EA005686B1 - Производные пирролидина в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы, специфичной к циклическому амф - Google Patents

Производные пирролидина в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы, специфичной к циклическому амф Download PDF

Info

Publication number
EA005686B1
EA005686B1 EA200200590A EA200200590A EA005686B1 EA 005686 B1 EA005686 B1 EA 005686B1 EA 200200590 A EA200200590 A EA 200200590A EA 200200590 A EA200200590 A EA 200200590A EA 005686 B1 EA005686 B1 EA 005686B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
nmr
mhz
mmol
aryl
alkyl
Prior art date
Application number
EA200200590A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200200590A1 (ru
Inventor
Тимоти Дж. Мартинс
Керри У. Фаулер
Джошуа Одинго
Эдвард А. Кесицки
Эйми Оливер
Лоренс И. Бэрджесс
Джон Дж. Годино
Закари С. Джоунс
Брэдли Дж. Ньюхаус
Стивен Шлахтер
Original Assignee
Айкос Корпорейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Айкос Корпорейшн filed Critical Айкос Корпорейшн
Publication of EA200200590A1 publication Critical patent/EA200200590A1/ru
Publication of EA005686B1 publication Critical patent/EA005686B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)

Abstract

Предложены новые соединения ряда пирролидина, которые имеют структурную формулу (II) и которые являются сильнодействующими и селективными ингибиторами PDE4, а также способы их получения. Описано также использование соединений при лечении воспалительных заболеваний и других заболеваний, включающих повышенные уровни цитокинов, а также нарушения центральной нервной системы (ЦНС).

Description

Перекрестная ссылка на родственную заявку
Данная заявка является частично продолжающей заявку на патент США, регистрационный № 09/471846, зарегистрированной 23 декабря 1999 г., находящейся на рассмотрении.
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к ряду соединений, которые являются сильнодействующими и селективными ингибиторами фосфодиэстеразы, специфичной к циклическому аденозин-3',5'монофосфату (цАМФ-специфичная ΡΏΕ). В частности, настоящее изобретение относится к ряду новых соединений ряда пирролидина, которые можно использовать для ингибирования функции цАМФспецифичной ΡΏΕ, особенно ΡΏΕ4, а также способам получения их, фармацевтическим композициям, содержащим их, и их использованию в качестве терапевтических агентов, например, при лечении воспалительных заболеваний и других заболеваний, заключающихся в повышенных уровнях цитокинов и провоспалительных медиаторов.
Предпосылки создания изобретения
Хроническое воспаление является многофакторным осложнением заболевания, характеризующимся активацией многих типов воспалительных клеток, особенно клеток лимфоидного происхождения (в том числе Т-лимфоцитов) и миелоидного происхождения (в том числе гранулоцитов, макрофагов и моноциты). Провоспалительные медиаторы, в том числе цитокины, такие как фактор некроза опухоли (ΤΝΕ) и интерлейкин-1 (ΙΙ.-1), продуцируются указанными активированными клетками. В соответствии с этим, агент, который подавляет активацию указанных клеток или их продуцирование провоспалительных цитокинов, может быть полезным при терапевтическом лечении воспалительных заболеваний и других заболевании, заключающихся в повышенных уровнях цитокинов.
Циклический аденозинмонофосфат (цАМФ) является вторым мессенджером, который опосредует биологические ответные реакции клеток на широкий диапазон внеклеточных стимулов. Когда соответствующий агонист связывается со специфическими рецепторами поверхности клеток, аденилатциклаза активируется, превращая при этом аденозинтрифосфат (АТФ) в цАМФ. Теоретически считается, что индуцированные агонистом действия цАМФ в клетках опосредуются преимущественно действием цАМФзависимых протеинкиназ. Внутриклеточные действия цАМФ завершаются либо переносом нуклеотида за пределы клетки, либо ферментативным расщеплением фосфодиэстеразами циклических нуклеотидов (ΡΏΕ§), которые гидролизуют З'-фосфодиэфирную связь с образованием 5'-аденозинмонофосфата (5'АМФ). 5'-АМФ является неактивным метаболитом. Структуры цАМФ и 5'-АМФ иллюстрируются ниже.
- 1 005686
Повышенные уровни цАМФ в клетках миелоидного и лимфоидного происхождения человека связаны с подавлением активации клеток. Семейство внутриклеточных ферментов ΡΌΕδ, следовательно, регулирует уровень цАМФ в клетках. ΡΌΕ4 является преобладающим изотипом ΡΌΕ в этих клетках и является основным ферментом, вносящим вклад в деградацию цАМФ. В соответствии с этим, ингибирование функции ΡΌΕ может предупредить превращение цАМФ в неактивный метаболит 5'-АМФ и, следовательно, поддерживать более высокие уровни цАМФ и соответственно подавлять активацию клеток (см. Веауо е! а1., «Сусйс ШсКоВбе Ρΐιοφοάίοδίοπίδοδ: 81гис1игс. КещбаВоп апб Игид Лебов». \Убсу апб 8опк, Сй1сйе8!ег, рр. 3-14, (1990)); Тогрйу е! а1., Эгид №\\ъ апб Ρе^5^есί^νе5, 6, рр. 203-216 (1993); С|етЬусх е! а1., Сйп. Εxр. А11егду, 22, рр. 337-344 (1992)).
Было показано, что, в частности, ингибиторы ΡΌΕ4, такие как ролипрам, ингибируют продуцирование ΤΝΡα и частично ингибируют выделение 1И-1 β моноцитами (см. 8етт1ег е! а1., 1п!. 1. 1ттипорйагтасо1., 15, рр. 409-413, (1993); Мо1паг-К1тЬег е! а1., Меб1а!ог5 о£ 1пПатта1юп, 1, рр. 411-417, (1992)). Было показано также, что ингибиторы ΡΌΕ4 ингибируют продуцирование супероксидных радикалов из полиморфонуклеарных лейкоцитов человека (см. Уегдйеке е! а1., 1. Мо1. Се11. Сагбюй, 21 (кирр1. 2), 861 (1989); №е1коп е! а1., 1. А11егду 1ттипо1., 86, рр. 801-808, (1990)); ингибируют выделение вазоактивных аминов и простаноидов из базофилов человека (см. Ρеасйе11 е! а1., 1. 1ттипо1., 148, рр. 2503-2510, (1992)); ингибируют респираторные «вспышки» в эозинофилах (см. Иеп! е! а1., 1. БаипасоЕ 103, рр. 1339-1346)) и ингибируют активацию Т-лимфоцитов человека (см. КоЫскек е! а1., Вюсйет. Ρйа^тасо1., 42, рр. 869-877, (1991)).
Активация воспалительных клеток и избыточное или нерегулируемое продуцирование цитокинов (например, ΤΝΡα и ТС-1 β) вовлекаются в аллергические, аутоиммунные и воспалительные заболевания и нарушения, такие как ревматоидный артрит, остеоартрит, подагрический артрит, спондилит, тироидассоциированная офтальмопатия, болезнь Бехчета, сепсис, септический шок, эндотоксический шок, грамотрицательный сепсис, грамположительный сепсис, синдром токсического шока, астма, хронический бронхит, респираторный дистресс-синдром взрослых, хроническое легочное воспалительное заболевание, такое как хроническое закупоривающее легочное заболевание, силикоз, легочный саркоидоз, реперфузионное повреждение миокарда, головного мозга и конечностей, фиброз, муковисцидоз, келоидное образование, образование рубца, атеросклероз, нарушения, являющиеся отторжением трансплантата, такие как гомологичная болезнь и отторжение аллотрансплантата, хронический гломерулонефрит, волчанка, воспалительное заболевание кишечника, такое как болезнь Крона и неспецифический язвенный колит, пролиферативные лимфоцитарные заболевания, такие как лейкоз, и воспалительные дерматозы, такие как атопический дерматит, псориаз и крапивница.
Другие состояния, характеризующиеся повышенными уровнями цитокинов, включают повреждение головного мозга вследствие «умеренной» травмы (см. О1в11оп е! а1., 1. №иго1гаита, 12, рр. 1035-1043 (1995); 8и!!огр е! а1., 1. Сйп. 1пуе§!., 91, рр. 1421-1428 (1993)), кардиомиопатию, такую как застойная сердечная недостаточность (см. Впк1о\\· е! а1., Спси1а!юп, 97, рр. 1340-1341 (1998)), кахексия, кахексия, вторичная к инфекции или злокачественности, кахексия, вторичная к синдрому приобретенного иммунного дефицита (СПИД), АКС (спид-ассоциированный комплекс), лихорадочная миалгия вследствие инфекции, церебральная малярия, остеопороз и заболевания типа резорбции костей, келоидное образование, образование рубца на ткани и гипертермия.
В частности, ΤΝΡα был идентифицирован как играющий роль в отношении синдрома приобретенного иммунного дефицита (СПИД) человека. СПИД является результатом инфекции Т-лимфоцитов вирусом иммунодефицита (ВИЧ) человека. Хотя ВИЧ также инфицирует клетки миелоидного происхождения и сохраняется в них, было показано, что ΤΝΡ положительно регулирует ВИЧ-инфекцию в Тлимфоцитарных и моноцитарных клетках (см. Ио11 е! а1., Ριόο №111. Асаб. 8с1, И8А, 87, рр. 782-785 (1990)).
Несколько свойств ΤΝΡα, таких как стимуляция коллагеназ, стимуляция развития кровеносных сосудов ш у1уо, стимуляция костной резорбции и способность повышать прилипание опухолевых клеток к эндотелию, согласуются с ролью ΤΝΡ в развитии и метастатическом распространении рака у хозяина. Недавно было показано, что ΤΝΡα непосредственно вовлечен в активирование роста и метастаз опухолевых клеток (см. Огок/ е! а1., 1. Ехр. Меб., 177, рр. 1391-1398 (1993)).
ΡΌΕ4 является широко распространенным в тканях. Имеется по меньшей мере четыре гена для ΡΌΕ4, множественные транскрипты которого из любого данного гена могут дать несколько разных белков, которые имеют общие идентичные каталитические сайты. Аминокислотная идентичность между четырьмя возможными каталитическими сайтами выше, чем 85%. Их общая чувствительность к ингибиторам и их кинетическое сходство отражают функциональный аспект данного уровня аминокислотной идентичности. Теоретически считается, что роль этих альтернативно экспрессированных белков ΡΌΕ4 делает возможным механизм, которым клетка может дифференцированно локализовать эти ферменты внутриклеточным образом и/или регулировать каталитическую эффективность посредством посттрансляционной модификации. Любой данный тип клетки, который экспрессирует фермент ΡΌΕ4, обычно экспрессирует более чем один из четырех возможных генов, кодирующих эти белки.
- 2 005686
Исследователи проявили значительный интерес к использованию ингибиторов ΡΌΕ4 в качестве противовоспалительных агентов. Ранняя информация указывает на то, что ингибирование ΡΌΕ4 оказывает полезное действие на различные воспалительные клетки, такие как моноциты, макрофаги, Т-клетки Тй-1-происхождения и гранулоциты. Синтез и/или высвобождение многих провоспалительных медиаторов, таких как цитокины, липидные медиаторы, супероксид и биогенные амины, такие как гистамин, ослабляется в этих клетках действием ингибиторов ΡΌΕ4. Ингибиторы ΡΌΕ4 оказывают действие также на другие клеточные функции, в том числе пролиферацию Т-клеток, трансмиграцию гранулоцитов в ответ на хемотоксичные вещества и целостность соединений эндотелиальных клеток в васкулатуре.
Были сообщения о разработке, синтезе и отборе различных ингибиторов ΡΌΕ4. Метилксантины, такие как кофеин и теофиллин, были первыми описанными ингибиторами ΡΌΕ, но эти соединения являются неселективными в отношении ингибирования ΡΌΕ. Лекарственное средство ролипрам, антидепрессивный агент, было одним из первых описанных специфических ингибиторов ΡΌΕ4. Ролипрам, имеющий нижеприведенную структурную формулу, имеет описанную 50% ингибиторную концентрацию (1С50) приблизительно 200 нМ (наномолей) в отношении ингибирования рекомбинантной ΡΌΕ4 человека.
Ролипрам
Исследователи продолжали поиск ингибиторов ΡΌΕ4, которые являются более селективными в отношении ингибирования ΡΌΕ4, которые имеют 1С50 ниже, чем у ролипрама, и которые не обладают нежелательными побочными действиями на центральную нервную систему (ЦНС), такими как позыв к рвоте, рвота и седативный эффект, связанные с введением ролипрама. Один класс соединений описан в патенте США № 5665754 Ее1бшаи с1 а1. Соединения, описанные в нем, являются замещенными пирролидинами, имеющими структуру, подобную структуре ролипрама. Одно конкретное соединение, имеющее структурную формулу (I), имеет 1С50 в отношении рекомбинантной ΡΌΕ4 человека приблизительно 2 нМ. Хотя наблюдали благоприятное разделение рвотного побочного действия и эффективности, данные соединения не проявляют снижение в нежелательных побочных действиях на ЦНС.
(I)
Кроме того, несколько компаний теперь предпринимают клинические испытания с другими ингибиторами ΡΌΕ4. Однако проблемы, относящиеся к эффективности и отрицательным побочным действиям, таким как рвота и расстройство центральной нервной системы, остаются неразрешенными.
В соответствии с этим, соединения, которые селективно ингибируют ΡΌΕ4 и которые снижают или исключают побочные отрицательные действия на ЦНС, связанное с предшествующими ингибиторами ΡΌΕ4, могут быть полезными при лечении аллергических и воспалительных заболеваний и других заболеваний, связанных с избыточным или нерегулируемым продуцированием цитокинов, таких как ΤΝΡ. Кроме того, селективные ингибиторы ΡΌΕ4 могут быть полезными при лечении заболеваний, которые ассоциируются с повышенными уровнями цАМФ или функции ΡΌΕ4 в конкретной, являющейся целью, ткани.
Краткое изложение изобретения
Настоящее изобретение относится к сильнодействующим и селективным ингибиторам ΚΌΕ4, полезным при лечении заболеваний и состояний, где ингибирование активности ΚΌΕ4 считается полезным. Ингибиторы ΚΌΕ4 настоящего изобретения неожиданно снижают или исключают отрицательные побочные действия на ЦНС, связанные с предшествующими ингибиторами ΚΌΕ4.
В частности, настоящее изобретение относится к соединениям ряда пирролидина, имеющим структурную формулу (II)
- 3 005686 к3 /
(II) где Я1 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, мостиковый алкил (например, норборнил), арил, циклоалкил (например, инданил), 4-, 5- или 6-членный насыщенный гетероцикл (например, 3тетрагидрофурил), гетероарил, С1-4алкиленарил, С1-4алкилен-О-арил, С1-4алкиленгетероарил, С1-4 алкилен-Не!, С2-4алкиленарил-О-арил, С1-4алкилен-мостиковый алкил, С1-4алкиленциклоалкил (например, циклопентилметил), замещенный или незамещенный пропаргил (например, -СН2-С^С-С6Н5), замещенный или незамещенный аллил (например, -СН2СН=СН-С6Н5) и галогенциклоалкил (например, фторциклопентил);
Я2 выбран из группы, включающей водород, метил и галогензамещенный метил, например СНР2;
Я3 выбран из группы, включающий С(=О)ОЯ7, С(=О)Я7, ИНС(=О)ОЯ7, С1-3алкилен-С(=О)ОЯ8, С1-3 алкилен-С(=О)Я8, С(=ИН)ИЯ8Я9, С(=О)ИЯ8Я9, С(=О)-С(=О)ИЯ8Я9, С(=О)С(=О)ОЯ8, С1-4алкилен-ОЯ8, арил, С1-3алкиленарил, С1-3алкиленгетероарил, 8О2-гетероарил, Не! и гетероарил;
Я4 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, галогеналкил, циклоалкил и арил;
Я5 выбран из группы, включающий водород, низший алкил, алкинил, галогеналкил, гидроксиалкил, циклоалкил и арил;
Я6 выбран из группы, включающей водород, низший алкил и С(=О)Я7;
Я7 выбран из группы, включающей низший алкил, разветвленный или неразветвленный С1-4 алкиленарил, циклоалкил, Не!, С1-4алкиленциклоалкил, гетероарил и арил, причем каждый, необязатель8 8 8 8 9 но, замещен одним или несколькими заместителями из группы ОС(=О)Я , С(=О)ОЯ , ОЯ , ИЯ Я или 8Я8;
Я8 и Я9, одинаковые или разные, выбраны из группы, включающей водород, низший алкил, циклоалкил, арил, гетероарил, С(=О)О-алкил, С(=О)О-арил, С(=О)-алкил, алкил-8О2, галогеналкил-8О2, С(=О)-С1-3алкиленарил, С(О)О-С1-4алкиленарил, С1-4алкиленарил и Не!, или Я8 и Я9 вместе образуют кольцо от 4-членного до 7-членного;
Я10 выбран из группы, включающей водород, алкил, галогеналкил, циклоалкил, арил, С(=О)-алкил, С(=О)-циклоалкил, С(=О)-арил, С(=О)О-алкил, С(=О)О-циклоалкил, С(=О)-арил, СН2ОН, СН2О-алкил, СНО, СИ, ИО2 и 8О2Я11;
Я11 выбран из группы, включающей алкил, циклоалкил, трифторметил, арил, аралкил и ИЯ8Я9, и их солям и сольватам (например, гидратам).
В другом осуществлении настоящее изобретение относится к соединениям ряда пирролидина,
где Я1 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, мостиковый алкил, арил, циклоалкил, 4-, 5- или 6-членный насыщенный гетероцикл, гетероарил, С1-4алкиленарил, С1-4алкилен-О-арил, С1-4 алкиленгетероарил, С1-4алкилен-Не!, С2-4алкиленарил-О-арил, С1-4алкилен-мостиковый алкил, С1-4 алкиленциклоалкил, замещенный или незамещенный пропаргил, замещенный или незамещенный аллил и галогенциклоалкил;
Я2 выбран из группы, включающей водород, метил и галогензамещенный метил;
Я3 выбран из группы, включающий водород, С1-4алкиленарил и С(=О)-С1-3алкилен-О-С1-3 алкиленарил;
Я4 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, галогеналкил, циклоалкил и арил;
Я5 выбран из группы, включающий водород, низший алкил, алкинил, галогеналкил, гидроксиалкил, циклоалкил и арил;
Я6 выбран из группы, включающей водород, низший алкил и С(=О)Я7;
- 4 005686
Я7 выбран из группы, включающей низший алкил, разветвленный или неразветвленный, С1.4 алкиленарил, циклоалкил, Не!, С1_4алкиленциклоалкил, гетероарил и арил, причем каждый, необязательно, замещен одним или несколькими заместителями из группы ОС(=О)Я , С(=О)ОЯ , ОЯ , ΝΚ Я и 8Я ;
Я8 и Я9, одинаковые или разные, выбраны из группы, включающей водород, низший алкил, циклоалкил, арил, гетероарил, С(=О)О-алкил, С(=О)алкил, С(=О)О-арил, алкил-8О2, галогеналкил-8О2, С(=О)С1-3алкиленарил, С(О)О-С1-4алкиленарил, С1-4алкиленарил и Не!, или Я8 и Я9 вместе образуют кольцо от 4-членного до 7-членного;
Я10 выбран из группы, включающей водород, алкил, галогеналкил, циклоалкил, арил, С(=О)-алкил, С(=О)-циклоалкил, С(=О)-арил, С(=О)О-алкил, С(=О)О-циклоалкил, С(=О)-арил, СН2ОН, СН2О-алкил, СНО, ΌΝ, \О; и 8О2Я11;
Я11 выбран из группы, включающей алкил, циклоалкил, трифторметил, арил, аралкил и ΝΑΚ9. и их солям и сольватам (например, гидратам).
Настоящее изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим одно или несколько соединений структурной формулы (II), к использованию соединений и композиций, содержащих такие соединения, при лечении заболевания или нарушения и способам получения соединений и промежуточных продуктов, включенных в синтез соединений структурной формулы (II).
Настоящее изобретение относится также к способам (а) лечения состояния млекопитающего, при котором ингибирование ΡΌΕ4 обеспечивает пользу, (Ь) модуляции уровней цАМФ у млекопитающего, (с) снижения уровней ΤΝΡα у млекопитающего, (а) подавления активации воспалительных клеток у млекопитающего и (е) ингибирования функции ΡΌΕ4 у млекопитающего введением млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения структурной формулы (II) или композиции, содержащей соединение структурной формулы (II).
Подробное описание предпочтительных осуществлений
Настоящее изобретение относится к соединениям, имеющим структурную формулу (II) к3 /
(II) где Я1 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, мостиковый алкил (например, норборнил), арил, циклоалкил (например, инданил), 4-, 5- или 6-членный насыщенный гетероцикл (например, 3тетрагидрофурил), гетероарил, С1-4алкиленарил, С1-4алкилен-О-арил, С1-4алкиленгетероарил, С1-4 алкилен-Не!, С2-4алкиленарил-О-арил, С1-4алкилен-мостиковый алкил, С1-4алкиленциклоалкил (например, циклопентилметил), замещенный или незамещенный пропаргил (например, -СН2-С^С-С6Н5), замещенный или незамещенный аллил (например, -СН2СН=Н-С6Н5) и галогенциклоалкил (например, фторциклопентил);
Я2 выбран из группы, включающей водород, метил и галогензамещенный метил, например СНЕ2;
Я3 выбран из группы, включающий С(=О)ОЯ7, С(=О)Я7, NНС(=О)ОЯ7, С1-3алкилен-С(=О)ОЯ8, С1-3 алкилен-С(=О)Я8, С(=МН)МЯ8Я9, С(=О)№8Я9, С(=О)-С(=О)№8Я9, С(=О)С(=О)ОЯ8, С^алкилен-ОЯ8, арила, С1-4алкиленарил, С1-3алкиленгетероарил, 8О2-гетероарил, Не! и гетероарил;
Я4 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, галогеналкил, циклоалкил и арил;
Я5 выбран из группы, включающий водород, низший алкил, алкинил, галогеналкил, гидроксиалкил, циклоалкил и арил;
Я6 выбран из группы, включающей водород, низший алкил и С(=О)Я7;
Я7 выбран из группы, включающей низший алкил, разветвленный или неразветвленный С1-4 алкиленарил, циклоалкил, Не!, С1-4алкиленциклоалкил, гетероарил и арил, причем каждый, необязатель8 8 8 8 9 но, замещен одним или несколькими заместителями из группы ОС(=О)Я , С(=О)ОЯ , ОЯ , ΝΡ Я или 8Я8;
Я8 и Я9, одинаковые или разные, выбраны из группы, включающей водород, низший алкил, циклоалкил, арил, гетероарил, С(=О)О-алкил, С(=О)О-арил, С(=О)-алкил, алкил-8О2, галогеналкил-8О2, С(=О)-С1-3алкиленарил, С(О)О-С1-4алкиленарил, С1-4алкиленарил и Не!, или Я8 и Я9 вместе образуют кольцо от 4-членного до 7-членного;
Я10 выбран из группы, включающей водород, алкил, галогеналкил, циклоалкил, арил, С(=О)-алкил, С(=О)-циклоалкил, С(=О)-арил, С(=О)О-алкил, С(=О)О-циклоалкил, С(=О)-арил, СН2ОН, СН2О-алкил, СНО, ΟΝ, \О; и 8О2Я11;
Я11 выбран из группы, включающей алкил, циклоалкил, трифторметил, арил, аралкил и ВЯ8Я9, и их солям и сольватам (например, гидратам).
- 5 005686
В другом осуществлении настоящее изобретение относится к соединениям ряда пирролидина,
где В1 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, мостиковый алкил, арил, циклоалкил, 4-, 5- или 6-членный насыщенный гетероцикл, гетероарил, С1-4алкиленарил, С1-4алкилен-О-арил, С1-4 алкиленгетероарил, С1-4алкилен-Не!, С2-4алкиленарил-О-арил, С1-4алкилен-мостиковый алкил, С1-4 алкиленциклоалкил, замещенный или незамещенный пропаргил, замещенный или незамещенный аллил и галогенциклоалкил;
В2 выбран из группы, включающей водород, метил и галогензамещенный метил;
В3 выбран из группы, включающий водород, С1-4алкиленарил и С(=О)-С1-3алкилен-О-С1-3 алкиленарил;
В4 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, галогеналкил, циклоалкил и арил;
В5 выбран из группы, включающей водород, низший алкил, алкинил, галогеналкил, гидроксиалкил, циклоалкил и арил;
В6 выбран из группы, включающей водород, низший алкил и С(=О)В7;
В7 выбран из группы, включающей низший алкил, разветвленный или неразветвленный С1-4 алкиленарил, циклоалкил, Не!, С1-4алкиленциклоалкил, гетероарил и арил, причем каждый, необязатель8 8 8 8 9 но, замещен одним или несколькими заместителями из группы из ОС(=О)В , С(=О)ОВ , ОВ , NВ В и 8В8;
В8 и В9, одинаковые или разные, выбраны из группы, включающей водород, низший алкил, циклоалкил, арил, гетероарил, С(=О)О-алкил, С(=О)алкил, С(=О)О-арил, алкил-8О2, галогеналкил-8О2, С(=О)С1-3алкиленарил, С(О)О-С1-4алкиленарил, С1-4алкиленарил и Не!, или В8 и В9 вместе образуют кольцо от 4-членного до 7-членного;
В10 выбран из группы, включающей водород, алкил, галогеналкил, циклоалкил, арил, С(=О)-алкил, С(=О)-циклоалкил, С(=О)-арил, С(=О)О-алкил, С(=О)О-циклоалкил, С(=О)-арил, СН2ОН, СН2О-алкил, СНО, СН №2 и 8О2В11;
В11 выбран из группы, включающей алкил, циклоалкил, трифторметил, арил, аралкил и NВ8В9, и их солям и сольватам (например, гидратам).
Используемый здесь термин «алкил», приведенный отдельно или в комбинации, введен как включающий насыщенные углеводородные группы с неразветвленной и разветвленной цепью, содержащей от 1 до 16 атомов углерода, либо замещенные, либо незамещенные. Термин «низший алкил» определен здесь как алкильная группа, имеющая от одного до шести атомов углерода (С1-С6). Примеры низших алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, н-пропил, изопропил, изобутил, третичный бутил, изопентил, н-бутил, неопентил, н-гексил и тому подобное. Термин «алкинил» относится к ненасыщенной алкильной группе, которая содержит углерод-углеродную тройную связь.
Термин «мостиковый алкил» определен здесь как С6-С16бициклическая или полициклическая углеводородная группа, например норборнил, адамантил, бицикло [2.2.2] октил, бицикло [2.2.1] гептил, бицикло [3.2.1] октил, бицикло [4.1.0] гептил, бицикло [3.1.0] гексил и декагидронафтил, замещенный или незамещенный.
Термин «циклоалкил» определен здесь для включения моноциклических или конденсированных полициклических С3-С10алифатических углеводородных групп. Примеры циклоалкильных групп включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклогексил, декагидронафталин и циклопентил. Используемый здесь термин «циклоалкил» включает также циклические С3-С7алифатические углеводородные группы, конденсированные с арильным кольцом. Циклоалкильными группами, как определено здесь, являются, например, инданил и тетрагидронафталинил.
Алкильная, мостиковая алкильная или циклоалкильная группа, необязательно, может быть замещена одним или несколькими, обычно от одного до трех, заместителями, например низшим алкилом, циклоалкилом, галогеналкилом, например СР3-, галогеном, гидрокси, алкокси, арилом, гетероарилом и Не!.
Термин «алкилен» относится к алкильной группе, имеющей заместитель. Например, термин «С1-3 алкиленциклоалкил» относится к алкильной группе, содержащей от одного до трех атомов углерода и замещенной циклоалкильной группой. Примером «С1-3алкиленарила является бензил.
- 6 005686
Термин «галогеналкил» определяют здесь как алкильную группу, замещенную одним или несколькими галогенными заместителями, либо фтором, хлором, бромом, иодом, либо их комбинациями. Аналогично этому «галогенциклоалкил» и «галогенарил» определяют здесь как циклоалкильную или арильную группу, имеющую один или несколько галогенных заместителей.
Термин «арил», используемый отдельно или в комбинации, определяют здесь как моноциклическую или полициклическую ароматическую группу, предпочтительно моноциклическую или бициклическую ароматическую группу, например фенил или нафтил, которая может быть незамещенной или замещенной, например, одним или несколькими заместителями, особенно заместителями от одного до трех, выбранными из галогена, алкила, фенила, замещенного фенила, гидрокси, гидроксиалкила, алкокси, арилокси, алкоксиалкила, галогеналкила, нитро, амино, алкиламино, ациламино, алкилтио, алкилсульфинила и алкилсульфонила. Примеры арильных групп включают фенил, нафтил, бифенил, тетрагидронафтил, инданил, 2-хлорфенил, 3-хлорфенил, 4-хлорфенил, 4-фторфенил, 2-метилфенил, 4-метоксифенил, 4трифторметилфенил, 4-нитрофенил и тому подобное.
Термин «гетероарил» определен здесь как моноциклическая или бициклическая система, которая содержит один или два ароматических кольца и содержит по меньшей мере один атом азота, кислорода или серы в ароматическом кольце и которая может быть незамещенной или замещенной, например, одним или несколькими заместителями, в частности заместителями от одного до трех, подобными галогену, алкилу, гидрокси, гидроксиалкилу, алкокси, алкоксиалкилу, галогеналкилу, арилу, галогенарилу, нитро, амино, алкиламино, ациламино, алкилтио, алкилсульфинилу и алкилсульфонилу. Примеры гетероарильных групп включают тиенил, фурил, пиридил, оксазолил, 1,2,4-оксадиазол-3-ил, хинолил, изохинолил, индолил, триазолил, изотиазолил, изоксазолил, имидазолил, бензотиазолил, пиразинил, пиримидинил, тиазолил и тиадиазолил.
Термины «гетероцикл» и «Не!» определены здесь как 4-, 5- или 6-членное неароматическое кольцо, имеющее один или несколько, обычно от одного до трех, гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, присутствующих в кольце, и, необязательно, замещенное алкилом, галогеном, арилом, алкокси, С1-3алкилен-Не!, С1-3алкиленамино, С1-3алкиленалкиламино и галогенарилом. Неограничивающие примеры включают тетрагидрофуран, тетрагидропиран, пиперидин, пиперазин, сульфолан, морфолин, 1,3диоксолан, тетрагидропиран, диоксан, триметиленоксид и тому подобное.
Термин «галоген» определен здесь для включения фтора, хлора, брома и иода.
Термин «алкокси» и «арилокси» определен как -ОН, где В представляет алкил или арил соответственно.
Термин «алкоксиалкил» определен здесь как алкоксигруппа, присоединенная к алкильной группе.
Термин «пропаргил» определен здесь В-С=С-СН2-, где В представляет водород, низший алкил, галогеналкил, циклоалкил, замещенный или незамещенный арил или замещенный или незамещенный гетероарил.
Термин «аллил» определен здесь как В-СН=СНСН2-, где В представляет водород, низший алкил, галогеналкил, циклоалкил, замещенный или незамещенный арил или замещенный или незамещенный гетероарил.
Термин «гидрокси» определен здесь как -ОН.
Термин «гидроксиалкил» определен как гидроксигруппа, присоединенная к алкильной группе.
Термин «амино» определен как -ЫН2.
Термин «алкиламино» определен как -НВ2, где по меньшей мере один В представляет алкил и второй представляет алкил или водород.
Термин «ацилтио» определен как ВС(=О)НН, где В представляет алкил или арил.
Термин «нитро» определен как -ΝΟ2.
Термин «алкиламино» определен как -8В, где В представляет алкил.
Термин «алкилсульфинил» определен как В-8О, где В представляет алкил.
Термин «алкилсульфонил» определен как В-8О2, где В представляет алкил.
В предпочтительном осуществлении В5 представляет метил, В7 представляет метил или бензил, В2 представляет метил или дифторметил, В4 выбран из группы, состоящей из водорода, метила, трифторметила, циклопропила, бензила и фенила, и В выбран из группы, состоящей из водорода, ацетила и бензолила, В1 предпочтительно выбран или группы, состоящей из
- 7 005686
- 8 005686
- 9 005686
В3 предпочтительно выбран из группы, состоящей из
- 10 005686
- 11 005686
СН3СНС
ОАс
(СН
- 12 005686
- 13 005686
о носн^ сн3 о
II ..
ЬВиОСЫНСНСI еЗи □
II
НзИСНСеви
о
II
ЬВиОСЫНСН2С0
II носн2снсЫНСОСВи
II
НОСН-.СНСΊ
ЫН3С1 СНз ^Н2 о
II
АсОСН2Со о
II II
СН2ОСМНСН2С-
о сн3зо2ынсн2!!:о
СЕзЗОгЫНСНг!:о о
II II
СН2ОСЫНСНССНз
сн3 о η2ν<[η-^- 14 005686
он | он
СН3СН2СНСНС- I
I || (сн3)2снсн2снссн3 о и || о
где Ас представляет СН3С(=О) и (Ви представляет С(СН3)3.
В большинстве предпочтительных осуществлений К1 выбран из группы, состоящей из циклопентила, бензила, тетрагидрофурила, инданила, норборнила, фенетила, фенилбутила, метиленциклопропила, метилентетрагидрофурила, этилентиенила, С1-4алкиленциклопентила, метиленинданила, С1-4алкиленфенила, фенилпропаргила, фенилаллила, 3-(4-хлорфенил)-(1,2,4-оксадиазол-5-ил)метила, С1-4алкиленфенокси, С1-4алкиленбифенила, С1-4алкиленциклогексила, пиранила, метиленового мостикового алкила,
- 15 005686 тетрагидронафтила, декагидронафтила и С1-6алкила, где К1, необязательно, замещен одним или несколькими фенилами, гидрокси, метокси, метилами, этилами, трифторметилами, фторами, фенокси, третбутилами, метокси, циклопропилами и галогенфенилами; К2 выбран из группы, состоящей из метила и дифторметила, К3 выбран из группы, состоящей из
СО2СН3, С(=О)СН2ОН, С(=О)СН(СН3)ОН, С(=О)С(СН3)2ОН, С(=О)С(=О)ЫН2,
С(=О)С(=О)ОН, 0(=Ο)ΘΗ2ΝΗ2, С(=О)СН(ОН)СН2ОН, С(=О)СН(ОН)СН2СН2СН3,
С(=О)СНСН2ОН νη2
С(=О) СНСН 2С6Н5 ш2
С(=О)СНС6Н5 он
С(=О)СНСН,С4Н5
I он
и с (-о) ^он
К4 представляет водород; К5 представляет метил; К6 представляет водород и К8 и К9 независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и низшего алкила, или образуют 5-членное или 6-членное кольцо.
Настоящее изобретение включает все возможные стереоизомеры и геометрические изомеры соединений структурной формулы (II) и включают не только рацемические соединения, но также, кроме того, оптически активные изомеры. Когда соединение структурной формулы (II) нужно получить в виде индивидуального энантиомера, его можно получить либо разделением конечного продукта, либо стереоспецифическим синтезом из любого изомерно чистого исходного материала, или использованием хирального вспомогательного реагента, например, см. Ζ Ма с1 а1., Те1гайе6гоп: Азуттейу, 8(6), радез 883-888 (1997). Разделение конечного продукта, промежуточного продукта или исходного материала можно достичь любым подходящим способом, известным в данной области. Кроме того, в случаях, когда возможны таутомеры соединений структурной формулы (II), предполагается, что настоящее изобретение включает все таутомерные формы соединений. Как показано здесь ниже, определенные стереоизомеры обладают необычной способностью ингибировать ΡΌΕ4 без проявления нежелательных побочных действий на ЦНС, обычно связанных с ингибиторами ΡΌΕ4.
В частности, обычно допускают, что биологические системы могут проявлять очень чувствительную активность в отношении абсолютной стереохимической природы соединений. (См. Ε.Ι. Апепз, Ме61С1иа1 Кезеагсй Кеу1е^з, 6:451-466 (1986); Ε.Ε Апепз, Ме61ста1 Кезеагсй Кеу1е^з, 7:367-387 (1987); КАУ. ЕоШег, НапйЬоок о£ 81егео1зотегз: Тйегареийс Эгидз, СКС Ргезз, ебйеб Ьу ЭопаШ Ρ. 8тйй, рр.35-63 (1989); апй 8.С. 8йпзоп, Сйет1са1 апй Επ§ίι^ππ§ Ые^з, 75:38-70 (1997)).
Например, ролипрам является стереоспецифичным ингибитором ΡΌΕ4, который содержит один хиральный центр. (-)-Энантиомер ролипрама обладает более высокой фармакологической активностью,
- 16 005686 чем (+)-энантиомер, которую можно отнести к его потенциальному антидепрессивному действию. ΒοΙηιΗζ е! а1., Ыаипуп-8ейш1ебеЪегд'8 АгеЕ Рйагшаео1, 333: 23-30 (1986). Кроме того, по-видимому, метаболизм ролипрама является стереоспецифичным для (+)-энантиомера, обладающего более быстрой скоростью клиренса, чем (-)-энантиомер. Кгаизе е! а1., ХепоЪюЕеа, 18:561-571 (1988). Наконец, недавнее исследование показало, что (-)-энантиомер ролипрама (В-ролипрам) приблизительно в десять раз сильнее вызывает рвоту, чем (+)-энантиомер (δ-ролипрам). А. ВоЫейаиб е! а1., Ыеигорйагшаео1оду, 38:289-297 (1999). Данное наблюдение не согласуется легко с различиями в предрасположении испытуемых животных к изомерам ролипрама и способности ролипрама ингибировать фермент ΡΌΕ4. Соединения настоящего изобретения могут иметь три или более хиральных центров. Как показано ниже, соединения со специфичной стереохимической ориентацией проявляют одинаковую ингибирующую активность в отношении ΡΌΕ4 и фармакологическую активность, но различаются по токсичности для ЦНС и рвотному потенциалу.
В соответствии с этим предпочтительные соединения настоящего изобретения имеют структурную формулу (III)
(III)
Соединения структурной формулы (III) являются сильнодействующими и селективными ингибиторами ΡΌΕ4 и не проявляют отрицательное действие на ЦНС и рвотное действие, показанное стереоизомерами соединений структурной формулы (III).
Соединения структурной формулы (II), которые содержат кислотные части, могут образовывать фармацевтически приемлемые соли с подходящими катионами. Подходящие фармацевтически приемлемые катионы включают катионы щелочного металла (например, натрия или калия) и щелочноземельного металла (например, кальция или магния). Фармацевтически приемлемыми солями соединений структурной формулы (II), которые содержат основный центр, являются кислотно-аддитивные соли, образованные с фармацевтически приемлемыми кислотами. Примеры солей включают гидрохлорид, гидробромид, сульфат или бисульфат, фосфат или гидрофосфат, ацетат, бензоат, сукцинат, фумарат, малеинат, лактат, цитрат, тартрат, глюконат, метансульфонат, бензолсульфонат и п-толуолсульфонат. В свете вышеуказанного предполагается, что любая ссылка на соединения настоящего изобретения, появляющаяся здесь, включает соединения структурной формулы (II), а также их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.
Соединения настоящего изобретения можно терапевтически ввести в виде неразбавленного химического соединения, но предпочтительным является введение соединений структурной формулы (II) в виде фармацевтической композиции или готовой препаративной формы. В соответствии с этим, в настоящем изобретении предлагаются фармацевтические готовые препаративные формы, включающие соединение структурной формулы (II) вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями и, необязательно, другими терапевтическими и/или профилактическими ингредиентами. Носители являются «приемлемыми» в смысле совместимости с другими ингредиентами готовой препаративной формы и не ухудшают качество их реципиента.
В частности, селективный ингибитор ΡΌΕ4 настоящего изобретения можно использовать отдельно или в комбинации со вторым противовоспалительным терапевтическим агентом, например терапевтическим агентом, мишенью которого является ΤΝΕα, таким как ЕЯВКЕЕ® или ΕΕΜ[ΕΑΕΕΧ, который имеет использование при лечении ревматоидного артрита. Таким же образом на животных моделях для ревматоидного артрита была также показана терапевтическая пригодность антагонизма !^-1. Таким образом, предполагается, что антагонизм П.-1 в комбинации с ингибированием ΡΌΕ4, которое ослабляет ΤΝΕα, может быть эффективным.
Ингибиторы ΡΌΕ4 настоящего изобретения можно использовать при лечении различных аллергических, аутоиммунных и воспалительных заболеваний.
Термин «лечение» включает профилактику, снижение, остановку или изменение направления прогрессивного развития тяжести подвергаемого лечению состояния или симптомов. Как таковой термин «лечение» включает как медицинское терапевтическое, так и/или профилактическое введение, в зависимости от того, что является подходящим в данном случае.
В частности, воспаление является локализованной, защитной ответной реакцией, вызванной повреждением или разрушением тканей, которая служит для разрушения, ослабления или ограничения (т.е.
- 17 005686 секвестрации) как повреждающего агента, так и поврежденной ткани. Термин «воспалительное заболевание», используемый здесь, означает любое заболевание, в котором избыточные или нерегулируемые воспалительные ответные реакции приводят к избыточным воспалительным симптомам, повреждению ткани хозяина или потери тканевой функции. Кроме того, термин «аутоиммунное заболевание», используемый здесь, означает любую группу нарушений, в которой нарушение ткани ассоциируется с гуморальными или опосредованными клетками ответными реакциями на собственные составляющие компоненты организма. Термин «аллергическое заболевание», используемое здесь, означает любой симптом, повреждение ткани или потерю функции ткани, являющиеся результатом аллергии. Термин «артритное заболевание», используемый здесь, означает любое из большого семейства заболеваний, которые характеризуются воспалительными повреждениями суставов, относимыми к различным этиологиям. Термин «дерматит», используемый здесь, означает любое заболевание из большого семейства заболеваний кожи, которые характеризуются воспалением кожи, относимым к различным этиологиям. Термин «отторжение трансплантата», используемый здесь, означает любую иммунную реакцию, направленную против трансплантированной ткани (в том числе органа и клетки (например, костного мозга)), характеризующуюся потерей функции трансплантированных и окружающих тканей, болью, опуханием, лейкоцитозом и тромбоцитопенией.
Настоящее изобретение предлагает также способ модуляции уровней цАМФ у млекопитающего, а также способ лечения заболеваний, характеризующихся повышенными уровнями цитокинов.
Термин «цитокин», используемый здесь, означает любой секретированный полипептид, который воздействует на функции других клеток и который модулирует взаимодействия между клетками в иммунной или воспалительной ответной реакции. Цитокины включают, но не ограничиваются ими, монокины, лимфокины и хемокины, независимо от того, какие клетки их продуцируют. Например, монокины обычно обозначают как продуцированные и секретированные моноцитом, однако, многие другие клетки продуцируют монокины, такие как природные клетки-киллеры, фибробласты, базофилы, нейтрофилы, эндотелиальные клетки, астроциты головного мозга, клетки стромы костного мозга, эпидермальные кератиноциты и В-лимфоциты. Лимфокины обычно обозначают как продуцированные лимфоцитными клетками. Примеры цитокинов включают, но не ограничиваются ими, интерлейкин-1 (1Ь-1), интерлейкин-6 (1Ь-6), альфа-фактор некроза опухоли (ΤΝΕα), бета-фактор некроза опухоли (ΤΝΕα).
Настоящее изобретение далее предлагает способ снижения уровней ΤΝΕ у млекопитающего, который включает введение эффективного количества соединения структурной формулы (II) млекопитающему. Термин «снижение уровней ΤΝΕ», используемый здесь, означает либо
a) снижение избыточных ίη νίνο уровней ΤΝΕ у млекопитающего до нормальных уровней или ниже нормальных уровней ингибированием ίη νίνο высвобождения ΤΝΕ всеми клетками, включая, но не ограничиваясь ими, моноциты или макрофаги, либо
b) индуцирование негативной регуляции, при трансляционном или транскрипционном уровне, избыточных ίη νίνο уровней ΤΝΕ у млекопитающего до нормальных уровней или ниже нормальных уровней, либо
c) индуцирование негативной регуляции посредством ингибирования прямого синтеза ΤΝΕ как посттрансляционного события.
Кроме того, соединения настоящего изобретения можно использовать при подавлении активации воспалительных клеток. Термин «активация воспалительных клеток», используемый здесь, означает индукцию стимулом (включая, но не ограничиваясь указанным, цитокины, антигены или аутоантитела) пролиферативной клеточной ответной реакции, продуцирование растворимых медиаторов (включая, но не ограничиваясь перечисленным, цитокины, кислородные радикалы, ферменты, простаноиды или вазоактивные амины) или поверхностную клеточную экспрессию новых медиаторов или повышенных чисел медиаторов (включая, но не ограничиваясь ими, основные антигены гистосовместимости или молекулы клеточной адгезии) в воспалительных клетках (включая, но не ограничиваясь ими, моноциты, макрофаги, Т-лимфоциты, В-лимфоциты, гранулоциты, полиморфонуклеарные лейкоциты, тучные клетки, базофилы, эозинофилы, дендритные клетки и эндотелиальные клетки). Специалистам в данной области должно быть понятно, что активация одного или комбинации упомянутых фенотипов в этих клетках может способствовать инициации, течению или обострению воспалительного состояния.
Соединения настоящего изобретения можно также использовать для индуцирования релаксации гладких мышц дыхательных путей, увеличения просвета бронхов и предотвращения бронхостеноза.
Соединения настоящего изобретения, следовательно, можно использовать при лечении таких заболеваний, как артритные заболевания (такие как ревматоидный артрит), остеоартрит, подагрический артрит, спондилит, тироид-ассоциированная офтальмопатия, болезнь Бехчета, сепсис, септический шок, эндотоксический шок, грамотрицательный сепсис, грамположительный сепсис, синдром токсического шока, астма, хронический бронхит, аллергический ринит, аллергический конъюнктивит, весенний конъюнктивит, эозинофильная гранулема, (острый) респираторный дистресс-синдром взрослых (АВО8), хроническое легочное воспалительное заболевание (такое как хроническое закупоривающее легочное заболевание), силикоз, легочный саркоидоз, реперфузионное повреждение миокарда, головного мозга или конечностей, повреждение головного мозга или спинного мозга вследствие незначительной травмы,
- 18 005686 фиброз, в том числе муковисцидоз, келоидное образование, образование рубцовой ткани, атеросклероз, аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка (8ΕΕ) и нарушения, являющиеся отторжением трансплантата (например, гомологичная болезнь (ΟνΗ) и отторжение аллотрансплантата), хронический гломерулонефрит, воспалительное заболевание кишечника, такое как болезнь Крона и неспецифический язвенный колит, пролиферативные лимфоцитарные заболевания, такие как лейкоз (например, хронический лимфоцитарный лейкоз; СЬЬ) (см. Меп(х е! а1., В1ооб 88, рр. 2172-2182 (1996)) и воспалительные дерматозы, такие как атопический дерматит, псориаз или крапивница.
Соединения настоящего изобретения можно также использовать при лечении ожирения, причем отдельно или в комбинации с ингибитором ΡΌΕ3, и при лечении и профилактике нефропатии при диабете типа 2 (см. Мога е! а1., №\ν Επ^Ε-πιά 1оита1 о£ Мебюте, 342, р. 441 (2000). Ингибиторы ΡΌΕ3 известны специалистам в данной области.
Другие примеры таких заболеваний или родственных состояний включают в себя кардиомиопатии, такие как застойная сердечная недостаточность, гипертермия, кахексия, кахексия, вторичная к инфекции или злокачественному образованию, кахексия, вторичная к синдрому приобретенного иммунного дефицита (СПИД), ЛЯС (спид-ассоциированный комплекс), церебральная малярия, остеопороз и заболевания типа резорбции костей, лихорадка и миалгия вследствие инфекции. Кроме того, соединения настоящего изобретения можно использовать при лечении эректильной дисфункции, особенно васкулогенной импотенции (ОоНегбу, 1г. е! а1., патент США № 6127363), несахарного диабета и нарушений центральной нервной системы, таких как депрессия и полиинфарктная деменция.
Соединения настоящего изобретения имеют также применение за пределами применения, обычно известного как терапевтическое. Например, настоящие соединения могут действовать также в качестве консервантов органов-трансплантатов (см. ΡίπίΈν е! а1., I. С11п. 1ше8!., 92, рр. 2994-3002 (1993).
Селективные ингибиторы ΡΌΕ4 можно также использовать при лечении эректильной дисфункции, особенно васкулогенной импотенции (ОоНеПу, 1г. е! а1., патент США № 6127363), несахарного диабета (К1бпеу Ιπΐ., 37, р. 362, (1990); К1бпеу Ιπΐ., 35, р. 494, (1989)) и нарушений центральной нервной системы, таких как полиинфарктная деменция (МсйоПоп, Ρ8усйорйа^тасо1оду, 101, р. 147 (1990)), депрессия (Бсктап е! а1., Сигг. Тйег. Яе§., 43, р. 291 (1988), состояние страха и ответные реакции на стресс (№игорйагтасо1оду, 38, р. 1831 (1991)), церебральной ишемии (Έιπ. I. Ρйа^тасо1.. 272, р. 107 (1995)), поздней дискинезии (I. С11п. Ρйа^тосо1., 16, р. 304 (1976)), болезни Паркинсона (см. №иго1оду, 25, р. 722 (1975); С11п. Εxр. Ейаппасок ПНу^оЕ, 26, р. 421 (1999)) и пременструального синдрома. Что касается депрессии, РОЕ4-селективные ингибиторы проявляют эффективность на различных животных моделях депрессии, таких как «поведенческое отчаяние» или испытания Пог^оН (Έιπ. I. Ρйа^тасо1.. 47, р. 379 (1978); Ειπ. I. Ρйа^тасо1.. 57, р. 431 (1979); Лпббергеккапк: пеигосйетюа1, Ье11а\юга1 апб с11шса1 ргокресЩеу Επικι, Ма11ск, апб Яюйекоп, еб§., Яаνеп ΡΐΌ55, р. 121 (1981)) и «испытание с подвешиванием за хвост» (Тхусйорйагтасо1о§у, 85, р. 367 (1985)). Данные недавних исследований показали, что продолжительное лечение ίπ νί\Ό различными антидепрессантами повышает происходящую из головного мозга экспрессию ΡΌΕ4 (I. №иго8с1епсе, 19, р. 610 (1999)). Следовательно, селективный ингибитор ΡΌΕ4 можно использовать отдельно или в сочетании со вторым терапевтическим агентом при лечении четырьмя основными классами антидепрессантов: электросудорожные процедуры, ингибиторы моноаминоксидазы и селективные ингибиторы повторного поглощения серотонина и норэпинефрина. Селективные ингибиторы ΡΌΕ4 можно использовать при применениях, которые модулируют бронхорасширяющую активность посредством прямого действия на клетки бронхиальных гладких мышц при лечении астмы.
Селективные ингибиторы ΡΌΕ4 настоящего изобретения можно также использовать при лечении бесплодия как у особей женского пола, так и у особей мужского пола. Настоящие ингибиторы ΡЯΕ4 повышают уровни цАМФ в клетках гранулез и, тем самым, усиливают гонадотропное индуцирование овуляции и миграции овоцитов (ТкаЕгш е! а1., ϋπν. Вю1., 178, рр. 393-402 (1996)). Кроме того, настоящие ингибиторы ΡΌΕ4 можно использовать при лечении бесплодных пар, имеющих аномальные параметры спермы, повышением подвижности спермы без воздействия на реакцию акросом (см. Еоксй е! а1., Нит. Яергоб., 13, рр. 1248-1254 (1998).
Соединения и фармацевтические композиции, пригодные для использовании в настоящем изобретении, включают соединения и композиции, в которых активный ингредиент вводят млекопитающему в эффективном количестве для достижения предназначенной цели. Более определено, «терапевтически эффективное количество» означает количество, эффективное для предотвращения развития или ослабления существующих симптомов у подвергаемого лечению субъекта. Определение эффективных количеств находится вполне в пределах способности специалиста в данной области, особенно ввиду представленного здесь подробного описания.
Термин «млекопитающее», используемый здесь, включает в себя особи мужского и женского пола и включает людей, домашних животных (например, кошек, собак), домашний скот (например, крупный рогатый скот, лошадей, свиней) и диких животных (например, приматов, диких животных семейства кошачьих, животных зоопарков).
«Терапевтически эффективная доза» относится к такому количеству соединения, которое приводит к достижению нужного действия. Токсичность и терапевтическую эффективность таких соединений
- 19 005686 можно определить стандартными фармацевтическими процедурами в клеточных культурах или на экспериментальных животных, например, для определения ЬИ50 (летальная доза для 50% популяции) и ЕИ50 (доза, терапевтически эффективная для 50% популяции). Отношение доз между токсичным и терапевтическим действиями является терапевтическим индексом, который выражают как отношение между ЬИ50 и ЕИ50. Предпочтительны соединения, которые имеют высокие терапевтические индексы. Данные, полученные из таких результатов, можно использовать при выборе диапазона доз для использования при лечении людей. Дозировка таких соединений предпочтительно находится в диапазоне циркулирующих концентраций, которые включают ЕИ50 с небольшой токсичностью или совсем без токсичности. Дозировка может варьировать в таком диапазоне в зависимости от используемой лекарственной формы и используемого пути введения.
Точную готовую препаративную форму, путь введения и дозировку может выбрать отдельный врач в соответствии с состоянием пациента. Дозированное количество и интервал введения можно регулировать индивидуально для обеспечения в плазме уровня активного компонента, достаточного для поддержания терапевтического действия.
Как понятно специалисту в данной области, ссылка здесь на лечение распространяется на профилактику, а также лечение установленных заболеваний или симптомов. Понятно также, что количество соединения изобретения, требуемое для использования при лечении, изменяется с природой подвергаемого лечению состояния и с возрастом и состоянием пациента и, в конечном счете, определяется штатным врачом больницы или ветеринаром. В общем, однако, дозы, применяемые для лечения взрослого человека, обычно находятся в диапазоне от 0,001 до приблизительно 100 мг/кг в день. Требуемую дозу можно удобно ввести в виде одинарной дозы или нескольких доз, введенных через определенные интервалы, например в виде двух, трех, четырех или более субдоз в день. На практике врач определяет реальную схему приема лекарственного средства, которая является особенно подходящей для индивидуального пациента, доза изменяется с возрастом, массой и восприимчивостью отдельного пациента. Вышеуказанные дозы являются примерными среднего случая, но могут быть отдельные случаи, в которых необходимы более высокие или более низкие дозы, такие дозы находятся в пределах объема настоящего изобретения.
Готовые препаративные формы настоящего изобретения для лечения указанных заболеваний можно вводить стандартным образом, например перорально, парентерально, через слизистую оболочку (например, сублингвально или посредством трансбуккального введения), местно, чрескожно, ректально, через ингаляцию (например, назальной или глубокой легочной ингаляцией). Парентеральное введение включает, но не ограничивается ими, внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное, подкожное, внутримышечное, внутриоболочечное и внутрисуставное. Парентеральное введение можно также выполнить с использованием способа высокого давления, подобного РО^ИЕЯХЕСТ™.
Для трансбуккального введения композиция может быть в форме таблеток или лепешек, изготовленных общепринятым способом. Например, таблетки и капсулы для перорального введения могут содержать общепринятые эксципиенты, такие как связующие агенты (например, сироп, аравийская камедь, желатин, сорбит, трагакант, клейстеризованный крахмал или поливинилпирролидон), наполнители (например, лактозу, сахар, микрокристаллическую целлюлозу, кукурузный крахмал, фосфат кальция или сорбит), смазывающие средства (например, стеарат магния, стеариновую кислоту, тальк, полиэтиленгликоль или диоксид кремния), дезинтегрирующие агенты (например, картофельный крахмал или натриевую соль гликолята крахмала) или смачивающие агенты (например, лаурилсульфат натрия). Таблетки могут быть покрыты способами, хорошо известными в данной области.
В альтернативном случае соединения настоящего изобретения можно вводить в пероральные жидкие препараты, такие как, например, водные или масляные суспензии, растворы, эмульсии, сиропы или эликсиры. Кроме того, готовые препаративные формы, содержащие эти соединения, могут быть представлены в виде сухого продукта для пересоздания с водой или другим подходящим наполнителем перед использованием. Такие жидкие препараты могут содержать общепринятые добавки, такие как суспендирующие агенты, такие как сироп сорбита, метилцеллюлоза, сироп глюкозы/сахара, желатин, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, гель стеарата алюминия и гидрированные пищевые жиры; эмульгирующие агенты, такие как лецитин, моноолеат сорбитана или аравийская камедь; неводные наполнители (которые могут включать пищевые масла), такие как миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, маслянистые сложные эфиры, пропиленгликоль и этиловый спирт, и консерванты, такие как метил- или пропил-п-гидроксибензоат и сорбиновая кислота.
Такие препараты можно также изготовить в виде суппозиториев, например, содержащих общепринятые основы суппозиториев, таких как какао-масло или другие глицериды. Композиции для ингаляции в типичном случае могут быть представлены в форме раствора, суспензии или эмульсии, которую можно ввести в виде сухого порошка или в форме аэрозоля с использованием общепринятого пропеллента, такого как дихлордифторметан или трихлорфторметан. Типичные местные и чрескожные готовые препаративные формы включают общепринятые водные или неводные наполнители, такие как глазные капли, кремы, мази, лосьоны и пасты, или находятся в форме пропитанного лекарственным средством пластыря, повязки или мембраны.
- 20 005686
Дополнительные композиции настоящего изобретения можно изготовить для парентерального введения инъекцией или непрерывной инфузией. Готовые препаративные формы для инъекции могут быть в форме суспензий, растворов или эмульсий в масляных или водных наполнителях и могут содержать вспомогательные агенты для изготовления готовой препаративной формы, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. В альтернативном случае активный ингредиент может быть в форме порошка для пересоздания с подходящим наполнителем (например, стерильной водой без пирогенов) перед использованием.
Композиция по настоящему изобретению может быть изготовлена в виде препарата-депо. Такие долго действующие готовые препаративные формы можно ввести имплантацией (например, подкожно или внутримышечно) или внутримышечной инъекцией. В соответствии с этим, соединения изобретения можно изготовить с подходящими полимерными или гидрофобными материалами (например, эмульсией в приемлемом масле), ионообменными смолами или слаборастворимыми производными (например, слаборастворимой солью).
Для ветеринарного использования соединение формулы (II) или его нетоксичные соли в пригодном случае вводят в виде приемлемой готовой препаративной формы в соответствии с обычной ветеринарной практикой.
Ветеринар может легко определить схему приема лекарственного средства и путь введения, который очень подходит для конкретного животного.
Таким образом, изобретение представляет в следующем аспекте фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы (II) вместе с его фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Далее настоящим изобретением предложен способ получения фармацевтической композиции, включающей соединение формулы (II), который включает смешивание соединения формулы (II) вместе с его фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Конкретные, не ограничивающие изобретение примеры соединений структурной формулы (II) представлены ниже, синтез их проводят в соответствии с процедурами, приведенными ниже.
Соединения структурной формулы (II) обычно можно получить в соответствии со следующими синтетическими схемами. В данной области предполагается, что в каждой схеме, описанной ниже, защитные группы можно использовать, где необходимо, в соответствии с общими принципами синтетической химии. Эти защитные группы удаляют в конечных стадиях синтеза в основных, кислотных или гидрогенолитических условиях, которые легко понятны специалистам данной области. Посредством использования подходящей манипуляции и защиты любых функциональных групп синтез соединений структурной формулы (II), не представленных здесь конкретно, можно выполнить способами, аналогичными схемам, представленным ниже.
Если не оговорено особо, все исходные материалы получали от коммерческих поставщиков и использовали без дополнительной очистки. Все продукты реакций и хроматографические фракции анализировали тонкослойной хроматографией на 250-мм силикагелевых пластинах, визуализированных УФ (ультрафиолетовым) светом при нанесении пятна йода. Продукты и промежуточные продукты очищали флэш-хроматографией или ВЭЖХ с обращенной фазой.
Соединения общей структурной формулы (II) можно получить, например, сначала взаимодействием дизамещенного бензальдегида (1) с 2-бутаноном, затем по схеме реакций, иллюстрированной ниже. Другие синтетические пути также известны и доступны специалистам в данной области. См., например, патент США № 5665754 ЕеИтап е! а1., включенный здесь в качестве ссылки, для различных отдельных реакций и синтетических способов, описанных в промежуточных продуктах и примерах, представленных ниже.
- 21 005686
Вышеуказанной схемой реакций получают соединение (5) структурной формулы (II), где В и В2 определяются исходным бензальдегидом, В3 представляет С(=О)ОСН3, В4 представляет водород, В5 представляет метил, В6 представляет водород и В7 представляет метил и В10 представляет водород. Подходящий выбор исходных материалов или проведение реакций превращения соединения (5) дает соединения общей структурной формулы (II), имеющие другие перечисленные значения заместителей от В1 до В7 и В10.
Нижеследующее описание иллюстрирует синтез различных промежуточных продуктов и соединений структурной формулы (II). Следующие примеры представлены для иллюстрации и не должны рассматриваться как ограничивающие изобретение.
В указанных здесь структурах у связи, лишенной заместителя, заместителем является метил, например
- 22 005686
Когда у атома углерода или азота не указывается присоединенный заместитель, следует понимать, что атом углерода содержит подходящее число атомов водорода.
Используют также аббревиатуры, которые хорошо известны специалисту в данной области, например, «Ме» представляет метил, «ОМз» представляет мезилат, «РИ» представляет фенил, «СН2С12» представляет метиленхлорид, «№ОИ» представляет гидроксид натрия, «БЮЛе» представляет этилацетат, «ΝΗ4ΟΗ» представляет гидроксид аммония, «МеОН» представляет метанол, «БЮИ» представляет гидроксид лития, «СзСО3» представляет карбонат цезия, «Н2» представляет газообразный водород, «ТФУ» представляет трифторуксусную кислоту, «ОАс» представляет ацетат, «Ас» представляет ацетил, «ΐ-Ви» представляет третичный бутил, «нас.» означает насыщенный, «ч» означает час, «г» означает грамм, «ммоль» означает миллимоль, «экв.» означает эквивалент, «М» означает молярный и «н» означает нормальный.
Общий синтез циклопентильного ряда
(ЕЮУ^ОХаХСНзХЗОаЭ
1) МОН. Η,Ο. диоксан. 80 °С
2) (соаренд каталитическое
ΙΤΝ(ΤΜ3)* тетрашдрофуран 0 *С до температуры окружающей среды
Ό до температуры тетрагидрофуран -78 “С до температуры
80-90% для двух стадий
70-75% для стадий.
а№|). РтЦОН),
ЕЮН, температура окружающей среды
- 23 005686
Общий синтез инданилового ряда
Промежуточный продукт 1. 3-Циклопропилметокси-4-метоксибензальдегид.
Раствор 3-гидрокси-4-метоксибензальдегида (400 г, 2,63 моль) и бромметилциклопропана (426 г, 3,2 моль) в 1 л диметилформамида (ДМФ) перемешивают с карбонатом калия (К2СО3) (483 г, 3,5 моль) при 55°С в течение 3,5 ч. Затем добавляют 1 л воды, смесь охлаждают на льду и промежуточный продукт 1 отфильтровывают в виде белого твердого вещества (535 г, 99%). т/ζ 207 (МН+).
Промежуточный продукт 2. 3-(Индан-2-илокси)-4-метоксибензальдегид.
Процедура Мицунобу.
Раствор 3-гидрокси-4-метоксибензальдегида (15,2 г, 100 ммоль, 1 экв.), 2-инданола (12,1 г, 90 ммоль, 0,9 экв.) и трифенилфосфина (26,2 г, 100 ммоль, 1 экв.) в сухом ТГФ (300 мл) обрабатывают по каплям диизопропилазодикарбоксилатом (ОНС) (19,6 мл, 100 ммоль, 1 экв.). Реакционную смесь перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 16 ч, затем охлаждают и разбавляют
- 24 005686 диэтиловым эфиром (500 мл). Раствор промывают водой (2 х 150 мл), 1М ΝαΟΗ (4 х 125 мл) и насыщенным хлоридом натрия (№С1) (2 х 100 мл), сушат сульфатом натрия (Να2ΒΟ4) и концентрируют, получая при этом сироп, который отверждается при стоянии. Твердое вещество суспендируют в Εΐ2Ο (350 мл) и перемешивают в течение ночи, получая при этом мелкие частицы. Твердое вещество собирают вакуумным фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси этанол/вода (21,4 г). Эфирный фильтрат концентрируют и очищают флэш-хроматографией (силикагель, колонка 7,5 х 36 см Вю!а§е ΚΡ-8Ϊ1, элюированная 25% ΕΐΟΆο в гептане), получая при этом дополнительные 5 г промежуточного продукта 2.
1Н ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ 9,86 (с, 1Н), 7,49-7,44 (м, 2Н), 7,25-7,16 (м, 4Н), 6,97 (д, I = 8,7 Гц, 1Н), 5,29-5,22 (м, 1Н), 3,89 (с, 1Н), 3,45 (дд, I = 16,7, 6,6 Гц, 2Н), 3,24 (дд, I = 16,7, 3,6 Гц, 2Н).
13С ЯМР (75 МГц, СЭС13) δ: 190,9, 155,5, 147,9, 140,4, 130,0, 126,9, 126,8, 124,7, 112,1, 111,0, 78,9, 56,1, 39,7.
Промежуточный продукт 3. 3-(трет-Бутокси)-4-метоксибензальдегид.
К перемешиваемому раствору изованилина (30,4 г, 200 ммоль) в СН2С12 (200 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота добавляют (2-аза-1-(трет-бутокси)-3-метилбут-1-енил)(метилэтил)амин (сырой продукт, 40 мл, приблизительно 200 ммоль) в качестве алкилирующего агента. Каждые 2 ч добавляют следующий молярный эквивалент алкилирующего агента до тех пор, пока не будет добавлено всего 5 экв. Реакционную смесь перемешивают еще 16 ч. ТСХ в 3/7 смеси ЕЮАс/гексан показывает, что реакция завершилась приблизительно на 80%. Смесь разбавляют СН2С12 (500 мл) и промывают 3М ΝαΟΗ (4 х 300 мл) для удаления непрореагировавшего изованилина. Органическую часть сушат над сульфатом магния (Μ§δΟ4), фильтруют и концентрируют в вакууме до сырого коричневого масла, которое флэшхроматографируют в смеси 3/1 гексан/ЕЮАс и сушат в вакууме, получая при этом чистый промежуточный продукт 3 (22,6 г, 54%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 9,84 (с, 1Н), 7,60 (д, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,00 (д, 1Н), 3,86 (с, 3Н), 1,39 (с, 9Н).
Промежуточный продукт 4. Этиловый эфир (2Е)-3-(3-трет-бутокси-4-метоксифенил)-2-метилакриловой кислоты.
Процедура Хорнер-Эммонса.
К перемешиваемому раствору триэтил-2-фосфонопропионата (25,6 мл, 119,4 ммоль) в ТГФ (120 мл) при 0°С в атмосфере азота по каплям шприцем добавляют гексаметилдисилиламид лития (1М в ТГФ, 114 мл, 114 ммоль). Спустя 30 мин раствор промежуточного продукта 3 (22,6 г, 108 ммоль) в ТГФ (40 мл) добавляют канюлированием. После проведения реакции при 0°С в течение 2 ч ТСХ со смесью 4/1 гексан/ЕЮАс показала завершение реакции. Реакционную смесь частично концентрируют роторным испарителем и распределяют между ΕΐΟΆο (500 мл) и водой (500 мл). Органическую часть промывают насыщенным №С1 (500 мл), сушат (Μ§δΟ4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой продукт флэшхроматографируют с использованием смеси 9/1 гексан/ЕЮАс, получая при этом после концентрирования в вакууме промежуточный продукт 4 (34,1 г, 98%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,60 (с, 1Н), 7,16 (д, 1Н), 7,12 (с, 1Н), 6,91 (д, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 2,13 (с, 3Н), 1,37 (с, 9Н).
- 25 005686
Промежуточный продукт 5. (2Е)-3-(3-трет-Бутокси-4-метоксифенил)2-метилакриловая кислота.
Процедура гидролиза гидроксидом лития.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 4 34,1 г, 116 ммоль) в диоксане (116 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота добавляют раствор моногидрата ПОН (5,87 г, 140 ммоль) в воде (116 мл). Реакционную смесь нагревают при 80°С в течение 2 ч, затем дают ей возможность охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь затем распределяют между Е!ОАс (400 мл) и 1М фосфорной кислотой (Н3РО4) (400 мл). Органическую часть выделяют, промывают Н2О (400 мл) и насыщенным №С1 (400 мл), сушат (М§8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом промежуточный продукт 5 в виде белого твердого вещества (28,2 г, 92%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,66 (с, 1Н), 7,20 (д, 1Н), 7,18 (с, 1Н), 6,92 (д, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 2,16 (с, 3Н), 1,38 (с, 9Н).
Промежуточный продукт 6. (Е)-4-(3-Бензилокси-4-метоксифенил)-3-метилбут-3-ен-2-он.
Процедура катализируемой кислотой альдольной конденсации.
Раствор коммерчески доступного 3-бензилокси-4-метоксибензальдегида (34 г, 0,14 моль, 1 экв.) и 2бутанона (50 мл, 0,56 моль, 4 экв.) в сухом ТГФ (50 мл) охлаждают до -4°С. Через хорошо перемешиваемый раствор в течение нескольких минут пропускают газообразным хлорид водорода и реакционную смесь закрывают и сохраняют при -4°С в течение 16 ч. Смесь выливают в хорошо перемешиваемый раствор охлаждаемого льдом насыщенного бикарбоната натрия (Ναΐ 1СО3) (приблизительно 2 л). Если необходимо, рН регулируют до >7 насыщ. №11СО3 и смесь экстрагируют Е!ОАс (3 х 300 мл). Слой Е!ОАс промывают Ναΐ 1СО3 (2 х 200 мл), водой (2 х 200 мл) и насыщенным №С1 (2 х 200 мл), сушат №:8О.| и концентрируют до сиропа. Сырую смесь очищают флэш-хроматографией (силикагель, колонка 7,5 х 36 см В1о!аде КР-811, элюируемая 25% Е!ОАс в гептане), получая при этом промежуточный продукт 6 (29,1 г, 70%).
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 7,46-7,27 (м, 6Н), 7,06-6,91 (м, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 2,41 (с, 3Н), 1,92 (д, I = 1,1 Гц, 3Н).
Промежуточный продукт 7. (Е)-4-[3-(Индан-2-илокси)-4-метоксифенил]-3-метилбут-3-ен-2-он.
Получают из промежуточного продукта 2 процедурой катализируемой кислотой альдольной конденсации промежуточного продукта 6. ЕКМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, положительные ионы): Пае 323,4 (т + 1).
Промежуточный продукт 8. (Е)-4-(3-Бром-4-метоксифенил)-3-метилбут-3-ен-2-он.
Получают из 3-бром-4-метоксибензальдегида процедурой катализируемой кислотой альдольной конденсации промежуточного продукта 6.
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 7,66 (д, I = 2,0 Гц, 1Н), 7,36-7,41 (м, 2Н), 6,94 (д, I = 8,6 Гц, 1Н), 3,94 (с, 3Н), 2,45 (с, 3Н), 2,06 (д, I = 1,1 Гц, 3Н).
Промежуточный продукт 9. (Е)-4-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилбут-3-ен-2-он.
Получают из промежуточного продукта 1 процедурой катализируемой кислотой альдольной конденсации промежуточного продукта 6.
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 7,45 (шир. с, 1Н), 7,05-6,99 (м, 2Н), 6,90 (д, I = 8,26 Гц, 1Н), 4,81-4,75 (м, 1Н, 3,39 (с, 3Н), 2,46 (с, 3Н), 2,09 (д, I = 1,1 Гц, 3Н), 1,98-1,79 (м, 6Н), 1,66-1,60 (м, 2Н).
- 26 005686
Промежуточный продукт 10. Этил-(2Е)-3-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-2-метилпроп-2еноат.
Из коммерчески доступного 3-циклопентилокси-4-метоксибензальдегида процедурой ХорнерЭммонса промежуточного продукта 4 получают коричневую жидкость (68,4 г, 100%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 7,64 (сложная группа сигналов (сл.), 1Н), 7,01-6,96 (сл., 2Н), 6,87 (м, 1Н), 4,77 (м, 1Н), 4,26 (к, 2Н), 3,87 (с, 3Н), 2,14 (с, 3Н), 1,81-1,96 (сл., 6Н), 1,59-1,63 (сл., 2Н), 1,34 (т, 3Н).
ЬКМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 305,3 (т + 1).
Промежуточный продукт 11. (2Е)-3-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-2-метилпроп-2-еновая кислота.
Промежуточный продукт 10 (68,4 г; 225 ммоль) гидролизуют процедурой гидролиза МОН промежуточного продукта 5, получая при этом промежуточный продукт 11 в виде оранжевого твердого вещества (55 г, 88%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 7,76 (с, 1Н), 7,06-7,00 (сл., 2Н), 6,89 (м, 1Н), 4,78 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 2,17 (с, 3Н), 1,97-1,83 (сл., 6Н), 1,64-1,61 (сл., 2Н).
ЬКМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, отрицательные ионы): Эа/е 275,3 (М-1).
Промежуточный продукт 12. (2Е)-3-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-2-метилпроп-2-еноилхлорид.
Процедура хлорангидрида кислоты.
К охлажденной (0°С) перемешиваемой суспензии промежуточного продукта 11 (55 г, 199 ммоль) в безводном СН2С12 (400 мл) добавляют на протяжении 10 мин раствор оксалилхлорида в СН2С12 (109 мл 2,0М, 218 ммоль, 1,1 экв.) через шприц в атмосфере высушенного хлоридом кальция воздуха. Наблюдается энергичное барботирование. Образовавшийся темный раствор оставляют для перемешивания при 0°С в течение 15 мин, затем через шприц добавляют каталитическое количество ДМФ (0,3 мл), образовавшийся раствор перемешивают при 0°С в течение 0,5 ч, в то время как барботирование уменьшается, затем дают ему возможность нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи (17 ч). Реакционную смесь разбавляют Е!ОАс (500 мл) и осторожно гасят водой (250 мл). После энергичного перемешивания в течение 1 ч слои разделяют и органический слой промывают водой (400 мл) и насыщенным раствором соли (400 мл), затем сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом промежуточный продукт 12 в виде коричневого твердого вещества (57,5 г, 98%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1э) δ: 7,98 (с, 1Н), 7,11-7,02 (с, 2Н), 6,92 (м, 1Н), 4,79 (м, 1Н), 3,90 (с, 3Н), 2,22 (с, 3Н), 2,01-1,82 (сл., 6Н), 1,68-1,62 (сл., 2Н).
Промежуточный продукт 13. Этил-(2Е)-3-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-2-метилпроп-2еноат.
Получают посредством процедуры Хорнер-Эммонса промежуточного продукта 4 из промежуточного продукта 2.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС1э) δ: 7,64 (д, 1Н, 7,28-7,17 (м, 4Н), 7,06 (дд, 1Н), 7,03 (д, 1Н), 6,90 (д, 1Н), 5,20 (сл., 1Н), 4,28 (к, 2Н), 3,85 (с, 3Н), 3,39 (дд, 2Н), 3,26 (дд, 2Н), 2,16 (д, 3Н), 1,36 (т, 3Н).
- 27 005686
Промежуточный продукт 14. (2Е)-3-(3-Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-2-метилпроп-2-еновая кислота.
Получают из промежуточного продукта 13 посредством процедуры гидролиза с ЬЮН промежуточного продукта 5.
1Н ЯМР (Б6-ДМСО, 400 МГц) δ: 7,56 (с, 1Н), 7,25-7,11 (м, 5Н), 7,06 (д, 1Н), 6,99 (д, 1Н), 5,22 (сл., 1Н), 3,71 (с, 3Н), 3,34 (дд, 2Н), 3,03 (д, 2Н), 2,06 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 15. (2Е)-3-(3-Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-2-метилпроп-2-еноилхлорид.
Получают из промежуточного продукта 14 посредством процедуры хлорангидрида кислоты промежуточного продукта 12.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 8,01 (с, 1Н), 7,29-6,93 (м, 7Н), 5,23 (сл., 1Н), 3,89 (с, 3Н), 3,42 (дд, 2Н), 3,28 (дд, 2Н), 2,26 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 16. 3-[(2Е)-3-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-2-метилпроп-2еноил]-(4В)-4-фенил-1,3-оксазолидин-2-он.
Процедура ацилирования оксазолидинона.
К охлажденному (-78°С) дистиллятному, механически перемешиваемому раствору В-фенилоксазолидинона (10,0 г, 61,3 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (400 мл) добавляют раствор н-бутиллития в гексанах (27 мл 2,5М, 1,1 экв.) через шприц в атмосфере азота. Образовавшийся раствор перемешивают при -78°С в течение 0,8 ч, затем через канюлю добавляют раствор промежуточного продукта 12 (19,9 г, 67,4 ммоль, 1,1 экв.) в ТГФ (100 мл). После перемешивания при -78°С в течение 15 мин реакционной смеси дают возможность медленно нагреться до 0°С на протяжении 40 мин, за это время реакционная смесь становится густой суспензией. После перемешивания при 0°С в течение 2,5 ч реакционную смесь гасят насыщенным водным хлоридом аммония (КН4С1) (300 мл) и объем ТГФ удаляют при пониженном давлении. Остаток затем экстрагируют хлороформом (СНС13) (3 х 700 мл) и объединенные органические слои промывают водой (300 мл) и насыщенным раствором соли (300 мл), затем сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом 33 г светло-оранжевого твердого вещества. Материал суспендируют в 10% ЕЮАс в гексане (1,2 л) и энергично перемешивают в течение ночи. Образовавшееся твердое вещество в виде мелкого порошка собирают на воронке Бюхнера с отсасыванием, затем сушат в вакууме, получая при этом промежуточный продукт 16 в виде рыжевато-коричневого порошка (21,8 г, 88%).
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ:7,41-7,37 (сл., 5Н), 7,06 (с, 1Н), 7,01-6,97 (сл., 2Н), 6,86 (м, 1Н), 5,54 (т, 1Н), 4,77-4,73 (сл., 2Н), 4,29 (т, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 2,17 (с, 3Н), 1,97-1,82 (сл., 6Н), 1,62-1,56 (сл., 2н).
Промежуточный продукт 17. 3-[(2Е)-3-(3-Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-2-метилпроп-2-еноил](4В)-4-фенил-1,3-оксазолидин-2-он.
- 28 005686
Получают из промежуточного продукта 15 посредством процедуры ацилирования оксазолидинона промежуточного продукта 16.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,43-7,33 (м, 5Н), 7,25-7,16 (м, 4Н), 7,07-7,03 (м, 2Н), 6,89 (д, 1Н), 5,54 (дд, 1Н), 5,19 (сл., 1Н), 4,74 (т, 1Н), 4,28 (дд, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 3,38 (дд, 2Н), 3,24 (ддд, 2Н), 2,19 (д, 3Н).
Промежуточный продукт 18. Этил-(2Е)-3-[4-метокси-3-(фенилметокси)фенил]-2-метилпроп-2еноат.
Получают из 3-бензилокси-4-метоксибензальдегида посредством процедуры Хорнера-Эммонса промежуточного продукта 4.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,56 (с, 1Н), 7,44 (т, 2Н), 7,36 (т, 2Н), 7,30 (т, 1Н), 7,01 (дд, 1Н), 6,95 (д, 1Н), 6,90 (д, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 4,24 (к, 2Н), 3,92 (с, 3Н), 1,98(д, 3Н), 1,33 (т, 3Н).
Промежуточный продукт 19. (2Е)-3-[4-Метокси-3-(фенилметокси)фенил]-2-метилпроп-2-еновая кислота.
Получают из промежуточного продукта 18 посредством процедуры гидролиза с БЮН промежуточного продукта 5 и используют без получения его характеристик.
Промежуточный продукт 20. (2Е)-3-[4-Метокси-3-(фенилметокси)фенил]-2-метилпроп-2-еноилхлорид.
Получают из промежуточного продукта 19 посредством процедуры хлорангидрида кислоты промежуточного продукта 12.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,91 (с, 1Н), 7,47-7,29 (м, 5Н), 7,10 (дд, 1Н), 7,00 (д, 1Н), 6,95 (д, 1Н),
Промежуточный продукт 21. 3-{(2Е)-3-[4-Метокси-3-(фенилметокси)фенил]-2-метилпроп-2-еноил}(4В)-4-фенил-1,3-оксазолидин-2-он.
Получают из промежуточного продукта 19 посредством процедуры ацилирования оксазолидинона промежуточного продукта 16.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,44-7,29 (м, 11Н), 7,03-6,89 (м, 3Н), 5,52 (дд, 1Н), 5,17 (с, 2Н), 4,73 (дт, 1Н), 4,27 (дд, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 2,00 (с, 2Н).
- 29 005686
Промежуточный продукт 22. (2Е)-3-[3-(3-трет-Бутокси-4-метоксифенил)-2-метилакрилоил]-4-Кфенилоксазолидин-2-он.
Получают из промежуточного продукта 5 (25,7 г, 97,2 ммоль) посредством процедуры ацилирова ния оксазолидинона промежуточного продукта 16, получая при этом промежуточный продукт 22 в виде не совсем белого твердого вещества (39,8 г, количественный выход).
1Н ЯМР (СПС13, 400 МГц) δ: 7,42-7,33 (м, 5Н), 7,16 (д, 1Н), 7,02 (с, 1Н), 6,87 (д, 1Н), 5,55 (дд, 1Н), 4,73 (дд, 1Н), 4,26 (дд, 1Н), 3,81 (с, 3Н), 2,16 (с, 3Н), 1,38 (с, 9Н).
Промежуточный продукт 23. транс-(±)-1-[1-Бензил-4-(3-бензилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанон.
Азометинилидная циклизация.
Раствор промежуточного продукта 6 (15 г, 50,6 ммоль, 1 экв.) и И-(метоксиметил)-Х-(триметилсилилметил)бензиламина (11,9 г, 50,6 ммоль, 1 экв.) в СН2С12 (85 мл) при 0°С обрабатывают по каплям раствором ТФУ (1М в СН2С12, 5 мл, 5,1 ммоль, 0,1 экв.). После перемешивания при 0°С в течение 30 мин реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Раствор обрабатывают дополнительным количеством К-(метоксиметил)-Х-(триметилсилилметил)бензиламина (6 г, 25,3 ммоль, 0,5 экв.), перемешивают 1 ч при комнатной температуре и обрабатывают в течение третьего времени Ν(метоксиметил)-И-(триметилсилилметил)бензиламином (6 г, 25,3 ммоль, 0,5 экв.). Реакционную смесь концентрируют и остаток растворяют в ЕЮАс (500 мл). Раствор промывают 1н. НС1 (2 х 60 мл с добавленными 10 мл насыщ. ИаС1), водой (250 мл), 1М ИаОН (250 мл), водой (250 мл), насыщенным ИаС1 (2 х 100 мл), сушат Иа28О4 и концентрируют в вакууме. Остаток очищают флэш-хроматографией (силикагель, колонка 7,5 х 36 см Вю1аде КР-811, элюированная 5-10% диэтиловым эфиром в дихлорметане, получая при этом промежуточный продукт 23 в виде светло-желтого сиропа (17,4 г, 80%).
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 7,44-7,22 (м, 10Н), 6,81-6,72 (м, 3Н), 5,14 (с, 2Н), 3,86 (с, 3Н), 3,72-3,67 (м, 2Н), 3,58 (д, 1 = 13,0 Гц, 1Н), 3,08 (д, 1 = 9,7 Гц, 1Н), 1 = 9,7 Гц, 1Н), 2,99 (дд, 1 = 8,9, 7,8 Гц, 1Н), 2,74 (дд, 1 = 9,1, 7,4 Гц, 1Н), 2,33 (д, 1 = 9,7 Гц, 1Н), 2,15 (с, 3Н), 0,68 (с, 3Н).
13С ЯМР (75 МГц, СПС13) δ: 211,3, 148,4, 147,4, 139,2, 137,2, 132,7, 128,51, 128,50, 128,3, 127,8,
127,4, 127,0, 121,6, 115,5, 111,2, 71,0, 63,8, 60,0, 59,5, 57,9, 56,0, 47,7, 25,6, 20,6.
Промежуточный продукт 24.
метилпирролидин-3-ил}этанон.
транс-(±)- 1-{1-Бензил-4-[3-(индан-2-илокси)-4-метоксифенил ]-3 Получают из промежуточного продукта 7 процедурой азометиновой циклизации промежуточного продукта 23.
Ί I ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 7,38-7,16 (м, 9Н), 6,88 (шир. с, 1Н), 6,78 (шир. с, 2Н), 5,18-5,13 (м, 1Н), 3,82-3,73 (м, 2Н), 3,79 (с, 3Н), 3,60 (д, 1 = 13,0 Гц, 1Н), 3,41-3,17 (м, 4Н), 3,14 (д, 1 = 9,7 Гц, 1Н), 3,05 (т, 1 = 8,3 Гц, 1Н), 2,84 (т, 1 = 8,3 Гц, 1Н), 2,44 (д, 1 = 9,7 Гц, 1Н), 2,24 (с, 3Н), 0,86 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 25. Этиловый эфир (±)-1-бензил-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)3-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты.
Получают из промежуточного продукта 10 реакцией азометинилиденовой циклизации промежуточного продукта 23 с образованием янтарного масла (16,7 г, выход 61%).
'| I ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ: 7,39-7,23 (м, 5Н, ароматический), 6,91 (с, 1Н, ароматический), 6,78 (м, 2Н, ароматический), 4,75 (м, 1Н), 4,18 (к, 2Н, ОЕ!), 3,86 (м, 1Н), 3,81 (с, 3Н, ОСН3), 3,75 (д, 1Н, 1 = 13,2 Гц), 3,62 (д, 1Н, 1 = 13,2 Гц), 3,20 (д, 1Н, 1 = 9,5 Гц), 3,01 (м, 1Н), 2,91 (м, 1Н), 2,51 (д, 1Н, 1 = 9,5 Гц), 3,01
- 30 005686
О
Промежуточный продукт 26. транс-(±)-1-[1-Бензил-4-(3-циклопентилокси)-4-метоксифенил)-3метилпирролидин-3-ил] этанон.
Получают по процедуре, приведенной в патенте США № 5665754.
он
Промежуточный продукт 27. (±)-[1-Бензил-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-ил]метанол.
К перемешиваемому магнитной мешалкой раствору промежуточного продукта 25 (9,32 г, 21,3 ммоль) в сухом толуоле (10 мл) при 0°С добавляют диизобутилалюминийгидрид (64 мл, 1,0М в СН2С12, 63,9 ммоль). Смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С, затем при комнатной температуре в течение 1 ч и, наконец, гасят МеОН (20 мл). Затем добавляют 1,0н. раствор (100 мл) хлористо-водородной кислоты (НС1) и смесь перемешивают еще 30 мин. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют СН3С1 (2 х 20 мл). Органические фазы промывают насыщенным раствором МН4С1, сушат над безводным №:8О|. затем концентрируют, получая при этом продукт в виде бледно-желтого масла (8,28 г, выход 98%).
2Н ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ: 7,31-7,14 (м, 5Н, ароматический), 6,78-6,71 (м, 3Н, ароматический),
4,76-4,73 (шир. м, 1Н), 3,79 (с, 3Н, ОСН3), 3,71-3,55 (м, 3Н), 3,47-3,10 (м, 3Н), 2,92 (д, 1Н, I = 9,2 Гц)),
2,62 (м, 1Н), 3,35-2,33 (м, 2Н), 1,89-1,58 (м, 8Н, циклопентил), 0,52 (с, 3Н, СН3).
Промежуточный продукт 28. (±)-1-Бензил-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-карбоксальдегид.
Раствор оксалилхлорида (4,87 мл, 9,73 ммоль) в сухом СН2С12 (20 мл) охлаждают до -78°С в атмосфере азота и перемешивают при обработке раствором диметилсульфоксида (ДМСО, 1,38 мл, 19,5 ммоль) в СН2С12 (5 мл). Наблюдается выделение газа. Когда добавление завершают, раствор перемешивают в течение 5 мин, затем на протяжении периода 10 мин добавляют раствор промежуточного продукта 27 (3,5 г, 8,85 ммоль) в СН2С12 (10 мл). Смесь перемешивают в течение 30 мин, обрабатывают триэтиламином (Е1^) (6,7 мл, 44,3 ммоль) и оставляют для нагревания до комнатной температуры. К смеси добавляют воду и образовавшиеся фазы разделяют. Водную фазу экстрагируют СН2С12 (2 х 50 мл). Объединенные органические фазы промывают насыщенным раствором соли, сушат (Νη28Ο4) и концентрируют, получая при этом маслянистый продукт (3,2 г, 92%).
2Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ: 9,63 (с, 1Н, СНО), 7,34-7,21 (м, 5Н, ароматический), 6,78-6,68 (м, 3Н, ароматический), 4,73 (шир. м, 1Н), 3,80 (с, 3Н, ОСН3), 3,78-3,61 (м, 3Н), 3,18-3,11 (м, 2Н), 2,86-2,81 (м, 1Н), 2,58-2,52 (м, 1Н), 2,43-2,34 (м, 2Н), 1,87-1,59 (м, 8Н, циклопентил), 0,74 (с, 3Н, СН3).
- 31 005686
Промежуточный продукт 29. (±)-1-[1-Бензил-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-ил]-1-гидроксипропан-2-он.
К раствору этилвинилового простого эфира (0,95 мл, 9,91 ммоль) в сухом ТГФ (4 мл) при -78°С добавляют 1,7М трет-бутиллитий в пентане (5,25 мл, 8,93 ммоль) и образовавшийся раствор нагревают до 0°С. Цвет раствора изменяется от желтого до бесцветного. Образовавшийся виниланион затем охлаждают до -78°С и по каплям добавляют раствор промежуточного продукта 28 (1,95 г, 4,96 ммоль) в ТГФ (10 мл). Образовавшуюся смесь перемешивают в течение 45 мин, гасят насыщенным ΝΗ4Ο1 (15 мл) и экстрагируют Εΐ2Ο (3 х 30 мл). Объединенные органические экстракты сушат над Να28Ο4 и концентрируют. Сырой продукт растворяют в Εΐ2Ο и обрабатывают концентрированной серной кислотой (Н28О4) в делительной воронке при энергичном встряхивании. Раствор в Εΐ2Ο промывают водой (30 мл), насыщенным раствором \а11СО3 (30 мл), сушат над Να28Ο4 и концентрируют. Остаток очищают флэшхроматографией (силикагель, 20% ΕΐΟΆο-гексаны), получая при этом промежуточный продукт 29 в виде оранжевого масла (1,36 г, выход 62%).
1Н ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ: 7,34-7,27 (м, 5Н, ароматический), 6,77-6,68 (м, 3Η, ароматический), 4,75-4,72 (шир. м, 1Н), 4,13-4,08 (м, 1Н), 3,81 (с, 3Η, ОСН3), 3,79-3,57 (м, 3Η), 3,26 (м, 1Н), 2,99 (д, 1Н, I = 9,2 Гц), 2,69-2,64 (м, 1Н), 2,39 (д, 1Н, I = 9,2 Гц), 2,25 (с, 3Η, ОСН3), 1,94-1,59 (м, 8Н, циклопентил), 0,69 (с, 3Η, СН3).
Пример 1. Метиловый эфир (±)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-(1-гидрокси-1-метилэтил)-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
К 3,0М раствору метилмагнийбромида (0,6 мл, 1,8 ммоль) в Εΐ2Ο при 0°С добавляют по каплям посредством насоса шприца раствор промежуточного продукта 36 (0,65 г, 1,73 ммоль) в сухом ТГФ (5 мл). Образовавшуюся смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин, затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь затем гасят насыщенным ΝΗ4Ο1 (15 мл) и экстрагируют Εΐ2Ο (2 х 10 мл). Объединенные органические экстракты сушат над \а28(')4 и концентрируют. Остаток очищают флэшхроматографией (силикагель, 20%, затем 50% ΕΐΟΆο-гексаны), получая при этом соединение примера 1 в виде оранжевого масла (0,37 г, 55%).
1Η ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ: 6,83-6,77 (м, 3Η, ароматический), 4,75-4,74 (шир. м. 1Н), 3,83 (с, 3Η, ОСН3), 3,96-3,50 (м, 4Н), 3,73 (с, 3Η, ОСН3), 3,37-3,25 (м, 1Н), 1,96-1,59 (м, 8Н, циклопентил), 1,22 (с, 3Η, СН3), 1,07 (с, 6Н, СН3).
Промежуточный продукт 30. 2-[1-Бензил-4-(8)-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)метилпирролидин-3-ил]пропан-2-ол.
Промежуточный продукт 33 (0,992 г, 2,52 ммоль) растворяют в ТГФ (7,5 мл) и раствор охлаждают до 0°С. Добавляют метилмагнийиодид (3,0М в простом эфире, 2,52 мл, 7,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1,5 ч. Добавляют насыщенный ΝΗ4Ο и реакционную смесь концен
- 32 005686 трируют в вакууме. Остаток разбавляют ЕЮ Ас и органический слой промывают три раза насыщенным ЫаНСОз, насыщенным №1С1. затем сушат над Να28Ο4 и концентрируют в вакууме (0,96 г, 93%).
'|| ЯМР (СОС13, 400 МГц) δ: 7,33-7,24 (м, 5Н), 6,83-6,77 (м, 3Н), 3,86-3,74 (м, 7Н), 3,68-3,59 (дд, 2Н), 3,32 (дд, 1Н), 3,24 (д, 1Н), 2,48 (дд, 1Н), 2,16 (д, 1Н), 1,35-1,28 (м, 1Н), 1,21-1,18 (м, 5Н), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,56 (с, 3Н), 0,38-0,33 (м, 2Н).
ЕКМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 410,5 (т+1).
Промежуточный продукт 31. 2-[4-(8)-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)-метилпирролидин-3 -ил] пропан-2-ол.
Промежуточный продукт 30 (0,96 г, 2,3 ммоль) растворяют в метаноле (10 мл) и раствор обрабатывают катализатором Реаг1тап (20% Рй(ОН)2 на угле, 200 мг) и формиатом аммония (1,0 г, 15,8 ммоль). Раствор нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 6 ч. Катализатор удаляют фильтрованием и раствор концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в Е1ОАс и промывают три раза водой, насыщенным №С1, сушат над №128О4 и концентрируют в вакууме (384 мг, 52%).
'Н ЯМР (СОС13, 400 МГц) δ: 6,83-6,79 (м, 3Н), 3,86-3,80 (м, 5Н), 3,75-3,66 (м, 2Н), 3,57-3,51 (м, 2Н), 3,22-3,17 (м, 1Н), 2,78-2,67 (м, 1Н), 1,34-1,21 (м, 7Н), 0,69 (с, 3Н), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,37-0,33 (м, 2Н).
ЬКМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 320,3 (т+1).
Промежуточный продукт 32. 2-Бензилокси-1-[4-(8)-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(1гидрокси-1-метилэтил)-3 -(8)-метилпирролидин-1-ил]этанон.
Промежуточный продукт 31 (75 мг, 0,23 ммоль) растворяют в СН2С12 (1 мл) и раствор обрабатывают Ν,Ν-диизопропилэтиламином (ΌΙΕΑ) (61 мкл, 0,35 ммоль), затем охлаждают до 0°С. Добавляют бензилоксиацетилхлорид (55,6 мкл, 0,23 ммоль) и раствор перемешивают при 0° в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляют СН2С12 и промывают три раза 1н. НС1, один раз водой, три раза 6% NаНСО3, затем сушат №ь8О4 и концентрируют в вакууме. Сырой продукт (103 мг) хроматографируют с применением смеси Е1ОАс/гексан (1:1), получая при этом промежуточный продукт 32 (21 мг, 19%).
'|| ЯМР (СОС13, 400 МГц) δ: 7,41-7,27 (м, 5Н), 6,85-6,76 (м, 3Н), 4,66-4,61 (м, 2Н), 4,13-4,07 (м, 2Н), 3,94-3,59 (м, 7Н), 3,53-3,47 (м, 1Н), 3,28-3,22 (м, 1Н), 1,34-1,24 (м, 2Н), 1,24-1,19 (м, 2Н), 1,14-1,11 (м, 2Н), 1,07-0,98 (м, 6Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,36-0,31 (м, 2Н).
ЕКМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 468,3 (т+1).
Пример 2. 1 -[4-(8)-(3 -Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(1-гидрокси-1-метилэтил)-3-(8)метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Промежуточный продукт 32 (21 мг, 45 мкмоль) растворяют в этаноле (95%, 2 мл) и обрабатывают в этаноле (95%, 2 мл), обрабатывают катализатором Реаг1тап (20% Рй(ОН)2 на угле, 20 мг). Раствор под
- 33 005686 вергают действию Н2 до 1 атм в течение 20 ч. Катализатор удаляют фильтрованием и концентрируют в вакууме, получая при этом соединение примера 2 (15 мг, 88%).
Ή ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 6,87-6,80 (м, 3Н), 4,20-4,09 (м, 2Н), 3,89-3,62 (м, 9Н), 3,58-3,51 (м, 1Н), 3,13-2,87 (м, 2Н), 1,35-1,01 (м, 10Н), 0,67-0,61 (м, 2Н), 0,39-0,33 (2Н).
ЬКМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 378,4 (т+1).
Промежуточный продукт 33. 1-[1-Бензил-4-(8)-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)метилпирролидин-3-ил] этанон.
Оксалилхлорид (2,0М в СН2С12, 1,35 мл, 2,7 ммоль) добавляют к СН2С12 (4 мл) и раствор охлаждают до -60°С. Медленно добавляют раствор ДМСО (0,36 мл, 5,0 ммоль) в СН2С12 (1,5 мл). Данный раствор перемешивают в течение 5 мин, затем к раствору добавляют промежуточный продукт 66 (1,06 г, 2,7 ммоль), растворенный в СН2С12 (7,5 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при -60°С, затем гасят Ε!3Ν (1,9 мл). Смеси дают возможность нагреться до комнатной температуры, разбавляют водой и после энергичного перемешивания в течение нескольких минут слои разделяют. Органический слой промывают три раза 1н. НС1, три раза 6% №11СО3, затем сушат над №:8О.| и концентрируют в вакууме. Промежуточный продукт 33 выделяют и используют без очистки (0,992 г, 93%).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 392,4 (т+1).
О —0
Промежуточный продукт 34. Метиловый эфир транс-(±)-[3-ацетил-4-(3-бензилокси-4-метоксифенил)-3-метил]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
Раствор промежуточного продукта 23 (17,4 г, 40,5 ммоль, 1 экв.) в ацетонитриле (150 мл) обрабатывают метилхлорформиатом (15,6 мл, 202,5 ммоль, 5 экв.), затем перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют и остаток очищают флэшхроматографией (силикагель, колонка 7,5 х 36 см Вю!аде ΚΡ-811, элюированная 50-60% Ε!ОАс в гептане), получая при этом промежуточный продукт 34 в виде бесцветного сиропа (13,7 г, 85%).
2Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ: 7,42-7,27 (м, 5Н), 6,82 (д, I = 8,8 Гц, 1Н), 6,69 (шир. д, I = 8,3 Гц, 1Н),
6,63 (д, I = 1,8 Гц, 1Н), 5,15 (с, 2Н), 3,88 (с, 3Н), 3,84 (дд, I = 16,3, 11,0 Гц, 1Н), 3,73 (шир. с, 3н), 3,24/3,12 (2 д, I = 11,31/11,0 Гц, 1Н), 2,09/2,01 (2 с, 3Н), 0,84 (с, 3Н).
13С ЯМР (75 МГц, СОС13) δ: 210,0/209,8, 155,2, 149,0, 147,5, 137,0. 130,5/130,0, 128,5, 127,8, 127.2/127,1, 121,2/121,0, 114,9/114,8, 111,5, 70,9, 58,1/57,2, 55,9, 545,4/54,0, 52,5, 50,2/50,0, 48,4/48,0, 26,3, 17,5.
метоксифенил]-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
Получают из промежуточного продукта 24 процедурой с метилхлорформиатом промежуточного продукта 34.
2Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ: 7,24-7,16 (м, 4Н), 6,82 (д, I = 8,8 Гц, 1Н), 6,75-6,72 (м, 2Н), 5,18-5,10 (м, 1Н), 3,91 (т, I = 11,2 Гц, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 3,77-3,65 (м, 3Н), 3,74 (с, 3Н), 3,42-3,16 (м, 5Н), 2,17 (д, I = 6,8 Гц, 3Н), 1,04 (с, 3Н).
- 34 005686 13С ЯМР (75 МГц, СЭС13) δ: 210,1/209,9, 155,3, 149,4, 146,9/146,8, 140,5/140,4, 130,5/130,0, 126,7, 124,7, 121,3/121,1, 116,1/115,8, 111,9, 79,2, 58,2/57,4, 55,9, 54,7/54,2, 52,6, 50,2/50,0, 48,5/48,1, 39,7, 26,6/26,5, 17,8.
(±)
Промежуточный продукт 36. Метиловый эфир транс-(±)-3-ацетил-4-(3-циклопентилокси-4метоксифенил)-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
Получен по процедуре, приведенной в патенте США № 5665754.
Рацемическая форма промежуточного продукта 46.
Промежуточный продукт 37. Метиловый эфир транс-(±)-[3-ацетил-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)3-метил]пирролидин-1-карбоновой кислоты.
Раствор промежуточного продукта 34 (8,7 г, 21,9 ммоль) в этаноле (50 мл) встряхивают в течение 16 ч в атмосфере Н2 (50 фунт/кв.дюйм) в присутствии катализатора, палладия на угле (0,5 г, 10% Ρά/С). Катализатор удаляют фильтрованием через подушку диатомовой земли с последующим фильтрованием через мембранный фильтр 0,22 мкм. Фильтрат концентрируют в вакууме, получая при этом промежуточный продукт 37 в виде прозрачного сиропа (6,5 г, 97%).
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ: 6,79 (д, I = 8,3 Гц, 1Н), 6,74 (д, I = 1,8 Гц, 1Н), 6,63 (шир. д, I = 8,3 Гц, 1Н), 6,04 (шир. с, 1Н), 3,96-3,85 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,75/3,73 (2с, 3Н), 3,74-3,59 (м, 3Н), 3,36/3,26 (2 ά, 1= 11,2/11,0 Гц, 1Н), 2,17/2,15 (2 с, 3Н), 1,01 (с, 3Н).
13С ЯМР (75 МГц, СОС13) δ: 210,0/209,8, 155,3, 145,9/145,8, 145,5. 131,2/130,8, 119,9, 114,5, 110,6, 58,1/57,2, 55,8, 54,4/53,9, 52,5, 50,3/50,1, 48,4/48,0, 26,3, 17,6.
Промежуточный продукт 38. Метиловый эфир транс-3-ацетил-4-[экзо-3-(бицикло [2.2.1] гепт-2илокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
Получают по процедуре Мицунобу промежуточного продукта 2 из промежуточного продукта 37 и эндонорборнеола (выход 36%).
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ: 6,80 (д, I = 8,2 Гц, 1Н), 6,66 (д, I = 9,0 Гц, 1Н), 6,62 (с, 1Н), 4,15-4,08 (м, 1Н), 3,95-3,86 (м, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 3,74 (с, 3Н), 3,73-3,60 (м, 3Н), 3,37/3,28 (2 ά, I = 11,2/10,8 Гц, 1Н), 2,47 (шир. с, 1Н), 2,32 (шир. с, 1Н), 2,17/2,15 (2 С, 3Н), 1,76-1,66 (м, 2Н), 1,63-1,45 (м, 3Н), 1,28-1,08 (м, 3Н), 1,02/1,01 (2 с, 3Н).
13С ЯМР (75 МГц, СОС13) δ: 210,5/210,3, 155,7, 149,6, 147,4, 130,8/130,76, 130,3, 120,9/120,7/120,5, 115,6/115,4/115,3/115,2, 112,2, 81,5, 58,6/57,8, 56,4 54,9/54,6, 52,9, 50,6/50,5, 49,1/49,0/48,7, 41,5, 40,4, 35,8/35,7, 28,8, 26,9/26,8, 24,7/24,6, 18,2.
- 35 005686
Промежуточный продукт 39. Метиловый эфир транс-[3-ацетил-4-[4-метокси-3-(1-метил-3-фенилпропокси)фенил]-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
Получают по процедуре Мицунобу промежуточного продукта 2 из промежуточного продукта 37 и 4-фенил-2-бутанола.
1Н ЯМР (300 МГц, СОС1;) δ: 7,29-7,15 (м, 5Н), 6,82 (д, 1 = 8,3 Гц), 6,72-6,63 (м, 2Н), 4,33-4,25 (м, 1Н), 3,94-3,59 (м, 4Н), 3,84 (с, 3Н), 3,74 (шир. с, 3Н), 3,36/3,27 (2 дд, 1 = 11,2, 3,0/10,9, 3,9 Гц, 1Н), 2,88-
2,69 (м, 2Н), 2,18-2,06 (м, 4Н), 1,95-1,82 (м, 1Н), 1,33/1,31 (2 д, 1 = 2,3/2,3 Нх, 3Н), 1,01/0,99 (2 с, 3Н).
13С ЯМР (75 МГц, СОС1;) δ: 209,9, 155,4, 149,8, 147,1, 141.9, 130,4/129,9, 128,5, 128,4, 125,8, 121,2, 116,9, 111,9, 74,8, 58,1/57,3, 55/9, 54,6/54,3, 52,6, 50,2/50,1, 48,6/48,2, 38,1, 31,8, 26,6, 19,9, 17,7.
О
Промежуточный продукт 40. Метиловый эфир транс-(±)-3-ацетил-4-(4-метокси-3-фенетилоксифенил)-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
Получают по процедуре Мицунобу промежуточного продукта 2 из промежуточного продукта 37 и 2-фенилэтанола.
1Н ЯМР (300 МГц, СОС1;) δ: 7,36-7,23 (м, 5Н), 6,82 (д, 1 = 8,2 Гц, 1Н)), 6,70 (д, 1 = 8,4 Гц, 1Н), 6,66 (с, 1Н), 4,18 (т, 1 = 7,5 Гц, 2Н), 3,92-3,81 (м, 1Н), 3,86 (с, 3Н), 3,76-3,61 (м, 3Н), 3,73 (с, 3Н), 3,40/3,27 (2 д, 1 = 11,2/10,9 Гц, 1Н), 3,15 (т, 1 = 7,5 Гц, 2Н), 2,16-2,12 (2 с, 3Н), 1,00 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 41. Метиловый эфир транс-3-ацетил-4-[4-метокси-3-(тетрагидрофуран-3илокси)фенил]-3 -метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
Получают по процедуре Мицунобу промежуточного продукта 2 из промежуточного продукта 37 и 3-гидрокситетрагидрофурана.
' Н ЯМР (300 МГц, СОС1;) δ: 6,85-6,63 (м, 3Н), 4,92-4,88 (м, 1Н), 4,07-3,62 (м, 8Н), 3,84 (с, 3Н), 3,75 (с, 3Н), 3,39/3,29 (2 д, 1 = 11,2/10,2 Гц, 1Н), 2,19-2,14 (м, 5Н), 1,02 (шир. с, 3Н).
13С ЯМР (75 МГц, СЮСЕ) δ: 210,0/209,9, 155,4, 149,5, 146,5, 130,0, 121,6/121,5, 116,5/116,4/116,3, 112,0, 111,0, 78,9, 73,0, 67,2, 58,1/57,3, 55,9, 54,7/54,3, 52,6, 50,1/50,0, 48,4/48,0, 33,0, 26,6, 17,8.
Промежуточный продукт 42. (4В)-3-{[(3Б,4Б)-4-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метил-1бензилпирролидин-3 -ил]карбонил}-4-фенил-1,3-оксазолидин-2-он.
К охлажденной (-4°С) перемешиваемой суспензии ацилоксазолидинона (9,30 г, 22,8 ммоль) и Ν(метоксиметил)-Ы-(триметилсилилметил)бензиламина (11,7 мл, 45,6 ммоль, 2 экв.) в СНС13 (65 мл) добавляют раствор ТФУ в СНС13 (4,6 мл 1,0М, 4,6 ммоль, 0,2 экв.) посредством шприца в атмосфере азота. Образовавшуюся суспензию перемешивают приблизительно при 0°С в течение 4 ч, затем приблизительно при 15°С в течение ночи (водяная баня). Образовавшийся мутный раствор затем снова охлаждают до -4°С, обрабатывают дополнительной порцией №(метоксиметил)-№(триметилсилилметил)бензиламина (5,9 мл, 22,8 ммоль, 1 экв.) посредством шприца и оставляют для перемешивания в течение более 5 ч, в течение указанного времени реакционная смесь становится гомогенной. ТСХ (5% Е12О в СН2С12) показала завершение реакции. Массу СНС13 удаляют при пониженном давлении и остаток разбавляют ЕЮАс (250 мл) и промывают последовательно 1н. водным НС1 (2 х 50 мл), 1н. водным №ЮН (50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл). Органический слой затем сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом оранжевое полутвердое вещество (13,9 г). Очистка посредством флэш
- 36 005686 хроматографии на силикагеле (2% простой эфир в СН2С12) дает основной диастереомер в виде белой пены (8,25 г, 65%).
Диастереомерная селективность составляет приблизительно 10:1 (ВЭЖХ).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,42-7,21 (с, 10Н), 6,95 (с, 1Н), 6,81 (с 2Н), 5,55 (дд, 1Н), 4,74 (т, 1Н), 4,68 (м, 1Н), 4,10 (дд, 1Н), 3,93 (т, 1Н), 3,70 (д, 1Н), 3,68 (с, 3Н), 3,56 (д, 1Н), 3,42 (д, 1Н), 2,72 (м, 2Н),
2,64 (д, 1Н), 2,48 (м, 1Н), 1,85-1,78 (с, 2Н), 1,75-1,61 (с, 4Н), 1,57-1,53 (с, 2Н), 0,96 (с, 3Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 555,2 (т+1).
Промежуточный продукт 43. (38,48)-1-Бензил-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-карбоновая кислота.
Суспензию пероксида лития (0,5 г, 10,8 ммоль) в смеси вода-ТГФ (1:1, 6 мл) добавляют к раствору промежуточного продукта 42 (3,0 г, 5,4 ммоль) в смеси вода-ТГФ (3:1, 30 мл) при 0°С в атмосфере азота. Суспензия сразу растворяется. После 1 ч перемешивания при 0°С для гашения избыточного пероксида добавляют водный раствор сульфита натрия (Ыа28О3) (1,5н., 12 мл) и ТГФ удаляют при пониженном давлении. Основный остаток экстрагируют три раза порциями по 30 мл СН2С12. Водную фазу подкисляют до рН 1 водным 1,0н. раствором НС1 и экстрагируют тремя порциями по 30 мл Εΐ2Ο. Эфирные экстракты сушат (Ыа28О4), концентрируют при пониженном давлении и используют без дополнительной очистки.
1Н ЯМР (300 МГц, СБС13) δ: 10,73 (шир. с, 1Н, СООН), 7,69 (шир. с, 2Н, ароматический), 7,38-7,36 (м, 3Н, ароматический), 6,78 (с, 1Н, ароматический), 6,69 (м, 2Н, ароматический), 4,71 (шир. с, 1Н), 4,514,48 (м, 2Н), 4,24-4,11 (шир. с, 2Н), 4,08-3,88 (шир. с, 1Н), 3,76 (с, 3Н, ОСН3), 3,54 (шир. с, 1Н), 3,1 (шир. с, 1Н), 1,83-1,52 (м, 8Н, циклопентил), 1,05 (шир. с, 3Н, СН3).
Промежуточный продукт 44. Метоксиметиламид (38,48)-1-бензил-4-(3-циклопентилокси-4метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты.
Промежуточный продукт 44 получают из промежуточного продукта 43 (2,1 г, 4,98 ммоль), 1,1'карбонилдиимидазола (0,89 г, 5,47 ммоль) и гидрохлорида Ы,О-диметилгидроксиламина (0,73 г, 7,47 ммоль) в виде белого кристаллического порошка (0,9 г, 40%).
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13) δ: 10,73 (шир. с, 1Н, СООН), 7,69 (шир. с, 2Н, ароматический), 7,4-7,3 (м, 5Н, ароматические), 7,06 (д, 1Н, I = 1,7 Гц, ароматический), 6,89 (дд, 1Н, I = 8,3 Гц, ароматический), 6,73 (д, 1Н, I = 8,3 Гц, ароматический), 4,77-4,75 (м, 1Н), 4,16-4,06 (м, 1Н), 3,81 (с, 3Н, ОСН3), 3,81-3,71 (м, 2Н), 3,60 (с, 3Н, ОСН3), 3,21 (с, 3Н, ЫСН3), 2,96 (д, 1Н, I = 9,6 Гц), 2,91 (м, 1Н), 2,78 (д, 1Н, I = 9,6 Гц), 2,77 (м, 1Н), 2,04 (с, 3Н, СН3), 1,92-1,59 (м, 8Н, циклопентил), 0,94 (с, 3Н, СН3).
Промежуточный продукт 45. 1-[(38,48)-1-Бензил-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанон.
Раствор промежуточного продукта 44 (0,17 г, 0,43 ммоль) в ТГФ (8 мл) охлаждают до -78°С и обрабатывают метиллитием (1,5М в ТГФ, 0,315 мл, 0,47 ммоль) в атмосфере азота. Раствор перемешивают в течение 40 мин при -78°С, затем гасят холодным насыщенным водным раствором ЫН4С1 (8 мл). При энергичном перемешивании добавляют смесь гексаны/СН2С12 (3:1, 8 мл). После дальнейшего разбавления смесью гексаны/СН2С12 (3:1, 10 мл) добавляют насыщенный раствор соли (10 мл) и два слоя разделяют. Водный слой промывают СН2С12 (8 мл) и объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат (Ыа28О4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении с образованием маслянистого продукта (154 мг, 89%).
- 37 005686 1Н ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ: 7,39-7,24 (м, 5Н, ароматический), 6,82-6,70 (м, 3Н, ароматические), 4,74 (шир. с, 1Н), 3,81 (с, 3Н, ОСН3), 3,78-3,58 (м, 3Н), 3,14 (д, 1Н, I = 9,7 Гц), 3,05 (м, 1Н), 2,84 (м, 1н), 2,40 (д, 1Н, I = 9,7 Гц), 2,23 (с, 3Н, СН3), 1,92-1,59 (м, 8Н, циклопентил), 0,83 (с, 3Н, СН3).
Промежуточный продукт 46. Метиловый эфир (38,48)-3-ацетил-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 45 (0,154 г, 0,38 ммоль) в безводном ацетонитриле (10 мл) добавляют метилхлорформиат (0,146 мл, 1,89 ммоль). Раствор нагревают до 80° С и кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч. Раствор затем охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Очистка ВЭЖХ с обращенной фазой дает промежуточный продукт 46 в виде масла (93 мг, 65%). Удельное вращение: [α]259 23 +2,5 (с = 1,0, Е!ОН).
1Н ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ 6,8 (д, 1Н, I = 8,0 Гц, ароматический), 6,66 (д, 1Н, I = 8,0 Гц, ароматический), 6,66 (с, 1Н, ароматический), 4,73 (с, 1Н), 3,95-3,64 (м, 4Н), 3,83 (с, 3Н, ОСН3), 3,74 (с, 3Н, ОСН3), 3,37 и 3,27 (с, 3Н, СН3) 2,17 и 2,14 (с, 3Н, СН3), 1,92-1,59 (м, 8Н, циклопентил), 1,03 и 1,02 (с, 3Н, СН3).
Промежуточный продукт 47. (38,48)-4-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метил-1-бензилпирролидин-3-карбальдегид.
Общая процедура восстановления/окисления оксазолидинона.
К охлажденному (-78°С), перемешиваемому раствору промежуточного продукта 42 (15,09 г, 27,2 ммоль) в толуоле (250 мл) добавляют раствор литийалюминийгидрида в тетрагидрофуране (16,3 мл 1,0М, 16,3 ммоль, 0,6 экв.) посредством шприца в атмосфере азота. Наблюдается энергичное барботирование. Образовавшийся раствор перемешивают при -78°С в течение 2 ч, после указанного времени охлаждающую баню убирают. Реакционную смесь гасят последовательным добавлением воды (0,62 мл), 15% водного NаОН (0,62 мл) и воды (1,9 мл). Образовавшейся смеси дают возможность нагреться до комнатной температуры, перемешивают в течение 30 мин, затем разбавляют Е!О2 (500 мл) и сушат (Мд8О4). Фильтрование и концентрирование в вакууме дают спирт (с некоторым количеством присутствующего альдегида) в виде полутвердого вещества (14,8 г). Данный материал используют непосредственно без дополнительной очистки.
К охлажденному (-78°С), перемешиваемому раствору оксалилхлорида в СН2С12 (10,9 мл, 2,0М, 21,8 ммоль, 0,8 экв.) добавляют через шприц в атмосфере азота ДМСО (3,1 мл, 43,5 ммоль, 1,6 экв.) в дополнительном количестве СН2С12 (75 мл). После перемешивания при -78°С в течение 20 мин при помощи канюли добавляют сырой спирт в СН2С12 (75 мл). Образовавшийся желтый раствор оставляют для перемешивания при -78°С в течение 20 мин, затем шприцем добавляют Ε!3Ν (15,2 мл, 109 ммоль, 4 экв.). Реакционную смесь оставляют для перемешивания при -78°С в течение 20 мин, затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение дополнительного 1 ч. Реакционную смесь гасят с добавлением насыщенного раствора соли (150 мл), затем экстрагируют СН2С12 (2 х 100 мл). Объединенные органические слои сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом сырой альдегид. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (25% Е!ОАс в гексанах) дает альдегид в виде прозрачного бесцветного масла (9,8 г, 92%).
*Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 9,64 (с, 1Н), 7,37-7,26 (с, 5Н), 6,78-6,76 (с, 2Н), 6,70 (м, 1Н), 4,74 (м, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 3,70 (м, 1Н), 3,64-3,62 (с, 2н), 3,18-3,13 (с, 2н), 2,84 (т, 1Н), 2,41 (д, 1Н), 1,94-1,83 (с, 6Н), 1,63-1,59 (с, 2Н), 0,74 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 394,3 (т+1).
- 38 005686
Промежуточный продукт 48. (4К)-3-{[(38,48)-4-(3-Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метил-1бензилпирролидин-3-ил]карбонил}-4-фенил-1,3-оксазолидин-2-он.
Получают посредством процедуры циклоприсоединения азометина промежуточного продукта 23 из промежуточного продукта 17.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,45-7,12 (м, 15Н), 6,95 (д, 1Н), 6,78 (д, 1Н), 5,54 (дд, 1Н), 5,17 (с, 1Н),
4,69 (т, 1Н), 4,22 (дд, 1Н), 4,11 (т, 1Н), 3,84-3,60 (м, 5Н), 3,51 (д, 1Н), 3,37 (дт, 2Н), 3,21 (дд, 2Н), 2,90 (д, 1Н), 2,85 (дд, 1Н), 2,76 (дд, 1Н), 1,12 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 49. (38, 48)-4-(3-Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метил-1-бензилпирролидин-3-карбальдегид.
Получают из промежуточного продукта 48 посредством процедуры восстановления/окисления промежуточного продукта 47.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 9,65 (с, 1Н), 7,36-7,17 (м, 9Н), 6,84 (д, 1Н), 6,79 (д, 1Н), 6,76 (дд, 1Н), 5,16 (с, 1Н), 3,79 (с, 3Н), 3,76 (д, 1н), 3,68-3,63 (с, 1н), 3,40-3,31 (м, 2Н), 3,24-3,13 (м, 2Н), 2,85 (дд, 1н), 2,43 (д, 1Н), 0,77 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 50. (1К)-1-[(38,48)-4-(3-Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метил-1бензилпирролидин-3-ил]этан-1-ол.
Требуемый, более полярный диастереомер. Получают посредством процедуры присоединения по Гриньяру промежуточного продукта 56 из промежуточного продукта 49.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,39-7,17 (м, 9Н), 6,84-6,77 (м, 3Н), 5,17 (с, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 3,72-3,57 (м, 4Н), 3,38-3,19 (м, 5Н), 3,11 (д, 1Н), 2,57 (т, 1Н), 2,12 (д, 1Н), 1,15 (д, 3Н), 0,51 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 51. (1К)-1-[(38,48)-4-(3-Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3 -ил]этан-1 -ол.
Получают посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31 из промежуточного продукта 50.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,26-7,16 (м, 4Н), 6,81 (с, 3Н), 5,19 (с, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 3,74-3,68 (м, 2Н), 3,44-3,17 (м, 8Н), 2,66 (д, 1Н), 2,51 (шир. с, 1Н), 1,18 (д, 3Н), 0,63 (с, 3Н).
- 39 005686
Промежуточный продукт 52. (4К)-3-({(38,48)-4-[4-Метокси-3-(фенилметокси)фенил]-3-метил-1бензилпирролидин-3-ил}карбонил)-4-фенил-1,3-оксазолидин-2-он (основной диастереомер).
Получают посредством процедуры циклоприсоединения промежуточного продукта 23 из промежуточного продукта 21.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭСЬ) δ: 7,49-7,23 (м, 15Н), 7,09 (д, 1Н), 6,94 (дд, 1Н), 6,80 (д, 1Н), 5,49 (дд, 1Н), 5,17 (с, 2Н), 4,66 (т, 1Н), 4,19 (дд, 1Н), 4,09 (т, 1Н), 3,87 (с, 3Η), 3,68 (к, 2Н), 3,51 (д, 1Н), 2,85-2,79 (м, 2Н),
2,69 (дд, 1Н), 0,99 (с, 3Η).
Промежуточный продукт 53. (38,48)-4-(4-Метокси-3-(фенилметокси)фенил)-3-метил-1-бензилпирролидин-3-карбальдегид.
Получают посредством процедуры восстановления/окисления промежуточного продукта 47 из промежуточного продукта 52.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 9,56 (с, 1Н), 7,43-7,22 (м, 10Н), 6,79 (д, 1Н), 6,77 (д, 1Н), 6,71 (дд, 1Н), 5,14 (дд, 2Н), 3,86 (с, 3Η), 3,71 (д, 1Н), 3,62 (д, 1Н), 3,57 (д, 1Н), 3,13-3,08 (м, 2Н), 2,73 (дд, 1Н), 2,30 (д, 1Н), 0,58 (с, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 416,3 (т+1).
Промежуточный продукт 54. 3-[1-Бензил-4-8-(3-трет-бутокси-4-метоксифенил)-3-8-метилпирролидин-3-карбонил]-4-К-фенилоксазолидин-2-он.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 22 (39,8 г, 97 ммоль) с СНС13 (292 мл) при 0°С в атмосфере азота добавляют №(метоксиметил)-№-(триметилсилилметил)бензиламин (49,5 мл, 194 ммоль), затем ТФУ-кислоту (1М в СНС13, 9,7 мл, 9,7 ммоль). Суспензии дают возможность нагреться до комнатной температуры на протяжении ночи. ТСХ с применением смеси 2/3 ΕΐΟΑο/гексан показывает частичное превращение исходного материала в продукт с незначительно более высоким К.
Образовавшийся раствор обрабатывают дополнительным №(метоксиметил)-№(триметилсилилметил)бензиламином (25 мл, 97 ммоль) до расхода остаточного исходного материала. После выдерживания реакционной смеси 3 ч при комнатной температуре, как оказалось по данным ТСХ, реакция завершается. Раствор концентрируют роторным испарителем, затем снова растворяют в ΕΐΟΑο (500 мл). Органическую часть промывают 2н. НС1 (2 х 500 мл), 1н. ΝαΟΙ 1 (2 х 500 мл) и насыщенным №С1 (1 х 500 мл). Органическую часть сушат (М§8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом промежуточный продукт 54 с отношением диастереомеров приблизительно 12:1. Хроматография на колонке 110 мм х 8 с применением смеси 1/3 ΕΐΟΑο/гексан дает после концентрирования в вакууме обедненные фракции промежуточного продукта 54 (40 г, 76%) в виде желтой пены.
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,42-7,20 (м, 10Н), 7,11 (с, 1Н), 7,05 (д, 1Н), 6,76 (д, 1Н), 5,53 (дд, 1Н),
4,65 (дд, 1Н), 4,20 (дд, 1Н), 4,08 (дд, 1Н), 3,77 (с, 3Η), 3,65 (дд, 2Н), 3,51 (д, 1Н), 2,82 (дд, 1Н), 2,81 (д, 1Н), 2,71 (дд, 1Н), 1,34 (с, 9Н), 1,06 (с, 3Η).
- 40 005686
Промежуточный продукт 55. (3К)-4-[3-(трет-Бутокси)-4-метоксифенил]-3-метил-1-бензилпирролидин-3-карбальдегид.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 54 (21,5 г, 39,7 ммоль) в толуоле (400 мл) при -78°С в атмосфере азота добавляют литийалюминийгидрид (1М в ТГФ, 24 мл, 24 ммоль) прикапыванием при помощи шприца на протяжении 10 мин. Спустя 15 мин ТСХ с использованием смеси 4/1 СН2С12/Е!2О показала полный расход исходного материала и появление материала с более низким Я. При помощи шприца при -78°С осторожно добавляют метанол (4 мл) в толуоле (40 мл) с выделением газа. Когда выделение газа завершается, реакционной смеси дают возможность нагреться до комнатной температуры, затем обрабатывают последовательно водой (1 мл), 3н. №ОН (2 мл) и водой (1 мл). Спустя 10 мин реакционную смесь разбавляют Е!2О (300 мл) и перемешивают в течение 15 мин. Добавляют сульфат магния и смесь фильтруют через фильтровальную бумагу СЕ/Е с Е!2О. Сырой продукт концентрируют в вакууме, и оказывается по данным 'И ЯМР, что он является смесью приблизительно 4:1 требуемого альдегида к восстановленному спирту. Сырой продукт растворяют в СН2С12 (40 мл). Отдельно оксалилхлорид (2М в СН2С12, 11,2 мл, 22,4 ммоль) перемешивают при -60°С в атмосфере азота и обрабатывают по каплям через шприц ДМСО (3,1 мл, 44 ммоль) в СН2С12 (15 мл). Спустя 5 мин к раствору оксалилхлорид/ДМСО канюлей добавляют смешанный раствор альдегид/спирт. Реакционную смесь перемешивают при -60°С в течение 45 мин, затем обрабатывают Е!^ (13,8 мл, 100 ммоль) и оставляют для нагревания до комнатной температуры. Раствор разбавляют до 200 мл СН2С12 и промывают водой (1 х 200 мл), 2н. НС1 (2 х 200 мл), насыщенным №НСО3 (2 х 200 мл) и насыщенным №С1 (1 х 200 мл). Органические слои сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом желтое масло, которое растворяют в смеси 3/1 гексан/Е!ОАс. После растворения отщепленный фенилоксазолидинон осаждают и удаляют фильтрованием. Фильтрат хроматографируют на колонке 70 мм х 8 с использованием смеси 3/1 гексан/Е!ОАс, получая при этом (после концентрирования фракций, содержащих продукт, в вакууме) чистый промежуточный продукт 55 в виде желтого масла (13,7 г, 90%).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 9,62 (с, 1Н), 7,37-7,22 (м, 5Н), 6,92 (с, 1Н), 6,84 (д, 1Н), 6,79 (д, 1Н), 3,79 (с, 3Н), 3,71 (дд, 2Н), 3,62 (дд, 1Н), 3,17 (дд, 1Н), 2,80 (дд, 1Н), 2,38 (д, 1Н), 1,35 (с, 9Н), 0,73 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 56. (1К)-1-[(38,48)-4-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метил-1бензилпирролидин-3-ил]этан-1-ол.
Процедура присоединения по Гриньяру.
К охлажденному (0°С) перемешиваемому раствору промежуточного продукта 47 (0,96 мг, 2,45 ммоль) в сухом Е!2О (10 мл) добавляют раствор метилмагнийиодида (или другого реагента Гриньяра) в простом эфире (2,45 мл 3,0М, 7,35 ммоль, 3 экв.) через шприц в атмосфере азота. После перемешивания при 0°С в течение 15 мин реакционной смеси дают возможность нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь затем осторожно гасят насыщенным водным ΝΚ4Ο (40 мл) и экстрагируют Е!ОАс (3 х 50 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (№28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом 990 мг оранжевого масла. Очистка посредством флэш-хроматографии на силикагеле (от СН2С12 до 5% метанола в СН2С12) дает менее полярный диастереомер (419 мг, 42%) и более полярный диастереомер (375 мг, 37%) в виде бесцветных вязких масел.
Менее полярный диастереомер (18)-1 -[(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метил-1-бензилпирролидин-3-ил]этан-1ол.
- 41 005686 1Н ЯМР (400 МГц, СБСГ) ά: 7,34-7,28 (с, 5Н), 6,79-6,73 (с, 3Н), 4,74 (м, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 3,74 (к, 1Н), 3,65 (к, 2Н), 3,53 (т, 1Н), 3,40 (т, 1Н), 2,99 (д, 1Н), 2,50 (т, 1Н), 2,35 (д, 1Н), 1,94-1,81 (с, 6Н), 1,631,59 (с, 2Н), 1,10 (д, 3Н), 0,52 (с, 3Н).
ЬРМЗ (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 410,3 (т+1).
Более полярный диастереомер (1Я)-1-[(38,48)-4-(3 -циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метил-1- бензилпирролидин-3-ил] этан-1 ол.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,33-7,31 (с, 5Н), 6,79-6,72 (с, 3Н), 4,74 (м, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 3,69-3,56 (с, 4Н), 3,29 (т, 1Н), 3,10 (д, 1Н), 2,56 (т, 1Н), 2,09 (д, 1Н), 2,04 (с, 3Н), 1,92-1,81 (с, 6Н), 1,62-1,59 (с, 2Н), 1,13 (д, 3Н), 0,47 (с, 3Н).
ЬРМЗ (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 410,3 (т+1).
Промежуточный продукт 57. (18)-1-{(38,48)-4-[4-Метокси-3-(фенилметокси)фенил]-3-метил-1бензилпирролидин-3-ил}этан-1-ол.
Менее полярный диастереомер. Получают посредством процедуры Гриньяра промежуточного продукта 56 из промежуточного продукта 53.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,44-7,22 (м, 10Н), 6,80 (д, 1Н), 6,75 (дд, 1Н), 6,67 (д, 1Н), 5,17 (с, 2Н), 3,88 (с, 3Н), 3,66 (к, 1Н), 3,60 (д, 2Н), 3,43 (т, 1Н), 2,92 (д, 1Н), 2,38 (т, 1Н), 2,22 (д, 1Н), 0,98 (д, 3Н), 0,32 (с, 3Н).
ЬРМЗ (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 432,5 (т+1).
Промежуточный продукт 58. (1Я)-1-{(38,48)-4-[4-Метокси-3-(фенилметокси)фенил]-3-метил-1бензилпирролидин-3-ил} этан-1-ол.
Более полярный, требуемый диастереомер. Получают посредством процедуры Гриньяра промежуточного продукта 56 из промежуточного продукта 53.
1Н ЯМР (400 МГц, СБСЙ) δ: 7,43-7,21 (м, 10Н), 6,79 (д, 1Н), 6,75-6,70 (м, 2Н), 5,16 (дд, 2Н), 3,87 (с, 3Н), 3,64-3,49 (м, 4Н), 3,23 (т, 1Н), 3,06 (д, 1Н), 2,46 (т, 1Н), 1,99 (д, 1Н), 1,07 (д, 3Н), 0,28 (с, 3Н).
ЬРМЗ (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 432,5 (т+1).
Промежуточный продукт 59. 1Я-[1-Бензил-48-(3-трет-бутокси-4-метоксифенил)-38-метилпирролидин-3-ил]этанол.
К перемешиваемому раствору триметилалюминия (2М в толуоле, 59,4 мл, 119 ммоль) при 0°С в атмосфере азота добавляют метилмагнийиодид (3М в Е!2О, 36 мл, 108 ммоль). После выдерживания 30 мин при 0°С через канюлю к раствору промежуточного продукта 55 (13,7 г, 36 ммоль) в СН2С12 (360 мл) при -78°С в атмосфере азота добавляют раствор металлорганического соединения. После завершения добавления реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 6 ч. Реакционную смесь затем нагревают до 0°С и осторожно выливают в охлажденный льдом 1М тартрат калия и натрия (1500 мл) с быстрым перемешиванием и разбавляют Е!ОАс (1500 мл). После перемешивания в течение 15 мин слои разделяют и органическую часть промывают 1М тартратом калия и натрия (1 х 1000 мл) и насыщенным №С1 (1 х
- 42 005686
1000 мл). Органическую часть сушат (М§8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом сырую смесь 2,5:1 диастереомеров плюс приблизительно 10% остаточного исходного альдегида по данным 1Н ЯМР. Сырой продукт хроматографируют на колонке 110 мм х 8 с использованием смеси 3/7/0,4 ΕΐΟΑ/гексан/МеОН, получая при этом после объединения и концентрирования в вакууме фракции, содержащие требуемый диастереомер с более низким Ку, промежуточный продукт 59 (8,1 г, 57%) в виде оранжевого масла.
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,34-7,23 (м, 5Н), 6,86 (м, 3Н), 6,79 (д, 1Н), 3,79 (с, 3Н), 3,65 (дд, 1Н), 3,62 (с, 2Н), 3,58 (дд, 1Н), 3,29 (дд, 1Н), 3,10 (д, 1Н), 2,53 (дд, 1Н), 2,07 (д, 1Н), 1,35 (с, 9Н), 1,12 (д, 3н), 0,45 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 60. Этиловый эфир 3-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-2-метилЕ-акриловой кислоты.
В круглодонную колбу загружают ТГФ (850 мл) и триэтил-2-фосфонопропионат (97,2 г, 0,408 моль) и образовавшуюся смесь охлаждают до 0°С. Затем по каплям добавляют гексаметилдисилазид лития (1,0М в ТГФ, 489 мл, 0,489 моль). Смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С, затем добавляют раствор промежуточного продукта 1 (70 г, 0,34 моль) в ТГФ (100 мл). После добавления по каплям реакционную смесь выдерживают при 22°С в течение 62 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным №С1 и разбавляют ΕΐΟΑο. После разделения органический слой промывают насыщенным №С1, сушат над №:8О.| и концентрируют в вакууме. Зеленое масло очищают хроматографией через подушку δίθ2 (650 г) с использованием ЕЮАс/гексаны (1:10) в качестве элюента (40,8 г).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,67-7,61 (м, 1Н), 7,07-7,02 (м, 1Н), 6,98-6,95 (м, 1Н), 6,92-6,89 (м, 1Н), 4,32-4,25 (м, 2Н), 3,92 (с, 3Н), 3,90-3,85 (м, 2Н), 2,15 (с, 3Н), 1,38-1,32 (м, 4Н), 0,70-0,63 (м, 2Н), 0,41-0,37 (м, 2Н).
Промежуточный продукт 61. 3-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-2-метил-Е-акриловая кислота.
Промежуточный продукт 60 (26,9 г, 93 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (95 мл) и обрабатывают раствором моногидрата Б1ОН (4,6 г, 111 ммоль), растворенным в воде (95 мл). Образовавшийся раствор нагревают при 80°С в течение 3 ч, затем перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в воду (350 мл) и экстрагируют дважды Εϊ2Ο (всего 500 мл). Водный слой разбавляют ΕΐΟΑο (350 мл) и рН регулируют концентрированной Н3РО4 (24 мл). Слои разделяют, слой ΕΐΟΑο промывают водой и насыщенным №С1, сушат над Мд8О4 и концентрируют в вакууме (20,4 г).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,77 (с, 1Н), 7,11-7,07 (дд, 1Н), 7,02-6,98 (д, 1Н), 6,93-6,90 (д, 1Н), 3,93 (с, 3Н), 3,86 (д, 2Н), 2,18 (с, 3Н), 1,39-1,31 (м, 1Н), 0,69-0,63 (м, 2Н), 0,39-0,35 (м, 2Н).
Промежуточный продукт 62. 3-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-2-метил-Е-акрилоилхлорид.
Промежуточный продукт 61 (55,8 г, 0,213 моль) растворяют в СН2С12 (300 мл) и охлаждают до 0°С с присоединенной осушающей трубкой. Добавляют оксалилхлорид (2,0М в СН2С12, 117 мл, 0,234 моль), затем добавляют ДМФ (1,0 мл). Реакционную смесь выдерживают при 22°С в течение нескольких часов. Смесь разбавляют СН2С12 и промывают водой, насыщенным №С1, затем сушат над №:8О.| и концентрируют в вакууме (65,1 г желтого твердого вещества).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,97 (с, 1Н), 7,16-7,11 (дд, 1Н), 7,03-7,00 (д, 1Н), 6,95-6,91 (дд, 1Н), 3,93 (с, 3Н), 3,87 (д, 2Н), 2,23 (с, 3Н), 1,39-1,31 (м, 1Н), 0,69-0,64 (м, 2Н), 0,40-0,37 (м, 2Н).
- 43 005686
Ή ЯМР (400 МГц, СБС^) δ: 7,97 (с, 1Н), 7,16-7,11 (дд, 1Н), 7,03-7,00 (д, 1Н), 6,95-6,91 (дд, 1Н), 3,93 (с, 3Η), 3,87 (д, 2Н), 2,23 (с, 3Η), 1,39-1,31 (м, 1Н), 0,69-0,64 (м, 2Н), 0,40-0,37 (м, 2Н).
Промежуточный продукт 63. 3-[3-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-2-метил-Е-акрилоил]4-(К)-фенилоксазолидин-2-он.
4-(К)-Фенилоксазолидин-2-он (33,0 г, 0,202 моль) растворяют в ТГФ (1 л) и охлаждают до -78°С. Добавляют н-бутиллитий (2,5М в гексанах, 79,5 мл, 0,198 моль) и образовавшуюся реакционную смесь перемешивают в течение 20 мин. По каплям на протяжении 15 мин добавляют раствор промежуточного продукта 62 (65,1 г, 0,213 моль) в ТГФ (200 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при -78°С, затем медленно нагревают до 0°С. Реакционная смесь становится густой с бежевым твердым веществом. Смесь нейтрализуют при 0°С насыщенным ΝΗ4Ο (600 мл) и водой (300 мл). Раствор быстро нагревают до 22°С и выливают в СНС13 (2400 мл). После встряхивания и разделения органический слой промывают водой (1 л), насыщенным №С1 (1 л), сушат над Να28Ο4 и концентрируют в вакууме до образования бледно-оранжевого твердого вещества (94,4 г).
Ή ЯМР (400 МГц, СБСУ δ: 7,41-7,32 (м, 5Н), 7,07-6,98 (м, 2Н), 6,95-6,93 (д, 1Н), 6,90-6,86 (д, 1Н), 5,55-5,51 (дд, 1Н), 4,77-4,71 (дд, 1Н), 4,30-4,26 (дд, 1Н), 3,91 (с, 3Η), 3,85 (д, 2Н), 2,17 (с, 3Η), 1,38-1,29 (м, 1Н), 0,66-0,62 (м, 2Н), 0,39-9,34 (м, 2Н).
О
Промежуточный продукт 64. 3-[1-Бензил-4-(8)-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)метилпирролидин-3-карбонил]-4-(К)-фенилоксазолидин-2-он.
Промежуточный продукт 63 (94,4 г, 0,21 моль) растворяют в СНС13 (640 мл), затем охлаждают до 0°С. Добавляют бензилметоксиметилтриметилсиланилметиламин (95 г, 0,40 моль) и реакционную смесь обрабатывают по каплям раствором ТФУ (3,08 мл) в С11С13 (40 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при нагревании до 22°С. Добавляют дополнительный бензилметоксиметилтриметилсиланилметиламин (71,2 г, 0,3 моль), затем смесь перемешивают в течение дополнительных 68 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным N114С1 (600 мл) и разделяют. Органический слой промывают дважды 1н. 11С1 (500 мл), один раз водой, один раз 1н. ΝαΟΗ (500 мл), один раз водой, один раз 6% №11СО3, один раз насыщенным №С1, сушат над Νη28Ο)| и концентрируют в вакууме. Сырой материал хроматографируют на 8ΐΟ2 (1,2 кг) в виде двух порций с использованием в качестве элюента смеси гексаны/ЕЮАс (2:1), получая при этом 62,3 г.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 7,44-7,20 (м, 10Н), 7,07 (д, 1Н), 6,94-6,91 (дд, 1Н), 6,78-6,76 (д, 1Н), 5,56-5,50 (дд, 1Н), 4,69-4,63 (дд, 1Н), 4,21-4,16 (дд, 1Н), 3,83-3,80 (м, 2Н), 3,82 (с, 3Η), 3,74-3,70 (д, 1Н), 3,64-3,59 (д, 1Н), 3,50-3,46 (д, 1Н), 2,90-2,86 (д, 1Н), 2,83-2,71 (м, 2Н), 1,36-1,29 (м, 1Н), 0,64-0,60 (м, 2Н), 0,38-0,32 (м, 2Н).
- 44 005686
Промежуточный продукт 65. 1-Бензил-4-(8)-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)метилпирролидин-3-карбальдегид.
Промежуточный продукт 64 (62,3 г, 0,115 моль) растворяют в толуоле (1 л), затем охлаждают до -78°С. Раствор обрабатывают литийалюминийгидридом (1,0М в ТГФ, 69 мл, 69 моль) при медленном добавлении. Реакционную смесь перемешивают в течение 0,5 ч, затем гасят при -78°С добавлением по каплям МеОН (13 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин при -78°С, нагревают до 0°С с последующим добавлением воды (2,62 мл), 15% \аО11 (2,62 мл) и воды (7,85 мл). Раствор перемешивают в течение 10 мин, затем добавляют ЕьО (1,5 л) и образовавшуюся смесь перемешивают в течение ночи при 22°С. Добавляют сульфат магния и после перемешивания в течение 15 мин раствор фильтруют через М§8О4 и концентрируют в вакууме. ЯМР показал, что продукты данной реакции являются смесью требуемого альдегида и первичного спирта (приблизительно 4:1). Данный материал используют без дальнейшей очистки в следующем приведенном ниже окислении по Бмеги. К СН2С12 (75 мл) добавляют оксалилхлорид (2,0 М в СН2С12, 25 мл, 50 ммоль) и охлаждают до -60°С. Добавляют диметилсульфоксид (7,1 мл, 100 ммоль) в виде раствора в СН2С12 (30 мл) способом прикапывания. Спустя 5 мин по каплям добавляют раствор смеси альдегид/спирт (4:1, 0,115 моль (приблизительно 0,05 моль спирта)), растворенного в СН2С12. Смесь перемешивают в течение 30 мин, затем добавляют Εΐ3Ν (31 мл, 222 ммоль) и раствор нагревают до 22°С и перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь гасят водой и энергично перемешивают в течение 20 мин, затем разделяют. Водный слой промывают СН2С12. Объединенные органические слои промывают насыщенным №С1, сушат над Ха28О4 и концентрируют в вакууме. Промежуточный продукт 65 очищают хроматографией на фильтре с использованием в качестве элюента смеси гексаны/ЕЮАс (4:1) (42 г).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 9,64 (с, 1Н), 7,39-7,23 (м, 5Н), 6,81-6,71 (м, 3Н), 3,83 (с, 1Н), 3,83-3,81 (м, 2Н), 3,80-3,75 (д, 1Н), 3,67-3,61 (м, 2Н), 3,19-3,11 (м, 2Н), 2,86-2,81 (м, 1Н), 2,43-2,40 (м, 1Н), 1,38-1,29 (м, 1н), 0,76 (с, 3Н), 0,68-0,62 (м, 2Н), 0,30-0,37 (м, 2Н).
МеО
N
Промежуточный продукт 66. 1-[1-Бензил-4-(Б)-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(Б)метилпирролидин-3-ил]этанол.
Триметилалюминий (2,0М в толуоле, 2,1 мл, 4,2 ммоль) охлаждают до 0°С и по каплям добавляют метилмагнийиодид (3,0М в этиловом эфире, 1,3 мл, 3,95 ммоль). Данную серую суспензию перемешивают при 0°С в течение 30 мин, затем ее добавляют через канюлю к раствору промежуточного продукта 65 (0,5 г, 1,3 ммоль), растворенного в СН2С12 (6,6 мл), который охлаждают до -78°С. Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 6 ч. Смесь затем выливают непосредственно в делительную воронку, содержащую соль Восйе11е (1М, 150 мл). Остаток промывают ЕЮАс и наливают в воронку. Смесь разбавляют ЕЮАс и разделяют. Органический слой промывают второй раз солью Восйе11е, затем насыщенным №С1, сушат над М§8О4 и концентрируют в вакууме. Сырой продукт является смесью (1:1) двух диастереомерных спиртов плюс небольшое количество альдегида. Эти материалы разделяют хроматографией на 81О4 с использованием смеси ЕЮ Ас/ гексаны (1:1).
Требуемый более полярный карбинол 1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 7,36-7,30 (м, 3Н), 7,28-7,24 (м, 2Н), 6,81-6,74 (м, 3Н), 3,85 (с, 3Н), 3,843,79 (м, 2Н), 3,71-3,56 (м, 4Н), 3,33-3,25 (дд, 1Н), 3,12-3,09 (д, 1Н), 2,59-2,53 (дд, 1н), 2,16-2,08 (д, 1Н), 1,38-1,25 (м, 1Н), 1,16 (д, 3Н), 0,69-0,61 (м, 2Н), 0,49 (с, 3Н), 0,39-0,35 (м, 2Н).
- 45 005686
Промежуточный продукт 67. (1К)-1-{(38,48)-4-[3-(Циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидин-3-ил } этан-1-ол.
Получают из промежуточного продукта 66 процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
2Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ: 6,88-6,71 (м, 3Н), 3,92-3,56 (с, 11Н), 3,14-3,05 (м, 1Н), 1,37-1,25 (м, 1Н), 1,20 (д, 2Н), 0,72 (с, 3Н), 0,63 (д, 2Н), 0,37 (д, 2Н).
ГКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 306,2 (т+1).
Промежуточный продукт 68. (1К)-1-[(38,48)-4-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этан-1-ол.
Получают процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31 из изомера 1-(К)-карбинол (более полярный диастереомер) промежуточного продукта 56.
2Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 6,81 (д, 1Н), 6,75-6,73 (м, 2Н), 4,80 (с, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 3,79-3,68 (м, 5Н), 3,61 (т, 1Н), 3,10 (д, 1Н), 1,96-1,80 (м, 6Н), 1,63-1,57 (м, 2Н), 1,21 (д, 3Н), 0,72 (с, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 320,4 (т+1).
Промежуточный продукт 69. (18)-1-[(38,48)-4-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этан-1-ол.
Получают процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31 из 1-(8)-изомера (менее полярный промежуточный продукт) промежуточного продукта 56.
ГКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 320,4 (т+1).
Промежуточный продукт 70. 5-[4-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-метилпирролидин-3-ил]-2метоксифенол.
Получают из промежуточного продукта 58 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31 (10% палладий на угле, используемый вместо ацетата палладия).
2Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 6,72 (д, 1Н), 6,67 (д, 1Н), 6,59 (дд, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 3,60 (кд, 1Н), 3,293,17 (м, 6Н), 3,10 (т, 1Н), 2,55 (д, 1Н), 1,06 (д, 3Н), 0,56 (с, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 252,1 (т+1).
- 46 005686
Промежуточный продукт 71. 1-К-[1-Бензил-4-8-(3-трет-бутокси-4-метоксифенил)-3-8-метилпирролидин-3-ил]этанол.
К перемешиваемому раствору триметилалюминия (2М в толуоле, 59,4 мл, 119 ммоль) при 0° в атмосфере азота добавляют метилмагнийиодид (3М в ЕьО, 36 мл, 108 ммоль). После выдерживания 30 мин при 0°С через канюлю раствор металлорганического соединения добавляют к раствору промежуточного продукта 55 (13,7 г, 36 ммоль) в СН2С12 (360 мл) при -78°С в атмосфере азота. После завершения добавления реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 6 ч. Реакционную смесь нагревают до 0°С и осторожно выливают в охлажденный льдом 1М тартрат калия и натрия (1500 мл) с быстрым перемешиванием и разбавляют ЕЮАс (1500 мл). После перемешивания в течение 15 мин слои разделяют и органические слои промывают 1М тартратом калия и натрия (1 х 1000 мл) и насыщенным \аС1 (1 х 1000 мл). Органические слои сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом смесь 2,5:1 диастереомеров плюс приблизительно 10% остаточного исходного альдегида по данным '11 ЯМР. Сырой продукт хроматографируют на колонке 110 мм х 8 с использованием смеси 3/7/0,4 ЕЮАс/гексан/МеОН, получая при этом после объединения и концентрирования в вакууме фракции, содержащие требуемый диастереомер с более низким Кг, промежуточный продукт 71 (8,1 г, 57%) в виде оранжевого масла.
Ή ЯМР (400 МГц, СЭС^) δ: 7,34-7,23 (м, 5Н), 6,86 (м, 3Н), 6,79 (д, 1Н), 3,79 (с,3Н), 3,65 (дд, 1Н), 3,62 (с, 2Н), 3,58 (дд, 1Н), 3,29 (дд, 1Н), 3,10 (д, 1Н), 2,53 (дд, 1Н), 2,07 (д, 1Н), 1,35 (с, 9Н), 1,12 (д, 3Н), 0,45 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 72. 5-[(4К)-4-((18)-1-Гидроксиэтил)-4-метил-1-бензилпирролидин-3-ил]-2метоксифенол.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 71 (2,3 г, 5,8 ммоль) в СН2С12 (18 мл) при 0°С с осушающей трубкой добавляют трифторуксусную кислоту (2,7 мл, 35 ммоль). Охлаждающую баню удаляют и реакционной смеси дают возможность нагреться до комнатной температуры, затем перемешивают в течение 3,5 ч. Реакционную смесь концентрируют роторным испарителем для удаления избыточной трифторуксусной кислоты, снова растворяют в СН2С12 (50 мл), затем промывают 10% \а2СО)3 (2 х 50 мл) и насыщенным \аС1 (1 х 50 мл). Органические слои сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом промежуточный продукт 72 в виде белой пены (1,9 г, 96%).
'Н ЯМР (400 МГц, СЭСБ) δ: 7,36-7,20 (м, 5Н), 6,82 (с, 1Н), 6,77 (д, 1Н), 6,66 (д, 1Н), 5,57 (с, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 3,70-3,56 (м, 4Н), 3,30 (дд, 1Н), 3,13 (д, 1Н), 2,55 (дд, 1Н), 2,04 (д, 1Н), 1,12 (д, 3Н), 0,45 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 73. (1К)-1-{(3К)-4-[3-(трет-Бутокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидин-3-ил}этан-1-ол.
Получают из промежуточного продукта 71 (1 г, 2,53 ммоль) процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом 775 мг промежуточного продукта 73.
- 47 005686 'И ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 6,92-6,79 (м, 3Н), 3,78 (с, 3Н), 3,51-3,42 (м, 4Н), 3,29 (дд, 1Н), 2,77 (д, 1Н), 1,35 (с, 9Н), 1,17 (д, 3Н), 0,62 (с, 3Н).
/
Промежуточный продукт 74.
Я1 = Н
Метил-3-((1Я)-1 -гидроксиэтил-(3 8,48)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Процедура ацилирования, опосредованного основанием Хюнига.
К охлажденному (0°С) перемешиваемому раствору промежуточного продукта 70 (670 мг, 2,67 ммоль) и основания Хюнига (1,4 мл, 8,0 ммоль) в сухом СН2С12 (10 мл), 1,4-диоксане (5 мл) и МеОН (1 мл) добавляют метилхлорформиат (0,41 мл, 5,3 ммоль) через шприц в атмосфере азота. Образовавшийся раствор оставляют для перемешивания при 0°С в течение 1 ч, затем разбавляют СН2С12 (90 мл), промывают последовательно 1н. водным НС1 (2 х 20 мл) и насыщенным раствором соли (20 мл) и сушат (Ж28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток (737 мг) растворяют в ТГФ (3 мл) и воде (2 мл), затем обрабатывают раствором ЬЮН (112 мг, 2,67 ммоль в 2 л воды) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 4 ч реакционную смесь разбавляют ΕΐОΑс (100 мл) и промывают последовательно 1н. водным НС1 (2 х 50 мл), насыщенным водным ЖНСО3 (30 мл) и насыщенным раствором соли (30 мл), затем сушат (№28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают посредством радиальной хроматографии (пластина 4 мм с 3% МеОН с СН2С12), получая при этом промежуточный продукт 74 в виде светлой рыжевато-коричневой пены (250 мг, 30%).
' Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 6,84 (д, 1Н), 6,78 (д, 1Н), 6,72 (дд, 1Н), 5,57 (д, 1Н), 3,90-3,54 (м, 1Н), 3,30 (д, 0,5Н), 3,20 (д, 0,5Н), 1,35 (шир. д, 1Н), 1,14 (т, 3Н), 0,75 (с, 3н).
ЬЯМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, отрицательные ионы): т/ζ 308,6 (т-1).
ЬЯМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, положительные ионы): т/ζ 310,5 (т+1).
Промежуточный продукт 75.
Из промежуточного продукта 57 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31 и процедуры ацилирования, опосредованного основанием Хюнига, промежуточного продукта 74.
ЬЯМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, отрицательные ионы): т/ζ 308,6 (т-1).
ЬЯМ8 (масс-спектр низкого разрешения) (электрораспыление, положительные ионы): т/ζ 310,5 (т+1).
Промежуточный продукт 76. (2Я)-2-Гидроксигексановая кислота.
К охлажденному (0°С) перемешиваемому раствору Ό-норлейцина (500 мг, 3,81 ммоль) в 10 мл 1н. водной серной кислоты добавляют по каплям на протяжении периода 20 мин нитрит натрия (421 мг, 6,10 ммоль) в 3 мл воды. Реакционную смесь оставляют для перемешивания, чтобы медленно нагреть ее до комнатной температуры на протяжении периода 16 ч. Смесь затем экстрагируют ΕΐОΑс (2 х 25 мл), сушат (№28О4) и концентрируют, получая при этом 200 мг (40%) белого воскообразного твердого вещест ва.
- 48 005686 1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 4,28 (дд, 1Н), 1,92-1,81 (м, 1Н), 1,76-1,64 (м, 1Н), 1,51-1,29 (м, 4Н), 0,92 (т, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, отрицательные ионы): Оа-'е 131,1 (т-1).
ОАс
Промежуточный продукт 77. (1К)-1-(Хлоркарбонил)пентилацетат.
Процедура ацилирования/гидролиза/образования хлорангидрида кислоты.
К охлажденному (0°С) раствору промежуточного продукта 76 (200 мг, 1,51 ммоль) и основания Хюнига (657 мл, 3,78 ммоль) в СН2С12 (6 мл) добавляют шприцем ацетилхлорид (215 мкл, 3,03 ммоль). Образовавшуюся смесь оставляют для медленного нагревания до комнатной температуры на протяжении периода 16 ч. Реакционную смесь затем промывают 1н. НС1 (2 х 20 мл), сушат %а28О4) и концентрируют до образования оранжево-коричневого масла, которое, как показано данными ЯМР, является бисацилированным материалом. К этому материалу добавляют 5 мл смеси 4:1 ГТФ-вода и смесь перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре, экстрагируют ΕΐОАс, сушат %а28О4) и концентрируют, получая при этом 186 мг (71%) оранжевого масла. ЯМР и масс-спектрометрия подтверждают получение ацетоксикислоты. К данному материалу в 5 мл СН2С12 добавляют оксалилхлорид (1,07 мл, 2,14 ммоль, 2М раствор в СН2С12) и каплю ДМФ. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч, затем концентрируют при пониженном давлении, получая при этом промежуточный продукт 77.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 5,17 (дд, 1Н), 2,18 (с, 3Н), 2,04-1,86 (м, 2Н), 1,50-1,30 (м, 4Н), 0,93 (т, 3Н).
ОАс
Промежуточный продукт 78. (Хлоркарбонил)-(4-фторфенил)метилацетат.
Получают процедурой ацилирования/гидролиза/образования хлорангидрида кислоты промежуточного продукта 77 из 2-(4-хлорфенил)-2-гидроксиуксусной кислоты.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 7,48 (к, 2Н), 7,14 (т, 2Н), 6,06 (с, 1Н), 2,21 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 79. (Хлоркарбонил)циклопропилацетат.
Получают посредством процедуры ацилирования/гидролиза/образования хлорангидрида кислоты промежуточного продукта 77 из 1-гидроксициклопропанкарбоновой кислоты.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 2,13 (с, 3Н), 1,89-1,84 (м, 2Н), 1,46-1,42 (м, 2Н).
Промежуточный продукт 80. (18)-1-(Хлоркарбонил)-2-метилбутилацетат.
Получают процедурой ацилирования/гидролиза/образования хлорангидрида кислоты промежуточного продукта 77 из (28)-2-гидрокси-3-метилпентановой кислоты.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 5,01 (д, 1Н), 2,24-2,17 (м, 1Н), 2,17 (с, 3Н), 1,57-1,47 (м, 1Н), 1,39-1,28 (м, 1Н), 1,03 (д, 3Н), 0,94 (т, 3Н).
Промежуточный продукт 81. (18)-1-(Хлоркарбонил)-3-метилбутилацетат.
Получают процедурой ацилирования/гидролиза/образования хлорангидрида кислоты промежуточного продукта 77 из (28)-2-гидрокси-4-метилпентановой кислоты.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 5,12 (д, 1Н), 2,16 (с, 3Н), 1,88-1,75 (м, 3Н), 0,97 (дд, 6Н). Промежуточный продукт 82. (1К)-1-(Хлоркарбонил)-2-фенилэтилацетат.
Получают процедурой ацилирования/гидролиза/образования хлорангидрида кислоты промежуточного продукта 77 из (2К)-2-гидрокси-3-фенилпропановой кислоты.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 7,38-7,21 (м, 5Н), 5,33 (дд, 1Н), 3,33 (дд, 1Н), 3,18 (дд, 1Н), 2,11 (с, 3Н). Промежуточный продукт 83. (18)-1-(Хлоркарбонил)-2-фенилэтилацетат.
Получают посредством процедуры ацилирования/гидролиза/образования хлорангидрида кислоты промежуточного продукта 77 из (28)-2-гидрокси-3-фенилпропановой кислоты.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 7,38-7,21 (м, 5Н), 5,33 (дд, 1Н), 3,33 (дд, 1Н), 3,18 (дд, 1Н), 2,11 (с, 3Н).
- 49 005686
Промежуточный продукт 84. (4-Хлорфенил)(гидроксиимино)метиламин.
Раствор 4-хлорбензонитрила (10 г, 0,073 моль), гидрохлорида гидроксиламина и №ОН (3,5 г, 0,087 моль) в этаноле (300 мл) и воде (80 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 10 ч, затем концентрируют при пониженном давлении. Образовавшееся не совсем белое твердое вещество растворяют в смеси вода/4:1 Е1ОАс:СН2С12. Органические слои отделяют, промывают один раз водой, сушат (№28О4) и концентрируют до 10,4 г белого твердого вещества (84%).
'Н ЯМР (ДМСО-бб, 400 МГц) δ: 9,71 (с, 1Н), 7,66 (д, 2Н), 7,41 (д, 2Н), 5,85 (шир. с, 2Н).
Промежуточный продукт 85. [3-(4-Хлорфенил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил]метилацетат.
К охлажденному (0°С) раствору промежуточного продукта 84 (4,5 г, 0,026 моль) в сухом пиридине (20 мл) добавляют по каплям на протяжении периода одного часа ацетоксиацетилхлорид (6 мл, 0,056 моль). После завершения добавления смесь нагревают при 90°С в течение 3 ч, затем оставляют для охлаждения до комнатной температуры. Пиридин удаляют при пониженном давлении и образовавшийся темный маслянистый материал растворяют в СН2С12 и фильтруют через фильтровальную бумагу ОР/Р. Фильтрат промывают насыщенным раствором соли (2 х 100 мл), сушат (№28О4) и концентрируют. Очистка при помощи Бю1а§е (картридж 40М, 20% ЕЮАс/гексан) дает 1,93 г промежуточного продукта 85 в виде белого твердого вещества (29%).
'Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ: 8,01 (д, 2Н), 7,46 (д, 2Н), 5,35 (с, 2Н), 2,21 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 86. [3-(4-Хлорфенил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил]метан-1-ол.
К раствору промежуточного продукта 85 (1 г, 3,96 ммоль) в МеОН (50 мл) добавляют водный К2СО3 (0,56М, 7 мл, 3,96 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух часов. Растворители затем удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в Е!ОАс (75 мл), промывают водой (2 х 75 мл), сушат (№28О4) и концентрируют до 820 мг (98%) промежуточного продукта 86 в виде белого твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 8,02 (д, 2Н), 7,47 (д, 2Н), 4,97 (с, 2Н), 2,52 (шир. с, 3Н).
Промежуточный продукт 87. [3-(4-Хлорфенил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил]метилметилсульфонат. Получают посредством процедуры мезилирования промежуточного продукта 90.
'Н ЯМР (400 МГц, СЭСЦ) δ: 8,02 (д, 2Н), 7,47 (д, 2Н), 5,49 (с, 2Н), 3,24 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 88. 3-[4-(Трифторметил)фенил]проп-2-ин-1-ол. Катализируемая палладием процедура сочетания.
- 50 005686
Раствор 4-иодбензотрифторида (5 г, 0,018 моль), пропаргилового спирта (1,07 мл, 0,018 моль), иодида медиП) (17,5 мг, 0,092 ммоль) и бистрифенилфосфинпалладий(П)хлорида (129 мг, 0,184 ммоль) в 50 мл диэтиламина перемешивают при комнатной температуре в течение нескольких часов. Диэтиламин затем удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в СН2С12 (150 мл). Раствор промывают 1н. НС1 (3 х 150 мл), сушат (Ыа28О4) и концентрируют до получения 3,1 г промежуточного продукта 88 в виде оранжево-коричневого масла (84%).
'И ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,55 (к, 4Н), 4,52(д, 2Н), 1,74 (шир. с, 1Н).
Промежуточный продукт 89. 3-[4-(Фторфенил)]проп-2-ин-1-ол. Получают посредством процедуры промежуточного продукта 88. 'И ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,42 (к, 2Н), 7,01 (т, 2Н), 1,70 (т, 1Н).
Промежуточный продукт 90. 3-Фенилпроп-2-инилметилсульфонат.
Процедура мезилирования.
К раствору 3-фенил-2-пропин-1-ола (100 г, 757 моль) и Εί3Ν (158 мл, 1,13 моль) в 3 л сухого СН2С12, охлажденного до 5°С, добавляют метансульфонилхлорид (59 мл, 0,757 моль) через капельную воронку, поддерживая при этом внутреннюю температуру приблизительно 5°С (добавление завершается приблизительно после 45 мин). После выдерживания реакционной смеси 1 ч при 5°С ТСХ показала, что основная часть исходного материала была израсходована. Добавляют 1 мл метансульфонилхлорида и реакционную смесь перемешивают в течение дополнительных 30 мин при 5°С. ТСХ показала полный расход исходного материала. Смесь затем промывают 1н. НС1 (3 х 250 мл), сушат (Ыа28О4) и концентрируют, получая при этом 113 г промежуточного продукта 90 в виде желтой жидкости (71%).
'И ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,48-7,45 (м, 2Н), 7,39-7,34 (м, 3Н), 5,09 (с, 2Н), 3,16 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 91. 3-(4-Фторфенил)проп-2-инилметилсульфонат.
Получают из промежуточного продукта 89 посредством способа мезилирования промежуточного продукта 90.
'И ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,47-7,44 (к, 2Н), 7,04 (т, 2Н), 5,07 (с, 2Н), 3,15 (с, 3Н).
Промежуточный продукт 92. 3-[(4-Трифторметил)фенил]проп-2-инилметилсульфонат.
Получают из промежуточного продукта 88 посредством способа мезилирования промежуточного продукта 90.
'И ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,62-7,56 (м, 4Н), 5,09 (с, 2Н), 3,16 (с, 3Н).
- 51 005686
Κ,Α,Η
Пример 3. Получение четырех стереоизомеров восстановлением промежуточного продукта 36.
Борогидрид натрия (2,0 ммоль, 0,075 г) добавляют к промежуточному продукту 36 (1,3 ммоль, 0,50 г), растворенному в 10 мл этанола. После завершения реакции через 1 ч реакционную смесь сушат в вакууме. Образовавшееся масло экстрагируют три раза ЕЮАс из воды, затем объединенные экстракты промывают насыщенным раствором соли и сушат над Мд8О4. Получают смесь двух рацематов в виде масла.
2Н ЯМР δ: 6,80 (д, 1Н); 6,67 (д, 2Н); 4,72 (шир. д, 1Н); 3,86-3,95 (шир. м, 1Н); 3,83 (с, 3Н); 3,64-3,78 (шир. м, 1Н); 3,74 (с, 3Н); 3,33 (дд, 1Н); 2,16 (д, 3Н); 1,79-1,92 (шир. м, 4Н); 1,59-1,63 (шир. м, 2Н); 1,01 (сд, 3Н).
Смесь рацематов растворяют в 50% ацетонитрила и 50% воды при концентрации 50 мг/мл и очищают порциями на С-18-колонке (250 х 10 мм) с использованием градиента смеси вода/ацетонитрил/0,5% ТФУ. Подходящие фракции собирают, объединяют и сушат до получения масел.
2Н ЯМР для неосновного рацемата δ: 6,75-6,82 (шир. м, 3Н); 4,75 (шир. д, 1Н); 3,83 (с, 3Н); 3,64-3,81 (шир. м, 1Н); 3,74 (с, 3Н), 3,54-3,61 (шир. м. 2Н), 3,28 (дд, 1Н); 1,81-1,94 (шир. м, 5Н); 1,58-1,65 (шир. м, 4Н); 1,15 (дд, 3Н); 0,75 (с, 3Н).
2Н ЯМР для основного рацемата: 6,76-6,83 (шир. м, 3Н); 4,74 (шир. д, 1Н); 3,77-3,89 (шир. м, 1Н); 3,83 (с, 3Н); 3,73 (с, 3Н), 3,65 (квинт, 1Н), 3,25-3,32 (шир. м, 3Н); 1,77-1,96 (шир. м, 7Н); 1,58-1,61 (шир. м, 2Н); 1,13 (д, 3Н); 0,92 (с, 3Н).
Хиральное разделение спиртов.
Для разделения четырех диастереомеров ВЭЖХ требуются две колонки. Первую колонку (8 х 30 см) на основе декстрозы используют для разделения В,В,8-изомера от других. 10 мл (7,1 мг/мл исходного раствора) сырой смеси в колоночном буфере вводят в колонку, затем элюируют при скорости 1 мл/мин равным количеством смеси гексанов (85%) и изопропанола (15%), собирая при этом подходящие фракции. Оставшиеся диастереомеры очищают на другой колонке (10 х 50 см) на основе декстрозы. Снова 10 мл (7,1 мг/мл исходного раствора) вводят впрыскиванием, затем элюируют при скорости 1 мл/мин равной смесью гексанов (95%) и изопропанола (5%). Подходящие фракции собирают, объединяют и сушат до получения масел.
Пример 4.
В1 = 2-инданил, В3 = СО2СН3
Метиловый эфир транс-(±)-3-(1-гидроксиэтил)-4-[3-(индан-2-илокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты (2 диастереомера карбинола).
Раствор промежуточного продукта 35 (рацемический) (300 мг, 0,71 ммоль, 1 экв.) в этаноле (10 мл) обрабатывают борогидридом натрия (54 мг, 1,42 ммоль, 2 экв.). Смесь перемешивают 10 мин при комнатной температуре, обрабатывают 1н. НС1 (50 мл) и экстрагируют ЕЮАс (3 х 25 мл). Объединенные органические экстракты промывают 1н. НС1 (25 мл), водой, насыщ. Ναΐ 1СО3 (25 мл), водой (25 мл) и насыщенным раствором соли (25 мл), сушат над №28О)| и концентрируют в вакууме. Часть сырого остатка очищают ВЭЖХ (колонка Ууйас 20 х 250 мм С18 «Рго£ет апй Рерййе», 8 мин, градиент 50-75% ацетонитрила в воде с содержанием 0,05% ТФУ в каждом растворителе, скорость потока 20 мл/мин), получая при этом выделенные диастереомеры в отношении 2:1 в виде бесцветных сиропов (75 и 37 мг соответственно, в порядке элюирования из колонки).
Изомер 1: 2Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ: 7,24-7,15 (м, 4Н), 6,83 (шир. с, 3Н), 5,21-5.12 (м, 1Н), 3,913,59 (м, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 3,73 (с, 3Н), 3,40-3,18 (м, 7Н), 1,14 (д, I = 6,3 Гц, 3Н), 0,94 (с, 3Н).
Изомер 2: 2Н ЯМР (300 МГц, СВС13) δ: 7,23-7,15 (м, 4Н), 6,85-6,82 (м, 3Н), 5,22-5,10 (м, 1Н), 3,893,67 (м, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 3,75 (с, 3Н), 3,64-3,52 (м, 2Н), 3,40-3,15 (м, 5Н), 1,20-1,13 (м, 3Н), 0,78 (с, 3Н).
Соединения примеров 5 и 6 получают таким же способом, как в примере 4.
- 52 005686
Пример 5.
Я1 = 2-норборнил; Я3 = СО2СН3
Метиловый эфир транс-4-[3-экзо-(бицикло[2.2.1]гепт-2-илокси)-4-метоксифенил]-3-(1-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты (2 диастереомера карбинола).
Промежуточный продукт 38 восстанавливают и разделяют, как указано выше, получая при этом два изомера.
Изомер 1: 1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 6,82-6,72 (м, 3Н), 4,15 (шир. с, 1Н), 3,88-3,59 (м, 3Н), 3,87 (с, 3Н), 3,73 (с, 3Н), 3,32-3,24 (м, 3Н), 2,50-2,47 (м, 1Н), 2,34-2,28 (м, 1Н), 1,77-1,50 (м, 5Н), 1,21-1,12 (м, 6Н), 0,92 (с, 3Н).
Изомер 2: 1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 6,82-6,72 (м, 3Н), 4,19-4,15 (м, 1Н), 3,85-3,54 (м, 5Н), 3,83 (с, 3Н), 3,74 (с, 3Н), 3,30/3,23 (2 ά, I = 10,4/10,4 Гц, 1н), 2,49-2,46 (м, 1н), 2,32 (шир. с, 1н), 1,76-1,70 (м, 2Н), 1,65-1,44 (м, 3Н), 1,21-1,14 (м, 6Н), 0,75 (с, 3Н).
Пример 6.
Я1 = РйСН2СН2СН(СН3); Я3 = СО2СН3
Метиловый эфир транс-3-(1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(1-метил-3-фенилпропокси)фенил]-3метилпирролидин-1-карбоновой кислоты (2 диастереомера карбинола).
Промежуточный продукт восстанавливают и разделяют, как указано выше, получая при этом два изомера.
Изомер 1: 1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 7,30-7,25 (м, 3Н), 7,22-7,15 (м, 3Н), 6,85-6,69 (м, 3Н), 4,344,27 (м, 1Н), 3,87-5,54 (м, 3Н), 3,84 (с, 3Н), 3,73/3,72 (2 с, 3Н), 3,31-3,20 (м, 3Н), 2,83-2,75 (м, 2Н), 2,18/2,08 (м, 1Н), 1,95-1,84 (м, 1Н), 1,34/1,31 (2 с, 3Н), 1,12 (д, I = 6,3 Гц, 3Н), 0,89 (шир. с, 3Н).
13С ЯМР (74 МГц, СПС13) δ: 156,0, 150,3, 147,8, 142,2, 131,3/131,1, 128,9, 128,8, 126,2, 121,7. 117,1, 112,5, 77,6, 75,3/75,1, 74,1/74,0, 56,3, 56,2/55,8, 52,9, 52,0/51,5/51,2, 49,9/49,1, 38,5/38,4, 32,2, 20,3, 19,0/18,9, 14,6/14.5.
Изомер 2: 1Н ЯМР (300 МГц, СПС13) δ: 7,29-7,24 (м, 2Н), 7,20-7,14 (м, 3Н), 6,84-6,69 (м, 3Н), 4,354,24 (м, 1Н), 3,85/3,84 (2 с, 3Н), 3,83-3,45 (м, 5Н), 3,75 (с, 3Н), 3,31-3,23 (м, 1Н), 2,88-2,76 (м, 2Н), 2,212,07 (м, 1Н), 1,95-1,83 (м, 1Н), 1,34/1,32 (2 с, 3Н), 1,15-1,11 (м, 3Н), 0,73 (шир. с, 3Н).
13С ЯМР (74 МГц, СПС13) δ: 156,1, 149,9, 147,4, 142,3, 129,5/129,4, 128,9, 128,7, 126,2, 122,1/121,8, 117,9/117,7/117,4, 112,0, 77,6, 75,3/75,0/74,9, 69,4/69,3, 56,3, 56,2, 53,2, 53,1, 49,5/49,3/49,1/48,6, 46,5/46,0, 38,5/38,4/38,3, 32,1, 20,3, 20,0, 17,7.
Следующие соединения получают из не имеющего хиральные центры пирролидинового промежуточного продукта 68.
Пример 7.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН2ОСН2Рй
1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-(фенилметокси)этан-1-он.
Процедура Ν-ацилирования.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 68 (42,6 мг, 0,13 ммоль) в 1,4-диоксане (0,4 мл) добавляют последовательно водный К2СО3 (0,8 мл 0,65М, 4 экв.) и раствор хлорангидрида кислоты (Я3-С1) (21 мкл, 0,13 ммоль) в 1,4-диоксане (0,4 мл) при комнатной температуре. Образовавшийся
- 53 005686 раствор оставляют для перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь разбавляют Е!ОАс (30 мл), затем промывают последовательно водой (20 мл) и насыщенным раствором соли (20 мл), сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом соединение примера 7 в виде легкой рыжевато-коричневой пены (46,5 мг, 99%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ: смесь ротамеров): 7,40-7,31 (м, 5Н), 6,80-6,72 (м, 3Н), 4,73 (с, 1Н), 4,67 (с, 2Н), 4,14 (с, 2Н), 3,82 (с, 3Н), 3,79-3,45 (м, 5Н), 3,22 (д, 1Н), 1,92-1,80 (с, 6Н), 1,61-1,55 (с, 2Н), 1,14 (дд, 3Н), 0,73 (д, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 468,4 (т+1).
Пример 8.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН2ОН 1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-гидроксиэтан-1-он.
Соединение примера 7 (35 мг, 75 мкмоль) подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 8 (24 мг, 84%).
1Н ЯМР (СО3ОЭ. 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,91-6,82 (м, 3Н), 4,83 (с, 1Н), 4,22 (с, 1Н), 3,87-3,22 (м, 11Н), 1,93-1,73 (м, 6Н), 1,69-1,59 (м, 2Н), 1,11 (дд, 3Н), 0,75 (шир. с, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 378,4 (т+1).
Пример 9.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН2СН2И(Н)СО2СН2Рй
И-{3-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-3-оксопропил}(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры ацилирования соединения примера 7. п-Нитрофениловый эфир И-СЬх-бета-аланина используют вместо хлорангидрида кислоты.
1Н ЯМР (400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,38-7,28 (м, 5Н), 6,92-6,83 (м, 3Н), 5,06 (с, 2Н), 4,86 (с, 2Н), 4,84 (с, 1Н), 3,81-3,27 (м, 10Н), 2,59 (с, 2Н), 1,98-1,69 (с, 6Н), 1,64-1,57 (с, 2Н), 1,09 (д, 3Н), 0,73 (д, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 525,3 (т+1).
Пример 10.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН2СН2ИН2 1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-3 -аминопропан-1-он.
Получают из соединения примера 9 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (С1);О1). 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,91-6,79 (м, 3Н), 4,81 (с, 1Н), 3,92-3,29 (м, 11Н), 3,01 (шир. с, 2Н), 2,61-2,58 (м, 2Н), 1,95-1,73 (м, 6Н), 1,68-1,58 (м, 2Н), 1,10 (дд, 3Н), 0,76 (д, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 391,4 (т+1).
Пример 11.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН2СН2СО2СН2Рй
Фенилметил-4-[3-((1Я)-1 -гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3 -метилпирролидинил]-4-оксобутаноат.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры ацилирования соединения примера 7.
1Н ЯМР (400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,41-7,31 (м, 5Н), 6,84-6,75 (м, 3Н), 5,14 (д, 2Н), 4,74 (с, 1Н), 3,94-3,44 (м, 8Н), 3,27 (д, 1Н), 2,80-2,73 (м, 2Н), 2,67-2,58 (м, 2Н), 1,96-1,81 (м, 6Н), 1,68-1,56 (м, 2Н), 1,15 (дд, 3Н), 0,75 (д, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 510,3 (т+1).
Пример 12.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН2СН2СО2Н
4-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-4-оксобутановая кислота.
Получают из соединения примера 11 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,80-6,72 (м, 3Н), 4,74 (с, 1Н), 3,98-3,54 (м, 10Н), 3,40 (д, 1Н), 3,24 (д, 1Н), 2,69 (с, 2Н), 1,95-1,74 (м, 6Н), 1,69-1,51 (м, 2Н), 1,14 (дд, 3Н), 0,74 (д, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 420,3 (т+1).
Пример 13.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН2И(Н)СО2СН2Рй И-{2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксоэтил}(фенилметокси)карбоксамид.
- 54 005686
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры ацилирования примера 7. пНитрофениловый эфир ^СЬх-глицина используют вместо хлорангидрида кислоты.
1Η ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,25 (м, 5Н), 6,92-6,81 (м, 3Η), 5,11 (с, 2Н), 4,87 (с, 2Н), 4,82 (с, 1Н), 4,11-3,28 (м, 9Н), 1,95-1,70 (м, 6Н), 1,65-1,55 (м, 2Н), 1,10 (шир. с, 3Η), 0,76 (шир. с, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 511,6 (т+1).
Пример 14.
К1 = Ε,ΙΕ: К3 = ίΌΟΗΝΗ
1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-аминоэтан-1-он.
Получают из соединения примера 13 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Η ЯМР (С1УО1Х 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,91-6,82 (м, 3Η), 4,80 (с, 1Н), 3,91-3,28 (м, 11Н), 1,90-1,75 (м, 6Н), 1,66-1,57 (м, 2Н), 1,09 (дд, 3Η), 0,74 (д,3Ц).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 377,2 (т+1).
Пример 15.
К1 = ί.’5Η9: К3 = СО-4-метилпиперазин
3-(( 1К)-1 -Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил-4метилпиперазинилкетон.
Промежуточный продукт 68 (30,2 мг, 94 ммоль) растворяют в 1,2-дихлорэтане (400 мкл) и охлаждают до 0°С, затем добавляют карбонилдиимидазол (16 мг, 94 мкмоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1,5 ч с последующим добавлением 1-метилпиперазина (21 мкл, 180 мкмоль). Раствор нагревают до 80°С в течение 60 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляют 0Η2Ο2 и промывают три раза 6% ΝηΗί.Ό3. сушат над №28О4 и концентрируют в вакууме. Остаток хроматографируют на 8Ю2 с использованием БЮЛс (15,5 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,83-6,78 (м, 3Η), 4,76 (сл., 1Н), 4,06-3,77 (м, 18Н), 3,61 (к, 1Н), 3,39 (шир. с, 1Н), 1,93-1,78 (м, 6Н), 1,63-1,57 (м, 2Н), 1,15 (шир. с, 3Η), 0,81 (шир. с, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 446,4 (т+1).
Пример 16.
К1 = ί.’5Η9: К3 = СО-№морфолин
3-(( 1К)-1 -Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинилморфолин-4-илкетон.
Получают из промежуточного продукта 68 с использованием морфолина и карбонилдиимидазола в качестве сочетающего реагента процедурой, описанной в примере 15.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,84-6,77 (м, 3Η), 4,76 (сл., 1Н), 3,88-3,52 (м, 12Н), 3,41 (дд, 1Н), 3,38 (дд, 1Н), 3,28 (дд, 1Н), 3,25 (дд, 1Н), 3,10 (д, 1Н), 1,95-1,81 (м, 6Н), 1,62-1,54 (м, 2Н),
1,15 (д, 3Η), 0,75 (с, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 433,3 (т+1).
Пример 17.
К1 = ί.’5Η9: К3 = СОСН2О-ментол, изомер (18)-карбинола
1-[3-((18)-1 -Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2-[(28,1К,5К)-5 -метил-2-(метилэтил)циклогексилокси] этан-1-он.
Получен из изомера 8-карбинола промежуточного продукта 69 процедурой опосредованного основанием Хюнига ацилирования промежуточного продукта 69.
1Η ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,82-6,75 (м, 3Η), 4,74 (сл., 1Н), 4,19 (дд, 1Н), 4,04 (дд, 1Н), 3,92-3,76 (м, 5Н), 3,47-3,19 (м, 5Н), 2,26 (сл, 1Н), 2,13 (сл, 1Н), 1,94-1,80 (м, 6Н), 1,65-1,53 (м, 4Н), 1,51-1,19 (м, 4Н), 1,14 (д, 3Η), 0,95-0,84 (м, 9Н), 0,79 (д, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 516,3 (т+1).
Пример 18.
К1 = ί.’5Η9: К3 = СО-4-(2-метилтиазол)
3-((1К)-1 -Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил-2метил-( 1,3-тиазол-4-ил)кетон.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры сочетания ΕΌί.Ί примера 27 из 2-метил-1,3 -тиазол-4-карбоновой кислоты.
1Η ЯМР (С1УО1X 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,98 (дд, 1Н), 6,92-6,82 (м, 3Η), 4,84 (ел, 1Н), 4,27 (т, 0,5Н), 4,16 (т, 0,5 Н), 4,08 (т, 0,5 Н), 3,96 (д, 0,5 Н), 3,85-3,47 (м, 7Н), 2,72 (дд, 3Η), 1,88-1,72 (м, 6Н), 1,681,56 (м, 2Н), 1,14 (дд, 1,5Н), 1,08 (дд, 1,5Н), 0,82 (д, 1,5Н), 0,73 (д, 1,5Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 445,4 (т+1).
Пример 19.
К1 = ί.’5Η9: К3 = 8О2-3-пиридил
- 55 005686
3-{[3-(1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]сульфонил}пиридин.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 68 (32 мг, 0,1 ммоль) в диоксане (0,3 мл) последовательно добавляют водный К2СО3 (0,6 мл 0,65М, 4 экв.) и раствор К3-сульфонилхлорида (26 мг, 0,12 ммоль) в диоксане (0,3 мл) при комнатной температуре. Образовавшийся раствор оставляют для перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют смесью 1:1 гексаны:ЕЮЛс (30 мл) и последовательно промывают водой (20 мл) и насыщенным раствором соли (20 мл), затем сушат (МёЗСд), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом промежуточный продукт примера 19 в виде светло-оранжевой пены (36 мг, 78%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ: 9,11 (д, 1Н, 1 = 2,2 Гц), 8,83 (дд, 1Н, 1 = 1,6, 4,8 Гц), 8,17 (ддд, 1Н, 1 = 1,5, 2,4, 8,1 Гц), 7,50 (ддд, 1Н, 1 = 0,8, 4,9, 8,0 Гц), 6,74 (д, 1Н, 1 = 8,5 Гц), 6,68 (д, 1Н, 1 = 2,1 Гц), 6,62 (дд, 1Н, 1 = 2,1, 8,3 Гц), 4,70 (сл, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 3,66-3,62 (м, 2Н), 3,51-3,43 (м, 3Н), 3,24 (д, 1Н, 1 = 13,3 Гц), 1,91-1,62 (м, 6Н), 1,60-1,55 (м, 2Н), 1,08 (д, 3Н, 1 = 6,4 Гц), 0,62 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 461,2 (т+1).
Пример 20.
К1 = 2-инданил; К3 = ίΌί.Ή;Οί.Ή;Ρ1ι
1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2-(фенилметокси)этан-1-он.
Из промежуточного продукта 51 (50 мг, 0,14 ммоль) процедурой ацилирования с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием бензилоксиацетилхлорида (22,5 мкл, 0,14 ммоль) получают соединение примера 20 в виде светлого масла (48 мг, 68%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 7,41-7,16 (м, 9Н), 6,84-6,79 (м, 3Н), 5,17 (сл., 1Н), 4,66 (д, 2Н), 4,19-4,11 (м, 2Н), 3,96 (дд, 0,5 Н), 3,83-3,54 (м, 7Н), 3,47 (д, 0,5Н), 3,38-3,29 (м, 2Н), 3,24-3,17 (м, 3Н), 1,57 (шир. т, 1Н), 1,15 (дд, 3Н), 0,75 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 516,8 (т+1).
Пример 21.
К1 = 2-инданил; К3 = ТОСН^Н 1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2-гидроксиэтан-1-он.
Получают из соединения примера 20 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР ((ΊΤΟΙλ 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,24-7,18 (м, 2Н), 7,14-7,12 (м, 2Н), 6,92-6,86 (м, 3Н), 5,20 (сл., 1Н), 4,27-4,14 (м, 2Н), 3,90-3,50 (м, 6Н), 3,41 (д, 1Н), 3,34-3,24 (м, 4Н), 3,13-3,08 (м, 2Н), 1,12 (дд, 3Н), 0,77 (шир. с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 426,5 (т+1).
Пример 22.
К1 = 2-инданил; К3 = СОСО2СН3
Метил-2-[3-((1К)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксоацетат.
Получают из промежуточного продукта 51 и метилоксалилхлорида посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 6,82-6,75 (м, 3Н), 4,74 (сл., 1Н), 4,01 (д, 1Н), 3,98-3,56 (м, 10Н), 3,50 (дд, 1Н), 1,93-1,84 (м, 6Н), 1,64-1,56 (м, 2Н), 1,45 (дд, 1Н), 1,16 (дд, 3Н), 0,79 (с, 1,5Н), 0,75 (с, 1,5Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 406,2 (т+1).
Пример 23.
К1 = 2-инданил; К3 = ^^Η^Ν^^Ο^Η^Η №{2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-1,1-диметил-2-оксоэтил)фенилметокси}карбоксамид.
Процедура сочетания РуВгОР.
К перемешиваемому раствору гексафторфосфата бромтриспирролидинофосфония (РуВгОР, 70 мг, 0,15 ммоль), №карбобензилокси-2-метилаланина (35,5 мг, 0,15 ммоль) и основания Хюнига (78 мкл, 0,45
- 56 005686 ммоль) в сухом диметилформамиде (1 мл) добавляют промежуточный продукт 51 (50 мг, 0,14 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Образовавшийся раствор оставляют для перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч, затем нагревают до 70°С в течение 5 ч. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры, затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают посредством радиальной хроматографии (1 мм пластина с 3% МеОН в СИ2С12), получая при этом соединение примера 23 в виде белой пены (20 мг, 24%).
1Η ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 7,43-7,15 (м, 9Н), 6,82-6,62 (м, 3Η), 5,64 (шир. с, 0,5Н), 5,51 (шир. с, 0,5Н), 5,15-5,08 (м, 3Η), 3,97-3,15 (м, 13Н), 1,58 (шир. с, 6Н), 1,13 (шир. д, 3Η), 0,68 (шир. с, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/с 604,9 (т+18).
Пример 24.
К1 = 2-инданил; К3 = СОС(С11 ;);\1 Е
1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,4§)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2-амино-2-метилпропан-1-он.
Получают из соединения примера 23 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (ΕΙΧΟΙλ 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,21-7,16 (м, 2Н), 7,15-7,12 (м, 2Н), 6,94-6,87 (м, 3Η), 5,22 (сл., 1Н), 4,05 (д, 1Н), 3,88 (сл., 1Н), 3,77-3,69 (м, 4Н), 3,60-3,52 (сл., 2Н), 3,40-3,29 (сл., 2Н), 3,22 (к, 1Н), 3,13-3,09 (сл., 2Н), 1,37 (д, 6Н), 1,13 (шир. д, 3Η), 0,80 (с, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/с 453,5 (т+1).
Пример 25.
К1 = 2-инданил; К3 = ί.Ό2ί.Ή3
Метил-3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 51 посредством процедуры опосредованного основанием Хюнига ацилирования промежуточного продукта 74 с использованием метилхлорформиата.
1Н ЯМР (400 МГц, ГИСТ. смесь ротамеров) δ: 7,24-7,16 (м, 4Н), 6,86-6,82 (м, 3Η), 5,18 (сл., 1Н), 3,85-3,56 (м, 8Н), 3,38-3,30 (м, 3Η), 3,25-3,19 (м, 3Η), 1,51 (д, 0,5Н), 1,47 (д, 0,5Н), 1,16 (т, 3Η), 0,77 (с, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/с 426,5 (т+18).
Пример 26.
К1 = 2-инданил; К3 = СОСНСССНЖ^Н
4-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,4§)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2,2-диметил-4-оксобутановая кислота.
В толстостенную стеклянную трубку, снабженную пробкой с винтовой резьбой, загружают промежуточный продукт 51 (20 мг, 0,05 ммоль) и 2,2-диметилянтарный ангидрид (25,8 мг, 0,05 ммоль). Трубку герметизируют, затем нагревают при 150°С в течение 30 мин. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры, получая при этом соединение примера 26 (содержащее приблизительно 15-20% другого региоизомера) в виде коричневого твердого вещества (22 мг, 82%).
Ή ЯМР (ΕΙΧΟΙλ 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,22-7,20 (м, 2Н), 7,15-7,12 (м, 2Н), 6,96-6,85 (м, 3Η), 5,23 (сл., 1Н), 3,92-3,49 (м, 7Н), 3,37-3,28 (м, 4Н), 3,13-3,09 (м, 2Н), 2,73-2,55 (м, 2Н), 1,30 (шир. с, 6Н), 1,12 (т, 3Η), 0,76 (д, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, отрицательные ионы): Эа/с 494,5 (т-1).
Пример 27.
К1 = 2-инданил; К3 = СΟ-4-(2-метилтиазол)
3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил-2метил-( 1,3-тиазол-4-ил)кетон.
Процедура сочетания ΕΌΟ.
К перемешиваемому раствору гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (42,3 мг, 0,214 ммоль) в сухом СИ2С12 (1 мл) добавляют 2-метил-1,3-тиазол-4-карбоновую кислоту (30,7 мг, 0,214 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Образовавшуюся ярко-красную смесь оставляют для перемешивания в течение 1 ч, затем в виде одной порции добавляют промежуточный продукт 51 (75 мг, 0,204 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают посредством радиальной хроматографии (1 мл пластинка с 3% МеОН в СИ2С12), получая при этом соединение примера 27 в виде прозрачной пленки (21 мг, 20%).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 7,91 (с, 0,5Н), 7,88 (с, 0,5Н), 7,25-7,20 (м, 2Н), 7,18-
7,16 (м, 2Н), 6,90-6,82 (м, 3Η), 5,19 (сл., 1Н), 4,33 (дд, 0,5Н), 4,23 (т, 0,5Н), 4,15 (д, 0,5Н), 4,10 (дд, 0,5Н), 3,99 (т, 0,5Н), 3,85 (д, 0,5Н), 3,81 (с, 3Η), 3,77-3,58 (м, 3Η), 3,38-3,31 (м, 2Н), 3,24-3,20 (м, 2Н), 2,74 (с, 1,5Н), 2,71 (с, 1,5Н), 1,93 (с, 0,5Н), 1,61 (д, 0,5Н), 1,22 (д, 1,5Н), 1,18 (д, 1,5Н), 0,86 (с, 1,5Н), 0,75 (с, 1,5Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/с 493,6 (т+1).
- 57 005686
Пример 28.
К1 = 2-инданил; К3 = СО-3-тетрагидрофуранил 3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(48,38)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилциклопентилоксолан-3-илкетон (смесь 2 диастереомеров у тетрагидрофуранильного положения присоединения).
Получают из промежуточного продукта 51 посредством процедуры опосредованного основанием Хюнига сочетания промежуточного продукта 74 с использованием тетрагидрофуран-3-карбонилхлорида.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭСк смесь ротамеров) δ: 7,40-7,20 (м, 2Н), 7,19-7,16 (м, 2Н), 6,86-6,83 (м, 3Н), 5,18 (сл., 1Н), 4,15-4,04 (м, 1Н), 3,98-3,15 (м, 13Н), 2,31-2,09 (м, 2Н), 1,75 (шир. с, 1Н), 1,26 (т, 1,5Н), 1,17 (т, 1,5Н), 0,80 (д, 1,5Н), 0,78 (с, 1,5Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 466,3 (т+1).
Пример 29.
К1 = 2-инданил; К3 = СОС11Л'(Н)СО;С11.ΓΙ1
Ы-{2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксоэтил}(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 51 посредством процедуры сочетания с РуВгОР примера 23 с использованием Ν-бензилоксикарбонилглицина.
'Н ЯМР (СП3ОП, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,35-7,20 (м, 9Н), 6,91-6,88 (м, 3Н), 5,22 (шир. с, 1Н), 5,10 (с, 2Н), 4,07-3,09 (м, 15Н), 1,13 (т, 3Н), 0,78 (с, 3Н).
Пример 30.
К1 = 2-инданил; К3 = СОСН2ЫН2 1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2-аминоэтан-1-он.
Получают из соединения примера 29 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
'Н ЯМР (400 МГц, СИСк смесь ротамеров) δ: 7,22-7,19 (м, 2Н), 7,18-7,15 (м, 2Н), 6,84 (д, 1Н), 6,81 (д, 2Н), 5,17 (сл., 1Н), 3,96 (дд, 0,5Н), 3,81-3,43 (м, 9Н), 3,37-3,30 (м, 1,5Н), 3,24-3,13 (м, 2Н), 2,99 (шир. с, 2Н), 1,15 (т, 3Н), 0,75 (д, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 425,5 (т+1).
Пример 31.
К1 = 2-инданил; К3 = 2-пиридил (1К)-1-[(3 8,48)-4-(3 -Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метил-1-(2-пиридил)пирролидин-3ил]этан-1-ол.
Процедура сочетания с арилбромидом.
К перемешиваемой смеси промежуточного продукта 51 (115 мг, 0,31 ммоль) и К2СО3 (173 мг, 1,2 ммоль) в сухом ДМФ (2 мл) через шприц при комнатной температуре в атмосфере азота добавляют 2бромпиридин (0,12 мл, 1,2 ммоль). Образовавшуюся смесь нагревают при 90°С в течение 22 ч, затем оставляют для охлаждения до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляют водой (60 мл) и экстрагируют ΕΐΟАс (3 х 30 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат (Ыа28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме.
Остаток очищают посредством флэш-хроматографии на силикагеле (100% ΕΏΑ^, получая при этом соединение примера 31 (73,4 мг, 53%).
'|| ЯМР (400 МГц, С12С1Д δ: 8,18 (ддд, 1Н), 7,45 (ддд, 1Н), 7,26-7,21 (м, 2Н), 7,19-7,16 (м, 2Н), 6,926,88 (м, 2Н), 6,83 (д, 1Н), 6,54 (ддд, 1Н), 6,40 (д, 1Н), 5,17 (сл., 1Н), 3,86-3,78 (м, 5Н), 3,70 (д, 1Н), 3,67 (д, 1Н), 3,38-3,30 (м, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 445,4 (т+1).
Пример 32.
К1 = 2-инданил; К3 = 3-пиридил (1К)-1-[(3 8,48)-4-(3 -Индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метил-1-(3-пиридил)пирролидин-3ил]этан-1-ол.
Процедура катализируемого палладием сочетания.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 51 (79,3 мг, 0,22 ммоль) и трет-бутоксида натрия (29 мг, 0,31 ммоль) в сухом толуоле (3 мл) последовательно добавляют 3-бромпиридин (22,9 мл, 0,24 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (3,9 мг, кат.) и (К)-(+)-1,1'-би-2-нафтол (5,4 мг, кат.) при комнатной температуре в атмосфере азота. Образовавшуюся смесь нагревают при 80°С в течение 3 ч, затем оставляют для охлаждения до комнатной температуры. Реакционную смесь затем разбавляют ΕΐΟАс (40 мл), промывают насыщенным раствором соли, сушат (Ыа28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают посредством флэш-хроматографии на силикагеле (40% ΕΐΟАс в гексанах), получая при этом соединение примера 32 (72,1 мг, 75%).
'Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) δ: 7,98 (д, 1Н), 7,91 (д, 1Н), 7,24-7,15 (м, 4Н), 7,11 (дд, 1Н), 6,90-6,82 (м, 4Н), 5,15 (сл., 1Н), 3,81-3,72 (м, 4Н), 3,70-3,62 (м, 4Н), 3,35-3,11 (м, 5Н), 1,24 (д, 3Н), 0,84 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 445,3 (т+1).
- 58 005686
Пример 33.
К1 = 2-инданил; Я3 = 2-пиримидил (1Я)-1 -[(3 8,48)-4-(3 -Индан-2-ило кси-4-метоксифенил)-3 -метил-1 -пиримидин-2-илпирро лидин-3 ил]этан-1-ол.
Получают из промежуточного продукта 51 посредством процедуры сочетания арилбромида примера 31.
!Н ЯМР (400 МГц, ΓΌΟΙ,) δ: 8,34 (дд, 2Н), 7,24-7,18 (м, 2Н), 7,16 (дд, 2Н), 6,94-6,84 (м, 2Н), 6,82 (ел., 1Н), 6,48 (т, 1Н), 5,16 (ел., 1Н), 4,12-3,75 (м, 7Н), 3,64 (шир. д, 1Н), 3,52 (д, 1Н), 3,36 (д, 1Н), 3,32 (д, 1Н), 3,24 (т, 1Н), 3,20 (т, 1Н), 1,23(д, ЗН), 0,83(с, ЗН).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 446,4 (ш+1).
Пример 34.
Я1 = С5Н9; Я3 = 2-пиридил (1Я)-1 -[(3 8,48)-4-(3 -Цикло пентилокси-4-метоксифенил)-3 -метил-1 -(2-пиридил)пирро лидин-3 ил]этан-1-ол.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры сочетания арилбромида примера 31.
!Н ЯМР (400 МГц, ΓΌΟΙ,) δ: 8,18 (ддд, 1Н), 7,46 (ддд, 1Н), 6,89-6,82 (м, ЗН), 6,54 (ддд, 1Н), 6,40 (д, 1Н), 4,75 (ел., 1Н), 3,92-3,65 (м, 8Н), 3,36 (д, 1Н), 1,94-1,80 (м, 6Н), 1,66-1,55 (м, 2Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 397,4 (ш+1).
Пример 35.
Я1 = С5Н9; Я3 = 3-пиридил (1Я)-1 -[(3 8,48)-4-(3 -Цикло пентилокси-4-метоксифенил)-3 -метил-1 -(3 -пиридил)пирро лидин-3 ил]этан-1-ол.
Получен из промежуточного продукта 68 посредством катализируемой палладием процедуры сочетания примера 32.
!Н ЯМР (400 МГц, ΓΌΟΙ,) δ: 8,00 (д, 1Н), 7,93 (д, 1Н), 7,12 (дд, 1Н), 6,86-6,78 (м, 4Н), 4,73 (ел., 1Н), 3,85-3,59 (м, 8Н), 3,12 (д, 1Н), 1,90-1,79 (м, 6Н), 1,60-1,54 (м, 2Н), 1,22 (д, ЗН), 0,82 (с, ЗН).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 397,2 (ш+1).
/
Пример 36.
Я1 = (4-РЮ)-Р11; Я3 = СО2СН3
Метил-3 -((1Я)-1 -гидроксиэтил-(3 8,48)-4-[4-метокси-3 -(4-феноксифенокси)фенил] -3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Процедура получения простого эфира криптанда.
К перемешиваемой суспензии гидрида натрия (16 мг 60% дисперсии в минеральном масле, 0,40 ммоль) в сухом анизоле (2 мл) по частям добавляют при комнатной температуре в атмосфере азота промсжуточный продукт 74 (100 мг, 0,32 ммоль) на протяжении 5 мин с выделением Н2. После перемешивания в течение 30 мин добавляют трис-[2-(2-метоксиэтокси)этил]амин (10 мл, 0,03 ммоль), хлорид меди(1) (10 мг, 0,10 ммоль) и 4-бромдифениловый простой эфир и образовавшуюся смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 20 ч. Затем анизол удаляют посредством вакуумной дистилляции. Остаток растворяют в ЕЮАс (25 мл) и фильтруют через фильтровальную бумагу ОР/Р. Фильтрат промывают 1н. водным НС1 (20 мл), сушат (Ν328Ο |). фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают посредством радиальной хроматографии (2 мл пластина из диоксида кремния с применением
-59 005686 смеси 1:1 гексаны:Е!ОАс, получая при этом соединение примера 36 в виде рыжевато-коричневого масла (40 мг, 26%).
1Н ЯМР (400 МГц, СИСЬ смесь ротамеров) δ: 7,30 (дд, 2Н), 7,09-6,86 (м, 10Н), 3,88-3,49 (м, 11Н), 3,28 (д, 0,5Н), 3,19 (д, 0,5Н), 1,93 (шир. с, 0,5Н), 1,83 (шир. с, 0,5Н), 1,12 (дд, 3Н), 0,71 (шир. с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 478,2 (т+1).
Пример 37.
В1 = (4-РЬО)-РЬ; В3 = СО2СН3:
Другой диастереомер карбинола
Метил-3-(( 18)-1 -гидроксиэтил-(38,48)-4-[4-метокси-3-(4-феноксифенокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из (18)-карбинольного изомерного промежуточного продукта 75 посредством процедуры получения простого эфира криптанда примера 36.
1Н ЯМР (400 МГц, СИСЬ смесь ротамеров) δ: 7,32 (т, 2Н), 7,07 (дт, 1Н), 7,03-6,74 (м, 9Н), 3,91-3,55 (м, 9Н), 3,35-3,17 (м, 3Н), 2,16 (д, 0,5Н), 1,38 (шир. с, 0,5Н), 1,12 (д, 3Н), 0,85 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 478,2 (т+1).
Пример 38.
В1 = (4-РЬ)-РЬ; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1-гидроксиэтил-(38,48)-4-[4-метокси-3-(4-фенилфенокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира криптанда примера 36.
1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;. смесь ротамеров) δ: 7,55 (д, 2Н), 7,51 (д, 2Н), 7,42 (т, 2Н), 7,31 (т, 1Н), 7,05 (дт, 1Н), 6,98-6,92 (м, 4Н), 3,87-3,54 (м, 11Н), 3,29 (д, 0,5Н), 3,19 (д, 0,5Н), 1,64 (шир. с, 0,5Н), 1,57 (шир. с, 0.5Н), 1,14 (дд, 3Н), 0,74 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 462,2 (т+1).
Пример 39.
В1 = (4-РЬ)-РЬ; В3 = СО2СН3:
Другой карбинольный диастереомер
Метил-3-(( 18)-1-гидроксиэтил-(3 8,48)-4-[4-метокси-3-(4-фенилфенокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из (18)-карбинольного изомерного промежуточного продукта 75 посредством процедуры получения простого эфира криптанда примера 36.
1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;. смесь ротамеров) δ: 7,56 (д, 2Н), 7,52 (дт, 2Н), 7,42 (т, 2Н), 7,32 (т, 1Н), 7,10-6,94 (м, 5Н), 3,93-3,58 (м, 9Н), 3,38-3,18 (м, 3Н), 1,13 (д, 3Н), 0,88 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 462,2 (т+1).
Пример 40.
В1 = РЬ; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1 -гидроксиэтил-(38,48)-4-(4-метокси-3-феноксифенил)-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира криптанда примера 36.
1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;. смесь ротамеров) δ: 7,32-7,26 (м, 3Н), 7,02 (т, 2Н), 6,94-6,88 (м, 3Н), 3,853,49 (м, 11Н), 3,27 (д, 0,5Н), 3,18 (д, 0,5Н), 1,12 (т, 3Н), 0,71 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 386,3 (т+1).
Пример 41.
В1 = РЬ; В3 = СО2СН3:
Другой карбинольный диастереомер
Метил-3-(( 18)-1 -гидроксиэтил-(3 8,48)-4-(4-метокси-3-феноксифенил)-3 -метилпирролидинкарбоксилата.
Получают из (18)-карбинольного изомерного промежуточного продукта 75 посредством процедуры получения простого эфира криптанда примера 36.
1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;. смесь ротамеров) δ: 7,29 (т, 2Н), 7,08-6,85 (м, 6Н), 3,87-3,52 (м, 9Н), 3,34-
33,16 (м, 3Н), 1,11 (д, 3Н), 0,85 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 386,3 (т+1).
Пример 42.
В1 = 4-фторфенил; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(4-фторфенокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира криптанда примера 36.
- 60 005686 1Н ЯМР (400 МГц, ΟΌΟ’Ρ. смесь ротамеров) δ: 7,05-6,84 (м, 7Н), 3,89-3,45 (м, 11Н), 3,28 (д, 0,5Н), 3,18 (д, 0,5Н), 1,13 (т, 3Н), 0,71 (шир. с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 404,4 (т+1).
Пример 43.
В1 = СН2СЩ5; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1 -гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Способ получения простого эфира с применением К2СО3.
К перемешиваемой смеси промежуточного продукта 74 (50 мг, 0,16 ммоль) и порошкообразного К2СО3 (24,6 мг, 0,18 ммоль) в сухом ДМФ (1 мл) через шприц при комнатной температуре в атмосфере азота добавляют бромметилциклопропан (16,5 мкл, 0,17 ммоль). Образовавшуюся смесь нагревают при 65°С в течение 24 ч, затем оставляют для охлаждения до комнатной температуры. Реакционную смесь затем разбавляют водой (5 мл) и экстрагируют Е!2О (3 х 20 мл). Объединенные органические слои сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают посредством радиальной хроматографии (1 мм пластина из диоксида кремния с 30% ЕЮАс в гексанах), получая при этом соединение примера 43 в виде светлого масла (30 мг, 51%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 6,84-6,75 (м, 3Н), 3,94-3,54 (м, 13Н), 3,29 (д, 0,5Н), 3,21 (д, 0,5Н), 1,72 (шир. с, 0,5Н), 1,65 (шир. с, 0,5Н), 1,30 (с, 1Н), 1,13 (т, 3Н), 0,73 (сл., 3Н), 0,61 (сл., 2Н), 0,34 (с, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 364,3 (т+1).
Пример 44.
В1 = СН2С3Н5; В3 = СО2СН3 Диастереомер
Метил-3-(( 18)-1 -гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из (18)-карбинольного изомерного промежуточного продукта 75 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием бромметилциклопропана.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 6,84-6,75 (м, 3Н), 3,89-3,58 (м, 11Н), 3,33-3,20 (м, 3Н), 1,52 (шир. с, 1Н), 1,31 (с, 1Н), 1,11 (д, 3Н), 0,89 (с, 3Н), 0,62 (м, 2Н), 0,33 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 364,3 (т+1).
Пример 45.
В1 = 2-тиазол; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(1,3-тиазол-2-илокси)фенил)-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием 2-бромтиазола.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 7,24-7,12 (м, 3Н), 6,96 (д, 1Н), 6,75 (Д, 1Н), 3,89-3,52 (м, 11Н), 3,29 (д, 0,5Н), 3,20 (д, 0,5Н), 1,74 (шир. с, Н), 1,14 (т, 3Н), 0,74 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 393,2 (т+1).
Пример 46.
В1 = 2-тиазол; В3 = СО2СН3, Диастереомер
Метил-3-((18)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(1,3-тиазол-2-илокси)фенил)-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из (18)-карбинольного изомерного промежуточного продукта 75 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 7,17 (д, 1Н), 7,16 (д, 1Н), 7,11 (дд, 1Н), 6,97 (д, 1Н), 6,75 (д, 1Н), 3,86-3,59 (м, 9Н), 3,42-3,19 (м, 3Н), 1,52 (шир. с, Н), 1,14(д, 3Н), 0,87(с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 393,2 (т+1).
Пример 47.
В1 = 2-(Ы-метил)бензимидазол; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1 -гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-бензимидазол-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием 2-хлор-И-метилбензимидазола.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 7,50 (д, 1Н), 7,29-7,10 (м, 5Н), 6.95 (д, 1Н), 3,80-3,66 (м, 13Н), 3,57 (т, 1Н), 3,29 (д, 0,5Н), 3,20 (д, 0,5Н), 2,04 (шир. с, 1Н), 1,13 (т, 3Н), 0,77 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 440,2 (т+1).
Пример 48.
В1 = 2-(Ы-метил)бензимидазол; В3 = СО2СН3: Диастереомер
Метил-3-(( 18)-1 -гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-бензимидазол-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинкарбоксилат.
- 61 005686
Получают из (18)-карбинольного изомерного промежуточного продукта 75 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием 2-хлор-1-метил-1Нбензимидазола.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,50 (д, 1Н), 7,30-7,09 (м, 5Н), 6.96 (д, 1Н), 3,87-3,63 (м, 12Н), 3,40-3,21 (м, 3Н), 1,15 (д, 3Н), 0,91 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 440,2 (т+1).
Пример 49.
В1 = СН2СН2СН2Рй; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1-гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпропокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием 3-фенилпропилхлорида.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,35-7,17 (м, 5Н), 6,85-6,77 (м, 3Н), 4,02 (дт, 2Н),
3,90-3,52 (м, 11Н), 3,30 (д, 0,5Н), 3,21 (д, 0,5Н), 2,82 (т, 2Н), 2,14 (р, 2Н), 1,54 (шир. с, 0,5Н), 1,49 (шир. с, 0,5Н), 1,13 (т, 3Н), 0,72 (с, 3Н).
Пример 50.
В1 = СН2СН2СН2Рй; В3 = СО2СН3, Другой карбинольный диастереомер
Метил-3-(( 18)-1-гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпропокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из (18)-карбинольного изомерного промежуточного продукта 75 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием (18)-карбинольного изомера промежуточного продукта 75.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,33-7,19 (м, 5Н), 6,84-6,78 (м, 2Н), 6,72 (шир. с, 1Н), 4,01 (т, 2Н), 3,90-3,56 (м, 9Н), 3,34-3,23 (м, 3Н), 2,82 (т, 2Н), 2,15 (р, 2Н), 1,11 (д, 3Н), 0,89 (с, 3Н).
Пример 51.
В1 = СН2СН2СН2СН2Рй; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1 -гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[4-метокси-3-(4-фенилбутокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием 1-хлор-4-фенилбутана.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,32-7,15 (м, 5Н), 6,84-6,74 (м, 3Н), 4,00 (т, 2Н), 3,893,51 (м, 11Н), 3,30 (д, 0,5Н), 3,22 (д, 0,5Н), 2,69 (т, 2Н), 1,90-1,79 (м, 4Н), 1,41 (дд, 1Н), 1,13 (т, 3Н), 0,73 (с, 3Н).
Пример 52.
В1 = СН2СН2СН2СН2Рй; В3 = СО2СН3, Другой карбинольный диастереомер
Метил-3-(( 18)-1 -гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[4-метокси-3-(4-фенилбутокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием 1-хлор-5-фенилпентана.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,32-7,16 (м, 5Н), 6,83-6,70 (м, 3Н), 3,99 (т, 2Н), 3,903,58 (м, 9Н), 3,34-3,21 (м, 3Н), 2,69 (т, 2Н), 1,90-1,77 (м, 4Н), 1,45 (шир. с, 1Н), 1,12 (д, 3Н), 0,90 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 442,4 (т+1).
Пример 53.
В1 = СН2СН2Рй; В3 = СО2СН3
Метил-3-((1В)-1-гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[4-метокси-3-(2-фенилэтокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 с использованием 2-фенетилбромида.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,39-7,23 (м, 5Н), 6,84-6,78 (м, 3Н), 4,20 (т, 2Н), 3,873,52 (м, 11Н), 3,30 (д, 0,5Н), 3,21 (д, 0,5Н), 3,15 (т, 2Н), 1,13 (т, 3Н), 0,73 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 414,3 (т+1).
Пример 54.
В1 = СН2СН2Рй; В3 = СО2СН3, Другой карбинольный диастереомер
Метил-3-(( 18)-1-гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[4-метокси-3-(2-фенилэтокси)фенил]-3 -метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из (18)-карбинольного изомерного промежуточного продукта 75 посредством процедуры получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,34-7,24 (м, 5Н), 6,83 (д, 1Н), 6,79 (дд, 1Н), 6,73 (шир. с, 1Н), 4,18 (т, 2Н), 3,89-3,56 (м, 9Н), 3,31-3,20 (м, 3Н), 3,15 (т, 2Н), 1,11 (д, 3Н), 0,89 (с, 3Н).
- 62 005686
Пример 55.
В1 = С5Н9; В3 = СН2-2-пиридил (1В)-1-[(3 8,48)-4-(3 -Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3 -метил-1-(2-пиридилметил)пирролидин-3ил]этан-1-ол.
Процедура восстановительного аминирования.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 68 (32 мг, 0,1 ммоль) и пиридин-2карбоксальдегида (10 мл, 0,1 мкмоль) в сухом 1,2-дихлорэтане (0,3 мл) добавляют триацетоксиборогидрид натрия (30 мг, 0,14 ммоль) в атмосфере азота при комнатной температуре. После перемешивания в течение 3 ч реакционную смесь гасят насыщенным водным NаНСОз (0,1 мл) и перемешивают в течение 5 мин. Реакционную смесь разбавляют ДЮАс (20 мл), промывают насыщенным водным NаНСОз (20 мл) и насыщенным раствором соли (20 мл), затем сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом соединение примера 55 в виде желтого масла (40,4 мг, 98%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭСк смесь ротамеров) δ: 8,54 (ддд, 1Н), 7,68 (дт, 1Н), 7,43 (д, 1Н), 7,18 (ддд, 1Н), 6,79-6,73 (м, 3Н), 4,75 (сл., 1Н), 3,89-3,77 (м, 5Н), 3,69 (к, 1Н), 3,59 (т, 1Н), 3,33 (т, 1Н), 3,16 (д, 1Н), 2,70 (т, 1Н), 2,21 (д, 1Н), 1,92-1,80 (м, 6Н), 1,64-1,57 (м, 2Н), 1,14 (д, 3Н), 0,50 (3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 411,4 (т+1).
Пример 56.
В1 = С5Н9; В3 = СН2-3-пиридил (1В)-1-[(3 8,48)-4-(3 -Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3 -метил-1-(3-пиридилметил)пирролидин-3ил]этан-1-ол.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры восстановительного аминирования примера 55 с использованием пиридин-3-карбоксальдегида.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 8,54 (д, 1Н), 8,51 (дд, 1Н), 7,68 (д, 1Н), 7,26 (дд, 1Н), 6,78-6,71 (м, 3Н), 4,74 (сл., 1Н), 3,86-3,78 (м, 4Н), 3,68 (к, 1Н), 3,64 (д, 1Н), 3,53 (т, 1Н), 3,22 (т, 1Н), 3,05 (д, 1Н) 2,62 (т, 1Н), 2,14 (д, 1Н), 1,92-1,78 (м, 6Н), 1,64-1,56 (м, 2Н), 1,12 (д, 3Н), 0,50 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 411,4 (т+1).
Пример 57.
В1 = С5Н9; В3 = СН2-4-пиридил (1В)-1-[(3 8,48)-4-(3 -Циклопентилокси-4-метоксифенил)-3 -метил-1-(4-пиридилметил)пирролидин-3ил]этан-1-ол.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры восстановительного аминирования примера 55 с использованием пиридин-4-карбоксальдегида.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;. смесь ротамеров) δ: 8,54 (д, 2Н), 7,27 (д, 2Н), 6,79-6,72 (м, 3Н), 4,74 (сл., 1Н), 3,86-3,74 (м, 4Н), 3,70 (к, 1Н), 3,64 (д, 1Н), 3,55 (т, 1Н), 3,23 (т, 1Н), 3,06 (д, 1Н) 2,64 (т, 1Н), 2,15 (д, 1Н), 1,92-1,80 (м, 6Н), 1,65-1,58 (м, 2Н), 1,14 (д, 3Н), 0,52 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 411,4 (т+1).
Пример 58.
В1 = С5Н9; В3 = С1ДС11;СО;С11.-ΡΙι
Фенилметил-3-[3-((1В)-1 -гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3 метилпирролидинил]пропаноат.
К перемешиваемому раствору бензилакрилата (19,4 мг, 0,12 ммоль) в сухом ДМФ (0,1 мл) добавляют промежуточный продукт 68 (12,8 мг, 0,04 ммоль) и порошкообразный К2СО3 (26,5 мг, 0,18 ммоль) в атмосфере азота. Образовавшуюся смесь оставляют для перемешивания при 80°С в течение 16 ч, затем оставляют для охлаждения до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляют СН2С12 (20 мл), промывают водой, насыщенным водным NаНСО3 и насыщенным раствором соли, затем сушат (Ш28О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают посредством флэш-хроматографии (смесь 2:1 ΕΐОΑс/гексаны, на силикагеле), получая при этом соединение примера 58 (11,7 мг, 60%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ: 7,37-7,31 (м, 5Н), 6,81-6,72 (м, 3Н), 5,14 (к, 2Н), 4,76 (с, 1Н), 3,87-3,81 (м, 4Н), 3,65 (к, 1Н), 3,54 (т, 1Н), 3,31 (т, 1Н), 3,15 (д, 1Н), 2,82 (дт, 2Н), 2,62-2,54 (м, 3Н), 2,08 (д, 1Н),
1,91-1,81 (м, 6Н), 1,66-1,56 (м, 2Н), 1,15 (д, 3Н), 0,48 (с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 482,3 (т+1).
- 63 005686
Пример 59.
Я1 = С5Н9; Я3 = СН2СН2СО2Н
3-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил] пропановая кислота.
Получают из соединения примера 58 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ: 6,82-6,71 (м, 3Н), 4,80 (сл., 1Н), 4,06-3,15 (м, 11Н), 2,73 (шир. с, 2Н),
1,91-1,74 (м, 6Н), 1,63-1,53 (м, 2Н), 1,14 (д, 3Н), 0,68 (с, 3Н).
Пример 60.
Я1 = С5Н9; Я3 = СНгСОгСНГй
Фенилметил-2-[3-((1Я)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]ацетат.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры опосредованного основанием Хюнига сочетания промежуточного продукта 74 с использованием бензилбромацетата.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,41-7,32 (м, 5Н), 6,82-6,73 (м, 3Н), 5,18 (к, 2Н), 4,77 (с, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 3,68 (к, 1Н), 3,59 (т, 1Н), 3,52 (д, 1н), 3,36-3,30 (м, 2н), 3,24 (д, 1Н), 2,88 (т, 1Н), 2,31 (д, 1Н), 1,931,80 (м, 6Н), 1,65-1,56 (м, 2н), 1,16 (д,3Н), 0,53 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 468,3 (т+1).
Пример 61.
Я1 = С5Н9; Я3 = СН2СО2Н 2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]уксусная кислота.
Получают из промежуточного продукта 60 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 6,77-6,68 (м, 3Н), 5,56 (шир. с, 1Н), 4,77 (сл., 1Н), 3,99-3,85 (м, 4Н), 3,82-3,59 (м, 7Н), 2,88 (шир. с, 1Н), 1,91-1,75 (м, 6Н), 1,59-1,51 (м,2Н), 1,11 (д, 3Н), 0,67 (с, 3Н).
ПЯМ8 (электрораспыление, отрицательные ионы): Эа/е 376,2 (т-1).
Пример 62.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСЩОАс^й 2-[(3Я)-3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2оксо-1-фенилэтилацетат.
Из промежуточного продукта 68 (104 мг, 0,33 ммоль) и хлорангидрида О-ацетилминдальной кислоты (75 мкл, 0,33 ммоль) процедурой ацилирования примера 7 получают соединение примера 62 (149 мг, 100%).
' Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,60-7,37 (м, 5Н), 6,82-6,70 (м, 3Н), 6,08 (м, 1Н), 4,76 (м, 1Н), 4,05-3,32 (м, 7Н), 3,81 (с, 3Н), 2,20 (с, 3Н), 1,95-1,53 (шир. м. 5Н), 1,13 и 0,51 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,79 и 0,41 (синглеты, 3Н, ротамеры).
Пример 63.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН(ОН)Гй 1-[(3Я)-3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2гидрокси-2-фенилэтан-1-он.
Из соединения примера 62 процедурой гидролиза ЫОН промежуточного продукта 5 получают соединение примера 63 в виде белой пены (99 мг, 66%).
- 64 005686 1Н ЯМР (400 МГц, СИС13) δ: 7,41-7,26 (м, 5Н), 6,80-6,41 (м, 3Н), 5,16-5,07 (м, 1Н), 4,75-4,54 (мультиплеты, 1Н, ротамеры и диастереомеры), 4,06-2,80 (м, 7Н), 3,81 и 3,79 и 3,78 (синглеты, 3Н, ротамеры и диастереомеры), 1,95-1,55 (шир. м. 5Н), 1,15 и 1,02 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,77 и 0,75 и 0,46 и 0,38 (синглеты, 3Н, ротамеры и диастереомеры).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Иа/е 454,5 (т+1).
Пример 64.
К1 = С5Н9; К3 = СОСН2ОСН2Р1
1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-(фенилметокси)этан-1-он.
Из промежуточного продукта 68 (176 мг, 0,574 ммоль) процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием бензилоксиацетилхлорида (31 мкл, 0,22 ммоль, 2 экв.) получают прозрачное, бесцветное масло (79 мг, 29%).
1Н ЯМР (400 МГц, СИС13, смесь ротамеров) δ: 7,38-7,28 (м, 5Н), 6,77-6,73 (м, 3Н), 4,73-4,71 (м, 1Н), 4,65-4,64 (м, 2Н), 4,14-3,19 (сл., 12Н), 2,07-1,56 (м, 8Н), 1,16-1,09 (дд, 3Н), 0,72 (с, 3Н).
Пример 65.
К1 = С5Н9; К3 = СОСН2ОН
1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-гидроксиэтан-1-он.
Из соединения примера 64 процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31 получают белое твердое вещество (47 мг, 73%).
1Н ЯМР (400 МГц, СИС13, смесь ротамеров) δ: 6,82-6,76 (м, 3Н), 4,75-4,73 (м, 1Н), 4,15-3,04 (сл., 12Н), 1,92-1,61 (м, 9Н), 1,27-1,24 (дд, 3Н), 0,76 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Иа/е 378,2 (т+1).
Пример 66.
К1 = С5Н9; К3 = (8)-СОСН(ОАс)СН3
2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-( 18)-1 -метил-2-оксоэтилацетат.
Из промежуточного продукта 68 (106 мг, 0,330 ммоль) процедурой ацилирования примера 7 с использованием (8)-(-)-2-ацетоксипропионилхлорида (84 мкл, 0,66 ммоль, 2 экв.) получают прозрачное, бесцветное масло, которое далее не очищают.
Пример 67.
К1 = С5Н9; К3 = (8)-СОСН(ОН)СН3
- 65 005686
1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-(28)-2-гидроксипропан-1-он.
Сырое соединение примера 66 освобождают от защитной группы процедурой с МОН промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 67 в виде белого твердого вещества (22 мг, 17% для двух стадий).
1Н ЯМР (400 МГц, СБСС) δ: 6,82-6,76 (м, 3Н), 4,75-4,73 (м, 1Н), 4,38-4,35 (м, 1Н), 3,88-3,55 (сл., 9Н), 3,39-3,25 (дд, 1Н), 1,92-1,58 (м, 9Н), 1,41-1,36 (дд, 3Н), 1,18-1,14 (дд, 3Н), 0,77-0,76 (д, 3Н).
ПЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 392,3 (т+1).
Пример 68.
Я1 = С5Н9; Я3 = СО(СН2СН2)ОАс {[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]карбонил}циклопропилацетат.
Промежуточный продукт 68 (97,6 мг, 0,306 ммоль) ацилируют процедурой ацилирования примера 7 с использованием 2-ацетокси-2-циклопропанэтаноилхлорида (99 мг, 0,61 ммоль, 2 экв.), получая при этом прозрачное, бесцветное масло (77 мг, 56%).
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 6,78-6,71 (м, 3Н), 4,72-4,71 (м, 1Н), 3,80-3,36 (сл., 10Н), 2,08 (с, 3Н), 1,90-1,50 (м, 11Н), 1,16-1,11 (д, 3Н), 0,96 (шир. с, 1Н), 1,18-1,14 (дд, 3Н), 0,70 (с, 3Н).
Пример 69.
Я1 = С5Н9; Я3 = СО(СН2СН2)ОН
3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинилгидроксициклопропилкетон.
Соединение примера 68 (77 мг) гидролизуют процедурой с МОН промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 69 в виде белого твердого вещества (34 мг, 44% для двух стадий).
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 6,80-6,75 (м, 3Н), 4,74-3,33 (сл., 10Н), 2,30 (шир. с, 1Н), 1,93-1,56 (м, 8Н), 1,37-0,89 (м, 8Н), 0,74-0,72 (д, 3Н).
ПЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 404,4 (т+1).
Пример 70.
Я1 = С5Н9; Я3 = СОСН(ОАс)(СН3)СН3
2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-1,1-диметил-2-оксоэтилацетат.
Промежуточный продукт 68 (124 мг, 0,389 ммоль) ацилируют процедурой ацилирования примера 7 с использованием (+)-2-ацетокси-2-метилпропионилхлорида (11 мкг, 0,78 ммоль, 2 экв.). Образовавшееся масло далее не очищают.
- 66 005686
Пример 71.
В1 = С5Н9; В3 = СОСН(ОН)(СН3)СН3 1-[3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-гидрокси-2-метилпропан-1-он.
Сырой продукт примера 70 превращают процедурой гидролиза с Г1О11 промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 71 в виде белого твердого вещества (47 мг, 30%).
2Н ЯМР (400 МГц, СБС13, смесь ротамеров) δ: 6,79-6,75 (м, 3Н), 4,75 (шир. с, 1Н), 4,49 (шир. с, 1Н),
3,91-3,48 (сл., 10Н), 1,90-1,46 (м, 14Н), 1,18-1,14 (дд, 3Н), 0,77-0,74 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 406,3 (т+1).
Пример 72.
В1 = С5Н9; В3 = СОСО2СН3
Метил-2-[3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксоацетат.
Промежуточный продукт 68 (57,5 мг, 0,180 ммоль) превращают процедурой 1)П:А промежуточного продукта 32 с использованием метилоксалилхлорида, получая при этом соединение примера 72 в виде прозрачного, бесцветного масла (26,8 мг, 36%).
2Н ЯМР (400 МГц, СБС^) δ: 6,81-6,77 (м, 3Н), 4,75-4,74 (м, 1Н), 4,12-3,45 (сл., 13Н), 1,91-1,52 (м, 8Н), 1,18-1,13 (дд, 3Н), 0,78-0,75 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 406,4 (т+1).
Пример 73.
В1 = С5Н9; В3 = СОСО2Н
2-[3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксоуксусная кислота.
Соединение примера 72 (46,8 мг, 0,116 ммоль) превращают процедурой с ЫОН промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 73 в виде прозрачной, бесцветной пленки (34 мг, 76%).
2Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 6,82-6,76 (м, 3Н), 4,75-4,73 (м, 1Н), 4,43-3,49 (сл., 10Н), 1,92-1,58 (м, 8Н), 1,19-1,16 (дд, 3Н), 0,78-0,76 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, отрицательные ионы): Ба/е 390,2 (т-1).
Пример 74.
В1 = С5Н9; В3 = ^^Ν!
- 67 005686
2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксоацетамид.
Соединение примера 72 (7,1 мг, 0,014 ммоль) растворяют в ТГФ (0,5 мл), добавляют NΗ4ΟΗ (0,5 мл) и устройство герметизируют и содержимое его перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. ТСХ (смесь 1:1 ЕЮАс/гексаны) показала полный расход исходного материала. Реакционную смесь разбавляют ΕΐΟΆο (20 мл) и органический слой промывают насыщенным раствором соли (2 х 15 мл). Органический слой сушат над Ν28Ο4 и концентрируют в вакууме, получая при этом прозрачное, бесцветное масло (6,6 г, 117%).
2Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,36 (шир. с, 1Н), 6,82-6,79 (м, 3Н), 5,53 (шир. с, 1Н), 4,76-4,75 (м, 1Н), 4,44-3,47 (сл., 10Н), 1,92-1,58 (м, 8Н), 1,18-1,17 (д, 3Н), 0,78-0,74 (д, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, отрицательные ионы): Эа/е 389,1 (т-1).
Пример 75.
К1 = РНС ССН< К3 = ΟΟΟΟΝΗ2 2-{(38,48)-3-((К)-1-Гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидин-1-ил}-2-оксоацетамид.
Получают ацилированием промежуточного продукта 73 метилоксалилхлоридом процедурой ΏΙΕΆ промежуточного продукта 32, удалением трет-бутильной группы процедурой промежуточного продукта 72, Ο-алкилированием промежуточного продукта 90 процедурой получения простого эфира в присутствии К2СО3 примера 43 и амидированием процедурой примера 74.
Данные 2Н ЯМР δ: 7,28-7,42 (м, 5Н); 7,08 (сд, 1Н); 6,83-6,87 (м, 2Н); 5,45 (шир., 1Н), 5,0 (с, 2Н);
4,42-4,48 (2д, 0,5Н); 4,26 (т, 0,5 Н); 3,72-4,01 (м, 3,5Н); 3,89 (с, 3Н); 3,50-3,70 (м, 1Н); 3,44 (д, 0,5Н); 0,960,99 (дд, 3Н); 0,71 (д, 3Н).
Пример 76.
К1 = 4-СР3РЬС=ССН2; К3 = ΟΟΟΟΝΗ2
2-(38,48)-3-((К)-1-Гидроксиэтил)-4-{4-метокси-3-[3-(4-трифторметилфенил)проп-2-инилокси] фенил}-3-метилпирролидин-1-ил)-2-оксоацетамид.
Получают, как описано в примере 75, с использованием промежуточного продукта 92 в качестве Οалкилирующего реагента.
Данные 2Н ЯМР δ: 7,50-7,61 (м, 4Н); 7,04 (с, 1Н); 6,85-6,91 (м, 2Н); 5,69 (шир., 1Н), 5,00 (с, 2Н);
4,42-4,49 (2д, 0,5Н); 4,26 (т, 0,5 Н); 3,69-4,07 (м, 5Н); 3,90 (с, 3Н); 3,45-3,58 (м, 1н); 1,04-1,07 (дд, 3н); 0,73 (д, 3Н) р
Пример 77.
К1 = 4-ГРЮСН2СН2СН2; К3 = ΟΟΟΟΝΗ2
2-[(38,48)-4-{3-[3-(4-Фторфенокси)пропокси]-4-метоксифенил}-3-((К)-1-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]-2-оксоацетамид.
Получают, как описано в примере 75, с использованием 1-(3-хлорпропокси)-4-фторбензола в качестве алкилирующего реагента.
- 68 005686
Данные '1 ЯМР δ: 6,93-6,99 (м, 2Н); 6,82-6,88 (м, 5Н); 5,44 (с, 1Н), 4,40 (дд, 0,5Н); 4,14-4,22 (м, 5Н); 3,83 (с, 3Н); 3,69-4,04 (м, 5Н); 3,56 (д, 0,5Н); 2,28 (квинт, 2Н); 1,16 (дд, 3н); 0,75 (д, 3Н).
Пример 78.
В1 = СН2С3Н5; В3 = СОСОИН2
2-[(38,48)-4-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-((В)-1-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин1-ил]-2-оксоацетамид.
Получают, как описано в примере 75, с использованием циклопропилметилбромида в качестве алкилирующего реагента.
Данные Ή ЯМР δ: 6,80-6,81 (м, 3Н); 5,50 (шир., 1Н), 4,40 (2д, 0,5Н); 4,23 (т, 0,5Н); 3,68-4,05 (м, 7Н); 3,84 (с, 3Н); 1,40 (т, 1Н); 1,17 (сд, 3Н); 0,76 (д, 3Н); 0,61-0,67 (м, 2Н); 0,33-0.38 (м, 2Н).
Пример 79.
В1 = 2-инданил; В3 = СОСО№2 2-{(38,48)-3-((В)-1-Гидроксиэтил)-4-[3-(индан-2-илокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидин-1ил}-2-оксоацетамид.
Получают, как описано в примере 75, с использованием 2-броминдана в качестве алкилирующего реагента.
Данные 2Н ЯМР δ: 7,16-7,24 (м, 4Н), 6,84-6,87 (м, 3Н); 5,51 (с, 1Н); 5,17-5,20 (м, 1Н); 4,42-4,5 (2д, 0,5Н); 4,24 (т, 0,5Н); 3,60-4,06 (м, 6Н); 3,81 (с, 3Н); 3,20-3,40 (м, 4Н); 1,20 (сд, 3Н); 0,78 (д, 3Н).
Пример 80.
В1 = С5Н9; В3 = СОСОИНСН3
2-[3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-№метил-2-оксоацетамид.
Соединение примера 72 (17,3 мг, 0,0427 ммоль) растворяют в ТГФ (0,8 мл). Добавляют метиламин (40% в воде, 0,5 мл) и аппаратуру герметизируют и содержимое ее перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. ТСХ (смесь 3:1, ЕЮАс: гексаны) показала полный расход исходного материала. Реакционную смесь разбавляют ЕЮАс (20 мл) и органический слой промывают насыщенным раствором соли (2 х 15 мл). Органический слой сушат над №:8О.| и концентрируют в вакууме, получая при этом прозрачное, бесцветное масло (16,9 мг, 97%).
2Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,59 (шир. с, 1Н); 6,80-6,79 (м, 3Н); 4,75-4,73 (м, 1Н); 4,47-3,46 (сл., 10Н); 2,89-2,87 (дд, 3Н); 1,91-1,57 (м, 8Н); 1,18-1,16 (дд, 3Н); 0,76-0,73 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 405,1 (т+1).
- 69 005686
Пример 81.
К1 = С5Н9; К3 = СОСО-пиперидин
1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-пиперидилэтан-1,2-дион.
Соединение примера 72 (25,4 мг, 0,0626 ммоль) растворяют в ТГФ (0,8 мл). Добавляют пиперидин (213 мкл, 2,15 ммоль, 34 экв.) и аппаратуру герметизируют и нагревают при 53°С в течение 12 ч. ТСХ (100% ΕΐОАс) показала образование небольшого количества продукта. Реакционную смесь разбавляют ΕΐОАс (20 мл), органические слои промывают 2н. НС1 (2 х 15 мл), 1н. \аО11 (15 мл) и насыщенным раствором соли (2 х 15 мл). Органический слой сушат над №28О4 и концентрируют в вакууме, получая при этом прозрачное, бесцветное масло (1,2 мг, 4%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС1э) δ: 6,82-6,76 (м, 3Н); 4,75 (м, 1Н); 4,01-3,27 (сл., 14Н); 1,89-1,59 (м, 14Н); 1,18-1,13 (дд, 3Н); 0,78-0,74 (д, 3Н).
0%°
Пример 82.
К1 = С5Н9; К3 = СОСОЫНСзН
2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]%-циклопентил-2-оксоацетамид.
Соединение примера 72 (20,9 мг, 0,0515 ммоль) растворяют в ТГФ (0,8 мл). Добавляют циклопентиламин (211 мкл, 2,13 ммоль, 41 экв.) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 42 ч. Реакционную смесь разбавляют ΕΐОАс (20 мл), органические слои промывают 2н. НС1 (2 х 15 мл), 1н. \аО11 (15 мл) и насыщенным раствором соли (2 х 15 мл). Органический слой сушат над №28О4 и концентрируют в вакууме. Образовавшееся масло очищают хроматографией на диоксиде кремния (100% ΕΐОАс), получая при этом прозрачное, бесцветное масло (14,0 мг, 59%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС1э) δ: 7,57-7,53 (шир. с, 1Н); 6,8-6,76 (м, 3Н); 4,76-4,73 (шир. с, 1Н); 4,48-3,44 (сл., 9Н); 2,04-1,48 (м, 18Н); 1,18-1,16 (д, 3н); 0,77-0,73 (д, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, отрицательные ионы): Оа/е 457,2 (т-1).
Пример 83.
К1 = С5Н9; К3 = СОСОХ11С112Ρ1ι
2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксо-Ы-бензилацетамид.
Способом примера 82 с использованием бензиламина получают соединение примера 83 в виде прозрачного, бесцветного масла (9,4 мг, 47%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС1э) δ: 7,96-7,92 (шир. с, 1Н); 7,36-7,25 (м, 3Н); 4,75 (шир. с, 1Н); 4,49-3,47 (д, 2Н); 4,28-3,46 (сл., 9Н), 1,93-1,61 (м, 8Н); 1,19-1,16 (дд, 3Н); 0,78-0,74 (д, 3Н).
ЬКМ8 (электрорасныление, положительные ионы): Оа/е 481,4 (т+1).
Пример 84.
К1 = С5Н9; К3 = (Ю-СОСНСадОЫНСОгСНгРЬ
- 70 005686
N-{(1 Я)-2-[3 -((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-1-бутил-2-оксоэтил}(фенилметокси)карбоксамид.
Промежуточный продукт 68 (39,5 мг, 0,129 ммоль) превращают процедурой ЭГЕА промежуточного продукта 32, получая при этом прозрачное, бесцветное масло (59,0 мг, 80%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,36-7,26 (м, 5Н); 6,82-6,71 (м, 3Н); 5,71-5,68 (дд, 1Н); 5,12-5,06 (м, 2Н); 4,73 (м, 1Н); 4,49-4,47 (м, 1Н), 4,12-2,58 (сл., 8Н); 2,03-1,25 (м, 16Н), 1,16-1,14 (дд, 3Н); 0,92-0,84 (м, 3Н); 0,73-0,72 (д, 3Н).
(2Я)-1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-аминогексан-1-он.
Соединение примера 84 (59 мг, 0,10 ммоль) превращают процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 85 в виде белого порошка (43 мг, 95%).
1Н ЯМР (СП3ОЭ, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,90-6,83 (м, 3Н); 3,85-3,30 (сл., 10Н), 2,00-1,37 (м, 14Н), 1.14-1,11 (дд, 3Н); 1,10-0,92 (дт, 3Н); 0,77 (с, 3Н).
ЕКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 433,5 (т+1).
Пример 86.
Я1 = С5Н9; Я3 = (Я)-СОСН(1-Рг№СО2СН2РЬ
N-{(1 Я)-2-[3 -((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-1-(метилэтил)-2-оксоэтил}(фенилметокси)карбоксамид.
Промежуточный продукт 68 (43,7 мг, 0,143 ммоль) ацилируют способом в присутствии основания Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием 7-О-Уа1-О8и (54,6 мг, 0,15 ммоль, 1,1 экв.), получая при этом прозрачное, бесцветное масло (38,9 мг, 49%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,36-7,33 (м, 5Н), 6,80-6,71 (м, 3Н), 5,62-5,59 (д, 1Н), 5,10-5,06 (м, 2Н) 5,84-5,72 (м, 1Н), 4,12-2,68 (сл., 10Н), 2,03-1,52 (м, 9Н), 1,18-1,14 (дд, 3Н); 1,04-0,92 (м, 7Н); 0,73-0,70 (д, 3Н).
(2Я)-1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-амино-3 -метилбутан-1-он.
- 71 005686
Соединение примера 86 (38,9 мг, 0,070 ммоль) превращают процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 87 в виде светлого твердого вещества (26 мг, 88%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС1э) δ: 6,42-6,33 (м, 3Н), 4,36 (м, 1Н), 3,62-2,80 (сл., 10Н), 2,81-2,68 (м, 1Н),
1,42-1,08 (м, 9Н); 0,78-0,65 (м, 9Н), 0,24 (с, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 419,5 (т+1).
Пример 88.
Я1 = С5Н9; Я3 = (8)-СОСН(ОАс)С6Нп
2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-(18)-1 -циклогексил-2-оксоэтилацетат.
Промежуточный продукт 68 (41,2 мг, 0,129 ммоль) ацилируют процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием хлорангидрида (8)-(+)-ацетоксигексагидроминдальной кислоты (625 мкл, 0,4121М в СН2С12, 2 экв.), получая при этом соединение примера 88 в виде прозрачного, бесцветного масла (40,5 мг, 63%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 6,78-6,77 (м, 3Н), 4,84-4,72 (м, 2Н), 4,12-3,11 (м, 9Н), 2,10 (д, 3Н), 2,02-1,68 (м, 1,5Н), 1,38-0,99 (м, 10Н); 0,81-0,74 (д, 3Н).
Пример 89.
Я1 = С5Н9; Я3 = (8)-СОСН(ОН)СбНп
1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-(28)-2-циклогексил-2-гидроксиэтан-1-он.
Соединение примера 88 (40,5 мг, 0,0807 ммоль) превращают процедурой гидролиза с МОН промежуточного продукта 5 в соединение примера 89 в виде прозрачного, бесцветного масла (26,9 мг, 72%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 6,80-6,78 (м, 3Н), 4,73 (м, 1Н), (м, 1Н), 4,14-4,06 (м, 1Н), 3,83-2,99 (сл., 9Н), 1,91-1,36 (м, 1 7Н), 1,35-1,11 (м, 7Н); 0,79-0,78 (д, 3Н).
ЬЯМ8 (электрорасныление, положительные ионы): Оа/е 460,3 (т+1).
1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-(2Я)-2-циклогексил-2-ацетоксиэтан-1-он.
Промежуточный продукт 68 (43,1 мг, 0,135 ммоль) превращают процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием хлорангидрида (Я)-(-)-ацетоксигексагидроминдальной
- 72 005686 кислоты (368 мкл, 0,734М в ΠΗ2Ο2, 2 экв.), получая при этом прозрачное бесцветное масло (59,9 мг, 88%).
1Η ЯМР (400 МГц, СБС13, смесь ротамеров) δ: 6,84-6,64 (м, 3Η), 4,78-4,76 (м, 2Н), 4,12-2,65 (сл., 9Н), 2,11 (д. 3Η), 2,10-1,51 (м, 1,51-1), 1,38-0,98 (м, 10Η); 0,73-0,65 (д, 3Η).
Пример 91.
К1 = С5^; К3 = (К)-СΟСИ(ΟИ)С6И11 (2К)-1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-циклогексил-2-гидроксиэтан-1-он.
Соединение примера 90 (59,9 мг, 0,119 ммоль) превращают процедурой гидролиза с 1аО11 промежуточного продукта 5, получая при этом прозрачную, бесцветную пленку (46,6 мг, 84%).
1Η ЯМР (400 МГц, СБСГ, смесь ротамеров) δ: 6,85-6,74 (м, 3Η), 4,79-4,72 (м, 1Н), 4,13-4,07 (м, 1Н), 3,87-3,01 (с, 9Н), 1,96-1,34 (м, 17Н), 1,34-1,08 (м, 7Н); 0,78-0,77 (д, 3Η).
1.1КМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а/е 460,4 (т+1).
Пример 92.
К1 = С5^; К3 = (8)-СΟСИ(С4И9)NИСΟ2СИ2ΡЬ №{2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-( 18)-1-бутил-2-оксоэтил }(фенилметокси)карбоксамид.
Промежуточный продукт 68 (40,6 мг, 0,125 ммоль) превращают процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием 2-Ь-Ме-О^ (53 мг, 0,15 ммоль, 1,1 экв.), получая при этом соединение примера 92 в виде прозрачного, бесцветного масла (50,4 мг, 71%).
1Η ЯМР (400 МГц, СБС13, смесь ротамеров) δ: 7,36-7,25 (м 5Н), 6,80-6,75 (м, 3Η), 5,74-5,72 (дд, 1Н), 5,10-5,06 (м, 2Н), 4,74-4,53 (м, 1Н), 4,13 (м, 1Н), 4,13-3,35 (сл., 8Н), 1,95-1,24 (м, 16Н), 1,14-1,13 (д, 3Η); 0,93-0,87 (м, 3Η), 0,74 (с, 3Η).
Пример 93.
К1 = С5^; К3 = (ЗДСОСЩСд^^з
1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-(28)-2-аминогексан-1-он.
Соединение примера 92 (50,4 мг, 0,0889 ммоль) подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 93 в виде белого твердого вещества (31,7 мг, 82%).
1Η ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 6,89-6,74 (м, 3Η), 4,84-4,75 (м, 1Н), 4,40-3,32 (сл., 10Η), 1,99-1,68 (м, 14Н), 1,14-1,12 (м, 3Η); 1,04-0,95 (д, 3Η), 0,91-0,88 (д, 3Η).
1.1КМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а/е 433,5 (т+1).
Пример 94.
К1 = С5^; К3 = (К)-СОСН(ОАс)(СН2)3СН3
- 73 005686 (1Я)-2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-1 -бутил-2-оксоэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (1Я)-1-(хлоркарбонил)пентилацетата.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,81 (м, 2Н), 6,79-6,69 (м, 3Н). 5,10-5,02 (м, 1Н), 4,794,73 (м, 1Н), 4,14-3,18 (сл., 9Н), 2,14 (д, 3Н), 1,94-1,76 (м, 8Н), 1,53-1,34 (м, 4Н); 1,20 (дд, 2Н), 0,96-0,86 (м, 3Н), 0,74 (д, 3Н).
Пример 95.
Я1 = С5Н9; Я3 = (Я)-СОСН(ОН)(СН2)эСНэ (2Я)-1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-гидроксигексан-1-он.
Соединение примера 94 (5 мг, 0,011 ммоль) гидролизуют ЫОН, получая при этом соединение примера 95 (2,5 мг, 55%) в виде прозрачной пленки.
1Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц) δ: 6,91-6,80 (м, 3Н), 4,34-4,28 (м, 1Н), 4,04-3,35 (сл., 9Н), 1,90-1,77 (м, 8Н), 1,74-1,62 (м, 2Н), 1,55-1,23 (м, 4Н); 1,12 (д, 3Н), 0,97-0,87 (м, 3Н), 0,74 (д, 3Н).
ШМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 434,2 (т+1). Пример 96.
Я1 = С5Н9; Я3 = (8)-СОСН(М1С1№СН;Р11 №{2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-( 18)-2-оксо-1 -бензилэтил}(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 68 посредством процедуры ацилирования с основанием Хюнига с использованием п-нитрофенилового эфира №СВ2-(8)-фенилаланина.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,41-7,26 (м, 10Н), 6,78-6,42 (м, 3Н), 5,78-5,74 (м, 1Н), 5,14-5,05 (м, 2Н), 4,76-4,70 (м, 2Н), 3,81 (с, 3Н), 3,75-2,66 (сл., 10Н), 1,94-1,80 (м, 6Н), 1,65-1,57 (м, 2Н); 1,08-0,99 (дд, 3Н), 0,64 и 0,33 (с,3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 601,2 (т+1).
Пример 97.
Я1 = С5Н9; Я3 = (8)-СОСН(МР)С1 ΡΡΙ1
1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-(28)-2-амино-3-фенилпропан-1-он.
Получают из соединения примера 96 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,47-7,31 (м, 5Н), 6,88-6,47 (м, 3Н), 4,78-4,76 (м, 1Н), 4,48-4,44 (м, 1Н), 3,80-3,06 (сл., 13Н), 1,88-1,80 (м, 6Н), 1,67-1,64 (м, 2Н); 1,02 (д, 3Н), 0,75 и 0,34 (с, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 467,5 (т+1).
Пример 98.
Я1 = С5Н9; Я3 = (Я)-С 'ОС'11(ΝΙ Κ'ΒΖΚ'Ι ΠΡΙ1 №{(1Я)-2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксо-1-бензилэтил}(фенилметокси)карбоксамид.
Получен из промежуточного продукта 68 посредством процедуры ацилирования с основанием Хюнига промежуточного примера 74 с использованием п-нитрофенилового эфира Ν-Ο'ΒΖ-(Β)фенилаланина.
ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,41-7,19 (м, 10Н), 6,77-6,46 (м, 3Н), 5,70 (д, 1Н), 5,14-5,04 (м, 2Н), 4,76-4,69 (м, 2Н), 3,82 (с, 3Н), 3,93-2,99 (сл., 6Н), 2,53 (д 1Н), 1,93-1,81 (м, 6Н), 1,62-1,56 (м, 2Н); 1,06 (дд, 3Н), 0,67 и 0,28 (с, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 602,3 (т+1). Пример 99.
Я1 = С5Н9; Я3 = (Я)-СОСН(1\1Н2)СН2Рй (2Я)-1-[3-((1Я)-1 -Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-амино-3 -фенилпропан-1-он.
Получают из соединения примера 98 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
'Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,42-7,26 (м, 5Н), 6,88-6,65 (м, 3Н), 4,80-4,78 (м, 1Н), 4,42-4,39 (м, 1Н), 3,89-2,42 (сл., 13Н), 1,89-1,79 (м, 6Н), 1,64-1,62 (м, 2Н); 0,99 (дд, 3Н), 0,69 и 0,21 (с, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 467,0 (т+1).
- 74 005686
2-{(38,48)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4- [3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил ]-3 -метилпирролидинил}-2-оксо-1-пропилэтилацетат.
Промежуточный продукт 67 (46 мг, 0,15 ммоль) превращают процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (±)-2-ацетоксипропионилхлорида (29 мг, 0,165 ммоль), получая при этом соединение примера 100 (36 мг, 54%).
1Н ЯМР (400 МГц, ΟΌΟ13) δ: 6,86-6,69 (м, 3Н), 5,30-5,02 (м, 1Н), 4,17-4,00 (м, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 3,823,18 (м, 5Н), 3,08 и 2,97 (синглеты, 2Н, ротамеры), 2,13 и 2,11 (синглеты, 3Н, ротамеры), 1,95-1,23 (м, 5Н), 1,20-1,14 (м, 2Н), 1,00-0,92 (м, 3Н), 0,76 и 0,72 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,62 (м, 2Н), 0,36 (м, 2Н).
/
Пример 101.
В1 = СН2С3Н5; В3 = СОСН(ОН)С4Н9
1-{(38,48)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4- [3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил ]-3 -метилпирролидинил}-2-гидроксипентан-1-он.
Соединение примера 100 (36 мг, 80 мкмоль) подвергают процедуре гидролиза Ь1ОН промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 101 в виде прозрачной пленки (30 мг, 90%).
1Н ЯМР (400 МГц, ΟΌΟ13) δ: 6,85-6,73 (м, 3Н), 4,23 (м, 1Н), 4,07-2,98 (м, 6Н), 3,83 (с, 3Н), 1,71-1,23 (м, 5Н), 1,16 (м, 3Н); 0,96 (м, 3Н), 0,77 (с, 3Н), 0,62 (м, 2Н), 0,37 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа-е 406,5 (т+1).
Пример 102.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(СН3)ОСН2РЬ
1-{(38,48)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4- [3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил ]-3 -метилпирролидинил }-(28)-2-(фенилметокси)пропан-1-он.
Промежуточный продукт 67 (46 мг, 0,15 ммоль) превращают процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (28)-2-(фенилметокси)пропаноилхлорида (59 мг, 0,3 ммоль), получая при этом соединение примера 102 (54 мг, 77%).
1Н ЯМР (400 МГц, ΟΌΟ13) δ: 7,40-7,25 (м, 5Н), 6,82-6,77 (м, 2Н), 6,72 (с, 1Н), 4,63 (дд, 1Н) 4,49 (дд, 1Н), 4,22 (м, 1Н), 3,98-3,38 (м, 8Н), 3,82 (с, 3Н), 3,07 и 2,96 (синглеты, 1Н, ротамеры), 1,43 (м, 3Н), 1,31 (м, 1Н), 1,17 и 1,10 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,72 и 0,70 (синглеты, 3Н, ротамеры), 0,62 (м, 2Н), 0,37 (м, 2Н).
- 75 005686
Пример 103.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (8)-СОСН(СН3)ОН
1-{(38,48)-3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(28)-2-(гидрокси)пропан-1-он.
Соединение примера 103 получают в виде прозрачного масла (45 мг, 100%) из соединения примера 102 (54 мг, 0,12 ммоль) процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 6,84-6,73 (м, 3Н), 4,44 (м, 1Н), 4,06-3,16 (м, 8Н), 3,82 (с, 3Н), 2,99 (д, 1Н), 1,38 (м, 3Н, ротамеры), 1,30 (м, 1Н), 1,18 (м 3Н, ротамеры), 0,78 и 0,76 (синглеты, 3Н, ротамеры), 0,62 (м, 2Н), 0,36 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа-'е 378,7 (т+1).
Пример 104.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (К)-СОСН(1-Ви)ЫНСО2-1-Ви
Ы-((1К)-2-{(38,48)-3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3метилпирролидинил}-1-(трет-бутил)-2-оксоэтил)(трет-бутокси)карбоксамид.
Промежуточный продукт 67 (46 мг, 0,15 ммоль) превращают процедурой сочетания ΕΌΟ примера 27 с использованием Вос-Э-трет-бутилглицина (35 мг, 0,15 ммоль), получая при этом соединение примера 104 в виде белой пены (62 мг, 80%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 6,85-6,79 (м, 2Н), 6,72-6,64 (м, 1Н), 4,36-4,00 (м, 3Н, ротамеры), 3,83 (с, 3Н), 3,79 (д, 2Н), 3,67-3,12 (м, 4Н, ротамеры), 1,44 и 1,41 (синглеты, 9Н, ротамеры), 1,32 (м, 1Н), 1,22-1,16 (м, 3Н), 1,06 и 1,01 (синглеты, 9Н, ротамеры), 1,02 (м, 3Н), 0,73 и 0,63 (синглеты, 3Н, ротамеры), 0,61 (м, 2Н), 0,36 (м, 2Н).
Пример 105.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (К)-СОСН(1-Ви)ЫН2 (2К)-1-{(38,48)-3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-амино-3,3-диметилбутан-1-он.
К перемешиваемому раствору соединения примера 104 (62 мг, 0,12 ммоль) в СН2С12 (1,5 мл) при комнатной температуре в колбе с пробкой добавляют трифторуксусную кислоту (77 мкл, 1 ммоль). По сле перемешивания в течение ночи реакционную смесь концентрируют в вакууме, получая при этом сырой продукт, который, как оказалось, содержит в качестве примеси трифторацетатный эфир. Сырой продукт растворяют в смеси 3:2 ТГФ:Н2О (1,5 мл) при комнатной температуре и перемешивают в колбе с пробкой и обрабатывают моногидратом Ь1ОН (42 мг, 1 ммоль). Спустя 1 ч смесь распределяют между ΕΐΟАс (15 мл) и водой (15 мл). Органические слои отделяют, сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом соединение примера 105 в виде белой пены (35 мг, 70%).
- 76 005686
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 6,85-6,82 (м, 2Н), 6,78-6,73 (м, 1Н), 4,01-3,30 (м, 9Н), 3,83 (с, 3Н), 1,18 и 1,12 (дублеты, 3Н, ротамеры), 1,06 и 1,02 (синглеты, 9Н, ротамеры), 0,78 и 0,68 (синглеты, 3Н, ротамеры), 0,63 (м, 2Н), 0,37 (м, 2Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 419,4 (т+1).
Пример 106.
В1 = Н; В3 = (Ι\)-('()(Ί Ι((Ί ΓΟΓΙΜ’ΜΝΙ ΚΊΓ-Ι-Βιι №{2-[(38,48)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил ](1В)-2-оксо-1-[(фенилметокси)метил]этил}(трет-бутокси)карбоксамид.
К перемешиваемому раствору Ν-Вос-О-бензил-О-серина (2,95 г, 10 ммоль) в ТГФ (50 мл) при -78°С в атмосфере азота добавляют Ν-метилморфолин (3,3 мл, 30 ммоль) с последующим добавлением изобутилхлорформиата (1,3 мл, 10 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин при помощи канюли добавляют раствор/суспензию промежуточного продукта 70 (2,51 г, 10 ммоль) в ТГФ (50 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при -78°С, затем нагревают до 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь затем частично концентрируют роторным испарителем приблизительно до 25 мл и распределяют между ΕΐОΑс (250 мл) и 2н. НС1 (250 мл). Органические слои промывают 2н. НС1 (2 х 250 мл), насыщенным №НСО3 (3 х 250 мл) и насыщенным №С1 (1 х 250 мл). Органические слои сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом соединение примера 106 в виде желтого масла (4,2 г, 79%).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,36-7,21 (м, 5Н), 6,81-6,63 (м, 3Н), 5,81 (шир. с, 1Н), 5,47 (м, 1Н), 4,73 (м, 1Н), 4,51 (м, 2Н), 4,00-3,40 (м, 83,83 Н), 3,84 и 3,82 (синглеты, 3Н, ротамеры), 1,43 и 1,41 (синглеты, 9Н, ротамеры), 1,13 и 1,06 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,95 (м, 1Н), 0,73 и 0,45 (синглеты, 3Н, ротамеры).
Пример 107.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (Ι\)-('Ο(Ί Ι((Ί ΓΟΓΙΒΡΜΝΙ ΚΧΓ-Ι-Βιι №(2-{(38,48)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(18)-2-оксо-1-[(фенилметокси)метил]этил)(трет-бутокси)карбоксамид.
К перемешиваемому раствору соединения примера 106 (4,2 г, 7,9 ммоль) в ДМФ (24 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота добавляют порошкообразный К2СО3 (5,45 г, 39,5 ммоль) с последующим добавлением бромметилциклопропана (1,53 мл, 15,8 ммоль). Суспензию нагревают до 65°С в течение 4 ч, затем обрабатывают еще одной порцией бромметилциклопропана (1,53 мл, 15,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение еще 16 ч при 65°С, затем охлаждают до комнатной температуры и распределяют между ΕΐОΑс (500 мл) и водой (500 мл). Органические слои промывают водой (3 х 500 мл) и насыщенным №С1 (1 х 500 мл), сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой продукт делят на две порции и хроматографируют на колонке Вю(аде 40М с применением смеси 1/1 ЕЮАс/гексан, получая при этом после объединения и концентрирования в вакууме фракций, содержащих продукт, соединение примера 107 (2,11 г, 46%). Диалкилированный продукт с высоким В был идентифицирован в качестве основной примеси.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 7,36-7,22 (м, 5Н), 6,81-6,71 (м, 3Н), 5,42 (м, 1Н), 4,73 (м, 1Н), 4,51 (м, 2Н), 4,04-3,44 (м, 10Н), 3,83 и 3,81 (синглеты, 3Н, ротамеры), 1,42 и 1,43 (синглеты, 9Н, ротамеры), 1,32 (м, 1Н), 1,16 и 1,06 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,76 и 0,45 (синглеты, 3Н, ротамеры), 0,62 (м, 2Н), 0,37 (м, 2Н).
- 77 005686
Пример 108.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (В)-СОСН(СН2ОН)\НСО2-1-Ви \-(2-{(38,48)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-(1 В)-1 -(гидроксиметил)-2-оксоэтил)(трет-бутокси)карбоксамид.
Соединение примера 107 (2,1 г, 3,6 ммоль) подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 108 в виде белой пены (1,75 г, 100%).
1Н ЯМР (СПС13/СП3ОП, 400 МГц) δ: 6,83-6,71 (м, 3Н), 5,70 (шир. д, 1Н), 4,55 (м, 1Н), 4,09-3,38 (м, 10Н), 3,83 (с, 3Н), 1,44 (с, 9Н), 1,33 (м, 1Н), 1,18 (м, 3Н); 0,73 (д, 3Н), 0,62 (м, 2Н), 0,37 (м, 2Н).
но^'у^о ннэ+аПример 109.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (В)-СОСН(СН2ОН)\Н2
Г идрохлорид 1 - {(3 8,48)-(( 1В)-1 -гидроксиэтил)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3метилпирролидинил}-(2В)-2-амино-3-гидроксипропан-1-она.
К перемешиваемому раствору соединения примера 108 (1,75 г, 3,6 ммоль) в диоксане (16 мл) при комнатной температуре и с применением осушающей трубки добавляют 4н. НС1 в диоксане (16 мл). Прозрачный раствор перемешивают в течение 4 ч, затем концентрируют в вакууме, получая при этом соединение примера 109 в виде рыжевато-коричневой пены (1,5 г, 97%).
Ή ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 6,85-6,76 (м, 3Н), 4,36 (м, 1Н), 4,13-3,31 (м, 10Н), 3,84 (с, 3Н), 1,29 (м, 1Н), 1,17 и 1,12 (дублеты, 3Н, ротамеры), 1,77 и 1,75 (синглеты, 3Н, ротамеры), 0,62 (м, 2Н), 0,36 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 393,4 (т+1).
Пример 110.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(ОАс)С8Нп
2-{3-((1В)-1 -Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(18)-1 -циклогексил-2-оксоэтилацетат.
Промежуточный продукт 67 (91 мг, 0,6 ммоль) сочетают процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием хлорангидрида (8)-(+)-ацетоксигексагидроминдальной кислоты (100 мкл, 4,98М в СН2С12, 1,7 экв.), получая при этом соединение примера 110 в виде прозрачного, бесцветного масла (89 мг, 61%).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 488,6 (т+1).
- 78 005686
Пример 111.
К1 = СН2СзН5; К3 = (8)-СОСН(ОН)СбНп
1-{3-((1 К)-1 -Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(28)-2-циклогексил-2-гидроксиэтан-1-он.
Соединение примера 110 (89 мг, 0,18 ммоль) подвергают процедуре гидролиза МОН промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 111 в виде прозрачной, бесцветной пленки (44 мг, 54%).
1Н ЯМР (400 МГц, С^С1з) δ: 6,80-6,78 (м, 3Н), 3,88-3,52 (сл., 10Н), 3,34-3,26 (дд, 1Н), 2,98 (д, 1Н), 2,12 (шир. с, 1Н), 1,77-1,10 (сл., 16Н), 0,75-0,73 (д, 3Н), 0,62-0,59 (м, 2Н), 0,34-0,31 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 446,6 (т+1).
Пример 112.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (К)-СОСН(ОАс)С6Нп (1К)-2-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-1-циклогексил-2-оксоэтилацетат.
Промежуточный продукт 67 (76 мг, 0,25 ммоль) сочетают процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с хлорангидридом (К)-(-)-ацетоксигексагидроминдальной кислоты (100 мкл, 4,16М в СН2С12, 1,7 экв.), получая при этом соединение примера 112 в виде прозрачного, бесцветного масла (75 мг, 62%).
ЬКМ8 (электрорасныление, положительные ионы): Оа/е 488,7 (т+1).
Пример 113.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (К)-СОСН(ОН)С6НП (2К)-1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопронилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-2-циклогексил-2-гидроксиэтан-1-он.
Соединение примера 112 (75 мг, 0,15 ммоль) подвергают процедуре гидролиза МОН промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 113 в виде прозрачной, бесцветной пленки (35 мг, 51%).
1Н ЯМР (400 МГц, С^С1з) δ: 6,81-6,73 (м, 3Н), 3,85-3,59 (сл., 11Н), 2,99-2,98 (д, 1Н), 2,03-1,15 (сл., 17Н), 0,73 (с, 3Н), 0,64-0,60 (м, 2Н), 0,35-0,32 (м, 2Н). (т+1).
ЬКМ8 (электрорасныление, положительные ионы): Оа/е 446,5 (т+1).
- 79 005686
Пример 114.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (В)-СОСН(С4Н9)К[НСО2СН2Рй
Ν-((1 В)-2- {3-((1 В)- 1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 метилпирролидинил }-1-бутил-2-оксоэтил(фенилметокси)карбоксамид.
Промежуточный продукт 67 (41 мг, 0,013 ммоль) сочетают процедурой с применением основания Хюнига промежуточного продукта 74 с 2-Э-Ме-ОХр (57 мг, 0,15 ммоль, 1,1 экв.), получая при этом соединение примера 114 в виде прозрачного, бесцветного масла (29,9 мг, 40%).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 553,6 (т+1).
Пример 115.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (В)-СОСН(С4Н9)ХН2 (2В)-1-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-аминогексан-1-он.
Соединение примера 114 (29,9 мг, 0,054 ммоль) подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 115 в виде белого порошка (18,8 мг, 83%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 6,83-6,62 (м, 3Н), 4,17-4,08 (м, 2Н), 3,85-3,61 (сл., 9Н), 3,32-3,29 (т, 1Н),
3,13-3,11 (д, 1Н), 2,04-1,78 (м, 3Н), 1,52-1,21 (сл., 10Н), 0,92-0,88 (т, 3Н), 0,62-0,58 (м, 5Н), 0,34-0,30 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 419,4 (т+1).
Пример 116.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (В)-СОСН(1-Рг)ХНСО2СН2РЪ
Ν-((1 В)-2- {3-((1 В)-1 -Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинил}-1-(метилэтил)-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Промежуточный продукт 67 (41 мг, 0,13 ммоль) сочетают процедурой с применением основания Хюнига промежуточного продукта 74 с 2-П-Уа1-О8и (52,2 мг, 0,15 ммоль, 1,1 экв.), получая при этом соединение примера 116 в виде прозрачного, бесцветного масла (64,8 мг, 89%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 7,35-7,32 (м, 5Н), 6,81-6,69 (м, 3Н), 5,65-5,61 (т, 3Н), 5,28-5,01 (м, 2Н), 4,34-2,78 (м, 10Н), 2,08-1,98 (м, 1Н), 1,31-0,91 (сл., 8Н), 0,71-0,68 (д, 3Н), 0,64-0,59 (м, 2Н), 0,38-0,31 (м, 2Н).
- 80 005686
Пример 117.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (1<)-С(.)С11(|-Рг)\Н2 (2К)-1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-2-амино-3-метилбутан-1-он.
Соединение примера 116 (64,8 мг, 0,120 ммоль) подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 117 в виде светлого твердого вещества (38,9 мг, 80%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,77-6,59 (м, 3Н), 4,41 (с, 1Н), 4,23-4,12 (м, 2Н), 3,853,60 (сл., 9Н), 3,24 (с, 1Н), 3,15-3,13 (д, 1Н), 2,40 (шир. с, 1Н), 1,29-1,14 (м, 11Н), 0,62-0,58 (м, 5н), 0,330,29 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 405,5 (т+1).
Пример 118.
К1 = Н; К3 = СЮСНгЗАс
1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2ацетилтиоэтан-1-он.
Промежуточный продукт 70 (173 мг, 0,694 ммоль) растворяют в диоксане (2 мл) и по каплям добавляют 1М К2СО3 (1 мл). Добавляют хлорангидрид ацетоксимеркаптоуксусной кислоты (100 мкл, 13,9М в диоксане, 2 экв.) и раствор энергично перемешивают в течение 1 ч. Раствор разбавляют ЕЮЛе (30 мл) и органические слои промывают 1М К2СО3 (20 мл), затем насыщенным раствором соли (20 мл), Органический слой сушат над Ν28Ο4 и концентрируют в вакууме. Образовавшееся масло хроматографируют на колонке с диоксидом кремния (смесь 1:1 ЕЮ Ас: гексаны), получая при этом прозрачное, бесцветное масло (34 мг, 13%).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,85-6,82 (м, 3Н), 3,92-2,98 (сл., 12Н), 2,39 (с, 3Н), 1,15-1,11 (т, 3Н), 0,75-0,73 (д, 3Н).
Пример 119.
К1 = СН2С3Н5; К3 = ΌΟΌ^δΆο
1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-ацетилтиоэтан-1-он.
В колбу, содержащую безводный К2СО3 (52 мг, 0,37 ммоль, 4,0 экв.), в атмосфере азота добавляют раствор соединения примера 118 (34 мг, 0,093 ммоль, 1 экв.) в безводном ДМФ (1 мл). К смеси посредством шприца добавляют циклопропилметилбромид (40 мкл, 0,37 ммоль, 4,0 экв.). Суспензию перемешивают при 65°С на протяжении ночи. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, затем разбавляют водой (50 мл). Водный раствор экстрагируют ЕЮЛе (3 х 30 мл) и объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли (50 мл), затем сушат над №28Ο4, фильтруют и концентрируют в вакууме. Образовавшееся масло очищают препаративной ТСХ на пластине (100% ЕЮЛе), получая при этом прозрачное, бесцветное масло (13,9 мг, 36%).
- 81 005686 1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 7,10-6,75 (м, 3Н), 3,91-3,32 (сл., 11Н), 2,64-2,61 (м,
/ о
Пример 120.
Я1 = СН2С3Н5; Я3 = СОСН28Н
1-{3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-сульфанилэтан-1-он.
Соединение примера 119 (13,9 мг, 0,0329 ммоль) подвергают процедуре гидролиза МОН промежуточного продукта 5, получая при этом прозрачное, бесцветное масло (7,2 мг, 58%).
1Н ЯМР (СВ3ОН, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,86-6,75 (м, 3Н), 3,83-3,11 (сл., 13Н), 2,60-2,56 (д,
2Н), 1,39-0,85 (м, 4Н), 0,76-0,74 (м, 3Н), 0,58-0,56 (м, 2Н), 0,35-0,24 (м, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Паю 380,5 (т+1).
Пример 121.
Я1 = СН2С3Н5; Я3 = СОСН^НСО2СН2РЪ №(2-{3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-оксоэтил(фенилметокси)карбоксамид.
Промежуточный продукт 67 ацилируют процедурой с применением основания Хюнига промежуточного продукта 74 п-нитрофениловым эфиром Ν-СВ/-глицина, получая при этом соединение примера
121.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 7,42-7,28 (м, 5Н), 6,83-6,75 (м, 3Н), 5,87-5,80 (м, 1Н),
5,13 (с, 2Н), 4,08-3,15 (сл., 13Н), 1,39-1,24 (м, 1Н), 1,14 (т, 3Н), 0,73 (д, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,39-0,31 (м, 2Н).
Пример 122.
Я1 = СН2С3Н5; Я3 = ^^ΝΉζ
1-{3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-аминоэтан-1-он.
Соединение примера 121 подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 122.
1Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,94-6,84 (м, 3Н), 4,01-3,27 (сл., 13Н), 1,29-1,18 (м, 3Н), 0,79-0,73 (м, 3Н), 0,62-0,55 (м, 2Н), 0,35-0,29 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 363,2 (т+1).
Пример 123.
Я1 = СН2С3Н5; Я3 = СОСН^Н8О2СН3
- 82 005686
-{3-((1К)-1 -Гидроксиэтил )-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси )-4-метоксифенил ]-3-метилпирролидинил }-2-[(метилсульфонил)амино]этан-1-он.
Ацилирование соединения примера 122 процедурой сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием метансульфонилхлорида дает соединение примера 123.
1Η ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 6,86-6,75 (м, 3Η), 5,48-5,42 (м, 1Н), 4,00-3,57 (сл., 11Н), 3,46 и 3,15 (д и д, 1Н), 3,00 (с, 3Η), 1,67 (дд, 1Н), 1,36-1,24 (м, 1Н), 1,16 (т, 3Η), 0,76 (д, 3Η), 0,660,60 (м, 2Н), 0,39-0,32 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 441,3 (т+1).
Пример 124.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОСН2NН8Ο2СΡ3
-{3-((1К)-1 -Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-{ [(трифторметил)сульфонил]амино}этан-1-он.
Сульфонилирование соединения примера 122 процедурой сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием трифторметансульфонилхлорида дает соединение примера 124.
1Η ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 6,85-6,77 (м, 3Η), 4,13-3,10 (сл., 13Н), 1,15 (т, 3Η), 0,76 (д, 3Η), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,40-0,32 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 495,3 (т+1).
Пример 125.
К1 = СΗ2СзΗ5; К3 = СΟСΗ2NМе2
-{3-((1К)-1 -Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-2-(диметиламино)этан-1-он.
Реакция сочетания ΕΙΧΊ в твердой фазе.
В реакционную колбу, снабженную лопастной мешалкой, загружают смолу НОС (164 мг, 0,082 ммоль, 0,5 ммоль/г), NМΡ (2 мл) и Ν,Ν-диметилглицин (20 мг, 0,143 ммоль). Образовавшуюся смесь оставляют для перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем добавляют промежуточный продукт 67 и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч, затем фильтруют. Смолу споласкивают несколько раз NМΡ. Все промывочные жидкости и фильтрат объединяют и выдерживают при пониженном давлении для удаления растворителя. Очистка остатка на Вю1аде (картридж 128, 5% МеΟΗ/СΗ2С12/1% ΝΗ4ΟΗ) дает 8 мг (25%) прозрачной пленки.
1Η ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 6,87-6,72 (м, 3Η), 4,07-2,97 (сл., 13Н), 2,35 (д, 6Н), 1,35-1,25 (м, 1Н), 1,17 (т, 3Η), 0,74 и 0,64 (с и с, 3Η), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,37-0,32 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 391,5 (т+1).
Пример 126.
К1 = СΗ2СзΗ5; К3 = (8)-€Ο€Ή^)ΝΗ€Ο2€Ή2ΡΗ №(2-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-(18)-1-метил-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Ацилирование промежуточного продукта 67 процедурой ΕΙΧΊ в твердой фазе примера 125 соединением Σ-Άΐη-Ο^ дает соединение примера 126.
- 83 005686 1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,38-7,26 (м, 5Н), 6,84-6,74 (м, 3Н), 5,86 (дд, 1Н),
5,14-5,08 (м, 2Н), 4,56 (квинтет, 1Н), 3,87-3,32 (сл., 11Н), 1,43-1,34 (дд, 3Н), 1,33-1,24 (м, 1Н), 1,13 (д, 3н), 0,74 (с, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,37-0,32 (м, 2Н).
1.1ВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 511,7 (т+1).
Пример 127.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(СН3^Н2
1-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинил}-(28)-2-аминопропан-1-он.
Соединение примера 126 подвергают процедуре промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 127.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 8,44-8,16 (шир. с, 2Н), 6,82-6,56 (м, 3Н), 4,53-3,02 (сл., 12Н), 1,43-1,34 (дд, 3Н), 1,33-1,24 (м, 1Н), 1,13 (д, 3Н), 0,74 (с, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,37-0,32 (м, 2Н).
1.1ВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 377,3 (т+1).
Пример 128.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(СН3^СО2СН2РЬ №((1В)-2-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3метилпирролидинил }-1-метил-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры ацилирования соединения примера 7 соединением 2-О-А1а-О8и.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,28 (м, 5Н), 6,85-6,74 (м, 3Н), 5,80 (т, 1Н), 5,10 (д, 2Н), 4,57-4,47 (м, 1Н), 3,99-3,12 (сл., 11Н), 1,40-1,24 (м, 4Н), 1,14 (д, 3Н), 0,73 (с, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,38-0,31 (м, 2Н).
1.1ВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 511,6 (т+1).
Пример 129.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (В)-СОСН(СН3^Н2 (2В)- 1-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-аминопропан-1-он.
Получают из соединения примера 128 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 8,60-8,27 (шир. м, 3Н), 6,87-6,58 (м, 3Н), 4,75-3,10 (сл., 12Н), 1,74-1,59 (м, 3Н), 1,33-1,05 (м, 4Н), 0,66-0,55 (м, 5Н), 0,35-0,27 (м, 2Н).
1.1ВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 377,2 (т+1).
- 84 005686
Пример 130.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (8)-СΟСН(^-Ρ^)NНСΟ2СН2Ρй
Ы-(2-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(18)-1 -(метилэтил)-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры ацилирования примера 7 соединением Ζ-Vа1-ΟNр.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,42-7,27 (м, 5Н), 6,84-6,75 (м, 3Н), 5,63 (дд, 1Н),
5,15-5,02 (д, 2Н), 4,40-4,07 (дм, 1Н), 3,87-3,33 (ел, 12Н), 2,08-1,95 (м, 1Н), 1,34-1,25 (м, 1Н), 1,14 (т, 3Н), 1,04-0,90 (м, 6Н), 0,73 (с, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,38-0,31 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 539,5 (т+1).
Ан,
Пример 131.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (8)-СΟСН(^-Ρ^)NН2 1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-(28)-2-амино-3-метилбутан-1-он.
Получают из соединения примера 130 посредством способа дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13, смесь ротамеров) δ: 8,37 (шир. с, 3Н), 6,82-6,63 (м,3Н), 4,24-3,53 (сл, 11Н), 3,19 (д, 1Н), 2,45-2,32 (м, 2Н), 1,34-1,04 (м, 10Н), 0,64 (с, 3Н), 0,63-0,56 (м, 2Н), 0,36-0,29 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 405,4 (т+1).
Пример 132.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (8)-СОСН(СН2СН(СН3)СН3)ЫНСО2СН2Рй
Ы-(2-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-(18)-1 -(2-метилпропил)-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры ацилирования с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием Ζ-^еи-ΟNр.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,43-7,26 (м, 5Н), 6,84-6,75 (м, 3Н), 5,61 (дд, 1Н),
5,16-5,04 (м, 2Н), 4,63-4,55 (м, 1Н), 3,90-3,34 (сл., 12Н), 1,80-1,68 (м, 1Н), 1,64-1,40 (м, 2Н), 1,36-1,24 (м, 1Н), 1,14 (д, 3Н), 1,05-0,92 (м, 6Н), 0,74 (д, 3Н), 0,65-0,59 (м, 2Н), 0,37-0,32 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 553,7 (т+1).
- 85 005686
Пример 133.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (8)-СОСН(СН2СН(СН3)СН3)КН2
1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-(28)-2-амино-4-метилнентан-1-он.
Получают из примера 132 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31. 1Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,96-6,86 (м, 3Н), 4,33-4,28 (м, 1Н), 4,03-3,28 (сл., 11Н), 1,87-1,65 (м, 3Н), 1,29-1,18 (м, 1Н), 1,14-0,96 (м, 9Н), 0,76 (д, 3н), 0,61-0,55 (м, 2Н), 0,36-0,29 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 419,5 (т+1).
Пример 134.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (К)-СОСН(СН2СН(СН3)СН3)КНСО2СН2РЬ №((1К)-(2-{3-((1К)-1-Г идроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3метилпирролидинил }-1-(2-метилпропил)-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством способа ацилирования с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием 7-О-Геи-О№.
'Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,28 (м, 5Н), 6,85-6,70 (м, 3Н), 5,57 (дд, 1Н),
5,14-5,04 (м, 2Н), 4,58-4,49 (м, 1Н), 4,11-3,19 (сл., 11Н), 1,78-1,66 (м, 1Н), 1,60-1,22 (м, 3н), 1,15 (дд, 3Н), 1,03-0,85 (м, 6н), 0,72 (д, 3Н), 0,65-0,57 (м, 2Н), 0,38-0,30 (м, 2Н).
ШМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 553,7 (т+1).
Пример 135.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (К)-СОСН(СН2СН(СН3)СН3)ЯН2 (2К)-1 -{3-((1К)- 1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-амино-4-метилпентан-1-он.
Получают из соединения примера 134 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
'Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,97-6,91 (м, 2Н), 6,88-6,83 (м, 1Н), 4,29-3,25 (сл., 11Н), 1,85-1,59 (м, 3Н), 1,30-1,19 (м, 1н), 1,10 (дд, 3Н), 1,06-0,93 (м, 6Н), 0,77 (дд, 3Н), 0,62-0,55 (м, 2Н), 0,36-0,29 (м, 2Н).
ШМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 419,5 (т+1).
- 86 005686
Пример 136.
В1 = СН2С3Н5; В3 = СОСН(С4Н9)ХНСО2СН2РЬ
Ν-(2-{3-((1 В)-1 -Г идроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(18)-1-бутил-2- оксоэтил )(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством способа ацилирования примера 7 с использованием 2^Ьеи-О^.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,25 (м, 5Н), 6,85-6,75 (м, 3Н), 5,69 (дд, 1Н),
5,14-5,05 (м, 2Н), 4,56-4,50 (м, 1Н), 3,87-3,34 (сл., 11Н), 1,80-1,54 (м, 2Н), 1,43-1,24 (м, 5Н), 1,14 (м, 3Н), 0,96-0,85 (м, 3Н), 0,74 (с, 3Н), 0,65-0,61 (м, 2н), 0,37-0,32 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Пае 553,8 (т+1).
Пример 137.
В1 = СН2С3Н5; В3 = СОСН(С4Н9)т2
1-{3-((1 В)-1 -Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3 -(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинил }-(28)-2-аминогексан-1-он.
Получают из примера 136 посредством способа дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,96-6,85 (м, 3Н), 4,33-4,25 (м, 1Н), 4,02-3,47 (сл., 11Н), 1,96-1,79 (м, 2Н), 1,51-1,35 (м, 4Н), 1,30-1,19 (м, 1Н), 1,11 (дд, 3Н), 1,03-0,93 (м, 3Н), 0,77 (д, 3Н), 0,62-0,56 (м, 2Н), 0,35-0,30 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а е 419,5 (т+1).
Пример 138.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (В)-СОСН(С6Н11)ОТ2СО2СН2Рй
Ν-((1 В)-2- {3-((1 В)-1 -Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3метилпирролидинил}-(1В)-циклогексил-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Процедура сочетания ЕОИ/НОВВ
В реакционную колбу, снабженную лопастной мешалкой, загружают Ν-карбоксибензил-Эциклогексилглицин (23,8 мг, 0,0819 ммоль), сухой СН2С12 (350 мкл), ЕОС1 (15,7 мг, 0,0819 ммоль) и гидроксибензотриазол (НОВТ) (12,5 мг, 0,0819 ммоль). Данную смесь оставляют для перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч и в виде одной порции добавляют промежуточный продукт 67 (25 мг, 0,0819 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 48 ч реакционную смесь разбавляют СН2С12 (5 мл), промывают 1н. НС1 (2 х 20 мл), насыщенным раствором ХаНСО3 (1 х 20 мл), сушат (Ха28О4 и концентрируют до 27 мг (57%) белой пены.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,39-7,29 (м, 5Н), 6,86-6,78 (м, 2Н), 6,75-6,68 (м, 1Н), 5,54 (дд, 1Н), 4,37-3,25 (сл., 12Н), 1,81-1,56 (м, 5Н), 1,36-0,95 (м, 10Н), 0,71 (д, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2н), 0,39-0,31 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Пае 580,2 (т+1).
Пример 139.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(С6Нп)ХН2 (2В)-1-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-амино-2-циклогексилэтан-1-он.
Получают из соединения примера 138 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,95-6,78 (м, 3Н), 4,10-3,20 (сл., 12Н), 1,96-1,62 (м, 5Н), 1,39-1,02 (м, 10Н), 0,75 (д, 3Н), 0,62-0,51 (м, 2Н), 0,35-0,23 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а е 445,5 (т+1).
- 87 005686
Пример 140.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(1-Би^СО2СН2РЬ №((1В)-2-{3-((1В)-1 -Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинил}-(18)-2-циклогексил-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания ЕПС1/НОБТ примера 138 с использованием Ν-карбобензил-Б-трет-бутилглицина.
Ή ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,39-7,29 (м, 5Н), 6,84-6,76 (м, 3Н), 5,59-5,53 (м, 1Н),
5,14-5,02 (м, 2Н), 4,34 (дд, 1Н), 3,87-3,33 (сл., 10Н), 1,34-1,24 (м, 1Н), 1,14 (дд, 3Н), 0,74 (д, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,39-0,31 (м, 2Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 554,2 (т+1).
»-вц
Пример 141.
1-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(28)-2-амино-3,3-диметилбутан-1-он.
Получают из примера 140 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (Метанол-й4, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,98-6,86 (м, 3Н), 4,16-3,33 (сл., 12Н), 1,29-1,20 (м, 1Н), 1,15-0,97 (м, 12Н), 0,75 (д, 3Н), 0,62-0,56 (м, 2Н), 0,36-0,30 (м, 2Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 419,5 (т+1).
Пример 142.
1-{(3В)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4-[3-(трет-бутокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2(фенилметокси)этан-1-он.
Промежуточный продукт 73 (775 мг, 2,53 ммоль) сочетают с бензилоксиацетилхлоридом (497 мкл, 3,16 ммоль) процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74, получая при этом соединение примера 142 в виде коричневой пены (978 мг, 85%).
Ή ЯМР (400 МГц, СБС13) δ: 7,41-7,30 (м, 5Н), 6,90 (м, 2Н), 6,81 (д, 1Н), 4,64 (дд, 2Н), 4,15 (дд, 2Н), 3,95 (дд, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 3,62 (дд, 1Н), 3,57 (м, 2Н), 3,44 (д, 1н), 3,21 (д 1Н), 1,33 (с, 9Н), 1,16 и 1,11 (два дублета, 3Н, ротамеры), 0,73 (д, 3Н, ротамеры).
Пример 143.
В1 = Н; В3 = СОСН2ОСН2Рй
1-[(3В)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-(фенилметокси)этан-1-он.
К перемешиваемому раствору соединения примера 142 (750 мг, 1,65 ммоль) в СН2С12 (6,6 мл) при 0°С с осушающей трубкой добавляют трифторуксусную кислоту (763 мкл, 9,9 ммоль). Охлаждающую баню удаляют и реакционной смеси дают возможность нагреться до комнатной температуры, затем перемешивают в течение 3,5 ч. Реакционную смесь концентрируют роторным испарением для удаления избыточной трифторуксусной кислоты, затем разбавляют СН2С12 (30 мл) и промывают 10% №28О4 (2 х 3 мл). Органические слои сушат (Мд8О4), фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом соединение примера 143. Флэш-хроматография в ЕЮАс дает после объединения и концентрирования в вакууме фракций, содержащих продукт, соединение примера 143 в виде белой пены (650 мг, 98%).
- 88 005686 1Н ЯМР (400 МГц, С^С1з) δ: 7,42 (м, 5Н), 6,83-6,70 (м, 3Н), 4,64 (с, 2Н), 4,16 (с, 2Н), 3,93 (дд, 1Н), 3,95 (с, 3Н), 3,78 (д, 1Н), 3,74 (дд, 2Н), 3,67-5,52 (м, 4Н), 3,44 (д, 1Н), 3,20 (д, 1Н), 1,16 и 1,10 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,73 (с, 3Н).
/ О
Пример 144.
К1 = СН2С(СН3)(СН2СН2); К3 = ('О('11;ОС1 ЫФ 2-Бензилокси-1-(3-((1К)-1-гидроксиэтил)-(3Б,4Б)-4-[4-метокси-3-(1-метилциклопропилметокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил)этанон.
Процедура Мицунобу в твердой фазе.
К перемешиваемому раствору соединения примера 143 (40 мг, 0,1 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) при комнатной температуре в коническом реакционном сосуде с пробкой добавляют РБ-трифенилфосфин (1,65 ммоль/г, 182 мг, 0,3 ммоль). После медленного перемешивания суспензии в течение 5 мин для набухания геля добавляют 1-метилциклопропанметанол (29 мкл, 0,3 ммоль) и реакционную смесь охлаждают до 0°С. Суспензию затем обрабатывают ^IАС (59 мкл, 0,3 ммоль) и реакционную смесь нагревают до 65°С. После медленного перемешивания в течение ночи реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через полистирольную фритту с ТГФ (30 мл). Фильтрат концентрируют в вакууме и флэш-хроматографируют на колонке 15 мм х 6 со смесью 1/1/0,1 ЕЮАс/гексан/метанол и фракции, содержащие продукт, объединяют и концентрируют в вакууме, получая при этом соединение примера 144 в виде желтого масла (40 мг, 86%).
1Н ЯМР (400 МГц, С^С1з) δ: 7,42-7,25 (м, 5Н), 6,83-6,77 (м, 3Н), 4,63 (с, 2Н), 4,15 (дд, 2Н), 3,96-3,20 (м, 6Н, ротамеры), 3,81 (с, 3Н), 1,74 (м, 1Н), 1,24 (с, 3Н), 1,17 и 1,10 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,72 (д, 3Н, ротамеры), 0,53 (м, 2Н), 0,41 (м, 2Н).
Пример 145.
К1 = СН2С(СН3)(СН2СН2); К3 = СОСН2ОН
1-((3К)-3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-4-{4-метокси-3-[(метилциклопропил)метокси] фенил }-3метилпирролидинил)-2-гидроксиэтан-1-он.
Сырой продукт примера 144 (40 мг, 0,086 ммоль) подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 145 в виде прозрачного масла (32,5 мг, 100%).
1Н ЯМР (СТС13^^, 400 МГц) δ: 6,87-6,79 (м, 3Н), 3,97-3,18 (м, 7Н), ротамеры), 3,83 (с, 3Н), 1,23 (с, 3Н), 1,14 и 1,11 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,77 (с, 3Н), 0,56 (м, 2Н), 0,42 (м, 2Н).
БКМБ (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 378,2 (т+1).
Пример 146.
К1 = СН2СН2С3Н5; К3 = СОСН2ОСН2Рй
2-Бензилокси-1-[(3Б,4Б)-4-[3-(2-циклопропилэтокси)-4-метилфенил]-3-((1К)-1-гидроксиэтил)-3метилпирролидин-1-ил]этанон.
Соединение примера 143 подвергают превращению по процедуре примера 144 с использованием 2циклопропилэтанола (26 мг, 0,3 ммоль), получая при этом соединение примера 146 (41 мг, 88%).
1Н ЯМР (400 МГц, С^С13) δ: 7,41-7,25 (м, 5Н), 6,82-6,74 (м, 3Н), 4,63 (с, 2Н), 4,15 (дд, 2Н), 4,04 (дд, 2Н), 3,98-3,20 (м, 5Н, ротамеры), 3,81 (с, 3Н), 1,82 и 1,79 (м, 1Н, ротамеры), 1,72 (дд, 2Н), 1,40-1,20 (м, 1Н), 1,18 и 1,12 (д, 3Н, ротамеры), 0,82 (м, 1Н), 0,74 (с, 3Н), 0,46 (м, 2Н), 0,12 (м, 2Н).
- 89 005686
Пример 147.
В1 = СН2СН2С3Н5; В3 = СОСН2ОН
1-{(3В)-3-((1В)- 1-Гидроксиэтил)-4-[3-(2-циклопропилэтокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-2-гидроксиэтан-1 -он.
Соединение примера 146 подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 147 в виде прозрачного масла (27,4 мг, 82%).
1Н ЯМР (СПС13/СП3ОП, 400 МГц) δ: 6,91-6,80 (м, 3Н), 4,19 (м, 2Н), 4,10 (м, 2Н), 3,97-3,15 (м, 5Н, ротамеры), 3,82 (с, 3Н), 1,73 (дд, 2Н), 1,25 (м, 1Н), 1,14 и 1,12 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,85 (м, 1Н), 0,78 (с, 3Н), 0,46 (м, 2Н), 0,14 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 378,5 (т+1).
Пример 148.
В1 = СН2СН2С5Н9; В3 = СОСН2ОН
1-{(3В)-3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-4-[3-(2-циклопентилэтокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-гидроксиэтан-1-он.
По процедуре примера 144 с использованием соединения примера 143 и 2-циклопентилэтанола (34 мг, 0,3 ммоль) получают соединение примера 148 (41 мг, 100%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ: 7,41-7,25 (м, 5Н), 6,82-6,74 (м, 3Н), 4,63 (с, 2Н), 4,15 (дд, 2Н), 3,99 (дд, 2Н), 3,98-3,20 (м, 5Н, ротамеры), 3,81 (с, 3Н), 2,00-1,20 (м, 11Н), 1,18 и 1,12 (д, 3Н, ротамеры), 0,74 (с, 3Н).
Пример 149.
1-[(38,48)-4-[3-(2-циклопентилэтокси)-4-метоксифенил]-3-((1В)-1-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Соединение примера 148 подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом продукт в виде прозрачного масла (34,7 мг, 86%).
1Н ЯМР (СПС13/СП3ОП, 400 МГц) δ: 6,87-6,80 (м, 3Н), 4,18 (м, 2Н), 4,03 (м, 2Н), 3,99-3,11 (м, 5Н, ротамеры), 3,84 (с, 3Н), 2,01-1,15 (м, 11Н), 1,14 и 1,11 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,77 (с, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 406,4 (т+1).
Пример 150.
2-Бензилокси-1-[4-(8)-[3-(бицикло[4.1.0]гепт-7-илметокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(В)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]этанон.
Из соединения примера 143 реакцией Мицунобу примера 144 с использованием бицикло[4.1.0]гепт7-илметанола получают смесь 80:20 цис- и транс-изомеров (выход 34%).
- 90 005686 1Н ЯМР (СПС13, 400 МГц) δ: 7,42-7,23 (м, 5Н), 6,85-6,72 (м, 3Н), 5,06-4,89 (м, 1Н), 4,67 (с, 2Н), 4,15 (с, 2Н), 4,07-3,56 (м, 9Н), 2,09-1,56 (м, 8Н), 1,36-0,87 (м, 8Н), 0,73 (м, 3н).
ЕЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 508,6 (т+1).
Пример 151.
1-[4-(8)-[3-(Бицикло[4.1.0]гепт-7-илметокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(Я)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Соединение примера 150 (15 мг, 30 ммоль) растворяют в 95% этаноле (1 мл) и раствор обрабатывают катализатором Геаптап (20% Ρ6^Η)2 на угле, 15 мг). Реакционную смесь подвергают гидрогенолизу при 1 атм (или при 50 фунт/кв. дюйм) водорода в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтруют для удаления катализатора, затем растворитель удаляют потоком азота. Продукт очищают хроматографией на силикагеле, если необходимо, с использованием смеси ЕЮАс/гексаны/метанол (1:1:0,2). (выход 76%).
1Н ЯМР (СПС13, 400 МГц) δ: 6,73-6,66 (м, 3Н), 4,04-3,99 (м, 2Н), 3,94-3,87 (м, 4Н), 3,83-3,20 (м, 7Н),
3,15-2,73 (м, 1Н), 1,78-1,47 (м, 5Н), 1,14-0,69 (10Н), 0,63-0,60 (3Н).
ЕЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 418,3 (т+1).
Пример 152.
2-Бензилокси-1-[4-(8)-[3-(бицикло[3.1.0]гекс-6-илметокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(Я)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]этанон.
Из соединения примера 143 способом Мицунобу примера 144 с использованием бицикло [3.1.0] гекс6-илметанола получают продукт, представляющий собой неразделяемую смесь изомеров у спиртовой боковой цепи (выход 32%).
1Н ЯМР (СПС13, 400 МГц) δ: 7,45-7,29 (м, 5Н), 6,84-6,72 (м, 3Н), 5,02-4,94 (м, 1Н), 4,66 (с, 2Н), 4,16 (с, 2Н), 4,08-3,44 (м, 8Н), 1,96-1,51 (м, 4Н), 1,26 (д, 6н), 1,18-1,08 (дд, 5Н), 0,72(м, 3Н).
ЕЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 494,4 (т+1).
Пример 153.
1-[4-(8)-[3-(Бицикло[3.1.0]гекс-6-илметокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(Я)-гидроксиэтил)-3метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Получают из соединения примера 152 дебензилированием способом примера 151 (выход 90%).
1Н ЯМР (СП3ОП, 400 МГц) δ: 6,87-6,79 (м, 3Н), 4,97-4,90 (м, 1Н), 4,19-4,14 (м, 2Н), 3,99-3,36 (м, 7Н), 3,30-2,89 (м, 1Н), 1,92-1,52 (м, 4н), 1,28 (д, 6Н), 1,16-1,06 (м, 6Н), 0,77 (м, 3Н).
ЕЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 404,3 (т+1).
- 91 005686
Пример 154.
2-Бензилокси-1-[4-(8)-[3-(4-трет-бутилциклогексилокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]этанон.
Получают способом Мицунобу примера 144 с использованием соединения примера 143 и 4-третбутилциклогексанола (выход 17%).
1Н ЯМР (СБС13, 400 МГц) δ: 7,43-7,28 (м, 5Н), 6,85-6,73 (м, 3Н), 6,37 (шир. с, 1Н), 5,02-4,93 (м, 2Н), 4,67 (с, 2Н), 4,13 (м, 2Н), 3,89-3,43 (м, 7Н), 2,19-1,36 (м, 8Н), 1,26 (д, 9Н), 1,18-1,08 (дд, 1Н), 0,92-0,81 (м, 6Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 538,8 (т+1).
Пример 155.
1-[4-(8)-[3-(4-трет-бутилциклогексилокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-3метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Получают из соединения примера 154 способом дебензилирования примера 151 (выход 89%).
1Н ЯМР (СО3ОЭ, 400 МГц) δ: 6,82-6,74 (м, 3Н), 4,91-4,85 (м, 3Н), 3,82-3,78 (м, 4Н), 3,76-3,30 (м, 4Н), 2,14-1,34 (м, 2Н), 1,22-1,18 (м, 10Н), 1,08-0,99 (м, 3Н), 0,86-0,78 (м, 9Н), 0,79-0,75 (м, 3Н).
ПКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 448,8 (т+1).
Пример 156.
2-Бензилокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(4-метилциклогексилокси)фенил]-3метилпирролидин-1-ил} этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу с использованием 4метилциклогексанола (смесь изомеров) (выход 10%).
1Н ЯМР (СБС13, 400 МГц) δ: 7,42-7,28 (м, 5Н), 6,83-6,74 (м, 3Н), 4,67 (с, 2Н), 4,40-4,36 (м, 1Н), 4,154,12 (м, 2Н), 3,97-3,44 (м, 8Н), 1,98-1,91 (м, 2Н), 1,60-0,85 (м, 15Н), 0,74-0,71 (д, 3Н).
ПКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 496,7 (т+1).
Пример 157.
2-Гидрокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(4-метилциклогексилокси)фенил]-3метилпирролидин-1-ил} этанон.
Получают из соединения примера 156 процедурой дебензилирования примера 151 (количественный выход).
1Н ЯМР (СЭзОЭ, 400 МГц) δ: 6,87-6,79 (м, 3Н), 4,18-4,11 (м, 2Н), 3,98-3,70 (м, 1Н), 3,69-3,36 (м, 10Н), 3,09-2,89 (м, 1Н), 1,99-1,92 (м, 1Н), 1,61-0,43 (м, 6Н), 1,28-1,25 (м, 2Н), 1,14-1,10 (м, 3Н), 0,97-0,86 (м, 3Н), 0,78-0,76 (м, 3Н).
ПКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 406,6 (т+1).
- 92 005686
Пример 158.
2-Бензилокси-1-[4-(8)-[3-(декагидронафталин-2-илокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу с использованием декагидронафталин-2-ола (смесь изомеров) (выход 10%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,42-7,29 (м, 5Н), 6,85-6,74 (м, 3Η), 5,03-4,95 (м, 1Н), 4,68 (с, 2Н), 3,98-
3,45 (м, 7Н), 1,90-1,10 (м, 22Н), 0,75-0,72 (м, 3Η).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 536,7 (т+1).
Пример 159.
1-[4-(8)-[3-(Декагидронафталин-2-илокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Получают из соединения примера 158 процедурой дебензилирования примера 151 (выход количественный).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) ?: 6,85-6,79 (м, 3Η), 5,02-4,94 (м, 1Н), 4,23-4,12 (м, 2Н), 4,03-3,48 (м, 10Η), 3,08-2,89 (м, 1Н), 1,89-1,80 (м, 2Н), 1,78-1,13 (м, 17Н), 0,77-0,76 (м, 3Η).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 446,1 (т+1).
Пример 160.
2-Бензилокси-1-[4-(8)-[3-(бициклогексил-4-илокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-3метилпирролидин-1 -ил]этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу с использованием бициклогексил-4ола (смесь изомеров) (выход 12%).
1Η ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,42-7,29 (м, 5Н), 6,84-6,74 (м, 3Η), 5,03-4,95 (м, 1Н), 4,68 (с, 2Н), 4,174,11 (м, 2Н), 3,98-3,45 (м, 7Н), 1,90-1,10 (м, 26Н), 0,75-0,72 (м, 3Η).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 564,8 (т+1).
Пример 161.
1-[4-(8)-[3-(Бициклогексил-4-илокси)-4-метоксифенил]-3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Получают из соединения примера 160 процедурой дебензилирования примера 151 (выход количественный).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 6,85-6,79 (м, 3Η), 5,02-4,93 (м, 1Н), 4,20-4,15 (м, 2Н), 4,07-3,47 (м, 8Н), 3,07-2,88 (м, 1Н), 2,17-1,94 (м, 2Н), 1,82-0,82 (м, 23Н), 0,77-0,74 (шир. с, 3Η).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 474,6 (т+1).
- 93 005686
Пример 162.
2-Бензилокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(4-трифторметилциклогексилокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил } этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу с использованием 4-трифторметилциклогексанола (смесь изомеров) (выход 40%).
1Н ЯМР (СВС13, 400 МГц) δ: 7,46-7,24 (м, 5Н), 6,88-6,77 (м, 3Н), 4,72-4,61 (шир. с, 2Н), 5,03-4,89 (шир. м, 1Н), 4,19-3,18 (м, 10Н), 2,26-0,80 (м, 14Н), 0,75-0,68 (шир., 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а-е 550,7 (т+1).
Пример 163.
2-Гидрокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(4-трифторметилциклогексилокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил } этанон.
Получают из соединения примера 162 процедурой дебензилирования примера 151 (количественный выход).
1Н ЯМР (СВС13, 400 МГц) δ: 6,85-6,83 (м, 3Н), 5,03-4,90 (м, 1Н), 4,26-4,15 (м, 2Н), 4,13-3,95 (м, 2Н), 3,89-3,37 (м, 7Н), 3,10-2,90 (м, 1Н), 2,26-2,18 (м, 2Н), 2,08-2,01 (м, 3Н), 1,55-0,86 (м, 7Н), 0,75 (с, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а-е 460,3 (т+1).
Пример 164.
2-Бензилокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(3-метокси-3-метилбутокси)фенил]3-метилпирролидин-1-ил}этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу с использованием 3-метокси-3метилбутанола (выход 78%).
1Н ЯМР (СРС13, 400 МГц) δ: 7,42-7,29 (м, 5Н), 6,85-6,72 (м, 3Н), 4,67 (с, 2Н), 4,17-4,13 (м, 3Н), 3,97-
3,45 (м, 9Н), 3,23 (д, 4Н), 2,07-2,01 (м, 2Н), 1,23 (с, 6Н), 1,16-1,09 (дд, 4Н), 0,72 (д,3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а-е 500,6 (т+1).
Пример 165.
2-Гидрокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(3-метокси-3-метилбутокси)фенил]-3метилпирролидин-1-ил} этанон.
Получают из соединения примера 164 способом дебензилирования примера 151 (выход 97%).
1Н ЯМР (СРС13, 400 МГц) δ: 6,83-6,72 (м, 3Н), 4,19-4,11 (м, 4Н), 4,01-3,79 (м, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 3,72-
3,46 (м, 7Н), 3,22 (с, 3Н), 2,05-1,99 (м, 2Н), 1,22 (шир. с, 7Н), 1,16-1,11 (м, 3Н), 0,73 (шир. с, 3Н).
- 94 005686
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 410,2 (т+1).
Пример 166.
2-Бензилокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(1-фенилциклопентилметокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил }этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу с использованием (1-фенилциклопентил)метанола (выход 25%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,46-7,13 (м, 10Н), 6,78-6,37 (м, 3Н), 5,01-4,93 (м, 1Н), 4,66 (с, 2Н),
4,15-4,10 (м, 2Н), 3,92-3,41 (м, 7Н), 2,24-2,15 (м, 1н), 2,04-1,97 (м, 2Н), 1,84-1,70 (м, 4н), 1,26 (с, 6н),
1,13-1,05 (дд, 3Н), 0,87-0,85 (м, 1Н), 0,65 (2Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 558,5 (т+1).
Пример 167.
2-Гидрокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(1-фенилциклопентилметокси)фенил]3-метилпирролидин-1-ил}этанон.
Получают из соединения примера 166 процедурой дебензилирования примера 151 (выход 26%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,46-7,43 (м, 2Н), 7,34-7,27 (м, 2Н), 7,23-7,18 (м, 1Н), 6,81-6,71 (м, 3Н), 6,53-6,48 (м, 1Н), 4,15-4,09 (м, 2Н), 3,93-3,88 (м, 2Н), 3,78-3,46 (м, 7Н), 2,25-0,68 (м, 17Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 468,7 (т+1).
Пример 168.
2-Бензилокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(1-фенилциклопропилметокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил }этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу с использованием (1фенилциклопропил)метанола (выход 90%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,46-7,16 (м, 10Н), 6,79-6,72 (м, 2Н), 6,64-6,59 (м, 1Н), 4,66 (с, 2Н),
4,14-4,12 (м, 2Н), 4,10-4,02 (м, 2Н), 3,91-3,42 (м, 9Н), 1,28-1,25 (м, 1Н), 1,24-1,06 (м, 3Н), 1,04-0,95 (м,
4Н), 0,66 (с, 3Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 530,7 (т+1).
Пример 169.
2-Гидрокси-1-{3-(8)-(1-(К)-гидроксиэтил)-4-(8)-[4-метокси-3-(1-фенилциклопропилметокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил }этанон.
Получают из соединения примера 168 процедурой дебензилирования примера 151 (выход 44%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,47-7,21 (м, 5Н), 6,84-6,60 (м, 3Н), 4,15-4,04 (м, 4Н), 3,99-3,46 (м, 8Н), 3,05-2,99 (м, 1Н), 2,11-2,04 (м, 1Н), 1,74-1,59 (м, 2Н), 1,29-0,96 (м. 4Н), 0,88-0,68 (м, 4Н).
- 95 005686
ГЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Иа/е 440,1 (т+1).
Пример 170.
Я1 = СН2С(СН2СН3)(СН2ОСН2); Я3 = СОСН2ОСН2РЙ 2-Бензилокси-1-[(38,48)-4-[3-(3-этилоксетан-3-илметокси)-4-метоксифенил]-3-((1Я)-1-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]этанон.
Из соединения примера 143 по процедуре примера 144 с использованием 3-этил-3-оксетанметанола (34 мл, 0,3 ммоль) получают соединение примера 170 (44 мг, 88%).
1Н ЯМР (400 МГц, СИСЬ) δ: 7,41-7,25 (м, 5Н), 6,84-6,30 (м, 3Н), 4,64 (с, 2Н), 4,58 (дд, 2Н), 4,49 (д, 2Н), 4,17-4,11 (м, 3Н), 3,99 (дд, 2Н), 3,98-3,20 (м, 5Н, ротамеры), 3,80 (с, 3Н), 1,91 (дд, 2Н), 1,80 (д, 1Н), 1,24 (дд, 1Н), 1,17 и 1,13 (дублеты, 3Н, ротамеры), 0,94 (т, 3Н), 0,73 (с, 3Н).
Пример 171.
Я1 = СН2С(СН2СН3)(СН2ОСН2); Я3 = СОСН2ОН
-((3Я)-3-((1Я)-1 -Гидроксиэтил )-4- {3-[(3-этилоксетан-3-ил)метокси]-4-метоксифенил }-3-метилпирролидинил)-2-гидроксиэтан-1-он.
Соединение примера 170 подвергают реакции удаления защитной группы с использованием дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 171 в виде прозрачного масла (28,6 мг, 80%).
1Н ЯМР (СВС13/СВ3ОВ, 400 МГц) δ: 6,91-6,83 (м, 3Н), 4,64 (д, 1Н), 4,19 (м, 2Н), 4,12 (м, 1Н), 4,003,14 (м, 12Н), 3,83 (с, 3Н), 1,15 (м, 3Н), 0,96 (м, 3Н), 0,78 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Иа/е 408,5 (т+1).
Пример 172.
Я1 = !-Ви; Я3 = СОСН2ОАС (2-{3-((1 Я)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(трет-бутокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }2-оксоэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 73 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием ацетоксиацетилхлорида.
1Н ЯМР (400 МГц, СИС13, смесь ротамеров) δ: 6,94-6,81 (м, 3Н), 4,72-4,58 (м, 2Н), 3,80 (м, 3Н), 3,973,17 (м, 6Н), 2,19 (с, 3Н), 1,33 (д, 9Н), 1,15 (т, 3Н), 0,76 (д, 3Н).
Пример 173.
Я1 = Н; Я3 = СОСН2ОАС
2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2оксоэтилацетат.
- 96 005686
Соединение примера 172 подвергают реакции удаления защитной группы способом ТФУ примера 143, получая при этом соединение примера 173 в виде рыжевато-коричневой пены (173 мг, 80%).
' Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 6,86-6,70 (м, 3Н), 5,64 (шир. с, 1Н), 4,72-4,62 (м, 2Н), 3,88 (м, 3Н), 3,95-3,18 (сл., 6Н), 2,20 (д, 3Н), 1,15 (т, 3Н), 0,77 (д, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 352,2 (т+1).
Пример 174.
К1 = 4-ΡΗ-ΡΗ<Η2^; К3 = С(=Ο)СН2ΟСН2Ρй 2-Бензилокси-1-[(38,48)-4-[3-(2-бифенил-4-илэтокси)-4-метоксифенил]-3-((К)-1-гидроксиэтил)-3метилпирролидин-1-ил]этанон.
Соединение примера 143 (60 мг, 0,15 ммоль) подвергают процедуре Мицунобу примера 144 с использованием 4-гидроксиэтилбифенила (90 мг, 0,45 ммоль) и продукт используют без дальнейшей очистки или получения его характеристик (73 мг, 84%).
Пример 175.
К1 = 4-РЙ-РЙ-СН2СН2; К3 = С(=О)СН2ОН 1-[(38,48)-4-[3-(2-Бифенил-4-илэтокси)-4-метоксифенил]-3-((К)-1-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Соединение примера 174 подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 175.
' Н ЯМР (300 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 7,58 (шир. т, 7,4 Гц, 3Н), 7,47-7,27 (м, 6Н), 6,86-6,77 (м, 3Н), 4,24 (дт, I = 3,0, 7,4 Гц, 2Н), 4,11 (шир. т, I = 4,1 Гц, 2Н), 4,01-3,47 (м, 5,6Н, ротамеры), 3,87 (с, 3Н), 3,20 (т, I = 7,4 Гц, 2Н), 3,03 (д, I = 9,8 Гц, 0,5Н, ротамер), 1,36/1,32 (2д, I = 3,6/3,7 Гц, 1Н), 1,16/1,13 (2д, I = 6,5/6,4 Гц, 3Н), 0,74 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 490 (т+Н)+.
Пример 176.
К1 = С'1 РС СТА К3 = СОСН2ОАС
2-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидинил}-2-оксоэтилацетат.
В круглодонную колбу, снабженную лопастной мешалкой и холодильником, загружают соединение примера 173 (270 мг, 0,769 ммоль), ацетон (5 мл), СзСО3 (376 мг, 1,15 ммоль) и промежуточный продукт 90 (242 мг, 1,15 ммоль) в атмосфере азота. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч, затем ей дают возможность охладиться до комнатной температуры. Ацетон удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в смеси ЕЮАс/вода. Образовавшуюся смесь экстрагируют ΕΐΟАс (2 х 100 мл), сушат (Ыа28О4) и концентрируют. Очистка на Вю1аде (картридж 40М, смесь 1:1:0,1 ЕЮАс:гексан:МеОН) дает 146 мг соединения примера 176 в виде белой пены (41%).
' Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 7,41-7,26 (м, 5Н), 7,05 (дд, 1Н), 6,85 (д, 2Н), 5,05-4,95 (м, 2Н), 4,70-4,58 (м, 2Н), 3,88 (д, 3Н), 3,95-3,13 (сл., 6Н), 2,19 (с, 3н). 0,97-0,92 (дд, 3Н), 0,71 (д, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 466,4 (т+1).
Пример 177.
К1 = С'Н2С Ε-4-ΡΡΗ; К3 = СОСН2ОАс
- 97 005686
2-(3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-{3-[3-(4-фторфенил)проп-2-инилокси]-4-метоксифенил}-3метилпирролидинил)-2-оксоэтилацетат.
Получают из соединения примера 173 способом примера 176 с использованием промежуточного продукта 91 в качестве алкилирующего агента.
' Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,36 (м, 2Н), 7,04-6,97 (м, 3Н), 6,86-6,85 (м, 2Н), 4,98-4,97 (м, 2Н), 4,71-4,59 (м, 2Н), 3,88 (д, 3Н), 3,96-3,16 (с, 6Н), 2,20-2,18 (м, 3Н). 1,01 (т, 3Н), 0,72 (д, 3Н).
ШМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 484,8 (т+1).
Пример 178.
В1 = СН(С3Н5)С3Н5; В3 = СОСН2ОАс
2-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(дициклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-оксоэтилацетат.
Получают из соединения примера 173 способом Мицунобу примера 144 с использованием дициклопропилкарбинола.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,26-6,78 (м, 3Н), 4,74-4,60 (д, 2Н), 3,96-3,46 (м, 9Н), 3,21-3,10 (м, 2Н), 2,20 (с, 3Н), 1,26 (д, 1Н), 1,19-1,11 (м, 4Н), 0,75 (д, 3Н), 0,55-0,41 (м, 4Н), 0,33-0,24 (м, 4Н).
ШМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 446,5 (т+1).
Пример 179.
В1 = 3-(4-хлорфенил-(1,2,4-оксадиазол-5-ил)метил; В3 = СОСН2ОАс
2-[3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-{[3-(4-хлорфенил)(1,2,4-оксадиазол-5-ил)]метокси}-4метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-оксоэтилацетат.
Получают из соединения примера 173 посредством способа с СкСО3 примера 176 с использованием промежуточного продукта 87.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 8,02 (д, 2Н), 7,46 (д, 2Н), 6,95-6,85 (м, 3Н), 5,40 (д, 2Н), 4,70-4,58 (м, 2Н), 3,94 (д, 3Н), 3,95-3,12 (сл., 6Н), 2,19 (с, 3Н), 1,04-1,00 (дд, 3Н), 0,64 (д, 3Н).
ШМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 544,4 (т+1).
/
О
N
Пример 180.
В1 = СН2С СРП; В3 = СОСН2ОН
2-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидинил}-2-гидроксиэтан-1-он.
Получают из соединения примера 176 посредством процедуры гидролиза ЫОН промежуточного продукта 5.
' Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,26 (м, 5Н), 7,07-7,06 (м 1Н), 6,85-6,84 (м, 2Н), 5,05-4,94 (м, 2Н), 3,89 (с, 3Н), 4,13-2,99 (сл., 8Н), 0,98-0,92 (дд, 3Н), 0,71 (д, 3Н).
ШМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 424,6 (т+1).
Пример 181.
В1 = СН2С=С-4-ЕРй; В3 = СОСН2ОН 1-(3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-{3-[3-(4-фторфенил)проп-2-инилокси]-4-метоксифенил}-3метилпирролидинил)-2-гидроксиэтан-1-он.
Получают из соединения примера 177 посредством процедуры гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,39-7,36 (м, 2Н), 7,03-6,98 (м, 3Н), 6,85 (с, 2Н), 5,024,93 (м, 2Н), 3,89 (с, 3Н), 4,15-3,01 (сл., 8Н), 1,04-0,99 (дд, 3Н), 0,72 (с, 3Н).
ШМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 442,7 (т+1).
Пример 182.
В1 = С3Н5СНС3Н5; В3 = СОСН2ОН
1-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(дициклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-гидроксиэтан-1-он.
Получают из примера 178 процедурой гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5.
- 98 005686 1Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 6,90-6,78 (м, 3Н), 4,17-3,44 (сл., 11Н), 3,15-3,03 (м, 2Н), 1,32-1,20 (м, 1Н), 1,19-1,09 (м, 4Н), 0,75 (д, 3Н), 0,54-0,39 (м, 4Н), 0,34-0,23 (м, 4Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 404,5 (т+1).
Пример 183.
Я1 = 3-(4-хлорфенил)-(1,2,4-оксадиазол-5-ил)метил; Я3 = СОСН2ОН
1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-{[3-(4-хлорфенил)-(1,2,4-оксадиазол-5-ил)]метокси}-4метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-2-гидроксиэтан-1-он.
Получают из соединения примера 179 посредством процедуры гидролиза с ПОН промежуточного продукта 5.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 8,03 (д, 2Н), 7,47 (д, 2Н), 6,95-6,86 (м, 3Н), 5,40 (с, 2Н), 3,88 (с, 3Н), 4,12-2,98 (сл., 8Н), 1,05-0,99 (дд, 3Н), 0,64 (д, 3н).
НЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 502,4 (т+1).
Пример 184.
Я1 = СН2СН2-!-Ви; Я3 = СОСН2ОСН2РЬ
1-{3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(3,3-диметилбутокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинил}-2-(фенилметокси)этан-1-он.
Получают из соединения примера 143 посредством способа Мицунобу примера 144 с использованием 3,3-диметил-1-бутанола.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 7,41-7,31 (м, 5Н), 6,80-6,75 (м, 3Н), 4,70-4,63 (м, 2Н),
4,15-3,21 (ел, 13Н), 1,80-1,73 (м, 2Н), 1,17-1,10 (м, 2Н), 0,98 (с, 9Н), 0,74 (д, 3Н).
НЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 484,6 (т+1).
1-{3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(3,3-диметилбутокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинил}-2-гидроксиэтан-1-он.
Получают из соединения примера 184 посредством способа дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 6,88-6,71 (м, 3Н), 4,38-2,99 (сл., 13Н), 1,82-1,73 (м, 2Н), 1,19-1,08 (м, 3Н), 0,97 (с, 9Н), 0,80-0,69 (м, 3Н).
НЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 394,4 (т+1).
1-{3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-(фенилметокси)этан-1-он.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством способа сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием бензилоксиацетилхлорида.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,29 (м, 5Н), 6,82-6,74 (м, 3Н), 4,66 (с, 2Н), 4,153,20 (сл, 11Н), 1,71-1,57 (шир. с, 1Н), 1,35-1,23 (м, 1Н), 1,16-1,07 (дд, 3Н), 0,71 (с, 3Н), 0,62 (д, 3н), 0,34 (д, 2Н).
- 99 005686
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 454,6 (т+1).
Пример 187.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОСН2ОН
1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-гидроксиэтан-1-он.
Получают из соединения примера 186 посредством способа дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц) δ: 6,95-6,84 (м, 3Н), 4,31-4,22 (м, 2Н), 3,91-3,23 (сл, 11Н), 1,30-1,19 (м, 1Н), 0,74 (с, 3Н), 0,62-0,56 (м, 2Н), 0,35-0,28 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 364,2 (т+1).
Пример 188.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОС1ΙΛΊ 1СО;С11+11 №(2-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-оксоэтил)(фенилметокси)карбоксамид.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры ацилирования примера 7 с использованием 2-С1у-ОНр.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,45-7,30 (м, 5Н), 6,85-6,76 (м, 3Н), 5,81 (шир. с, 1Н), 5,13 (с, 2Н), 4,10-3,43 (сл, 12Н), 3,17 (д, 1Н), 1,68 (шир. с, 1Н), 1,36-1,26 (м, 1Н), 1,14 (т, 3Н), 0,73 (д, 3Н), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,38-0,31 (м, 2Н).
Пример 189.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОСН2ЯН2
1- {3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-аминоэтан-1-он.
Получают из соединения примера 188 посредством процедуры дебензилирования промежуточного продукта 31.
1Н ЯМР (Метанол-б4, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,96-6,81 (м, 3Н), 4,00-3,27 (сл., 13Н), 1,29-1,18 (м, 1Н), 1,13-1,07 (м, 3Н), 0,75 (м, 3Н), 0,62-0,54 (м, 2Н), 0,35-0,28 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 363,2 (т+1).
Пример 190.
К1 = СН2СЩ5; К3 = СОС(СН3)2ОСОСН3
2- {3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-1,1-диметил-2-оксоэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием 2-ацетоксиизобутирилхлорида.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,87-6,70 (м, 3Н), 3,93-3,32 (сл., 11Н), 2,08 (д, 3Н), 1,81-1,65 (шир. м, 1Н), 1,65-1,53 (м, 6Н), 1,35-1,23 (м, 1Н), 1,19-1,11 (т, 3Н), 0,68 (д, 3Н), 0,65-0,57 (м, 2Н), 0,37-0,30 (м, 2Н).
Пример 191.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОС(СН3)2ОН
1- {3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-гидрокси-2-метилпропан-1-он.
Получают из соединения примера 190 посредством процедуры гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,84-6,75 (м, 3Н), 4,43 (шир. с, 1Н), 4,01-3,41 (сл., 11Н), 1,52-1,41 (м, 6Н), 1,32-1,17 (м, 1Н), 1,16-1,08 (т, 3Н), 0,73 (д, 3Н), 0,63-0,57 (м, 2Н), 0,37-0,29 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 392,5 (т+1).
Пример 192.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (8)-СОСН(СН3)ОАс
2- {3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(18)-1 -метил-2-оксоэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (8)-2-ацетоксипропионилхлорида.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,83-6,76 (м, 3Н), 5,25-5,17 (м, 1Н), 4,08-3,35 (сл., 12Н), 2,15-2,09 (м, 3Н), 1,50-1,44 (м, 3Н), 1,35-1,23 (м, 1Н), 1,15 (д, 3Н), 0,79-0,71 (м, 3Н), 0,65-0,60 (м, 2Н), 0,37-0,30 (м, 2Н).
Пример 193.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (8)-СОСН(СН3)ОН
1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(28)-2-гидроксипропан-1-он.
Получают из примера 192 посредством процедуры гидролиза с ЬЮН промежуточного продукта 5.
- 100 005686 1Н ЯМР (400 МГц, СИСк смесь ротамеров) δ: 6,84-6,73 (м, 3Н), 4,39-4,28 (м, 1Н), 3,88-3,48 (сл., 10Н), 3,29 (дд, 1Н), 1,40-1,20 (м, 4Н), 1,12 (т, 3Н), 0,73 (д,3Н), 0,64-0,55 (м, 2Н), 0,37-0,29 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 378,7 (т+1).
Пример 194.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОСН(Рй)ОАс
2-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,4§)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-оксо-1-фенилэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием хлорангидрида О-ацетилминдальной кислоты.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13. смесь ротамеров и диастереомеров) δ: 7,57-7,35 (м, 5Н), 6,84-6,51 (м, 3Н),
6.11- 6,04 (м, 1Н), 4,08-3,05 (сл., 11Н), 2,21-2,14 (м, 3Н), 1,36-1,20 (м, 1Н), 1,14-1,06 (дд, 3Н), 0,78 и 0,48 (с и д, 3Н), 0,67-0,57 (м, 2Н), 0,37-0,28 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 482,6 (т+1).
Пример 195.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОСН(Рй)ОН
1- {3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,4§)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-гидрокси-2-фенилэтан-1-он.
Получают из соединения примера 194 посредством процедуры гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭСк смесь ротамеров и диастереомеров) δ: 7,40-7,28 (м, 5Н), 6,81-6,42 (м, 3Н), 5,13-4,61 (м, 1Н), 4,07-3,29 (сл., 10Н), 3,21-2,79 (м, 1Н), 1,36-1,20 (м, 1Н), 1,15-0,97 (дд, 3Н), 0,73 и 0,47 (д и с, 3Н), 0,65-0,56 (м, 2Н), 0,37-0,28 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 440,2 (т+1).
Пример 196.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОСН(4-РРй)Ас
2- {3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,4§)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-1-(4-фторфенил)-2-оксоэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (хлоркарбонил)(4-фторфенил)метилацетата.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭСк смесь ротамеров и диастереомеров) δ: 7,60-7,46 (м, 2Н), 7,15-7,03 (м, 2Н). 6,85-6,54 (м, 3Н), 6,09-5,99 (м, 1Н), 4,07-2,87 (сл., 11Н), 2,19-2,12 (м, 3Н), 1,33-1,20 (м, 1Н), 1,15-1,03 (дд, 3Н), 0,78 и 0,52 (д и д, 3Н), 0,65-0,57 (м, 2Н), 0,38-0,27 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 501,0 (т+1).
Пример 197.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОСН(4-РРй)ОН
1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,4§)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-(4-фторфенил)-2-гидроксиэтан-1-он.
Получают из соединения примера 196 посредством процедуры гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭСк смесь ротамеров и диастереомеров) δ: 7,60-7,25 (м, 2Н), 7,12-7,00 (м, 2Н), 6,84-6,48 (м, 3Н), 5,11-4,59 (м, 1Н), 4,04-2,79 (сл., 11Н), 1,35-1,23 (м, 1Н), 1,15-1,00 (дд, 3Н), 0,75 и 0,48 (д и с, 3Н), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,37-0,30 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 458,2 (т+1).
Пример 198.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОС(СН2СН2)ОАс ({3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,4§)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинил}карбонил)циклопропилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (хлоркарбонил)циклопропилацетата.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 6,85-6,72 (м, 3Н), 4,06-3,31 (сл., 11Н), 2,10 (с, 3Н), 1,74-1,62 (м, 1Н), 1,59-1,47 (м, 1Н), 1,35-1,19 (м, 2Н), 1,14 (д, 3Н), 1,02-0,93 (м, 1Н), 0,71 (с, 3Н), 0,65-0,59 (м, 2Н), 0,37-0,30 (м, 2Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 432,5 (т+1).
Пример 199.
К1 = СН2С3Н5; К3 = СОС(СН2СН2)ОН
3- (( 1К)-1 -Гидроксиэтил)-(38,4§)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3 -метилпирролидинилгидроксициклопропилкетон.
Получают из соединения примера 198 посредством процедуры гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5.
'Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 6,88-6,78 (м, 3Н), 4,42-3,30 (сл., 11Н), 1,42-1,22 (м, 3Н), 1,16 (д, 3Н),
1.11- 0,88 (м, 3Н), 0,74 (д, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,39-0,31 (м, 2Н).
- 101 005686
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 390,5 (т+1).
Пример 200.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(ОАс)СН(СН3)СН2СН3
2-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(18)-1-(метилпропил)-2-оксоэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (18)-1-(хлоркарбонил)-2-метилбутилацетата.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13. смесь ротамеров и диастереомеров) δ: 6,85-6,72 (м, 3Н), 4,84 (дд, 1Н), 3,89-3,31 (сл., 11Н), 2,12 (д, 3Н), 2,09-1,95 (м, 1Н), 1,75-1,62 (м, 1Н), 1,35-1,19 (м, 2Н), 1,15 (т, 3Н), 1,000,86 (м, 6Н), 0,75 (д, 3Н), 0,65-0,56 (м, 2Н), 0,37-0,30 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 462,5 (т+1).
Пример 201.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(ОН)СН(СН3)СН2СН3
1- {3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(28)-2-гидрокси-3 -метилпентан-1-он.
Получают из соединения примера 200 посредством процедуры гидролиза ЫОН промежуточного продукта 5.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13, смесь ротамеров и диастереомеров) δ: 6,85-6,76 (м, 3Н), 4,18-4,11 (м, 1Н), 3,94-3,26 (сл., 11Н), 1,75-1,66 (м, 1Н), 1,54-1,19 (м, 4Н), 1,15 (дд, 3Н), 1,07 (м, 3Н), 0,94-0,85 (м, 3Н), 0,76 (д, 3Н), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,38-0,32 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 420,5 (т+1).
Пример 202.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(ОАс)СН2СН(СН3)2
2- {3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(18)-1 -(2-метилпропил)-2-оксоэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (18)-1-(хлоркарбонил)-3-метилбутилацетата.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,84-6,74 (м, 3Н), 5,19-5,10 (м, 1Н), 4,15-2,95 (сл., 11Н), 2,13 (д, 3Н), 1,95-1,72 (м, 2Н), 1,58-1,39 (м, 2Н), 1,34-1,23 (м, 1Н), 1,18-1,12 (м, 3Н), 1,00-0,88 (м, 6Н), 0,75 (д, 3Н), 0,68-0,57 (м, 2Н), 0,37-0,30 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 462,5 (т+1).
Пример 203.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(ОН)СН2СН(СН3)2
1- {3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(28)-2-гидрокси-4-метилпентан-1-он.
Получают из соединения примера 202 посредством процедуры гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,86-6,77 (м, 3Н), 4,32-4,25 (м, 1Н), 3,88-2,97 (сл., 11Н), 2,05-1,93 (м, 1Н), 1,73-1,21 (м, 5Н), 1,14 (дд, 3Н), 1,02-0,93 (м, 6Н), 0,76 (д, 3Н), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,38-0,32 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 420,3.
Пример 204.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(ОАс)СН2РЬ
2- {3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(18)-2-оксо-1 -бензилэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига с использованием (18)-1-(хлоркарбонил)-2-фенилэтилацетата.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,26 (м, 5Н), 6,82-6,70 и 6,52-6,47 (м и м, 3Н), 5,30-5,18 (м, 1Н), 3,90-2,79 (сл., 13Н), 2,11 (д, 3Н), 1,35-1,25 (м, 1Н), 1,05 (дд, 3Н),0,66 и 0,33 (с и с, 3Н), 0,68-0,60 (м, 2Н), 0,39-0,32 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 497,0 (т+1).
Пример 205.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(ОН)СН2РЬ
1-{3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-(28)-2-гидрокси-3 -фенилпропан-1-он.
Из соединения примера 204 (20 мг, 0,040 ммоль) процедурой гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5 получают 14,5 мг (79%) соединение примера 205 в виде бесцветной пленки.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,26 (м, 5Н), 6,82-6,75 и 6,56-6,53 (м и м, 3Н), 4,51-4,43 (м, 1Н), 3,90-2,70 (сл., 13Н), 1,35-1,25 (м, 1Н), 1,09 (дд, 3Н),0,69 и 0,52 (с и с, 3Н), 0,68-0,60 (м, 2Н), 0,39-0,32 (м, 2Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 454,3 (т+1).
- 102 005686
Пример 206.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (^-ΟΟίΉ^ΑΟΟΗΡΗ (1К)-2-{3-(( 1К)- 1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }-2-оксо-1 -бензилэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 67 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (1К)-1-(хлоркарбонил)-2-фенилэтилацетата.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,37-7,22 (м, 5Н), 6,82-6,72, 6,64, 6,45 (м, д и дд, 3Н), 5,27 и 5,18 (дд, т, 1Н), 3,99-2,56 (сл., 13Н), 2,12 (с, 3н), 1,34-1,24 (м, 1н), 1,13-1,02 (дд, 3Н), 0,68 и 0,34 (с и с, 3Н), 0,65-0,58 (м, 2Н), 0,37-0,30 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а/е 496,6 (т+1).
Пример 207.
К1 = СН2С3Н5; К3 = (К)-СΟСΗ(ΟΗ)СΗ2Ρй ((2К)-1-{3-((1 К)-1-Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(циклопропилметокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-гидрокси-3-фенилпропан-1-он.
Получают из соединения примера 206 посредством способа с пероксидом лития промежуточного продукта 43.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,35-7,18 (м, 5Н), 6,84-6,67 (м, 3Н), 4,48-4,40 (м, 1Н), 4,04-2,70 (сл., 13Н), 1,34-1,24 (м, 1Н), 1,08 (дд, 3Н),0,71 и 0,49 (с и с, 3Н), 0,65-0,58 (м, 2Н), 0,38-0,31 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа-е 454,5 (т+1).
Пример 208.
К1 = ί-Ви; К3 = (8)-СОСН(ОАс)СН3
2-{3 -((1 К)-1 -Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[3-(трет-бутокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил }(18)-1 -метил-2-оксоэтилацетат.
Получают из промежуточного продукта 73 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием (8)-2-ацетоксипропионилхлорида.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,95-6,81 (м, 3Н), 5,24-5,11 (м, 1Н), 3,80 (м, 3Н), 4,083,38 (м, 6Н), 2,15-2,12 (д, 3Н), 1,49-1,46 (дд, 3Н), 1,33 (д, 9Н), 1,14 (д,3Н), 0,76 (д, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а/е 422,4 (т+1).
Пример 209.
К1 = Н; К3 = (8)-СОСН(ОАс)СН3
2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-(18)-1метил-2-оксоэтилацетат.
Получают из соединения примера 208 посредством способа снятия защиты ТФУ примера 143.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,88-6,70 (м, 3Н), 5,73-5,69 (шир. д, 1Н), 5,25-5,19 (м, 1Н), 3,88 (д, 3Н), 4,06-3,38 (м, 6Н), 2,12 (д, 3Н), 1,49-1,46 (д, 3Н), 1,16-1,14 (дд, 3Н), 0,75 (д, 3н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа-е 366,3 (т+1).
Пример 210.
К1 = СН:С СРН; К3 = (8)-СОСН(ОАс)СН3
2-{3 -((1 К)-1 -Гидроксиэтил)-(3 8,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3 -метилпирролидинил}-(18)-1-метил-2-оксоэтилацетат.
Получают из соединения примера 209 посредством способа с Сз2СО3 примера 176 с использованием δ: 7,39-7,26 (м, 5Н), 7,05 (д, 1Н), 6,85 (с, 2Н), 5,23-5,17 (м, 1Н), 5,05-4,95 (м, 2Н), 3,86 (с, 3Н), 4,07-3,36 (д, 6Н), 2,15-2,12 (д, 3Н), 1,47-1,40 (т, 3Н), 1,36-1,33 (м, 1Н), 0,99-0,95 (м, 3н), 0,75-0,71 (д, 3Н).
- 103 005686
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е (т+1).
Пример 211.
В1 = СН;С СРП; В3 = (8)-СОСН(ОН)СН3
1- {3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидинил}-(28)-2-гидроксипропан-1-он.
Получают из соединения примера 210 посредством способа снятия О-ацетатной защиты примера 95.
1Н ЯМР (400 МГц, ОПСР. смесь ротамеров) δ: 7,41-7,26 (м, 5Н), 7,07 (д, 1Н), 6,86 (с, 2Н), 5,05-4,94 (м, 1Н), 4,36-4,30 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н), 3,91-3,48 (сл., 5Н), 3,28 (дд, 1Н), 1,37-1,32 (м, 3Н), 0,99-0,92 (дд, 3Н), 0,73-0,70 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 438,2 (т+1).
Пример 212.
В1 = СН;С С-4-РРР; В3 = (8)-СОСН(ОАс)СН3
2- (3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-{3-[3-(4-фторфенил)проп-2-инилокси]-4-метоксифенил}-3метилпирролидинил)-2-оксоэтилацетат.
Получают из соединения примера 209 посредством способа с С§2СО3 примера 176 с использованием промежуточного продукта 91.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,36 (м, 2Н), 7,03-6,96 (м, 3Н), 5,22-5,20 (кв.,1Н), 4,98-4,96 (м, 2Н), 4,07-3,53 (сл., 6Н), 3,88-3,86 (м, 3Н), 2,14-2,11 (д, 3Н), 1,47-1,42 (т, 3Н), 1,06-1,01 (м, 3Н), 0,75-0,72 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 498,5 (т+1).
Пример 213.
В1 = СН;С С-4-РРР; В3 = (8)-СОСН(ОН)СН3
1- (3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-{3-[3-(4-фторфенил)проп-2-инилокси]-4-метоксифенил}-3метилпирролидинил)-(28)-2-гидроксипропан-1-он.
Получают из соединения примера 212 посредством способа снятия О-ацетатной защитной группы примера 95.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,26 (м, 2Н), 7,04-6,98 (м, 3Н), 6,86 (с, 2Н), 5,034,97 (м, 2Н), 4,40-4,30 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н), 3,94-3,52 (сл., 5Н), 3,29 (дд, 1Н), 1,39-1,28 (д, 3Н), 1,04-1,00 (м, 3Н), 0,74-0,72 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 456,5 (т+1).
Пример 214.
В1 = СН;С С-4-СР;РР; В3 = (8)-СОСН(ОАс)СН3
2- [3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(4-метокси-3-{3-[4-(трифторметил)фенил]проп-2инилокси}фенил)-3-метилпирролидинил] -(18)-1-метил-2-оксоэтилацетат.
Получают из соединения примера 209 посредством способа с С§2СО3 примера 176 с использованием промежуточного продукта 92.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,57-7,45 (м, 4Н), 7,01 (д, 1Н), 6,88-6,83 (м, 2Н), 5,225,17 (м, 1Н), 5,00 (с, 2Н), 4,07-3,35 (сл., 6Н), 3,88 (д, 3Н), 2,13-2,11 (д, 3Н), 1,47-1,42 (дд, 3Н), 1,12 (д, 3Н), 0,75-0,71 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 548,8 (т+1).
Пример 215.
В1 = СН;С С-4-СР;РР; В3 = (8)-СОСН(ОН)СН3
2-[3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(4-метокси-3-{3-[4-(трифторметил)фенил]проп-2-инилокси} фенил)-3 -метилпирролидинил] -(28)-2-гидроксипропан-1-он.
Получают из соединения примера 214 посредством способа снятия О-ацетатной защитной группы примера 95.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,56 (д, 2Н), 7,50 (д, 2Н), 7,03 (с, 1Н), 6,87 (с, 2Н), 5,01 (с, 2Н), 4,36-4,33 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н), 3,91-3,49 (сл., 5Н), 3,30 (дд, 1Н), 1,37-1,35 (дд, 3Н), 1,04-1,01 (т, 3Н), 0,74-0,71 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 505,9 (т+1).
Пример 216.
В1 = 3-(4-хлорфенил)-(1,2,4-оксадиазол-5-ил)метил; В3 = (8)-СОСН(ОАс)СН3
2-[3-((1В)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-{[3-(4-хлорфенил)(1,2,4-оксадиазол-5-ил)]метокси}-4метоксифенил)-3-метилпирролидинил] -(18)-1-метил-2-оксоэтилацетат.
Получают из соединения примера 209 посредством способа с С§2СО3 примера 176 с использованием промежуточного продукта 87.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 8,01 (д, 2Н), 7,46 (д, 1Н), 6,96-6,85 (м, 3Н), 5,45-5,36 (м, 2Н), 5,21-5,14 (м, 1Н), 4,02-3,36 (сл., 6Н), 3,84 (д, 3Н), 2,11 (д, 3Н), 1,47-1,42 (м, 3Н), 1,04-1,02 (д, 3Н), 0,67-0,65 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 558,2 (т+1).
- 104 005686
Пример 217.
Я1 = 3-(4-хлорфенил)-(1,2,4-оксадиазол-5-ил)метил; Я3 = (8)-СОСН(ОН)СН3
1-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-{[3-(4-хлорфенил)(1,2,4-оксадиазол-5-ил)]метокси}-4метоксифенил)-3-метилпирролидинил] -(28)-2-гидроксипропан-1-он.
Получают из соединения примера 216 посредством способа удаления О-ацетатной защитной группы примера 95.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 8,06-8,00 (м, 2Н), 7,49-7,45 (м, 2Н), 6,97-6,86 (м, 3Н), 5,41 (м, 2Н), 4,35-4,32 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 3,86-3,19 (сл., 6Н), 1,38-1,32 (м, 3Н), 1,05-1,00 (дд, 3Н), 0,660,63 (д, 3Н).
1.1ЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 516,4 (т+1).
Пример 218.
Я1 = 2-инданил; Я3 = СОСН(ОАс)-4-Г?й
2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-
1-(4-фторфенил)-2-оксоэтилацетат.
Промежуточный продукт 51 (72,8 мг, 0,198 ммоль) ацилируют процедурой с К2СО3 примера 7 с использованием хлорангидрида 2-ацетоксифторминдальной кислоты (120 мг, 0,297 ммоль, 1,5 экв.), получая при этом прозрачное, бесцветное масло (84,2 мг, 75%).
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 7,53-7,47 (м, 2Н), 7,26-7,03 (м, 6Н), 6,87-6,59 (м, 3Н), 6,09-6,04 (м, 1Н), 5,28-5,01 (м, 1Н), 4,14-3,03 (сл., 13Н), 2,16 (с, 3Н), 1,27-1,06 (м, 3Н), 0,82-0,80 (д, 1,5Н), 0,55-0,52 (д, 1,5Н).
Пример 219.
Я1 = 2-инданил; Я3 = СОСН(ОН)-4-ГГй
2-[3-((1Я)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2-(4-фторфенил)-2-гидроксиэтан-1-он.
Соединение примера 218 (19 мг, 0,034 ммоль, 1 экв.) подвергают процедуре гидролиза с ЬЮН промежуточного продукта 5, получая при этом белый порошок (6,1 мг, 35%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЕ>С13, смесь ротамеров) δ: 6,97-6,80 (сл., 7Н), 4,19 (м, 2Н), 4,13 (т, 2Н), 3,82 (с, 3Н), 3,72 (с, 3Н), 3,83-3,48 (сл., 4Н), 3,25 (дд, 1н), 2,27 (квинтет, 2Н), 1,70 (с, 1Н), 1,56 (шир. д, 1Н), 1,13 (т, 3Н), 0,73 (с, 3Н).
1.1ЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 520,4 (т+1).
Пример 220.
Я1 = 2-инданил; Я3 = СОСН(ОАс)СН
- 105 005686
2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]1-метил-2-оксоэтилацетат.
Промежуточный продукт 51 (27 мг, 0,074 ммоль) ацилируют процедурой с К2СО3 примера 7 с использованием (+)-2-ацетоксипропионилхлорида (12,1 мкл, 0,110 ммоль, 1,5 экв.), получая при этом прозрачное, бесцветное масло (16,7 мг, 47%).
1Η ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,27-7,17 (м, 4Н), 6,85-6,83 (м, 3Η), 5,30-5,17 (м, 2Н), 4,13-3,19 (сл., 9Н), 2,14 (с, 3Η), 1,72 (шир. с, 1Н), 1,51-1,47 (м, 4Н), 1,19-1,17 (д, 3Η), 0,82-0,78 (д, 3Η).
Пример 221.
К1 = 2-инданил; К3 = СОСН(ОН)СН3 1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]-
2-гидроксипропан-1-он.
Соединение примера 220 (16,7 мг, 0,0347 ммоль, 1 экв.) подвергают процедуре гидролиза с ΜΟΗ промежуточного продукта 5, получая при этом белое твердое вещество (4,7 мг, 31%).
1Η ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,27-7,17 (м, 4Н), 6,85-6,84 (м, 3Η), 5,19-5,15 (м, 1Н), 4,39-4,35 (м, 1Н), 3,90-3,18 (сл., 14Н), 1,57-1,37 (м, 3Η), 1,28-1,15 (м, 3Η), 0,80-0,78 (д, 3Η).
ЕКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 440,4 (т+1).
Пример 222.
К1 = 2-инданил; К3 = СОС(СН3)(ОАс)СН3
2-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]1,1-диметил-2-оксоэтилацетат.
Промежуточный продукт 51 (40 мг, 0,11 ммоль) ацилируют процедурой с К2СО3 примера 7 с использованием 2-ацетокси-2-метилпропионилхлорида (31 мкл, 0,22 ммоль, 2 экв.), получая при этом прозрачное, бесцветное масло (22 мг, 40%).
1Η ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,26-7,16 (м, 4Н), 6,85-6,77 (м, 3Η), 4,17 (м, 1Н), 3,953,19 (сл., 14Н), 2,10 (с, 3Η), 1,65-1,57 (м, 6Н), 1,20-1,17 (м, 3Η), 0,73 (с, 3Η).
Пример 223.
К1 = 2-инданил; К3 = СОС(СН3)(ОН)СН3 1-[3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-индан-2-илокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2-гидрокси-2-метилпропан-1-он.
Соединение примера 222 (22 мг, 0,044 ммоль) подвергают процедуре гидролиза с ΏΟΗ промежуточного продукта 5, получая при этом продукт в виде белого твердого вещества (4,3 мг, 22%).
1Η ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,26-7,17 (м, 4Н), 6,83 (м, 3Η), 5,18-5,17 (м, 1Н), 4,454,44 (м, 1Н), 1Н), 3,89-3,19 (сл., 14Н), 1,53-1,48 (м, 6Н), 1,19-1,17 (м, 3Η), 0,79-0,78 (д, 3Η).
- 106 005686
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 454,4 (т+1).
Пример 224.
В1 = ΐ-Ви; В3 = СО2СН3
Метил-(3В)-3-((1В)-1-гидроксиэтил)-4-[3-(трет-бутокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Промежуточный продукт 73 (6,5 мкл, 0,084 ммоль) ацилируют способом с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием метилхлорформиата, получая при этом соединение примера 224 в виде желтого масла (19 мг, 94%).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ: 6,96 (д, 1Н), 6,84 (с, 1Н), 6,83 (д, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 3,77-3,58 (м, 4Н), 3,06 (д, 1Н), 1,36 (с, 9Н), 1,16 (д, 3Н), 0,76 (с, 3Н).
Пример 225.
2-Гидрокси-1-((38,48)-3-((В)-1-гидроксиэтил)-4-{4-метокси-3-[2-(тетрагидрофуран-2-ил)этокси] фенил }-3-метилпирролидин-1-ил)этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу примера 144 с использованием 2тетрагидрофуран-2-илэтанола с последующим дебензилированием посредством способа промежуточного продукта 31.
Данные 1Н ЯМР δ: 6,75-6,87 (м, 3Н); 4,16-4,20 (м, 2Н); 4.15 (с, 3Н); 3,49-4,13 (м, 11Н); 3,05 (д, 1Н);
1,97-2,10 (м, 2Н); 1,88-1,96 (т, 2Н); 1,56-1,63 (м, 2Н); 1,3-1,17 (т, 3Н); 0,75 (с, 3Н).
Пример 226.
2-Гидрокси-1 -{(38,48)-3-((В)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(тетрагидрофуран-3-илметокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил}этанон.
Получают из соединения примера 143 способом Мицунобу примера 144 с использованием тетрагидрофуран-3-илметанола с последующей процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
Данные 1Н ЯМР δ: 6,79-6,82 (м, 3Н); 4,13-4,16 (м, 2Н); 3,48-3,98 (м, 11Н); 3,84 (с, 3Н); 3,05 (д, 1Н); 2,80 (шир. т, 1Н); 2,07-2,15 (м, 2Н); 1,72-1,79 (м, 1Н); 1,16 (т, 3Н); 0,76 (с, 3Н).
Пример 227.
В1 = (8)-СН(СН2ОСН2СН2); В3 = СО2СН3
Метил-(3В)-3-((1В)-1-гидроксиэтил)-4-[3-((38)-оксолан-3-илокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Из промежуточного продукта 74 (146 мг, 0,47 ммоль) процедурой Мицунобу в твердой фазе примера 144 с использованием (8)-(+)-3-гидрокситетрагидрофурана (38 мкл, 0,47 ммоль) получают соединение примера 227 в виде прозрачного масла (95 мг, 53%).
- 107 005686 2Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) δ: 6,82 (м, 2Н), 6,78 (м, 1Н), 4,95 (м, 1Н), 4,03-3,20 (м, 10Н), 3,82 (с, 3Н), 3,66 (с, 3Н), 2,17 (м, 2Н), 1,17 (т, 3Н), 0,73 (с, 3Н).
ГЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 379,8 (т+1).
д
Пример 228.
Я1 = (Я)-СН(СН2ОСН2СН2); Я3 = СО2СН3
Метил-(3Я)-3-((1Я)-1-гидроксиэтил)-4-[3-((3Я)-оксолан-3-илокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Из промежуточного продукта 74 с использованием реакции Мицунобу в твердой фазе примера 144 и (Я)-(-)-3-гидрокситетрагидрофурана (46 мкл, 0,57 ммоль) получают соединение примера 228 в виде прозрачного масла (27 мг, 37%).
2Н ЯМР (400 МГц, δ: 6,82 (м, 2Н), 6,78 (м, 1Н), 4,95 (м, 1Н), 4,03-3,20 (м, 10Н), 3,82 (с, 3Н),
3,66 (с, 3Н), 2,17 (м, 2Н), 1,17 (т, 3Н), 0,73 (с, 3Н).
ГЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 380,3 (т+1).
Пример 229.
Я1 = СН2СН2О-4-ГРй; Я3 = СО2СН3
Метил-3-((1Я)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-{3-[2-(4-фторфенокси)этокси]-4-метоксифенил}-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Процедурой получения простого эфира с К2СО3 примера 43 с использованием промежуточного продукта 74 (21,2 мг, 0,0685 ммоль, 1 экв.) и 4-фторфеноксиэтилбромида (60 мг, 0,27 ммоль, 4,0 экв.) получают прозрачное, бесцветное масло (15,2 мг, 49,7%).
2Н ЯМР (400 МГц, ОСЪ) δ: 6,99-6,83 (сл., 7Н), 4,35 (т, 2Н), 4,29 (т, 2Н), 3,83 (с, 3Н), 3,72 (с, 3Н), 3,83-3,48 (сл., 4Н), 3,25 (дд, 1Н), 1,64 (с, 1Н), 1,42 (шир. д, 1Н), 1,13 (т, 3Н), 0,73 (с, 3Н).
Пример 230.
Я1 = СН2СН2СН2О-4-ЕРН; Я3 = СО2СН3
Метил-3-((1Я)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-{3-[3-(4-фторфенокси)пропокси]-4-метоксифенил}-3метилпирролидинкарбоксилат.
Из промежуточного продукта 74 (25,2 мг, 0,0815 ммоль, 1 экв.) процедурой получения простого эфира с К2СО3 примера 43 с использованием 1-(3-хлорпропокси)-4-фторбензола (62 мг, 0,33 ммоль, 4,0 экв.) получают соединение примера 230 в виде прозрачного, бесцветного масла (19,0 мг, 50,5%).
Ή ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 6,97-6,80 (сл., 7Н), 4,19 (м, 2Н), 4,13 (т, 2Н), 3,82 (с, 3Н), 3,72 (с, 3Н), 3,83-3,48 (с, 4Н), 3,25 (дд, 1Н), 2,27 (квинтет, 2Н), 1,70 (с, 1Н), 1,56 (шир. д, 1Н), 1,13 (т, 3Н), 0,73 (с, 3Н).
Пример 231.
Я1 = С'Н;С' С'Н; Я3 = СО2СН3
Метил-3-((1Я)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-(4-метокси-3-проп-2-инилоксифенил)-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира с К2СО3 примера 43 с использованием пропаргилбромида.
2Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ: 6,97 (с, 1Н), 6,87-6,82 (м, 2Н), 4,76 (с, 2Н), 3,86 (с, 3Н), 3,73 (с, 3Н), 3,90-3,55 (м, 5Н), 3,27 (дд, 1Н), 2,48 (с, 1Н), 1,49-1,46 (м, 1Н),1,14 (т, 3Н), 0,75 (с, 3Н).
- 108 005686
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Иа/е 348,1 (т+1).
Пример 232.
К1 = СН2С=ССН3; К3 = СО2СН3
Метил-3-((1К)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-бут-2-инилокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры получения простого эфира с К2СО3 примера 43 с использованием 1-бром-2-бутина.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13) δ: 6,96 (с, 1Н), 6,85-6,82 (м, 2Н), 4,72-4,71 (м, 2Н), 3,86 (с, 3Н), 3,72 (с, 3Н), 3,90-3,55 (м, 5Н), 3,27 (дд, 1Н), 2,48 (с, 1Н), 1,81 (с, 3Н), 1,52-1,48 (м, 1Н), 1,14 (т, 3Н), 0,77 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораеныление, положительные ионы): Иа/е 362,2 (т+1).
Пример 233.
К1 = СН2С=СРй; К3 = СО2СН3
Метил-3-((1К)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 реакцией Мицунобу примера 144 с использованием 3фенил-2-пропин-1-ола.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 7,41-7,38 (м, 2Н), 7,32-7,27 (м, 3Н), 7,07 (д, 1Н), 6,84 (с, 2Н), 5,00-4,94 (м, 2Н), 3,88 (с, 3Н), 3,72 (с, 3Н), 3,80-3,69 (м, 3Н), 3,57-3,50 (м, 2Н), 3,23 (дд, 1Н), 1,351,32 (м, 1Н), 0,98-0,94 (дд,3Н), 0,70 (д, 3Н).
1.1КМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Иа/е 424,2 (т+1).
Пример 234.
К1 = СН2С=С-4-РРй; К3 = СО2СН3
Метил-3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-{3-[3-(4-фторфенил)проп-2-инилокси]-4-метоксифенил}-
3-метилнирролидинкарбоксилат.
Получают из промежуточного продукта 74 посредством процедуры Мицунобу в твердой фазе примера 144 с использованием промежуточного продукта 89.
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 7,40-7,36 (м, 2Н), 7,04-6,97 (м, 3Н), 6,85 (с, 2Н), 4,97 (с, 2Н), 3,88 (с, 3Н), 3,72 (с, 3Н), 3,86-3,65 (м, 3Н), 3,58-3,48 (м, 2Н), 3,24 (дд, 1Н), 1,013 (т, 3Н), 1,14 (т, 3Н), 0,71 (д, 3Н).
1.1КМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Иа/е 442,5 (т+1).
Пример 235.
К1 = СН2С=СРй; К3 = СОСН28Ас
1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидинил }-2-ацетилтиоэтан-1-он.
Из соединения примера 118 (30 мг, 0,082 ммоль, 1,0 экв.) процедурой с С§2СО3 примера 176 с использованием фенилпропаргилмезилата (17,4 мг, 0,082 ммоль, 1,0 экв.) получают прозрачное, бесцветное масло (13,2 мг, 33%).
1Н ЯМР (400 МГц, СВС13, смесь ротамеров) δ: 7,45-6,86 (м, 8Н), 4,13-3,49 (сл., 12Н), 2,31 (с, 3Н), 1,60 (с, 1Н), 1,28-1,24 (дд, 1Н), 1,15-1,08 (дд, 3Н), 0,73 (с,3Н).
1-{3-((1К)-1-Гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидинил }-2-сульфанилэтан-1-он.
Получают из соединения примера 235 (13,2 мг, 0,0274 ммоль) процедурой гидролиза с ЫОН промежуточного продукта 5 продукт в виде прозрачного, бесцветного масла (10,5 мг, 87%).
1Н ЯМР (СВ3ОН, 400 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,41-7,20 (м, 5Н), 6,91-6,75 (м, 3Н), 4,01-3,29 (сл., 12Н), 3,21 (с, 1Н), 1,88 (с, 1Н), 1,38-1,21 (м, 1Н), 1,07-1,03 (м, 3Н), 0,73-0,72 (м, 3Н).
- 109 005686
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Пае 440,4 (т+1).
Промежуточный продукт 93.
трет-Бутиловый эфир {2-[(38,48)-3-(К)-1-гидроксиэтил)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-1-ил]-2-оксоэтил} карбаминовой кислоты.
В колбу, содержащую раствор промежуточного продукта 70 (67,2 мг, 0,27 ммоль), в диоксане (2,0 мл) добавляют 1,0М раствор водного К2СО3 (1,0 мл, 1,0 ммоль). Через шприц к смеси добавляют раствор п-нитрофенилового эфира Ν-Вос-глицина (236 мг, 0,79 ммоль) в диоксане (100 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь разбавляют ΕΐΟΑс (100 мл), затем промывают водным NаИСΟ3 (3 х 50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл), сушат над №28О)|, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом желтый порошок (43 мг, выход 84%).
Ή ЯМР (СБС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,88-6,77 (м, 2Н, ароматические), 6,75-6,65 (м, 1Н, ароматический), 5,56 (шир. с, 1Н, ΝΗ), 4,07-3,83 (м, 3Η), 3,89 (с, 3Η, ОМе), 3,82-3,68 (м, 2Н), 3,67-3,52 (м, 2Н), 3,46 (д, 1Н, I = 11,5 Гц), 3,19 (д, 1Н, I = 11,5 Гц), 1,46 (с, 9Н), 1,16-1,05 (м, 3Η), 0,74 (д, 3Η).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Пае 353,151 (т+1).
Пример 237.
2-Амино-1 -((38,48)-3-((К)-1 -гидроксиэтил)-4- {4-метокси-3-[3-(4-трифторметилфенил)проп-2инилокси]фенил}-3-метилпирролидин-1-ил)этанон.
Из промежуточного продукта 93 способом с Сз2СО3 примера 176 с применением процедуры примера 109 получают продукт в виде янтарного масла (12,7 мг, выход 4,1%).
Ή ЯМР (СБС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,55-7,4 (м, 4Н, ароматические), 7,93 (с, 1Н, ароматический), 6,85-6,7 (м, 2Н, ароматические), 4,96 (с, 2Н), 4,38 (шир. с, 2Н), 4,0-3,4 (м, 7Н), 3,83 (д, 3Η, ОМе), 3,2 (дд, 1Н), 1,0-0,88 (м, 3Η), 0,65 (м, 3Η).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Пае 491,20 (т+1).
Пример 238.
К1 = ΐ-Ви; К3 = СОСО2СН3
Метил-2-{3-((1К)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-[3-(трет-бутокси)-4-метоксифенил]-3-метилпирролидинил}-2-оксоацетат.
Получают из промежуточного продукта 73 посредством процедуры сочетания с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием метилоксалилхлорида.
Ή ЯМР (400 МГц, СБС13, смесь ротамеров) δ: 6,93-6,81 (м, 3Η), 4,01-3,44 (сл., 12Н), 1,32 (с, 9Н), 1,16-1,12 (дд, 3Η), 0,77-0,74 (д, 3Η).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Пае 394,0 (т+1).
- 110 005686
Пример 239.
В1 = Н; В3 = СОСО2СН3
Метил-2-[3-((1В)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-(3-(гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидинил]2-оксоацетат.
Получают из соединения примера 238 посредством способа снятия защиты с применением ТФУ примера 143.
!Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 6,85-6,70 (м, 3Н), 5,60-5,56 (шир. м, 1Н), 4,00-3,46 (сл., 12Н), 1,17-1,13 (дд, 3Н), 0,79-0,76 (д и д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 338,1 (т+1).
ΖΓ
Пример 240.
В1 = СН2С (‘ΡΙι; В3 = СОСО2СН3
Метил-2-{3-((1В)-1-гидроксиэтил)-(38,48)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3метилпирролидинил}-2-оксоацетат.
Получают из соединения примера 239 посредством способа Мицунобу примера 144 с использованием 3-фенил-2-пропин-1-ола.
!Н ЯМР (400 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,41-7,26 (м, 5Н), 7,07 (с, 1Н), 6,86-6,85 (м, 2Н), 5,054,95 (м, 2Н), 4,06-3,43 (сл., 12Н), 0,98-0,91 (дд, 3Н), 0,74-0,71 (д, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 452,7 (т+1).
Промежуточный продукт 94.
1-Бензил-4-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-метил-3-винилпирролидин.
В круглодонную колбу, снабженную лопастной мешалкой и каучуковой мембраной, загружают сухой диэтиловый эфир (10 мл) и бромид метилтрифенилфосфония (1,88 г, 5,27 ммоль) в атмосфере азота. Затем через шприц добавляют бутиллитий (2,32 мл, 5,80 ммоль, 2,5М в гексанах), получая при этом оранжево-желтую суспензию, которую перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Затем добавляют раствор в Εϊ2Ο промежуточного продукта 65 (2,0 г, 5,27 ммоль в 10 мл эфира), что вызывает немедленное обесцвечивание. После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч реакционную смесь гасят насыщенным раствором ΝΗ.·|ί.Ί. экстрагируют ΕΐОΑс (2 х 50 мл), сушат (Ш28О4) и концентрируют. Колоночная хроматография (система Вю!аде, картридж 40М, 25% ЕЮАс/гексан) дает 850 мг (43%) оранжевого масла.
!Н ЯМР (400 МГц, СОСД) δ: 7,42-7,23 (м, 5Н), 6,80-6,68 (м, 3Н), 6,05 (дд, 1Н), 4,95 (дд, 1Н), 4,87 (дд, 1Н), 4,87 (дд, 1Н), 3,86-3,79 (м, 6Н), 3,71 (дд, 2Н), 3,22 (т, 1Н), 3,04-2,96 (м, 2Н), 2,81 (д, 1Н), 2,52 (д, 1Н), 1,37-1,26 (м, 1Н), 0,77 (с, 3Н), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,37-0,32 (м, 2Н).
- 111 005686
Промежуточный продукт 95.
Метиловый эфир 4-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-метил-3-винилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
Раствор промежуточного продукта 94 (480 мг, 1,27 ммоль) в 10 мл ацетонитрила обрабатывают метилхлорформиатом (491 мкл, 6,36 ммоль) и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 6 ч. Реакционную смесь затем концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией (система Вю!аде, картридж 40§, от смеси 10% Е!ОАс/гексан до смеси 20% Е!ОАс/гексан), получая при этом 237 мг оранжевого масла (54%).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ: 6,81 (д, 1Н), 6,72-6,67 (м, 2Н), 5,87 (дд, 1Н), 5,09 (д, 1Н), 4,95 (дд, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,84-3,68 (м, 7Н), 3,52-3,32 (м, 2Н), 3,14 (т, 1Н), 1,35-1,25 (м, 1Н),0,85 (с, 3н), 0,66-0,60 (м, 2Н), 0,37-0,32 (м, 2Н).
Пример 241.
Я1 = СН2С3Н5; Я3 = СО2СН3; Кд = Н; Я5 = СН2ОН; Я = Н
Метиловый эфир 4-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(1,2-дигидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-карбоновой кислоты.
В реакционный сосуд, снабженный лопастной мешалкой, загружают промежуточный продукт 95 (46 мг, 0,133 ммоль), ацетон (250 мкл), воду (500 мкл) и Ν-оксид Ν-метилморфолина (17,1 мг, 0,146 ммоль). К данной смеси добавляют тетраоксид осмия в трет-бутаноле (50 мкл, 0,004 ммоль, 2,5 мас.% раствор). Образовавшуюся смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакционную смесь затем разбавляют 10% водным раствором тиосульфата натрия (5 мл), фильтруют через фильтровальную бумагу ОГ/Г. Фильтрат экстрагируют Е!ОАс (2 х 10 мл), сушат (Ж28О4) и концентрируют. Очистка с В1о!аде (картридж 128, смесь 1:1:0,1 Е!ОАс/гексан/МеОН, получая при этом 18 мг соединения примера 241 (36%).
1Н ЯМР (400 МГц, СВОД δ: 6,81 (д, 1Н), 3,86 (с, 3Н), 3,85-3,36 (сл., 15Н), 3,23 (дд, 1Н), 1,35-1,27 (м, 1Н), 0,75 (с, 3Н), 0,66-0,59 (м, 2Н), 0,38-0,32 (м, 2Н).
ГЕМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 380,2 (т+1).
Пример 242.
Я1 = СН2С3Н5; Я3 = (8)-СОСН(СН2ОС(СН3)(СН3)О) [4-(8)-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)-(1-(Я)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1ил]-(2,2-диметил[1,3]диоксолан-4-(8)-ил)метанон.
Промежуточный продукт 67 ацилируют процедурой с основанием Хюнига промежуточного продукта 74 с использованием 2,2-диметил[1,3]диоксолан-4-(8)-карбонилхлорида, получая при этом соединение примера 242 (22%).
1Н ЯМР (СОС13, 400 МГц) δ: 6,83-6,78 (д, 4Н), 4,71-4,65 (м, 1Н), 4,37-4,32 (м, 1Н), 4,23-4,15 (м, 1Н), 3,95-3,44 (м, 10Н), 1,72-1,15 (м, 10Н), 0,76 (с, 3Н), 0,67-0,62 (м, 2Н), 0,38-0,33 (м, 2Н).
ГЕМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)ае 434,4 (т+1).
- 112 005686
Пример 243.
В1 = СН2С3Н5; В3 = (8)-СОСН(ОН)СН2ОН
1-[4-(8)-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)-(1-(В)-гидроксиэтил)-3-метилпирролидин1-ил]-2-(8)-дигидроксипропан-1-он.
Соединение примера 242 (9 мг, 20 мкмоль) растворяют в растворе уксусная кислота/вода (3:1, 0,9 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 72 ч. Раствор нейтрализуют выливанием в раствор \аНСО3. Раствор концентрируют досуха, затем твердое вещество экстрагируют пять раз СН2С12. Объединенную органическую часть сушат над \а28О.| и концентрируют в вакууме (5,1 мг, 62%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 6,84-6,76 (м, 3Н), 4,40-4,37 (м, 1Н), 3,89-3,32 (м, 11Н), 2,33-1,95 (м, 1Н), 1,34-1,12 (м, 7Н), 0,89-0,81 (м, 1Н), 0,78-0,73 (м, 3Н), 0,66-0,61 (м, 2Н), 0,37-0,32 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 394,0 (т+1).
Пример 244.
В1 = 2-инданил; В3 = (В)-СОСН(ОН)СН2ОН (В)-2,3-Дигидрокси-1 -{(38,48)-3-((В)-1-гидроксиэтил)-4-[3-(индан-2-илметокси)-4-метоксифенил]3-метилпирролидин-1 -ил}пропан-1-он.
Получают из промежуточного продукта 96 процедурой, описанной в примере 75, и защитную группу удаляют, как в примере 243.
1Н ЯМР (СЭС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,26-7,16 (м, 4Н, ароматические), 6,83-6,82 (шир. с, 3Н, ароматические), 5,19-5,15 (м, 1Н), 4,45-4,32 (м, 1Н), 4,10-3,50 (м, 8Н), 3,80 (д, 3Н, ОМе), 3,45-3,12 (м, 5Н), 1,27-1,25 (м, 1Н), 1,20-1,15 (м, 3Н), 0,79-0,77 (м, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 470,58 (т+1).
Пример 245.
В1 = 4-Р-РЙ-ОСН2СН2СН2; В3 = (В)-СОСН(ОН)СН2ОН (8)-1-[(38,48)-4-{3-[3-(4-Фторфенокси)пропокси]-4-метоксифенил}-3-((В)-1-гидроксиэтил)-3метилпирролидин-1-ил]-2,3-дигидроксипропан-1-он.
Получают процедурой, описанной в примере 243.
1Н ЯМР (СЭС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,99-6,92 (м, 2Н, ароматические), 6,87-6,79 (м, 5Н, ароматические), 4,39 (с, 1Н), 4,22-4,12 (м, 4Н), 4,0 (д, 1Н), 3,89-3,56 (м, 7Н), 3,83 (с, 3Н, ОМе), 3,4-3,3 (дд, 1Н), 2,32-2,24 (м, 2Н), 1,17-1,12 (м, 3Н), 0,7 (д, 3Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Эа/е 492,25 (т+1).
- 113 005686
Промежуточный продукт 96.
1-((К)-2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-1-[(38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-(3-гидрокси-4метоксифенил)-3-метилпирролидин-1-ил)метанон.
В круглодонную колбу, снабженную лопастной мешалкой и каучуковой мембраной, загружают 5[4-(1-гидроксиэтил)-4-метилпирролидин-3-ил)-2-метоксифенол (2,4 г, 9,55 ммоль), сухой СН2С12 (50 мл) и ΌΙΕΑ (3,49 мл, 20,1 ммоль) в атмосфере азота. Смесь охлаждают до 0°С и по каплям через шприц добавляют (8)-2,2-диметил[1,3]диоксолан-4-карбонилхлорид (3,14 г, 19,1 ммоль) в 15 мл СН2С12. Реакционной смеси дают возможность постепенно нагреться до комнатной температуры на протяжении 16часового периода. Смесь затем разбавляют 50 мл СН2С12, промывают 1н. НС1 (2 х 50 мл), насыщенным водным ЫаНСО3 (1 х 50 мл), сушат над Ыа28О4 и концентрируют до получения 3,9 г рыжеватокоричневой пены. Материал растворяют в 100 мл СН3ОН и охлаждают до 0°С. Затем добавляют три эквивалента водного 1н. Ь1ОН (29 мл, 29,0 ммоль), смесь перемешивают при 0°С в течение 2 ч, затем нагревают до комнатной температуры в течение 2 ч. Реакционную смесь затем концентрируют при пониженном давлении с температурой бани при 30°С для удаления СН3ОН. Оставшийся водный материал нейтрализуют насыщенным ЫН4С1 до рН 7 и экстрагируют ΕΐΟΑс (2 х 100 мл). Экстракты сушат над Ыа28О4 и концентрируют до получения 2,74 г рыжевато-коричневой пены (76%).
1Н ЯМР (СПС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 6,90-6,70 (м, 3Н), 5,66 (шир. с, 1Н), 4,68 (т, 1Н), 4,34 (т, 1Н), 4,23-4,09 (м, 6Н), 3,89 (с, 3Н), 3,94-3,42 (м, 5Н), 1,49-1,37 (м, 6Н), 1,17 (д, 3Н), 0,76 (с, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а-е 378,3 (т-1).
Пример 246.
К1 = Г3С-РЪ-С=ССН3; К3 = СО-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил
1-((К)-2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-1-((38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-{4-метокси-3-[3-(4трифторметилфенил)проп-2-инилокси]фенил}-3-метилпирролидин-1-ил)метанон.
В колбу, содержащую безводный С§2СО3 (67 мг, 0,206 ммоль, 1,1 экв.), в атмосфере азота добавляют раствор промежуточного продукта 96 (71 мг, 0,187 ммоль, 1,0 экв.) в безводном ацетоне (1 мл). К смеси через шприц добавляют промежуточный продукт 92 (52,1 мг, 0,187 ммоль, 1,0 экв.). Реакционную смесь затем нагревают и перемешивают при 65°С в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и разбавляют водой (50 мл). Водный раствор экстрагируют ΕΐΟΑс (3 х 30 мл) и объединенную органическую часть промывают насыщенным раствором соли (50 мл), затем сушат над Ыа28О4, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом белый пенообразный продукт (104 мг).
1Н ЯМР (СОС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,5-7,35 (м, 4Н, ароматические), 6,96 (д, 1Н, ароматический), 6,85-6,75 (м, 2Н, ароматические), 4,92 (д, 2Н, СН2), 4,65-4,50 (м, 1Н), 4,35-4,20 (м, 1Н), 4,154,00 (м, 1Н), 3,85-3,40 (м, 5Н), 3,8 (д, 3Н, ОМе), 3,35-3,30 (дд, 1Н), 1,45-1,25 (2д, 6Н, Ме), 1,0-0,9 (м, 3Н), 0,63 (м, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а-е 562,25 (т+1).
Пример 247.
К1 = Г3С-РЪ-С=ССН2; К3 = СО-СН(ОН)СН2ОН (К)-2,3-Дигидрокси-1-((38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-{4-метокси-3-[3-(4-трифторметилфенил) проп-2-инилокси]фенил}-3-метилпирролидин-1-ил)пропан-1-он.
В реакционный сосуд, содержащий соединение примера 246 (104 мг, 0,185 ммоль) добавляют уксусную кислоту (3,0 мл) и воду (1,0 мл). Сосуд затем герметизируют, нагревают до 50°С и перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ВЭЖХ с обращенной фазой на С18-колонке (Ьипа 10; С18, 250 х 10 мм). Градиентное элюирование с применением 50-100% раствора ацетонитрил-вода (0,05 ТФУ) дает продукт в виде янтарного масла (27,8 мг, выход 28,5%).
1Н ЯМР (СЭС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,6-7,45 (м, 4Н, ароматические), 7,69 (д, 1Н, ароматический), 6,9-6,82 (м, 2Н, ароматические), 5,0 (м, 2Н), 4,4-4,32 (м, 1Н), 4,1-3,2 (м, 7Н), 3,89 (д, 3Н, ОМе), 1,05 (с, 3Н), 0,72 (м, 3Н).
ЬКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а-е 522,15 (т+1).
- 114 005686
Пример 248.
К1 = 3-тиенил-СН2СН2; К3 = ^-^Ο^ΡΗ
2-Бензилокси-1-{(38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(2-тиофен-3-илэтокси)фенил]-3метилпирролидин-1 -ил } этанон.
Получают алкилированием соединения примера 143 процедурой с К2СО3 примера 7 с использованием 2-(3-тиенил)этилбромида.
Данные 1Η ЯМР δ: 7,27-7,38 (м, 6Н); 7,05-7,07 (м, 1Н); 7,12-7,13 (м, 1Н); 6,74-6,84 (м, 3Η); 6,05 (с, 2Н); 4,15-4,22 (м, 4Н); 3,44-3,93 (м, 6,5Н); 3,86 (с, 3Η); 3,14-3,24 (м, 2,5Н); 1,13 (дд, 3Η); 0,72 (с, 3Η).
Пример 249.
К1 = РН(цикло-С3Н4)СН2; К3 = №^ΟΗ 2-Гидрокси-1-{(38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-((К)-2-фенилциклопропилметокси) фенил ]-3-метилпирролидин-1-ил } этанон.
Получают алкилированием соединения примера 143 процедурой Мицунобу примера 144 с использованием 2-фенилциклопропанола и удалением бензильной группы процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
Данные 1Н ЯМР δ: 7,17-7,30 (м, 5Н); 6,72-6,85 (м, 3Η)); 4,00-4,14 (м, 2Н); 3,49-3,98 (м, 8,5Н); 3,86 (с, 3Η); -3,05 (д, 0,51-1); 2,86-2,93 (м, 1Н); 2,51-2,60 (м, 1Н); 2,27-2,34 (м, 1Н), 1,02-1,05 (дд, 3Η); 0,74 (сд, 3Η).
Пример 250.
К1 = С5Н9СН2СН2СН2; К3 = СОСН2ΟН
1-[(38,48)-4-[3-(3-Циклопентилпропокси)-4-метоксифенил]-3-((К)-1 -гидроксиэтил)-3-метилпирролидин-1-ил]-2-гидроксиэтанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой Мицунобу примера 144 с использованием 3циклопентилпропан-1-ола и удалением бензильной группы процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
Данные 1Η ЯМР δ: 6,75-6,83 (м, 3Η)); 4,12-4,15 (м, 2Н); 3,96-4,01 (м, 2,5Н); 3,86 (с, 3Η); 3,79-3,86 (м, 1Н); 3,59-3,70 (м, 4Н); 3,06 (м, 0,5Н); 1,75-1,88 (м, 5Н); 1,44-1,61 (м, 6Н); 1,16 (т, 5Н); 0,77 (сд, 3Η).
Пример 251.
К1 = ΡΙΚΊ ΙΌΙΙΧΊ 1< К3 = ^№2ΟΗ
2-Гидрокси-1-{(38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпропокси)фенил]-3-метилпирролидин-1-ил } этанон.
- 115 005686
Получают из соединения примера 143 процедурой с К2СО3 примера 7 с использованием 3фенилпропилхлорида и удалением бензильной группы процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
Данные 1Н ЯМР δ: 7,16-7,31 (м, 5Н); 6,74-6,85 (м, 3Н)); 4,13-4,15 (м, 2Н); 3,94-4,04 (м, 2Н); 3,86 (с, 3Н); 3,76-3,83 (м, 1Н); 3,47-3,70 (м, 4Н); 3,04-3,07 (м, 3Н); 2,80-2,85 (т, 2Н); 2,10-2,20 (квинтет, 2Н); 1,14 (т, 3Н); 0,74 (с, 3Н).
Пример 252.
В1 = 1-гидроксииндан-2-ил; В3 = СОСНО2ОН
2-Гидрокси-1-{(3 8,48)-3-((В)-1 -гидроксиэтил)-4-[3-(1-гидроксииндан-2-илокси)-4-метоксифенил]-3метилпирролидин-1 -ил } этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой с К2СО3 примера 7 с использованием оксида индена и удалением бензильной группы процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
Данные 1Н ЯМР δ: 7,48-7,51 (м, 1Н); 7,24-7,32 (м, 3Н); 6,85-6,96 (м, 3Н)); 5,11-5,14 (м, 1Н); 4,84-4,89 (м, 1Н); 3,98-4,15 (м, 3Н); 3,84-3,86 (м, 1Н); 3,83 (с, 3Н); 3,50-3,78 (м, 4,5Н); 3,16-3,32 (м, 2Н); 3,06 (д, 0,5Н); 1,15-1,20 (м, 3Н); 0,77 (с,3Н).
Пример 253.
В1 = 4-СН3ОРйСН2СН2; В3 = СОСН2ОН
2-Гидрокси-1-((38,48)-3-((В)-1-гидроксиэтил)-4-{4-метокси-3-[2-(4-метоксифенил)этокси]фенил}-3метилпирролидин-1-ил)этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой с К2СО3 примера 7 с использованием 1-(2хлорэтил)-4-метоксибензола и удалением бензильной группы процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
Данные 1Н ЯМР δ: 7,20-7,23 (д, 2Н); 6,74-6,88 (м, 5Н)); 4,10-4,18 (м, 4Н); 3,72-3,91 (м, 2Н); 3,86 (с, 3Н); 3,80 (с, 3Н); 3,48-3,64 (м, 4Н); 3,02-3,11 (м, 2Н); 1,12-1,17 (м, 3Н); 0,74 (с, 3Н).
Пример 254.
В1 = СН3(цикло-С3Н4)СН2; В3 = СОСН2ОН
2-Гидрокси-1-{(38,48)-3-((В)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-((В)-2-метилциклопропилметокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил } этанон.
Получают из соединения примера 143 процедурой с К2СО3 примера 7 с использованием 1-(2хлорэтил)-4-метоксибензола и удалением бензильной группы процедурой дебензилирования промежуточного продукта 31.
Данные 1Н ЯМР: 6,77-6,84 (м, 3Н)); 4,15-4,18 (м, 2Н); 3,78-3,99 (м, 4Н); 3,86 (с, 3Н); 3,49-3,71 (м, 3,5Н); 3,08 (д, 0,5Н); 1,14-1,19 (м, 3Н); 1,07 (сд, 3Н); 0,92-1,03 (м, 1Н); 0,76-0,77 (м, 4Н); 0,50-0,52 (м, 1Н); 0,37-0,41 (м, 1Н).
- 116 005686
Пример 255.
1-(Я)-[1-(2-Бензилоксиэтил)-4-(8)-(3-циклонентилокси-4-метоксифенил)-3-(8)-метилнирролидин-3ил]этанол.
Промежуточный продукт 68 (86,4 мг, 0,27 ммоль) растворяют в 1,2-дихлорэтане (1 мл) и раствор обрабатывают бензилоксиацетальдегидом (38 мкл, 0,27 ммоль), затем триацетоксиборогидридом натрия (81 мг, 0,38 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при комнатной температуре. Добавляют дополнительный триацетоксиборогидрид натрия (40 мг, 0,19 ммоль) и перемешивание продолжают в течение 8 ч. Реакционную смесь разбавляют 1,0М \аО11 (0,5 мл) и энергично перемешивают в течение 15 мин. Слои разделяют, водную фазу промывают СН2С12 и органические слои объединяют. После промывания 6% \а11СО3 органическую часть сушат \а38О3, затем концентрируют в вакууме. Сырой материал (129 мг) хроматографируют на силикагеле с применением смеси СНС13/95% этанол/конц. \Н3ОН (170:15:1), получая при этом соединение примера 255 (27 мг, 22%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,36-7,26 (м, 5Н), 6,81-6,73 (м, 3Н), 4,79-4,73 (м, 1Н), 4,54 (с, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 3,71-3,54 (м, 4Н), 3,40-3,35 (м, 1Н), 3,24-3,21 (м, 1Н), 2,80-2,67 (м, 2Н), 2,63-2,56 (м, 1Н), 2,16-2,09 (м, 1Н), 1,95-1,88 (м, 8Н), 1,65-1,57 (м, 2Н), 1,22-1,10 (м, 3Н), 0,49 (м, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 454,5 (т+1).
Пример 256.
1-(Я)-[4-(8)-(3-Циклопентилокси-4-метоксифенил)-1-(2-гидроксиэтил)-3-(8)-метилпирролидин-3ил]этанол.
Соединение примера 255 (25 мг, 55 ммоль) подвергают процедуре дебензилирования промежуточного продукта 31, получая при этом соединение примера 256 (7,4 мг, 28%) в виде соли ТФУ после очистки ВЭЖХ.
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 6,84-6,65 (м, 3Н), 5,40-4,90 (шир. 2Н), 4,74 (шир. с, 1Н), 4,26-3,21 (м, 11Н), 1,97-1,73 (м, 6Н), 1,66-1,56 (м, 3Н), 1,33-0,77 (м, 4Н), 0,69 (с, 3Н).
ЬЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 364,4 (т+1).
Пример 257.
2-Бензилокси-1-[4-(8)-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)-гидроксиметил-3-метилпирролидин-1-ил]этанон.
[4-(8)-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)-метилпирролидин-3-ил]метанол (100 мг, 0,34 ммоль) растворяют в СН2С12 (1,7 мл) и раствор охлаждают до 0°С. Добавляют ΏΙΕΑ (144 мкл, 0,82 ммоль), затем бензилоксиацетилхлорид (114 мкл, 0,72 ммоль). Реакционной смеси дают возможность медленно нагреться до комнатной температуры и перемешивают ее в течение 18 ч. Добавляют воду (0,25 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 1,5 ч. Добавляют СН2С12 и смесь промывают один раз водой, дважды 1н. НС1, один раз водой, дважды 6% \НСО3, затем сушат над \а38О3 и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в ТГФ (1 мл) и охлаждают до 0°С. Добавляют раствор Ь1ОН в воде (1,36М, 1 мл, 1,36 ммоль) и проводят гидролиз при 0°С в течение 4 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным \Н3С1 и ТГФ удаляют концентрированием в вакууме. Остаток снова суспендируют в СН2С12 и промывают дважды 6% \а11СО3, сушат над \а38О3 и концентрируют в вакууме.
- 117 005686 1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 7,40-7,28 (м, 5Н), 6,83-6,79 (м, 1Н), 6,73-6,66 (м, 2Н), 4,66 (с, 2Н), 4,164,13 (м, 2Н), 3,86 (с, 3Н), 3,83-3,78 (м, 3Н), 3,63-3,26 (шир. м, 4Н), 3,06-3,00 (м, 1Н), 2,50-2,45 (шир. м, 1Н), 1,34-1,12 (м, 1Н), 1,03-0,99 (м, 2Н), 0,73 (с, 3Н), 0,66-0,61 (м, 2Н), 0,36-0,32 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 440,3 (т+1).
Промежуточный продукт 97.
[4-(8)-(3-Циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)-метилпирролидин-3-ил]метанол.
Промежуточный продукт 65 (0,99 г, 2,6 ммоль) растворяют в этаноле (95%, 10 мл) и раствор обрабатывают катализатором Реаг1тап (20% Ρά(ΟΗ)2 на угле, 250 мг). Смесь гидрируют при 1 атм Н2 в течение 16 ч. Добавляют дополнительный катализатор (250 мг) и реакцию продолжают в течение дополнительных 24 ч. Катализатор удаляют фильтрованием и реакционную смесь концентрируют в вакууме (0,68 г, 89%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 6,84-6,73 (м, 3Н), 3,87-3,83 (м, 4Н), 3,59-3,47 (м, 3Н), 3,30-3,20 (м, 3Н), 2,85 (д, I = 10,6, 1Н), 2,35-2,12 (шир. м, 1Н), 1,35-1,27 (м, 1Н), 0,64-0,60 (м, 4Н), 0,37-0,31 (м, 2Н), 0,360,32 (м, 2Н).
БКМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Оа/е 377,3 (т+1).
Пример 258.
1-(2-Бензилоксиацетил)-4-(8)-(3-циклопропилметокси-4-метоксифенил)-3-(8)-метилпирролидин-3карбальдегид.
Оксалилхлорид (2,0М в СН2С12, 0,175 мл, 0,35 ммоль) добавляют к СН2С12 (0,52 мл). Образовавшийся раствор охлаждают до -60°С. Затем по каплям добавляют раствор ДМСО (47 мл, 0,66 ммоль) в СН2С12 (0,18 мл). Раствор перемешивают в течение 5 мин и соединение примера 257 (растворенное в 1,0 мл СН2С12) добавляют к смеси окисления по Сверну.
После перемешивания реакционной смеси в течение 30 мин при -60°С добавляют Εί3Ν (0,25 мл) и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Спустя 30 мин добавляют воду и раствор энергично перемешивают в течение 15 мин. Слои разделяют, водную фазу промывают один раз СН2С12. Об'ъединенные органические слои промывали насыщенным №С1, сушат над Nа28Ο4 и концентрируют в вакууме. Сырой материал хроматографируют на 8ΐΟ2 с использованием смеси ЕЮАс/гексаны (2:1) (76 мг, 50%).
1Н ЯМР (СЭС13, 400 МГц) δ: 9,62-9,57 (м, 1Н), 7,41-7,30 (м, 5Н), 6,84-6,78 (м, 1Н), 6,68-6,56 (м, 2Н), 4,68-4,63 (м, 2Н), 4,20-4,10 (м, 2Н), 4,05-3,32 (м, 5Н), 3,87 (с, 3Н), 1,57-1,55 (м, 2Н), 1,33-1,24 (м, 1н), 0,92-0,88 (м, 3Н), 0,67-0,60 (м, 2Н), 0,37-0,31 (м, 2Н).
Пример 259.
1-((К)-2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-1-[(38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3 -метилпирролидин-1-ил] метанон.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 70 (73,5 мг, 0,293 ммоль, 1,0 экв.) в СН2С12 (3 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота добавляют Εί3Ν (65,2 мг, 0,645 ммоль), затем 2,2диметил-1,3-диоксолан-(4К)-карбонилхлорид (53,2 мг, 0,322 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем выливают в 50 мл ΕίΟΛο, промывают насыщенным раствором соли, сушат №28Ο4 и концентрируют в вакууме, получая при этом пенообразный продукт (94 мг, выход 85%). Сырой продукт гидролизуют БЮН посредством процедуры промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 259.
- 118 005686 1Н ЯМР (ΟϋΟ13, 300 МГц) δ: 6,97-6,58 (м, 3Н, ароматические), 4,68 (т, 1Н, I = 6,4 Гц), 4,44-4,34 (м, 1Н), 4,24-3,95 (м, 1н), 3,94-3,50 (м, 5Н), 3,87 (д, 3Н, ОМе), 3,42 (д, 1Н, I = 12,4 Гц), 3,35 (д, 1Н, I = 12,4 Гц), 1,4 (м, 6Н), 1,15 (м, 3Н), 0,75 (м, 3Н).
Пример 260.
1-((Я)-2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил)- 1-{(38,48)-3-((Я)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(3фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидин-1-ил}метанон.
Из соединения примера 259 (126 мг, 0,332 ммоль, 1,0 экв.) и промежуточного продукта 90 (69,8 мг, 0,332 ммоль, 1,0 экв.) способом примера 176 получают продукт в виде белой пены (160 мг).
1Н ЯМР (СБС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,42-7,25 (м, 5Н, ароматические), 7,08 (д, 1Н, ароматический), 6,86 (д, 2Н, ароматические), 5,0 (д, 2Н, СН2), 4,72-4,60 (м, 1Н), 4,45-4,32 (м, 1Н), 4,22-4,10 (м, 1Н), 3,95-3,70 (м, 3Н), 3,89 (сд, 3Н, ОМе), 3,70-3,45 (м, 2Н), 3,44-3,29 (м, 1Н), 1,5-1,38 (2д, 6Н, Ме), 1,020,75-0,65 (м, 3Н), 0,63 (д, 3Н).
Е1ЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 494,55 (т+1).
Пример 261.
(Я)-2,3-Дигидрокси-1-{(38,48)-3-((Я)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси) фенил]-3 -метилпирролидин-1-ил} пропан-1-он.
В реакционный сосуд, содержащий соединение примера 260 (160 мг, 0,323 ммоль), добавляют уксусную кислоту (3,0 мл) и воду (1,0 мл). Сосуд герметизируют, нагревают до 50°С и перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ВЭЖХ с обращенной фазой на колонке С18 (кипа 10 мк, С18, 250 х 10 мм). Градиентное элюирование смесью 50-100% ацетонитрилвода (0,05% ТФУ) дает соединение примера 261 в виде белого пенообразного твердого вещества (52,2 мг, выход 35,6%).
1Н ЯМР (СБС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,5-7,21 (м, 5Н, ароматические), 7,05 (д, 1Н, ароматический), 6,9-6,75 (д, 2Н, ароматические), 5,0 (д, 2Н), 4,31 (с, 1Н), 4,01-3,2 (м, 9Н), 3,88 (с, 3Н, ОМе), 1,01-0,9 (м, 3Н), 0,7 (с, 3Н).
Е1ЯМ8 (электрораспыление, положительные ионы): 1)а/е 454,20 (т+1).
Пример 262.
1-((8)-2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-1-[(38,48)-3-((Я)-1-гидроксиэтил)-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-1-ил]метанон.
К перемешиваемому раствору промежуточного продукта 70 (73,5 мг, 0,293 ммоль, 1,0 экв.) в СН2С12 (3 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота добавляют 1·'13Ν (65,2 мг, 0,645 ммоль) затем 2,2диметил-1,3-диоксолан-(48)-карбонилхлорид (53,2 мг, 0,322 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем выливают в 50 мл ЕЮАс, промывают насыщенным раствором соли, сушат №28О.| и концентрируют в вакууме, получая при этом пенообразный продукт (94 мг, выход 85%). Сырой продукт гидролизуют ЬЮН посредством способа промежуточного продукта 5, получая при этом соединение примера 262.
1Н ЯМР (СПС13, 300 МГц) δ: 6,93-6,65 (м, 3Н, ароматические), 5,68 (с, 1Н), 4,67 (м, 1Н), 4,34 (м, 1Н), 4,21 (м, 1Н), 3,94-3,40 (м, 5Н), 3,89 (с, 3Н, ОМе), 1,4 (м, 6Н), 1,16 (м, 3Н), 0,76 (м, 3н).
Пример 263.
1-((8)-2,2-Диметил-1,3 - диоксолан-4-ил)-1-{(38,4 8)-3-((Я)- 1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(3фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3-метилпирролидин-1-ил}метанон.
- 119 005686
Из соединения примера 262 (126 мг, 0,332 ммоль, 1,0 экв.) и промежуточного продукта 90 (69,8 мг, 0,332 ммоль, 1,0 экв.) способом примера 176 получают белый пенообразный продукт (160 мг).
1Н ЯМР (СБС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,52-7,15 (м, 5Н, ароматические), 7,08 (д, 1Н, ароматический), 6,86 (д, 2Н, ароматические), 5,98 (м, 2Н, СН2), 4,64 (м, 1Н), 4,35-4,32 (м, 1Н), 4,22-4,10 (м, 1Н), 3,97-3,36 (м, 5Н), 3,89 (с, 3Н, ОМе), 1,5-0,38 (2д, 6Н, Ме), 1,02-0,75 (м, 3Н), 0,74 (с, 3Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 494,55 (т+1).
Пример 264.
(8)-2,3-Дигидрокси-1-{(38,48)-3-((В)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(3- фенилпроп-2-инилокси) фенил]-3-метилпирролидин-1-ил } пропан-1-он.
В реакционный сосуд, содержащий соединение примера 263 (160 мг, 0,323 ммоль), добавляют уксусную кислоту (3,0 мл) и воду (1,0 мл). Сосуд герметизируют, нагревают до 50°С и перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ВЭЖХ с обращенной фазой на колонке С18 (Рипа 10 мк, С18, 250 х 10 мм). Градиентное элюирование смесью 50-100% ацетонитрилвода (0,05% ТФУ) дает продукт в виде белого пенообразного твердого вещества (52,2 мг, выход 35,6%).
1Н ЯМР (СБС13, 300 МГц, смесь ротамеров) δ: 7,44-7,18 (м, 5Н, ароматические), 7,08 (с, 1Н, ароматический), 6,86 (с, 2Н, ароматические), 4,6 (с, 2Н, СН2), 4,4-4,3 (м, 1Н), 4,01-4,62 (м, 7Н), 3,89 (с, 3Н, ОМе), 3,59-3,46 (м, 1Н), 3,32-3,29 (м, 1Н), 2,4 (м, 1Н), 0,95 (м, 3Н), 0,72 (д, 3Н).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): Ба/е 454,20 (т+1).
[α]η = 14,6° (с= 1,00, ЕЮН)
Пример 265.
В! = ΐ-Ви; В3 = (8)-СОСН(ОЛс)СН2Рй
Получают из промежуточного продукта 73 ацилированием (8)-1-хлоркарбонил-2-фенилэтиловым эфиром уксусной кислоты по процедуре Р. ВаЪибп еΐ а1., Те+гаКебгоп, 8, 2431-2440 (1999).
БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): т/ζ 498 (т+1).
Пример 266.
В1 = Н; В3 = (8)-СОСН(ОЛс)СН2Рй
Из соединения примера 265 способом ТФУ примера 143 получают соединение примера 266. БВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): т/ζ 442 (т+1).
- 120 005686
Пример 267.
(8)-1-Бензил-2-{(38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]-3метилпирролидин-1-ил}-2-оксоэтиловый эфир уксусной кислоты.
К1 = Р11С СС1Р; 1К = (8)-СОС11(ОАс)СН+Р
Соединение примера 266 (88 мг, 0,2 ммоль) и промежуточный продукт 90 (50 мг, 0,24 ммоль) подвергают процедуре с С§2СО3 примера 176 и сырой остаток (110 мг) используют без дальнейшей очистки.
Пример 268.
(8)-2-Гидрокси-1-{(38,48)-3-((К)-1-гидроксиэтил)-4-[4-метокси-3-(3-фенилпроп-2-инилокси)фенил]3-метилпирролидин-1 -ил}-3-фенилпропан-1-он.
К1 = 1’11С ССНе 1К = (8)-СОСН(ОН)СН+Р
Соединение примера 267 (110 мг сырого соединения, теоретически 0,2 ммолъ) подвергают процедуре снятия О-ацетатной защитной группы и очищают ВЭЖХ (колонка 20 х 50 мм УМС Οοιι+ίΡΐΌρ С18, 20 мл/мин, 10-95% смесь ацетонитрил/вода, 7 мин), получая при этом соединение примера 268 (38 мг, 75%).
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13, смесь ротамеров) δ: 7,50-7,16 (м, 10Н), 7,10-6,52 (м, 3Н), 5,05-4,92 (м, 2Н), 4,52-4,36 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 3,87-2,72 (м, 9Н), 1,48/1,29 (2д, 1 = 4,3/4,6 Гц, 1Н), 0,93/0,88 (2д, 1 = 6,4 Гц, 3Н), 0,66/0,51 (2с, 3Н).
ЬВМ8 (электрораспыление, положительные ионы): т/е 514 (т+Н)+.
Соединения структурной формулы (II) испытывали на их способность ингибировать ΡΌΕ4. Способность соединения ингибировать РОЕ4-активность относят к величине 1С50 для соединения, т.е. концентрации ингибитора, требуемой для 50% ингибирования активности фермента. Величину 1С+, для соединений структурной формулы (II) определяли с использованием рекомбинантного ΡΌΕ4 человека.
Величины Юзо ингибирования ίη νίίΓο активности фосфодиэстеразы и получаемые вычисленные величины К соединений, приведенные в примерах, определяли измерением ингибирования гидролиза цАМФ как функцию концентрации испытуемого соединения на протяжении диапазона от 0 до 1 мМ. Величины К1 соединений, испытанных в вышеуказанном анализе, составляют приблизительно от 0,0003 до приблизительно 100 мкМ.
Соединения настоящего изобретения обычно имеют величину К+, в отношении рекомбинантной ΡΌΕ4 человека меньше чем приблизительно 50 мкМ, предпочтительно меньше чем приблизительно 25 мкМ, более предпочтительно меньше чем приблизительно 15 мкМ. Соединения настоящего изобретения обычно имеют величину К+, в отношении рекомбинантного ΡΌΕ4 человека меньше чем приблизительно 1 мкМ, часто меньше чем приблизительно 0,05 мкМ. Настоящий ингибитор ΡΌΕ4 имеет Κ.'50 приблизительно от 700 пМ (пикомоли) до приблизительно 15 мкМ, что гарантирует достижение полного преимущества настоящего изобретения.
Величины ГС50 для соединений определяют из кривых зависимости концентрация-ответная реакция, обычно с использованием концентраций, составляющих от 0,1 пМ до 500 мкМ. Испытания в отношении других ферментов ΡΌΕ с использованием стандартной методологии, как описано в публикации Еоидйпеу е! а1., 1. Вю1. С1ет., 271, рр. 796-806 (1996), показали также, что соединения настоящего изобретения являются очень селективными для цАМФ-специфичного фермента ΡΌΕ4.
В частности, соединение настоящего изобретения, т.е. образец 66, имеет К+, в отношении рекомбинантного ΡΌΕ4Β человека 0,015 мкМ, но имеет К+, в отношении ΡΌΕ1Α 80 мкМ, в отношении ΡΌΕ1Β 100 мкМ, в отношении ΡΟΕΚ.’ 12 мкМ, в отношении ΡΌΕ2 450 мкМ, в отношении ΡΌΕ3Α 40 мкМ, в отношении ΡΌΕ5 270 мкМ и в отношении ΡΌΕ7 36 мкМ. Это иллюстрирует селективность настоящего изобретения в отношении ингибирования ΡΌΕ4.
- 121 005686
Соединения структурной формулы (II) испытывали также на способность снижать секрецию ΤΝΕα в лимфоцитах периферической крови человека. Способность снижать секрецию ΤΝΕα относят к величинам ΕС5ο (т.е. эффективной концентрации соединения, способной ингибировать 50% общего ΤΝΕν).
Ингибирование ίη δίΐιι высвобождения ΤΝΕα из обработанных эндотоксином выделенных лимфоцитов периферической крови человека, приводящее к величинам ΕС5ο соединений, указанным в примерах, определяли как функцию концентрации испытуемого соединения на протяжении диапазона от 0 до 100 мкМ. Величины ΕС5ο соединений, испытанных в вышеуказанном анализе, составляли приблизительно от 0,0002 до приблизительно 20 мкМ.
Соединения настоящего изобретения обычно имеют величину ΕС5ο меньше чем приблизительно 50 мкМ и предпочтительно меньше чем приблизительно 25 мкМ и более предпочтительно меньше чем приблизительно 15 мкМ. Соединения настоящего изобретения обычно имеют величину ΕС5ο РВЬ/ΤΝΕα меньше чем приблизительно 1 мкМ и часто меньше чем приблизительно 0,05 мкМ. Настоящий ингибитор ΡΌΕ4 имеет величину ΕС5ο приблизительно от 1000 пМ (пикомоль) до приблизительно 20 мкМ, что гарантирует достижение полного преимущества настоящего изобретения.
Определения продуцирования рекомбинантных ΡΌΕ человека и 1С5) и ΕС5ο можно выполнить хорошо известными в данной области способами. Примерные способы описываются ниже.
Экспрессия ΡϋΕ человека
Экспрессия в инфицированных бакуловирусом клетках 8робор!ега Гищрегба (8Е9).
Плазмиды для переноса бакуловируса были сконструированы с использованием либо рВ1иеВас111 (1пубгодеп), либо рЕайВас (ВКЬ-61Ьсо). Структуры всех плазмид подтверждали секвенированием по стыкам вектора и полным секвенированием всех областей, генерированных ПЦР. Плазмида рВВ-Ρ^Ε1Α3/6 содержала полную открытую рамку считывания ΡΌΕ1Α3 (ЬоидЬпеу е! а1., I. Вю1. СИет., 271, рр. 796-806 (1996)) в рВ1иеВас111. Плазмида Нсат3аВВ содержала полную открытую рамку считывания ΡΌΕΚ.’3 (ЬоидЬпеу е! а1. (1966) в рВ1иеВас111. Плазмида рВВ-РОЕ3А содержала полную открытую рамку считывания ΡΌΕ3Α (Меасс1 е! а1., Ргос. №И. Асаб. 8сЕ, И8А, 89, рр. 3721-3725 (1992) в рВ1иеВас111.
Штаммы рекомбинантных вирусов получали с использованием либо системы МахВас (1пу11годеп), либо системы ЕайВас (С1Ьсо-ВКЬ) в соответствии с протоколами изготовителя. В обоих случаях экспрессию рекомбинантных ΡΌΕ человека в образовавшихся вирусах регулировали промотором полиэдрического вируса. При использовании системы МахВас® вирус был два раза очищен из тромбоцитов для уверенности в том, что препарат не загрязнен вирусом дикого типа (осс+). Экспрессию белка проводили следующим образом. Клетки кГ9 выращивали при 27°С в культуральной среде Грейса (1пкес!) (61ЬсоВКЬ), дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой, 0,33% дрожжевого продукта ТС, 0,33% гидролизата лактальбумина, 4,2 мМ NаИСΟ3, 10 мкг/мл гентамицина, 100 единиц/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. Клетки в экспоненциальной фазе роста инфицировали при множественности приблизительно от 2 до 3 вирусных частиц на клетку и инкубировали в течение 48 ч. Клетки собирали центрифугированием, промывали средой Грейса без дополнения и быстро замораживали для хранения.
Экспрессия в 8ассЬаготусе§ СегеуЫае (Дрожжи).
Рекомбинантное получение ΡΌΕ^, ΡΌΕ2, ΡΌΕ4Α, Ρ^Ε4В, Ρ0Ε4ί.\ ΡΌΕ4Ό, ΡΌΕ5 и ΡΌΕ7 проводили аналогично получению, описанному в примере 7 патента США № 5702936, включенном здесь в качестве ссылки, за исключением того, что использовали вектор трансформации дрожжей, который получали из основной плазмиды ΑΌΗ2, которая описана в Ργ^ е! а1., МеШобк ш Ьпхуто^ду, 185, рр. 308-318 (1990) и в которую введены последовательности промотора и терминатора ΑΌΗ2 дрожжей, и хозяином, 8ассЬаготусе§ сегеуЫае, был протеазо-дефицитный штамм В12-54, депонированный 31 августа 1998 г. в Американской коллекции тканевых культур, Манатах ^г§1ша, под № АТСС 74465. Трансформированные клетки-хозяева выращивали в среде 2Х 8С-1еи, рΗ 6,2, со следовыми количествами металлов и витаминов. Спустя 24 ч добавляли глицерин, содержащий среду ΥΕΡ, до достижения конечной концентрации 2Х ΥΕΤ/3% глицерин. Приблизительно через 24 ч клетки собирали, промывали и хранили при -70°С.
Очистка кальмодулина
Кальмодулин, использованный для активации ферментов ΡΌΕ1, очищали из бычьих проб, по существу, как описано Эебшап е! а1., МеИобк ш Ьпхуто^ду, 102, рр. 1-8 (1983), с использованием процедуры ΡЬа^тас^а ΡЬеу1-8^ра^о8е®.
Иммобилизация кальмодулина на агарозе
Кальмодулин иммобилизовали на ВюКаб ΑГГ^Се1® по инструкциям изготовителя.
Препараты фосфодиэстераз человека
Определения активности фосфодиэстераз.
Фосфодиэстеразную активность препаратов определяли следующим образом. Анализы ΡΌΕ, использующие способ разделения на угле, проводили, по существу, как описано в ЬоидЬпеу е! а1.(1996). В данном анализе активный ΡΌΕ превращает [32Р]цАМФ или [32Р]цГМФ в соответствующий [32Р]5'АМФ или [32Р]5'-ГМФ пропорционально количеству присутствующего активного ΡΌΕ. [32Р]5'-АМФ или [32Р]5'-ГМФ затем количественно превращали в свободный [32Р]фосфат и немеченый аденозин или
- 122 005686 гуанозин действием 5'-нуклеотидазы змеиного яда. Отсюда количество выделенного [32Р]фосфата пропорционально активности фермента. Анализ проводили при 30°С в 100 мкл реакционной смеси, содержащей (конечные концентрации) 40 мМ Трис НС1 (рН 8,0), 1 мкМ Ζη8Ο4, 5 мМ МдС12 и 0,1 мг/мл бычьего сывороточного альбумина (В8А). В альтернативном случае, в анализах, определяющих. ΡΌΕ1специфическую активность, смеси для инкубации дополнительно включали использование 0,1 мМ СаС12 и 10 мкг/мл кальмодулина. Фермент ΡΌΕ присутствовал в количествах, которые обеспечивают <30% общего гидролиза субстрата (условия линейного анализа). Анализ инициировали добавлением субстрата (1 мМ [32Р]цАМФ или цГМФ) и смесь инкубировали в течение 12 мин. Затем добавляли семьдесят пять (75) мкг яда Сго1а1и5 а!гох и инкубацию продолжали в течение 3 мин (всего 15 мин). Реакцию останавливали добавлением 200 мкл активированного угля (25 мг/мл суспензии в 0,1М NаН2ΡО4, рН 4). После центрифугирования (750 х д в течение 3 мин) для осаждения угля отбирали образец супернатанта для определения радиоактивности в сцинтилляционном счетчике и вычисляли активность ΡΌΕ.
Анализы ингибиторов проводили аналогично способу, описанному в ЬоидЬпеу е! а1., 1. Вю1. СЬет., 271, рр. 796-806 (1996), за исключением того, что использовали как цГМФ, так и цАМФ, и концентрации субстрата поддерживали ниже 32 нМ, которая значительно ниже Кт испытанных ΡΌΕ.
Очистка ΡΌΕ1Α3 из клеток 8Е9.
Клеточный дебрис (5 г) смешивали с 10 мл буфера для лизиса (50 мМ МОВ8, рН 7,5, 2 мМ дитиотреит (ΌΤΤ), 2 мМ соль бензамидин НС1, 5 мкМ Ζη8Ο4, 0,1 мМ СаС12, 20 мкг/мл кальпаиновых ингибиторов I и II и 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина и апротинина) при комнатной температуре. Клетки лизировали пропусканием через элемент ЕгепсЬ®, разрушающий клетки посредством давления (8ЕМ-Лттсо'К 8рес!гошс ЛзДитеШз, 1пс., ВосЬез1ег ΝΥ). Образовавшийся лизат центрифугировали в ультрацентрифуге Бекмана с использованием ротора типа Т180 при 45000 оборотов/мин в течение 1 ч. Супернатант отбирали и фильтровали через фильтр 0,2 мкм. Данный фильтрат вводили в колонку 2,6 х 90 см 8ΕΡНΑСВΥ^® 8-300, уравновешенную колоночным буфером А (буфер для лизиса, содержащий 100 мМ №1С1 и 2 мМ МдС12). Скорость потока из колонки регулировали до 1 мл/мин и собирали фракции по 7 мл. Активные фракции объединяли и дополняли 0,16 мг кальмодулина. Фермент вводили в течение ночи при скорости потока 0,2 мл/мин в иммуноафинную колонку агарозы АСС-1, как описано в Напзеп е! а1., МеЛобз ш Εηζуто1оду 159, рр. 453-557 (1988). Колонку промывали 5 объемами колоночного буфера В (колоночный буфер А без №1С1) и затем 5 объемами колоночного буфера С (колоночный буфер А, содержащий 250 мМ №1С1). Колонку элюировали колоночным буфером Ό (50 мМ МОΡ8, рН 7,5, 1 мМ ЭДТУ, 1 мМ ЭГТУ, 1 мМ ΌΤΤ, 1 мМ соль бензамидин НС1, 100 мМ ШС1, 20 мкг/мл кальпаиновых ингибиторов I и II и 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина и апротонина) введением его в количестве одного объема колонки при 0,1 мл/мин, остановкой потока на 1 ч и затем продолжением элюирования при такой же скорости потока. Собирали фракции по 0,5 мл. Фракции, проявляющие активность, объединяли и сначала диализовали против буфера диализа, содержащего 25 мМ МОΡ8, рН 7,5, 100 мМ ШС1, 10 мкМ Ζ^Ο^ 1 мМ СаС12, 1 мМ ΌΤΤ и 1 мМ соль бензамидин НС1. Последующий диализ против буфера для диализа, содержащего 50% глицерина, проводили перед быстрым замораживанием образца сухим льдом и хранением при -70°С. Полученные препараты по данным 8Ό8-ΡΑΟΕ имели чистоту от 10 до 15%. Указанные препараты имели специфическую активность приблизительно от 5 до 20 мкмоль цАМФ, гидролизованного в минуту, на 1 мг белка.
Очистка ΡΌΕ1Β из 8. Сегеу131ае.
Клетки дрожжей (50 г) размораживали смешиванием с 100 мл стеклянных шариков (промытых 0,5 мМ кислотой) и 200 мл буфера А при комнатной температуре. Буфер А состоял из 50 мМ МОВ8, рН 7,5, 1 мМ ΌΤΤ, 2 мМ соли бензамидин НС1, 0,01 мМ Ζ^Ο/ι, 5 мМ МдС12, 20 мкг/мл кальпаиновых ингибиторов I и II и 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина и апротинина. Смесь охлаждали до 4°С, переносили в Веа6-Веа!ег® и клетки лизировали быстрым перемешиванием в течение 6 циклов по 30 с каждая. Гомогенат центрифугировали в течение 15 мин в центрифуге Бекмана 12-21М с использованием ротора ΙΑ-10 при 9000 об./мин при 4°С. Супернатант отбирали и центрифугировали в ультрацентрифуге Бекмана ХЬ-80 с использованием ротора ΤΠ5 при 36000 об./мин в течение 45 мин при 4°С. Супернатант отбирали и ΡΌΕ1Β осаждали добавлением твердого сульфата аммония (0,33 г/мл супернатанта) при перемешивании на ледяной бане и регулировании рН между 7,0 и 7,5. Данную смесь затем центрифугировали в течение 22 мин в центрифуге Бекмана 12 с использованием ротора ΙΑ-10 при 9000 об./мин (12000 х д). Супернатант выгружали и клеточный дебрис растворяли в 100 мл буфера В (50 мМ МОВ8, рН 7,5, 1 мМ ΌΤΤ, 1 мМ соль бензамидин НС1, 0,01 мМ Ζ^Ο/ι, 2 мМ МдС12, 2 мМ СаС12 и 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина и апротинина). рН и проводимость корректировали до 7,5 и 15-20 миллисименс (мСм) соответственно. Данный раствор загружали в 20 мл колонку комплекса кальмодулин-арагоза, которая была уравновешена 10 колоночными объемами буфера В при скорости 1 мл/мин. Поток вводили в колонку по меньшей мере 5 раз. Колонку промывали 5 объемами буфера В, 5 объемами буфера В, содержащего 250 мМ ШС1, и снова 2 объемами буфера В снова без ШС1. Элюирование выполняли пропусканием одного объема буфера С (50 мМ МОΡ8, рН 7,5, 1 мМ ЭДТУ, 1 мМ ЭгТУ, 1 ММ ΌΤΤ, 1 мМ соль бензамидин НС1) при скорости 0,33 мл/мин, затем течение останавливали на 1 ч до продолжения элюирования. Собирали фракции по 4 мл и анализировали на активность ΡΌΕ. Активные фракции объе
- 123 005686 диняли и концентрировали до объема 5 мл с использованием системы ультрафильтрования Ат1соп. Концентрат затем вводили в 320 мл колонку с 8ерЬасгу1® 8-300 (1,6 х 150 см), уравновешенную по меньшей мере 2 объемами буфера Ό (50 мМ МОР8, рН 7,5 1 мМ ΌΤΤ, 1 мМ соль бензамидин НС1, 0,01 мМ 2п8О4, 2 мМ СаС12 и 100 мМ Ν;·ιί.Ί). Колонку проявляли при скорости потока 1 мл/мин (11 см/ч) и собирали 5 мл фракции. Фракции с пиком активности объединяли и диализовали в течение ночи против буфера Ό, содержащего 50% глицерина. Очищенный фермент замораживали на сухом льду и хранили при -70°С. Полученные препараты имеют по способу 808-РАСЕ чистоту приблизительно >90%. Эти препараты имели специфическую активность приблизительно от 10 до 30 мкмоль цГМФ, гидролизованного в минуту, на миллиграмм белка.
Очистка Р0Е1С3 из клеток 8Г9.
Клеточный дебрис (5 г) размораживали на льду с 20 мл буфера для лизиса (50 мМ МОВ8, рН 7,5, 10 мкМ 2п8О4, 0,1 мМ СаС13, 1 мМ ΌΤΤ, 2 мМ соль бензамидин НС1, 0,01 мМ 2п8О4, 5 мкг/мл каждого из пепстатина, лейпептина и апротинина). Клетки лизировали пропусканием через элемент ЕгепсЬ®, разрушающий клетки посредством давления (8ЬМ-Аштсо®, 8рес1гошс 1пк!гцтеп!5) при поддержании температур ниже 10°С. Образовавшийся клеточный гомогенат центрифугировали при 36000 об./мин при 4°С в течение 45 мин в центрифуге Бекмана с использованием ротора типа ΤΙ45. Супернатант выгружали и образовавшийся дебрис снова суспендировали с 40 мл буфера для солюбилизации (буфер для лизиса, содержащий 1 М №С1, 0,1 М МдС12, 1 мМ СаС12, 20 мкг/мл кальмодулина и 1% сульфобетаина 8В12 (Ζ312)) обработкой ультразвуком с использованием тюнера У1ЬгаСе11 с микроголовкой в течение 3 х 30 с. Обработку проводили в смеси размолотый лед/вода для охлаждения. После обработки ультразвуком смесь медленно смешивали в течение 30 мин при 4°С для окончания солюбилизации мембраноассоциированных белков. Данную смесь центрифугировали в ультрацентрифуге Бекмана с использованием ротора типа ΤΙ45 при 36000 об./мин в течение 45 мин. Супернатант разбавляли буфером для лизиса, содержащим 10 мкг/мл кальпаиновых ингибиторов Ι и ΙΙ. Осажденный белок центрифугировали в течение 20 мин при 9000 об./мин в роторе Бекмана 1А-10. Выделенный супернатант затем подвергали хроматографии М1те!1с В1ие® АР Адагоке.
Для проведения хроматографии на колонке М1те!1с В1ие® АР Адагоке смолу сначала защищали нанесением 10 объемов слоя 1% поливинилпирролидона (т. е. ММ 40000) для блокирования сайтов неспецифического связывания. Слабо связанный РУР-40 удаляли промыванием 10 объемами слоя 2 М Ν;·ιί.Ί и 10 мМ цитрата натрия с рН 3,4. Непосредственно перед добавлением образца солюбилизированного Р0Е1С3 колонку уравновешивали 5 объемами слоя колоночного буфера А (50 мМ МОР8, рН 7,4, 10 мкМ Ζη8О4, 5 мМ МдС12, 0,1 мМ СаС12, 1 нМ ΌΤΤ, 2 мМ соль бензамидин НС1).
Солюбилизированный образец вводили в колонку при скорости потока 2 мл/мин с рециркуляцией таким образом, чтобы общий образец был введен от 4 до 5 раз за 12 ч. После завершения загрузки колонку промывали 10 объемами колонки колоночного буфера А, затем 5 объемами колонки колоночного буфера В (колоночный буфер А, содержащий 20 мМ 5'-АМФ) и затем 5 объемами колонки колоночного буфера С (50 мМ МОР8, рН 7,4, 10 мкМ Ζп8О4, 0,1 мМ СаС12, 1 мМ ΌΤΤ и 2 мМ соль бензамидин НС1). Фермент элюировали в три последовательных пула. Первый пул состоял из фермента, промытого 5 объемами слоя колоночного буфера С, содержащего 1 мМ цАМФ. Второй пул состоял из фермента, промытого 10 объемами слоя колоночного буфера С, содержащего 1 М №С1. Последний пул состоял из фермента, промытого 5 объемами слоя колоночного буфера С, содержащего 1 М Ν;·ιί.Ί и 20 мМ цАМФ.
Активные пулы фермента собирали и циклический нуклеотид удаляли посредством общепринятой хроматографии гель-фильтрование или хроматографии на гидроксиапатитных смолах. После удаления циклических нуклеотидов пулы ферментов диализовали против буфера для диализа, содержащего 25 мМ МОР8, рН 7,4, 10 мкМ Ζη8О4, 500 мМ №С1, 1 мМ СаС12, 1 мМ ΌΤΤ, 1 мМ соль бензамидин НС1, с последующим диализом против буфера для диализа, содержащего 50% глицерина. Фермент быстро замораживали при помощи сухого льда и хранили при -70°С.
Полученные препараты имели по способу 808-РАСЕ чистоту >90%. Эти препараты имели специфическую активность приблизительно от 0,1 до 1,0 мкмоль цГМФ, гидролизованного в минуту, на миллиграмм белка.
Очистка РОЕ2 из 8.Сегеуыае.
Замороженный клеточный дебрис дрожжей штамма Υ134 (10 г, хранили при -70°С) оставляли для размораживания на льду в 25 мл буфера для лизиса (50 мМ МОР8, рН 7,2, 1 мМ ЭДТУ, 1 мМ ЭГТУ, 0,1 мМ ΌΤΤ, 0,1 мМ 4-(2-аминоэтил)бензолсульфонилхлорид (АЕВ8Е), 1 мкг/мл пепстатина, лейпептина, апротинина, кальпаиновых ингибиторов Ι и ΙΙ и 2 мМ бензамидин). Клетки лизировали тремя пропусканиями через элемент ЕгепсЬ®, разрушающий клетки посредством давления (8ЬМ-Аш1псо®, 8рес1гошс 1пк1гцтеп!к). Лизат центрифугировали при 36000 об./мин в ультрацентрифуге Бекмана с ротором типа 45Τ1 в течение 60 мин при 4°С. Супернатант отделяли от седимента и пропускали через 15 мл смолы Ероху-сСМР 8ерЬагок® при 4°С два раза приблизительно при 0,5 мл/мин. Колонку затем промывали 45 мл буфера 1 для промывки (50 мМ МОР8, рН 7,2, 0,1 мМ ЭДТУ, 0,1 мМ ΌΤΤ). После указанной промывки колонку промывали 45 мл буфера 2 для промывки (буфер 1 для промывки, содержащий 0,5 М №1С1). По
- 124 005686 сле данной промывки солью колонку промывали 15 мл буфера 3 для промывки (буфер 1 для промывки, содержащий 0,25 М ЫаС1). Колонку переносили в помещение с комнатной температурой и оставляли нагреваться. Приблизительно 25 мл буфера для элюирования (буфер для промывания 3, содержащий 10 мМ цГМФ и выдерживаемый при комнатной температуре) вводили в колонку и вытекающий поток собирали по фракциям 2 мл. Небольшие аликвоты каждой из фракций 20-кратно разбавляли в РВ8, содержащем 5 мМ МдС12, чтобы провести гидролиз конкурирующего лиганда и помочь определению активности РЭЕ2. Активные фракции пропускали через колонку для гель-фильтрации РНагтас1а РЭ-10®для обмена в буфер 3 для промывки. Данный подвергнутый обмену пул разбавляли на 50% об./об. стерильным 80% глицерином и хранили при -20°С. Полученные препараты имели чистоту выше, чем 85%, оцененную по способу 8Э8-РЛСЕ с последующим окрашиванием белка Соота551е К-250. Эти препараты имели специфическую активность приблизительно от 150 до 250 мкмоль цГМФ, гидролизованного в минуту, на миллиграмм белка.
Получение РЭЕ3Л из клеток 8£9.
Клетки (2 х 1010) суспендировали в буфера для лизиса, содержащем 50 мМ МОР8, рН 7,5, 2 мМ ΌΤΤ, 2 мМ соль бензамидин НС1, 5 мкМ 2и8О4, 0,1 мМ СаС12, 20 мкг/мл кальпаиновых ингибиторов I и II и 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина и апротинина. Смесь дважды обрабатывали ультразвуком в течение 30 с и клетки лизировали пропусканием через элемент ЕгепсЕ®, разрушающий клетки посредством давления (8ЕМ-Ат1исо®, 8рес1гошс 1п51гитеп15) при 4°С. Лизат центрифугировали при 100000 х д в течение 45 мин. Клеточный дебрис промывали один раз буфером для лизиса и суспендировали в 46 мл буфера для лизиса гомогенизатором Даунса. Аликвоты хранили при -70°С. Данные препараты имели специфическую активность приблизительно от 1 до 2 нмоль цАМФ, гидролизованного в минуту на миллиграмм белка.
Получение РЭЕ4А, 4В, 4С и 4Ό человека.
Получение РЭЕ4Л из 8.Сегеу151ае.
Дрожжевые клетки (50 г штамма дрожжей Υ126 ЕагЬогшд НПиЫ1.46) размораживали при комнатной температуре смешиванием с 50 мл буфера для лизиса (50 мМ МОР8, рН 7,5, 10 мкМ 2п8О4, 2 мМ МдС12, 14,2 мМ 2-меркаптозтанол, 5 мкг/мл каждого из пепстатина, лейпептина, апротинина, 20 мкг/мл каждого из кальпаиновых ингибиторов I и II и 2 мМ соль бензамидин НС1). Клетки лизировали пропусканием через элемент ЕгепсЕ®, разрушающий клетки посредством давления (8ЕМ-Лт1псо®, 8рес1гошс Тп81гцтеп18) при 10°С. Экстракт центрифугировали в роторе Бекмана 1Л-10 при 9000 об./мин в течение 22 мин при 4°С. Супернатант отбирали и центрифугировали в роторе Бекмана Ή45 при 36000 об./мин в течение 45 мин при 4°С.
РЭЕ4Л осаждали из супернатанта центрифугирования при высокой скорости добавлением твердого сульфата аммония (0,26 г/мл супернатанта) при перемешивании на ледяной бане и регулировании рН между 7,0 и 7,5. Осажденные белки, содержащие РЭЕ4А, собирали посредством центрифугирования в роторе Бекмана 1Л-10 при 9000 об./мин в течение 22 мин. Осадок снова суспендировали в 50 мл буфера 6 (50 мМ МОР8, рН 7,5, 10 мкМ 2п8О4, 5 мМ МдС12, 100 мМ ЫаС1, 14,2 мМ 2-меркаптоэтанол, 2 мМ соль бензамидин НС1, 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина и апротинина и 20 мкг/ил каждого из кальпаиновых ингибиторов I и II) и пропускали через фильтр 0,45 мкм.
Повторно суспендированный образец (от 50 до 100 мл) загружали в колонку 5 х 10 см РЕагшааа 8ЕРНАСКУЪ® 8-300, уравновешенного в буфере 6. Активный фермент элюировали при скорости потока 2 мл/мин и объединяли по пулам для последующего фракционирования.
РЭЕ4А, выделенный хроматографией типа гель-фильтрации вводили в колонку 1,6 х 20 см 81дта СФасгоп В1ие ЛдагокеЭуре 300 (10 мл), уравновешенного в буфере А (50 мМ МОР8, рН 7,5, 10 мкМ 2п8О4, 5 мМ МдС12, 14,2 мМ 2-меркаптоэтанол и 100 мМ соль бензамидин НС1). Колонку промывали последовательно от 50 до 100 мл буфера А, от 20 до 30 мл буфера А, содержащего 20 мМ 5'-АМФ, от 50 до 100 мл буфера А, содержащего 1,5 М ЫаС1, и от 10 до 20 мл буфера С (50 мМ Трис НС1, рН 8, 10 мкМ 2п8О4, 14,2 мМ 2-меркатоэтанол и 2 мМ соль бензамидин НС1). Фермент элюировали от 20 до 30 мл буфера С, содержащего 20 мМ цАМФ.
Фракции с пиковой активностью РЭЕ объединяли и осаждали сульфатом аммония (0,33 г/мл ферментного пула) для удаления избыточного циклического нуклеотида. Осажденные белки снова суспендировали в буфере Х (25 мМ МОР8, рН 7,5, 5 мкМ 2п8О4, 50 мМ ЫаС1, 1 мМ ΌΤΤ и 1 мМ соль бензамидин НС1) и освобождали от соли посредством гель-фильтрования на колонке РЕагташа РЭ-10® по инструкциям изготовителя. Фермент быстро замораживали на бане сухой лед/этанол и хранили при -70°С.
Полученные препараты имели по способу 8Э8-РЛСЕ чистоту приблизительно >80%. Эти препараты имели специфическую активность приблизительно от 10 до 40 мкмоль цАМФ, гидролизованного в минуту, на миллиграмм белка.
Получение РЭЕ4В из 8.Сегеу151ае.
Дрожжевые клетки (150 г штамма дрожжей Υ123 ЕагЬогшд НПиЫ2.32) размораживали смешиванием с 100 мл стеклянных шариков (промытых 0,5 мМ кислотой) и 150 мл буфера для лизиса (50 мМ МОР8, рН 7,2, 2 мМ ЭДТУ, 2 мМ ЭГТУ, 1 мМ ΌΤΤ, 2 мМ соль бензамидин НС1, 5 мкг/мл каждого из
- 125 005686 пепстатина, лейпептина, апротинина, кальпаиновых ингибиторов I и II) при комнатной температуре. Смесь охлаждали до 4°С, переносили в Веаб-Веа!ег® и клетки лизировали быстрым перемешиванием в течение 6 циклов по 30 с каждый цикл. Гомогенат центрифугировали в течение 22 мин в центрифуге Бекмана 12-21М с использование ротора 1А-10 при 9000 об./мин и 4°С. Супернатант извлекали и центрифугировали в ультрацентрифуге Бекмана ХЬ-80 с использованием ротора ΤΙ45 при 36000 об./мин в течение 45 мин при 4°С.
Супернатант извлекали и РЭЕ4В осаждали добавлением твердого сульфата аммония (0,26 г/мл супернатанта) при перемешивании на ледяной бане и поддерживании рН между 7,0 и 7,5. Данную смесь затем центрифугировали в течение 22 мин в центрифуге Бекмана 12 с использованием ротора 1А-10 при 9000 об./мин (12000 х д). Супернатант выгружали и клеточный дебрис растворяли в 200 мл буфера А (50 мМ МОР8, рН 7,5, 5 мМ МдС12, 1 мМ ΌΤΤ, 1 мМ соль бензамидин НС1 и 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина и апротинина). Величины рН и проводимости корректировали до 7,5 и 15-20 мСм соответственно.
Повторно суспендированный образец загружали в колонку 1,6 х 200 см (25 мл) 81дта С1Ьасгоп В1ие Адаго§е-1уре, уравновешенную в буфере А. Образец пропускали через колонку от 4 до 6 раз на протяжении курса 12 ч. Колонку промывали последовательно от 125 до 250 мл буфера А, от 125 до 250 мл буфера А, содержащего 1,5 М №С1, и затем от 25 до 50 мл буфера А. Фермент элюировали от 50 до 75 мл буфера Е (50 мМ Трис НС1, рН 8, 2 мМ ЭДТУ, 2 мМ ЭГТУ, 1 мМ ΌΤΤ, 2 мМ соль бензамидин НС1 и 20 мМ цАМФ) и от 50 до 75 мл буфера Е, содержащего 1 М №С1. Фракции с пиковой активностью РОЕ объединяли и осаждали сульфатом аммония (0,4 г/мл ферментного пула) для удаления избыточного циклического нуклеотида. Осажденные белки снова суспендировали в буфере Х (25 мМ МОР8, рН 7,5, 5 мкМ 2п8О, 50 мМ №С1, 1 мМ ΌΤΤ и 1 мМ соль бензамидин НС1) и освобождали от соли посредством гель-фильтрования на колонке РПагтааа РП-10® по инструкциям изготовителя. Ферментный пул диализовали в течение ночи против буфера X, содержащего 50% глицерина. Указанный фермент быстро замораживали на бане сухой лед/этанол и хранили при -70°С.
Полученные препараты имели по способу 8Э8-РАСЕ чистоту приблизительно >90%. Эти препараты имели специфическую активность приблизительно от 10 до 50 мкмоль цАМФ, гидролизованного в минуту, на миллиграмм белка.
Получение РЭЕ4С из 8.Сегеущ1ае.
Дрожжевые клетки (150 г штамма дрожжей Υ130 НагЬоппд НЬЬН3.48) размораживали смешиванием с 100 мл стеклянных шариков (промытых 0,5 мМ кислотой) и 150 мл буфера для лизиса (50 мМ МОР8, рН 7,2, 2мМ ЭДТУ, 2 мМ ЭГТУ, 1 мМ ΌΤΤ, 2 мМ соль бензамидин НС1, 5 мкг/мл каждого из пепстатина, лейпептина, апротинина, кальпаиновых ингибиторов I и II) при комнатной температуре. Смесь охлаждали до 4°С, переносили в ВΕА^-ВΕАΤΕВ® и клетки лизировали быстрым перемешиванием в течение 6 циклов по 30 с каждый цикл. Гомогенат центрифугировали в течение 22 мин в центрифуге Бекмана 12-21М с использование ротора 1А-10 при 9000 об./мин и 4°С. Супернатант извлекали и центрифугировали в ультрацентрифуге Бекмана ХЬ-80 с использованием ротора ΤΤ45 при 36000 об./мин в течение 45 мин при 4°С.
Супернатант извлекали и РЬЕ4С осаждали добавлением твердого сульфата аммония (0,26 г/мл супернатанта) при перемешивании на ледяной бане и регулировании рН между 7,0 и 7,5. Спустя 30 мин данную смесь центрифугировали в течение 22 мин в центрифуге Бекмана 12 с использованием ротора 1А10 при 9000 об./мин (12000 х д). Супернатант выгружали и клеточный дебрис растворяли в 200 мл буфера А (50 мМ МОР8, рН 7,5, 5 мМ МдС12, 1 мМ ΌΤΤ, 1 мМ соль бензамидин НС1 и 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина и апротинина). Величины рН и проводимости корректировали до 7,5 и 15-20 мСм соответственно.
Повторно суспендированный образец загружали в колонку 1,6 х 20 см (25 мл) 81дта С1Ьасгоп В1ие Адаго5е-1уре. уравновешенную в буфере А. Образец пропускали через колонку от 4 до 6 раз на протяжении курса 12 ч. Колонку промывали последовательно от 125 до 250 мл буфера А, от 125 до 250 мл буфера А, содержащего 1,5 М №С1, и затем от 25 до 50 мл буфера А. Фермент элюировали от 50 до 75 мл буфера Е (50 мМ Трис НС1, рН 8, 2 мМ ЭДТУ, 2 мМ ЭГТУ, 1 мМ ΌΤΤ, 2 мМ соль бензамидин НС1 и 20 мМ цАМФ) и от 50 до 75 мл буфера Е, содержащего 1 М №С1.
Фракции с пиковой активностью РОЕ объединяли и осаждали сульфатом аммония (0,4 г/мл ферментного пула) для удаления избыточного циклического нуклеотида. Осажденные белки снова суспендировали в буфере Х (25 мМ МОР8, рН 7,2, 5 мМ 2п8О4, 50 мМ №С1, 1 мМ ΌΤΤ и 1 мм соль бензамидин НС1) и освобождали от соли посредством гель-фильтрования на колонке РНагшааа РП-10® по инструкциям изготовителя. Ферментный пул диализовали в течение ночи против буфера X, содержащего 50% глицерина. Указанный фермент быстро замораживали на бане сухой лед/этанол и хранили при -70°С.
Полученные препараты имели по способу 8Э8-РАСЕ чистоту приблизительно >80%. Эти препараты имели специфическую активность приблизительно от 10 до 20 мкмоль цАМФ, гидролизованного в минуту на миллиграмм белка.
- 126 005686
Получение РПЕ4П из 8.Сегеуыае.
Дрожжевые клетки (100 г штамма дрожжей Υ129 НагЬоппд ΗΌυΝ4.11) размораживали смешиванием с 150 мл стеклянных шариков (промытых 0,5 мМ кислотой) и 150 мл буфера для лизиса (50 мМ МОР8, рН 7,2, 10 мкМ ΖηΟ2, 2 мМ Мд8О4, 14,2 мМ 2-меркаптоэтанол, 2 мМ соль бензамидин НС1, 5 мкг/мл каждого из пепстатина, лейпептина, апротинина, кальпаиновых ингибиторов I и II) при комнатной температуре. Смесь охлаждали до 4°С, переносили в Веаб-Веа!ег® и клетки лизировали быстрым перемешиванием в течение 6 циклов по 30 с каждый цикл. Гомогенат центрифугировали в течение 22 мин в центрифуге Бекмана 12-21М с использование ротора 1Л-10 при 9000 об./мин и 4°С. Супернатант извлекали и центрифугировали в ультрацентрифуге Бекмана ХЬ-80 с использованием ротора Т145 при 36000 об./мин в течение 45 мин при 4°С. Супернатант извлекали и РПЕ4П осаждали добавлением твердого сульфата аммония (0,33 г/мл супернатанта) при перемешивании на ледяной бане и регулировании рН между 7,0 и 7,5. Спустя 30 мин данную смесь центрифугировали в течение 22 мин в центрифуге Бекмана 12 с использованием ротора 1Л-10 при 9000 об./мин (12000 х д). Супернатант выгружали и клеточный дебрис растворяли в 100 мл буфера А (50 мМ МОР8, рН 7,5, 10 мкМ Ζη8О4, 5 мМ МдС12, 14,2 мМ 2меркаптоэтанол, 100 мМ соль бензамидин НС1 и 5 мкг/мл каждого из лейпептина, пепстатина, апротинина, кальпаинового ингибитора I или II). Величины рН и проводимости регулировали до 7,5 и 15-20 мСм соответственно.
При скорости потока 67 мл/мин повторно суспендированный образец загружали в колонку 1,6 х 20 см (10 мл) 81дта СЛасгоп В1ие АдагокеЭуре 300, уравновешенную в буфере А. Колонку промывали последовательно от 50 до 100 мл буфера А, от 20 до 30 мл буфера А, содержащего 20 мМ 5'-АМФ, от 50 до 100 мл буфера А, содержащего 1,5 М №С1, и затем от 10 до 20 мл буфера С (50 мМ Трис НС1, рН 8, 10 мкМ Ζη8О4, 14,2 мМ 2-меркаптоэтанол, 2 мМ соль бензамидин НС1). Фермент элюировали от 20 до 30 мл буфера С, содержащего 20 мМ цАМФ.
Фракции с пиковой активностью РОЕ объединяли и осаждали сульфатом аммония (0,4 г/мл ферментного пула) для удаления избыточного циклического нуклеотида. Осажденные белки снова суспендировали в буфере Х (25 мМ МОР8, рН 7,2, 5 мкМ Ζη8О4, 50 мМ №С1, 1 мМ ΌΤΤ и 1 мМ соль бензамидин НС1) и освобождали от соли посредством гель-фильтрования на колонке РНагтааа РП-10® по инструкциям изготовителя. Ферментный пул диализовали в течение ночи против буфера Х, содержащего 50% глицерина. Указанный фермент быстро замораживали на бане сухой лед/этанол и хранили при -70°С.
Полученные препараты имели по способу 8П8-РЛСЕ чистоту приблизительно >80%. Эти препараты имели специфическую активность приблизительно от 20 до 50 мкмоль цАМФ, гидролизованного в минуту на миллиграмм белка.
Очистка РЭЕ5 из 8.сегеуыае.
Клеточные дебрисы (29 г) размораживали на льду с равным объемом буфера для лизиса (25 мМ трис НС1, рН 8, 5 мМ МдС12, 0,25 мМ ΌΤΤ, 1 мМ соль бензамидин НС1 и 10 мкМ Ζη8О4). Клетки лизировали в М1сго11шб18ег® (МюгойшФск Согр.) с использованием азота при 20000 фунт/кв. дюйм. Лизат центрифугировали и фильтровали через имеющиеся в распоряжении фильтры 0,45 мкм. Фильтрат вводили в 150 мл колонку 0 8ЕРНА8О8Е® Еа51-Е1о\г (Рйагташа). Колонку промывали 1,5 объема буфера А (20 мМ Бис-триспропан, рН 6,8, 1 мМ МдС12, 0,25 мМ ΌΤΤ, 10 мкМ Ζη8О4) и элюировали со ступенчатым градиентом 125 мМ №1С1 в буфере А, затем линейным градиентом 125-1000 мМ №1С1 в буфере А. Активные фракции, полученные при элюировании с линейным градиентом, вводили в колонку 180 мл гидроксиапатита в буфере В (20 мМ Бис-триспропан (рН 6,8), 1 мМ МдС12, 0,25 мМ ΌΤΤ, 10 мкМ Ζη8О4 и 250 мМ КС1). После загрузки колонку промывали 2 объемами буфера В и элюировали с линейным градиентом 0125 мМ фосфата калия в буфере В. Активные фракции объединяли, осаждали 60% сульфатом аммония и снова суспендировали в буфере С (20 мМ Бис-триспропан, рН 6,8, 125 мМ №С1, 0,5 мМ ΌΤΤ и 10 мкМ Ζη8О4). Пул вводили в 140 мл колонку 8ΕΡΗАСЯΥ^® 8-300 НЯ и элюировали буфером С.
Активные фракции разбавляли до 50% глицерина и хранили при -20°С.
Полученные препараты имели по способу 8Э8-РАСЕ чистоту приблизительно 85%. Эти препараты имели специфическую активность приблизительно 3 мкмоль цГМФ, гидролизованного в минуту, на миллиграмм белка.
Получение РЭЕ7 из 8. сегегыае.
Клеточные дебрисы (126 г) размораживали и снова суспендировали при комнатной температуре в течение приблизительно 30 мин равным объемом буфера для лизиса (50 мМ Трис НС1, рН 8, 1 мМ ЭДТУ, 1 мМ ΌΤΤ, 50 мМ №С1, 2 мМ соль бензамидин НС1 и 5 мкг/мл каждого из пепстатина, лейпептина и апротонина). Клетки лизировали при 0-4°С при помощи стеклянных шариков (125 мл) в Веаб-Веа!ег® в течение 6 циклов по 30 с. Лизат центрифугировали и фильтровали через имеющиеся в распоряжении фильтры 0,45 мкм. Отфильтрованный экстракт (178 мл) распределяли на аликвоты по 4 мл, быстро замораживали сухим льдом и хранили в морозильнике при -70°С. Эти препараты были стабильными в процессе нескольких циклов замораживания и размораживания и имели специфические активности приблизительно от 50 до 100 пмоль цАМФ, гидролизованного в минуту, на миллиграмм белка.
- 127 005686
Стимулированное липополисахаридом высвобождение ΤΝΓα из лимфоцитов периферической крови человека.
Для определения способности соединения снижать секрецию ΤΝΓα в лимфоцитах периферической крови РВЬ) человека (РВЬ) были проведены следующие испытания. Предыдущими исследованиями было показано, что инкубация РВЬ человека с цАМФ-повышающими агентами, такими как простагландин Е21, форсколин, 8-бром-цАМФ или дибутрил-цАМФ, ингибирует секрецию ΤΝΓα клетками при стимуляции липополисахаридом (ЬР8, эндотоксин). В соответствии с этим, предварительные эксперименты были проведены для демонстрации того, что селективные ингибиторы РЭН4. такие как ролипрам, ингибируют ЬР8-индуцированную секрецию ΤΝΓα из лимфоцитов человека дозазависимым образом. Следовательно, секрецию ΤΝΓα из РВЬ человека использовали в качестве стандарта для способности соединения повышать концентрации внутриклеточного цАМФ и/или ингибировать активность РЭБ4 в клетке.
Гепаринизированную кровь (приблизительно 30 мл), отобранную у людей-добровольцев, смешивали 1:1 с модифицированным Дульбекко забуференным фосфатом солевым раствором. Данную смесь смешивали в пропорции 1:1 с ΗI8ΤΟΡΑ^υΕ® и центрифугировали при 1500 об./мин при комнатной температуре без торможения во вращающейся корзине центрифуги модели Бекмана Τ16. Эритроциты в результате центрифугирования находились на дне пробирок, а сыворотка оставалась у поверхности пробирок. Слой, содержащий лимфоциты, осаждался между сывороткой и слоями ΗI8ΤΟΡΑ^υΕ®, его отсасывали в свежую пробирку. Клетки определяли количественно и концентрацию их регулировали до 3 х 106 клеток/мл и 100 мкл аликвоту помещали в лунки 96-луночного планшета. В каждую из лунок за 15 мин до добавления бактериального ЬР8 (25 мг/мл) добавляли испытуемые соединения и среду КРМ1 (С1Ьсо/ВКЬ ЬгГе 8с1епсе§). Смеси давали возможность инкубироваться в течение 20 ч при 37°С в увлажненной камере. Клетки затем отделяли центрифугированием при 800 об./мин в течение 5 мин при комнатной температуре. 180 мкл аликвоту супернатанта переносили в новый планшет для определения концентрации ΤΝΓα. Белок ΤΝΓα в жидкости супернатанта клеток измеряли с использованием коммерчески доступного твердофазного иммуноферментного анализа (ΕΟ8Α) (Набор для иммуноанализа
СΥΤΟ8СКΕΕN® от Вюкоигсе 1и1ета1юиа1).
Анализ на клеточной основе дал следующие результаты для различных соединений ряда пирролидина настоящего изобретения. Величины ΕС5ο (т.е. эффективная концентрация соединения, способная ингибировать 50% общего ΤΝΓα) иллюстрируют способность настоящих соединений ингибировать ЬР8стимулированное высвобождение ΤΝΓα из РВЬ человека.
Таблица ниже иллюстрирует способность соединений формулы (II) ингибировать активность РЭБ4 и высвобождение ΤΝΓα ίη νίίτο. В следующей таблице величины 1С50 были определены по отношению к рекомбинантному РЭБ4 человека.
- 128 005686
Номер образца1* Стереохимия 1СИ РЦЕ4 (Μ х 1О'Э) ЕС50 ΡΒΙ./ ΤΝΕν (М х 10’·)
1 Абсолютная, как нарисовано 87,0 1205,8
2 Абсолютная, как нарисовано 260,0 1900,0
3 Относительная стереохимия, как нарисовано; рацемическая 180,0 3261,7
4 Относительная стереохимия, как нарисовано; рацемическая 190,0 3611,5
5 Относительная стереохимия, как нарисовано; рацемическая 75,0 1551,3
6 Относительная стереохимия, как нарисовано; рацемическая 75,0 3657,5
7 Абсолютная, как нарисовано 5800,0
8 Абсолютная, как нарисовано 784,0 909,6
9 Абсолютная, как нарисовано 13000,0
10 Абсолютная, как нарисовано 7900,0
11 Абсолютная, как нарисовано 3700,0
12 Абсолютная, как нарисовано 2600,0
13 Абсолютная, как нарисовано 1000,0 2339,5
14 Абсолютная, как нарисовано 900,0 2981,5
15 Относительная стереохимия, как нарисовано; рацемическая, смесь изомеров простого эфира 4,3 108,8
16 Относительная стереохимия, как нарисовано; рацемическая, смесь изомеров простого эфира 7,3 46,4
17 Абсолютная, как нарисовано 2211,6 3447,3
18 Абсолютная, как нарисовано 1027,3 5101,6
19 Абсолютная, как нарисовано 1974,0 1951,1
20 Абсолютная, как нарисовано 536,0 170,0
21 Абсолютная, как нарисовано 16,2 278,0
22 Абсолютная, как нарисовано 520,4 164,0
23 Абсолютная, как нарисовано 1592,2
24 Абсолютная, как нарисовано; смесь изомеров простого эфира 1,6 40,0
25 Абсолютная, как нарисовано; смесь изомеров простого эфира 2,8 12,2
26 Абсолютная, как нарисовано; смесь изомеров простого эфира 35,0 106,0
27 Абсолютная, как нарисовано; смесь изомеров простого эфира 1,8 36,0
28 Абсолютная, как нарисовано 23,0 241,0
29 Абсолютная, как нарисовано 4,9 78,0
30 Абсолютная, как нарисовано 100,0 440,0
31 Абсолютная, как нарисовано 3,6 35,0
32 Абсолютная, как нарисовано 1000.0 801,0
33 Абсолютная, как нарисовано 2100,0
34 Абсолютная, как нарисовано 402,6 250,0
35 Абсолютная, как нарисовано 35,6 20,3
36 Абсолютная, как нарисовано 187,2 1600,0
- 129 005686
37 Абсолютная, как нарисовано 0,768 72,0
38 Абсолютная, как нарисовано 5,9 36,0
39 Абсолютная, как нарисовано 2,7 48,1
40 Абсолютная, как нарисовано 98,4 139,1
41 Абсолютная, как нарисовано 27,0 266,9
42 Абсолютная, как нарисовано 7,5 171,7
43 Абсолютная, как нарисовано 12,5 145,8
44 Абсолютная, как нарисовано 41,2 238,0
45 Абсолютная, как нарисовано 247,6 694,0
46 Абсолютная, как нарисовано 1805,9 13317,0
47 Абсолютная, как нарисовано 2727,4 20000,0
48 Абсолютная, как нарисовано 89,7 446,0
49 Абсолютная, как нарисовано 14,3 26,2
50 Абсолютная, как нарисовано 44,8 151,2
51 Абсолютная,как нарисовано 44,7 72,6
52 Абсолютная, как нарисовано 26,7
53 Абсолютная, как нарисовано; смесь тетрагидрофурилизомеров 116,3 112,6
54 Абсолютная, как нарисовано; смесь 2,2-диметил-4-оксо-4- пирролидин-1-илмасляной кислоты и амидов З.З-диметил-4оксо-4-пирролидин-1-илмасляной кислоты 464,7
55 Абсолютная, как нарисовано 1842,1
56 57 Абсолютная, как нарисовано Абсолютная, как нарисовано 4,0 95,6
58 Абсолютная, как нарисовано
59 Рацемическая; относительная стереохимия, как показано 58,0 170,0
60 Рацемическая; относительная стереохимия, как показано 74,0 44,0
61 Рацемическая; относительная стереохимия, как показано 18,3 57,8
62 Рацемическая; относительная стереохимия, как показано 6,8 10,2
63 Рацемическая; относительная стереохимия, как показано, рацемическая с норборнильным остатком 51,4 267,4
64 Рацемическая; относительная стереохимия, как показано, рацемическая с норборнильным остатком 8,5 36,2
65 Рацемическая; относительная стереохимия, как показано 220,0 181,0
66 Абсолютная стереохимия, как показано 14,0 71,6
67 Абсолютная стереохимия, как показано 514,7 603,3
68 Абсолютная стереохимия, как показано 61,1 169,9
Номер образца1* Стереохимия 1С50 ΡΩΕ4 (М х 10 ’) ЕС5о ΡΒί/ΤΝΕν (Μ х 10’9)
69 Абсолютная стереохимия, как показано 13,3 57,0
70 Абсолютная стереохимия, как показано; индивидуальный неидентифицированный спиртовый изомер 1 498,5 547,2
71 Абсолютная стереохимия, как показано; индивидуальный неидентифицированный спиртовый изомер 2 1707,2
72 Абсолютная, как нарисовано 2452,6
73 Абсолютная^ как нарисовано 9131,0
74 Абсолютная, как нарисовано 352,3 557,3
75 Абсолютная, как нарисовано 45,1 121,0
76 Абсолютная, как нарисовано 35,6 173,0
77 Абсолютная, как нарисовано 188,7 580,0
78 Абсолютная, как нарисовано 760,1 1288,6
79 Абсолютная, как нарисовано 1639,0 2366,6
80 Абсолютная, как нарисовано 300,0 272,4
81 Абсолютная, как нарисовано 700,0 624,8
82 Абсолютная, как нарисовано 389,8 490,0
83 Абсолютная, как нарисовано 172,0 51,0
84 Абсолютная, как нарисовано 21,7 40,0
85 Абсолютная, как нарисовано 3576,8
86 Абсолютная, как нарисовано 6077,6
87 Абсолютная, как нарисовано 896,6 934,4
88 Абсолютная, как нарисовано 953,4 629,5
89 Абсолютная, как нарисовано 699,0 860,0
90 Абсолютная, как нарисовано 69,4 ’ 61,0
91 Абсолютная, как нарисовано 150,0 44,0
92 ' Абсолютная, как нарисовано 439,4
93 Абсолютная, как нарисовано 33,1 7,8
94 Абсолютная стереохимия, как показано 238,2 1800,0
См. приложение А для структуры каждого образца.
- 130 005686
Данные, представленные выше, показывают, что настоящие соединения являются сильнодействующими ингибиторами РЬЕ4, например, соединения имеют 1С50 в отношении рекомбинантного РЭЕ4 человека приблизительно от 700 пМ до приблизительно 15 мкМ. Предпочтительные соединения имеют 1С50 приблизительно 100 нМ или меньше, особенно предпочтительные соединения имеют 1С50 приблизительно 50 нМ или меньше.
Аналогично этому, предпочтительные соединения имеют ЕС50 РВЬ/ΤΝΕα приблизительно 500 нМ или меньше, предпочтительно приблизительно 200 нМ или меньше. Более предпочтительные соединения имеют ЕС50 РВЬ/ΤΝΕα приблизительно 100 нМ или меньше.
Соединения имеют 1С50 в отношении рекомбинантного РЭЕ4 человека приблизительно 100 нМ или меньше и ЕС50 РВЬ/ΤΝΕα приблизительно 500 нМ или меньше, благодаря чему достигается полное преимущество настоящего изобретения. Более предпочтительно соединения имеют 1С50 приблизительно 50 нМ или меньше и ЕС50 РВЬ/ΤΝΕα приблизительно 100 нМ или меньше.
Животные модели.
Анализ ингибирования уровней ΤΝΕα в сыворотке млекопитающих (Мышь/ЕЬ50 ΤΝΕα (мг/кг)).
Для оценки способности соединения снижать уровни ΤΝΕα в сыворотке у млекопитающих использовали следующий протокол. Специалистам в данной области понятно, что предыдущие исследования показали, что инкубация ЬР8-активированных моноцитов человека с агентами, которые могут повышать цАМФ, подобными Р6Е2, фосколину и йЬцАМФ, ингибировали секрецию ΤΝΕα. Обнаружено, что ингибиторы РЬЕ4, подобные ролипраму, которые также повышают цАМФ, ингибируют также ΤΝΕα сыворотки. Было также обнаружено, что ролипрам ингибирует секрецию ΤΝΕα из ЬР8-активированных мышиных макрофагов. В соответствии с этим, эффективность ίη νίνο снижающего РЭЕ4 соединения была показана дозированным введением соединения и измерением снижения уровней ΤΝΕα у ЬР8-инъецированных мышей. Самкам мышей С3Н, масса тела 20-25 г, которых не кормили в течение ночи, внутрибрюшинным способом вводили дозы испытуемого соединения в подходящем наполнителе за 60 мин до инъекции ЬР8. Затем мышам внутрибрюшинно инъецировали 5 мкг ЬР8. Через девяносто минут после инъекции ЬР8 у мышей спускали кровь из сердца. Крови давали возможность свернуться в течение ночи при 4°С. Образцы центрифугировали в течение 10 мин в микроцентрифуге и сыворотку извлекали и хранили при -20°С до анализа. Уровни ΤΝΕα в сыворотке затем измеряли с использованием коммерчески доступного набора ЕЫ8Л (Сегщуте) по протоколу, вложенному в набор. Процент ингибирования уровней ΤΝΕα сыворотки, вызванного соединением, определяли относительно уровней ΤΝΕα сыворотки у контрольных мышей, получающих только наполнитель.
Комбинированный анализ стимулированного эндотоксином высвобождения ΤΝΕα и двигательной активности мыши (ЕЬ50 (мг/кг)).
Целью данного изучения было определение эффективности ингибиторов РЬЕ4 ίη νίνο на ЬР8мышиной модели вместе с определением побочных действий на центральную нервную систему (ЦНС), показанных посредством снижения в самопроизвольной подвижности.
Испытуемыми животными были самки мышей Ва1Ь/с, имеющие среднюю массу приблизительно 20 г. Ингибиторы РЬЕ4, приготовленные в 30% Сгеторйог® ЕЬ, вводили посредством внутрибрюшинных (ί.ρ.) инъекций при дозах 0,1, 1,0, 10,0 и 100 мг/кг. Объемы индивидуальных доз (приблизительно
150 мкл) регулировали на основании измеренных масс тела. Спустя один час каждому животному вводили инъекцией через вену хвоста 5 мг/кг ЬР8 в конечном объеме 200 мкл. Через девяносто минут после обработки ЬР8 у животных спускали кровь и образцы сыворотки собирали и хранили при -70°С до проведения анализа.
Для определения эффективности образцы сыворотки разбавляли в два раза и уровни ΤΝΕα определяли с использованием набора для иммуноанализа СΥΤΟ8СВЕЕN® (Вюкоигсе 1п1егпа1юпа1). Данные усредняли между тремя повторностями образцов субъектов для каждого из испытуемых соединений.
Движение по плоскости Х-Υ или вставание на задние лапы количественно определяли подсчетом числа пересечений «светового пучка» на единицу времени. Снижение числа случаев активности прямо пропорционально подвижности или неподвижности животного. Количественная оценка хорошо коррелировала с субъективными измерениями, описанными выше.
В следующей таблице суммированы результаты мышь/ЕЬ50 ΤΝΕα (мг/кг), полученные вышеуказанным способом
- 131 005686
Номер образца11 Мышь/Εϋδο ΤΝΕα ЕО50 (μι7κγ)“'
29 (мг/кг) 9,8
31 3 83
61 0,2 >50
62 0,08 >50
66 5 >50
67 - >50
68 12 20
69 7 <0,5
3) Эффективная доза в мг/кг, которая снижает самопроизвольную подвижность на 50% от контроля.
Было установлено также, что соединения формулы (II) оказывают более слабые побочные действия на центральную нервную систему по сравнению с ролипрамом и соединениями, описанными РеИтап е! а1. в патенте США № 5665754. Было также обнаружено, что активность центральной нервной системы связана с абсолютной стереохимией настоящих соединений.
Известно, что стереоизомеры лекарственных средств могут иметь существенно разные биологические активности, например профили эффективности, селективности, поглощения, распределения, метаболизма, выполнения и побочных действий. В настоящем изобретении энантиомеры и диастереомеры, представленные соединениями (А)-(Э) в следующей таблице, были испытаны на их влияние на ΡΌΕактивности ίη νίΐΓΟ, высвобождение ΌΡ8/ΤΝΡα из лимфоцитов периферической крови ΡΒΌδ человека, подвижность мыши и рвоту у хорька.
Как показано в следующей таблице, соединения (С) и (А) (например, образцы 66 и 69 соответственно) проявляют сходное ингибирование ΡΌΕ4 и ^Ρ8-стимулированного высвобождения ΤΝΡα, но, по существу, различные поведенческие профили. Соединения (С) и (А), которые проявляют меньшую активность для ЦНС, получают из преобладающего продукта [3+2]-азометинилидной циклизации в хиральный α,β-ненасыщенный амид. Таким образом, абсолютная стереохимия ингибитора ΡΌΕ4 настоящего изобретения вносит существенный вклад в поведенческий профиль соединения.
- 132 005686
1) Побочные действия на ЦНС определяли субъективной оценкой неподвижности мыши после инъекции соединения (ΐ.ρ.) при дозах 1, 10 и 100 мг/кг. Оценку подвижности (или ее отсутствие) выражали по следующим критериям: пониженное исследовательское поведение, плоское положение тела, распростертое положение тела, взлохмаченная шерсть. Явные действия не были отмечены на протяжении времени оценки 60 минут с соединениями примеров 8(С), 8(0) и 8(В). Однако, мыши были поражены при всех дозах, когда давали соединение примера 8(А). Кроме того, при самой высокой дозе соединения примера 8(А) мыши агонизировали и погибали за 10 минут после обработки.
Данные, представленные выше, показывают, что соединения формулы (II) являются сильнодействующими и селективными ингибиторами ΡΌΕ4. В качестве важного дополнительного преимущества, соединения формулы (II) оказывают также пониженные или совсем не оказывают побочные действия на ЦНС, связанные с предыдущими ингибиторами ΡΌΕ4. Соединения формулы (II) были далее испытаны на рвотные свойства на животных моделях для дальнейшей иллюстрации эффективности соединений. Способ и результаты испытания на рвотное действие приводятся ниже.
Моделирование рвотного действия на хорьке после перорального и внутривенного дозированного введения РОЕ4-селективных ингибиторов.
Данное изучение проводили для исследования рвотных свойств ингибиторов ΡΌΕ4 ίη νί\Ό. Хорек предварительно был выбран в качестве полезного объекта для оценки рвоты после действия на него испытуемых соединений. Предварительные изучения показали, что рвотная реакция хорька на многие ингибиторы ΡΌΕ4 предсказывает склонность человека к тем же самым испытуемым соединениям. Следовательно, отсутствие и/или ослабление в рвотном потенциале испытуемых соединений у хорьков предсказывает благоприятное не рвотное действие у людей. Рвота является сложной физиологической ответной реакцией на вредные агенты, которые могут начинать действовать в периферической или центральной нервной системах. Поэтому Ρ^Ε4-селективные агенты испытывали при введении либо внутривенно, либо перорально.
Испытуемыми животными были взрослые, кастрированные и ослабленные самцы хорьков (вид Ми81е1а ри1огш8 £иго, штамм 8аЫе), имеющие массу в диапазоне приблизительно от 1 до 1,5 кг. Испытания проводили в четырех повторностях на животных, которые были простыми моделями для ингибиторов ΡΌΕ4. Ингибиторы ΡΌΕ4 приготовляли в 10% касторовом масле Ρо1уоxу1-35 (СКΕМΟΡНΟК® ΕΕ, доступен от ВА8Е Согрогайоп, ΡΗΓδίρρπ^, N1), в забуференном фосфатом солевом растворе (ГВ8) и вводили посредством внутривенных (ί.ν.) инъекций в постоянный катетер, введенный хирургическим путем и расположенный в правой наружной шейной вене, со скоростью 0,66 мл на кг массы тела. Ингибиторы ΡΌΕ4 для перорального поглощения приготовляли в 30% СКΕМΟΡНΟК® ΕΕ ΡВ8 и вводили интубированием животных иглой для кормления 16 калибра в желудок. Животные получали ингибиторы ΡΌΕ4 в объеме 1,33 мл на кг массы тела.
Все животные голодали в течение от 8 до 12 ч перед введением ингибиторов ΡΌΕ4. После введения ингибитора ΡΌΕ4 рвотные и поведенческие ответные реакции количественно определяли в течение 3 ч после введения дозы. Общее число рвотных ответных реакций и эпизодов рвоты количественно определяли в течение интервала наблюдения. Кроме того, регистрировали латентное время до первого эпизода рвоты, продолжительность эпизодов рвоты и значительные поведенческие изменения, в том числе атаксию, обильное и густое слюноотделение, царапанье рта, гипервентиляцию легких, движение задом, плоское положение тела, гиперактивность, облизывание губ и общий внешний вид.
Для сравнительных целей рвотное действие образцов 66 и 69 испытывали внутривенно при 1,0, 2,5, 5,0 и 10 мг/кг и перорально при 2,5, 10, 17 и 25 мг/кг. Результаты суммированы в следующей таблице.
- 133 005686
СРАВНИТЕЛЬНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Соединение (А) (образец 69) Число случаев рвоты
Пероральное (мг/кг) Рвоты Позывы на рвоту Всего Отвечающие организмы
2,5 0 0 0 0.4
10,0 5 27 32 3/4
17,0 7 51 58 3/4
25,0 26 88 114 4/4
Внутривенное (мг/кг) Рвоты Позывы на рвоту Всего Отвечающие организмы
1,0 0 0 0 0/4
СРАВНИТЕЛЬНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Соединение (А) (образец 66)
Число случаев рвоты
Пероральное (мг/кг)
мг/кг соединения примера 8(А) не вводили внутривенно.
Внутривенное (мг/кг) Рвоты Позывы на рвоту Всего Отвечающие организмы
1,0 0 0 0 0/4
2,5 0 0 0 0/4
5,0” 0 10 10 2/4
10,0 4 27 31 4/4
Только двух хорьков дозировали внутривенно 5 мг/кг соединения (А) вследствие тяжести
- 134 005686
В общем, оба соединения (С) и (А), введенные либо перорально, либо посредством внутривенной инъекции, вызывают явную ответную реакцию в зависимости от дозы в терминах рвотного поведения. Соединение (А) вызывает значительно более сильную рвотную реакцию, чем соединение (С). Это легко обнаруживалось, когда сравнивали ответные реакции на пероральные дозы. Например, при дозе 25 мг/кг массы тела соединение (А) вызывает больше эпизодов позывов на рвоту и рвоты, чем такая же пероральная доза соединения (С). Кроме того, число позывов на рвоту и случаев рвоты на эпизод было значительно больше для соединения (А), чем для соединения (С) в данной группе доз. Аналогичная тенденция была очевидна при пероральных дозах 17 и 11 мг/кг массы тела, причем соединение (А) проявляло более сильную ответную реакцию, чем соединение (С). Не наблюдали явных различий между самыми низкими дозированными группами для обеих молекул. В данных случаях некоторые небольшие облизывания губ/царапанье рта были очевидными для обоих соединений, но рвотные реакции не наблюдали.
Результаты перорального дозированного введения заметно контрастировали с результатами внутривенного дозированного введения. При внутривенной дозе 5 мг/кг массы тела соединения (А) одно из подвергаемых испытанию животных погибло почти сразу после дозирования (через 5 мин), тогда как второе животное явно испытывало дистресс, но выздоровело спустя 3 ч. Дистресс можно отнести либо к острому случаю токсичности, либо чрезмерной фармакологической реакции на опосредованную центральной нервной системой рвоту. Было отмечено также, что нарушенное и затрудненное дыхание у этих дозированных животных трудно отличить от поведения экстремальных позывов к рвоте. Действия не были почти такими же серьезными при внутривенном введении соединения (С), как показано в вышеприведенной таблице. Хотя все животные проявляли рвотное поведение при 10 мг/кг массы тела в случае соединения (С), ни одно из них не демонстрировал дистресс, связанный с введением 5 мг/кг дозы соединения (А). За исключением случая дозы соединения (А) 5 мг/кг тела, все животные выздоравливали после их обработки и выглядели нормально.
го изобретения являются полезными для селективного ингибирования активности ΡΌΕ4 у млекопитающего без проявления отрицательного действия на ЦНС и рвотного действия, связанных с предыдущими ингибиторами ΡΌΕ4.
Очевидно, что может быть сделано много модификаций и вариантов изобретения, как ранее здесь изложено, не выходящих за пределы сущности и объема его, и, следовательно, только такие ограничения могут быть введены, какие указываются прилагаемой формулой изобретения.

Claims (1)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ где Я1 выбран из группы, включающей водород, С1-6алкил, мостиковый алкил, выбранный из группы, включающей норборнил, адамантил, бицикло[2.2.2]октил, бицикло[3.2.1]гептил, бицикло[3.2.1]октил, бицикло [4.1.0]гептил, бицикло [3.1.0] гексил и декагидронафтил, замещенный или незамещенный арил, выбранный из группы включающей фенил, нафтил, бифенил, тетрагидронафтил, инданил, 2-хлорфенил, 3-хлорфенил, 4-хлорфенил, 4-фторфенил, 2-метилфенил, 4-метоксифенил, 4-триформетилфенил, 4нитрофенил, циклоалкил, выбранный из группы, включающей циклопропил, циклобутил, циклогексил, декагидронафталин, циклопентил, инданил, тетрагидронафталинил, 4-, 5-, 6-членный насыщенный гетероцикл, выбранный из группы, включающей тетрагидрофуран, тетрагидропиран, пиперидин, пиперазин, сульфолан, морфолин, 1,3-диоксолан, тетрагидропиран, диоксан, триметиленоксид, гетероарил, выбранный из группы, включающей тиенил, фурил, пиридил, оксазолил, 1,2,4-оксадиазол-3-ил, хинолил, изохинолил, индол, триазолил, изотиазолил, и изоксазолил, имидазолил, бензотиазолил, пиразинил, пиримидинил, тиазолил и тиадиазолил, С1-4алкиленарил, С1-4алкилен-0-арил, С1-4алкиленгетероарил, С1-4алкилен-Не!, где Не! выбран из группы, включающей тетрагидрофуран, тетрагидропиран, пиперидин, пиперазин, сульфолан, морфолин, 1,3-диоксолан, тетрагидропиран, диоксан, триметиленоксид, С2-4алкиленарил-0-арил, С1-4алкиленовый мостиковый алкил, С1-4алкиленциклоалкил, замещенный или незамещенный пропаргил, представляющий собой Я-С=С-СН2-, где Я выбран из группы, включающей водород, С1-6алкил, галогеналкил, циклоалкил (определен выше), замещенный или незамещенный арил (определен выше) или замещенный или незамещенный гетероарил (определен выше), замещенный или незамещенный аллил, представляющий собой Я-СН-СН-СН2-, где Я выбран из группы, включающей С1-6 алкил, галогеналкил, циклоалкил (определен выше), замещенный или незамещенный арил (определен выше) или замещенный или незамещенный гетероарил, галогенциклоалкил;
    Я2 выбран из группы, включающей водород, метил и галогензамещенный метил, например СНГ2;
    Я3 выбран из группы, включающей С(=О)ОЯ7, С(=О)Я7, NΗС(=О)ОЯ7, С1-3алкилен-С(=О)ОЯ8, С13алкилен-С=(О)Я8, С(=NΗ)NК8Я9, (^νΜ9, ^ΜΝ^9 С(=О)С(=О)ОЯ8, С1-4алкилен-ОЯ8, арил (определен выше), С1-3алкиленарил, С1-3алкиленгетероарил, 8О2-гетероарил, Не! (определен выше) и гетероарил (определен выше);
    Я4 выбран из группы, включающей водород, С1-6алкил, галогеналкил, циклоалкил и арил (определен в Я1);
    Я5 выбран из группы, включающей водород, С1-6алкил, алкинил, галогеналкил, гидроксиалкил, циклоалкил (определен в Я1) и арил (определен в Я1);
    Я6 выбран из группы, включающей водород, С1-6алкил, С(=О)Я7;
    Я7 выбран из группы, включающей С1-6алкил, разветвленный или неразветвленный, С1-4алкиленарил, циклоалкил (определен в Я1), Не! (определен в Я1), С1-4алкиленциклоалкил, гетероарил и арил
    - 151 005686 (определены в В1), причем каждый необязательно замещен одним или несколькими заместителями из ОС(=О)В8, С(=О)ОВ8, ОВ8, ΝΚ8Β9 или 8В8;
    В8 и В9, одинаковые или разные, выбраны из группы, включающей водород, С1-6алкил, арил (определен в В1), циклоалкил (определен в В1), гетероарил (определен в В1), С(=О)О-алкил, С(=О)О-арил, С(=О)-алкил, алкил-8О2, галогеналкил-8О2, С(=О)-С1-3алкиленарил, С(=О)О-С1-4алкиленарил, С1-4алкиленарил и Не! (определен в В1), или В8 и В9 вместе образуют кольцо от 4-членного до 7-членного;
    В10 выбран из группы, включающей водород, алкил (определен в В1), галогеналкил, циклоалкил (определен в В1), арил (определен в В1), С(=О)-алкил, С(=О)-циклоалкил, С(=О)-арил, С(=О)О-алкил, С(=О)О-циклоалкил, С(=О)-арил, СН2ОН, СН2О-алкил, СНО, ΟΝ, NО2 и 8О2В11;
    В11 выбран из группы, включающей алкил, циклоалкил (определен в В1), трифторметил, арил (определен в В1), аралкил и NВ8В9, и его соли и сольваты.
EA200200590A 1999-12-23 2000-11-28 Производные пирролидина в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы, специфичной к циклическому амф EA005686B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/471,846 US6258833B1 (en) 1999-12-23 1999-12-23 Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
PCT/US2000/032401 WO2001047905A1 (en) 1999-12-23 2000-11-28 Pyrrolidine derivatives as cyclic amp-specific phosphodiesterase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200200590A1 EA200200590A1 (ru) 2002-12-26
EA005686B1 true EA005686B1 (ru) 2005-04-28

Family

ID=23873210

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200200590A EA005686B1 (ru) 1999-12-23 2000-11-28 Производные пирролидина в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы, специфичной к циклическому амф

Country Status (29)

Country Link
US (6) US6258833B1 (ru)
EP (1) EP1242400B1 (ru)
JP (1) JP4294903B2 (ru)
KR (1) KR20020063600A (ru)
CN (1) CN1434813A (ru)
AT (1) ATE325108T1 (ru)
AU (1) AU778543B2 (ru)
BG (1) BG65892B1 (ru)
BR (1) BRPI0016693B1 (ru)
CA (1) CA2395193C (ru)
CZ (1) CZ20022188A3 (ru)
DE (1) DE60027769D1 (ru)
EA (1) EA005686B1 (ru)
EE (1) EE05087B1 (ru)
GE (1) GEP20043384B (ru)
HK (1) HK1051359A1 (ru)
HR (1) HRP20020541B1 (ru)
HU (1) HUP0301113A3 (ru)
IL (1) IL150313A0 (ru)
IS (1) IS6436A (ru)
MX (1) MXPA02006212A (ru)
NO (1) NO20023008L (ru)
PL (1) PL202227B1 (ru)
RS (1) RS50841B (ru)
SK (1) SK287964B6 (ru)
TR (1) TR200400702T4 (ru)
UA (1) UA73964C2 (ru)
WO (1) WO2001047905A1 (ru)
ZA (1) ZA200205551B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2669938C2 (ru) * 2014-05-29 2018-10-17 Мицубиси Танабе Фарма Корпорейшн Новое пирролидиновое соединение и его применение в качестве агониста рецептора меланокортина

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6455571B1 (en) * 1998-04-23 2002-09-24 Abbott Laboratories Inhibitors of neuraminidases
US6258833B1 (en) * 1999-12-23 2001-07-10 Icos Corporation Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
AU2001243297A1 (en) * 2000-02-29 2001-09-12 Merck Frosst Canada And Co. Method for treating or preventing depression
CN100482632C (zh) * 2000-07-03 2009-04-29 斯皮德尔药品公司 (r)-2-烷基-3-苯基丙酸的制备
US6953774B2 (en) * 2000-08-11 2005-10-11 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Methods of inducing ovulation
WO2002047540A2 (en) * 2000-12-15 2002-06-20 The General Hospital Corporation Methods for inhibiting fibrosis
US20040014099A1 (en) * 2001-03-19 2004-01-22 Decode Genetics Ehf. Susceptibility gene for human stroke; methods of treatment
US6479493B1 (en) 2001-08-23 2002-11-12 Cell Pathways, Inc. Methods for treatment of type I diabetes
US20030073711A1 (en) * 2001-08-23 2003-04-17 Whitehead Clark M. Methods for treatment of scleroderma
ATE444065T1 (de) * 2001-10-16 2009-10-15 Memory Pharm Corp 4(4-alkoxy-3-hydroxyphenyl)-2-pyrrolidon-deriva e als pde-4-hemmer zur behandlung von neurologischen syndromen
JP4532115B2 (ja) 2001-12-14 2010-08-25 メルク セローノ ソシエテ アノニム 非ポリペプチドｃＡＭＰレベル調節剤を使用する排卵誘発方法
MY140561A (en) * 2002-02-20 2009-12-31 Nycomed Gmbh Dosage form containing pde 4 inhibitor as active ingredient
DE10228132A1 (de) * 2002-06-24 2004-01-22 Arzneimittelwerk Dresden Gmbh Amide cyclischer Aminosäuren als PDE 4 Inhibitoren
AU2004220357B2 (en) 2003-03-10 2010-09-30 Astrazeneca Ab Novel process for the preparation of roflumilast
AU2004232958A1 (en) * 2003-04-16 2004-11-04 F.-Hoffmann La-Roche Inc. 4 - (3,4 - disubstituted phenyl) - pyrrolidin-2-one compounds as phosphodiesterase 4 inhibitors
WO2004094411A1 (en) * 2003-04-18 2004-11-04 Memory Pharmaceuticals Corporation Pyrazole derivatives as phosphodiesterase 4 inhibitors
US20070060593A1 (en) * 2003-06-25 2007-03-15 Kerns Jeffrey K 4-Carboxamido quinoline derivatives for use as nk-2 and nk-3
US7468437B2 (en) * 2003-09-30 2008-12-23 Merck & Co., Inc. Phenyl pyrrolidine ether tachykinin receptor antagonists
US20050201989A1 (en) * 2004-02-19 2005-09-15 St. Camillus Medical, Inc. Compositions and methods for ex vivo preservation of blood vessels for vascular grafts using inhibitors of tumor necrosis factor-alpha
WO2005100346A1 (en) * 2004-04-08 2005-10-27 Wyeth Thioamide derivatives as progesterone receptor modulators
JP2008516964A (ja) * 2004-10-15 2008-05-22 メモリー ファーマシューティカルス コーポレーション ホスホジエステラーゼ４阻害剤としてのピラゾール誘導体
JP2008517066A (ja) * 2004-10-20 2008-05-22 メモリー ファーマシューティカルス コーポレーション ホスホジエステラーゼ４阻害剤
DK1861074T3 (da) * 2005-03-16 2013-07-29 Takeda Gmbh Smagsmaskeret doseringsform indeholdende roflumilast
EP2258357A3 (en) 2005-08-26 2011-04-06 Braincells, Inc. Neurogenesis with acetylcholinesterase inhibitor
EP1928437A2 (en) 2005-08-26 2008-06-11 Braincells, Inc. Neurogenesis by muscarinic receptor modulation
EP1940389A2 (en) 2005-10-21 2008-07-09 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by pde inhibition
US20070112017A1 (en) 2005-10-31 2007-05-17 Braincells, Inc. Gaba receptor mediated modulation of neurogenesis
KR20080065704A (ko) 2005-11-09 2008-07-14 콤비네이토릭스, 인코포레이티드 의학적 이상의 치료 방법들, 조성물들, 및 키트들
WO2007104035A1 (en) * 2006-03-08 2007-09-13 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by nootropic agents
US20100216734A1 (en) 2006-03-08 2010-08-26 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by nootropic agents
US20100009983A1 (en) * 2006-05-09 2010-01-14 Braincells, Inc. 5 ht receptor mediated neurogenesis
EP2377531A2 (en) 2006-05-09 2011-10-19 Braincells, Inc. Neurogenesis by modulating angiotensin
WO2007134077A2 (en) 2006-05-09 2007-11-22 Braincells, Inc. 5 ht receptor mediated neurogenesis
BRPI0716604A2 (pt) 2006-09-08 2013-04-09 Braincells Inc combinaÇÕes contendo um derivado de 4-acilaminopiridina
US20100184806A1 (en) 2006-09-19 2010-07-22 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by ppar agents
AU2007299920A1 (en) * 2006-09-19 2008-03-27 Braincells, Inc. PPAR Mediated Modulation of Neurogenesis
AR063275A1 (es) * 2006-10-12 2009-01-14 Epix Delaware Inc Compuestos de carboxamida, una composicion farmaceutica que los comprende y su uso en la preparacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades mediadas por la activacion de ccr2.
CA2695852C (en) 2007-08-07 2017-01-03 Takeda Pharmaceutical Company Limited Cyclic amine compounds
WO2009076512A1 (en) 2007-12-11 2009-06-18 Epix Delaware, Inc. Carboxamidξ compounds and their use as chemokine receptor agonists
WO2010099217A1 (en) 2009-02-25 2010-09-02 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis using d-cycloserine combinations
CN102603623A (zh) * 2011-12-26 2012-07-25 北京赛林泰医药技术有限公司 制备高纯度罗氟司特的方法
WO2013106547A1 (en) 2012-01-10 2013-07-18 President And Fellows Of Harvard College Beta-cell replication promoting compounds and methods of their use
JO3264B1 (ar) * 2013-03-13 2018-09-16 Lilly Co Eli مركبات ازيتيدينيل أوكسي فينيل بيروليدين
EP3096749B1 (en) * 2014-01-24 2019-05-15 Celgene Corporation Methods for the treatment of obesity using apremilast
WO2016033776A1 (en) * 2014-09-04 2016-03-10 Eli Lilly And Company Crystalline (2s) -3- [ (3s, 4s) -3- [ (1r) -1-hydroxyethyl] -4- (4-methoxy-3- { [1- (5-methylpyridin-2-yl) azetidin-3-yl] oxy} phenyl) -3-methylpyrrolidin-1-yl] -3-oxopropane-1, 2-diol
AR101696A1 (es) 2014-09-12 2017-01-04 Lilly Co Eli Compuestos de azetidiniloxifenilpirrolidina
WO2017072796A1 (en) 2015-10-30 2017-05-04 Council Of Scientific & Industrial Research 2-pyridone based compounds useful as potential phosphodiesterase3a (pde3a)inhibitors and a process for the preparation thereof
JP6392297B2 (ja) * 2015-11-27 2018-09-19 田辺三菱製薬株式会社 医薬組成物
JP6986565B2 (ja) 2017-09-29 2021-12-22 田辺三菱製薬株式会社 光学活性ピロリジン化合物及びその製造方法
CN111333626B (zh) * 2018-12-18 2022-10-18 武汉人福创新药物研发中心有限公司 苯基吡咯烷类化合物及其用途
WO2021036953A1 (zh) * 2019-08-23 2021-03-04 湖北生物医药产业技术研究院有限公司 苯基吡咯烷类化合物
TWI877358B (zh) * 2020-04-29 2025-03-21 大陸商廣東東陽光藥業股份有限公司 取代的吡咯烷類化合物及其在藥物中的應用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5821622B2 (ja) * 1973-02-28 1983-05-02 ウェルファイド株式会社 ピロリジンメタノ−ル ノ セイゾウホウ
JPS50108258A (ru) * 1974-02-08 1975-08-26
US5665754A (en) * 1993-09-20 1997-09-09 Glaxo Wellcome Inc. Substituted pyrrolidines
JPH07300455A (ja) * 1994-03-08 1995-11-14 Mitsubishi Chem Corp ３−フェニルピロリジン誘導体
CA2143143A1 (en) * 1994-03-08 1995-09-09 Toshihiko Tanaka 3-phenylpyrrolidine derivatives
US5998428A (en) 1995-05-31 1999-12-07 Smithkline Beecham Corporation Compounds and methods for treating PDE IV-related diseases
US5856103A (en) * 1994-10-07 1999-01-05 Board Of Regents The University Of Texas Method for selectively ranking sequences for antisense targeting
DE19601938A1 (de) * 1996-01-12 1997-07-17 Schering Ag Neue Phosphodiesteraseinhibitoren
TR199902432T2 (xx) * 1997-04-04 2000-01-21 Prizer Products Inc. Nikotinamid t�revleri.
US6258833B1 (en) * 1999-12-23 2001-07-10 Icos Corporation Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2669938C2 (ru) * 2014-05-29 2018-10-17 Мицубиси Танабе Фарма Корпорейшн Новое пирролидиновое соединение и его применение в качестве агониста рецептора меланокортина

Also Published As

Publication number Publication date
ATE325108T1 (de) 2006-06-15
HK1051359A1 (zh) 2003-08-01
SK287964B6 (sk) 2012-07-03
NO20023008D0 (no) 2002-06-21
EP1242400B1 (en) 2006-05-03
US6458787B1 (en) 2002-10-01
PL355988A1 (en) 2004-05-31
US7176229B2 (en) 2007-02-13
AU778543B2 (en) 2004-12-09
BG106860A (bg) 2003-03-31
CZ20022188A3 (cs) 2003-03-12
EE200200351A (et) 2003-10-15
SK9172002A3 (en) 2002-11-06
YU48002A (sh) 2005-11-28
KR20020063600A (ko) 2002-08-03
CN1434813A (zh) 2003-08-06
RS50841B (sr) 2010-08-31
US6716871B2 (en) 2004-04-06
CA2395193C (en) 2008-06-17
HRP20020541A2 (en) 2004-08-31
US6998416B2 (en) 2006-02-14
IL150313A0 (en) 2002-12-01
BRPI0016693B1 (pt) 2015-09-01
EA200200590A1 (ru) 2002-12-26
EP1242400A1 (en) 2002-09-25
PL202227B1 (pl) 2009-06-30
EE05087B1 (et) 2008-10-15
IS6436A (is) 2002-06-19
HUP0301113A2 (hu) 2003-08-28
AU2426201A (en) 2001-07-09
US6258833B1 (en) 2001-07-10
BG65892B1 (bg) 2010-04-30
NO20023008L (no) 2002-08-20
JP4294903B2 (ja) 2009-07-15
UA73964C2 (ru) 2005-10-17
HUP0301113A3 (en) 2011-07-28
JP2003519135A (ja) 2003-06-17
GEP20043384B (en) 2004-05-10
US6423710B1 (en) 2002-07-23
CA2395193A1 (en) 2001-07-05
US20040152754A1 (en) 2004-08-05
WO2001047905A1 (en) 2001-07-05
BR0016693A (pt) 2003-03-11
HRP20020541B1 (en) 2008-06-30
DE60027769D1 (de) 2006-06-08
TR200400702T4 (tr) 2004-06-21
US20040023945A1 (en) 2004-02-05
ZA200205551B (en) 2003-07-11
US20060074123A1 (en) 2006-04-06
MXPA02006212A (es) 2004-02-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA005686B1 (ru) Производные пирролидина в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы, специфичной к циклическому амф
AU778795B2 (en) Pyrrolidines which inhibit cAMP-specific PDE
AU4137001A (en) Hydrazone and oxime derivatives of pyrrolidine as AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
AU769801B2 (en) Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
US6680336B2 (en) Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
US20020044963A1 (en) Cyclic AMP-specific phosphodiesterase inhibitors
AU2580901A (en) Cyclic amp-specific phosphodiesterase inhibitors
US6596738B1 (en) Heterocyclic compound, composition and method for inhibiting adenosine deaminase

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU