EA001386B1

EA001386B1 - Композиции, содержащие антигрибковый агент и ацетатный буфер

Info

Publication number: EA001386B1
Application number: EA199800938A
Authority: EA
Inventors: Маниш Дж. Неруркар; Вильям А. Ханке; Майкл Дж. Кауфман
Original assignee: Мерк Энд Ко., Инк.
Priority date: 1996-04-19
Filing date: 1997-04-15
Publication date: 2001-02-26
Also published as: CY2374B1; ES2198569T3; IS4858A; PE63998A1; SA97180104B1; NO984860L; TR199802102T2; CN1132624C; BR9708706A; BG102857A; BR9708706B1; EA199800938A1; SK144898A3; ATE241999T1; EP0904098B1; HUP9901586A3; YU45098A; DE69722615D1; HRP970201A2; IL126479A0

Abstract

Изобретение представляет фармацевтическую композицию для внутривенного введения пациенту, содержащую а) фармацевтически эффективное количество соединения, имеющего формулу Iи его фармацевтически приемлемых солей, б) фармацевтически приемлемое количество эксципиента, такого как сахар-наполнитель или комбинация сахаров-наполнителей, эффективных для образования лиофилизованной лепешки, и в) фармацевтически приемлемое количество ацетатного буфера, эффективного для обеспечения рН между около 5 и 7.

Description

Это изобретение относится к композициям для лечения и/или профилактики грибковых инфекций.

Существует возрастающая потребность в новых антигрибковых средствах, которые эффективны против условно-патогенных микотических инфекций, вызванных такими агентами, как Сап4Ма, АзрегдШиз, Сгур!ососсиз и Рпеитосу8118 сагти. Лечение их в настоящее время, т.е. лечение амфотерицином В и флюконазолом, неадекватно, вследствие их токсичности и отбора по устойчивости. Композиции по настоящему изобретению рассматриваются как безопасные и фунгицидные.

Композиции по настоящему изобретению содержат соединение, которое можно использовать в качестве антибиотика, особенно в качестве антигрибкового средства или в качестве средства против простейших. В качестве антигрибкового средства его можно использовать для борьбы с нитеобразными грибами и дрожжами. Особенно его легко можно приспособить для применения при лечении микотических инфекций у млекопитающих, в особенности инфекций, вызванных видами Сап4Ма, такими как С. аМсапз, С. 1гор1са118; С. кгизе1, С. §1аЬга!а и С. р8еи4о!гор1са118, и видами АзрегдШиз, такими как А. Гит ΐ да I из, А. Науиз и А. тдег. В частности, композиции содержат соединение, которое, как было обнаружено, эффективно против устойчивых к амфотерицину В и флюконазолу изолятов Сап4Ма. Композиции можно также использовать для лечения и/или профилактики пневмонии Рпеитосузйз саппи, к которой особенно восприимчивы пациенты с ослабленным иммунитетом, такие как пациенты, страдающие СПИДом.

Композиции настоящего изобретения являются безопасными, стабильными, лиофилизованными лекарственными формами для пересоздания, которые особенно полезны для доставки антигрибковых средств пациентам, нуждающимся в таких средствах.

Краткое изложение сущности изобретения

Это изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей

а) фармацевтически эффективное количество соединения (именуется здесь также «активным ингредиентом»), имеющего формулу

и его фармацевтически приемлемых солей;

б) фармацевтически приемлемое количество ацетатного буфера, эффективного для обеспечения рН около от 4 до 7; и

в) фармацевтически приемлемое количество эксципиента, такого как смесь сахароза/ маннит, для образования лиофилизованной лепешки.

В специфическом воплощении этого изобретения готовую препаративную форму получают в виде раствора 42 мг/мл соединения I, 30 мг/мл сахарозы, 20 мг/мл маннита, 1,5 мг/мл (25 мМ) уксусной кислоты, рН которого устанавливают около 6 гидроксидом натрия. Раствором затем заполняют пузырек на 1 ,25 мл и лиофилизуют. Полученная таким образом лиофилизованная лепешка содержит 52,5 мг соединения I,

62,5 мг сахаров и 31,25 микромолей ацетатного буфера на пузырек. Лиофилизованную лепешку затем пересоздают для использования путем разбавления 21 мл разбавителя. 20 мл продукта разбавления отбирают и воссоздают в мешке для инфузии на 200 мл. Пациенту затем вводят инфузией раствор, содержащий около 0,25 мг/мл соединения I, около 0,03 миллимолей или 0,15 миллимолярного ацетатного буфера, около 0,3 мг/мл наполняющих агентов, причем получаемая композиция имеет рН около от 5 до 7.

Подробное описание изобретения

Готовые препаративные формы изобретения обеспечивают повышенную химическую стабильность фармацевтических композиций. Одним преимуществом такой стабильности является длительный срок годности фармацевтического продукта. Предыдущие готовые препаративные формы, с тартратным буфером, содержали фармацевтически значительные количества нежелательных продуктов деградации. Использование забуференной ацетатом готовой препаративной формы приводит к генерации меньшего количества продуктов деградации и более стабильной готовой препаративной форме. Длительный срок фармацевтической годности обеспечивает значительные экономические преимущества.

Было обнаружено, что соединение формулы

и его фармацевтически приемлемые соли значительно более стабильны при хранении, когда их готовят в присутствии ацетатного буфера.

Соединение формулы I заявляется и описывается в патенте И8 А 5378804. Способы его получения раскрываются в этом патенте, а также в патенте И8 А 5552521, который выдан 3 сентября 1996.

Это соединение само очень нестабильно и разрушается различными путями, включая, но не ограничиваясь ими, гидролиз, димеризацию и окисление. Однако с этой нестабильностью ранее боролись путем лиофилизации этого соединения в забуференной тартратом готовой препаративной форме. Эта готовая препаративная форма, однако, хотя она относительно стабильна, приводила к генерации продуктов деградации с относительно высокой скоростью. При использовании ацетатного буфера лиофилизованный продукт более стабилен, содержит меньше нежелательных продуктов деградации при повышенном сроке годности композиции. Это делает его привлекательным в качестве коммерческого продукта.

Настоящее изобретение относится также к способу лечения грибковых инфекций, вызванных Сапб1ба, АкрегдШик и Рпеитосукйк салил, который предусматривает введение композиции, содержащей соединение формулы I, пациенту, нуждающемуся в таком лечении, в количестве, эффективном для лечения грибковой инфекции. Изобретение дополнительно относится к способу профилактики инфекций РпеитосуйЪ саппл у пациента, который предусматривает введение профилактического количества соединения формулы I.

Забуференная ацетатом готовая препаративная форма изобретения включает количество ацетата, эффективное для обеспечения фармацевтически приемлемого значения рН, например, для обеспечении рН окружающей среды в диапазоне от 5 до 8, предпочтительно около от 6 до 7. Для обеспечения фармацевтически приемлемого количества ацетатного буфера, эффективного для достижения желаемого значения рН, можно использовать подходящие количества ацетата натрия и уксусной кислоты или подходящие количества уксусной кислоты и гидроксида натрия. Буфер обычно присутствует в диапазоне от около 12,5 до около 200 мМ, предпочтительно в диапазоне от около 25 до около 50 мМ.

Эксципиенты, такие как наполнители, т. е. сахара-наполнители, используют для обеспечения образования эстетически подходящей лиофилизованной лепешки, твердого разбавления активного ингредиента и сорбции имеющейся влаги. Сахара, которые можно использовать в изобретении, включают сахарозу, лактозу, маннит или их комбинации. Было обнаружено, что сахароза и маннит обеспечивают получение более стабильной готовой препаративной формы и образуют фармацевтически изящную лепешку для композиции. Эксципиенты обычно присутствуют в количествах около 10 - 200 мг/мл, предпочтительное количество их составляет около 4,0 - 60 мг/мл.

Композиции не ограничиваются активным ингредиентом, ацетатным буфером и наполнителем, и могут также включать другие фармацевтически приемлемые разбавители, эксципиенты или носители. Такие готовые препаративные формы пригодны для долговременного хранения в стеклянных контейнерах, обычно используемых в фармацевтической промышленности, например, в концентрированной форме в стандартных боросиликатных стеклянных контейнерах типа I И8Р.

Композиции изобретения обычно получают следующим образом

1) наполнитель или комбинацию таких наполнителей растворяют в воде;

2) добавляют уксусную кислоту и, если нужно, рН устанавливают около 3,7;

3) добавляют соединение I и растворяют с последующим установлением рН основанием от около 5 до около 6;

4) раствор фильтруют и наполняют им пузырек для лиофилизации и замораживают при -50°С;

5) замороженную готовую препаративную форму лиофилизуют при -20°С со второй сушкой при 15°С (полный цикл требует свыше двух дней); и

6) лиофилизованные пузырьки закрывают пробкой и хранят приблизительно при 5°С.

Лиофилизованные готовые препаративные формы можно разбавить во время введения подходящим разбавителем для получения конечной концентрации, например, около 5,0 мг/мл, которая пригодна для переноса в мешок для инфузии для использования пациентом, нуждающимся в целевом активном ингредиенте.

Термин «фармацевтически приемлемые соли» означает нетоксичные соли активного ингредиента, включая моно-, ди- и трикислотные формы, которые обычно получают реакцией свободного основания с подходящей органической или неорганической кислотой. Фармацевтически приемлемые соли, пригодные в виде кислотно-аддитивных солей, а также соли, обеспечивающие анион четвертичной соли, являются солями, полученными из кислот, таких как хлористо-водородная, бромистоводородная, фосфорная, серная, малеиновая, лимонная, уксусная, винная, янтарная, щавелевая, яблочная, глутаминовая, памоевая и тому подобные кислоты, и включают другие кислоты, связанные с фармацевтически приемлемыми солями, перечисленными в 1оигпа1 оГ РйагтасеиБса1 8с1епсе, 66, 2 (1977).

Термин «фармацевтически эффективное количество» будет означать такое количество активного ингредиента, которое будет вызывать биологическую или медицинскую реакцию ткани/системы или животного, которую добивается исследователь или практикующий врач.

Композиции изобретения можно вводить пациентам, для которых необходимо лечение и/или профилактика грибковых инфекций. Их можно также использовать при лечении видов СапйИа, таких как С. а1Ысапз, С. 1гор1саЙ8, С. Кгизец С. §1аЬга!а и С. р8еийо1гор1еаЙ8, и видов АзрегдШиз, таких как А. ГигпщаШз. А. йауиз и А. пщег. Их можно также использовать для лечения и/или профилактики пневмонии Рпеитосузйз саппй, к которой особенно восприимчивы пациенты с ослабленным иммунитетом, такие как пациенты, страдающие СПИДом.

Схему приема с использованием композиций настоящего изобретения выбирают в соответствии с рядом факторов, включая тип, вид, возраст, массу, пол и медицинское состояние пациента; тяжесть состояния, которое лечат; путь введения; функцию почек и печени пациента; и конкретно применяемый активный ингредиент или его соль. Обычно сведущий в данной области практикующий врач может легко определить и прописать эффективное количество этого лекарственного средства, требуемого для профилактики, противодействия или задержки прогресса этого состояния.

Наиболее предпочтительные дозы активного ингредиента для внутривенного введения будут варьировать от около 1,67 до около 33 мкг/кг/мин при скорости инфузии около 200 мл/ч. Чтобы ввести это количество активного ингредиента, композиция изобретения должна иметь от 0,025 до 0,50 мг/мл активного ингредиента для пациента с массой 50 кг.

Соединение I, активный ингредиент, обычно получают следующим образом.

Исходное соединение II формулы

восстанавливают для получения соединения III формулы

которое затем превращают в соединение IV формулы

но

которое стереоселективно превращают в соединение 1 путем замены фенилтиогруппы.

По альтернативному способу соединение II подвергают реакции с тиофенолом для получения соединения ^-а формулы

Соединение ^-а затем восстанавливают в соединение IV формулы

которое стереоселективно превращают в соединение I путем замены фенилтиогруппы.

Получение соединения I.

1. Синтез и выделение соединения III.

Соединение II (15,9 г, чистота 89% по площади пика, 3,4% воды, 0,0128 моль) добавляли к сухому ТГФ (0,64 л) и суспензию сушили до содержания <10 мол.% воды кипячением с обратным холодильником через слой молекулярных сит 3 А. Добавляли дополнительный сухой ТГФ для воссоздания смеси до первоначального объема и суспензию охлаждали до <4°С на бане лед/вода/метанол.

В течение десяти минут добавляли неразбавленный ВН₃-8Ме₂ (10,91 г, 0,144 моль) и реакционную смесь сохраняли при 0-4°С. Протекание реакции контролировали по ВЭЖХ до тех пор, пока отношение исходного материала к продукту не было 1:1, что указывало на окончание реакции (3,5 ч). После 4 ч смесь охлаждали до -12°С и медленно гасили 2Н НС1 (0,036 л). Раствор разбавляли до 1,14 л водой. Анализ показал, что выход соединения III был 6,60 г (47%).

Раствор после гашения разбавляли до 4 л и загружали в колонку под средним давлением с адсорбентом ЫСйгоргер КР-С18 (158 г). После загрузки колонку промывали 1,2 л воды и амин элюировали 1,9 л смеси 1:4 (об./об.) ацетонитрил/вода и затем 0,38 л смеси 1:3 (об./об.) ацетонитрил-вода.

Обогащенные фракции (>80% по площади) объединяли и разбавляли водой до получения раствора 1:7,3 (об./об.) ацетонитрил-вода (всего 1,70 л). Эту смесь загружали в ту же самую колонку, описанную выше, и колонку промывали 0,57 л воды. Целевое соединение элюировали 0,57 л метанола. Обогащенные фракции (>85% по площади) объединяли и концентрировали роторным испарением при статическом высоком вакууме, получая 6,81 г (чистота 87 мас.%, 6,8 мас.% воды) содержащей 5,92 г соединения III (где К¹ представляет диметилтридецил) гидрохлоридной соли, выделенной с выходом 43%.

2. Получение фенилсульфида (соединение IV).

Соединение III (5,80 г по анализу, 0,00533 моль) загружали в 0,23 л сухого ацетонитрила и охлаждали до -5°С, в этой точке добавляли тиофенол (3,10 г, 0,028 моль). Для того чтобы поддерживать температуру реакционной смеси ниже 0°С ТЕЛ (трифторуксусную кислоту) (36 г,

24,5 мл, 0,318 моль.) добавляли на протяжении 20 мин. Реакционную смесь выдерживали при температуре от -1 0 до 0°С до тех пор, пока анализ ВЭЖХ не показал <3% (по площади) исходного материала (3,75 ч). В это время медленно (1 ч) добавляли охлажденную воду (0,56 л) при охлаждении реакционной смеси для поддержания температуры ниже 5°С. Анализ показал, что выход а- и β-фенилсульфидного аддукта в виде трифторацетатной соли был 4,82 г (71%).

Этот раствор загружали в ту же самую колонку, описанную в стадии 1 , и колонку промывали водой (0,57 л), затем адсорбированные органические соединения элюировали метанолом (0,50 л). Обогащенные фракции концентрировали роторным испарением в статическом высоком вакууме. Это давало 7,20 г (чистота 57 мас.%, 5,1 мас.% воды) сырой трифторацетатной соли фенилсульфида в виде аморфного пенистого твердого продукта. Исправленный выход в стадии выделения фенилсульфида в виде смеси 93:7 диастереомеров а- и β-аминаля был

4,10 г (61%).

3. Превращение соединения IV в соединение Ы.

Сырую трифторметансульфонатную соль фенилсульфида (8,4 г сырой соли, чистота 57 мас.%, 0,00377 моль) добавляли к этилендиамину (24 мл) при перемешивании при комнатной температуре. Получаемый раствор перемешивали 1,5 ч до завершения замещения, затем добавляли метанол (40 мл), затем уксусную кислоту (45 мл), поддерживая температуру ниже 25°С охлаждением на ледяной бане. Получали густую суспензию. Для растворения суспензии добавляли воду (1 60 мл) и водный слой экстрагировали, осторожно встряхивая с гексаном (75 мл). Слой гексана обратно экстрагировали водой (40 мл) и объединенный водный слой фильтровали через сплавленную с фильтром стеклянную воронку со средней пористостью, затем очищали препаративной ВЭЖХ с использованием колонки С 18 с диаметром 50 мм и с использованием в качество элюента смеси 22% ацетонитрила/78% 0,15% водной уксусной кислоты. Обогащенную фракцию лиофилизовали, получая 4,2 г соединения Ы в виде диацетатной соли с чистотой 85% и с выходом на стадии выделения 78%.

4. Кристаллизация соединения Ы.

Твердый продукт (2,3 г) растворяли в этаноле (25 мл) и затем добавляли воду (2,7 мл). Раствор пропускали через сплавленную с фильтром стеклянную воронку для удаления постороннего материала. К этому фильтрату добавляли уксусную кислоту (0,14 мл), затем медленно добавляли (1,75 ч) этилацетат (14 мл).

В раствор вносили затравку и слой затравки выдерживали в течение 1 ч. Остальную часть этилацетата (32 мл) добавляли в течение 5 ч и выдерживали дополнительно 1 ч. Кристаллический твердый продукт собирали на сплавленной с фильтром стеклянной воронке и промывали раствором этанол/этилацетат/вода (6 мл/9 мл/0,5 мл, соответственно). Сырой осадок сушили потоком азота, получая 1,91 г (1,75 г по данным анализа, 88% выделение) диацетатной соли соединения 1-1.

Пример I. Получение готовой препаративной формы I.

Ингредиент

Соединение I Сахароза Маннит

Количество мг/мл мг/мл мг/мл

Уксусная кислота 1,5 мг/мл

Гидроксид натрия по необходимости до рН от 5 до 6,2

Объем наполнения от 0,875 до 1,8 мл

Типично к мерной колбе на 25 мл добавляли 0,75 г сахарозы и 0,5 г маннита, около 17,5 мл воды, 0,5 мл раствора 75 мг/мл уксусной кислоты и 42 мг/мл эквивалента соединения I. Раствор смешивали и рН устанавливали до 6 с использованием 1 М ΝαΟΗ. Объем устанавливали добавлением воды и подтверждали рН. Раствор фильтровали через фильтр-шприц М111ех-ОУ и вносили в стеклянные трубчатые склянки на 10 мл по 1,75 мл в каждую. Склянки частично закрывали пробками для лиофилизации и лиофилизовали, получая твердую лиофилизованную лепешку на дне склянки.

Лиофилизованную готовую препаративную форму разбавляли 10,5 мл и 10 мл отбирали и разбавляли в 200 мл, получая конечную концентрацию 0,25 мг/мл, перед введением пациен ту.

Были получены, как описано выше, дополнительные готовые препаративные формы, содержащие следующие ингредиенты (каждую из этих готовых препаративных форм получали при концентрации раствора 40-42 мг/мл активного ингредиента).

Таблица 1

Пример	Буфер	Сахар (а)
2	50 мМ тартрата (7,5 мг/мл)	Без сахара
3	50 мМ тартрата (7,5 мг/мл)	Лактоза (30 мг/мл) Маннит (20 мг/мл)
4	50 мМ тартрата (7,5 мг/мл)	Маннит (50 мг/мл)
5	25 мМ ацетата (1 ,5 мг/мл)	Лактоза (30 мг/мл) Маннит (20 мг/мл)
6	50 мМ тартрата (7,5 мг/мл)	Сахароза (50 мг/мл)
7	25 мМ ацетата (1,5 мг/мл)	Сахароза (50 мг/мл)

8

50 мМ ацетата (3,0 мг/мл)

Лактоза (30 мг/мл) Маннит (20 мг/мл)

Готовые препаративные формы хранили в лиофилизованном состоянии при 5°С и испытывали с интервалами около 4 недель на стабильность. Стабильность и образование продуктов деградации определяли градиентной ВЭЖХ с использованием стандартных способов, известных специалистам в данной области.

Неожиданно было обнаружено, что готовые препаративные формы 1, 5, 7 и 8 были значительно более стабильны и обнаруживали значительно меньше нежелательных продуктов деградации, чем другие готовые препаративные формы.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Фармацевтическая композиция для внутривенного введения пациенту, содержащая

а) фармацевтически эффективное количество соединения, имеющего формулу и его фармацевтически приемлемых солей,

б) фармацевтически приемлемое количество эксципиента, такого как сахар-наполнитель или комбинация сахаров-наполнителей, эффективных для образования лиофилизованной лепёшки; и

в) фармацевтически приемлемое количество ацетатного буфера, эффективное для обеспечения фармацевтически приемлемого рН.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, содержащая

а) фармацевтически эффективное количество соединения I;

б) между около 10-200 мг/мл эксципиента, такого как сахар-наполнитель или комбинация сахаров-наполнителей, эффективных для образования лиофилизованной лепёшки; и

в) фармацевтически приемлемое количество ацетатного буфера, эффективного для обеспечения рН между около 5 и 7.
3. Композиция по п.2, содержащая около 5-200 мг/мл соединения I или его фармацевтически приемлемой соли, от около 1 2,5 до около 200 мМ ацетатного буфера, около 1 0-200 мг/мл наполняющего агента и воду.
4. Композиция по п.3, содержащая около 30-50 мг/мл соединения I или его фармацевтически приемлемой соли, около 20-60 мМ ацетатного буфера, около 30-70 мг/мл сахаранаполнителя или комбинации сахаровнаполнителей, эффективных для образования лиофилизованной лепёшки, и воду.
5. Композиция по п.4, содержащая 42 мг/мл соединения I или его фармацевтически приемлемой соли, 25 мМ ацетатного буфера, 30 мг/мл сахарозы, 20 мг/мл маннита и воду.
6. Композиция по п.4, содержащая 42 мг/мл соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли, 50 мМ ацетатного буфера, 30 мг/мл сахарозы, 20 мг/мл маннита и воду.
7. Способ лечения и/или профилактики грибковых инфекций млекопитающего, включающий внутривенное введение млекопитающему фармацевтически эффективного количества композиции по п.1.
8. Способ по п.7, где млекопитающим является человек.
9. Способ лечения инфекции, вызванной СапФба зр., у пациента, который предусматривает введение этому пациенту эффективного количества композиции по п. 1.
10. Способ лечения инфекции, вызванной СапФба зр., у пациента, который предусматривает введение этому пациенту эффективного количества композиции по п.5.
11 . Способ лечения инфекции, вызванной СапФба зр., у пациента, который предусматривает введение этому пациенту эффективного количества композиции по п.6.
1 2. Способ лечения инфекции, вызванной АзрегдШиз зр, у пациента, который предусматривает введение этому пациенту эффективного количества композиции по п. 1.
13. Способ лечения инфекции, вызванной АзрегдШиз зр., у пациента, который предусматривает введение этому пациенту эффективного количества композиции по п.5.
1 4. Способ лечения инфекции, вызванной АзрегдШиз зр., у пациента, который предусматривает введение этому пациенту эффективного количества композиции по п.6.
15. Способ лечения или профилактики инфекции или состояния, вызванного Рпеишоеузйз еагтп у пациента, нуждающегося в таком лечении или профилактике, который предусматривает введение этому пациенту профилактического или терапевтического количества композиции по п. 1 .
16. Способ лечения или профилактики инфекции или состояния, вызванного Рпеишоеузйз еагтп, у пациента, нуждающегося в таком лечении или профилактике, который предусматривает введение этому пациенту профилактического или терапевтического количества композиции по п.5.
17. Способ лечения или профилактики инфекции или состояния, вызванного Рпеишоеузйз еагтп, у пациента, нуждающегося в таком лечении или профилактике, который предусматривает введение этому пациенту профилактического или терапевтического количества композиции по п.6.
18. Способ получения фармацевтической композиции, содержащей соединение, имеющее формулу и его фармацевтически приемлемые соли, который содержит стадии

а) растворения наполнителя или комбинации наполнителей в воде,

б) добавления уксусной кислоты и установления рН до около 3,7;

в) добавления соединения I и установление рН до от около 5 до около 7 основанием;

г) фильтрования таким образом полученного раствора;

д) замораживания такого раствора и

е) лиофилизации замороженного раствора.