ацетоне (6,0 мл) смешивали с МеВг (4,69 мл, 2,0 М в 1-ВиОМе. 0,938 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 мин и фильтровали. Твердый остаток промывали с ацетоном (2x3 мл) до получения указанного в заголовке соединения (333 мг, 83%) со следующими показателями: БСМ8 (Е8) т/ζ 345 (М)⁺;

Ή-ЯМР (МеОО) δ 1,82 (д, 2Н), 2,17 (м, 1Н), 2,35 (м, 2Н), 2,49 (м, 4Н), 3,01 (д, 2Н), 3,07 (с, 3Н), 3,10 (с, 3Н), 3,79 (с, 2Н), 7,36 (м, 2Н), 7,43 (м, 4Н), 7,49 (м, 4Н).

Пример 7.

(Эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид.

Раствор 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионитрила (26,5 мг, 0,080 ммоль) в СН₂С1₂ (0,5 мл) и МеСЫ (0,5 мл) перемешивали с Ме1 (0,125 мл, 2,00 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, разбавляли ДМСО (0,3 мл) и выпаривали. Последующая очистка обращение-фазной ВЭЖХ (Сйхоп) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (22,9 мг, 60%) со следующими показателями: БСМ8 (Е8) т/ζ 345 (М)⁺;

Ή-ЯМР ^С1₃) δ 1,83 (д, 2Н), 2,17 (м, 1Н), 2,35 (м, 2Н), 2,49 (м, 4Н), 3,01 (д, 2Н), 3,07 (с, 3Н), 3,10 (с, 3Н), 3,79 (с, 2Н), 7,36 (м, 2Н), 7,43 (м, 4Н), 7,49 (м, 4Н).

Пример 8.

3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло [3,2,1]окт-3 -ил)-2,2-дифенил-пропан-1-ол.

Смесь 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионовой кислоты (42,5 мг, 0,122 ммоль) и Ь1Л1Н₄ (0,488 мл, 1,0 М в ТГФ, 0,488 ммоль) нагревали в микроволновом реакторе при 100°С в течение 1 ч. Смесь разбавляли насыщенным раствором Ыа₂8О₄, фильтровали через целит и выпаривали. Полученный остаток растворяли в ДМСО и фильтровали.

Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (СЮоп) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (29,1 мг, 71%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 336 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР ^С1₃) δ 1,40 (д, 2Н), 1,92 (м, 1Н), 2,29 (м, 6Н), 2,59 (м, 2Н), 2,68 (д, 3Н), 3,72 (с, 2Н), 4,16 (с, 2Н), 7,13 (м, 3Н), 7,30 (м, 7Н).

Пример 9.

Х-Бензил-3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионамид.

Раствор 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионовой кислоты (82,0 мг, 0,235 ммоль) в СН₂С1₂ (3,0 мл) смешивали с РЬСН₂ЫН₂ (28,2 мкл, 0,258 ммоль), хлористым этиленом (ЕОС) (49,5 мг, 0,258 ммоль), НОВ! (3,2 мг, 0,024 ммоль) и (СН₃СН₂)₃Х (0,232 мл, 1,65 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 ч и выпаривали. Полученный остаток растворяли в ДМСО и фильтровали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (61коп) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (29,8 мг, 30%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 439 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР ^С1₃) δ 1,34 (д, 2Н), 1,96 (м, 1Н), 2,23 (м, 2Н), 2,38 (м, 4Н), 2,63 (д, 3Н), 2,83 (д, 2Н), 3,66 (с, 2Н), 4,41 (д, 2Н), 6,93 (м, 2Н), 7,22 (м, 3Н), 7,38 (м, 10Н).

- 8 013689

Пример 10.

(Эндо)-3-(2-карбамоил-2,2-дифенил-этил)8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид.

Указанное в заголовке соединение изготавливали из 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3ил)-2,2-дифенил-пропионамида в соответствии со способом примера 7 (33% выхода) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 363 (М)⁺;

¹Н-ЯМР ^С1₃) δ 1,49 (д, 2Н), 1,95 (м, 1Н), 2,25 (м, 2Н), 2,42 (м, 4Н), 2,84 (д, 2Н), 3,17 (с, 3Н), 3,23 (с, 3Н), 3,93 (с, 2Н), 5,65 (с, 1Н), 5,91 (с, 1Н), 7,39 (м, 10Н).

Пример 11.

№Бензил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевина.

lla) . 3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропиламин.

Раствор 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионитрила (250 мг, 0,758 ммоль) в ТГФ (2,5 мл) смешивали с ВН₃ (2,53 мл, 1,5 М в ТГФ, 3,79 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч и разбавляли Н₂О (1,0 мл). Затем раствор смешивали с К₂СО₃ (0,1 г) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Отделяли органические слои и водную часть экстрагировали с ЕЮАс (2x3 мл). Органические слои объединяли, обезвоживали с Να₂8Ο.·ι и выпаривали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (Сйкои) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (159 мг, 63%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 335 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (МеОН) δ 1,35 (д, 2Н), 2,01 (м, 3Н), 2,34 (с, 4Н), 2,55 (с, 2Н), 2,68 (с, 3Н), 3,73 (м, 5Н), 7,26 (м, 4Н), 7,33 (м, 2Н), 7,43 (м, 4Н).

llb) . 1-Бензил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевина.

Раствор 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропиламина (50,0 мг, 0,149 ммоль) в СН₂С1₂ (2,0 мл) смешивали с Ρ1ιί'Ή₂ΝΟΟ (20,4 мкл, 0,164 ммоль) и (СН₃СН₂)^ (62,8 мкл, 0,447 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и выпаривали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (СШои) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (13,0 мг, 19%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 468 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (МеОН) δ 1,24 (д, 2Н), 1,94 (м, 3Н), 2,25 (м, 4Н), 2,49 (д, 2Н), 2,67 (с, 3Н), 3,62 (с, 2Н), 3,97 (с, 2Н), 4,23 (с, 2Н), 7,22 (м, 6Н), 7,33 (м, 4Н).

Пример 12.

1-Этил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло [3,2,1]окт-3 -ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевина.

Титульное соединение изготавливали из 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2дифенил-пропиламина и СН₃СН^СО в соответствии со способом примера 11 (45% выхода): ЬСМ8 (Е8) т/ζ 406 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (\1сО1)) δ 1,03 (т, 3Н), 1,33 (д, 2Н), 1,94 (м, 3Н), 2,25 (м, 4Н), 2,55 (д, 2Н), 2,67 (с, 3Н), 3,07 (кв, 2Н), 3,68 (с, 2Н), 3,94 (с, 2Н), 7,24 (м, 6Н), 7,34 (м, 4Н).

- 9 013689

Пример 13.

Х-[3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]ацетамид.

Раствор 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропиламина (33,4 мг, 0,10 ммоль) в СН₂С1₂ (0,5 мл) смешивали с Ас₂О (18,9 мкл, 0,20 ммоль) и пиридином (16,2 мкл, 0,20 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и выпаривали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (Сйкои) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (10,7 мг, 29%) со следующими показателями: БСМБ (Е8) т/ζ 377 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (МеОЭ) δ 1,26 (д, 2Н), 1,82 (с, 3Н), 1,96 (м, 3Н), 2,26 (с, 4Н), 2,53 (д, 2Н), 2,67 (с, 3Н), 3,66 (с, 2Н), 4,00 (с, 2Н), 7,24 (м, 6Н), 7,33 (м, 4Н).

Пример 14.

Ы-[3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]бензамид.

Указанное в заголовке соединение изготавливали из 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3ил)-2,2-дифенил-пропиламина и (РйСО)₂О в соответствии со способом примера 13 (8% выхода) со следующими показателями: БСМБ (Е8) т/ζ 439 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (МеОЭ) δ 1,28 (д, 2Н), 2,00 (м, 3Н), 2,24 (с, 4Н), 2,59 (д, 2Н), 2,67 (с, 3Н), 3,65 (с, 2Н), 4,21 (с, 2Н), 7,31 (м, 6Н), 7,39 (м, 6Н), 7,50 (м, 3Н).

Пример 15.

3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дитиофен-2-ил-пропионитрил.

Указанное в заголовке соединение изготавливали из (эндо)-3-йодметил-8-метил-8азабицикло[3,2,1]октана и 2,2-дитиофен-2-ил-ацетонитрила в соответствии со способом примера 2С (34% выхода) со следующими показателями: ЬСМБ (Е8) т/ζ 343 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (СБС1₃) δ 1,79 (м, 2Н), 2,21 (м, 2Н), 2,33 (м, 2Н), 2,62 (м, 2Н), 2,73 (м, 4Н), 3,80 (м, 2Н), 4,35 (с, 2Н), 7,02 (м, 2Н), 7,23 (м, 2Н), 7,37 (м, 2Н).

Пример 16.

(Эндо)-3-(2-циано-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азонийбицикло[3,2,1]октан йодид.

Указанное в заголовке соединение изготавливали из 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3ил)-2,2-дитиофен-2-ил-пропионитрила в соответствии со способом примера 7 (43%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 345 (М)⁺;

Ή-ЯМР (СОС1₃) δ 1,82 (д, 2Н), 2,35 (м, 2Н), 2,23 (м, 3Н), 2,58 (м, 4Н), 2,82 (м, 2Н), 3,37 (с, 6Н), 4,25 (с, 2Н), 7,02 (м, 2Н), 7,24 (м, 2Н), 7,36 (м, 2Н).

- 10 013689

Пример 17.

№[3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]бензолсульфонамид.

Раствор 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропиламина (67,0 мг, 0,20 ммоль) в СН₂С1₂ (2,0 мл) смешивали с РЬ8О₂С1 (28,2 мкл, 0,22 ммоль) и (ΟΗ₃ΟΗ₂)₃Ν (84,3 мкл, 0,60 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и выпаривали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (ΟίΠοη) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (51,5 мг, 54%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 475 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (МеОЭ) δ 1,39 (д, 2Н), 2,01 (м, 3Н), 2,30 (с, 4Н), 2,69 (с, 5Н), 3,60 (с, 2Н), 3,68 (с, 2Н), 7,12 (м, 4Н), 7,27 (м, 6Н), 7,55 (м, 2Н), 7,63 (м, 1Н), 7,78 (м, 2Н).

Пример 18.

[3 -((Эндо)-8-метил-8-азабицикло [3,2,1]окт-3 -ил)-2,2-дифенил-пропил]мочевина.

К раствору 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропиламина (50,0 мг, 0,149 ммоль) в СН₂С1₂ (4,0 мл), добавляли СКО^СО (31,2 мкл, 0,358 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней и выпаривали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (С1кои) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (21,6 мг, 38%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 378 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (МеОЭ) δ 1,33 (д, 2Н), 2,01 (м, 3Н), 2,29 (с, 4Н), 2,57 (м, 2Н), 2,68 (с, 3Н), 3,69 (с, 2Н), 4,01 (с, 2Н), 7,25 (м, 6Н), 7,34 (м, 4Н).

Пример 19.

№[3-((Эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]метансульфонамид.

Указанное в заголовке соединение изготавливали из 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3ил)-2,2-дифенил-пропиламина и Ме8О₂С1 в соответствии со способом примера 17 (28% выхода) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 413 (М+Н)⁺;

Ή-ЯМР (МеОЭ) δ 1,39 (д, 2Н), 1,97 (м, 3Н), 2,30 (с, 4Н), 2,68 (с, 3Н), 2,76 (с, 3Н), 3,68 (с, 2Н), 3,84 (с, 2Н), 7,23 (с, 6Н), 7,33 (с, 4Н).

Пример 20.

(Эндо-3-{2,2-дифенил-3-[(1-фенил-метаноил)амино]пропил}-8,8-диметил-8-азонийбицикло [3,2,1] октан бромид.

Раствор №[3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]бензамида (29 мг, 0,0683 ммоль) в СН₂С1₂ (0,5 мл) и ацетоне (0,5 мл) смешивали с МеВг (0,342 мл, 2,0 М в !бутилметиловом эфире, 0,683 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в

- 11 013689 течение 3 ч и выпаривали. Последующая очистка обращенно-фазной ВЭЖХ (Οίίκοη) обеспечивала получение указанного в заголовке соединения (19,6 мг, 64%) со следующими показателями: ЬСМ8 (Е8) т/ζ 453 (М)⁺;

¹Н-ЯМР (МеОИ) δ 1,20 (д, 2Н), 2,32 (м, 7Н), 2,65 (д, 2Н), 2,98 (с, 3Н), 3,02 (с, 3Н), 3,60 (с, 2Н), 4,22 (с, 2Н), 7,30 (м, 6Н), 7,39 (м, 6Н), 7,50 (с, 3Н).

Биологические примеры

Ингибирующее действие соединений М₃ шАСЬЯк настоящего изобретения определяли в следующих исследованиях ίη νίίτο и ίη νίνο.

Анализ ингибирования активации рецептора мобилизацией кальция

Проводили мониторинг активированной рецептором мобилизации кальция, как ранее описано¹⁰, для анализа экспрессированной в клетках СНО (клетках яичника китайского хомячка) стимуляции шАСЬЯк. Клетки СНО с устойчивой экспрессией М₃ шАСЬЯк помещали в 96-луночные планшеты с черными стенками и прозрачным дном. Через промежуток времени от 18 до 24 ч среду удаляли и заменяли на 100 мкл загрузочной среды (ЕМЕМ с солями Эрла, 0,1% бычий сывороточный альбумин (В8А) для радиоиммуноанализа (81дта, 8ί. Бонк МО), и 4 мкл фтор-3-ацетоксиметилового сложноэфирного флуоресцентного индикаторного красителя (Б1ио-3 АМ, Мо1еси1аг РгоЬек, Еидепе, ОК) и помещали в инкубатор на 1 ч при 37°С. Затем содержащую краситель среду удаляли и заменяли на свежую среду (без Б1ио-3 АМ) и клетки помещали в инкубатор на 10 мин при 37°С. После этого клетки промывали 3 раза и помещали в инкубатор на 10 мин при 37°С в 100 мкл оценочного буфера (0,1% желатин (8щта). 120 ммоль ИаС1, 4,6 ммоль КС1, 1 ммоль КН₂РО₄, 25 ммоль ИаНСО₃, 1,0 ммоль СаС1₂, 1,1 ммоль МдС1₂, 1,1 ммоль глюкозы, 20 ммоль НЕРЕ8 (рН 7,4)). Добавляли 50 мкл соединения (1х 10^-11 - 1 х 10^-5 М на конец анализа) и планшеты помещали в инкубатор на 10 мин при 37°С. Затем планшеты помещали в планшет-ридер интенсивности флуоресцентного излучения (ТЫРЯ Мо1еси1аг РгоЬек), где содержащие краситель клетки подвергали возбуждению светом (488 нм) с помощью аргонного лазера мощностью в 6 Вт. Клетки активировали добавлением 50 мкл ацетилхолина со скоростью 50 мкл/с (0,1-10 нМ на конец анализа), приготовленном в буфере, содержащем 0,1% В8А. Мобилизацию кальция, отслеживаемую по изменению цитозольной концентрации кальция, измеряли по изменению интенсивности эмиссии в 566 нм. Изменение в интенсивности эмиссии непосредственно зависит от уровня содержания цитозольного кальция¹¹. Во всех 96 лунках излучение флуоресценции измеряли одновременно, используя охлажденную камеру прибора с зарядовой связью (ПЗС-камеру). Полученные данные отмечали точками каждую секунду. Это данные наносили на схему и анализировали с использованием программного обеспечения ОгарйРаб РЯ18М.

Бронхоспазм, индуцированный метахолином

Ответную реакцию дыхательных путей на метахолин определяли у активных и свободно перемещающихся мышей Ва1ЬС в количестве (п=6 в каждой группе). Для измерения увеличенной паузы (Репй) использовали барометрическую плетизмографию, представляющую собой безразмерное измерение, показавшее зависимость от изменений в реактивности дыхательных путей, появляющегося во время метахолиновой провокации бронхов¹². Предварительно мышам интраназально вводили 50 мкл соединения (0,003-10 мкл на мышь) в 50 мкл носителя (10% ДМСО), и после чего их помещали в плетизмографическую камеру. В течение 10 мин мышам в камере давали успокоиться перед началом исходного Репй измерения, продолжающегося в течение 5 мин. Затем в течение 2 мин мышам вводили аэрозоль метахолина (10 мг/мл). Увеличенную паузу Репй начинали непрерывно регистрировать в течение 7 мин от начала введения аэрозоля и продолжали еще в течение 5 мин после введения. Данные по каждой мыши наносили на схему и анализировали с использованием программного обеспечения ОгарйРаб РЯ18М.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, имеющее структуру II в котором обозначенный атом Н находится в экзо-положении;

Я2 и Я3 независимо выбраны из арила или гетероарила, где арил представляет собой фенил или нафтил и гетероарил представляет собой 5-10-членную систему ароматических колец, в которой одно или более колец содержит один и более гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О или 8;

Я4 представляет собой -ΟΝ.
2. Соединение по п.1, где Я2 и Я3 оба являются арилом.
3. Соединение по п.1 или 2, где Я2 и Я3 оба являются фенилом.

- 12 013689
4. Соединение по п.1, где К2 и К.3 оба являются гетероарилом.
5. Соединение по п.1 или 4, где К2 и КЗ оба являются тиенилом.
6. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из

3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло [3,2,1]окт-3 -ил)-2,2-дифенил-пропионитрила;

3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2-дитиофен-2-ил-пропионитрила.
7. Соединение, которое представляет собой 3-((эндо)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]окт-3-ил)-2,2дифенил-пропионитрил.
8. Фармацевтическая композиция, включающая соединение согласно пп.1-6 и фармацевтически приемлемый носитель или растворитель.
9. Фармацевтическая композиция, включающая соединение согласно п.7 и фармацевтически приемлемый носитель или растворитель.