DK175029B1

DK175029B1 - 2-(heterocyclylthio)carbapenemderivater, farmaceutiske midler indeholdende dem, fremgangsmåde til fremstilling deraf samt deres anvendelse som antibiotika

Info

Publication number: DK175029B1
Application number: DK198901580A
Authority: DK
Inventors: Masayuki Iwata; Teruo Tanaka; Isao Kawamoto; Masao Miyauchi; Rokuro Endo
Original assignee: Sankyo Co
Priority date: 1988-04-01
Filing date: 1989-03-31
Publication date: 2004-05-03
Also published as: IE950607L; ATE114654T1; ES2067534T3; EP0597821A1; HUT50178A; FI891572A0; EP0337637B1; AU3238689A; KR0133071B1; HK1005733A1; DE68919508D1; CA1336092C; DE68919508T2; FI91258C; FI91258B; US5104867A; NO891364D0; GR3015128T3; DK158089A; NZ228589A

Description

DK 175029 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte 2-(heterocyclylthio)carbapenem-forbindelser, fremgangsmåder til fremstilling deraf, farmaceutiske midler indeholdende disse forbindelser og deres anvendelse til fremstilling af antibiotika.

A

Penicillinerne udgør en velkendt klasse af antibiotika, som I

5 har fundet stor anvendelse til behandling af mennesker og dyr i mange år. Penicillinerne har kemisk falles en 0-1actamstruk-tur, som almindeligvis refereres til som "penam", og som kan repræsenteres ved den følgende formel:

S

/ \ ·-· · (A)

I I I

• -N-· i o

Selvom penicillinerne stadig udgør et vardifuldt våben inden 10 for det farmaceutiske arsenal, har udviklingen af hidtil ukendte, ofte pen i c i 11 inresi stente patogene bakteriestammer imidlertid i stigende grad gjort det nødvendigt at søge hidtil ukendte antibiotikatyper.

I de senere år er der blevet udvist stor interesse for forbindelser med en carbapenemstruktur, dvs. forbindelser med et carbonatom i stedet for svovlatomet i 1-stillingen og med en ^ dobbeltbinding mellem carbonatomerne i 2- og 3-sti 11 i ngerne i * den grundlæggende penamstruktur. Carbapenemstrukturen kan re præsenteres ved den følgende formel: 2 DK 175029 B1 / \ 6·-·5 ·2 (B) Ί f r 7·-Ν-·3 5 7 4 0

Disse penam- og carbapenemstrukturer udgør grundlaget for den halvsysteaatiske noaenklatur for penici11inderivaterne i ovei— ensstemaelse aed anbefalingerne fra the International Union of Pure and Applied Cheaistry (IUPAC), og denne noaenklatur er generelt accepteret af fagaanden inden for området overalt i verden og er anvendt heri. Det heri anvendte nummereringssy-stea er det, soa er illustreret i den ovenfor viste formel (B) .

15

Blandt de kendte carbapeneaderivater er den bedst kendte en forbindelse kaldet "thienamycin", hvis halvsysteaatiske navn er 2-(2-aminoethylthio)-6-(1-hydroxyethyl)carbapen-2-ea-3-car-boxylsyre. Selvom thienamycin er kendt for at have bemærkel- 20 sesværdig kraftig og bred antibakteriel aktivitet er dens kemiske stabilitet i menneskelegemet ringe, hvilket begrænser dens praktiske anvendelse. Der har derfor været gjort forskellige forsøg på at modificere thienamycins kemiske struktur for at forbedre dens kemiske stabilitet under bevarelse eller 25 forbedring af dens overlegne aktivitet, men der er stadig et fortsat behov for udvikling af yderligere carbapenemantibio-tika med forbedrede egenskaber.

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer en hidtil ukendt 30 gruppe af carbapenemderi vater, som har overlegen absorption og metabolisk stabilitet (som det kan ses ved forbedrede udvindingsgrader i urinen) såvel som et bredt antibakterielt spektrum og lav toksicitet. Opfindelsen tilvejebringer også syntesefremgangsmåder til fremstilling af de hidtil ukendte carba-35 penemderi vater såvel som farmaceutiske midler omfattende derivaterne, som er egnede til administration til mennesker og dyr.

3 DK 175029 B1

Blandt den kendte teknik, som er kendt af den foreliggende opfindelses ophavsmand, er følgende ment at vare narmest: I US patentskrifterne nr, 4.640,799 og nr. 4.665.170 omhandles 5 carbapenemforbindelser, hvori der er en gruppe S-A-N+ i 2-stillingen. "A" kan vare forskellige grupper, og N+ reprssen* terer en kvaterniseret nitrogen-holdig heterocyk1 i sk gruppe forbundet til A gennem dens kvaternare nitrogenatom. Disse forbindelser adskiller sig fra forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse ved at, når forbindelserne ifølge den fo-10 religgende opfindelse indeholder en kvaterniseret nitrogen-holdig heterocyklisk gruppe med et kvaternart nitrogenatom, er denne ikke forbundet til resten af molekylet via det kvaternare nitrogenatom, men er forbundet via et carbonatom i den heterocykliske gruppe.

15 I europaisk patentskrift nr. 126.587 beskrives en rakke car-bapeneraforbindel ser med en pyrrolidinylthiogruppe i 2-stillin-gen. Disse adskiller sig fra forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse, som er kvaternare nitrogenforbindelser, ved at disse kendte forbindelser ikke er kvaternare nitrogen-20 forbindelser, og de adskiller sig fra de ikke-kvaterniserede forbindelser ifølge den foreliggende opfindelse i substituen-ternes natur på den heterocykliske ring. Visse af forbindelserne beskrevet i denne kendte teknik kan have god aktivitet, men de menes at blive mindre godt absorberet in vivo end forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse.

25

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse er repræsenteret ved formlen (I): 4 DK 175029 B1 HO H CHa

\ / I

C C-H

/ \ f \

HjC CH_CH C-S-(CH;)rRa I I Μ (I)

C_N_C

// \ O COOR5 hvori: R* betegner en gruppe med formlen (ΠΙ): R' R- \ / C R' / \ / (CR * 2) p C (III) I I \ N_C R' / \\

R2a O

og hvori: 5 et af symbolerne R' betegner en binding til resten af forbindelsen med formlen (I)» idet i nævnte gruppe med formlen (HI) de andre symboler R alle betegner hydrogenatomer, R2· betegner et hydrogenatom eller en C,-C4-alkylgruppe; og R5 betegner et hydrogenatom, en kation eller en beskyttelsesgruppe for en carboxygrup- pe; 10 {er 0 eller 1; 5 DK 175029 B1 p er 0 eller det hele tal 1 eller 2; og farmaceutisk acceptable salte og estere deraf, « idet den beskyttende gruppe for en cafboxygruppe og esterresten af den farmaceutisk acceptable ester er udvalgt blandt en C1-C20-alkylgruppe; en Cj-C7-cykloalkylgruppe; en 5 aralkylgruppe, hvori alkyldelen er CrC3, og den aromatiske gruppe er C6-C,4 og er usub-stitueret eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (c); en C2-C6-alkenylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (a); en halogeneret C|-C6-alkylgruppe; en substitueret silylalkylgruppe, hvori hver alkyldel er Ci-C6, og silylgruppen har op til 3 substituenter valgt blandt C|-C6-10 alkylgrupper og phenylgrupper, som er usubstituerede eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (a); en phenylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en C,-C4-alkyl- eller (C,-C6)alkanoylaminosubstituent; en phenacylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (a); en cyklisk eller acyklisk terpenylgruppe valg blandt geranyl-, neryl-, linalyl-, phytyl-, 15 menthyl-, thujyl-, caryl-, pinanyl-, bomyl-, notcaryl-, norpinanyl-, norbomyl-, menthe-nyl-, camphenyl- og norbomenylgrupper; en alkoxymethylgruppe, hvori alkoxydelen er C,-C6, som er usubstitueret eller i sig selv er substitueret med en enkelt usubstitueret alkoxygruppe; en alifatisk acyloxymethylgruppe, hvori acylgruppen er en alkanoylgruppe; en højere alifatisk acyloxyalkylgruppe, hvori acylgruppen er en alkanoylgruppe, og alkyl-20 delen er C2-C6; en cykloalkylsubstitueret alifatisk acyloxyalkylgruppe, hvori acylgruppen er «i alkanoylgruppe, cykloalkylsubstituenten er C3-C7, og alkyldelen er en Ci-C6-alkyl-gruppe; en alkoxycarbonyloxyalkylgruppe, hvori alkoxydelen er Ci-C|0, og alkyldelen er

C]-Cé; en cykloalkylcaibonyloxyalkyl- eller cykloalkyloxycarbonyloxyalkylgruppe, hvori cykloalkylgruppen er C3-C10, er mono- eller polycyklisk og eventuelt er substitueret med 25 i det mindste en C,-C4-alkylgruppe, og aikylgruppen er en C|-C6-alkylgruppe; en cykloal-kylalkoxycarbonyloxyalkylgruppe, hvori alkoxygruppen har en enkelt cykloalkylsubstitu-ent, idet cykloalkylsubstituenten er C3-Cj0 og mono- eller polycyklisk; en terpenyl- I

carbonyloxyalkyl- eller terpenyloxycaibonyloxyalkylgruppe (hvori terpenyldelen er som 6 DK 175029 B1 defineret ovenfor); en 5-alkyl- eller 5-phenylsubstitueret (2-oxo-l ,3-dioxolen-4-yl)alkylgruppe, hvori hver alkylgruppe er C,-C6> og hvori phenylgruppen er usubstitueret eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (c); en phthalidylgrup-pe; en indanylgruppe; eller en 2-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1,3-benzodioxolen-4-yl-gruppe; i 5 hvilke substituenter fal omfatter hydroxygrupper, cyanogrupper, caibamoyloxygrupper, azidogrupper, carboxygrupper, nitrogrupper, oxogrupper, halogenatomer, Ct-C6-alkoxygrupper, C j-C6-al kanoyl grupper, C,-C6-alkanoyloxygrupper, C i -C6-alkanoyl aminogrupper, Q-Cralkoxycarbonylgrupper, grupper med formlen -NR'°R11 og -CONR12R'3 10 hvori R10, R11, R12 og R13 er ens eller forskellige og hver betegner et hydrogenatom, en C,-C6-alkylgruppe eller en C,-C6-alkanoylgruppe, grupper med formlen -S02NR’4R15 og -S(0)kR16 hvor R14, R15 og R16 er ens eller forskellige og hver betegner en CrC6-aIkylgruppe, og k er nul eller et helt tal 1 eller 2, og 15 grupper med formlen -NHS02R17, -N=CR18NR19R20, -N=CR21CR22=NR23 og -C(=NH)-NR24R25 hvor R17 til R25 er ens eller forskellige og hver betegner et hydrogenatom eller en Cr Q-alkylgruppe; og hvilke substituenter (cl omfatter: 20 C i -C4-alkylgrupper, C|-C4-alkoxygrupper, C|-C4-halogenalkylgrupper, CrC3-alkylen- dioxygrupper, halogenatomer, cyanogrupper og nitrogrupper.

7 DK 175029 B1

Opfindelsen tilvejebringer også et farmaceutisk middel omfattende en effektiv mængde af et antibiotikum i blanding med en farmaceutisk acceptabel bærer eller et farmaceutisk acceptabelt fortyndingsmiddel, hvor antibiotikummet er i det mindste en forbindelse valgt blandt forbindelserne med formlen (I) og 5 farmaceutisk acceptable salte og estere deraf.

Opfindelsen tilvejebringer endvidere en anvendelse til fremstilling af et lægemiddel til behandling eller forhindring af mikrobiel infektion ved administration til et pattedyr, som kan være et menneske, af en ef-jq fektiv mængde af et antibiotikum, hvor antibiotikummet er i det mindste en forbindelse valgt blandt forbindelserne med formlen (I) og farmaceutisk acceptable salte og estere deraf.

Opfindelsen tilvejebringer også fremgangsmåder til fremstilling af forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse, som J5 er beskrevet mere detaljeret herefter.

I forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse, hvor R'°, Rn, R12, R'3, R14, R15, R'6, R17, R18, R19, R20, R21, R22, R23, R24 eller R25 betegner en alkylgruppe, kan denne være en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe indeholdende fra 1 til 6 carbonatomer, og eksempler omfatter grupperne methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, 20 t-butyl, pentyl, isopentyl, 2-methylbutyl, hexyl, isohexyl og 2-methylpentyl, blandt hvilke grupperne methyl, ethyl, propyl og butyl foretrækkes, idet methylgruppen generelt foretrækkes mest. 1 25 tilfældet med R2* er den mest foretrukne alkylgruppe methylgruppen.

8 DK 175029 B1 Når R,0f R1', R12, R13 eller substituent (a) betegner en alkanoylgruppe, kan denne være en ligekædet eller forgrenet alkanoylgruppe indeholdende fra 1 til 6 carbonatomer, og eksempler omfatter grupperne formyl, acetyl, propionyl, butyiyl, isobutyryl, valetyl, isovaleryl, pivaloyl og hexanoyl, blandt hvilke formyl gruppen og acetylgruppen foretræk-5 kes mest.

Når substituent (a) betegner en alkanoylaminogruppe,kan denne være en ligekædet eller forgrenet alkanoylaminogruppe indeholdende fra 1 til 6 carbonatomer, og eksempler omfatter grupperne formamido, acetamido, propionamido, butyramido, isobutyramido, valerylamino, isovalerylamino, pivaloylamino og hexanoylamino, blandt hvilke acetami-10 dogruppen foretrækkes mest.

Når substituent (a) betegner en alkanoyloxygruppe, kan denne være en ligekædet eller forgrenet alkanoyloxygruppe indeholdende fra 1 til 6 carbonatomer, og eksempleromfatter grupperne formyloxy, acetoxy, propionyloxy, butyiyloxy, isobu-tyryloxy, valeryloxy, isovaleryloxy, pivaloyloxy og hexanoyl-jg oxy, blandt hvilke grupperne acetoxy, propionyloxy, butyryl-oxy, isobutyryloxy og pivaloyloxy er mere foretrukne, og acet-oxygruppen er mest foretrukket.

Når substituent (a) betegner et halogenatom, kan dette være et fluoratom, chloratom, iodatom eller bromatom, blandt hvilke fluoratomet, chloratomet og bromatomet fore-20 trækkes, idet fluoratomet og chloratomet foretrækkes mest.

Når substituent (a) betegner en alkoxygruppe, kan denne være en ligekædet eller forgrenet alkoxygruppe indeholdende fra 1 til 6 carbonatomer, og eksempler omfatter grupperne methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobu-toxy, sec-butoxy, t-butoxy, pentyloxy, isopentyloxy, 2-methyl-^ butoxy, hexyloxy, isohexyloxy og 2-methylpentyloxy, blandt hvilke grupperne methoxy, ethoxy, propoxy og butoxy er fore- 9 DK 175029 B1 trukne, idet methoxygruppen generelt er den mest foretrukne.

Når substituent (a) betegner en alkoxycarbonylgruppe, kan denne være en ligekædet eller forgrenet alkoxygruppe indeholdende i alt fra 2 til 7 cafbonatomer omfattende carbonatomet i carbonylgruppen (dvs. alkoxydelen indeholder fra 1 til 6 5 carbonatomer), og eksempler omfatter grupperne methoxycarbo-nyl, ethoxycarbony!, propoxycarbony1, isopropoxycarbony1, but-oxycarbonyl, isobutoxycarbony1, see-butoxycarbonyl, t-butoxy-carbonyl, penty 1oxycarbonyl, isopenty1oxyearbonyl, 2-methyl-butoxycarbony1, hexyloxycarbony1, isohexyloxycarbonyl og 2-methylpentyloxycarbonyl, blandt hvilke grupperne methoxycar-jQ bonyl og ethoxycarbony! er mest foretrukne.

Specifikke eksempler på atomer og grupper, som er indbefattet inden for substituenter (a) omfatter: hydroxygrupper, cyanogrupper, carbamoy1oxygrupper, azido-grupper, carboxygrupper, nitrogrupper og oxygrupper; halogenatomer, såsom chloratomet, fluoratomet, bromato-met og jodatomet, især chloratomet og fluoratomet; C1-C6-alkoxygrupper, Ci-Cg-alkanoylgrupper, Ci-Cg-alka-noyloxygrupper, Cj-Cg-alkanoylaminogrupper og C2“C7-alk-oxyearbonylgrupper, som ovenfor eksemplificeret; - 20 grupper aed formlen -NR1°r11 og -C0NR12r13# dvs. amino-og carbamoylgrupper og al kylsubstituerede og alkanoylsub-st i tuerede derivater deraf, såsom grupperne amino, meth-ylamino, ethylamino, propylamino, isopropy1 ami no, butyl- 10 DK 175029 B1 amino, isobutylamino, sec-butylamino, t-buty1 a* i no, d i -methyl amino, di ethyl ami no, dipropylamino, di isopropy1 am i -no, dibutylamino, carbamoyl, methylearbamoy1, ethylcarba-moyl, propyl carbamoyl, isopropylcarbamoy1, butyIcarbamo-^ yl, isobutylcarbamoyl, sec-butylcarbamoyl, t-butylcarba moyl, dimethylearbamoyl, diethylearbamoy1, dipropylearbamoy 1, diisopropylcarbamoyl, di buty1 carbamoyl, formamido, acetamido, prop ionamido, butyramido, isobutyramido, vale-rylamino, isovalerylami no, pivaloylamino, hexanoy1 ami no, formyl carbamoyl, acetylearbamoy!, propionylcarbamoyl, bu-10 tyry1carbamoy1, isobutyrylearbamoy1, valerylamino, isova- lerylamino, pivaloylcarbamoyl og hexanoylearbamoy1; grupper med formlen SO2NRHRI5 og -S(0)fcRl®, dvs. grupperne sulfamoyl, thio, sulfinyl og sulfonyl, f.eks. grup-^ perne methylsulfamoyl, ethylsulfamoyl, propylsulfamoyl, isopropylsulfamoy1, buty 1su1famoyl, isobuty1 sulfamoyl, sec-butylsulfamoyl, t-butylsulfamoyl, dimethylsulfamoyl, di ethyl sulfamoy1, dipropy1su1famoy1, di isopropy1 sulfamoyl, di buty1 sulfamoy1 og thio-, sulfinyl- og sulfony 1 grupperne eksempi iceret for R2, når R2 repræsenterer en gruppe med formlen -S(0)jR9; 20 grupper med formlen -NHSO2R17, -N*Cr18Nr19r20, -N=CR21cR22»NR22 og -C(=NH)NR24r25, hvori Ri? til R25 er som ovenfor defineret og eksemplificeret.

25 Når substituenter (c) er CrC4-alkylgrupper, halogenatomer, cyanogrupper og nitrogrupper, kan disse være som eksemplificeret andet steds ovenfor. Når substituent (c) er en alkylendioxygruppe, har denne fra 1 til 3 carbonatomer og er fortrinsvis forbundet til 2 11 DK 175029 B1 nærliggende stillinger i benzylgruppen, som den substituerer. Eksempler omfatter methylendioxy-, dimethylendioxy- og trimethylendioxygrupper, blandt hvilke methylen-dioxygruppen foretrækkes. Når (c) er en CrC4-halogenalkylgruppe, omfatter gruppen: fluormethyl, difluormethyl, trifluormethyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 3-fluorpro-5 pyl, 2,2,2-trichlorethyl, 2-chlorethyl, 2-bromethyI, 2-iodethyl, 2,2-dibromethyl og 2,2,2-tribromethyl.

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse kan indeholde en basisk gruppe, og kan derfor danne syreadditionssalte. Også når R5 betegner et hydrogenatom, en kation eller en beskyttelsesgruppe, og Ra betegner gruppen (II), er en anion nødvendig for at udligne den positive ladning på nitrogenatomet i gruppen (II). Denne anion kan tilvejebringes ved hjælp af en syre son nedenfor eksemplificeret. Naturen af sådanne salte og sådanne syrer er ikke afgørende for opfindelsen, forudsat at når forbindelsen er påtænkt terapeutisk brug, er saltet farmaceutisk acceptabel, hvilket betyder, som det er vel-15 kendt, at det ikke har en lavere (eller signifikant lavere) aktivitet eller en højere (eller signifikant højere) toksicitet end den frie base. Når forbindelsen er påtænkt anden brug, f.eks. som et mellemprodukt ved fremstilling af andre forbindelser, gælder imidlertid selv denne begrænsning ikke.

20

Eksempler på syrer, som kan danne sådanne salte eller kan give den udlignende anion, omfatter: uorganiske syrer, såsom saltsyre, hy drogenbrom idsyre, hydrogenjodidsyre, phosphorsyre, svovlsyre eller salpetersyre; organiske sulfonsyrer, såsom raethansulfonsyre, ethansu1 fonsyre, benzensu1 fonsyre eller p-toluensu1 fonsyre og organiske carboxylsyrer, såsom oxalsyre, vinsyre, citronsyre, maleinsyre, ravsyre, eddikesyre, benzoe- 12 DK 175029 B1 syre, «andelsyre, ascorbinsyre, mælkesyre, gluconsyre og æble-syre.

Eksempler på kationer, som kan være repræsenteret af M i forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse omfatter: me- ^ talatomer, især alkalimetalatomer, såsom natrium- og kaliumatomer, og jordalkalimetalatomer, såsom calciumatomet, ammo-niumgruppen og kationer hidrørende fra en trialkylamin, såsom triethylamin, eller fra en anden organisk base, såsom procain, di benzyl amin eller phenethy1amin.

10 Blandt forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse foretrækkes: sådanne hvori: P er 1, og især hvor gruppen med formlen (III) er en pyrroli-din-2-on-4-yl-gruppe, som har gruppen R2a ved dens nitrogenatom; og ^ R2a er et hydrogenatom, en Cj-Cj-alkyl gruppe, mere foretrukket en methylgruppe, ethylgruppe, propylgruppe eller butylgruppe, og mest foretrukket er et hydrogenatom, dvs. pyrrolidin-2-on-4-yl-gruppen er usubstitu-eret.

Forbindelserne med formlen (I) kan eksistere i form af for-20 skellige isomerer på grund af tilstedeværelsen af asymmetriske carbonatomer. Både de individuelle i somerer og blandinger af to eller flere isomerer er indbefattet ifølge den foreliggende opfindelse. Sådanne blandinger kan fremstilles som et resultat af syntesereaktioner eller ved blanding. Når der ønskes en in- 13 DK 175029 B1 dividuel isomer, kan denne fremstilles ved hjælp af en stereospecifik syntesevej, eller den kan fremstilles ved adskillelse af en blanding af isomerer under anvendelse af adskillelsesteknikker, som er velkendte inden for området. Der foretrækkes ^ særligt sådanne forbindelser, hvori 1-hydroxyethy1 gruppen ved 6-penemsti 11 i ngen er i den samme konfiguration som thienamy-cin, dvs. den er 1(R)-hydroxyethyl . Også når Ri betegner et hydrogenatom foretrækkes ( 5R,6S)-konfi gurat ionen , og når R1 betegner en methylgruppe foretrækkes (IR, 5S,5S)-konfiguratio-nen.

10

Specifikke eksempler på forbindelserne ifølge opfindelsen er anført i de følgende formler (1-8) og (1-9), hvori substituenteme er som defineret i den tilsvarende tabel blandt tabellerne 8 og 9 [dvs. tabel 8 angår formlen (1-8) og tabel 2 angår formlen (1-9)].

I tabellerne anvendes de følgende forkortelser:

15 ac acetyl I

Ada adamantyl

All allyl

Azr aziridinyl

Azt azetidinyl

Bu butyl 2Q cBu cyklobutyl sBu sec-butyl tBu t-butyl

Byr butyryl iByr isobutyryl

Bz benzyl

Car carbamoyl 14 DK 175029 B1

Oix 2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl

Dox (5-methyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4- y1) methyl

Et ethyl

Etc ethoxycarbonyl 5 cHp cykloheptyl cHx cyklohexyl

Me methyl

Mec methoxycarbony1

Men menthyl

Mor aorpholino 10 Pdox (5-pheny1-2-oxo-l,3-d ioxo1en-4- y1) methyl

Ph phenyl

Phth phthalidyl

Pip piperidyl

Piv pivaloyl 1^ Ρϊς piperazinyl cPn cyklopentyl

Pr propyl cPr cyklopropyl iPr isopropyl

Prg propargyl (=* 2-propynyl)

Prn propionyl 20

Pyrd pyrrolidinyl

Tfm trif1uormethy1

Thz perhydro-i,4-thiazin-4-yl (a thiomorpholino ) 25 15 DK 175029 B1 HO H CH3

\ / I

C Η H C-H (CH2)p / M 1/ ' / ' h3c c-c c-s-ch N-R3 (1-8) i i II \ /

C-N-C C

// \ II

o c*o o OR5

HO H CH3 O

\ / I tt

c Η H C-H H2c-C

/ \| 1/ \ I I

h3c c-c C-S-CH N-R3 (1-9) I I II \ / C-N-C CH2 o COOR5 16

Tabel S

Forb. R3 R5 £ nr.

DK 175029 B1 8-1 H Na 2 8-2 H DOX 2 8-3 H Na 1 8-4 H PivO-CH2- 1 8-5 H -CH^O-CO- (1-Me-cHx) 1 8-6 H -CH(Me)0-C0-0-cPa 1 8-7 H -CH(Me)0-C0-0-iPr 1 8-8 H -CH (Me )0-C0-0-Men 1 8-9 H -CH(Me)0-C0-0-CH2£HX 1 8-10 H -CH(Me)0-C0-0-cHx 1 8-11 H -CH(Me)0-C0-cHx 1 8-12 H -CHjOAC 1 8-13 H 1-EtcOEt 1 8-14 H 1-PivOEt 1 8-15 H Dox 1 8-16 H Phth 1 8-17 Me PivO-CHj- 1 B-18 Me -CHjO-CO- (1-Me-cHx) 1 8-19 Me -CH(Me)0-C0-0-cPn 1 8-20 Me -CH(Me)0-C0-0-iPr 1 8-21 Me -CH(Me)0-CO-O-CH2cHx 1 8-22 Me -CH(Me)0-C0-O-cHx 1 8-23 Me -CH(Me)0-C0-cHx 1 8-24 Me -CH2OAC 1 8-25 Me 1-EtcOEt 1 8-26 Me 1-PivOEt 1 8-27 Me Dox 1 8-28 Me Phth 1 8-34 H PivO-CH2- 2 8-35 H 1-EtcOEt 2

Forb. R

nr.

Tabel 9 17 DK 175029 B1 9-1 H Na 9-2 H PivO-CHj- 9-3 H -CH^O-CO-C1-Me-CHX) 9-4 H -CHjO-CO-O-Men 9-5 H -CH(Me)0-CO-cPa 9-6 H -CH(Me}O-CO-O-iPr 9-7 H -CH(Me)0-C0-0-Mea 9-0 H -CH(Me)0-C0-0-CH2-cHx 9-9 H -CH(Me)O-CO-O-cHx 9-10 H -CH(Me)O-CO-O-tBu

9-11 H -CH(Me)0-C0-cHX

9-12 H 1-PivOEt

9-13 H -CHjOAC

9-14 H 1-EtcOEt 9-15 H -CH(Me)O-CO-O-CHE t 9-16 H -CH(Me)O-CO-O-CP c ^ 9-17 H -CH (Me) O-CO-O-cHp

9-18 H DoI

9-19 H Phth

9-20 H PdoX

9-21 H 1-AcOEt 9-22 H 1-lBycOEt 9-23 H -CHjO-CO-(1-Me-CPn) 9-24 H 1-MecOEt 9-25 H -CH(Me)O-CO-O-Ada 9-26 Me PivO-CH2- 9-27 Me -CH20-C0-(1-Me-CHx) 9-28 Me -CH(Me)0-C0-0-cPn

Tabel 9 (fortsati 18 DK 175029 B1

Forb. R* ® nr.

9-29 Me -CH(Me)0-C0-0-iPr 9-30 Me -CH(Me)O-CO-O-Men 9-31 Me -CH(Me)0-C0-0-CH2-cHr 9-32 Me -CH(Me)0-C0-0-cHx 9-33 Me -CH(Me)0-CO-cHx

9-34 Me -CH2OAC

9-35 Me 1-EtcOEt 9-36 Me 1-PivOEt 9-37 Me Dor 9-3 8 Me Na 9-39 Me Pbth 9-44 Et . PivO-CH^- 9-45 Et 1-EtcOEt 9-46 Et Dor 9-47 Et Na 9-49 H -CH(Me)0-C0-0-sBu 9-50 H 1-AcOEt 9-51 H -CH20-C0-0-CH2-CPt 9-52 H -CH20-C0-0-CH2-CBu 9-53 H -CH(Me)0-C0-0-CH2-cPn 9_54 H 2-oxo-4.5.6.7-tetrahydro- 1,3-benzodioxolen-4-yl 9-55 H 5-iPC-DiX-CH2-

Tabel 9 (fortsat) 19 DK 175029 B1

Forb. R

nr.

9-56 H 5-lBu-Dix-CH2- 9-57 H l-(5-Me-Dix)Et 9-58 H l-(iPrO-C0-O-)Et 9-59 H 2-Me-l-(iPr0-C0-0-)Pr 9-60 H 2-(iPr0-C0-0-)Pr

9-61 H 1-PivOPE

9-62 H 2-Me-l-PivOPr

9-63 H 2-PivOPC

9-64 Η 1-(1-MecHx-CO-O-)Pc 9-65 H 2-Me-l-(1-MecHx-CO-O-)Pr 9-66 H 2-(1-MecHx-CO-O-)Pr

9-67 Η 1-(cHx-C0-0-)PC

9-68 H 2-Me-l-(cHx-C0-0-)Pr 9-69 H (cHx-AcO)-CH2- 9-70 H l-<cHX-AcO)Et 9-71 H l-(cHx-AcO)Pr 9-72 H 2-Me-l-(cHx-AcO)Pr 9-73 H 1-iByrOEt 9-74 H 1-iByrOPr 9-75 H (cPQ-C0-0-)CH2- 9-76 Η 1- (c.Pn-CO-0- )Et 9-77 H l-(cPn-C0-0-)Pr 9-78 H 2-Me-l-(cPn-CO-O-)Pr

9-79 H 1-AcOPC

9-80 H l-Ac0-2-MePr 9-81 H PrnO-CH2- 9-82 H 1-PrnOEt 9-83 H 1-PrnOPr 20

Tabel 9 (fortsat)

Forb. R3 R5 nr.

DK 175029 B1 9-84 Η 1-(1-MecPn-CO-O-)Et

9-85 H l-(1-MecPn-CO-O-)PC

9-86 H 2-AcOPt 9-87 H ByrO-CH2- 9-88 H 1-ByrOEt 9-89 H iP rO.CO. OCHj- 9-90 H cPnO.CO.OCH2- 9-91 H cHxO.CO.OCH2- 9-92 H tB«O.CO.OCH2- 9-93 H EtO.CO.OCH2- 9-94 H MeO.CO.OCH2- 9-95 Hft £HX.CO.OCH2- 9-96 Me cPnO.CO.OCHj- 9-97 He cHxO.CO.OCH2- 9-98 Me iPrO.CO.OCH2- 9-99 Me iByrOCH2- 9-100 Me 1-(iBycOJEt 9-101 Me l-(cPn.CO.O)Et 9-102 Me cPn.CO.OCH2- 9-103 H cHX.CO.OCH2- DK 175029 B1 21

Blandt de ovenfor anførte forbindelser er de følgende foretrukne, dvs. forbindelserne nr.

9-2, 9-3, 9-5,9-6 og 9-8, hvoraf de følgende er mest foretrukne: 9-2. Pivaloyloxymethy1-2-(2-oxo-4-pyrrolid i ny 1 thi o)-6-(1-hy-droxyethyl)-l-methy1-1-carbapen-2-em-3-earboxy1 at, især dets 5 p iva Toy 1oxymethy1 -(lR,5S,6S)-2-(2-oxo-4-pyrro 1 i d i ny 11 h i o ) - 6-[ (IR ) -1-hydroxyethyl]-l-methy1-l-carbapen-2-em-3-carboxylat-i somer; 9-3. (1-methylcyklohexan-l-yl}carbonyloxymethy1-2-(2-Oxo-4-pyrrolidinylthio)-6-(l-hydroxyethyl)-1-methyl-l-carbapen-2-em-jq 3-carboxylat, isar dets (l-methylcyklohexan-l-yl)carbonyloxy-methyl-(lR,5S,6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolidinylthio)-6~[(lR)-l-hy-droxyethyl]-l-methy1-l-carbapen-2-em-3-carboxylat i somer; 9-5 . 1-(cykl opentyloxycarbonyloxy)ethyt-2-(2-oxo-4-pyrro 1idi - nylthio)-6-(1-hydroxyethy1)-l-methyl-l-carbapen-2-em-3-car-boxylat, især dets l-{cyklopentyloxycarbonyloxy)ethyl-(lR,5S,6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolidinylthio)-6-[(lR)-l-hydroxy-ethy1]-l-methy1-1-carbapen-2-em-3-carboxylat i somer; og farmaceutisk acceptable salte deraf.

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse kan fremstilles ved en fremgangsmå-20 de, der er ejendommelig ved, at (a) en forbindelse med formlen (IV): DK 175029 B1 22 HO H CHj \ / i

C C-H

/ \ / \ H3C CH—ch c-r27

I I II

C_N_C

// \ o COOR2® (hvori R27 betegner en gruppe med formlen -OR29 eller -SO-R30, hvori: R29 betegner en alkansulfonylgruppe repræsenteret ved en methansulfonyl-, ethan-sulfonyl-, propansulfonyl-, isopropansulfonyl- eller butansulfonylgruppe; en arylsulfo-nylgruppe repræsenteret ved en phenylsulfonyl-, tolylsulfonyl-, især p-tolylsulfonyl-, 5 eller naphthylsulfonylgruppe; en dialkylphosphorylgruppe repræsenteret ved en dimethyl-phosphoryl-, diethylphosphoryl-, dipropylphosphoryl-, diisopropylphosphoryl-, dibutyl-phosphoryl- eller dipentylphosphorylgruppe; eller en diarylphosphorylgruppe repræsenteret ved en diphenylphosphoTyl- eller ditolylphosphorylgruppe; R30 betegner en alkylgruppe repræsenteret ved en methyl-, ethyl-, propyl- eller isopropyl-10 gruppe; en halogenalkylgruppe repræsenteret ved en fluormethyl-, chlormethyl-, fluorethyl-, difluormethyl-, difluorethyl-, dichlorelhyl-, trifluormethyl- eller txifluorethyl-gruppe; en 2-acetylaminoethylgruppe; en 2-acetylaminovinylgnippe; en ary 1 gruppe repræsenteret ved en phenyl- eller naphthylgruppe, som eventuelt er substitueret med 1 til 3 substituenter, der er ens eller forskellige og er valgt blandt fluor-, chlor- og bromatomer 15 og methyl-, ethyl-, propyl-, isopropyl-, methoxy-, ethoxy-, propoxy-, isopropoxy-, meth-oxycarbonyl-, ethoxycarbonyl-, t-butoxycarbonyl-, nitro-, hydroxy- og cyanogrupper; en heteroarylgruppe repræsenteret ved en pyridyl- eller pyrimidmylgruppe, som eventuelt er substitueret med 1 til 3 substituenter, der er ens eller forskellige og er valgt blandt fluor-, chlor- og bromatomer og methyl-, elhyl-, propyl- og isopropylgrupper, og 20 R28 betegner en beskyttelsesgruppe for en carboxylsyre); DK 175029 B1 23 omsættes med en forbindelse med formlen (Vb): HS-(CH2)rRffl (Vb) [hvori RUI betegner gruppen med formlen (ΠΙ), hvori en hvilken som helst aktiv gruppe om nødvendigt er beskyttet, og C er som defineret i krav 1 ], 5 til opnåelse af en forbindelse med formlen (VI): HO H CHj

\ / I

C C-H

/ \ / \ H3C CH_CH C-S- (CH2) t-Rb I I II (VI)

C_N_C

// \ o COOR26 [hvori R28 er som defineret ovenfor, (er som defineret i krav 1, og Rb betegner gruppen med formlen (HI), hvori om nødvendigt en hvilken som helst aktiv gruppe er beskyttet, og som om nødvendigt indeholder en udlignende anion], b) og derefter underkastes den resulterende forbindelse om nødvendigt fjernelse af 10 beskyttelsesgrupperne og/eller forestring og/eller saltdannelse til opnåelse af en forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt eller ester deraf.

Mere detaljeret kan forbindelserne fremstilles som illustreret i de følgende fremgangsmåder A og B.

Fremgangsmåde A: 15 Denne er som vist i det følgende reaktionsskema A: DK 175029 B1 24 REAKTIONSSKEMA A:

OH

TRIN A1_ C»3 [ [_l . H«D8|

1Γ COORZS

(VU) OH CH3 r TRIN A2 0,3 [ _li l(Vb)l / ^ COOR28 (vnn OH a** Γ ' X .S-(CH2lrR· /N.- -Xy trin A3 ch3 I [ J --- /-* SoOR*8 [Vtl OH CH1

“1 i 1 I

^-* ^C00R5

a (II

DK 175029 B1 25 I de ovenfor viste formler er R\ R', R28, R29 og <· som ovenfor defineret I trin Al i dette reaktionsskema omsættes forbindelsen med formlen (VII), som er udgangsmaterialet, med et aktivt derivat 5 af en alkansulfonsyre, arylsulfonsyre, dialky1phosphorsyre eller diarylphosphorsyre, R29OH, f.eks. et alkansulfon- eller arylsulfonsyreanhydrid eller et dialkylphosphoryl- eller di -arylphosphorylhalogenid i nærværelse af en base. I trin A2 omsættes den opnåede forbindelse med formlen (VIII) derefter uden isolering med et mercaptanderi vat med formlen (Va) eller jq (Vb) i nærværelse af en base til opnåelse af en forbindelse med formlen (VI). Den ønskede forbindelse med formlen (I) kan derefter fremstilles om nødvendigt ved fjernelse af beskyttelsesgruppen R28 fra carboxylgruppen i forbindelse med formlen (VI).

15 I trin Al omfatter eksempler på det reaktive derivat af reagenset med formlen r29qh, som kan anvendes: alkansulfonsyrean-hydrider, såsom methansulfon- eller ethansulfonsyreanhydrid; arylsulfonsyreanhydri der, såsom benzensul fon- eller p-toluen-sulfonsyreanhydri d; dial ky1phosphorylha1ogenider, såsom di-20 methylphosphoryl- eller diethylphosphorylchlorid; diarylphos-phorylhalogenider, såsom diphenylphosphoryIchlorid eller diphenyl phosphory 1 bromi d. Blandt disse reagenser foretrækkes p-toluensulfonsyreanhydrid eller dipheny1phosphory1ch1 or id. Der er ikke nogen særlig begrænsning på det anvendte opløsningsmiddels natur, forudsat at det ikke har nogen ugunstig ind-25 virkning på reaktionen eller på de involverede reagenser. Eksempler på egnede opløsningsmidler omfatter: halogenerede hy-drocarboner, i sær ha 1 ogenerede alifatiske hydroearboner, såsom DK 175029 B1 26 methylenchlorid, 1,2-dichlorethan «Her chloroform; nitri ler, sisom acetonitril; amider, sisom N,N-dimethylformamid eller N.N-dimethylacetamid. Der er på lignende mide ikke nogen sar> lig begrensning pi den anvendte bases natur, forudsat at den 5 ikke har nogen ugunstig indvirkning pi andre dele i molekylet, iser Ø-lactamringen. Foretrukne baser, som kan anvendes ved denne reaktion, omfatter sidanne organiske baser, som triet-hylamin, diisopropylethy1amin eller 4-dimethylaminopyridin.

10 Reaktionen kan finde sted over et bredt temperaturoeråde, og den precise reaktionstemperatur er ikke afgerende for opfindelsen. Generelt har det vist sig hensigtsmessigt at udføre reaktionen ved en relativt lav temperatur for at forhindre sidereaktioner, sedvanligvis ved en temperatur fra -20*C til 15 40*C. Det nødvendige tidsrum for reaktionen kan også variere i vid udstrmkning afhcngig af mange faktorer, ismr reaktionstemperaturen og reagensernes natur. Forudsat at reaktionen udføres under de ovenfor beskrevne foretrukne betingelser vil en periode pi fra 10 minutter til 5 timer imidlertid sedvanligvis 20 vare tilstrækkelig.

Det er ikke nødvendigt at isolere den opnåede forbindelse med formlen (VIII) før det næste trin i reaktionsskemaet. Således kan reaktionsblandingen i trin A2 behandles med et mercaptan- 2 5 derivat med formlen (Vb) i nærværelse af en base. Den ved reaktionen anvendte bases natur er ikke afgørende, men foretrukne baser omfatter organiske baser, såsom triethyl-amin eller diisopropylamin, og uorganiske baser, såsom kaliumcaibonat eller natriumcar- bonat 30

Reaktionen kan finde sted over et bredt temperaturområde, og den præcise reaktionstemperatur er ikke afgørende for opfindelsen. Generelt har det imidlertid vist sig hensigtsmæssigt at udføre reaktionen ved en relativt lav temperatur, f.eks.

35 ved en temperatur fra -20*C til stuetemperatur. Det nødvendige tidsrum for reaktionen kan også variere i vid udstrækning afhængig af mange faktorer, især reaktionstemperaturen og reagensernes natur. Forudsat at reaktionen udføres under de oven 27 DK 175029 B1 for beskrevne foretrukne betingelser vil en periode på fra 30 minutter til 5 dage imidlertid sædvanligvis være tilstrækkelig.

5 Efter at reaktionen er bragt til ende kan den ønskede forbin delse med formlen (VI) udvindes fra reaktionsblandingen på konventionelle måder, f.eks. omfatter en hensigtsmæssig udvindingsf remgangsmåde simpelthen at afdestillere opløsningsmidlet fra reaktionsblandingen. Den opnåede forbindelse kan yderi i-10 gere oprenses om nødvendigt på konventionelle måder, f.eks.

ved omkrystallisation, genpræcipitation eller de forskellige kromatografiteknikker, såsom søjlekromatografi eller præparativ tyndt!agskromatografi.

15 Om ønsket kan carboxybeskyttelsesgruppen fjernes før eller efter sådan yderligere oprensning. Dette udføres fortrinsvis uden isolering af forbindelsen med formlen (VI).

Slutreaktionstrinnet i fremgangsmåde A omfatter fjernelsen af 20 carboxybeskyttelsesgruppen R28 fra forbindelsen med formlen (VI) til opnåelse af den tilsvarende carboxylsyre med formlen (I), og om nødvendigt omdannelse af den resulterende frie syre til et andet salt eller ester. Dette trin er valgfrit, og det vil forstås, at fjernelsen af carboxybeskyttelsesgruppen mu-25 ligvis ikke altid er nødvendig eller hensigtsmæssig, f.eks.

når forbindelsen med formlen (VI) er en farmaceutisk acceptabel ester inden for den foreliggende opfindelses omfang. Hvis det er ønskeligt at fjerne carboxybeskyttel sesgruppen kan dette udføres ved anvendelse af konventionelle fremgangsmåder, 30 hvor valget vil afhænge af naturen af den anvendte beskyttel sesgruppe.

Hvis beskyttelsesgruppen kan fjernes ved reduktion, f.eks. hvis den er en halogenalkylgruppe, en aralky1 gruppe eller en 35 benzhydrylgruppe, kan den fjernes ved kontakt med et reduk tionsmiddel. I tilfældet med halogenalkylgrupper, såsom grupperne 2,2-dibromethyl eller 2,2,2-trichlorethyl, er det foretrukne reduktionsraiddel en kombination af zink med eddikesyre.

28 DK 175029 B1

Hvis beskyttelsesgruppen er en aralkylgruppe (såsom en benzyl-eller p-nitrobenzylgruppe) eller en benzhydrylgruppe, fore-trekkes det at fjerne den enten ved katalytisk reduktion under anvendelse af hydrogen og en egnet katalysator, såsom platin 5 eller palladium på carbon; eller ved reduktion med et alkali - metalsulfid, såsom natriumsulfid eller kaliumsulfid. Uanset hvilken reduktionsteknik udføres reduktionsfremgangsmåden fortrinsvis i nerverelse af et opløsningsmiddel, hvis natur ikke er afgørende, forudsat at det ikke har nogen ugunstig indvirk-10 ning på reaktionen. Egnede opløsningsmidler omfatter alkoholer (såsom methanol eller ethanol), ethere (såsom tetrahydrofuran eller dioxan), alifatiske carboxy1 syrer (såsom eddikesyre) eller en blanding af en eller flere af disse organiske opløsningsmidler med vand. Reakt i onstemperaturen er ikke afgørende, 15 men vil normalt vare i området fra 0*C til stuetemperatur. Det nødvendige tidsrum for reaktionen vil variere afhængig af naturen af udgangsmaterialerne og reduktionsmidler såvel som af reaktionstemperaturen, men en periode på fra 5 minutter til 12 timer vil normalt vare tilstrakkelig.

20

Efter at reaktionen er bragt til ende, kan den ønskede forbindelse, som vil indeholde en fri carboxygruppe, udvindes på konventionelle måder fra reaktionsblandingen. F.eks. omfatter en hensigtsmassig udvindingsteknik: fraskillelse af eventuelle 25 uopløselige materialer og derefter afdesti1 lering af opløs ningsmidlet til opnåelse af det ønskede produkt. Dette kan om nødvendigt yderligere oprenses ved hjalp af konventionelle måder, f.eks. omkrystallisation eller de forskellige kromatografiteknikker, såsom praparativ tyndt 1agskromatografi eller søj-30 lekromatografi.

Om ønsket kan en carboxygruppe i forbindelsen fremstillet som beskrevet ovenfor omdannes til en estergruppe, som er hydrolyserbar under fysiologiske betingelser. Dette kan udføres på 35 konventionelle måder. Hvis R$ betegner en ester, som er hydro lyserbar under fysiologiske betingelser, f.eks. en pivaloyl-oxymethylgruppe, acetoxymethylgruppe, phthalidylgruppe, inda-nylgruppe, methoxymethylgruppe eller 2-oxo-5-methyl-l,3-dio- 29 DK 175029 B1 xolen-4-ylmethylgruppe, kan forbindelserne med formlen (i) hydrolyseres in vivo under fysiologiske forhold. En sådan forbindelse kan således indgives direkte til en patient uden af-beskyttelse.

5

Fremgangsmåde B:

Denne er som vist i det følgende reaktionsskema B: > o OH CB l 1 JL i-»» trin Bl ch3 -- (Γ COORzi (1X1 OH ch3

c^]-If ro.IM-!L

(Γ " ^COOR^® (Vil OH CH3

CH3 ] \T

$ * C00H5 (I) DK 175029 B1 30 I de ovenfor viste formler er R\ R2“, R30 og C som ovenfor defineret.

Forbindelserne ned forelen (IX), der anvendes son udgangsmaterialer i dette reaktionsskema, kan fremstilles som beskrevet i japansk patentansøgning Kokai nr. Sho 62-30781.

^ I trin Bl kan forbindelsen ned formlen (VI) fremstilles ved omsmtning af en forbindelse med formlen (IX) med en mercaptan- forbindelse med formlen (Vb) i nærværelse af en base og i et inert opløsningsmiddel.

Der er ikke nogen særlig begrænsning på det anvendte opløsningsmiddels natur, forudsat at det ikke har nogen ugunstig indvirkning på reaktionen eller 2q på de involverede reagenser. Eksempler på egnede opløsningsmidler omfatter: ethere, såsom tetrahydrofuran; nitriler, såsom acetonitril; fedtsyreamider, såsom dimethylformamid; sulf-oxider, såsom di methyl sulfoxid; vand; eller en blanding af hvilke som helst to eller flere deraf. Oen ved reaktionen anvendte base er ligeledes ikke afgørende, forudsat at den ikke påvirker andre molekyldele, iser 8-1actamringen. Eksempler på egnede baser omfatter: organiske baser, såsom diisopropylethy-lamin, tri ethy1amin, N-methylpiperidin eller 4-(N,N-dimethyl-amino)pyrid in og uorganiske baser, isxr alkalimetalcarbonater, såsom kaliumcarbonat eller natriumbicarbonat. Reaktionen kan finde sted over et bredt temperaturområde, og den precise reaktionstemperatur er ikke afgørende for opfindelsen, selvom 20 det foretrækkes at reaktionen udføres ved en relativ lav temperatur for at forhindre sidereaktioner. Generelt har det vist sig hens igtsmcssigt at udføre reaktionen ved en temperatur fra -20*C til 40 · C. Det nødvendige tidsrum for reaktionen kan også variere i høj grad, afhængig af mange faktorer, især reak-tionstemperatur og reagensernes natur. Forudsat at reaktionen 25 DK 175029 B1 31 udføres under de ovenfor beskrevne foretrukne forhold vil et tidsrum på fra 5 minutter til 5 dage imidlertid sædvanligvis være tilstrækkeligt.

Efter at reaktionen er afsluttet, kan den ønskede forbindelse 5 med formlen (VI) udvindes fra reaktionsblandingen på konventionelle måder. Forbindelserne med formlen (I) kan om nødvendigt også fremstilles ved afbeskytte!se af en forbindelse med formlen (VI) under anvendelse af den i fremgangsmåde A beskrevne fremgangsmåde. Yderligere adskillelse og oprensning af den resulterende forbindelse kan udføres som beskrevet under 10 fremgangsmåde A.

Forbindelser med formlen (Vb), som også er udgangsmaterialer i de ovenfor viste reaktionsskemaer, kan opnås på konventionelle og velkendte måder til fremstilling af denne forbindelsestype. I tilfældet med sådanne forbindelser med 25 formlen (Vb), hvor disse ikke på anden måde er tilgængelige, kan de fremstilles på følgende måde*.

Først omdannes en forbindelse med formlen (X): L-RC (X) [hvori L betegner en 1eavinggruppe, såsom en hydroxygruppe, et halogenatom (såsom et chlor-, brom- eller jodatom) eller en sulfonyloxygruppe (f.eks. en methansu1fonyloxy-, propansulfo-2q nyloxy-, trif 1uormethansulfonyloxy- eller to 1uensu1fony 1oxy-gruppe), og Rc betegner en 2-oxopyrrolidinylgruppe. som defineret i forbindelse med gruppen (III)l DK 175029 B1 32 til den tilsvarende beskyttede thioforbindelse med formlen (XI) :

Rd-RC (XI) [hvori betegner en thiobeskyttelsesgruppe, såsom en al ka-noylgruppe (f.eks. en acetylgruppe eller prop i ony 1 gruppe) el-ler en ara 1 kyl gruppe (f.eks. en 4-methoxybenzylgruppe, 3,4-di-methoxybenzylgruppe, benzhydrylgruppe, tripheny1methylgruppe eller di(4-methoxyphenyl)methylgruppe)].

Når L betegner en hydroxygruppe, kan denne udføres ved hjalp af Mitsunobu-reaktionen, som kan udføres under betingelser, som er kendte per se, i nærværelse af diethy1azodicarboxy1 at, triphenylphosphin og thioeddikesyre.

Når L betegner et halogenatoa eller en sulfonyloxygruppe kan reaktionen udføres ved omsætni ng af forbi ndel sen med formlen (X) med et natriumsalt eller kaliumsalt af Rd-SH.

15 Det andet trin er en konventionel hydrolysereaktion og kan udføres under betingelser, som er kendte per se. F.eks. når Rd er en alkanoylgruppe, kan den fjernes under alkaliske eller sure betingelser, f.eks. med natriumhydroxid i vandig methanol. Når Rd er en aralkylgruppe, kan den fjernes f.eks. med tri fluormethansulfonsyre i nærvære Ise af trifluoreddikesyre og 2Q an i sol .

DK 175029 B1 33

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse udviser fremragende antibakteriel aktivitet med et bredt aktivitets-spektrum, og de er også resistente over for Ø-lactamase. Som bedømt ved agarpladefortyndingsmetoden er de blevet vist at ^ være aktive over for en lang række patogene mikroorganismer, omfattende både grampositive bakterier (såsom Staphylococcus aureus og Bacillus subtilis) og gram-negative bakterier (såsom Escherichia coli, Shigella flexneri, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Serratia-arter, f.eks. Serratia marcescens, Enterobacter-arter, f.eks. Enterobacter cloacae, Salmonella 10 enteritidis og Pseudomonas aeruginosa) og er således meget egnede til behandling af sygdomme forårsaget af sådanne mikroorganismer i mennesker og ikke-menneskedyr. I modsætning til thi enamyci n og dets anal oger, som i n akt i ve res in vivo i pattedyr af dehydropeptidase I, er forbindelserne ifølge opfindelsen meget mere stabile over for dette enzym og udviser god 15 ur i nudv inding og har således god biologisk aktivitet. De udviser også lav toksicitet, når undersøgt i laboratoriedyr.

Tabel 10 viser aktiviteterne af flere af forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse over for forskellige bakterier med hensyn til deres minimale inhiberende koncentrationer (pg/ml).

20

Tabel 10 34 DK 175029 B1

Forbindelse Mikroorganisme fra eksempel_A_§_C_ 5 1 0,01* 0,05 1,5 4 0,05 0,1 0,8 16 0,01* 0,05 1,5 20 0,02 0,1 0,8 10 35 0,01* 0,01* 25 A: Staphylococcus aureus 209

15 B: Escherichia coli NIHJ

C: Pseudomonas aeruginosa 1001 0,01*: ikke højere end 0,01 20 0e ovenfor anførte resultater viser, at forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse kan anvendes til behandling eller forhindring af sygdomme, som forårsages af en lang række patogene bakterier.

25 Estrene, der var fremstillet som beskrevet i eksemplerne 39, 40 og 41, blev inkuberet ved 37*C i 1 time med hesteserum, hvorefter MIC-værdierne blev bestemt. Værdierne var alle præcis de samme som de for eksempel 36 og anført ovenfor. Oette betyder at estrene let kløves ved hjælp af esterase i tyndtar-30 mene, efter at de er blevet oralt indgivet, og at de således absorberes godt gennem fordøjelseskanalerne og i fuld udstrækning udviser den aktivitet, som den frie syre har.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan indgives enten oralt el-35 ler parenteralt til behandling af sygdomme hos mennesker og andre dyr forårsaget af patogene mikroorganismer. Forbindelserne kan sammensættes i hvilke som helst konventionelle former til administration. F.eks. omfatter, til oral administra 35 DK 175029 B1 tion, hensigtsmæssige sammensætninger tabletter, granuler, kapsler, pulvere og sirupper, mens sammensætninger til parenteral adminstration omfatter injicerbare opløsninger til i n-tramuskulær, eller mere foretrukket i ntravenøs injektion.

5

Forbi ndel serne ifølge opfindelsen indgives fortrinsvis parenteralt, især i form af en intravenøs injektion.

Dosen af forbindelsen ifølge opfindelsen vil variere afhængig 10 af patientens alder, legemsvægt og tilstand såvel som af ad ministrationsformen og administrationstidspunkterne. Generelt forventes den daglige voksendosis imidlertid at være 100 til 3 000 mg af forbindelsen, som kan indgives i en enkeltdos is eller i delte doser.

15 EKSEMPEL 1 flR,5S,6S)-2-r(2S.AS)-2-carbamoyl-1,1-dimethyl pyrrol idi ni um-4-vlthiol-6-Γ (IR)-1-hvdroxvethvl1-1-methyl-l-carbapen-2-em-3-20 carboxyl at (1) 5,14 ml trif1uoreddikesyre og 0,13 ml tri fluormethansul- fonsyre blev under isafkøling dråbevis sat til en suspension af 520 mg (2S,4S)-2-carbamoy1-4-(4-methoxybenzyl thio)-1,1-di-25 methyl pyrrol idi ni unfluorsul fonat (fremsti 11 et som beskrevet i fremstillingseksempel 1) i 1,45 ml anisol, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 40 minutter. Ved afslutning af dette tidsrum blev opløsningsmidlet afdestilleret, og resten blev vasket gentagne gange ved dekantering under anvendel-30 se af diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 420 mg af et (2S,4S)-2-carbamoyl-4-mercapto-l,1-dimethyl-pyrrolidiniumsalt som en olie. Anionen af dette salt blev ikke identificeret; det samme gælder herefter.

35 (2) 0,20 ml di isopropylethylamin og 0,24 ml diphenylphospho- rylchlorid blev dråbevis under isafkøling sat til en opløsning af 400 mg 4-nitrobenzyl-(lR,5R,6S)-6-[(iR)-i-hydroxyethyl]-l-methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy1 at i 4 ml'tør acetonitril, 36 DK 175029 B1 og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 0,46 ml diisopropyl-ethylamin og en opløsning af saltet, som var fremstillet i trin (1) ovenfor i 3 ml acetonitril sat til reaktionsblandin-5 gen under isafkøling, og blandingen blev derefter omrørt i 7 timer og fik derefter lov til at henstå i 2 dage ved den samme temperatur. Opløsningsmidlet blev derefter destilleret af under reduceret tryk, og resten blev vasket gentagne gange ved dekantering under anvendelse af diethylether og tørret under 10 reduceret tryk til opnåelse af et råprodukt. Dette råprodukt blev derefter opløst i en blanding af 30 ml tetrahydrofuran og 30 ml af en 0,1 H phosphatpuffer (pH-værdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 2,5 timer i nsrvmrelse af 555 mg 10% vmgt/vmgt palladium på trekul. Ved afslutningen af dette tids-15 rum blev et uopløseligt materiale fjernet ved filtrering ved hjælp af et "Celite"-filterhjælpemiddel (handelsnavn), og filtratet blev vasket med diethylether. Det vandige lag blev derefter koncentreret ved inddampning under reduceret tryk. Resten blev adsorberet på en søjle af "Dia i on" (handelsnavn) 20 HP-20AG (Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.), og fraktioner ne, som blev elueret med en 5% efter volumen vandig acetoneopløsning blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk, og resten blev lyofiliseret til opnåelse af et råprodukt som et gult pulver. Dette råprodukt blev oprenset ved kroma-25 tograf i under anvendelse af en Lobar-søjle (Merck Co., LiChro- prep RP-8, størrelse B). Fraktionerne, som blev elueret med 5% og 10% efter volumen vandige methanoliske opløsninger, blev opsamlet og koncentreret ved inddampning under reduceret tryk, og resten blev lyofiliseret til opnåelse af 100 mg af den i 30 overskriften nævnte forbindelse.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) *„axnm: 297.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 35 1,02 (3H, dublet, J * 7,33 Hz); 1,10 (3H, dublet, J = 6,23 Hz); 2,20 - 2,31 (IH, multiplet); 37 DK 175029 B1 2,87 - 3,22 (2H, multiplet); 3,10 (3H, Singlet); 3,14 (3H, singlet); 3,28 (IH, dublet af dubletter, J = 6,05 & 2,78 Hz); 5 3,67-3,73 (IH, multiplet); 3,86 - 4,08 (4H, multiplet); 4,22 (IH, dublet af dubletter, J = 9,35 & 7,50).

EKSEMPEL 2 10 (IR ,5S . 6S)-2-Γ(2S.4S)-2-carbamov1-1-(2-f1uorethvi )-1-methyl -pyrrolidinium-4-v1thiol-6-r(IR)-1-hvdroxvethvl1-l-methvl-l-carbapen-2-em-3-carboxyl at 15 (1) 10,0 ml trif 1 uoreddikesyre og 0,25 ml trif1uormethansul - fonsyre blev dråbevis under isafkøling sat til en suspension af 1,11 g (2R,4S)-2-carbamoyl-4-(4-methoxybenzylthio)-1-(2-f1 uorethy1)-1-methyl pyrrol i di ni umf1uorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 2) i 2,83 ml anisol, og 20 blandingen blev derefter omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet destilleret af, og resten blev gentagne gange vasket ved dekantering med diethyl ether, og derefter tørret under reduceret tryk til opnåelse af 927 mg af et {2S, 4S)-2-carbamoy1-4-mer-25 capto-l-(2-fluormethyl)-l-methylpyrrolidiniumsalt.

(2) 0,37 ml diisopropylethylamin og 0,44 ml di phenylphospho- rylchlorid blev dråbevis under isafkøling sat til en opløsning af 720 mg 4-nitrobenzy1 -(IR,5R,6S)-6-((IR)-1-hydroxyethyl]-1-30 methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy1 at i 7 ml tørt acetoni- tril, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 0,88 ml diisopro-pylethylamin og en opløsning af saltet, der var fremstillet som beskrevet i trin (1) ovenfor i 5 ml acetonitril, dråbevis 35 sat til reaktionsblandingen under isafkøling, og derefter fik blandingen lov til at henstå i 2 dage ved den samme temperatur. Opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket gentagne gange ved dekan- DK 175029 B1 38 tering under anvendelse af diethylether og derefter tørret under reduceret tryk til opnåelse af et råprodukt. Dette råprodukt blev opløst i en blanding af 55 ml tetrahydrofuran og 55 øl af en 0,1 M phosphatpuffer (pH-værdi 7,0) og derefter 5 hydrogeneret ved stuetemperatur i 2 timer i nærverelse af 1 g 10* vegt/vegt palladium-på-trækul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev et uopløseligt materiale fjernet ved filtrering under anvendelse af et Celite-filterhjælpemiddel, og filtratet blev vasket med diethylether. Det vandige lag blev koncentre-10 ret ved inddampning under reduceret tryk, og resten blev ad- sorberet på en søjle af Diaion HP-20A6 (Mitsubishi Chemi cal Industries, Ltd.). De fraktioner, som blev elueret med en 5* efter volumen vandig acetoneopløsning blev koncentreret ved Inddampning under reduceret tryk og lyofiliseret til opnåelse 15 af et råprodukt som et gult pulver. Dette råprodukt blev op renset ved kromatografi under anvendelse af en Lobar-søjle (Merck Co. LiChroprep RP-8, størrelse B). Fraktionerne, som blev elueret med en 2* efter volumen vandig methanolisk opløsning, blev opsamlet, koncentreret ved inddampning under redu-20 ceret tryk og lyofiliseret til opnåelse af 40 mg af den i overskriften nævnte forbindelse.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Amaxnm: 297.

25 Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 1,03 (3H, dublet, J - 7,33 Hz); 1,10 (3H, dublet, J » 6,59 Hz); 2,27 - 2,35 (IH, multiplet); 30 2,92 - 3,12 (2H, multiplet); 3,19 (3H, Singlet); 3,29 (IH, dublet af dubletter, J 6,05 & 2,75 Hz); 3,67 - 3,78 (2H, multiplet); 3,91 - 4,09 {5H, multiplet); 35 4,37 (IH, dublet af dubletter, J * 10,81 & 7,50); 4,69 - 4,91 (IH, multiplet).

EKSEMPEL 3 DK 175029 B1 39 (lR.5S,6S)-2-r(2S.4S)-1.1-di methy1 - 2-methv1carbamov1pyrro1idi-ni um-4-vlthiol-6-Γ(IR) -1-hvdroxvethvll-l-methyl-l-carbapen-2-5 em-3-carboxvlat (1) 2,64 ml trif1uoreddikesyre og 0,132 ml trif1uormethansul-fonsyre blev dråbevis under isafkøling sat til en suspension af 280 mg (2S,4S)-1,1-dimethy1-2-methy1carbamoy1-4-{4-methoxy-10 benzyl thi o)pyrro1idiniumf1uorsulfonat (fremstillet som beskre vet i fremst i 11 ingseksempel 3) i 0,744 ml anisol, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet afdestilleret, og resten blev vasket to gange ved dekantering med diet-15 hyl ether og derefter tørret ved inddampning under reduceret tryk til opnåelse af 230 mg af et ubehandlet (2S,4S)-1,1-di-methy1-2-methylcarbamoy1-4-mercaptopyrrolidiniumsalt som en olie.

20 (2} 108 μΐ di isopropylethy1 am in og 129 μΐ di phenylphosphoryl- chlorid blev dråbevis samtidigt under isafkøling sat til en opløsning af 225 mg 4-nitrobenzy1-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hy-droxyethylJ-l-methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat i 3 ml tør acetonitril, og blandingen blev omrørt ved den samme tem-25 peratur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 118 μΐ diisopropylethylamin og en oplosning af det som beskrevet i trin (1) ovenfor fremstillede salt i 2 ml acetonitril sat til reaktionsblandingen under isafkøling. Blandingen fik derefter lov til at henstå ved 0 til 5“ C i 2 timer og i 48 timer i et 30 køleskab. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsnings midlet afdest i 11eret, og resten blev vasket gentagne gange ved dekantering med di ethyl ether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af et råprodukt. Dette råprodukt blev opløst i en blanding af 20 ml tetrahydrofuran og 20 ml af en 0,1 M phos-35 phatpuffer (pH-vardi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 2,5 timer i narværelse af 254 mg 10¾ vægt/vægt palladium-på-trakul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev et uopløseligt materiale fjernet ved filtrering under anvendelse af et Celi- DK 175029 B1 40 te-fi 1terhjelpemiddel, og filtratet blev vasket under anvendelse af diethylether. Oet vandige lag blev koncentreret ved inddanpning under reduceret tryk. Oen resulterende rest blev adsorberet på en søjle af Diaion HP-20AG (Mitsubishi Chemical 5 Industries, Ltd.), og fraktionerne, som blev elueret med en 5* efter volumen vandig acetoneopløsning, blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk. Den resulterende rest blev derefter lyofiliseret til opnåelse af et råprodukt som et pulver. Dette råprodukt blev oprenset ved kromatografi under an-10 vendel se af en Lobar-søjle (Merck Co. LiChroprep RP-8, stør relse B). Fraktionerne, som blev elueret med 10* og 15* efter volumen vandige methanoliske opløsninger, blev opsamlet og koncentreret ved inddampning under reduceret tryk. Den resulterende rest blev lyofiliseret til opnåelse af 3,0 mg af den i 15 overskriften nsvnte forbindelse.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xaaxnm: 297,5.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 5 ppm: 20 1,02 (3H, dublet, J * 7,33 Hz); 1,10 (3H, dublet, J a 6,59 Hz); 2,19 ~ 2,31 (IH, multiplet); 2,63 {3H, singlet); 25 2,82 - 3,23 (2H, multiplet); 3,05 (3H, singlet); 3,12 (3H, singlet); 3,29 (IH, dublet af dubletter, J * 6,22 6 2,93 Hz); 3,70 (ih, dublet af dubletter, J * 12,46 & 5,13 Hz); 30 3,83 - 4,20 (5H, multiplet).

35 DK 175029 B1 41 EKSEMPEL 4 (lR.5S.6S)-2-r f2S.AS)-1.1-di methyl-2-(N,N-di methyl carbamoyl) -pyrrol id i ni um-4-vl thiol-β- Γ ( IR)-1-hydroxy ethyl l-l-methyl_-l-5 carbapen-2-em-3-carboxy!at (1) 3,3 ml trif1uoreddikesyre og 0,12 ml trif1uormethansulfon- syre blev dråbevis under isafkøling sat til en suspension af 350 mg (2S,4S)-1,1-dimethyl-2-(N,N-dimethylcarbamoy1)-4-(4- 10 methoxybenzy1thio) pyrrol idiniumf1uorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 4) i 0,669 ml anisol, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket to 15 gange ved dekantering med hexan og di ethyl ether, i den række følge, og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 316 mg af et ubehandlet (2S,4S)-l,l-dimethyl-2-(N,N-dimethylcarbamo-yl)-4-mercaptopyrrolidiniumsalt som en olie. Denne blev anvendt i den følgende reaktion uden yderligere oprensning.

20 (2) 164 μΐ diisopropylethylamin og 196 μΐ diphenylphosphoryl-chlorid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 326 mg 4-nitrobenzyl-(lR,5R,6S)-6-[(lR)-l-hydroxyethyl]-l-me-thyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat i 4 ml tørt acetonitril, 25 og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time.

Ved afslutningen af dette tidsrum blev 248 μΐ diisopropyl-ethylamin og en opløsning af saltet, som var fremstillet som beskrevet i trin (1) ovenfor i 3 ml acetonitril, sat til reaktionsblandingen under isafkøling. Blandingen fik derefter lov 30 til at henstå ved 0 til 5*C i 1 time, og derefter i et køle skab i yderligere 2 dage. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen behandlet på en måde svarende til den i eksempel l-(2) beskrevne. Det opnåede råprodukt blev derefter opløst i en blanding af 20 ml tetrahydrofuran og 20 ml af 35 en 0,1 M phosphatpuf f er (pH-værdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 2,5 timer i nærværelse af 400 mg 10¾ vægt/ vægt pal 1 ad ium-på-1rækul . Reduktion og oprensning blev derefter udført på en måde svarende til den i eksempel 1-(2) be- DK 175029 B1 42 skrevne til opnåelse af 101 mg af den i overskriften nævnte forbindelse.

Ultraviolet absorptionsspektrum {H2O) λΛ8χηπι: 298.

5

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 1,03 (3H, dublet, J * 7,33 HZ); 1,11 (3H, dublet, J = 6,22 Hz); 10 2,19 (IH, kvintet, J 7,20 Hz); 2,83 (3H, singlet); 2,90 - 3,18 (2H, multiplet); 3,01 (3H, singlet}; 3,10 (3H, singlet); 15 3,12 (3H, singlet); 3,29 (IH, dublet af dubletter, J * 6,23 & 2,56 Hz); 3,74 - 3,91 (2H, multiplet); 3,96 - 4,11 (3H, multiplet); 4,76 (IH, triplet, J « 7,70 Hz).

20

EKSEMPEL S

(lR,5S,6S)-2-r(3S)-l,l-dimethvlpvrrodinium-3-vlthiol-6-f-ilR)- 1-hydroxyethyll-l-methyl-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat 25 (1) 4,97 ml trif1uoreddikesyre og 0,249 ml trif1uormethansu1-fonsyre blev dråbevis under isafkøling sat til en suspension af 453 mg (3S)-1,1-dimethy1-3-(4-methoxybenzy1thi o)pyrro1 idi -niumfluorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillings- 30 eksempel 5) i 1,40 ml anisol, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet destilleret af, og resten blev vasket to gange ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 250 mg af et ubehandlet 35 (3S)-l,l-dimethyl-3-mercaptopyrrolidiniumsalt som en olie.

(2) 126 μΐ di isopropy1ethy1 am in og 150 μΐ diphenylphosphoryl-chlorid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af DK 175029 B1 43 250 mg 4-nitrobenzyl-(lR,5R,6S)-6-[(IR)-l-hydroxyethy1]-1- methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat i 2 ml tørt aceto-nitril, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 145 μΐ diisopro-5 pylethylamin og en opløsning af saltet, som var fremstillet som beskrevet i trin (1) ovenfor fremstillede salt i 4 ml ace-tonitril, sat til reaktionsblandingen under isafkøling. Reaktionsblandingen fik derefter lov til at henstå ved 0 til 5* C i 2 timer og i 2 dage i køleskab. Ved afslutningen af dette 10 tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev blandet med diethylether og derefter dekanteret. Det opnåede råprodukt blev opløst i en blanding af 20 ml tetrahydrofuran og 20 ml af en 0,1 M phos-phatpuffer (pH-værdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 15 2,5 timer i nærværelse af 300 mg 10% vægt/vægt pal 1 adium-på- trækul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev et uopløseligt materiale fjernet ved filtrering under anvendelse af et Celi-te-filterhjalpemiddel, og filtratet blev vasket under anvendelse af diethylether. Det vandige lag blev koncentreret ved 20 inddampning under reduceret tryk. Resten blev adsorberet på en søjle af Diaion HP-20AG (Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.), og fraktionerne, som blev elueret med en 5% efter volumen vandig acetoneopløsning, blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk og lyofiliseret til opnåelse af et rå-25 produkt som et pulver. Dette råprodukt blev oprenset ved kro matografi under anvendelse af én Lobar-søjle (Merck Co. Li-Chroprep RP-8, størrelse B). Fraktionerne, som blev elueret med 10% og 15% efter volumen vandige methanoliske opløsninger, blev opsamlet, koncentreret ved inddampning under reduceret 30 tryk og lyofiliseret til opnåelse af 90 mg af den i overskrif ten nævnte forbindelse.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) λ|„8χηιη: 297,3.

35 Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O# 270 MHz) 6 ppm: 1,02 (3H, dublet, J = 7,33 Hz); 1,09 (3H, dublet, J = 6,59 Hz); DK 175029 B1 44 1,96 - 2,14 (IH, multiplet); 2,52 - 2,70 (IH, multiplet); 3,00 (3H, singlet); 3,09 C3H, singlet); 5 3,04 - 3,18 (IH, multiplet); 3,28 (IH, dublet af dubletter, J * 6,05 & 2,75 Hz); 3,38 - 3,67 (3H, multiplet); 3,80 (IH, dublet af dubletter, J * 12.46 & 7.70 Hz); 3,91 - 4,11 (3H, multiplet).

10 EKSEMPEL 6 (5R,6S)-2-f(3S)-1,1 - d imethylpyrrolidinium-3-vlthiol-6-r(lR)-l-hydroxyethvl1-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat 15 183 μΐ di isopropylethy1 amin og 218 μΐ diphenyIphosphoryIchlo-rid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 348 mg 4-nitrobenzyl-(5R,6S)-6-({IR)-1-hydroxyethyl]-2-oxo-l-car-bapenam-3-carboxy1 at opløst i 4 ml tørt acetonitril, og blan-20 dingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved af* slutningen af dette tidsrum blev en opløsning af 338 mg af det ubehandlede (3S)-1,1-dimethy1-3-mercaptopyrrolidiniumsalt, der var fremstillet som beskrevet i eksempel 5-(1) i 4 ml tørt acetonitril og 209 μΐ di isopropylam in, sat til blandingen un-25 der isafkøling. Blandingen fik derefter lov til at henstå ved den samme temperatur i en time' og derefter i 2 dage i køleskab. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen vasket ved dekantering med diethylether. Det resulterende produkt blev opløst i en blanding af 30 ml tetrahydrofuran og 30 30 ml af en 0,1 M phosphatpuffer (pH-værdi 7,0) og hydrogene ret ved stuetemperatur i 2,5 timer i nærværelse af 400 mg 10% vægt/vægt pal 1 adium-på-trækul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev et uopløseligt materiale fjernet ved filtrering, og filtratet blev vasket med diethylether. Det vandige lag blev 35 koncentreret ved inddampning under reduceret tryk og derefter underkastet søjlekromatografi gennem Diaion HP-20AG (Mitsubishi Chemicals Industries, Inc.). Den i overskriften nævnte forbindelse blev fremstillet som et råprodukt ud fra fraktioner- DK 175029 B1 45 ne, som blev elueret med vand. Råforbindelsen blev derefter yderligere oprenset ved kromatografi gennem en Lobar>søjle (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B), og fraktionerne, som blev elueret med 5% efter volumen vandig methanol, blev opsam-5 let, koncentreret ved inddampnirig under reduceret tryk og lyo- filiseret til opnåelse af 60 mg af den i overskriften nævnte forbi ndelse.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xroaxnm: 298.

Kernemagnetisk resonansspektrum (O2O, 270 MHz) δ ppm: 1.09 (3H, dublet, J - 6,23 Hz); 2.01 - 2,18 (IH, multiplet); 15 2,53 - 2,72 (IH, multiplet); 2,89 - 3,04 (2H, multiplet); 3.01 (3H, singlet); 3.09 (3H, singlet); 3,23 (IH, dublet af dubletter, J = 6,05 & 2,75 Hz); 20 3,36 - 3,67 (3H, multiplet); 3,85 (IH, dublet af dubletter, J = 12,44 & 8,24 Hz); 3,93 - 4,09 (3H, multiplet).

EKSEMPEL 7 25 (lR.5S.6S)-2-fl.l-dimethvlpiperidinium-4-vlthiol-6-f(lR)-l-hv-droxyethvll-l-methvl-l-carbapen-2-em-3-carboxyl at 7 —(1) 31,6 ml tri fluoreddikesyre og 1,6 ml trif1uormethan- 30 sulfonsyre blev under isafkøling sat til en suspension af 3,0 g l,l-dimethyl-4-(4-methoxybenzylthio)piperidiniumfluorsulfo-nat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 6) i 8,9 ml anisol. Blandingen blev derefter omrørt i 3 timer, hvorefter den blev befriet for opløsningsmidlet ved destilla-35 tion under reduceret tryk. Resten blev gentagne gange vasket ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 2,4 g af et ubehandlet l,l-dimethyl-4-mereaptopiperidiniumsalt som en olie.

DK 175029 B1 46 7-(2) 126 μΐ diisopropylethylamin og 150 μΊ diphenylsulfo- nylchlorid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 250 ag 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroxyethy1]-1-methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat, som var opløst i 2 ml 5 tørt acetonitril, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 288 μΐ di isopropylethylamin og en opløsning af 245 μΊ af saltet, soa var fremstillet soa beskrevet i trin (1) i 4 al tørt acetonitril sat til blandingen, som derefter fik lov til at hen- 10 stå i 2 dage i et køleskab. Reaktionsblandingen blev derefter heldt i di ethyl ether, og det opn&ede precipitat blev vasket ved dekantering. Det opn&ede råprodukt blev derefter opløst i 20 al af en 0,1 M phosphatpuffer (pH-værdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 2 timer i nervarelse af 331 mg 10* 15 vegt/vegt pal 1 adium-på-trekul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen oparbejdet på en måde svarende til den i eksempel 5-£2) beskrevne til opnåelse af 11,3 ag af den i overskriften ncvnte forbindelse.

20 Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) *maxn<": 298· I

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 1.02 (3H, dublet, J = 6,96 Hz); 25 1,10 (3H, dublet, J = 6,23 Hz); 1,70 - 1,93 (2H, multiplet); 2.03 - 2,20 (2H, multiplet); 2,97 (6H, singlet); 3,11 - 3,48 (7H, multiplet); 30 4,01 - 4,12 (2H, multiplet).

35 EKSEMPEL 8 DK 175029 B1 47

(5R,6S)-2-fl.l-dimethvlpiperidiniuro-4-ylthio1-6-[(lR)-l-hv-droxvethvl1-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat S

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 6 beskrevne, men under anvendelse af 368 mg af det ubehandlede 1,1-dimethy1-4-mercaptopiper id i niumsalt, som var fremstillet som beskrevet i eksempel 7-(l), og 3,63 mg 4-nitrobenzy1-10 (5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroxyethy1]-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy- lat, blev 24 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået .

Ultraviolet absorptionsspektrum {H2O) Xaaxnis: 299.

15

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 1,09 (3H, dublet, J = 6,23 Hz); 1,74 - 1,93 (2H, multiplet); 20 2,02 - 2,16 (2H, multiplet); 2,86 - 3,43 (8H, multiplet); 2.96 (6H, singlet); 3.97 - 4,08 (2H, multiplet).

25 EKSEMPEL 9 (lR,5S,6S)-2-rf2S.4Sl-2-fN.N-d imethvlcarbamovll-l-ethvl-l-methylpyrrolidinium-4-vlthiol-6-r(IR)-1-hvdroxvethvl1-1-meth-y1-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat 30 9 —(1) 4,94 ml trifluoreddikesyre og 248 μΐ tri fluormethansul- fonsyre blev under isafkøling sat til en suspension af 560 mg (2S,4S)-2 -(N,N-di methyl carbamoyl)-l-ethyl-l-methyl-4-(4-meth-oxybenzy1thi o) pyrrol i diniumf1uorsu1fonat (fremstillet som be-35 skrevet i fremst i 11ingseksempel 7) i 1,39 ml anisol, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket DK 175029 B1 48 to gange ved dekantering med diethylether og derefter tørret under reduceret tryk til opnåelse af 460 mg af et ubehandlet (2S,4S)-2-(N,N-di methylcarbamoyl)-l-ethyl-l-methyl-4-mercapto-pyrro 1 idiniumsa11 som en olie.

S

Kernemagnetisk resonansspektrum (02°* 270 MHz) δ ppm: 1,21 (3H, triplet, J « 7,33 Hz); 10 2,14 (IH, dublet af tripletter, J » 14,29 & 7,15 Hz); 2,8 2 (3H, singlet) ; 2,98 (3H, singlet); 3,00 (3H, singlet); 2,86 - 3,94 (6H, multiplet); 15 4,69 (IH, triplet, J = 7,15 Hz).

9-(2) 152 μΊ di i sopropy 1 ethy1 amin og 181 μΐ dipheny1phospho- rylchlorid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 310 mg 4-nitrobenzyl-(IR,5R,6S)—6—[(IR)-1-hydroxyethy1]-ΙΣΟ methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat, som var opløst i 4 ml tørt acetonitril, og blandingen blev omrørt i 1 time under isafkøling. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 174 μΐ diiso-propy lethy lami n og en opløsning af 366 mg af saltet, som var fremstillet som beskrevet i trin (1) i 4 ml tørt acetonitril, 25 sat til blandingen, som derefter fik lov til at henstå i en time ved 0 til 5*C og derefter i 2 dage i køleskab. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hmldt i diethylether og vasket ved dekantering. Oe således opnåede u be handl ede produkter blev opløst i en blanding af 25 ml te-30 trahydrofuran og 25 ml af en 0,1 M phosphatpuffer (pH-værdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 2,5 timer i nærværelse af 340 mg 10% vægt/vagt pal 1 ad ium-på-træku 1. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen oparbejdet og oprenset på en måde svarende til den i eksempel l-(2) beskrev-35 ne til opnåelse af 127 mg af den i overskriften nævnte forbindelse.

Ultraviolet absorpti onsspektrum (H2O) Aoaxnn: 297,0.

DK 175029 B1 49

Kernemagnetisk resonansspektrum [02^> 27& MHz) 6 ppm: 1,02 (3H, dublet, J = 6,96 Hz); 1.10 (3H, dublet, J = 6,22 Hz); 5 1,22 (3H, triplet, J « 7,32 Hz); 2,12 - 2,25 (IH, multiplet) ; 2.82 (3H, singlet); 2.83 - 3,50 (5H, multiplet); 3,00 (3H, singlet); 10 3,05 (3H, s i nglet) ; 3,65 (IH, dublet af dubletter, J 12,45 & 5,13 Hz); 3,85 (IH, dublet af dubletter, J = 12,45 & 8,42 Hz); 3,91 - 4,12 (3H, multiplet); 4,68 - 4,75 (IH, multiplet).

15 EKSEMPEL 10 (5R,6S)-2-[{2S.4S)-l-ethvl-l-methvl-2-(N.N-di methyl carbamoyl)-pyrrolidinium-4-vlthiol-6-rflR)-1-hvdroxvethvll-l-carbapen-2-20 em-3-carboxvlat

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 6 beskrevne, men under anvendelse af 459 mg 4-nitrobenzy1 -(5R,6S)-6-[(lR)-1-hydroxyethyl]-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy-25 lat og 580 mg af det ubehandlede (2S,4S)-2-(N,N-dimethylcarba-moyl)-l-ethyl-l-methyl-4-mercaptopyrrolidiniumsalt [fremstillet som beskrevet i eksempel 9-(2)], blev 55 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

30 Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xmaxnm: 298.

Kernemagnetisk resonansspektrum (O2O, 270 MHz) δ ppm: 1.10 (3H, dublet, J = 6,59 Hz); 35 1,23 (3H, triplet. J = 7,15 Hz); 2,17 - 2,30 (IH, multiplet); 2.83 (3 H, singlet); 2.83 - 3,07 (2H, multiplet); DK 175029 B1 50 3.00 (3H, s i nglet); 3.01 (3H, singlet); 3,05 (3H, singlet); 3,24 (ih, dublet af dubletter, J * 6,04 & 2,75 Hz); 5 3,27 - 4,18 (7H, Multiplet); 4,72 (IH, triplet, J * 8,06 Hz).

EKSEMPEL 11 10 (5R,6S)-2-n2S.4S)-l.l-dimethvl-2-(N.N-di »ethvlcarbamoyl) pyr rol id ini um-4-vlthiol-6-[(lR)-1-hydroxvethyl1-l-carbapen-2-em- 3-earboxvlat 126 pi diisopropylethylamin og 132 μΐ diphenylphosphorylchlo-15 rid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 218 mg 4-nitrobenzyl-(5R,6S)-6-[(lR)-l-hydroxyethyl)-2-oxo-l-car-bapenam-3-carboxy1 at, son var opløst i 3 ml tør acetonitril, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time.

Ved afslutningen af dette tidsrum blev en opløsning af 243 mg 20 af det ubehandlede (2S,4S)-2-(N,N-dimethylcarbamoyl)-l,l-di-methy1-4-mercaptopyrrolidiniumsalt [fremstillet som beskrevet i eksempel 4-(1)] i 2 ml tørt acetonitril og 144 μΐ diisopro-py1 ethyl am i n sat til blandingen under isafkøl i ng. Blandingen fik derefter lov til at henstå ved den samme temperatur i 5 25 timer og derefter i 2 dage i et køleskab. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen oparbejdet på en måde svarende til den i eksempel 6 beskrevne. Råproduktet blev opløst i en blanding af 15 ml tetrahydrofuran og 15 ml af en 0,1 M phosphatpuffer (pH-v*rdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetem-30 peratur i 2 timer i nmrvmrelse af 200 mg 10¾ vmgt/vmgt palla-dium-på-tr*kul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen oparbejdet og oprenset på en måde svarende til den i eksempel 6 beskrevne til opnåelse af 56 mg af den i overskriften nevnte forbindelse.

35

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) λmaxniti: 299.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm; DK 175029 B1 51 1.10 (3H, dublet, J » 6,23 Hz); 2,17 - 2,28 (IH, multiplet); 2,79 - 3,04 (3H, multiplet); 2,83 (3H, singlet); 5 3,00 (3H, Singlet); 3.11 (3H, singlet); 3.12 (3H, singlet); 3,24 (ih, dublet af dubletter, J = 6,05 & 2,75 Hz); 3.76 - 3,96 (2H, multiplet); 10 3,97 - 4,12 (3H, multiplet); 4.76 (IH, triplet, J = 7,33 Hz).

EKSEMPEL 12 15 (lR,5S,6S)-2-r(2S.4S)-l.l-dimethvl-2-(4-morpho1inocarbonyi)- pyrrolidinium-4-ylthiol-6-r(lR)-1-hvdroxvethvl1-1-methvl-1-carbapen-2-em-3-carboxvlat

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 4 20 beskrevne, men under anvendelse af 446 mg (2S,4S)-1,1-di-methyl-4-(4-methoxybenzylthio)-2-(4·morpholi nocarbony1)pyrro-1 id iniuraf1uorsu1fonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 8) (i trin (1)] og 192 mg 4-nitrobenzyl-(lR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroxyethyl]-1-methyl-2-oxo-l-carbape-25 nam-3-carboxy1 at [i trin (2)], blev 16 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) ^maxnm: 297.

30 Kernemagnetisk resonansspektrum (O2O, 270 MHz) δ ppm: 1,02 (3H, dublet, J * 7,32 Hz); 1.10 (3H, dublet, J = 6,59 Hz); 2,16 - 2,28 (IH, multiplet); 35 2,90 - 3,18 (2H, multiplet); 3.10 (3H, singlet); 3,15 (3H, singlet); 3,29 (IH, dublet af dubletter, J * 6,23 & 2,93 Hz); DK 175029 B1 52 3,43 - 3,65 (8H, multiplet); 3.76 - 3,93 (2H, multiplet); 3,96 - 4,12 (3H, multiplet); 4.76 (IH, triplet, J » 7,69 Hz).

5 EKSEMPEL 13 (lR,SS.6S)-2-rf2S,4S)-l.l-dimethvl-2-(l-pvrrolidinocarbonvl)-pyrrolidinium-4-vlthiol-6-f(lRl-l-hvdroxvethvll-l-methyl-l-10 carbapen-2-em-3-carboxvlat

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 4 beskrevne, men under anvendelse af 472 mg (2S,4S)-l,l-di-methy1-4-(4-methoxybenzy1th io)-2-(1-pyrroli d inocarbony1)pyrro-15 1idiniumfluorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstil lingseksempel 9) (i trin (1)] og 220 mg 4-nitrobenzy1 -(lR,5R,6S)-6-[(lR)-1-hydroxyethyl]-1-methy1-2-oxo-l-carbape-nam-3-carboxy1 at [i trin (2)3, blev 24 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

20

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Amaxnm: 298.

Kernemagnetisk resonansspektrum (DjO, 270 MHz) δ ppm: 25 1,02 (3H, dublet, J 6,96 Hz); 1,10 (3H, dublet, J * 6,23 Hz); 1,65 - 1,84 (4H, multiplet); 2,14 - 2,24 (IH, multiplet); 2,92 - 3,04 (IH, multiplet); 30 3,10 (3H, singlet); 3,12 (3H, singlet); 3,20 - 3,57 (5H, multiplet); 3,74 - 4,11 (6H, multiplet); 4,47 - 4,63 (IH, multiplet).

35 DK 175029 B1 53 EKSEMPEL 14 (lR.5S.6S)-2-f(2S.AS)-2-carbamoyl-1-ethvl-l-methvlpvrrolidi-n i um-4-vlthiol-6-Γ(IR)-1-hydroxvethv11-1-methvl-l-carbapen-5 2-em-3-carboxylat 14-(1) 4,2 ml trif1uoreddikesyre og 0,11 ml trif1uormethan- sulfonsyre blev dråbevis under isafkøling sat til en suspension af 450 mg (2S,4S)-2-carbamoy1-4-(4-methoxybenzy1thi o)-Ι-ΙΟ ethyl-l-methylpyrrolidiniumfluorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 10) i 1,2 ml anisol. Blandingen blev derefter omrørt ved den samme temperatur i 90 minutter, hvorefter den blev befriet for opløsningsmidlet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev vasket ved dekan-15 tering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 370 mg af et (2S,4S)-2-carbamoyl-4-mercapto-l-ethyl-1-methy1 pyrrolidiniumsalt som en olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vmax cm"l: 20 1699, 1247, 1169.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 25 1,20 (3H, triplet, J = 7,32 Hz); 2,13 - 2,25 (IH, multiplet); 2,80 - 3,92 (6H, multiplet); 2,98 (3H, singlet); 4,11 - 4,17 (IH, multiplet).

30 14-(2) Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 9 beskrevne, men under anvendelse af 300 mg 4-nitro-benzyl-(lR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroxyethy1] -1-methy1-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy1 at og 340 mg af saltet, som var fremstil-35 let som beskrevet i trin (1), blev 120 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) *maxnm: 297.

DK 175029 B1 54

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O. 270 MHz) 6 ppm: 1.02 (3H, dublet, J « 6,96 Hz); 1,10 (3H, dublet, J > 6,23 Hz); 5 1,23 (3H, triplet, J * 7,33 Hz); 2,21 - 2,35 (IH, multiplet); 2,88 - 3,25 (2H, multiplet); 3,04 (3H, singlet); 3.26 - 4,08 (8H, multiplet); 10 4,22 (IH, dublet af dubletter, J * 10,26 & 7,32 Hz).

EKSEMPEL 15 ( 5R, 6S )_-2 - Γ ( 2S . 4S 1 - 2-carbamovl -1 -et hyl -1 -methyl pyrrol i d i ni um-15 4-vlthiol-6-r(lR)-l-hvdroxvethvll-l-carbaoen-2-em-3-carboxvlat

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 11 beskrevne, men under anvendelse af 450 mg 4-nitrobenzy1 -(5R,6S)-6-[(iR)-i-hydroxyethyl]-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy-20 lat og 530 mg af saltet, som var fremstillet som beskrevet i eksempel 14-(1), blev 205 mg af den i overskriften navnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H20) *maxnm: 298.

25

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 1,09 (3H, dublet, J » 6,60 Hz); 1.24 (3H, triplet, J * 7,33 Hz); 30 2,26 - 2,38 (IH, multiplet); 2,84 - 3,07 (2H, multiplet); 3.03 (3H, singlet); 3.24 (IH, dublet af dubletter, J = 6,05 & 2,93 Hz); 3.27 - 4,06 (8H, multiplet); 35 4,22 (IH. dublet af dubletter, J * 10,26 & 7,33 Hz).

DK 175029 B1 55 EKSEMPEL 16 (5R.6S)-2-r(2S.4S)-2-carbamovl-l.l-dimethvlpyrrolidinium-4-vl-thiol-6-r(lRl-l-hvdroxvethvl 1-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat 5 210 μΐ diisopropylethylamin og 250 μΐ diphenyIphosphorylch-lorid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 400 mg 4-nitrobenzyl-(5R,6S)-6-[(lR)-l-hydroxyethyl]-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat, som var opløst i 5 ml tørt acetoni-10 tril, og blandingen blev omrørt i 1 time under isafkøling. Ved afslutningen af dette tidsrum blev en opløsning af 447 mg af det ubehandlede (2S,4S)-2-carbamoyl-l,l-dimethyl-4-mercapto-pyrrolid i niumsalt, der var fremstillet som beskrevet i eksempel 1 — (1) i 5 ml tørt acetonitril, sat til blandingen under 1® isafkøling, og derefter fik blandingen lov til at henstå i 4 timer ved den samme temperatur og derefter i 2 dage i et køleskab. Reaktionsblandingen blev derefter hældt i diethy-lether, og det opnåede bundfald blev vasket gentagne gange ved dekantering. Råproduktet blev opløst i en blanding af 30 ml 20 tetrahydrofuran og 30 ml af en 0,1 M phosphatpuffer (pH-værdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 2,5 timer i nærværelse af 450 mg 10% vægt/vægt pal 1 adium-på-trækul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev uopløselige materialer fjernet ved filtrering under anvendelse af et Cel ite-fi 1 terhjælpemid-2^ del. Det vandige lag blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk, og resten blev overført til en søjle, som er pakket med Diaion HP-20AG (Mitsubishi Chemicals Industries, Ltd.}. Fraktioner, som blev elueret med vand, blev opsamlet og lyofiliseret til opnåelse af den i overskriften nævnte forbin-30 delse som et pulver. Dette blev yderligere oprenset under anvendelse af en Lobar-søjle (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse B), og fraktioner, som blev elueret med en 5% efter volumen vandig methanolisk opløsning, blev opsamlet og koncentreret ved inddampning under reduceret tryk efterfulgt af lyofilise-35 ring til opnåelse af 208 mg af den i overskriften nævnte forbindelse.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H20) *maxnro: 297,7.

DK 175029 B1 56

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ΡΡ®: 1.09 (3H, dublet, J * 6,59 Hz); 2.23 - 2,36 (IH. multiplet); 5 2,86 - 3,04 (3H, multiplet); 3.10 (3H, singlet); 3,15 (3H, singlet); 3.23 (IH, dublet af dubletter, J * 5,86 & 2,57 Hz); 3.73 (IH, dublet af dubletter, J * 12,09 & 5,50 Hz); 10 3,90 - 4,08 (4H, multiplet); 4,22 (IH, dublet af dubletter, J * 9,16 & 7,69 Hz).

EKSEMPEL 17 15 (lR,5S.6S)-2-rf2S.4S)-2-ethyl carbamoyl-l-ethvl-l-methylpyrro- lidinium-4-vlthiol-6-r(lRl-l-hydroxyethyll-l-methvl-l-carba-pen-2-em-3-carboxylat 17-(1) 10,86 ml trifluoreddikesyre og 544 μ! trif1uormethan- 20 sulfonsyre blev under i safkø ling sat til en suspension af 1,23 g (2S,4S)-2-ethylcarbamoy1-1-ethyl-l-methy 1-4-(4-methoxyben- zy1thio) pyrrol i di niumf1uorsu1 fonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 11) i 3,06 ml an i sol, og blandingen blev omrørt i 2 timer under de samme betingelser. Opløsnings-25 midlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket tre gange ved dekantering med d i -ethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 0,96 g af et ubehandlet (2S,4S)-2-ethylcarbamoy1-l-ethyl-1-methyl - 4-mercaptopyrrolidiniumsalt.

30

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 0,96 {3H, triplet, J * 7,33 Hz); 1,21 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 35 2,13 - 2,26 (IH, multiplet); 2,95 (3H, singlet); 2.73 - 4,16 (9H, multiplet).

DK 175029 B1 57 17-(2) Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 1 beskrevne, men under anvendelse af 250 mg 4-nitroben-zyl-(lR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroxyethy1]-l-methyl-2-oxo-carba-penam-3-carboxylat og 304 mg af saltet fremstillet som be-5 skrevet i trin (1), blev 69 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xmaxnm: 296,6.

10 Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 0,95 (3H, triplet, J = 7,32 Hz); 1.02 (3H, dublet, J = 7,33 Hz); 1,10 (3H, dublet, J * 6,59 Hz); 15 1,22 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 2,12 - 2,34 (IH, multiplet); 2,76 - 2,97 (IH, multiplet),- 2,99 (3H, singlet); 3.03 - 4,18 (12H, multiplet).

20 EKSEMPEL 18 (5R,6S)-2-[i2S,4S)-2-ethyl carbamovi-1-ethvl-1-methvlpyrroli-dinium-4-vlthiol-6-f(lR)-l-hvdroxvethvl1-l-carbapen-2-em-3-25 carboxyl at

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 16 beskrevne, men under anvendelse af 348 mg 4-nitrobenzy 1-(5R,6S)-6-[(lR)-1-hydroxyethy1]-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy-30 lat og 440 mg af det ubehandlede (2S,4S)-2-ethylcarbamoyl-l-ethyl-1-methyl-4-mercaptopyrrolidiniumsalt fremstillet som beskrevet i eksempel 17-(1), blev 80 mg af den i overskriften nmvnte forbindelse opnået.

35 Ultraviolet absorptionsspektrum (H20) Xnaxnm; 298,2.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: DK 175029 B1 58 0,95 (3H, triplet, J * 7,32 Hz); 1.09 (3H, dublet, J s 6,59 Hz); 1.23 (3H, triplet, J « 7,33 Hz); 2,13 - 2,37 (IH, multiplet); 5 2,76 - 3,05 (3H, multiplet); 2.98 (3H, singlet); 3.09 (2H, kvartet, J * 7,33 Hz); 3.23 (IH, dublet af dubletter, J * 6,05 & 2,75 Hz); 3,22 - 4,18 (8H, multiplet).

10 EKSEMPEL 19 (lR,5S,6S)-2-n2S.4S)-l-ethvl-l-methvl-3-methvlcarbamov_l_pyr-rolidinium-4-vlthiol-S-r(lR)-l-hvdroxvethvll-l-methyl-l-car-15 bapen-2-em-3-carboxyl at

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 1 beskrevne, men under anvendelse af 986 mg (2S,4S)-l-ethyl-l-methyl-2-methylcarbamoyl-4-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidinium-20 f1uorsu1 fonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 12) [i trin (1)] og 362 mg 4-nitrobenzy1-(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hyroxyethy1]-1-methy1-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy1 at [i trin (2)], blev 74 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

25

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Amaxnm: 296,6.

Kernemagnetisk resonansspektrum (O2O, 270 MHz) δ ppm: 30 1,02 (3H, dublet, J * 7,33 Hz); 1.10 (3H, dublet, J = 6,59 Hz); 1,21 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 2.11 - 2,33 (IH, multiplet); 2,62 (3H, singlet); 35 2,77 - 2,90 (IH, multiplet); 2.98 (3H, singlet); 3.00 - 4,23 (10H, multiplet).

EKSEMPEL 20 DK 175029 B1 59 flR.5S.6S)-2-rf2S.4Sl-l.l-dimethv1-2-ethylcarbamoylpyrrolidi-nium-4-vlthiol-6-mR)-l-hvdroxvethyl]-l-methvl-l-carbapen-_2-5 em-3-carboxvlat 20-(1) 11,56 ml trif1uoreddikesyre og 580 μΐ trif1uormethan- sulfonsyre blev under isafkøling sat til en suspension af 1,27 g (2S,4S)-1,i-di methyl-2-ethylcarbamoy1-4-(4-methoxybenzyl-10 thiojpyrrolidiniumfluorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstiΠingseksempel 13) i 3,26 ml anisol, og blandingen blev omrørt i 2 timer under de samme betingelser. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket tre gange ved 15 dekantering med diethylether og derefter tørret under reduceret tryk til opnåelse af 802 mg af et ubehandlet (2S,4S)-1,1-dimethyl-2-ethylcarbamoyl-4-mercaptopyrrolidiniumsalt som en olie.

20 Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 0,96 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 2,18 (IH, dublet af tripletter, J = 14,66 & 7,33 Hz); 2,79 - 2,98 (IH, multiplet); 25 3,03 (3H, singlet); 3.06 (3H, singlet); 3,10 (2H, kvartet, J = 7,33 Hz); 3,46 - 3,92 (3H, multiplet); 4.06 (IH, triplet, J = 7,33 Hz).

30 20-(2) 340 mg di isopropy1ethy1 am in og 405 μΐ dipheny1phospho- rylchlorid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 674 mg 4-nitrobenzy1 -(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroxyethy1]-1-methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat, som var opløst i 10 ml 35 tørt acetonitril, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev en opløsning af 390 μΐ diisopropylethylamin og 790 mg af saltet, som var fremstillet som beskrevet i trin (l) i 8 ml tørt ace- DK 175029 B1 60 tonitril, sat til reaktionsblandingen, som derefter fik lov til at henstå ved 0 til 5*C i 2 timer og derefter i 2 dage i et køleskab. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen heldt i diethylether og vasket ved dekantering. Det 5 opnåede råprodukt blev opløst i en blanding af 30 ml tetra-hydrofuran og 30 ml af en 0,1 H phosphatpuffer (pH-verdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 2 timer i nærværelse af 650 mg 10% vægt/vægt pal ladium-på-trækul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen oparbejdet og oprenset 10 på en måde svarende til den i eksempel l-(2) beskrevne til opnåelse af 289 mg af den i overskriften nxvnte forbindelse.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xmaxnm: 297,0.

15 Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 0,95 (3H, triplet, J * 7,15 Hz); 1,02 (3H, dublet, J * 7,33 Hz); 1.10 (3H, dublet, J * 6,23 Hz); 20 2,17 - 2,30 (IH, multiplet); 2,81 - 3,18 (2H, multiplet); 3,05 (3H, singlet); 3.10 (2H, kvartet, J « 7,33 Hz); 3.11 (3H, singlet); 25 3,28 (IH, dublet af dubletter, J » 6,05 & 2,76 Hz); 3,69 (IH, dublet af dubletter, J * 12,09 8 5,49 Hz); 3,84 - 4,16 (5H, multiplet).

EKSEMPEL 21 30 (lR.5S,6S)-2-r(2S)-l.l-dimethyl-2-pvrro1idini ummethylthiol- 6-f(IR)-1-hvdroxvethvll-l-methvl-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat 21-(1) Fremgangsmåden som beskrevet i eksempel 7-(i) blev 35 gentaget, men under anvendelse af 1,1 g (2S )-1,1-dimethy1-4-(4-methoxybenzylth i omethyl) pyrrolidiniumfluorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremsti 11ingseksempel 14), 3,3 ml ani-sol, 11,6 ml trif1uoreddikesyre og 581 μΐ trifluorsulfonsyre DK 175029 B1 61 til opnåelse af 666 mg af et ubehandlet (2S)-l,l-dimethyl-4-mercaptomethylpyrrolidiniumsalt som en olie.

21-(2) 76 μΐ di isopropylethy1amin og 90 μΐ diphenylphospho- 5 rylchlorid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 150 mg 4-nitrobenzy1 -(IR ,5R,6S)-6-[(IR)-1-hydroxyethy1]-1-methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat, som var opløst i 3 ml tørt acetonitril, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 87 μΐ 10 diisopropylethylamin og en opløsning af 148 mg af saltet, som var fremstillet som beskrevet i trin (1) i 2 ml tørt acetonitril, sat til blandingen under isafkøling, og blandingen fik lov til at henstå ved 0 til 5®C i 2 timer og derefter 1 dag i et køleskab. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktions-15 blandingen hældt i -78eC afkølet diethylether og blev vasket ved dekantering. Det opnåede råprodukt blev opløst i en blanding af 13 ml tetrahydrofuran og 13 ml af en 0,1 M phosphat-puffer (pH-værdi 7,0) og hydrogeneret ved stuetemperatur i 2 timer i nærværelse af 210 mg 10fc vægt/vægt pal 1 adium-på-træ-20 kul. Uopløselige materialer blev fjernet ved filtrering ved hjælp af et Cel ite-fiIterhjælpemiddel, og filtratet blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk. Resten blev underkastet søjlekromatografi gennem CHP-20P (Mitsubishi Chemicals Industries, Ltd.), og fraktioner elueret med en 5% ef-25 ter volumen vandig acetoneopløsning blev opsamlet, koncentreret ved inddampning under reduceret tryk og lyofi 1iseret. Det opnåede råprodukt blev underkastet søjlekromatografi gennem en søjle pakket med Dowex S0W-X4, (Dom Chemicals Co.), og fraktioner, som blev elueret med vand, blev opsamlet, koncentreret 30 ved inddampning under reduceret tryk og 1yofi 1 i seret. Oet opnåede råprodukt blev yderligere renset under anvendelse af en Lobar-søjle RP-8 (Merck) og 45 mg af den i overskriften nævnte forbindelse blev opnået ud fra fraktionerne, som blev elueret med en 8% efter volumen vandig methanolisk opløsning.

35

Ultraviolet absorptionsspektrum (Η2O) Xmaxnm: 297.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: DK 175029 B1 62 1.04 (3H, dublet, J * 7,33 Hz); 1.11 (3H, dublet, J = 6,60 Hz); 1.70 - 2,08 (3H, multiplet); 2,35 - 2,56 (IH, multiplet); 5 2,70 (IH, dublet af dubletter, J a 13,18 & 10,99 Hz); 2,77 (3H, singlet); 3.04 (3H, singlet); 3,08 - 3,60 (6H, multiplet); 4.04 - 4,09 (2H, multiplet).

10 EKSEMPEL 22 (lR.5S,6$)-2-r(2R)-l,l-dimethvl-2-pyrrolidini ummethvlth i ol- 6-Γ(IR)-i-hydroxyethyl]-l-methyl-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat 15

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 21 beskrevne, men under anvendelse af 0,94 g (2R)-l,l-dimethyl-4-(4-methoxybenzy1thiomethy1)pyrrolidiniumfluorsulfonat (frem stillet som beskrevet i fremstillingseksempel 15) [i trin (1)] 20 og 470 mg 4-nitrobenzy1-(lR,5R,6S)-6-[(lR)-1-hydroxyethyl] -1-methyl-2-oxo-l-carbapenem-3-carboxylat [i trin (2)], blev 70 mg af den i overskriften nevnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xnaxnn: 297.

25

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 1.01 (3H, dublet, J * 7,33 Hz); 1,10 (3H, dublet, J = 6,23 HZ); 30 1,69 - 2,08 (3H, multiplet); 2,28 - 2,45 (IH, multiplet); 2,79 (3H, singlet); 2,94 - 3,12 (2H, multiplet); 3,07 (3H, singlet); 35 3,18 - 3,64 (5H, multiplet); 4.01 - 4,11 (2H, multiplet).

EKSEMPEL 23 DK 175029 B1 63 HR.SS.6S)-2-r (2S.4S)-2-carbamovl-l-(2-hvdroxvethyl)-1-methyl-pyrrolidinium-4-vlthiol-6-f(IR)-1-hvdroxyethyl1-1-methyl-1-5 carbapen-2-em-3-carboxyl at

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 7 beskrevne, men under anvendelse af 0,37 g (2S,4S)-2-carbamoyl-l-(2-hydroxyethyl)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methylpyrrolidi-10 niumfluorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 16) [i trin (1)] og 260 mg 4-ni trobenzy1-(IR ,5R,6S)- 6- [ (IR)-1-hydroxyethyl]-l-methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy-lat [i trin (2)], blev 17 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

15

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xmaxnm: 298.

EKSEMPEL 24 20 (lR,5S,6S)-2-(l-methvlguinuclidiniutn-3-vlthio)-6-f(lR)-l-hv-droxvethvl1-1-methyl -l-carbapen-2-em-3-carboxyl at 24-(1) Fremgangsmåden beskrevet i eksempel 7 —(1) blev gentaget, men under anvendelse af 1,08 g 3-(4-methoxybenzylthio)-25 l-methylquinuclidiniumfluorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 17), 3,12 ml anisol, 15 ml trifluored-dikesyre og 278 μΐ trifluormethansulfonsyre til opnåelse af 880 mg af et ubehandlet 3-mercapto-l-roethylquinuclidiniumsalt som en olie.

30 24-(2) 135 μΐ di isopropylethy1amin og 160 μΐ diphenylphospho- rylchlorid blev samtidig sat til en opløsning af 268 ml 4-ni-trobenzyl-(lR,5R,lS)-6-[(lR)-l-hydroxyethyl]-l-methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat opløst i 3 ml tørt acetonitril, og 35 blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 185 μΐ di isopropy1ethy1 amin og en opløsning af 271 mg af saltet fremstillet som beskrevet i trin (1) opløst i 2 ml tørt acetonitril sat til reaktions- blandingen. Fremgangsmaden beskrevet i eksempel 21-(2) blev derefter gentaget til opnåelse af 35 mg af den i overskriften nsvnte forbindelse.

DK 175029 B1 64 5 Ultraviolet absorptionsspektrum (H20) *aaxnm: 297.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz) 6 ppm: 1,02 (3H, dublet, J * 7,32 Hz); 10 1,10 (3H, dublet, J 5,60 Hz); 1,66 - 2,32 (5H, multiplet); 2,80 (3H, singlet); 2,98 - 3,36 (7H, multiplet); 3,57 - 3,73 (2H, multiplet); 15 4,00 - 4,12 (2H, multiplet).

EKSEMPEL 25 (lR,5S,6S)-2-r(6S.8S1-1,4-dimethyl-5-oxo-4-aza-l-azoniabicyk-20 1or4.3.01non-8-ylthiol-6-r(IR )-l-hvdroxvethvl1-1-methvl-1-carbapen-2-em-3-carboxyl at 25-(1) Fremgangsmåden beskrevet i eksempel 7 —(1) blev gentaget, men under anvendelse af 841 mg (6S,8S)-l,4-dimethyl-8-25 (4-methoxybenzyl thi o)-5-oxo-4-aza-l-azon i abicyklo[4.3.0]nonan- fluorsulfonat ( freest i 11 et som beskrevet i freest illingseksem-pel 18), 2,17 ml anisol, 7,70 ml trif1uoreddikesyre og 386 μΐ trif1uormethansulfonsyre til opnåelse af 700 mg af et ubehandlet (6S,8S)-l,4-dimethyl-8-mercapto-5-oxo-4-aza-l-azoniabicyk-30 1o[4.3.0]nonansa 11 som en olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz) δ ppm: 2,18 (IH, dublet af tripletter, J * 13,92 & 9,16 Hz); 35 2,85 (3H, singlet); 2,86 - 3,04 (IH, multiplet); 3,16 (3H, singlet); 3,51 - 3,90 (6H, multiplet); DK 175029 B1 65 3,9β (IH, dublet af dubletter, J = 12,09 & 7,69 Hz); 4,26 (IH, triplet, J b 8,61 Hz).

25~{2) 183 μΐ di isopropy1ethy1 ami π og 218 μΐ diphenylphospho- 5 rylchlorid blev samtidig under isafkøling sat til en opløsning af 362 mg 4-nitrobenzyl-(lR,5R,6S)-6-t(lR)-i-hydroxyethyl]-l-methy1-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxy1 at opløst i 5 ml tørt ace-tonitril, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 209 μΐ diiso-10 propylethylamin og en opløsning af 420 mg af saltet, fremstillet som beskrevet i trin (1) i 3 ml tørt acetonitril sat til blandingen under isafkøling, og derefter blev fremgangsmåden beskrevet i eksempel 20-(2) gentaget til opnåelse af 195 mg af den i overskriften nævnte forbindelse.

15

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Amaxnm; 295,2.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) fi ppm: 20 1,02 (3H, dublet, J = 7,33 Hz); 1,10 (3H, dublet, J = 6,59 Hz); 2,23 - 2,37 (IH, multiplet); 2,86 (3H, singlet); 2,96 - 3,14 (2H, multiplet); 25 3,20 (3H, singlet); 3,31 (IH, dublet af dubletter, J = 5,86, 2,93 Hz); 3,47 - 3,80 (4H, multiplet); 3,83 - 4,12 (5H, multiplet); 4,34 (IH, triplet, J = 7,88 Hz).

30 35 (IR.5S.6Sl-2-r(2RS.4S)-1.1-dimethv1-2-methoxycarbonyl pyrrol i - dinium-4-vlthiol-6-r f 1R1-1-hvdroxvethyl 1-1-methyl-l-carbapen- 5 2-em-3-carboxyl at EKSEMPEL 26 DK 175029 B1 66

Ved at følge en fremgangsnåde svarende til den i eksempel 1 beskrevne, men under anvendelse af (2S, 4S)-1,1-dimethyl-4-(4-methoxybenzylthio)-2-methoxycarbonylpyrrolidiniumfluorsul-10 fonat (fremstillet ved en fremgangsmåde svarende til den i fremstillingseksemplerne 1 til 4 beskrevne) blev den i overskriften nmvnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xmaxnm: 298.

15

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm.· 1,02, 1,03 (3H, dublet, J * 7,33 Hz); 1,10 (3H, dublet, J s 5,23 Hz); 20 2,27 - 2,45 (IH, multiplet); 2,83 - 3,32 (3H, multiplet); 3,01, 3,14 (3H, singlet); 3,19, 3,22 (3H, singlet); 3,53 - 3,77 (IH, multiplet); 25 3,69 (3 H, singlet); 3,88 - 4,12 (4H, multiplet); 4,48 (0,5H, dublet af dubletter, J * 11,35 & 7,69 Hz); 4,65 (0,5H, dublet af dubletter, J » 10,44 & 8,61 Hz).

30 EKSEMPEL 27 (lR,5S.6S)-2-r(2R.4S)-l,l-dimethvl-2-(N.N-dimethy1carbamoy1) -Pvrrolidinium-4-vlthiol-6-f(lR)-l-hvdroxvethvl1-l-methyl-l- carbapen-2-em-3-carboxyl at 35

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 4 beskrevne, men under anvendelse af (2R,4S)-1,1-dimethy1-Σι N, N-d i met hyl carbamoyl )-4-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidinium- DK 175029 B1 67 f1uorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 23), blev den i overskriften nsvnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xnaxnm: 297.

5

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 1.02 (3H, dublet, J = 7,33 Hz); 1.10 (3H, dublet, J s 6,22 Hz); 10 2,28 - 2,41 (IH, multiplet); 2,88 - 2,80 (IH, multiplet); 2,82 (3H, singlet); 3.01 (3H, singlet); 3.03 {3H, singlet); 15 3,05 - 3,16 (IH, multiplet); 3,18 (3H, singlet); 3,29 (IH, dublet af dubletter. J = 6,23 & 2,94 Hz); 3,50 - 3,58 (IH, multiplet); 4.01 - 4,18 (4H, multiplet); 20 4,91 (IH, dublet af dubletter, J = 7,69 & 6,23 Hz).

EKSEMPEL 28 (IR.5S,6S1-2-Γ(2R.4S)-2-carbamov1-1.1-di methylpyrroli di nium-2 5 4-vi thiol-6-ΓfIR)-1-hvdroxyethvl1-1-roethvl-l-carbapen-2-em-3- carboxvlat

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 1 beskrevne, men under anvendelse af (2R,4S)-2-carbamoyl-4-(4-30 methoxybenzylthio)-l,l-dimethylpyrrolidiniumfluorsulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 22), blev den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H20) *maxniB: 297.

35

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O» 270 MHz) δ ppm: 1.03 (3H, dublet, J * 6,96 Hz); 1.10 (3H, dublet, J = 6,22 Hz); DK 175029 B1 68 2.28 - 2,41 (IH, multiplet); 2,74 - 2,88 (IH, multiplet); 3,02 (3H, singlet); 3,07 - 3,18 (IH, multiplet); 5 3,22 (3H, singlet); 3.29 (IH, dublet af dubletter, J « 6,23 & 2,57 Hz); 3,52 - 3,63 (IH, multiplet); 3,98 - 4,17 (4H, multiplet); 4,39 (IH, triplet, J * 8,06 Hz).

10 EKSEMPEL 29 (lR,5S,6S)-2-r(2S.4S1-2-cvk1 opropvicarbamov1-1,1-dimethylpyr-ro1idinium-4-vlthio1-6-r(IR)-1-hvdroxvethyll-l-methvl-l-car-15 bapen-2-em-3-carboxvlat

Ved at felge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 3 beskrevne, men under anvendelse af (2S,4S)-2-cyklopropylcarba-moyl-1,l-dimethyl-4-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidiniumfluor-20 sulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 24), blev den i overskriften nsvnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H20) XBaxnm: 297.

25 Kernemagnetisk resonansspektrum (020, 270 MHz) 6 ppm: 0,37 - 0,42 (2H, multiplet); 0,59 - 0,64 (2H, multiplet); 1,01 (3H, dublet, J * 7,32 Hz); 30 1,09 (3H, dublet, J = 6,23 Hz); 2,17 - 2,29 (IH, multiplet); 2,47 - 2,55 (IH, multiplet); 2,80 - 3,13 (2H, multiplet); 3,05 (3H, singlet); 35 3,09 (3H, singlet); 3,28 (ih, dublet af dubletter, J = 6,05 & 2,75 Hz); 3,69 (IH, dublet af dubletter, J * 12,09 & 6,05 Hz); 3,84 - 4,10 (5H, multiplet).

(lR,5S.eS)-2-(l.l-dimethylazetidinium-3-vlthiol-6-r(lR)-l-hv- droxvethvl1-1-methyl-l-carbapen-2-em-3-carboxyl at 5 DK 175029 B1 69 EKSEMPEL 30

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 5 beskrevne, men under anvendelse af 1,1-dimethyl-4-{4-methoxy-benzylthio)azetidiniumf1uorsulfonat, blev den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

10

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xmaxnm: 297.

EKSEMPEL 31 15 (IR, SS, 6S 1-2-(4,4-di met hyl morpho linium-2-vl met hvlthiol-6-f(1R)-1-hydroxyethy11-1-methy1 -1-carbapen-2-em-3-carboxyl at

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 5 beskrevne, men under anvendelse af 4,4-dimethy1-2-(4-methoxy-20 benzylthiojmethylmorpholiniumf1uorsu1 fonat, blev den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrura (H2O) Xmaxnm: 298.

25 EKSEMPEL 32 (IR,5S,6S1-2-Γ(6S,8S)-S-oxo-l-methv1-4-aza-l-azonia-bicvklo-Γ 4.3.01non-8-vlthiol-6-f(IR 1-1-hvdroxyethvlΊ-1-methyl-l-carba-pen-2-em-3-carboxvlat 30

Ved følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 25 beskrevne, men under anvendelse af (6S,8S)-5-oxo-8-(4-methoxy-benzylthio)-l-methyl-4-aza-l-azoniabicyklo[4.3.0]nonanfluor-sulfonat (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 35 25), blev den i overskriften nævnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) Xmaxnm: 296.

Kernemagnetisk resonansspektrum (O2O, 270 MHz) δ ppm: DK 175029 B1 70 1*02 (3H, dublet, J « 7,33 Hz); 1,09 (3H, dublet, J = 6,23 HZ); 5 2,23 - 2,37 (IH, multiplet); 2,94 - 3,27 (2H, multiplet); 3,19 {3H, singlet); 3,30 (IH, dublet af dubletter, J * 6.23 & 2,94 Hz); 3,45 - 3,93 (5H, multiplet); 10 3,96 - 4,13 (4H, multiplet); *,32 (IH, triplet, J * 8,24 Hz).

EKSEMPEL 33 15 Natrium-(lR.5S.6S)-2-(2-oxo-pyr rolidinvlthio)-6-f(lR)-l-hv-droxyethyl1-l-methvl-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat 126 μΐ diisopropylethylamin og 150 pi diphenylphosphorylchlo-rid blev under omrøring og isafkøling sat til en opløsning af 20 250 mg 4-nitrobenzy1-(IR,5R,5S)-[(IR)-1-hydroxyethy1]-1-meth- yl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat i 3 ml tørt acetonitril, og derefter blev blandingen omrørt ved 0-5*C i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 288 pi diisopropylethylamin og en opløsning af 222 mg af en 1:1 efter vegt blanding af 25 3-mercapto-2-pyrroli di non (fremstillet ved en fremgangsmåde svarende til den i fremstillingseksempel 19 beskrevne) og tri-f1 uormethansul fonsyre i 2 ml acetoni tri 1 tilsat under isafkøling til den tidligere nevnte reaktionsblanding. Hele blandingen fik derefter lov til at henstå i 3 dage i et køleskab.

30 Ved afslutningen af dette tidsrum blev blandingen fortyndet med ethylacetat, vasket skiftevis med en vandig opløsning af natriumbicarbonat og en vandig opløsning af natriumchlorid og derefter tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter destilleret af under reduceret tryk til ef-35 terladelse af et råprodukt, som blev opløst i en blanding af 20 ml tetrahydrofuran og 20 ml af en 0,1 M phosphatpufferopløsning (pH-vmrdi 7,1), og derefter hydrogeneret ved stuetemperatur i 2 timer i nærværelse af 331 mg 10¾ vægt/vægt palla- DK 175029 Β1 71 dium-på-trækul. Ved afslutningen af denne periode blev uoplø-seligt materiale fjernet ved filtrering under anvendelse af et Cel ite-fi 1 terhjælpemiddel, og filtratet blev vasket med diet-hylether. Den vandige fase blev koncentreret ved inddampning 5 under reduceret tryk, og resten blev underkastet søjlekromatografi gennem Diaion HP-20AG, idet der blev elueret med vand. Eluatet blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk og derefter lyofiliseret til opnåelse af et råprodukt. Dette blev yderligere oprenset ved Lobar-søjlekromatograf i (Merck 10 LiChroprep RP-8, størrelse B), idet der blev elueret med en 3% efter volumen vandig methanolopløsning. Eluatet blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk og lyofiliseret til opnåelse af 35 mg af den i overskriften nævnte forbindelse i form af et farveløst pulver.

15

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) X„,axnm: 302 .

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 20 1,00 (3H, dublet, J = 7,33 Hz); 1,11 (3H, dublet, J s 6,60 Hz); 1,86 - 1,98 (IH, multiplet); 2,40 - 2,55 (IH, multiplet); 3,18 - 3,39 ( 4H, multiplet); 25 3,71 (IH, dublet af dubletter, J = 9,16 & 6,60 Hz); 4,02 - 4,12 (2H, multiplet).

EKSEMPEL 34 30 Natrium-(lR,5S,6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolidinvlthio)-6-f(lR)-l-hy-droxvethvll-l-methvlcarbapen-2-em-3-carboxvlat 126 μ 1 di isopropyl ethyl ami n og 150 μΐ di phenyl phosphory1 chiο-rid blev under omrøring og isafkøling sat til en opløsning af 35 250 mg 4-nitrobenzy1-(IR,5R,6S)-[(IR)-l-hydroxyethy1]-l-meth yl -2-oxo-l-carbapenam-3-carboxylat i 5 ml tørt acetonitril, og derefter blev blandingen omrørt ved 0-5* C i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 144 μΐ diisopropylethylamin DK 175029 B1 72 og 97 mg 4-mercapto-2-pyrro 1idinon (fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 20) med isafkøling sat til den tidligere nevnte reaktionsblanding. Hele blandingen blev derefter omrørt ved 0-5*C i 7 timer og fik derefter lov til at henstå 5 natten over i et køleskab. Ved afslutningen af dette tidsrum blev blandingen fortyndet med ethylacetat, vasket to gange med en vandig opløsning af natriuachlorid og derefter tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter af -destilleret under reduceret tryk til efterladelse af et råpro-10 dukt, som blev opløst i en blanding af 20 ml tetrahydrof ur an og 20 ml af en 0,1 M phosphatpufferopløsning (pH-vmrdi 7,1) og derefter hydrogeneret ved stuetemperatur i 2,5 timer i narva-relse af 331 mg 10* vcgt/vmgt pal 1adium-på-trakul. Ved afslutningen af dette tidsrum blev uopløseligt materiale fjernet ved 15 filtrering under anvendelse af et Cel ite-fi 1terhjalpemiddel, og filtratet blev vasket med diethylether. Den vandige fase blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk, og resten blev underkastet søjlekromatografi gennem Diaion HP20-AG, idet der blev elueret med vand. Eluatet blev koncen-20 treret ved inddampning under reduceret tryk og derefter lyofi-liseret til opnåelse af et råprodukt. Dette blev yderligere oprenset ved Lobar-søj1ekromatograf i (Merck, Li Chroprep RP-β, størrelse B), idet der blev elueret med en 3% efter volumen vandig methanolopløsning. Eluatet blev koncentreret ved ind-25 dampning under reduceret tryk og lyofiliseret til opnåelse af 91 ag af den i overskriften navnte forbindelse i form af et farveløst pulver. Dette er en blanding af de to i somerer med hensyn til carbonatomet i 4-stillingen i pyrrolidinringen i forhold på ca. 1:1.

30

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2O) A.naxnm: 300.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm-.

35 1,02 & 1,03 (3H, dublet x 2, J * 7,33 & 6,96 Hz); 1,10 (3H, dublet, J * 6,60 Hz); 2,12 & 2,22 (IH, dublet af dubletter x 2, J = 17,59 & 4,40

Hz og 17,59 & 4,03 Hz); DK 175029 B1 73 2,74 & 2,77 (IH, dublet af dubletter x 2, J * 17,59 & 9,16 Hz og 17,59 & 9,16 Hz); 3,07 - 3,29 (3H, multiplet); 3,64 - 3,73 (IH, multiplet); 5 3,84 - 3,96 (IH, multiplet); 4,00 - 4,12 (2H, multiplet).

EKSEMPEL 35 10 5-n>ethvl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-vlmethvl-tlR.5S.6S)-2-(2-oxo-3-Pvrrolidinvlthio)-6-niR)-l-hvdroxvethv11-l-methvl-l-carbapen- 2-em-3-carboxyl at

En opløsning af 66 mg 5-methyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-ylmethyl-15 jodid (fremstillet ved opvarmning af 5-methyl-2-oxo-l,3-dioxo-len-4-ylmethylbromid og natriumjodid under tilbagesvaling i acetone) i chloroform blev sat til en blanding af 47,6 mg natri um-(lR,5S,6S)-2-(2-oxo-3-pyrrolidi nylthio)-6-[(IR)-1-hy-droxyethyl]-1-methyl-l-carbapen-2-em-3-carboxylat og 0,4 ml 20 tørt dimethyl formam id. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 80 minutter og derefter ved 30-45*C i 4,5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen fortyndet med ethylacetat og vasket fire gange med en vandig opløsning af natriumchlorid. Ekstrakten blev tørret, og opløsnings-25 midlet blev destilleret af under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved Lobar-søj1ekromatografi (Merck, LiChroprep Si60, størrelse A), idet der blev elueret med en 10:1 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol til opnåelse af 27,4 mg af den i overskriften nævnte forbindelse i form af et farveløst 30 pulver.

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3OH) Amaxnm: 322.

Kernemagnetisk resonansspektrum (hexadeutereret dimethylsulf-35 oxid, 270 MHz) δ ppm: 1,13 (3H, dublet, J * 7,32 Hz); 1,15 (3H, dublet, J = 6,35 Hz); DK 175029 B1 74 1#84 - 1,98 (IH, multiplet); 2,17 (3H, singlet); 2,50 - 2,65 (IH, multiplet); 3*12 - 3,45 (4H, multiplet); 5 3,77 - 4,06 (2H, multiplet); 4,14 (ih, dublet af dubletter, J * 9,27 & 2,44 Hz); 5,08 (2H, singlet).

EKSEMPEL 36 10

Natrium-(lR.5S,6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolidinvlthiol-e-r(lRl-l-hv-droxyethvn-i-methvl-l-carbapen-2 -em-3-carboxvlat I

1,45 ml diisopropylethylamin og 1,70 ml diphenylphosphoryl-15 chlorid blev under isafkøling sat til en opløsning af 2,93 g 4-nitrobenzyl-(lR,5R,6S)-6-((IR)-1-hydroxyethy1]-1-nethyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxyl at i 50 ml tørt acetonitril, og derefter blev blandingen omrørt ved 0-5*C i 30 minutter. 1,45 ml diisopropylethylamin og en opløsning af 1,35 g 4-mercapto-20 2-pyrroli di non (fremstillet som beskrevet i fremst i 11 ingsek-sempel 20) i 5 ml acetonitril blev sat til blandingen, afkølet ved -20*C, og derefter blev hele blandingen omrørt ved 0*C i 3 timer, hvorefter den fik lov til at henstå ved den samme temperatur natten over. Reaktionsblandingen blev derefter fortyn-25 det med ethylacetat, vasket to gange med en vandig opløsning af natriumchlorid og filtreret. Den organiske fase blev tørret over vandfrit natriumsulfat, og opløsningsmidlet blev destilleret af under reduceret tryk til opnåelse af 4-nitrobenzy1 -ester af den i overskriften nmvnte forbindelse som et skum.

30 Denne blev opløst i 150 ml tetrahydrofuran, og opløsningen blev filtreret til fjernelse af uopløseligt materiale. 150 ml af en 0,1 M phosphatpuf feropløsning (pH-vardi 7,1) blev sat til filtratet, og katalytisk reduktion blev udført ved stuetemperatur i 2,5 timer i nmrverelse af 1,5 g 10% vagt/vagt 35 pal 1adium-på-trmkul. Reaktionsblandingen blev derefter oparbejdet på en måde svarende til den i eksempel 34 beskrevne til opnåelse af 1,05 g af den i overskriften navnte forbindelse som et farveløst pulver. Dette er en blanding af de to i some- DK 175029 B1 75 rer med hensyn til carbonatomet i 4-stillingen i pyrrolidin-ringen i forhold på ca. 9:1.

Ultraviolet absorptionsspektrum (H2°) *maxnBI: 299.

5

Infrarødt absorptionsspektrura (KBr) vmax cm"*: 1748. 1689. 1597, 1393, 1296.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 10 1.03 {3H, dublet, J = 7,3 Hz); 1,10 (3H, dublet, J = 6,2 Hz); 2,12 (0,9H, dublet af dubletter, J = 17,9 & 4,4 Hz); 2,22 (0, IH, dublet af dubletter, J - 17,9 & 4.4 Hz); 15 2,74, 2,77 (IH, 2 x dublet af dubletter, J = 17,9 $ 8.4 Hz); 3,08 - 3,24 (2H, multiplet); 3,26 (IH, dublet af dubletter, J - 5,9 & 2,6 Hz); 3,69 (IH, dublet af dubletter, J = 11,4 & 6,6 Hz); 20 3,84 - 3,93 (IH, multiplet); 4,02 - 4,11 (2H, multiplet).

EKSEMPEL 37 2 5 Natrium-(IR,5S.6S) - 2-(2-oxo-4-pvrro1idinvlthio)-6-r f 1R >-1-hv-droxvethvll-l-methvl-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat

En ubehandlet p-nitrobenzylester af den i overskriften nævnte forbindelse blev fremstillet ved at følge i alt væsentligt den 30 samme fremgangsmåde som beskrevet i eksempel 36 ovenfor, men under anvendelse af 330 mg 4-nitrobenzy1 -(IR,5R,6S)-6-[(IR)-1“ hydroxyet hyl]-1-methyl-2-oxo-1-carbapenam-3-carboxyl at. Esteren blev underkastet søjlekromatografi gennem 50 g silicagel, idet der blev elueret med en 4:1 efter volumen blanding af 35 ethylacetat og methanol. Elueringsmidlet blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk til opnåelse af 260 mg af et farveløst pulver, som blev blandet med 10 ml ethylacetat. Blandingen blev isafkølet og filtreret til fjernelse af uop- DK 175029 B1 76 løseligt materiale. Filtratet blev koncentreret ved inddamp-ning under reduceret tryk, og di isopropy1 ether blev sat til resten til opnåelse af et præcipitat. Dette blev opsamlet ved filtrering og tørret til opnåelse af 150 mg af p-nitrobenzyl-5 esteren af den i overskriften nævnte forbindelse som et pulver, som enten er R- eller S-isomeren med hensyn til carbon-atomet i 4-stillingen i pyrrolidinr i ngen.

Kernemagnetisk resonansspektrum (hexadeutereret dimethyl-10 sulfoxid, 270 MHz) 6 ppm: 1,16 {3H, dublet, J = 6,0 Hz); 1,18 (3H, dublet, J * 7,3 Hz); 2.02 (IH, dublet af dubletter, J = 17,1 & 4,9 Hz); 15 2,72 (IH, dublet af dubletter, J = 17,1 & 8,3 Hz); 3.12 - 3,48 (3H, multiplet); 3,74 (IH, dublet af dubletter, J = 10,7 & 6,3 Hz); 3,94 - 4,05 (2H, multiplet); 4,24 (IH, dublet af dubletter, J * 9,8 & 2,9 Hz); 20 5,06 (IH, dublet, J a 4,9 HZ); 5,30, 5,46 {2H, AB, J * 14,2 Hz); 7,71 (2H, dublet, J a 8,8 Hz); 8,23 (2H, dublet, J a 8,8 Hz).

25 100 mg af den i det tidligere trin opnåede p-nitrobenzylester blev underkastet katalytisk hydrogenering på en måde svarende til den i eksempel 34 beskrevne til opnåelse af 55 mg af den i overskriften nævnte forbindelse med enten R- eller S-konfigu-rationen med hensyn til carbonatomet i 4-stillingen i pyrroli-30 dinringen i en ren tilstand som et pulver.

Ultraviolet absorptionsspektrum Xaaxnm: 299 (H2O)·

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 35 1.03 {3H, dublet, J = 7,3 Hz) ; 1,10 (3H, dublet, J * 6,2 Hz); 2.12 (IH, dublet af dubletter, J = 17,9 & 4,4 Hz); DK 175029 B1 77 2,74 {IH, dublet af dubletter, J * 17,9 & 8,4 Hz); 3,08 - 3,24 (2H, multiplet); 3,26 (IH, dublet af dubletter, J = 5,9 & 2,6 Hz); 3,69 (IH, dublet af dubletter, J * 11,4 & 6,6 Hz); 5 3,84 - 3,93 (IH, multiplet); 4,02 - 4,11 (2H, multiplet).

EKSEMPEL 38 10 Natrium-(1R.5S.6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolidinvlthio)-6-r(lR)-l-hvdroxyethvl1-1-methvl-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat

En ubehandlet p-nitrobenzylester af den i overskriften nævnte forbindelse blev fremstillet ved i alt væsentligt at følge den 15 samme fremgangsmåde som den i eksempel 34 beskrevne, men under anvendelse af 300 mg 4-nitrobenzy1-(IR,5R,6S)-6-[{IR)-l-hy-droxyethy1]-1-methyl-2-oxo-l-carbapenam-3-carboxyl at. Esteren blev underkastet søjlekromatografi gennem 50 g silicagel, idet der blev elueret med en 4:1 efter volumen blanding af ethyla-20 cetat og methanol. Elueringsmidlet blev koncentreret ved ind-dampning under reduceret tryk til opnåelse af 270 mg af et farveløst pulver. Produktet er ca. en 1:1 blanding af de to isomerer med hensyn til carbonatomet i 4-stillingen i pyrro-lidinringen. 100 mg af dette produkt blev blandet med 10 ml 25 ethylacetat. Blandingen blev filtreret til opsamling af det uopløselige materiale, som blev omkrystalliseret ud fra en blanding af methanol og isopropanol til opnåelse af 30 mg af p-nitrobenzylesteren af den i overskriften nævnte forbindelse som farveløse nåle. Dette er enten R- eller S-isomeren med 30 hensyn til carbonatomet i 4-stillingen i pyrrolidinringen og er den anden isomer med den modsatte konfiguration af den i det første trin i eksempel 37 opnåede forbindelse.

Kernemagnetisk resonansspektrum (hexadeutereret di methy 1 sulf-35 oxid, 270 MHz) δ ppm: 1.16 (3H, dublet, J = 6,3 Hz); 1.17 (3H, dublet, J = 7,3 Hz); DK 175029 B1 78 2,13 (IH, dublet af dubletter, J » 17,1 & 4,4 Hz); 2,79 (IH, dublet af dubletter, J * 17,1 & 7,8 Hz); 3,10 (IH, dublet af dubletter, J * 10,8, 3,4 Hz); 3,16 - 3,35 (IH, Multiplet); 5 3,40 - 3,51 (IH, Multiplet); 3.70 (IH, dublet af dubletter, J = 10,7 & 7,3 Hz); 3,95 - 4,12 (2H, multiplet); 4.25 (IH, dublet af dubletter, J = 9,3 & 2,5 Hz); 5.07 (IH, dublet, J * 5,4 Hz); 10 5,30, 5,46 (2H, AB, J - 14,2 Hz); 7.71 (2H, dublet, J = 8,8 Hz); 8,23 (2H, dublet, J * 8,8 Hz).

20 mg af den i det tidligere trin opnåede p-nitrobenzylester 15 blev underkastet katalytisk hydrogenering på en måde svarende til den i eksempel 34 beskrevne til opnåelse af 11 mg af den i overskriften nævnte forbindelse med enten R- eller S-konfigu-rationen med hensyn til carbonatomet i 4-stillingen i pyrroli-di nringen og med den modsatte konfiguration af den i eksempel 20 37 opnåede i en ren tilstand som et pulver.

Kernemagnetisk resonansspektrum (DjO, 270 MHz) δ ppm: 1,02 (3H, dublet, J * 7,3 Hz); 25 1,10 (3H, dublet, J * 6,6 Hz); 2,22 (IH, dublet af dubletter, J * 17,6 & 4,4 Hz); 2,77 (IH, dublet af dubletter, J * 17,6 & 8,4 Hz); 3.08 - 3,25 (2H, multiplet); 3.25 (IH, dublet af dubletter, J * 5,9 & 2,6 Hz); 30 3,68 (IH, dublet af dubletter, J = 11,4 & 6,4 Hz); 3,84 - 3,96 (IH, multiplet); 4,00 - 4,12 (2H, multiplet).

35 EKSEMPEL 39 DK 175029 B1 79

Pivalovloxvmethvl-(IR.SS .6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolid i nvlthio)-6-C(IR)-1-hvdroxvethvl1-1-methyl-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat .5 100 mg natri um-2-(2-oxo-4-pyrrolidinylthio)-6-[(IR)-1-hydroxy-ethyl]-l-methyl-l-carbapen-2-em-3-carboxylat, som var opnået ved hjælp af en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 36 beskrevne, blev suspenderet i 3 ml tørt N,N-dimethylacetamid.

10 80 μΐ pivaloyloxymethyljodid blev tilsat under isafkøling til suspensionen, og derefter blev blandingen omrørt i 15 minut· ter, i løbet af hvilket tidsrum blandingen blev en opløsning. Reaktionsblandingen blev derefter fortyndet med 50 ml ethyl-acetat og vasket to gange med en vandig opløsning af natrium· 15 chlorid. Den organiske fase blev tørret over vandfrit natriumsulfat, og opløsningsmidlet blev destilleret af under reduceret tryk. Resten blev renset ved Lobar-søjlekromatografi (Merck, LiChroprep RP-8, størrelse 8), idet der blev elueret med 60% efter volumen vandig methanol. E1ueringsmid1 et blev 20 inddampet under reduceret tryk til fjernelse af methanolen, hvilket efterlod en vandig fase, som blev blandet med natrium-chlorid og derefter ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev tørret over vandfrit natriumsulfat og koncentreret ved inddampning under reduceret tryk til opnåelse af 110 mg af den 25 i overskriften nævnte forbindelse som et farveløst pulver.

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) *roaxnm: 323 (e = 10760).

30 Infrarødt absorpti onsspektrum {KBr) vmax cm'1: 1778, 1756, 1699.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz) δ ppm: 35 1,23 (9H, singlet); 1,29 (3H, dublet, J = 7,3 Hz); 1,35 (3H, dublet, J = 6,2 Hz); 1,95 (3H, bred singlet); DK 175029 B1 80 2,33 (IH, dublet af dubletter, J * 17,6 & 6,2 Hz); 2.79 (ih, dublet af dubletter, J = 17,6 & 8,8 Hz); 3,22 - 3,34 (2H, Multiplet); 3.38 (ih, dublet af dubletter, J = 9,9 & 4,8 Hz); 5 3,80 (IH, dublet af dubletter, J s 10,3 & 7,0 Hz); 3,95 - 4,05 (IH, multiplet); 4.20 - 4,27 (2H, multiplet); 5.79 (ih, bred singlet); 5,83, 5,97 (2H, A8, J * 5,5 Hz) .

10 EKSEMPEL 40 (1-methylcyklohexan-l-vllcarbonyloxvmethvl-(iR.5S.6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolidinylthio)-6-r(IR)-1-hvdroxvethvil-1-»ethyl-1-15 carbapen-2-em-3-carboxyl at

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 39 beskrevne, men under anvendelse af (1-methylcyklohexan-l-y 1 )-carbony1oxymethy1 jodid i stedet for pivaloyloxymethyljodid 20 blev den i overskriften ncvnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xaax nm: 323 (e = 9655).

25 Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vnax cm"*: 1777, 1753, 1700.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz) δ ppm: 30 1,18 (3H, singlet); 1,29 (3H, dublet, J = 7,3 Hz); 1,35 (3H, dublet, J » 6,2 Hz); 1» 2 5 - 1,75 (9H, multiplet); 2,00 - 2,08 (2H, multiplet); 35 2,33 (IH. dublet af dubletter, J » 17,6 & 6,2 Hz); 2.79 (IH, dublet af dubletter, J * 17,6 & 8,8 Hz); 3.21 - 3,33 (2H, multiplet); 3.38 (IH, dublet af dubletter, J * 9,9 & 4,8 Hz); DK 175029 B1 81 3,79 (IH, dublet af dubletter, j = 9,9 & 7,0 Hz); 3,95 - 4,05 (IH, multiplet); 4,21 - 4,30 (2H, multiplet); 5,78 (IH, bred singlet); 5 5,87, 5,96 (2H, AB, J = 5,5 Hz).

EKSEMPEL 41 1- (cyklohexvloxvcarbonvloxv)ethyl-(lR,5S.6S)-2-(2-oxo-4-pyr- 10 rolidinvlthio)-6-niR)-l-hvdroxyethvll-l-methvl-1-carbapen-2- em-3-carboxvlat

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 39 beskrevne, men under anvendelse af 54 mg natrium-2-(2-oxo-4-15 pyrrolidinylthio)-6-[(lR)-l-hydroxyethyl]-l-methyl-1-carbapen- 2- em-3-carboxy1 at, som var opnået ved hjælp af en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 36 beskrevne, og 50 μΐ l-(cyk-lohexyloxycarbonyloxy)ethyl jodid, blev 62 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået som et farveløst pulver.

20

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xmax nm: 323 (e * 10766).

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm“l; 25 1759, 1701.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz) δ ppm: 1,28 (3H, dublet, J = 7,0 Hz); 30 1,33, 1,36 (3H, to dubletter, J = 6,2 Hz); 1,59, 1,61 {3H, to dubletter, J = 5,5 Hz); 1,2 - 1,6 (6H, multiplet); 1,7 - 2,0 (5H, multiplet); 2,33 (IH, dublet af dubletter, J = 17,6 & 6,2 Hz); 35 2,79 (IH, dublet af dubletter, J = 17,6 & 8,8 Hz); 3,24 - 3,33 (2H, multiplet); 3,35 - 3,42 (IH, multiplet); 3,76 - 3,85 (IH, multiplet); DK 175029 B1 82 3.94 - 4,05 (IH, multiplet); 4,19 - 4,27 (2H, multiplet); 4,59 - 4,70 (IH, multiplet); 5,69 (IH, bred singlet); 5 6,88 (IH, kvartet, J « 5,5 Hz).

EKSEMPEL 42 1-(cyklopentyloxycarbonvloxv)ethvl-(IR.5S.6S)-2-(2-oxo-4-pyr-10 rolidinylthio)-6-nlRl-l-hvdroxvethvn-i-methvl-l-carbapen-2-em-3-carboxvlat

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 39 beskrevne, men under anvendelse af 1-(cyklopentyloxycarbony1 -15 oxy)ethy1 jod id, blev den i overskriften navnte forbindelse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Awax nm: 322 (e « 10651).

20

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vnax cm-*: 1760, 1701.

Kernemagnetisk resonansspektrum (¢0013, 270 MHz) δ ppm: 25 1,28, 1,29 (3H, to dubletter, J - 7,3 Hz); 1,33, 1,35 (3H, to dubletter, J * 6,2 Hz); 1*58, 1,60 (3H, to dubletter, J * 5,5 Hz); 1*65 - 1,95 (8H, multiplet); 30 2,33 (IH, dublet af dubletter, J * 17,6 & 6,2 Hz); 2,79 (IH, dublet af dubletter, J * 17,6 & 8,8 Hz); 3,23 - 3,32 (2H, multiplet); 3,38, 3,39 (IH, to dubletter af dubletter, J * 9,9 & 4,8 Hz); 35 3,68 - 3,87 (IH, multiplet); 3.95 - 4,07 (IH, multiplet); " 4,27 (2H, multiplet); 5,08 - 5,16 (IH, multiplet); DK 175029 B1 83 5,66 (IH, bred singlet); 6.87 (IH, kvartet, J = 5,5 Hz).

EKSEMPEL 43 5 1-(cyklohexvlmethyloxvcarbonvloxv)ethyl -(IR.5S.6S1-2-(2-oxo-4-pyrrolidinv1thio)-6-r(IR)-1-hvdroxvethyl1-1-methvl-l-carba-pen-2-em-3-carboxvlat 10 Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 39 beskrevne, men under anvendelse af 1-(cyklohexylmethyloxycar-bonyloxy)ethyljodid, blev den i overskriften navnte forbindelse opnået.

15 Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xmax nm: 323 (e = 10975).

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm“l; 1766, 1700, 1269.

20

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 270 MHz) 5 ppm: °*95 - 1,26 (5H, multiplet); 1.28, 1,29 (3H, to dubletter, J * 7,3 Hz); 25 1,33, 1,35 (3H, to dubletter, J = 6,2 Hz); lr59, 1,61 (3H, to dubletter, J = 5,9 & 5,5 Hz); 1.64 - 1,76 (6H, multiplet); 1.87 (IH, bred singlet); 2.33 (ih, dublet af dubletter, J * 17,6 & 6,2 Hz); 30 2,79 (ih, dublet af dubletter, J * 17,6 & 8,8 Hz); 3,24 - 3,35 (2H, multiplet); 3.37 - 3,42 (IH, multiplet); 3,75 - 3,87 (IH, multiplet); 3.95 - 4,06 (3H, multiplet); 35 4'20 " 4.28 (2H, multiplet); 5,73 (ih, bred singlet); 6,86. 6,87 (IH, to kvartetter, J = 5,9 & 5,5 Hz).

EKSEMPEL 44 DK 175029 B1 84 1-(isopropoxvcarbonvloxv)ethvl-(lR.5S.6S)-2-(2-oxo-4-pyrro-lidinvlthio)-6-r( IR) -1-hvdroxvcthvl 1 -1-met hyl -l-carbapen-2-em-5 3-carboxvl at

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 39 beskrevne, men under anvendelse af 1-{isopropoxycarbonyloxy)-ethyljodid, blev den i overskriften nevnte forbindelse opnået.

10

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xnax nm: 323 (e * 10961).

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) v„ax cm"*: 15 1762, 1701, 1272.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 270 MHz) δ ppm: 1»26 - 1,36 (12H, multiplet); 2° 1,59, 1,61 (3H, to dubletter, J = 5,5 Hz); 1»80 (IH, bred triplet, J - 3,7 Hz); 2,33 (ih, dublet af dubletter, J * 17,6 & 6,2 Hz); 2,79 (ih, dublet af dubletter, J » 17,6 & 8,8 Hz); 3*24 - 3,34 (2H, multiplet); 25 3'35 - 3,42 (IH, multiplet); 3,76 - 3,87 (IH, multiplet); 3,95 - 4,07 (IH, multiplet); 4,19 - 4,28 {2H, multiplet); 4,82 - 4,99 (IH, multiplet); 30 5,63 (ih, bred singlet); 6*88 (ih, kvartet, J * 5,5 Hz).

35 fIR.2S.5R1-(i)-menthy1oxycarbonyloxvmethyl-(IR,5S,6S)-2-f 2- oxo-4-pvrrol idinvlthio)-6-r(IR 1-1-hydroxyethyll-l-methyl-1- 5 carbapen-2-em-3-carboxyl at DK 175029 B1 85 EKSEMPEL 45

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 39 beskrevne, men under anvendelse af {IR,2S,5R}-{t)-menthy 1 oxy-carbonyloxymethyljodid, blev den i overskriften ncvnte forbin-10 delse opnået.

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xfflax nm: 324 {€ 10801).

15 Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm-1: 1763, 1695, 1266.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz) δ ppm: 20 0,78 (3H, dublet, J = 7,0 Hz); 0,89 (3H, dublet, J = 7,0 Hz); 0,92 (3H, dublet, J = 7,3 Hz); 1.29 (3H, dublet. J = 7,3 Hz); 1,35 (3H, dublet, J = 6,2 Hz); 25 0,95 - 1,55 (5H, multiplet); 1#63 - ir73 (2H, multiplet); 1#88 - 2,03 (IH, multiplet); 2,08 - 2,17 (IH, multiplet); 2.34 (ih, dublet af dubletter, J * 17,2 & 6,2 Hz); 30 2,79 (1H, dublet af dubletter, J * 17,2 & 8,8 Hz); 3,22 - 3,34 (2H, multiplet); 3,39 (ih, dublet af dubletter, J = 9,5 & 4,8 Hz); “ 3,86 (IH, multiplet); 3»96 - 4,06 (IH, multiplet); 35 4·18 - 4,28 (2H, multiplet); 4,56 (IH, dublet af tripletter, J = 10,6 & 4,4 Hz); 5f70 (ih, bred singlet); 5,89, 5,91 (2H, AB, J * 5,9 Hz).

EKSEMPEL 46 DK 175029 B1 86 S-aethvl-2-oxo~l.3-dioxolen-4-v1methvl-tlR.SS.6S)-2-(2-oxo-4-pvrrol idinvl thio)-6-r( IR )-l-hvdroxvethvl 1 -1-aethyl-l-carbapen-5 2-em-3-carboxyl at

Ved at følge en fremgangsmåde svarende til den i eksempel 39 beskrevne, men under anvendelse af 50 ag natrium-2-(2-oxo-4-pyrrolidinylthio)-6-[(IR)-l-hydroxyethy1]-1-methyl-l-carba-10 pen-2-em-3-carboxy1 at og 55 mg 5-øethyl-2-oxo-l,3-dioxolen-4-ylmethylbromid, blev 50 mg af den i overskriften nævnte forbindelse opnået soa et farveløst pulver.

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xmax nm: 15 321,1 {e = 8982).

Infrarødt absorptionsspektrum (CHCl3) vmax cm"*: 1820, 1772, 1701, 1627.

20 Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz) δ ppm: 1,30 {3H, dublet, J = 7,33 Hz); 1/36 (3H, dublet, J » 6,22 Hz); 1/80 {IH, bred singlet); · 25 2,21 (3H, singlet); 2/35 (ih, dublet af dubletter, J « 17,58 & 6,04 Hz); 2,81 (ih, dublet af dubletter, J » 17,58 & 8,80 Hz); 3,25 - 3,43 (3H, multiplet); 3,73 - 4,05 (2H, multiplet); 30 - 4,32 (2H, multiplet); </96, 5,05 {2H, AB, J = 13,93 Hz); 5,59 (IH, bred singlet).

35 DK 175029 B1 87 EKSEMPLERNE 47 TIL 56

Eksempel 47 5 1-(i sobutvrvloxv)ethvl-tlR.5S.6S)-2-(2-oxo-4-pyrrol i di nyl-thio)-6-r i IR} -i-hvdroxvethvl l-l-m'ethyl-l-carbapen-2-em-3-car-boxvlat

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xmax nn: 323.

10

Eksempel 48 1-(cyklohexancarbonvioxv1 ethvl-(lR,5S.6S)-2-(2-oxo-4-pyrroli -dinvlthiol-6-Γ f1Rί-l-hvdroxvethvl1-1-methyl-1-carbapen-2-em-15 3-carboxylat

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xmax nm: 323.

Eksempel 49 20 1-(pivalovloxv)ethvl-(IR.5S,6S1-2-(2-oxo-4-pyrrolidinvlthiol- 6-Γ(IR)-1-hvdroxvethvl1«1-methyl-l-carbapen-2-em-3-carboxyl at

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xnax nm: 323.

25

Eksempel 50 1-acetoxvethyl-(IR,SS.6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolidinvlthiol-6-Γ i IR)-1-hvdroxvethvl1-1-methvl-l-carbapen-2-em-3-carboxyl at 30

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xmax nm: 323.

35 DK 175029 B1 88

Eksempel SI

Cvklohexancarbonvloxvmethvl-(IR.5S.6S1-2-(2-oxo-4-pvrrolidi-nvlthio)-6-f( lR)-l-hvdroxvethvl l-l-methvl-l-carbapen-2-em-3-5 carboxyl at

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xaax nm: 323.

Eksempel 52 10

Cvklohexvloxvcarbonvloxvmethvl-(lR.SS,SS1-2-f2-oxo-4-pyrrol i -dinylthio)-6-f(IR1-1-hydroxvethvl1-1-methvl-l-carbapen-2-en- 3-carboxvlat 15 ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) XBax nm: 323.

Eksempel 53

Cvk1opentvloxvearbonvioxvaethvl-tlR.5S.6S)-2-f2-oxo-4-pyrroli-20 dinvlthio)-6-f flR)-1-hydroxvethvll-l-inethvl-l-carbapen-2-em- 3-carboxvlat

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) XBax na: 323 .

25 Eksempel 54

Natrium-(lR,5S.gS)-2-(l-methvl-2-oxo-4-pyrrolidinvlthio)-6-Γ(IR)-1-hydroxvethvl1-1-methyl-l-carbapen-2-em-3-carboxyl at 30 Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xmax nm: 300.

Eksempel 55 P i va1oyloxvmethvl-(lR,5S.6S)-2-(l-methvl-2-oxo-4-pyrrolidinvl-35 thio)-6-rflR)-l-hvdroxvethvll-l-methvl-l-carbapen-2-em-3-car-boxvlat

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Xmax nm: 323.

Eksempel 56 DK 175029 B1 89 1-(isopropoxvcarbonvloxy)ethvl-(lR.5S.6S)-2-(l-methvl-2-oxo-4-pyrrolidi nvlthio)-6-f(IR)-1-hvdroxvethvl1-1-methyl-1-carbapen-S 2-em-3-carboxyl at

Ultraviolet absorptionsspektrum (CH3CN) Amax nm: 323.

FREMSTILLINGSEKSEMPEL 1 10 (2S,4S)-2-carbamoyl-4-f4-methoxvbenzvlthio)-l.l-dimethvlpvrro-1idiniumf1uorsul fonat 1 - f 11 (2S.4R)-1-t-butoxvcarbonvi-4-hydroxy-2-pyrrolidincar- 15 boxvlsvre 27,3 g natri umhydroxid blev opløst i 380 ml vand, og 85 g (2S,4R)-4-hydroxy-2-pyrrolidi ncarboxy1 syre blev derefter sat til opløsningen ved 3 til 5eC efterfulgt af 570 ml tetrahydro-20 furan ved den samme temperatur. En opløsning af 141,5 g di-t-butoxycarbonat i 190 ml tetrahydrofuran blev derefter sat til reaktionsblandingen ved 3 til 5*C og derefter blev blandingen omrørt ved 50 til 55*C i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev blandingen afkølet, og derefter blev dens pH-vær-25 di indstillet til en værdi på 3 til 4 ved tilsætningen af koncentreret saltsyre efterfulgt af ammoniumchlorid. Blandingen blev derefter ekstraheret med tetrahydrofuran, og ekstrakten blev tørret. Opløsningsmidlet blev derefter destilleret fra ekstrakten under reduceret tryk til opnåelse af 128 g af den i 30 overskriften nævnte forbindelse som et farveløst pulver.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) 6 ppm: 1,44 (9H, singlet); 35 1,96 - 2,45 (2H, multiplet); 2,36 - 2,72 (2H, multiplet); 4,24 - 4,66 (2H, multiplet); 5,04 - 5,60 (2H, bred singlet).

DK 175029 B1 90 1 - (2 ) 12S. 4R )-1-t-butoxvcarbonvl-2-carbamovl-4-hvdroxvpyrro- 1 i d i n 58 g (2S,4R)-l-(t-butoxycarbonyl)-4-hydroxy-2-pyrrolidincar-5 boxylsyre [fremstillet som beskrevet i trin (1) ovenfor] blev opløst i 850 ml tørt tetrahydrofuran, og derefter blev 38,2 el triethylaain sat til blandingen ved -15 til -20*C. En opløsning af 26,3 ml ethylchlorformiat i 240 al tørt tetrahydrofuran blev derefter dråbevis sat til blandingen ved -15 til 10 -20*C, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 35 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 258 ml 28% vsgt/vol vandig ammoniuahydroxid sat til blandingen ved -15 til -20*C, og blandingen fik lov til at henstå natten over ved stuetemperatur. Ammoniumchlorid blev derefter sat til reak-15 tionsblandingen, som derefter blev ekstraheret med tetrahydrofuran. Ekstrakten blev tørret og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under reduceret tryk. Den opnåede rest blev tritureret aed diethylether til forårsagelse af krystallisering. Krystallerne blev opsamlet ved filtrering og vasket aed 20 diethylether til opnåelse af 49,7 g af den i overskriften nmvnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 146-148*0.

Kerneaagneti sk resonansspektrum (hexadeutereret dimethylsulf-25 oxid, 60 MHz) 6 ppm: 1,38 (9H, singlet}; 1,65 - 2,24 (2H, multiplet); 3,00 - 3,66 (2H, multiplet); 30 3,76 - 4,49 (3H, multiplet); 6,78 (IH, bred singlet}; 7,23 (IH, bred singlet).

l-(3) (2S,4R)-i-(t-butoxvcarbonvi)-2-carbamovl-4-methansulfo- 35 nyloxypvrrolidin 1,85 ml methansulfonylchlorid blev under isafkøling sat til en opløsning af 5,0 g (2S,AR)-1-(t-butoxycarbony1)-2-carbamoy1-4- DK 175029 B1 91 hydroxypyrrolid in [fremstillet som beskrevet i trin (2) ovenfor] i 250 ml tørt tetrahydrofuran efterfulgt af 3,31 ml tri-ethylamin. Blandingen blev derefter omrørt ved 0 til 5*C i 1 time, hvorefter den blev hældt i en vandig opløsning af natri-5 umchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved kromatografi gennem silicagel (elueret med en 9:1 efter volu-10 men blanding af ethylacetat og methanol) til opnåelse af 5,5 g af den i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krystaller.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) 6 ppm: 15 1,43 (9H, singlet); 2.10 - 2,68 (2H, multiplet); 3,12 (3H, singlet); 3.10 - 3,40 (IH, bred singlet); 20 3,73 {2H, dublet, J * 4,0 Hz); 4,32 (IH, triplet, J * 7,0 Hz); 5,26 (IH, triplet, J * 4,0 Hz); 6,68 (IH, bred singlet); 7,30 (IH, bred singlet).

25 1-(4) (2S,4R)-l-(t-butoxvcarbonvl)-2-carbamovl-4-(4-methoxv-benzvlth i o) pyrrol i di n 330 mg natriumhydrid (som en 55% vægt/vægt dispersion i mine-30 ralolie) blev under isafkøling sat til en opløsning af 1,18 g p-methoxybenzylmercaptan i 25 ml tørt dimethyl formamid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev 2,14 g (2S,4R)-1-(t-butoxy-carbony1)-2-carbamoyl-4-methansulfonyloxypyrrolid in [fremsti 1 -35 let som beskrevet i trin (3) ovenfor] sat til blandingen, som derefter blev omrørt ved stuetemperatur i 3 timer. Reaktionsblandingen blev derefter hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vas- DK 175029 B1 92 ket ned en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved kromatografi gennem silicagel (elueret med en 2:3 efter volu-5 men blanding af cyklohexan og ethylacetat) til opnåelse af 1,94 g af den i overskriften nevnte forbindelse som en olie.

Kernemagnet i sk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 10 1,43 (9H, Singlet); 1,80 - 3,42 (5H, multiplet) 3,70 (2H, singlet); 3,78 {3H, singlet); 4,18 (IH, triplet, J = 7,0 Hz); 15 5,96 (IH, bred singlet); 6,35 (IH, bred singlet); 6,79, 7,21 (4H, A2B2' J * 9'° Hz>· 1-(5) (2S,4S)-2-carbamovl-4-(4-methoxvbenzvlthio)pyrrol id in 20 1,92 g {2S,4S)-1-(t-butoxycarbony1)-2-carbamoyl-4-(4-methoxy-benzylthio)-pyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (4) ovenfor] blev opløst i 25 ml ethylacetat, og 26,2 ml af en 4 N dioxanopløsning af hydrogenchlorid blev sat til opløsningen 25 under isafkøling. Blandingen blev derefter omrørt ved 0 til 5*C i 2 timer og ved stuetemperatur i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev den hmldt i en mcttet vandig opløsning af natriumbicarbonat for at gøre den svagt basisk og blev ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med 30 en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk til opnåelse af 1,36 g af den i overskriften nevnte forbindelse som et pulver, som smeltede ved 120-121*0.

Kernemagnetisk resonansspektrum (hexadeutereret dimethylsulf-oxid, 60 MHz) δ ppm: 35 DK 175029 B1 93 1,58 - 3,40 (7H, multiplet); 1,67 (2H, singlet); 1,78 (3H, singlet); 6,43 (IH, bred singlet); 5 6,78, 7,22 (4H, A2B2' J * 9'° 7,31 (IH, bred singlet).

1-(5a) (2S.4S1-2-carbamoyl-4-f4-methoxvbenzvlthio)pyrrolidin- hvdrochlori d 10 620 ml af en 4 N opløsning af hydrogenchlorid i ethylacetat blev under isafkøling sat til en opløsning af 91 g (2S,4S)-1-t-butoxycarbonyl-2-carbamoyl-4-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (4) ovenfor] i 2 1 ethylace-15 tat, og derefter blev blandingen omrørt ved stuetemperatur i 4,5 timer. Krystallerne, som præcipiterede, blev opsamlet ved filtrering, vasket med diethylether og tørret i vakuum til opnåelse af 63 g af den i overskriften nævnte forbindelse, som smeltede ved 192-195eC.

20

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm-1: 1706, 1584, 1512.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 25 1 ,75 - 1,90 (IH, multiplet); 2,54 - 2,62 (IH, multiplet); 3,04 - 3,11 (IH, multiplet); 3,28 - 3,41 (2H, multiplet); 30 3,64 (2H, singlet); 3,65 {3H, singlet); 4.22 (IH, triplet, J * 8,06 Hz); 6,80, 7,15 (4H, A2B2' J * 9'79 Hz>· 35 DK 175029 B1 94 1-(6a) (2S.AS1-2-carbamoyl-4- (4-methoxvbcnzvlthio1-1-methvl-pyrrolidin

En opløsning af 0,29 g natriumbicarbonat i 3 ml vand og 0,34 S ml 35% formalin blev dråbevis i nævnte rækkefølge under isafkøling sat til en suspension af 1 g af forbindelsen, soa var opnået son beskrevet i trin l-(5a) i 20 *1 acetonitril, og derefter blev blandingen omrørt ved 10*C i 20 minutter. 0,25 g natriumcyanoborhydrid blev derefter sat til blandingen under 10 isafkøling, og derefter blev blandingen omrørt ved stuetemperatur i 20 minutter. 0,5 al eddikesyre blev under isafkøl i ng sat til blandingen, som derefter blev omrørt ved stuetemperatur i 20 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev blandingen fortyndet med 100 ml ethylacetat og vasket skifte-15 vis med en 1:1 efter volumen blanding af en 1 N vandig opløsning af natriumhydroxid og en mættet vandig opløsning af na-triumchlorid og derefter med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid. Den organiske fase blev derefter tørret over vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev destilleret 20 af under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem silicagel (Wakogel C-100, Wako Junyaku), idet der blev elueret med en 95:5 efter volumen blanding af chloroform og methanol til opnåelse af 0,92 g af den i overskriften nævnte forbindelse. Smeltepunktet, infrarødt absorptionsspek-25 true og kernemagneti sk resonansspektrum for denne forbindelse var magen til de for forbindelsen, som blev opnået som beskrevet i fremstillingseksempel 1-{6) nedenfor.

1-(6) (2S.4Sl-2-carbamovl-4-(4-methoxvbenzvlthiol-1-methvl- 30 pyrrolidin 0,07 ml methyljodid blev under isafkøling sat til en opløsning af 0,6 g (2S,4S)-2-carbamoy1-4-(4-methoxybenzy1thio)-pyrrol i -din [fremstillet som beskrevet i trin (5) ovenfor] opløst i 35 4,5 ml tørt dimethyl formamid. Blandingen blev derefter omrørt ved 0 til 5*C i 5 minutter og ved stuetemperatur i 20 minut ter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hældt i en mættet vandig opløsning af natriumbicarbonat og DK 175029 B1 95 derefter ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med den vandige opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk, og derefter blev resten S underkastet søjlekromatografi under anvendelse af en Lobar-søjle (Merck LiChroprep Si 60, størrelse B) og 252 mg af den i overskriften nævnte forbindelse, som smeltede ved 113-llAeC, blev opnået som krystaller ud fra fraktionerne, som blev elue-ret med en 9:1 efter volumen blanding af ethylacetat og metha-10 nol.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm"1: 1636, 1609, 1512.

15 Kernemagnetisk resonansspektrum (CDCl3, 60 MHz) 6 ppm: 1,58 - 3,36 (6H, multiplet); 2,35 (3H, singlet); 3,68 {2H, s i ng1 et); 20 3,78 (3H, singlet); 5,95 (IH, bred singlet); 6,84, 7,23 (4H, A2B2' J s 9'° Ηζ)ί 7,20 (IH, bred singlet).

25 1-(7) (2S.4S)-2-carbamoyl-4-(4-methoxvbenzvlthio)-l.l-di- methyl pyrrolidiniumfluorsulfonat 0,123 ml methylf1uorsulfonat blev under isafkøling sat til en opløsning af 320 mg (2S,4S)-2-carbamoy1-4-(4-methoxybenzy1 -30 thi o)-1-methy1 pyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (6) eller (6a) ovenfor], som var opløst i 7 ml tørt methylenchlo-rid. Blandingen blev derefter omrørt ved den samme temperatur i 20 minutter og ved stuetemperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved des-35 tillation under reduceret tryk, og resten blev gentagne gange vasket ved dekantering med diethylether og derefter tørret under reduceret tryk til opnåelse af 525 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

DK 175029 B1 96

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O* 270 MHz) δ ppm: 2.01 - 3,68 (5H, multiplet); 3.02 (3H, singlet); 5 3,03 (3H, singlet); 3,6$ (3H, singlet); 3,68 (2H, singlet); 4,07 (IH, dublet af dubletter, J * 8,43 & 7,70 Hz); 6,81, 7,16 (4H, A2B2' J a 8>79 Hz>· 10 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 2 (2S.4S)-2-carbamoyl-4-(4-methoxvbenzvlthio)-l-(2-fluorethyl)- 1- methvlpyprolidiniumfluorsulfonat 15 2- (1) (2S.4S)-2-carbamoyl-4-{4-methoxvbenzvlthi o)-l-f2-fluor- ethvl)pyrrolidin 0,4 ml l-brom-2-fluorethan, 3,83 g natriumjodid og 0,38 g na-20 triumbicarbonat blev sat til en opløsning af 1,2 g (2S,4S)-2-carbamoyl-4-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidin, som var opløst i 12 al tørt dimethylformamid, under isafkøling, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 20 minutter og derefter ved 40*C i 20 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reak-25 tionsblandingen hmldt i en mcttet vandig opløsning af natrium-bicarbonat og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en mmttet vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og 30 resten blev underkastet søjlekromatografi gennem silicagel (Katayama Chemicals Industries Co., silicagel 60K070). 838 mg af den i overskriften ncvnte forbindelse, som smeltede ved 122-123*C, blev opnået som et pulver ud fra de fraktioner, som blev elueret med ethylacetat.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) »aax cm”1: 1636, 1610, 1510.

35 DK 175029 B1 97

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) 6 ppm: 1,55 - 3,40 (8H, multiplet); 3,69 (2H, singlet); 5 3,79 (3H, singlet); 4,47 (2H, dublet af tripletter, J = 47,0 & 6,0 Hz); 4.78 (IH, bred singlet); 7,02 (4H, A2B2* j 9'° Hz); 6,95 - 7,50 (IH, bred singlet).

10 2-f 2 ) (25,4S)-2-carbamovl-4-(4-methoxvbenzvlthio)-l-(2-fluor et hyl )-1-methylpyrrodiniumfluorsulfonat 0,17 ml methylfluorsulfonat blev under isafkøling sat til en 15 opløsning af 630 mg (2S,4S)-2-carbaraoy1-4-(4-methoxybenzy1-thio)-1-(2-f1uorethy1)pyrro 1 i din [fremstillet som beskrevet i trin (1) ovenfor], som var opløst i 12 ml tørt methylenchlo-rid. Blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 30 minutter og derefter ved stuetemperatur i 5 timer. Ved afslut-20 ni ngen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket gentagne gange ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 850 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

25

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz) 6 ppm: 1,84 - 4,73 (1 OH, multiplet); 3,18 {3H, singlet); 30 3,65 (3H, singlet); 3,68 (2H, singlet); 6.79 - 7,19 (4H, multiplet).

35 DK 175029 B1 98 FREMSTILLINGSEKSEHPEL 3 (2S.4S)-l.l-dimethvl-2-methvlcarbaaoyl-4-(4-wethoxvbenzvl-thio)pyrrol idiniumf1uorsulfonat 5 3-(i 1 (2S.4R)-l-(t-butoxvcarbonyl)-2-methylcarbamoyl-4-hv-droxvpvrrolidin 9,91 ni triethylamin blev ved -40*C sat til en opløsning af 10 15,03 g (2S,4RJ-1-(t-butoxycarbony1)-4-hydroxy-2-pyrrolidin- carboxylsyre, so« var opløst i 250 el tørt tetrahydrofuran, og derefter blev en opløsning af 6,81 ni ethylchlorformiat i 30 »1 tørt tetrahydrofuran ved -30 til ~40*C sat til den opnåede blanding, so· derefter blev omrørt ved den samme temperatur i 15 1 time. 16,82 ml af en 40% efter volumen vandig methyl am inop-løsning blev derefter tilsat ved -30*C, og reaktionsblandingens temperatur fik lov til at stige til stuetemperatur. Reaktionen fik derefter lov til at fortsmtte i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen blandet med 20 en lille mcngde af en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret tre gange med ethylacetat. De forenede ekstrakter blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, hvilket 25 gav 12,76 g af den i overskriften nmvnte forbindelse som en farveløs olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 30 1,44 (9H, singlet); 1»89 - 2,45 (2H, multiplet); 2,81 (3H, dublet, J » 5,0 Hz); 3,23 - 3,71 (3H, multiplet); 4,12 - 4,68 (2H, multiplet); 38 6,70 (IH, bred singlet).

DK 175029 B1 99 3-(2) (2S,4R)-1- (t-butoxvcarbonvl)-4-methansu1fonvloxv-2- methylcarbamoyl pyrrol i din 7,H ml triethylamin blev under isafkøling sat til en opløs-5 ning af 11,29 g (2S,4R)-1-(t-butoxycarbony1)-2-methy1 carbamoyl-4-hydroxypyrrol idin [fremstillet som beskrevet i trin (1) ovenfor], som var opløst i 120 ml tørt tetrahydrofuran, og derefter blev 3,93 ml methansulfonylchlorid sat til den opnåede blanding, og blandingen blev omrørt ved 0 til 5*C i 30 mi-10 nutter og derefter ved 15eC i 30 minutter. Den blev derefter hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethyl acetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumhydrid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under 15 reduceret tryk, hvilket gav 11,58 g af den . i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krystaller.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) 6 ppm: 20 1,46 (9H, singlet); 2,00 - 2,85 (2H, multiplet); 2,81 {3H, dublet, J = 5,0 Hz); 3,03 (3H, singlet); 3,41 - 5,42 (4H, multiplet); 25 6,75 (IH, bred singlet).

3- (3) (2S,4S)-l-(t-butoxvcarbonvl)-4-(4-methoxybenzvlth io)- 2-methyl carbamoyl pyrrol i di η 30 1,80 g natriumhydrid (som en 55% vægt/vægt dispersion i mineralolie) blev under isafkøling sat til en opløsning af 5,70 ml 4- methoxybenzylmercaptan, som var opløst i 100 ml tørt tetra-hydrofuran, og blandingen blev derefter omrørt ved 0 til 5eC i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev en opløs- 35 ning af 11,00 g (2S,4R)-1-(t-butoxycarbonyl}-4-methansulfony1 -oxy-2-methylcarbamoyl pyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (2) ovenfor] i 80 ml tørt dimethyl formamid sat til blandingen, og blandingen blev omrørt ved 34eC i 4,5 timer. Reak- DK 175029 B1 100 tionsblandingen blev derefter hasidt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret ned ethylacetat. Ekstrakten blev vasket ned en vandig opløsning af natriunchlorid og tørret over vandfrit nagnesiunsulfat. Opløsningsnidlet blev derefter 5 fjernet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søj1ekronatografi gennen silicagel (elueret ned en 5:1 efter voluaen blanding af ethylacetat og hexan) til opn&else af 4,35 g af den i overskriften nævnte forbindelse soa en olie.

10

Kernenagnetisk resonansspektrun (COCI3, 60 MHz) 6 ppa: 1,42 (9H, singlet); 1,80 - 4,40 (6H, aultiplet); 15 2,81 (3H, dublet, J * 5,0 Hz); 3,70 (2H, singlet); 3,79 (3H, singlet); 6,39 (IH, bred singlet); 6,87, 7,26 {4H, A2B2, J = 9.0 Hz).

20 3 - (4) (2S.4Sl-4-(4-methoxvben2vlthio)-2-methv1carbamovlpyrro-1 i d i n 52,5 ml af en 4 N dioxanopløsn i ng af hydrogench1 or id blev un-25 der isafkøling sat til en opløsning af 4,00 g (2S,4S)-l-(t-butoxycarbonyl)-4-(4-methoxybenzy1thio)-2-aethylcarbamoylpyr-rolidin (fremstillet som beskrevet i trin (3) ovenfor], som var opløst i 50 al ethylacetat. Blandingen blev omrørt ved 0 til 5*C i 30 minutter og derefter ved stuetemperatur i 2 ti-30 mer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hcldt i en mættet vandig opløsning af natriumbicarbonat for at gøre den svagt basisk, og den blev derefter ekstraheret med ethylacetat. Det vandige lag blev mmttet med ammon iumchlo-rid og derefter ekstraheret med tetrahydrofuran. Ekstrakten 35 blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og derefter tørret over vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem silicagel (elueret DK 175029 B1 101 med en 5:1 blanding efter volumen af ethylacetat og methanol) til opnåelse af 2,34 g af den i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 53-54*C.

5 Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) δ ppm: 1,42 - 3,89 (6H, multiplet); 2,74 (3H, dublet, J * 5,0 Hz); 3,66 (2H, singlet); 10 3,76 (3H, singlet); 6,79, 7,17 (4H, A2B2' J = 9'° Hz^ 7,03 - 7,75 (2H, multiplet).

3-(5) (2S,AS)-4-(4-methoxvbenzvlthi o)-1-methvl-2-methvlcarba- 15 movlpyrrolidin 244 μΐ methyljodid og 300 mg natriumbicarbonat blev under isafkøling sat til en opløsning af 1,00 g (2S,4S)-4-(4-methoxy-benzylthio)-2-methylcarbamoylpyrrol idin [fremstillet som be-20 skrevet i trin (4) ovenfor], som var opløst i 6 ml tørt dimethyl formamid. Blandingen blev derefter omrørt ved 0 til 5*C i 1 time og fik lov til at henstå natten over ved stuetemperatur. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstra-25 heret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem silicagel (elueret med en 10:1 efter volu-30 men blanding af ethylacetat og methanol) til opnåelse af 220 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 82-84eC.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm”*: 35 1655, 1512, 1251.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) 6 ppm: DK 175029 B1 102 1,45 - 3,91 (6H, multiplet); 2,31 (3H, singlet); 2.80 (3H, dublet, J * 5,0 Hz); 3.65 (2H, singlet); 5 3,77 (3H, singlet); 6,81, 7,20 (4H, A2B2, J * 9,0 Hz); 6,85 - 7,60 (IH, multiplet).

3-f 6) 12S.4S)-l.1-dimethyl-2-methyl carbamoyl-4-(4-methoxy- 10 benzvlthiolpvrrolidiniumfluorsulfonat 280 μΐ methylfluorsulfonat blev under isafkøling sat til en opløsning af 210 mg (2S,4S)-4-(4-methoxybenzy1thio)-l-methyl- 2-methylcarbamoylpyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin 15 (5) ovenfor], som var opløst i 30 ml tørt methylenchlorid.

Blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 30 minutter og derefter ved stuetemperatur i 5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev .vasket gentagne gange ved 20 dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 281 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som et farveløst pulver.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vBax cm"!: 25 1681, 1512, 1248.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 KHz) δ ppm: 1,95 - 2,43 (2H, multiplet); 30 2,62 (3H, singlet); 2,61-3,88 (3H, mult i plet); 3,03 (3H, singlet); 3,10 (3H, singlet); 3.65 (3H, singlet); 35 3,68 (2H, singlet); 4,12 (IH, triplet, J « 8,06 Hz); 6,83, 7,12 {4H, A2B2, J = 8,61 HZ).

DK 175029 B1 103 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 4 (2S.4S)-l.l-dimethvl-2-(N,N-di methylcarbamoyl)-4-f4-methoxv-benzvlthiolpvrrolidiniumfluorsulfonat 5 4 — f11 (2S.4R)-l-(t-butoxvcarbonvl)-2-(N,N-di methylcarbamoyl)- 4-hydroxypvrroli din 3,84 ml triethyl arain blev ved -15 til -20* C sat til en opløs-10 ning af 5,8 g (2S, 4R)-1-(t-butoxycarbony1)-4-hydroxy-2-pyrro-1idincarboxylsyre, som var opløst i 85 ml tørt tetrahydrofu-ran, og derefter blev en opløsning af 2,63 ml ethylchlorfor-miat i 25 ral tørt tetrahydrof uran sat til den resulterende blanding ved den samme temperatur. Reaktionsblandingen blev 15 derefter omrørt i 2 timer, hvorefter 19,75 ml 50% efter volumen vandig dimethylamin blev sat til blandingen ved -20 til -25“C. Blandingen blev derefter omrørt i 3 timer under isafkøling, hvorefter den fik lov til at henstå natten over ved stuetemperatur. Ved afslutningen af.dette tidsrum blev blan-20 di ngen hældt i en blanding af 30 ml koncentreret saltsyre og is og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en van'dig opløsning af natr i umch 1 or i d og tørret. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev oprenset ved søjlekroraatografi gennem 25 silicagel (elueret med en 9:1 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol) til opnåelse af 429 mg af den i overskriften nævnte forbindelse.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 60 MHz) δ ppm: 30 1.42 (9H, singlet); 1,86 - 2,34 (2H, multiplet); 2,58 - 2,95 (IH, multiplet); 2,97 (3H, singlet); 35 3,10 {3H, Singlet); 3.43 - 3,74 (2H, multiplet); 4,36 - 5,00 (2H, multiplet).

DK 175029 B1 104 4-(2) (2S.4R1-W t-butoxvcarbonyl )-2-fN.N-dimethvlcarbamoyl).- 4-»ethansul fonvioxypyrrolidin 297 μΐ methansulfonylchlorid efterfulgt af 537 μΐ triethylamin 5 blev under isafkøling sat til en opløsning af 993 »g (2S,4R)-1-(t-butoxycarbony 1)-2-(N,N-dimethylcarbanoy1)-4-hydroxypyrro-lidin [fremstillet son beskrevet i trin (1) ovenfor], som var opløst i 20 ml tørt tetrahydrofuran. Blandingen blev omrørt ved 0 til 5*C i l time, og derefter ved stuetemperatur i 1 10 time. Ved afslutningen af dette tidsrum blev den behandlet og oprenset ifølge den i fremstil 1ingseksenpel 1—(3) beskrevne fremgangsmåde til opnåelse af 1,05 g af den i overskriften nxvnte forbindelse som en farveløs olie.

15 Kernenagneti sk resonansspektrum (CDCI3, 60 HHz) δ ppm: 1,43 (9H, singlet); 2.15 - 2,60 (2H, multiplet); 2,97 {3H, singlet); 20 3,07 (3H, Singlet); 3,10, 3,13 (tilsammen 3H, hver singlet); 3,83 (2H, dublet, J s 4,0 Hz); 4,63 - 5,03 (IH, multiplet); 5.15 - 5,46 (IH, multiplet).

25 4-(3) (2S.4S)-l-(t-butoxvcarbamovl>-2-(N,N-dimethvlcarba- aovl)-4-(4-methoxvbenzvlthi o) pyrrol i d i n 151 mg natriumhydrid (som en 55¾ vegt/vægt dispersion i mine-30 ralolie) blev under isafkøling sat til en opløsning af 532 mg 4-methoxybenzy1 mercaptan, som var opløst i 10 ml tørt dimeth-ylformamid. Blandingen blev derefter omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter, hvorefter der blev tilsat 1,05 g (2S,4R)-1-(t-butoxycarbonyl )-2-(N,N-dimethy1 carbamoyl)-4-methansulfony1 -35 oxypyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (2) ovenfor]. Reaktionsblandingen blev derefter omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter og derefter ved 40*C i 6 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev den behandlet og oprenset ved hjælp af DK 175029 B1 105 den i fremsti 11 ingseksempel l-(4) beskrevne fremgangsmåde til opnåelse af 385 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

5 Infrarødt absorptionsspektrum (vsskefilm) vmax cm-1: 1690, 1660, 1605, 1585, 1515.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) δ ppm*.

10 1,35 og 1,38 (9H, singlet); 1,55 - 3,37 (5H, multiplet); 2,93 (3H, singlet); 3,00 (3H, s i nglet) ; 3,68 (2H, singlet); 15 3,77 (3H, singlet); 4,30 - 4,75 (IH, multiplet); 6,85, 7,25 (4H, A2B2, J = 9,0 Hz).

4-(4) (2S.4S)-2-(N.N-dimethvlcarbamovll-4-f 4-methoxvbenzvl-20 thio)pyrrolidin 1 ml af en 4 N dioxanopløsning af hydrogenchlor id blev under isafkøling sat til en opløsning af 385 mg (2S,4S)-l-(t-butoxy-carbonyl)-2-(N,N-di methylcarbamoy1)-4-(4-methoxybenzylthio)-25 pyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (3) ovenfor], som var opløst i 1 ml ethylacetat, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 1,5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hældt i en mættet vandig opløsning af natriumbicarbonat for at gøre den svagt basisk, og den blev 30 ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem silicagel (elueret med en 1:2 efter 35 volumen blanding af ethylacetat og methanol) til opnåelse af 163 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vmax cm'l; 3300, 1640, 1605, 1590, 1510.

DK 175029 B1 106

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDCl3, 60 MHz) 6 ppm: 1,21 - 1,78 (2H, multiplet); 2,09 - 3,98 (5H, multiplet); S 2,94 (6H, singlet); 3,64 (2H, Singlet); 3,74 (3H, singlet); 6,81, 7,21 (4H, A2B2' J " 9'° Hz)· 10 4-(S) (2S.4S)-2-(N.N-di met hyl carbamoyl)-4-(4-methoxybenzvl- thiol-1-methyl pyrrol id in 84 mg natriumbicarbonat og 41 μΐ methyljodid blev under isafkøling sat til en opløsning af 163 mg (2S,4S)-2-(N,N-dimethyl-15 carbamoyl)-4-(4-methoxybenzylthi o)pyrrol i din [fremstillet som beskrevet i trin (4) ovenfor], som var opløst i 1,5 ml tørt dimethylformamid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 4 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hmldt i en mmttet vandig opløsning af natriuabicar-20 bonat og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev oprenset ved kromatografi under anvendelse af en Lobar-søjle (Merck, 25 LiChroprep Si60, størrelse A). 45 mg af den i overskriften nevnte forbindelse blev opnået som en olie ud fra fraktionerne , som var elueret med en 3:1 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol.

30 Infrarødt absorptionsspektrum (veskefilm) Umax cn»~l: 1640, 1607, 1580, 1510.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) δ ppm: 35 1,56 - 2,18 (2H, multiplet); 2,20 - 3,60 (4H, multiplet); 2,34 (3H, singlet); 2,96 (3H, singlet); DK 175029 B1 107 3,10 (3H, singlet); 3.70 (2H, singlet); 3.78 (3H, Singlet); 6,82, 7,22 ( 4H, A2B2' J = 9'° Hz^·

S

4- { 6 ) Methvl-l-(t-butoxvcarbonvloxv)-4-hvdroxyprol i nat 2,2 g natriumhydrid (som en 55% vægt/vægt dispersion i mineralolie) blev ved 0 til 5*C sat til en opløsning af 1,15 g l-(t-10 butoxycarbony1)-4-hydroxyprolin, som var opløst i 100 ml tørt dimethyl formamid. Blandingen blev derefter omrørt ved stuetemperatur i 1,5 timer, hvorefter den blev afkølet til 0 til 5eC, og 3,42 ml methyljodid blev sat til blandingen. Reaktionsblandingen fik derefter lov til at henstå natten over ved stuetem-15 peratur. Ved afslutningen af dette tidsrum blev den haldt i en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret, hvorefter opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev 20 oprenset ved søj1ekromagrafi gennem silicagel (elueret med en 1:1 efter volumen blanding af benzen og ethylacetat) til opnåelse af 6,1 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

25 Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) ymax cm-1: 3430, 1750, 1700, 1670.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDCl3, 60 MHz) δ ppm: 3 0 1,41 (9H, si ng1 et); 1.78 - 2,84 (3H, multiplet); 3,58 (2H, dublet, J * 4,0 Hz); 3.71 (3H, singlet); 4,18 - 4,62 (2H, multiplet).

35 DK 175029 B1 108 4-(7) (2S.4R)-l-(t-butoxvcarbonvl)-4-methansul fonvioxy-2-methoxvcarbonvlpyrrolidin 2,02 »1 methansulfonylchlorid, efterfulgt af 3,65 ml triethy-5 lamin, blev under isafkøling sat til en opløsning af 6,1 g methy1-l-{t-butoxycarbonyl)-4-hydroxyprolinat [fremstillet som beskrevet i trin (6) ovenfor], som var opløst i 120 ml tørt tetrahydrofuran. Blandingen blev omrørt, først ved 0 til 5*C i 1 time, og derefter ved stuetemperatur i 1 time, hvorefter den 10 blev hmldt i en vandig opløsning af natriumchlor id og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk til opnåelse af 8,13 g af den i 15 overskriften nevnte forbindelse som en olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 60 MHz) δ ppm: 1,47 (9H, singlet); 20 1,74 - 2,85 (2H, multiplet); 3,08 (3H, singlet); 3,79 (3H, singlet); 3,81 (2H, dublet, J « 4,0 Hz); 4,15 - 4,65 (IH, multiplet); 25 5,12 - 5,41 (IH, multiplet).

4- (8) (2S.4S)-l-(t-butoxvcarbonvl)-4-(4-methoxvbenzvlth i o 1-2-methoxvcarbonvi pyrrolidin 30 1,11 g natriumhydrid (som en 55* v*gt/v*gt dispersion i mine ralolie) blev under isafkøling sat til en opløsning af 3,51 ml 4-methoxybenzylmercaptan, som var opløst i 60 ml tørt dimeth-ylformamid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev en opløsning 35 af 8,13 g (2S,4R)-1-{t-butoxycarbony1)-4-methansul fony 1 oxy-2-methoxycarbonylpyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (7) ovenfor] i 20 ml tørt dimethyl formami d dråbevis sat til blandingen, som derefter blev omrørt ved stuetemperatur i 15 DK 175029 B1 109 minutter og derefter ved 40*c i 4 timer. Reaktionsblandingen blev derefter hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med vand, tørret og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under 5 reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem silicagel (elueret med en 15:1 efter volumen blanding af benzen og ethylacetat) til opnåelse af 6,89 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

10 Infrarødt absorptionsspektrum (vsskefilm) vmax cm-1: 1745, 1690, 1605, 1580, 1510.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) δ ppm: 15 1,40 (9H, singlet); 1.71 - 3,48 (5H, multiplet); 3.71 (3H, singlet); 3,78 (2H, singlet); 4,01 - 4,45 (IH, multiplet); 20 6,85, 7,25 (4H, A2B2' J 9»° Hz)* 4-(9) (2S.4S)-4-(4-roethoxvbenzv1thiol-2-methoxvcarbonvlpyrro-1 i d i n 25 27,3 ml af en 4 N ethylacetatopløsning af hydrogenchlorid blev under isafkøling sat til en opløsning af 5,22 g (2S,4S)-1-(t-butoxycarbony1)-4-(4-methoxybenzy11h i o)-2-methoxycarbony1 pyr-rolidin (fremstillet som beskrevet i trin (8) ovenfor], som var opløst i 14 ml ethylacetat, og blandingen blev omrørt ved 30 stuetemperatur i 1 time. Reaktionsblandingen blev derefter hældt i en mættet vandig opløsning af natriumbicarbonat og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved 35 destillation under reduceret tryk til opnåelse af 3,3 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) wmax cm‘1·: 3250, 1735, 1610, 1580, 1510.

DK 175029 B1 110

Kernemagnetisk resonansspektrum (C0C13, 60 MHz) 6 ppm*.

1,56 - 3,32 (6H, multiplet); 3,67 (2H, Singlet); S 3,72 (3H, singlet); 3,78 (3H, singlet); 3.70 - 3,99 (IH, multiplet).

4-(10) f 2S.4S)-4-(4-methoxvbenzvlthio)-2-methoxvcarbonv1*1-10 methyl pyrrol i di η 1,18 g natriumbicarbonat og 0,876 ml methyljodid blev under isafkøling sat til en opløsning af 3,3 g (2S,4S)-4-{4-*ethoxy-benzylthio)-2-methoxycarbonylpyrrolidin [fremstillet som be-15 skrevet i trin (9) ovenfor), som var opløst i 30 ml tørt dimethylformamid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hmldt i en mcttet vandig opløsning af natriumbicar-bonat og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket 20 med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vand-frit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søjlekromatografi over silicagel (elueret med en 1:2 efter volumen blanding af ethylacetat og benzen) til opnåelse af 968 mg 25 af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vmax cm“l·.

1740, 1730, 1605, 1580, 1510.

30 Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 1,64 - 3,34 (6H, multiplet); 2,37 (3H, singlet); 3.70 (2H, singlet) ; 35 3,81 (3H, singlet); 3,88 (3H, singlet); 6,83, 7,23 (4H, A2B2' J a 9«° Hz)· DK 175029 B1 111 4-(111 (2S,4S1-2-(N,N-di methyTearbamoyl)-4-(4-methoxvbenzvl- thio)-l-methvlpyrrolidin 1,92 ml af en 1 N vandig opløsning af natriumhydroxid blev sat 5 til en opløsning af 378 mg (2S, 4S)-4-(4-methoxybenzyl thio)-2-^ methoxycarbony1-1-methy1 pyrrol idin [fremstillet som beskrevet i trin (10) ovenfor], som var opløst i 3,84 ml methanol, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 3 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev blandingen neutraliseret ved 10 tilsætning af 1,92 ml 1 N vandig saltsyre. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev tørret til opnåelse af ubehandlet (2S,4S)-2-carboxy-4-(4-methoxybenzylthi o)-l-methyl pyrrolidin.

15 Alt af dette råprodukt blev suspenderet i 7,3 ml acetonitril, og 318 mg N,Ν'-carbonyldiimidazol blev sat til suspensionen, og den resulterende blanding blev derefter omrørt ved 40*C i 1 time. Ved afslutningen af dette tidsrum fik blandingen lov til at afkøle til stuetemperatur, og derefter blev en opløsning af 20 559 mg dimethylamin i 3,7 ml tetrahydrofuran sat til blandin gen. Blandingen fik derefter lov til at henstå ved stuetemperatur natten over. Opløsningsmidlet og et overskud af dimethylamin blev fjernet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev blandet med en vandig opløsning af natriumchlorid 25 og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev destilleret af under reduceret tryk. Resten blev oprenset efter den i referenceeksempel 4-(5) beskrevne fremgangsmåde til opnåelse af 382 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

30 4-(12) (2S,4S)-2-(N.N-dimethylcarbamovl)-4-(4-methoxvbenzv1 -thio)-l.l-dimethvlpvrrolidiniumfluorsulfonat 139 μΐ methy1f1uorsu1 fonat blev under isafkøling sat til en 35 opløsning af 190 mg (2S,4S)-2-(N,N-dimethylcarbamoy1)-4-( 4 -methoxybenzy1thio)-1-methy1 pyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (5) eller (11) ovenfor], som var opløst i 3,8 ml methylenchlorid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur DK 175029 B1 112 i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet destilleret af under reduceret tryk. Resten blev gentagne gange vasket ved dekantering med hexan og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 356 mg af den i overskriften 5 nævnte forbindelse som en olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (020, 50 MHz) δ ppm: 1,58 - 4,58 (12H, multiplet); 10 3,07 {6H, singlet); 3,84 (3H, singlet); 3.90 (2H, singlet); 6,90, 7,25 (4H, A2B2' J * 9'° Hz>·

15 FREMSTILLINGSEKSEMPEL S

(3S)-l.l-dimethv1-3-(4-aethoxvbenzvlthi o)ovrrolid iniumfluor-sulfonat 20 5-(l) (3R)-l-t-butoxvcarbonvl-3-methansulfonyloxvDvrrolidin 16,91 ml triethylamin og 9,36 ml methansulfonylchlorid blev i nævnte rækkefølge under isafkøling sat til en opløsning af 25 g (3R)-l-t-butoxycarbonyl-3-hydroxypyrrolidin, som var opløst 25 i 250 ml tørt tetrahydrofuran, og blandingen blev omrørt ved 0 til 5·C i 30 minutter og derefter ved 15*C i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev blandingen hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylace-tat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natri-30 umchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk til opnåelse af 3,10 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en farveløs olie.

35 Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 1,48 (9H, singlet); 1.91 - 2,45 (2H, multiplet); DK 175029 B1 113 3,04 (3H, singlet); 3,26 * 3,82 (4H, multiplet); 6,1 - 6,44 (IH, multiplet).

5 S-(2) (3S)-l-t-butoxvcarbonvl-3-f4-roethoxvbenzvlthio)pyrro-1 i d i n 5,32 g natriumhydrid (som en 55¾ vægt/vægt dispersion i mineralolie) blev under isafkøling sat til en opløsning af 16,86 10 ml 4-methoxymethylmercaptan, som var opløst i 200 ml tørt dimethyl formamid, og blandingen blev derefter omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev en opløsning af 31,00 g (3R)-1-t-butoxycarbonyl-3-methan-sulfonyloxypyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (1) 15 ovenfor] i 50 ml tørt dimethyl formamid sat til reaktionsblandingen. Blandingen blev derefter omrørt i 30 minutter under isafkøling, hvorefter den fik lov til at henstå natten over ved stuetemperatur. Den blev derefter hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Eks-20 trakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev destilleret af under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem silicagel (elueret med en 5:1 efter volumen blanding af hexan og ethylacetat) til opnåelse af 25 28,00 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en lyse brun olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum {CDCI3, 60 MHz) δ ppm: 30 1,46 (9H, singlet); 1,50 - 2,35 (2H, multiplet); 2,81 - 3,88 (5H, multiplet); 3,70 (2H, singlet); 3,79 (3H, singlet); 35 6,83, 7,27 (4H, A2B2' J * 9'° Hz).

DK 175029 B1 114 5-(3) (3S)-3-(4-methoxvbenzv1thio)pyrrolidinhydrochlorid 106 ·1 af en 4 N ethyl acetatopløsning af hydrogenhydrid blev under isafkøling sat til en opløsning af 27,50 g (3R)-1-t-but-5 oxycarbonyl-3-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidin [fremstillet som beskrevet i trin (2) ovenfor], som var opløst i 100 ml ethyl-acetat, og blandingen blev omrørt ved 0 til 5*C i 30 minutter og derefter ved 25*C i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev blandingen fortyndet med 200 ml diisopropylether, 10 og krystallerne, som pråse i p i terede, blev opsamlet ved filtrering til opnåelse af 20,84 g af den i overskriften nmvnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 125-126*0.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) v>ax c·”*: 15 1510, 1246, 1174.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 60 MHz) δ ppm: 1,52 - 2,53 (2H, multiplet); 20 2,91 - 3,70 (5H, multiplet); 3,63 (2H, singlet); 3,67 (3H, singlet); 6,80, 7,16 (4H, A2B2' J B 9'° Hz)· 25 5-(4) (3S)-3-(4-methoxvbenzvlthio)-l-methvlpyrrol id in 750 ag (3S)-3-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidin [som var blevet fremstillet ved neutralisering af 900 mg {3S)-3-(4-methoxy-benzylthio)pyrrolidinhydrochlor id, som var fremstillet som be-30 skrevet i trin (3) ovenfor, med natriumbicarbonat] blev opløst i 15 ml tørt acetonitril, og 1,44 al af en 35% efter volumen opløsning af formaldehyd i vand blev sat til opløsningen.

Reakt i onsbi andi ngen blev derefter omrørt i 15 minutter, hvorefter den blev neutraliseret ved tilsatningen af eddikesyre, 35 hvorefter den igen blev om rørt i yderligere 2,5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hældt i 200 ml ethylacetat, og blandingen blev vasket med en 2 N vandig opløsning af kaliumhydroxid og en vandig opløsning af DK 175029 B1 115 natriumchl or i d. Det organiske lag blev tørret over kaliumcar-bonat, og opløsningsmidlet blev destilleret af under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem sili-cagel (elueret med en 3:1 efter volumen blanding af ethylace-5 tat og methanol) til opnåelse af 349 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som en farveløs olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDCl3, SO MHz) δ ppm: 10 1,40 - 3,49 {7H, multiplet); 2.33 (3H, singlet); 3,69 (2H, singlet); 3,78 (3H, singlet); 6,86, 7,25 (4H, A2B2* J * 9»° Hz)· 15 5-(5) f3S)-l.l-dimethvl-3-(4-methoxvbenzvlthio)pyrrolidinium-f1uorsulfonat 118 μΐ methy1fluorsulfonat blev under isafkøling sat til en 20 opløsning af 340 mg (3S)-3-(4-methoxybenzy1thio)-1-methy1pyr-rolidin [fremstillet som beskrevet i trin (4) ovenfor], som var opløst i 20 ml tørt methylenchlorid. Blandingen blev der* efter omrørt ved den samme temperatur i 30 minutter og derefter ved stuetemperatur i 3,5 timer. Ved afslutningen af dette 25 tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev gentagne gange vasket ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 500 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som et farveløst pulver.

30

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz) 6 ppm: 1,86 - 2,05 (IH, multiplet); 2.34 - 2,56 (IH, multiplet); 35 2,90 (3H, singlet); 3,01 (3H, singlet); 2,98 - 3,73 (5H, multiplet); 3,65 (3H, singlet); DK 175029 B1 116 3,67 (2H, singlet); 6.82, 7,17 (4H, A2B2* J * 8'62 Hz>·

FREMSTILLINGSEKSEMPEL 6 S

1,1 - diaet hyl -4- (4-nethoxvbenzvl thiolpiperidiniunfluorsulfonat 6-f1) 4-»ethansulfonvloxv-l-nethv1 piperidin 13,3 »1 tri ethyl an in og derefter 7,4 ni nethansulfonylchlorid blev under isafkøling sat til en opløsning af 10 g 4-hydroxy-1-methylpiperidin, son var opløst i 100 ni tørt tetrahydrofu-ran. Blandingen blev derefter onrert ved 0 til 5*C i 2 tiner og derefter ved stuetemperatur i 1,5 tiner, hvorefter den blev 15 heldt i en vandig opløsning af natriunchlorid og ekstraheret ned ethylacetat. Ekstrakten blev vasket ned en vandig opløsning af natriunchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsul-fat. Opløsningsmidlet blev derefter destilleret af under reduceret tryk til opnåelse af 12,74 g af den i overskriften nevn-20 te forbindelse son en olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) δ ppm: 1,74 - 2,90 (8H, multiplet); 25 2,28 (3H, singlet); 3,00 {3H, singlet); 4,73 (IH, nultiplet).

6 - f 2 ) 4-f4-nethoxvbenzvlthi ol-l-nethylpioeridin 30 10,9 ni 4-nethoxybenzylmercaptan blev opløst i 55 ni tørt dimethyl formamid, og 3,4 g natriumhydrid (som en 55% v*gt/v*gt suspension i mineralolie) blev sat til opløsningen under isafkøling. Blaadingen blev derefter omrørt ved stuetemperatur i 35 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev en opløs ning af 12,6 g 4-methansulfony1oxy-1-methy1pi per idin i 63 ml tørt dimethyl formamid sat til blandingen, som derefter fik lov til at henstå natten over ved stuetemperatur. Reakt ionsbi an- DK 175029 B1 117 dingen blev derefter hældt i en vandig opløsning af natrium-chlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet 5 ved destillation under reduceret tryk, og resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem silicagel (elueret med en 1:4 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol) til opnåelse af 9t01 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

10

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 1,40 - 3,05 {9H, multiplet); 2,23 (3H, singlet); 15 3,69 (2H, singlet); 3,78 (3H, singlet); 6,82, 7,23 (4H, A2B2« J = 9»° Ης)· 6-(3) l.l-dimethvl-4-f4-methoxvbenzylthio)piperidiniumfluor-20 sul fonat 2,9 ml methy1f1uorsu1 fonat blev under isafkøling sat til en opløsning af 8,95 g 4-(4-methoxybenzylthio)-l-methylpiperidin, som var opløst i 300 ml tørt methylenchlorid, og blandingen 25 blev omrørt ved den samme temperatur i 20 minutter og derefter ved stuetemperatur i 2,5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket gentagne gange ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til 30 opnåelse af 12,76 g af den i overskriften nævnte forbindelse som et farveløst pulver.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz) δ ppm: 35 1,75 - 1,93 (2H, multiplet); 2,02 - 2,15 (2H, multiplet); 2,70 - 2,84 (2H, multiplet); 3,05 (3H, singlet); DK 175029 B1 118 3,06 (3H, singlet); 3,24 - 3,97 (4H, multiplet); 3,74 (3H, singlet); 3,78 {2H, singlet); S 6,88, 7,26 (4H, A2B2' J * 8'79 Hz)· FREMSTILLINGSEKSEMPEL 7 (2S.4S)-2-fN,N-di methvlcarbamoyl)-l-ethvl-l-methvl-4-f4-weth-jq oxvbenzvlthiolovrrolidiniuwfluorsulfonat 7-fl) (2S.4S)-l-ethvl-4-(4-methoxvbenzvlthio)-2-methoxvcarbo-nvlpyrrolidi ni umfluorsulfonat 15 g (2S,4S)-l-ethyl-4-(4-methoxybenzylthio)-2-methoxycarbo- nylpyrrolidin [fremstillet som beskrevet i frems t i 11 ingseksem-pel 4-(9)] blev opløst i 12 ml tørt dimethylformamid, og 358 mg natriumbicarbonat og 0,41 ml ethyljodid blev sat til den opnåede opløsning under isafkøling.. Blandingen blev derefter 20 omrørt ved stuetemperatur i 6 timer og derefter ved 45 til 50*C i 3 timer. Den blev derefter hældt i en mættet vandig opløsning af natriumbicarbonat og derefter ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af nat ri urnehl or i d og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløs-25 ningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem silieagel (elueret med en 1:4 efter volumen blanding af ethylacetat og benzen) til opnåelse af 904 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

30

Infrarødt absorptionsspektrum (vmskefilm) vnax cm"*: 1740, 1615, 1590, 1515.

Kernemagnetisk resonansspektrum (C0C13, 60 MHz) δ ppm: 1,03 (3H, triplet, J - 7,0 Hz); 2,72 - 3,43 {8H, multiplet); 3,70 (5H, singlet); 35 DK 175029 B1 119 3,78 (3H, singlet); 6.84, 7,25 (4H, A2B2' J = 9'° Hz).

7 — ( 2 ) (2S.4S)-2-(N,N-din)ethylcarbamovl)-l-ethvl-4-(4-methoxv-5 benzylthiolpvrrolidin 883 mg (2S,4S)-1-ethy1-4-(4-methoxybenzy1thi o)-2-methoxycarbo-nylpyrro 1 idin blev opløst i 8,6 ml methanol, og 4,3 ml af en 1 N vandig opløsning af natriumhydroxid blev sat til den opnåede 10 opløsning. Bl and i ngen blev derefter omrørt ved stuetemperatur i 2 timer, hvorefter den blev neutraliseret ved tilsætning af 4,3 ml 1 N vandig saltsyre. Reaktionsblandingen blev derefter inddampet til tørhed under reduceret tryk til opnåelse af et råprodukt.

15

Det opnåede råprodukt blev suspenderet i 18 ml tørt acetoni-tril, og 694 mg N, N'-carbodi i midazol blev sat til suspensionen. Blandingen blev derefter omrørt ved 40*C i 1 time, hvorefter en opløsning af 1,89 ml dimethylamin i 10 ml tetrahydro-20 furan blev sat til blandingen. Reaktionsblandingen fik derefter lov til at henstå ved stuetemperatur natten over, hvorefter den blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk. Resten blev blandet med en vandig opløsning af natrium-chlorid og ekstraheret med ethylacetat, og ekstrakten blev 25 vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og derefter tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev underkastet søjlekromatografi under anvendelse af en Lobar-søjle (Merck, LiChroprep Si60, størrelse B). 795 mg 30 af den i overskriften nævnte forbindelse blev opnået som en olie ud fra fraktionerne, som var elueret med en 10:1 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol.

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vmax cm~l: 35 1640, 1610, 1585, 1515.

Kernemagnetisk resonansspektrum (C0C13, 60 MHz) δ ppm·.

DK 175029 B1 120 1,01 (3H, triplet, J « 7,0 Hz); 1,57 - 3,73 (8H, multiplet); 2.91 (3H, singlet); 3,16 (3H, singlet); 5 3,70 (2H, singlet); 3.78 (3H, singlet) ; 6,83, 7,27 (4H, A2B2' J * 9'° H2)· 7-(31 (2S,4S)-2-(N.N-di methyl carbamoyl)-l-ethvl-l-methvl-4- ^0 (4-nethoxvbenzvl thi o ) pyrrol idiniumf lu'orsul fonat 128 μΊ methylfluorsulfonat blev sat til en opløsning af 438 ng (2S,4S)-2-(N,N-dimethy1 carbamoyl)-1-ethy1-4-(4-aethoxybenzyl-thio)pyrrol idin, som var opløst i 10 ml methylenchlorid, og 15 blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket gentagne gange ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opn&else af den i overskriften nevnte for-2o bindelse som en olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (020, 270 MHz) 6 ppm: 1,12 (3H, triplet, J * 7,15 Hz); 25 1,96 - 2,08 (IH, multiplet).; 2,62 - 3,51 (6H, multiplet); 2.79 (3H, singlet); 2,93 (3H, singlet); 2,95 (3H, singlet); 30 3,65 (3H, singlet); 3,68 (2H, singlet); 4,55 - 4,60 (IH, multiplet).

35 (2S.4Sl-l,l-dimethvl-4-(4-methoxvbenzvlthio)-2-(4-morpholino- carbonvllpvrrolidiniumfluorsulfonat DK 175029 B1 121 FREnSTILLINGSEKSEMPEL 3 5 8— f1ί (2S,4S1-4-(4-methoxvbenzvlthi o)-2-methoxvcarbonvl-l-methvlpyrrolidin 3,43 ml 35% formalin blev sat til en opløsning af 2,25 g 10 (2S,4S)-4-(4-methoxybenzy1thio)-2-methoxycarbonylpyrrolidin, som var opløst i 42 ml acetonitril. Derefter blev 804 mg na-triumcyanoborhydrid fordelt i tre portioner og sat til blandingen i løbet af en periode på 5 minutter. Blandingen blev derefter omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter. Ved afslut-15 ningen af dette tidsrum blev blandingen afkølet, 1,3 ml eddikesyre blev tilsat, og reaktionsblandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 40 minutter. 40 ml af en 1 N vandig opløsning af natriumhydroxid og en vandig opløsning af natriumchlorid blev derefter sat til blandingen, hvorefter den blev ekstra-20 heret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev oprenset ved hjælp af en fremgangsmåde svarende til den i fremstillingseksempel 25 4-(10) beskrevne til opnåelse af 1,31 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie. Infrarødt spektrum, kernemagnetisk resonansspektrum og tyndtlagskromatografi for denne forbindelse var identiske med de for forbindelsen, der var fremstillet som beskrevet i fremsti 11ingseksempel 4-(10).

30 8-(21 (2S,4S)-4-(4-methoxvbenzvlthio)-l-methvl-2-(4-morpholi-nocarbonvi)pyrrol idin 5,32 ml af en 1 N vandig opløsning af natriumhydroxid blev sat 35 til en opløsning af 1,31 g (2S,4S)-4-(4-methoxybenzy1thi o)-2-methoxycarbony1-1-methylpyrrolidin, som var opløst i 11 ml methanol, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev den neutraliseret DK 175029 B1 122 ned 5,32 al l N vandig saltsyre, og reaktionsblandingen blev befriet for opløsningsmidlet ved inddampning under reduceret tryk, og resten blev tørret og koncentreret ved inddampning under reduceret tryk til opnåelse af 1,5 g ubehandlet (2S,4S)-5 2-carboxy-4-(4-methoxybenzyl thio)-1-methylpyrrol i di n.

500 mg af dette ubehandlede (2S,4S)-2-carboxy-4-(4-methoxy-benzylthio)-l-methy1pyrrolidin blev suspenderet i 10 ml aceto-nitril, og 278 mg N,N’-carbonyldiiaidazol blev sat til suspen-10 sionen, og blandingen blev omrørt ved 40*C i 1 time. Blandingen fik derefter lov til at afkøle til. stuetemperatur, hvorefter der blev tilsat 187 μΐ morpholin, og reaktionsblandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer og fik derefter lov til at henstå natten over. Opløsningsmidlet og overskud af 15 morpholin blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev blandet med en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev destilleret af under reduceret tryk. Resten blev underkastet 20 søjlekromatografi under anvendelse af en Lobar-søjle (Merck, LiChroprep Si60, størrelse B), og der blev opnået 418 eg af den i overskriften navnte forbindelse som en olie ud fra fraktionerne, som var elueret med en 3:1:1 efter volumen blanding af cyklohexan, ethylacetat og methanol.

25

Infrarødt absorptionsspektrum (vaskefilm) vmax cm“l; 1639, 1610, 1511.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 30 1,50 - 3,33 {6H, multiplet); 2,31 (3H, si ngiet); 3,64 (8H, bred singlet); 3,70 (2H, singlet); 35 3,78 (3H, singlet); 6,82, 7,21 (4H, A2B2' J * 9'° Hz)· 8-f 31 (2S.4S)-l.l-dimethyl-4-(4-methoxvbenzvlthi o)-2-(4-mor- pholinocarbonvlIpvrrolidiniumfluorsulfonat DK 175029 B1 123 106 μΐ methylf1uorsulfonat blev sat til en opløsning af 392 mg 5 (2S,4S)-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methyl-2-(4-morpho1inocarbo-nylJpyrrolidin, som var opløst i 8 ml methylenchlorid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Ved af-s 1 utni ngen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket gen-10 tagne gange ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 446 mg af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) 6 ppm: 15 1,80 - 2,03 (IH, multiplet); 2.67 - 3,90 (12H, multiplet); 2,98 (3H, singlet); 3,07 (3H, singlet); 20 3,65 (3H, singlet); 3.68 (2H, singlet); 4,61 (IH, dublet af dubletter, J = 8,06, 6,23 Hz); 6,82, 7,17 (4H, A2B2* J * 8'61 Hz>* 25 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 9 (2S,4S)-l,l-dimethyl-4-(4-methoxybenzvlth i o)-2-(l-pyrrolidino-carbonvllpyrrolidiniumfluorsulfonat 3Q 9-(1) (2S,4S)-4-(4-methoxvbenzvlthi o)-1-methyl-2-(1-pyrro 1 i - di nocarbonvl1 pyrrolidi n

Den i fremstillingseksempel 8 —{2) beskrevne fremgangsmåde blev gentaget, men under anvendelse af 500 mg ubehandlet (2S,4S)-35 2-carboxy-4-(4-methoxybenzylthio)-l-methyl pyrrolidin [frem stillet som beskrevet i fremstillingseksempel 3-(2)], 278 mg N,N'-carbonyldiimidazol og 178 μΐ pyrrolidin i stedet for morpholin, til opnåelse af 440 mg af den i overskriften nævnte forbindelse.

DK 175029 B1 124

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) v>max cm-1: 1640, 1611, 1511, 1444.

Kernemagnetisk resonansspektrua (CDCI3, 60 MHz) 6 ppm: 5 1,58 - 2,78 (6H, multiplet); 2,30 (3H, singlet); 2,90 - 3,80 (8H, multiplet); 3,70 (2H, singlet); 10 3,78 (3H, Singlet); 6,84, 7,24 (4H, A2B2' J 3 5,0 Hz).

9 - (2) (2S.4S)-l.l-di«ethvl-4-(4-methoxvbenzvlthi o)-2-(1-pyr rol idinoearbonvl)pvrrolidiniumfluorsulfonat 15

Den i fremstillingseksempel 8 —(3) beskrevne fremgangsmåde blev gentaget, men under anvendelse af 418 mg (2S,4S)-4-(4-methoxy-benzylthio)-l-methyl-2-(l-pyrrolidinocarbonyl)pyrrolidin, 118 μΐ methylf1uorsulfonat, til opnåelsé af 472 mg af den i over-20 skriften ncvnte forbindelse som en olie.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz) 6 ppm: 1.68 - 1,85 (4H, multiplet); 25 1,94 - 2,10 (IH, multiplet); 2.69 - 3,85 (7H, multiplet); 2,99 (3H, singlet); 3,03 (3H, singlet); 3,65 (3H, singlet); 30 3,67 (2H, singlet); 4,41 (IH, dublet af dubletter, J * 8,06, 6,60 Hz); 6,81, 7,17 (4H, A2B2' J * 8'62 Hz>· 35 DK 175029 B1 125 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 10

(2S.4S)-2-carbamov1-4-(4-methoxvbenzylthio)-l-ethyl-l-methyl-pyrrolidiniumfluorsulfonat S

10-m (2S. 4S)-2-carbamovl-l-ethvl-4- (4-methoxvbenzvlth io) - pvrrolidin 0,362 ml ethyljodid og 315 mg natriumbicarbonat blev sat til 10 en opløsning af 1000 mg (2S,4S)-2-carbamoyl-4-(4-methoxyben-zy1thi o) pyrrol i din, som var opløst i 10 ml tørt dimethylfor-mamid under isafkøling, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 5,5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hældt i en mættet vandig opløsning af 15 natriumbicarbonat og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesi umsulfat, og derefter blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev underkastet søjlekromatografi gennem silicagel 20 (Katayama Chemicals Co., Silica Gel 60K070) og 560 mg af den i overskriften nævnte forbindelse blev opnået som krystaller, som smeltede ved 124-125°C, ud fra de fraktioner, som var elueret med ethylacetat.

25 Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm"*: 1632, 1509.

Kernemagnetisk resonansspektrum (C0C13 + D2O, 270 MHz) 6 ppm: 30 1,08 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 1,86 - 1,96 (IH, multiplet); 2,38 - 2,76 (4H, multiplet); 2,99 - 3,18 (3H, multiplet); 3,70 (2H, singlet); 35 3,80 (3H, singlet); 6,84, 7.21 (4H, A2B2, J * 8,79 Hz).

10-(21 (2S.4S1 -2-carba«ov l-4-(4-methoxvbenzvlthiol-l-cthvl-l- methylpyrrolidiniumfluorsulfonat DK 175029 B1 126 0,43 al aethylfluorsulfonat blev under isafkøling sat til en 5 opløsning af 1,44 g (2S,4S)-2-carbaaoy1-4-(4-methoxybenzyl-thio)-1-ethylpyrrolidin, som var opløst i 30 ml tørt methylen-chlorid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev 10 vasket gentagne gange ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 2,0 g af den i overskriften ncvnte forbindelse som en olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (vsskefilm) vBax cm-1: 15 1698, 1610, 1512.

Kernemagnetisk resonansspektrum (O2O, 270 MHz) δ ppm: 1,12 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 20 2,06 - 2,18 (IH, multiplet); 2.63 - 3,83 (6H, multiplet); 2,92 (3H, singlet); 3.64 (3H, singlet); 3.65 (2H, singlet); 25 4,02 - 4,09 (IH, multiplet); 6,82, 7,16 (4H, AZB2' J * 8'42 Hz)· FREMSTILLINGSEKSEMPEL 11 30 (2S.4S)-2-ethvlcarbamovl-l-ethvl-l-methvl-4-(4-methoxvbenzvl-thiolpyrrolidiniumfluorsulfonat (1) (2S.4S)-l-t-butoxvcarbonvl-2-ethylcarbamovl-4-hvdroxv-pyrrolidin 15,25 ml triethylamin og derefter en opløsning af 10,48 ml ethylchlorformiat i 50 ml tørt tetrahydrofuran blev ved -25*C sat til en opløsning af 23,13 g (2S,4S)-1-t-butoxycarbony1-4- 35 DK 175029 B1 127 hydroxy-2-pyrro1idincarboxylsyre, som var opløst i 350 ml tørt tetrahydrofuran, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev en 70% efter vol umen vandig ethylaminopløsning tilsat ved 5 -22*C, reakt ionstemperaturen fik lov til at stige gradvis, og reaktionen var fardig, når temperaturen nåede 10“C. Reaktionsblandingen blev derefter blandet med en lille mængde af en vandig opløsning af natriumchlorid, hvorefter den blev ekstraheret tre gange med ethylacetat. De forenede ekstrakter blev 10 vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk til opnåelse af 23,60 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en farveløs olie.

15

Kernemagnetisk resonansspektrum {CDCI3, 60 KHz) 6 ppm: 1,10 (3H, triplet, J = 7,5 Hz); 1,44 (9H, singlet); 20 1,80 - 4,65 (10H, multiplet); 6,64 (IH, bred singlet).

11-(2) (2S,4S)-l-t-butoxvcarbonvl-2-ethylcarbamoyl-4-methan- sulfonvloxvpvrrolidin 25 13,81 ml triethylamin og derefter 7,65 ml methansulfonylchlo-rid blev under isafkøling sat til en opløsning af 23,20 g (2S,4S)-1-t-butoxycarbony1-2-ethyl carbamoyl-4-hydroxypyrrol i -di η, som var opløst i 250 ml tørt tetrahydrofuran, og derefter 30 blev blandingen omrørt ved 0 til 5°C i 30 minutter. Reaktionsblandingen blev derefter hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter 35 fjernet ved destillation under reduceret tryk til opnåelse af 26,54 g af den i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved l38-140eC.

DK 175029 B1 128

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm"*: 1675, 1548, 1348.

Kernemagnetisk resonansspektrum (C0C13, 60 MHz) δ ppm: 5 1,12 (3H, triplet, J * 7,5 Hz); 1,48 (9H, singlet); 2,05 - 4,59 {7H, multiplet); 3,03 (3H, singlet); 10 5,07 - 5,43 (IH, multiplet); 6,58 (IH, bred singlet).

11-(3) (2S.4S)-l-t-butoxvcarbonvl-2-ethvlcarbamoyl-4-(4- methoxvbenzvlthi o)pyrrolidin 15 3,57 g natriumhydrid (som en 55* vmgt/v*gt suspension i mineralolie) blev under isafkøling sat til en opløsning af 11,31 m1 4-methoxybenzylmercaptan, som var opløst i 150 ral tørt dimethyl formamid , og blandingen blev omrørt ved 0 til 5*C i 30 20 minutter. En opløsning af 26,00 g (2S,4S)-l-t-butoxycarbony1- 2-ethyIcarbamoyl-4-methansu1fonyloxypyrroli din i 100 ml tørt dimethyl formamid blev derefter sat til den resulterende blanding, og det hele blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer.

Ved afslutni ngen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen 25 hcldt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiurasu1 -fat. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev 30 oprenset ved søjlekromatografi gennem silicagel under anvendelse af en 1:1 efter volumen blanding af hexan og ethylacetat som et elueringsmiddel til opnåelse af 17,00 g af den i overskriften navnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 92-94*c.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm"*: 1700, 1655, 1406.

35

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) 6 ppm: DK 175029 B1 129 1.10 (3H, triplet, J » 7,5 Hz); 1,43 (9H, singlet); 5 1,85 - 3,96 (7H, multiplet); 3,69 ( 2H, singlet); 3,78 (3H, singlet); 4,18 (IH, triplet, J = 7,5 Hz); 6,35 (IH, bred singlet); 10 6,86, 7,24 (4H, A2B2. J * 9,0 Hz).

11-(4) (2S.4S1-2-ethvlcarbamovl-4-(4-methoxvbenzy1thio)pyrro- 1 idin 15 41,19 ml af en 4 N ethyl acetatopløsning af hydrogenchlorid blev sat til en opløsning af 13,00 g (2S,4S)-l-t-butoxycarbonyl -2-ethyl carbamoyl-4-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidin, som var opløst i 100 ml ethylacetat, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 3 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum 20 blev reaktionsblandingen hældt i en mættet vandig opløsning af natriumbicarbonat og ekstraheret med ethylacetat. Det vandige lag blev mættet med ammoniumchlorid og ekstraheret med tetra-hydrofuran. De forenede ekstrakter blev vasket med en vandig opløsning af natri urnehlorid og tørret over vandfrit magnesium-25 sulfat, og derefter blev op løsn i ngsmidlet fjernet ved desti 1 -lation under reduceret tryk. Resten blev underkastet søjlekromatografi gennem silieagel (elueret med en 87:13 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol) til opnåelse af 8,00 g af den i overskriften nævnte forbindelse som lysbrune krystaller, 30 som smeltede ved 67-68°C.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm”1: 1649, 1512, 1240.

35 Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 1.10 {3H, triplet. J = 7,5 Hz) ; 1,50 - 2,20 (IH, multiplet); DK 175029 B1 130 2,16 (IH, singlet); 2,23 - 3,96 (7H, Multiplet); 3.69 (2H, singlet); 3,78 (3H, singlet); 5 6.86, 7,25 (4H, A2B2. J * 9,0 Hz); 7,53 (IH, bred singlet).

11-(5) (2S,4S)-2-ethvlcarbamovl-l-ethvl-4-(4-methoxybenzyl- thio)pyrrol idin 10 301 μΐ ethyljodid og 314 mg natriumbicarbonat blev under isafkøling sat til en opløsning af 1,00 g (2S, 4S)-2-ethylcarba-moy1-4-(4-methoxybenzy1thi o)pyrrol i d in, som var opløst i 8 ml tørt dimethylformamid, og blandingen blev omrørt ved stuetem-15 peratur i 5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hcldt i en vandig opløsning af natrium-chlorid og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natri umch1 ori d og tørret over vand-frit magnesiumsulfat, hvorefter opløsningsmidlet blev fjernet 20 ved destillation under reduceret tryk. Resten blev underkastet søjlekromatografi gennem silicagel (elueret med ethylacetat) til opnåelse af 982 mg af den i overskriften navnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 60-61*C.

25 Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) ymax cm"1: 1651, 1512, 1252.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 30 1,06 (3H, triplet, J = 7,5 Hz); 1,14 (3H, triplet, J 7,5 Hz); 1,56 - 3,90 (10H, multiplet); 3.69 (2H, singlet); 3,80 (3H, singlet); 35 6.82, 7,20 (4H, A2B2, J = 9,0 Hz); 7,30 (IH, bred singlet).

DK 175029 B1 131 11- (6) (2S.4S) -2-et hyl carbamoyl -1-ethyl - l-methyl-A-M-meth- oxybenzvlthiolpvrrolidiniumfluorsulfonat 233 μΐ methylf1uorsulfonat blev under isafkøling sat til en 5 opløsning af 910 mg (2S,4S)-2-ethylcarbamoyl-l-ethyl-4-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidin, som var opløst i 35 ml tørt methylenchlorid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 3,5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og 10 resten blev vasket ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 1,20 g af den i overskriften navnte forbindelse som en lysbrun olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) νη3Χ cm-1: 15 1680, 1513, 1250.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D2O, 270 MHz) δ ppm: 0,93 (3H, triplet, J * 7,33 Hz); 20 1,12 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 1,95 - 2,26 (IH, multiplet); 2,56 - 4,50 (9H, multiplet); 2,88 (3H, singlet); 3,65 (3H, singlet); 25 3,69 (2H, singlet); 6,83, 7,18 (4H, A2B2, J = 8,80 Hz).

FREMSTILLINGSEKSEMPEL 12 30 (2S.4S)-l-ethyl-l-methvl-2-methvlcarbamovl-4-(4-methoxvbenzvl-thiolpvrrolidiniumfluorsulfonat 12- (1) (2S.4S)-l-ethvl-A-(4-methoxvbenzvlthio)-2-methvlcarba-movlpyrrolidin 0,71 ml ethyljodid og 742 mg natriumbicarbonat blev sat til en opløsning af 2,25 g (2S,4S)-4-(4-methoxybenzy1thi o)-2-methy1 -carbamoy1pyrro 1 idin , som var opløst i 20 ml tørt dimethylfor- 35 DK 175029 B1 132 mamid, og blandingen blev omrørt ved 0 til 5*C i 1 time og derefter ved stuetemperatur i 5 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen heldt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med ethylacetat. Eks-S trakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat, hvorefter opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk.

Resten blev oprenset ved søjlekromatografi (elueret med ethylacetat) til opnåelse af 1,87 g af den i overskriften nevnte 10 forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 68-70*C.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vBax cm"*: 1657, 1511, 1252.

15

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) δ ppm: 1,02 (3H, triplet, J * 7,0 Hz); 1,58 - 3,91 (8H, multiplet); 20 2,80 (3H, dublet, J » 5,0 Hz); 3,67 (2H, singlet); 3,78 (3H, singlet); 6.85, 7,21 (4H, A2B2, 3 * 9,0 Hz); 7,10 - 7,60 (IH, bred singlet).

25 12-(2) (2S,4S)-l-ethvl-l-inethv1-2-methvlcarbamovl-4-(A-meth-oxvbenzvlthiolDvrrolidiniumfluorsulfonat 187 pi methyl fluorsul fonat blev under isafkøling sat til en 30 opløsning af 700 mg (2S,4S)-1-ethy1-4-(4-methoxybenzy1thi o)- 2-methyl carbamoyl pyrrol i din, som var opløst i 30 ml tørt methylenchlorid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 4 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og res-35 ten blev vasket gentagne gange ved dekantering med diethylet-her og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 950 mg af den i overskriften nevnte forbindelse som en farveløs olie.

DK 175029 B1 133

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) νπ3χ cm”1: 1683, 1565, 1280.

Kernemagnetisk resonansspektrum (020* 270 MHz) 8 ppm: 5 1,12 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 2,02 - 2,20 (IH, multiplet); 2,58 - 4,50 (7H, multiplet); 2,60 (3H, singlet); 10 2,87 (3H, singlet); 3,65 (3H, singlet); 3,68 (2H, singlet); 6,82, 7,17 (4H, A2B2, J = 8,80 HZ).

15 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 13 (2S,4S)-1.1-dimethvl-2-ethvlcarbamoyl-4-(4-methoxvbenzvlthio) -pyrrolidiniumfluorsulfonat 20 13-(1) f 2S,4S)-2-ethvlcarbamoyl-4-(4-methoxybenzylthi o)-1- methvlpyrrolidin 3,43 ml 35% formalin og 804 mg natriumcyanoborhydrid blev sat til en opløsning af 2,36 g (2S,4S)-2-ethylcarbamoyl-4-(4-meth-25 oxybenzylthio)pyrrol idin, som var opløst i 42 ml acetonitril, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 40 minutter.

Ved afslutningen af dette tidsrum blev en 1 N vandig opløsning af natriumhydroxid tilsat, og reaktionsblandingen blev hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og ekstraheret med 30 ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søjlekromatografi gennem s i 1 i -cage! (elueret med ethylacetat) til opnåelse af 1,93 g af den 35 i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krystaller.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) tfmax cm"1: 1655, 1513, 1252.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 60 MHz) 6 ppm: DK 175029 B1 134 1,12 (3H, triplet, J * 7,5 Hz); 1,50 - 2,20 (IH, multiplet); 5 2,31 (3H, singlet); 2,36 - 3,88 (7H, multiplet); 3.67 (2H, singlet); 3,78 (3H, singlet); 6,83, 7,21 (4H, A2B2, J a 9.0 Hz); 10 7,20 (IH, bred singlet).

13-(2) (2S,4S)-1.1-di methyl-2-ethvlcarbamoyl-4-(4-methoxy- benzylthiolpyrrolidiniumfluorsulfonat 15 264 μΐ methylfluorsulfonat blev under isafkøling sat til en opløsning af 987 mg (2S,4S)-2-ethylcarbamoyl-4-(4-methoxyben-zylthio)-l-methylpyrrolidin, som var opløst i 40 ml tørt methylenchlorid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsn i ngs-20 midlet fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev vasket gentagne gange ved dekantering med diethyl- ether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 1,332 g af den i overskriften nmvnte forbindelse som en farveløs olie.

25 Infrarødt absorptionsspektrum (CHC13) vBax cm'1: 1680, 1510, 1240.

Kernemagnetisk resonansspektrum (020, 270 MHz) 5 ppm: 30 0,94 (3H, triplet, J = 7,33 Hz); 1.95 - 2,20 (IH, multiplet); 2,60 - 2,98 (IH, multiplet); 2.96 (3H, Singlet); 3,00 (3H, singlet); 35 3,02 - 3,70 (5H, multiplet); 3,64 (3H, singlet); 3.67 (2H, singlet); 3.97 (IH, triplet, J = 7,88 Hz); 6,81, 7,01 (4H, A2B2, J * 8,80 Hz).

(2S)-l,l-dimethvl-4-(4-methoxvbenzvlthiomethvl)pyrrol i d i n i um- f1uorsu1 fonat 5 DK 175029 B1 135 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 14 14-Hl (2S)-l-t-butoxvcarbonvl-2-(4-methoxvbenzvlthiomethvl)-pyrrolidin

Den i fremstillingseksempel 5-(2) beskrevne fremgangsmåde blev 10 gentaget, men under anvendelse af 12,16 g (2S)-1-t-butoxycar-bony1-2-methansulfony1oxymethylpyrrol i din [fremstillet ved methan-sulfony1 ering af (2S)-l-t-butoxycarbonyl-2-hydroxymeth-ylpyrrolidin], 7,3 ml 4-methoxybenzylmercaptan og 2,3 g natri-umhydrid (som en 55% vægt/vægt suspension i mineralolie) i 100 15 ml tørt di methyl formamid, til opnåelse af 13,93 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (vsskefilm) »max cro”*: 1690, 1615, 1590, 1518.

20

Kernemagnetisk resonansspektrum (C0C13, 60 MHz) 6 ppm: 1,20 - 4,15 (9H, multiplet); 1,45 (9H, singlet); 25 3,70 (2H, singlet); 3,78 {3H, singlet); 6,82, 7,25 (4H, A2B2, J = 9,0 Hz).

/* 14-(2) (2S)-2-(4-methoxvbenzy1thiomethvlIpyrrolidin 30

Den i fremstillingseksempel 5-(3) beskrevne fremgangsmåde blev gentaget, men under anvendelse af 5 g (2S)-i-t-butoxycarbonyl- 2-(4-methoxybenzylthiomethyl)pyrrolidin til opnåelse af 2,51 g af den i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krys-35 taller, som smeltede ved 124-l26,5eC.

Infrarødt absorptionsspektrum (Nujol - handelsnavn) vmax cm"l: 1615, 1585, 1520.

Kernemagneti sk resonansspektrum (CDCI3, 60 MHz) 6 ppm: DK 175029 B1 136 1,45 - 2,20 (4H, multiplet); 2.25 - 3,96 (6H, multiplet); 5 3,76 (5H, singlet); 6,85 S 7,32 (4H, A2B2, J - 9,0 Hz).

14-(3) (2S)-2-t 4-methoxvbenzvlthiomethvl)-l-methvlpyrrol id in 10 Oen i fremstillingseksempel 5-(4) beskrevne fremgangsmåde blev gentaget, men under anvendelse af 2 g (2S)-2-(4-methoxybenzyl-thiomethyl)pyrrolidin, 35% formalin og 848 mg natriumcyanobor-hydrid i ncrvmrelse af 44 ml acetonitril, til opnåelse af 883 mg af den i overskriften nsvnte forbindelse som en olie.

15

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vnax cm-*: 1610, 1585, 1510.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) δ ppm: 20 · 1,40 - 3,22 {9H, multiplet); 2.26 (3H, singlet); 3,68 (2H, singlet); 3,78 (3H, singlet); 25 6,83, 7,25 (4H, A282, J * 9,0 Hz).

14-(4) (2S)-l.l-dimethvl-2-(4-methoxvbenzvlthiomethyl)pyrro-lidiniumfluorsulfonat 30 Den i fremstillingseksempel 5 —(5) beskrevne fremgangsmåde blev gentaget, men under anvendelse af 740 mg (2S)-2-(4-methoxybenzyl thiomethy1)-l-methylpyrrolidin og 243 μΐ methylfluorsul-fonat i nærværelse af 22 ml methylenchlorid, til opnåelse af 1,0 g af den i overskriften nævnte forbindelse som krystaller, 35 som smeltede ved 150-153*C.

Infrarødt absorptionsspektrum (Nujol) νη8Χ cm“l; 1610, 1585, 1518.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz) δ ppm: DK 175029 B1 137 1,60 - 2,02 (3H, multiplet); 2,26 - 3,51 (6H, multiplet); 5 2,64 {3H, singlet); 2.85 (3H, singlet); 3.64 (5H, singlet); 5.82, 7,19 (4H, A2B2, J * 8,79 Hz).

10 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 15 (2R)-l,l-dimethvl-4-f4-methoxvbenzvlthiomethv1)pvrrolidiniuin-f1uorsu1 fonat 15 (1) Den i fremstillingseksempel 14-(1), (2), (3) og (4) be skrevne fremgangsmåde blev gentaget, men under anvendelse af (2R)-l-t-butoxycarbonyl-2-hydroxymethylpyrrolidin som udgangsmaterialet, til opnåelse af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

20

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vmax cm”*: 1610, 1585, 1512.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz) δ ppm: 25 1.64 - 2,00 (3H, multiplet); 2,25 - 3,48 (6H, multiplet); 2.64 (3H, singlet); 2.85 (3H, singlet); 30 3,64 (5H, singlet); 6.82, 7,18 (4H, A2B2, J * 8,79 Hz).

35 DK 175029 B1 138 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 16

(2S.4S)-2-carbamovl-l-(2-hvdroxvethvl)-4-(4-methoxvbenzvl-thio)-l-methvlDvrrolidiniumfluorsulfonat S

16-(1) (2S,4S)-2-carbamovl-1-(2-hvdroxvethvl)-4-(4-methoxv- benzvlthiolpvrrolidin 0,175 m! 2-jodethanol og 0,16 g natriumbicarbonat blev under 10 isafkøling sat til en opløsning af 0,5 g (2S,4S)-2-carbamoyl-4-(4-methoxybenzy1thio) pyrrol idin [fremstillet som beskrevet i fremstillingseksempel 1-(5)], som var opløst i 5 ml tørt di-methylformamid, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 1 time, ved stuetemperatur i 2,5 timer og ved 40*C i 15 19 timer. Reaktionsblandingen blev derefter hsldt i en måttet vandig opløsning af natriumbicarbonat og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlorid og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under redu-20 ceret tryk, og resten blev underkastet søjlekromatografi gennem silicagel (Wako Pure Chemicals, Ltd.; Wako Gel C-100).

0,465 g af den i overskriften nævnte forbindelse blev opnået som krystaller fra de fraktioner, som var elueret med en 95:5 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol.

25

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vRax cm"l; 1625. 1510, 1243.

Kernemagnetisk resonansspektrum (C0C13, 270 MHz) δ ppm: 30 1,69 (IH, bred singlet); 1,92 - 1,99 (IH. multiplet); 2,55 - 2,72 (3H, multiplet); 2,82 - 2,92 (IH, multiplet); 35 3,12 - 3,18 (3H, multiplet); 3,67 (2H, triplet, J * 4,03 Hz); 3,71 {2H, singlet}; 3,80 (3H, singlet); DK 175029 B1 139 5,42 (IH, bred singlet); 3,78 (3 H, singlet); 6,85, 7,21 (4H, A2B2, J = 8,8 Hz); 7,35 (ih, bred singlet).

5 16- (2) (2S . 4S)-2-carbamovl-1-(2-hvdroxvethvl)-4-(4-methoxy- benzvlthio)-i-methvlpvrrolidiniumfluorsulfonat 0,108 ml methylfluorsulfonat blev dråbevis ved stuetemperatur 10 sat til en opløsning af 0,38 g (2S,4S)-2-carbamoy1 -1-(2-hy-droxyethyl)-4-(4-methoxybenzylthio)pyrrolidin, som var opløst i 7,5 ml tørt methylenchlorid, og blandingen blev omrørt ved den samme temperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under 15 reduceret tryk, og resten blev vasket ved dekantering med diethylether og tørret under reduceret tryk til opnåelse af 0,396 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

FREMSTILLINGSEKSEMPEL 17 20 3-(4-methoxvbenzvlthiol-l-methvlauinuclidiniumfluorsulfonat 17- (1) 3-(4-methoxvbenzvlth io)gu i nuelidin 25 Den i fremstillingseksempel 6-(2) beskrevne fremgangsmåde blev gentaget, men under anvendelse af 3,7 g 3-methansulfonyloxy-quinuclidin (fremstillet ved methansulfonylering af 3-quinu-clidinol), 3,0 ml 4-methoxybenzylmercaptan og 0,942 g natrium-hydrid (som en 55¾ vægt/vægt suspension i mineralolie) til op-30 nåelse af 1,74 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vmax cm"l; 1520, 1590, 1510, 1247.

35

Kernemagnetisk resonansspektrum {CDC13, 60 MHz) 6 ppm; 1,02 - 2,31 (5H, multiplet) ; 2,33 - 3,41 (7J, multiplet); DK 175029 B1 140 3,67 (2H, singlet); 3,82 (3H, singlet); 6,86, 7,26 (4H, A2B2, J = 9,0 Hz).

S 17-(21 3- (4-methoxvbenzvl thi o)-l-methvlquinuclidiniumfluor- sulfonat

Den i fremstillingseksempel 6—(3) beskrevne frengangsnåde blev gentaget, nen under anvendelse af 756 ng 3-(4-methoxybenzy1-10 thio)quinuc1idin og 271 μΐ nethy1f1uorsu1 fonat i nærværelse af 5 ni nethylenchlorid til opnåelse af 1,078 g af den i overskriften nævnte forbindelse son en olie.

Infrarødt absorptionsspektrun (væskefilm) vmax cn~l; 15 1609, 1590, 1512, 1490, 1467.

Kernenagnetisk resonansspektrun (D2O, 270 MHz) 6 ppn: 1.63 - 2,16 (5H, multiplet); 20 2,70 (3H, singlet); 2,76 - 3,77 (7H, multiplet); 3.63 {5H, singlet); 6,80, 7,15 (4H, A2B2, J * 8,61 Hz).

25 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 18 (6S.8S)-l,4-dimethvl-8-(4-methoxvbenzvlthio)-5-oxo-4-aza-l- azoniabicvklor4.3.01nonanfluorsulfonat 30 18-(1) (2S ,4S1-1-(2-hvdroxvethvl)-4-(4-methoxvbenzylthio)-2- methvlcarbamoyl pyrrolidin 934 μΐ 2-jodethanol og 1,01 g natriumbicarbonat blev under isafkøling sat til en opløsning af 2,80 g (2S,4S)-4-(4-methoxy-35 benzylthio)-2-nethy1 carbamoyl pyrro 1 idin, som var opløst i 18 ml tørt dimethyl formamid, og blandingen blev omrørt ved 40*C i 24 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen hældt i en vandig opløsning af natriunch1 orid og DK 175029 B1 141 ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandi g opløsning af natri umchlor id og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev derefter fjernet ved destillation under reduceret tryk, og resten blev oprenset ved S søjlekromatografi gennem silicagel (elueret med en 15:1 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol) til opnåelse af 2,22 g af den i overskriften navnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 88-89,5eC.

10 Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) »max cm-*: 1637, 1510, 1240.

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDCI3, 270 MHz) δ ppm: 15 1,66 - 2,05 (2H, multiplet); 2,50 - 2,91 (4H, multiplet); 2,82 {3H, dublet, J » 4,77 Hz); 3,07 - 3,21 (3H, multiplet); 3,56 - 3,75 (2H, multiplet); 20 3,69 (2H, singlet); 3,80 (3H, singlet); 6,84. 7,20 (4H, A2B2, J * 8,79 Hz); 7,42 (IH, bred singlet).

25 18-(2) (2S.4S)-l-(2-methansulfonvloxvethvl)-4-{4-methoxyben- zvlthio)-2-methvlcarbamoyl pyrrol id i η 1,06 ml triethylamin og derefter 584 μΐ methansulfonylchlorid blev under isafkøling sat til en opløsning af 2,13 g (2S,4S)-30 1-(2-hydroxyethyl )-4-(4-methoxybenzy1 thi o)-2-methylcarbamoy1 - pyrrolidin, som var opløst i 45 ml tørt tetrahydrof uran, og blandingen blev omrørt ved 0 til 5*C i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev krystallerne, som pracipite-rede, opsamlet ved filtrering og vasket med tetrahydrofuran.

35 Filtratet og vaskevandet blev forenet og tørret over vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under reduceret tryk til opnåelse af 2,50 g af den i overskriften navnte forbindelse som en olie.

DK 175029 B1 142

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vnax cm"1: 1664, 1510, 1350.

Kerneaagnetisk resonansspektrum (CDC13, 60 MHz) 6 ppm: 5 1.55 - 4,10 (6H, multiplet); 2,81 (3H, dublet, J - 5,0 Hz); 3,05 (3H, singlet); 3,70 (2H, singlet); 10 3,80 (3H, singlet); 4,18 - 4,49 (2H, multiplet); 6,87, 7,26 (4H, A2B2, J = 9,0 Hz); 7.55 (IH, bred singlet).

15 18-(3) (6S6S)-8-(4-methoxvbenzvlthio)-4-methvl-5-oxo-1.4- diazabicvklor4.3.01nonan 347 mg natriumhydrid (som en 55% vægt/vægt suspension i mineralolie) blev under isafkøling sat til en opløsning af 2,64 g 20 (2S,45)-1-(2-methansulfonyloxyethyl)-4-(4-methoxybenzylth i o)- 2-methyIcarbamoylpyrrol idin. som var opløst i 30 ml tørt dimethyl formaaid, og blandingen blev omrørt ved 0 til 5*C i 30 minutter og derefter ved 30*C i 2 timer. Reaktionsblandingen blev derefter hældt i en vandig opløsning af natriumchlorid og 25 ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med en vandig opløsning af natriumchlor id, tørret over vandfrit mag-nesi umsulfat og befriet for opløsningsmidlet ved destillation under reduceret tryk. Resten blev oprenset ved søj1ekromagrafi gennem silicagel (elueret med en 5:1 efter volumen blanding af 30 acetonitril og methanol) til opnåelse af 1,75 g af den i overskriften nævnte forbindelse som en olie.

Infrarødt absorptionsspektrum (CHC13) vmax cm"1: 1637, 1508, 1240.

35

Kernemagnetisk resonansspektrum (CDC13, 270 MHz) 6 ppm: 1,88 - 2,01 (IH, multiplet); 2,59 (IH, dublet af tripletter, J = 13,18, 8,06 Hz); DK 175029 B1 143 2,75 - 2,98 (3H, multiplet); 2,94 (3H, singlet); 3,00 - 3,24 (3H, multiplet); 3,30 (IH, triplet, J * 8,06 Hz); 5 3,48 - 3,62 (IH, multiplet); 3,70 (2H, singlet); 3.80 (3H, singlet); 6,84, 7,33 (4H, A2B2, J = 8,80 Hz).

10 18-(4) (6S.8S1-1.4-dimethvl-8-(4-inethoxvbenzvlthio)-5-oxo-4- aza-l-azoniabicvklor4.3.01nonanfluorsulfonat 461 μΐ methylf1uorsulfonat blev under isafkøling sat til en opløsning af 1,71 g (6S,8S)-8-(4-methoxybenzylthio)-4-methyl-15 5-oxo-l,4-diazabicykl o[4.3.0]nonan, som var opløst i 60 ml methylenchlorid, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev blandingen fortyndet med diethylether, og de opnåede krystaller blev opsamlet ved filtrering og tørret under reduceret tryk til 20 opnåelse af 2,09 g af den i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krystaller, som smeltede ved 208-210eC.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) v^ax cm-*: 1651, 1512, 1295.

25

Kernemagnetisk resonansspektrum (hexadeutereret dimethylsulf-oxid, 270 MHz) 6 ppm: 2,16 - 2,33 (IH, multiplet); 30 2,79 - 2,95 (IH, multiplet); 2,89 (3H, singlet); 3,23 (3H, singlet); 3,38 (IH, bred singlet); 3,56 - 4,02 (6H, multiplet); 35 3,74 (3H, Singlet); 3.80 (2H, singlet); 4,37 (IH, triplet, J = 8,30 Hz); 6,90, 7,26 (4H, A2B2, J = 8,79 Hz).

DK 175029 B1 144 FREMSTILLINGSEKSEMPEL 19 3-nercapto-2-ovrrolidinontrifluorroethansu1 fonat 5 20 ni tri fluoreddikesyre og 0,41 ni trif1uormethansu1 fonsyre blev under isafkøling sat til en opløsning af 949 mg 3- {4 — methoxybenzylthiojpyrrolidin-2-on i 4 ni anisol, og derefter blev blandingen omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen koncen-10 treret ved inddampning under reduceret tryk til efterladelse af en rest, son blev oprenset ved søjlekromagrafi gennen sili-cagel, idet der blev elueret ned en 10:1 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol til opnåelse af 728 mg af den i overskriften nævnte forbindelse son en olie.

15

Kernenagnetisk resonansspektrum (60 MHz, CDC13) δ ppm: 1,75 - 3,05 (3H, multiplet); 3,30 - 4,04 (3H, multiplet); 20 8,12 (IH, bred singlet); 9,32 (IH, bred singlet).

FREMSTILLINGSEKSEMPEL 20 25 4-mercapto-2-pyrrolidinon 20-(1) 15,6 g triphenylphosphin blev sat til en suspension af 3 g 4-hydroxy-2-pyrrolidinon i 200 ml tetrahydrofuran, og derefter blev blandingen omrørt ved stuetemperatur i 5 minutter, 30 hvorefter den blev afkølet til -20*C. En opløsning af 9,3 ml diethylazodicarboxylat i 9 ml tetrahydrofuran blev dråbevis under afkøling ved -12*C til 20*C sat til den tidligere opløsning. Blandingen blev derefter omrørt ved 0 til 5eC i 5 minutter, hvorefter den igen blev afkølet til -20*C. 4,2 ml thioed-35 dikesyre blev derefter dråbevis sat til blandingen under afkøling ved -18*C til -20*C. Blandingen blev derefter opvarmet til 0-5eC og omrørt ved denne temperatur i 2 timer. Ved afslutningen af dette tidsrum blev reaktionsblandingen koneen- DK 175029 B1 145 treret ved inddampning under reduceret tryk. Resten blev oprenset, først ved søjlekromatografi gennem silicagel, idet der blev elueret med en 10:1 efter volumen blanding af ethylacetat og methanol og derefter ved søjlekromatografi gennem silica-5 gel, idet der blev elueret med en 2:1 efter volumen blanding af acetonitril og benzen til opnåelse af 2,45 g 4-acetylthio- 2-pyrrolidinon som farveløse krystaller.

Kernemagnetisk resonansspektrum (COCI3, 90 MHz) 6 ppm: 10 2,00 - 4,44 (5H; multiplet); 2,31 (3H, singlet); 7,13 (IH, bred singlet).

15 20-(2) 1,82 g af det i trin (1) opnåede produkt blev opløst i 30 ml methanol. 2,3 ml af en 28% vægt/volurnen methanolisk opløsning af natriummethoxid blev dråbevis under isafkøling sat til den tidligere nævnte opløsning, og derefter blev blandingen omrørt i 30 minutter. 12 ml 1 N saltsyre blev derefter un-20 der isafkøling sat til reaktionsblandingen, som derefter blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk til efterla-delse af en pulverformig rest. Resten blev ekstraheret med 50 ml ethylacetat, og ekstrakten blev tørret over vandfrit natriumsulfat. Ekstrakten blev koncentreret ved inddampning un-25 der reduceret tryk til opnåelse af 1,35 g af den i overskriften nævnte forbindelse som farveløse krystaller.

Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) vmax cm"*: 1687, 1681, 1250.

30

Kernemagnetisk resonansspektrum (C0C13, 270 MHz) δ ppm: 1,95 (3H, dublet, J = 7,0 Hz); 2.30 (IH, dublet af dubletter, J = 17,2 & 6,6 Hz); 35 2,80 (IH, dublet af dubletter, J = 17,2 & 7,1 Hz); 3.31 (IH, dublet af dubletter af dubletter, J = 9,9, 5,2 & 0,8 HZ); 3,59 - 3,73 (IH, multiplet) ; DK 175029 B1 146

3,80 (IH, dublet af dubletter af dubletter, J · 9,9, 7,3 S

0,7 Hz); 6,13 (IH, bred singlet).

5 FREMSTILLINOSEKSEMPLERNE 21 TIL 25

Ved at følge fremgangsmåder, som svarer til de ovenfor i fremstillingseksemplerne 1 til 4 beskrevne, blev de følgende forbindelser også fremstillet: 10

Fremsti11inaseksempel 21 (2S,4S)-l.l-dimethvl-4-(4-methoxvbenzv 1 thio)-2-methoxycarbo-nvlpyrrolidiniumfluorsulfonat 15

Infrarødt absorptionsspektrum (vaskefilm) vnax cm-*: 1747, 1512.

Kernemagnetisk resonansspektrum (O2O, 270 MHz) δ ppm: 20 2,16 - 2,29 (IH, multiplet); 2,74 - 2,92 (IH, multiplet); 3,05 (3H, singlet); 3,12 (3H, singlet); 25 3,38 - 3,73 (3H, multiplet); 3.65 (3H, singlet); 3.66 (3H, singlet); 3,68 (2H, singlet); 4,32 (IH, dublet af dubletter, J = 10,99 & 7,69 Hz); 30 7,16, 7,82 (4H, A2B2, J * 8,61 Hz).

Fremsti 11 inoseksempe1 22 (2R.4S)-2-carbamovl*4-(4-methoxvbenzvlthio)-l,l-dimethvlpvrro-35 lidiniumfluorsulfonat

Infrarødt absorptionsspektruin (KBr) »»max cm“l: 1698. 1512.

DK 175029 B1 147

Kernemagnetisk resonansspektrum (020, 270 NHz) δ ppm: 2,19 - 2,30 (IH, multiplet); 2,57 - 2,70 (IH, multiplet); 5 2,93 (3H, singlet); 3,15 (3H, singlet); 3,30 (IH, dublet af dubletter, J = 12,09 & 7,51 Hz); 3,47 - 3,60 (IH, multiplet); 3,66 (3H, singlet); 10 3,69 (2H, singlet); 3.77 (IH, dublet af dubletter, J = 12,09 & 6,06 Hz); 4.26 {3H, triplet, J s 8,43 Hz); 6.82, 7,18 (4H, A2B2, J * 8,61 Hz).

15 Fremsti11inoseksempel 23 (2R,4S)-l,l~dimethv1-2-(N,N-dimethv1 carbamoyl )-4-(4-methoxy-benzvl thi o)pyrrolidiniumfluorsulfonat 20 Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) i>max c®“*: 1652, 1511.

Kernemagnetisk resonansspektrum (D20, 270 MHz) δ ppm: 25 2,17 - 2,29 (IH, multiplet); 2,46 - 2,58 (IH, multiplet); 2.78 (3H,' singlet); 2,94 (3H, singlet); 2,98 (3H, singlet); 30 3,10 {3 H, singlet); 3.26 (ih, dublet af dubletter, J = 12,09 S 6,96 Hz); 3,51 - 3,63 (IH, multiplet); 3,65 (3H, singlet); 3,69 (2H, singlet); 35 3,84 (IH, dublet af dubletter, J = 12.09 & 8,62 Hz); 4.75 (ih, dublet af dubletter, J = 7,69 & 6,96 Hz); 6.82, 7,17 (4H, A2B2, J = 8,78 Hz).

DK 175029 B1 148

Fremsti11 inqseksempel 24 (2S.4S)-2-cvklopropvlcarbamoyl-1.l-dimethvl-4-f4-fflethoxvben-zvlthio)pyrrolidiniumfluorsulfonat 5

Infrarødt absorptionsspektrum (væskefilm) vmax c»”1: 1685, 1532, 1512.

Kernenagnetisk resonansspektrua (D20, 270 MHz) 6 ppm: 10 0,26 - 2,66 (4H, multiplet); 2,00 - 3,65 (6H, multiplet); 2,96 {3H, singlet); 2,98 C3H, singlet); 15 3,65 (3H, singlet); 3,68 (2H, singlet); 3,92 (IH, triplet, J * 7,86 Hz); 6.81, 3,17 (4H, A2B2, J * 8,80 Hz).

20 Fremsti11inaseksempel 25 (6S, 8S) - 5-OXO-8 - f 4~methoxvbenzylthio)-l-inethvl~4-aza-l-azonia- bicyklo[4.3.01nonanfluorsulfonat 25 Infrarødt absorptionsspektrum (KBr) »>max 1680, 1609, 1512, 1246.

Kernemagneti sk resonansspektrum (D20, 270 MHz) 6 ppm: 30 2,10 - 2,24 (IH, multiplet); 2,73 - 2,90 (ih, multiplet); 3,65 (3H, singlet); 3,67 (2H, singlet); 3,36 - 3,85 (7H, multiplet); 35 (IH, triplet, J = 8,43 Hz); 6.82, 7,17 (4H, A2B2, J = 8,79 Hz).

Claims

5 R* betegner en gruppe med formlen (III): R' R' \ / C R* / \ / (CR’j)p C (III) I I \ N_C R’ / W R2a O og hvori: et af symbolerne R' betegner en binding til resten af forbindelsen med formlen (I), idet i nævnte gruppe med formlen (ΠΙ) de andre symboler R’ alle betegner hydrogenatomer; R2* betegner et hydrogenatom eller en CrC^-alkylgruppe; og
10 Rs betegner et hydrogenatom, en kation eller en beskyttelsesgruppe for en carboxygrup-pe; DK 175029 B1 150 f er 0 eller 1; p er 0 eller det hele tal 1 eller 2; og farmaceutisk acceptable salte og estere deraf, idet den beskyttende gruppe for en caiboxygruppe og esterresten af den farmaceutisk 5 acceptable ester er udvalgt blandt en CrC2o-aIkylgmppe; en C3-C7-cykloalkylgruppe; en aralkylgruppe, hvori alkyldelen er C,-C3, og den aromatiske gruppe er C6-CM og er usub-stitueret eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (c); en C2-C6~ alkenylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (a) ; en halogeneret C i -C6-alkylgruppe; en substitueret silylalkylgruppe, 10 hvori hver alkyldel er Ct-C6, og silylgruppen har op til 3 substituenter valgt blandt CrC6-alkylgrupper og phenylgrupper, som er usubstituerede eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (a); en phenylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en C,-C4-alkyl- eller (C1-C6)alkanoylaminosubstituent; en phenacylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter 15 (a); en cyklisk eller acyklisk terpenylgruppe valg blandt geranyl-, neryl-, linalyl-, phytyl-, menthyl-, thujyl-, caryl-, pinanyl-, bomyl-, notcaiyl-, noipinanyl-, norbomyl-, menthe-nyl-, camphenyl- ognorbomenylgmpper; en alkoxymethylgruppe, hvori alkoxydelen er C,-C6, som er usubstitueret eller i sig selv er substitueret med en enkelt usubstitueret I alkoxygruppe; en alifatisk acyloxymethylgruppe, hvori acylgruppen er en alkanoylgmppe; 20 en højere alifatisk acyloxyalkylgruppe, hvori acylgruppen er en alkanoylgmppe, og alkyldelen er C2-C6; en cykloalkylsubstitueret alifatisk acyloxyalkylgruppe, hvori acylgruppen er en alkanoylgmppe, cykloalkylsubstituenten er C3-C7, og alkyldelen er en C,-C6-alkyl-gmppe; en alkoxycarbonyloxyalkylgruppe, hvori alkoxydelen erC,-C10, og alkyldelen er C|-C6; en cykloalkylcarbonyloxyalkyl- eller cykloalkyloxycaibonyloxyalkylgruppe, hvori 25 cykloalkylgmppen er C3-C|0, ermono- eller polycyklisk og eventuelt er substitueret med i det mindste en C,-C4-alkylgruppe, og alkylgruppen er en Cj-C6-alkylgruppe; en cyldoal-kylalkoxycarbonyloxyalkylgmppe, hvori alkoxygruppen har en enkelt cykloalkylsubstitu- DK 175029 B1 151 ent, idet cykloalkylsubstituenten er C3-Ci0 og mono- eller polycyklisk; en terpenyl-carbonyloxyalkyl- eller teipenyloxycarbonyloxyalkylgruppe (hvori teipenyldelen er som defineret ovenfor); en 5-alkyl- eller 5-phenylsubstitueret (2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)alkylgruppe, hvori hver alkylgruppe er CrC6, og hvori phenylgruppen er usubstitueret 5 eller har i det mindste en af de nedenfor definerede substituenter (c); en phthalidylgrup-pe; en indanylgroppe; eller en 2-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-l,3-benzodioxolen-4-yl-gruppe; hvilke substituenter fal omfatter: hydroxygrupper, cyanogrupper, carbamoyloxygrupper, azidogrupper, carboxygrupper, nitrogrupper, oxogrupper, halogenatomer, C rC6-alkoxy grupper, C|-C6-alkanoylgrupper,
10 CrC6-alkanoyloxygrupper, Cj-CValkanoylaminogrupper, C2-C7-alkoxycarbonylgrupper, grupper med formlen -NR10Rn og -CONRl2R13 hvori R10, R11, R12 og R13 er ens eller forskellige og hver betegner et hydrogenatom, en CrC6-alkylgruppe eller en Ci-C6-alkanoylgnippe, grupper med formlen -S02NRl4R,5 og -S(OXR'6 15 hvor R14, R15 og R16 er ens eller forskellige og hver betegner en C|-C6-alkylgruppe, og k er nul eller et helt tal 1 eller 2, og grupper med formlen -NHS02R17, -N=CR18NRI9R20, -N=CR2iCR22=NR23 og -C(=NH>-NR^R25 hvor Rn til R25 er ens eller forskellige og hver betegner et hydrogenatom eller en C,-20 C6-alkylgruppe; og hvilke substituenter (cl omfatter: DK 175029 B1 152 C,-C4-alkylgrupper, C,-C4-alkoxygrupper, CrC4-halogenalkylgrupper, C,-C3-alkylen-dioxygrupper, halogenatomer, cyanogrupper og nitrogrupper.
2. Forbindelse ifølge krav 1, hvor R5 repræsenterer en C,-C6-alkylgruppe; en C3-C7-cykloalkylgruppe; en aralkylgruppe, hvori alkyldelen er C,-C3, og den aromatiske gruppe 5 er C6-CM og er usubstitueret eller har i det mindste en af de i krav 1 definerede substitu-enter (c); en C2-C6-alkenylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en af de i krav 1 definerede subs ti tuen ter (a); en halogeneret C,-C4-alkylgruppe; en substitueret silylalkylgruppe, hvori hver alkyldel er Ct-C6, og silylgruppen har op til tre substituenter valgt blandt C,-C6-alkylgrupper og phenylgrupper, som er usubstituerede eller har i det 10 mindste en af de i krav 1 definerede substituenter (a); en phenylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en Ct-C4-alkyl- eller Q-Q-alkanoylaminosubstituent; en phenacylgruppe, som er usubstitueret eller har i det mindste en af de i krav 1 definerede substituenter (a); en cyklisk eller acyklisk terpenylgruppe, som defineret i krav 1; en alkoxymethylgmppe, hvori alkoxydelen er CrC4> som er usubstitueret eller i sig selv er 15 substitueret med en enkelt usubstitueret alkoxygruppe; en alifatisk acyloxymethylgruppe, hvori acylgruppen er en C2-C6-alkanoylgruppe; en højere alifatisk acyloxyalkylgruppe, hvori acylgruppen er en C2-C6-alkanoylgruppe, og alkyldelen er C2-C4; en cykloalkylsub-stitueret alifatisk acyloxyalkylgruppe, hvori acylgruppen er en C2-C6-alkanoylgruppe, cykloalkylsubstituenten er C3-C7, og alkyldelen er en C,-C4-alkylgruppe; en l-(alkoxy-20 carbonyloxy)-ethylgruppe, hvori alkoxydelen er CrC4, og alkyldelen er C,-C4; en cyklo-alkylcarbonyloxyalkyl- eller cykloalkyloxycarbonyloxyalkylgruppe, hvori cykloalkyl-gruppen er C3-C7, er mono- eller polycyklisk og eventuelt er substitueret med i det mindste en C|-C4-alkylgruppe, og alkylgruppen er en C1-C4-alkylgruppe; en cykloalkyl-alkoxycarbonyloxyalkylgmppe, hvori alkoxygruppen har en enkelt cykloalkylsubstituent, 25 idet cykloalkylsubstituenten er C3-C7 og mono- eller polycyklisk; en terpenylcarbonyl-oxyalkyl- eller terpenyloxycarbonyloxyalkylgruppe, idet terpenyldelen er som defineret i krav 1; en 5-alkyl- eller 5-phenylsubstitueret (2-oxo-l,3-dioxolen-4-yl)alkylgruppe, hvori hver alkylgruppe er C]-C4, og hvori phenylgruppen er usubstitueret eller har i det DK 175029 B1 153 mindst én af de i krav 1 definerede substituenter (c); en phthalidylgruppe; en indanylgrup-pe eller en 2-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-l,3-benzodioxolen-4-yl-gruppe.
3. Forbindelse ifølge.krav 1, hvori p er 1.
4. Forbindelse ifølge krav 1, hvori: 5 gruppen med formlen (III) betegner en pyrrolidin-2-on-4-yl-gruppe, som har gruppen R2* ved sit nitrogenatom; og R2* betegner et hydrogenatom eller en methyl-, ethyl-, propyl- eller butylgruppe.
5. Forbindelse ifølge krav I, hvori: gruppen med formlen (ΠΤ) betegner en pyrrolidin-2-on-4-yl-gruppe, som har gruppen R2* 10 ved sit nitrogenatom; og R2* betegner et hydrogenatom.
6. Forbindelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 5, hvori 1 -bydroxyethylgrup-pen ved 6-penomstillingen er i l(R)-hydroxyethylkonfigurationen.
7. Forbindelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 6, hvori penemsystemet har 15 (5R,6S)-konfigurationen.
8. Forbindelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 6, hvori penemsystemet har (1 R,5S,6S)-konfigurationen. DK 175029 B1 154
9. Forbindelse ifølge krav 1, nemlig pivaloyloxymethyl-2-(2-oxo-4-pyrrolidinylthio)-6-( 1 -hydroxyethyl)-1 -methyl-1 -carbapen-2-em-3-carboxylat; pivaloyloxymethyl-( 1 R,5S,6S)-2-(2-oxo-4-pyiTolidinylthio)-6-[( 1R)-1 -hydroxyethyl]-1 -5 methyl-1 -carbapen-2-em-3-caiboxylat; (1 -methylcyklohexan-1 -yl)carbonyloxymethyl-2-(2-oxo-4-pym>lidinylthio)-6-( 1 -hydroxyethyl)-1 -methyl-1 -carbapen-2 -em- 3 -carboxylat; (1 -methylcyklohexan-1 -yl)carbonyloxymethyl-(lR,5S)6S)-2-(2-oxo-4-pyrrolidinylthio)- 6-[( 1R)-1 -hydroxyethyl]-1 -methyl-1 -carbapen-2-em-3-carboxylat; 10 1 -(cyklopentyloxy carbonyloxy)ethyl-2-(2-oxo-4-pyrrolidinylthio)-6-( 1 -hydroxyethyl)- 1 -methyl-1 -carbapen-2-em-3-carboxylat; 1 -(cyklopentyloxycarbonyloxy)ethyl-( 1 R,5S,6S)-2-(2-oxo-4-pym>lidinylthio)-6-[( 1R)-1 -hydroxyethyl]-1 -methyl-1 -carbapen-2-em-3-carboxylat, eller et farmaceutisk acceptable salt deraf.
10. Farmaceutisk middel omfattende et antibiotikum i blanding med en farmaceutisk acceptabel bærer eller et farmaceutisk acceptabelt fortyndingsmiddel, hvor antibiotikummet er i det mindste én forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt eller ester deraf ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 9.
11. Farmaceutisk middel ifølge krav 10 formuleret til oral administration.
12. Farmaceutisk middel ifølge krav 10 formuleret til parenteral administration. DK 175029 B1 155
13. Fremgangsmåde til fremstilling af en forbindelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 9, kendetegnet ved, at den omfatter trinnene: (a) omsætning af en forbindelse med formlen (IV): HO H CH3 \ / I C C-H / \ / Λ H3C CH_CH C-R27 I I II (IV) C_N_C // \ O COOR28 (hvori R27 betegner en gruppe med formlen -OR29 eller -SO-R30, hvori:
5 R29 betegner en alkansulfonylgruppe repræsenteret ved en methansulfonyl-, ethan- sulfonyl-, propansulfonyl-, isopropansulfonyl- ellerbutansulfonylgruppe; en aiylsulfo-nylgruppe repræsenteret ved en phenylsulfonyl-, tolylsulfonyl-, især p-tolylsulfonyl-, eller naphthylsulfonylgmppe; en dialkylphosphorylgruppe repræsenteret ved en dimethyl-phosphoryl-, diethylphosphoryl-, dipropylphosphoryl-, diisopropylphosphoryl-, dibutyl-10 phosphoiyl- eller dipentylphosphorylgruppe; eller en diaiylphosphorylgruppe repræsenteret ved en diphenylphosphoryl- eller ditolylphosphorylgruppe; R30 betegner en alkylgruppe repræsenteret ved en methyl-, ethyl-, propyl- eller isopropyl-gruppe; en halogenalkylgruppe repræsenteret ved en fluormethyl-, chlormethyl-, fluorethyl-, difluormethyl-, difluorethyl-, dichlorethyl-, trifluormethyl- eller trifluorethyl-15 gruppe; en 2-acetylaminoethylgruppe; en 2-acetylaminovinylgruppe; en aiylgruppe repræsenteret ved en phenyl- eller naphthylgruppe, som eventuelt er substitueret med 1 til 3 substituenter, der er ens eller forskellige og er valgt blandt fluor-, chlor- og bromatomer og methyl-, ethyl-, propyl-, isopropyl-, methoxy-, ethoxy-, propoxy-, isopropoxy-, meth-oxycarbonyl-, ethoxycaibonyl-, t-butoxycarbonyl-, nitro-, hydroxy- og cyanogrupper, en 20 heteroaiylgruppe repræsenteret ved en pyridyl- eller pyrimidinylgruppe, som eventuelt DK 175029 B1 156 er substitueret med 1 til 3 substituenter, der er ens eller forskellige og er valgt blandt fluor-, chlor- og bromatomer og methyl-, ethyl-, propyl- og isopropylgrupper; og R2* betegner en beskyttelsesgruppe for en carboxylsyre); omsættes med en forbindelse med formlen (Vb):
5 HS-(CH2)rRm (Vb) [hvori Rm betegner gruppen med formlen (ΙΠ), hvori en hvilken som helst aktiv gruppe om nødvendigt er beskyttet, og C er som defineret i krav 1 ], til opnåelse af en forbindelse med formlen (VI): HO H CH, \ / I C C-H / \ / \ H3C CH—CH C-S- (CHa) ,-Rb I I II (VI) C_N_C // \ O COOR28 [hvori R28 er som defineret ovenfor, i er som defineret i krav 1, og Rb betegner gruppen 10 med formlen (ΙΠ), hvori om nødvendigt en hvilken som helst aktiv gruppe er beskyttet, og som om nødvendigt indeholder en udlignende anion], (b) og derefter underkastes den resulterende forbindelse om nødvendigt Qemelse af beskyttelsesgrupperne og/eller forestring og/eller saltdannelse til opnåelse af en forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt eller ester deraf. DK 175029 B1 157
14. Anvendelse til fremstilling af et lægemiddel til behandling eller forebyggelse af mikrobiel infektion af et antibiotikum, hvor antibiotikummet er mindst én forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt elleT ester deraf ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 9. > 5