ES2955711T3

ES2955711T3 - Regímenes de dosificación para el tratamiento de infecciones fúngicas

Info

Publication number: ES2955711T3
Application number: ES17767455T
Authority: ES
Inventors: Kenneth Bartizal; Paul Daruwala; Jeffrey Locke; Voon Ong; Taylor Sandison; Dirk Thye
Original assignee: Cidara Therapeutics Inc
Current assignee: Cidara Therapeutics Inc
Priority date: 2016-03-16
Filing date: 2017-03-15
Publication date: 2023-12-05
Anticipated expiration: 2037-03-15
Also published as: EP3430400A4; EP4268896A2; JP2019511496A; JP2022169599A; CN109154603A; JP7322259B2; EP4268896A3; US20240108684A1; US20190216885A1; US11712459B2; WO2017161016A1; JP7224916B2; CA3017485A1; MA43825A; JP2023139211A; EP3430400B1; EP3430400A1

Abstract

La divulgación presenta composiciones, métodos y kits farmacéuticos que presentan regímenes de dosificación y CD101, o una sal o forma neutra farmacéuticamente aceptable del mismo (por ejemplo, acetato de CD101). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Regímenes de dosificación para el tratamiento de infecciones fúngicas

La invención, que se define por las reivindicaciones adjuntas, se refiere al campo del tratamiento de las infecciones fúngicas.

Antecedentes

Las infecciones sistémicas provocadas por Candida son infecciones graves y potencialmente mortales que representan un importante problema de salud pública, particularmente en poblaciones de pacientes muy vulnerables, como ancianos, posquirúrgicos, enfermos críticos y otros pacientes hospitalizados con afecciones médicas graves. Debido a la creciente resistencia a los fármacos antifúngicos existentes, hay una necesidad urgente de desarrollar nuevos agentes antifúngicos y más eficaces para tratar estas infecciones graves. Los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades han advertido recientemente de que las Candidas resistentes al fluconazol pueden suponer una grave amenaza para la salud pública. La US2015087583A1 se titula "dosing regimens for echinocandin class compounds". Sin embargo, desde 2007 no se ha aprobado ningún nuevo agente antifúngico para el tratamiento de la candidemia. Por lo tanto, hay una necesidad de nuevos tratamientos para Candida y otras infecciones fúngicas.

Sumario de la divulgación

La invención se define en las reivindicaciones adjuntas. Hemos descubierto regímenes de dosificación para la administración de CD101, un agente antifúngico de amplio espectro con excelente actividad contra cepas de Candida spp. de tipo salvaje y resistentes a azoles y equinocandinas.

En algunas realizaciones, el método incluye además opcionalmente administrar por vía intravenosa una quinta dosis que incluye 200±25 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la quinta dosis, si se administra, se administra entre el día 28 y el día 30 (por ejemplo, el día 29). En realizaciones adicionales, el método incluye además opcionalmente administrar por vía intravenosa una sexta dosis que incluye 200±25 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la sexta dosis, si se administra, se administra entre el día 35 y el día 37 (por ejemplo, el día 36).

En algunas realizaciones, la primera dosis es de 400 mg de CD101 en forma salina o neutra y la segunda y tercera dosis son cada una de 200 mg de CD101 en forma salina o neutra.

En algunas realizaciones, el método incluye además opcionalmente administrar por vía intravenosa una quinta dosis que incluye 400±25 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la quinta dosis, si se administra, se administra entre el día 28 y el día 30 (por ejemplo, el día 29). En realizaciones adicionales, el método incluye además opcionalmente administrar por vía intravenosa una sexta dosis que incluye 400±25 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la sexta dosis, si se administra, se administra entre el día 35 y el día 37 (por ejemplo, el día 36).

En algunas realizaciones, la primera, la segunda y la tercera dosis son cada una de 400 mg de CD101 o forma salina o neutra del mismo.

En algunas realizaciones, el CD101 en forma salina o neutra se administra hasta que se consigue la erradicación micológica, la mejora de los signos y síntomas clínicos y/o la curación clínica, según se determina por una prueba estándar conocida en la técnica. En algunas realizaciones, la erradicación micológica se define como un cultivo de sangre negativo. En algunas realizaciones, la erradicación micológica se define como dos cultivos de sangre negativos extraídos con un intervalo de > 12 horas sin cultivos de sangre positivos intermedios y sin cambio de la terapia antifúngica para la infección fúngica.

En algunas realizaciones, el CD101 en forma salina o neutra se administra hasta que el sujeto esté libre de síntomas de la infección fúngica, como fiebre, tos, dificultad respiratoria, pérdida de peso, sudores nocturnos, taquicardia, taquipnea, hipotensión y/o hipotermia, según lo determine un médico.

En algunas realizaciones del primer y segundo aspectos, la tercera dosis que incluye 200±25 mg (por ejemplo, 200 mg) de CD101 en forma salina o neutra se administra si en el día 15 no se ha logrado la erradicación micológica y/o la curación clínica en el sujeto. En otras realizaciones del primer y del segundo aspectos, la tercera dosis que incluye 200±25 mg (por ejemplo, 200 mg) de CD101 en forma salina o neutra no se administra si se ha logrado la erradicación micológica y/o la curación clínica en el sujeto. En otras realizaciones del primer y del segundo aspectos, la tercera dosis que incluye 200±25 mg (por ejemplo, 200 mg) de CD101 en forma salina o neutra se administra si en el día 15 el sujeto muestra síntomas de una infección fúngica.

En algunas realizaciones del tercer y el cuarto aspectos, la tercera dosis que incluye 400±25 mg (por ejemplo, 400 mg) de CD101 en forma salina o neutra se administra si en el día 15 no se ha logrado la erradicación micológica y/o la curación clínica en el sujeto. En otras realizaciones del tercer y del cuarto aspectos, la tercera dosis que incluye 400±25 mg (por ejemplo, 400 mg) de CD101 en forma salina o neutra no se administra si en el día 15 se consigue la erradicación micológica y/o la curación clínica en el sujeto. En otras realizaciones del tercer y el cuarto aspectos, la tercera dosis que incluye 400±25 mg (por ejemplo, 400 mg) de CD101 en forma salina o neutra se administra si en el día 15 el sujeto muestra síntomas de una infección fúngica.

En algunas realizaciones, la erradicación micológica se determina mediante un cultivo de sangre negativo. En algunas realizaciones, la erradicación micológica se determina mediante dos cultivos de sangre negativos extraídos con un intervalo de >12 horas sin que haya cultivos de sangre positivos intermedios.

En algunas realizaciones, los síntomas de las infecciones fúngicas comprenden fiebre, tos, dificultad para respirar, pérdida de peso, sudores nocturnos, taquicardia, taquipnea, hipotensión y/o hipotermia.

La infección fúngica es una infección por Candida (por ejemplo, una infección por Candida albicans, C. glabrata, C. dubliniensis, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. orthopsilosis, C. guilliermondii, C. rugosa, C. auris, C. lusitaniae u otras especies de Candida). Las infecciones por Candida incluyen candidemia, candidiasis invasiva, candidiasis orofaríngea, candidiasis esofágica, candidiasis mucosal, candidiasis genital, candidiasis vulvovaginal, candidiasis gastrointestinal, candidiasis rectal, candidiasis hepática, candidiasis renal, candidiasis pulmonar, candidiasis esplénica, otomicosis, osteomielitis, artritis séptica y candidiasis cardiovascular. En algunas realizaciones, la candidiasis cardiovascular es una endocarditis. En algunas realizaciones, la candidiasis mucosa es candidiasis ocular, candidiasis auricular o candidiasis bucal.

En realizaciones de cualquiera de los aspectos anteriores, el CD101 en forma salina o neutra se administra durante un periodo de tiempo de 30 a 180 minutos (por ejemplo, durante 30±5 minutos, 60±5 minutos, 90±5 minutos, 120±5 minutos, 150±5 minutos, 180±5 minutos, 30±10 minutos, 60±10 minutos, 90±10 minutos, 120±10 minutos, 150±10 minutos o 180±10 minutos).

En realizaciones de cualquiera de los aspectos anteriores, el CD101 en forma salina o neutra se administra como una composición farmacéutica acuosa (por ejemplo, una composición farmacéutica que tiene un pH de 4,0 a 8).

En cualquiera de los aspectos anteriores, la sal de CD101 es acetato de CD101.

En algunas realizaciones de los métodos descritos en la presente, el CD101 en forma salina o neutra se administra durante 2-12 dosis (por ejemplo, 2-3 dosis).

Como se usan en la presente, los términos "administración intravenosa" o "administrar por vía intravenosa" se refieren a la inyección intravenosa en bolo o a la infusión de un fármaco a un sujeto.

Por "cantidad suficiente" se entiende la cantidad de un aditivo necesaria para aumentar la biodisponibilidad oral de un fármaco.

Por "infección fúngica" se entiende la invasión de un huésped por hongos patógenos. Por ejemplo, la infección puede incluir el crecimiento excesivo de hongos que normalmente están presentes en o sobre el cuerpo de un ser humano o el crecimiento de hongos que normalmente no están presentes en o sobre un ser humano. En términos más generales, una infección fúngica puede ser cualquier situación en la que la presencia de una población o poblaciones de hongos esté dañando un cuerpo huésped. Por tanto, un humano "padece" hay una infección fúngica cuando una cantidad excesiva de una población fúngica en o sobre el cuerpo de la persona, o cuando la presencia de una población o poblaciones fúngicas está dañando las células u otros tejidos de la persona.

Como se usa en la presente, el término "infección fúngica farmacorresistente" se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con un fármaco, por ejemplo, un fármaco antifúngico. En tales infecciones, el hongo que provoca la infección es resistente al tratamiento con uno o más fármacos antifúngicos (por ejemplo, una cepa de hongo resistente a los fármacos antifúngicos (por ejemplo, una cepa de Candida spp. resistente a los fármacos antifúngicos)). Los fármacos antifúngicos incluyen, entre otros, equinocandinas, compuestos de polieno, flucitosina y compuestos azólicos. Las infecciones fúngicas pueden estar provocadas por un hongo del género, por ejemplo, Candida (por ejemplo, C. albicans, C. glabrata y C. auris) o Aspergillus (por ejemplo, A. fumigatus). En algunas realizaciones, una infección fúngica también puede ser una infección por dermatofitos.

Como se usa en la presente, el término "infección fúngica resistente a equinocandinas" se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con una equinocandina. En tales infecciones, el hongo que provoca la infección es resistente al tratamiento con una o más equinocandinas. La una o más equinocandinas son lipopéptidos cíclicos que inhiben la síntesis de glucano en la pared celular por inhibición del complejo enzimático 1,3-p-D-glucano sintasa. Las una o más equinocandinas a las que se refiere el término "infección fúngica resistente a equinocandinas" incluyen micafungina, caspofungina y anidulafungina, pero no incluyen CD101 ni sus formas salinas o neutras. Por tanto, usando los métodos de la divulgación, puede usarse CD101 o una forma salina o neutra del mismo para tratar infecciones fúngicas resistentes a micafungina, caspofungina y/o anidulafungina.

Como se usa en la presente, el término "infección fúngica resistente a los polienos" se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con un compuesto de polieno. En tales infecciones, el hongo que provoca la infección es resistente al tratamiento con uno o más compuestos de polieno. Los compuestos de polieno son compuestos que se insertan en las membranas fúngicas, se unen al ergosterol y a esteroles estructuralmente relacionados en la membrana fúngica, y alteran la integridad de la estructura de la membrana, provocando por tanto la fuga de componentes celulares del hongo que provoca la infección. Los compuestos de polieno típicamente incluyen grandes anillos de lactona con de tres a ocho enlaces dobles carbono-carbono conjugados y también pueden contener una fracción de azúcar y una fracción aromática. Los ejemplos de compuestos de polieno incluyen, pero no se limitan a, 67-121-A, 67-121-C, anfotericina B, arenomvcina B, aurenina, aureofungina A, aureotuscina, candidina, chinina, demetoxipramicina, dermostatina A, dermostatina B, DJ-400-B1, DJ-400-B2, elizabethina, eurocidina A, eurocidina B, filipina I, filipina II, filipina III, filipina IV, fungicromina, gannibamicina, hamicina, levorina A², lienomicina, lucensomicina, micoheptina, micoticina A, micoticina B, natamicina, nistatina A, nistatina A³, partricina A, partricina B, perimicina A, pimaricina, polifungina B, rapamicina, rectilavendomvcina, rimocidina, roflamicina, tetramicina A, tetramicina B, tetrina A y tetrina B.

Como se usa en la presente, el término "infección fúngica resistente a la flucitosina" se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con el fármaco antifúngico sintético flucitosina. Una marca comercial de flucitosina es Ancobon®®.

Como se usa en la presente, el término "infección fúngica resistente a los azoles" se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con un compuesto azólico. En tales infecciones, el hongo que provoca la infección es resistente al tratamiento con uno o más compuestos azólicos. Los compuestos azólicos a los que se refiere el término "infección fúngica resistente al azol" son compuestos antifúngicos que contienen un grupo azol, que es un anillo heterocíclico de cinco miembros que tiene por lo menos un N y uno o más heteroátomos seleccionados entre N, O o S. Los compuestos azólicos antifúngicos funcionan uniéndose a la enzima 14a-demetilasa y alteran, inhiben y/o evitan su función natural. La enzima 14a-demetilasa es una enzima del citocromo P450 que cataliza la eliminación del grupo C-14 a-metilo del lanosterol antes de que el lanosterol se convierta en ergosterol, un componente esencial de la pared celular fúngica. Por lo tanto, al inhibir la 14a-demetilasa, se inhibe la síntesis de ergosterol. Algunos ejemplos de compuestos azólicos son, entre otros, VT-1161, VT-1598, fluconazol, albaconazol, bifonazol, butoconazol, clotrimazol, econazol, efinaconazol, fenticonazol, isavuconazol, isoconazol, itraconazol, ketoconazol, luliconazol, miconazol, omoconazol, oxiconazol, posaconazol, pramiconazol, ravuconazol, sertaconazol, sulconazol, terconazol, tioconazol y voriconazol.

Como se usa en la presente, el término "terapia antifúngica" se refiere al tratamiento de una infección fúngica usando un fármaco antifúngico. Los fármacos antifúngicos usados en una terapia antifúngica incluyen, entre otros, equinocandinas, compuestos de polieno, flucitosina, compuestos azólicos, enfumafungina y SCY-078, APX001. Como se describe en la presente, un aspecto de la invención es CD101 o una forma salina o neutra para su uso en un método de tratamiento de una infección fúngica en un sujeto en el que ha fallado el tratamiento con una terapia antifúngica. Los fármacos antifúngicos usados en la terapia antifúngica en este aspecto de la divulgación no incluyen CD101 o una forma salina o neutra del mismo.

Como se usa en la presente, el término "terapia con equinocandina" se refiere a un tratamiento para una infección fúngica usando una equinocandina (como micafungina, caspofungina y anidulafungina, pero no una sal del Compuesto 1, o una forma neutra del mismo). Como se describe en la presente, en algunas realizaciones, a un sujeto en el que ha fallado el tratamiento con una equinocandina se le puede administrar una sal del Compuesto 1, o una forma neutra del mismo, para tratar una infección fúngica. En algunas realizaciones, a un sujeto que tiene una infección fúngica se le puede administrar CD101 o una forma salina o neutra del mismo si en la infección fúngica ha fallado el tratamiento con una terapia de equinocandina.

Como se usa en la presente, el término "terapia de polieno" se refiere a un tratamiento para una infección fúngica que usa un compuesto de polieno. Como se describe en la presente, en algunas realizaciones, a un sujeto en el que ha fallado el tratamiento con una terapia de polieno se le puede administrar CD101 o una forma salina o neutra del mismo para tratar una infección fúngica. En algunas realizaciones, puede administrarse CD101 o una forma salina o neutra del mismo a un sujeto que tiene una infección fúngica si en la infección fúngica ha fallado el tratamiento con una terapia de polieno.

En la presente, el término "terapia con azoles" se refiere al tratamiento de una infección fúngica con un compuesto azólico. Los ejemplos de compuestos azólicos antifúngicos incluyen, entre otros, VT-1161, VT-1598, fluconazol, albaconazol, bifonazol, butoconazol, clotrimazol, econazol, efinaconazol, fenticonazol, isavuconazol, isoconazol, itraconazol, ketoconazol, luliconazol, miconazol, omoconazol, oxiconazol, posaconazol, pramiconazol, ravuconazol, sertaconazol, sulconazol, terconazol, tioconazol y voriconazol. Como se describe en la presente, en algunas realizaciones, a un sujeto en el que ha fallado el tratamiento con un azol se le puede administrar CD101 o una forma salina o neutra del mismo para tratar la infección fúngica. En algunas realizaciones, puede administrarse CD101 o una forma salina o neutra del mismo a un sujeto que tenga una infección fúngica si en la infección fúngica ha fallado el tratamiento con una terapia con azoles.

Como se usa en la presente, el término "complejo enzimático de 1,3-p-D-glucano sintasa" se refiere al complejo enzimático de múltiples subunidades responsable de la síntesis de f 1,3-p-D-glucano, que es un componente esencial en la pared celular fúngica. Un complejo enzimático de 1,3-p-D-glucano sintasa mutante se refiere a un complejo enzimático de 1,3-p-D-glucano sintasa que tiene una o más mutaciones en una o más subunidades del complejo enzimático. En algunas realizaciones, la una o más mutaciones están en los genes FKS (FKS1, FKS2, FKS3), que codifican la subunidad catalítica del complejo enzimático de 1,3-p-D-glucano sintasa.

Por cantidad "eficaz" se entiende la cantidad de fármaco necesaria para tratar o prevenir una infección o una enfermedad asociada con una infección. La cantidad eficaz de fármaco usada para poner en práctica los métodos descritos en la presente para el tratamiento terapéutico o profiláctico de afecciones provocadas o a las que contribuye una infección microbiana varía dependiendo de la forma de administración, la edad, el peso corporal y el estado general de salud del sujeto. En última instancia, el médico tratante decidirá la cantidad adecuada y el régimen de dosificación. Dicha cantidad se denomina cantidad "eficaz".

Como se usa en la presente, el término "sal CD101" se refiere a una sal del compuesto de Fórmula 1. El CD101 tiene una estructura (abajo) en la que la carga positiva del ion de amonio terciario del CD101 se equilibra con un contraión negativo (por ejemplo, un acetato) en su forma de sal.

Como se usa en la presente, el término "forma neutra del CD101" incluye las formas zwitteriónicas del CD101 en las que el compuesto de Fórmula 1 no tiene carga neta positiva o negativa. El zwitterión está presente en mayor proporción en un medio básico (por ejemplo, pH 9) con respecto al CD101 o una sal del CD101. En algunas realizaciones, el zwitterion también puede estar presente en su forma salina.

Como se usa en la presente, el término "sal" se refiere a cualquier sal farmacéuticamente aceptable, como una sal de adición de ácido no tóxica, una sal metálica o un complejo metálico, usados habitualmente en la industria farmacéutica. Ejemplos de sales de adición de ácidos incluyen los ácidos orgánicos, como el acético, láctico, palmóico, maleico, cítrico, cólico, cáprico, caprílico, láurico, glutárico, glucurónico, glicérico, glicocólico, glioxílico, isocítrico, isovalérico, láctico, málico, oxaloacético, oxalosuccínico, propiónico, pirúvico, ascórbico, succínico, benzoico, palmítico, subérico, salicílico, tartárico, metanosulfónico, toluenosulfónico y trifluoroacético, y ácidos inorgánicos, como el ácido clorhídrico, el ácido bromhídrico, el ácido sulfúrico y el ácido fosfórico. Las sales representativas de metales alcalinos o alcalinotérreos incluyen sodio, litio, potasio, calcio y magnesio, entre otras.

Como se usa en la presente, la cantidad en cada dosis se refiere a la cantidad de CD101 (Fórmula 1 mostrada anteriormente) que no incluye el contraión negativo (por ejemplo, un acetato) si el CD101 está en su forma de sal.

Por "dosis" se entiende la cantidad de CD101 administrada al sujeto.

Por "sujeto" o "paciente" se entiende un humano.

Por "curación clínica" se entiende la resolución completa de la mayoría o la totalidad de los signos y síntomas clínicos de candidemia y/o candidiasis invasora presentes al inicio del estudio y la ausencia de nuevos signos/síntomas o complicaciones atribuibles a la candidemia y/o candidiasis invasora.

Como se usa en la presente, el término "tratar' se refiere a administrar una composición farmacéutica con propósitos profilácticos y/o terapéuticos. "Prevenir la enfermedad" se refiere al tratamiento profiláctico de un sujeto que aún no está enfermo, pero que es susceptible de padecer una enfermedad concreta, o está en riesgo de padecerla.

"Tratamiento de la enfermedad" o "tratamiento terapéutico" se refiere a la administración de un tratamiento a un sujeto que ya padece una enfermedad para mejorar o estabilizar la afección del sujeto. Por tanto, en las reivindicaciones y las realizaciones, tratar es la administración a un sujeto con propósitos terapéuticos o profilácticos.

Como se usa en la presente, el término "concentración de prevención de mutantes" o "MPC" se refiere a la concentración de un fármaco suficiente para suprimir el desarrollo de todos los mutantes espontáneos excepto los muy raros. El intervalo de concentraciones del fármaco entre la MIC y la MPC representa una ventana de selección de mutantes en la que es más probable que se produzcan mutantes de novo. Los regímenes terapéuticos que maximizan la duración de las concentraciones de fármaco por encima de la MPC minimizan el potencial de desarrollo de resistencia durante el curso de la terapia.

La selección de cepas resistentes in vivo se produce predominantemente en un intervalo de concentraciones del fármaco comprendido entre los valores de MIC y MPC. Los paradigmas de dosificación que dan lugar a concentraciones plasmáticas del fármaco superiores a la MPC son, por tanto, más deseables y eficaces para prevenir el desarrollo de mutantes de novo durante el curso de la terapia (consultar, por ejemplo, Drlica et al., J. Antimicrob. Chemother. 52:11-17, 2003). Los regímenes de tratamiento aprobados actualmente para la caspofungina, la micafungina y la anidulafungina implican una dosificación una vez al día a niveles tales que es improbable que la Cmax sea equivalente o supere la MPC en cualquier momento durante el tratamiento. La MPC determinada para CD101 frente a C. albicans y C. glabrata fue de 16 μg/ml (ver el Ejemplo 2). La modelización de las concentraciones plasmáticas totales de CD101 basada en datos farmacocinéticos in vivo permite calcular que una administración IV de C101 >150 mg sería suficiente para generar concentraciones superiores a 16 μg/ml. Para otras cepas y/o especies fúngicas, el régimen de dosificación que produce una concentración plasmática de prevención de mutantes puede ser uno en el que la concentración plasmática sea superior a 20 μg/ml, 24 μg/ml, 30 μg/ml, o 36 μg/ml de CD101 o una forma salina o neutra del mismo tiene el potencial de dosificarse a niveles superiores a la MPC, y tener por tanto una capacidad de prevención de mutantes más fuerte que los regímenes de tratamiento con equinocandinas aprobados existentes.

Salvo en los ejemplos operativos, o cuando se indique lo contrario, todas las cifras que expresan cantidades de ingredientes o condiciones de reacción usadas en la presente deben entenderse modificadas en todos los casos por el término "aproximadamente". Como se usa en la presente, el término "aproximadamente" indica una desviación del ±5%.

Otras características y ventajas de la divulgación serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada, los dibujos y las reivindicaciones.

Breve descripción de los dibujos

La FIG. 1 son gráficos de barras que muestran la consecución del objetivo de PK-PD para los dos regímenes de dosificación de CD101, estratificados por semana y Concentración Inhibidora Mínima (MIC).

La FIG. 2 es un gráfico de barras que muestra la carga renal en ratones infectados con diferentes densidades de inóculo de la cepa R357 de C. albicans resistente a los azoles.

La FIG. 3 muestra un esquema del protocolo experimental usado para evaluar la eficacia de CD101, anfotericina B y fluconazol en un modelo de infección por C. albicans R357.

Las FIGS. 4A y 4B son gráficos de barras que muestran los efectos de CD101, anfotericina B (AM-B) y fluconazol (FLU) sobre la carga renal en ratones infectados con la cepa R357 de C. albicans resistente a azoles.

La FIG. 5 es un diagrama de dispersión que muestra la ^pK de CD101 en dosis de 1 mg/kg, 4 mg/kg y 16 mg/kg. La FIG. 6 es un diagrama de dispersión que muestra el cambio neto en la densidad fúngica (log¹⁰CFU) frente a diferentes dosis totales de CD101 en diferentes programas de fraccionamiento.

La FIG.7 es un gráfico de barras que muestra el cambio en la reducción de la densidad fúngica (log¹⁰CFU) a partir del valor de referencia provocada por la dosis total de 2 mg/kg de CD101 en diferentes esquemas de fraccionamiento.

La FIG. 8 es un gráfico lineal que muestra perfiles simulados de tiempo de concentración del fármaco libre con respecto a la MIC para el régimen fraccionado de CD101 2 mg/kg.

La FIG. 9 es un gráfico que muestra el porcentaje de supervivencia a lo largo del tiempo en ratones infectados con Aspergillus fumigatus y tratados con 2 mg/kg de CD101 (IV o IP).

La FIG. 10 es una tabla que muestra la actividad de varios agentes antifúngicos contra aislados clínicos de Candida auris.

Descripción detallada

La invención se define por las reivindicaciones adjuntas, que se refieren a CD101, en forma salina o neutra, formulado como una composición acuosa para su uso en métodos de tratamiento de una infección fúngica en un sujeto con necesidad de ello, administrando al sujeto una infusión intravenosa de CD101, en forma salina o neutra, formulado como una composición acuosa.

CD101

El CD101 es una equinocandina semisintética que inhibe la síntesis de 1,3-p-D-glucano, un componente esencial de la pared celular fúngica de las formas de levadura de las especies de Candida y de las regiones de crecimiento celular activo de las hifas de Aspergillus. La síntesis de 1,3-p-D-glucano depende de la actividad de la 1,3-p-D-glucano sintasa, un complejo enzimático cuya subunidad catalítica está codificada por los genes FKS1, FKS2 y FKS3. La inhibición de esta enzima da como resultado una actividad fungicida rápida y dependiente de la concentración para Candida spp. La estructura de CD101 se ha representado anteriormente.

Terapia

Los regímenes de tratamiento y las composiciones farmacéuticas descritos en la presente pueden usarse para tratar o prevenir las infecciones fúngicas.

La infección fúngica tratada puede ser una infección seleccionada de tinea capitis, tinea corporis, tinea pedis, onicomicosis, perionicomicosis, pitiriasis versicolor, candidiasis oral, candidiasis vaginal, candidiasis de las vías respiratorias, candidiasis biliar, candidiasis eosofágica, candidiasis de las vías urinarias, candidiasis sistémica, candidiasis mucocutánea, mucormicosis, paracoccidioidomicosis,

blastomicosis de América del Norte, histoplasmosis, coccidioidomicosis, esporotricosis, sinusitis fúngica o sinusitis crónica. La infección que se está tratando es una infección por una especie de Candida (por ejemplo, C. albicans, C. glabrata, C. dubliniensis, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. orthopsilosis, C. guilliermondii, C. rugosa, C. auris, C. lusitaniae u otras especies de Candida).

En algunas realizaciones, una infección fúngica puede ser una infección fúngica resistente a fármacos antifúngicos, que es una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con un fármaco antifúngico. En tales infecciones, el hongo que provoca la infección es resistente al tratamiento con uno o más fármacos antifúngicos (por ejemplo, una cepa de hongo resistente a los fármacos antifúngicos (por ejemplo, una cepa de Candida spp. resistente a los fármacos antifúngicos)). Los fármacos antifúngicos incluyen, entre otros, compuestos azólicos, equinocandinas, compuestos polienos y flucitosina.

Por ejemplo, una infección fúngica resistente a la equinocandina se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con una equinocandina. En tales infecciones, el hongo que provoca la infección es resistente al tratamiento con una o más equinocandinas. La una o más equinocandinas son lipopéptidos cíclicos que inhiben la síntesis de glucano en la pared celular por inhibición del complejo enzimático 1,3-p-D-glucano sintasa. Las una o más equinocandinas a las que se refiere el término "infección fúngica resistente a equinocandinas" incluyen micafungina, caspofungina y anidulafungina, pero no incluyen CD101, en forma salina o neutra. Por tanto, usando los métodos de la divulgación, el CD101, en forma salina o neutra, puede usarse para tratar infecciones fúngicas resistentes a micafungina, caspofungina y/o anidulafungina.

Una infección fúngica resistente a los antifúngicos también puede ser una infección fúngica resistente a los azoles, que se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con un compuesto azol. En tales infecciones, el hongo que provoca la infección es resistente al tratamiento con uno o más compuestos azólicos. Los compuestos azólicos a los que se refiere el término "infección fúngica resistente al azol" son compuestos antifúngicos que contienen un grupo azol, que es un anillo heterocíclico de cinco miembros que tiene por lo menos un N y uno o más heteroátomos seleccionados entre N, O o S. Los compuestos azólicos antifúngicos funcionan uniéndose a la enzima 14a-demetilasa y alteran, inhiben y/o evitan su función natural. La enzima 14a-demetilasa es una enzima del citocromo P450 que cataliza la eliminación del grupo C-14 a-metilo del lanosterol antes de que el lanosterol se convierta en ergosterol, un componente esencial de la pared celular fúngica. Por lo tanto, al inhibir la 14a-demetilasa, se inhibe la síntesis de ergosterol. Algunos ejemplos de compuestos azólicos son, entre otros, VT-1161, VT-1598, fluconazol, albaconazol, bifonazol, butoconazol, clotrimazol, econazol, efinaconazol, fenticonazol, isavuconazol, isoconazol, itraconazol, ketoconazol, luliconazol, miconazol, omoconazol, oxiconazol, posaconazol, pramiconazol, ravuconazol, sertaconazol, sulconazol, terconazol, tioconazol y voriconazol.

Una infección fúngica resistente a los antifúngicos también puede ser una infección fúngica resistente a los polienos, que se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con un compuesto de polieno. En tales infecciones, el hongo que provoca la infección es resistente al tratamiento con uno o más compuestos de polieno. Los compuestos de polieno son compuestos que se insertan en las membranas fúngicas, se unen al ergosterol y a esteroles estructuralmente relacionados en la membrana fúngica, y alteran la integridad de la estructura de la membrana, provocando por tanto la fuga de componentes celulares del hongo que provoca la infección. Los compuestos de polieno típicamente incluyen grandes anillos de lactona con de tres a ocho enlaces dobles carbonocarbono conjugados y también pueden contener una fracción de azúcar y una fracción aromática. Los ejemplos de compuestos de polieno incluyen, pero no se limitan a, 67-121-A, 67-121-C, anfotericina B, arenomicina B, aurenina, aureofungina A, aureotuscina, candidina, chinina, demetoxipramicina, dermostatina A, dermostatina B, DJ-400-B1, DJ-400-B2, elizabethina, eurocidina A, eurocidina B, filipina I, filipina II, filipina III, filipina IV, fungicromina, gannibamicina, hamicina, levorina A², lienomicina, lucensomicina, micoheptina, micoticina A, micoticina B, natamicina, nistatina A, nistatina A³, partricina A, partricina B, perimicina A, pimaricina, polifungina B, rapamicina, rectilavendomvcina, rimocidina, roflamicina, tetramicina A, tetramicina B, tetrina A y tetrina B.

Una infección fúngica resistente a los fármacos antifúngicos también puede ser una infección fúngica resistente a la flucitosina, que se refiere a una infección fúngica que es refractaria al tratamiento con el antifúngico sintético flucitosina. Una marca comercial de la flucitosina es Ancobon®.

Una infección por Candida puede estar provocada por una cepa de hongo del género Candida resistente a los fármacos antifúngicos, como una cepa resistente a los fármacos antifúngicos de C. albicans, C. parapsilosis, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei, C. lusitaniae, C. auris, C. tropicalis u otras especies de Candida. En algunas realizaciones, una infección por Candida puede estar provocada por una cepa resistente a los azoles de un hongo del género Candida, como una cepa resistente a los azoles de C. albicans, C. parapsilosis, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei, C. lusitaniae, C. auris, C. tropicalis u otras especies de Candida. En algunas realizaciones, una cepa de hongo resistente a los azoles es Candida albicans, por ejemplo, la cepa C. albicans R357. La cepa C. albicans R357 resistente a azoles contiene mutaciones en el gen ERG11 (por ejemplo, C. albicans ERG11 (CaERG11)). El gen CaERG11 codifica la enzima 14a-demetilasa, objetivo de los compuestos antifúngicos azólicos. Las mutaciones en el gen CaERG11 que dan como resultado sustituciones de aminoácidos alteran la capacidad de los compuestos azólicos para unirse e inhibir la 14a-demetilasa, lo que da como resultado resistencia. En algunas realizaciones, una cepa R357 de C. albicans resistente a azoles tiene un aumento en la expresión de CaERG11, por ejemplo, una expresión aumentada de 2 a 15 veces (por ejemplo, 3 a 15, 4 a 15, 5 a 15, 6 a 15, 7 a 15, 8 a 15, 9 a 15, 10 a 15, 11 a 15, 12 a 15, 13 a 15 o 14 a 15 veces) con respecto a una cepa de tipo salvaje. En algunas realizaciones, una cepa de C. albicans R357 resistente a azoles tiene una o más mutaciones en el gen CaERG11 que llevan a una o más sustituciones de aminoácidos, por ejemplo, D116E, D153E, y/o E266D. En algunas realizaciones, una cepa de Candida albicans R357 resistente a azoles no tiene cambios significativos en la expresión de CDR1 o MDR1. La Tabla 1 muestra el porcentaje de inhibición y los valores de MIC de tres compuestos azólicos, anfotericina B, caspofungina y CD101 frente a la cepa C. albicans R357 resistente a azoles y el estado de susceptibilidad (S: susceptible; R: resistente) según se clasifica mediante el CLSI (Instituto de Normas Clínicas y de Laboratorio) de la cepa C. albicans R357 frente a los compuestos enumerados.

Tabla 1

Los aislados clínicos de C. auris que pueden tratarse o prevenirse mediante los regímenes de tratamiento y las composiciones farmacéuticas descritos en la presente se describen en la sección Ejemplos (por ejemplo, Ejemplo 9) y también en Lee et al., J Clin Microbiol. 49:3139-42, 2011, Kathuria et al., J Clin Microbiol. 53:1823-30, 2015, y Vallabhaneni et al., MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 65:1234-1237, 2016. Por ejemplo, la Figura 2 de Kathuria describe aislados clínicos de C. auris que se muestran en la Tabla 2.

Tabl a 2.

Continuación

Los regímenes de tratamiento y las composiciones farmacéuticas descritos en la presente pueden administrarse para prevenir una infección fúngica en un sujeto con necesidad de ello. Por ejemplo, los sujetos pueden recibir tratamiento profiláctico mientras se preparan para un procedimiento médico invasivo (por ejemplo, preparación para cirugía, como recibir un trasplante, terapia de células madre, un injerto, una prótesis, recibir cateterización intravenosa frecuente o a largo plazo, o recibir tratamiento en una unidad de cuidados intensivos), en sujetos inmunocomprometidos (por ejemplo, sujetos con cáncer, con VIH/SIDA, o que toman agentes inmunosupresores), o en sujetos sometidos a terapia antibiótica a largo plazo. Alternativamente, los regímenes de tratamiento y las composiciones farmacéuticas descritos en la presente pueden administrarse para tratar una infección del torrente sanguíneo o una infección de órganos (por ejemplo, infecciones pulmonares, renales o hepáticas) en un sujeto.

Los siguientes ejemplos se presentan para proporcionar a los expertos en la técnica una divulgación completa de cómo se realizan, elaboran y evalúan los métodos y compuestos reivindicados en la presente, y se pretende que sean puramente ejemplares de la divulgación y no limitativos.

Ejemplos

Ejemplo 1: Administración de CD101 a sujetos adultos sanos

Los estudios clínicos han demostrado que el CD101 es seguro y bien tolerado en dosis individuales de hasta 400 mg y en dosis múltiples de hasta 400 mg.

En un primer estudio, el CD101 se administró mediante inyección IV a sujetos adultos sanos. En este estudio, los sujetos de 4 cohortes de 8 sujetos (6 activos, 2 placebo) fueron aleatorizados cada uno para recibir dosis IV individuales de CD101 o placebo (solución salina normal) infundidas durante 60 (±5) minutos. Las dosis de CD101 evaluadas siguieron un régimen de dosis individual ascendente (50, 100, 200 o 400 mg).

Se asignaron aleatoriamente un total de 32 sujetos, 31 de los cuales completaron todas las evaluaciones del estudio. Un sujeto se retiró prematuramente por motivos personales no relacionados con la seguridad o la tolerabilidad. Los sujetos eran principalmente blancos (97%) e hispanos (94%), y la representación de hombres y mujeres fue aproximadamente igual (53% y 47%, respectivamente). No se produjeron acontecimientos adversos graves (SAE), acontecimientos adversos graves (AE) ni relaciones de respuesta a la dosis para los AE generales. La mayoría de los AE fueron leves y todos se resolvieron completamente al final del estudio. No se produjeron AE relacionados con el fármaco derivados de anomalías de laboratorio clínicamente significativas en hematología o química clínica en ninguna de las dosis. Además, no hubo problemas de seguridad relacionados con electrocardiogramas (ECG), constantes vitales o descubrimiento en la exploración física.

También se realizó un segundo estudio de CD101 administrado por inyección IV a sujetos adultos sanos. En este estudio, los sujetos de 3 cohortes de 8 sujetos (6 activos, 2 placebo) se aleatorizaron cada uno para recibir múltiples dosis IV de CD101 o placebo (solución salina normal) en infusión durante 60 (±5) minutos. Los niveles de dosis de CD101 evaluadas siguieron un régimen ascendente de dosis múltiples (100 mg x 2 dosis, 200 mg x 2 dosis o 400 mg x 3 dosis).

Se asignaron aleatoriamente un total de 24 sujetos y todos ellos completaron el estudio. Los sujetos eran principalmente blancos (88%), hispanos o latinos (88%), y tenían un índice de masa corporal (IMC) medio de 27,208 kg/m2 y una edad media de 42,8 años. Hombres y mujeres estaban representados por igual (50% cada uno). No hubo SAE ni AE graves. La mayoría de los AE fueron leves, y todos los a E relacionados se resolvieron completamente al final del estudio. Cuatro sujetos del grupo CD101 experimentaron reacciones leves y transitorias a la infusión, caracterizadas por rubor, sensación de calor, náuseas y opresión torácica. Estas reacciones a la infusión se asociaron principalmente con la cohorte de dosis de 400 mg y fueron más frecuentes con la tercera dosis. Estas reacciones se produjeron a los pocos minutos de iniciarse la infusión y desaparecieron en cuestión de minutos sin que se interrumpiera o suspendiera la infusión del fármaco del estudio. No se produjeron AE relacionados con el fármaco resultantes en anomalías de laboratorio clínicamente significativas en hematología o química clínica en ninguna de las dosis. Además, no hubo problemas de seguridad relacionados con ECG, constantes vitales o descubrimientos en la exploración física.

Ejemplo 2: Farmacología clínica de CD101

Como se describe más adelante, la farmacocinética de CD101 ha sido bien caracterizada en sujetos sanos para dosis de hasta 400 mg durante 3 semanas.

Farmacocinética de dosis individual ascendente

La farmacocinética se determinó en primer lugar analizando la concentración de CD101 en muestras de plasma y orina obtenidas de sujetos que recibieron CD101 en cada cohorte en distintos momentos tras la administración de la dosis individual del fármaco del estudio.

La PK plasmática del CD101 fue en general bien caracterizada después de las dosis de 50, 100, 200 y 400 mg de CD101. La exposición a CD101 aumentó con el incremento de las dosis de CD101 (Tabla 3). El tiempo para alcanzar la Cmax (es decir, Tmax) se observó al final de la infusión, como era de esperar, aproximadamente 1 hora después del inicio de la infusión para todas las dosis. La eliminación de CD101 parece multifásica. La AUC y la Cmax aumentaron de manera proporcional a la dosis y la depuración corporal total fue similar en todos los niveles de dosis con valores de t^1/2de >80 horas durante la primera semana de recogida de plasma (se calcula un t^1/2terminal más largo de 127-146 horas cuando se incorporan datos de tiempos de recogida posteriores). La depuración corporal total fue de aproximadamente 4 ml/min en todas las dosis de CD101, lo que indica una cinética lineal para CD101 en todas las dosis investigadas. El volumen de distribución (Vz y Vss) varió entre 33 y 48 l. La fracción de dosis excretada en orina fue de <1% en todos los niveles de dosis, lo que indica una contribución menor de la depuración renal en la excreción de CD101.

Tabla 3. Resumen de las exposiciones plasmáticas de CD101 después de la administración de 50, 100, 200

400 m de^ CD101 en infusión intravenosa de 1 hora

continuación

Farmacocinética de dosis múltiples ascendentes

La farmacocinética se determinó analizando la concentración de CD101 en muestras de plasma y orina obtenidas de sujetos que recibieron CD101 en cada cohorte en varios puntos temporales tras la administración de CD101.

La PK plasmática de CD101 también se caracterizó bien tras 2 o 3 dosis semanales de CD101: 100 mg (Día 1/ Día 8), 200 mg (Día 1/ Día 8) y 400 mg (Día 1/ Día 8/ Día 15). Las exposiciones tras la primera dosis fueron muy comparables a las observadas en el estudio SAD, con AUC y Cmax aumentando generalmente de manera proporcional a la dosis (Tabla 4). La acumulación fue menor, variando del 14% al 34% (o 1,14 a 1,34), medido por la relación de Cmax de la última/primera dosis, y del 30% al 55% (o 1,30 a 1,55), medido por la relación de AUC^0-168de la última/primera dosis.

Tabla 4. Resumen de las exposiciones plasmáticas de CD101 tras la administración de 100 mg (Día 1/Día8),

Se usaron los datos de los estudios anteriores para desarrollar un modelo PK poblacional para describir el curso temporal de las concentraciones de CD101 tras la administración IV de dosis individuales y múltiples, una vez a la semana. En resumen, los datos se describieron mejor usando un modelo de 4 compartimentos con entrada de fármaco de orden 0 a través de la infusión IV y eliminación lineal de primer orden. Para tener en cuenta las relaciones entre los parámetros PK estructurales y el peso corporal del sujeto, todos los parámetros del modelo se ampliaron a escala al peso corporal del sujeto usando coeficientes alométricos estándar (una potencia de 0,75 para los términos de depuración y 1,0 para los términos de volumen). Este modelo se ajustó a los datos observados con muy poco sesgo y excelente precisión.

Se realizaron simulaciones Monte Carlo para evaluar la probabilidad de alcanzar el objetivo PK-farmacodinámico (PD) usando una variedad de regímenes exploratorios de dosificación. Se seleccionaron dos regímenes de dosificación para su posterior investigación (Tabla 5). Se simuló el área libre de fármaco semanal bajo la curva de concentración-tiempo de CD101 desde el momento 0 hasta 168 horas (fAUC^0-168) después de cada dosis para 2000 pacientes hipotéticos; se simuló el peso corporal del paciente usando una base de datos de características demográficas de pacientes y se supuso que la unión a proteínas plasmáticas era del 99,1%. Estudios no clínicos de infecciones por Candida albicans en ratones han demostrado que una relación CD101 fAUC^0-168:MIC de 10 se ha asociado con una reducción de 2 log en la carga fúngica en riñones infectados. Por consiguiente, se eligió este valor de 10 como objetivo PK-PD de interés para las simulaciones de Monte Carlo.

Se prevé que dos regímenes (400 mg/400 mg/400 mg y 400 mg/200 mg/200 mg) proporcionen una consecución adecuada del objetivo PK-PD hasta una MIC de 0,5 mg/l (3 pasos de dilución por encima de la MIC⁹⁰de 0,06 para C. albicans y glabrata sobre la base de los datos de vigilancia de Sentry 2014). Además, debido a la acumulación con dosis repetidas, se esperaría que el régimen de 400 mg IV una vez a la semana alcance un mayor objetivo de PK-PD a una MIC de 1 mg/l en las semanas 2 y 3 de tratamiento, y por lo tanto se espera que proporcione un beneficio adicional más allá de la primera semana de tratamiento contra patógenos con una MIC >1mg/ml. La consecución del objetivo PK-PD para los 2 regímenes elegidos se muestra en la Tabla 5 y en la Figura 1.

Tabla 5. Consecución de objetivo farmacocinético-farmacodinámico previsto para regímenes de CD101, r ifi r m n n n r i n inhi i r mínim

Ejemplo 3: Tratamiento de sujetos con candidemia y/o candidiasis invasora

Los sujetos con candidemia y/o candidiasis invasora reciben inyección de CD101 (400 mg en cada uno de los Días 1 y 8, con una dosis opcional de 400 mg en el Día 15; o 400 mg en cada uno de los Días 1, 8 y 15, con una dosis opcional de 400 mg en el Día 22; o 400 mg en cada uno de los Días 1, 8, 15 y 22, con una dosis opcional de 400 mg en el Día 29; o 400 mg en cada uno de los Días 1, 8, 15, 22 y 29, con una dosis opcional de 400 mg en el Día 36; o 400 mg en el Día 1 y 200 mg en el Día 8, con una dosis opcional de 200 mg en el Día 15; 400 mg en el Día 1 y 200 mg en cada uno de los Días 8 y 15, con una dosis opcional de 200 mg en el Día 22; 400 mg en el Día 1 y 200 mg en cada uno de los Días 8, 15 y 22, con una dosis opcional de 200 mg en el Día 29; 400 mg en el Día 1 y 200 mg en cada uno de los Días 8, 15, 22 y 29, con una dosis opcional de 200 mg en el Día 36). El diagnóstico micológico de candidemia y/o candidiasis invasora se establece mediante un cultivo de sangre >1 positivo para Candida spp. en el plazo de las 96 horas siguientes a la recogida antes de la administración de la primera dosis.

El CD101 se suministra como solución estéril o como formulación liofilizada. Los viales de inyección de CD101 se diluyen con solución salina normal en una bolsa de infusión. El CD101 se administra mediante perfusión IV durante 60 (±5) minutos el día 1, el día 8 y, opcionalmente, el día 15.

En algunas realizaciones, la inyección de CD101 se suministra como un producto estéril acuoso o liofilizado para dilución (por ejemplo, en cloruro sódico al 0,9%) antes de la perfusión. En algunas realizaciones, uno o más viales de CD101 acuoso se diluyen en bolsas de infusión.

El CD101 se administra durante un periodo de tiempo de 30 a 180 minutos (por ejemplo, durante 30±5 minutos, 60±5 minutos, 90±5 minutos, 120±5 minutos, 150±5 minutos, 180±5 minutos, 30±10 minutos, 60±10 minutos, 90±10 minutos, 120±10 minutos, 150±10 minutos o 180±10 minutos).

Ejemplo 4: Evaluación de la infección tras la infección por Candida albicans R357 resistente a los azoles

La cepa R357 de C. albicans resistente a los azoles se obtuvo a partir de una reserva de trabajo congelada y se descongeló a temperatura ambiente. Se transfirió una alícuota de 0,1 ml de la reserva a una placa de agar Sabouraud (SA) y se incubó a 35-37° C durante la noche. El cultivo se volvió a suspender en 1 ml de PBS frío (>2,0 x 109 CFU/ml, DÜ⁶²⁰3,0-3,2) y se diluyó con PBS hasta alcanzar tamaños de inóculo objetivo de 5 x 106, 5 x 105, 5 x 104 y 5 x 103 CFU/ml. El recuento real de colonias se determinó colocando las diluciones en placas SA seguido de incubación entre 20 y 24 horas.

Se usaron grupos de ratones ICR (Institute of Cancer Research) macho (n=3 por grupo) de 22 ± 2 g de peso. La inmunosupresión se indujo mediante dos inyecciones intraperitoneales de ciclofosfamida a 150 mg/kg 4 días (Día -4) y a 100 mg/kg 1 día (Día -1) antes de la infección por C. albicans. El Día 0, se inoculó a los animales por vía intravenosa (0,2 ml/ratón) con la suspensión de R357. Los animales se sacrificaron por asfixia con CO²a las 2 y 72 horas después de la inoculación. En la Tabla 6 se muestra un resumen del diseño experimental.

Tabla 6. Diseño ex erimental

Se recogieron y pesaron riñones emparejados. Los riñones recogidos se homogeneizaron en 1 ml de PBS estéril (pH 7,4) y se prepararon diluciones 10 veces mayores que se depositaron por separado en placas SA durante 20-24 horas adicionales de incubación y, a continuación, se calcularon los recuentos fúngicos (CFU/g) en los riñones. En la FIG. 2 se muestran las cargas fúngicas renales de diferentes densidades de inóculo de la cepa R357 de C. albicans resistente a los azoles.

Ejemplo 5: Eficacia de anfotericina B, fluconazol y CD101 en el modelo de infección diseminada con R357 de C. albicans

Materiales

Artículos de prueba. El CD101 se disolvió en el vehículo que contenía un 10% de DMSO y un 1% de Tween 20 en NaCl al 0,9% (ver la tabla de formulación más abajo). La anfotericina B y el fluconazol estaban en forma de polvo. La anfotericina B se disolvió en NaCl al 0,9%. El fluconazol se disolvió en agua (WFI: agua para inyección). En la Tabla 7 se muestra un resumen de los artículos de prueba.

T l 7. Ar í l r Ar í l r

Organismo. La cepa R357 de C. albicans se crioconservó como cultivos madre de trabajo congelados de un solo uso almacenados a -70° C.

Animales. Se aclimataron ratones ICR macho de 22 ± 2 g de peso durante 3 días antes de su utilización y se confirmó que gozaban de buena salud. El espacio asignado para 3 o 5 animales era de 27 x 20 x 14 cm. Todos los animales se mantuvieron en un entorno higiénico con temperatura controlada (20-24° C), humedad (30%-70%) y ciclos de luz/oscuridad de 12 horas. Se les concedió libre acceso a dieta de laboratorio estándar esterilizada y agua del grifo esterilizada en autoclave. Todos los aspectos de este trabajo, incluyendo el alojamiento, la experimentación y la eliminación de los animales, se realizaron de acuerdo con la "Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio: Octava edición" (National Academies Press, Washington, D.C., 2011).

Productos químicos. Anfotericina B en polvo (N° de Cat. A-9528, Sigma, USA), Bacto agar (N° de Cat. 214040, BD DIFCO, USA), ciclofosfamida (N° de Cat. C-0768, Sigma, USA), dimetilsulfóxido (N° de Cat. 1.02931.1000, Merck, Alemania), fluconazol en polvo (N° de Cat. F8929, SIGMA-Aldrich, USA), medio Sabouraud fluido (N° de Cat. 264210, BD DIFCO, USA), tampón fosfato salino (PBS) (N° de Cat. P4417, Sigma, USA), cloruro sódico (N° de Cat. S7653, SIGMA-Aldrich, USA), Tween 20 (N° de Cat. P-7949, Sigma, USA) y agua para inyección (WFI) (Tai-Yu, Taiwán).

Equipamiento. Cabina de seguridad biológica (NuAire, USA), Lectores de microplacas de absorbancia (Tecan, Infinite F50, USA), Centrifugadora (Modelo 5922, Kubota, Japón), Jaulas ventiladas individualmente (IVC, 36 Mini Isolator systems) (Tecniplast, Italia), flujo laminar (Tsao-Hsin, Taiwán), incubadora de agitación orbital (Firstek Scientific, Taiwán), pipeteador (Rainin, USA), homogeneizador Polytron (Kinematica, Suiza) y congelador de temperatura ultrabaja (NuAire, USA).

Métodos

La cepa de C. albicans resistente a los azoles (R357) se obtuvo a partir de una reserva de trabajo congelada y se descongeló a temperatura ambiente. Se transfirió una alícuota de 0,1 ml de reserva a una placa de agar Sabouraud (SA) y se incubó a 35-37° C durante la noche. El cultivo se volvió a suspender en 1 ml de PBS frío (>2,0 x 109 CFU/ml, DÜ⁶²⁰3,0-3,2) y se diluyó con PBS hasta 5 x 105 CFU/ml. El recuento real de colonias se determinó colocando las diluciones en placas SA e incubándolas durante 20-24 horas. El recuento real del inóculo fue de 7,05 x 105 CFU/ml.

Se usaron grupos de ratones ICR macho (n=5 por grupo) de 22 ± 2 g de peso. La inmunosupresión se indujo mediante dos inyecciones intraperitoneales de ciclofosfamida a 150 mg/kg 4 días (Día -4) y a 100 mg/kg 1 día (Día -1) antes de la infección por C. albicans. El Día 0, a los animales se les inoculó por vía intravenosa (0,2 ml/ratón) con 5 tamaños de inóculo a 1,41 x 105 CFU/0,2 ml/ratón de C. albicans (R357). El CD101 se administró mediante inyección intraperitoneal (IP) a 3, 10 y 30 mg/kg. La anfotericina B (AM-B) se administró mediante inyección intravenosa (IV) a 1 y 3 mg/kg. El fluconazol (FLU) se administró por sonda oral (PO) a 20 mg/kg. Todos los artículos de prueba se administraron una vez 2 horas después de la inoculación. El volumen de dosificación fue de 10 ml/kg para todos los grupos. En la Tabla 8 se muestra un resumen del diseño experimental.

Tabla 8. Diseño ex erimental Diseño ex erimental

Los animales se sacrificaron por asfixia con CO²48 y 72 horas después de la inoculación. Se recogieron y pesaron riñones emparejados. Los riñones recogidos se homogeneizaron en 1 ml de PBS estéril (pH 7,4) y se prepararon diluciones de 10 veces y se colocaron por separado en placas SA. Se calcularon los recuentos de hongos (CFU/g) en los riñones y el porcentaje de disminución se calculó mediante la siguiente fórmula:

% de Disminución = [(CFU/g de vehículo - CFU/g de tratamiento)/(CFU/g de vehículo)] x 100%.

En la FIG. 3 se muestra un esquema del protocolo experimental. Las FIGS. 4A y 4B muestran los recuentos absolutos de hongos y la diferencia en los recuentos de hongos, respectivamente, de los grupos de tratamiento con el artículo de prueba medidos 48 o 74 h después de la infección. Una disminución del 99% o más (>99%, 2-log) en los recuentos fúngicos de los animales tratados en comparación con los del grupo del vehículo medidos 48 o 72 h después de la infección indicó una actividad antimicrobiana significativa. También se aplicó el ANOVA unidireccional seguido de la prueba de Dunnett para evaluar la significancia estadística.

Se observaron efectos antimicrobianos significativos (P <0,05) con los grupos de tratamiento con CD101 a 3, 10 y 30 mg/kg IP a las 48 y 72 horas después de la infección. Se observó una reducción de dos logaritmos en los recuentos de hongos con todos los grupos de tratamiento con CD101 en los puntos temporales de 48 y 72 horas. Se observaron efectos significativos tras el tratamiento con anfotericina B a 1 y 3 mg/kg IV a las 48 y 72 horas después de la infección. El tratamiento con anfotericina B a 3 mg/kg IV produjo una reducción de dos logaritmos en los recuentos a las 72 horas. La administración de fluconazol a 20 mg/kg PO provocó una reducción moderada (51% y 84%) de los recuentos de colonias 48 y 72 horas después de la infección, en comparación con el grupo de control con vehículo, que no fue significativa con el ANOVA unidireccional seguido del análisis de la prueba de Dunnett (P>0,05).

Ejemplo 6: Base farmacológica de la eficacia de CD101

Métodos

Estudio farmacocinético. Se administró a ratones ICR hembra sanos una dosis única de CD101 mediante inyección intraperitoneal (IP). Se estudiaron las siguientes dosis, a tres ratones por dosis: 1, 4 y 16 mg/kg. Las concentraciones plasmáticas de CD101 se determinaron a las 0, 1, 3, 6, 12, 24, 48, 72, 96 horas después de la dosis usando un ensayo LC/MS validado con un límite inferior de cuantificación de 0,02 μg/ml.

Estudio de fraccionamiento de dosis. Los ratones ICR macho o hembra (5 por régimen y tiempo de observación) que pesaban 22 ± 2 g se volvieron neutropénicos para el estudio inyectándoles un tratamiento con ciclofosfamida cuatro días (- Día 4) (150 mg/kg IP) y un día (- Día 1) antes de la infección a 100 mg/kg IP. La neutropenia se mantuvo durante todo el estudio con dosis de ciclofosfamida (100 mg/kg IP) cada 48 horas los días 1, 3, 5 y 7 después de la infección. Cada animal fue inoculado por vía intravenosa con 1 x 103 CFU de C.albicans (cepa R303, MIC=0,125 mg/l). El CD101 (o vehículo) se administró 24 horas después de la infección mediante inyección IP. Las dosis estudiadas se muestran en la Tabla 9.

Los ratones se sacrificaron 168 horas (7 días) después del inicio del tratamiento. Los ratones del brazo de control se sacrificaron 0, 24 y 48 horas después de la administración del vehículo. Se recogieron asépticamente riñones emparejados, se homogeneizaron y se colocaron en placas para el recuento de colonias para determinar la carga fúngica (CFU/g).

Análisis farmacocinéticos-farmacodinámicos. A partir de los datos recogidos en el estudio PK, se desarrolló un modelo PK en S-ADAPT. Usando el modelo PK desarrollado, se calcularon los perfiles de concentración-tiempo y los valores AUC⁰-¹⁶⁸h para cada régimen de dosificación administrado en el estudio de fraccionamiento de dosis. Las concentraciones plasmáticas del fármaco libre se generaron usando un valor de unión a proteínas murinas del 99,1%. Se exploraron las relaciones entre el cambio en el log¹⁰CFU desde el inicio de la terapia y el AUC⁰-¹⁶⁸h.

Resultados

El CD101 mostró una PK lineal en el intervalo de dosis estudiado (1 a 16 mg/kg IP). Un modelo de 4 compartimentos describió mejor los datos PK. Los ajustes del modelo se muestran en la FIG. 5.

Los resultados del estudio de fraccionamiento de dosis se muestran en la FIG. 6, que muestra que los hongos crecieron bien en el grupo de control sin tratamiento. La magnitud del cambio neto en la densidad fúngica (log¹⁰CFU) fue similar independientemente del programa de fraccionamiento dentro de los grupos de dosificación de 0,7 y 7 mg/kg de CD101. Sin embargo, los resultados en el grupo de 2 mg/kg de CD101 variaron según el programa de fraccionamiento.

En la FIG. 7 se muestra el cambio en la reducción de CFU log¹⁰con respecto al valor de referencia a las 168 horas según el programa de fraccionamiento para el grupo de 2 mg/kg de CD101. Cuando se administró una dosis total de 2 mg/kg al día (0,29 mg/kg/día), la magnitud del cambio neto en la densidad fúngica (log¹⁰CFU) fue similar a la del grupo de control sin tratamiento. Sin embargo, cuando se administraron 2 mg/kg como dosis única, se produjo una reducción de más de 2 log¹⁰CFU con respecto al valor de referencia a las 168 horas. Los regímenes de 2 mg/kg x 1 y 0,29 mg/kg diarios x 7 tuvieron exposiciones acumuladas de CD101 similares a las 168 horas, como se muestra en la FIG. 6. A pesar de tener exposiciones similares, lo que influye en la eficacia, estos regímenes mostraron efectos muy diferentes.

Los perfiles de concentración plasmática-tiempo del fármaco libre de los tres regímenes de dosificación fraccionada de 2 mg/kg de CD101 se muestran en la FIG. 8. Los tres regímenes muestran perfiles de exposición muy diferentes. En particular, el régimen de dosis única da como resultado una mayor exposición al CD101 al inicio de la terapia. La AUC^0-24plasmática de fármaco libre es de 0,0654, 0,0303 y 0,00948 mg-h/l tras la administración de 2 mg/kg de CD101 como dosis única, dos veces por semana y régimen diario, respectivamente. Además, la administración de una dosis única da como resultado concentraciones plasmáticas de fármaco libre que permanecen por encima de las de los regímenes dos veces por semana y diario durante 84 y 48 horas, respectivamente.

Tres regímenes de CD101 con exposiciones totales similares, pero con formas de exposición muy diferentes, muestran una eficacia considerablemente distinta. Esto sugiere que la forma de la AUC de CD101 es un determinante de la eficacia, con regímenes de carga frontal que demuestran una mayor eficacia. La magnitud del cambio neto en la carga fúngica fue similar independientemente del esquema de fraccionamiento dentro de los grupos de dosificación de 0,7 y 7 mg/kg de CD101, pero difirió dentro del grupo de 2 mg/kg. Una dosis de 2 mg/kg fue considerablemente más eficaz cuando se administró una vez a la semana en comparación con la misma dosis dividida en regímenes de dos veces por semana o diarios.

Ejemplo 7: Eficacia de CD101 en modelos de ratón de aspergilosis y candidiasis diseminada resistente a los azoles.

Métodos

La eficacia in vivo de CD101 se evaluó usando modelos de ratón neutropénico de candidiasis y aspergilosis resistentes a los azoles. Para el modelo de candidiasis en ratón se usó una cepa de C. albicans resistente a los azoles (R357; resistente a fluconazol [Flu], voriconazol y posaconazol, pero sensible a anfotericina B [AmB] y equinocandinas) aislada de sangre humana. Para el modelo de aspergilosis en ratón se usó una cepa de prueba de Aspergillus fumigatus (ATCC 13073). Los ratones se volvieron neutropénicos mediante ciclofosfamida y luego se infectaron mediante inyecciones de C. albicans (105 CFU/ratón) o A. fumigatus (104 CFU/ratón) en la vena de la cola. Los artículos de prueba se administraron a partir de 2 horas después de la infección. En el modelo de candidiasis en ratón, grupos de 5 ratones recibieron cada uno una dosis de AmB (3 mg/kg IV), Flu (20 mg/kg por vía oral) o CD101 (3, 10 o 30 mg/kg por administración intraperitoneal [IP]). Después de 72 horas después de la infección, se practicó la eutanasia a los ratones y se midieron los recuentos de C. albicans en el tejido renal (CFU/g). En el modelo de aspergilosis de ratón, grupos de 10 ratones recibieron cada uno una dosis de AmB (2 mg/kg IP) o CD101 (2 mg/kg IV e IP). La supervivencia se monitorizó diariamente durante 10 días. Se evaluó la significancia de las diferencias entre los grupos del vehículo y del artículo de ensayo mediante ANOVA unidireccional seguido de la prueba de Dunnett y la prueba exacta de Fisher en los modelos de candidiasis y aspergilosis, respectivamente.

Resultados

Una dosis de CD101 3 mg/kg produjo una reducción de >99,9% (o >3 log; P<0,001) de las CFU de C. albicans en comparación con el vehículo durante por lo menos 72 horas después de la dosis única IP. AmB mostró una eficacia similar, aunque menos robusta (>99% o >2-log de reducción en CFU; P<0,05), mientras que fluconazol fue menos eficaz (83,9% o <2-log de reducción en CFU). En el modelo de aspergilosis, el CD101 administrado a 2 mg/kg IV o IP mostró una eficacia similar a la de AmB 2 mg/kg IP, ambos con una supervivencia significativamente mayor que el vehículo (P<0,05; FIG. 9).

Conclusiones

Una dosis única de 3 mg/kg de CD101 produjo una reducción significativa de la carga de C. albicans en comparación con el vehículo (P<0,001) en el modelo de ratón neutropénico de candidiasis resistente a los azoles, demostrando una eficacia comparable, si no mejor, a la de AmB a la misma dosis. Una dosis de CD101 también demostró eficacia en el modelo de ratón de la aspergilosis. Estos datos respaldan el desarrollo continuado de CD101 para el tratamiento de infecciones graves provocadas por Candida, incluyendo las cepas resistentes a los azoles, y Aspergillus spp.

Ejemplo 8: Eficacia de CD101 contra aislados clínicos de Candida auris

Materiales y métodos

Organismos y agentes antifúngicos

Se evaluaron aislados clínicos de C. auris obtenidos en Japón, Corea del Sur, India y el Centro de Micología Médica (n=14). Se usaron las siguientes cepas de Candida QC aprobadas para levaduras y mohos por el Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, Documento M38-A2): C. parapsilosis ATCC 22019, C. krusei ATCC 6258. Los compuestos de ensayo se prepararon nuevos antes de su uso en los ensayos de MIC e incluyeron: CD101, 5-flucitosina (5FC), anfotericina B (AMB), anidulafungina (ANID), caspofungina (CAS), fluconazol (FLU), itraconazol (ITRA), micafungina (MICA), posaconazol (POSA) y voriconazol (Vo R i).

Ensayos de concentración inhibidora mínima (MIC)

Para evaluar la susceptibilidad de las cepas fúngicas a los antifúngicos seleccionados se usaron ensayos de MIC por microdilución en caldo realizados según la metodología CLSI M38-A2. Brevemente, las cepas de C. auris se colocaron en placas en agar de dextrosa Sabouraud (SDA) y se incubaron a 37° C durante 2 días. Luego, se recogieron las células de C. auris mediante centrifugación y lavados con solución salina normal (0,85% de NaCl). Los inóculos para el ensayo de MIC se prepararon usando un hemocitómetro. Los ensayos de MIC se leyeron después de 24 y/o 48 horas de incubación a 50 y/o 100% de inhibición (FIG. 10). Para comprobar el recuento del inóculo, se colocaron en placas en medio SDA diluciones diez veces mayores de la suspensión conidial activa de C. auris. Las placas de inóculo se incubaron a 37° C durante 2 días antes de determinar el recuento de colonias.

Ejemplo 9: Eficacia de CD101, caspofungina (CAS), micafungina (MICA) y fluconazol (FLU) contra aislados clínicos de Candida auris y análisis de la secuencia FKS1 HS1.

El objetivo de este estudio era determinar la susceptibilidad in vitro de aislados clínicos de C. auris a CD101, caspofungina (CAS), micafungina (MICA) y fluconazol (FLU), y analizar la secuencia del punto caliente 1 (HS1) dentro de FKS1.

Materiales y métodos

Aislados de Candida auris. En el estudio se usaron 38 cepas de C. auris obtenidas en el VP Chest Institute de la Universidad de Delhi (Delhi, India) (Tabla 10). Las cepas se cultivaron en placas de agar de extracto de levadura, peptona dextrosa (YPD) antes de realizar las pruebas.

Tabla 10

Pruebas de susceptibilidad antifúngica de Candida auris (AFST). Las pruebas de susceptibilidad antifúngica se realizaron por duplicado para cada cepa de acuerdo con las directrices descritas en los documentos M27-A3 del CLSI (CLSI, 2008). Se usaron C. parapsilosis ATCC 22019 y C. krusei ATCC 6258 como cepas de control de calidad. Se obtuvieron CD101, CAS, MlCA y FLU como polvos estándar de sus fabricantes, y las soluciones madre se prepararon disolviendo los compuestos en agua (^cA^s, MICA) o en dimetilsulfóxido (DMSO) al 100% (CD101, FLU).

PCR/secuenciación de FKS1 HS1. La PCR de FKS1 HS1 se llevó a cabo en el termociclador T100 (Bio-Rad) en un volumen de reacción de 30 μl usando EmeraldAmp MAX PCR Master Mix (TaKaRa). Las mezclas de PCR contenían 1 μl de cada cebador: Cspp_F2275 (5'-AATGGGCTGGTGCT^cAA^cAT-3') y Cspp_R3070 (5'-CCTTCAATTTCAGATGGAACTTGATG-3') a 10 μM. Se sumergió un palillo estéril con un toque de prueba de una sola colonia en la mezcla maestra de reacción de PCR y, a continuación, se realizó la PCR de FKS1 HS1. El perfil de tiempo-temperatura incluyó una desnaturalización inicial durante 3 min a 94° C seguido de 35 ciclos de 30 s a 94° C, 30 s a 53° C y 90 s a 72° C. Los amplicones se visualizaron en un gel de agarosa al 1% teñido con el colorante de gel de ácidos nucleicos GelStar (Lonza), se purificaron usando el kit de limpieza de secuenciación de ADN ZR (Zymo Research) y se secuenciaron con Genewiz. Los resultados de la secuenciación se analizaron con SeqMan Pro 14 (DNASTAR Lasergene).

Resultados

Pruebas de susceptibilidad antifúngica (PSA) de Candida auris. En la Tabla 11 se muestran las distribuciones de MIC (μg/ML) de los aislados de C. auris para CD101, CAS, MICA y FLU. Todos los aislados de C. auris (38) eran resistentes al fluconazol. Cuatro (4) aislados eran resistentes a todas las equinocandinas probadas (CD101, CAS, MICA). El CD101 mostró una actividad similar a MICA.

PCR/secuenciación de FKS1 HS1. En la Tabla 11 se muestran los resultados del análisis de la secuencia FKS1 HS1 de los aislados de C. auris. Treinta y cuatro (34) aislados sensibles a equinocandinas presentaron genotipo de tipo salvaje (WT) en la región FKS1 HS1. Cuatro (4) aislados (cepas N°: 16, 25, 27 y 30 en la Tabla 11), determinados como resistentes a equinocandinas, presentaban una sustitución de aminoácidos de serina a fenilalanina en posición equivalente a FKS1 HS1 S645 en Candida albicans.

Tabla 11. Perfil de susceptibilidad antifúngica in vitro y características de FKS1 HS1 de las cepas de Candida auris

continuación

Conclusiones

La alta resistencia al fluconazol es frecuente en los aislados clínicos de C. suris. La mayoría de las cepas de C. suris son sensibles a las equinocandinas. Sin embargo, la mayoría de las cepas rompen con caspofungina a las 48 h, pero no con CD101 u otras equinocandinas. La resistencia a las equinocandinas en estos aislados de C. suris estaba asociada a la sustitución de aminoácidos (serina en fenilalanina, posición equivalente a la S645 de C. slbicsns) dentro de la región FKS1 HS1.

Ejemplo 10: Evaluación farmacocinética/farmacodinámica (PK/PD) in vivo de CD101 contra C. albicans y C. glabrata

Métodos

Se usaron 4 cepas de C. slbicsns y 3 de C. glsbrsts. Las MIC se determinaron según los estándares de CLSI. Se determinó la PK plasmática de dosis única en grupos de tres ratones tras dosis IP de 1, 4, 16 y 64 mg/kg. Para los estudios de tratamiento, los ratones se volvieron neutropénicos mediante la administración de ciclofosfamida en los días -4, -1, 2 y 4. Los ratones se infectaron con 6,3 ± 0,1 CFU/ml (C. slbicsns) o 6,2 ± 0,2 CFU/ml (C. glsbrsts) inyectadas en la vena lateral de la cola. El intervalo de dosis del tratamiento fue de 0,016 - 64 mg/kg, administrados una vez por inyección IP 2 h después de la infección. La duración del experimento fue de 7 días, momento en el que se recogieron asépticamente los riñones para los recuentos de CFU. Se usó la ecuación Emax Hill para modelar los datos de respuesta a la dosis a AUC/MIC del índice PK/PD. Para cada aislado se determinaron las dosis estáticas y de letalidad 1 log, así como los valores de AUC/MIC asociados.

Resultados

Las MIC de CD101 fueron de 0,008-0,06 mg/l para C. slbicsns y de 0,06 - 0,5 mg/l para C. glsbrsts. Los intervalos de los parámetros PK plasmáticos de dosis única incluyen: Cmax 2,6-77 mg/l, AUC⁰-~ 93-4046 mg*h/l, T1/2 28-41 h. Se observó una actividad cidal dependiente de la dosis con una eliminación máxima de más de 2 log¹⁰CFU/riñón. Se usó la AUC media de 24 h durante 7 días para modelar los datos de AUC/MIC y se ajustó bien a los datos de respuesta al tratamiento con R20,70 para C. slbicsns y R20,86 para C. glsbrsts. En la Tabla 12 se muestran la dosis estática (SD) y la dosis letal de 1 log y los valores de AUC/MIC asociados.

Tabla 12

Conclusiones

CD101 demostró su potencia in vivo en el modelo de candidiasis diseminada murina neutropénica frente a cepas seleccionadas de C. albicans y C. glabrata. De manera similar a los estudios con otras equinocandinas, la AUC/MIC se ajustó bien a los datos de exposición-respuesta y los objetivos de C. glabrata fueron numéricamente inferiores a los de C. albicans. Los objetivos de PK/PD identificados en este estudio serán útiles para la optimización del régimen de dosificación clínica de CD101 en el contexto de la farmacocinética humana y la distribución MIC.

Claims

REIVINDICACIONES

1. El CD101 de acuerdo con la estructura:

en forma salina o neutra para su uso en un método de tratamiento de una infección fúngica en un sujeto, en donde la infección fúngica es una infección por Candida, y en donde el método comprende:

(i)

(a) administrar por vía intravenosa una primera dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra,

(b) administrar por vía intravenosa una segunda dosis que comprende 200 mg de CD101 en forma salina o neutra, y

(c) opcionalmente, administrar por vía intravenosa una tercera dosis que comprende 200 mg de CD101 en forma salina o neutra,

en donde la primera dosis se administra el día 1, la segunda dosis se administra el día 8 y la tercera dosis, si se administra, se administra el día 15; o

(ii)

(b) administrar por vía intravenosa una segunda dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra, y

(c) opcionalmente, administrar por vía intravenosa una tercera dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra,

en donde la primera dosis se administra el día 1, la segunda dosis se administra el día 8, y la tercera dosis, si se administra, se administra el día 15.

2. El CD101 en forma salina o neutra para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde (i) comprende: (a) administrar por vía intravenosa una primera dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra, (b) administrar por vía intravenosa una segunda dosis que comprende 200 mg de CD101 en forma salina o neutra, y

(c) administrar por vía intravenosa una tercera dosis que comprende 200 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la primera dosis se administra el día 1, la segunda dosis se administra el día 8 y la tercera dosis se administra el día 15.

3. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 2, en donde (i) comprende además administrar por vía intravenosa una cuarta dosis que comprende 200 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la cuarta dosis se administra el día 22.

4. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 3, en donde (i) comprende además administrar por vía intravenosa una quinta dosis que comprende 200 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la quinta dosis se administra el día 29.

5. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde (i) comprende además administrar por vía intravenosa una sexta dosis que comprende 200 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la sexta dosis se administra el día 36.

6. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde (ii) comprende:

(a) administrar por vía intravenosa una primera dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra, (b) administrar por vía intravenosa una segunda dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra, y

(c) administrar por vía intravenosa una tercera dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra,

en donde la primera dosis se administra el día 1, la segunda dosis se administra el día 8 y la tercera dosis se administra el día 15.

7. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 6, en donde (ii) comprende además administrar por vía intravenosa una cuarta dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la cuarta dosis se administra el día 22.

8. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 7, en donde (ii) comprende además administrar por vía intravenosa una quinta dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la quinta dosis se administra el día 29.

9. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde (ii) comprende además administrar por vía intravenosa una sexta dosis que comprende 400 mg de CD101 en forma salina o neutra, en donde la sexta dosis se administra el día 36.

10. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde la Candida se selecciona del grupo que consiste en C. albicans, C. glabrata, C. dubliniensis, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. orthopsilosis, C. guilliermondii, C. rugosa, C. auris y C. lusitaniae.

11. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la tercera dosis que comprende 200 mg o 400 mg de CD101 en forma salina o neutra se administra si en el día 15 no se consigue la erradicación micológica y/o la curación clínica en el sujeto; o en donde la tercera dosis que comprende 200 mg o 400 mg de CD101 en forma salina o neutra se administra si en el día 15 el sujeto muestra síntomas de una infección fúngica;

opcionalmente en donde:

(i) la erradicación micológica viene determinada por un cultivo de sangre negativo o por dos cultivos de sangre negativos extraídos con un intervalo de > 12 horas sin cultivos de sangre positivos intermedios, o

(ii) los síntomas de la infección fúngica comprenden fiebre, tos, dificultad respiratoria, pérdida de peso, sudores nocturnos, taquicardia, taquipnea, hipotensión y/o hipotermia.

12. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en donde:

(i) el CD101 se administra durante un periodo de tiempo de 30 a 180 minutos;

(ii) el CD101 se administra como una composición farmacéutica acuosa, opcionalmente en donde la composición farmacéutica tiene un pH de 4,0 a 8; y/o

(iii) la sal de CD101 es acetato de CD101.

13. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde:

(i) la cantidad administrada mantiene por lo menos una concentración de prevención mutante de CD101 en forma salina o neutra en el plasma del sujeto durante un periodo de por lo menos 8 horas;

(ii) el tratamiento con una equinocandina ha fallado en dicho sujeto, opcionalmente en donde el tratamiento con anidulafungina, micafungina o caspofungina ha fallado en dicho sujeto; y/o

(iii) el tratamiento con una terapia de polieno, una terapia de flucitosina o una terapia de azol ha fallado en dicho sujeto.

14. El CD101 en forma salina o neutra para el uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en donde dicha infección por Candida es candidemia, candidiasis invasiva, candidiasis orofaríngea, candidiasis esofágica, candidiasis mucosal, candidiasis genital, candidiasis vulvovaginal, candidiasis gastrointestinal, candidiasis rectal, candidiasis hepática, candidiasis renal, candidiasis pulmonar, candidiasis esplénica, otomicosis, osteomielitis, artritis séptica o candidiasis cardiovascular.