EA002120B1

EA002120B1 - Алатрофлоксациновые парентеральные составы

Info

Publication number: EA002120B1
Application number: EA200000086A
Authority: EA
Inventors: Роберт Марк Гвин; Джон Фрэнсис Ламберт; Сабраманян Сэм Гухан; Стэнли Вальтер Валински
Original assignee: Пфайзер Продактс Инк.
Priority date: 1997-08-01
Filing date: 1998-07-23
Publication date: 2001-12-24
Also published as: CA2296466A1; NO20000485D0; YU2500A; PT1000086E; HUP0004793A3; AP1031A; ES2214716T3; HRP980417A2; UY25113A1; CN1265671A; KR20010022495A; AU734863B2; GT199800112A; HUP0004793A2; HN1998000106A; ID24374A; PA8456701A1; CO4970688A1; NZ502249A; IS5339A

Abstract

Настоящее изобретение относится к мезилату алатрофлоксацина, по существу свободному от менее полярных примесей, к парентеральным составам мезилата алатрофлоксацина и способам очистки мезилата алатрофлоксацина.

Description

Настоящее изобретение относится к нафтиридонному антибиотику мезилату алатрофлоксацина, по существу свободному от менее полярных примесей, к парентеральным композициям указанного мезилата алатрофлоксацина и способам очистки мезилата алатрофлоксацина.

Мезилат алатрофлоксацина представляет собой мезилатную пролекарственную соль соответствующего нафтиридонного антибиотика тровафлоксацина. Мезилат алатрофлоксацина, полученный по способам, доступным в настоящее время, получают с очень высокой чистотой. Однако мезилат алатрофлоксацина, полученный этими современными способами, содержит мельчайшие менее полярные примеси, которые имеют тенденцию к осаждению из парентерального состава после стояния в течение неопределенного времени. Эти менее полярные примеси не могут быть удалены соответствующим образом обычными коммерческими способами, такими как перекристаллизация, стандартные хроматографические способы с применением тонких слоев силикагеля, способы экстракции растворитель/растворитель или обработка диатомовой землей. Настоящие изобретатели обнаружили, что примеси могут быть успешно удалены обработкой неочищенных продуктов реакции, например продукта, полученного любым из описанных в последнее время в литературе способов, полистирольной смолой.

Ранее было известно, что хинолоновый антибиотик сипрофлоксацин также содержит примеси, превращающие продукт в непригодный для парентерального состава. Европейский патент № 287926, опубликованный 26 октября 1988г., описывает очистку сипрофлоксацина обработкой диатомовой землей так, чтобы производить продукт, который является пригодным для парентерального состава. Как указано выше, обработка мезилата алатрофлоксацина диатомовой землей не удаляет в достаточной степени менее полярные примеси.

Антибактерицидная активность и синтез вышеупомянутого алатрофлоксацина описан в патентах США № 5164402 и 5229396, выданных 17 ноября 1992г. и 20 июля 1993г., соответственно, описания которых включены сюда в качестве ссылок. Предшествующие патенты предоставлены совместно с настоящей заявкой.

В публикации международной заявки ШО 97/00268, опубликованной 3 января 1997г., заявлен другой способ получения алатрофлоксацина. Данная заявка включена сюда в качестве ссылки.

В публикации международной заявки ШО 97/08191, опубликованной 6 марта 1997г., описан третий способ получения алатрофлоксацина и его полиморфных модификаций, описание которого включено сюда в качестве ссылки в полном объеме. Данная заявка предоставлена совместно с настоящей заявкой.

В публикации международной заявки ШО 95/19361, опубликованной 20 июля 1995г., заяв ке на патент США № 60/021 41 9, поданной 9 июля 1996г., и международной заявке на патент РСТ/ЕР96/04782, поданной 31 октября 1996г., заявлены новые промежуточные соединения для получения алатрофлоксацина и тровафлоксацина, описания которых включены сюда в качестве ссылок. Указанные заявки предоставлены совместно с настоящей заявкой.

В патенте США № 5475116, выданном 12 декабря 1995г., и патенте США № 5256791, выданном 26 октября 1993г., заявлены различные азабициклогексановые промежуточные соединения, применяемые в синтезах алатрофлоксацина и тровафлоксацина, описание которых включено сюда в качестве ссылок. Предшествующие патенты предоставлены совместно с настоящей заявкой.

Заявка на патент США № 08/764655, поданная 2 декабря 1996г. относится к способам лечения Не11еоЬае1ег ру1ог1 инфекций алатрофлоксацином и тровафлоксацином, описание которых включено здесь в качестве ссылки в полном объеме. Предшествующая заявка на патент предоставлена совместно с настоящей заявкой.

Международная заявка, номер публикации ШО 96/39406, опубликованная 12 декабря 1996г., относится к новой кристаллический форме ангидрида 7-([1а,5а,6а]-6-амино-3азабицикло [3,1,0] гекс-3 -ил)-6-фтор-1 -(2,4-дифторфенил)-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3карбоновой кислоты, соли метансульфоновой кислоты, способу применения указанного соединения в лечении бактериальной инфекции у млекопитающих, особенно у людей, и к фармацевтическим композициям, описания которых включены сюда в качестве ссылок. Предшествующие патенты и заявки предоставлены совместно с настоящей заявкой.

В международной заявке РСТ/1В 96/00756, поданной 29 июля 1996г., заявлены цвиттерионные формы тровафлоксацина, которые применяют для введения лекарства в виде суспензии, описание которых включено сюда в качестве ссылки в полном объеме. Предшествующая заявка на патент предоставлена совместно с настоящей заявкой.

Краткое изложение существа изобретения

Настоящее изобретение относится к способу очистки соединения формулы

Е

I включающему обработку неочищенного продукта реакции, содержащего количество ука3 занного соединения формулы I и менее полярные примеси, гидрофобной смолой. Указанные менее полярные примеси определяют по их временам удерживания в анализе высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) от момента впрыскивания образца в колонку хроматографа Не^1ей-Раскагб Мобе1 1100 8епез Н1§й Ргеззиге ЫдиМ Скгоша1одгарйег® при элюировании в качестве подвижной фазы раствором 40% ацетонитрила, 0,05М дигидрофосфата калия (КН₂РО₄) и 0,3% хлорной кислоты (об/об) при скорости потока приблизительно 2 мл в минуту на ВЭЖХ колонке РигезП® с 5 микронным С¹⁸ кремнеземом (4,6 х 150 мм) с 20 мкл объемом впрыскивания и используя детектор Не^1ей-Раскагб 1100 8епез Эюбе Аггау Эе1ес1ог®, установленный для записи при длине волны 270 нм.

ВЭЖХ колонку используют при температуре окружающей среды (20-25°С). Указанные менее полярные примеси, определенные при вышеуказанных условиях ВЭЖХ, имеют время удерживания от около 2,1 мин до около 30 мин. Одна из определенных нежелательных менее полярных примесей имеет время удерживания 9-12 мин при вышеуказанных условиях ВЭЖХ. Вышеуказанная примесь, имеющая время удерживания 9-12 мин, имеет формулу

(в дальнейшем также называемая олигомерная примесь). Предпочтительно, менее полярные примеси после обработки составляют менее чем 500 ч./млн., более предпочтительно менее чем 60 ч./млн. по отношению к весу неочищенного продукта. Наиболее предпочтительно, указанные примеси составляют менее чем 20 ч./млн. Предпочтительно, гидрофобная смола представляет собой поперечно-сшитую полистирольную смолу, такую как О1аюп НР-20® или АшЬегсЪгош СО-161®.

Настоящее изобретение также относится к соединению формулы

Е по существу свободному от менее полярных примесей, более предпочтительно по существу свободному от соединения формулы II.

Настоящее изобретение также относится к парентеральной композиции, включающей антибактериально эффективное количество соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, по существу свободного от менее полярных примесей, предпочтительно по существу свободного от соединения формулы II и фармацевтически приемлемый носитель. Предпочтительно, фармацевтически приемлемый носитель представляет собой воду.

Настоящее изобретение также относится к парентеральной композиции, как описано выше, в которой соединение формулы I представляет собой лиофилат.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, как описано выше, в которой соединение формулы I составляет примерно 10 мг до примерно 700 мг, предпочтительно, примерно 275 мг до примерно 500 мг соединения в контейнере с единичной дозой, наиболее предпочтительно, примерно 300 мг.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей антибактериально эффективное количество соединения формулы II или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения бактериальной инфекции, включающему введение субъекту, пораженному бактериальной инфекцией, антибактериально эффективного количества соединения формулы II.

р

III

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей антибактериально эффективное количество соединения формулы III или его фармацевтически приемлемой соли.

I

Настоящее изобретение также относится к способу лечения бактериальной инфекции, включающему введение субъекту, пораженному бактериальной инфекцией, антибактериально эффективного количества соединения формулы III.

Подробное описание изобретения

Алатрофлоксацин может быть получен тремя способами, которые описаны в опубликованных патентах или патентных публикациях. В частности, алатрофлоксацин может быть получен взаимодействием ВОС-(Е-А1а-Ь-А1а)-азабициклогексана с активированным хинолоном, как описано в патенте США № 5164402, выданном 17 ноября 1992г., и патенте США № 5229396, выданном 20 июля 1993г. Второй способ получения алатрофлоксацина включает реакцию ВОС-Ь-А1а-ЬА1а с защищенным азабициклогексаннафтиридинным кольцом, как описано в публикации международной заявки Ж') 97/00268, опубликованной 3 января 1997г. Наконец, третий способ получения алатрофлоксацина включает сочетание мезилата тровафлоксацина с ВОС-Ь-А1а-Ь-А1а, как описано в публикации международной заявки Ж') 97/08191, опубликованной 6 марта 1997г. Описания каждой из вышеупомянутых заявок включены сюда в качестве ссылок. Предшествующие заявки предоставлены совместно с настоящей заявкой.

Неочищенный алатрофлоксацин, полученный по любому из вышеупомянутых способов, содержит небольшие количества менее полярных примесей. Конкретный тип и количество примеси зависит от применяемого способа и условий. Неочищенные алатрофлоксациновые лекарственные продукты, полученные в соответствии с каждым из трех вышеупомянутых способов, имеют характерные хроматограммы ВЭЖХ, полученные при вышеуказанных условиях, которые изображены на фиг. 1-3 соответственно. В частности, фиг. 1 описывает хроматограмму мезилата алатрофлоксацина, полученного в соответствии со способами, описанными в ВгщЫу е! а1., патенте США № 5164402, выданном 17 ноября 1 992г., и патенте США № 5229396, выданном 20 июля 1 993г. Приблизительная концентрация примесей в этом оригинальном способе при нормировании на известную концентрацию олигомера представлены в табл. 1 ниже. Фиг. 2 описывает ВЭЖХ хроматограмму мезилата алатрофлоксацина, полученного в соответствии со способами, описанными в публикации международной заявки Ж') 97/00268, опубликованной 3 января 1997г. Приблизительная концентрация примесей, полученных в этом втором способе при нормировании на известную концентрацию олигомера, представлена в табл. 2 ниже. Фиг. 3 описывает ВЭЖХ хроматограмму мезилата алатрофлоксацина, полученного в соответствии со способами, описанными в публикации международной заявки Ж') 97/08191, опубликованной 6 марта 1 997г. Приблизительная концентрация примесей, полученных в соответствии с этим третьим способом при нормировании на известную концентрацию олигомера, представлены в табл. 2, ниже. Как указано выше, указанные менее полярные примеси определяют по их времени удерживания от момента впрыскивания образца в колонку хроматографа НеЖеК-Раскагй Мойе1 1100 Зепез Нщй Ргеззиге Ыдшй

Сйгоша1о§гарйег® при элюировании в качестве подвижной фазы раствором 40% ацетонитрила, 0,05М дигидрофосфата калия (КН₂РО₄) и 0,3% хлорной кислоты (об./об.) при скорости потока приблизительно 2 мл в минуту на колонке Риге811® с 5 микронным С¹⁸ кремнеземом (4,6 х 150 мм) с 20 мл объемом впрыскивания и используя детектор НеЖеИ-Раскагй 1100 Зепез Эюйе Аггау Эе1ес!ог®, установленный для записи при длине волны 270 нм. Указанные менее полярные примеси, определенные в вышеуказанных условиях, имеют время удерживания от около 2,2 мин до около 30 мин. Одна из определенных нежелательных примесей имеет время удерживания 9-12 мин (приблизительно 10,5 мин) при вышеуказанных условиях. Вышеуказанная примесь, имеющая время удерживания 9-12 мин, имеет формулу

Е

II

Эта примесь составляет примерно 700 ч./млн. в продукте реакции, полученном этим третьим способом, описанным выше.

Абсолютное количество примеси зависит от применяемого способа и условий. После очистки эта примесь составляет менее чем примерно 100 ч./млн. в продукте реакции, предпочтительно менее чем 50 ч./млн., наиболее предпочтительно менее чем примерно 20 ч./млн.

Другие примеси имеют время удерживания около 23,0, 20,1, 13,6, 11,7, 11,0, 10,9, 9,8, 8,4, 7,6, 7,1, 6,2, 5,5, 5,0, 4,8, 3,9, 3,6, 3,1, 2,8, 2,5 и 2,1 мин при условиях, описанных выше. Соединения, соответствующие этим временам удерживания, до сих пор не охарактеризованы вследствие их низкой в ч./млн. концентрации.

Эти примеси могут быть удалены хроматографией с использованием смол при элюировании полярным растворителем. В частности, продукт реакции растворяют в небольшом количестве воды. Растворенный неочищенный продукт реакции затем добавляют в колонку, наполненную полистирольной смолой, такой как гидратированная полистирольная смола АшЬегсйгош СС-161® (Тозойааз Сйеш1са18 156 Кеуз!опе Эпуе, Моп!дошегууШе, РА 18936), АшЬегШе® ХАО-4 или ХАО-16 (Койш и Нааз) или О1аюп НР-20® (МИзиЫзЫ Сйеш1са1 Со.), предпочтительно гидратированная полистирольная смола АтЬсгсйгот СО-161®. Полистирольные смолы представляют собой гидрофобные макропористые полимерные шарики на основе стирола, которые обеспечивают неполярные ароматические поверхности для адсорбции. Обычные специалисты в данной области техники понимают, что неионные полимерные смолы имеются с различными размерами шариков, размерами пор и площадями поверхности, которые влияют на условия разделения. Обычный специалист в данной области техники также понимает, что параметры смол можно варьировать для оптимизации результатов для конкретного применения. Весовое отношение неочищенного продукта реакции (килограмм) к весу сухой смолы (килограмм) равно от примерно 8 до примерно 15 кг неочищенного продукта реакции к примерно одному килограмму сухой смолы. Предпочтительно, отношение веса неочищенного продукта реакции к весу смолы равно приблизительно 10-12 кг неочищенного продукта реакции на килограмм сухой смолы. Отношение объема элюанта (литры) к весу неочищенного лекарственного вещества (килограмм) изменяется от примерно 1 до примерно 70 л растворителя на килограмм неочищенного лекарственного вещества, предпочтительно от 10 до 40 л воды на килограмм лекарственного вещества при температуре окружающей среды. Наиболее предпочтительно, примерно 25 л воды на килограмм лекарственного вещества при температуре окружающей среды вымывают чистый продукт. Скорость потока элюанта через колонку находится в пределах 1-10 объемов слоя в час (т.е. количество элюанта, требуемое для заполнения и опустошения слоя смолы за один час). Предпочтительно, скорость потока раствора элюанта равна 3-5 объемов слоя в час.

Продукт, полученный в соответствии со способами, описанными выше, является по существу свободным от менее полярных примесей и пригоден для использования в качестве парентерального состава. Очищенный мезилат алатрофлоксацина, в котором исходные вещества представляют собой неочищенные алатрофлоксациновые лекарственные продукты, полученные в соответствии с вышеуказанными тремя способами, имеют хроматограммы ВЭЖХ при записи в соответствии с вышеуказанными условиями, которые изображены на фиг. 4-6, соответственно. В частности, фиг. 4 описывает хроматограмму очищенного мезилата алатрофлоксацина после обработки смолой, полученного обработкой неочищенного мезилата алатрофлоксацина, который получают в соответствии со способами, описанными в ВпдНу с! а1., патенте США № 5164402, выданном 17 ноября 1992г., и патенте США № 5229396, выданном 20 июля 1993г. Приблизительная концентрация примесей после очистки при нормировании на известное количество олигомера представлены в табл. 1, ниже. Фиг. 5 описывает хроматограмму ВЭЖХ очищенного мезилата алатрофлоксацина, полученного обработкой неочищенного мезилата алатрофлоксацина, который получают в соответствии со способами, описанными в публикации международной заявки \<О 97/00268, опубликованной 3 января 1997г. Приблизительная концентрация примесей после очистки при нормировании на известное количество олигомера, представлена в табл. 2 ниже. Фиг. 6 описывает хроматограмму ВЭЖХ очищенного мезилата алатрофлоксацина, полученного обработкой неочищенного мезилата алатрофлоксацина, который получают в соответствии со способами, описанными в публикации международной заявки \<О 97/08191, опубликованной 6 марта 1997г. Приблизительная концентрация примесей после очистки при нормировании на известное количество олигомера, представлена в табл. 3, ниже.

Таблица1

Время удерживания, мин	Концентрация до обработки смолой, ч./млн.	Концентрация после обработки смолой, ч./млн
2,1	214	1
2,5	250	5
3,1	197
3,6	94
3,9	34
4,8	16
5,0	17
5,5	17
6,2	83
7,6	27
9,8	30
10,5	8
10,9	10
20,1	211
23,0	29

Таблица 2

Время удерживания, мин	Концентрация до обработки смолой, ч./млн.	Концентрация после обработки смолой, ч./млн.
2,1	382
2,5	234
3,1	77	2
5,5	7
6,2	55
7,1	10
7,6	118
8,4	4
9,8	76
11,7	5
13,6	5
20,1	49

Таблица 3

Время удерживания, мин	Концентрация до обработки смолой, ч./млн.	Концентрация после обработки смолой, ч./млн.
2,1	28
2,5	8
2, 8	5
3,1	38	5
5,0	5
5,5	124	13
8,4	8
6,2	22
10,5	700	1
11,0	97
20,1	22

На парентеральные составы следовые загрязнения влияют больше, чем на другие фармацевтические составы. Это так, потому что парентеральные составы, разбавленные или пересоставленные, представляют собой жидкие дозовые формы, качественные стандарты которых являются очевидными при визуальном осмотре. Визуальный осмотр парентеральных составов может определять менее полярные примеси такие уже при концентрации 10 ч./млн. Присутствие видимых примесей влияет на доверие общественности к безопасности, стабильности и применению продукта. Поэтому важно удалить как можно больше менее полярных примесей из парентеральных составов, т. к. менее полярные примеси обычно менее растворимы в воде и, более вероятно, осаждаются из рецептур. Кроме того, большинство индустриальных наций требуют, чтобы парентеральные составы, представленные на одобрение лекарства отвечали минимальному стандарту по чистоте и отсутствию загрязнения в виде частиц. Минимальный стандарт в Соединенных Штатах устанавливает, чтобы парентеральный состав «был свободным от частиц, которые можно наблюдать при визуальном осмотре». иш1е4 81а1е§ Рйагшаеоре1а, В-246 (1994). Фармакопея Соединенных Штатов (И8Р) не предусматривает технических условий на минимальное количество вещества в виде частиц, т.е. примесей, которое удовлетворяло бы этому стандарту. И8Р предусматривает несколько испытаний для подсчета видимых посторонних частиц, которые полезны для оценки количества вещества в виде частиц. Однако ни одно из этих испытаний не достаточно для удовлетворения стандарта, в соответствии с которым состав должен быть «по существу свободным от частиц, которые можно наблюдать при визуальном осмотре». Хотя ни одно из испытаний не принимают в качестве сертифицирующего чистоту состава, анализ мутности представляет собой одно из обычно используемых измерений для количественной оценки присутствия вещества в виде частиц, см. \ν.1. Ра881 е! а1., Лиа1у81, 105, 512-515 (1980). В соответствии со стандартом измерения мутности, величина 0-0,45 нефелометрических единиц мутности (ΝΤυ) принята для раствора, свободного от вещества в виде частиц. Вещество настоящего изобретения, когда его анализируют обычным прибором для измерения мутности НеШде ТигЫ41ше1ег (НеШде, 1пс. 877 81е\\аг1 Луеиие, Сагйеи Сйу, Νον Уогк 11530) обычно дает величины мутности такие малые, как 0,3 ΝΤυ. Неочищенное исходное вещество, полученное в соответствии со способом, описанным в международной заявке νθ 97/08191, дает величины мутности такие высокие, как примерно 1 ΝΤυ. Фиг. 7 показывает зависимость мутности как функции концентрации примеси (ч./млн. олигомера по отношению к неочищенному веществу). Способ настоящего изобретения вклю чает все составы, имеющие величину мутности меньше, чем 0,5 ΝΤυ.

Продукт, очищенный таким образом, может быть введен в состав рецептуры для парентерального введения (например, внутривенного, внутримышечного или подкожного) млекопитающим, включая людей, для лечения бактериальной инфекции способами, хорошо известными для обычных специалистов в данной области техники, или способами, описанными ниже. Вообще, соединение формулы I вводят дозами между от примерно 0,5 до примерно 16 мг/кг/день, предпочтительно примерно 4-7 мг/кг/день, наиболее предпочтительно примерно 4,5 мг/кг/день. Однако некоторое изменение в дозе по необходимости происходит в зависимости от состояния лечащегося субъекта. Лицо, ответственное за введение, в любом случае определяет соответствующую дозу для индивидуального субъекта.

Мезилат алатрофлоксацина настоящего изобретения может быть введен в виде широкого ряда различных дозовых форм, вообще терапевтически эффективные соединения этого изобретения присутствуют в таких дозовых формах при уровнях концентрации в интервале от примерно 0,5 до 70% (100% для лиофилата) по весу. Для парентерального введения (внутримышечного, внутрибрюшинного, подкожного или внутривенного введения) обычно получают стерильный апирогенный раствор для инъекций активного ингредиента. Растворы соединения формулы I, по существу свободные от менее полярных примесей, предпочтительно, соединения формулы II, могут быть получены в растворителе, таком как кунжутное масло, арахисовое масло, вода или водный пропиленгликоль. Предпочтительно, раствор представляет собой незабуференную воду. Водные растворы могут также быть соответствующим образом доведены до определенного рН и забуферены, если необходимо, и жидкий разбавитель, в первую очередь, может быть обращен в изотонический. Эти водные растворы являются пригодными для внутривенных инъекций. Масляные растворы являются пригодными для внутрисуставных, внутримышечных и подкожных инъекций. Получение всех таких растворов в стерильных условиях легко выполняют стандартными фармацевтическими способами, хорошо известными для специалистов в данной области техники. В случае животных соединения могут быть введены внутримышечно или подкожно с уровнями дозы примерно от 0,1 до 20 мг/кг/день, предпочтительно примерно от 0,2 до примерно 10 мг/кг/день в виде разовой дозы или вплоть до 3 раздельных доз.

Соединение формулы II, когда его гидролизуют 1и уйго для удаления Ь-Л1а-Ь-Л1а дипептидной группы, также обладает антибактериальной активностью. Такое прогидролизованное соединение имеет формулу

III

Антибактериальная активность соединения формулы III может быть определена в соответствии со способами, хорошо известными для обычных специалистов в данной области техники, такими как описано в Е. 81еегз е! а1., АпЕЫо11С8 апб СБешоФегару, 9, 307 (1959). Соединения формулы III, когда их испытывают в соответствии со способом, описанным выше, дает минимальную ингибирующую концентрацию (МГС) 6,25 мкг/мл против 81гер1ососси8 руодепез и 12,5-25 мкг/мл против ряда штаммов 81арБу1ососсиз аигеиз.

Соединение формулы III соответствующим способом может быть включено в состав рецептуры с применением одного или более фармацевтически приемлемых носителей. Таким образом, соединение формулы III может быть включено в рецептуру для перорального, трансбуккального или ректального введения.

Для перорального введения фармацевтические композиции соединения формулы III могут принимать форму, например, таблеток или капсул, полученных соответствующими способами, с фармацевтически приемлемыми наполнителями, такими как связующие агенты (например, предварительно желатинизированный кукурузный крахмал, поливинилпирролидон или гидроксипропилметилцеллюлоза);

наполнителями (например, лактозой, микрокристаллической целлюлозой или фосфатом кальция); смазывающими агентами (например, стеаратом магния, тальком или кремнеземом);

разрыхлителями (например, картофельным крахмалом или гликолятом натрийкрахмала);

или смачивающими агентами (например, лаурилсульфатом натрия). Таблетки могут быть покрыты способами, хорошо известными в технике. Жидкие композиции для перорального введения могут принимать форму, например, растворов, сиропов или суспензий, или они могут быть представлены в виде сухого продукта для составления с водой или другим пригодным растворителем перед применением. Такие жидкие композиции могут быть получены соответствующими способами с фармацевтически приемлемыми добавками, такими как суспендирующие агенты (например, сироп сорбита, метилцеллюлоза или гидрогенированные пищевые жиры); эмульгирующие агенты (например, лецитин или аравийская камедь); неводные носители (например, миндальное масло, маслянистые сложные эфиры или этиловый спирт); и консерванты (например, метил- или пропил-ргидроксибензоаты или сорбиновая кислота).

Для трансбуккального введения композиция соединения формулы III, введенного в состав рецептуры соответствующим способом, может принимать форму таблеток или лепешек.

Соединение формулы III может также быть введено в состав рецептуры в виде ректальных составов, таких как суппозитории или удерживаемые клизмы, например, содержащие соответствующие основы для суппозиториев, такие как масло какао или другие глицериды.

Предлагаемая доза соединения формулы III для перорального, ректального или трансбуккального введения человеку среднего возраста для лечения бактериальной инфекции равна между примерно от 0,1 до примерно 500 мг/кг/день, предпочтительно от примерно 0,5 до примерно 50 мг/кг/день активного ингредиента на единичную дозу, которая может вводиться, например, 1 до 4 раз в день.

Следующие примеры иллюстрируют получение соединения и композиций настоящего изобретения. Точки плавления не скорректированы. ЯМР данные приводят в частях на миллион (5) и относят к синхронизированному сигналу дейтерия образца растворителя (дейтерийдиметилсульфоксид, за исключением особо оговоренных случаев). Коммерческие реагенты используют без дальнейшей очистки. ΌΜΤ обозначает Ν,Ν-диметилформамид. Хроматография представляет собой высокоэффективную жидкостную хроматографию на Нем1еИ-Раскагб Мобе1 1100 8епез ШдБ Ргеззиге Ыдшб СБгоша1о8гарйег® при элюировании в качестве подвижной фазы раствором 40% ацетонитрила, 0,05М дигидрофосфата калия (КН₂РО₄) и 0,3% хлорной кислоты (об/об) при скорости потока приблизительно 2 мл в минуту на колонке ВЭЖХ РигезП® с 5 микронным С¹⁸ кремнеземом (4,6 х 150 мм) с 20 мл объемом впрыскивания и используя детектор Раскагб 1100 8епез Эюбе Аггау Эе1ес1ог®, установленный для записи при длине волны 270 нм. ВЭЖХ колонку используют при температуре окружающей среды. Комнатная или температура окружающей среды составляет 20-25°С. Все неводные реакции проводят в атмосфере азота для удобства и максимизации выходов. Концентрирование при пониженном давлении означает, что применяют роторный испаритель.

Пример 1. Периодическая обработка мезилата алатрофлоксацина смолой.

Мезилат алатрофлоксацина (50 г), содержащий приблизительно 700 ч./млн. примеси олигомера в дополнение к другим менее полярным примесям, растворяют в 0,05% водной метансульфоновой кислоте (714 мл) и затем добавляют гидрофобную смолу МБзиЫзЫ'з Э1аюп НР-20^® (50 г). После перемешивания суспензии смолы в течение 24 ч в темноте, суспензию фильтруют и раствор анализируют с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ условия описаны выше. Отфильтрованный раствор содержит 19

ч./млн. примеси олигомера с 80% выходом, после выделения мезилата алатрофлоксацина.

Олигомер имеет следующий ЯМР (¹ЯМР ДМСО-а₆) δ: 9,98 (д, 1Н), 8,79 (с, 1Н), 8,51 (с, 1Н), 8,45 (д, 1Н), 8,16 (д, 1Н), 8,03 (д, 1Н), 7,92 (д, 1Н), 7,76 (м, 2Н), 7,61 (м, 2Н), 7,33 (м, 2Н), 4,81 (кв, 1Н), 3,77 (кв, 1Н), 3,60 (м, 8Н), 2,54 (с, 1Н), 2,34 (с, 1Н), 2,27 (с, 3Н), 1,92 (ушир.с., 2Н), 1,72 (ушир.с.), 1,28 (д, 3Н), 1,17 (д, 3Н).

Пример 2. Обработка мезилата алатрофлоксацина смолой в колонке.

Мезилат алатрофлоксацина растворяют в от 10 до 40 л воды на килограмм лекарственного вещества при температуре окружающей среды. Раствор фильтруют и затем пропускают через (3-5 объемов слоя в час) колонку, содержащую гидратированную полистирольную смолу АтЬетсйтот СО-161® (приблизительно 10-12 кг неочищенного продукта реакции на килограмм сухой смолы). Колонку промывают водой (3 л/кг неочищенного продукта реакции) и затем элюант и промывку объединяют. Обработанный раствор мезилата алатрофлоксацина анализируют ВЭЖХ. Обработка в колонке с полистирольной смолой уменьшает количество примеси соединения формулы II от 500 ч./млн. до менее, чем 30 ч./млн. в расчете на количество лекарственного вещества. Далее лекарственное вещество выделяют с 95% выходом из смолы.

Пример 3. Выделение цвиттериона.

Раствор, содержащий обработанный смолой мезилат алатрофлоксацина (10 г) (полученный в примерах 1 или 2), деионизованную воду (154 мл) и этанол (31 мл) нейтрализуют до рН примерно 6,5-7,5 добавлением по каплям 10% водного каустика.

Суспензию перемешивают в течение 30 мин при 24°С и затем фильтруют. После фильтрации твердые вещества промывают этанолом (30 мл), цвиттерион сушат в вакууме при 40°С в течение приблизительно 16 ч. Алатрофлоксацин (800 г) выделяют с 95% выходом в виде белых трапециевидных кристаллов.

Пример 4. Получение мезилата алатрофлоксацина.

Цвиттерион алатрофлоксацина (25 г мокрая лепешка) в виде либо мокрой лепешки, либо сухого продукта объединяют с 10% водным этанолом (242 мл) и затем метансульфоновую кислоту добавляют к суспензии для доведения рН до примерно 3,5-4,5. Реакционную смесь затем нагревают в колбе с обратным холодильником, фильтруют и затем концентрируют при атмосферном давлении до приблизительно половины ее начального объема. Раствор затем охлаждают до 0-5°С и полученные твердые вещества измельчают в течение 1 ч. После того, как твердые вещества отфильтровывают и промывают этанолом (39 мл), мезилат алатрофлок сацина сушат в течение 24 ч при 40°С. Мезилат алатрофлоксацина (17,7 г), пригодный для парентеральной композиции, выделяют с 90% выходом.

Пример 5. Парентеральная композиция в пузырьках.

Мезилат алатрофлоксацина (314,46 мг, полученный в соответствии с примером 4) растворяют в минимальном количестве воды для инъекций, фармакопея Соединенных Штатов (ΑΕΊ). рН полученного раствора доводят до 4 1% вес/вес раствором хлористо-водородной кислоты, национальный фармакологический справочник (ΝΕ), в воде для инъекций и/или 1% вес/вес раствором гидроксида натрия, национальный фармакологический справочник, в воде для инъекций и разбавляют до концентрации 7,86 мг/мл. Полученный раствор (40,12 г) фильтруют и наливают в 40 мл пузырек и закупоривают. Закупоренный пузырек стерилизуют в автоклаве при 115°С в течение 15 мин.

Пример 6. Парентеральная композиция в ампулах.

Мезилат алатрофлоксацина (314,4 мг, полученный в соответствии с примером 4) растворяют в минимальном количестве воды для инъекций, фармакопея Соединенных Штатов (ΑΕΙ). рН полученного раствора доводят до 4 1% вес/вес раствором хлористо-водородной кислоты, национальный фармакологический справочник (ΝΕ), в воде для инъекций и/или 1% вес/вес раствором гидроксида натрия, национальный фармакологический справочник, в воде для инъекций и разбавляют до концентрации 7,86 мг/мл. Полученный раствор (40,12 г) фильтруют и наливают в 40 мл ампулу и запаивают. Запаянную ампулу стерилизуют в автоклаве при 115°С в течение 15 мин.

Пример 7. Лиофил.

Мезилат алотрофлоксацина (314,4 мг, полученный в соответствии с примером 4) и лактозу (500 мг, национальный фармакологический справочник) растворяют в достаточном количестве воды для инъекций, фармакопея Соединенных Штатов, с получением конечного веса 10000 мг. Полученный раствор фильтруют и наливают в 20 мл пузырек. Наполненный пузырек лиофилизуют в течение 24 ч в вакууме 0,1 атм, в процессе чего пузырек закупоривают и запаивают. Запаянный пузырек стерилизуют в автоклаве при 115°С в течение 15 мин.

Пример 8. Изотоническая парентеральная композиция в пузырьках.

Декстрозу (500 мг, фармакопея Соединенных Штатов) и мезилат алатрофлоксацина (314,46 мг, полученный в соответствии с примером 4) растворяют в минимальном количестве воды для инъекций (фармакопея Соединенных Штатов) и рН доводят до 4 1% вес/вес раствором хлористоводородной кислоты (национальный фармакологический справочник) в воде для инъекций и/или 1% вес/вес раствором гидроксида натрия в воде для инъекций (фармакопея Соединенных Штатов) и разбавляют до концентрации 3,14 мг/мл. Полученный раствор (101,7 г) фильтруют и наливают в 100 мл пузырек и закупоривают. Закупоренный пузырек стерилизуют в автоклаве при 115°С в течение 15 мин.

Пример 9. Изотоническая парентеральная композиция в ампулах.

Декстрозу (500 мг, фармакопея Соединенных Штатов) и мезилат алатрофлоксацина (314,4 мг, полученный в соответствии с примером 4) растворяют в минимальном количестве воды для инъекций (фармакопея Соединенных Штатов) и рН доводят до 4 1% вес/вес раствором хлористоводородной кислоты (национальный фармакологический справочник) в воде для инъекций и/или 1% вес/вес раствором гидроксида натрия в воде для инъекций (фармакопея Соединенных Штатов) и разбавляют до концентрации 3,14 мг/мл. Полученный раствор (101,7 г) фильтруют и наливают в 100 мл ампулу и запаивают. Запаянную ампулу стерилизуют в автоклаве при 115°С в течение 15 мин.

Пример 10. Ь-аланил-Ы-[3[6-[[[3-[6-карбокси-8-(2,4-дифторфенил)-3-фтор-5,8-дигидро-5оксо-1,8-нафтиридин-2-ил] -3 -азабицикло [3,1,0] гекс-6-ил]амино]карбонил]-8-(2,4-дифторфенил)-3-фтор-5,8-дигидро-5-оксо-1,8-нафтиридин-2 -ил]-3 -азабицикло- [3,1,0] гекс-6 -ил] -Ьаланинамида метансульфонат.

250 мл одногорлую круглодонную колбу оборудуют обратным холодильником и магнитной мешалкой. Колбу продувают и затем сохраняют в атмосфере сухого азота. (1α,5α,6α)-7-(6амино-3 -азабицик-ло [3,1,0]гекс-3 -ил)-1 -(2,4дифторфенил)-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8нафтиридин-3-карбоно-вой кислоты этиловый эфир (2,50 г, 5,62 ммоль) (полученный в соответствии со способом, описанным в публикации международной заявки XV О 97/00268);

(1 α,5 α,6α)-Ν-[(1,1 -диметил-этокси)карбонил]Ь-аланил-Ы-[3-[8-(2,4-дифтор-фенил)-6-карбокси-3-фтор-5,8-дигидро-5-оксо-1,8-нафтиридин2-ил]-3 -азабицикло-[3,1,0]гекс-6-ил] -Ь-аланинамид (3,37 г, 5,11 ммоль) (полученный в соответствии со способом, описанным в публикации международной заявки νθ 97/08191), и 100 мл метиленхлорида добавляют в колбу с получением белой суспензии. После добавления в реакционную смесь 4-диметиламинопиридина (0,37 г, 3,07 ммоль) и бром-трис-пирролидинофосфонийгексафторфосфата (2,86 г, 6,14 ммоль), 1,8 мл диизопропилэтиламина (10,2 ммоль) медленно добавляют в течение 30 мин. Реакционную смесь перемешивают при 25-30°С в течение ночи, и затем тонкослойная хроматография [Мегск К|С5с1дс1 60 Р₂₅₄ кремнеземные пластинки (5 х 10 см) с применением гидроксид аммония/метанол/метиленхлорид (1:10:90) элюанта] показывает, что реакция завершилась. Густую суспензию фильтруют, лепешку на фильтре промывают метиленхлоридом (2 х 20 мл) и затем сушат в вакууме при 25-30°С с получением 4,63 г (83% выход) дизащищенного промежуточного соединения, предшественника соединения формулы II.

^!ЯМР (СОС1₃): δ 8,58 (с, 1Н), 8,35 (с, 1Н), 8,02 (д, 1=12,7 Гц, 1Н), 7,96 (д, 1=12,5 Гц, 1Н), 7,33 (м, 2Н), 7,05 (м, 6Н), 6,70 (м, 1Н), 5,24 (м, 1Н), 4,39 (кв, 1=7,26 Гц, 1Н), 4,33 (кв, 1=7,26 Гц, 2Н), 4,03 (кв, 1=1,7 Гц, 1Н), 3,87 (м, 4Н), 3,55 (м, 4Н), 2,66 (с, 1Н), 2,40 (с, 1Н), 1,87 (м, 4Н), 1,41 (с, 9Н), 1,35 (м, 9Н). РЛБМ8: т/ζ 1086 (МН⁺) .

Метансульфоновую кислоту (1,4 мл) и воду (3,1 мл) добавляют к дизащищенному промежуточному соединению (4,63 г, 4,28 ммоль), суспендированному в 135 мл 1-метил-2пирролидона. Получают раствор после нагревания реакционной смеси в течение 15 мин при 80-85°С, и реакция по существу завершается после нагревания в течение дополнительных 4858 ч при 80-85°С. Раствор затем охлаждают до комнатной температуры и медленно добавляют 270 мл метиленхлорида. Полученную суспензию перемешивают в течение 2 дней при комнатной температуре и затем фильтруют. Твердое вещество сушат при пониженном давлении с получением 4,0 г неочищенного продукта. Гранулированное твердое вещество измельчают в ступке пестиком и затем получают суспензию с 160 мл метиленхлорида. После перемешивания суспензии в течение 24 ч при комнатной температуре твердое вещество отфильтровывают и сушат на воздухе с получением соединения формулы II в виде мезилатной соли (3,2 г, 75% выход).

^!ЯМР (ДМСО-бв): δ 9,98 (д, 1Н), 8,79 (с, 1Н), 8,51 (с, 1Н), 8,45 (д, 1Н), 8,6 (д, 1Н), 8,03 (д, 1=12, 6 Гц, 1Н), 7,92 (д, 1=12,9 Гц, 1Н), 7,76 (м, 2Н), 7,61 (м, 2Н), 7,33 (м, 2Н), 4,18 (кв, 1=6,85 Гц, 1Н), 3,77 (кв, 1=7,06 Гц, 1Н), 3,60 (м, 8Н), 2,54 (с, 1Н), 2,34 (с, 1Н), 2,27 (с, 3Н), 1,92 (с, 2Н), 1,72 (с, 2Н), 1,28 (д, 1=6,85 Гц, 3Н), 1,17 (д, 1=7,06 Гц, 3Н); РЛБМ8: т/ζ 957 (М^-СН38О3Н).

Пример 11. (1α,5α,6α)-7-(6-[7-(6-амино-3азабицикло[3,1,0]гекс-3-ил)-1-(2,4-дифторфенил)-6-фтор -4 -оксо -1,4 -дигидро -1,8 -нафтиридин-3 -карбоксамидо]-(1 α,5 α,6α)-3 -азабицикло [3,1,0]гекс-3-ил)-1-(2,4-дифторфенил)-6-фтор-4оксо-1,4-дигидро-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты, метансульфонат.

В 20 мл круглодонную колбу, оборудованную обратным холодильником, магнитной мешалкой и входным отверстием для азота добавляют (1α,5α,6α)-1-(2,4-дифторфенил)-7-[6[[(1,1 -диметилэтокси)карбонил] амино]-3 -азабицикло [3,1,0]гекс-3 -ил)-6-фтор-1,4-дигидро-4оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоновую кислоту (232 мг, 0,45 ммоль) (полученную в соответствии со способом, описанным в патенте США № 5164402), триэтиламин (1,14 г, 11,3 ммоль), 2,0 мл 50% вес/вес раствора циклического ан гидрида 1-пропанфосфоновой кислоты (1,43 г, 4,50 ммоль) в этилацетате и 10 мл тетрагидрофурана (ТНТ). Полученную светло-желтую суспензию сохраняют в атмосфере инертного азота. В отдельной колбе, оборудованной магнитной мешалкой и капельной воронкой с уравновешенным давлением, получают суспензию (1а,5а,6а)-7-(6-[7-(6-амино-3-азабицикло[3,1,0] гекс-3 -ил)-1 -(2,4-дифторфенил)-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8 -нафтиридин-3 -карбонильной кислоты этилового эфира (200 мг, 0,45 ммоля) (полученного в соответствии со способом, описанным в публикации международной заявки Ж) 97/08191) в 5 мл ТНТ. Желтую суспензию, содержащую триэтиламин, выливают в капельную воронку и затем медленно добавляют в течение 20 мин в колбу, содержащую (1α,5α,6α)7-(6-[7-(6-амино-3 -азабицикло [3,1,0] гекс-3 -ил)1-(2,4-дифторфенил)-6-фтор-1,4-дигидро-4оксо-1, 8 -нафтиридин-3 -карбонильной кислоты этиловый эфир. Смесь перемешивают в течение 6 ч при комнатной температуре, когда тонкослойная хроматография [Мегск К1е§е1§е1 60 Е₂₅₄кремнеземные пластинки (5 х 10 см) с применением смеси метанол/метиленхлорид (1:9) элюанта] показывает, что реакция завершилась. Желтую суспензию выливают в 70 мл воды и рН доводят до 3,0 2н хлористо-водородной кислотой. Водный раствор экстрагируют 70 мл метиленхлорида и затем метиленхлоридный раствор промывают водой (70 мл). Метиленхлорид удаляют при пониженном давлении с получением неочищенного твердого вещества (449 мг), которое растирают с 6 мл этанола в течение 6 ч. Суспензию фильтруют, твердое вещество промывают 2 мл этанола и затем сушат в вакууме в течение 18 ч при 45°С с получением 304 мг (72% выход) дизащищенного промежуточного соединения для соединения формулы III в виде белого кристаллического твердого вещества. Т.пл. 248-251°С.

¹ЯМР (СИС1³): δ 10,0 (д, 2Н), 8,60 (с, 1Н), 8,35 (с, 1Н), 8,05 (д, 1Н), 7,96 (д, 1Н), 7,33 (м, 2Н), 7,05 (м, 4Н), 4,70 (м, 1Н), 4,36 (кв, 2Н), 3,92 (м, 3Н), 3,05 (м, 3Н), 2,68 (с, 1Н), 2,23 (с, 1Н), 1,86 (м, 2Н), 1,77 (м, 2Н), 1,59 (с, 9Н), 1,38 (т, 3Н). ЕАВМ8: т/ζ 943 (М⁺).

Метансульфоновую кислоту (1,4 мл) и воду (3,1 мл) добавляют к дизамещенному промежуточному соединению (240 мг, 0,25 ммоль), суспендированному в 7 мл 1-метил-2-пирролидона. Реакционную смесь нагревают в течение 50-58 ч при 80-85°С. Раствор затем охлаждают до комнатной температуры и медленно добавляют 14 мл метиленхлорида. Полученную суспензию перемешивают в течение 2 дней при комнатной температуре и затем фильтруют. Твердое вещество сушат при пониженном давлении с получением 110 мг неочищенного продукта. Неочищенное твердое вещество растирают с 3 мл метиленхлорида/метанола (1:1) в те чение 4 ч и затем фильтруют. Твердое вещество сушат в вакууме при 45°С с получением соединения формулы III в виде его мезилатной соли (105 мг, 45% выход). Температура плавления больше, чем 230°С. ^ХЯМР, записанный в трифторуксусной кислоте, показывает отсутствие ВОС и этилэфирных защитных групп, и он соответствует структуре соединения формулы III; РАВМ8: т/ζ 815 (М^-СН38О3Н).

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ очистки соединения формулы

Е

I включающий обработку неочищенного продукта реакции, который содержит количество указанного соединения формулы I и менее полярные примеси, гидрофобной смолой.
2. Способ по п.1, в котором указанные менее полярные примеси имеют время удерживания примерно от 2,1 до 30 мин.
3. Способ по п.1, в котором одна из указанных менее полярных примесей имеет время удерживания от 9 до 12 мин.
4. Способ по п.1, в котором одна из указанных менее полярных примесей имеет формулу
5. Способ по п.1, в котором указанные примеси после обработки составляют меньше чем примерно 60 ч./млн. от общего веса очищенного продукта.
6. Способ по п.1, в котором указанные примеси после обработки составляют меньше, чем примерно 20 ч./млн. от общего веса очищенного продукта.
7. Способ по п.1, в котором указанная гидрофобная смола представляет собой поперечносшитую полистирольную смолу.
8. Способ по п.1, в котором указанная гидрофобная смола представляет собой Όίαίοπ НР20® или АтЬегсЪгот СС-161®.
9. Способ по п.3, в котором указанная гидрофобная смола представляет собой Όίαίοπ НР20® или АтЬегсЪгот СС-161®.
10. Соединение формулы по существу свободное от менее полярных примесей.
11. Соединение по п.10, в котором указанное соединение формулы I является по существу свободным от соединения формулы II.
12. Парентеральная композиция, включающая антибактериально эффективное количество соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, по существу свободных от менее полярных примесей, и фармацевтически приемлемый носитель.
13. Парентеральная композиция, включающая антибактериально эффективное количество соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, по существу свободных от соединения формулы II, и фармацевтически приемлемый носитель.
14. Парентеральная композиция по п.12, включающая соединение формулы I по п.10 и воду.
15. Парентеральная композиция по п.12, в которой соединение формулы I по п.10 представляет собой лиофилат.
16. Парентеральная композиция по п.12, содержащая соединение формулы I по п.11 в количестве примерно 10 мг до 700 мг соединения в контейнере единичной дозы.
17. Парентеральная композиция по п.12, содержащая соединение формулы I по п.11 в количестве примерно 275 мг до 500 мг соединения в контейнере единичной дозы.
18. Парентеральная композиция по п.12, содержащая соединение формулы I по п.10 в количестве примерно 10 мг до 700 мг соединения в контейнере единичной дозы.
19. Парентеральная композиция по п.12, содержащая соединение формулы I по п.10 в количестве примерно 275 мг до примерно 500 мг соединения в контейнере единичной дозы.
21. Фармацевтическая композиция, включающая антибактериально эффективное количество соединения по п.20 или его фармацевтически приемлемой соли.
22. Способ лечения бактериальной инфекции, включающий введение субъекту, пораженному бактериальной инфекцией, антибактериально эффективного количества соединения по п.20.
23. Соединение формулы

III
24. Фармацевтическая композиция, включающая антибактериально эффективное количество соединения по п.23 или его фармацевтически приемлемой соли.
25. Способ лечения бактериальной инфекции, включающий введение субъекту, пораженному бактериальной инфекцией, антибактериально эффективного количества соединения по п.23.