EA001887B1 - Производные иминоазаантрациклинона для лечения амилоидоза - Google Patents

Abstract

Соединение формулы (1), где Rи Rнезависимо выбраны из водорода и органического остатка и Rявляется группой формулы ORили NRR, или его фармацевтически приемлемая соль применимы в лечении амилоидоза.

Description

Данное изобретение относится к производным иминоазаантрациклинона, их применению для лечения амилоидоза, способам их получения и содержащим их фармацевтическим композициям.

Взаимосвязь между амилоидозом, некрозом клеток и потерей функции ткани имеет, повидимому, отношение к расстройствам различного типа, в том числе некоторым нейродегенеративным расстройствам. Таким образом, предотвращение образования амилоида и/или индукция деградации амилоида может быть важной терапевтической стратегией для всех патологических нарушений, связанных с амилоидозом и нейродегенеративными расстройствами типа Альцгеймера.

Данное изобретение относится к иминоазаантрациклинонам и их применению при лечении амилоидоза. Этот новый класс молекул является производным соединения, названного антразалоном, которое характеризуется наличием антрахиноновой системы, конденсированной с содержащим мостик гетероциклическим кольцом, структура которого изображена ниже:

Антразалон может рассматриваться как член нового класса молекул, которые относятся к 8-азаантрациклинонам и которые могут быть названы антразалинонами.

Соединения, охватываемые данным изобретением, характеризуются присутствием аминогруппы на содержащем мостик гетероциклическом кольце.

Более конкретно, данное изобретение относится к производному антразалинона формулы 1

где К₁ выбран из водорода, гидроксила, С_1-16алкила, С_1-16-алкоксила, С_3-8-цнклоалкокснла, галогена, аминогруппы, которая может быть незамещенной или моно- или О8О₂(К₄), где Кд обозначает алкил или арил;

К₂ выбран из водорода,

К_В-СН₂-, где К_в обозначает арильную группу, гетероциклильную группу или группу формулы К_С-СН=СН-, где Кс обозначает водород, С_1-16-алкил, С_2-8-алкенил или С_3-8циклоалкил,

С_1-16-алкила,

С_3-8-циклоалкила, арил-С₁-С₁₆-алкила, арилокси-С ₁ -С ₁₆-алкила, ацила формулы -С(К₅)=О, где К₅ выбран из водорода, С_1-16-алкила, С_2-16-алкенила, С_3-8 циклоалкила, арила, гетероциклила, ацильного остатка аминокислоты,

К₃ выбран из группы формулы ОКб, где К₆ обозначает водород, С_1-16-алкил, С_2-16-алкенил, С_3-8-циклоалкил, арил-С₁-С₆-алкил, арил, группы формулы ΝΚ₇Κ₈, где К₇ и К₈, которые могут быть одинаковыми или различными, обозначают водород, С_1-16-алкил, аралкил, С_2-16алкенил, С3-8-циклоалкил, гетероциклил, ацил формулы -С(К₅)=О, где К₅ имеет вышеупомянутое значение, или К₇ и К₈ вместе с атомом Ν, к которому они присоединены, обозначают гетероциклил, при условии, что, когда К₁ обозначает метоксильную группу и К3 обозначает гидроксильную группу, К₂ не является 4-пиридинметилом, или его фармацевтически приемлемую соль.

Предпочтительными соединениями формулы 1 являются соединения, в которых

- К1 выбран из водорода, гидрокси, метокси,

- К2 выбран из водорода, метила, аллила, бензила, 3-бромбензила, 4-трифторметилбензила, 4-метоксибензила, (4-бензилокси)бензила, 3,4-диметоксибензила, 3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензила, пиридинметила, глицила, аланила, цистеила, никотиноила,

- К₃ выбран из гидрокси, метокси, этокси, бензилокси, пиридинметилокси, метиламино, диметиламино, бензиламино, 4-морфолинила, 4метилпиперазинила.

Алкильная группа или фрагмент представляет собой обычно С₁-С₁₆-алкильную группу или фрагмент, С₁-С₁₆-алкильная группа или фрагмент включает в себя алкильные группы или фрагмент, как с прямой, так и с разветвленной цепью. Предпочтительно, С₁-С₁₆-алкильная группа или фрагмент представляет собой С₁-С₁₂алкильную группу или фрагмент, такой как гептил, октил, нонил, децил, ундецил или додецил или их изомер с разветвленной цепью.

Предпочтительно, С₁-С₁₂-алкильная группа или фрагмент представляет собой С₁-С₆алкильную группу или фрагмент, такой как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, трет-бутил, изобутил, пентил, гексил или изогексил или их изомер с разветвленной цепью.

Алкильные группы и фрагменты, обсужденные выше, могут быть замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из циклоалкила, гетероциклила, галогена, СТ₃, гидрокси, алкокси, арилокси, амино, моно- или диалкиламино, карбокси, алкилоксикарбонила.

Термин алкенил в применении здесь включает в себя радикалы, как с прямой, так и с разветвленной цепью до 16 атомов углерода, такие как ноненил, деценил и додеценил. Предпочтительные алкенильные группы имеют до 8 атомов углерода. Примеры включают в себя аллил, бутенил, гексенил, октенил.

Термин циклоалкил в применении здесь обозначает циклоалкильную группу, имеющую 3-8 атомов углерода, предпочтительно от 3 до 5 атомов углерода. Примеры включают в себя циклопропил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил.

Арильная группа или фрагмент включает в себя как моноциклические, так и бициклические ароматические группы или фрагменты, обычно содержащие от 6 до 10 атомов углерода в кольцевой части, такие как фенил или нафтил, необязательно замещенные одним или несколькими заместителями, предпочтительно одним, двумя или тремя заместителями, выбранными из С_1-6-алкила, С_1-6-алкокси, трифторметила, галогена, гидрокси или арилокси.

Термин гетероциклил в применении здесь обозначает 3-, 4-, 5- или 6-членное, насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее, по меньшей мере, один гетероатом, выбранный из О, 8 и Ν, которое необязательно конденсировано со второй 5- или 6-членной, насыщенной или ненасыщенной гетероциклильной группой или с вышеупомянутой циклоалкильной группой или арильной группой.

Примерами гетероциклильных групп являются группы пирролил, пиразолил, имидазолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, тиенил, фуранил, пиранил, пиридинил, дигидропиридинил, пиперидинил, пиперазинил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, пирролидинил, морфолинил, бензимидазолил, бензотиазолил или бензоксазолил.

Термин галоген в применении здесь обозначает фтор, хлор, бром или йод.

Термин аралкил в применении здесь относится к алкильным группам, рассмотренным выше, замещенным вышеупомянутой арильной группой, например, к бензилу, фенетилу, дифенилметилу и трифенилметилу.

Термин алкокси, арилокси или циклоалкоксил в применении здесь включает в себя любую из вышеупомянутых алкильной, аралкильной или циклоалкильной групп, связанных с атомом кислорода.

Термин арилоксиалкил в применении здесь обозначает любой алкил, обсужденный выше, связанный с арилом, обсужденным выше, атомом кислорода, например, феноксиэтил или феноксипропил.

Термин аминокислота в применении здесь обозначает природно-встречающуюся аминокислоту, например, глицин, аланин, цистеин, фенилаланин, тирозин и т.п.

Ацильная группа представляет собой обычно С₁-С₁₀-ацильную группу, например, С₁-С₆-ацильную группу, такую как метаноил, этаноил, пропаноил, бутаноил, трет-бутаноил, втор-бутаноил или гексаноил.

Данное изобретение включает в себя также все возможные изомеры соединений формулы (I) и их смеси, например, диастереоизомерные смеси и рацемические смеси. Так, стереоцентры в положении 7 и положении 9 могут быть в Кили 8-конфигурации (или обеих, т.е. присутствует смесь стереоизомеров). Подобным образом, оксимы и гидразоны могут быть в форме син- или антиизомеров или смеси син- и антиизомеров.

Данное изобретение относится также к соли соединений формулы 1, которые имеют солеобразующие группы, в частности, соли соединений, имеющих карбоксильную группу или основную группу (например, аминогруппу).

Соли являются обычно физиологически переносимыми или фармацевтически приемлемыми солями, например, солями щелочных металлов или щелочно-земельных металлов (например, солями натрия, калия, лития, кальция и магния), солями аммония и солями с подходящими органическим амином или аминокислотой (например, солями аргинина, прокаина), и аддитивными солями, образованными с подходящими органическими или неорганическими кислотами, например, соляной кислотой, серной кислотой, моно- и дикарбоновыми кислотами и сульфоновыми кислотами (например, уксусной, трифторуксусной, винной, метансульфоновой, п-толуолсульфоновой кислотой). Соединения формулы 1, в которых К₁, К₂ и К₃ имеют вышеуказанные значения, могут быть получены (а) взаимодействием соединения формулы 2

К1 о но где К₁ и К₂ имеют вышеуказанные значения, с соединением формулы

Κ₃-ΝΗ₂ где К₃ имеет вышеуказанное значение, и (b) если желательно, преобразованием полученного соединения формулы 1 в другое соединение формулы 1 подходящей химической реакцией, и/или (c) преобразованием соединения формулы 1 в его фармацевтически приемлемую соль.

Соединение формулы 2 обычно взаимодействует с соединением формулы К₃-ЫН₂ или Κ₃-ΝΗ₂·ΗΑ, где К₃ имеет вышеуказанное значение и НА обозначает неорганическую кислоту, обычно соляную или серную кислоту, в органическом растворителе, который обычно выбран из метанола, этанола, диоксана или толуола. Соединение Κ₃-ΝΗ₂ или Κ₃-ΝΗ₂·ΗΑ обычно присутствует в 2-5-кратном избытке. При применении соединения формулы Κ₃-ΝΗ₂·ΗΑ реакцию проводят в присутствии эквимолярного количества органического или неорганического основания. Основание обычно выбрано из аце тата натрия и гидрокарбоната натрия или калия. Реакцию обычно проводят в течение периода 124 ч при температуре от комнатной температуры до приблизительно 100°С. Растворителем обычно является этанол и реакцию обычно проводят при 80°С в течение 2-4 ч.

Соединения формулы К₃-ЫН₂ или К₃ΝΗ₂·ΗΑ обычно коммерчески доступны или они могут быть получены аналогично известным процедурам, сообщенным в литературе (см., например, НоиЬеп-^еу1, МеШобеп бег Огдашзсйеп Сйеш1е, νοί. Е 16а, Оеогд ТЫете Уег1а§, ^иНдаН 1990).

Соединения формулы 1, в которых К₁ и К₂ имеют вышеуказанные значения и К₃ представляет собой ОК₆, где К₆ обозначает водород, могут быть преобразованы в соединения формулы 1, в которой К₁ и К₂ имеют вышеуказанные значения и К₃ представляет собой ОК₆, где К₆ не является водородом или арилом, согласно известным методам, описанным в литературе (см., например, 1. Сйет. 8ос. 1949, 71, 3021 или Гагтасо, Еб. 8с1. 1990, 45, 1013).

Соединения формулы 1, в которой К₁ и К₂ имеют вышеуказанные значения и К₃ представляет собой ОК₆, где К₆ не является водородом, могут быть преобразованы в соединения формулы 1, в которой К₁ имеет вышеуказанные значения, К₂ является ацильной группой формулы -С(К₅)=О, где К₅ имеет вышеуказанные значения, и К₃ представляет собой ОК₆, где К не является водородом, согласно известным процедурам ацилирования. Это преобразование предпочтительно осуществляют взаимодействием соединения формулы 1, в которой К₁ имеет вышеуказанные значения, К₂ является водородом и К₃ представляет собой ОК₆, где К не является водородом, с кислотой формулы К₅СООН в присутствии конденсирующего агента, такого как диизопропилкарбодиимид, дициклогексилкарбодиимид или 2-этокси-1 -этоксикарбонил- 1,2-дигидрохинон (ΕΕΌΡ). Предпочтительные условия реакции включают использование безводного растворителя, такого как дихлорметан или диметилформамид, при комнатной температуре в течение от 4 до 24 ч.

Соединение формулы 1, в которой К₁, К₂ и К₃ имеют вышеуказанные значения, может быть преобразовано в фармацевтически приемлемую соль растворением свободного основания в подходящем органическом растворителе, таком как дихлорметан, метанол, этанол или диоксан, и добавлением раствора фармацевтически приемлемой органической или неорганической кислоты в метаноле, этаноле или диоксане. Образующуюся соль соединения 1 получают выпариванием или концентрированием раствора или соль осаждают добавлением диэтилового эфира к раствору соли.

При необходимости, на любой стадии этого процесса все возможные образующиеся диа стереоизомерные смеси и рацемические смеси могут быть разделены обычными способами.

Оксимы и гидразоны могут быть получены в виде смесей син- и антиизомеров или в виде индивидуального изомера; эти смеси могут быть разделены на отдельные син- и антиизомеры известными способами, например, хроматографией.

Соединения формулы 2, в которой К₁ имеет вышеуказанные значения и К₂ обозначает остаток К_ВСН₂, определенный выше, могут быть получены взаимодействием соединения формулы 3

О но · νν где К₁ имеет вышеуказанные значения и обозначает уходящую (отщепляемую) группу, с амином формулы

Β^Η₂-ΝΗ₂ где К_в имеет вышеуказанные значения.

Подходящие группы включают в себя О-сахариды, такие как производные Одауносаминила, О-ацил, такой как Отрифторацетил или О-(п-нитробензоил) или Оэтоксикарбонил, и О-ацеталь, такой как Отетрагидропиранил (О-ТНР). Предпочтительные амины формулы Ι<_ΒίΊΙ₂-ΝΗ₂ включают в себя аллиламин и алкилариламины, например, бензиламин, 3,4-диметоксибензиламин или пиридинметиламин.

Соединение формулы 3 обычно реагирует с 1 -1 0-кратным избытком амина формулы Ι<_ΒίΊΙ₂-ΝΗ₂, определенной выше. Реакция может иметь место в подходящем органическом растворителе, таком как дихлорметан или пиридин. Может присутствовать органическое основание, такое как пиридин. Реакция может иметь место в течение периода 6-48 ч, обычно при температуре от -10°С до комнатной температуры.

Предпочтительно используют четырехкратный избыток амина формулы К_ВСН₂-ЫН₂. Наиболее типичным растворителем является пиридин. Предпочтительными условиями реакции являются комнатная температура в течение 12-24 ч.

Соединения формулы 2, в которой К₁ имеет вышеуказанные значения и К₂ обозначает водород, могут быть получены, например, удалением защиты у соединения формулы 2, где К₁ имеет вышеуказанные значения и К₂ является 3,4-диметоксибензилом, при помощи 2,3дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохинона (ΌΌΡ). Предпочтительные условия включают в себя применение эквивалентного количества ΌΌΡ в смеси дихлорметана и воды (обычно в соотношении 20:1 по объему). Реакцию обычно проводят при комнатной температуре в течение 1-6 ч.

Соединения формулы 2, где К! имеет вышеуказанные значения и К₂ обозначает С1_-!6алкил, С_3-8-циклоалкил, вышеуказанную аралкильную или вышеуказанную арилоксиалкильную группу, могут быть получены из соединений формулы 2, в которой К₁ имеет вышеуказанные значения и К₂ обозначает водород, при помощи стандартных процедур алкилирования. Например, 8-Ы-алкил-, -алкенил-, -циклоалкил-, -аралкил- или арилоксиалкилантразалиноны формулы 2 предпочтительно получают взаимодействием соединения формулы 2, где К₁ имеет вышеуказанные значения и К₂ является водородом, с группой К₂-Х, где К₂ обозначает С_1-16алкил, С3-8-циклоалкил, вышеуказанный аралкил или вышеуказанный арилоксиалкил и Х обозначает удаляемую группу, такую как галоген, О-8О₂СЕ₃, О-8О₂-СН₃ или О-8О₂-С₆Н₄-СН₃. Предпочтительно, Х является галогеном, более предпочтительно, йодом или бромом. Обычно взаимодействие имеет место в присутствии подходящего органического или неорганического основания. Предпочтительные условия включают использование 2-10-кратного избытка К₂X в органическом растворителе, таком как дихлорметан или диметилформамид, в присутствии триэтиламина, этилдиизопропиламина или гидрокарбоната натрия, при температуре от 40 до 80°С в течение 4-24 ч.

Соединения формулы 2, где К₁ имеет вышеуказанные значения и К₂ является ацильной группой формулы -С(К₅)=О, где К₅ имеет вышеуказанные значения, предпочтительно получают взаимодействием соединения формулы 2, где К₂ является водородом, с ацилпроизводным формулы К₅-СО-На1 или (К₅СО)₂О, где К₅ имеет вышеуказанные значения и На1 обозначает галоген, предпочтительно, хлор. Предпочтительные условия включают использование 2-10-кратного избытка ацилпроизводного в органическом растворителе, таком как дихлорметан или диметилформамид, при температуре от -10 до 40°С в течение 1-24 ч.

В следующем примере соединения формулы 2, где К₁ имеет вышеуказанные значения и К₂ является ацильной группой формулы С(К₅)=О, где К₅ имеет вышеуказанные значения, или ацильным остатком аминокислоты, могут быть получены взаимодействием антразалинона формулы 2, где К₂ является водородом, с производным кислоты формулы К₅-СООН или с подходящим образом защищенной аминокислотой в присутствии конденсирующего агента, такого как дициклогексилкарбодиимид или 2-этокси-1 этоксикарбонил-1,2-дигидрохинон (ΕΕΌΡ) в безводном органическом растворителе. Предпочтительные условия включают использование 1 -4-кратного избытка кислоты или защищенной аминокислоты в сухом органическом растворителе, таком как диметилформамид. Эквивалентное количество ΕΕΌρ обычно используют при комнатной температуре в течение 15 ч.

Соединения формулы 3 доступны из природных источников или могут быть получены при помощи следующих известных способов синтеза с известными антрациклинами или антрациклинонами в качестве исходных продуктов.

Например, 7-О-сахарид, в котором сахаром является дауносаминил, может быть получен из природного источника, такого как даунорубицин, или может быть получен путем синтетической модификации.

Другие агликоны, функционализованные в положении С-7, могут быть получены при помощи хорошо известных процедур.

Например, производные 7-О-ТНР формулы 3 (А = О-ТНР) могут быть получены взаимодействием агликона формулы 4 о он о

К1 о он он с 3,4-дигидро-2Н-пираном в органическом растворителе и в присутствии кислотного катализатора при комнатной температуре в течение 1-4 ч. Предпочтительные условия включают растворение агликона формулы 4 в дихлорметане и взаимодействие его с 4 эквивалентами 3,4дигидро-2Н-пирана в присутствии каталитического количества камфорсульфоновой или птолуолсульфоновой кислоты при комнатной температуре в течение 4 ч. Производное 7-ОТНР выделяют промыванием реакционной смеси водным гидрокарбонатом натрия, водой и затем удалением растворителя при пониженном давлении.

7-О-Ацилпроизводные формулы 3 могут быть получены взаимодействием агликона формулы 4 с подходящей карбоновой кислотой, ангидридом карбоновой кислоты или ацилхлоридом в органическом растворителе в присутствии основания при температуре от -10°С до комнатной температуры в течение 1-6 ч.

Например, 7-О-ацетилпроизводное формулы 3 (А = О-СОСН₃) может быть получено взаимодействием агликона формулы (4) с уксусным ангидридом в органическом растворителе, таком как дихлорметан и в присутствии органического основания, такого как пиридин. Соединение может быть выделено осаждением неочищенного материала в аполярном растворителе, таком как гексан.

Некоторые из исходных продуктов для получения соединений формулы 2 являются известными, другие могут быть получены из известных антрациклинов и антрациклинонов в качестве исходных продуктов при помощи известных процедур.

Например, следующие антрациклины являются известными и могут быть представлены той же самой формулой 3:

даунорубицин (3 а: В1=ОСН₃, \ν=ϋдауносаминил), 4-деметоксидаунорубицин (3Ь: К₁=Н, ^=О-дауносаминил), 4-аминодаунорубицин (3 с: Я₁=Н, ^=О-дауносаминил). Также известны некоторые 7-О-производные формулы 3, например, 7-О-этоксикарбонилдауноми-цинон (36: Р|=ОСН₃. М=О-СООС₂Н₅), 7-О-ТНР-дауномицинон (3е: К₁=ОСН₃, ^=О-ТНР), 7-О-ацетилдауномицинон (3Т К₁=ОСН₃, \ν=Ο-ίΌΤΉ₃).

Соединения данного изобретения характеризуются высокой ингибирующей активностью в отношении образования отложений амилоида амилоидогенными белками и способны индуцировать разрушение существующих отложений амилоида.

Термин амилоидоз обозначает группу заболеваний, общей характеристикой которых является склонность определенных белков агрегировать и осаждаться в форме агрегатов нерастворимых фибрилл во внеклеточном пространстве. Агрегированный белок может, таким образом, вызвать структурное и функциональное повреждение органов и тканей. Классификация амилоида и амилоидоза недавно была пересмотрена в Ви11еОп οί 1йе ^ог1б Неайй Огдашкайоп 1993, 71(1), 105.

Все различные типы амилоида имеют общую ультраструктурную организацию в виде антипараллельных β-складчатых листов, несмотря на тот факт, что они содержат разнообразные широко отличающиеся субъединицы белков [см: 61еппег 6.6., Ыете Епд1апб ί. Меб. 1980, 302, 1283]. Амилоидоз АЬ вызывается своеобразными моноклональными легкими цепями иммуноглобулина, которые образуют амилоидные фибриллы. Эти моноклональные легкие цепи продуцируются моноклональными плазматическими клетками с низким митотическим индексом, который ответственен за их хорошо известную нечувствительность к химиотерапии. Злокачественность этих клеток состоит в их белоксинтезирующей активности.

Клиническое развитие этого заболевания зависит от селективности участия органа; прогноз может быть крайне неблагоприятным в случае инфильтрации сердца (среднее выживание <12 месяцев) или более доброкачественным в случае участия почек (среднее выживание приблизительно 5 лет).

Молекулы, которые могут блокировать или замедлять образование амилоида и увеличивать растворимость существующих отложений амилоида, представляются единственной разумной надеждой для пациентов с амилоидозом АЬ. Кроме того, поскольку надмолекулярная организация фибрилл амилоида является одинаковой для всех типов амилоида, доступность лекарственного средства, которое препятствует образованию амилоида и увеличивает растворимость существующих отложений, делая возможным выведение из организма при помощи нормальных механизмов, могла бы быть использована при всех типах амилоидоза, в том числе амилоидоза центральной нервной системы, такого как болезнь Альцгеймера и другие патологии.

Действительно, одним из основных патологических признаков болезни Альцгеймера (БА), синдрома Дауна, Летепба рищНкОса и амилоидной церебральной ангиопатии является отложение пептида из 39-43 аминокислот, называемого амилоидным β-пептидом (Ав), в форме нерастворимых устойчивых к протеазам амилоидных отложений в паренхиме и на стенках сосудов мозга. Этот маркер связан с потерей нервных клеток в коре головного мозга, лимбических участках, и подкорковых ядрах. Некоторые исследования показали, что селективное повреждение различных нейронных систем и утрата синапса в лобной коре переднего мозга коррелируют со снижением познавательной функции. Патогенез и молекулярная основа этих нейродегенеративных процессов в БА не вполне понятны, но осаждение Ав-пептидов в форме отложений амилоида в мозгу, возможно, играет центральную роль в генезе этого заболевания. В самом деле, нейротоксические эффекты ίη νίΐτο Αβ-пептидов на различных клеточных системах, в том числе первичных культивируемых нейронах, сообщались многими исследователями [Уапкпег е1 а1., 8с1епсе 1989, 245, 417; Войег е1 а1., Вюсйет. Вюрйук. Век. Соттип. 1991, 174, 572; Кой е1 а1., Вгат Век. 1990, 533, 315; Сорап е1 а1., ЫеигоВероп 1991, 2, 763; Майкоп е1 а1., 1. №игоксг 1992, 12, 376; Майкоп е1 а1., Вгат Век. 1993, 621, 35; Р1ке ей а1., 1. Ыеигокс1. 1993, 13, 1676].

Кроме того, сегрегация семейной БА с мутациями в гене белка-предшественника амилоида (АРР) предполагает потенциальную патогенетическую функцию отложения β-амилоида в БА [Ми11ап М. Εΐ а1. ΤΙΝ8 1993, 16, 392]. Действительно, растворимая форма Аβ-пептидов продуцируется 1п νί\Ό и 1п ν Нго как результат нормального клеточного метаболизма [Наакк еΐ а1. №1Шге 1993, 359, 322].

Нейротоксичность Аβ-пептидов связывали с их фибриллогенными свойствами. Исследования с синтетическими пептидами свидетельствуют о том, что нейроны гиппокампа никак не реагировали при выдерживании со свежим раствором Аβ-40 или Αβ-42 в течение 24 ч, тогда как их жизнеспособность уменьшалась при выдерживании их с Аβ-40 или Аβ-42, предварительно хранящимися в солевых растворах в течение 2-4 дней при 37°С для агрегации пептидов [Ьогепго апб Уапкпег ΡΝΑ8 1994, 91, 12243].

С другой стороны, неконгофильные преамилоидные образования, содержащие неагрегированные Аβ-пептиды, не были связаны с изменением нейронов [Тадйау1ш еΐ а1., №игокс1

Ьей. 1988, 93, 191].

Нейротоксические и фибриллогенные свойства полноразмерных Αβ -пептидов были также обнаружены в более коротком фрагменте, включающем в себя 25-35 остатков (Αβ25-35) последовательности Ав. Продолжительное, но не резкое экспонирование нейронов гиппокампа с микромолярной концентрацией Αβ25-35 индуцировало некроз нервных клеток активацией механизма запрограммированной смерти клеток, известной как апоптоз [Ροτίοηί е! а1., №игоК.ероп 1993, 4, 523]. В этом случае нейротоксичность также была связана с самоагрегирующим свойством Ав25-35.

Другие нейродегенеративные расстройства, такие как губчатая энцефалопатия (ГЭ), характеризуются некрозом нервных клеток и внеклеточным отложением амилоида, в этом случае происходящего из белка Приона (РгР). По аналогии с наблюдением, что β-амилоид является нейротоксичным, исследовали действия синтетических пептидов, гомологичных различным сегментам РгР, на жизнеспособность первичных крысиных нейронов гиппокампа. Продолжительное нанесение пептида, соответствующего фрагменту РгР 106-126, индуцировало некроз нейронов по механизму апоптоза, тогда как при тех же самых условиях беспорядочно собранная последовательность РгР 106-126 не снижала жизнеспособность клеток [Ροτίοηί е! а1., №11иге 1993, 362, 543]. Было показано, что РгР 106-126 является высокофибриллогенным ίη νίίτο и при окрашивании Конго красным агрегаты пептида обнаруживают зеленое двойное лучепреломление, свидетельствующее о βлистовой конформации, характерной для амилоида.

Способность соединений формулы 1 ингибировать образование амилоидных фибрилл оценивали при помощи тестов со светорассеянием и с тиофлавином Т.

Тест светорассеяния выполняли, как описано ниже.

Αβ25-35 (68ΝΚΟΑΙΙΟΕΗ) и РгР 106-126 (ΚΤΝΜΚΗΜΑΟΑΑΑΑΟΑ^ΟΟΕΟ) синтезировали при помощи твердофазной химии с использованием приборов 430А Лрркеб Вюкук1еш8 1п81гишеп18 и очищали обращенно-фазовой ВЖХ (Весктап Ιηκΐ. тοά 243) в соответствии с Ροτίοηί е! а1., №11иге 1993, 362, 543.

Светорассеяние растворов пептидов оценивали при помощи спектрофлуориметрии (Регкш Е1тег Ь8 50В), возбуждение и эмиссию наблюдали при 600 нм.

При растворении Αβ-фрагмента 25-35 и РгР 106-126 в концентрации 0,5-1 мг/мл (0,4-0,8 мМ и 0,2-0,4 мМ, соответственно) в растворе 10 мМ фосфатного буфера рН 5, они спонтанно агрегируют в пределах часа.

При добавлении соединений формулы 1 к растворам пептидов в эквимолярной концентрации наблюдали предотвращение агрегации.

Тест с тиофлавином Т измеряет способность тест-соединения ингибировать агрегацию пептида в амилоидные фибриллы. Образование амилоида определяли количественно по флуоресценции тиофлавина Т. Тиофлавин Т связывается специфически с фибриллами амилоида, и это связывание производит смещение в его спектрах поглощения и эмиссии: интенсивность сигнала флуоресценции прямо пропорциональна массе образованного амилоида.

Этот тест проводили, как описано ниже.

Исходные растворы пептида Αβ 25-36 готовили растворением лиофилизированного пептида в диметилсульфоксиде (ДМСО) при концентрации 7,07 мг/мл.

Аликвоты этого раствора растворяли в 50 мМ фосфатном буфере, рН 5, так чтобы получить конечную концентрацию пептида 100 мкМ, и инкубировали в течение 24 ч при 25°С с 30 мкМ тест-соединением, или без него, в конечном объеме 113 мкл. Соединения предварительно растворяли в ДМСО при концентрации 3,39 мМ и затем разбавляли водой таким образом, чтобы иметь менее 3% ДМСО (об/об) в инкубационных смесях.

Измерения флуоресценции проводили, как описано Νηί1<ί е! а1., Αιτιί. Вюсйет. 1989, 177, 244 и Н. Бетт III, Ртйеш 8с1. 1993, 2, 404. Вкратце, инкубированные пробы разбавляли при концентрации пептида 8 мг/мл в 50 мМ натрий-цитратном буфере, рН 5, содержащем 47 мМ тиофлавин Т в конечном объеме 1,5 мл. Флуоресценцию измеряли с возбуждением при 420 нм и эмиссией при 490 нм в спектрофотометре Κοη!τοη ΠιιοϊΌ^ικχ 8рес!^οрйο!οте!е^ и получали средние величины после вычитания фоновой флуоресценции 47 ΜΜ Τ11Τ.

Результаты выражали в виде относительной флуоресценции, т.е. в виде процента флуоресценции пептида Αβ 25-35, инкубированного отдельно (контроля).

Соединения 1 уменьшали флуоресценцию тиофлавина Т до 90% при совместном инкубировании с раствором пептида, и было обнаружено, что их токсичность была очень незначительной. Активность соединений, описанных в данном патенте, показана также их противодействием запускаемой затравкой агрегации пептида Αβ1-40 в мономерной форме. Активность описанных соединений оценивали в соответствии с процедурой, описанной ниже.

Исходный раствор мономера пептида Αβ140 готовят растворением этого пептида в диметилсульфоксиде при концентрации 33,33 мг/мл. Этот исходный раствор дополнительно разбавляют 1:11,5 диметилсульфоксидом. Затем этот раствор разбавляют 10 мМ фосфатным буфером, рН 7,4, содержащим 150 мМ хлорид натрия, с получением тест-раствора.

В пробирку Эппендорфа, содержащую 47 мкл раствора мономера пептида Αβ1-40, добав13 ляют 3 мкл 830 мкМ водного раствора тестсоединения, содержащего 66,4 мкМ, в расчете на содержание мономера Αβ1-40, предварительно образованных обработанных ультразвуком фибрилл Αβ1-40: полученный раствор является 20 мкМ в отношении мономера Αβ1-40, 50 мкМ в отношении тест-соединения и содержит 4 мкМ, в расчете на содержание мономера Αβ140, предобразованных обработанных ультразвуком фибрилл. Агрегации дают происходить в течение двух часов при 37°С. Затем суспензию центрифугируют при 15000 об/мин в течение 15 мин при +4°С, супернатант собирают и мономер Αβ1-40 измеряют количественно при помощи ВЖХ.

Активность некоторых репрезентативных соединений представлена в таблице 1. Активность выражена в виде процента ингибирования агрегации 20 мкМ раствора мономера Αρ1-40, стимулированной 4 мкМ, в расчете на содержание мономера Αβ1-40, предварительно образованными обработанными ультразвуком фибриллами.

_____________________________________________Таблица 1

Соединение	% Ингибирования
1а	22,9
1с	36,0
1е	26,2
1р	31,7
1ς	24,2
1ас-1	54,2

Соединения данного изобретения могут быть использованы для приготовления лекарственных средств для предупреждения, для остановки или для замедления образования или для индукции деградации отложений амилоида, которые образуются различными амилоидогенными белками. Таким образом, соединения данного изобретения могут быть использованы при профилактике и лечении различных типов амилоидозных заболеваний. Амилоидозные заболевания включают в себя периферические амилоидозы, подобные амилоидозу ΑΕ, амилоидозы центральной нервной системы, подобные болезни Альцгеймера, синдрому Дауна, губчатым энцефалопатиям и т.п.

Данное изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (1) или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента, вместе с фармацевтически приемлемым носителем, наполнителем или другой добавкой, если необходимо.

Также предложено соединение формулы (1), определенное выше, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении организма человека или животного. Кроме того, данное изобретение относится к применению соединения формулы (1) или его фармацевтически приемлемой соли при получении лекарст венного средства для лечения заболевания, связанного с амилоидозом.

Фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы 1 или его соли, могут быть приготовлены общепринятым образом с использованием общепринятых нетоксических фармацевтических носителей или разбавителей в разнообразных дозированных формах и для разных путей введения.

В частности, соединения формулы 1 могут вводиться:

А) перорально, например, в виде таблеток, пастилок, лепешек, водной или масляной суспензии, диспергируемых порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул или сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального применения, могут быть приготовлены согласно любому способу, известному в данной области, для приготовления фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или несколько агентов, выбранных из группы, состоящей из подслащивающих агентов, улучшающих вкус и запах агентов, красящих агентов и консервантов для обеспечения фармацевтически изящных и вкусных препаратов.

Таблетки содержат активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми наполнителями, которые пригодны для приготовления таблеток. Этими наполнителями могут быть, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие агенты, например, кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связывающие агенты, например, кукурузный крахмал, желатин или аравийская камедь, и смачивающие агенты, например, стеарат магния или стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут не иметь покрытия или они могут быть покрыты известными способами для замедления разрушения их и всасывания в желудочно-кишечном тракте и обеспечения тем самым устойчивого действия на протяжении более продолжительного периода. Например, может быть использован такой материал для замедления действия, как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат.

Препарат для перорального применения может быть также представлен в виде твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например, карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в виде мягких желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с водой или масляной средой, например, арахисовым маслом, жидким парафином или оливковым маслом. Водные суспензии содержат активные вещества в смеси с наполнителями, пригодными для изготовления водных суспензий.

Такими наполнителями являются суспендирующие агенты, например, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидрокси-, пропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и аравийская камедь; диспергирующими или смачивающими агентами могут быть природно-встречающиеся фосфатиды, например, лецитин, или продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, например, стеарат полиоксиэтилена, или продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например, гептадекаэтиленоксицетанол, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такие как моноолеат полиоксиэтиленсорбита, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, произведенными из жирных кислот и ангидридов гексита, например, моноолеат полиэтиленсорбитана.

Вышеуказанные водные суспензии могут также содержать один или несколько консервантов, например, этил- или н-пропил-пгидроксибензоат, один или несколько красящих агентов, один или несколько улучшающих вкус и запах агентов или один или несколько подслащивающих агентов, таких как сахароза или сахарин. Масляная суспензия может быть приготовлена суспендированием активного ингредиента в растительном масле, например, арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном масле или кокосовом масле, или в минеральном масле, таком как жидкий парафин. Масляные суспензии могут содержать загуститель, например, пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Могут быть добавлены подслащивающие агенты, такие как изложенные выше, и улучшающие вкус и запах агенты для обеспечения вкусной пероральной композиции.

Эти композиции могут сохраняться путем добавления аутооксиданта, такого как аскорбиновая кислота. Диспергируемые порошки и гранулы, пригодные для получения водной суспензии путем добавления воды, содержат активный ингредиент в смеси с диспергирующим или смачивающим агентом, суспендирующим агентом и одним или несколькими консервантами. Примеры подходящих диспергирующих или смачивающих агентов уже указаны выше. Могут также присутствовать дополнительные наполнители, например, подслащивающие, улучшающие вкус и запах агенты.

Фармацевтические композиции по данному изобретению могут быть также в форме эмульсий типа масло-в-воде. Масляной фазой может быть растительное масло, например, оливковое масло или арахисовое масло, или минеральное масло, например, жидкий парафин, или их смеси.

Пригодными эмульгирующими агентами могут быть природные камеди, например, ара вийская камедь или трагакантовая камедь, природные фосфатиды, например, соя, лецитин и эфиры или неполные эфиры, произведенные из жирных кислот и ангидридов гексита, например, моноолеат сорбитана, и продукты конденсации вышеуказанных неполных эфиров с этиленоксидом, например, моноолеат полиоксиэтиленсорбитана. Эмульсия может также содержать подслащивающие и улучшающие вкус и запах агенты. Могут быть приготовлены сиропы и эликсиры с подслащивающими агентами, например, глицерином, сорбитом или сахарозой. Такие препараты могут также содержать средство, уменьшающее раздражение, консервант и улучшающие вкус и запах агенты.

В) Парентерально, либо подкожно, или внутривенно, или внутримышечно, или внутригрудинно, либо инфузионными способами, в форме стерильной инъекционной водной или маслянистой суспензии. Эти фармацевтические композиции могут быть в форме стерильных инъекционных водных или маслянистых суспензий.

Такая суспензия может быть приготовлена в соответствии с известными в данной области способами с использованием пригодных диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, которые были упомянуты выше. Стерильный инъекционный препарат может быть также стерильным инъецируемым раствором или суспензией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть применены, находятся вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используют в качестве растворителя или суспендирующей среды.

Для этой цели является общепринятым применение любых мягких нелетучих масел, в том числе синтетических моно- или диглицеридов. Кроме того, в приготовлении инъекционных растворов используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

Данное изобретение относится далее к способу лечения человека или животного, например, млекопитающего, страдающего от заболевания амилоидоза или подверженного этому заболеванию, предусматривающему введение ему нетоксичного и терапевтически эффективного количества соединения формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли.

Обычной дневной дозой является доза от ~0,1 до ~50 мг на кг веса тела, в соответствии с активностью конкретного соединения, возрастом, весом и состоянием субъекта, который проходит лечение, типом и тяжестью заболевания и частотой и путем введения;

предпочтительно дневные уровни дозы находятся в пределах 5 мг - 2 г. Количество актив17 ного ингредиента, которое может быть комбинировано с веществами-носителями для получения дозированной формы для одного приема, будет меняться в зависимости от проходящего лечение хозяина и конкретного способа введения. Например, композиция, предназначенная для перорального введения, может содержать от 5 мг до 2 г активного агента, компаундированного с подходящим и удобным количеством вещества-носителя, которое может быть в варьирующем количестве от ~5 до ~95 процентов всей композиции. Дозированные стандартные формы обычно содержат от ~5 мг до ~500 мг активного ингредиента.

Следующие далее примеры иллюстрируют изобретение без его ограничения.

Пример 1.

Оксим 8^-(3,4-диметоксибензил)антразалона (1а)

О но

1а

Стадия 1.

Даунорубицин (3а, 1,58 г, 3 ммоль) растворяли в сухом пиридине (20 мл), добавляли 3,4диметоксибензиламин (2 г, 12 ммоль) и выдерживали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем к реакционной смеси добавляли водную 1 н НС1 (400 мл) и экстрагировали дихлорметаном (200 мл). Органическую фазу промывали водой (2х200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали до небольшого объема при пониженном давлении и флэш-хроматографировали на силикагеле с использованием смеси толуол-ацетон (9:1 по объему) в качестве системы элюции с получением 1 г 8-N-(3,4-диметоксибензнл)антразалона 2а (К₁=ОСН₃, К₂ 3,4-диметоксибензил). ТСХ на пластинке силикагеля Г₂₅₄ (Мегск), система элюции дихлорметан-ацетон (95:5 по объему) Κί=0,56 ГАВ-М8(+): т/ζ 530 [МН]⁺ 380 [М СН2(С6Н3) (ОСН3)2 + 2Н]⁺;

¹Н-ЯМР (400 МГц, СВС1₃) δ:

1,43 (с, 3Н, СН3); 2,34 (д, 1=17,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,66, 2,77(два дублета, 1=19,4 Гц, 2Н, СН₂-10); 2,81 (дд, 1=7,3, 17,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 3,24, 3,79 (два дублета, 1=12,8 Гц, 2Н, Ν-СН^ РЬ); 3,85, 3,86 (2хс, 6Н, 2хОСН₃); 4,08 (с, 3Н, 4ОСН₃); 4,77 (д, 1=7,3 Гц, 1Н, Н-7); 6,6-6,8 (м, 3Н, ароматические водороды); 7,38 (д, 1=7,6 Гц, 1Н, Н-3); 7,77 (дд, 3=7,6, 7,8 Гц, 1Н, Н-2); 8,03 (д, 1=7,8 Гц, 1Н, Н-1); 13,22 (с, 1Н, ОН-11); 13,50 (с, 1Н, ОН-6).

Стадия 2.

Раствор 8-Ν-(3 ,4-диметоксибензил)антразалона 2а (1 г, 1,89 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (0,2 г, 2,83 ммоль) и ацетатом натрия (0,38 г, 2,83 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 3 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли и сушили над безводным сульфатом натрия. Раствор концентрировали до небольшого объема, добавляли диэтиловый эфир и осажденный оксим (1а) собирали: 0,55 г (выход 54%).

ГАВ-М8: т/ζ 545 [М+Н]⁺; 151 [С9Н11О2]⁺ 'Н-ЯМР (200 МГц, СБС13) δ:

1,55 (с, 3Н, СН3); 2,68 (д, 1=16,9 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,77, 2,87(два дублета, 1=19,3 Гц, 2Н, СН2-10); 2,81 (дд, 1=5,7, 16,9 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 3,15, 3,78 (два дублета, 1=12,7 Гц, 2Н, Ν-СНАг); 3,83, 3,85 (два синглета, 6Н, два ОСН₃); 4,07 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,60 (д, 1=5,7 Гц, 1Н, Н-7); 6,66,8 (м, 3Н, ароматические водороды); 7,04 (с, 1Н, С \ОН); 7,37 (дд, 1=1,1, 8,6 Гц, 1Н, Н-3);

7,76 (дд, 1=7,7, 8,6 Гц, 1Н, Н-2); 8,02 (дд, 1=1,1, 7,7 Гц, 1Н, Н-1); 13,26, 13,51 (два синглета, 2Н, фенольный ОН).

Пример 2.

Оксим 8-Ы-аллилантразалона (1Ь) о но

н₃с - о о но

1Ь

Стадия 1.

Даунорубицин (3 а, 1,58 г, 3 ммоль) реагировал с аллиламином (0,9 г, 12 ммоль), как описано для получения 2а в примере 1. Неочищенный материал флэш-хроматографировали на силикагеле с использованием смеси дихлорметана и ацетона (98:2 по объему) в качестве системы элюции с получением 0,85 г 8-Νаллилантразалона 2Ь (К₁=ОСН₃, К₂=аллил).

ТСХ на пластинке силикагеля Г₂₅₄ (Мегск), система элюции дихлорметан-ацетон (95:5 по объему) Кд=0,1.

¹Н-ЯМР (200 МГц, СВС1₃) δ:

1,37 (с, 3Н, СН3); 2,41 (д, 1=17,6 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,64 (м, 2Н, СН₂-10); 2,88 (дд, 1=7,2,

17,6 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,8-3,4 (м, 2Н,

СН₂СН=СН₂); 4,04 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 5,0-5,2 (м, 2Н, СН₂СН=СН₂); 5,90 (м, 1Н, СН₂СН=СН₂);

7,37 (д, 1=8,4 Гц, 1Н, Н-3); 7,75 (дд, 1=7,6, 8,4 Гц, 1Н, Н-2); 8,00 (д, 1=7,6 Гц, 1Н, Н-1); 13,0,

13,5 (2хс, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Стадия 2.

Раствор 8-№аллилантразалона 2Ь (1,5 г, 3,58 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (0,41 г, 5,8 ммоль) и ацетатом натрия (0,47 г, 5,8 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 3 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли и сушили над безводным сульфатом натрия. Раствор концентрировали до небольшого объема, добавляли н-гексан и осажденный ок сим (1Ь). Собирали 1,2 г (выход 77%). ΕΑΒ-Μ8: т/ζ 435 [М+Н]^{+ 1}Н-ЯМР (200 МГц, СВС1₃) δ:

1,48 (с, 3Н, СН₃); 2,6-3,0 (м, 5Н, СН₂-12 + С'Н10 +ΌΗ(Η)Ν);

3,30 (м, 1Н, ΕΗ(Η)Ν); 4,06 (с, 3Н, 4-ОСН₃) ;

4,83 (д, 1=6,4 Гц, 1Н, Н-7); 5,02 (д, 1=17,1 Гц, 1Н, СН=СН(Н-транс)); 5,09 (д, 1=10,1 Гц, 1Н,

СН=СН(Н-цис)); 5,90 (м, 1Н, 7,08 (с, 1Н, С \-ОН); 7,35 (д, 1=8,4 Гц, 1Н, Н-3); 7,74 (дд, 4=7,7, 8,4 Гц, 1Н, Н-2); 7,99 (д, 4=7,7 Гц, 1Н, Н-1); 13,20, 13,55 (два синглета, 2Н, фенольный ОН)

Пример 3.

О-метилоксим 8-Ы-аллилантразалона (1с) о но

н₃с - о о но

1с

Раствор 8-Ы-аллилантразалона 2Ь, полученного, как описано в примере 2, (0,5 г, 1,19 ммоль) в 15 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-метилгидроксиламина (0,2 г, 2,38 ммоль) и ацетатом натрия (0,2 г, 2,38 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 4 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли и сушили над безводным сульфатом натрия. Реакционную смесь флэшхроматографировали на силикагеле с использованием смеси циклогексан-этилацетат (80:20 по объему) с получением 0,15 г (выход 28%) соединения 1с. ТСХ на пластинке силикагеля Г₂₅₄ (Мегск), система элюции циклогексанэтилацетат (50:50 по объему) 0,37.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 449 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ:

1,50 (с, 3Н, СН3); 2,64 (д, 1=17,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,72, 2,82 (два дублета, 1=19,2 Гц, 2Н, СН2-10); 2,84 (дд, 1=6,8, 17,5 Гц, 1Η, СН(Н)12); 2,55, 3,30 (два мультиплета, 2Н, ΝОДС^С^; 3,79 (с, 3Н, Ы-ОСН3); 4,07 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,80 (д, 4=6,8 Гц, 1Н, Н-7); 5,05 (м, 2Н, ^^Η^Η^; 5,89 (м, 1Н, СН₂СН=СН₂); 7,36 (дд, 4=0,8, 8,5 Гц, 1Н, Н-3); 7,75 (дд, 4=7,7, 8,5 Гц, 1Н, Н-2); 8,01 (дд, 4=0,8, 7,7 Гц, 1Н, Н-1)4 13,23, 13,56 (два с, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Действуя, как описано в предыдущих примерах, можно также получить следующие соединения.

Пример 4.

О-бензилоксим 8-Ы-аллилантразалона, 16 (К₁=ОСН₃, К₂=аллил, К₃=ОСН₂Рй);

Пример 5.

О-метилоксим 8-Ν-(3,4-диметоксибензил) антразалона (1е)

О но

Раствор 8А-(3,4-диметоксибензил)антразалона 2а (1 г, 1,88 ммоль), полученного, как описано в примере 1, в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-метилгидроксиламина (0,62 г, 7,42 ммоль) и ацетатом натрия (1,01 г, 7,42 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 24 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и выпаривали. Остаток растирали с диэтиловым эфиром и фильтровали с получением 0,69 г (выход 65%) соединения 1е. Соединение 1е превращали в гидрохлоридную соль добавлением раствора хлористоводородной кислоты в метаноле к раствору этого соединения в дихлорметане и осаждали гидрохлоридную соль диэтиловым эфиром.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 559 [Μ+Η]⁺;

¹Н-ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Θ-ά₆, Т = 55°С) δ:

1,52 (с, 3Н, СН₃); 2,2-3,8 (м, 6Н, СН₂-12 + СН₂-10 + ΝίΊΓ-Αΐ'); 3,65, 3,70, 3,71 (три синглета, 9Н, три ОСН3); 3,95 (с, 3Н, 4-ОСН3); 4,47 (с, 1Н, Н-7); 6,7-6,9 (м, 3Н, СбНэЧОСНэЬ); 7,60 (м, 1Н, Н-3); 7,88 (м, 1Н, Н-1 + Н-2); 13,00, 13,41 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-11 ).

Пример 6.

О-бензилоксим 8-Ν-(3,4-диметоксибензил) антразалона (1ί)

1£

Раствор 8-Ν-(3,4-диметоксибензил)антразалона 2а (0,5 г, 0,94 ммоль) , полученного, как описано в примере 1, в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-бензилгидроксиламина (0,30 г, 1,88 ммоль) и ацетатом натрия (0,26 г, 1,88 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 12 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Реакционную смесь флэш-хроматографировали на силикагеле с использованием смеси дихлорметанацетон (95:5 по объему) с получением 0,30 г (выход 50%) соединения 1ί.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 635 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (200 МГц, СПС1_;) δ:

1,54 (с, 3Н, СН3); 2,64 (д, 1=17,6 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,76, 2,88 (два дублета, 1=19,3 Гц, 2Н, СН2-10); 2,82 (дд, 1=5,9, 17,6 Гц, 1Н, СН(Н)12); 3,16, 3,77 (два дублета, 4=12,7 Гц, 2Н, ΝОГ-Аг); 3,84, 3,86 (два синглета, 6Н, два ОСН₃); 4,08 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,57 (д, 4=5,9 Гц, 1Н, Н-7); 5,03 (м, 2Н, О^РЬ.); 6,74 (м, 3Н, С₆Н₃-(ОСН₃)₂); 7,26 (м, 5Н, РЬ); 7,36 (м, 1Н, Н3); 7,78 (дд, 4=9,0 Гц, 1Н, Н-2); 8,04 (д, 4= 9,0 Гц, 1Н, Н-1); 13,29, 13,50 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Пример 7.

О-метилоксим 8-Ы-бензилантразалона, 1д (К1=ОСН3, К₂=бензил, К3=ОСН3)

Пример 8.

О-бензилоксим 8-Ы-бензилантразалона, 1Ь (К1=ОСН3, К₂=бензил, К3=ОСН₂РЬ)

Пример 9.

О-метилоксим 8-М-(4-трифторметилбензил) антразалона, 11 (К₁=ОСН₃, К₂=4-трифторметилбензил, К₃=ОСН₃)

Пример 10.

О-бензилоксим 8-Х-(4-трифторметилбензил)антразалона, 11 (К₁=ОСН₃, К₂=4-трифторметилбензил, К₃=ОСН₂РЬ)

Пример 11.

Оксим 8-Ы-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)антразалона, 1т (К₁=ОСН₃, К₂=3,5-дитрет-бутил-4-гидроксибензил, К₃=ОН);

Пример 12.

О-метилоксим 8-Х-(3,5-ди-трет-бутил-4гидроксибензил)антразалона, 1п (К₁=ОСН₃, К₂=3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил, К₃=ОСН₃);

Пример 13.

О-бензилоксим 8-Ы-(3,5-ди-трет-бутил-4гидроксибензил)антразалона, 1о (К₁=ОСН₃, К₂=3,5ди-трет-бутил-4-гидроксибензил, К₃=ОСН₂РЬ);

Пример 14.

О-метилоксим 8-Х-(4-пиридилметил)антразалона (1р) о но

1р

Стадия 1.

Даунорубицин (3 а, 1,58 г, 3 ммоль) растворяли в сухом пиридине (20 мл), добавляли 4аминометилпиридин (1,2 г, 12 ммоль) и выдерживали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем к реакционной смеси добавляли водную 1 н НС1 (400 мл) и экстрагировали дихлорметаном (200 мл). Органическую фазу промывали водой (2х200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, концентрировали до небольшого объема при пониженном давлении и флэш-хроматографировали на силикагеле с использованием смеси толуол-ацетон (9:1 по объему) в качестве системы элюции с получением 0,95 г (выход 67%) 8-Ы-(4-пиридилметил) антразалона 2с (К₁=ОСН₃, К₂=4-пиридилметил).

ΕΑΒ-Μ8(+): т/ζ 471 [МН]⁺; 380 [М - СН₂ (С₅Н4Ы) + 2Н]⁺;

сн₃о о , он *Н-ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ:

1,39 (с, 3Н, СН₃); 2,50 (д, 1=17,9 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,78 (с, 2Н, СН₂-10); 2,96 (дд, 1=7,3, 17,9 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 3,70, 4,07 (два дублета, 1=16,7 Гц, 2Н, И⁺-СН₂-Ру); 4,07 (с, 3Н, ОСН₃);

4,76 (д, 1=7,3 Гц, 1Н, Н-7); 7,40 (д, 1=7,3 Гц, 1Н,

Н-3); 7,79 (дд, 1=7,3 Гц, 1Н, Н-2); 7,89 (д, 1=6,0 Гц, 2Н, С₆Н₅Ы); 8,02 (д, 1=7,7 Гц, 1Н, Н-1); 8,70 (д, 1=6,0 Гц, 2Н, С6Н₅И); 13,14 (с, 1Н, ОН-11);

13,45 (с, 1Н, ОН-6).

Стадия 2.

Раствор 8-Ы-(4-пиридилметил)антразалона 2с (0,5 г, 1,06 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-метилгидроксиламина (0,18 г, 2,15 ммоль) и ацетатом натрия (0,29 г, 2,15 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 12 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Остаток флэшхроматографировали на силикагеле с использованием смеси дихлор-метан-ацетон (80:20 по объему) с получением 0,18 г (выход 34%) соединения 1р.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 500 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (200 МГц, ОМ8О-а₆) δ:

1,41 (с, 3Н, СН₃); 2,48 (д, 1=19,0 Гц, 1Н, СН(Н)-10); 2,54 (д, 1=17,1 Гц, 1Н, СН(Н)-12);

2,90 (м, 2Н, СН(Н)-12 + СН(Н)-10); 3,51, 4,08 (два дублета, 1=17,5 Гц, 2Н, Ы-СН₂-Ру); 3,72 (с, 3Н, Ы-ОСН3); 3,94 (с, 3Н, 4-ОСН3); 4,48 (д, 1=6, 3 Гц, 1Н, Н-7); 7,60 (м, 2Н, С₅Н₅Ы); 7,84 (м, 2Н, Н-1 + Н-2); 8,67 (м, 2Н, С5Н₃К); 13,03, 13,48 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-11 ).

Пример 15.

О-бензилоксим 8-Х-(4-пиридилметил)антразалона (1д)

Раствор 8-Ы-(4-пиридилметил)антразалона 2с (0,5 г, 1,06 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-бензилгидроксиламина (0,4 г, 2,51 ммоль) и ацетатом натрия (0,34 г, 2,51 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 6 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Остаток флэшхроматографировали на силикагеле с использованием смеси дихлорметан-ацетон (80:20 по объему) с получением 0,19 г (выход 31%) соединения 1с].

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 576 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (200 МГц, 1)М8О-<1₆) δ:

1,40 (с, 3Н, СН₃); 2,47 (д, 1=17,0 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,50, 2,89 (два дублета, 1=18,8 Гц, 2Н, СН2-10); 2,85 (дд, 1=6,8, 17,0 Гц, 1Н, СН(Н)12); 3,20, 3,90 (два дублета, 1=15,0 Гц, 2Н, ΝСН₂-Ру); 3,93 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,39 (д, 1=6, 8 Гц, 1Н, Н-7); 4,96 (с, 2Н, ОСН 141); 7,23 (м, 7Н, РЬ +С₅Н₅К); 7,60 (м, 1Н, Н-3); 7,87 (м, Н-1 + Н-2);

8,43 (дд, 1=1,7, 4,3 Гц, 2Н, С₅Н₅^; 13,00, 13,40 (широкие сигналы, 2Н, ОН-6 + ОН-11 ).

Пример 16.

Ν,Ν-диметилгидразон 8 -Ν-аллилантразалона, 1г (К₁=ОСН₃, К₂=аллил, К₃=^СН₃)₂);

Пример 17.

4-метилпиперазинилгидразон 8-№(4-пиридинметил)антразалона, 1з: (К₁=ОСН₃, К₂=4пиридинметил, К₃=4-метилпиперазинил);

Пример 18.

4-морфолинилгидразон 8-№(4-пиридинметил)антразалона, 11: (К₁=ОСН₃, К₂=4-пиридинметил, К₃=4-морфолинил);

Пример 19.

О-метилоксим 4-деметокси-8-№(4-пиридинметил)антразалона, 1и (К₁=Н, К₂=4-пиридинметил, К₃=ОСН₃);

Пример 20.

О-метилоксим 8-Ν-(3 -бромбензил)антразалона, 1ν (1<|=ОСН₃. К₂=3-бромбензил, К₃=ОСН₃).

Пример 21.

О-этилоксим 8^-аллилантразалона (1\ν) о но

н₃с - о о но

Раствор 8-№аллилантразалона 2Ь (0,6 г, 1,43 ммоль), полученного, как описано в примере 2, в 15 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-этилгидроксиламина (0,27 г, 2,77 ммоль) и ацетатом натрия (0,36 г, 2,77 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 4

ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Реакционную смесь флэш-хроматографировали на силикагеле с использованием смеси циклогексан-этилацетат (90:10 по объему) с получением 0,43 г (выход 65%) соединения 1 \ν.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 463 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ:

1,18 (т, 1=7,0 Гц, 3Н, ОСН₂СН₃); 1,50 (с, 3Н, СН₃); 2,64 (д, 1=16,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,70,

2,80 (два дублета, 1=18,0 Гц, 2Н, СН₂-10); 2,75, 3,30 (два мультиплета, 2Н, №СН₂СН=СН₂); 2,84 (дд, 1=6,4, 16,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 4,04 (м, 2Н, №ОСН₂СН₃); 4,08 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,82 (д, 1=6,8 Гц, 1Н, Н-7); 5,10 (м, 2Н, С1ГС11=С1 Г); 5,90 (м, 1Н, СН₂СН=СН₂); 7,37 (дд, 1=1,1, 6,8 Гц, 1Н, Н3); 7,75 (дд, 1=7,9, 8,6 Гц, 1Н, Н-2); 8,02 (дд, 1=1,1, 7,9 Гц, 1Н, Н-1); 13,24, 13,56 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Пример 22.

Ν-метилгидразон 8-№аллилантразалона (1у)

О но

н₃с - О О НО

1у

Раствор 8^-аллилантразалона 2Ь (0,5 г, 1,19 ммоль), полученного, как описано в примере 2, в 15 мл этанола обрабатывали Ν метилгидразином (0,45 г, 9,52 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 24 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Реакционную смесь флэш-хроматографировали на силикагеле с использованием смеси дихлорметан-метанол (95:5 по объему) с получением 0,31 г (выход 58%) соединения 1у.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 448 [М+Н]^{+ 1}Н-ЯМР (200 МГц, СОС1₃) δ:

1,45 (с, 3Н, СН₃); 2,35 (д, 1=16,2 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,68 (дд, 1=6,4, 16,2 Гц, 1Н, СН(Н)12); 2,72 (м, 2Н, СН₂-10); 2,70, 3,30 (два мультиплета, 2Н, №СН₂СН=СН₂); 2,88 (с, 3Н, N№3); 4,08 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,88 (д, 1=6, 4 Гц, 1Н, Н-7);

5,10 (м, 2Н, СН₂СН=СН₂); 5,90 (м, 1Н,

СН₂СН=СН₂); 7,36 (дд, 1=0, 9, 8,5 Гц, 1Н, Н-3);

7,75 (дд, 1=7,7, 8,5 Гц, 1Н, Н-2); 8,01 (дд, 1=0,9,

7,7 Гц, 1Н, Н-1); 13,21, 13,59 (два с, 2Н, ОН-6 + ОН-11 ).

Пример 23.

О-этилоксим 8-№(4-пиридилметил)антразалона (1х)

О НО

IX

Раствор 8^-(4-пиридилметил)антразалона 2с (0,5 г, 1,06 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-этилгидроксиламина (0,4 г, 4,1 ммоль) и ацетатом натрия (0,56 г, 4,1 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 16 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и выпаривали. Остаток растирали со смесью этанола и диэтилового эфира, фильтровали и промывали той же самой смесью с получением 0,5 г (выход 92%) указанного в заголовке соединения 1х.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 448 [М+Н]^{+ 1}Н-ЯМР (200 МГц, ΏΜ8Ο-6₆) δ:

1,12 (т, 1=7,0 Гц, 3Н, СН₃СН₂О); 1,41 (с, 3Н, СН₃); 2,55, 2,98 (два дублета, 1=19,0 Гц, СН₂-10); 2,55 (д, 1=17, 1 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,94 (дд, 1=6,4, 17,1 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 3,62, 4,21 (два дублета, 1=17,3 Гц, 2Н, Ν-СЩ-Ру); 3,95 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,00 (м, 2Н, СН₃СН₂О); 4,48 (д, 1=6,4 Гц, 1Н, Н-7); 7,63 (м, 1Н, Н-3); 7,86 (м, 4Н, Н-1 + Н-2 + С₅Н*); 8,78 (д, 1=6, 6 Гц, 2Н, С₅Н₅К); 13,04, 13,49 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Пример 24.

О-(4-пиридилметил)оксим 8-№(4-пиридилметил)антразалона (1ζ)

О НО

1ζ

Раствор 8-Ы-(4-пиридилметил)антразалона 2с (0,5 г, 1,06 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-(4-пиридилметил)гидроксиламина (0,42 г, 2,61 ммоль) и ацетатом натрия (0,36 г, 2,61 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 4 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Остаток флэшхроматографировали на силикагеле с использованием смеси хлороформ-метанол (20:1 по объему) с получением 0,23 г (выход 38%) соединения 1ζ. Соединение превращали в гидрохлоридную соль, как описано в примере 5.

ΕδΙ-Μδ: т/ζ. 577 [М+Н]⁺ 'Н-ЯМР (200 МГц, Ι')ΜδΟ-6₆) δ:

1,38 (с, 3Н, СН₃); 2,57, 3,00 (два дублета, 1=19,0 Гц, 2Н, СН₂-10); 2,76 (д, 1=17,6 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 3,05 (дд, 1=6,3, 17,6 Гц, 1Н, СН(Н)12); 3,61, 4,16 (два дублета, 1=16,6 Гц, 2Н, ΝСН₂-Ру); 3,96 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,56 (д, 1=6,3 Гц, 1Н, Н-7); 5,24 (с, 2Н, ОСН₂Ру); 7,60 (м, 3Н, Н-3 + С₅Н₅\); 7,89 (м, 4Н, Н-1 + Н-2 + С₅Н₅И); 8,67, 8,75 (два дублета, 1=6,3 Гц, 4Н, С₅Н₅П); 13,05, 13,52 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Пример 25.

Оксим антразалона (1аа)

М-аОН

Н_зс-О

Стадия 1.

8-Ы-(3,4-диметоксибензил)антразалон (2а, 1,0 г, 1,89 ммоль) растворяли в смеси метиленхлорида (40 мл) и воды (2 мл) и обрабатывали 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохиноном (^^^, 0,5 г, 1,89 ммоль) при комнатной температуре. После 4 ч реакционную смесь промывали 5% водным гидрокарбонатом натрия (3х200 мл), затем водой. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением 0,61 г (85%) антразалона 26 (К₁=ОСН₃, К2=Н).

ΓΏ-Μδ: 380 [МН]⁺; 362 [М - ΝΒ₃]⁺ ‘Н-ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ:

1,45 (с, 3Н, СН₃); 2,43 (д, 1=17,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,76, 2,84 (два дублета, 1=19,2 Гц, 2Н, СН₂-10); 2,86 (дд, 1=7,3, 17,5 Гц, 1Н, СН(Н)12); 4,08 (с, 3Н, ОСН₃); 5,14 (д, 1=7,3 Гц, 1Н, Н7); 7,37 (д, 1=8,5 Гц, 1Н, Н-3); 7,76 (дд, 1=7,7, 8,5 Гц, 1Н, Н-2); 8,01 (д, 1=7,7 Гц, 1Н, Н-1); 13,14 (с, 1Н, ОН-11); 13,60 (с, 1Н, ОН-6).

Стадия 2.

Раствор антразалона 2с1 (0,5 г, 1,32 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (0,14 г, 2 ммоль) и ацетатом натрия (0,27 г, 2 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 3 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Остаток флэшхроматографировали на силикагеле с использованием смеси хлороформ-метанол (48:2 по объему) с получением 0,06 г (выход 12%) соединения 1аа в виде смеси 1:1 Е- и Ζ-оксимов.

ΕδΙ-Μδ: т/ζ 395 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (200 МГц, ДМСО-ф) δ:

1,43, 1,59 (два синглета, 6Н, СН₃); 2,28, 2,51 (два дублета, 1=14,7 Гц, 2Н, СН(Н)-12 двух оксимов); 2,60, 2,72 (два дублета, 1=18,6 Гц, 2Н, СН₂-10 одного изомера); 2,58, 3,13 (два дублета, 1=18,6 Гц, 2Н, СН₂-10 другого изомера); 2,68, 2,90 (два дублета, 1=7,6, 14,7 Гц, 1Н, СН(Н)-12 двух оксимов); 3,96 (с, 3Н, ОСН₃); 4,65, 4,68 (два дублета, 1=7,6 Гц, 2Н, Н-7 двух оксимов);

7,64 (м, 1Н, Н-3); 7,85 (м, 2Н, Н-1 + Н-2); 10,45, 10,52 (два синглета, 2Н, ЫОН двух оксимов); 13,00, 13,60 (широкие сигналы, 2Н, ОН-6 + ОН11).

Пример 26.

О-метилоксим антразалона (1аЬ)

о. но

н₃с - о о но

1аЬ

Раствор антразалона 26 (0,5 г, 1,32 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-метилгидроксиламина (0,33 г, 3,9 ммоль) и ацетатом натрия (0,53 г, 3,9 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 12 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Остаток флэш-хроматографировали на силикагеле с использованием смеси дихлорметан-ацетон (90:10 по объему) с получением 0,12 г (выход 23%) соединения 1аЬ.

ΕδΙ-Μδ: т/ζ 409 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (200 МГц, ДМСО-06) δ:

1,71 (два синглета, 6Н, СН₃); 2,60 (д, 1=15,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,74, 3,32 (два дублета, 1=18,5 Гц, 2Н, СН2-10); 3,02 (дд, 1=6,2, 15,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 3,80 (с, 3Н, Νθ№₃); 4,08 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,94 (д, 1=6,2 Гц, 1Н, Н-7); 7,37 (дд, 1=1,3, 8,6 Гц, 1Н, Н-3); 7,75 (дд, 1=7,7, 8,6 Гц, 1Н, Н-2); 8,01 (дд, 1=1,3, 7,7 Гц, 1Н, Н-1); 13,22,

13,64 (с, 2Н, ОН-2 + ОН-11).

Пример 27.

О-этилоксим антразалона (1ас) I и II

О но

н_эс - о о но

1ас

Раствор антразалона 26 (0,5 г, 1,32 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом

О-этилгидроксиламина (0,51 г, 5,2 ммоль) и ацетатом натрия (0,71 г, 5,2 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 24 ч.

ΙΊ

Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до небольшого объема. Остаток флэш-хроматографировали на силикагеле с использованием смеси гексан-этилацетатметанол (50:20:5 по объему) с получением 0,085 г (выход 15%) менее полярного изомера соединения 1ас-1, т.пл. 258-261°С (разл.) и 0,095 г (выход 17%) более полярного изомера соединения 1ас-11, т.пл. 147-149°С.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 423 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (400 МГц, СБС1) δ, менее полярный изомер:

1,19 (т, 1=6,8 Гц, 3Н, СН₃СН₂О); 1,60 (с, 3Н, СН₃); 2,82 (м, 2Н, СН₂-12); 2,91 (м, 2Н, СН₂-

10) ; 4,05 (м, 2Н, СН₃СН₂о); 4,08 (с, 3Н, 4ОСН₃); 4,97 (м, 1Н, Н-7); 7,37 (дд, 1=1,3, 8,6 Гц, 1Н, Н-3); 7,76 (дд, 1=7,7, 8,6 Гц, 1Н, Н-2); 8,01 (дд, 1=1,3, 7,7 Гц, 1Н, Н-1); 13,19, 13,62 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

'Н-ЯМР (400 МГц, СБС1₃) δ, более полярный изомер:

1,23 (т, 1=7,3 Гц, 3Н, СН3СН2О); 1,72 (с, 3Н, СН₃); 2,60 (д, 1=15,8 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,74, 3,34 (два дублета, 1=18,4 Гц, 2Н, СН2-10); 3,02 (дд, 1=6,4, 15,8 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 4,03 (м, 2Н, СН₃СН₂О); 4,08 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 4,95 (д, 1=6,4 Гц, 1Н, Н-7); 7,37 (д, 1=8,5 Гц, 1Н, Н-3); 7,76 (дд, 1=7,7, 8,5 Гц, 1Н, Н-2); 8,01 (д, 1=7,7 Гц, 1Н, Н1); 13,23, 13,65 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-

11) .

Пример 28.

О-бензилоксим антразалона (1аб)

О но
н3с - О о но	1а0

Раствор антразалона 2ά (0,43 г, 1,13 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом О-бензилгидроксиламина (0,36 г, 2,26 ммоль) и ацетатом натрия (0,31 г, 2,26 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 16 ч. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в дихлорметан и воду, органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и выпаривали. Остаток растирали с диэтиловым эфиром с получением 0,28 г (выход 51%) соединения 1аб.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 485 [М+Н]⁺;

'Н-ЯМР (200 МГц, ДМСО-03) δ: 1,43 (с, 3Н, СН₃); 2,56 (д, 1=16,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,62, 2,76 (два дублета, 1=18,0 Гц, 2Н, СН₂-10); 2,78 (дд, 1=6,1, 16,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 3,97 (с, 3Н, 4ОСН₃); 4,68 (д, 1=6,1 Гц, 1Н, Н-7); 4,97 (с, 2Н, СН₂РЬ); 7,25 (м, 5Н, РЬ); 7,62 (м, 1Н, Н-3); 7,87 (м, 2Н, Н-1 = Н-2); 13,03, 13,62 (с, 2Н, ОН-6 + ОН-11 ).

Пример 29.

О-метилоксим 8-Ν- [2-(4-пиридил)ацетил] антразалона (1ае) о но

1ае

К раствору О-метилоксима антразалона 1аЬ (0,117 г, 0,29 ммоль) в 5 мл безводного дихлорметана добавляли 2-(4-пиридил)-уксусную кислоту (0,05 г, 0,29 ммоль), триэтиламин (0,04 мл, 0,29 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0,017 г, 0,145 ммоль). Реакционную смесь охлаждали при 0°С и добавляли Ν,Ν'диизопропилкарбодиимид (0,051 мл, 0,33 ммоль) при перемешивании. Реакцию перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре, выливали в буферный раствор с рН 3 и экстрагировали дважды дихлорметаном. Органическую фазу промывали буферным раствором с рН 7 и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток растирали с диэтиловым эфиром. Твердое вещество собирали и промывали основательно диэтиловым эфиром с получением 0,08 г (выход 52%) указанного в заголовке соединения (1ае).

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 528 [М+Н]⁺;

‘Н-ЯМР (200 МГц, ДМСО-б₆) δ:

1,92 (с, 3Н, СН₃); 2,66 (д, 1=17,1 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,97 (дд, 1=6,4, 17,1 Гц, 1Н, СН(Н)12); 2,67, 3,35 (два дублета, 1=18,2 Гц, 2Н, СН₂10); 3,74 (с, 3Н, ЬЮСН₃); 3,80 (с, 2Н, СОСН₂Ру);

3,98 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 5,69 (д, 1=6,4 Гц, 1Н, Н-7); 7,07 (д, 1=5,9 Гц, 2Н, С5Н5Щ; 7,66 (м, 1Н, Н-3);

7,87 (м, 2Н, Н-1 + Н-2); 8,20 (д, 1=5,9 Гц, 2Н, С₅Н₅Щ; 12,87, 13,40 (с, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Пример 30.

О-этилоксим 8-Ν- [2-(4-пиридил)ацетил] антразалона (1а1)

О но

1а£

Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 28, с использованием О-этилоксима антразалона 1ас (0,15 г, 0,36 ммоль), 2-(4-пиридил)уксусной кислоты (0,06 г, 0,36 ммоль), триэтиламина (0,05 мл, 0,36 ммоль), 4-диметиламинопиридина (0,02 г, 0,178 ммоль) и Ν,Ν'-диизопропилкарбодиимида (0,063 мл, 0,41 ммоль) в качестве исходных продуктов: получали 0,11 г (57%) соединения 1а£.

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 542 [М+Н]⁺;

‘Н-ЯМР (200 МГц, ДМСО-06) δ:

1,11 (т, 1=7,0 Гц, 3Н, СН₃СН₂О); 1,93 (с,

3Н, СН3); 2,68 (д, 1=16,9 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,71,

3,35 (два дублета, 1=18,2 Гц, 2Н, СН₂-10); 2,98 (дд, 1=6, 6, 16,9 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 3,79 (с, 2Н,

СОСН₂Ру); 3,98 (с, 3Н, 4-ОСН₃); 3,99 (м, 2Н,

СН₃СН₂О); 5,68 (д, 1=6,6 Гц, 1Н, Н-7); 7,07 (д,

1=6, 1 Гц, 2Н, С5Н5Щ; 7,67 (м, 1Н, Н-3); 7,87 (м,

2Н, Н-1 + Н-2); 8,21 (д, 1=6,1 Гц, 2Н, СзНН); 13,5 (широкий сигнал, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Пример 31.

Оксим 4-деметокси-8-Ы-(3,4-диметоксибензил)антразалона (1ад) о но

1ад

Стадия 1. 4-деметоксидаунорубицин (3Ь, 1,38 г, 3 ммоль) и 3,4-диметоксибензиламин (2 г, 12 ммоль) реагировали, как описано в примере 1, с образованием 1 г (выход 66%) 4диметокси-8-Ы-(3,4-диметоксибензил)антразалона 2е (К₁=Н, К₂=3,4-диметоксибензил) т.пл. 112-115°С.

ΓΑΒ-Μδ(+): т/ζ 500 [МН]⁺; 350 [М СН2(С6Н3) (ОСН3)22 + 2Н]⁺;

Стадия 2.

Раствор 4-диметокси-8^-(3,4-диметоксибензил)антразалона 2е (0,5 г, 1 ммоль) в 30 мл этанола обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (0,15 г, 2,16 ммоль) и ацетатом натрия (0,29 г, 2,16 ммоль) и нагревали при температуре дефлегмации в течение 8 ч. Осадок фильтровали, промывали смесью этанол-вода, затем этанолом и сушили с получением 0,4 г (выход 77%) указанного в заголовке соединения 1ад.

Ε8Ι-Μ8; т/ζ 515 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (200 МГц, СБС1₃) δ:

1,55 (с, 3Н, СН₃); 2,72 (д, 1=17,0 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,80, 2,92 (два дублета, 1=18,4 Гц, 2Н, СН₂-10); 2,86 (м, 1Н, СН(Н)-12); 3,19, 3,80 (два дублета, 1=12,7 Гц, 2Н, Ν-ίΊΓ-Λΐ'); 3,84, 3,86 (два синглета, 6Н, ОСН₃); 4,61 (д, 1=5,7 Гц, 1Н, Н-7); 6,70 (м, 3Н, С₆Н₃-(ОСН₃)₂); 6,90 (с, 1Н, ΝΟΗ); 7,85 (м, 2Н, Н-2 + Н-3); 8,35 (м, 2Н, Н-1 + Н-4); 13,16, 13,30 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН11).

Пример 32.

О-метилоксим 4-деметокси-8-Ы-(3,4-диметоксибензил)антразалона (1аГ) о но

1аЪ

Действуя, как описано в примере 30, получали 0,37 г (выход 70%) указанного в заголовке соединения 1аГ с использованием 4-диметокси8-№(3,4-диметоксибензил)антразалона 2е (0,5 г, 1 ммоль), гидрохлорида О-метилгидроксиламина (0,18 г, 2,15 ммоль) и ацетата натрия (0,29 г, 2,15 ммоль) в качестве исходных продуктов .

Ε8Ι-Μ8: т/ζ 529 [М+Н]⁺;

¹Н-ЯМР (200 МГц, СВС1₃) δ:

1,58 (с, 3Н, СН₃); 2,62 (д, 1=17,5 Гц, 1Н, СН(Н)-12); 2,80 (дд, 1=6,1, 17,5 Гц, 1Н, СН(Н)12); 2,80, 2,92 (два дублета, 1=18,5 Гц, 2Н, СН₂

10); 3,18, 3,80 (два дублета, 1=12,7 Гц, 2Н, ΝСН₂-Аг); 3,81, 3,84, 3,86 (три синглета, 9Н, ОСН₃); 4,58 (д, 1=6,1 Гц, 1Н, Н-7); 6,80 (м, 3Н, С₆Н₃-(ОСН₃)₂); 7,85 (м, 2Н, Н-2 + Н-3); 8,36 (м, 2Н, Н-1 + Н-4); 13,15, 13,30 (два синглета, 2Н, ОН-6 + ОН-11).

Пример 33.

Таблетки, содержащие следующие ингредиенты, могут быть приготовлены общепринятым способом:

Ингредиент

Соединение 1

Лактоза

Кукурузный крахмал

Тальк

Стеарат магния

Общий вес

На таблетку 25,0 мг 125,0 мг 75,0 мг 4,0 мг 1,0 мг 230,0 мг

Пример 34.

Капсулы, содержащие следующие ингредиенты, могут быть приготовлены общепринятым способом:

Ингредиент

Соединение 1

Лактоза

Кукурузный крахмал

Тальк

Вес капсулы

На капсулу 50,0 мг 165,0 мг 20,0 мг 5,0 мг 240,0 мг

Пример 35.

о но

Н₃С-0 о но

Следуя методикам, описанным в вышеприведенных примерах, получают 8-Νпропилантразолона О-метилоксим в виде хлористо-водородной соли. Т.пл. 226-229°С.

Claims (9)

1. Соединение формулы 1 где К₁ выбран из водорода и низшего алкоксила, К₂ выбран из водорода, С_1-4-алкила, аллила, бензила, необязательно замещенного одним-тремя заместителями, выбранными из группы, включающей трифторметил, С_1-4-алкил, С_1-4-алкокси, галоген и гидрокси; пиридинометил, пиридинометилкарбонил;

К₃ выбирают из групп гидроксила, С_1-4алкокси, бензилокси, метиламино или 4пиридинметилокси, 4-морфолинила, 4-метилпиперазинила, при условии, что когда К₁ представляет собой метоксигруппу и

К₃гидроксигруппу, К₂ отличен от 4-пиридинметила, или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, в котором К₁ выбран из водорода и метокси, К₂ выбран из водорода, метила, аллила, бензила, 3-бромбензила, 4трифторметилбензила, 4-метоксибензила, 3,4диметоксибензила, 3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензила, пиридинметила, никотиноила,

К₃ выбран из гидрокси, метокси, этокси, бензилокси, 4-пиридинметилокси, метиламино, 4-морфолинила, 4-метилпиперазинила, или его фармацевтически приемлемая соль.

3. Соединение по п.1, которое выбрано из оксима 8^-(3,4-диметоксибензил)антразалона, оксима δ-Ν-аллилантразалона, О-метилоксима δ-Ν-аллилантразалона и О-этилоксима антразалона, или их фармацевтически приемлемых солей.

4. Способ получения соединения формулы 1, определенной в п.1,

а) взаимодейстивем соединения формулы 2 где К₁ и К₂ имеют указанные в п. 1 значения, с соединением формулы

К₃-КН₂ где К₃ имеет указанные в п. 1 значения, и (Ь) при необходимости, преобразование полученного таким образом соединения формулы (1) в другое соединение формулы (1) и/или (с) при необходимости, превращение соединения формулы (1) в его фармацевтически приемлемую соль.

5. Способ по п.4, где на стадии (а) соединение формулы 2, определенное в п.4, взаимодействует с соединением формулы Κ₃-ΝΗ₂·ΗΑ, где НА обозначает неорганическую кислоту, в органическом растворителе в присутствии органического или неорганического основания.

6. Фармацевтическая композиция, которая содержит в качестве активного ингредиента соединение формулы 1, определенное в любом из пп.1-3, или его фармацевтически приемлемую соль, в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.

7. Соединение формулы 1, определенное в любом из пп.1-3, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении организма человека или животного.

8. Применение соединения формулы 1, определенного в любом из пп.1-3, или его фармацевтически приемлемой соли при получении лекарственного средства для лечения амилоидоза АЬ, болезни Альцгеймера или синдрома Дауна.

9. Способ лечения человека или животного, страдающего от заболевания амилоидоза, или подверженного этому заболеванию, предусматривающий введение ему нетоксичного и эффективного количества соединения формулы (1), определенного в любом из пп.1-3, или его фармацевтически приемлемой соли.