NO321954B1 - Farmasoytisk preparat omfattende antisoppmiddel for intravenos administrering til en pasient, anvendelse av preparatet for fremstilling av intravenost medikament, fremgangsmate for fremstilling av det farmasoytiske preparatet og preparat som er fremstilt ved fremgangsmaten. - Google Patents

Description

Oppfinnelsens bakgrunn

Oppfinnelsen angår preparater for behandling og/eller

forebyggelse av soppinfeksjoner.

Det er et økende behov for nye antisoppmidler som er effektive mot opportunistiske mykotiske infeksjoner av typene Candida, Aspergillus, Cryptococcus og Pneumocystis carinii. Eksisterende behandlinger, dvs. amfotericin B og flukonazol, er inadekvate på grunn av deres toksisitet og resistens seleksjon. Preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse antas å være både sikre og fungicide.

Preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse inneholder en forbindelse som er nyttig som et antibiotikum, spesielt som et antisoppmiddel eller som et antiprotozomiddel. Som et antisoppmiddel er det nyttig både for kontroll av filamentøse sopp og gjær. Det er spesielt tilpasset anvendelse ved behandling av mykotiske infeksjoner hos pattedyr, spesielt de forårsaket av Candida-arter som C. albicans, C. tropicalis, C. krusei, C. glabrata og C. pseudotropicalis, og Aspergillus-arter som A. fumigatus, A. flavus og A. niger. I særdeleshet inneholder preparatene en forbindelse som er blitt funnet å være effektiv mot antatte amfotericin B- og flukonazol-resistente isolater av Candida. Preparatene er også nyttige ved behandling og/eller forebyggelse av Pneumocystis carinii pneumoni der immunkompromitterte pasienter, slik som de som lider av AIDS, er spesielt følsomme.

Preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse er sikre, stabile, lyofiliserte doseformer for rekonstituering, som er spesielt nyttige ved administrering av antisoppmidler til pasienter som har behov for slike midler.

Oppsummering av oppfinnelsen

Oppfinnelsen angår et farmasøytisk preparat for intravenøs administrering til en pasient, kjennetegnet ved at det omfatter

a) en farmasøytisk effektiv mengde av en forbindelse med formelen

og farmasøytisk akseptable salter av denne,

b) en farmasøytisk akseptabel mengde av en eksipiens som et massemiddel som effektivt danner en

lyofilisert kake; og

c) en farmasøytisk akseptabel mengde av en acetatbuffer som effektivt frembringer en farmasøytisk

akseptabel pH.

I en spesiell utførelsesform av denne oppfinnelse, fremstilles preparatet som en løsning av 42 mg/ml forbindelse I, 30 mg/ml sukrose, 20 mg/ml mannitol og 1,5 mg/ml (25 mM) eddiksyre justert til pH ca. 6 med natriumhydroksid. Løsningen fylles deretter på en ampulle med et volum på 1,25 ml og frysetørkes. Den frysetørkede kake inneholder 52,5 mg forbindelsen I, 62,5 mg sukker og 31,25 mikromol acetatbuffer pr. ampulle. Den lyofiliserte kake rekonstitueres deretter for anvendelse ved fortynning med 21 ml av et fortynningsmedium. 20 ral fortynningsmedium tas ut og rekonstitueres i en 200 ml infusjonspose. Pasienten infunderes deretter med denne løsning omfattende ca. 0,25 mg/ml forbindelsen I, ca. 0,03 millimol eller 0,15 millimolar acetatbuffer, ca. 0,3 mg/ml massemidler, med det dannede preparat som har en pH på ca. 5 til 7. Oppfinnelsen vedrører også anvendelse av et preparat ifølge oppfinnelsen for fremstilling av et intravenøst medikament til behandling og/eller forebygging av soppinfeksjoner hos et pattedyr og en fremgangsmåte for fremstilling av et farmasøytisk preparat som inneholder en forbindelse som har formelen

og de farmasøytisk akseptable saltene derav, kjennetegnet ved at fremgangsmåten omfatter trinnene med å a) løse opp et massemiddel eller kombinasjon av midler i vann, b) tilsette eddiksyre og justere pH til omtrent 3,7, c) tilsette forbindelse I og justere pH til omtrent 7

med base,

d) filtrere løsningen som er fremstilt på denne måten,

e) fryse inn nevnte løsning og

f) frysetørke den frosne løsningen.

Et preparat kjennetegnet ved at det er fremstilt ved

fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er også omfattet av oppfinnelsen.

Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen

Formuleringene ifølge oppfinnelsen frembringer økt kjemisk stabilitet til de farmasøytiske preparater. Én fordel med slik stabilitet er forlenget holdbarhet av det farma-søytiske produkt. Tidligere formuleringer anvender en tartrat-buffer inneholdende farmasøytisk betydelige mengder av uønskede degraderingsprodukter. Anvendelsen av en acetat-bufferformulering resulterer i dannelsen av færre degraderingsprodukter og en mer stabil formulering. Forlenget farmasøytisk holdbarhet medfører betydelige økonomiske fordeler.

Det er blitt funnet at forbindelsen med formelen

og farmasøytisk akseptable salter av denne er betydelig mer stabile ved lagring når de formuleres i nærvær av en acetatbuffer.

Forbindelse I i følge oppfinnelsen beskrives i US patent nr. 5378804. Fremgangsmåter for fremstilling av denne beskrives i det patent, så vel som i US patent nr. 5552521 som ble innvilget 3. september 1996.

Forbindelsen selv er høyst ustabil og degraderes på ulike måter inkludert, men ikke begrenset til, hydrolyse, dimerisering og oksidering. Imidlertid ble denne ustabilitet tidligere motvirket ved lyofilisering av forbindelsen i en tartratbufferformulering. Selv om denne formulering var relativt stabil, resulterte den i dannelsen av degraderingsprodukter i en relativt høy grad.

Ved å bytte til acetatbuffer, er det lyofiliserte produkt mer stabilt, inneholder mindre uønskede degraderingsprodukter og det forlenger holdbarheten til preparatet. Dette gjør det attraktivt som et kommersielt produkt.

Det beskrives også en fremgangsmåte for behandling av soppinfeksjoner forårsaket av Candida, Aspergillus og Pneumocystis carinii som omfatter administrering av preparatet inneholdende forbindelsen med formel I til en pasient som har behov for slik behandling i en mengde effektiv for å behandle soppinfeksjonen. Også beskrevet er en fremgangsmåte for forebyggelse av Pneumocystis carinii- infeksjoner hos en pasient som omfatter administrering av en forebyggende mengde av forbindelsen med formel I.

Acetatbufferformuleringen ifølge oppfinnelsen omfatter en mengde acetat som effektivt sørger for en farmasøytisk akseptabel pH, f.eks. sørger for et pH-miljø i området 5 til 8, fortrinnsvis ca. 6 til ca. 7. For å frembringe en farmasøytisk akseptabel mengde acetatbuffer effektivt til å oppnå den ønskede pH, kan egnede mengder av natriumacetat og eddiksyre, eller egnede mengder av eddiksyre og natriumhydroksid anvendes. Bufferen er typisk til stede i området fra ca. 12,5 mM til ca. 200 mM, med et foretrukket område fra ca. 25 mM til ca. 50 mM.

Eksipienser som massemidler, dvs. eksipienssukkere anvendes for å frembringe en estetisk egnet lyofilisert kake, fast fortynning av den aktive ingrediens og sorpsjon av tilgjengelig fuktighet. Sukkere nyttig i oppfinnelsen omfatter sukrose, laktose, mannitol eller kombinasjoner av disse. Det er blitt funnet at sukrose og mannitol frembringer en mer stabil formulering og danner en farmasøytisk elegant kake for preparatet. Eksipiensene er vanligvis til stede i mengder fra ca. 10-200 mg/ml, med en foretrukken mengde på

ca. 40-60 mg/ml.

Preparatene er ikke begrenset til den aktive ingrediens, acetatbuffer og masseraiddel, og kan også omfatte andre farmasøytisk akseptable fortynningsmidler, eksipienser eller barere. Formuleringene er egnede for langtidslagring i glassbeholdere som vanligvis anvendes innen den farmasøytiske industri, for eksempel i konsentrert form i standard USP Type I borsilikatglassbeholdere.

Preparatene ifølge oppfinnelsen fremstilles vanligvis som følger: 1) et massemiddel eller kombinasjon av midler oppløses i vann; 2) eddiksyre tilsettes og pH justeres til ca. 3,7, om nødvendig; 3) forbindelse I tilsettes og løses med påfølgende pH-justeringer med base til 5-6; 4) løsningen filtreres og fylles på en frysetørkingsampulle og fryses ved -50<*>C; 5) den fryste formulering frysetørkes ved -20 °C, med en sekundærtørking ved 15 "C (den fullstendige syklus

tar over to dager); og

6) frysetørkede ampuller korkes og lagres ved ca. 5 °C.

De frysetørkede formuleringer av preparatene kan fortynnes ved tidspunktet for administrering med et egnet fortynningsmiddel for å oppnå en sluttkonsentrasjon på for eksempel ca. 5,0 mg/ml, som er egnet for overføring til en infusjonspose for anvendelse av pasienten som har behov for den anmodede aktive ingrediens.

Betegnelsen "farmasøytiske akseptable salter" betyr ikke-toksiske salter av den aktive ingrediens, omfattende mono-, di- og trisyreformer, som vanligvis fremstilles ved å reagere den frie base med en egnet organisk eller uorganisk syre. Farmasøytisk akseptable salter egnet som syreaddisjons-salter, så vel som salter som frembringer anionet av det kvaternære salt er slike fra syrer som saltsyre, hydro-bromsyre, fosforsyre, svovelsyre, maleinsyre, sitronsyre, eddiksyre, tartarsyre, ravsyre, oksalsyre, eplesyre, glutaminsyre, pamoinsyre og lignende, og omfatter andre syrer forbundet med de farmasøytisk akseptable salter listet opp i Journal of Pharmaceutical Science, 66,2 (1977).

Betegnelsen "farmasøytisk effektiv mengde" skal bety den mengde av aktiv ingrediens som vil utløse den biologiske eller medisinske respons i et vev, system eller dyr som er ettertraktet av en forsker eller kliniker.

Preparater ifølge oppfinnelsen kan administreres til pasienter der behandling og/eller forebyggelse av sopp-inf eks joner er ønskelig. De er nyttige i behandling av Candida-arter som C. albicans, C. tropicalis, C. krusei, C. glabrata og C. pseudotropicalisfog Aspergrillus-arter som A. fumigatus, A. flavus og A. niger. De er også nyttige ved behandling og/eller forebyggelse av Pneumocystis carinii-pneumoni der immunkompromitterte pasienter, som de som lider av AIDS, er spesielt følsomme.

Doseregimer som benytter preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse utvelges i henhold til et uttall av' faktorer inkludert type, art, alder, vekt, kjønn og medisinsk tilstand hos pasienten; alvorligheten av tilstanden som skal behandles; administrasjonsmåten; nyre- og leverfunksjonen til pasienten; og den spesielle aktive ingrediens eller saltet av denne som anvendes. En alminnelig trenet lege kan enkelt bestemme og foreskrive den effektive mengde av medikamentet nødvendig for å forebygge, motvirke eller stoppe progresjonen av tilstanden. Intravenøst vil den mest foretrukne dose av aktiv ingrediens variere fra ca. 1,67 til ca. 33 ug/kg/minutt med en infusjonshastighet på ca. 200 ml/t. For å administrere denne mengde av aktiv ingrediens bør et preparat ifølge oppfinnelsen ha 0,025 til 0,50 mg/ml aktiv ingrediens basert på en pasient pa 50 kg.

Forbindelse I, den aktive ingrediens, fremstilles vanligvis som følger:

Startforbindelse II med formelen:

reduseres for å frembringe forbindelse III med formelen: > som deretter konverteres til forbindelse IV med formelen: 5som stereoselektivt konverteres til forbindelse I ved fjerning av en fenyltiogruppe.

I en alternativ fremgangsmåte reagerer forbindelse II med tiofenol for å frembringe forbindelse IV-a med formelen:

forbindelse IV-a reduseres deretter til forbindelse IV med

formelen:

som stereoselektivt konverteres til forbindelse I ved fjerning av fenyltiogruppen.

Fremstilling av forbindelse I

a) Syntese og separering av forbindelse III

Forbindelse II (15,9 g, 89 areal% rent, 3,4 vekt%

vann, 0,0128 mol) ble tilsatt tørr THF (0,64 1) og suspensjonen ble tørket til < 10 mol% vann ved tilbakeløpskoking gjennom et lag med 3A molekylsil. Ytterligere tørr THF ble tilsatt for å rekonstituere blandingen til originalvolumet og suspensjonen ble nedkjølt

til < 4 °C med et is/vann/metanolbad.

Rent BH3'SMe2{10,91 g, 0,144 mol) ble tilsatt i løpet av 10 minutter og reaksjonsblandingen ble oppbevart ved 0-4 °C. Reaksjonsforløpet ble fulgt ved HPLC inntil forholdet av startmateriale og produkt var 1:1, hvilket indikerer avslutning på reaksjonen (3,5 t). Etter 4 timer ble blandingen nedkjølt til -12 °C og langsomt stanset med 2 N HC1 (0,036 1). Denne løsning ble fortynnet med vann til 1,14 1. Analyseutbyttet av forbindelse III var 6,60 g (47

Den stansede løsning ble fortynnet til 4 1 og satt på en middeltrykkolonne av LiChroprep RP-C18-adsorbent (158 g). Etter påsetting ble kolonnen vasket med 1,2 1 vann og aminet ble eluert med 1,9 1 1:4 volum/volum acetonitril/vann, og deretter 0,38 1 1:3 volum/volum acetonitril/vann.

Fraksjonene med høyest produktinnhold (> 80 areal%) ble blandet og fortynnet med vann til en 1:7,3 volum/volum acetonitril/vann-løsning (1,70 1 totalt). Denne blanding ble satt på den samme kolonne som beskrevet ovenfor, og kolonnen ble vasket med 0,57 1 vann. Den ønskede forbindelse ble eluert med 0,57 1 metanol. Fraksjonene med høyest produktinnhold (> 85 areal%) ble blandet og konsentrert ved roterende fordamping og statisk høyvakuum for å gi 6,81 g (87 vekt% renhet, 6,8 vekt% vann) inneholdende 5,92 g av forbindelse III (hvor R<1>er dimetyltridecyl) hydrokloridsalt for et utbytte på 43 %.

b) Fremstilling av fenylsulfid ( forbindelse IV)

Forbindelse III (5,80 g analysert, 0,00533 mol) ble

blandet med 0,23 1 tørr acetonitril og nedkjølt til -5 °C der tiofenol (3,10 g, 0,028 mol) ble tilsatt. TFA (36 g, 24,5 ml, 0,318 mol) ble tilsatt i løpet av 20 minutter for å holde temperaturen i reaksjonsblandingen under 0 °C. Reaksjonen ble hensatt ved -10° til 0 °C inntil HPLC-analysen viste < 3 areal% startmateriale {3,75 t). Ved dette tidspunkt ble kaldt vann (0,56 1) tilsatt langsomt (1 t), mens reaksjonsblandingen ble nedkjølt for å holde temperaturen under 5 °C. Analyseutbyttet av a- og B-fenylsulfidadduktet som trifluoracetatsaltet var 4,82 g (71 %) .

Løsningen ble satt på den samme kolonne som beskrevet i trinn a og kolonnen ble vasket med vann (0,57 1), og de adsorberte organiske forbindelser ble deretter eluert med metanol (0,50 1). Fraksjonene med høyest produktinnhold ble konsentrert ved roterende fordampning og statisk høyvakuum. Det ga 7,20 g (57 vekt% renhet, 5,1 vekt% vann) av urenset fenylsulfidtrifluoracetatsalt som et amorft fast skum. Det korrigerte isolerte trinnutbytte for fenylsulfid var 4,10 g (61 %) som en 93:7-blanding av a- og (3-amindiastereomerer.

c) Konvertering av forbindelse IV til forbindelse I- l

Det urensede fenylsulfidtrifluormetansulfonatsalt

(8,4 g urenset materiale, 57 vekt% rent, 0,00377 mol) ble tilsatt etylendiamin (24 ml) under røring ved romtemperatur. Den dannede løsning ble omrørt i 1,5 t for å fullføre fjerningen, deretter ble metanol {40 ml) tilsatt, etterfulgt av eddiksyre (45 ml), og temperaturen ble holdt under 25 °C med isbadnedkjøling. En tykk velling ble dannet. Vann (160 ml) ble tilsatt for å løse opp slammet, og det vandige lag ble ekstrahert ved mild rysting med heksan (75 ml). Heksanlaget ble tilakeekstrahert med vann (40 ml) og det kombinerte vannlag ble filtrert gjennom en sintret glasstrakt med middels porøsitet, deretter renset ved preparativ HPLC ved hjelp av en 50 mm diameter C18-kolonne, ved anvendelse av 22 % acetonitril/78 % 0,15 % vandig eddiksyre som elueringsmiddel. Fraksjonene med høyest produktinnhold ble frysetørket for å frembringe 4,2 g 85 vekt% ren forbindelse I-l som diacetatsaltet i 78 % isolert trinnutbytte.

d) Krystallisering av forbindelse I- l

Det faste stoff (2,3 g) ble løst i etanol (25 ml), og

vann (2,7 ml) ble deretter tilsatt. Løsningen ble passert gjennom en sintret glasstrakt for å fjerne fremmed substans. Til dette filtrat ble det tilsatt eddiksyre {0,14 ml)

etterfulgt av sakte tilsetning (1,75 t) av etylacetat (14 ml). Løsningen ble krystallisert og krystallaget ble hensatt ilt. Det gjenværende etylacetat {32 ml) ble tilsatt i løpet av 5 t og hensatt i ytterligere 1 t. De faste krystaller ble samlet

på en sintret glasstrakt og vasket med en løsning av etanol/etylacetat/vann (hhv. 6 ml/9 ml/0,5 ml). Den våte kake ble tørket med en nitrogenstrøm for å gi 1,91 g (1,75 g analysert, 88 % gjenvinning) av diacetatsaltet av forbindelse I-l.

Eksempel 1

Fremstilling av Formulering 1

fyllvolum 0,875 ml til 1,8 ml •

Til en 25 ml volumetrisk flaske ble det typisk tilsatt 0,75 g sukrose og 0,5 g mannitol, ca. 17,5 ml vann, 0,5 ml 75 mg/ml eddiksyreløsning og 42 mg/ml ekvivalent av forbindelse I. Løsningen ble blandet og pH justert til 6 ved hjelp av IM NaOH.

Volumet ble justert med vann og pH ble bekreftet. Løsningen ble filtrert gjennom et Millex-GV sprøytefilter og fylt på 10 ml tubeglassampuller med 1,75 ml i hver. Ampullene ble delvis lukket med frysetørkingskorker og frysetørket for å gi en fast frysetørket kake på bunnen av ampullen.

Den lyofiliserte formulering fortynnes med 10,5 ml og 10 ml tas ut og fortynnes i 200 ml medførende en sluttkonsentrasjon på 0,25 mg/ml før administrering til pasienten.

Ytterligere formuleringer ble fremstilt som beskrevet ovenfor inneholdende de følgende ingredienser (hver av formuleringene ble fremstilt ved en løsningskonsentrasjon på 40-42 mg/ml aktiv ingrediens):

Formuleringene ble lagret i frysetørket tilstand ved 5 °C og undersøkt med ca. 4 ukers intervall for stabilitet. Stabilitet og dannelse av degraderingsprodukter ble bestemt ved gradient-HPLC ved anvendelse av standard fremgangsmåter kjent for fagpersoner innen teknikken.

Det ble overraskende funnet at formuleringene 1, 5, 7 og 8 var betydelig mer stabile og viste betydelig mindre uønskede degraderingsprodukter enn de andre formuleringene.

Claims (13)

1. Farmasøytisk preparat for intravenøs administrering til en pasient, karakterisert vedat det omfatter a) en farmasøytisk effektiv mengde av en forbindelse med formelen

og farmasøytisk akseptable salter av denne, b) en farmasøytisk akseptabel mengde av en eksipiens som et massemiddel som effektivt danner en lyofilisert kake; og c) en farmasøytisk akseptabel mengde av en acetatbuffer som effektivt frembringer en farmasøytisk akseptabel pH.

2. Farmasøytisk preparat ifølge krav 1,karakterisert vedat det omfatter a) en farmasøytisk effektiv mengde av forbindelse I; b) mellom omtrent 10-200 mg/ml av en eksipiens.som et massemiddel eller kombinasjon av massemidler som effektivt danner en lyofilisert kake; og c) en farmasøytisk akseptabel mengde av en acetat buffer som effektivt frembringer en pH mellom omtrent 4 og 7.

3. Preparat ifølge krav 2, karakterisert vedat det omfatter omtrent 5 - 200 mg/ml forbindelse I eller et farmasøytisk akseptabelt salt av denne, omtrent 12,5 mM - omtrent 200 mM av en acetatbuffer, omtrent 10-200 mg/ml massemiddel, og vann.

4. Preparat ifølge krav 3, karakterisert vedat det omfatter omtrent 30-50 mg/ml av forbindelse I eller et farmasøytisk akseptabelt salt av denne, omtrent 20-60 mM av en acetatbuffer, omtrent 30-70 mg/ml sukker eller kombinasjon av sukkere som massemiddel som effektivt danner en lyofilisert kake, og vann.

5. Preparat ifølge krav 4, karakterisert vedat det omfatter 42 mg/ml av forbindelse I eller et farmasøytisk akseptabelt salt av denne, 25 mM av en acetatbuffer, 30 mg/ml sukrose, 20 mg/ml mannitol, og vann.

6. Preparat ifølge krav 4, karakterisert vedat det omfatter 42 mg/ml av forbindelse I eller et farmasøytisk akseptabelt salt av denne, 50 mM av en acetatbuffer, 30 mg/ml sukrose, 20 mg/ml mannitol, og vann.

7. Anvendelse av et preparat ifølge krav 1 for fremstilling av et intravenøst medikament til behandling og/eller forebygging av soppinfeksjoner hos et pattedyr.

8. Anvendelse ifølge krav 7, der pattedyret er et menneske.

9. Anvendelse av preparat ifølge krav 1, 5 eller 6 for fremstilling av et medikament til behandling av en infeksjon som er forårsaket av Candida-arter.

10. Anvendelse av preparat ifølge krav 1, 5 elle.r 6 for fremstilling av et medikament til behandling av en infeksjon som er forårsaket av Aspergillus- arter.

11. Anvendelse av preparat ifølge krav 1, 5 eller 6 for fremstilling av et medikament til behandling eller forebygging av en infeksjon eller tilstand som er forårsaket av Pneumocystis carinii.

12. Fremgangsmåte for fremstilling av et farmasøytisk preparat som inneholder en forbindelse som har formelen

og de farmasøytisk akseptable saltene derav,karakterisert vedat fremgangsmåten omfatter trinnene med å a) løse opp et massemiddel eller kombinasjon av midler i vann, b) tilsette eddiksyre og justere pH til omtrent 3,7, c) tilsette forbindelse I og justere pH til omtrent 7 med base, d) filtrere løsningen som er fremstilt på denne måten, e) fryse inn nevnte løsning og f) frysetørke den frosne løsningen.

13. Preparat, karakterisert vedat det er fremstilt ved fremgangsmåten ifølge krav 12.