PT1340757E - Derivados 1-metilcarbapenem - Google Patents

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PT1340757E
PT1340757E PT01983800T PT01983800T PT1340757E PT 1340757 E PT1340757 E PT 1340757E PT 01983800 T PT01983800 T PT 01983800T PT 01983800 T PT01983800 T PT 01983800T PT 1340757 E PT1340757 E PT 1340757E
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thio
azetidin
carboxylic acid
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PT01983800T
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Yoshiyuki Kobayashi
Tsuyoshi Shinozuka
Osamu Kanno
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Sankyo Co
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D477/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring
    • C07D477/10—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
    • C07D477/12—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6
    • C07D477/16—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6 with hetero atoms or carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 3
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Description

ΡΕ1340757 1 DESCRIÇÃO "DERIVADOS 1—METILCARBAPENEM" A presente invenção diz respeito a compostos 1-metilcarbapenem tendo excelente actividade antibacteriana, seus ésteres e sais farmaceuticamente aceitáveis, composições farmacêuticas (particularmente agentes antibacte-rianos) que os contêm como ingrediente activo, utilização dos referidos compostos, derivados éster ou sais para o fabrico das referidas composições farmacêuticas, ou um método para a prevenção ou tratamento de doenças (particularmente infecções bacterianas) que compreende a administração de uma quantidade farmacologicamente eficaz dos referidos compostos, derivados éster ou sais a animais de sangue quente (particularmente seres humanos).
[ANTECEDENTES DA INVENÇÃO]
Existe uma necessidade para o desenvolvimento de derivados carbapenem tendo actividade antibacteriana forte e equilibrada contra uma larga gama de bactérias patogé-nicas. Compostos 1-metilcarbapenem tendo uma estrutura análoga ao do composto da presente invenção são revelados no Pedido de Patente Japonesa (Kokai) No. Hei 8-53453/(US5534510). ΡΕ1340757 2
Os presentes inventores levaram a cabo investigações acerca de compostos 1-metilcarbapenem durante muito tempo. Como resultado, foi descoberto que quando comparados com derivados 1-metilcarbapenem convencionais, os compostos de fórmula (I) da presente invenção têm poder anti-bacteriano mais forte e são eficazes como agentes antibac-terianos para o tratamento ou prevenção (particularmente o tratamento) de infecções bacterianas, particularmente infecções do sistema respiratório, para completar com bom êxito a presente invenção.
[DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA PRESENTE INVENÇÃO] A presente invenção diz respeito a compostos 1-metilcarbapenem representados pela fórmula (I):
(l) ou seus sais ou ésteres farmacologicamente aceitáveis.
Na fórmula, R1 representa (1) um grupo representado pela fórmula COOR3 [em que R3 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 ou um grupo cicloalquilo C3-C6] , (2) um grupo representado pela fórmula CONR4R5 3 ΡΕ1340757 [em que R4 e R1 podem ser iguais ou diferentes e representa, cada um, um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte A mais adiante), um grupo ciclo-alquilo C3-C6 ou um grupo heterociclico de 3 a 6 membros ou um grupo arilo C6-C10 (que pode estar substituído por um ou dois grupos, que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B mais adiante) , ou, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um heterociclo de 3 a 6 membros contendo azoto (que pode estar substituído por um ou dois grupos, que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B mais adiante)], (3) um grupo ciano, (4) um grupo representado pela fórmula CH2OR2 [em que R2 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 ou um grupo cicloalquilo C3-C6] ou 1
um grupo representado pela fórmula CH2NR R 2 [em que R3 representa um átomo de hidrogénio, um grupo 3 alquilo C1-C6 ou um grupo cicloalquilo C3-C6, e R4 4 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6, um grupo cicloalquilo C3-Ce, um grupo alcanoilo C1-C6, um grupo (aril C6-Ci0)carbonilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são 4 ΡΕ1340757 seleccionados a partir do grupo substituinte B mais adiante), um grupo (alcoxi Ci-Cô) carbonilo, um grupo heterociclil aromático de 5 ou 6 membros-carbonilo, um grupo alquil Ci-C6_sulf onilo ou um grupo aril Οε-Οιο-sulfonilo, ou R7 e R8, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um grupo succinimida (que pode estar condensado com um grupo fenilo)]; R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci~Ce; n representa 1, 2 ou 3; X representa um átomo de enxofre ou um átomo de oxigénio; o grupo substituinte A compreende um grupo hidroxilo, um grupo amino (que pode estar substituido por um ou dois grupos alquilo Ci-C6) , um grupo carbamoilo (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos alquilo Ci-Cõ) , um grupo carboxilo, um grupo ciano e um grupo alcoxi Ci-Cõ; e o grupo substituinte B compreende um grupo hidroxi-alquilo Ci-C6, um grupo amino-alquilo Ci-C4 (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos alquilo Ci-C6) , um grupo carbamoilo (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos alquilo Ci-C6) , um grupo carboxilo, um grupo hidroxilo, um 5 ΡΕ1340757 grupo amino (que pode estar substituído por um ou dois grupos alquilo Ci-C6) , um grupo alcoxi Ci-C6 e um grupo alquilo Ci-Cõ] ·
Na descrição anterior, o "grupo alquilo Ci-C6" nas definições de R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, do grupo substituinte A e do grupo substituinte B representa um grupo hidrocarboneto saturado linear ou ramificado tendo desde 1 até 6 átomos de carbono. Exemplos de tal grupo incluem os grupos metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, tert-butilo, n-pentilo, isopentilo, 2-metilbutilo, neopentilo, 1-etilpropilo, n-hexilo, iso-hexilo, 4-metilpentilo, 3-metilpentilo, 2-metilpentilo, 1-metilpentilo, 3,3-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 1,1-dimetilbutilo, 1,2-dimetilbutilo, 1,3-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo, 2-etilbutilo e l-metil-2-metilpropilo. Nas definições de R2, R3, R6, R7, R8, do grupo substituinte A e do grupo substituinte B, é preferido um grupo alquilo Ci-C3 e é particularmente preferido um grupo metilo. Na definição de R4, é preferido um grupo alquilo C1-C3 e é particularmente preferido um grupo metilo ou isopropilo. Na definição de R5, é preferido um grupo alquilo C2-C6 e um grupo l-metil-2-metilpropilo é o mais preferido. O "grupo cicloalquilo C3-C6" nas definições de R3, R4, R5, R6, R7 e R8, representa um grupo hidrocarboneto cíclico tendo desde 3 até 6 átomos de carbono. Exemplos de tal grupo incluem os grupos ciclopropilo, ciclobutilo, 6 ΡΕ1340757 ciclopentilo e ciclo-hexilo, dos quais é preferido um grupo ciclopropilo. 0 "grupo heterocíclico de 3 a 6 membros" nas definições de R4 e R5 representa um grupo heterociclico saturado incluindo um ou dois átomos de oxigénio, azoto ou enxofre. Exemplos de tal grupo incluem os grupos aziridinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, oxi-ranilo, oxetanilo, tetra-hidrofuranilo, tetra-hidropira-nilo, tetra-hidrotienilo, morfolinilo, piperazinilo e tio-morfolinilo, dos quais é preferido um grupo heterociclico de 4 a 6 membros, contendo azoto, e é mais preferido um grupo azetidinilo, pirrolidinilo ou piperidinilo.
Exemplos do "grupo arilo C6-C10" nas definições de R4 e R5 e da porção "arilo 0 1 O o do "grupo (aril Cè~ Cio) carbonilo" e do "grupo arilo C6-Cio_sulf onilo" na definição de R8 incluem os grupos fenilo, indenilo e naftilo, dos quais é preferido o fenilo grupo. O "heterociclo contendo azoto" do "heterociclo de 3 a 6 membros contendo azoto" nas definições do grupo formado por R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representa um grupo heterociclico saturado contendo um ou dois átomos de azoto e que pode conter um átomo de oxigénio ou de enxofre. Exemplos de tal grupo incluem os grupos aziridino, azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, piperazino e tiomorfolino, dos quais é preferido um heterociclo de 4 a 6 membros contendo azoto 7 ΡΕ1340757 e são mais preferidos os grupos azetidino, piperazino, morfolino ou tiomorfolino. 0 "grupo alcanoílo Ci-C6" na definição de R8 representa um grupo alcanoílo linear ou ramificado tendo desde 1 até 6 átomos de carbono. Exemplos de tal grupo incluem os grupos formilo, acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, valerilo, isovalerilo, pivaloílo e hexanoílo, dos quais é preferido um grupo alcanoílo C1-C3 e um grupo acetilo é o mais preferido. A porção "alcoxi Ci-C6" do " (grupo alcoxi Cq-C6)carbonilo" na definição de R8 e o "grupo alcoxi Ci-C6" nas definições dos grupos substituintes representa um grupo alcoxi linear ou ramificado tendo desde 1 até 6 átomos de carbono. Exemplos de tal grupo incluem os grupos metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, pentiloxi e hexiloxi, dos quais é preferido um grupo alcoxi C1-C3 e um grupo metoxi é o mais preferido. A porção "heterocíclico aromático de 5 ou 6 membros" do "grupo heterociclil aromático de 5 ou 6 membros-carbonilo" na definição de R8 representa um heterociclo aromático contendo desde um até três átomos de oxigénio, azoto e enxofre. Exemplos de tal heterociclo incluem pirrole, imidazole, tiazole, oxazole, isoxazole, furano, tiofeno, triazole, tiadiazole, piridina, pirimidi-na, piridazina e triazina, dos quais é preferido furano, tiofeno ou piridina. 8 ΡΕ1340757
Exemplos do "grupo hidroxi-alquilo C1-C4" no grupo substituinte B incluem os grupos hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxipropilo e hidroxibutilo, dos quais é preferido um grupo hidroxi-alquilo C1-C2 e um grupo hidroximetilo é o mais preferido.
Exemplos do "grupo amino-alquilo C1-C4" no grupo substituinte B incluem os grupos aminometilo, aminoetilo, aminopropilo e aminobutilo, dos quais é preferido um amino-grupo alquilo C1-C2 e um grupo aminometilo é o mais preferido.
Preferencialmente o grupo substituinte A compreende um grupo hidroxilo, um grupo amino (que pode estar substituído por um ou dois grupos alquilo C1-C3) e um grupo carbamoilo, dos quais um grupo amino (que pode estar substituído por um ou dois grupos metilo ou etilo) é o mais preferido.
Preferencialmente o grupo substituinte B compreende um grupo hidroxi-alquilo C1-C6, um grupo amino-alquilo C1-C4 (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos alquilo C1-C3) , um grupo carbamoilo (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos alquilo C1-C3) , um grupo hidroxilo e um grupo amino (que pode estar substituído por um ou dois grupos alquilo C1-C3) , dos quais é mais preferido um grupo compreendendo um grupo hidroximetilo, um grupo aminometilo (a porção 9 ΡΕ1340757 amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos metilo ou etilo), um grupo carbamoílo (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos metilo ou etilo), um grupo hidroxilo e um grupo amino (que pode estar substituído por um ou dois grupos metilo ou etilo) , sendo mais preferidos um grupo aminometilo e um grupo amino. 0 "éster farmacologicamente aceitável" do composto (I) é um éster no qual alguns dos grupos carboxilo ou grupos hidroxilo do composto (I) estão protegidos por um grupo que pode ser clivado no corpo de um ser humano ou de um animal através de um método químico ou biológico tal como hidrólise de modo a proporcionar o composto original (I) ou um seu sal. Se um derivado é ou não tal éster pode ser determinado por meio de administração oral ou intravenosa do derivado a um animal experimental tal como uma ratazana ou um ratinho, estudando o fluido corporal do animal e detectando o composto original (I) ou o seu sal.
Exemplos do grupo protector que forma um éster de um grupo carboxilo incluem um grupo alquilo Ci-Cio, um grupo cicloalquilo C3-C6, um grupo cicloalquil C3-C6_alquilo C1-C4, um grupo alcanoil C2-Ci0-oxi-alquilo C1-C4, um grupo (alcoxi (C1-C10) ) carboniloxi-alquilo C1-C4, um grupo fenilo (o referido grupo fenilo pode estar substituído por um ou dois grupos seleccionados a partir de um átomo de halogéneo, um grupo alquilo C1-C4, um grupo alcoxi C1-C4, um grupo metilenodioxi e um grupo alcanoil Ci-C6-oxi) , um grupo alcanoil Ci-Ci0-oxibenzilo, um grupo ftalidilo e um grupo 5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-ilmetilo. 10 ΡΕ1340757
Exemplos do grupo protector que forma um éster de um grupo hidroxilo incluem a um grupo alcanoílo C1-C10, um grupo (aril Cô-Cio) carbonilo, um grupo (alcoxi (Ci — Cio))carbonilo e um grupo aminoacilo.
Exemplos do anterior "grupo alquilo C1-C10" incluem os grupos metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, s-butilo, t-butilo, pentilo, 2-pentilo, 3-pentilo, isopentilo, hexilo, 2-hexilo, 3-hexilo, iso-hexilo, heptilo, octilo, nonilo e decilo, dos quais é preferido um grupo alquilo C1-C6, é mais preferido um grupo alquilo C2-C4 e um grupo etilo é o mais preferido.
Exemplos do "grupo cicloalquilo C3-C6" incluem os grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo e ciclo-hexilo, dos quais é preferido o grupo ciclopentilo ou ciclo-hexilo.
Exemplos do "grupo cicloalquil C3-C6-alquilo Cx-C4" incluem os grupos ciclopropilmetilo, ciclopropiletilo, ciclopropilpropilo, ciclopropilbutilo, ciclobutilmetilo, ciclobutiletilo, ciclobutilpropilo, ciclopentilmetilo, ciclopentiletilo, ciclopentilpropilo, ciclo-hexilmetilo e ciclo-hexiletilo, dos quais é preferido o grupo ciclopropilmetilo .
Exemplos do "grupo alcanoil C2-Cio-oxi-alquilo Ci-C4" incluem os grupos acetoximetilo, 1-(acetoxi)etilo, 1- 11 ΡΕ1340757 (acetoxi)propilo, 1-(acetoxi)butilo, propioniloximetilo, 1-(propioniloxi)etilo, isopropioniloximetilo, 1-(isopropio-niloxi)etilo, butiriloximetilo, 1-(butiriloxi)etilo, isobu-tiriloximetilo, 1-(isobutiriloxi)etilo, pivaloiloximetilo, 1-(pivaloiloxi)etilo, valeriloximetilo, 1-(valeriloxi)-etilo, isovaleriloximetilo, 1-(isovaleriloxi)etilo, hexa-noiloximetilo, 1-(hexanoiloxi)etilo, octanoiloximetilo, 1-(octanoiloxi)etilo, decanoiloximetilo, ciclopentilcarbo-niloximetilo, 1-metilciclopentilcarboniloximetilo, ciclo-hexilcarboniloximetilo e 1-metilciclo-hexilcarboniloxi-metilo, dos quais é preferido um grupo alcanoil C2-Ce-oximetilo ou 1-(alcanoil C2-C6-oxi)etilo.
Exemplos do "(grupo alcoxi (Ci-Cio) ) carboniloxi-alquilo C1-C4" incluem os grupos metoxicarboniloximetilo, 1-(metoxicarboniloxi)etilo, etoxicarboniloximetilo, 1-(eto-xicarboniloxi)etilo, 1-(etoxicarboniloxi)propilo, 1-(etoxi-carboniloxi)butilo, propoxicarboniloximetilo, 1-(propoxi-carboniloxi)etilo, isopropoxicarboniloximetilo, l-(isopro-poxicarboniloxi)etilo, butoxicarboniloximetilo, 1-(butoxi-carboniloxi)etilo, isobutoxicarboniloximetilo, 1-(isobuto-xicarboniloxi)etilo, s-butoxicarboniloximetilo, 1-(s-bu-toxicarboniloxi)etilo, t-butoxicarboniloximetilo, 1-(t-bu-toxicarboniloxi)etilo, pentiloxicarboniloximetilo, l-(pen-tiloxicarboniloxi)etilo, (1-metilbutiloxicarboniloxi)meti-lo, 1-(1-metilbutiloxicarboniloxi)etilo, (2-metilbutiloxi-carboniloxi)metilo, 1-(2-metilbutiloxicarboniloxi)etilo, (3-metilbutiloxicarboniloxi)metilo, 1-(3-metilbutiloxicar-boniloxi)etilo, (1-etilpropiloxicarboniloxi)metilo, 1-(1- 12 ΡΕ1340757 etilpropiloxicarboniloxi)etilo, hexiloxicarboniloximetilo, 1-(hexiloxicarboniloxi)etilo, (1-metilpentiloxicarbonilo-xi)metilo, 1-(1-metilpentiloxicarboniloxi)etilo, octiloxi-carboniloximetilo, 1-(octiloxicarboniloxi)etilo, deciloxi-carboniloximetilo, 1-(deciloxicarboniloxi)etilo, ciclopen-tilcarboniloximetilo, 1-(ciclopentiloxicarboniloxi)etilo, ciclo-hexilcarboniloximetilo e 1- (ciclo-hexiloxicarbonilo-xi)etilo, dos quais é preferido um grupo (alcoxi Ci-Ce)carboniloximetilo ou 1-( (alcoxi Ci-Cê)carboniloxi)etilo.
Exemplos do "grupo fenilo que pode estar substituído" incluem os grupos fenilo, 3-fluorofenilo, 4-fluo-rofenilo, 3,4-difluorofenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, 3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 3,4-dimetoxifenilo, 3,4-metilenodioxifenilo, 3-acetoxifenilo e 4-acetoxifenilo, dos quais é preferido um grupo fenilo insubstituido.
Exemplos do "grupo alcanoil C2-Cio-oxibenzilo" incluem os grupos 2-acetoxibenzilo, 3-acetoxibenzilo, 4-acetoxibenzilo, 3-propioniloxibenzilo, 4-propioniloxiben-zilo, 4-butiriloxibenzilo, 4-valeriloxibenzilo, 4-hexa-noiloxibenzilo, 4-octanoiloxibenzilo e 4-decanoiloxiben-zilo, dos quais é preferido o grupo 3- ou 4- (alcanoil C2-C4~oxi)benzilo.
Exemplos do "grupo alcanoilo C1-C10" incluem os grupos formilo, acetilo, propionilo, butirilo, pentanoilo, hexanoilo, octanoilo e decanoilo, dos quais é preferido um grupo alcanoilo C2-C6. 13 ΡΕ1340757
Exemplos do "grupo (aril C6-Ci0) carbonilo" incluem os grupos benzoílo, 1-naftoílo e 2-naftoílo, dos quais é preferido o grupo benzoilo.
Exemplos do "grupo (alcoxi (C1-C10) ) carbonilo" incluem os grupos metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propo-xicarbonilo, butoxicarbonilo, pentiloxicarbonilo, hexilo-xicarbonilo, octiloxicarbonilo e deciloxicarbonilo, dos quais é preferido um grupo alcoxi C2_C6carbonilo.
Exemplos do "grupo aminoacilo" incluem um grupo aminoácido tal como glicilo, alanilo, β-alanilo, leucilo,, isoleucilo, fenilalanilo, histidilo, asparagilo, prolilo e lisilo, dos quais é preferido um grupo glicilo.
Os compostos (I) e seus ésteres farmacologica-mente aceitáveis da presente invenção podem formar sais farmacologicamente aceitáveis se necessário. 0 "seu sal farmacologicamente aceitável" é um sal no qual o composto (I) da presente invenção pode ser convertido. Exemplo preferidos de tal sal incluem sais de metais alcalinos tais como um sal de sódio, um sal de potássio e um sal de lítio; sais de metais alcalino-terrosos tais como sal de cálcio e um sal de magnésio; sais de metais tais como um sal de alumínio, um sal de ferro, um sal de zinco, um sal de cobre, um sal de níquel e um sal de cobalto; sais de amina tais como sais inorgânicos tais como 14 ΡΕ1340757 um sal de amónio e sais orgânicos tais como um sal de t-octilamina, um sal de dibenzilamina, um sal de morfolina, um sal de glucosamina, um sal de éster de alquilo de fenilglicina, um sal de etilenodiamina, um sal de N-metilglucamina, um sal de guanidina, um sal de dietilamina, um sal de trietilamina, um sal de diciclo-hexilamina, um sal de N,N'-dibenziletilenodiamina, um sal de cloropro-caína, sal de um procaína, um sal de dietanolamina, um sal de N-benzil-fenetilamina, um sal de piperazina, um sal de tetrametilamónio e um sal de tris(hidroximetil)aminometano; sais de ácidos inorgânicos tais como sais de ácidos halidricos tais como um hidrofluoreto, um hidrocloreto, um hidrobrometo ou um hidroiodeto, um nitrato, um perclorato, um sulfato ou um fosfato; alcano inferior-sulfonatos tais como um metanossulfonato, trifluorometanossulfonato ou um etanossulfonato; arilsulfonatos tais como um benzenos-sulfonato ou um p-toluenossulfonato; e sais de ácidos orgânicos tais como um acetato, um malato, um fumarato, um succinato, um citrato, um tartarato, um oxalato ou um maleato; e sais de aminoácidos tais como um sal de glicina, um sal de lisina, um sal de arginina, um sal de ornitina, um glutamato ou um aspartato.
Os compostos (I), seus sais farmacologicamente aceitáveis e derivados éster da presente invenção incluem seus hidratos ou solvatos.
Nos compostos da fórmula (I), são preferidos os seguintes compostos. 15 ΡΕ1340757 (1) No que respeita a R1: (1-1) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5, um grupo ciano ou um grupo representado pela fórmula CH2NR7R8; (1-2) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5 ou um grupo representado pela fórmula CH2NR7R8; (1-3) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5. (2) No que respeita a R2: (2-1) compostos em que R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3; (2-2) compostos em que R2 representa um átomo de hidrogénio. (3) No que respeita a R3: (3-1) compostos em que R3 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3; (3-2) compostos em que R3 representa um átomo de hidrogénio, um grupo metilo ou um grupo etilo. 16 ΡΕ1340757 (4) No que respeita a R4: (4-1) compostos em que R4 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3; (4-2) compostos em que R4 representa um átomo de hidrogénio, um grupo metilo ou um grupo isopropilo. (5) No que respeita a R5: (5-1) compostos no qual R5 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte A) ou um grupo heterociclico de 4 a 6 membros, contendo azoto; (5-2) compostos em que R5 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte A) , ou grupo azetidinilo, pirrolidinilo ou piperi-dinilo. (6) No que respeita a R4 e R5: (6-1) compostos em que R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um 17 ΡΕ1340757 heterociclo de 4 a 6 membros contendo azoto (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substi-tuinte B); (6-2) compostos em que R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um grupo azetidino, piperazino, morfolino ou tiomorfolino (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B). (7) No que respeita a R6: (7-1) compostos em que R6 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3; (7-2) compostos em que R6 representa um átomo de hidrogénio. (8) No que respeita a R7: (8-1) compostos em que R7 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3; (8-2) compostos em que R7 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo; (8-3) compostos em que R7 representa um átomo de hidrogénio. 18 ΡΕ1340757 (9) No que respeita a R8: (9-1) compostos em que R8 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C3, um grupo alcanoilo Ci~ C3, um grupo benzoilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B), um grupo (alcoxi C1-C3)carbonilo, um grupo tienilcarbonilo, um grupo furilcarbonilo ou um grupo piridilcarbonilo; (9-2) compostos em que R8 representa um átomo de hidrogénio, um grupo benzoilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B) , um grupo (2-tienil)carbonilo, um grupo (2-furil)carbonilo ou um grupo (3-piridil)carbonilo. (10) No que respeita a n: (10-1) compostos em que n representa 1. (11) No que respeita a X: (11-1) compostos em que X representa um átomo de oxigénio. São mais preferidos os compostos obtidos através da combinação arbitrária de 2 ou mais dos substituintes 19 ΡΕ1340757 preferidos anteriormente listados. Exemplos de compostos mais preferidos incluem os compostos seguintes: (12) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5 (em que R4 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-C3; e R5 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo Ci~Ce (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte A) ou um grupo heterocíclico de 4 a 6 membros, contendo azoto,); R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre. (13) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5 (em que R4 representa um átomo de hidrogénio, um grupo metilo ou um grupo isopropilo; e R5 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo Ci- -C6 (que pode estar substituído por um dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e seleccionados a partir do grupo substituinte A) , ou grupo azetidinilo, pirrolidinilo ou piperidinilo); n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre. (14) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5 (em que R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um heterociclo de 4 a 6 membros contendo azoto 20 ΡΕ1340757 (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B) ; R2 representa um átomo de hidro génio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre. (15) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5 (em que R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um grupo azetidino, piperazino, morfolino ou tiomorfolino (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B)); R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre. (16) compostos em que R1 representa um grupo ciano; R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre. (17) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CH2NR7R8 (em que R7 representa um 8 átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3; e R representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C3, um grupo alcanoílo C1-C3, um grupo benzoílo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B), um grupo (alcoxi C1-C3)carbonilo, um grupo tienilcarbonilo, um grupo furilcarbonilo ou um grupo 21 ΡΕ1340757 piridilcarbonilo) ; R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre. (18) compostos em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CH2NR7R8 (em que R7 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo; e R representa um átomo de hidrogénio, um grupo benzoilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B) , um grupo (2-tienil)-carbonilo, um grupo (2-furil)-carbonilo ou um grupo (3-piridil)-carbonilo); R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1, e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre.
Certos compostos (I) da presente invenção estão especificamente exemplificados nas Tabelas 1 a 5. Deve ser tido em consideração que os compostos (I) da presente invenção não estão limitados a estes compostos de exemplificação .
Nas tabelas 1 a 5, Me representa um grupo metilo, Et um grupo etilo, Pr um grupo propilo, iPr um grupo isopropilo, Bu um grupo butilo, Pen um grupo pentilo, Hex um grupo hexilo, cPr um grupo ciclopropilo, cBu um grupo ciclobutilo, cPen um grupo ciclopentilo, cHex um grupo ciclo-hexilo, Azt um grupo azetidinilo, Pir um grupo pirrolidinilo , Pip um grupo piperidinilo, e Ph um grupo fenilo. O termo "posição" significa a posição da ligação do átomo de enxofre. ΡΕ1340757 22 [TABELA 1]
Comp No. X n posição R2 R3 1 S 1 3 H H 2 S 1 3 H Me 3 S 1 3 H Et 4 S 1 3 H Pr 5 s 1 3 H iPr 6 s 1 3 H Bu 7 s 1 3 H Pen 8 s 1 3 H Hex 9 s 1 3 H cPr 10 s 1 3 H cBu 11 s 1 3 H cPen 12 s 1 3 H cHex 13 s 1 3 Me H 14 s 1 3 Me Me 15 s 1 3 Me Et 16 s 1 3 Me Pr 17 s 1 3 Me iPr 18 s 1 3 Me Bu 19 s 1 3 Me Pen 20 s 1 3 Me Hex 21 s 1 3 Me cPr 23 ΡΕ1340757
22 S 1 3 Me cBu 23 S 1 3 Me cPen 24 S 1 3 Me cHex 26 S 2 3 H H 27 S 2 3 H Me 28 S 2 3 H Et 29 S 2 3 H Pr 30 S 2 3 H iPr 31 S 2 3 H Bu 32 S 2 3 H Pen 33 S 2 3 H Hex 34 S 2 3 H cPr 35 S 2 3 H cBu 36 S 2 3 H cPen 37 S 2 3 H cHex 38 S 2 3 Me H 39 S 2 3 Me Me 40 S 2 3 Me Et 41 S 2 3 Me Pr 42 S 2 3 Me iPr 43 S 2 3 Me Bu 44 S 2 3 Me Pen 45 S 2 3 Me Hex 46 S 2 3 Me cPr 47 S 2 3 Me cBu 48 S 2 3 Me cPen 49 s 2 3 Me cHex 51 s 3 4 H H - 24 - ΡΕ1340757 52 S 3 4 H Me 53 S 3 4 H Et 54 S 3 4 H Pr 55 S 3 4 H iPr 56 S 3 4 H Bu 57 S 3 4 H Pen 58 S 3 4 H Hex 59 S 3 4 H cPr 60 S 3 4 H cBu 61 S 3 4 H cPen 62 S 3 4 H cHex 63 S 3 4 Me H 64 S 3 4 Me Me 65 S 3 4 Me Et 66 S 3 4 Me Pr 67 S 3 4 Me iPr 68 S 3 4 Me Bu 69 S 3 4 Me Pen 70 S 3 4 Me Hex 71 S 3 4 Me cPr 72 S 3 4 Me cBu 73 S 3 4 Me cPen 74 S 3 4 Me cHex 76 0 1 3 H H 77 0 1 3 H Me 78 0 1 3 H Et 79 0 1 3 H Pr 80 0 1 3 H iPr 25 ΡΕ1340757 81 0 1 3 Η Bu 82 0 1 3 Η Pen 83 0 1 3 Η Hex 84 0 1 3 Η cPr 85 0 1 3 Η cBu 86 0 1 3 Η cPen 87 0 1 3 Η cHex 88 0 1 3 Me H 89 0 1 3 Me Me 90 0 1 3 Me Et 91 0 1 3 Me Pr 92 0 1 3 Me iPr 93 0 1 3 Me Bu 94 0 1 3 Me Pen 95 0 1 3 Me Hex 96 0 1 3 Me cPr 97 0 1 3 Me cBu 98 0 1 3 Me cPen 99 0 1 3 Me cHex 101 0 2 3 H H 102 0 2 3 H Me 103 0 2 3 H Et 104 0 2 3 H Pr 105 0 2 3 H iPr 106 0 2 3 H Bu 107 0 2 3 H Pen 108 0 2 3 H Hex 109 0 2 3 H cPr 26 ΡΕ1340757
110 0 2 3 Η cBu 111 0 2 3 Η cPen 112 0 2 3 Η cHex 113 0 2 3 Me H 114 0 2 3 Me Me 115 0 2 3 Me Et 116 0 2 3 Me Pr 117 0 2 3 Me iPr 118 0 2 3 Me Bu 119 0 2 3 Me Pen 120 0 2 3 Me Hex 121 0 2 3 Me cPr 122 0 2 3 Me cBu 123 0 2 3 Me cPen 124 0 2 3 Me cHex 126 0 3 4 H H 127 0 3 4 H Me 128 0 3 4 H Et 129 0 3 4 H Pr 130 0 3 4 H iPr 131 0 3 4 H Bu 132 0 3 4 H Pen 133 0 3 4 H Hex 134 0 3 4 H cPr 135 0 3 4 H cBu 136 0 3 4 H cPen 137 0 3 4 H cHex 138 0 3 4 Me H 27 ΡΕ1340757 139 0 3 4 Me Me 140 0 3 4 Me Et 141 0 3 4 Me Pr 142 0 3 4 Me iPr 143 0 3 4 Me Bu 144 0 3 4 Me Pen 145 0 3 4 Me Hex 146 0 3 4 Me cPr 147 0 3 4 Me cBu 148 0 3 4 Me cPen 149 0 3 4 Me cHex [TABELA 2]
Comp No. X n posição R2 R4 R5 1 S 1 3 H H H 2 S 1 3 H H Me 3 S 1 3 H H Et 4 s 1 3 H H Pr 5 s 1 3 H H iPr 6 s 1 3 H H Bu 7 s 1 3 H Me Me 8 s 1 3 H Me Et 9 s 1 3 H Me Pr 28 ΡΕ1340757
10 S 1 3 H Me iPr 11 S 1 3 H Me Bu 12 S 1 3 H Et Et 13 S 1 3 H Et Pr 14 S 1 3 H Et iPr 15 S 1 3 H Et Bu 16 S 1 3 H Pr Pr 17 S 1 3 H Pr iPr 18 S 1 3 H Pr Bu 19 S 1 3 H iPr iPr 20 S 1 3 H iPr Bu 21 S 1 3 H Bu Bu 22 S 1 3 H H CH2CH2OH 23 S 1 3 H Me ch2ch2oh 24 S 1 3 H Et ch2ch2oh 25 S 1 3 H Pr ch2ch2oh 26 S 1 3 H iPr ch2ch2oh 27 S 1 3 H H CH (CH3) CH2OH 28 S 1 3 H H CH (CH2OH) CH2OH 29 S 1 3 H H CH (CH2CH3) CH2OH 30 S 1 3 H H CH(CH(CH3)2)CH2OH 31 S 1 3 H H CH2CH2NH2 32 S 1 3 H H CH(CH3)CH2NH2 33 S 1 3 H H CH(CH2CH3)CH2NH2 34 S 1 3 H H CH(CH(CH3)2)CH2NH2 35 S 1 3 H H ch2cooh 36 S 1 3 H H CH (CH3) COOH 37 s 1 3 H H CH (CH2OH)COOH 29 ΡΕ1340757 38 S 1 3 H H CH (CH2CH3) COOH 39 S 1 3 H H CH (CH (CH3) 2) COOH 40 S 1 3 H H CH2CONH2 41 S 1 3 H H CH (CH3) CONH2 42 S 1 3 H H CH (CH2OH) CONH2 43 S 1 3 H H CH (CH2CH3) CONH2 44 S 1 3 H H CH (CH (CH3) 2) CONH2 45 S 1 3 H H cPr 46 S 1 3 H H cBu 47 S 1 3 H H cPen 48 S 1 3 H H cHex 49 S 1 3 H H 3-Azt 50 S 1 3 H H 3-Pir 51 S 1 3 H H 3-Pip 52 S 1 3 H H 4-Pip 53 S 1 3 H H 2-COOH-Ph 54 S 1 3 H H 2-CONH2-Ph 55 S 1 3 H H 3-COOH-Ph 56 S 1 3 H H 3-CONH2-Ph 57 S 1 3 H H 4-COOH-Ph 58 S 1 3 H H 4-CONH2-Ph 59 S 1 3 H -ch2ch2ch2- 60 S 1 3 H -CH2CH2CH2CH2- 61 S 1 3 H -CH2CH2CH2CH2CH2- 62 S 1 3 H -CH2CH2OCH2CH2- 63 S 1 3 H -CH2CH2SCH2CH2- 64 s 1 3 H -CH2CH2NHCH2CH2- 65 s 1 3 H -CH2CH (OH) CH2- 30 ΡΕ1340757 66 S 1 3 H -CH2CH (OH) CH2CH2- 67 S 1 3 H -CH2CH (OH) CH2CH2CH2- 68 S 1 3 H -CH2CH2CH (OH) CH2CH2- 69 S 1 3 H -CH (COOH) CH2CH2- 70 S 1 3 H -CH (CONH2) CH2CH2- 71 S 1 3 H -CH (CH2OH) CH2CH2- 72 S 1 3 H -CH(CH2NH2)CH2CH2- 73 S 1 3 H -CH (COOH) CH2CH2CH2- 74 S 1 3 H -CH (CONH2) ch2ch2ch2- 75 S 1 3 H -CH (CH2OH) ch2ch2ch2- 76 S 1 3 H -CH (CH2NH2) ch2ch2ch2- 77 S 1 3 H -CH (COOH) CH2CH2CH2CH2- 78 S 1 3 H -CH (CONH2) ch2ch2ch2ch2- 79 S 1 3 H -CH (CH2OH) ch2ch2ch2ch2- 80 S 1 3 H -CH (CH2NH2) ch2ch2ch2ch2- 81 S 1 3 H -CH2CH (COOH) ch2ch2ch2- 82 S 1 3 H -ch2ch (conh2) ch2ch2ch2- 83 S 1 3 H -ch2ch (CH2OH) ch2ch2ch2- 84 S 1 3 H -ch2ch (CH2NH2) ch2ch2ch2- 85 S 1 3 H -CH2CH2CH (COOH) ch2ch2- 86 S 1 3 H -ch2ch2ch (CONH2) ch2ch2- 87 S 1 3 H -ch2ch2ch (CH2OH) ch2ch2- 88 S 1 3 H -ch2ch2ch (CH2NH2) ch2ch2- 89 S 1 3 Me H H 90 S 1 3 Me H Me 91 s 1 3 Me H Et 92 s 1 3 Me H Pr 93 s 1 3 Me H iPr 31 ΡΕ1340757 94 S 1 3 Me H Bu 95 S 1 3 Me Me Me 96 S 1 3 Me Me Et 97 S 1 3 Me Me Pr 98 S 1 3 Me Me iPr 99 S 1 3 Me Me Bu 100 S 1 3 Me Et Et 101 S 1 3 Me Et Pr 102 S 1 3 Me Et iPr 103 S 1 3 Me Et Bu 104 S 1 3 Me Pr Pr 105 S 1 3 Me Pr iPr 106 S 1 3 Me Pr Bu 107 S 1 3 Me iPr iPr 108 S 1 3 Me iPr Bu 109 S 1 3 Me Bu Bu 110 s 1 3 Me H CH2CH2OH 111 s 1 3 Me Me CH2CH2OH 112 s 1 3 Me Et CH2CH2OH 113 s 1 3 Me Pr CH2CH2OH 114 s 1 3 Me iPr CH2CH2OH 115 s 1 3 Me H CH (CH3) CH2OH 116 s 1 3 Me H CH (CH2OH) CH2OH 117 s 1 3 Me H CH (CH2CH3) CH2OH 118 s 1 3 Me H CH(CH(CH3)2)CH2OH 119 s 1 3 Me H ch2ch2nh2 120 s 1 3 Me H CH(CH3)CH2NH2 121 s 1 3 Me H CH(CH2CH3)CH2NH2 32 ΡΕ1340757 122 S 1 3 Me H CH(CH(CH3)2)CH2NH2 123 S 1 3 Me H ch2cooh 124 S 1 3 Me H CH (CH3) COOH 125 S 1 3 Me H CH (CH2OH)COOH 126 S 1 3 Me H CH (CH2CH3) COOH 127 S 1 3 Me H CH (CH (CH3) 2) COOH 128 S 1 3 Me H CH2CONH2 129 S 1 3 Me H CH (CH3) CONH2 130 S 1 3 Me H CH (CH2OH) CONH2 131 S 1 3 Me H CH (CH2CH3) CONH2 132 S 1 3 Me H CH (CH (CH3) 2) CONH2 133 S 1 3 Me H cPr 134 S 1 3 Me H cBu 135 S 1 3 Me H cPen 136 S 1 3 Me H cHex 137 S 1 3 Me H 3-Azt 138 S 1 3 Me H 3-Pir 139 S 1 3 Me H 3-Pip 140 S 1 3 Me H 4-Pip 141 S 1 3 Me H 2-COOH-Ph 142 S 1 3 Me H 2-CONH2-Ph 143 S 1 3 Me H 3-COOH-Ph 144 S 1 3 Me H 3-CONH2-Ph 145 S 1 3 Me H 4-COOH-Ph 146 s 1 3 Me H 4-CONH2-Ph 147 s 1 3 Me -ch2ch2ch2- 148 s 1 3 Me -ch2ch2ch2ch2- 149 s 1 3 Me -ch2ch2ch2ch2ch2- 33 ΡΕ1340757
150 S 1 3 Me -CH2CH2OCH2CH2- 151 S 1 3 Me -CH2CH2SCH2CH2- 152 S 1 3 Me -CH2CH2NHCH2CH2- 153 S 1 3 Me -CH2CH (OH) CH2- 154 S 1 3 Me -CH2CH (OH) CH2CH2- 155 S 1 3 Me -CH2CH (OH) ch2ch2ch2- 156 S 1 3 Me -CH2CH2CH (OH) CH2CH2- 157 S 1 3 Me -CH (COOH) CH2CH2- 158 S 1 3 Me -CH (CONH2) CH2CH2- 159 S 1 3 Me -CH (CH2OH) CH2CH2- 160 S 1 3 Me -CH(CH2NH2)CH2CH2- 161 S 1 3 Me -CH (COOH) CH2CH2CH2- 162 S 1 3 Me -CH (CONH2) CH2CH2CH2- 163 S 1 3 Me -CH (CH2OH) CH2CH2CH2- 164 S 1 3 Me -CH (CH2NH2) CH2CH2CH2- 165 S 1 3 Me -CH (COOH) CH2CH2CH2CH2- 166 S 1 3 Me -CH (CONH2) CH2CH2CH2CH2- 167 S 1 3 Me -CH (CH2OH) CH2CH2CH2CH2- 168 S 1 3 Me -CH (CH2NH2) CH2CH2CH2CH2- 169 S 1 3 Me -CH2CH (COOH) CH2CH2CH2- 170 S 1 3 Me -CH2CH (CONH2) CH2CH2CH2- 171 S 1 3 Me -CH2CH (CH2OH) ch2ch2ch2- 172 S 1 3 Me -CH2CH (CH2NH2) CH2CH2CH2- 173 s 1 3 Me -CH2CH2CH (COOH) CH2CH2- 174 s 1 3 Me -CH2CH2CH (CONH2) CH2CH2- 175 s 1 3 Me -CH2CH2CH (CH2OH) CH2CH2- 176 s 1 3 Me -CH2CH2CH (CH2NH2) CH2CH2- 177 s 2 3 H Η H 34 ΡΕ1340757
178 S 2 3 H H Me 179 S 2 3 H H Et 180 S 2 3 H H Pr 181 S 2 3 H H iPr 182 S 2 3 H H Bu 183 S 2 3 H Me Me 184 S 2 3 H Me Et 185 S 2 3 H Me Pr 186 S 2 3 H Me iPr 187 S 2 3 H Me Bu 188 S 2 3 H Et Et 189 S 2 3 H Et Pr 190 S 2 3 H Et iPr 191 S 2 3 H Et Bu 192 S 2 3 H Pr Pr 193 S 2 3 H Pr iPr 194 S 2 3 H Pr Bu 195 S 2 3 H iPr iPr 196 S 2 3 H iPr Bu 197 S 2 3 H Bu Bu 198 S 2 3 H H CH2CH2OH 199 S 2 3 H Me CH2CH2OH 200 S 2 3 H Et CH2CH2OH 201 s 2 3 H Pr CH2CH2OH 202 s 2 3 H iPr CH2CH2OH 203 s 2 3 H H CH (CH3) CH2OH 204 s 2 3 H H CH (CH2OH) CH2OH 205 s 2 3 H H CH (CH2CH3) CH2OH 35 ΡΕ1340757 206 S 2 3 H H CH(CH(CH3)2)CH2OH 207 S 2 3 H H ch2ch2nh2 208 S 2 3 H H CH(CH3)CH2NH2 209 S 2 3 H H CH(CH2CH3)CH2NH2 210 S 2 3 H H CH(CH(CH3)2)CH2NH2 211 S 2 3 H H ch2cooh 212 S 2 3 H H CH (CH3) COOH 213 S 2 3 H H CH (CH2OH)COOH 214 S 2 3 H H CH (CH2CH3) COOH 215 S 2 3 H H CH (CH (CH3) 2) COOH 216 S 2 3 H H CH2CONH2 217 S 2 3 H H CH (CH3) CONH2 218 S 2 3 H H CH (CH2OH) CONH2 219 S 2 3 H H CH (CH2CH3) CONH2 220 S 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(nch3) ch2ch2 1075 S 2 3 H H CH(CH2 (CH3)2)CH2OH 1076 S 2 3 H H CH(CH2 (CH3)2)CH2NH2 1077 S 2 3 H H CH(CH2 (CH3)2)COOH 1078 S 2 3 H H CH(CH2 (CH3)2)CONH2 1079 S 2 3 H H CH (CH2OH) CH2NH2 1080 S 2 3 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2OH 1081 S 2 3 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2NH2 1082 S 2 3 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) COOH 1083 S 2 3 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CONH2 1084 S 2 3 H Me ch2ch2nh2 1085 S 2 3 H Me ch2cooh 1086 S 2 3 H Me ch2conh2 1087 s 2 3 H iPr ch2ch2nh2 1088 s 2 3 H iPr ch2cooh 1089 s 2 3 H iPr ch2conh2 1090 s 2 3 H CH2CH(NH2)CH2 1091 s 2 3 H ch2ch (OCH3) ch2 1092 s 2 3 H ch2ch (NCH3) ch2ch2 1093 s 3 4 H H CH(CH2 (CH3)2)CH2OH 1094 s 3 4 H H CH(CH2 (CH3)2)CH2NH2 1095 s 3 4 H H CH (CH2 (CH3) 2) COOH 1096 s 3 4 H H CH(CH2 (CH3)2)CONH2 1097 s 3 4 H H CH (CH2OH) CH2NH2 1098 s 3 4 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2OH 1099 s 3 4 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2NH2 1100 s 3 4 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) COOH 1101 s 3 4 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CONH2 67 ΡΕ1340757
1102 S 3 4 H Me CH2CH2NH2 1103 S 3 4 H Me ch2cooh 1104 S 3 4 H Me ch2conh2 1105 S 3 4 H iPr ch2ch2nh2 1106 S 3 4 H iPr ch2cooh 1107 S 3 4 H iPr ch2conh2 1108 S 3 4 H CH2CH(NH2)CH2 1109 S 3 4 H ch2ch (och3) ch2 1110 S 3 4 H ch2ch (nch3) ch2ch2 1111 0 1 3 H H CH(CH2 (CH3)2)CH2OH 1112 0 1 3 H H CH(CH2 (CH3)2)CH2NH2 1113 0 1 3 H H CH(CH2 (CH3)2)COOH 1114 0 1 3 H H CH(CH2 (CH3)2)CONH2 1115 0 1 3 H H CH (CH2OH) CH2NH2 1116 0 1 3 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2OH 1117 0 1 3 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2NH2 1118 0 1 3 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) COOH 1119 0 1 3 H H CH (CH (CH3) CH2CH3) CONH2 1120 0 1 3 H Me ch2ch2nh2 1121 0 1 3 H Me ch2cooh 1122 0 1 3 H Me ch2conh2 1123 0 1 3 H iPr ch2ch2nh2 1124 0 1 3 H iPr ch2cooh 1125 0 1 3 H iPr ch2conh2 1126 0 1 3 H CH2CH(NH2)CH2 1127 0 1 3 H ch2ch (OCH3) ch2 1128 0 1 3 H ch2ch (NCH3) ch2ch2 1129 0 2 3 H H CH(CH2 (CH3)2)CH2OH 68 ΡΕ1340757 1130 0 2 3 Η Η CH(CH2 (CH3)2)CH2NH2 1131 0 2 3 Η Η CH(CH2 (CH3)2)COOH 1132 0 2 3 Η Η CH(CH2 (CH3)2)CONH2 1133 0 2 3 Η Η CH (CH2OH) CH2NH2 1134 0 2 3 Η Η CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2OH 1135 0 2 3 Η Η CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2NH2 1136 0 2 3 Η Η CH (CH (CH3) CH2CH3) COOH 1137 0 2 3 Η Η CH (CH (CH3) CH2CH3) CONH2 1138 0 2 3 Η Me ch2ch2nh2 1139 0 2 3 Η Me ch2cooh 1140 0 2 3 Η Me ch2conh2 1141 0 2 3 Η iPr ch2ch2nh2 1142 0 2 3 Η iPr ch2cooh 1143 0 2 3 Η iPr ch2conh2 1144 0 2 3 Η CH2CH(NH2)CH2 1145 0 2 3 Η ch2ch (OCH3) ch2 1146 0 2 3 Η ch2ch (nch3) ch2ch2 1147 0 3 4 Η H CH(CH2 (CH3)2)CH2OH 1148 0 3 4 Η H CH(CH2 (CH3)2)CH2NH2 1149 0 3 4 Η H CH(CH2 (CH3)2)COOH 1150 0 3 4 Η H CH(CH2 (CH3)2)CONH2 1151 0 3 4 Η H CH (CH2OH) CH2NH2 1152 0 3 4 Η H CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2OH 1153 0 3 4 Η H CH (CH (CH3) CH2CH3) CH2NH2 1154 0 3 4 Η H CH (CH (CH3) CH2CH3) COOH 1155 0 3 4 Η H CH (CH (CH3) CH2CH3) CONH2 1156 0 3 4 Η Me ch2ch2nh2 1157 0 3 4 Η Me ch2cooh 69 ΡΕ1340757 1158 0 3 4 Η Me ch2conh2 1159 0 3 4 Η iPr ch2ch2nh2 1160 0 3 4 Η iPr ch2cooh 1161 0 3 4 Η iPr ch2conh2 1162 0 3 4 Η CH2CH(NH2)CH2 1163 0 3 4 Η ch2ch (OCH3) ch2 1164 0 3 4 Η ch2ch (nch3) ch2ch2 [TABELA 3]
(I-3)
Comp No. X n posição R2 1 S 1 3 H 2 s 1 3 Me 3 s 2 3 H 4 s 2 3 Me 5 s 3 4 H 6 s 3 4 Me 7 0 1 3 H 8 0 1 3 Me 9 0 2 3 H 10 0 2 3 Me 11 0 3 4 H 12 0 3 4 Me ΡΕ1340757 70 [TABELA 4]
(I-4)
Comp No. X n posição R2 R6 1 S 1 3 H H 2 S 1 3 H Me 3 S 1 3 H Et 4 S 1 3 H Pr 5 S 1 3 H iPr 6 S 1 3 H Bu 7 S 1 3 H cPr 8 S 1 3 H cBu 9 s 1 3 H cPen 10 s 1 3 H cHex 11 s 1 3 Me H 12 s 1 3 Me Me 13 s 1 3 Me Et 14 s 1 3 Me Pr 15 s 1 3 Me iPr 16 s 1 3 Me Bu 17 s 1 3 Me cPr 18 s 1 3 Me cBu 19 s 1 3 Me cPen 20 s 1 3 Me cHex 21 s 2 3 H H 71 ΡΕ1340757 22 S 2 3 H Me 23 S 2 3 H Et 24 S 2 3 H Pr 25 S 2 3 H iPr 26 S 2 3 H Bu 27 S 2 3 H cPr 28 S 2 3 H cBu 29 S 2 3 H cPen 30 S 2 3 H cHex 31 S 2 3 Me H 32 S 2 3 Me Me 33 S 2 3 Me Et 34 S 2 3 Me Pr 35 S 2 3 Me iPr 36 S 2 3 Me Bu 37 S 2 3 Me cPr 38 S 2 3 Me cBu 39 S 2 3 Me cPen 40 S 2 3 Me cHex 41 S 3 4 H H 42 S 3 4 H Me 43 S 3 4 H Et 44 S 3 4 H Pr 45 S 3 4 H iPr 46 S 3 4 H Bu 47 S 3 4 H cPr 48 S 3 4 H cBu 49 s 3 4 H cPen 72 ΡΕ1340757 50 S 3 4 H cHex 51 S 3 4 Me H 52 S 3 4 Me Me 53 S 3 4 Me Et 54 S 3 4 Me Pr 55 S 3 4 Me iPr 56 S 3 4 Me Bu 57 S 3 4 Me cPr 58 S 3 4 Me cBu 59 S 3 4 Me cPen 60 S 3 4 Me cHex 61 0 1 3 H H 62 0 1 3 H Me 63 0 1 3 H Et 64 0 1 3 H Pr 65 0 1 3 H iPr 66 0 1 3 H Bu 67 0 1 3 H cPr 68 0 1 3 H cBu 69 0 1 3 H cPen 70 0 1 3 H cHex 71 0 1 3 Me H 72 0 1 3 Me Me 73 0 1 3 Me Et 74 0 1 3 Me Pr 75 0 1 3 Me iPr 76 0 1 3 Me Bu 77 0 1 3 Me cPr 73 ΡΕ1340757 78 0 1 3 Me cBu 79 0 1 3 Me cPen 80 0 1 3 Me cHex 81 0 2 3 H H 82 0 2 3 H Me 83 0 2 3 H Et 84 0 2 3 H Pr 85 0 2 3 H iPr 86 0 2 3 H Bu 87 0 2 3 H cPr 88 0 2 3 H cBu 89 0 2 3 H cPen 90 0 2 3 H cHex 91 0 2 3 Me H 92 0 2 3 Me Me 93 0 2 3 Me Et 94 0 2 3 Me Pr 95 0 2 3 Me iPr 96 0 2 3 Me Bu 97 0 2 3 Me cPr 98 0 2 3 Me cBu 99 0 2 3 Me cPen 100 0 2 3 Me cHex 101 0 3 4 H H 102 0 3 4 H Me 103 0 3 4 H Et 104 0 3 4 H Pr 105 0 3 4 H iPr - 74 - ΡΕ1340757 106 0 3 4 H Bu 107 0 3 4 H cPr 108 0 3 4 H cBu 109 0 3 4 H cPen 110 0 3 4 H cHex 111 0 3 4 Me H 112 0 3 4 Me Me 113 0 3 4 Me Et 114 0 3 4 Me Pr 115 0 3 4 Me iPr 116 0 3 4 Me Bu 117 0 3 4 Me cPr 118 0 3 4 Me cBu 119 0 3 4 Me cPen 120 0 3 4 Me cHex [TABELA 5]
ch2nn R2 R7 R8 (I-5)
Comp No. X n posição R2 R7 R8 1 S 1 3 H H H 2 S 1 3 H H Me 3 S 1 3 H H Et 4 S 1 3 H H COCH3 5 s 1 3 H H COCH2CH3 75 ΡΕ1340757 6 S 1 3 H H COCH2CH2CH3 7 S 1 3 H H COPh 8 S 1 3 H H COOMe 9 S 1 3 H H COOEt 10 S 1 3 H Me Me 11 S 1 3 H Et Et 12 S 1 3 H Me COCH3 13 S 1 3 H Me COPh 14 S 1 3 H Me COOMe 15 S 1 3 H Me COOEt 16 S 1 3 Me H H 17 S 1 3 Me H Me 18 S 1 3 Me H Et 19 S 1 3 Me H COCH3 20 S 1 3 Me H COCH2CH3 21 S 1 3 Me H COCH2CH2CH3 22 S 1 3 Me H COPh 23 S 1 3 Me H COOMe 24 S 1 3 Me H COOEt 25 s 1 3 Me Me Me 26 s 1 3 Me Et Et 27 s 1 3 Me Me COCH3 28 s 1 3 Me Me COPh 29 s 1 3 Me Me COOMe 30 s 1 3 Me Me COOEt 31 s 2 3 H H H 32 s 2 3 H H Me 33 s 2 3 H H Et 76 ΡΕ1340757
34 S 2 3 H H COCH3 35 S 2 3 H H COCH2CH3 36 S 2 3 H H COCH2CH2CH3 37 S 2 3 H H COPh 38 S 2 3 H H COOMe 39 S 2 3 H H COOEt 40 S 2 3 H Me Me 41 S 2 3 H Et Et 42 S 2 3 H Me COCH3 43 S 2 3 H Me COPh 44 S 2 3 H Me COOMe 45 S 2 3 H Me COOEt 46 S 2 3 Me H H 47 S 2 3 Me H Me 48 S 2 3 Me H Et 49 S 2 3 Me H COCH3 50 S 2 3 Me H COCH2CH3 51 S 2 3 Me H COCH2CH2CH3 52 S 2 3 Me H COPh 53 S 2 3 Me H COOMe 54 S 2 3 Me H COOEt 55 S 2 3 Me Me Me 56 S 2 3 Me Et Et 57 S 2 3 Me Me COCH3 58 S 2 3 Me Me COPh 59 s 2 3 Me Me COOMe 60 s 2 3 Me Me COOEt 61 s 3 4 H H H 77 ΡΕ1340757 62 S 3 4 H H Me 63 S 3 4 H H Et 64 S 3 4 H H COCH3 65 S 3 4 H H COCH2CH3 66 S 3 4 H H COCH2CH2CH3 67 S 3 4 H H COPh 68 S 3 4 H H COOMe 69 S 3 4 H H COOEt 70 S 3 4 H Me Me 71 S 3 4 H Et Et 72 S 3 4 H Me COCH3 73 S 3 4 H Me COPh 74 S 3 4 H Me COOMe 75 S 3 4 H Me COOEt 76 S 3 4 Me H H 77 S 3 4 Me H Me 78 S 3 4 Me H Et 79 S 3 4 Me H COCH3 80 S 3 4 Me H COCH2CH3 81 S 3 4 Me H COCH2CH2CH3 82 S 3 4 Me H COPh 83 S 3 4 Me H COOMe 84 S 3 4 Me H COOEt 85 S 3 4 Me Me Me 86 S 3 4 Me Et Et 87 S 3 4 Me Me COCH3 88 S 3 4 Me Me COPh 89 s 3 4 Me Me COOMe 78 ΡΕ1340757 90 S 3 4 Me Me COOEt 91 0 1 3 H H H 92 0 1 3 H H Me 93 0 1 3 H H Et 94 0 1 3 H H COCH3 95 0 1 3 H H COCH2CH3 96 0 1 3 H H COCH2CH2CH3 97 0 1 3 H H COPh 98 0 1 3 H H COOMe 99 0 1 3 H H COOEt 100 0 1 3 H Me Me 101 0 1 3 H Et Et 102 0 1 3 H Me COCH3 103 0 1 3 H Me COPh 104 0 1 3 H Me COOMe 105 0 1 3 H Me COOEt 106 0 1 3 Me H H 107 0 1 3 Me H Me 108 0 1 3 Me H Et 109 0 1 3 Me H COCH3 110 0 1 3 Me H COCH2CH3 111 0 1 3 Me H COCH2CH2CH3 112 0 1 3 Me H COPh 113 0 1 3 Me H COOMe 114 0 1 3 Me H COOEt 115 0 1 3 Me Me Me 116 0 1 3 Me Et Et 117 0 1 3 Me Me COCH3 79 ΡΕ1340757 118 0 1 3 Me Me COPh 119 0 1 3 Me Me COOMe 120 0 1 3 Me Me COOEt 121 0 2 3 H H H 122 0 2 3 H H Me 123 0 2 3 H H Et 124 0 2 3 H H COCH3 125 0 2 3 H H COCH2CH3 126 0 2 3 H H COCH2CH2CH3 127 0 2 3 H H COPh 128 0 2 3 H H COOMe 129 0 2 3 H H COOEt 130 0 2 3 H Me Me 131 0 2 3 H Et Et 132 0 2 3 H Me COCH3 133 0 2 3 H Me COPh 134 0 2 3 H Me COOMe 135 0 2 3 H Me COOEt 136 0 2 3 Me H H 137 0 2 3 Me H Me 138 0 2 3 Me H Et 139 0 2 3 Me H COCH3 140 0 2 3 Me H COCH2CH3 141 0 2 3 Me H COCH2CH2CH3 142 0 2 3 Me H COPh 143 0 2 3 Me H COOMe 144 0 2 3 Me H COOEt 145 0 2 3 Me Me Me 80 ΡΕ1340757 146 0 2 3 Me Et Et 147 0 2 3 Me Me COCH3 148 0 2 3 Me Me COPh 149 0 2 3 Me Me COOMe 150 0 2 3 Me Me COOEt 151 0 3 4 H H H 152 0 3 4 H H Me 153 0 3 4 H H Et 154 0 3 4 H H COCH3 155 0 3 4 H H COCH2CH3 156 0 3 4 H H COCH2CH2CH3 157 0 3 4 H H COPh 158 0 3 4 H H COOMe 159 0 3 4 H H COOEt 160 0 3 4 H Me Me 161 0 3 4 H Et Et 162 0 3 4 H Me COCH3 163 0 3 4 H Me COPh 164 0 3 4 H Me COOMe 165 0 3 4 H Me COOEt 167 0 3 4 Me H H 168 0 3 4 Me H Me 169 0 3 4 Me H Et 170 0 3 4 Me H COCH3 171 0 3 4 Me H COCH2CH3 172 0 3 4 Me H COCH2CH2CH3 173 0 3 4 Me H COPh 174 0 3 4 Me H COOMe 81 ΡΕ1340757
175 0 3 4 Me H COOEt 176 0 3 4 Me Me Me 177 0 3 4 Me Et Et 178 0 3 4 Me Me COCH3 179 0 3 4 Me Me COPh 180 0 3 4 Me Me COOMe 181 0 3 4 Me Me COOEt 182 S 1 3 H H CO-cPr 183 S 1 3 H H CO-cBu 184 S 1 3 H H CO-cPen 185 S 1 3 H H CO-cHex 186 S 1 3 H H CO-2-tienilo 187 S 1 3 H H CO-2-furilo 188 S 1 3 H H CO-2-piridilo 189 S 1 3 H H CO-3-piridilo 190 S 1 3 H H CO-4-piridilo 191 S 1 3 H H S02-Ph 192 S 1 3 H H CO-Ph-2-COOH 193 S 1 3 H H CO-Ph-2-CONH2 194 S 1 3 H H CO-Ph-2-CH2OH 195 S 1 3 H H CO-Ph-2-CH2NH2 196 S 1 3 H H CO-Ph-3-COOH 197 s 1 3 H H CO-Ph-3-CONH2 198 s 1 3 H H CO-Ph-3-CH2OH 199 s 1 3 H H CO-Ph-3-CH2NH2 200 s 1 3 H H CO-Ph-4-COOH 201 s 1 3 H H CO-Ph-4-CONH2 202 s 1 3 H H CO-Ph-4-CH2OH 82 ΡΕ1340757 203 S 1 3 H H CO-Ph-4-CH2NH2 204 S 2 3 H H CO-cPr 205 S 2 3 H H CO-cBu 206 S 2 3 H H CO-cPen 207 S 2 3 H H CO-cHex 208 S 2 3 H H CO-2-tienilo 209 S 2 3 H H CO-2-furilo 210 S 2 3 H H CO-2-piridilo 211 S 2 3 H H CO-3-piridilo 212 S 2 3 H H CO-4-piridilo 213 S 2 3 H H S02-Ph 214 S 2 3 H H CO-Ph-2-COOH 215 S 2 3 H H CO-Ph-2-CONH2 216 S 2 3 H H CO-Ph-2-CH2OH 217 S 2 3 H H CO-Ph-2-CH2NH2 218 S 2 3 H H CO-Ph-3-COOH 219 S 2 3 H H CO-Ph-3-CONH2 220 S 2 3 H H CO-Ph-3-CH2OH 221 S 2 3 H H CO-Ph-3-CH2NH2 222 s 2 3 H H CO-Ph-4-COOH 223 s 2 3 H H CO-Ph-4-CONH2 224 s 2 3 H H CO-Ph-4-CH2OH 225 s 2 3 H H CO-Ph-4-CH2NH2 226 s 3 4 H H CO-cPr 227 s 3 4 H H CO-cBu 228 s 3 4 H H CO-cPen 229 s 3 4 H H CO-cHex 230 s 3 4 H H CO-2-tienilo 83 ΡΕ1340757
231 S 3 4 H H CO-2-furilo 232 S 3 4 H H CO-2-piridilo 233 S 3 4 H H CO-3-piridilo 234 S 3 4 H H CO-4-piridilo 235 S 3 4 H H S02-Ph 236 S 3 4 H H CO-Ph-2-COOH 237 S 3 4 H H CO-Ph-2-CONH2 238 S 3 4 H H CO-Ph-2-CH2OH 239 S 3 4 H H CO-Ph-2-CH2NH2 240 S 3 4 H H CO-Ph-3-COOH 241 S 3 4 H H CO-Ph-3-CONH2 242 S 3 4 H H CO-Ph-3-CH2OH 243 S 3 4 H H CO-Ph-3-CH2NH2 244 S 3 4 H H CO-Ph-4-COOH 245 S 3 4 H H CO-Ph-4-CONH2 246 S 3 4 H H CO-Ph-4-CH2OH 247 S 3 4 H H CO-Ph-4-CH2NH2 248 0 1 3 H H CO-cPr 249 0 1 3 H H CO-cBu 250 0 1 3 H H CO-cPen 251 0 1 3 H H CO-cHex 252 0 1 3 H H CO-2-tienilo 253 0 1 3 H H CO-2-furilo 254 0 1 3 H H CO-2-piridilo 255 0 1 3 H H CO-3-piridilo 256 0 1 3 H H CO-4-piridilo 257 0 1 3 H H S02-Ph 258 0 1 3 H H CO-Ph-2-COOH 84 ΡΕ1340757
259 0 1 3 Η Η CO-Ph-2-CONH2 260 0 1 3 Η Η CO-Ph-2-CH2OH 261 0 1 3 Η Η CO-Ph-2-CH2NH2 262 0 1 3 Η Η CO-Ph-3-COOH 263 0 1 3 Η Η CO-Ph-3-CONH2 264 0 1 3 Η Η CO-Ph-3-CH2OH 265 0 1 3 Η Η CO-Ph-3-CH2NH2 266 0 1 3 Η Η CO-Ph-4-COOH 267 0 1 3 Η Η CO-Ph-4-CONH2 268 0 1 3 Η Η CO-Ph-4-CH2OH 269 0 1 3 Η Η CO-Ph-4-CH2NH2 270 0 2 3 Η Η CO-cPr 271 0 2 3 Η Η CO-cBu 272 0 2 3 Η Η CO-cPen 273 0 2 3 Η Η CO-cHex 274 0 2 3 Η Η CO-2-tienilo 275 0 2 3 Η Η CO-2-furilo 276 0 2 3 Η Η CO-2-piridilo 277 0 2 3 Η Η CO-3-piridilo 278 0 2 3 Η Η CO-4-piridilo 279 0 2 3 Η Η S02-Ph 280 0 2 3 Η Η CO-Ph-2-COOH 281 0 2 3 Η Η CO-Ph-2-CONH2 282 0 2 3 Η Η CO-Ph-2-CH2OH 283 0 2 3 Η Η CO-Ph-2-CH2NH2 284 0 2 3 Η Η CO-Ph-3-COOH 285 0 2 3 Η Η CO-Ph-3-CONH2 286 0 2 3 Η Η CO-Ph-3-CH2OH 85 ΡΕ1340757 287 0 2 3 Η Η CO-Ph-3-CH2NH2 288 0 2 3 Η Η CO-Ph-4-COOH 289 0 2 3 Η Η CO-Ph-4-CONH2 290 0 2 3 Η Η CO-Ph-4-CH2OH 291 0 2 3 Η Η CO-Ph-4-CH2NH2 292 0 3 4 Η Η CO-cPr 293 0 3 4 Η Η CO-cBu 294 0 3 4 Η Η CO-cPen 295 0 3 4 Η Η CO-cHex 296 0 3 4 Η Η CO-2-tienilo 297 0 3 4 Η Η CO-2-furilo 298 0 3 4 Η Η CO-2-piridilo 299 0 3 4 Η Η CO-3-piridilo 300 0 3 4 Η Η CO-4-piridilo 301 0 3 4 Η Η S02-Ph 302 0 3 4 Η Η CO-Ph-2-COOH 303 0 3 4 Η Η CO-Ph-2-CONH2 304 0 3 4 Η Η CO-Ph-2-CH2OH 305 0 3 4 Η Η CO-Ph-2-CH2NH2 306 0 3 4 Η Η CO-Ph-3-COOH 307 0 3 4 Η Η CO-Ph-3-CONH2 308 0 3 4 Η Η CO-Ph-3-CH2OH 309 0 3 4 Η Η CO-Ph-3-CH2NH2 310 0 3 4 Η Η CO-Ph-4-COOH 311 0 3 4 Η Η CO-Ph-4-CONH2 312 0 3 4 Η Η CO-Ph-4-CH2OH 313 0 3 4 Η Η CO-Ph-4-CH2NH2 314 s 1 3 Η co-ch2ch2-co 86 ΡΕ1340757
315 S 1 3 H CO-1,2-Ph-CO 316 S 2 3 H C0-CH2CH2-C0 317 S 2 3 H CO-1,2-Ph-CO 318 S 3 4 H CO-CH2CH2-CO 319 S 3 4 H CO-1,2-Ph-CO 320 0 1 3 H CO-CH2CH2-CO 321 0 1 3 H CO-1,2-Ph-CO 322 0 2 3 H CO-CH2CH2-CO 323 0 2 3 H CO-1,2-Ph-CO 324 0 3 4 H CO-CH2CH2-CO 325 0 3 4 H CO-1,2-Ph-CO
Entre os compostos exemplificados nas tabelas anteriores, são preferidos os compostos com os números de composto de Exemplificação: 1, 2, 3, 13, 14, 15, 26, 27, 28, 38, 39, 40, 51, . 52, 53, 63, 64, 65, . 76, 77, 78, 88, 89, 90, 101 , 102, 103, 113, 114, • 115, 126, 127, 128, 138, 139 e 140 na Tabela 1, são preferidos os compostos com os números de composto de Exemplificação: 1, 2, 7, 22, 2 6, 31, CM OO 34 35, 39, 4 0, 44 , 49, 50, 51, 52, 59 , 62, 63, 64, 65 , 89, 90 LO σ\ 110, 114, 119, 120, 122, 123, 127, 128, 132, 137, 138 139, 140, 147, 150, 151, 152, 153, 177, 178, 183, 198, 202 207, 208, 210, 211, 215, 216, 220, 225, 226, 227, 228, 235 238, 239, 240, 241, 265, 266, 271, 286, 290, 295, 296, 298 299, 303, 304, 308, 313, 314, 315, 316, 323, 326, 327, 328 87 ΡΕ1340757 329, 353, 354, 359, 374, 378, 383, 384, 386, 387, 391, 392, 396, 401, 402, 403, 404, 411, 414, 415, 416, 417, 441, 442, 447, 462, 466, 471, 472, 474, 475, 479, 480, 484, 489, 490, 491, 492, 499, 502, 503, 504, 505, 529, 530, 535, 550, 554, 559, 560, 562, 563, 567, 568, 572, 577, 578, 579, 580, 587, 590, 591, 592, 593, 617, 618, 623, 638, 640, 647, 648, 650, 651, 655, 656, 660, 665, 6 6 6, 675, 678, 679, 680, 681, 705, 706, 711, 726, 730, 735, 753, 754, 755, 756, 763, 766, 767, 768, 769, 793, 794, 799, 814, 818, 823, 824, 826, 827, 831, 832, 836, 841, 851, 854, 855, 856, 857, 881, 882, 887, 902, 906, 911, 912, 914, 915, 919, 920, 924, 929, 930, 931, 932, 939, 942, 943, 944 , 945 i, 969, 970, 975, 990, 994, 999, 1000, 1002, 1003, 1007, 1008, 1012, 1017, 1018, 1019, 1020, 1027, 1030, 1031, 1032, 1033, 1057, 1058, 1059, 1060, 1063, 1064, 1065, 1066, 1067, 1068, 1069, 1070, 1071, 1072, 1073, 1074, 1075, 1076, 1077, 1078, 1081, 1082, 1083, 1084, 1085, 1086, 1087, 1088, 1089, 1090, 1091, 1092, 1093, 1094, 1095, 1096, 1099, 1100, 1101, 1102, 1103, 1104, 1105, 1106, 1107, 1108, 1109, 1110, 1111, 1112, 1113, 1114, 1117, 1118, 1119, 1120, 1121, 1122, 1123, 1124, 1125, 1126, 1127, 1128, 1129, 1130, 1131, 1132, 1135, 1136, 1137, 1138, 1139, 1140, 1141, 1142, 1143, 1144, 1145, 1146, 1147, 1148, 1149, 1150, 1153, 1154, 1155, 1156, 1157, 1158, 1159, 1160, 1161, 1162, 1163 e 1164 na Tabela 2, são preferidos os compostos com os números de composto de Exemplificação: 1, 3, 5, 7, 9 e 11 na Tabela 3, ΡΕ1340757 são preferidos os compostos com os números de composto de Exemplificação: 1, 2, 11, 12, 21, 22, 31, 32, 41, 42, 51, 52, 61, 62, 71, 72, 81, 82, 91, 92, 101, 102, 111 e 112 na Tabela 4, e são preferidoí 3 OS compostos com os números de composto de Exempli ficação: 1, 2, 4, 7, 8, 10, 12 , 13, 14, 16, 17, 19 , 22 , 23, 25, 27, 28 , 29 , 31, 32, 34, 37 , 38, 40, 42, 43, 44 , 46 , 47, 49, 52, 53 , 55 , 57, 58, 59, 61 , 62, 64, 67, 68, 70 , 72 , 73, 74, 76, 77 , 79 , 82, 83, 85, 87 , 88, 89, 91, 92, 94 , 97 , 98, 100, 102, 103, 104, 106, 107, 109, 112, 113, 115, 117, 118, 119, 121, 122, 124, 127, 128, 130, 132, 133, 134, 136, 137, 139, 142, 143, 145, 147, 148, 149, 151, 152, 154, 157, 158, 160, 162, 163, 164, 167, 168, 170, 173, 174, 176, 178, 179, 180, 182, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325 e 326 na Tabela 5. 89 ΡΕ1340757
Destes, são mais preferidos os compostos com os números de composto de Exemplificação: 3, 28, 53, 78, 103 e 128 na Tabela 1, são mais preferidos os compostos com os números de composto de Exemplifi cação : 1, 2 , 7, 26, 31, 32 , 34 , 35 39, 40, 44, 49 , 50, 51, 52, 59, 62 , 63, 64, . 65 r 529, 530 535, 554, 559, 560, 562, 563, 567, 568, 572, 577 r 578, 579 580, 587, 590, 591, 592, 593, 1057, 1058 , io 59, 10 60, 1063 1069 , 1070, 1071, 1072, 1073, 1074, 1111 , 11 12, 11 13, 1114 1117 , 1123, 112 !4, 1125, 1126, 1127 e 112 8 na Tabel a 2, são mais preferidos os compostos com os números de composto de Exemplificação: 1, 3, 7 e 11 na Tabela 3, são mais preferidos os compostos com os números de composto de Exemplificação: 1, 2, 21, 22, 41, 42, 61, 62, 81, 82, 101 e 102 na Tabela 4, e são mais preferidos os compostos com os números de compo sto de Exemplif: icação : 1, 2, 4 , 7, 8, 91 , 92, . 94 97, 98, 182, 1 83, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191 192 , 193 , 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203 248 , 249 , 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259 260 , 261 , 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 314, 315 320 e 321 na Tabela 5. 90 ΡΕ1340757
Os compostos mais preferidos estão listados a seguir: Ácido (lR,5S,6S)-2-[l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il) azeti-din-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il) azeti-din-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-l,3-oxazol-2-il)aze-tidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2- il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-l, 3-oxazol-2- il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-[l-(4-azetidinocarbonil-l, 3-tiazol-2- il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, 91 ΡΕ1340757 Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-aminoazetidino)carbonil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-aminoazetidino)carbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-hidroxiazetidino)carbonil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-hidroxiazetidino)carbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-oxa-zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, 92 ΡΕ1340757 Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxa zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR, 5S,6S)-2-{l-[4-((3 S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil) 1.3- tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil) 1, 3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil) 1.3- tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil) 1.3- oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazino-l-carbonil)-1,3-tia zol-2-il]azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazino-l-carbonil)-1,3-oxa zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(2-amino-etilcarbamoil)-1,3-tia zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(2-amino-etilcarbamoil)-1,3-oxa zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((lS)-l-aminometil-2-metil-pro pilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, 93 ΡΕ1340757 Ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-aminometil-2-metil-propil-carbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-amino-etil)-N-isopropil-car-bamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-amino-etil)-N-isopropil-car-bamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-hidroxi-etil)-N-isopropil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[N-(2-hidroxi-etil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-[l-(4-aminometil-l,3-tiazol-2-il)azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-l,3-oxazol-2-il)azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(benzoilaminometil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(benzenossulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, 94 ΡΕ1340757 Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(benzenossulfonilaminometil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(tiofeno-2-carbonilamino)metil]- 1.3- tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(tiofeno-2-carbonilamino)metil]- 1.3- oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(furano-2-carbonilamino)metil]- 1.3- tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, e Ácido (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[ (furano-2-carbonilamino)metil]- 1.3- oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico.
[Modos para Levar a Cabo a Invenção] 0 derivado 1-metilcarbapenem representado pela fórmula (I) da presente invenção pode ser preparado pelos métodos descritos no Processo A e Processo B a seguir.
[Processo A]
Processo A é um método para a preparação de um composto de fórmula (I) por meio de reacção de um derivado carbapenem de fórmula (II) com um composto mercapto de fórmula (III) e subsequentemente levando a cabo uma reacção de desprotecção. ΡΕ1340757 95
(IV) (i)
Nas fórmulas anteriores, R1, R2, X e n têm os mesmos significados que os anteriormente definidos; L1 representa um grupo para ser eliminado; P1 representa um grupo protector de um grupo carboxilo; e R2p representa R1 que pode ter um grupo protector.
Exemplos do "grupo protector de um grupo carboxilo" adequado como P1 incluem um grupo benzilo que pode ter um substituinte (o substituinte é nitro, metilo, cloro ou metoxi) tal como benzilo, 4-metoxibenzilo, 4-nitro-benzilo ou 2-nitrobenzilo; um grupo benzidrilo; um grupo alilo que pode ter um substituinte na posição 2 (o substi- 96 ΡΕ1340757 tuinte é cloro ou metilo) tal como alilo, 2-cloroalilo ou 2-metilalilo; e um grupo formador do éster farmacologi-camente aceitável anterior, dos quais é preferido um grupo benzilo que pode ter um substituinte (particularmente um grupo 4-nitrobenzilo).
Exemplos do "grupo para ser eliminado" como L1 incluem um grupo de fórmula -0R11 ou -S(0)R12.
Exemplos do grupo R11 incluem um grupo alcano Ci-C4-sulfonilo tal como a metanossulfonilo, trifluorometa-nossulfonilo, etanossulfonilo, propanossulfonilo, isopropa-nossulfonilo ou butanossulfonilo grupo; um grupo aril Ce~ Cio-sulfonilo tais como fenilsulfonilo, tolilsulfonilo ou naftilsulfonilo; um grupo di-alquil Ci-C6_fosforilo tais como dimetilfosforilo, dietilfosforilo, dipropilfosforilo, diisopropilfosforilo, dibutilfosforilo, dipentilfosforilo ou di-hexilfosforilo; ou um grupo di-aril C6_Cio_fosforilo tal como difenilfosforilo ou ditolilfosforilo, dos quais é preferido um grupo difenilfosforilo.
Exemplos do grupo R12 incluem um grupo alquilo Ci~ C4 tal como metilo, etilo, propilo ou isopropilo; um grupo halogeno-alquilo Ci~C4 tal como fluorometilo, clorometilo, fluoroetilo, cloroetilo, fluoropropilo, difluorometilo, difluoroetilo, dicloroetilo, trifluorometilo ou trifluo-roetilo; um grupo 2-acetilaminoetilo; um grupo 2-acetil-aminovinilo; ou um grupo arilo C6-C10 (o grupo arilo pode ter desde 1 até 3 substituintes, que podem ser iguais ou 97 ΡΕ1340757 diferentes, e os substituintes podem compreender um átomo de halogéneo tal como flúor, cloro ou bromo; um grupo alquilo C1-C4 tal como metilo, etilo, propilo ou isopro-pilo; um grupo alcoxi C1-C4 tal como metoxi, etoxi, propoxi ou isopropoxi; um grupo (alcoxi C1-C4) carbonilo tal como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo ou t-butoxicarbonilo; car-bamoílo, um grupo mono- ou di-(alquil C1-C4) carbamoilo; um grupo nitro; um grupo hidroxilo; ou um grupo ciano) tal como fenilo ou naftilo que podem ter substituintes; ou um grupo heteroarilo que pode ter um ou dois átomos de azoto (o grupo heteroarilo pode ter desde um até três substituintes, que podem ser iguais ou diferentes, e os substituintes podem compreender um átomo de halogéneo tal como flúor, cloro ou bromo; um grupo alquilo C1-C4 tal como metilo, etilo, propilo ou isopropilo; um grupo alcoxi C1-C4 tal como metoxi, etoxi, propoxi ou isopropoxi; um grupo (alcoxi C1-C4)carbonilo tal como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo ou t-butoxicarbonilo; carbamoilo ou um grupo mono- ou di-(alquil C1-C4) carbamoilo; um grupo nitro; um grupo hidroxilo; ou um grupo ciano) tal como piridilo ou pirimidinilo que podem ter substituintes.
Exemplos do "grupo protector de um grupo hidroxilo" incluído na definição de Rxp incluem um grupo ben-ziloxicarbonilo que pode estar substituído (o substituinte pode compreender nitro, metilo, cloro ou metoxi) tal como benziloxicarbonilo, 4-nitrobenziloxicarbonilo, 4-cloro-benziloxicarbonilo ou 4-metoxibenziloxicarbonilo; um grupo aliloxicarbonilo que pode estar substituído na posição 2 (o 98 ΡΕ1340757 substituinte pode compreender cloro ou metilo) tal como aliloxicarbonilo, 2-cloroaliloxicarbonilo e 2-metilaliloxi-carbonilo; um grupo tri-(alquil Ci-C4)sililo tal como trimetilsililo, trietilsililo ou t-butildimetilsililo; e um grupo formador do éster farmacologicamente aceitável anterior, do qual é preferido um grupo tri-(alquil Ci~ C4)sililo (particularmente um grupo t-butildimetilsililo).
Exemplos do "grupo protector de um grupo amino" incluido em Rxp incluem um grupo aliloxicarbonilo que pode estar substituído na posição 2 (o substituinte pode compreender cloro ou metilo) tal como aliloxicarbonilo, 2-cloroaliloxicarbonilo e 2-metilaliloxicarbonilo; e um grupo benziloxicarbonilo que pode estar substituído (o substituinte podem compreender metilo, metoxi, cloro ou nitro) tal como benziloxicarbonilo, 4-metilbenziloxicarbonilo, 4-metoxibenziloxicarbonilo, 4-clorobenziloxicarbonilo ou 4-nitrobenziloxicarbonilo, dos quais é preferido um grupo aliloxicarbonilo ou um grupo 4-nitrobenziloxicarbonilo e é mais preferido um grupo 4-nitrobenziloxicarbonilo. O grupo protector utilizado como P1 anterior pode ser empregue como "grupo protector de um grupo carboxilo" incluído em R1p. O presente processo é um processo no qual um composto de fórmula (IV) é preparado por meio de reacção de um composto de fórmula (II) com um composto de fórmula (III) na presença de uma base (Passo Al) e um composto de 99 ΡΕ1340757 fórmula (I) é subsequentemente preparado por meio de remoção de quaisquer qrupos protectores (Passo A2). No caso onde L1 representa um grupo representado pela fórmula: -OR11, o composto de fórmula (II) que é utilizado como um material de partida é preparado através de um método descrito em D.H. Shih et al., Heterocycles 21, 29 (1984) ou um método análogo a ele. No caso onde L1 representa um 12 grupo representado pela fórmula: -S(0)R , o composto de partida (II) é preparado através de um método descrito em Pedido de Patente Japonesa (Kokai) No. Sho 62-30781 ou um método análogo a ele. Cada passo será descrito a seguir. (Passo Al)
Passo Al é um passo para preparar um composto de fórmula (IV), que é realizado por meio de reacção de um composto de fórmula (II) com um derivado mercaptano de fórmula (III) na presença de uma base num solvente inerte. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos de solventes adequados incluem hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno, 1,2-dicloroetano ou clorofórmio; nitrilos tais como acetonitrilo; amidas tais como N,N-dimetilformamida ou N,N-dimetilacetamida; ésteres tais como acetato de etilo ou acetato de metilo; e éteres tais como éter dietilico, tetra-hidrofurano ou dioxano, dos quais é preferido 100 ΡΕ1340757 acetonitrilo, N,N-dimetilformamida ou tetra-hidrofurano e é particularmente preferido acetonitrilo.
Exemplo preferidos da base a ser empregue incluem aminas orgânicas tais como trietilamina, diisopropil-etilamina, piridina ou dimetilaminopiridina; ou bases inorgânicas tais como carbonato de potássio, carbonato de sódio ou hidrogenocarbonato de sódio, das quais são preferidas aminas orgânicas (particularmente diisopropil-etilamina). A reacção é habitualmente levada a cabo a um temperatura desde -20°C até 40°C (preferencialmente desde -10°C até 20°C) . 0 tempo de reacção varia desde 30 minutos até 108 horas (preferencialmente desde uma hora até 18 horas) .
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado de fórmula (IV), que é o produto do presente passo, é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos; por exemplo, adição à mistura de reacção ou ao resíduo obtido por separação do solvente por destilação a partir da mistura de reacção dum solvente orgânico que é não é miscível com água, seguido de lavagem com água e separação do solvente por destilação. Se necessário, o composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado através de meios conhecidos, por exemplo, por recristalização, reprecipitação ou cromato-grafia. É também possível submeter o composto desejado de 101 ΡΕ1340757 fórmula (IV) ao passo subsequente seguinte sem isolamento, sem isolamento. (Passo A2)
Passo A2 é um passo para converter um composto de fórmula (IV) num composto de fórmula (I), que é realizado através de remoção de quaisquer grupos protectores contidos no composto de fórmula (IV).
Embora o método para a remoção de um grupo protector dependa da natureza do grupo protector, ele é realizado através de um método habitualmente empregue no campo da química orgânica sintética (por exemplo, um método descrito em Protective Grupos in Organic Synthesis, Second Edition, John Wiley & Sons, Inc. 1991 escrito por T.W. Greene e P.G.M. Wuts). (1) Quando o grupo protector é um grupo benzilo que pode ter um substituinte, um grupo benzidrilo ou um grupo benziloxicarbonilo que pode ter um substituinte, estes grupos protectores podem ser removidos por meio de reacção com hidrogénio na presença de um agente de redução catalítico num solvente.
Exemplos do agente de redução catalítico a ser empregue incluem um catalisador de paládio-carbono, um catalisador de platina ou um catalisador de ródio-carbono, dos quais é preferido um catalisador de paládio-carbono. 102 ΡΕ1340757 Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos preferidos de solventes adequados incluem álcoois tais como metanol ou etanol; éteres tais como tetra-hidrofurano ou dioxano; e uma mistura destes solventes orgânicos e água, dos quais é preferida uma mistura de tetra-hidrofurano e água. A temperatura de reacção habitualmente varia desde 0°C até 50°C (preferencialmente desde 10°C até 40°C). Embora o tempo de reacção dependa do composto de partida e da natureza do catalisador, ele habitualmente varia desde 5 minutos até 12 horas (preferencialmente desde 30 minutos até 4 horas) .
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido por separação dos insolúveis por filtração, tais como o catalisador, a partir da mistura de reacção e, em seguida, separação do solvente por destilação. Se necessário, o composto deste modo obtido pode ser purificado por meio de procedimentos convencionais tais como recrista-lização, cromatografia preparativa de camada fina ou cromatografia de coluna. (2) Quando o grupo protector é um grupo alilo que 103 ΡΕ1340757 pode estar substituído ou um grupo aliloxicarbonilo que pode estar substituído, estes grupos protectores podem ser removidos por meio de reacção com um hidreto de tri-(alquil C1-C6-) estanho e um sal de metal alcalino de ácido carboxílico orgânico na presença de um composto de paládio num solvente. Podem ser adicionadas bases orgânicas ou substâncias orgânicas para a captura de grupos alilo. 0 composto de paládio pode preferencialmente compreender cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio ou tetraquis(trifenilfosfina)paládio. O hidreto de trialquil-estanho pode preferencialmente compreender hidreto de tributilestanho. O sal de metal alcalino de ácido carboxílico orgânico pode preferencialmente compreender 2-etil-hexanoato de potássio ou 2-etil-hexanoato de sódio. A base orgânica para a captura de grupos alilo pode preferencialmente compreender morfolina e a substância orgânica para a captura de grupos alilo pode preferencialmente compreender dimedona.
Combinações preferíveis de agentes de despro-tecção podem incluir uma combinação de cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio e hidreto de tributilestanho ou uma combinação de tetraquis(trifenilfosfina)paládio e 2-etil-hexanoato de potássio. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa 104 ΡΕ1340757 certa extensão. Exemplos de solventes adequados incluem hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno, clorofórmio ou 1,2-dicloroetano; ésteres tais como acetato de etilo; éteres tais como tetra-hidrofurano, dioxano ou 1,2-dimetoxietano; nitrilos tais como acetonitrilo; álcoois tais como metanol, etanol ou propanol; água; ou uma mistura destes solventes, dos quais é preferido cloreto de metileno, acetato de etilo ou uma sua mistura solvente.
Embora não exista limitação particular na temperatura de reacção, a reacção é habitualmente levada a cabo a um temperatura desde -20°C até 100°C (preferencialmente desde 0°C até 60°C). 0 tempo de reacção habitualmente varia desde 30 minutos até 48 horas (preferencialmente desde 30 minutos até 12 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido por separação dos insolúveis precipitados por filtração a partir da mistura de reacção e, em seguida, separação do solvente por destilação. Se necessário, o composto deste modo obtido pode ser purificado por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, cromatografia preparativa de camada fina ou cromatografia de coluna. (3) Quando o grupo protector um grupo protector à base de sililo, este grupo protector pode ser removido por 105 ΡΕ1340757 meio de tratamento com fonte de anião fluoreto tal como fluoreto de tetrabutilamónio, ácido fluoridrico, ácido fluoridrico-piridina ou fluoreto de potássio, ou tratamento com um ácido orgânico tal como ácido acético, ácido metanossulfónico, ácido para-toluenossulfónico, ácido trifluoroacético ou ácido trifluorometanossulfónico, ou um ácido inorgânico tal como ácido cloridrico, num solvente.
Quando o grupo protector é removido através de um anião fluoreto, a reacção algumas vezes progride sob condições suaves por meio da adição de um ácido orgânico tal como ácido fórmico, ácido acético ou ácido propiónico. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplo preferidos de solventes adequados incluem éteres tais como éter dietilico, éter diisopro-pílico, tetra-hidrofurano, dioxano, dimetoxietano ou éter dimetilico de dietilenoglicol; nitrilos tais como acetonitrilo ou isobutironitrilo; água; ácido orgânicos tais como ácido acético; e uma mistura destes solventes. A temperatura de reacção habitualmente varia desde 0°C até 100°C (preferencialmente desde 10°C até 30°C). Embora não exista limitação particular no tempo de reacção, ele habitualmente varia desde uma hora até 24 horas (preferencialmente desde uma hora até 4 horas). 106 ΡΕ1340757
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos, por exemplo, adição à mistura de reacção ou ao residuo obtido por separação do solvente por destilação a partir da mistura de reacção, de um solvente orgânico que é não é miscivel com água, seguido de lavagem com água e separação do solvente por destilação. Se necessário, o composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado através de meios conhecidos, por exemplo, recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (4) Quando o grupo protector é um grupo formador de um éster farmacologicamente aceitável de um grupo carboxilo ou de um grupo hidroxilo, estes grupos protec-tores são removidos por meio de reacção com eles de uma hidrolase em água ou numa mistura de água e um solvente orgânico.
Exemplos preferidos do solvente orgânico misturado com água incluem um éter ou álcool miscivel com água tal como tetra-hidrofurano, dioxano, metanol, etanol ou propanol. É preferido que um sal de metal alcalino tal como fosfato de sódio, acetato de sódio ou hidrogenocarbonato de sódio seja adicionado a água ou a uma mistura de água e um solvente orgânico ou o pH é mantido na gama de desde 6 até 8 utilizando uma solução tampão de pH tal como uma solução tampão de ácido fosfórico. 107 ΡΕ1340757 Não existe limitação na natureza da hidrolase desde que ela possa hidrolisar uma ligação éster. Exemplos de tal hidrolase incluem esterase derivada de figado de porco. 0 tempo de reacção habitualmente varia desde 10 minutos até 8 horas (preferencialmente desde 30 minutos até 2 horas) e a temperatura de reacção desde 10°C até 50°C (preferencialmente desde 30°C até 40°C).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado pode ser isolado e purificado por meio de croma-tografia de permuta iónica, cromatografia de coluna de fase reversa, reprecipitação, recristalização, etc.
Quando o composto de fórmula (IV) contém dois ou mais tipos de grupos protectores, o composto desejado de fórmula (I) pode ser obtido levando a cabo, sucessivamente, as reacções de desprotecção anteriores em combinação. Quando o éster farmacologicamente aceitável do composto de fórmula (I) é desejado, não é necessário remover o grupo formador do éster farmacologicamente aceitável como grupo protector. O composto de fórmula (I) deste modo obtido pode ser convertido num sal ou éster farmacologicamente aceitável, se necessário, de acordo com um método ou uma tecnologia conhecida no campo da quimica médica, particularmente a dos antibióticos à base de β-lactamas. 108 ΡΕ1340757
Os ésteres farmacologicamente aceitáveis do grupo carboxilo do composto de fórmula (I) podem ser preparados por meio de reacção de um composto halogenado correspondente ao resíduo éster desejado do composto de fórmula (I) na presença de uma base num solvente.
Exemplos do composto halogenado a ser empregue incluem um cloreto, um brometo ou um iodeto, dos quais é preferido um iodeto. Quando um cloreto ou um brometo é utilizado, a reacção pode ser promovida através da adição de uma quantidade catalítica de iodeto de sódio à solução de reacção.
Exemplos da base a ser empregue incluem aminas orgânicas tais como trietilamina, diisopropiletilamina, 4-dimetilaminopiridina ou piridina; e carbonatos de metal alcalino tais como carbonato de potássio, carbonato de sódio ou hidrogenocarbonato de sódio, das quais são preferidas aminas orgânicas (particularmente 4-dimetilamino-piridina). Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem nitrilos tais como acetonitrilo; amidas tais como N,N-dimetilformamida; e hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno, dos quais são preferidas amidas (particularmente dimetil-acetamida) ou nitrilos (particularmente acetonitrilo). 109 ΡΕ1340757 A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 50°C (preferencialmente desde -10°C até 20°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 horas até 108 horas (preferencialmente desde uma hora até 24 horas) . 0 composto previamente isolado sob a forma de um sal por meio de reacção de o composto de fórmula (I) com a base pode também ser feito reagir com os haletos tal como mencionado anteriormente.
Alternativamente, o composto de fórmula (I) pode ser preparado por meio de reacção de um álcool correspondente até ao desejado residuo éster no composto de fórmula (I) na presença de um agente de condensação e uma base.
Exemplos do agente de condensação incluem reagentes de Mitsunobu tais como azodicarboxilato de dietilo; agentes de condensação à base de éster fosfórico tal como difenilfosforilazida; agentes de condensação à base de carbodiimida tais como diciclo-hexilcarbodiimida ou 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida; e agentes de condensação à base de ónios tal como iodeto de 2-cloro-l-metilpiridinio.
Exemplo da base a ser empregue incluem aminas orgânicas tais como trietilamina, tributilamina, diisopro-piletilamina ou 4-dimetilaminopiridina. 110 ΡΕ1340757
Exemplos de outros aditivos incluem fosfinas tais como trifenilfosfina e tributilfosfina; e álcoois para a formação de um éster activo tal como 1-hidroxibenzo- triazole.
Exemplos do solvente incluem hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano; amidas tais como N,N-dimetilformamida; nitrilos tais como acetonitrilo; e éteres tais como tetra-hidrofurano.
Exemplos de uma combinação preferível destes incluem azodicarboxilato de dietilo e trifenilfosfina; iodeto de 2-cloro-l-metilpiridínio e tributilamina ou trietilamina; l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida e 4-dimetilaminopiridina ou 1-hidroxibenzotriazole.
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos, por exemplo, adição à mistura de reacção, ou ao residuo obtido por separação do solvente por destilação a partir da mistura de reacção, de um solvente orgânico que é não é miscivel com água, seguido de lavagem com água e separação do solvente por destilação. Se necessário, o composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado através de meios conhecidos, por exemplo, recristalização, reprecipitação ou cromatografia. ΡΕ1340757 111 [Processo B] 0 Processo B é um método para preparar um composto de fórmula (III) utilizado como a material de partida no Processo A.
No esquema anterior:
Rxp, R2, X e n têm os mesmos significados que os anteriormente definidos; P2 representa um grupo protector de um grupo carboxilo; exemplos de P2 incluem um grupo alquilo C1-C4 tal como metilo, etilo, propilo ou butilo; e um grupo benzilo que pode estar substituído tal como benzilo ou 4-metoxibenzilo, 112 ΡΕ1340757 dos quais é preferido um grupo alquilo C1-C4 e é particularmente preferido um grupo etilo; P3 representa um grupo protector de um grupo hidroxilo; exemplos de P3 incluem um grupo protector à base de sililo tal como trimetilsililo, trietilsililo, t-butildimetilsi-lilo ou t-butildifenilsililo, dos quais é preferido um grupo t-butildifenilsililo; L2 representa um grupo separável; exemplos de L2 incluem um átomo de halogéneo tal como um átomo de cloro, um átomo de bromo ou um átomo de iodo; um grupo alquil C1-C4-sulfoniloxi que pode estar substituído por flúor ou um grupo benzenossulfoniloxi que pode estar substituído por alquilo tal como metanossulfoniloxi, etanossulfoniloxi, trifluorometanossulfoniloxi, benzenossulfoniloxi ou tolue-nossulfoniloxi, dos quais é preferido um grupo alquil Ci-C4-sulfoniloxi que pode estar substituído por flúor; e P4 representa um grupo protector de um grupo mercapto; exemplos de P4 incluem um grupo C1-C4 alcanoilo tal como formilo, acetilo, propionilo ou butirilo e um grupo ben-zoilo que pode estar substituído tal como benzoilo, tolu-oilo ou anisoilo, dos quais é preferido um grupo alcanoilo C1-C4 (particularmente um grupo acetilo). (Passo Bl) O Passo Bl é um passo para a preparação de um composto de fórmula (VI) através da introdução de um grupo amida representado pela fórmula C(=X)NH2 no átomo de azoto de um composto de fórmula (V). 113 ΡΕ1340757 (1) Este passo é realizado por meio de reacção de um cianato ou tiocianato com o composto de fórmula (V) num solvente. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico; hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano; e uma mistura destes solventes e água, dos quais é preferida uma mistura de um éter e água (particularmente uma mistura de tetra-hidrofurano e água).
Exemplos do sal de ácido ciânico ou ácido tiociânico incluem sais de metais alcalinos tais como um sal de sódio ou um sal de potássio; um sal de amónio; ou sais de amónio orgânicos tais como um sal de trietilamónio, dos quais são preferidos sais de metais alcalinos (particularmente um sal de potássio).
Podem também ser empregues ácidos a fim de converter um cianato ou um tiocianato no ácido correspondente no sistema. Exemplos de tal ácido incluem ácidos orgânicos tal como ácido acético e ácidos minerais tal como ácido clorídrico, dos quais é preferido ácido acético ou ácido clorídrico. 114 ΡΕ1340757 A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 150°C (preferencialmente desde -10°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde 1 até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscível com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (2) Alternativamente, este passo pode ser realizado através do processo seguinte. O presente método compreende um a reacção para a preparação do composto que se segue de fórmula (XIII) a partir de composto de fórmula (V) e uma reacção para a preparação de um composto de fórmula (VI) a partir do composto de fórmula (XIII). HO. NH—COOR9 Vín^x (XIII)
Na fórmula anterior X e n têm os mesmos 115 ΡΕ1340757 significados que os anteriormente definidos e R9 representa um grupo alquilo C1-C4 (preferencialmente um grupo etilo). 0 passo para a preparação de um composto (XIII) a partir de um composto (V) é realizado por meio de reacção de um composto representado pela fórmula X=C=N-C00R9 (em que X e R9 têm os mesmos significados que os anteriormente definidos) sobre o composto de fórmula (V) num solvente. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico; hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano; e uma mistura destes solventes e água, dos quais é preferido um éter ou uma mistura de um éter e água (particularmente tetra-hidrofurano ou uma mistura de tetra-hidrofurano e água). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 150°C (preferencialmente desde -10°C até 50°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel 116 ΡΕ1340757 com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. 0 passo para a preparação de um composto de fórmula (VI) a partir de composto de fórmula (XIII) é realizado por meio de reacção de uma base com o composto (XIII) num solvente. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem álcoois tais como metanol ou etanol; éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietílico; e uma mistura destes solventes e água, dos quais é preferido um álcool ou uma mistura de um álcool e água (particularmente etanol ou uma mistura de etanol e água).
Exemplos da base a ser empregue incluem bases inorgânicas tais como hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidrogenocarbonato de sódio, carbonato de sódio e carbonato de potássio; e bases orgânicas tais como metóxido de sódio e etóxido de sódio, dos quais é preferido hidróxido de sódio. 117 ΡΕ1340757 A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 15°C (preferencialmente desde -10°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou croma-tografia. (Passo B2)
Passo B2 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (VII) submetendo um grupo amida de um composto de fórmula (VI) a uma reacção de fecho de anel.
Este passo é realizado por meio de reacção de um composto representado pela fórmula R2CHL3COCOOP2 (em gue R2 e P2 têm os mesmos significados que os anteriormente definidos e L3 representa um grupo separável) com o composto de fórmula (VI) na presença de uma base num solvente. Exemplos 118 ΡΕ1340757 preferidos do grupo separável L3 incluem um átomo de halogéneo, dos quais é particularmente preferido um átomo de bromo. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem álcoois tais como metanol ou etanol; éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico; hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano; e amidas tais como N,N-dimetilformamida, dos quais são preferidos álcoois (particularmente etanol).
Exemplos da base a ser empregue incluem bases orgânicas tais como trietilamina e diisopropilamina; e bases inorgânicas tais como carbonato de sódio, carbonato de potássio e hidrogenocarbonato de sódio, das quais são preferidas bases orgânicas (particularmente trietilamina). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 150°C (preferencialmente desde -10°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel 119 ΡΕ1340757 com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou crornatografia. (Passo B3) 0 Passo B3 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (VIII) através da introdução de um grupo protector P3 num grupo hidroxilo de um composto de fórmula (VII).
Este passo pode ser realizado através de um método habitualmente utilizado no campo da química orgânica sintética (por exemplo, um método descrito em Protective Grupos in Organic Synthesis, Second Edition, John Wiley & Sons, Inc. 1991, autores T.W. Greene e P.G.M. Wuts). A introdução de um grupo protector à base de sililo é realizada por meio de reacção de um haleto de sililo ou um triflato de sililo tendo um substituinte desejado com um composto de fórmula (VII) na presença de uma base num solvente.
Exemplos do haleto de sililo incluem cloreto de trimetilsililo, cloreto de trietilsililo, cloreto de t- 120 ΡΕ1340757 butildimetilsililo e cloreto de t-butildifenilsililo, dos quais é preferido cloreto de t-butildifenilsililo.
Exemplos do triflato de sililo incluem triflato de trimetilsililo, triflato de trietilsililo, triflato de t-butildimetilsililo e triflato de t-butildifenilsililo, dos quais é preferido triflato de t-butildifenilsililo. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem amidas tais como dimetilformamida; hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano; e éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico, dos quais são preferidas amidas (particularmente dimetilformamida) ou hidrocarbonetos halogenados (particularmente cloreto de metileno).
Exemplos da base a ser empregue incluem bases orgânicas tais como imidazole, trietilamina, lutidina, piridina ou dimetilaminopiridina, dos quais é preferido imidazole ou 2,6-lutidina. A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 50°C (preferencialmente desde -10°C até 40°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde 1 até 24 horas). 121 ΡΕ1340757
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscível com água a um residuo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convenci onais tais como recristalização, reprecipitação ou croma-tografia. (Passo B4) 0 Passo B4 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (IX) através de conversão de um grupo representado pela fórmula COOP2 num composto (VIII) num grupo desejado R1p.
Este passo pode ser realizado através da apli cação de uma reacção de conversão do grupo funcional habitualmente utilizado no campo da quimica orgânica sintética. Os pormenores são descritos no Processo C ao Processo H, mais adiante. (Passo B5) 0 Passo B5 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (X) através de remoção do grupo 122 ΡΕ1340757 protector P3 de um grupo hidroxilo do composto de fórmula (IX) ·
Este passo pode ser realizado através de um método habitualmente utilizado no campo da quimica orgânica sintética (por exemplo, um método descrito em Protective Grupos in Organic Synthesis, Second Edition, John Wiley & Sons, Inc. 1991, autores T.W. Greene e P.G.M. Wuts) .
Quando o grupo protector P3 de um grupo hidroxilo é um grupo protector à base de sililo, a sua eliminação é realizada de uma maneira semelhante ao método descrito no Passo A2 (3). (Passo B6) 0 Passo B6 é um passo para preparar um composto (XI) através de conversão do grupo hidroxilo de um composto de fórmula (X) num grupo separável L2. (1) Quando o grupo separável L2 representa um tipo de grupo sulfoniloxi, este passo é realizado por meio de reacção de um agente de sulfonilação com um composto de fórmula (X) na presença de uma base num solvente.
Exemplos do agente de sulfonilação a ser empregue incluem cloreto de metanossulfonilo, cloreto de etanossul-fonilo, cloreto de trifluorometanossulfonilo, cloreto de benzenossulfonilo ou cloreto de toluenossulfonilo, dos quais é preferido o cloreto de metanossulfonilo. 123 ΡΕ1340757 Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem hidrocarbone-tos halogenados tais como cloreto de metileno, dicloroetano ou clorofórmio; e éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico, dos quais são preferidos hidrocarbonetos halogenados (particularmente cloreto de metileno).
Exemplos da base a ser empregue incluem bases orgânicas tais como trietilamina, diisopropiletilamina, piridina ou dimetilaminopiridina, das quais é preferida a trietilamina. A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 80°C (preferencialmente desde -10°C até 40°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde 1 até 24 horas). por meio de procedimentos
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscível com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, 124 ΡΕ1340757 convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (2) Quando o grupo separável L2 representa um átomo de halogéneo, este passo é realizado por meio de reacção de um agente de halogenação com um composto de fórmula (X) num solvente.
Exemplos do agente de halogenação a ser empregue incluem pentacloreto de fósforo, cloreto de tionilo, oxicloreto de fósforo, iodo, tetrabrometo de carbono, tetracloreto de carbono, N-clorossuccinimida, N-bromossuc-cinimida ou trifluoreto de dietilaminoenxofre, dos quais é preferido o tetrabrometo de carbono. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem hidrocarbo-netos halogenados tais como cloreto de metileno ou diclo-roetano; e éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter di-etílico, dos quais são preferidos hidrocarbonetos halogenados (particularmente cloreto de metileno).
Exemplos dos aditivos a ser empregues incluem fosfinas tais como trifenilfosfina e tributilfosfina, dos quais é preferida a trifenilfosfina. A temperatura de reacção habitualmente varia 125 ΡΕ1340757 desde -20°C até 100°C (preferencialmente desde -10°C até 50 °C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 10 minutos até 108 horas (preferencialmente desde 0,5 até 24 horas) .
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um residuo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (Passo B7) O Passo B7 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XII) através de conversão do grupo separável L2 do composto de fórmula (XI) num grupo mercapto protegido.
Este passo é realizado por meio de reacção de um agente formador de mercapto com um composto de fórmula (XI) num solvente.
Exemplos do agente formador de mercapto a ser 126 ΡΕ1340757 empregue incluem sais de metais alcalinos de ácidos tiocarboxilicos tais como tioacetato de sódio, tioacetato de potássio, tiopropionato de sódio ou tiobenzoato de sódio; ou sais de metais alcalinos de 4-metoxibenzil-mercaptano, dos quais é preferido o tioacetato de potássio. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem éteres tais como tetra-hidrofurano ou dioxano; acetatos tais como acetato de etilo ou acetato de metilo; nitrilos tais como acetonitrilo; e amidas tais como dimetilformamida ou dime-tilacetamida, dos quais é preferida uma amida (particularmente dimetilformamida). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 150°C (preferencialmente desde 0°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purifi- 127 ΡΕ1340757 cado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (Passo B8) 0 Passo B8 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (III) por meio de remoção de um grupo protector P4 do grupo mercapto do composto de fórmula (XII) · (1) Quando o grupo protector P4 representa um grupo alcanoilo ou um grupo arilcarbonilo, este passo é realizado por meio de reacção de um sal de um composto hidrazina com um composto (XII) num solvente.
Exemplos do sal do composto hidrazina incluem hidrazina/ácido acético ou N,N-dimetil-hidrazina/ácido acético, dos quais é preferida hidrazina/ácido acético.
Como solvente a ser empregue, podem ser utilizados os solventes utilizados no primeiro passo anterior. A temperatura de reacção não é particularmente limitada e habitualmente varia desde -10°C até 40°C (preferencialmente desde 10°C até 30°C). Embora o tempo de reacção dependa do solvente, da temperatura de reacção e da natureza do reagente, ele habitualmente varia desde 30 minutos até 24 horas (preferencialmente desde uma hora até 8 horas). 128 ΡΕ1340757
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia.
Quando a sal de um composto hidrazina é utilizado como agente de desprotecção, o composto de fórmula (III) pode ser utilizado como a material de partida do Passo AI anterior sem isolá-lo a partir da solução de reacção. 0 presente passo é também realizado por meio de reacção de uma base com o composto de fórmula (XII) num solvente.
Exemplos da base a ser empregue incluem sais de um metal alcalino tais como hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato de potássio, carbonato de sódio, metóxido de sódio ou etóxido de sódio, dos quais é preferido o metóxido de sódio. Não existe limitação particular na natureza do 129 ΡΕ1340757 solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem álcoois tais como metanol ou etanol; éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietílico; amidas tais como dimetilformamida; e hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano, dos quais são preferidos álcoois (particularmente metanol). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 100°C (preferencialmente desde -10°C até 40°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 10 minutos até 108 horas (preferencialmente desde 0,5 até 24 horas) .
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. 130 ΡΕ1340757
Exemplos do ácido a ser empregue incluem ácidos sulfónicos tais como ácido metanossulfónico ou ácido trifluorometanossulfónico, dos quais é preferido o ácido trifluorometanossulfónico. A reacção pode ser acelerada através de anisole ou tioanisole co-existentes. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem hidrocarbo-netos halogenados tais como cloreto de metileno ou diclo-roetano; éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietí-lico; e ácidos acéticos facultativamente substituídos tais como ácido acético e ácido trifluoroacético, dos quais são preferidos ácidos acéticos facultativamente substituídos (particularmente ácido trifluoroacético). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 100°C (preferencialmente desde -10°C até 80°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 10 minutos até 108 horas (preferencialmente desde 0,5 até 24 horas) .
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscível 131 ΡΕ1340757 com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia.
[Processo C] 0 Processo C é um método para a preparação de um composto de fórmula (IX-1) tendo um grupo resíduo éster desejado através de conversão de um grupo carboxilo protegido de um composto de fórmula (VIII).
No esquema anterior, R2, X, η, P2 e P3 têm os mesmos significados que os anteriormente definidos, e Rp representa R3 que pode estar protegido. 132 ΡΕ1340757 (Passo Cl)
Passo Cl é um passo para a preparação de um composto (XIV) por meio de redução do grupo éster carbo-xílico de um composto de fórmula (VIII) até um grupo hidroximetilo. Este passo é realizado por meio de reacção de um agente de redução com o composto de fórmula (VIII) num solvente. 0 agente de redução a ser empregue não é particularmente limitado desde que ele possa converter um grupo éster carboxílico num grupo hidroximetilo por meio de redução. Exemplos do agente de redução incluem alumino-hidretos de metal alcalino tal como alumino-hidreto de lítio; e boro-hidretos de metal alcalino tais como boro-hidreto de litio ou boro-hidreto de sódio, dos quais é preferido o alumino-hidreto de litio. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico, dos quais tetra-hidrofurano é preferido. A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 100°C (preferencialmente desde -10°C até 40°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 10 minutos até 24 horas (preferencialmente desde 0,5 até 24 horas). 133 ΡΕ1340757
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água à mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (Passo C2) 0 Passo C2 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XV) por meio de oxidação de um grupo hidroximetilo de um composto de fórmula (XIV).
Este passo é realizado por meio de reacção de um agente de oxidação com o composto de fórmula (XIV) num solvente e compreende um passo de oxidação de um grupo hidroximetilo até um grupo aldeido e um passo de oxidação do grupo aldeido até um grupo carboxilo. (1) Passo de oxidação de um grupo hidroximetilo até um grupo aldeido 0 agente de oxidação a ser empregue não é particularmente limitado desde que ele possa oxidar um 134 ΡΕ1340757 grupo hidroximetilo para o converter num grupo aldeído. Exemplos incluem clorocromato de piridínio, cloreto de oxalilo-dimetilsulfóxido, ácido trifluoroacético anidro-dimetilsulfóxido, dióxido de manganês activo ou o reagente de Dess-Martin, dos quais é preferido o dióxido de manganês activo. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem hidrocarbo-netos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano, dos quais é preferido cloreto de metileno. A temperatura de reacção habitualmente varia desde -100°C até 100°C (preferencialmente desde -100°C até 50°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 30 minutos até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas) . se necessário
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscível com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de 135 ΡΕ1340757 procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (2) Passo de oxidação do grupo aldeído até um grupo carboxilo O agente de oxidação a ser empregue não é particularmente limitado desde que ele possa oxidar um grupo aldeído para o converter num grupo carboxilo. Exemplos do agente de oxidação incluem permanganato de potássio, tetróxido de ruténio, clorito de sódio-di-hidrogeno-fosfato de sódio (ou potássio)-2-metil-2-buteno, dos quais é preferido clorito de sódio-di-hidrogenofosfato de sódio-2-metil-2-buteno. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem hidrocarbone-tos halogenados tais como cloreto de metileno ou diclo-roetano; éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietí-lico; álcoois tais como t-butanol; e uma mistura destes solventes e água, dos quais é preferida uma mistura de tetra-hidrofurano-cloreto de metileno-água-t-butanol. Δ temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 50°C (preferencialmente desde -10°C até 40°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 10 minutos até 108 horas (preferencialmente desde 0,5 até 24 horas) . 136 ΡΕ1340757
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (Passo C3) 0 Passo C3 é um passo para a preparação de um composto ácido carboxílico de fórmula (XV) de uma maneira alternativa e é realizado por meio de remoção doe grupo protector de um composto (VIII). Este passo pode ser levado a cabo de uma maneira semelhante ao Passo A2 do Processo A. (Passo C4) 0 Passo C4 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (IX-1) por meio de esterificação do grupo carboxilo do composto de fórmula (XV).
(1) Este passo é realizado por meio de reacção de um composto álcool desejado representado pela fórmula R3p0H 137 ΡΕ1340757 com um composto de fórmula (XV) na presença de um agente de condensação num solvente.
Como agente de condensação a ser empregue, podem ser utilizados os descritos na secção da formação de éster descrita no Passo A2 do Processo A. A condensação pode também ser realizada através de um cloreto de ácido utilizando cloreto de oxalilo. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem hidrocarbo-netos halogenados tais como cloreto de metileno ou diclo-roetano; éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dieti-lico; amidas tais como dimetilformamida; e nitrilos tais como acetonitrilo, dos quais são preferidos hidrocarbonetos halogenados (particularmente cloreto de metileno). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -50°C até 100°C (preferencialmente desde -20°C até 50°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde 1 até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um residuo obtido por destilação da mistura de 138 ΡΕ1340757 reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (2) 0 presente passo é também realizado por meio de reacção de um composto desejado representado pela fórmula R3pL3 com um composto de fórmula (XV) na presença de uma base num solvente. L3 representa um grupo separável, preferencialmente um átomo de halogéneo (particularmente um átomo de iodo ou um átomo de bromo).
Como base a ser empregue, podem ser utilizadas bases inorgânicas ou bases orgânicas. A base inorgânica podem compreender um carbonato tal como carbonato de sódio, carbonato de potássio ou carbonato de césio ou a hidroge-nocarbonato tal como hidrogenocarbonato de sódio ou hidrogenocarbonato de potássio, preferencialmente carbonato de césio. A base orgânica pode compreender uma amina terciária tal como trietilamina ou diisopropiletilamina; ou uma base orgânica bicíclica tal como DBU ou DBN, preferencialmente diisopropiletilamina. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem hidrocarbone- 139 ΡΕ1340757 tos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloro-etano; éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietí-lico; amidas tais como dimetilformamida; e nitrilos tais como acetonitrilo, dos quais são preferidas amidas (particularmente dimetilformamida). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -50°C até 100°C (preferencialmente desde -20°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um residuo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água, e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia.
[Processo D] O Processo D é um método para a preparação de um composto de fórmula (IX-2) tendo um residuo amida desejado através de conversão do grupo carboxilo de um composto (XV) . 140 ΡΕ1340757
No esquema anterior, R2, X, n e P3 têm os mesmos significados que os anteriormente definidos, e R4p e R5p representam R4 e R5 que pode estar protegido. (Passo Dl)
Este passo é realizado por meio de reacção de um composto desejado tendo a fórmula HNR4pR5p com um composto de fórmula (XV) na presença de um agente de condensação num solvente. O presente passo pode ser levado a cabo utilizando um composto amino de fórmula HNR4pR5p em vez do composto álcool de fórmula R3p0H no Passo C4 anterior do Processo C.
Exemplos do agente de condensação incluem um agente de condensação à base de éster de ácido fosfórico tal como cianeto de dietilfosforilo; e um agente de condensação à base de carbonato tal como carbonildiimi-dazole, dos quais são preferidos cianeto de dietilfosforilo ou carbonildiimidazole. ΡΕ1340757 141 [Processo E] 0 Processo E é um método para a preparação de um composto desejado de fórmula (IX-2) tendo um grupo resíduo amida através de conversão de um grupo éster carboxílico de um composto (VIII).
No esquema anterior, R2, X, η, P3, R4p e R5p têm os mesmos significados que os anteriormente definidos, e P2a representa um grupo alquilo C1-C4 como um grupo protector P2 do grupo anterior carboxilo. (Passo El)
Este passo é realizado por meio de reacção de um composto amino desejado representado pela fórmula HNR4pR5p com um composto de fórmula (VIII) na presença de um catalisador num solvente.
Exemplos do catalisador a ser empregue incluem tri-alquil Ci-C4-alumínios tais como trimetilalumínio, dos quais é preferido trimetilalumínio. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito 142 ΡΕ1340757 adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem solventes aromáticos tais como benzeno, tolueno ou mesitileno; e hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano, dos quais são preferidos solventes aromáticos (particularmente benzeno ou tolueno). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 150°C (preferencialmente desde -10°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia.
[Processo F] O Processo F é um método para a preparação de um composto ciano de fórmula (IX-3) através de conversão de a grupo éster carboxílico de um composto de fórmula (VIII). 143 ΡΕ1340757
No esquema anterior, R2, X, η, P3 e P2a têm os mesmos significados que os anteriormente definidos. (Passo Fl)
Este passo é realizado através da utilização de um sal de amónio em vez do composto amino no Passo anterior EI do Processo E e fazendo-o reagir a uma temperatura de reacção mais elevada. É preferencialmente utilizado cloreto de amónio como sal de amónio e a temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 150°C (preferencialmente desde -10°C até 100°C).
[Processo G] 0 Processo G é um método para a preparação de um composto de fórmula (IX-4) através da introdução de um substituinte desejado R6 num grupo hidroxilo de um composto de fórmula (XIV). 144 ΡΕ1340757
Este passo é realizado por meio de reacção de um agente de alquilação com um composto de fórmula (XIV) na presença de uma base num solvente ou reacção de um agente de redução e um composto carbonilo desejado com o composto de fórmula (XIV) na presença de um catalisador ácido num solvente. (1) Método de alquilação sob condições básicas
Exemplos do solvente a ser empregue incluem amidas tais como N,N-dimetilformamida; e éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico, dos quais são preferidas amidas (particularmente N,N-dimetilformamida).
Exemplos do base a ser empregue incluem hidretos de metal alcalino tais como hidreto de sódio ou hidreto de potássio; bases inorgânicas tais como hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio; e bases orgânicas tais como trietilamina ou diisopropilamina, dos quais são preferidos hidretos de metal alcalino (particularmente hidreto de sódio).
Exemplos do agente de alquilação a ser empregue incluem haletos de alquilo tais como iodeto de metilo ou iodeto de etilo; e sulfatos de dialquilo tais como sulfato 145 ΡΕ1340757 de dimetilo e sulfato de dietilo, dos quais são preferidos haletos de alquilo (particularmente iodeto de alquilo). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -50°C até 100°C (preferencialmente desde -10°C até 40°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 10 minutos até 108 horas (preferencialmente desde 0,5 até 24 horas) .
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um residuo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (2) Método de alquilação sob condições acidicas Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem hidrocar-bonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano; e éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter 146 ΡΕ1340757 dietílico, dos quais são preferidos hidrocarbonetos haloge-nados (particularmente cloreto de metileno).
Exemplos do catalisador ácido incluem triflatos de trialquilsililo tais como triflato de trimetilsililo, triflato de trietilsililo ou triflato de t-butildimetil-sililo, dos quais é preferido triflato de trimetilsililo.
Exemplos do composto carbonilo desejado incluem cetonas tais como acetona, metil-etil-cetona e ciclo-hexil-cetona; e alquil-aldeidos tais como acetaldeído e propionaldeído, dos quais são preferidas cetonas.
Exemplos do agente de redução incluem trialquil-silanos tais como trietilsilano e difenilmetilsilano, dos quais são preferidos trialquilsilanos (particularmente trietilsilano) . A temperatura de reacção habitualmente varia desde -50°C até 100°C (preferencialmente desde -10°C até 40°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 10 minutos até 108 horas (preferencialmente desde 0,5 até 24 horas) .
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutra- 147 ΡΕ1340757 lização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia.
[Processo H] O Processo H é um método para a preparação de um composto de fórmula (IX-5) através de conversão de um grupo hidroxilo de um composto de fórmula (XIV) num grupo desejado representado pela fórmula NR7pR8p.
(Passo Hl) 0 Passo Hl é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XV) através da introdução de um grupo separável L3 num composto de fórmula (XIV) e pode ser realizado de uma maneira semelhante ao Passo B6 do Processo B anterior. 148 ΡΕ1340757 (Passo H2) O Passo H2 é um passo para a preparação de um composto amina de fórmula (IX-5a) a partir de composto de fórmula (XV) e para a preparação de um composto de fórmula (IX-5b), se necessário, através da introdução de um substi-tuinte. (A) Preparação de um composto amina de fórmula (IX-5a)
Este passo pode ser realizado por meio de reacção de um agente de aminação com o composto de fórmula (XV) num solvente. Este passo pode também ser realizado por meio de preparação de um composto azida por meio de reacção de um agente de azidação com um composto de fórmula (XV) num solvente, seguido de reacção com um agente de redução. (1) Método no qual é utilizado um agente de aminação Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem amidas tais como dimetilformamida; álcoois tais como metanol ou etanol; e éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico, preferencialmente as amidas (particularmente dimetilfor-mamida). 149 ΡΕ1340757
Exemplos do agente de aminação a ser empregue incluem alquilaminas primárias que podem estar substituídas tais como metilamina ou etilamina; aminas aromáticas que podem estar substituídas tais como anilina ou aminotiazole; alquilaminas secundárias que podem estar substituídas tais como metiletilamina ou dimetilamina; e sais destas aminas (por exemplo, hidrocloreto), dos quais são preferidas alquilaminas primárias ou secundárias que podem estar substituídas e seus sais (particularmente hidrocloreto de metilamina ou hidrocloreto de dimetilamina). A temperatura de reacção habitualmente varia desde 0°C até 150°C (preferencialmente desde 10°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. 150 ΡΕ1340757 (2) Método no qual são utilizados um agente de azidação e um agente de redução Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem amidas tais como dimetilformamida; álcoois tais como metanol ou etanol; e éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico, dos quais são preferidas amidas (particularmente dimetilformamida) .
Exemplos do agente de azidação incluem azetos de metal alcalino tais como azeto de sódio ou azeto de litio, dos quais são preferidos azetos de metal alcalino (particularmente azeto de sódio). A temperatura de reacção habitualmente varia desde 0°C até 150°C (preferencialmente desde 10°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscível com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por 151 ΡΕ1340757 destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. A azida deste modo obtida é convertida numa amina de fórmula (IX-5a) por meio de uma reacção de redução.
Exemplos do agente de redução a ser empregue incluem alumino-hidretos de metal alcalino tais como alumino-hidreto de lítio; fosfinas tais como trifenilfos-fina; e hidrogenação catalítica utilizando catalisadores de metal tais como catalisador de paládio-carbono ou de platina, dos quais é preferida a hidrogenação catalítica (particularmente no caso onde paládio-carbono é utilizado como catalisador). Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietílico; e álcoois tais como metanol ou etanol, dos quais são preferidos éteres (particularmente tetra-hidrofurano).
Exemplos do solvente a ser empregue na hidrogenação catalítica incluem álcoois tais como metanol ou etanol, dos quais é preferido metanol. 152 ΡΕ1340757 A temperatura de reacção habitualmente varia desde -10°C até 150°C (preferencialmente desde 0°C até 100°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um residuo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (B) Preparação de um composto (IX-5b)
Este passo é um passo levada a cabo se necessário a fim de preparar um composto de fórmula (IX-5b) através da introdução de um substituinte num composto amina de fórmula (IX-5a). 0 presente passo é realizado por meio de reacção de um desejado agente de acilação, agente de sulfonilação, agente de fosforilação ou éster de ácido clorofórmico com um composto amina de fórmula (IX-5a) na presença de uma base num solvente. 153 ΡΕ1340757
Exemplos do agente de acilação incluem anidridos de ácido tais como anidrido acético ou anidrido benzóico; e cloretos de ácido tais como cloreto de acetilo ou cloreto de benzoilo, dos quais são preferidos cloretos de ácido (particularmente cloreto de acetilo).
Exemplos do agente de sulfonilação incluem cloretos de ácido tais como cloreto de metanossulfonilo ou cloreto de p-toluenossulfonilo; e anidridos de ácido tais como anidrido metanossulfónico ou anidrido p-toluenos-sulfónico, dos quais são preferidos cloretos de ácido (particularmente cloreto de metanossulfonilo).
Exemplos do agente de fosforilação incluem cloretos de ácido tais como cloreto de dietilfosforilo ou cloreto de dimetilfosforilo, dos quais é preferido cloreto de dietilfosforilo .
Exemplos do éster de ácido clorofórmico incluem éster compostos tais como cloroformato de metilo, cloro-formato de etilo ou cloroformato de benzilo, dos quais são preferidos ésteres de ácido clorofórmico (particularmente cloroformato de metilo).
Exemplos da base a ser empregue incluem bases orgânicas tais como trietilamina, diisopropiletilamina ou piridina; e bases inorgânicas tais como carbonato de sódio, carbonato de potássio ou hidrogenocarbonato de sódio, dos quais são preferidas bases orgânicas (particularmente trietilamina) . 154 ΡΕ1340757 Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico; e hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano, dos quais são preferidos éteres (particularmente tetra-hidrofurano) . A temperatura de reacção habitualmente varia desde 0°C até 100°C (preferencialmente desde 10°C até 50°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um residuo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (Passo H3) 0 Passo H3 é um passo para a preparação de um 155 ΡΕ1340757 composto amina de fórmula (IX-5a) a partir de composto de fórmula (XIV) através de um composto azida e para a preparação de um composto de fórmula (IX-5b) através da introdução de um substituinte se necessário. (A) Preparação de um composto azida 0 presente passo é levado a cabo por meio de reacção de um composto de azidação (particularmente dife-nilfosforil-azida), azodicarboxilato de dietilo e trifenil-fosfina com um composto de fórmula (XIV) num solvente. Não existe limitação particular na natureza do solvente a ser empregue, desde que ele não tenha efeito adverso na reacção e dissolva os materiais de partida numa certa extensão. Exemplos do solvente incluem amidas tais como dimetilformamida; e éteres tais como tetra-hidrofurano ou éter dietilico, dos quais são preferidos éteres (particularmente tetra-hidrofurano). A temperatura de reacção habitualmente varia desde 0°C até 50°C (preferencialmente desde 10°C até 30°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 108 horas (preferencialmente desde uma até 24 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um residuo obtido por destilação da mistura de 156 ΡΕ1340757 reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (B) Preparação de um composto amina
Este é um passo para a preparação de uma amina de fórmula (IX-5a) através da redução de um composto azida e pode ser levada a cabo de uma maneira semelhante à redução descrita em Passo H2 (A)(2). (C) Preparação de um composto (IX-5b)
Este passo, levado a cabo se necessário, é um passo para a preparação de um composto de fórmula (IX-5b) através da introdução de um substituinte na amina de fórmula (IX-5a) e pode ser levado a cabo de uma maneira semelhante ao Passo H2 (B) anterior.
Os compostos de fórmula (IX-1) a (IX-5) obtidos no Processo C ao Processo H podem ser convertidos num composto de fórmula (III) que é utilizado como material de partida de uma cadeia lateral na posição 2 de um composto de fórmula (I) de acordo com os passos depois do Passo B5 do Processo B. ΡΕ1340757 157 [Processo I] 0 Processo I é um método para a preparação de um composto de fórmula (IX-6) que é um composto de fórmula (IX) , um intermediário na via sintética do Processo B, em que X representa um átomo de oxigénio, de uma maneira diferente. r2n JDH Passo 1-1 JOH c Passo 1-2 .OP3 c ZHIST ^COOH ZHN^ ^R1p ZHN^ ^R1p (XVIa) (XVI) (XVII) R2^ jO P3 R2^ X>P3
Passo 1-3 H2N"^R1p (XVIII)
Passo 1-4 s=C=N^R1p (XIX) R2^ .OP3
Passo 1-5 HO. s π Kn H (XX)
Passo 1-6 R \ ✓OH5 p5°y\ X X η H (XXI)
(IX-6) 158 ΡΕ1340757
No esquema anterior, R2p, R2, P3 e n têm os mesmos significados que os anteriormente definidos; Z representa um grupo protector de um grupo amino, preferencialmente um grupo benziloxicarbonilo; e P5 representa um grupo protector de um grupo hidroxilo, preferencialmente um grupo protector à base de acilo tal como acetilo, benzoílo ou pivaloilo, e o mais preferencialmente um grupo benzoilo. (Passo 1-1) 0 Passo 1-1 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XVI) através de conversão de um grupo carboxilo de um composto aminoácido (XVIa) do qual o grupo amino está protegido até ao R2p desejado.
Este passo pode ser levado a cabo de acordo com um método seleccionado a partir dos Processes C a H anteriores. Deve ser tido em consideração que no composto de fórmula (XVIa) que forma o material de partida, um composto em que R2 representa um átomo de hidrogénio pode ser preparado a partir de serina e um composto em que R2 é um grupo metilo pode ser preparado a partir treonina. Compostos em que R2 é um grupo diferente de um átomo de hidrogénio ou de um grupo metilo pode também ser preparado através de um método conhecido de um especialista na técnica. 159 ΡΕ1340757 (Passo 1-2) 0 Passo 1-2 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XVII) através da introdução de um grupo protector num grupo hidroxilo de um composto de fórmula (XVI).
Este passo pode ser levado a cabo de uma maneira semelhante ao Passo B3 do Processo B. Exemplos preferidos do grupo protector à base de sililo adequado como P3 incluem um grupo t-butildimetilsililo. (Passo 1-3) 0 Passo 1-3 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XVIII) por meio de remoção do grupo protector do grupo amino do composto de fórmula (XVII).
Este passo pode ser levado a cabo de uma maneira semelhante a um método do Passo A2 (1) do Processo A. 0 solvente preferido é metanol. (Passo 1-4) 0 Passo 1-4 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XIX) através de conversão do grupo amino do composto de fórmula (XVIII) num grupo isotio-cianato. 160 ΡΕ1340757
Este passo é realizado por meio de reacção de dissulfureto de carbono e um agente de desidro-sulfuretação com o composto de fórmula (XVIII) na presença de uma base num solvente.
Exemplos preferidos do solvente incluem hidrocar-bonetos halogenados (particularmente cloreto de metileno).
Exemplos preferidos do agente de desidro-sulfuretação incluem ésteres ácido fórmico halogenado (particularmente cloroformato de etilo) ou reagentes contendo azoto quaternário (particularmente iodeto de 2-cloro-l-metilpiridínio ou tetrafluoroborato de 2-cloro-l-etilben-zoxazólio).
Exemplo preferidos da base incluem aminas terciárias tais como trietilamina, diisopropiletilamina ou tributilamina (particularmente trietilamina). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 100°C (preferencialmente desde 0°C até 60°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 48 horas (preferencialmente desde uma até 12 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser 161 ΡΕ1340757 obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (Passo 1-5) 0 Passo 1-5 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XX) por meio de reacção da amina cíclica desejada com o composto de fórmula (XIX) . Este passo pode ser levado a cabo de acordo com o Passo BI do Processo B. (Passo 1-6) O Passo 1-6 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XXI) através da introdução de um grupo protector à base de acilo P5 num grupo hidroxilo de um composto (XX) e subsequentemente remoção de um grupo protector à base de sililo P3. (1) Introdução de um grupo protector à base de acilo P5 162 ΡΕ1340757
Este passo pode ser levado a cabo de acordo com Passo H2 (B) do Processo H. (2) Passo de remoção de um grupo protector à base de sililo P3
Este passo pode ser levado a cabo de acordo com Passo A2 do Processo A. (Passo 1-7) 0 Passo 1-7 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XXII) submetendo um composto de fórmula (XXI) a uma reacção de fecho de anel. Este passo é realizado por meio de reacção de um agente de ciclização (agente de desidro-sulfuretação) com o composto de fórmula (XXI) na presença de uma base num solvente.
Exemplos do solvente incluem amidas tais como dimetilformamida ou dimetilacetamida; hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno; e nitrilos tais como acetonitrilo; dos quais é preferido acetonitrilo.
Exemplo preferidos da base incluem aminas terciárias tais como trietilamina, diisopropiletilamina ou tributilamina (particularmente trietilamina).
Exemplos preferidos do agente de ciclização 163 ΡΕ1340757 (desidrosulfuretação) incluem sais de mercúrio tais como óxido de mercúrio e cloreto de mercúrio; ou reagentes contendo azoto quaternário (particularmente iodeto de 2-cloro-l-metilpiridínio ou tetrafluoroborato de 2-cloro-l-etilbenzoxazólio). A temperatura de reacção habitualmente varia desde -20°C até 100°C (preferencialmente desde 0°C até 60°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 48 horas (preferencialmente desde uma até 12 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, sua neutralização, lavagem com água e separação do solvente por destilação. O composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. (Passo 1-8)
Passo 1-8 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (XXIII) através de desidrogenação do composto de fórmula (XXII). 164 ΡΕ1340757
Este passo é realizado por meio de reacção de um agente de desidrogenação com o composto de fórmula (XXII) num solvente.
Exemplos do solvente incluem hidrocarbonetos aromáticos tais como benzeno ou tolueno; e hidrocarbonetos halogenados tais como cloreto de metileno ou dicloroetano.
Exemplos do agente de desidrogenação incluem agentes de oxidação tais como dióxido de manganês. A temperatura de reacção habitualmente varia desde 0°C até 100°C (preferencialmente desde 0°C até 60°C) e o tempo de reacção habitualmente varia desde 0,5 até 48 horas (preferencialmente desde uma até 12 horas).
Depois da reacção ficar completa, o composto desejado é obtido a partir da mistura de reacção através de meios conhecidos. Por exemplo, o composto desejado pode ser obtido através da adição de um solvente orgânico imiscivel com água a um resíduo obtido por destilação da mistura de reacção ou do solvente na mistura de reacção, remoção dos produtos insolúveis por meio de filtração, lavagem com água e separação do solvente por destilação. 0 composto desejado deste modo obtido pode ser adicionalmente purificado, se necessário, por meio de procedimentos convencionais tais como recristalização, reprecipitação ou cromatografia. 165 ΡΕ1340757 (Passo 1-9) 0 Passo 1-9 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (IX-6) por meio de remoção do grupo protector à base de acilo P5 do composto de fórmula (XXIII) e subsequentemente introdução de um grupo protector à base de sililo P3. (1) Eliminação do grupo protector à base de acilo P5
Este passo pode ser levado a cabo de acordo com um método para a preparação do composto de fórmula (VI) a partir do composto de fórmula (XIII) non Passo BI (2) do Processo B. (2) Introdução do grupo protector à base de sililo P3
Este passo pode ser levado a cabo de acordo com Passo B3 do Processo B.
[Processo J] 0 composto de fórmula (I) pode ser também preparado de uma maneira diferente do Processo A através do processo seguinte J. 0 Processo J pode ser aplicado à preparação do composto de fórmula (I — 1) ou (1-2) em que R1 é representado pela fórmula COOR3 ou pela fórmula CONR4R5. ΡΕ1340757 166
Passo J1 1'
Passo J3 ''
Passo J4
CH
X-^rZ (I)
COOH 167 ΡΕ1340757
No esquema anterior, R1, Rxp, R2, P1, P3, X, L1 e n têm os mesmos significados que os anteriormente definidos. Um exemplo preferido de PJ representa um grupo t-butildimetilsililo. (Passo Jl) 0 Passo Jl é um passo para a preparação de um composto de fórmula (IV-1) através de condensação de um composto de fórmula (II-l) que é protegido por um grupo protector à base de sililo P3 e um composto de fórmula (111 — 1) no qual R3p é um grupo carboxilo protegido por um grupo alilo.
Este passo pode ser levado a cabo de uma maneira semelhante ao Passo Al do Processo A. 0 composto de fórmula (11 — 1) utilizado como a material de partida pode ser preparado por meio de reacção de um agente de sililação com um composto de fórmula (II) e este passo pode ser levado a cabo de acordo com Passo B3 do Processo B. 0 composto de fórmula (III-l) pode ser preparado pelo Processo B. (Passo J2) 0 Passo J2 é um passo para a preparação do composto de fórmula (IV-2) por meio de remoção do grupo protector alilo a partir do composto de fórmula (IV-1). Este passo pode ser levado a cabo de acordo com o Passo A2 (2) do Processo A. 168 ΡΕ1340757 (Passo J3) 0 Passo J3 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (IV-3) através de modificação de um grupo carboxilo do composto de fórmula (IV-2). Este passo pode ser levado a cabo de acordo com Passo B4 do Processo B (particularmente Processo C e Processo D). (Passo J4) 0 Passo J4 é um passo para a preparação de um composto de fórmula (I) por meio de remoção dos grupos protectores P3 e P1 a partir do composto de fórmula (IV-3). (1) Eliminação do grupo protector P3
Este passo pode ser levado a cabo de acordo com Passo Ά2 (3) do Processo A. (2) Eliminação do grupo protector P1
Este passo pode ser levado a cabo de uma maneira semelhante ao Passo A2 do Processo A.
Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farma-cologicamente aceitáveis da presente invenção apresentam actividade antibacteriana ampla e forte contra várias bactérias patogénicas incluindo bactérias Gram-positivas 169 ΡΕ1340757 tais como Staphylococcus e Bacillus subtilis, bactérias Gram-negativas tais como Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Shigella, Proteus vulgaris, Serratia, Entero-bacter e Pseudomonas aerginosa, e bactérias anaeróbicas tais como Bacteroides fragilis, e, em particular, têm uma forte actividade antibacteriana contra Streptococcus pneumoniae (incluindo bactérias resistentes à penicilina) e Haemophilus influenzae (incluindo bactérias produtoras de β-lactamase), que causam infecção do tracto respiratório. Os compostos de fórmula (I) da presente invenção têm uma elevada estabilidade contra β-lactamases incluindo metalo-β-lactamase. Os compostos de fórmula (I) da presente invenção mostram boa farmacocinética tal como uma concentração máxima no soro e uma semi-vida no soro elevadas quando administrados quer oralmente quer não oralmente. Portanto, espera-se que os compostos de fórmula (I) da presente invenção tenham um efeito terapêutico potente mesmo se administradas menos frequentemente ou com doses menores em comparação com fármacos existentes. Os compostos de fórmula (I) da presente invenção têm fraca toxicidade para o rim. Consequentemente, os compostos de fórmula (I) ou seus sais ou ésteres farmacologicamente aceitáveis da presente invenção, são úteis, por exemplo, como produtos farmacêuticos e são particularmente úteis como agentes antibacte-rianos para o tratamento ou prevenção (preferencialmente tratamento) de infecções bacterianas causadas por vários tipos de bactérias patogénicas, particularmente bactérias que causam infecção do tracto respiratório. 170 ΡΕ1340757
Quando compostos de fórmula (I), seus ésteres e sais farmaceuticamente aceitáveis são utilizados como produtos farmacêuticos, particularmente agentes antibacte-rianos, elas podem ser administrados oralmente na forma de comprimidos, cápsulas, grânulos, pós ou xaropes através da sua utilização tal e qual ou misturando-os com aditivos apropriados farmacologicamente aceitáveis tais como exci-pientes ou diluentes, ou administrados parentericamente na forma de injecções.
Estas formulações podem ser preparadas de uma maneira conhecida através da utilização de aditivos. Exemplos de aditivos incluem excipientes (e.g. derivados açúcar tais como lactose, sacarose, glucose, manitol e sorbitol; derivados amido tais como amido de milho, amido de batata, α-amido, dextrina e carboximetilamido; derivados celulose tais como celulose cristalina, hidroxipropil-celulose pouco substituída, hidroxipropilmetilcelulose, carboximetilcelulose, carboximetilcelulose cálcica e carbo-ximetilcelulose sódiva internamente de ligação cruzada; goma arábica; dextrano; e pululano; derivados silicato tais como anidrido silícico leve, aluminossilicato sintético e aluminometassilicato de magnésio; derivados fosfato tais como fosfato de cálcio; derivados carbonato tais como carbonato de cálcio; ou derivados sulfato tais como sulfato de cálcio), ligantes (e.g. os excipientes anteriormente exemplificados; gelatina; polivinilpirrolidona; ou Macro-gol) ; desintegradores (e.g. os excipientes anteriormente exemplificados; ou derivados amido ou celulose quimicamente modificados tais como croscarmelose sódica ou carboxi- 171 ΡΕ1340757 metilamido sódico; ou polivinilpirrolidona de ligação cruzada); lubrificantes (e.g. talco; ácido esteárico; sais de metal de ácido esteárico tais como estearato de cálcio ou estearato de magnésio; silica coloidal; veegum; ceras tais como cera de abelhas e espermacete; ácido bórico; glicol; ácidos carboxilicos tais como ácido fumárico ou ácido adípico; carboxilatos de sódio tais como benzoato de sódio; sulfatos tais como sulfato de sódio; leucina; laurilsulfatos tais como laurilsulfato de sódio ou lauril-sulfato de magnésio; ácidos silicicos tais como anidrido silicico ou hidrato silicico; ou derivados amido exemplificados anteriormente como excipientes), estabilizadores (e.g. ésteres de ácido p-hidroxibenzóico tais como metil-parabeno ou propilparabeno; álcoois tais como clorobutanol, álcool benzilico ou álcool feniletílico; cloreto de benzalcónio; fenóis tais como fenol e cresol; timerosal; anidrido acético; ou ácido sórbico), correctivos (e.g. edulcorantes, agentes acidificantes ou aromas habitualmente empregues), agentes de suspensão (e.g. Polissorbato 80 ou carboximetilcelulose sódica), diluentes e solventes para formulação (e.g. água, etanol ou glicerina). A dose dos compostos de fórmula (I) irá variar dependendo do estado e idade do paciente. Oralmente, eles são administrados numa quantidade de 10 mg (preferencialmente 50 mg) numa dose única como limite inferior e 2000 mg (preferencialmente 1000 mg) numa dose única como limite superior, enquanto que intravenosamente, eles são administrados numa quantidade de 10 mg (preferencialmente 100 mg) numa dose única como limite inferior e 3000 mg (prefe- 172 ΡΕ1340757 rencialmente 2000 mg) numa dose única como limite superior. É desejável que o composto seja administrado a um adulto numa dose única ou em doses divididas (sextos) por dia dependendo do estado do paciente.
[Melhor Maneira de Levar a Cabo a Invenção] A presente invenção será agora ilustrada com mais pormenor pelos Exemplos, Exemplos de Referência, Exemplos de Teste e Exemplos de Formulação. O âmbito da presente invenção não é limitado por estes Exemplos. Nos espectros de ressonância magnética nuclear nos Exemplos e Exemplos de Referência, foi utilizado trimetilsililpropionato-d4 de sódio como padrão interno para a medição em água deuterada, enquanto que foi utilizado tetrametilsilano como padrão interno noutros solventes. Incidentalmente, quando não foi utilizado um padrão interno na medição em água deuterada, a medição foi feita com base no facto do sinal de HOD em água deuterada aparecer a 4,65 ppm.
Exemplo 1
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
173 ΡΕ1340757 (1) (IR, 5S,6S)-2-[l-(4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (468 mg, 1,71 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 1) em dimetil-formamida (15 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (171,0 mg, 1,86 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,02 g, 1,72 mmol) em acetonitrilo (30 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,5 ml, 8,61 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de 174 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[ 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)- 1- hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (752 mg, rendimento de 75%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8, 6 Hz), 7,66 (2H, d, J=8, 6 Hz), 7,50 (1H, s) , 5,50 (1H, d, J=13,7
Hz), 5,25 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,55 (2H, dd, J=14,4, 8,0
Hz), 4,36 (2H, q, J=7,l Hz), 4,35-4,20 (3H, m) , 4,20-4,05 (2H, m) , 3,29 (1H, dd, J=6,7, 2,4 Hz), 3,20 (1H, dq, J=10,3, 8,3 Hz), 1,82 (1H, s lg) , 1,42 (3H, d, J=6, 3 Hz), 1,40 (3H, t, J=7,1 Hz), 1,26 (3H, t, J=7,5 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 589 [M+H] + (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il) azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen- 2- em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (744 mg, 1,26 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 1(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (46 ml) e água destilada (23 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (736 mg) num banho de água (30°C) durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio 175 ΡΕ1340757 (106 mg) , uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidro-furano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-5% de acetonitrilo; água destilada-7% de acetonitrilo e água destilada como eluente. 0 eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (376 mg, rendimento de 63%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,68 (1H, s) , 4,50 (2H, t, J=12,6 Hz), 4,40-4,10 (5H, m incluindo q a 4,30 ppm, J=8,4 Hz), 4,10-3,95 (2H, m) , 3,45-3,35 (1H, m) , 3,30-3,25 (1H, m) , 1,30 (3H, t, J=8,4 Hz), 1,25 (3H, d, J=6,7 Hz), 1,15 (3H, d, J=9,2 Hz). IV (KBr): 1749, 1720, 1602, 1544, 1395, 1316 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 476 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci9H2306N3S2Na: 476, 0912, Encontrado: 476, 0938 [M+H] +
Exemplo 2
Sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 176 ΡΕ1340757
(1) (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-p-Nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-p-nitroben-ziloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (380 mg, 1,0 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 2) em dimetilformamida (15 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (115 mg, 1,25 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (695 mg, 1,17 mmol) em acetonitrilo (30 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,84 ml, 4,82 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 177 ΡΕ1340757 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo, sob a forma de um sólido espumoso castanho (336 mg, rendimento de 50%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6 Hz), 8,22 (2H, d, J=8, 6 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,59 (2H, d, J=8, 6 Hz), 7,57 (1H, s) , 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,43 (2H, s), 5,25 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,56 (2H, dd, J=15,7, 8,7 Hz), 4,31-4,20 (3H, m) , 4,19-4,05 (3H, m) , 3,29 (1H, dd, J=7,1, 2,9 Hz), 3,20 (1H, dq, J=9,2, 7,4 Hz), 1,38 (3H, d, J=6,5 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,2 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 696 [M+H] + (2) Sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-p-Nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (330 mg, 0,474 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 2(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (16 ml) e água destilada (8 178 ΡΕ1340757 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 10% (325 mg) num banho de água (30°C) durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (45 mg), uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidro-furano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada como eluente. 0 eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (86 mg, rendimento de 41%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,10 (1H, s) , 4,35 (2H, t, C-| II co o N , 4,20-4,10 (1H, O 1 o \—1 (2H, m) , 3,90-3,80 (2H, m) , 3,25-3,20 (1H, m) , 3,15-3,00 (1H, m)), 1,12 (3H, d q II o Hz), 1,00 (3H, d, J=9,2 Hz). IV (KBr): 1745, 1594, 1541, 1400, 1316, 1282 cm-1.
Espectro de massa (BAR+) : 470 [M+H] +
Exemplo 3
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 179 ΡΕ1340757
(1) (IR,5S,6S)—2—[1—(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3 — i1]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (1,13 g, 4,39 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 3) em dimetilformamida (57 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (485 mg, 5,27 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (2,61 g, 4,39 mmol) em acetonitrilo (130 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (3,1 ml, 17,6 mmol). A mistura foi agitada durante 3 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio 0,5 180 ΡΕ1340757 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno-3% de metanol, cloreto de metileno-6% de metanol, cloreto de metileno-9% de metanol e cloreto de metileno como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo, sob a forma de um sólido amarelo-pálido (2,61 g, rendimento de 94%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,48 (1H, s) , 6,99 (1H, s lg) , 5,55 (1H, s lg) , 5,51 (1H, d, J=13, 9 Hz), 5,25 (1H, d, J=13, 9 Hz), 4,50 (2H, dd, J=16,0, 8,0 Hz), 4,31-4,20 (3H, m) , 4,10-4,00 (2H, m) , 3,30 (1H, dd, J=6, 6, 2,2 Hz), 3,21 (1H, dq, J=10, 6, 8,0 Hz), 1,83 (1H, s lg) , 1,38 (3H, d, J=6, 6
Hz), 1,28 (3H, d, J=7,3 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 566 [M+H] + (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (2,2 g, 3,93 mmol) (obtido 181 ΡΕ1340757 tal como descrito no Exemplo 3(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (110 ml) e água destilada (110 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (2,2 g) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (330 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-2% de acetonitrilo; água destilada-4% de acetonitrilo; água destilada-6% de acetonitrilo; água destilada-8% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carba-moil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (1,12 g, rendimento de 64%), sob a forma de um sólido branco. XH-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,54 (1H, s) , 4,56 (2H, t, J=8,6 Hz), 4,40-4,30 (1H, m), 4,52 (1H, quinteto, J=6,2
Hz), 4,21 (1H, dd, J= 9,1, 2,5 Hz), 4,07 (2H, m), 3,44 (1H, dd, J=6,2, 2,5 Hz), 3,26 (1H, dd, J=9,l, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr) : 1749, 1671, 1598, 1546, 1394, 1287 cm"1 Espectro de massa (BAR+) : 447 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci7H2o05N4S2Na: 447,0773 Encontrado: 447,0734 [M+H] + 182 ΡΕ1340757
Exemplo 4
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Ciano-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)azetidina (760 mg, 3,18 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 4) em dimetilformamida (38 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (351 mg, 3,81 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni-trobenzilo (1,89 g, 3,18 mmol) em acetonitrilo (95 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (2,21 ml, 12,7 mmol). A mistura foi agitada durante 4 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção 183 ΡΕ1340757 estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:4) e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)aze-tidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (1,65 g, rendimento de 96%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 7 ,29 (1H, s), 5,51 ( 1H, d, 13, 9 Hz) , 5,25 (1H, d, J=13,9 Hz) , 4,54 (2H, dd, J=16,0 , 8,0 Hz) , 4,36- -4,24 (3H, m) , 4, , 12- 4,04 (2H, m) , 3, 30 (1H , dd, J=6, 6, 2, S ) Hz), 3,2 0 (1H, dq, J= 9,4, 7,3 Hz), 1,80 ( 1H, s ig), 1,38 (3H, d , J= =5, 9 Hz) , i ,27 (3H, d, J=7,3 Hz) .
Espectro de massa (BAR+) : 542 [M+H]+ (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[l-(4-Ciano-l,3-tiazol-2-il)azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3- 184 ΡΕ1340757 carboxilato de p-nitrobenzilo (600 mg, 1,11 miriol) (obtido tal como descrito no Exemplo 4 (1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (600 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (93 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-6% de acetonitrilo; água destilada-9% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo; água destilada-15% de acetonitrilo; água destilada-18% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (285 mg, rendimento de 60%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,68 (1H, s) , 4,57 (2H, t, J=8,2 Hz), 4,44-4,32 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,2
Hz), 4,21 \—1 dd, J= 9,0, 2,3 Hz) , 4,07 (2H, dt, 8,2, 4,7 Hz), 3,44 (1H, dd, J=6,2, 2,3 Hz) , 3,25 (1H, dq, J= 9,0, 7,2 Hz), 1,31 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr): 2231, 1750, 1599, 1549, 1470, 1397, 1307 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : 429 [M+H]+ 185 ΡΕ1340757
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C17H18O4N4 S2Na: 429,0668, Encontrado: 429,0662 [M+H]+
Exemplo 5
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
HO
COO'Na CONHMe (1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-N-Metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N-metilcarba-moil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (570 mg, 2,10 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 5) em dimetilformamida (28 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (291 mg, 3,16 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,25 g, 2,10 mmol) em acetonitrilo (25 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de 186 ΡΕ1340757 diisopropiletilamina (1,83 ml, 10,5 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (2:3) como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-[l-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (774 mg, rendimento de 64%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 66 (2H, d, J=8, E S Hz), 7,43 (1H r s) , 7,14 (1H, s) , 5, 51 (1H, d, J= = 13, 8 Hz) , 5,25 (1H , d, j= = 13 ,8 Hz), 4,48 (2H, dd, J= 47, . 2, 8 , 9 Hz) , 4,35- 4 ,20 (3H, m) , 4,10-4,00 (2H, m) , 3, 35- -3, 15 (2H , m) , 2, 96 ( 3H, d, J= =5 ,1 Hz), 1,70 (1H, s ig), 1, 38 (3H, d, J=6, 2 Hz) , 1 ,27 (3H, d , J =7,3 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 574 [M+H] (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 187 ΡΕ1340757 (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (768 mg, 1,34 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 5(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (38 ml) e água destilada (19 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (757 mg) num banho de água (30°C) durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (115 mg), uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1), separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-5% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (392 mg, rendimento de 64%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,30 (1H, s) , 4,40 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,30-4,18 (1H, m) , 4,18-4,00 (2H, m) , 3,90-3,85 (2H, m) , 3,30 (1H, dd, J=6,3, 3,8 Hz), 3,20-3, 05 (1H, m) , 1,18 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,06 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr) : 1749, 1650, 1599, 1552, 1397, 1316 cm'1 Espectro de massa (BAR+) 461 [M+H]+ ΡΕ1340757
Exemplo 6
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
HO
COO"Na+ (1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-N,N-Dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N,N-dimetil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (563 mg, 1,49 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 6) em dimetilformamida (28 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (264 mg, 2,87 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,15 g, 1,94 mmol) em acetonitrilo (23 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,7 ml, 9,76 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, 189 ΡΕ1340757 se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, acetato de etilo e solução aquosa saturada de foram adicionados hidroqenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (2:3) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (777 mg, rendimento de 68%). 1H-RMN (400 MHz CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8 ,2 Hz ), 7, 66 (2H, d, J= = 8,2 Hz), 7,09 (1H, s), 5,50 (1H, d, J= 43 ,5 Hz) , 5,25 (1H, d, J= = 13, 5 Hz) , 4,60-4,40 (2H, m) , 4, 35- 4, 20 (3H, m) , 4,20-4,00 (2H, m) , 3,32-3,25 (1H, m) , 3, 25- 3, 12 (4H, m) , 3, 05 (3H, s lg) , 1, 57 (1H, s ig), 1,38 (3H r d, Cs] II >~D Hz) , 1,25 (3H, d, J= =7,1 Hz) .
Espectro de massa (BAR+) : 588 [M+H]+ (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 190 ΡΕ1340757 (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-Dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (772 mg, 1,31 inmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 6(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (38 ml) e água destilada (19 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (7 68 mg) num banho de água (30°C) durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (112 mg) , uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil. O eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (375 mg, rendimento de 60%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,00 (1H, s) , 4,56-4,36 (2H, m) , 4,31-4,21 (1H, m) , 4,21-4,06 (2H, m) , 4,01- 3, 91 (2H, m) , 3,41-3,32 (1H, m) , 3,21-3,11 (1H, m) , 3, 00 (3H, s) , 2, 91 (3H, s), 1,21 (3H, d, J=6,4 Hz) , 1,11 (3H, d, J: =7,1
Hz) . IV (KBr) : 1750, 1610, 1540, 1397, 1305 cm'1 Espectro de massa (BAR+) : 475 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci9H2405N4S2Na: 475, 1087, Encontrado: 475, 1085 [M+H] + 191 ΡΕ1340757
Exemplo 7
Sal de sódio de ácido (lR,5S,6S)-2-[l-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
HO
COONa CONHEt (1) (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-N-Etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em- 3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N-etilcarba-moil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (450 mg, 1,58 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 7) em dimetil-formamida (23 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (174 mg, 1,89 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosfo-riloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (939 mg, 1,58 mmol) em acetoni-trilo (47 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (1,10 ml, 6,31 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a 192 ΡΕ1340757 temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo-10% de metanol e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il) azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (753 mg, rendimento de 81%) . 1H-RMN (4 0 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7, 66 (2 H, d, J=8, 8 Hz) , 7,43 (1H, s) , 7,12 (1H, t, J =5,1 Hz) , 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d, J= = 13 ,9 Hz) r 4,49 (2H, dd, J=16,1, 8 ,1 Hz), 4,32-4,20 (3H, m) , 4, 10-4,0 10 (2H, m) , 3,44 (2H, dq, J=7,3, 5,0 Hz), 3,29 (1H, dd , J=7, 3, 2,9 Hz) , 3,21 (1H, dq, J=8,9, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d , J=5, 9 Hz) , 1,28 (3H, d, J=7,3 Hz) , 1 ,23 (3H, t, J=7 , 3 Hz ) . Espectro de massa (BAR+) : 588 [M+H] + (2) Sal i de sódio de ácido (IR,5 S, ,6S)-2 - [ 1- ( 4- N-etilcarba- moil -1,3- tiazol-2- il)azet idin-3-il! 1tio-6 - [ (R) -1 -hidrc >xi - etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico 193 ΡΕ1340757 (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Etilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (750 mg, 1,23 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 7(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (38 ml) e água destilada (38 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (750 mg) à temperatura ambiente durante 1,7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (103 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-6% de acetonitrilo; água destilada-9% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo; água des-tilada-15% de acetonitrilo; água destilada-18% de acetonitrilo; água destilada-21% de acetonitrilo; e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S) -2-[1-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (384 mg, rendimento de 66%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,45 (1H, s), 4,60-4,48 (2H, m) , 4,40-4,29 (1H, m) , 4,25 (1H, quinteto, J=6,2 Hz), 4,20 (1H, dd, J= 9,1, 2,3 Hz), 4,12-4,00 (2H, m) , 3,43 (1H, 194 ΡΕ1340757 dd, J= 6,2, 2,3 Hz), 3,37 (3H, q, J=7,2 Hz), 3,32-3,18 (1H, m) , 1,30 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz), 1,19 (3H, t, J=7,2 Hz). IV (KBr): 1750, 1659, 1604, 1548, 1394, 1315 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 475 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci9H2405N4S2Na: 475, 1086, Encontrado: 475, 1070 [M+H] +
Exemplo 8
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
(1) (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N-isopropil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (460 mg, 1,65 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 8) em dimetilformamida (23 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (182 mg, 1,98 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-dife- 195 ΡΕ1340757 nilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (981 mg, 1,65 mmol) em acetonitrilo (49 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopro-piletilamina (1,15 ml, 6,60 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:2); acetato de etilo-5% de metanol e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarba-pen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (790 mg, rendimento de 80%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8, 8 Hz), 7,42 (1H, s) , 6,95 (1H, d, J=8,l Hz), 5,51 (1H, d, J=13,6 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,6 Hz), 4,49 (2H, dd, J=14,6, 8,1 Hz), 4,32-3, 40 (5H, m) , 3,30 (1H, dd, J=7,3, 2,9 Hz), 3,21 (1H, dq, J=8,8, 7,3 Hz), 1,60 (1H, s lg), 1,38 (1H, d, J=6,6 Hz), 1,30-1,20 (9H, m).
Espectro de massa (BAR+) : 602 [M+H] 196 ΡΕ1340757 (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Isopropilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (790 mg, 1,31 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 7(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (40 ml) e água destilada (40 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (790 mg) à temperatura ambiente durante 1,7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (110 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-4% de acetonitrilo; água destilada-8% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo; água destilada-16% de acetonitrilo; água desti-lada-20%de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopro-pilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (389 mg, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,45 (1H, s) , 4,55 (2H, 197 ΡΕ1340757 t, J=8,4 Hz), 4,40-4,30 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,3
Hz) , 4,19 (1H, dd , J=9,0 , 2,4 Hz) , 4,14- 4,03 (3H, m) , 3, 43 (1H, dd, J: = 6,3, 2, 4 Hz), 3,25 (1H, dq, J= = 9,0, 7,2 Hz), 1, 30 (3H, d, J= = 6, 3 Hz) , 1,23 (6H, d, J=6, 7 Hz) , 1,20 (3H f d, J=7, 2 Hz) . IV (KBr): 1751 , 1657, 1. 548, 1492, 14 69, , 1393, 1303, 12 63 cm-1 Espectro de mas sa (BAR+) : 489 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2oH2605N4S2Na: 489, 1242, Encontrado: 489, 1234 [M+H] +
Exemplo 9
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopentilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
(1) (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclopentilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N-ciclopentil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (550 mg, 1,67 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 9) em dimetilformamida (28 ml) foi adicionado acetato de hidrazi- 198 ΡΕ1340757 na (187 mg, 2,03 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-dife-nilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (993 mg, 1,67 mmol) em acetonitrilo (50 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diiso-propiletilamina (1,16 ml, 6,68 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cro-matografia sobre uma coluna de gel de sílica de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-me-tilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (346 mg, rendimento de 33%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,24 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,42 (1H, s), 7,05 (1H, d lg, J=8,0 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,6 Hz), 5,26 (1H, d, J=13,6 Hz), 4,49 (2H, dd, J=15,6, 8,1 Hz), 4,38-4,24 (3H, m) , 4,10-4,00 (2H, 199 ΡΕ1340757 m) , 3,30 (1H, dd, J=6,2, 2,1 Hz), 3,22 (1H, dq, J=9,4, 8,3
Hz), 2,12-2,00 (2H, m), 1,81 (1H, s lg), 1,78-1,44 (6H, m) , 1,38 (3H, d, J=5,8 Hz), 1,28 (3H, d, J=7,3 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 628 [M+H] + (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Isopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (790 mg, 1,31 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 8(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (40 ml) e água destilada (40 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (790 mg) à temperatura ambiente durante 1,7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (110 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-4% de acetonitrilo; água destila-da-8% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo; água destilada-16% de acetonitrilo; água destilada-20% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil- 200 ΡΕ1340757 1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (389 mg, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,45 (1H, s) , 4,55 (2H, t, J=8,4 Hz), 4,40-4,30 (1H, m) , 4,25 (1H, quinteto, J=6,3
Hz) , 4,1 9 (1H, dd, CM O Oh II •d Hz) , r 4,14-4,03 (3H, m) , 3, ,43 (1H, dd, J= = 6,3, . 2,4 Hz), 3,25 (1H, dq, J= 9,0, 7,2 Hz), 1, , 30 (3H, d, J= = 6,3 Hz) , 1,23 (6H, d, II Oh N 1,20 ' (3H, d, J=7,2 Hz) . IV (KBr) : 1751, 1657, 1548, 1492, 1469, 1393, 1303, 1263 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : 489 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2oH2605N4S2Na: 489, 1242, Encontrado: 489, 1234 [M+H] +
Exemplo 9
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopentilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclopentilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il) azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 201 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N-ciclo-hexil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (121 mg, 1,09 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 10) em dimetilformamida (19 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (121 mg, 1,31 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (648 mg, 1,09 mmol) em acetonitrilo (32 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,759 ml, 4,36 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido cloridrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:4); acetato de etilo-5% de metanol e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-l,3-tia-zol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil- 202 ΡΕ1340757 carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (598 mg, rendimento de 86%). 1H-RMN (4 0i 0 MHz, CDCls ) : δ (ppm) 8 , 23 (2H, d, J = 8, 8 Hz) , 7, 66 (2H, d, J=8, 8 Hz) r 7, 42 (1H, s) , 7,00 (1H, d, J=8, 8 Hz) , 5,51 (1H, d, J=13, 5 Hz ), 5,25 (1H, d, J= = 13,5 Hz) , 4,49 (2H, dd, J= =15,4, 8 , 8 Hz i) , 4 ,32-4,20 (3H, m) , 4, 11- 4,00 (2H, m) , 3, 96- 3 ,80 (1H, m) , 3 , 2 í 3 (1H, dd, J= = 6, 6, 2,2 Hz) , 3,21 (1H, dq, J =8,8, 7, 3 Hz: ) , 2, 01-1,18 (16H , m i nclui ndo 3H, d em 1 ,38, J= =5,9Hz e 3H, d em 1,28, J= = 7,3 Hz) .
Espectro de massa (BAR+) : 642 [M+H] + (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclo-hexilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil ] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (590 mg, 0,919 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 10(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidrogenação catalitica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (590 mg) à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogeno-carbonato de sódio (77 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia 203 ΡΕ1340757 sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-4% de acetonitrilo; água destilada-8% de acetonitrilo; água des-tilada-12% de acetonitrilo; água destilada-16% de acetonitrilo; água destilada-20%de acetonitrilo; água destilada-24% de acetonitrilo; água destilada-28% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxílico (318 mg, rendimento de 66%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (40 0 MHz , D2O, TSP) : δ (ppm) 7,4 5 (1H, s) , 4,55 (2H, dt, J= :8,5, 1, 9 Hz) , 4,40-4, .30 (1H, m) , 4,25 (1H, quinteto, J=6, 3 Hz) , 4,19 (1H, dd, J= 9, 0, 2,4 Hz) , 4,10 '-4,00 (2H, m) , 3,80-3 ,70 (1H, m) , 3 ,43 (1H, dd, J= = 6, 3 , 2,4 Hz) , 3,24 (1H, dq, J= = 9,0, 7,1 Hz) , 1,96-1 ,84 (2H, m) , , 1,83· -1,70 (2H, m) , 1,69-1 , 58 (1H, m) , 1,46-1, 10 (11H, m inclui ndo 3H, d, r em 1,30, J=6, 3Hz, e 3H, d, em 1, 19, J= 7,1 Hz) . IV (KBr): 1751, 1660, 1605, 1545, 1492, 1393, 1310, 1296 cm
Espectro de massa (BAR+) : 529 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C23H30O5N4S2Na: 529, 1555, Encontrado: 529, 1575 [M+H] +
Exemplo 11
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 204 ΡΕ1340757
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Morfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il) - azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-morfolinocar-bonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (410 mg, 1,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 11) em dimetil-formamida (20 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (138 mg, 1,50 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR, 5S,6S)-2-difenilfos-foriloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (743 mg, 1,25 mmol) em acetoni-trilo (37 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopro-piletilamina (0,873 ml, 5,01 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 205 ΡΕ1340757 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo-10% de metanol e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-morfoli-nocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (485 mg, rendimento de 62%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,19 (1H, s) , 5,51 (1H, d, J=13, 9
Hz), 5,25 (1H, d, J=13, 9 Hz), 4,50 (2H, ddd, J=13, 9, 8,1, 2.2 Hz), 4,35-4,20 (3H, m) , 4,10-4,00 (2H, m) , 3,95-3,60 (8H, m), 3,29 (1H, dd, J=6,6, 2,2 Hz), 3,20 (1H, dq, J=8,8, 7.3 Hz), 1,38 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz). Espectro de massa (BAR+) : 630 [M+H]+ (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-morfolino-carbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Morfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarba-pen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (480 mg, 0,762 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 11 (1) ) numa mistura de tetra-hidrofurano (24 ml) e água destilada (24 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de 206 ΡΕ1340757 paládio a 10% sobre carvão vegetal (480 mg) à temperatura ambiente durante 1,3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (64 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-6% de acetonitrilo; água destilada-9% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo; água desti-lada-15% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfoli-nocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (236 mg, rendimento de 60%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,15 (1H, s) , 4,56 (2H, dt, J=8,4, 0,9 Hz), 4,42-4,32 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,3 Hz), 4,21 (1H, dd, J=9,0, 2,3 Hz), 4,05 (2H, m) , 3, 90-3, 60 (8H, m) , 3,44 (1H, dd, J=6,3, 2,3 Hz), 3,25 (1H, dq, J=9, 0, 7,3 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,3 Hz). IV (KBr) : 1799, 1608, 1536, 1392, 1311, 1236, 1113 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 517 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2iH2606N4S2Na: 517,1192, Encontrado: 517,1186 [M+H] + 207 ΡΕ1340757
Exemplo 12
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR, 5S,6S)-2- [1- (4-Etoxicarbonil-3-tiazol-2-il)piperi-din-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 4-acetiltio-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (400 mg, 1,27 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 13) em dimetilfor-mamida (12 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (152 mg, 1,65 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfos-foriloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (755 mg, 1,27 mmol) em acetonitrilo (21 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,11 ml, 6,37 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. 208 ΡΕ1340757
Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:2) e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-etoxicar-bonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (296 mg, rendimento de 38%). -RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,27 (2H, d, 00 II •d 7 Hz) , 7, 71 (2H, d, J=8 ,7 Hz) , 7,51 (1H, s) , 5,56 (1H, d, J = 13, 7 Hz ) , 5,28 (1H, d, J = 13,7 Hz) , 4,40 (2H, q, J= = 7,1 Hz) r 4,39- 4, 30 (2H, m) , 4, 10- -4,00 (2H, m) , 3, 60- 3,20 (5H, m) , 2,20- 2, 00 (2H, m) , 1, 90 -1,70 (3H, m) , 1,43 (3H, d, J=6, . 5 Hz) , 1, 41 (3H, t, J=7, 1 Hz) , 1 ,36 (7,2 Hz) . (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Etoxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (291 mg, 0,578 209 ΡΕ1340757 irunol) (obtido tal como descrito no Exemplo 12(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (14 ml) e água destilada (7 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (291 mg) num banho de água (30°C) durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (42 mg), uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-5% de acetonitrilo; água destilada-7% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1- metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (69 mg, rendimento de 29%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, d2o, . TSP) : δ (ppm) 7, 69 (1H, s) i, 4,35 (2H, q, J=7, 1 Hz; ), 4,30-4 ,20 (2H, m incluindo dd em 4,23, J = 9,2, 2,5 Hz) , 4, 00-3, 85 (2H, m) , 3,55- 3,20 (5H, m) , 2,20 -2,05 (2H , m) , i, 75-1, 60 (2H, m) , 1,36 (3H, 1 t, J=7, 1 Hz) , 1,31 (3H , d, J=6, r 4 Hz) , i ,23 (3H, d, J=7 ,2 Hz) 1 . IV (KBr ) : 1 750, 172! 3, 1 603, 1540, 1448, 1385, 1337, 1265, 1223, 1210 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : 504 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2iH2706N3S2Na: 504,1239, Encontrado: 504,1246 [M+H] + 210 ΡΕ1340757
Exemplo 13
Sal dissódico de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-l, 3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1- metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR, 5S,6S)-2- [1- (4-p-Nitrobenziloxicarbonil-3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 4-acetiltio-l-(4-p-nitrobenzil-carbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (150 mg, 0,353 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 14) em dimetilformamida (7,5 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (46 mg, 0,49 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (200 mg, 0,353 mmol) em acetonitrilo (3,0 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,09 ml, 0,517 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, 211 ΡΕ1340757 se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato p-nitrobenzilo de sob a forma de um sólido amarelo-pálido (220 mg, rendimento de 89%) . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6 Hz), 8,22 (2H, d, J=8, 6 Hz), 7,66 (2H, co II T3 Hz) , 7,59 (2H, d, J= = 8,6 Hz) , 7,53 (1H, s), 5,51 (1H, d, J= = 13, 8 Hz) , 5,43 (2H, s), 5,22 (1H, d, J= 13,8 Hz), 4,35-4,20 (2H, m) , 4,05- 3, 90 (2H, m) , 3,50-3,10 (6H, m) , 2,20-1,95 (2H, m) , 1, 90- 1,50 (3H, m) , 1,38 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,31 (3H, d, J=7,2
Hz) .
Espectro de massa (BAR+) : 724 [M+H]+ (2) Sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 212 ΡΕ1340757 (IR,5S,6S)-2-[1-(4-p-Nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (570 mg, 0,788 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 13(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (38 ml) e água destilada (19 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (572 mg) num banho de água (30°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (132 mg), uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (285 mg, rendimento de 76%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,22 (1H, s) , 4,30-4,10 (2H, m) , 4, 00-3,78 (2H, m) , 3, 60-3, 05 (5H, m) , 2,15-2,00 (2H, m) , 1, 80-1,55 (2H, m) , 1,26 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,18 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr) : 1747, 1597, 1532, 1397, 1289 cm-1 213 ΡΕ1340757
Exemplo 14
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidin- 4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 4-acetiltio-l-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina (400 mg, 1,40 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 15) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (142 mg, 1,54 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,25 g, 2,10 mmol) em acetonitrilo (37 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,61 ml, 3,50 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a 214 ΡΕ1340757 reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido cloridrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-[l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (348 mg, rendimento de 42%). J (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 30 00 II •o a CM Hz) (2H, d, J=8, 6 Hz), 7,44 (1H, s) , 6 ,99 (1H, s lg), 5, 5 s lg) , 5,51 (1H, d, J= = 13, 8 Hz) , 5,24 (1H, d, J= = 13,
Hz), 4,35-4,20 (2H, m incluindo dd em 4,28, J=9,7, 2,9 Hz), 4, 04-3, 85 (3H, m) , 3,50-3,10 (6H, m) , 2,20-2,00 (2H, m) , 1, 95-1,70 (3H, m) , 1,39 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,31 (3H, d, J=7,3 Hz).
Espectro de massa (BAR+): 587 [M+H]+ (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[l-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pi-peridin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2- 215 ΡΕ1340757 em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (493 mg, 0,839 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 14(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (15 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (0,50 g) num banho de água (30°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (71 mg) , uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-5% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarba-pen-2-em-3-carboxílico (127 mg, rendimento de 32%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz , D20): δ (ppm) 7,70 (1H, s), 4,50-4,35 (2H, m incluindo dd em 4,18, J=9,2, 2,8 Hz), 4,00-3, 80 (2H, m) , 3,50-3,10 (5H, m) , 2,15 -1, 95 (2H, m) , 1,75-1,55 (2H, m) , 1,26 (3H, d, J=6,5 Hz), 1,19 (3H, d, J=9,0 Hz). IV (KBr) : 1749, 1667, 1594, 1547, 1386 cm'1 Espectro de massa (BAR+) : 475 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci9H2405N4S2Na: 475, 1086, Encontrado: 475, 1070 [M+H]+ 216 ΡΕ1340757
Exemplo 15
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
HO
COO'Na+ (1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-N-Metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)pi- peridin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 4-acetiltio-l-(4-N-metilcar- bamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1,21 g, 4,04 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 16) em dimetilformamida (36 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (408 mg, 4,43 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (3,12 g, 5,25 mmol) em acetonitrilo (72 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,76 ml, 10,1 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. 217 ΡΕ1340757
Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilormetanol (20:1) como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tia-zol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (1,336 g, rendimento de 55%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,64 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,40 (1H, s) , 7,19 (1H, s lg) , 5,50 (1H, d, J=12,8 Hz), 5,22 (1H, d, J=12,8 Hz), 4,40-4,20 (2H, m) , 4,00-3, 80 (2H, m) , 3,50-3,10 (5H, m) , 2,95 (3H, d, J=6,4 Hz), 2,15-1,90 (3H, m) , 1, 90-1,70 (2H, m) , 1,39 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=9,6 Hz).
Espectro de massa (BAR+): 587 [M+H]+ (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pi-peridin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2- 218 ΡΕ1340757 em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (493 mg, 0,839 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 14(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (15 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (0,50 g) num banho de água (30°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (71 mg) , uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-5% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4- carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (127 mg, rendimento de 32%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,70 (1H, s) , 4,50-4,35 (2H, m incluindo dd em 4,18, J=9,2, 2,8 Hz), 4,00-3, 80 (2H, m) , 3,50-3,10 (5H, m) , 2,15-1,95 (2H, m) , 1,75-1,55 (2H, m) , 1,26 (3H, d, J=6,5 Hz), 1,19 (3H, d, J=9,0 Hz). IV (KBr) : 1749, 1667, 1594, 1547, 1386 crn-1 Espectro de massa (BAR+) : 475 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci9H2405N4S2Na: 475, 1086, Encontrado: 475, 1070 [M+H] + 219 ΡΕ1340757
Exemplo 15
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
HO
.CONHMe COO"Na+ (1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-N-Metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)pi- peridin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 4-acetiltio-l-(4-N-metilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il) piperidina (1,21 g, 4,04 inmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 16) em dimetilformamida (36 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (408 mg, 4,43 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (3,12 g, 5,25 mmol) em acetonitrilo (72 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,76 ml, 10,1 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, 220 ΡΕ1340757 se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroqenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidroqenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (20:1) como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S) -2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tia-zol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (1,336 g, rendimento de 55%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,64 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,40 (1H, s) , 7,19 (1H, s lg) , 5,50 (1H, d, J=12,8 Hz), 5,22 (1H, d, J=12,8 Hz), 4,40-4,20 (2H, m) , 4,00-3, 80 (2H, m) , 3,50-3,10 (5H, m) , 2,95 (3H, d, J=6,4 Hz), 2,15-1,90 (3H, m) , 1, 90-1,70 (2H, m) , 1,39 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=9,6 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 602 [M+H] + (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R) -1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2- 221 ΡΕ1340757 il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-1-metilcarba-pen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (857 mg, 1,424 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 15(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (40 ml) e água destilada (20 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (853 mg) num banho de água (30°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (120 mg), uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de aceto-nitrilo; água destilada-5% de acetonitrilo; água destilada-7% de acetonitrilo; água destilada-9% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (317 mg, rendimento de 46%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,34 (1H, s) , 4,25-4,10 (2H, m incluindo dd em 4,16, J=9,2, 2,2 Hz), 3, 95-3, 80 (2H, m) , 3,50-3,10 (5H, m) , 2,84 (3H, s), 2,15-1,95 (2H, m) , 1,75-1,50 (2H, m) , 1,24 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,17 (3H, d, J=7,3
Hz) . 222 ΡΕ1340757 IV (KBr) : 1750, 1654, 1602, 1553, 1385, 1266 cm’1 Espectro de massa (BAR+) : 489 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2oH2605N4S2Na: 489, 1242, Encontrado: 489, 1255 [M+H]+
Exemplo 16
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarba-moil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-Dimetilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 4-acetiltio-l-(4-N,N-dimetil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (620 mg, 1,98 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 17) em dimetilformamida (35 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (201 mg, 2,18 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (2,35 g, 3,96 mmol) em 223 ΡΕ1340757 acetonitrilo (65 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopro-piletilamina (1,40 ml, 8,04 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno-10% de metanol e cloreto de metileno como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (412 mg, rendimento de 100%) . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,65 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,40 (1H, s) , 7,03 (1H, s lg) , 5,50 (1H, d, J=13, 6 Hz), 5,48 (1H, s lg) , 5,22 (1H, d, J=13, 6 Hz), 4,36-4,25 (2H, m incluindo dd em 4,32, J=9,5, 2,2 Hz), 3,71-3,60 (1H, m) , 3, 60-3, 49 (2H, m) , 3,40 (1H, dq, J=9,5, 7,3 Hz), 3,30 (1H, dd, J=6, 6, 2,2 Hz), 2, 60-2,45 (1H, m) , 2,40-2,05 (1H, m) , 1,77 (1H, d, J=4,4 Hz), 1,39 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,31 (3H, d, J=7,3 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 574 [M+H] + 224 ΡΕ1340757 (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-carba-moil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[(3 S)-1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (410 mg, 0,715 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 17(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (15 ml) e água destilada (15 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (410 mg) à temperatura ambiente durante 1,7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (60 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-6% de acetonitrilo; água destilada-9% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-[(3S)-1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirroli-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (150 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : 5 (ppm) 7,41 (1H, s), 4,35-4,20 (2H, 225 ΡΕ1340757 m) , 4,05 (1H, quinteto, J=5, 2 Hz) , 3, 90 (1H, dd, J=10, 8, 5, 9 Hz) , 3,75 -3, 65 (1H, m) , 3, 60- -3,40 (4H, m) , 2, 60-2, 45 (1H , m) , 2,20- -2,15 (1H, m) , 1,31 (3H, d, J=6, 4 Hz ) , 1, 25 (3H , d, J = 8, 9 Hz) . IV (KBr): 1749 , 1669 , 159 >9, 1 557, : 1391, 12 8 9 cm' -1 Espectro de ma ssa (BAR+) : 461 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci8H2205N4S2Na: 461,0929, Encontrado: 461,0926 [M+H] +
Exemplo 18
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[ (3S)-1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR,5S,6S)-2-[ (3S)-1- (4-Ciano-l,3-tiazol-2-il)pirroli-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (3S)-3-acetiltio-l-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina (137 mg, 0,541 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 19) em dimetil-formamida (7 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (60 mg, 0,649 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se 226 ΡΕ1340757 verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosfo-riloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (322 mg, 0,541 mmol) em acetoni-trilo (16 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopro-piletilamina (0,376 ml, 2,16 mmol). A mistura foi agitada durante 2 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:3) e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[(3 S)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil ] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (251 mg, rendimento de 84%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, C-| II co co Hz) , 7, 65 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7,21 (1H, s), 5, 50 (1H, d, J= = 13, 6 Hz) , 5,22 (1H , d, J=13, 9 Hz) , 4,35-4,24 (2H, m) , 3, 90 (2H, m) , 3,74-3,45 (3H , m) , 3, 38 (1H, dg, J: = 9,4, 4,7 Hz) , 3, 30 227 ΡΕ1340757 (1Η, dd, J=7,3, 2,9 Hz), 2,60-2,48 (1H, m), 2,24-2,10 (1H, m) , 1, 62-1,50 (1H, s lg), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,31 (3H, d, J=7,3 Hz) .
Espectro de massa (BAR+) : 556 [M+H] + (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-[(3S)-1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]- 1- metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-Ciano-l,3-tiazol-2-il)-pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen- 2- em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (250 mg, 0,450 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 18(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (12 ml) e água destilada (12 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (250 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (38 mg) , acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-6% de acetonitrilo; água destilada-9% de acetonitrilo; água des-tilada-12% de acetonitrilo; água destilada-15% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofili-zado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-ciano-l, 3-tiazol-2- 228 ΡΕ1340757 il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-1-metilcarba-pen-2-em-3-carboxílico (128 mg, rendimento de 64%), sob a forma de um sólido branco. -RMN (41 0 0 MH: 2, D20) : δ (ppm) 7, 56 (1H , s) , 4,32-4,22 (2H, m) , 4 ,10- 4,00 (1H, m), 3, 88 (1H, dd, J= 10,8, 5,9 Hz) , 3,74- 3, 62 (1H, m) , 3 ,62-3, 53 (1H, m) , - 3, 52- •3, 38 (3H, m), 2, 60- 2, 48 (1H, m) , 2 ,19-2, 08 (1H, m) , 1 ,31 (3H, d, J=6,4 Hz) , 1, 24 (3H, d, J= =7 ,3 Hz) • IV (KBr): 2229 / 1751, 1604, U 560 , 13 91, 1310 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : 443 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C18H2o04N4S2Na: 443, 0824, Encontrado: 443, 0799 [M+H] +
Exemplo 19
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-[(3R)-l-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pir- rolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (3R)-3-acetiltio-l-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (500 mg, 1,84 mmol) (obtida tal 229 ΡΕ1340757 como descrito no Exemplo de Referência 20) em dimetilfor-mamida (25 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (204 mg, 2,21 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosfo-riloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (1,09 g, 1,84 mmol) em acetonitri-lo (55 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (1,28 ml, 7,36 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno-9% de metanol e cloreto de metileno como eluente de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-[(3R)-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo sob a forma de um sólido amarelo-pálido (917 mg, rendimento de 87%). 230 ΡΕ1340757 ΧΗ· -RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, CN] 00 II ‘"O Hz) , 7, 66 (2H, d, J=8,2 Hz) , 7,40 (1H, s), 7 ,05 (: LH, s i ig), 5, 55 (1H, s lg) , 5,51 (1H, d, J= = 14,1 Hz) , 5,24 (1H, d, J= 14,1 Hz ) , 4,35-4, 25 (2H , m) , . 4,05-3, 90 (2H, m) , 3,70 -3, 60 (1H, m) r 3, 60-3,40 (4H, m) , 3, 31 (1H, dd, J= = 6,9, 2,9 Hz) , 2 , 60- 2, 40 (1H, m) , 2,20- -2,05 (1H, m) , 1,95 ( 1H, s ig), 1,39 (3H, d, OP =5,9 Hz) , 1,33 (3H, d, J= = 6, 8 Hz) .
Espectro de massa (BAR+) : 574 [M+H] + (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-carba-moil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (917 mg, 1,60 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 19(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (45 ml) e água destilada (45 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (917 mg) à temperatura ambiente durante 1,7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (134 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-2% de acetonitrilo; água destilada-4% de acetonitrilo; água destilada-6% de acetoni- 231 ΡΕ1340757 trilo; água destilada-8% de acetonitrilo; água destilada-10% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo; água destilada-14% de acetonitrilo; água destilada-16% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[ (3R)-1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (338 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,41 (1H, s), 4,35-4,20 (2H, m) , 4,10-4,00 (1H, m), 3,89 (1H, dd, J=ll,2, 6,7 Hz), 3,70-3,60 (1H, m) , 3,58-3,40 (4H, m) , 2, 60-2,45 (1H, m), 2,20-2,10 (1H, m) , 1,31 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,25 (3H, d, J=7,3 Hz) . IV (KBr) : 1748, 1608, 1597, 1559, 1391, 1289 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 461 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C18H2205N4S2Na: 461,0929 Encontrado: 461,0938 [M+H] +
Exemplo 20
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
232 ΡΕ1340757 (1) (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-t-Butildimetilsililoximetil-l,3-tia-zol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-t-butildimetil-sililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (415 mg, 1,16 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 12) em dimetilformamida (20,8 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (137,0 mg, 1,39 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (690 mg, 1,16 mmol) em acetonitrilo (34,4 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,34 ml, 7,69 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando 233 ΡΕ1340757 acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-t-butildimetilsililoximetil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarba-pen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo, sob a forma de um xarope amarelo-pálido (719 mg, rendimento de 94%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,3 Hz), 7, 66 (2H, d, J= = 8,8 H z) , 6,48 ( 1H, ε ;) , 5 , 50 (1H, d, J= 13, 9 Hz) , 5, 25 (1H, d, J= 13,9 Hz), 4, 66 (2H, s) , 4,46 (2 H, dd, J=15, - 4, 8 ,1 Hz) , 4, 32 -4,20 (3H, m) , 4,08- -4,00 (2H, m) , 3,28 (1H, dd, J=6,6, 2, 2 1 Hz), 3,21 (1H, d, dq, J= = 9,1, 7,3 Hz) , LO CD \—1 (1H, s lg) , 1, 37 (3H, d, J =5,9 Hz) , 1,26 (3H, d, J =7,3 Hz) , 0, 94 (9H, s) , 0, 10 (6H, s) • (2) (IR, 5S,6S) -2- [ ;i- (4-Hidroximetil -1,3- -tiaz ol-2- il)azeti- din-: 3-il] tio-6- [ (R) -1 -hidroxiet il] -1 -meti .lcarbapen -2-em -3- carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-[1-(4-t-butildime-tilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)— 1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (719 mg, 1,09 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 20(1)) em tetra-hidrofurano anidro (36 ml) foram adicionados, sequencialmente, ácido acético (0,19 ml, 3,3 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio em tetra-hidrofurano (3,3 ml, 3,3 mmol) num banho de gelo. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e hidrogenocarbonato de sódio aquoso 234 ΡΕ1340757 saturado e a camada aquosa foi adicionalmente extraída com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de magnésio anidro, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (15:1) como eluente de modo a proporcionar o composto desejado (IR,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (426,2 mg, rendimento de 72%), sob a forma de um xarope amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,20 (2H, d, J=8,l Hz), 7,66 (2 H, d, J=8, 1 Hz ), 6,50 (1H, s) , 5,54 (1H , d, J= 13, 6 Hz) , 5,27 (1H, . d, J= = 13 ,6 Hz), 4,56 (1H, d, J = 13, 6 Hz) , 4,53 (1H, d, J: = 13, 6 Hz) , 4 ,47 (1H, t, J=8, 5 Hz) , 4, ,41 (1H , t, J=8, 5 Hz) , r 4, 32 (1H, quinteto, J: = 6,4 Hz) , 4,2 8-4,20 (2H, m) , 4,08 i (1H, dd, J: = 8, 5, 5,4 Hz), 3, 88 (1H, dd, J=5,4, 8,5 Hz) , 3, 304 (1H, dd, 6, 2, 2,7 Hz), 3,204 (1H, dq, J=9,2, 7,3 Hz) , 1,35 (3H, . d, J= = 6, 2 Hz), 1,25 (3H, d, J= 7,3 Hz) . (3) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Hidroximetil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (426,2 mg, 0,78 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 20(2)) numa mistura de 235 ΡΕ1340757 tetra-hidrofurano (20 ml) e água destilada (10 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (530 mg) à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (65,5 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (156 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 6,50 (1H, s) , 4,36-4,28 (4H, m), 4,19-4,10 (1H, m) , 4,10-3,98 (2H, m incluindo 1H, dd em 4,01, J=8,0, 3,0 Hz), 3, 88-3, 68 (2H ,m), 3,24 (1H, dd, J=6,6, 2,9 Hz), 3,12-3,00 (1H, m) , 1,11 (3H, d, J=5, 9 Hz), 1,00 (3H, d, J=7,3 Hz). IV (KBr): 3357, 1748, 1600, 1528, 1470, 1396, 1311 cm’1 Espectro de massa (BAR+) : 434 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci7H2i05N3S2Na: 434,0820, Encontrado: 434,0796 [M+H] +
Exemplo 21
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 236 ΡΕ1340757
(1) (IR,5S,6S)—2—[1—(4-N-Metilcarbamoil-l,3-oxazol-2-il) -azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N-metilcarba-moil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (142 mg, 0,56 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 21) em dime-tilformamida (7 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (62 mg, 0,67 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosfori-loxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo (333 mg, 0,56 mmol) em acetonitrilo (7 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (0,39 ml, 2,24 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de 237 ΡΕ1340757 etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilormetanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-oxa-zol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (274 mg, rendimento de 88%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,77 (1H, , s) , 7,66 (: 2H, d , J=8 ,8 Hz), 6, 78 (1H, s lg), 5,51 (1H, d, J=13, 9 Hz) , 5,25 (1H, d , J=13,2 ? Hz), 4,51 (2H, q, J=8, 1 Hz ), 4, 30-4,21 (3H, m) , 4,1 08 (2H, dd, J=5,9, 8, 1 Hz), 3,30 (1H , dd, J=2,9, 7,3 Hz) , 3, 24-3,16 (1H, m), 2,94 (3H, d, J= :5, 1 Hz) , . 1,38 (3H, d, J= = 5, 9 Hz) , 1,26 (3H, d, J=7,4 Hz) . (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarba-moil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Metilcarbamoil-l, 3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (344 mg, 0,62 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 21(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (17 ml) e água destilada (9 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidró- 238 ΡΕ1340757 xido de paládio a 20% (344 mg) num banho de água (30°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (52 mg) , uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1), separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-5% de acetonitrilo como eluente. 0 eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-metil-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (166 mg, rendimento de 60%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (40 0 MHz, D20) : δ (ppm) 7,73 (1H , s) , 4,4 4 (2H , t, J=8, 1 Hz) , 4 ,20-4,13 (1H, m) , 4,10 (1H, t, J=6, 6 Hz ) , 4,05 (1H, c 1, J= = 9, 5 Hz), 3,94 (2H, quint. , J= :4,4 Hz) , 3, 28 (1H, dd, J= :2,2, 5 ,9 Hz), 3,09 (1H, quint . , J= = 7,3 Hz) , 2, 73 (3H, s) , 1, 15 ( 3H , d, J= 6,6 Hz ] ) , 1, 04 (3H , d, J=7 ,3 Hz; 1 . IV (KBr) : 3415, 1750, 1625, 1531, 1388 cm-1
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C18H2206N4SNa: 445, 1157, Encontrado: 445, 1162 [M+H]+
Exemplo 22
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-oxa-zol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico 239 ΡΕ1340757
HO
(1) (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (275 mg, 1,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 22) em dimetilformamida (14 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (126 mg, 1,37 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (677 mg, 1,14 mmol) em acetonitrilo (14 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,79 ml, 4,56 mmol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi sepa- 240 ΡΕ1340757 rada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo:metanol (10:10:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carba-moil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (313 mg, rendimento de 51%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 8,08 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,77 (1H, s), 7,55 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,32 (1H, d, J=13, 9 Hz), 5,14 (1H, d, J=13,9 Hz), 4,43 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,28-4,20 (1H, m) , 4,13 (1H, dd, J=2,9, 9,5 Hz), 4,00 (1H, t, J=6, 6 Hz), 3,90 (2H, dt, J=4,4, 9,5 Hz), 3,23-3,18 (2H, m) , 1,18 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,09 (3H, d, J=7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-oxazol-2-il)-azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (313 mg, 0,582 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 22(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (16 ml) e água destilada (8 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (313 mg) num banho de água (30°C) 241 ΡΕ1340757 durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (49 mg), uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1), separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-5% de acetonitrilo como eluente. 0 eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carba-moil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (110 mg, rendimento de 44%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (4 00 MHz, d20) : δ (ppm) 7,7 9 (1H, s) , 4,46 (2H, t, C-i II co 1 Hz) r 4,20- -4,16 (1H, m) , 4,10 (1H, t , J= =5,9 Hz ), 4, ,06 (1H, dd, j= =2, 9, 9,5 Hz) , 3,95 (2H, quint. , J= =4,4 Hz ) , 3, ,28 (1H, dd, j= =2, 9, 5, 9 Hz) , 3, 12-3,08 (1H, m) , 1,15 (3H, d, KD II 6 Hz) r 1,05 (3H, d, J= =7,3 Hz) . IV (KBr): 3360, 1749, 1671, 1625, 1384, 1275 cnT1 Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado: 431,0992, Encontrado: 431,1008[M+H]+
Exemplo 23
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l, 3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 242 ΡΕ1340757
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Ciano-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3- il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)azetidina (156 mg, 0,70 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 23) em dimetilformamida (8 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (77 mg, 0,84 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (416 mg, 0,70 mmol) em acetonitrilo (8 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,49 ml, 2,80 mmol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de 243 ΡΕ1340757 sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)aze-tidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (309 mg, rendimento de 84%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,74 (1H, s), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13, 9
Hz), 5,25 (1H, d, J=13,2 Hz), 4,56 (2H, q, J=8,l Hz), 4,29- 4,22 (3H, m) , 4,15-4,10 (2H, m) , 3,30 (1H, dd, J=2, 9, 7,3
Hz), 3,19 (1H, dt, J=7,3, 9,5 Hz), 1,37 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Ciano-l,3-oxazol-2-il) azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (309 mg, 0,59 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 23 (1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (16 ml) e água destilada (8 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (309 mg) num banho de água (30°C) durante 2 horas.
Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (50 mg) , uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1) e água desti- 244 ΡΕ1340757 lada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi lavada com uma mistura de acetato de etilo e tetra-hidrofurano (1:1), separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-5% de acetonitrilo como eluente. 0 eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il) azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (150 mg, rendimento de 60%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (40 0 MHz , D20) : δ (ppm) 7 ,92 (1H , s) 4 ,45 (2H , t, OD II •"D ,8 Hz) , 4,20 -4,16 (1H, m) , 4, ( 09 (1H, t, J=6, 6 Hz) , 4,05 (1H , d, J= =8,8 Hz), 3 , 95 (2H, quint. , J= =4,4 Hz) , 3,28 (1H, d, J= 6,6 Hz) , 3, 08 (1H, quint., J= = 8,1 Hz) , i- r14 (3H , d, VO II ,6 Hz) , 1,03 (3H, d, J= =7,3 Hz) • IV (KBr): 3372, 1750, 1628, 1394, 12 83 cm 1
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado: 413,0860, Encontrado: 413,0921[M+H]+
Exemplo 24
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COO'Na 245 ΡΕ1340757 (1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2- il) azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-azetidinocar-bonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (247 mg, 0,83 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 24) em dimetil-formamida (12 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (92 mg, 1,0 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosfo-riloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (493 mg, 0,83 mmol) em acetoni-trilo (25 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopro-piletilamina (0,58 ml, 3,32 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia 246 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica utilizando 10% de metanol-acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-[l-(4-azetidinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il) azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (321 mg, rendimento de 65%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,41 (1H, s) , 5,51 (1H, d, J=13,7
Hz), 5,25 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,56 (2H, t, J=7,4 Hz), 4,50- 4,40 (2H, m) , 4,35-4,10 (5H, m incluindo 2H, t em 4,17, J=7,4 Hz), 4,04 (1H, t, J=5,4 Hz), 4,02 (1H, t, J=5,4 Hz), 3.29 (1H, dd, J=7,0, 2,5 Hz), 3,18 (1H, dq, J=8,9, 7,3 Hz), 2.30 (2H, quinteto, J=7,4 Hz), 1,95-1,50 (s embotado incluindo 1H de grupo OH), 1,38 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz) .
Espectro de massa (BAR+) : 600 [M+H]+ (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-Azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (321 mg, 0,54 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 24 (1) ) numa mistura de tetra-hidrofurano (15 ml) e água destilada (15 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (321 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a 247 ΡΕ1340757 reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (45 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi lavada com a mistura de solventes anteriormente descrita, separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-5% de acetonitrilo; água desti-lada-10% de acetonitrilo; água destilada-15% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (162 mg, rendimento de 65%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,34 (1H, s) , 4,95-4,65 (4H, m) , 4,40-4,30 (1H, m) , 4,30-4,13 (4H, m incluindo 1H, quinteto em 4,25, J=6,3Hz, e 1H, dd, em 4,19, J=14,4, 7,2
Hz), 4,10-4,00 (2H, m) , 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,5 Hz), 3,26 (1H, quinteto, J=7,2 Hz), 2,37 (2H, quinteto, J=7,9 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr) : 1750, 1607, 1538, 1455, 1435, 1393, 1308, 1292 cm'1
Espectro de massa (BAR+) : 487 [M+H] +
Exemplo 25
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocar-bonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 248 ΡΕ1340757
(1) (IR,5S,6S)—2—[1—(4-Tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-tiomorfolino-carbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (207 mg, 0,62 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 25) em dimetilformamida (8 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (68,4 mg, 0,74 mmol) a 0°C sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (370,5 mg, 0,62 mmol) em acetonitrilo (16 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,43 ml, 2,48 mmol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi sepa- 249 ΡΕ1340757 rada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando 5% de metanol-acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(1-(1,3-tiazol-4-tiomorfolinocarbonil-2-il)azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (246 mg, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7, 67 (2H, d, J=8,7 Hz) , 7,12 (1H, s) , 5,51 (1H, d, J=13,8 Hz) , 5,25 (1H, d, J: = 13, 8 Hz) , 4, 60-4,40 (2H, m) , 4,35-4,22 (3H, m) , 4,10-4,00 (2H, m) , 4,00-3, 90 (4H, m) , 3,29 (1H, dd, J=6, 4 , 2,6 Hz), 3,21 (1H, dq, J=9,2, 7,3 Hz) , 2,80-2,60 (4H, m) , 1,80-1,50 (s embotado incluindo 1H de grupo OH), 1,38 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 646 [M+H] + (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfoli-nocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Tiomorfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (543 mg, 0,84 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 25(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 250 ΡΕ1340757 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (543 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (70,6 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-5% de acetonitrilo; água destilada-10% de acetonitrilo; água destilada-15% de acetonitrilo; água destilada-20% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (277 mg, rendimento de 62%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,10 (1H, s) , 4,56 (2H, t, J= O 00 II Hz) , 4,42- -4 ,30 (1H, . m) , 4,25 (1H, quinteto, J= = 6, 3 Hz) , 4,21 (2H, dd, J= =7,8, 2, 4 Hz), 4, 12 CM O 1 (2H, m) , 3, . 96- 3, 85 (2H, m) , 3, 85 -3 ,75 (2H , m) , 3, 44 (1H, dd, J=6, 3, 2,4 Hz) , 3,26 (1H, dq, J= = 8, 9, 7, 8 Hz) , 2,86 -2,70 (2H, m) , 2, . 70- O CM (2H, m) , 1,30 (3H, d, J=6, 3 Hz) , 1,20 (3H , d, J= =7,8
Hz) . IV (KBr) : 1749, 1608, 1535, 1454 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 533 [M+H]+ 251 ΡΕ1340757
Exemplo 26 (IR,5S,6S)-2-[l-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de etilo
HO
A uma solução de sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxílico (357 mg, 0,80 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 3) em dimetilformamida (5 ml) foi adicionado iodeto de etilo (357 mg, 2,40 mmol) a 0°C sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. A mistura foi adicionalmente agitada durante 2 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Ao fim deste tempo, à mistura de reacção foi adicionado acetato de etilo e a camada orgânica foi lavada, sequencialmente, com solução aquosa de cloreto de sódio a 10%, solução aquosa de tiossulfato de sódio a 10%, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo-20% de acetonitrilo; acetato de etilo-40% de acetonitrilo; acetato de etilo-60% de acetonitrilo e acetato de etilo, de modo a 252 ΡΕ1340757 originar um produto purificado, que foi dissolvido em cloreto de metileno e éter dietilico e hexano foram, sequencialmente, adicionados à solução de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6- [ (R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de etilo (387 mg, rendimento de 95%) , sob a forma de um pó incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,48 (1H, s), 6,99 (1H, s lg) , 5,61 (1H, s lg) , 4,48 (2H, q, J=8,5 Hz), 4,19-4,43 (4H, m) , 4,02-4,13 (2H, m) , 3,26 (2H, dd, J=7,l, 2,7 Hz), 3,10 (1H, dq, J=9,0, 7,3 Hz), 2,07 (1H, d, J=4,8 Hz), 1,37 (3H, d, J=6, 9 Hz), 1,36 (3H, t, J=7,5 Hz), 1,25 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr): 1770, 1669, 1602, 1543, 1324, 1283 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 453 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C19H25O5N4S2: 453, 1267, Encontrado: 453, 1235 [M+H] +
Exemplo 27 (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de fenilo
253 ΡΕ1340757 A uma solução de sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxílico (162 mg, 0,36 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 3) numa mistura de água (1 ml) e tetra-hidrofurano (1 ml) foi adicionado ácido clorídrico 1 M (0,33 ml, 0,36 mmol) a 0°C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. A uma solução do resíduo em acetonitrilo (10 ml) foram adicionados fenol (102 mg, 1,1 mmol), dimetilamino-piridina (22 mg, 0,18 mmol) e hidrocloreto de l-etil-3- (3-dimetilaminopropil)carbodiimida (139 mg, 0,73 mmol) à temperatura ambiente. Depois de agitação da mistura durante 30 minutos, foi adicionado a isso mais hidrocloreto de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (139 mg, 0,73 mmol) e a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos. Ao fim deste tempo, à mistura de reacção foi adicionado acetato de etilo e a camada orgânica foi lavada, sequencialmente, com ácido clorídrico diluído, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo-20% de acetonitrilo; acetato de etilo-40% de acetonitrilo; acetato de etilo-60% de acetonitrilo e acetato de etilo de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-[l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de fenilo (66 mg, rendimento de 36%), sob a forma de um pó incolor. 254 ΡΕ1340757 1H-RMN (4( 30 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 7,48 (1H, s) , 7, 38- 7 ,43 (2H, m) r 7,23-7,28 (3H, m) , 6,99 (1H, s lg) , 5, 60 (1H , s ig), 4, 40 -4,55 (2H, m) , 4,24-4,36 (3H, m) , 4,03-4, 13 ( 2H, m) , 3,32 (1H, dd, J= = 7,0, 2,6 Hz), 3,25 (1H, dq, J=9 ,2, 7,3 Hz) , 2, 09 (1H, lg), 1,39 (3H, d, J=6, i. 1 Hz) , 1,30 (3H r d, J=7,3 Hz). IV (KBr) : 1771, 1668, 1542, 1195 cm"1 Espectro de massa (BAR+) : 501 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (B AR+) : calculado para C23H25O5N4S2: 501,1266, Encontrado: 501,1266 [M+H] +
Exemplo 28 (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de pivaloiloximetilo
HO
A uma solução de sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilico (402 mg, 0,90 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 3) em dimetilacetamida (5 ml) foi adicionado pivalato de iodometilo (261 mg, 1,08 mmol) a 0°C sob uma 255 ΡΕ1340757 atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Ao fim deste tempo, foi adicionado acetato de etilo à mistura de reacção e a camada orgânica foi lavada, sequencialmente, com solução aquosa de cloreto de sódio a 10%, solução aquosa de tiossulfato de sódio a 10%, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado éter dietílico de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de pivaloiloximetilo (450 mg, rendimento de 93%), sob a forma de um pó incolor. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) : δ (ppm) 7,47 (1H, s) , 7,43 (1H, s lg) , 7,32 (1H, s lg) , 5,89 (1H, d, J=5, 9 Hz), 5,74 (1H, d, J=5, 9 Hz), 5,09 (1H, d, J=5,2 Hz), 4,42-4,58 (3H, m) , 4,20 (1H, dd, J= 9,4, 2,4 Hz), 3, 89-4,02 (3H, m), 3,37 (1H, dq, J= 9, 1, 7,4 Hz), 3,26 (1H, dd, J=6,3, 2,6 Hz), 1,14 (3H, d, J=7,4 Hz), 1,13 (9H, s), 1,11 (3H, d, J=6,5 Hz). IV (KBr): 1778, 1754, 1602, 1545, 1282, 1118 cm'1 Espectro de massa (BAR+) : 539 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C23H31O7N4S2:539, 1634, Encontrado: 539, 1634 [M+H] +
Exemplo 29 (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 1-(isopropoxicarboniloxi)etilo 256 ΡΕ1340757
HO
A uma solução de sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (245 mg, 0,55 mmol) obtido tal como descrito no Exemplo 3 em dimetilacetamida (5 ml) foi adicionado isopro-pilcarbonato de 1-iodoetilo (317 mg, 1,21 mmol) a 0°C sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1,5 horas. A mistura resultante foi adicionalmente agitada durante 1,5 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Ao fim deste tempo, à mistura de reacção foi adicionado acetato de etilo e a camada orgânica foi lavada, sequencialmente, com solução aquosa de cloreto de sódio a 10%, ácido clorídrico 0,1 M, solução aquosa de tiossulfato de sódio a 10%, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo-20% de acetonitrilo; acetato de etilo-40% de acetonitrilo; acetato de etilo-60% de acetonitrilo e acetato de etilo, de modo a originar um produto purificado, 257 ΡΕ1340757 que foi dissolvido em cloreto de metileno e foram, sequencialmente, adicionados éter dietilico e hexano à solução de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tia-zol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de 1- (isopropoxicarboniloxi-etilo (266 mg, rendimento de 88%), sob a forma de um pó incolor. 1H-RMN (4 C )0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 48 (1H, s), 7, 00 (1H, s ig) / 6, 82- -6,92 (1H, m) , 5 , 65 (1H, s lg) , 4,84-4 , 97 (1H, m), 4,43- 4,52 (2H, m ) , 4,18- 4,39 (3H, m) , 4,02-4, 07 (2H, m) , 3, 25 (1H, dd, J=7 ,0, 2,5 Hz) , 3, 17 (1H, dq, J=9 ,3, 7,3 Hz), 2,16 (1H, s lg) , 1, 61 (: 72h, d, J= = 5,5 Hz), 1, 59 (3/2h, d, J=5,5 Hz) , . 1,18-1 ,39 (12H , m) . IV(KBr): 1763, 1669, 1542, 1276, 1074 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 555 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C23H3i08N4S2: 555, 1584, Encontrado: 555, 1570 [M+H]
Exemplo 30 (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6- [ (R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 1-(3-pentiloxicarboniloxi)etilo
HO
258 ΡΕ1340757 A uma solução de sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (402 mg, 0,90 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 3) em dimetilacetamida (8 ml) foi adicionado 3-pentilcarbonato de 1-iodoetilo (568 mg, 1,98 mmol) a 0°C sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. A mistura resultante foi adicionalmente agitada durante 2 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Ao fim deste tempo, à mistura de reacção foi adicionado acetato de etilo e a camada orgânica foi lavada, sequencialmente, com solução aquosa de cloreto de sódio a 10%, ácido clorídrico 0,1 M, solução aquosa de tiossulfato de sódio a 10%, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo-20% de acetonitrilo; acetato de etilo-40% de acetonitrilo; acetato de etilo-60% de acetonitrilo e acetato de etilo de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2- il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 1-(3-pentiloxicarboniloxi)etilo (506 mg, rendimento de 96%), sob a forma de um sólido amorfo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,48 (1H, s), 7,00 (1H, s lg) , 6, 85-6, 93 (1H, m) , 5,58 (1H, s lg) , 4,57-4, 66 (1H, m) 4, 42-4,52 (2H, m) , 4,15-4,32 (3H, m) , 4,02-4,10 (2H, m) 259 ΡΕ1340757 3, 24 (1H, dd, J=7,1, 2,6 Hz) , 3,17 (1H, dg, J=9,3, 7, 4 Hz) , 2, 00 (1H, s lg) , 1,50-1 ,72 (7H, m) , 1,34 (3/2h, d, J=6, 5 Hz) , 1,36 (3/2H, d, J=6, 5 Hz; ), 1,24 (3/2H, d, J=7, 1 Hz) , 1,25 (3/2H, d, J=7,3 Hz), 0, 84-0, 98 (6H, m) . IV (KBr) : 1761, 1671, 1542, 1268, 1074 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 583 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C25H35O8N4S2: 583, 1896, Encontrado: 583, 1907 [M+H] +
Exemplo 31
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-pirrolidino-carbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Pirrolidinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-pirrolidinocar-bonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (235 mg, 0,84 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 26) em dimetil-formamida (12 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (103 mg, 110 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 3 horas. Depois de se 260 ΡΕ1340757 verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosfo-riloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (499 mg, 0,84 mmol) em aceto-nitrilo (25 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (0,56 ml, 3,36 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-pirro-lidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (240 mg, rendimento de 46%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,28 (1H, s), 5,51 (1H, d, J= 13,8 Hz), 5,25 (1H, d, J= 13,8 Hz), 4,49 (2H, dd, J= 14,6, 8,5 Hz), 4,35-4,20 (3H, m), 4,05 (1H, t, J= 6,1 Hz), 4,04 (1H, 261 ΡΕ1340757 t, J= 6,1 Hz), 3,78 (2H, t, J= 6,5 Hz), 3,62 (2H, t, J= 6,5 Hz), 3,29 (1H, dd, J= 7,2, 2,5 Hz), 3,20 (1H, dq, J = 9,0, 7,3 Hz), 1,82-1, 98 (4H, m) , 1,38 (3H, d, J= 6,1 Hz),1,27 (3H, d, J= 7,2 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-pirrolidi-nocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Pirrolidinocarbonil-l,3-tia-zol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (240 mg, 0,39 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 31 (1) ) numa mistura de tetra-hidrofurano (12 ml) e água destilada (12 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (240 mg) num banho de água (30°C) durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (33 mg), ácido acético e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna
Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-6% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-pir-rolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (113 mg, 262 ΡΕ1340757 rendimento de 60%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,40 (1H, s) , 4,56 (2H, t, J= 8,6 Hz), 4,43-4,30 (1H, m) , 4,25 (1H, quint., J= 6,4
Hz), 4,20 (1H, dd, J= 8,9, 2,4 Hz), 4,10-3,98 (2H, m) , 3,62 (2H, t, J= 6,6 Hz), 3,54 (2H, t, J= 6,6 Hz), 3,26 (1H, dq, J= 8,9, 7,4 Hz), 3,43 (1H, dd, J= 8,9, 2,4 Hz), 2,05-1,85 (4H, m), 1,30 (3H, d, J= 6,4 Hz),1,27 (3H, d, J= 7,4 Hz). IV (KBr) : 3375, 7, 1605, 9, 1537,4, 1468, 9, 1423, 6, 1396, 6, 12 98,2 cm’1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 501 [M+H] +
Exemplo 32
Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-piperidinocar-bonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-piperidino-carbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (276 mg, 0,85 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 27) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado acetato de 263 ΡΕ1340757 hidrazina (94 mg, 1,02 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (505 mg, 0,85 mmol) em acetonitrilo (20 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopro-piletilamina (0,59 ml, 3,40 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-piperi-dinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (464 mg, rendimento de 87%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,02 (1H, s), 5,51 (1H, d, J= 13,7 264 ΡΕ1340757
Hz) , 5,2 6 (1H, d, J= 13, 7 Hz) , 4,51 (1H, r t, J= 8 , 1 Hz), 4, 50 (1H , t, J= 8, 1 Hz) , 4 , 32-4 ,20 (3H, m incluindo 4,25 (1H, dd, J= 8,0, 2 ,5 Hz) ) , 4,07 (1H, t, J= = 5,7 Hz ), 4,05 a \—1 t, J= 5,7 Hz) r 3,72-3 ,58 ( 4H, m ) , 3, 28 (1H, dd, J= 6,8, 2,5 Hz), 3,20 ( 1H, dq , J = = 8 ,4, 7, 3 Hz) , 1, 80-1,45 (6H, m) , 1,38 (3H, d, J= 6, 8 Hz) , 1, 26 (3H r d, J= 7, 1 Hz) . (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S) -2- [1 - (4-pipe iridino- carbonil- -1,3-tiazol -2- -il)azetidin -3- il] tio -6 -[ (R)- -1- hidro- xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (464 mg, 0,74 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 32(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (20 ml) e água destilada (20 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (464 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (62 mg), ácido acético e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-2% de acetonitrilo; água destilada-5% de acetonitrilo; água destilada-10% de acetonitrilo; água destilada-20%de acetonitrilo; água destilada-30% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluido 265 ΡΕ1340757 foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-piperidinocarbo-nil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (171 mg, rendimento de 45%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,04 (1H, s), 4,10-4,00 (2H, m) , 4,42- 4,30 (1H r m) , 4 , 25 (1H , quint., J= 6, 2 Hz) r 4,21 (1H, dd, J= 9, 0, 2, 4 Hz) , 4, 05 (2H, ddd, J= 8, 3, 5, 4, 2,7 Hz) , 3, 62 (2H, t, J= = 5,3 Hz) , 3, 49 (2H, t , J= = 5, , 3 Hz) r 3,44 (1H, dd, J= 6, ,2, 2 r 4 Hz) , 3, r 26 (1H, dq, J= 7, 7, 7, 4 Hz) , 1,70 -1, 60 (4H, m) r 1, 60- 1,50 (2H, m), 1, 30 (3H r d, J= = 6,4
Hz),1,27 (3H, d, J= 7,2 Hz). IV (KBr): 3382,5, 1747,7, 1605,9, 1538,4, 1400,4, 1310,7, 1249, 0 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 515 [M+H] +
Exemplo 33
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
COO'Na+ (1) (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 266 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N-ciclopropil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (342 mg, 1,15 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 28) em dimetilformamida (12 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (127 mg, 1,38 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (684 mg, 1,15 mmol) em acetonitrilo (25 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,80 ml, 4,60 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilormetanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2- 267 ΡΕ1340757 il) azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (606 mg, rendimento de 88%) , sob a forma de um sói ido amarelo-pálido. 1H-RMN (4l 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz) , 7,66 (2H, d, J= 8,7 Hz) , 7,44 (1H, s) , 7 ,23 (1H, s ig), 5,51 (1H, d, J= 13, 7 Hz) , 5,25 (1H, d , J= 13, 7 Hz) , 4,49 (2H, dd, J= 14, 3, 7 , 6 Hz) , 4, 37-4,19 (3H , m) / 3, 98- -4,12 (3H, m) , 3,30 (1H, dd, J= 9,2, 7,3 Hz) / 3, 20 ( :ih , dq, J = 9,2, 7,3 Hz) , 21 ,80-2, r 94 (1H, m) , 1/38 (3H, d, j= 6,4 Hz) , 1,27 (3H, d, J= 7,3 Hz) , 0,85 (1H, t, J = = 5, 5 Hz) , 0,83 (1H, t, J = 5, ,5 Hz) , 0,58-0 ,70 ( ;2H, m) . (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R) -1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (606 mg, 1,01 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 33(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (606 mg) num banho de água (35°C) durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (85 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi 268 ΡΕ1340757 purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-5% de acetonitrilo; água destilada-10% de acetonitrilo e água destilada como eluen-te. 0 eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (275 mg, rendimento de 56%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,46 (1H, s) , 4,54 (2H, t, J= 8,2 Hz), 4,38-4,30 (1H, m) , 4,25 (1H, quint., J= 6,3
Hz), 4,19 (1H, dd, J= 8,9, 2,4 Hz), 4,10-4,19 (1H, dd, J= 8,9, 2,4 Hz), 3,43 (1H, dd, J= 6,3, 2,4 Hz), 3,24 (1H, dq, J= 8,9, 7,3 Hz), 2,78-2,70 (1H, m) , 1,30 (3H, d, J= 6,4
Hz), 1,19 (3H, d, J= 7,2 Hz), 0,85 (1H, t, J= 5,2 Hz), 0,84 (1H, t, J= 5,2 Hz), 0,73-0,61 (2H, m). IV (KBr): 3397,0, 1750,1, 1603,5, 1545,7, 1489,7, 1470,5, 1393, 3, 1312,3 cm’1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 465 [M+H]+
Exemplo 34
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclobutilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
HO
COONa
CO-NH
269 ΡΕ1340757 (1) (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclobutilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-N-ciclobutil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (398 mg, 1,28 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 29) em dimetilformamida (15 ml) foi adicionado acetato de hidra-zina (141 mg, 1,53 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarba-pen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (761 mg, 1,28 mmol) em acetonitrilo (30 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,88 ml, 5,12 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel 270 ΡΕ1340757 de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de eti-lo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (578 mg, rendimento de 74%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7, 66 (2H, d, J= 8, 7 Hz), 7 ,41 (1H, s) , 5, 51 (1H, d , J= 13, 7 Hz ) , 5,25 (1H, d, J = 13,7 Hz) , 4, 60- -4,42 (3H, m incluindo 4, 52 (2H, quint • r J = 7,8 Hz) ) , 4, 36 - 4,20 (3H, m) , 3, 30 (1H, dd, J= 6,9 r 2, 5 Hz) , 3,2 !1 (1H, dq, J= 9,2, 7,4 Hz) , 2, 47- -2,33 (2H, m) r 2,10-: 1, 92 (2H r m) , 1,85- -1, 65 (2H, m) , 1, 39 (3H, d, J= 6, 4 Hz), 1 ,28 (3H, d, J= 7,3 Hz) . (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclobutilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (578 mg, 0,94 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 34(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (578 mg) num banho de água (35°C) durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (79 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi 271 ΡΕ1340757 chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-5% de acetonitrilo; água destilada-10% de acetonitrilo e água destilada como eluente. 0 eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)—2—[1—(4— N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (322 mg, rendimento de 68%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,45 (1H, s), 4,56 (2H, t, J= 8,0 Hz), 4,44-4,29 (2H, m) , 4,25 (1H, quint., J= 6, 3 Hz), 4, 20 (1H, dd, J= 8,8, 2,4 Hz), 4,12-4,00 (2H, m) , 3 ,44 (1H, dd, J= 6, 3, 2,5 Hz) , 3,26 (1H, dq, J= 8,8, 7,4 Hz), 1 \—1 CM 2,28 (2H, m) , 2, 15-2, 00 (2H, m) , 1, 87-1,72 (2H, m) , 1,31 (3H, d, J= = 6, 2 Hz ), i, 20 (3H, d, J= 7 ,2 Hz). IV (KBr): 3395 ,1, 175 0,1, 1659,4, 1604,5, 1545,7, 1490,7, 1470, 5, i: 393,8, 12 110,4 , 1251,6 cm 1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 501 [M+H] +
Exemplo 35
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metilpipera-zino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COO"Na 272 ΡΕ1340757 (1) (IR,5S,6S)—2—{1—[4—(4-Metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-(4-metilpi-perazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,35 g, 3,97 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 30) em dimetilformamida (40 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (438 mg, 4,76 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (lR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (2,36 g, 3,97 mmol) em acetonitrilo (40 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopro-piletilamina (2,77 ml, 15,9 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidro-genocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de 273 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (1:5) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metil-piperazino-l-carbonil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (828 mg, rendimento de 60%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,16 (1H, s), 5,51 (1H, d, J= 13,8 Hz), 5,25 (1H, d, J= 13,8 Hz), 4,50 (1H, t, J= 4,9 Hz), 4,49 (1H, t, J= 4,9 Hz), 4,33-4,20 (3H, m), 4,06 (1H, t, J= 4,9 Hz), 4,05 (1H, t, J= 4,9 Hz) 3, 99-3, 73 (4H, m) , 3,29 (1H, dd, J= 7,0, 2,5 Hz), 3,20 (1H, dq, J = 9,1, 7,3 Hz), 2,74-2,48 (4H, m), 1,38 (3H, d, J= 6,3 Hz), 1,27 (3H, d, J= 7,3 Hz) . (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metilpipe-razino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(4-Metilpiperazino-l-carbo-nil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (500 mg, 0,78 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 35(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (25 ml) e água destilada (25 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (500 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de 274 ΡΕ1340757 reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados ácido acético e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com a mistura de solventes anteriormente descrita e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-2% de acetonitrilo; água destilada-4% de aceto-nitrilo; água destilada-6% de acetonitrilo; água destilada-8% de acetonitrilo; água destilada-10% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo e água destilada como eluente. 0 eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (192 mg, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,24 (1H, s) , 4,57 (2H, t, 00 II ,4 Hz), 4, 39-4 , 30 (1H , m) , 4 ,25 ( 1H, quint., J= 6,3 Hz) , 4,20 1 I1H, dd, r j= 9, 0, 2,4 Hz) , 4, 15-3, 05 (12H, m incluindo 4, 04 (2H, dd, J= 8,4, 4, . 9 Hz) r 3, 44 (1H, dd, J= 6,3, 2,6 Hz) , 3 ,25 (1H, dq, C-| II o 7,0 Hz) ), 2, 88 (3H, s), 1,30 (3H, d, J= 6,4 Hz) , r 1, 20 (3H, d, J= 7, 1 Hz) • IV (KBr): 3397, o, : 1757, 8, 1606,4, 1536, 0, 1457 ,9, 1429,0, 1383, 7, 1312,3 cm'1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 508 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C22H3o05N5S2Na: 508,1688, Encontrado: 508,1688 [M+H]+ 275 ΡΕ1340757
Exemplo 36
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazeti-dino-l-carbonil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR,5S,6S)—2 —{1—[4-(3-Metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-(3-metoxiazeti-dino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (350 mg, 1,07 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 31) em dimetilformamida (18 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (118 mg, 1,28 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (636 mg, 1,07 mmol) em acetonitrilo (32 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diiso-propiletilamina (746 μΐ, 4,28 mmol). A mistura foi agitada durante 6 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se 276 ΡΕ1340757 verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (95:5 e 9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)—2 — {1— [4 — (3 — metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (636 mg, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (4 0 0 MH: z, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, C-| II co co Hz) , 7, 66 (2H, d, J = 8,8 Hz) , 7,44 (1H, s) , ! 5, 51 (1H, d, J= = 13, 9 Hz) , 5,25 (1H, d, . J=13,2 Hz) , 4,75 -4, 69 (1H, m) , 4,51- -4,43 (2H, m) , 4,42- 4,37 (1H, m) , 4,32- 4,20 (5H, m) , 4,04 (2H, dt, J=8,1 , 5,1 Hz) , r 3,33 (3H, s) , 3,29 (1H, dd, J=2,2, 6, 6 Hz) , 3,20 (1H, dq, J=9, 2 , 7,3 Hz) , 1,38 (3H, d, J=6, 6 Hz) , 1,27 (3H, d, J= =7,3 Hz) . (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiaze-tidino-l-carbonil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(3-Metoxiazetidino-l-carbonil) -1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi- 277 ΡΕ1340757 etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (630 mg, 1,00 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 36(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (32 ml) e água destilada (32 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (630 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidro-genocarbonato de sódio (84 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada e água destilada:acetonitrilo (92:8) como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (239 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,39 (1H, s) , 4,76-4, 69 (1H, m) , 4,56 (2H, d, J= = 8,1 Hz) , 4,44- -4,31 (4H, m) , 4,25 (1H, dq, J=6, 1, 6,4 Hz) , 4,20 (1H, dd, J=2,4, 9,1 Hz) , 4,09- -3, 99 (3H, m), 3,43 (1H, dd, J=2,4, 6,1 Hz) , 3,37 (3H, s) , 3,26 (1H, dq, J=9,1 , 7,2 Hz) , 1,30 (3H, . d, J= = 6, 4 Hz) , 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz) IV (KBr) : 1750, 1607, 1538, 1449, 1395, 1306 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 539 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C2iH2506N4S2Na2 539, 0111, Encontrado 539, 1026 [M+Na] + 278 ΡΕ1340757
Análise elementar calculada para C2iH2506N4S2Na. 3/2H20 C : 4 6, 4 0 %; H:5,19%; N:10,31%; S:ll,80%
Encontrado C:46,48%; H:5,53%; N:10,60%; S:11,66%
Exemplo 37
Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Fenilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)aze- tidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (893 mg, 2,68 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 32) em dimetilfor-mamida (40 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (296 mg, 3,21 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosfori-loxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo (1,59 g, 3,21 mmol) em acetonitrilo 279 ΡΕ1340757 (53 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (1,87 ml, 10,7 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido cloridrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-fenilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,2 g, rendimento de 71%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,29-8,18 (2H, m) , 7,73- 7, 62 (4H, m) , 7, 62- -7,50 (1H , m), 7,42-7,82 (2H, m) , 7,18- 7,09 (1H, m) , 5,51 (1H, d, J= 13,8 Hz), 5, , 25 (1H, d, J= 13, 8 Hz) , 4,54 (2H, , dd, J= 15,6, 7,8 Hz) , 4,40 -4,21 (3H, m) , 4,21-4,08 (2H, m) , 3, 31 (1H, dd, J= 6,9, 2,5 Hz) , 3,23 (1H, dq, J= 9, 1, 7 , 3 Hz) r 1,39 (3H, d, J= 6,4 Hz) , 1,29 (3H, d, J= = 7,3 Hz) . 280 ΡΕ1340757 (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-fenilcarba-moil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-Fenilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (400 mg, 0,63 minol) (obtido tal como descrito no Exemplo 37(1) ) numa mistura de tetra-hidrofurano (120 ml) e água destilada (120 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (400 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (53 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de crornatografia sobre uma coluna
Cosmosil utilizando água destilada-4% de acetonitrilo; água destilada-8% de acetonitrilo; água destilada-12% de acetonitrilo; água destilada-16% de acetonitrilo e água destilada como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-fenilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3—i1]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (211 mg, rendimento de 64%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,60-7,51 (3H, m) , 7,54-7,42 (2H, m) , 7,36-7,27 (1H, m) , 4, 63-4, 52 (2H, m) , 4,29-4,39 281 ΡΕ1340757 (1H, m) , 4,25 (1H, quint., J= 6,3 Hz) , 4,20 (1H, dd, J= 9,0, 2,3 Hz) , 4,09 (1H, t, J= 8,8 Hz), 4,08 (1H, t, J= 8,8 Hz) , 3,44 (1H, dd, J= 6,6, 1,9 Hz), 3, 25 (1H, dq, J= 6,3, 5,9 Hz), 1,3 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,20 (3H, dd, J= 7,2, 2,4 Hz) . IV (KBr): 3368,1, 1750,1, 1676,8, 1598,7, 1538,9, 1506,1, 1470,5, 1440, 6, 1394,3, 1324, 9, 1295, 9, 1245, 8 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 501 [M+H]+
Exemplo 38
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxietilcar-bamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR, 5S,6S)—2 — (1—{4—[2—(t-Butildimetilsililoxi) etilcar-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitroben-zilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[2-(t-butil-dimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (398,2 mg, 0,96 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 33) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (110 mg, 1,19 mmol) à temperatura 282 ΡΕ1340757 ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (561,4 mg, 0,94 mmol) em acetonitrilo (38 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,7 ml, 4,02 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azeti-din-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (605,3 mg, rendimento de 80%), sob a forma de um xarope amarelo-pálido. ^-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,79 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8, 8 Hz), 7,54 (1H, t, J=5,8 Hz), 7,42 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,26 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,48 283 ΡΕ1340757 (1Η, dd, J=8,3, 7,3 Hz), 4,45 (1H, dd, J=8,3, 7,3 Hz), 4, 32-4,23 (3H, m) , 4,06 (1H, dd, J=8,3, 5,9 Hz), 4,03 (1H, dd, J=8,3, 5,9 Hz), 3,76 (2H, t, J=5,8 Hz), 3,52 (2H, q, J=5,8 Hz), 3,30 (1H, dd, J=6,8, 2,0 Hz), 3,208 (1H, dq, J=9, 0, 7,4 Hz), 1,95 (1H, s lg) , 1,38 (3H, d, J=5,7 Hz), 1,27 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,91 (9H, s), 0,07 (6H, s). (2) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(2-Hidroxi-etilcarbamoil)-1,3-tia- zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR, 5S,6S)-2-(1-{4-[2-(t-butil-dimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (605,3 mg, 0,84 mmol) em tetra-hidrofurano (30 ml) foram adicionados ácido acético (0,15 ml, 2,6 mmol) e uma solução de fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em tetra-hidrofurano (2,5 ml, 2,5 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (2:3) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S, 6S)-2-{1-[4- (2-hidroxietilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3- 284 ΡΕ1340757 il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (383,7 mg, rendimento de 75%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (500 MHz r CDC13 ) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=7 , 9 Hz) , 7,66 (2H, d, J= 7, 9 Hz) r 7, 53 (1H, t, J=5,3 Hz) , 7, 45 (1H, s) , 5,508 (1H, d I J=1 3, 7 Hz) , 5, 255 (1H, d, J = 13 ,7 Hz) , 4,50 (1H, t, J= :8, 6 Hz) r 4, 48 (1H, t, J=8, 6 Hz) , 4, 32 -4,24 (3H, m) , 4 ,07 (1H, . dd, j= = 8, 6, 5,3 ] Hz) , 4,05 (1H, dd, J = 8, 6, 5,3 Hz) , 3 , 807 (2H, t, J=5 ,3 Hz) , 3,58 (2H, q/ J=5 ,3 Hz) , 3,295 (1H, dd, J: = 7 , 6, 2 ,3 Hz ) , 3 ,21 (1H, dq, J=9 , 1, . 7, 6 Hz) , 2,78 (1H, s ig), 1, 92 (1H, s ig) , 1,3* 3 (3H , d r J=6, 3
Hz), 1,24 (3H, d, J=7,6 Hz). (3) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)—2 —{1—[4-(2-hidroxi-etilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R) -1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(2-Hidroxiletilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (383,7 mg, 0,64 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 38(2)) numa mistura de tetra-hidrofurano (20 ml) e água destilada (9,6 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (400 mg) num banho de água (30°C) durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidro-genocarbonato de sódio (53,4 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A 285 ΡΕ1340757 camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada-3% de acetonitrilo; água destilada-5% de acetonitrilo; água des-tilada-10% de acetonitrilo e água destilada como eluente. 0 eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxietilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (152,2 mg, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,29 (1H, s) , 4,36 (2H, t, J=8,4 Hz), 4,20-4,10 (1H, m) , 4,05 (1H, quinteto, J=6, 6
Hz), 4,00 (1H, dd, J=10,9, 2,2 Hz), 3,90-3,83 (2H, m), 3,55 (2H, t, J= :5,5 Hz), 3,32 (2H, t, J =5,5 Hz), 3 ,24 (1H, dd, J= 6,6, 2 r 2 Hz) , 3,06 (1H, dq, J=10, 9, 8, 6 Hz), 1,11 (3H, d, J=6, 6 Hz; ) , 1,00 (3H, d, J= = 8, 6 Hz) . IV (KBr) : 3396 , 1748, 1649, 1599, 1551, 1395 , 1315, 1265 cm-1 Espectro de mas sa (BAR+) : m/ z : 491 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci9H2306N4S2Na 491,1035, Encontrado 491,1024 [M+H] +
Exemplo 39
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidro-ximetil-propilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 286 ΡΕ1340757
(1) (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(IS)—1—(t-Butildimetilsililoxime-til)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (610 mg, 1,37 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 34) em dimetilformamida (30 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (152 mg, 1,65 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR, 5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (814 mg, 1,37 mmol) em acetonitrilo (40 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (955 μΐ, 5,48 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à 287 ΡΕ1340757 mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexa-no:acetato de etilo (1:2) e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (928 mg, rendimento de 89%) , sob a f o rma de um sóli< do amarelo- •pálido 1 e 1H-RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, , J=8 ,8 Hz) , 7, 66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,42 : (1H , s) , 7,42-7 , 38 (1H r d lg, J=9, 5 Hz) , 5, 51 (1H, d L, J= 13, 9 Hz) , 5,25 (1H, d, j = 13, 9 Hz) , 4,50 (1H, t, J=8,1 Hz) , 4,45 (1H, t, J= 8,1 Hz) r 4,31- 4,23 (2H, m) , 4,27 (1H, dd, J=8, 8, 2, 6 Hz) , 4,07 -4, 01 (2H, m), 4 , 00- 3, 94 (1H, m), 3,72 (1H, dd, J =10,3, 2, 6 Hz ), 3, 65 (1H, dd, J=10 ,3, 4,0 E íz) , 3, 30 (1H, dd, J= =7,3, 2 , 6 Hz) , 3,21 (1H, dq, J=8,8, 6, 6 Hz) , 1, 72-1,5 6 (2H, m) , 1, 38 (3H, d, J= =5,7 Hz) , 1,27 (3H , d, J=6, 6 Hz) , 0, 95 (3H, . t r J=7,3 Hz) , 0, 90 (9H, s) , 0,06 (6H, s) . (2) (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-1-Hidroximetil-propilcarba-moil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-1-(t- 288 ΡΕ1340757 butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoil]-1, 3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (920 mg, 1,23 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 39(1)) em tetra-hidrofurano (46 ml) foram adicionados ácido acético (208 μΐ, 3,63 mmol) e uma solução de fluoreto de tetrabu-tilamónio 1 M em tetra-hidrofurano (3,63 ml, 3,63 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 2 dias à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidroxi-metil-propilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (437 mg, rendimento de 56%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (1H, s), 7,24-7,19 (1H, d lg, J=7,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,26 (1H, d, J=13,7
Hz), 4,50 (2H, dt, J=8,8, 4,9 Hz), 4,32-4,24 (3H, m) , 4,07 (2H, dt, J=8, 8, 5,9 Hz), 4,01-3,93 (1H, m) , 3,81-3,75 (1H, m) , 3,71-3,64 (1H, m) , 3,30 (1H, dd, J=6,8, 2,9 Hz), 3,21 (1H, dq, J=9,0, 6,8 Hz), 1,75-1, 66 (1H, m) , 1, 65-1,55 (1H, 289 ΡΕ1340757 m) , 1,38 (3H, d, J=6, 8 Hz), 1,28 (3H, d, J=7,8 Hz), 1,00 (3H, t, J=7,8 Hz). (3) Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidro-ximetil-propilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-((IS)-1-Hidroximetil-propil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (430 mg, 0,681 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 39(2)) numa mistura de tetra-hidrofurano (22 ml) e água destilada (22 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (430 mg) à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidro-genocarbonato de sódio (57 mg) , acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada e água destilada:acetonitrilo (94:6) como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidroximetil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (212 mg, rendimento de 60%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,49 (1H, s), 4,59-4,52 290 ΡΕ1340757 (2H, m) , 4,39-4 ,31 1—1 4 , 25 (1H, dq, J = 6, 8, 6, 3 Hz) , 4,21 (1H, dd, J: = 9, 0 , 2,4 Hz ) , 4,10 -4, ( 03 (2H, m) / 4,01- -3, 93 (1H, m) , 3, 71 (1H, dd, J= dl ,7, 4,5 Hz) , 3, 64 (1H, dd, J=ll, ,7, 6 ,8 Hz) , 3, 43 (1H, dd, J= = 6,3 , 2,4 Hz) r 3,26 (1H, dq, J=8,8 , 7,2 Hz) , 1,73-1, 62 (1H, , m) , 1,57 -í, 44 (1H, m) , O 00 \—1 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,2 0 (3H, d, J=7,2 Hz) r 0, 93 (3H, t, J=7,4 Hz). IV (KBr): 1750, 1650, 1602, 1547, 1393, 1313 cm1 2 3 4 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 519 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado 519,1348, Encontrado 519,1339 [M+H]+
Análise elementar calculada para C2iH2706N4S2Na. 7/4H20 C:45, 85%; H:5,79%; N:10,18%; S:ll,66%
Encontrado C:46,07%; H:5,78%; N:10,29%; S:ll,61%
Exemplo 40
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidroxi-metil-etilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
1 (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(lS)-2-(t-Butildimetilsililoxi)-1- 2 metil-etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6- 3 [(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 4 p-nitrobenzilo 291 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[ (IS)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metil-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (645 mg, 1,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 35) em dimetilformamida (32 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (166 mg, 1,80 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (892 mg, 1,50 mmol) em acetonitrilo (45 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,05 ml, 6,0 mmol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexa-no:acetato de etilo (1:2) e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metil]-etilcarbamoil}-l,3-tiazol-2- 292 ΡΕ1340757 il)azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (949 mg, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 66 (2H, d, 00 00 II •"D Hz), 7,44-7,38 (1H , < 1 lg, J =5, 9 Hz) , 7,42 (1H, s) , 5, 51 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d, J= 13, 9 Hz) , 4,52 -4,42 (2H ,m), 4,33-4,22 (3H, m) f 4,22- 4,14 (1H, m) , 4,04 (2H, ddd, J=14,0, 5,9, 2,9 Hz) f 3, 67 (1H, dd, O \—1 II •"0 ,3, 4 ,4 Hz 0, 3, ,62 (1H, dd, J=10,3, 2, 9 Hz) , 3,30 (1H, dd, J=6, 6, , 2,2 Hz) , 3,21 (1H, dq, J=7,3, , 6 , 6 Hz) , 1,38 (3H, d, J =5,9 Hz) , 1,27 (3H, d, J=7,3 Hz), 1, 25 (3H, d, J = 6, 6 Hz) , 0, 92 (9H, s) , 0,07 (6H, s). (2) (IR,5S, 6S) -2 -{1- [4- ( (IS)-2-Hidroxi- 1-: metiletilcarba- moil )-1,3- -tiaz ol-2- il]azetidin-3-il}tio- -6- [(R)-1-1 lidrox i- etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[ (IS)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metil-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (940 mg, 1,28 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 40(1)) em tetra-hidrofurano (47 ml) foram adicionados ácido acético (221 μΐ, 3,85 mmol) e uma solução de fluoreto de tetrabutil-amónio 1 M em tetra-hidrofurano (3,85 ml, 3,85 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 3 dias à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com 293 ΡΕ1340757 solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo: metanol (99:1 e 9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-2-hidroxi-l-metiletilcarba-moil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (462 mg, rendimento de 58%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (1H, s), 7,23-7,19 (1H, d lg, J=7,3 Hz), 5,51 (1H, d, J=13, 9 Hz), 5,25 (1H, d, J=13, 9
Hz), 4,52-4,46 (2H, m) , 4,31-4,24 (2H, m) , 4,27 (1H, dd, J=9, 5, 2,0 Hz), 4,22-4,15 (1H, m) , 4,06 (2H, dt, J=8,l, 5,1
Hz), 3,79-3,71 (1H, m) , 3, 66-3, 59 (1H, m) , 3,30 (1H, dd, J=6, 6, 2,2 Hz), 3,21 (1H, dq, J=9,5, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,28 (6H, d, J=7,3 Hz). (3) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-2-hidroxi-l-metiletilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (IR, 5S, 6S) — 2 —{1—[4-((IS)-2-Hidroxi-l-metiletil-cabamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hi-droxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (460 mg, 0,745 mmol) (obtido tal como descrito no 294 ΡΕ1340757
Exemplo 40 (2)) numa mistura de tetra-hidrofurano (23 ml) e água destilada (23 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (460 mg) à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reac-ção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidro-genocarbonato de sódio (63 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada e água destilada:acetonitrilo (82:12) como eluente. O eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-2-hidroxi-l-metiletilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (179 mg, rendimento de 48%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,48 (1H, s), 4,56 (2H, dd, J=8,3, 8,3 Hz), 4,39-4,32 (1H, m), 4,25 (1H, dq, J=6,3, 6,4 Hz), 4,20 (1H, dd, J=9,l, 2,4 Hz), 4,18-4,11 (1H, m) , 4,10-4,03 (2H, m) , 3,68 (1H, dd, J=ll,6, 4,8 Hz), 3,61 (1H, dd, J=ll, 6, 6,7 Hz), 3,44 (1H, dd, J=6,3, 2,4 Hz), 3,26 (1H, dq, J= 9, 1, 6,6 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,22 (3H, d, J=6,7 Hz), 1,20 (3H, d, J=6,6 Hz). IV (KBr): 1749, 1650, 1602, 1547, 1393, 1313, 1295 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 505 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2oH2606N4S2Na 505, 1191, Encontrado 505, 1196 [M+H] +
Análise elementar calculada para C2oH2506N4S2Na. 4/3H20 295 ΡΕ1340757 C:45,45%; H:5,28%; N:10,60%; S:12,13%
Encontrado C:45,63%; H:5,35%; N:10,66%; S:ll,91%
Exemplo 41
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidroxime-til-2-metilpropilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COO"Na+ (1) (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(lS)-l-(t-Butildimetilsililoxime- til)-2-metil-propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metil-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (500 mg, 1,09 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 36) em dimetilformamida (25 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (121 mg, 1,31 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen- 296 ΡΕ1340757 2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (648 mg, 1,09 mmol) em acetonitrilo (33 ml) foi adicionado, gota a gota, à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (759 μΐ, 4,36 mmol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:2 e 1:4) como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-1-(t-butildimetil-sililoximetil)-2-metil-propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (649 mg, rendimento de 84%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz , CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= OO 00 II Hz) , 7, 66 (2H, d, J: =8,8 Hz), 7,47-7,52 (1H, r d lg, J= = 9,8 Hz) , 7,43 (1H, s), 5 ,52 (1H, d, J=13,7 Hz) , 5,25 (1H, d, J= = 13, 7 Hz) , 4,51 (1H, t, J=7,8 Hz), 4,45 (1H, t, . J=7,8 Hz) , 4,28 \—1 dd, J=9,3, 2,0 Hz) , 4,31-4,25 (2H, m) , 4,05 (2H, ddd, 00 r~- II •"D , 5,6, 1, 2 Hz), 3 ,86-3,80 (2H, m) , 3, 62 (1H, dd, C-| II co , 3,9 Hz), 3,30 (1H, dd, J=6,8, 2,C > Hz) , 3,22 (1H, , dq, 297 ΡΕ1340757 J= 9,3, 6,8 Hz), 2,05-1,95 (1H, m) , 1,39 (3H, d, J=5, 9 Hz), 1,28 (3H, d, J=6, 8 Hz), 0,99 (3H, d, J=6, 8 Hz), 0,97 (3H, d, J=6, 8 Hz), 0,91 (9H, s) , 0,06 (6H, s) . (2) (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-Hidroximetil-2-metilpropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni- trobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (690 mg, 0,914 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 41(1)) em tetra-hidrofurano (35 ml) foram adicionados ácido acético (157 μΐ, 2,74 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-butilamónio 1 M em tetra-hidrofurano (2,74 ml, 2,74 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 2 dias à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-l-hidroximetil-2-metilpropilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6- 298 ΡΕ1340757 [(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (388 mg, rendimento de 66%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8 ,23 (2H, d, OO OO II >"0 Hz) , 7, 66 (2H, d, J=8 ,8 Hz) , 7,44 (1H, s ), 7,33-7 ,28 (1H, d ig, J=8, 8 Hz) , 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz ), 5,25 ( :ih, d, J= 43, 9 Hz) , 4,50 (2H, ddd, J=8,: 1, 8,1, 3, r 7 Hz), 4,32 -4, 24 (2H, m) , 4,27 (1H, dd, J= 9,2, 2,5 Hz), 3,8 :8- 3,76 (2H, m) , , 3,74 (1H, dd, J=ll, 0, 6, 6 Hz), 3, 30 (1H, dd , J=7,0, 2,5 Hz) , 3,22 (1H, dq, J=7,2, 7,3 Hz) , 2,06-1, 95 (1H, m), 1, 38 (3H , d, J=6, 6 Hz) , 1,28 (3H, d, J=7,3 Hz) r 1,02 (3H, d, J=7,3 Hz) , 0, 99 (3H, d, J=6, ,6 Hz) . (3) Sal de sódio de ácido ('. IR, 5S,6S)-2- d- [4-( (IS )-i- hidroximetil-2-metilpropilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]aze-tidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-((IS)-l-Hidroximetil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R) -1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (380 mg, 0,588 mmol) obtido tal como descrito no Exemplo 41(2) numa mistura de tetra-hidrofurano (19 ml) e água destilada (19 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (380 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidro-genocarbonato de sódio (49 mg), acetato de etilo e água 299 ΡΕ1340757 destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada e água destilada:acetonitrilo (76:24) como eluente. 0 eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidroximetil-2-metilpropilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (164 mg, rendimento de 52%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,49 (1H, s) , 4,61-4,53 (2H, m) , 4,39-4 ,31 (1H, m) , 4,25 (1H, dq, J = 6,2, 6, 3 Hz) , 4,20 (1H, dd, J =2,4, • 9,1 Hz ), 4,11-4,0' 3 (2H, m) , 3, 87 -3, 83 (1H, m) , 3, 80 (1H, dd, J= :3, 8, 11,7 Hz) , 3,71 (1H, dd, J=7, 5, 11 ,7 Hz) , 3, 43 (1H, dd, J=2,4, 6,2 Hz), 3,26 (1H, dq, J=9, 1 , 7,2 Hz) , 1, 97 -í, 84 (1H, m) , 1,30 (3H, d, J=6, 3 Hz) , 1,20 (3H, d, J = 7,2 Hz) , 0,97 (3H, d, J·· = 6, 8 Hz) , 0, 93 (3H, d, J=6,9 Hz). IV (KBr): 1749, 1651, 1600, 1547, 1493, 1470, 1393, 1315 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 555 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C22H3o06N4S2Na 533, 1505, Encontrado 533, 1497 [M+H] +
Análise elementar calculada para C22H2906N4S2Na. 5/3H20 C:46, 9 6%; H:5,79%; N:9,96%; S:ll,40%
Encontrado C:46,89%; H:5,86%; N:10,41%; S:ll,15% 300 ΡΕ1340757
Exemplo 42
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidroxi-metil-3-metilbutilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxílico
COO~Na+ (1) (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(lS)-l-(t-Butildimetilsililoxime- til)-3-metil-butilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3- carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metil-butilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (450 mg, 0,954 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 37) em dimetilformamida (23 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (105 mg, 1,14 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[ (R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni-trobenzilo (567 mg, 0,954 mmol) em acetonitrilo (28 ml) à mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (665 μΐ, 301 ΡΕ1340757 3,82 iranol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:2 e 1:4) como eluente de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-1-(t-butildifenil-sililoxi)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (645 mg, rendimento de 87%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 66 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 7, , 41 (1H, s) , 7 , 35- 7,30 (1H, d ig# J=9, 5 Hz) , 5,51 (1H, d, r J=13 /9 Hz), 5 ,25 (1H, d, J= 13, 9 Hz) , 4,50 (1H, dd, J=8 ,1 Hz; ) , 4, r 4 5 C 1H, dd, J=8, 1 Hz) , 4,31 -4,24 (3H, m) , 4,21- -4, 13 (1H, m) , 4 ,06 (1H, dd, J= 5,9, 2,9 Hz), 4,03 (1H, dd, j= 5,9, 2,2 Hz) r 3,66 (2H, d, J =2, 9 Hz) , 3,30 (1H, dd, J=7,3 r 2,9 Hz) , 3,21 (1H, dq, J=6, 6, 7,3 Hz) , 1, 68 -1,57 (1H , m) , 1,52 (1H , ddd , J= = 14, 6 , 8, 8, 5,9 Hz) , 1,44 (1H, ddd, J= 14 ,6, 8,8, 5, 9 Hz) , i, 38 (3H, r d, J=5, 9 Hz), . 1,28 ! (3H :, d, J= =7,3 Hz) , 0, 95 (6H , t, J=6, 6 Hz) , 0, 91 (9H, s), 0 , 05 (6H, s) e 302 ΡΕ1340757 (2) (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-hidroximetil-3-metilbutil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni-trobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)—2 — (1 — {4 — [ (IS)—1—(t — butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (640 mg, 0,827 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 42(1)) em tetra-hidrofurano (32 ml) foram adicionados ácido acético (142 μΐ, 2,48 mmol) e uma solução de fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em tetra-hidrofurano (2,48 ml, 2,48 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 2 dias à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-l-hidroximetil-3-metilbutilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (302 mg, rendimento de 55%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 303 ΡΕ1340757 7, 66 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 7,44 (1H, s), 7,18- 7,14 (1H, d ig, J=7, 8 Hz) , 5,51 (1H, d, J=13 ,7 Hz), 5,26 (1H, d, J= 13, 7 Hz) , 4,53- -4,47 (2H, m) , 4,31- 4,25 (3H , m) , 4,20 -4,13 (1H, m) , 4,07 (2H, ddd, J=8,8 , 4,9, r 4,9 Hz) , 3,80-3,74 (1H, m) , 3, 66 -3, 60 (1H, m) , 3, 30 (1H, dd, J=6,8 , 2,9 Hz) , 3,22 (1H, dq, J=6, 8, r 6,8 Hz) , 2, li )-2,74 (1H, t lg, J= =5,9 Hz) , 1 ,74- 1, 65 (1H, m) , 1,51 (1H, ddd, J=14,7, 8,8, 5,9 Hz) , 1,43 (1H, ddd, J=14 ,7, 8,8, 5, 9 H :z), 1,38 (3H, d, J=6, 8 Hz) , 1,28 (3H, d, J= = 6, 8 Hz) , 0, 96 (3H, d, J=4, 9 Hz) , 0, 95 (3H, d, J=4,9 Hz). (3) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-hidroximetil-3-metilbutilcarbamoil)-1, 3-tiazol-2-il]azeti-din-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-((IS)-l-Hidroximetil-3-metil-butilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (300 mg, 0,455 mmol) obtido tal como descrito no Exemplo 42(2) numa mistura de tetra-hidrofurano (15 ml) e água destilada (15 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (380 mg) à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (38 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob 304 ΡΕ1340757 pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil utilizando água destilada e água destilada:acetonitrilo (76:24) como eluente. 0 eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4 — ((IS)-l-hidroximetil-3-metilbutilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (131 mg, rendimento de 53%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MH [z, ϋ20, , TSP) : δ (ppm) 7, 45 (1H, s) , 4, 60- -4,53 (2H, m) , 4,39· -4, 31 (1H, m), 4,25 C LH , dq, OP = 6, 0 , 6,4 Hz) , \—1 V (1H, dd, J= :2,0, 9, 1 Hz), 4,19- 4, 13 (1H, m) , 4,06 (2H, dd, J=4, 9 , 8, 4 Hz) , 3,68 (1H, dd, J=4,7, 11,6 Hz) , 3, 59 (1H, dd, J=6, 7, 11, 6 Hz), 3 ,43 (1H, dd, J= =2,0, . 6, 0 Hz) , 3,26 (1H, dq, J= = 9,1, r 7,2 Hz) , 1,69· -1 ,57 (1H, m) , 1,50 (1H, ddd, J=4, 5, 9, - 2, 14, 1 Hz), 1, 39 (1H r ddd, J= 4,5, 9,2, 14,1 Hz) , 1,39 (3H, , d, J= =6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J= =7,2 Hz) , 0, 91 (6H, t, J= = 6,2 Hz ) · IV (KBr) : 175 o, 1651, 1604, 1547, 1492, 1470, 1390, 1311
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 547 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C23H3206N4S2Na 547,1661, Encontrado 547,1674 [M+H] +
Exemplo 43
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS,2S)-1-hidro-ximetil-2-metilbutilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico 305 ΡΕ1340757
(1) (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(IS,2S)-1-(t-Butildimetilsililoxi- metil)-2-metilbutilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(IS,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (910 mg, 1,93 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 38) em dimetilformamida (46 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (213 mg, 2,31 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,15 g, 1,93 mmol) em acetonitrilo (58 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (1,34 ml, 7,72 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura 306 ΡΕ1340757 resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: n-hexano: acetato de etilo (1:1 -* 1:4)) de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S)—2—(1—{4—[ (IS,2S)-1-(t-butildimetilsililo-ximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (765 mg, rendimento de 51%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (4 0 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7, 66 (2H, d, J= 8,8 Hz) , 7, 50-7, 45 (1H, d : Lg# J=9, 5 Hz) , 7,42 (1H, s) , 5, 66 (1H, d, J=13, 9 Hz), 5,25 (1H , d, J= 13, 9 Hz) , 4,50 (1H , t , J = 8,1 Hz) , 4,44 (1H, t, J= = 8,1 Hz), 4 , 32- 4,24 (2 H, m) , 4, 27 (1H, dd, J=2, 6, 9,7 Hz), 4,07-4,02 (2H, m) , 3 , 91- 3, 85 (1H, m) , 3 , 83 (1H, dd, J=2,9, 10,: 3 Hz) , 3, 63 (1H, dd, J=3, - 7, 10 , 3 Hz :) , 3, 30 (1H, dd, J= =2, 6 ·, 7,0 Hz) , 3,21 (1H, dq, J= = 9,7 ', 6,6 Hz) , 1, 88-1,84 (1H , s ig), 1 , 80- 1,70 (1H, m) , 1 , 58- -1,50 (1H, m) , , 1,38 (3H, d, J=6, 6 Hz) , 1,27 (3H, d, J= 7,3 Hz) , 1, ,22-1, 10 (1H, m) , 0, 95 (3H , d, J=7,3 Hz) , o, 90 (3H , t, J=7 ,4 Hz ), 0,91 (9H, s) , 0,05 (6H, s) . (2) (IR t 5S, 6S) -2- {1-[4- - ( (1S,2S) -1-Hidroximetil -2-meti lbu- tilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 307 ΡΕ1340757 (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(1S,2S)-1-(t-Butildimetil-sililoximetil)-2-metil-butilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2- em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (760 mg, 0,982 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 43(1)) em tetra-hidro-furano (38 ml) foi adicionado a ácido acético (169 μΐ, 2,95 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (2,95 ml, 2,95 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e água à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa
saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (9:1)) de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((1S,2S)-l-hidroximetil-2-metilbutil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (390 mg, rendimento de 60%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (1H, s), 7,33-7,29 (1H, d lg, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,8
Hz), 4,53-4,46 (2H, m) , 4,31-4,28 (2H, m) , 4,28 (1H, dd, 308 ΡΕ1340757 J= 9,5, 2,2 ! Hz) . , 4,1 0-4,03 (2H, m) , 3, 94- -3, 87 (1H, m) , 3 , 85- 3, 79 (1H, m) , 3, 78- -3, 72 (1H, m) , 3, 30 (1H, dd, J=7, 0 r 2,2 Hz) , 3,21 (1H, dq, J=9,5, 7,3 Hz) , 1, 83- -1,72 (1H, m) , 1 ,61- 1,48 (1H, m) , 1,38 (3H, d, J = 6, 6 Hz) , 1,28 (3H, r d, J: =7,3 Hz) , 1,26- -1,14 (1H, m) , 0, 99 (3H, d, J: = 6, 6 Hz) , 0, 93 (3H, t, J=7,3 Hz) . (3) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS, 2S)-1-hidroximetil-2-metilbutilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azeti-din-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((1S,2S)-l-Hidroximetil-2-metilbutilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (390 mg, 0,591 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 43(2)) numa mistura de tetra-hidrofurano (20 ml) e água destilada (20 ml) foi submetido a hidro-genação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (390 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (50 mg) , acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluen-te: água destilada -► água destilada:acetonitrilo (76:24)) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (1R,5S,6S)—2—{1—[4—((1S,2S)— 309 ΡΕ1340757 l-hidroximetil-2-metilbutilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]aze-tidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (136 mg, rendimento de 42%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,49 (1H, s), 4,61-4,53 (2H, m) , 4,39- 4,31 (1H, m) , 4,25 (1H, dq, CM V II 6 ,3 Hz) , 4,20 (1H, dd, J=9,0, 2,3 Hz), 4,11 -4, 04 (2H, m) , 3, 91 (1H, ddd, J=7, 4, 3, 6, 3, 6 Hz) , 3,81 (1H, dd, j= dl,8, 3 , 6 Hz) , 3, 72 (1H, dd, J=11, 8, 7 ,4 Hz) , 3 ,43 (1H r dd, J = 6 ,2, , 2,3 Hz) , 3,25 (1H, dq, J = 9,0, 7 ,2 Hz), 1,76-1, 64 (1H, m) r 1,55- 1,44 (1H, m) , 1,30 (3H, d, J=6, 3 Hz) , 1, 20 (3H, d r J=7,2 Hz) , 1,22 -1,11 (1H, m) , 0, 95 (3H, d, J=6, 9 Hz) , o, 88 (3H, t, J=7,4 Hz). IV (KBr) : 1750, 1651, 1602, 1547, 1493, 1470, 1394, 1311 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 547 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C23H3206N4S2Na 547,1661;
Encontrado: 547,1647[M+H]+
Exemplo 44
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-l-(hidroximetil)etilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxílico
/OH
COO'Na' 310 ΡΕ1340757 (1) (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(2-t-Butildimetilsililoxi)-(1-t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(2-t-butildi-metilsililoxi)-(1-t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoil ]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (770 mg, 1,45 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 39) em dimetil-formamida (39 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (160 mg, 1,74 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR, 5S,6S)-2-(difenilfosfo-riloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (862 mg, 1,45 mmol) em acetoni-trilo (43 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,01 ml, 5,79 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão 311 ΡΕ1340757 reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: n-hexa-no: acetato de etilo (1:2 -► 1:4)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(2-t-butildimetilsililoxi)-(1-t-butil-dimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azeti-din-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (951 mg, rendimento de 76%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8 ,8 Hz) , 7, 66 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7,57-7,52 (1H , d ig, J = 8 , 8 Hz) , 7,42 (1H, s), 5,52 ! (1H, d, J=13,9 Hz) , 5,25 (1H, d, J= = 13, 9 Hz) , 4,47 (1H, t, J=8, 1 Hz), 4,44 (1H, t, J=8, 1 Hz ) , 4,26 (1H, dd, J=3,6 , 9, 2 Hz) , 4,31-4,2: B (2H, m) , 4,09- •3, 99 (3H, m) , 3,86-3,81 (1H, m) , 2 5,61 (1H, dd, J: = 6,6, 9, 5 Hz ) , 3, 30 (1H, dd, J=2,6 , 7, 0 Hz) , 3,21 (1H, dq, J=9,2 , 6, r 6 Hz ;), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz) , 1,27 (3H, d, J=6, 6 Hz) , 0, 91 ( 9H, s) , 0,07 (6H, s). (2) (IR,5S,6S)-2-{l-[4-(2-Hidroxi-l-hidroximetil)etilcarbamoil) -l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(2-t-Butildimetilsililoxi)-(1-t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (950 mg, 1,10 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 44(1)) em tetra-hidrofurano (48 ml) foi adicionado a ácido acético (378 μΐ, 6,60 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1M em solução em 312 ΡΕ1340757 tetra-hidrofurano (6,60 ml, 6,60 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e água à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo:metanol (9:1 -► 85:15)) de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S) -2-{1-[4-(2-hidroxi-l-(hidroximetil)etilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (499 mg, rendimento de 72%) , sob a f c irma de um s ól: ido amarelo-pálido • 1H-RMN (40 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8, 8 Hz ) , 7,73 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7, 49 (1H, s) , 7,45 (1H, d, J=8 ,1 Hz) , 5,46 (1H, d, J= 13, 9 Hz ), 5 ,31 (1H, d, J= 13 , 9 Hz) , 5, 09 (1H, d, J: = 4,4 Hz) r 4,85- -4, 77 (2H, m) , 4,57- 4, 42 (3H, m ) , 4,22 (1H, dd, J=1 r 7 , 8,8 Hz :) , 4,01 -3, 95 (2H, m] 1 , 3,89- 3, 82 (1H, m) , 3,56 -3,5 0 (2H, m) , 3 ,49- 3,41 (2H, m) I 3,41- 3, 27 (2H, m) , 1 ,16 (3H, d , J=6 , 6 Hz) , 1, 14 (3H, d, J= = 6, 6 Hz) e (3) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-l-(hidroximetil)etilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 313 ΡΕ1340757 (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(2-Hidroxi-l-(hidroximetil)-etilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (490 mg, 0,773 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 44(2)) numa mistura de tetra-hidrofurano (25 ml) e água destilada (25 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (490 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (65 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada: acetonitrilo (9:1), e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-l-(hidroximetil)etilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (187 mg, rendimento de 47%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz ;, D2O , TSP) : δ (ppm) 7, 51 (1H, s), 4 ,5 16 (2H, t, J=8, 2 Hz) , 4,39- 4,31 (1H, m) , 4,2! 5 (1H, dq, J= 6, 3, 6, 4 Hz), 4, 20 (1H, dd, J=2,4, 9,0 Hz ) , 4, 19 -4,14 (1H, m) t 4,06 (2H, ddd, J=3, 6, 4, 9, 8,6 Hz ) , 3, 78 (2H, dd, J=5 ,1 r 11,7 Hz), 3, 72 (2H, dd, J=6,6, 11 ,7 Hz ’) , 3, 43 (1H, dd r j= 2,4, 6,3 Hz) r 3,25 (1H, dq, J=9,0, 7, 2 Hz ) , 1,30 (3H, d, j = 6, 4 Hz), 1, 20 (3H, d, J= =7,2 Hz) . 314 ΡΕ1340757 IV (KBr) : 1748, 1649, 1599, 1547, 1393, 1313 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 521 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2oH26N407S2Na: 521,1141, Encontrado: 521,1155 [M+H] +
Análise elementar: C 2oH25N407S2Na-4 / 3H20
Calculado para: C,44,ll% H,5,12% N,10,29% S,ll,78%
Encontrado: C,44,21% H,5,12% N,10,31% S,ll,46%
Exemplo 45
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxi-etil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
(1) (IR,5S,6S)—2—[1—(4—{2—[N—(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-{2-[N-(t-butil-dimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il) -azetidina (384 mg, 0,89 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 40) em dimetilformamida (11 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (99 mg, 1,07 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura 315 ΡΕ1340757 foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de P-nitrobenzilo (5,29 mg, 0,89 mmol) em acetonitrilo (22 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (0,62 ml, 3,56 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (9:1)) de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-{2-[N-(t-butildimetilsi-liloxi)etil]-N-metil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (263 mg, rendimento de 50%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7, 63 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,14 (0,6H, s), 7,03 (0,4H, s) , 5, 48 (1H, d, J= 1,3 Hz), 5,25 (1H, d, J= 1,3 Hz) , 4,50 (1H, 316 ΡΕ1340757 t, J= 8,0 Hz) , 4, ,23 (2H, t, J= 9,0 Hz), 4,31-4, 18 (3H, m) , 4, 05 (1H, dd, J= 8,3 , 5,4 Hz) , 3,89-3,80 (1H, m) , 3,80- 3, 72 (1H, m) , 3, 72- -3, 63 (1H, m) , 3,63-3,51 (1H, m), . 3,26 (1H, dd, J = 7, 1, 2, 5 Hz) , 3,26 (1, ,8H, s), 3,: 18 (1H, dq, J= 8,3, 7,5 H z) , 3, 07 d, 2H, s) , 1,35 (3H, d, J= 6,4 Hz) , 1,22 (3H, d, J= 6, 9 Hz) , 0, 86 (9H, dd, J= 7,8, 1,4 Hz), 0, 27 (6H, dd, J= 12 ,4, 3,2 Hz). (2) (IR,5S, 6S) -2- (1-(4-[N- (2-Hidroxietil)-N-metil-carba- moil ] -1,3 -tiaz ol- 2-i 1}azetidi η-3-il)tio- 6-[(R)-1 -hidrox :i- etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (IR,5S,6S)-2-[1-(4 —{2 —[N-(t-Butildimetilsililo-xi)etil]-N-metil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (622 mg, 0,85 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 45(1)) em tetra-hidrofurano (30 ml) foi adicionado a ácido acético (0,15 ml, 2,55 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (2,55 ml, 2,55 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de 317 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -* acetato de etilo:metanol (9:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (263 mg, rendimento de 50%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7, 66 (2H, α C-i II co 7 Hz), 7,25 (1H, s) , 5,50 (1H, d, J= 1,4 Hz) , 5,26 (1H, d, J= 1,4 Hz! ), 4,62-4, 40 (2H, m), 4, 36-4,20 (3H, m ) , 4,08 (1 H, t. , J= 9,1 Hz), 4,06 (1H, t., J= 9,1 Hz) , 3, 84 (2H, t, J= = 4,9 Hz), 3,63 ( :2H, dd., J= 4 ,9 Hz), 3,29 (1H, dd, J= 6, 4, 2, 6 Hz), 3,21 (1H, quint., J= 7,5 Hz) , 3, 08 (3H, s), 1, 38 (3H, d, J= 6,2 Hz), 1,26 (3H , d, J= 7,3 Hz) . (3) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S) -2- (1-{4-[N-(2 -hidro- xiet il) -N- -metil-carbamoil]-1 ,3-tiazol- -2-il}azetidin- 3-il)- tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxí- lico (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[N-(2-Hidroxietil)-N-metil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (401 mg, 0,65 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 45(2)) numa mistura de tetra-hidrofurano (20 ml) e água destilada (20 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (401 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois 318 ΡΕ1340757 de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (5 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 2% em água destilada -► acetonitrilo a 4% em água destilada) , e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-(1—{4 —[(2-hidroxietil)-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-me-tilcarbapen-2-em-3-carboxílico (134 mg, rendimento de 41%), sob a forma de um sólido branco. -RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,31 (0,6H, s) , 7,11 (0 ,4H, s), 4, 56 (2H , t, J= 8,2 Hz) , 4,41-4 ,31 (2H , m) , 4,25 (1H, quint., J= 6, 2 Hz ) , 4,21 (1H, dd, J= 9,1, 2, 4 Hz) , 4, 12-4,00 (2H , m ) , 3, 85 (1H, t, J= = 5,4 Hz) , 3,74 (1H, t, J= 5, 4 Hz), 3,70 -3, 60 (2 H, m) , 3,44 (1H, dd, J= 6,2 , 2, 4 Hz) , 3, 26 (1H, dq, J= 9, 1, 7 ,4 Hz) , 3, 07 (1,2H , s) , 3 , 08 (1,8H, s) , 1,30 (3H, d, J= 6, 5 Hz) , 1, 20 (3H, d, J= 7,3 Hz) . IV (KBr): 3397,C 1749, 1, 160 6 '/ 4, 1538,9, . 1469, 5, 1 .398,1, 1311,4, 1266, 0 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 505 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C2oH25N406S2Na2: 505, 1191, Encontrado: 505, 1185 [M+Na] +
Análise elementar: C2oH25N407S2Na-4/3H20
Calculado para: C,44,ll% H,5,12% N,10,29% S,ll,78% 319 ΡΕ1340757
Exemplo 46
Sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(carboximetilcar-bamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
(1) (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(p-Nitrobenziloxicarbonilmetilcarba-moil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitroben-ziloxicarbonilmetil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (209,7 mg, 0,24 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41(10)) em tetra-hidrofurano (10 ml) foi adicionado ácido acético (0,042 ml, 0,7 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (0,72 ml, 0,72 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de 320 ΡΕ1340757 sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: tolueno:acetonitrilo (2:1)) de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (94,5 mg, rendimento de 53%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=7,9 Hz), 8,22 (2H, d, J=7, 9 Hz) , 7, 66 (2H, d, J= =7,9 Hz) , 7, 60 (1H, t, J= 6,6 Hz) , 7,54 (2H, d, J= :7, 9 Hz) , 1 ',47 (1H, s) , 5 , 505 (1H, d, J = 13, 8 Hz) , 5,30 (2H, s) , 5,255 (1H, d, J = 13 ,8 Hz) , 4,50 (1H, t, J=8,3 Hz) , 4, 40 (1H, t, J= = 8,3 Hz) , 4, 32- 4,24 (4 H, m) , 4,06 (1H, dd, J: = 8, 3, 6, 2 Hz) , 4 , 05 (1H, dd, J= 8,3, 6, 2 Hz) , 3,30 (1H, dd, J: = 7, 0, 3,1 Hz) , 3 ,21 (1H, dq, J= 9,0, 7,4 Hz) , 1, 98 (1H, s lg) , 1 , 38 (3H , J= 5, 7 Hz ), 1, 27 (3H , d, J=7, 4 Hz) • (2) Sal dissódico de áci .do (IR , 5S, 6S ) -2- {1- [4 - (carboxi- meti lcarbamoi 1)-1,3 -tiaz ol- 2-i 1 ] az etidin -3-i 1} tio -6- [ (R)-l- hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(p-nitrobenziloxicarbonilme-tilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni-trobenzilo (330,4 mg, 0,38 mmol) obtido tal como descrito no Exemplo 46(1) numa mistura de tetra-hidrofurano (16,5 321 ΡΕ1340757 ml) e água destilada (8,3 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (350 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (63,9 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluen-te: água destilada), e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(carboximetilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (158,7 mg, rendimento de 79%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (40 0 MHz , D20) : δ (ppm) 7, 83 (1H, s) , 4, 45 (1H , t, J=8,3 Hz) , 4,43 (1H, t, J: = 8,3 Hz) , , 4,28-4,21 (1H , m) , 4 , 124 (1H, quinteto, C-l II ΟΊ CO N , 4, 08 (1H, dd, 0Π = 8,8 r 2, 0 Hz) , 1 Oh Oh 00 3, 92 (2H, m) , 3,80 (2H, s) , 3,31 (1H, dd, j= =5, 9, 2,0 HZ) , 3, 14 (1H, dq, J=8,8, 6, 8 Hz) , 1,18 (3H, d, j= =5,9 Hz) , 1,08 (3H, d, J= 6, 8 Hz) . IV (KBr): 3388, 1748, 1602, 1550, 1398, 1314, , 12' 67 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : 527 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci9H2iN407S2Na: ,
Encontrado: [M+H]+ 322 ΡΕ1340757
Exemplo 47
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazeti-dino-l-carbonil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
COO'Na+ (1) (IR, 5S,6S)-2-{l-[4-(3-Hidroxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsi-liloxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni- trobenzilo A uma solução de (IR, 5S, 6S)-2-(l-{4-[3-(t-butil-difenilsililoxi)azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}aze-tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-me-tilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (850 mg, 0,878 mmol) obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 42(2) em tetra-hidrofurano (43 ml) foi adicionado ácido acético (301 μΐ, 5,27 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (5,27 ml, 5,27 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 dia. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e água à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de 323 ΡΕ1340757 hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo:metanol (95:5) -► cloreto de metileno:metanol (9:1) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsi-liloxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (355 mg, rendimento de 66%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,44 (1H, s) , 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,82-4,77 (1H, m), 4,71-4,65 (1H, m) , 4,51-4,36 (4H, m) , 4,31-4,23 (3H, m) , 4,07-3,96 (3H, m), 3,29 (1H, dd, J=2,4, 7,0 Hz), 3,20 (1H, dq, J=9,2, 7,1 Hz), 1,38 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,l Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidino-l-carbonil) -1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(3-Hidroxiazetidino-l-carbo-nil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildi-metilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (350 mg, 0,568 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 47(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (18 ml) e água destilada (18 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vege- 324 ΡΕ1340757 tal (350 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidro-genocarbonato de sódio (48 mg) , acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada:acetonitrilo (9:1)),e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4 - (3-hidroxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (118 mg, rendimento de 42%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz r D20, TSP) : δ (ppm) 7 , 33 \—1 s) , 4,78- -4, 67 (2H, m) , 4,56 (2H, t , J=8, 0 Hz) , 4, 45- 4,31 (3H, m) , 4,25 (1H, dq, J=6,3 , 6,3 Hz) , 4, ,20 (1H, dd, J= =2,3, 9,0 Hz) , 4, 10 -4,03 (2H, m) , 3, 97 (1H f dd, J=3, 7, 11,5 Hz) , 3, 44 (1H, dd, J=2,3, 6,3 Hz) , 3 ,25 (1H, dq, J=9 ,0, 7,2 Hz) , 1,30 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr): 1749, 1603, 1540, 1452, 1394, 1306 cm'1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 503 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2oH24N406S2Na: 503, 1035, Encontrado: 503, 1040 [M+H] +
Análise elementar: C2oH23N406S2Na-8/3H20
Calculado para: C,43,63% H,5,19% N,10,18% S,ll,65%
Encontrado: C,44,04% H,4,93% N,9,86% S,ll,30% 325 ΡΕ1340757
Exemplo 48
Sal dissódico de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-metil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-Metil-N-p-nitrobenziloxicarbonil-metil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni- trobenzilo A uma solução de (IR, 5S, 6S)-2-{1-[4-(N-metil-p-N-nitrobenziloxicarbonilmetil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (997 mg, 1,15 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 43(3)) em tetra-hidrofurano (50 ml) foi adicionado ácido acético (0,2 ml, 3,44 mmol)e fluoreto de tetrabu-tilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (3,44 ml, 3,44 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi sepa- 326 ΡΕ1340757 rada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo: metanol (19:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-metil-N-p-nitrobenziloxicarbonilmetil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (413 mg, rendimento de 47%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,32-8,10 (4H, m) , 7,75- 7,60 (2H, m) , 7, 60-7,45 (2H, m),7,75 (0,5H, s) , 7,41 (0,5H, s) , 5,51 (1H, d, J= 13,6 Hz), 5,38-5, 20 (3H, m incluindo 5,26 (1H, d, J= 13,6 Hz)), 4,75-3,71 (9H, m incluindo 4,36 (1H, s), 4,56-4,46 (1H. m) , 3, 93 -3, 83 (1H, m) ) , 3,45-3,05 (4H, m incluindo 3,36 (0,9H, s) , 3,16 (2,1H, s) ) , 3,29 (1H, d, J= 6,3 Hz), 1,38 (3H, d, J= 6,1 Hz), 1,33-1,20 (3H, m) . (2) Sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboxi-metil-N-metil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(N-Metil-N-p-nitrobenzilo-xicarbonilmetil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (413 mg, 0,54 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 48(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (20 ml) e água destilada (20 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% 327 ΡΕ1340757 sobre carvão vegetal (413 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (91 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada), e o eluído foi liofi-lizado de modo a proporcionar o composto desejado sal dissódico de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-metil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (126 mg, rendimento de 43%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7, 18 (0,6H, s), 7,03 (0,4H, s) , 4,41-4,32 (0,2H, m) , 4,25 (1H, quint., J= = 6,3 Hz), 4, 15-3, ,98 (4H, m ), 3,43 (1H, dd, J= 6, 3, 2,2 Hz), 3,26 (1H, quint. , J= 8,2 Hz), 3, 11 (1,2H, s) , 3,06 (1,8H, s) , 1,30 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,20 (3H, d, 7,1 Hz). IV (KBr): 3389,3, 1748,2, 1605,4, 1541,8, 1469,5, 1394,3 -1 cm
Espectro de massa (IEP+) : m/z: 519 [M-Na+2H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C2oH24N407S2Na: 519, 0984, Encontrado: 519, 0956 [M-Na+2H] +
Exemplo 49
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-N-carbamoilmetil-N-metil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 328 ΡΕ1340757
(1) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(N-Carbamoilmetil-N-metil-carba- moil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carba-moilmetil-N-metil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (932 mg, 1,27 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 44(2)) em tetra-hidrofurano (50 ml) foram adicionados ácido acético (0,22 ml, 3,81 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (3,81 ml, 3,81 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 dias. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, acetato de etilo e hidrogeno-carbonato de sódio aguoso saturado foram adicionados à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aguosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol 329 ΡΕ1340757 (10:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carba-moilmetil-N-metil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (424 mg, rendimento de 53%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. ΧΗ· -RMN (4 C 10 MHz, i—1 o Q o 3) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, 6Π = 7 ,8 Hz) , 7, 66 (2H, d, . J= 7,8 Hz) , 7,36 (0,2H, s) , 7,24 (0, 8H, s) , 5, 51 (1H, d, J= 13, 7 Hz) , 5,25 (1H, d, J= 13, 7 Hz) , 4 ,59- 4, 39 (2H, m) , 4, , 39-3, 94 (7H, m) , 3, 36 (0,6H, s), 3, 29 (1H, dd r J= 6, 9, 3,3 Hz), 3, 25-3,14 (1H, m) , 3, 11 (2, 4H, s) , 1, 38 (3H, d, J= 6,1 Hz), 1,26 (3H, d, J= 7, 1 Hz) . (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoil-metil-N-metil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(N-Carbamoilmetil-N-metil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (424 mg, 0,67 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 49(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (20 ml) e água destilada (20 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (424 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (57 mg) , acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de 330 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -* acetonitrilo a 2% em água destilada ->· aceto-nitrilo a 4% em água destilada) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—(carbamoilmetil-metil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (115 mg, rendimento de 33%), sob a forma de um sólido branco. ΧΗ- RMN (40 0 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,: 22 (0,5H, s) , 7, 20 (0, 5H, s) , 4,55 (2H, dd , J = 17 ,4, 8,4 Hz) , 4,41- 4,32 (1H, m) , 4, 25 (1H, quint., J = 6 ,3 Hz) , 4, 23-4,18 (3H m incluindo 4,22 (2H, s)) , 4 , 05 (2H , ddd, J= = 17,3, 8,8, 4 ,9 Hz) , 3, 44 (1H, dd, J= 6, 2, 2,4 Hz) , 3,31 -3, 20 (1H, m) , 3, 18 d, 5H, s) , 3,09 (1,5H, s) , 1,30 (3H, d , J= 6,4 Hz) , 1, 20 (3H :, d, 7, 1 Hz) . IV (KBr): 3384,5, 1748, 2, 1681 ,6, 1603, 5, 1539,9 , 1469, 5, 1397 2, 1310,4 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 518 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) :calculado para C2oH25N506S2Na: 518,1144, Encontrado: 518,1168 [M+H] +
Exemplo 50
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoilmetil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COO"Na+ 331 ΡΕ1340757 (1) (IR, 5S, 6S)—2—{1—[4—(Carbamoilmetil-carbamoil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoilmetil-carbamoil ) -1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (428,6 mg, 0,6 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 45(2)) em tetra-hidrofurano (21 ml) foram adicionados ácido acético (0,11 ml, 1,9 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (1,8 ml, 1,8 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, acetato de etilo e hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado foram adicionados à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo:metanol (8:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoilmetil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (310,5 mg, rendimento de 85%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) : δ (ppm) 8,24 (2H, d, J=8,8 Hz), 332 ΡΕ1340757 7,96 (1Η, t, J=5,7 Hz), 7,72 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (1H, s), 7,40 (1H, s lg) , 7,08 (1H, s lg) , 5,46 (1H, d, J=13, 9
Hz), 5,32 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,09 (1H, d, J=5,l Hz), 4,58-4,40 (3H, m), 4,22 (1H, dd, J=9,2, 2,7 Hz), 4,01-3,96 (3H, m) , 3,81 (2H, d, J=5,7 Hz), 3, 44-3,30 (2H, m) , 1,16 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,14 (3H, d, J=7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoilme-til-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(Carbamoilmetil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (310,5 mg, 0,5 inmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 50(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (15,5 ml) e água destilada (7,8 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (360 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (42,3 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -> acetonitrilo a 5% em água destilada -* acetonitrilo a 10% em água destilada),e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal 333 ΡΕ1340757 de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoilmetil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l- hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (157 mg, rendimento de 62%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,43 \—1 S) , 4,45 ( 2H, t, J=7, 8 Hz) , 4,28- 4,18 (1H, m) , 4,13 (1H , quinteto, J=5, 9 Hz) , 4,08 ( 1H, dd, J=9, .3, 2,3 Hz), 4, . 00-, 3, 92 (4H, m) , 3,31 (1H, dd, J= 5,9, 2 ,3 Hz) , 3,14 (1H, dq , J= 9,3, 7,8 Hz) , 1,13 (3H, d, J=5 ,9 Hz) , 1,08 (3H, d , J=7,8 Hz) • IV ( ;KBr): 3384, : 1748, 1660, 1 600, 1549, 1492 , 1471, 1394, 1315 , 1264 cm 1 Espectro de massa (BAR+ ) : 504 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para Ci9H2306N5S2Na : 504,0988, Encontrado: 504,1018 [M+H] +
Exemplo 51
Sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-carboxil-2-metilpropilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COO'Na+ 1 (IR,5S,6S)-2-(l-{4-[(IS)-2-metil-l-(p-nitrobenziloxi-carbonil)propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 334 ΡΕ1340757 A uma solução de (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[(IS)-2-me-til-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)propilcarbamoil]-1,3-tia-zol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililo-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitroben-zilo (1,15 g, 1,29 mmol) (obtido tal como descrito no
Exemplo de Referência 46(3)) em tetra-hidrofurano (58 ml) foi adicionado ácido acético (222μ1, 3,87 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (3,87 ml, 3,87 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e cloreto de sódio aquoso saturado à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de hidrogeno- carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: n-hexano: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(IS)—2 — metil-1-(p-nitrobenziloxicarboxil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (377 mg, rendimento de 37%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,22 (2H, d, J=8, 8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,58-7,55 335 ΡΕ1340757 (1H, s lg) , 7,54 (2H , d, J=8, ,8 Hz) , 7,45 (1H, s) , 5,51 (1H, d, J = 13, 5 Hz), 5,28 (2H, s) , 5 ,26 ( 1H, d, J= = 13, 5 Hz) , 4,74 (1H, dd, J=5,1, 8,8 Hz) , 4,53- 4,47 (2H, m) , 4,32-4,26 (3H, m) , 4,10- 4,05 (2H, m) , ! 3, 30 (1H, dd, J= 2,9, 6,6 Hz), 3,22 (1H, dq, J=9,5, 6,6 Hz) , 2, 32 -2,24 (1H, m) , , 1,39 (3H , d, J=5, 8 Hz) , 1,28 (3H, d, J=6, 6 Hz) , 1,00 (3H, d, J=7,3 Hz) , 0, 97 (3H, d, J=7,3 Hz). (2) Sal dissódico de ácido (IR, 5S,6S)-2- -{1-[4-((IS )-i- carboxil-2-metilpropilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(IS)-2-metil-l-(p-nitroben-ziloxicarbonil)-propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (370 mg, 0,465 irtmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 51(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (19 ml) e água destilada (19 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (370 mg) à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (80 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada:aceto-nitrilo (96:4)),e o eluído foi liofilizado de modo a 336 ΡΕ1340757 proporcionar o composto desejado sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-carboxil-2-metil-propilcarba-moil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (165 mg, rendimento de 63%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,51 (1H, s), 4,59 (2H, dt, O OD II •"D co LO Hz) , 4 ,40 -4, 34 (1H , m) , CM 9-4, 23 (2H , m) , 4,20 (1H, dd, J= =2,4, 9 ,0 Hz) r 4,10 (2H, dt, J=9, ,0, 5,2 Hz) , 3, 44 (1H, dd, J= =2,4, 6 ,4 Hz) r 3,27 (1H, dq, J=9, ,0, 7,2 Hz) , 2,28 -2,16 (1H, m) , 1, 30 (3H, d, J=6, 2 Hz) , 1 ,20 (3H, d, J=7, 2 Hz), O CO (3H, d , J = 6, 8 Hz) , 0, 95 (3H, d, J=6 ,8 Hz) . IV (KBr): 1749, 159! 9, 1547, 1 .491, 1471, , 14 00, 131 4, 1292, 12 64 cm-1
Espectro de massa (IEP+) : m/z: 591 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C22H26N407S2Na2: 591,0936, Encontrado: 591,0952 [M+Na] +
Análise elementar: C22H26N407S2Na2-8/3H20 Calculado para: C,42,85% H,5,12% N,9,09% S,10,40% Encontrado: C,42,78% H,5,33% N,9,14% S,10,12%
Exemplo 52
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-carbamoil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COO"Na 337 ΡΕ1340757 (1) (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-Carbamoil-2-metil-propilcar-bamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-{1-[4-( (IS)-1-carbamoil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]aze-tidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (930 mg, 1,20 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de
Referência 47 (3)) em tetra-hidrofurano (47 ml) foi adicionado ácido acético (20 6 μΐ, 3, 60 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (3,60 ml, 3,60 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e água à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo -► acetato de eti-lo:metanol (95:5)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS) -l-carbamoil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (383 mg, rendimento de 338 ΡΕ1340757 48 %) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. -RMN (40 0 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= = 8, 8 Hz) , 7, 66 (2H, d, J=8, . 8 Hz), 7,61 -7,5 6 (1H , d lg, J= = 9,5 Hz) , 6, 05 -6, 01 (1H, s lg), 5,51 ( 1H, d, J= 13,5 Hz) , 5,43- 5,39 (1H, s lg) , 5,26 C 1H, d, J=13,5 Hz) , 4,54 -4,47 (2H, m) , 4, 38 -4,33 (1H, m) r 4,32-4,25 (2 H j r m) , 4,10 -4,04 (2H, m) , 3, 30 (1H, dd, J=6, 6, 2,9 Hz) , 3,22 (1H, dq, J=9,5, 7,3 Hz) , 2, 33 -2,24 (1H, m) r 1,38 (3H, d, J=5, 9 Hz) , , 1,28 (3H , d, J= 7, 3 Hz) , 1,03 (3H, d, J=6,6 Hz) , 10,1 (3H, d, J= 6, 6 H :z) . (2 ) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2- {1- [4 -((IS) -1-carba- mo il -2-met il-propi .lcarbamoil)- 1,3- tiazol-2-i 1]azet idin- 3- il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (IR, 5S, 6S) —2—{1—[4—((IS)-l-Carbamoil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (380 mg, 0,577 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 52(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (19 ml) e água destilada (19 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (380 mg) à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (48 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de 339 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada: acetonitrilo (81:9)),e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-1-carbamoil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (170 mg, rendimento de 54%) , sob a forma de um sólido branco. -RMN (400 MHz, d2o, TSP) : δ (ppm) 7,55 (1H, s) , 4, 58 (2H t, J= :8,2 Hz) , 4 , 40-4 ,34 (1H, m) , 4,29 (1H, d, J = 6 , 9 Hz) 4, 25 (1H, dq, J= 6,2, 6,4 Hz) , 4,20 (1H, dd, J= =2,4, 9 ,0 Hz) 4, 09 (2H, dt, J= 9,0, 4,6 Hz) , 3, 43 (1H, dd, J= =2,4, 6 ,2 Hz) 3, 26 (1H, dq, J= = 9,0, 7,2 Hz) , , 2,26 -2,16 (1H, m) , 1, 30 (3H d, J= = 6, 4 Hz) , 0 ,20 i !3H, d, J=7,2 Hz) , 1,02 (6H, d r J=6, Hz ) · IV (KBr): 1749, 1662 , 1603, 1545, 1490, . 1471 , 13 94 r 1316 1293, 1260 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 546 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C22H28Ns06SNa2: 568,1276, Encontrado: 568,1271 [M+Na] +
Análise elementar: C22H28N506SNa-3H20
Calculado para: C,44,07% H,5,72% N,ll,68% S,10,69% Encontrado: C,44,17% H,6,18% N,ll,84% S,10,67%
Exemplo 53
Sal dissódico de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 340 ΡΕ1340757
COO'Na+ (1) A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil)-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-azetidina (312 mg, 0,63 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 48) em dimetilformamida (9 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (70 mg, 0,76 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (452 mg, 0,76 mmol) em acetonitrilo (20 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (0,44 ml, 2,52 mmol). A mistura foi agitada durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia 341 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo :metanol (20:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxi-carbonilmetil)-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)-tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo (193 mg, rendimento de 39%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J= 8,9 Hz), 7,66 (2H, d, J= 8,9 Hz) , 7, 56 (1H, d, J = 8,0 Hz) , 7,43- 7,32 (1r4H, m), 7,15 (0, 6H, s lg), 5, 51 (1H, d, J= 13, 8 Hz) , 5,28 (11 2H, s lg) , 5, 25 (1H, d, J= = 13, 8 Hz) , 5,20 (0,8H , s lg), 5, ,05-4,65 (0 t 4H, m) , 4,85 -4, 65 (0, 6H , m) , 4, 65- 3, 95 (8H, m incluindo 4,5C > (2H , t, J= 7,4 Hz) , 4,11 (2H, t, J= 7,4 Hz)), 3, 93-3, 75 (1H, m) , 3,29 (1H, dd, J= 6,6, 2,0 Hz), 3,25-3, 08 (1H, m) , 1,38 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,35 (3H, d, J= 7,2 Hz), 1,20 (6H, s lg). (2) Sal dissódico de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboxi-metil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (IR, 5S, 6S) —2 — 1—{4—[N-Isopropil-N-(p-nitrobenzilo-xicarbonilmetil)-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (193 mg, 0,24 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 53(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (9 ml) e água destilada (9 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre 342 ΡΕ1340757 carvão vegetal (193 mg) num banho de água (35°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (40 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com solventes misturados anteriormente mencionados, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cro-matografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada), e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal dissódico de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (63 mg, rendimento de 45%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,08 (0,6H, s lg) , 7,04 (0 , 4H, s lg) , 4,70- -4, 69 (0, , 2H, m) , 4,53 (2H, , d, J= 8, 0 Hz) 4, 42-4,31 (1H, m), 4,18 -4, 09 (0, 8H, m) , 4, 25 (1H, quint. J= 6,4 Hz) , 4,20 (1H, d, J= 9, 1 Hz), 4,0 9-4, 02 (2H, m) 3, 95 (2H, d, J= 5 , 8 Hz ) , 3,4 3 (1H, dd, J= = 6, 4, 0, 8 Hz) 3, 26 (1H, quint., J= 7 , 6 Hz) r 1,31 (3H, d, J= 6, 4 Hz) 1, 26-1,10 (9H, m) . IV ' (KBr) : 3398,0, 1749, 1, 1603, 5, 1539, 9, 14 ( 57, , 1453,1 1392,4, 1310,4, 1277, 6 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 569 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C22H2707N4S2Na2: 569, 1116, Encontrado: 569, 1119 [M+H] + 343 ΡΕ1340757
Exemplo 54
Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-{1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
(1) (IR, 5S,6S)-2-{l-[4-(N-Carbamoilmetil-N-isopropil-carba-moil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-(N-carbamoilme-til-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (347 mg, 0,97 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 49) em dimetilformamida (10 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (108 mg, 1,17 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 696 mg, 1,17 mmol) em acetonitrilo (20 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,68 ml, 3,88 mmol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até 344 ΡΕ1340757 à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilormetanol (10:1) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carba-moilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (359 mg, rendimento de 56%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz , CDCI3) : δ (ppm) 8 ,22 (2H, d, J= ^ 8,6 Hz), 7, 66 (2H, d, J= 8,6 Hz), 7,05-6,72 (1H, m) , 5,51 (1H, d, J= 13, 8 Hz) , 5,25 (11H, d, J= 13,8 Hz) , 4,80-4,45 (1H, m), 1 LO 4,35 (2H, m) , 4,35-4,17 (3H, m) , 4,03 (4H, m) , 3,29 (1H, dd, J= 7,0, 2,5 Hz), 3,25-3, 05 (1H, m) , 1,38 (3H, d, J= 6,3 Hz), 1,33-0,98 (9H, m incluindo 1,25 (3H, d, J= 7,1
Hz) ) . (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoil-metil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxílico 345 ΡΕ1340757 (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(N-Carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni-trobenzilo (359 mg, 0,55 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 54(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (12 ml) e água destilada (12 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 7,5% (359 mg) num banho de água (35°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reac-ção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogeno-carbonato de sódio (46 mg), ácido acético e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -* acetonitrilo a 2% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carba-moil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (195 mg, rendimento de 65%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,17 (0, 2H , s lg) 7,12 (0,8H, s lg), 4, 56 (2H, dd, J= 17,4, 9, 0 Hz) , 4, 42- 4,16 (4H, m incluindo 4,25 (1H, quint., J= 6, 3 Hz) , 4,: 21 (1H, dd, J= 8,4, 2,3 Hz), 4, 09-3, 97 (2H, m) r 3,44 (1H, dd, J=6,3, 2,5 Hz) , 3 ,26 (1H, quint., J= 8, 4 Hz) , 1, 30 (3H , d, J= 6,4 Hz), 1,25- 1,08 (9H, m incluindo 1, 19 (3H, d, J= 6,7
Hz) ) . 346 ΡΕ1340757 IV (KBr): 3404,7, 1749,1, 1681,6, 1605,4, 1538,0, 1468,5, 1448,3, 1395,2, 1306, 5, 1277, 6 cm’1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 546 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C22H29N506S2Na: 546, 1457, Encontrado: 546, 1458 [M+H] +
Exemplo 55
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(N-Cianometil-N-isopropil-carba- moil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (344 mg, 1,01 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 50) em dimetilformamida (10 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (112 mg, 1,22 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1- 347 ΡΕ1340757 metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (725 mg, 1,22 mmol) em acetonitrilo (20 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,70 ml, 4,04 mmol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reac-ção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (10:1) de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (245 mg, rendimento de 39%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (4 00 MH: z, CDC13) : δ (ppm) 8,23 K CM d, J II co Hz) , 7,6 (2H, d, J= 8,7 Hz) , 7, 48-7,15 (1H, . m) , 5, 51 (1H, d, J= 14,0 Hz) , 5,26 (1H , d, J= 14,0 Hz), 4,86 (1H, quint ·, J= LO LO Hz) , 4,72- -3,76 (9H, m incluindo 4,52 (2H, t, J: = 8,1 Hz) , 4,27 (2H, dd, J= 6, 6, 2,5 Hz) ) , 3,29 (1H, dd, J= 6,9, 2,5 Hz) , 3,21 (1H, quint • r J= 9,3, 7,3 Hz) , 1,38 (3H, d, J= 348 ΡΕ1340757 6,2 Hz), 1,35-1,20 (9H, m incluindo 1,25 (3H, d, J= 7,3
Hz) ) . (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR, 5S,6S)— 2 —{1—[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (245 mg, 0,39 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 55(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (12 ml) e água destilada (12 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (245 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (33 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com o solvente misto anteriormente mencionado, e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 2% em água destilada -► aceto-nitrilo a 4% em água destilada -> acetonitrilo a 6% em água destilada) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1- 349 ΡΕ1340757 metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (87 mg, rendimento de 42%) , sob a forma de um sólido branco • 1H-RMN (40 0 MHz r D20) : δ (ppm) 7,20 (1H, s lg) r 4,58 (2H, t, J= = 8,0 Hz) , 4, ,49-4 ,31 (3H, m incluindo 4,4 1 (2H, s) ) , 4,25 (1H, quint., J= 6,3 Hz), 4,21 (1H, dd, j= 9, 0, 2,3 Hz) , 4,19- -3,80 (3H, m incluindo 4,07 (2H, dd, j= 8, 6, 4, 9 Hz) , 3,44 (1H, dd , J= 6,3, 2,4 Hz) , 3,26 (1H, dq , J= 9, 0, 7,2 H z) , 1, 43-1, 25 (9H, m inclui ndo 1, 31 (3H, d, J= = 6,4 Hz) , 1,20 (3H, d, J= 7, 2 Hz: ) ) . IV (KBr): 3398,0, 1750,1, 1606,4, 1537,0, 1468,5, 1426,1, 1401, 0, 1373, 1, 1332, 6, 1311,4, 1274,7 cm'1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 550 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C22H26N505S2Na2: 550,1171, Encontrado: 550,1179 [M+Na] +
Exemplo 56 Ácido (IR,5S,6S)-2-{l-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico
HO
COOH 1 (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[l-(p-Nitrobenziloxicarbonil)-pipe- ridin-4-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 350 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[1-(p-nitro-benziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (260 mg, 0,500 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 51) em dimetilformamida (13 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (55 mg, 0,600 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hi-droxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (297 mg, 0,500 mmol) em acetonitrilo (15 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopro-piletilamina (348 μΐ, 2, 00 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido cloridrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo -» acetato de etilo :metanol (9:1) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[1-(p-nitrobenziloxicar- 351 ΡΕ1340757 bonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (348 mg, rendimento de 85%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J=8,8 Hz), 7, 66 (2H, d, . J=8,8 Hz) r 7,52 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 7,43 (1H, s) , 7,05- 7,01 (1H, d ig, , J= 8,8 Hz), 5 ,51 (1H, d, J= 13, 7 Hz) , 5,25 (1H, d, J= = 13 ,7 Hz) , 5,23 (2H, s) , 4,52- -4,46 (2H, m) , 4,31- -4,25 (3H, m) / 4,23- -4,04 (3H, m) , 4,05 (2H, dt, J=8, 8, 5, 9 Hz) , 3,30 (1H, dd, J=2,4, 7,3 Hz) , 3,2: 1 (1H, dq, J=6, 8, 8, 8 Hz) , 3,11 -2, . 95 (2H , m), 2,07- 2,00 (2H, m) , 1 , 55- 1,41 (2H, m) , 1,38 (3H, d, J=6, 8 Hz) , 1,28 (3H, d, J =5,9 Hz) . (2) Ácido (IR, 5S,6S) -2- -U -[4- (piperidin- 4-ilcarbamoil)- 1,3- tiaz ol-2- il] az etidin -3- -il } tio -6-[(R)-1-h idro: xietil]-1- metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-(1 — {4 —[1-(p-Nitrobenziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (340 mg, 0,414 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 56(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (17 ml) e água destilada (17 ml) foi submetido a hidro-genação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (340 mg) à temperatura ambiente durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura 352 ΡΕ1340757 foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada:aceto-nitrilo (8:2)) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(pipe-ridin-4-ilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (70 mg, rendimento de 33%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,50 (1H, s) , 4,55 (2H, t, J=8, 2 Hz) 1 KO 00 4, 29 (1H, m) , 4,24 (1H, dq, J= = 6,2 , 6,4 Hz) , 4,17 (1H, dd, J: =2, - 2, 9,1 Hz) , 4,17-4,08 (1H, m) , 4,03 (1H, dd, J=5, 0, 8,3 Hz) , 3,53 (2H, dt, J=13 ,3, 3,1 Hz) , 3, 43 (1H, dd, J=2,2, 6, 2 Hz) , 3,25 (1H, dq, J= = 9,1, 7,2 Hz) , 3, 17 (2H, dt, J=12,8 r 2, 9 Hz) , 2, 20 (1H, dd, J=2 ,9, 14,2 Hz) , 1, 93 -1,80 (2H, m) r 1,30 (3H, d, J=6, 4 Hz) , 1,1 9 (3H t J=7,2 Hz). IV (KBr): 1754, 1658, 1602, 1545, 1385, 1315 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 508 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C22H30N5O5S2: 508,1688, Encontrado: 508,1693 [M+H] +
Análise elementar: C22H29N505S2-3H20
Calculado para: C,47,05% H,6,28% N,12,47% S,ll,42% Encontrado: C,47,07% H,6,38% N,12,37% S,ll,14%
Exemplo 57 Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 353 ΡΕ1340757
COO Η (1) (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(3S)—1—(p-Nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (280 mg, 0,554 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 52) em dimetilformamida (14 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (61 mg, 0,665 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[ (R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (329 mg, 0,554 mmol) em acetonitrilo (16 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (35 6 μΐ, 2 ,22 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar- 354 ΡΕ1340757 bonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo -> acetato de etilo:metanol (9:1)) de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[ (3S)—1— (p-nitrobenziloxicarbo-nil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (399 mg, rendimento de 89%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J II co co Hz) , 8,20 (2H, d , 1 J=8, 8 Hz) , 7, 66 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 7,53 (2H, dd, J=8,8, 13 , 7 Hz ) , 7, 45 (1H, s ) , 7, 17-7, 12 (: 1H, t ig, c, II <1 8 Hz) , 5, 51 (1H, d, J =13,7 Hz), 5 ,25 (1H, d, J= = 13, 7 Hz) , 5,30-5 ,1E i (2 H, m) , 4, 68-4,59 (1H, m) , 4,54- •4,46 (2H, m) , 4,32-4, 24 (3H, m) , 4,09-4,00 (2H, m) , 3, 84- 3,76 (1H, m) , 3,65-3, 53 (2H, m) , 3, 46-3,40 (1H, m) , 3, 30 (1H, dd, J=2, 9, 6,8 Hz ) , 3, 22 (1H, dq, J= = 8,8, 6, 6 Hz) , 2,32- 2,22 (1H, m) , 2, 09' -1, 94 (1H, m) , 1,38 (3H, d, J = 6, 8 Hz) , 1,28 (3H, d, J=6, , 8 Hz) . (2) Ácido (IR, 5S, 6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarba-moil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 355 ΡΕ1340757 (IR,5S,6S)-2- (1—{4 —[(3S)-1-(p-Nitrobenziloxicar-bonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (390 mg, 0,483 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 57(1)) numa mistura de tetra-hi-drofurano (20 ml) e água destilada (20 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (390 mg) à temperatura ambiente durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada : acetonitrilo (76:24)) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4 - ( (3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azeti-din-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (90 mg, rendimento de 38%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz , D20) : δ (ppm) 7,52 (1H, s) , 4, 69- -4, 62 (1H, m) , 4,59- 4, 50 (2H, m) r 4,37-4,39 (1H, m) , 4, 22 (1H, dq, kO II •"D 4 6 r ^ r υ r 4 Hz) , 4, , 11 ( 1H, dd, J=2 ,4, 9, 0 Hz] l , 4, 07- -4,01 (2H , m) , 3, 65- 3,55 (2H, m), 3,48-3 ,39 (3H, m) / 3,21 (1H, dq, J=9, 0 r 7,2 Hz) , 2 ,5 0-2,40 (1H, m) , 2,23 -2, , 14 (1H, m) , 1,3 0 (3H, d, r J= :6, 4 Hz) r 1,18 (3H, d, J=7 , 2 Hz 0 · IV (KBr): 1' 754, 1654, 15 97, 1545, 12 >86, 1313 cm -1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 494 [M+H] + 356 ΡΕ1340757
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C21H28N5O5S2: 494,1532, Encontrado: 494, 1529 [M+H] +
Análise elementar: C2iH27N505S2-7/3H2O
Calculado para: C,47,09% H,5,96% N,13,08% S,ll,97%
Encontrado: C,47,04% H,5,95% N,13,04% S,ll,83%
Exemplo 58 Ácido (IR, 5S,6S)—2—{1—[4—((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(3R)-l-(p-Nitrobenziloxicarbonil)- pirrolidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (280 mg, 0,554 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53) em dimetilformamida (14 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (61 mg, 0,665 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, 357 ΡΕ1340757 uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6- [ (R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (329 mg, 0,554 mmol) em acetonitrilo (16 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (386 μΐ, 2,22 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (9:1)) de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbo-nil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (416 mg, rendimento de 93%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,19 (2H, d, J=8, 8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (2H, dd, J=8, 8, 15,6 Hz), 7,45 (1H, s) , 7,17-7,11 (1H, s lg) , 5,51 (1H, d, J=13,8 Hz), 5,30-5,18 (3H, m), 4,67-4,58 (1H, m) , 4,53-4,47 (2H, m) , 4,32-4,23 (3H, m) , 4,06 (2H, dt, 358 ΡΕ1340757 J=8, 8, 5,9 Hz), 3,81-3,76 (1H, m) , 3, 65-3, 53 (2H, m) , 3,47-3,40 (1H, m) , 3,30 (1H, dd, J=2,9, 6,8 Hz), 3,22 (1H, dq, J=8,8, 7,8 Hz), 2,32-2,25 (1H, m) , 2,09-1, 95 (1H, m), 1,39 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,28 (3H, d, J=7,8 Hz). (2) Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarba-moil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-(1 — {4 —[ (3R)-1-(p-Nitrobenziloxi-carbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze-tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (410 mg, 0,508 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 58(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (21 ml) e água destilada (21 ml) foi submetido a hidrogenação catalitica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (410 mg) à temperatura ambiente durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com o solvente misto anteriormente mencionado e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -* água destilada: acetonitrilo (76:24)) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1, 3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1- 359 ΡΕ1340757 metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (101 mg, rendimento de 41%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz , D20) : δ (ppm) 7 , 52 (1H, s) , 4, 69- 4, 62 (1H, m) , 4, 60-4, 52 (2H, m) , 4,38-4, 30 (1H, m) , 4, 24 (1H, dq, J=6, 3, 6, 3 Hz) , 4, 16 (1H, dd, J=2 ,3, 8, 9 Hz) r 4,09- -4,02 (2H, m) , 3, , 67- 3,54 (2H, m), 3, 49-3 ,40 (3H, m) r 3,24 (1H, dq, J= 8,9, 7,2 Hz) , 2 ,49-2,40 (1H, m) , 2,24 -2, 14 (1H, m) , 1,30 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr) : 1756, 1656, 1598, 1544, 1384, 1313 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 494 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C21H28N5O5S2: 494,1532, Encontrado: 494,1519 [M+H] +
Análise elementar: C2iH27N505S2-3H20
Calculado para: C,46,06% H,6,07% N,12,79% S,ll,71% Encontrado: C,46,35% H,5,75% N,12,82% S,ll,68%
Exemplo 59 Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4 - (azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[1—(p-Nitrobenziloxicarbonil)-aze-tidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 360 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[1-(p-nitro-benziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (400 mg, 0,814 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 54) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (90 mg, 0,977 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (484 mg, 0,814 mmol) em acetonitrilo (25 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (568 μΐ, 3,26 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (9:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenziloxi- 361 ΡΕ1340757 carbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (496 mg, rendimento de 77%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,54 (1H, s) , 8,23 (4H, d, J=8, 8 Hz), 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52-7,47 (1H, m) , 7,45 (1H, s) , 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,9 Hz), 4,90-4,80 (1H, m) , 4,54-4,47 (2H, m) , 4,47-4,38 (2H, m) , 4,42 (2H, dd, J=8,8, 8,8 Hz), 4,13-4,25 (2H, m) , 4,27 (1H, dd, J=2,2, 9,5 Hz), 4, 09-3, 96 (4H, m) , 3,30 (1H, dd, J=2,2, 7,0 Hz), 3,21 (1H, dq, J=9, 5, 6,6 Hz), 1,38 (3H, d, J=6, 6 Hz), 1,28 (3H, d, J=5,9 Hz). (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[1-(p-Nitrobenziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (490 mg, 0,617 inmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 59(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (25 ml) e água destilada (25 ml) foi submetido a hidrogena-ção catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (490 mg) à temperatura ambiente durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A 362 ΡΕ1340757 mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada:acetoni-trilo (76:24)) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(aze-tidin-3-ilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (143 mg, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,54 (1H, s) , 4, 97-4,87 (1H, m) , 4 , 60-4 ,54 (2H, m) , 4,44 (2H, dd , J=1 1,9, 8,4 Hz ;), 4 ,39- 4, 30 (3H, m) , 4,23 (1H , qd, J=6,4, 6,2 Hz) , 4,15 (1H, dd, J= 9, 0 , 2,4 Hz) , 4,1 .0-4, 03 (2H, m), 3, 43 (1H, dd, J= :6, 3, 2,4 Hz ) , 3,23 (1H, dq, J=9, 0, 7, 2 Hz), 1,30 (3H, d, J= 6,4 Hz) , 1, 19 (3H, d, J: = 7,2 Hz) . IV (KBr): 1753, 1655, 1600, 1545, 1387, 1314 cm’1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 480 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C20H26N5O5S2: 480,1375, Encontrado: 480,1391 [M+H] +
Análise elementar: C2oH25N505S2-9/4H20
Calculado para: C,46,19% H,5,72% N,13,47% S,12,33%
Encontrado: C,46,06% H,5,38% N,13,70% S,12,33%
Exemplo 60 Ácido (IR,5S,6S)—2 — {1—[4-(piperazino-l-carbonil)-1,3-tia- zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico 363 ΡΕ1340757
(1) (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(4-p-Nitrobenziloxicarbonil)-pipe-razino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il) tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(4-p-nitroben-ziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}-azetidina (546 mg, 1,07 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 55) em dimetilformamida (15 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (118 mg, 1,29 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reac-ção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR, 5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (636 mg, 1,07 mmol) em acetonitrilo(30 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,22 ml, 1,29 mmol). A mistura foi agitada durante 1 hora enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil 364 ΡΕ1340757 separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo -► acetato de eti-lo:metanol (20:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1-{4- [ (4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (215 mg, rendimento de 29%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 8,22 (4H, dd, J= 8,5, 5,2
Hz), 7,66 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,52 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,22 (1H, s), 5,51 (1H, d, J= 13,8 Hz), 5,25 (1H, d, J= 13,8
Hz), 5,25 (2H, s), 4,50 (1H, t, J= 8,0 Hz), 4,49 (1H, t, J= 8,0 Hz), 4,35-4,20 (3H, m) , 4,04 (1H, t, J= 8,5 Hz), 4,31 (1H, t, J= 8,5 Hz), 3, 98-3, 69 (4H, m) , 3, 69-3, 48 (4H, m) , 3,29 (1H, dd, J= 6,8, 2,6 Hz), 3,20 (1H, dq, J = 9,2, 7,2
Hz), 1,36 (3H, d, J= 6,3 Hz), 1,26 (3H, d, J= 7,5 Hz). (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(4-p-Nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 365 ΡΕ1340757 p-nitrobenzilo (539 mg, 0,79 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 60(1) ) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (539 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -> acetonitrilo a 2% em água destilada -► acetonitrilo a 4% em água destilada -> acetonitrilo a 6% em água destilada -> acetonitrilo a 8% em água destilada -► acetonitrilo a 10% em água destilada -► acetonitrilo a 13% em água destilada ->· acetonitrilo a 16% em água destilada -* acetonitrilo a 20% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazino-l-carbonil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (107 mg, rendimento de 27%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MH z, D20) : δ (ppm) 7,23 (1H, £ LO (2H, t, J= 8,4 Hz) , 4 ,40-4,30 (1H, m), 4,24 (1H, quint., . J= < 5,2 Hz) , 4, 20 (1H, dd, J= 8,7, 2,2 Hz), 4,03 (2H, dd, J= 8, 7, 2,2 Hz) , 3, 95 (4H, t, J= 5,2 Hz) , 3,43 (1H, dd, J= 6,2, ; -, 4 Hz) , 3, 40-3,29 (4H, m) , 3,24 (1H, dq, J= 8 ,7, 7,3 Hz),1, ,29 (3H r d/ J= 6, 3 Hz), 1, 19 (3H, d, J= 7,9 Hz) • IV (KBi :) : 3415 i,3, 175 9,7, 1620, 9, 1536, 0, 1456, 0, 1431, 9, 366 ΡΕ1340757 1384, 6, 1313, 3, 1246, 8 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 494 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C21H28N5O5S2: 494,2532, Encontrado: 494,1529 [M+H] +
Exemplo 61 Ácido (IR, 5S,6S)—2—{1—[4—((2-aminoetil)carbamoil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR, 5S,6S)—2 — (1—{4—[ (2—(p-Nitrobenziloxicarbonilamino)-etil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(2-(p-nitro-benziloxicarbonilamino)etil)carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}aze-tidina (330,6 mg, 0,68 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 56) em dimetilformamida (17 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (82 mg, 0,89 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hi- 367 ΡΕ1340757 droxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (426 mg, 0,72 mmol) em acetonitrilo (21 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (0,5 ml, 2,9 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: toluenorace-tonitrilo (1:2)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[ (2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)etil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (348,1 mg, rendimento de 66%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . lH- -RMN (5 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=7 , 8 Hz) , 8, 14 (2 H, d, J=8 ,8 Hz), 7, 66 (2H, d, J=7, 8 Hz) , 7, 47 (2H, d, J= = 8, 8 Hz; >, 7, 43 (1H, s) , 7,38 (1H, t, J = 6, 3 Hz ) , 5,51 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,51 (1H , t, J=6, 3 Hz) , 5, 25 (1H , d, J= 13, 7 Hz ) , 5, 18 (2H, s), 4,4E ] (1H , t, J=8,3 Hz) , - 4, 46 (1H, t, J= = 8, 3 Hz) , 4, 32-4,24 (3H, m) , 4,05 (1H, dd, J=8 ,3, 5, 6 368 ΡΕ1340757
Hz), 4,03 (1H, dd, J=8,3, 5,6 Hz), 3,55 (2H, d, 6,3 Hz), 3,44 (2H, q, 6,3 Hz), 3,30 (1H, dd, J=6, 9, 1,9 Hz), 3,22 (1H, dq, J=8, 8, 6,5 Hz), 1,73 (1H, s lg) , 1,38 (3H, d, J=6,5 Hz), 1,28 (3H, d, J=6,5 Hz). (2) Ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-((2-aminoetil)carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-(1 — {4 —[(2-(p-Nitrobenziloxicarbonil-amino)etil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (328,4 mg, 0,42 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 61(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (16,4 ml) e água destilada (8,2 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (328,4 mg) num banho de água (30°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reac-ção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo-tetra-hidro-furano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com o solvente misto anteriormente mencionado, e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cro-matografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -* acetonitrilo a 5% em água destilada -* acetonitrilo a 10% em água destilada ->· acetonitrilo a 15% em água destilada) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((2-aminoetil)- 369 ΡΕ1340757 carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (96,4 mg, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,37 (1H, s) , 4,42 (1H, t, J=8,4 Hz), 4,42 (1H, t, J=8,4 Hz), 4,24-4,16 (1H, m), 4,10 (1H, quinteto, J=6, 6 Hz), 4,00 (1H, dd, J=8,9, 2,4 Hz), 3,94 (1H, dd, J=8,4, 4,8 Hz), 3,90 (1H, dd, J=8,4, 4,8 Hz), 3,57 (2H, t, J=5,9 Hz), 3,26 (1H, dd, J=6,6, 2,4 Hz), 3,12 (2H, t, J=5, 9 Hz), 3,08 (1H, dq, J=8,9, 7,3 Hz), 1,16 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,05 (3H, d, J=7,3 Hz). IV (KBr): 3383, 1755, 1652, 1599, 1547, 1387, 1314 cm’1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 468 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C19H26O5N5S2: 468,1366, Encontrado: 468,1365 [M+H] +
Exemplo 62 Ácido (IR,5S,6S)—2 —{1—[4-(3-aminoazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COOH 1 (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[3-(p-Nitrobenziloxicarbonilamino)- azetidino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 370 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[3-(p-nitroben-ziloxicarbonilamino)azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (390 mg, 0,793 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 57) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (88 mg, 0,952 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (471 mg, 0,793 mmol) em acetonitrilo (24 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (552 μΐ, 3, 17 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo:metanol (93:7)) de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2 - (1—{4 —[3-(p-nitrobenziloxicarbo-nilamino)-azetidino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car- 371 ΡΕ1340757 boxilato de p-nitrobenzilo (587 mg, rendimento de 93%), sob a f o rma de um sólido amarelo -pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J=8 ,8 Hz) , 7, 66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 7, 46 (2H, s) , 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz) , 5,40 -5, 37 (1H, m) , 5, 25 (1H, d, J=13,9 Hz) , 5,21 (2H, s) , 4,92 -4, 86 (1H, m) , - 4, 59- 4,42 (4H, m) , 4,40 -4,32 (1H, m) , . 4,30· -4, 23 (3H, m) , 4, 04- •3, 92 (3H, m) , 3,30 (1H, dd, J= =2,2 , 6,6 Hz) , 3 ,21 (1H, dq, J= =7,3, 9,0 Hz), 1,38 (3H, d, J=6 >6 Hz), 1 ,27 (3H, d, , J=' 7,3 Hz) (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino-l-carbonil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)—2—{1—{4—[3-(p-Nitrobenziloxicarbonil)-azetidino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (580 mg, 0,731 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 62(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidroge-nação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (580 mg) à temperatura ambiente durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com solventes misturados anteriormente mencionados, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -> água destilada:aceto- 372 ΡΕ1340757 nitrilo (8:2)) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino-l-carbonil)-1, 3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (135 mg, rendimento de 39%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (4 O O MHz , D20) : δ (ppm) 7,45 (1H, s) , 4, 98 LO OD 1 (1H, m) , 4, 64 -4, 49 (4 H, m), , 4,38-4,30 (1H, m) , 4, 31 -4,17 (4 H, m) , 4,07· -4, 00 (2H, m), 3,44 (1H, dd, J= =2,0, 5 , 9 Hz) , 3,24 (1H , qd, J= 7,2, 8,5 Hz ), 1,30 (3H, d, J= = 6, 4 Hz ) , 1,20 (3H, d, J=7,2 Hz ) · IV (KBr) 1756 , 1607, 1537, 1449, 1387 , 13 09, r 1291, 1261 cm
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 502 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C2oH25N505S2Na: 502,1195, Encontrado: 502,1179 [M+Na] +
Análise elementar: C2oH25N505S2-3H20
Calculado para: C,45,02% H,5,86% N,13,12% S,12,02% Encontrado: C,44,27% H,5,28% N,13,26% S,12,68%
Exemplo 63 Ácido (IR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-aminoetil)-N-metil-carba-moil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COOH 373 ΡΕ1340757 (1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-{N-metil-N-[2-(p-Nitrobenziloxicar- bonilamino)etil]carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina (348,9 mg, 0,71 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 58) em dimetilformamida (17,5 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (85,2 mg, 0,93 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosfori-loxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (420,3 mg, 0,71 mmol) em acetoni-trilo (21 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,49 ml, 2,8 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca 374 ΡΕ1340757 sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: tolueno:acetonitrilo (1:2)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbo-nilamino)etil]carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (267,5 mg, rendimento de 47%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J=8 ,8 Hz) , 7, 66 (2H, , d, J=8,8 Hz) , 7,56-7, 46 (3H, m inclui ndo 2H , d, em 7 ,49 ppm, J=8,8 Hz) , 7,22 (0, 7H, s ) , 7 ,21 (0, 3H, s) , 5,52 (1H , d, J=13, 9 Hz) , 5,25 (1H, d, J=13,9 Hz) , 5 , 172 (2H, s) , 4,52 -4,38 (2H, m) , 4, 32- -4, 10 (3H, m) , 4, 10- 3, 98 (2H, m) , 3,74 -3, 58 (2H, m) , 3, 56- -3, 40 (2H, m) , 3, 30- 3,26 (1H, m) , 3,16- -3,06 (1H, m), 3,24 : ( 0, 9H, s) , 3, 04 (2, 1H, s) , 1,77 (1H, f d/ J=4,4 Hz) , 1,38 (3H, d, J= =5,9 Hz) , 1, 22 (3H, J=7,3 Hz). (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-metil-car-bamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil ] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-{N-Metil-N-[2-(p-nitrobenzilo-xicarbonilamino)etil]carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (267,5 mg, 0,33 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 63(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (14 ml) e água destilada (6,7 ml) foi submetido 375 ΡΕ1340757 a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (300 mg) a 30°C num banho de água durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo-tetra-hidrofurano (1:1) e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada, lavada com o solvente misto anteriormente mencionado, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 5% em água destilada -► acetonitrilo a 10% em água destilada -► acetonitrilo a 15% em água destilada), e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze-tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (81,6 mg, rendimento de 51%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (4 00 MHz, D20) : δ (ppm) 7,11 (0, 4H, s), 7 LO O (0 , 6H, s) , 4,43 (2H, t, J=8, 8 Hz) , 4 ,26-4, 18 (1H , m) , 4,1 2 (1H, quinteto, J=5, 9 Hz), 4, 08 (1H , dd, J= = 8,8, 2,3 Hz) r 3, 91 (2H, dd, J=8,8, 4,9 Hz) , 3,70 (2H, t, 5, 9 Hz) , 3,3 1 (1H, dd, J=5, £ ), 2,3 Hz :), 3,23 -3,16 ( 2H, m) r 3, 12 (1H, dq, j= 8,8, 7,8 Hz) , 3,00 (1, 8H, s), 2,94 ( 1,2H, s) , i, 17 (3H , d, j = 5,9
Hz), 1,07 (3H, d, J=7,8 Hz). IV (KBr): 3419, 2966, 1754, 1607, 1540, 1470, 1391, 1315 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 482 [M+H]+ 376 ΡΕ1340757
Exemplo 64
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxi-etil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxílico
(1) (IR,5S,6S)-2-[1-(4-{N-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-{N-[2-(t-butil-dimetilsililoxi)-etil]-N-isopropil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina (618 mg, 1,35 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 59) em dimetilformamida (30 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (149 mg, 1,62 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (963 mg, 1,62 mmol) em acetonitrilo (60 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil- 377 ΡΕ1340757 amina (0,94 ml, 5,40 mmol). A mistura foi agitada durante 8 horas aumentando gradualmente a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilormetanol (10:1)) de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-{ [l-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-isopropil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (310 mg, rendimento de 30%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J= 8,4 Hz), 7,64 (2H, d, J= 8,4 Hz), 7,12-6,90 (1H, m) , 5,45 (1H, d, J= 13,7 Hz), 5,25 (1H, d, J= 13,7 Hz), 4,69-4,18 (6H, m incluindo 4,45 (2H, dd, J= 7,9, 6,5 Hz), 4,24 (1H, quint., J= 6,3 Hz), 4,22 (1H, dd., J= 9,0, 2,5 Hz)), 3,89-3,72 (1H, m) , 3,72-3,46 (2H, m), 3,46-3,32 (1H, m) , 3,26 (1H, dd, J= 6,3, 2,5 Hz), 3,17 (1H, dq, J= 9,0, 7,3 Hz), 1,36 (3H, d, J= 6,3 Hz), 1,31-1,09 (9H, m incluindo 1,25 (3H, d, J= 7,2
Hz)), 0,87 (9H, s), 0,06 (6H, d, J= 2,9 Hz). 378 ΡΕ1340757 (2) (IR,5S,6S)-2 - (1—{4 —[N-(2-Hidroxietil)-N-isopropil-car-bamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (IR,5S,6S)-2-[1-(4-{N-[2-(t-Butildimetilsililoxi-)etil]-N-isopropil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (4,47 g, 5,88 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 64(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (220 ml) foi adicionado a ácido acético (0,40 ml, 7,06 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1M em solução em tetra-hidrofurano (7,06 ml, 7,06 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 dia. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (10:1)) de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-(l-{4-[(2-hidroxietil)-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,79 g, rendimento de 47%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz), 379 ΡΕ1340757 7, 66 (2H, d, J= 8,7 Hz) , 7 ,20 ( 0,6H, s lg) , 7, 09 (0 ,4H, s ig), 5, 50 (1H, d , J= : 13,8 Hz) , 5,26 (1H, d, J 13, 8 Hz) , 4, 62· -4,18 (6H, m incluindo 4,49 (2H, t., J= = 8, 4 Hz) , 4,26 (1H, dd, J= 9,3, 2, 6 Hz) ) , 4,04 (2H, dd, J: = 8, 4, 5, 4 Hz), 3, 80 (2H, s lg) , 3, 56 (2H, s lg) , 3,28 (1H, dd, J= : 7, 5, 2,5 Hz) , 3,19 (1H, s lg), 1,38 (3H, d , J= 6 ,2 Hz) , 1, . 35 (3 ',6H, s ig), 1,26 (3H, d, J= 7,3 Hz ), 1, 21 (2, 4H, s lg) . (3) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S) -2- (1- {4- [N- (2- hidro- xietil)-N-isopropil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxílico (IR,5S,6S)-2 - (1—{4 —[(2-Hidroxietil)-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,79 g, 2,77 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 64(2)) numa mistura de tetra-hidrofurano (90 ml) e água destilada (90 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (1,79 g) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (23,3 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura foi chocalhada num funil separador. A camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 2% em água destilada -► 380 ΡΕ1340757 acetonitrilo a 4% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-hidroxietil)-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (897 mg, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,08 (0,2H, s) , 7,02 (0,8H, s), 4,56 (2H, t, J= 8,0 Hz), 4,50-4,40 (0,3H, m), 4,40-4,30 (1H, m) , 4,25 (1H, quint., J= 6,5 Hz), 4,21 (1H, dd, J= 8,4, 2,2 Hz), 4,16-4,06 (0,7H, m) , 4,05 (2H, dd, J= 8,0, 4,8 Hz), 3, 84-3,76 (1H, m) , 3, 69-3, 60 (0,5H, m) , 3,60-3,52 (0,5H, m) , 3,52 (2H, t, J= 6,3 Hz), 3,43 (1H, dd, J= 6,5, 2,4 Hz), 3,25 (1H, quint., J= 8,4 Hz), 1,42-1,07 (6H, m) , 1,30 (3H, d, J= 6,3 Hz), 1,20 (3H, d, J= 7,1 Hz)). IV (KBr): 3382,5, 1750,1, 1603,5, 1537,0, 1468,5, 1452,1, 1396, 2, 1312,3, 1284,4 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 533 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C22H29N405S2Na: 533, 1504, Encontrado: 533, 1489 [M+H] +
Exemplo 65 Ácido (IR, 5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-aminoetil)-N-isopropil-car-bamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil ] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COOH 381 ΡΕ1340757 (1) (IR, 5S,6S)-2-[l-(4-{N-Isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxi-carbonilamino)-etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}—1,3 — tiazol-2-il)azetidina (746 mg, 1,43 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 60) em dimetilformamida (22 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (158 mg, 1,72 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,02 g, 1,72 mmol) em acetonitrilo (45 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (1,00 ml, 5,72 mmol). A mistura foi agitada durante 3 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre 382 ΡΕ1340757 sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (10:1)) de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (610 mg, rendimento de 52%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (4H, dd, J= 11,0, 8,6 Hz), 7,66 (2H, d, J= 8,6 Hz), 7,50 (2H, d, J= 8,6 Hz), 7,25-6, 95 (1H, m) , 5,51 (1H, d, J= 13,7 Hz), 5,25 (1H, d, J= 13,7 Hz), 5,19 (2H, s) , 4, 63-3, 88 (8H, m) , 3,91-3,35 (4H, m), 3,29 (1H, dd, J= 6,8, 2,2 Hz), 3,25-3,08 (1H, m), 1,38 (3H, d, J= 6,2 Hz), 1,31 (3H, s lg) , 1,25 (3H, d, J= 7,3 Hz) , 1,21 (3H, s lg) . (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-{N-Isopropil-N-[2-(p-nitro-benziloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (610 mg, 0,74 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 65(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio 383 ΡΕ1340757 a 7,5% sobre carvão vegetal (610 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e água destilada à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -* acetonitrilo a 2% em água destilada -> acetonitrilo a 4% em água destilada -> acetonitrilo a 6% em água destilada -► acetonitrilo a 8% em água destilada -* acetonitrilo a 10% em água destilada -► acetonitrilo a 12% em água destilada -► acetonitrilo a 14% em água destilada -► acetonitrilo a 16% em água destilada -► acetonitrilo a 18% em água destilada) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-aminoetil)-N-isopropil-car-bamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (104 mg, rendimento de 28%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,06 (1H, s) , 4,56 (2H, t, J= 8,4 Hz), 4,41-4,31 (1H, m), 4,29-4,09 (3H, m incluindo 4,24 (1H, quint., J= 6,3 Hz), 4,20 (1H, dd, J= 8,9, 2,4
Hz)), 4,03 (2H, dd, J= 8,4, 4,8 Hz), 3,43 (1H, dd, J= 6,3, 2.4 Hz), 3,37-3,16 (3H, m incluindo 3,25 (1H, dq, j= 8,9, 7.4 Hz)), 1,29 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,25-1,15 (9H, m incluindo 1,19 (3H, d, J= 7,0 Hz)) IV (KBr): 3381,6, 1759,7, 1597,7, 1537,0, 1469,5, 1424,2, 1388,5, 1371,1, 1314,3, 1282,4 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 510 [M+H] + 384 ΡΕ1340757
Espectro de massa de alta resolução (IEP+): calculado para C22H32 N505S2Na: 510,1845, Encontrado: 510,1826[M+H]+
Exemplo 66 Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((lS)-l-aminometil-2-metilpropil-carbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l- hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
COOH (1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-{(IS)-2-Metil-[1-(p-nitrobenziloxi- carbonilamino)metil]propilcarbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-{(IS)-2-metil-[1-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (780 mg, 1,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 61) em dimetil-formamida (40 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (166 mg, 1,80 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosfo-riloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car- 385 ΡΕ1340757 boxilato de p-nitrobenzilo (892 mg, 1,50 mmol) em aceto-nitrilo (45 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,05 ml, 6,00 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (98:2)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-{ (IS)-2-metil-[1-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)metil]propilcar-bamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (950 mg, rendimento de 77%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,09 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,43 (1H, s), 7,40 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,12 (1H, d lg, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,2 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,2 Hz), 5,23 (1H, d, J=13,2 Hz), 5,05 (1H, d, J=13,2 Hz), 4,51 (1H, t, J=8,l Hz), 4,44 (1H, t, J=8,1 Hz), 4,32-4,25 (3H, m) , 4,06-3,96 (3H, m) , 3, 45-3, 32 (2H, m) , 3,30 (1H, dd, J=2,2, 6,6 Hz), 386 ΡΕ1340757 3,21 (1H, dq, J=7,3, 9, 5 Hz) , 1, 93-1, 84 (1H, m) , 1,38 (3H, d, J= = 5, 9 Hz) , 1,28 (3H , d, J=7,3 Hz), 1,00 (3H, d, J=6,6 Hz) , 0, 98 (3H, d, J=7,3 Hz) . (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-l-aminometil-2-metil-propilcarbamoil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)- 1- hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)—2—[1—(4—{(IS)-2-Metil-[1-(p-nitroben-ziloxicarbonilamino)metil]propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen- 2- em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (950 mg, 1,15 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 66(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (48 ml) e água destilada (48 ml) foi submetido a hidrogenação catalitica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (950 mg) à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada, lavada com o solvente misto anteriormente mencionado e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -> água destilada:acetonitrilo (76:24)) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-aminometil-2-metilpropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (103 mg, 387 ΡΕ1340757 rendimento de 18%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz , D20): δ (ppm) 8,18-8,03 (1H, m) , 7, 51 \—1 s) , 4,47 (2H, t, J=8,1 Hz) , 4,24-4,14 (1H, m) , 3, 99- -3, 85 (4H, m) , 3, 84- 3,77 (1H, m) , 3,09-2,88 (4H, m) , 1, 94- -1,84 (1H, m) , 1,14 (3H, d, J=6,2 Hz), 1,03 (3H, d, J=7 ,0 Hz) , 0,89 (3H, d, J= 6, 6 Hz) , 0,84 (3H, d, J=6 , 6 Hz :) · IV (KBr): 1752, 1660, 1605, 1545, 1494, 1471 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 510 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C22H32N5O6S2: 510,1845, Encontrado: 510,1846 [M+H] +
Análise elementar: C22H3iN506S2-13/7H20
Calculado para: C,48,65% H,6,44% N,12,90% S,ll,81%
Encontrado: C,48,92% H,6,29% N,12,60% S,12,04%
Exemplo 67 Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-l,3-tiazol-2-il) azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(p-Nitrobenzilcarbonilaminometil)- 1, 3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-(p-nitroben- ΡΕ1340757 zilcarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (265,2 mg, 0,63 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62) em dimetilformamida (14 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (76,4 mg, 0,5 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 0,5 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (390 mg, 0,66 mmol) em acetonitrilo (19 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,44 ml, 2,5 mmol) . A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: tolueno:acetonitrilo (2:3)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitro-benzilcarbonilaminometil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}-tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo (268,4 mg, rendimento de 59%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 389 ΡΕ1340757 ΧΗ- -RMN (4' 00 MHz, CDC13) : : Ô (ppm) 8,22 (4H, d, J=8, ,8 Hz) , 7, 66 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7,51 (2H, d, J: = 8,8 Hz) , 6, 45 (1H, s) , 5 r 51 (1H, d, J=13,9 Hz) , . 5,37 (1H, s lg) , 5, 25 (1H , d, J= 13, 9 Hz ) , 5, 21 (2H, s) , 4, 48 (1H , t, J=7,8 Hz) , 4, 46 (1H, t, J= = 7 ,8 Hz) , 4,35-4,20 (5H , m) , 4,03 (2H, dd, J=7 , 8, 4, 9 Hz ) , 3 ,29 (1H, dd , J=6,2 , 2, 5 Hz) , 3,22 (1H, dq, J=8 , 9, 7,3 Hz ) , 1 , 80 (1H / d, J=4,4 Hz) , 1,38 (3H, d, J = 5, 9 Hz ) , 1,27 (3H, d , J= = 7,3 Hz) φ (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-l,3-tiazol-2-il) -azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-1-[4-(p-Nitrobenzilcarbonilamino-metil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitroben-zilo (660 mg, 0,89 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 67(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (606 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluen-te: água destilada -* acetonitrilo a 2% em água destilada -* acetonitrilo a 4% em água destilada -► acetonitrilo a 6% em 390 ΡΕ1340757 água destilada -* acetonitrilo a 8% em água destilada -► acetonitrilo a 10% em água destilada -► acetonitrilo a 13% em água destilada -* acetonitrilo a 15% em água destilada) , e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (123 mg, rendimento de 34%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 6,85 (1H, s) , 4,54 (2H, t, J= 8,1 Hz), 4,38-4,30 (1H, m) , 4,25 (1H, quint., J= 6,3
Hz), 4,25 (1H, dd, J= 8,9, 2,5 Hz), 4,07 (2H, s) , 4,02 (2H, dd, J= 8,1, 4,0 Hz), 3,44 (1H, dd, J= 6,3, 2,5 Hz), 3,25 (1H, dq, J= 8,9, 7,3 Hz), 1,30 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,20 (3H, d, J= 7,2 Hz). IV (KBr) : 3362,3, 1756, 8, 1589, 1, 1527,3, 1469, 5, 1386, 6, 1309, 4, 1286, 3, 1259, 3 cm’1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 411 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C17H23N4O4S2: 411,4161, Encontrado: 411,1173 [M+H] +
Exemplo 68
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonil-aminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
HO
COO"Na NHCOOMe 391 ΡΕ1340757 (1) (IR, 5S, 6S)—2—{1—[4—(Metoxicarbonilaminometil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-(metoxicarbo-nilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (441 mg, 1,39 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 63) em dimetilformamida (13 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (154 mg, 1,67 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (lR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (993 mg, 1,67 mmol) em acetonitrilo (26 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,97 ml, 5,56 mmol). A mistura foi agitada durante 30 minutos enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de 392 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (307 mg, rendimento de 53%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. ΧΗ· -RMN (400 MHz , CDC13 ) : δ (ppm) 8, 22 (2H, d, J= 8,7 Hz) , 7, 66 (2H, d, J= 8,7 Hz; ) , 6, 45 (1H, : s) , 5,51 (1H, d, r J= 13, 7 Hz ) , 5, 26 (1H, d, j= 13,7 Hz ) , 4, 48 (2H, t, J= 8, 0 Hz) , 4, 43- 4, 18 (5H, m) , 4, 09-3, 99 (2H, m) , 4,0: 9-3,99 (2H, m) , 3, 69 (3H, s), 3 ,29 (1H , dd, J= = 6,7, 2 ,7 Hz) , 3,21 (1H, dq, J= 9, 0, 7 , 3 Hz) , 1, 38 (3H, d, J= 6 ,1 Hz) , 1,25 (3H, d L, J= 7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-(1-[4-(metoxicarbonilaminometil) -1, 3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(Metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (307 mg, 0,52 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 68(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (15 ml) e água destilada (15 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (307 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio 393 ΡΕ1340757 (44 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 2% em água destilada -► acetonitrilo a 4% em água destilada -► acetonitrilo a 6% em água destilada) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (135 mg, rendimento de 53%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 6,59 (1H, s) , 4,51 (2H, t, J= 8,1 Hz), 4, , 38- 4,29 (1H , m) , 4,25 (1H, quint J= ( 5,2 Hz) , 4,20 (1H, dd, J= 9 ,1, 2,5 Hz ), 4, 19 (2H, s), 4,05- 3, , 98 (2H , m) , 3,68 (3H, s) , 3,43 (1H, dd, J= 6,2, 2,4 Hz) , 3, ,25 (1H , dq, J= 9, 1, 7,4 Hz), 1,30 (3H, d, J= 6,2 Hz) , 1, .20 (3H , d, J= 7,2 Hz) • IV (KBr): 3355 ,5, 1748 ,2, 1725,1 , 1600, 6, 1525,4 , 147 0, 5, 1395,2, 1311,4, 1290,1, 1254,5 cm’1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 513 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C19H23N405S2Na2: 513, 0855, Encontrado: 513,0850[M+Na]+
Exemplo 69
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilamino-metil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 394 ΡΕ1340757
(1) (IR, 5S, 6S)—2—{1—[4—(benzoilaminometil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-(benzoilaminometil) -1, 3-tiazol-2-il] azetidina (698 mg, 2,01 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 64) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (222 mg, 2,41 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (lR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,43 g, 2,41 mmol) em acetonitrilo (40 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,40 ml, 8,94 mmol). A mistura foi agitada durante 2,5 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de 395 ΡΕ1340757 acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo ->· acetato de etilo:metanol (20:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (851 mg, rendimento de 65%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,81 (2H, d, J= 7,3 Hz), 7,66 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,56-7,38 (3H, m) , 6,79 (1H, s lg) , 6,52 (1H, s) , 5,51 (1H, d, J= 13,7 Hz), 5,25 (1H, d, J= 13,7 Hz), 4,53 (2H, dd, J= 5,3, 2,9 Hz), 4,47 (2H, t, J= 8,3 Hz), 4,33-4,22 (3H, m), 4,10- 3,95 (2H, m) , 3,28 (1H, dd, J= 6,7, 2,6 Hz), 3,19 (1H, dq, J = 7,9, 6,4 Hz), 1,37 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,26 (3H, d, J= 7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoil aminometil ) -1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(Benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (851 mg, 1,31 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 69(1)) numa 396 ΡΕ1340757 mistura de tetra-hidrofurano (40 ml) e água destilada (40 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (851 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (110 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -> acetonitrilo a 2% em água destilada -> acetonitrilo a 4% em água destilada -> acetonitrilo a 6% em água destilada -»· acetonitrilo a 8% em água destilada -► acetonitrilo a 10% em água destilada -> acetonitrilo a 15% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (144 mg, rendimento de 20%), sob a forma de um sólido branco. ΧΗ· -RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7, 81 (2H, d, J= 7 ,4 Hz) , 7, 70-7 ,55 (3H, m) , 6, 62 (1H , d, J= 8,6 Hz) , 4, 52 (2H, t, J= 7, 9 Hz ), 4,47 (2H, s) , 4 ,37 -4,28 (1H, m), 4,24 (1H, qu .int. , J= 6, 2 Hz), 4, 19 (1H, dd, J= 8, 8, 2,2 Hz) l, 4 ,05-3, 97 (2H, m) , 3, 43 (1H, dd, J= 6, 2, 2,2 : Hz) , 3,26 (1H, dq, J= 8,8, 7, 2 Hz ), 1,29 (3H, d, J= 6, 4 Hz) , 1 ,19 (3H , d, J= 7, 2 Hz) . IV (KB r) : 333( 5,2, 1750, 2, 1645, 9, 1601,6, 1526, 4, 14 88,8, 14 70,5 , 1396,2 , 13 08,5, 1294,0 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 537 [M+H] + 397 ΡΕ1340757
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C24H26N405S2Na: 537,1243, Encontrado: 537,1246 [M+H] +
Exemplo 70
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(benzenossulfo-nilaminometil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
(1) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(Benzenossulfonilaminometil)-1,3- tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil] -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-(benzenossul-fonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,00 g, 2,68 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 65) em dimetilformamida (30 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (296 mg, 3,21 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (lR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,75 g, 2,94 mmol) em acetonitrilo (60 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição 398 ΡΕ1340757 de diisopropiletilamina (1,87 ml, 10,7 mmol). A mistura foi agitada durante 3 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: hexano:acetato de etilo (1:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(benzenossulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2 — i1]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,13 g, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,83 (2H, d, J= = 7,5 Hz), 7, 66 CM J= 8,7 Hz) , 7, 60- 7,43 (3H, m) , 6, 33 (1H, S) , 5, 58 (1H, s ig) , 5, 51 (1H, d , J= 13,7 Hz) , 5,26 (1H, d, J= 13 ,7 Hz), 4, 48 (2H, t, J= 7,8 Hz) , 4,44 (2H, t, J= = 7,8 Hz) , 4,36-4, , 18 (3H, m) , 4,: 13 (1H, quint ·, J: = 7,2 Hz) , 4,08 (1H, dd, J = 12,7, 6, 0 Hz) 1 , 4,01 (1H, dd, J= 8, 6, 5, 6 Hz) , 3,94 (1H, dd, J= 8, 6 , 5, , 6 Hz) , 3,30 (1H, dd, i J= 6, 7, 2,6 Hz) , 3,21 (1H, dq, . J = 8, , 9, 7,4 Hz) , 1,37 (3H, d, . J= 6,2 Hz) , 1,23 (3H , dd , J= = 7, 2, 1,2
Hz) . 399 ΡΕ1340757 (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(benzenossul-fonilaminometil)-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(Benzenossulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,13 g, 1,65 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 70(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (55 ml) e água destilada (55 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (1,13 g) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (139 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 2% em água destilada -► acetonitrilo a 4% em água destilada -► acetonitrilo a 8% em água destilada -► acetonitrilo a 12% em água destilada -► acetonitrilo a 16% em água destilada -► acetonitrilo a 20% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(benzenossulfonil-aminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (627 mg, rendimento de 66%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,71-7,68 (3H, m) , 7,61-7,52 400 ΡΕ1340757 (2Η, m), 6,52 (1H, s) , 4,35-4,18 (5H, m incluindo 4,22 (1H, dd, J= 9,1, 2,4 Hz)), 4,12 (2H, s) , 3, 78-3, 65 (2H, m) , 3,36 (1H, dd, J= 6,2, 2,4 Hz), 3,23 (1H, dq, J= 8,8, 7,2 Hz), 1,31 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,21 (3H, d, J= 7,2 Hz). IV (KBr): 3293,8, 1748,2, 1597,7, 1528,3, 1470,5, 1447,3, 1397,2, 1314,3 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 573 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C23H26N405S2Na: 573, 0093, Encontrado: 573, 0911 [M+H] +
Exemplo 71
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofeno-2-car-bonilamino)metil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(Tiofeno-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(tiofeno-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (490 mg, 1,52 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de
Referência 66) em dimetilformamida (15 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (169 mg, 1,83 mmol) à temperatura 401 ΡΕ1340757 ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,09 g, 1,83 mmol) em acetonitrilo (30 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,06 ml, 0,68 mmol). A mistura foi agitada durante 2,5 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo) de modo a proporcionar (IR, 5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofeno-2-carbonilami-no)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (997 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. -RMN (40 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8 ,22 (2H, d, J= 8,0 Hz), 8, 02 (2H, s) , 7,66 (2H, d, J= 8, 0 Hz) , 7,47 (1H, d, J= 5,2 Hz ), 7,07 (1H, d, J= 4,2 Hz) , 6,55 (1H, s) , 5,50 (1H, d, J= 402 ΡΕ1340757 13,7 Hz), 5,26 (1H, d, J= 13,7 Hz), 4,67-4,55 (2H, m), 4,51 (2H, d, J= 5,3 Hz), 4,35-4,22 (2H, m) , 4,22-4,03 (3H, m) , 3,29 (1H, dd, J= 6,8, 2,6 Hz), 3,18 (1H, dq, J = 9,0, 7,5 Hz), 1,37 (3H, d, J= 6,3 Hz), 1,25 (3H, d, J= 7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofeno-2-carbonilamino)metil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(Tiofeno-2-carbonilamino)me-til]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil ] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (997 mg, 1,52 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 71(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (35 ml) e água destilada (35 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (997 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reac-ção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogeno-carbonato de sódio (128 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 4% em água destilada -► aceto-nitrilo a 8% em água destilada -► acetonitrilo a 12% em água destilada ->· acetonitrilo a 15% em água destilada -* acetonitrilo a 20% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofeno-2-carbonil- 403 ΡΕ1340757 amino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (287 mg, rendimento de 35%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,73 (2H, d, J= 2,7 Hz), 7,19 (1H, t, J= 4,4 Hz), 6,59 (1H, d, J= 0,7 Hz), 4,49 (2H, t, J= 7,5 Hz), 4,43 (2H, s), 4,35-4,27 (1H, m), 4,24 (1H, quint., J= 6,3 Hz), 4,18 (1H, dd, J= 8,3, 2,4 Hz), 3,99 (1H, t, J= 4,7 Hz), 3,97 (1H, t, J= 4,7 Hz), 3,42 (1H, dd, J= 6,3, 2,4 Hz), 3,22 (1H, quint., J= 8,3 Hz), 1,30 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,18 (3H, d, J= 7,1 Hz). IV (KBr): 3324,7, 1749,1, 1599,7, 1530,2, 1469,5, 1418,4, 1396, 2 cm'1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 521 [M-Na+2H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C22H25N4O5S3: 521,0942, Encontrado: 521,0992 [M-Na+2H] +
Exemplo 72
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-(l-{4-[(furano-2-car-bonilamino)metil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
1 (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[(Furano-2-carbonilamino)metil]-l,3- tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 404 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(furano-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (341 mg, 1,12 iranol) (obtida tal como descrito no Exemplo de
Referência 67) em dimetilformamida (10 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (123 mg, 1,34 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (797 mg, 1,34 mmol) em acetonitrilo (20 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,78 ml, 4,48 mmol). A mistura foi agitada durante 3 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido cloridrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(furano-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (641 mg, 405 ΡΕ1340757 rendimento de 89%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J= 7,8 Hz), 7,66 (2H, d, J= 7,8 Hz), 7,45 (1H, s) , 7,13 (1H, d, J= 3,5
Hz) , 6,53 (1H, s), 6, 49 (1H, d, J= 5, 1 Hz), 5,48 (1H, d, J= 13,7 Hz), 5,26 (1H, d , J= 13,7 Hz ), 4,60-4,40 (4H, m incluindo 4,51 (2H, d, J= 5,6 Hz) ) , 4,35-4,20 (2H, m) , 4,20-4,00 (3H, m), 3, 29 (1H, dd, J= 6, 9, 2,5 Hz) , 3,19 (1H, dq, J = 9, 3, 7,3 Hz), 1, 37 (3H, d, J= 6,4 Hz) , 1,26 (3H, d, J= 7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-(1-{4-[(furano-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(Furano-2-carbonilamino)metil ]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (640 mg, 1,00 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 72(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (32 ml) e água destilada (32 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (640 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidro-genocarbonato de sódio (84 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de 406 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 2% em água destilada -► aceto-nitrilo a 4% em água destilada -> acetonitrilo a 6% em água destilada -► acetonitrilo a 8% em água destilada -► acetonitrilo a 10% em água destilada -► acetonitrilo a 15% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(furano-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (218 mg, rendimento de 41%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,69 (1H, dd, J= 1,7, 0,8
Hz) , 7, 19 (1H, dd, J= 3, 6, 0,7 Hz) , 6,64 (1H, dd, J= 3,6, 1,7 Hz) r 4 ,51 ( 2H, t, J= 8 ,2 Hz), 4,44 (2H, s) , 4 ,38- 4,28 (1H , m) r 4 : , 2 5 (1H, qu int., J= 6, 3 Hz) , 4,19 (1H, dd, , J= CT) 00 , 2, 2 Hz), 4 , 02 (1H , dd, J= 5,0, 3,2 Hz), 4, 00 (1H, dd, J= 5,0, 2 r 9 Hz) , 3, 43 (1H, dd, J= 6,3, 2,5 Hz) , 3 ,24 (1H, dq, J= 8, 9 , 7,1 Hz) ,1, 30 (3H, d, J = 6,4 Hz), 1 ,19 (3H , d, J= 7,1 Hz ) · IV (KBr): 3367, 1, 1749 >,1, 1653 ,7, 1594, 8, 1524 ,5, 1472,4, 1395,2 cm' -1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 505 [M-Na+2H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+): calculado para C22H25N4O6S2: 505, 1216, Encontrado: 505, 1208 [M-Na+2H] +
Exemplo 73
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico 407 ΡΕ1340757
HO
Ο
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il) aze- tidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (599 mg, 1,60 mmol) obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 68 em dimetilfor-mamida (18 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (177 mg, 1,92 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosfori-loxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (1,14 g, 1,92 mmol) em acetoni-trilo (36 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (1,11 ml, 6,40 mmol). A mistura foi agitada durante 30 minutos enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de 408 ΡΕ1340757 acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (640 mg, rendimento de 59%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (4( D0 MH z, CDC13) : δ (ppm) 8, 22 (2H, d, J= 8 ,7 Hz) , 7,8 8 (2H, dd, J= 5 ,5, 3 ,1 Hz) , 7,7 3 (2H, dd, J= 5 ,5, 3,1 Hz) r 7,65 (2H, d, J: = 8,7 Hz ), 6 ,41 (1H, s), 5,49 (1H , d , J= 13, 1 Hz) , 5,25 (1H, d, J= = 13,7 Hz) , 4,80 (2H s), 4, 46 (1H, t, j= = 8,1 Hz) , 4,43 (1H, r t , J= 8,1 Hz) , 4, 32-4,18 (3H , m, inc lu indo 4,24 (1H, dd, J= 9,2, 2,4 Hz) ) , 4 ,02 (1H, dd , J= 5,5 r 2,8 Hz) , 4,00 (1H, dd, J= 5,5, 2,8 Hz) , 3,26 ( 1H, dd, J= 6, 9, 2 , 5 Hz ), 3, 19 (1H, dq, J = 9,2, 7,3 Hz), 1, 38 (3H, d, J= = 6,2 Hz) , 1,25 (3H, dd , J= 7,3, 2,1 Hz) (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Ftalimidometil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (640 mg, 0,95 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 73(1)) numa mistura de 409 ΡΕ1340757 tetra-hidrofurano (32 ml) e água destilada (32 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (640 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (80 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 2% em água destilada -► acetonitrilo a 4% em água destilada -> acetonitrilo a 6% em água destilada -> acetonitrilo a 8% em água destilada -► acetonitrilo a 10% em água destilada -► acetonitrilo a 15% em água destilada -► acetonitrilo a 20% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3 — i1]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (202 mg, rendimento de 38%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz , D20) : δ (ppm) 7 ,90-7,78 (4H, m) , 6,56 (1H, d, J= 2 ,7 H z) , 4,70 (2H, s), 4, 43 (1H, t, J= = 7,9 Hz) , 4,42 (1H, t, J= 7, 9 Hz) , 4,31-4,19 (2H, m inclu indo 4,24 (1H, quint. , J= 6, 3 Hz) ) , 4,17 (1H, dd, J= 8,7, 2,0 Hz) , 3, 94 (1H, t, J = = 7, 9 Hz), 3,92 (1H, t, J = 7, 9 Hz) , 3,18 (1H, dq, J= 8,7, 7,2 Hz) , 1,29 (3H, d, J= 6, 4 Hz) , 1, 15 (3H , d, J= 7,2 Hz). 410 ΡΕ1340757 IV (KBr): 3409,5, 1768,4, 1750,1, 1717,3, 1601,6, 1528,3, 1425, 1, 1393,3, 1313,3 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 563 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C25H23N406S2Na2: 585, 0864, Encontrado: 585,0865[M+Na]+
Exemplo 74
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-[1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Succinimidometil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-succinimidome-til-1,3-tiazol-2-il)azetidina (238 mg, 0,73 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 69) em dimetil-formamida (7 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (81 mg, 0,88 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosfo-riloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car- 411 ΡΕ1340757 boxilato de p-nitrobenzilo (523 mg, 0,88 mmol) em acetoni-trilo (14 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (0,51 ml, 2,92 mmol). A mistura foi agitada durante 2 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilormetanol (20:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-succinimidometil-l,3-tia-zol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (211 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J= 8,7 Hz) , 6, 42 (1H, s) , 5, 50 (1H, d, J= 13,8 Hz) , 5,25 (1H, d, J= 13 ,8 Hz) , 4, 61 (2H, s) , 4 ,46 (1H, t, J= 8 ,0 Hz), 4, 45 (1H, t, J= 8,0 Hz) , 4,32-4, 18 (3H, m, incluindo 4,25 (1H, dd, J= 9, 1, 2 ,3 Hz) ) , 4,02 (1H, t, J= 4,8 Hz) , 4,00 (1H, dd, J= 4, 8, 3, ,1 Hz) , 3,28 (1H, dd, J= 6, 9, 2,5 : Hz) , 3 ,20 (1H, dq, J = 9, 1, 7,3 Hz), 2, 76 (4H, s) , 1,38 (3H, d, J= 6,2 Hz) , 1, 27 (3H, d, J= 7,3 Hz) 412 ΡΕ1340757 (2) Sal de sódio de ácido (IR, 5S, 6S)-2-[1-(4-succinimi-dometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidro-xietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Succinimidometil-l, 3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (211 mg, 0,34 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 74(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (10 ml) e água destilada (10 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 7,5% sobre carvão vegetal (211 mg) num banho de água (35°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (29 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► acetonitrilo a 2% em água destilada -► acetonitrilo a 4% em água destilada) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[ 1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (115 mg, rendimento de 66%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 6,59 (1H, s) , 4,57 (2H, s) , 4,50 (2H, t, J= 8,1 Hz), 4,38-4,29 (1H, m) , 4,25 (1H, quint., J= 6,3 Hz), 4,20 (1H, dd, J= 8,7, 2,3 Hz), 4,01 413 ΡΕ1340757 (1Η, t, J = 4,2 Hz), 3,99 (1H, t, J = 4,2 Hz), 3,43 (1H, dd, J= 6,3, 2,4 Hz), 3,24 (1H, dq, J= 8,7, 7,4 Hz), 2,48 (4H, s), 1,30 (3H, d, J= 6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J= 7,2 Hz). IV (KBr) : 3381, 6, 1749, 1, 1794,8, 1601, 6, 1526, 4, 1470,5, 1424,2, 1399, 1, 1312,3, 1295, 0, 1168,7 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 515 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C2iH24N406S2Na : 515, 1035, Encontrado: 515, 1034 [M+H] +
Exemplo 75
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)- azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-azetidinocar-bonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (330 mg, 1,17 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 71) em dimetil-formamida (17 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (130 mg, 1,41 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se 414 ΡΕ1340757 verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosfo-riloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (696 mg, 1,17 mmol) em aceto-nitrilo (35 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (815 μΐ, 4,68 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo:metanol (9:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (605 mg, rendimento de 89%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8 , 8 Hz) , 7,71 (1H, s) , 7,66 (2H, d, J= = 8,8 ] iz) , 5,51 (1H, d, d = 13, 9 Hz) , 5,25 (1H, d, J=13, 9 Hz) , 4,54 -4,47 (4H, m) , 4, 29 -4,12 (2H, m) , 4,26 (1H, dd, J=2,2, 9,5 Hz) , 4,09 (2H, t r J=8, 8 Hz) , 4,07 (2H, t, J=8,8 Hz) , 3,29 (1H, dd, J =2,2, 6 , 6 Hz) , 3,19 (1H, dq, J=9,5, 7, 3 Hz) , 2,37 -2,27 (2H, m) , 1, 38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz). 415 ΡΕ1340757 (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocar-bonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Azetidinocarbonil-l, 3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (600 mg, 1,03 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 75(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (30 ml) e água destilada (30 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (600 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (86 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada :acetonitrilo (9:1)),e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (lR,5S,6S)-2-[l-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azeti-din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (278 mg, rendimento de 58%), sob a forma de um sólido branco. XH-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,80 (1H, s) , 4,59 (2H, t, J=8,3 Hz), 4,45 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,35-4,27 (1H, m) , 4,25 (1H, dq, J=6,2, 6,4 Hz), 4,20 (1H, dd, J=2,4, 9,1 Hz), 416 ΡΕ1340757 4,16 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,08 (2H, dt, J=9, 2, 4,6 Hz) , 3,43 (1H, dd, J=2,4, 6,2 Hz), 3,24 (1H, dq, J=9,1, 7,2 Hz) , 2,39 (1H, quinteto, J=7,8 Hz) , 1,30 (3H , d, J=6, 4 Hz) , 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz) . IV (KBr) : 1750, 1619, 1468, 1443, 1383 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 493 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) :calculado para C2oH23N406SNa2: 493, 1133, Encontrado: 493, 1167 [M+Na] +
Análise elementar: C2oH23N406SNa-H20
Calculado para: C,49,18% H,5,16% N,ll,47% S,6,56%
Encontrado: C,49,04% H,5,46% N,ll,57% S,6,29%
Exemplo 76
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1) (lR,5S,6S)-2-[l-(4-Morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il) - azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-morfolinocar-bonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (260 mg, 0,835 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 72) em dime- 417 ΡΕ1340757 tilformamida (13 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (92 mg, 1,00 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosfori-loxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (496 mg, 0,835 mmol) em acetoni-trilo (25 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (582 μΐ, 3,34 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica (eluente: acetato de etilo:metanol (9:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (552 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,73 (1H, s), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,2 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,2 Hz), 4,52 (2H, q, J=8,l Hz), 4,31- 418 ΡΕ1340757 4,20 (3Η, m) , 4,13-4,06 (2H, m) , 3, 76-3, 65 (8H, s lg) , 3,29 (1H, dd, J2,5, 7,0 Hz), 3,19 (1H, dq, J=9,5, 7,3 Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolino-carbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico (IR,5S,6S)-2-[1-(4-Morfolinocarbonil-l, 3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (550 mg, 0,835 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 76(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (28 ml) e água destilada (28 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (550 mg) à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (70 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada : acetonitrilo (9:1)) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (193 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido branco. 419 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz , D20, TSP) : δ (ppm) 7,77 (1H, , s) , 4,60 (2H, t, J= = 8, 2 Hz) , 4,36-4,28 (1H, m) , 4,25 (1H, dq, J=6, 1, 6, 3 Hz) , 4, 21 (1H, dd, J=2,2, 9,0 Hz) , 4,09 (1H, dt, J=8,9, 4,5 Hz) , 3, 90-3,66 (8H, m), 3,43 (1H, dd, J: =2,2, 6, 1 Hz) , 3,25 (1H, dq J=9,0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J = 6, 3 Hz) , 1/19 (3H, d, J= =7, 2 Hz) . IV (KBr): 1750, 1618, 1459, 1443, 1385, 1304 cm_i Espectro de massa (BAR+) : m/z: 523 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C2iH25N407SNa2: 523, 1240, Encontrado: 523, 1238 [M+Na] +
Análise elementar: C2iH25N407SNa/H20
Calculado para: C,48,64% H,5,25% N,10,81% S,6,18%
Encontrado: C,48,45% H,5,41% N,10,45% S,5,55%
Exemplo 77
Sal de sódio de ácido (IR, 5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiaze-tidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
HO
OMe (1) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-Metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3- oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-(3-metoxiazeti- 420 ΡΕ1340757 dino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il)azetidina (330 mg, 1,06 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 73) em dimetilformamida (17 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (117 mg, 1,27 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (630 mg, 1,06 mmol) em acetonitrilo (32 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletilamina (739 μΐ, 4,24 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo: metanol (95:5 -► 9:1)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbo-nil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (550 mg, rendimento de 85%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 421 ΡΕ1340757 ΧΗ· -RMN (4 0 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8, 8 Hz) , 7, 74 (1H, s) , 7, 66 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 5,55 (1H, d, J = 13,2 Hz ) , 5,25 (1H, d , J: = 13,2 Hz) 4,7 1-4,63 > (1H, m) , 4,51 (2H, q, J= = 8,1 Hz) , 4, 38- 4,20 (6H , m) , 4,10- 4,05 (2H, m) , 4,04- 3, 98 (1H, m) , 3, 32 (3H, s) , 3,29 (1H, dd, J: =2,2, 6, 6 Hz) , 3, 20 (1H, dq, J= 9,2 , 7,3 Hz) , 1,3: 8 (3H, d, J = 5, 9 Hz) r 1,26 (3Η, d, J=7,3 Hz). (2) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxi-azetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(3-Metoxiazetidino-l-carbo-nil) -1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (550 mg, 0,896 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 77(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (28 ml) e água destilada (28 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (550 mg) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reac-ção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidroge-nocarbonato de sódio (75 mg) , ácido acético e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromato-grafia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada:acetonitrilo (92:8)) e o eluído foi liofili-zado de modo a proporcionar o composto desejado sal de 422 ΡΕ1340757 sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (276 mg, rendimento de 62%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,84 (1H, s) , 4,66 (1H, dd, J=6,4, 10,3 Hz), 4,60 (2H, t, J=8,3 Hz), 4,46-4,30 (4H, m) , 4,25 (1H, dq, J=6,2, 6,4 Hz), 4,20 (1H, dd, J=2,4, 9,0 Hz), 4,09 (2H, quinteto, J=4,5 Hz), 4,04-3,98 (1H, m), 3,43 (1H, dd, J=2,4, 6,2 Hz), 3,37 (3H, s) , 3,25 (1H, dq, J=9,0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr) : 1750, 1622, 1457, 1385 cm"1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 523 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+): calculado para C2iH25N4C>7SNa2: 523, 1239, Encontrado: 523, 1227 [M+Na] +
Análise elementar: C2iH25N407SNa-4/3H20
Calculado para: C,48,09% H,5,32% N,10,68% S,6,ll%
Encontrado: C,48,07% H,5,61% N,10,78% S,6,03%
Exemplo 78
Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazeti-dino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
HO
COO'Na 423 ΡΕ1340757 (1) (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[3-(t-Butildifenilsililoxi) -azeti-din-l-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni-trobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[3-(t-butildi-fenilsililoxi)-azetidin-l-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}aze-tidina (860 mg, 1,61 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 74) em dimetilformamida (43 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (178 mg, 1,93 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[ (R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo (957 mg, 1,61 mmol) em acetonitrilo (48 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (1,12 ml, 6,44 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verif-car que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de 424 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (95:5)) de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S)-2-(1-{4-[3-(t-butildifenilsililo-xi)-azetidin-l-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)-tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo (1,20 g, rendimento de 89%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8, 8 Hz) , 7, 69 (1H, s) , 7,66 (2H, d, J: =8,8 Hz), 7, 64- -7,59 (4H, m) , 7,47 -7,36 (6H, m) , 5, 51 (1H, d, J=13,5 Hz) , 5,25 (1H , d, J=13 ,5 Hz), 4,65-4,5 9 (1H , m) , 4,69-4,50 (1H, m) , 4 :, 50 (2H, q, J=8, 1 Hz), 4,39- 4,32 (1H, m) , 4,30- 4,20 (2H, : m) , 4,26 (1H, dd, J=2,9, 9,5 Hz) , 4,18 -3,99 (4H, m) , 3,29 (1H, dd, J=2, 9, 7,3 Hz) , 3,20 ' (1H, dq, J=9,5, 1,. 3 Hz) , 1,38 (3H , d, J=6, 5 Hz), 1,27 (3H, d, 0Π =7,3 Hz), 1,06 (9H, s) . (2) (IR,5S,6S)-2-{Ι [4- (3 -Hidroxiazetidi no-1- carbon dl)- 1,3- oxaz οί—2—il] azetidin -3-il } tio- 6-[(R)-1-h idrox :ietil ] -1- metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[3-(t-Butildifenilsililoxi)-azetidin-l-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il) tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,20 g, 1,43 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 78(1)) em tetra-hidrofurano (60 ml) foi adicionado a ácido acético (240 μΐ, 4,30 mmol) e fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em solução em tetra-hidrofurano (4,30 ml, 4,30 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 dias. Depois de se verificar que a 425 ΡΕ1340757 reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo: metanol (95:5 -► 9:1)) de modo a propor cionar (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-hidroxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (325 mg, rendimento de 38%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8 ,8 Hz) , 7,74 (1H, s) , 7, 66 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 5, 51 (1H, d, J= 13, 7 Hz) , 5,25 (1H, d , J=13,7 Hz) r 4,8 0-4,68 (2H, m) , 4, 50 (2H, q, J= = 8,0 Hz) , 4, 43-4,29 (2 H, ψ m) , 4,29- 4,20 (3H, m) , 4 ,13- 4,05 (2H, m) , 4, 02-3,95 (1H, r m) , 3,29 (1H, dd, J=2 ,7, 6, 9 Hz) , 3,20 (1H, dq, J= 9,3, , 7, 3 Hz) , 1,38 (3H, d, J=6 ,3 Hz) , 1,26 (3H, d, J= =7, •3 Hz). (3) Sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiaze-tidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(3-Hidroxiazetidino-l-carbo-nil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi- 426 ΡΕ1340757 etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (320 mg, 0,534 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 78(2)) numa mistura de tetra-hidrofurano (16 ml) e água destilada (16 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (320 mg) à temperatura ambiente durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (45 mg), acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada:acetonitrilo (9:1)) e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado sal de sódio de ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xílico (144 mg, rendimento de 56%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20, TSP) : δ (ppm) 7,84 (1H, s) , 4,75-4,66 (2H, m) , 4,60 (2H, t, J=8,2 Hz), 4, 44-4,38 (1H, m) , 4,35- 4,23 (3H, m) , 4,20 (1H, dd, J=2,4, 9,0 Hz), 4,09 (2H, dt, J= 8, 9, 4,5 Hz), 3, 98-3, 93 (1H, m) , 3,43 (1H, dd, J=2,4, 6,2 Hz), 3,24 (1H, dq, J=9,0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz) . IV (KBr): 1750, 1621, 1470, 1385, 1294, 1277 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 509 [M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado durante 509, 1083, Encontrado: 509, 1102[M+Na] + 427 ΡΕ1340757
Análise elementar:
Calculado para: C,49,38% H,4,77% N,ll,52% S,6,59
Encontrado: C,46,25% H,6,23% N,ll,07% S,5,90
Exemplo 79 Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-aminoazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
HO
COOH (1) (IR,5S,6S)-2-{l-{4-[3-(p-Nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidin-l-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[3-(p-nitroben-ziloxicarbonilamino)azetidin-l-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-iljazetidina (190 mg, 0,383 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 75) em dimetilformamida (10 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (42 mg, 0,460 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro- 428 ΡΕ1340757 benzilo (228 mg, 0,383 mmol) em acetonitrilo (11 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (268 μΐ, 1,53 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbo-nato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo:metanol (93:7)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)—2—{1—{4—[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)azeti-din-l-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni-trobenzilo (257 mg, rendimento de 86%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (4i 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (4H, d, C-| II co co Hz) , 7,75 (1H, s) , 7, 66 (2H, d, J=8,8 Hz) , 7,51 (2H , d, J=8, 8 Hz) , 5,51 (1H, d, J= = 13, 7 Hz) , 5,34 -5, 31 (1H, m) , 5,25 (1H, d, J= = 13,7 Hz) , 5, 21 (2H, s) , 4,87 -4,82 (1H, m) , 4, 60 -4,42 (2H, m) , 4,49 (2H r q, J= = 8,8 Hz) , 4,38- 4,30 (1H, m) , 4,28- 4,20 (3H, m) , 4,0' 6 (2H, dt, J=8,8, 4,9 Hz) , 4,00 -3, 93 (1H, m) , 3 ,29 (1H, dd, J= =2,9, 6, 8 Hz) , 3, 18 (1H, dq, J=9, 0 , 6,8 Hz) , 1,38 (3H, d, J= =5, 9 Hz) , 1,26 (3H, d, J=< 5, 8 Hz) . 429 ΡΕ1340757 (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR,5S,6S)-2-{l-{4-[3-(p-Nitrobenziloxicarbonil-amino)azetidin-l-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (250 mg, 0,321 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 79(1)) numa mistura de tetra-hi-drofurano (13 ml) e água destilada (13 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (250 mg) à temperatura ambiente durante 3,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -► água destilada : acetonitrilo (82:18)) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (68 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,88 (1H, s), 4,60 (2H, t, J=8,2 Hz), 4,57-4,49 (2H, m), 4,35-4,16 (6H, m) , 4,08 (2H, dt, J=8,6, 4,5 Hz), 3,44 (1H, dd, J=2,5, 6,2 Hz), 3,24 (1H, 430 ΡΕ1340757 dq, J=9, 0, 7,2 Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr) : 1754, 1624, 1457, 1380 cm-1 Espectro de massa (IEP+) : m/z: 486[M+Na] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C2oH26N506S: 464,1603, Encontrado: 464, 1609 [M+H] +
Análise elementar: 02οΗ25Ν5063·10/3H20
Calculado para: C,45,85% H,5,69% N,13,62% S,6,18%
Encontrado: C,45,88% H,6,10% N,13,38% S,6,12%
Exemplo 80 Ácido (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-((3 S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)- 1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilico
(1) (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(3S)—1—(p-Nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (530 mg, 1,08 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 76) em dimetilformamida 431 ΡΕ1340757 (27 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (120 mg, 1,30 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (642 mg, 1,08 mmol) em acetonitrilo (32 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropil-etilamina (753 μΐ, 4 ,32 mmol). A mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -► acetato de etilo: metanol (95:5)) de modo a proporcionar (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[ (3S)—1 — (p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (652 mg, rendimento de 76%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 8,23 (4H, d, J=8,8 Hz), 432 ΡΕ1340757 7,77 (1H, s) , 7, 66 (2H, d, J = 8, 8 Hz) , 7,53 (2H, t r OD 00 II •"D Hz) , 6, 82 -6, 78 (1H, m) , 5,51 (1H , d, J= 13, 6 Hz) , 5, 25 (1H, d, J = 13, 6 Hz) , 5,30 -5, 18 (2 H, m) , 4,66- 4,58 (1H, m) r 4,57- 4,46 (2H, m) , 4, 11- 4,20 (2H, m) , 4,26 (1H, dd, J =2 ,2 , 8,8 Hz) , 4,14 -4,04 (2H, m) , 3, 82- 3,74 (1H, m) , 3, 64- 3, 55 (2H, m) , 3,46- 3,40 (1H, m) , 3 ,29 ( :ih, dd, J: =2,2, 6, 6 Hz ) , 3,20 (1H, dq, J=8, 8 , 7,2 Hz) , 2,30 -2, 20 (1H, m) , 2,10- 1, 92 (1H, m) , 1,38 (3H, d, J=< 5,6 Hz ), i, 27 (3H, d, J=7( .2 Hz) φ (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarba-moil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxi-etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR, 5S,6S)-2 - (1-{4-[(3S)-1-(p-Nitrobenziloxicar-bonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (650 mg, 0,821 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 80(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (33 ml) e água destilada (33 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (650 mg) à temperatura ambiente durante 4,5 horas. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cro-matografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -* água destilada: acetonitrilo (76:24) ),e o eluido foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado 433 ΡΕ1340757 ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (129 mg, rendimento de 33%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7, 94 (1H, s) , 4, 68- -4, 60 (1H, m) , 4,60 (2H, t, J=8 :,2 Hz) , 4 , 35-4 ,28 (1H, m) , 4,25 (1H, dq, J=6,2, 6, 4 Hz), 4 ,19 (1H, dd, J= =2,4, 9,1 Hz) , 4,09 (2H, dt, J=8,9, 4,4 Hz), 3,63 (1H, dd, J=7, 0, 12,6 Hz) , 3,58 (1H, dt, J= = 12,0, 7,6 Hz) , 3,50 -2, 98 (3H, m) , 3,24 (1H, dq, J=9, 1, 7,2 Hz), 2,49- 2,39 (1H, m) , 2,22- 2,13 (1H, m) , 1,30 (3H, d, J=6 ,4 Hz), 1, 19 (3H, d, J=7, 2 Hz) . IV (KBr) : 1755, 1626, 1543, 1386 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : m/z: 478 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C21H28N5O6S: 478, 1761, Encontrado: 478, 1768 [M+H] +
Análise elementar: C2iH27N506S-3H20
Calculado para: C,47,45% H,6,26% N,13,17% S,6,06% Encontrado: C,47,33% H,5,52% N,12,9 % S,5,97%
Exemplo 81 Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((3R)-l-(p-nitrobenziloxicarbo-nil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxílico
COOH
434 ΡΕ1340757 (1) (IR, 5S, 6S)—2—{1—[4—((3R)—1—(p-Nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}-tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo A uma solução de 3-acetiltio-l-[4-( (3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (280 mg, 0,572 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 77) em dimetilformamida (14 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (63 mg, 0,686 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada, gota a gota, uma solução de (IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (340 mg, 0,572 mmol) em acetonitrilo (17 ml) para dentro da mistura resultante num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, seguido da adição de diisopropiletil-amina (399 μΐ, 2,29 mmol). A mistura foi agitada durante 4,5 horas enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio à mistura de reacção. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada de acetato de etilo foi separada, lavada com solução de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob 435 ΡΕ1340757 pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica (eluente: acetato de etilo -» acetato de etilo:metanol (95:5)) de modo a proporcionar (IR, 5S, 6S) -2-1-[4-((3R)-1-(p-nitrobenziloxi-carbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azeti-din-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (323 mg, rendimento de 73%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8 ,8 Hz) , 8,22 (2H, dd, J=8,8 , 12, 7 Hz), 7, 77 (1H, s) , 7,66 (2H , d, J=8, 8 Hz) , 7,52 (2H , dd, J= =8,8, 12,7 Hz ;), 6, 82-6, 78 (1H, t ig, J= 6, 8 Hz) , 5, 51 (1H, d, J=13,7 Hz) , 5,23 (1H, d, J= 13, 7 Hz) , 5 , 25 -5,19 (2H, m) , 4, 66-4,58 (1H, m) , 4,56- 4, 49 (2H, m) , 4, 30- 4,21 (3H, m) , 4,: 13-4,04 (2H, m) , 3, 80- 3, 74 (1H, m) , 3, 64- 3,53 (2H, m) , 3, 44-3,39 (1H, m) , 3,29 ( 1H, dd, J=2, 9, 6, 8 Hz) , 3, 20 (1H, dq, J= =7,8, 7,8 Hz) , 2, 30- 2,20 (1H, ir 0 , 2,10- 1, 94 (1H, m) , 1,38 (3H, d, J =5,9 Hz ) , 1,27 (3H, d , J= = 7,8 Hz) . (2) Ácido (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarba-moil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil ] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (IR, 5S,6S)— 2 —{1—[4-((3R)-1-(p-Nitrobenziloxicar-bonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo (320 mg, 0,404 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo 81 (1)) numa mistura de tetra-hi-drofurano (16 ml) e água destilada (16 ml) foi submetido a 436 ΡΕ1340757 hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (320 mg) à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e ao filtrado foram adicionados acetato de etilo e água destilada. A mistura resultante foi chocalhada num funil separador e a camada aquosa foi separada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna Cosmosil (eluente: água destilada -> água destilada : acetonitrilo (79:21)) e o eluído foi liofilizado de modo a proporcionar o composto desejado ácido (IR,5S, 6S)-2-{1-[4- ( (3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azeti-din-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (88 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, D20) : δ (ppm) 7,94 (1H, s) , 4, 67-4, 60 (1H, m) , 4,60 (2H, t, J=8,3 Hz), 4,35-4,28 (1H, m) , 4,25 (1H, dq, J=6,2, 6,4 Hz), 4,20 (1H, dd, J=2,4, 9,1 Hz), 4,08 (2H, dt, J=8,8, 4,5 Hz), 3,63 (1H, dd, J=7,0, 12,6 Hz), 3,57 (1H, dt, J=12,0, 7,6 Hz), 3, 49-3, 37 (3H, m) , 3,24 (1H, dq, J=9,1, 7,2 Hz), 2,49-2,38 (1H, m) , 2,22-2,13 (1H, m) , 1,30 (3H, d, J=6,4 Hz), 1,19 (3H, d, J=7,2 Hz). IV (KBr) : 1758, 1625, 1543, 1385 cm'1 Espectro de massa (IEP+) : m/z: 478 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (IEP+) : calculado para C21H28N5O6S: 478, 1760, Encontrado: 478, 1739 [M+H]+
Análise elementar: C2iH27N506S-3H20
Calculado para: C,47,45% H,6,26% N,13,17% S,6,03% Encontrado: C,47,30% H,5,88% N,13,14% S,6,01% 437 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 1 3-Acetiltio-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
(1) Éster de etilo de ácido (3-hidroxiazetidino-l-carbo-tioil)carbâmico
Uma solução de N-benzidril-3-hidroxiazetidina (20 g, 83,6 mmol) em metanol (600 ml) foi submetida a hidroge-nação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (20 g) num banho de água (50°C) sob pressão de hidrogénio de 1 atmosfera durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O residuo foi partilhado entre acetato de etilo e água destilada. A camada orgânica foi separada e adicionalmente extraída com água destilada. As camadas aquosas foram concentradas sob pressão reduzida e secas in vacuo, de modo a originar um produto, sob a forma de um óleo castanho. A uma solução do produto numa mistura de tetra-hidrofurano (180 ml) e água destilada (60 ml) foi adicionado isotiocianato de etoxicar-bonilo (19,7 ml, 167 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura durante 10 minutos no banho de gelo, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção 438 ΡΕ1340757 estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar éster de etilo de ácido (3-hidroxiazetidino-l-carbotioil)carbâmico (7,4 g, rendimento de 43%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ 7,63 (1H, s lg) , 4,80-4,50 (3H, m) , 4,40-4,00 (4H, m incluindo 2H, q, em 4,18, J=7,3 Hz), 2,28 (1H, s lg), 1,29 (3H, t, 7,3 Hz). (2) 1- (4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de éster de etilo de ácido (3-hidroxiazetidino-l-carbotioil)carbâmico (14,4 g, 70,5 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 1(1)) numa mistura de etanol (72 ml) e água destilada (72 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (14,1 g, 353 mmol). A mistura foi aquecida sob refluxo durante 16 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente. À mistura de reacção foi adicionado gás cloreto de hidrogénio 4N em dioxano (88 ml) num banho de gelo, seguido da adição de 2-bromopiruvato de etilo (17,7 ml, 141 mmol) e trietilamina (19,8 ml, 141 mmol). A mistura resultante foi aquecida sob refluxo durante 1 hora. Depois de se verificar 439 ΡΕ1340757 que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno: acetonitrilo (3:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar 1- (4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidro-xiazetidina (8,5 g, rendimento de 53%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ 7,46 (1H, s) , 4,88-4,78 (1H, m) , 4,42-4,32 (4H, m) , 4,02 (2H, ddd, J=10,3, 5,6, 1,5 Hz), 2,05 (1H, s lg) , 1,37 (3H, t, 7,3 Hz). (3) 1- (4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfonilo-xiazetidina A uma solução de 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (676 mg, 2,96 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 1(2)) em cloreto de metileno (20,5 ml) foram adicionados cloreto de metanossul-fonilo (0,28 ml, 3,63 mmol) e trietilamina (0,495 ml, 3,56 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado etanol à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minu- 440 ΡΕ1340757 tos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-etoxi-carbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (748 mg, rendimento de 82%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,52 (1H, s) , 5,50-5,30 (1H, m) i, 4,51 (2H , dd, J=9, 9, 6,7 Hz), 4,37 (2H, q, J=7,l Hz), 4, 32 (2H, dd, J=10, ,1, 3,7 Hz), 3,09 (3H, S) , 1,37 (3H, t, J=7,1 Hz) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidi-na A uma solução de 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (742 mg, 2,42 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 1(3)) em dimetilformamida (37 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,11 g, 9,72 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de 441 ΡΕ1340757 cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-etoxicar-bonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (494 mg, rendimento de 71%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,49 (1H, s), 4,58 (2H, t, J=8,3 Hz), 4,50-4,30 (3H, m, incluindo 2H, q, em 4,36, J=7,2 Hz), 4,03 (2H, dd, J=8,3, 5,7 Hz), 2,36 (3H, s), 1,37 (3H, t, J=7,2 Hz).
Espectro de massa (BAR+) : 287 [M+H] +
Exemplo de Referência 2 3-Acetiltio-l-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
COOPNB (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (8,5 g, 37,2 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 1(2)) em dimetilformamida (255 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (19,4 ml, 74,5 mmol) e imidazole (5,07 g, 74,5 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura num banho de 442 ΡΕ1340757 gelo durante 10 minutos, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado etanol (2,59 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexa-no:acetato de etilo (6:1 -> 2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (14,85 g, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,64-7,58 (4H, m) , 7,50- 7,36 (6H, m) , 7,43 (1H, s), 4,79-4,50 (1H, m) , 4,35 (2H, q J=7,3 Hz) , 4,13 (2H, dd, J= 9,0, 6,6 Hz) , 4,06 (2H. dd J= 9,0, 5,1 Hz), 1,36 (3H, t, J=7,l Hz), 1,06 (9H, s) . (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-hidroximetil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina
Uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (5,0 g, 10,7 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em tetra-hidrofurano anidro (100 ml) foi adicionada, gota a 443 ΡΕ1340757 gota, a uma solução de alumino-hidreto de lítio (1,22 g, 32,1 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (250 ml) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1,5 horas sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado, gradualmente, deca-hidrato de sulfato de magnésio à mistura de reacção num banho de gelo. Depois de terminar a formação de espuma, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Foi adicionado, gradualmente, acetato de etilo à mistura de reacção. A mistura resultante foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (3:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (3,88 g, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 66-7,58 (4H, m) , 7,50- 7,38 (6H, m) , 6,40 (1H, s) , 4,78-4,70 (1H, m) , 4,53 (2H, s), 4,10 (2H, dd, J=9,2, 6,6 Hz), 4,01 (2H, ddd, J=9,2, 5,1, 1,3 Hz), 2,24 (1H, s lg), 1,06 (9H, s). (3) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-formil-l,3-tiazol-2-il)- azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (3,88 g, 9,15 mmol) 444 ΡΕ1340757 (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(2)) em cloreto de metileno anidro (194 ml) foram adicionados dióxido de manganês activado (19,4 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1 -> 1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-formil-l,3-tiazol-2-il) -azetidina (3,54 g, rendimento de 92%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 9,69 (1H, s) , 7, 64-7,59- (4H, m) , 7,50-7,36 (7H, m) , 4,80-4,72 (1H, m) , 4,16 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,08 (2H, ddd, J=9,5, 5,1, 1,5 Hz), 1,06 (9H, s) . (4) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-formil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (3,5 g, 8,28 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (3)) em cloreto de metileno anidro (21 ml) foram adicionados t-butanol (105 ml) e uma solução de 2-metil-2-buteno 2M em tetra-hidrofurano (41,4 ml), seguido de adição, gota a gota, de uma solução de clorito de sódio (1,88 g, 16,6 mmol) e di-hidrogenofosfato de sódio (1,99 g, 16,6 mmol) em água (21 ml) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 445 ΡΕ1340757 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, à mistura de reacção foi adicionado ácido clorídrico 1M até um pH de desde 2 até 3. A mistura resultante foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -> metanol a 5% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (2,34 g, rendimento de 67%), sob a forma de um xarope castanho. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 62-7,56 (4H, m) , 7,50 (1H, s), 7,49-7,36 (6H, m) , 4,81-4,72 (1H, m) , 4,16-4,08 (2H, m) , 4,04 (2H, dd, J=9,5, 5,1 Hz), 2,00 (1H, s lg) , 1,07 (9H, s) . (5) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (224,8 mg, 0,51 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em cloreto de metileno anidro (11,2 ml) foram adicionados cloreto de oxalilo (0,067 ml, 0,76 mmol) e uma quantidade catalítica de dimetilformamida (0,022 ml) num banho de gelo. A mistura foi agitada durante 2 horas e, em seguida, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi seco in vacuo, de modo a originar um produto. A uma solução do 446 ΡΕ1340757 produto em diclorometano anidro (11,2 ml) foram adicionados álcool p-nitrobenzilico (157 mg, 1,0 mmol) e trietilamina (0,14 ml, 1,0 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-p-nitrobenzi-loxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (93 mg, rendimento de 32%), sob a forma de um xarope amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 64-7,56 (4H, m) , 7,50 (1H, s) , 7,48-7,36 (6H, m) , 5,42 (2H, s), 4,79-4,72 (1H, m) , 4,16 (2H, dd, J=8,8, 6,8 Hz), 4,07 (2H, dd, J=8,8, 4,8 Hz), 1,06 (9H, s) . (6) 1- (4-p-Nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidro- xiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (93 mg, 0,16 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(5)) em tetra-hidrofurano anidro (4,7 ml) foram adicionados ácido acético (0,028 ml, 0,49 mmol) e uma solução de fluoreto de tetrabutilamónio 1M em tetra-hidro- 447 ΡΕ1340757 furano (0,48 ml, 0,48 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 1- (4-p-nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il) -3-hidroxiazetidina (42,4 mg, rendimento de 81%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,59 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (1H, s) , 5,40 (2H, s) , 4,90-4,78 (1H, m) , 4,39-(2H, dd, J=9,7, 7,2 Hz), 4,03 (2H, dd, J= 9,7, 5,1 Hz), 2,28 (1H, d, J=6,2 Hz). (7) 1-(4-p-Nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-meta- nossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (648 mg, 1,93 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(6)) em cloreto de metileno (20 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,31 ml, 3,95 mmol) e trietilamina (0,55 ml, 3,95 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de 448 ΡΕ1340757 se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi recris-talizado a partir de uma mistura de n-hexano e acetato de etilo de modo a proporcionar 1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil- 1.3- tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (789 mg, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,59 (1H, s), 7,59 (2H, d, J=8,7 Hz), 5, 50-5, 40 (3H, m incluindo 1H, s em 5,44), 4,52 (2H, dd, J=10,3, 6,6 Hz), 4,32 (2H, dd, J=10,3, 4,1 Hz), 3,10 (3H, s) . (8) 3-Acetiltio-l-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l, 3-tiazol-2- il)azetidina A uma solução de 1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil- 1.3- tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (776 mg, 1,88 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (7) ) em dimetilformamida (35 ml) foi adicionado tio-acetato de potássio (860 mg, 7,53 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de 449 ΡΕ1340757 magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-azetidina (73,8 mg, rendimento de 11%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8, 6 Hz), 7,59 (2H, d, J=8, 6 Hz), 7,55 (1H, s) , 5,43 (2H, s) , 4,59 (2H, t, J=8,5 Hz), 4,50-4,40 (1H, m), 4,04 (2H, dd, J=8,5, 5,7 Hz) , 2,36 (3H, s) .
Exemplo de Referência 3 3-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (5,85 g, 12,5 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (290 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de amónio 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (56,4 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada num banho de água (40°C) durante 17 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, 450 ΡΕ1340757 solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (50 ml) foram adicionados à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (3:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carba-moil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (4,97 g, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 66-7,58 (4H, m) , 7,50-7,38 (7H, m) , 6,99 (1H, s lg) , 5,48 (1H, s lg) , 4,80-4,72 (1H, m) , 4,10 (2H, dd, J=8,8, 6,6 Hz), 4,01 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 1,07 (9H, s). (2) 1- (4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (6,7 g, 15,3 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 3(1)) em tetra-hidrofurano anidro (200 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (18,4 ml) num banho de gelo. A mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a 451 ΡΕ1340757 reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► metanol a 10% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,78 g, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,43 (1H, s) , 7,05 (1H, s lg) , 5,47 (1H, s lg) , 4, 90-4,80 (1H, m) , 4,35 (2H, dd, J=9, 5, 6,6 Hz), 3,97 (2H, dd, J=9,5, 4,4 Hz), 2,31 (1H, d, J=9,6 Hz). (3) 1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxi- azetidina A uma solução de 1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (1,0 g, 5,02 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 3(2)) numa mistura de cloreto de metileno (30 ml) e piridina (5 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,967 ml, 12,5 mmol) e trietilamina (1,75 ml, 12,5 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol (0,405 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de 452 ΡΕ1340757 sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado éter isopropílico, e a mistura foi filtrada de modo a proporcionar 1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,30 g, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,50 (1H, s) , 6,99 (1H, s 1—1 5. 5,60-5,40 (2H, m) , 4,46 (2H, ddd, J=9,5, 6, 6 4,28 (2H, ddd, J=9,5, 4,4, 1, 5 Hz), 3,11 (1H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (3,04 g, 11,0 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 3(3)) em dimetilformamida (152 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (7,5 g, 65,8 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 10 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► metanol a 4% em acetato de etilo como eluente de 453 ΡΕ1340757 modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina (1,97 g, rendimento de 70%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,46 (1H, s) , 7,00 (1H, s lg) , 5,55 (1H, s lg) , 4,53 (2H, t, J=8,l Hz), 4,50-4,40 (1H, m) , 3,99 (2H, dd, J=8,l, 5,1 Hz), 2,37 (3H, s) .
Exemplo de Referência 4 3-Acetiltio-l-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)-azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (7,73 g, 16,6 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (370 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de amónio 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (75 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada num banho de água (50°C) durante 17 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (50 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada 454 ΡΕ1340757 sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina (6,98 g, rendimento de 76%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ 7,64 (4H, m) , 7,50-7,37 (6H, m) , 7,20 (1H, s), 4,80-4,74 (1H, m) , 4,13 (2H, dd, J=8,8, 6,8 Hz), 4,04 (2H, dd, J=8,8, 4,9 Hz), 1,07 (9H, s). IV (KBr) : 2230, 1535, 1465, 1310, 1114 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 420 [M+H] + (2) 1-(4-Ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,36 g, 5,62 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 4(1)) em tetra-hidrofurano anidro (115 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (6,7 ml, 6,7 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxi- 455 ΡΕ1340757 azetidina (0,78 g, rendimento de 77%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,26 (1H, s) , 4,92-4,86 (1H, m) , 4,37 (2H, dd, J=9,8, 6,8 Hz), 4,02 (2H, dd, J=9,8, 4,9 Hz), 2,34 (1H, d, J=5,9 Hz). (3) 1- (4-Ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazeti- dina A uma solução de 1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (0,78 g, 4,3 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 4(2)) em cloreto de metileno (40 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (1,0 ml, 12,9 mmol) e trietilamina (1,8 ml, 12,9 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 40 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol à mistura de reacção num banho de gelo e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,12 g, rendi- 456 ΡΕ1340757 mento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,31 (1H, s) , 5,50-5,40 (1H, m) , 4,50 (2H, dd, J=9, 9, 6,6 Hz), 4,31 (2H, dd, J=9, 9, 4,4 Hz), 3,11 (3H, s). (4) 3-Acetiltio-l-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,12 g, 4,32 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 4 (3)) em dimetil-formamida (56 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (3,89 g, 27,0 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-ciano-l, 3-tiazol-2-il)azetidina (0,767 g, rendimento de 75%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 7,28 (1H, s), 4,57 (2H, t, J=8,3 Hz), 4,50-4,40 (1H, m), 4,03 (2H, dd, J=8,3, 5,5 Hz), 2,39 (3H, s) . 457 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 5 3-Acetiltio-l-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
AcS
CONHMe (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N-metilcarbamoil-l,3- tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,07 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (25 ml) foi adicionada uma solução de hidrocloreto de metilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (3,21 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (25 ml) e acetato de etilo (50 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi extraida com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-metilcarba- 458 ΡΕ1340757 moil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (479 mg, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 7, 65-7,59 (4H, m) , 7,50- 7,34 (7H, m) , 7,14 (1H, s lg) , 4, 80-4,70 (1H, m) , 4,09 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,00 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 2,95 (3H, d, J=5,1 Hz), 1,06 (9H, s). (2) 1-(4-N-Metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazeti- dina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (4,74 g, 10,5 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 5(1)) em tetra-hidrofurano anidro (240 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (12,6 ml, 12,6 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,10 g, rendimento de 96%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 7,34 (2H, s) , 7,20 (1H, s ig), 4,85-4,75 (1H, m), 4,31 (2H , dd, II 6,4 Hz) (2H, dd, J=9, 7, 5,5 Hz ) , 3, 10 (1H, s lg) , 2,96 ( J=5,1 Hz).
Espectro de massa: 213 [M+] 459 ΡΕ1340757 (3) 1-(4-N-Metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfo- niloxiazetidina A uma solução de 1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tia-zol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,15 g, 10,1 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 5(2)) em cloreto de metileno (45 ml) foram adicionados cloreto de meta-nossulfonilo (3,12 ml, 40,3 mmol) e trietilamina (7,04 ml, 50,5 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol à mistura de reacção num banho de gelo e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il) -3-metanossulfoniloxiazetidina (2,95 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido que forma uma espuma amarelo-pálida . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,44 (1H, s) , 7,18 (1H, s lg) , 5, 50-5, 39 (1H, m) , 4,45 (2H, dd, J=9,7, 6,6 Hz), 4,26 460 ΡΕ1340757 (2Η, dd, J= 9,7, 4,3 Hz), 3,11 (3H, s) , 2,97 (3H, d, J=5,l
Hz) .
Espectro de massa (BAR+) : 292 [M+H] + (4) 3-Acetiltio-l-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidina A uma solução de 1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tia-zol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (3,0 g, 10,3 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 5(3)) em dimetilformamida (150 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (7,07 g, 61,9 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:4 -► 1:10) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (2,41 g, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,44 (1H, s), 7,18 (1H, s lg) , 4,53 (2H, t, J=8,0 Hz), 4,50-4,40 (1H, m) , 4,50-3,95 (2H, m) , 2,95 (3H, d, J=6, 0 Hz), 2,38 (3H, s) .
Espectro de massa (BAR+) : 272 [M+H] + 461 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 6 3-Acetiltio-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
AcS
CONMe2 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,07 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (25 ml) foi adicionada uma solução de hidrocloreto de dimetilamina 0,67M-trimetilalumínio em benzeno (3,21 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (50 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica 462 ΡΕ1340757 utilizando n-hexano: acetato de etilo (3:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t- butildifenilsililoxi-1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,70-7, 60 (4H, m) , 7,52- 7,40 (6H, m) , 7,00 (1H, s), 4,79-4,70 (1H, m) , 4,11 (2H, dd, J=9, 5 , 7,5 Hz), 4,02 (2H, dd, J=9,5, 5, 0 Hz) , 3,19 (3H, s) , 3, 05 (3H, s), 1, .06 (9H, s) ) . (2) 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxi- azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (5,13 g, 10,7 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 6(1)) em tetra-hidrofurano anidro (250 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (12,0 ml, 12,0 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,42 g, rendimento de 100%), sob a forma de um xarope transparente. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,03 (1H, s), 4,90-4,70 (1H, m) , 4,32 (2H, t, J=8,2 Hz), 3,95 (2H, dd, J=8,2, 4,5 463 ΡΕ1340757
Hz), 3,20 (3H, s lg), 3,05 (3H, s lg), 2,85 (1H, s lg). Espectro de massa: 227 [M+] (3) 1-(4-N,N-Dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanos- sulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,56 g, 10,7 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 6(2)) em cloreto de metileno (50 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (2,4 ml, 31,0 mmol) e trietilamina (7,4 ml, 53,1 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol à mistura de reacção num banho de gelo e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilormetanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1 , 3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (3,28 g, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo castanho-pálido. 464 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,13 (1H, s) , 5,50-5,38 (1H, m) , 4,46 (2H, dd, J=9,7, 6,6 Hz), 4,26 (2H, dd, J=9,7, 4,3 Hz), 3,21 (3H, s lg), 3,10 (3H, s), 3,07 (3H, s lg). Espectro de massa (BAR+) : 306 [M+H] + (4) 3-Acetiltio-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-azetidina A uma solução de 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (3,40 g, 11,1 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 6(3)) em dimetilformamida (170 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (7,62 g, 66,7 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo: n-hexano (4:1 -► 5:1 -► 7:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tia-zol-2-il)azetidina (2,71 g, rendimento de 85%), sob a forma de um xarope castanho. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,09 (1H, s) , 4,53 (2H, dd, J=9, 0, 7,9 Hz), 4,50-4,40 (1H, m) , 3,99 (2H, dd, J=9,0, 5,5 Hz), 3,20 (3H, s lg) , 3,06 (3H, s lg) , 2,36 (3H, s) . 465 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 7 3-Acetiltio-l-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
CONHEt (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tia-zol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,0 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de hidrocloreto de etilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (6,42 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de 466 ΡΕ1340757 etilo (5:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (997 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 66-7,58 (4H, m) , 7,50- 7,37 (6H, m) , 7,35 (1H, s) , 7,14 (1H, s lg) , 4,80-4,76 (1H, m) , 4,16-4,06 (2H, m) , 4,01 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 3,43 (2H, dq, J=7,3, 5,6 Hz), 1,22 (3H, t, J=7,3 Hz), 1,07 (9H, s) . (2) 1-(4-N-Etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazeti- dina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-etilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina (990 mg, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 7(1)) em tetra-hidrofurano anidro (30 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,56 ml, 2,56 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 1,3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado acetato de etilo a isso e a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:2) ->· acetato de etilo ->· metanol a 5% em acetato de etilo como eluente de 467 ΡΕ1340757 modo a proporcionar 1-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (461 mg, rendimento de 95%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,36 (1H, s) , 7,20 (1H, s lg) , 4, 90-4,78 (1H, m) , 4,32 (2H, dd, J=9,0, 7,3 Hz), 3,96 (2H, dd, J= 9, 0, 4,3 Hz), 3,44 (2H, dq, J=7,2, 5,4 Hz), 2,61 (1H, d, J=6,6 Hz), 1,22 (3H, t, J=7,2 Hz). (3) 1-(4-N-Etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfo-niloxiazetidina A uma solução de 1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tia-zol-2-il)-3-hidroxiazetidina (460 mg, 2,02 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 7 (2)) em cloreto de metileno (23 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (0,469 ml, 6,06 mmol) e trietilamina (0,849 ml, 6,06 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos e agitada durante 1,3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:3) -* acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-meta- 468 ΡΕ1340757 nossulfoniloxiazetidina (598 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,44 (1H, s) , 7,13 (1H, s ig), 5,48-5,38 (1H, m) , 4,46 (2H, ddd, J=9,5, 6,6, 1,5 Hz), 4,27 (2H, ddd, J=9 ,5, 4,4, 1,5 Hz), 3,45 (2H, dq, J=7,3, 5, 0 Hz), 3,10 (3H, s) , 1,24 (3H, t, J=7,3 Hz). (4) 3-Acetiltio-l-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il) azeti-dina A uma solução de 1-(4-N-etilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfonilazetidina (590 mg, 1,93 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 7 (3)) em dimetilformamida (30 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,32 g, 11,6 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:3 -> 1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-N-etilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina (453 mg, rendimento de 82%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 469 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,40 (1H, s), 7,14 (1H, s ig), , 4,53 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,48-4,38 (1H, m) , 3, 98 (2H dd, J=8,8, 5,6 Hz) , 3,44 (2H, dq, J=7,3, 5,9 Hz) , 2,37 (3H s) , 1,23 (3H, t, J= =7,3 Hz) .
Exemplo de Referência 8 3-Acetiltio-l-(4-N-isopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2- il)azetidina
AcS (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N-isopropilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,0 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de hidrocloreto de isopropilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (6,42 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato 470 ΡΕ1340757 de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-isopropilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,01 g, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 66-7,58 (4H, m) , 7,50-7,36 (6H, m) , 7,34 (1H, s) , 6,98 (1H, d lg, J=8,l Hz), 4, 80-4,70 (1H, m) , 4,26-4,16 (1H, m) , 4,11 (2H, dd, J=8,8, 7,3 Hz), 4,02 (2H, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 1,24 (6H, d, J=6, 6
Hz) , 1,07 (9H, s) . (2) 1-(4-N-Isopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxi- azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,01 g, 2,11 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 8(1)) em tetra-hidrofurano anidro (30 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio l,0M-tetra-hidrofurano (2,53 ml) num banho de gelo. A mistura foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, 471 ΡΕ1340757 seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:3) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (681 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,36 (1H, s) , 7,00 (1H, d lg, J=8,0 Hz), 4, 90-4,78 (1H, m) , 4,32 (2H, dd, J=9, 9, 8,7 Hz), 3,97 (2H, ddd, J=9, 9, 7,3, 1,7 Hz), 2,55 (1H, d, J=8,0 Hz), 1,25 (6H, d, J=6,6 Hz). (3) 1-(4-N-Isopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanos-sulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-N-isopropilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (490 mg, 2,03 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 8(2)) em cloreto de metileno (15 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (0,471 ml, 6,09 mmol) e trietilamina (0,854 ml, 6,09 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos e agitada durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia 472 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:3) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-isopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (681 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,44 (1H, s) , 7,00 (1H, d lg, J=8,0 Hz), 5, 48-5, 38 (1H, m) , 4,46 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,32-4,18 (3H, m incluindo 2H, dd, em 4,28, J=9,5, 5,1 Hz), 3,11 (3H, s), 1,25 (6H, d, J=6,6 Hz). (4) 3-Acetiltio-l-(4-N-isopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-N-isopropilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (680 mg, 2,03 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 8(3)) em dimetilformamida (35 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,39 g, 12,2 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-N-isopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azeti- 473 ΡΕ1340757 dina (461 mg, rendimento de 81%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,40 (1H, s) , 6,98 (1H, s lg) , 4,54 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,50-4,40 (1H, m) , 4,26-4,16 (1H, m) , 3,99 (2H, dd, J=8,8, 5,9 Hz), 2,37 (3H, s) , 1,24 (6H, d, J=5,9 Hz).
Exemplo de Referência 9 3-Acetiltio-l-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
AcS (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,0 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de ciclopen-tilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (6,42 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente 474 ΡΕ1340757 durante 30 minutos. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica de modo a proporcionar 3-t- butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,07 g, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 66-7, 60 (4H, m) , 7,50- 7,38 (6H, m) , 7,34 (1H, s) , 7,08 (1H, d lg, J=8,l Hz), 4, 80-4,70 (1H, m) , 4,38-4,26 (1H, m) , 4,11 (2H, dd, J=8,8, 5,6 Hz), 4,02 (2H, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 2,12-2,20 (2H, m) , 1, 80-1,40 (6H, m), 1,07 (9H, s) . (2) 1-(4-N-Ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxi- azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclopentilcarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,07 g, 2,12 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 9(1)) em tetra-hidrofurano anidro (32 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,54 ml, 2,54 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 40 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a 475 ΡΕ1340757 mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica de modo a proporcionar 1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il) -3-hidroxiazetidina (528 mg, rendimento de 93%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,36 (1H, s) , 7,11 (1H, d, J=4, , 4 Hz) , 1 00 00 78 (1H, m) , 4,40-4,25 (3H, m) , 3,96 (2H dd, J= = 9,5, 4,4 Hz) , 2,54 (1H, d, J=6,0 Hz), 2,12-2,00 (2H m) , 1, 80-1, .44 (6H, m) . (3) 1- (4-N-Ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanos-sulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (520 mg, 1,95 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 9(2)) em cloreto de metileno (16 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (0,452 ml, 5,84 mmol) e trietilamina (0,818 ml, 5,84 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos e agitada de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi 476 ΡΕ1340757 lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1- (4-N-ciclo-pentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiaze-tidina (691 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,43 (1H, s) , 7,07 (1H, d lg, J=8,1 Hz), 5, 48-5, 38 (1H, m) , 4,46 (2H, ddd, J=9,9, 6,6, 1,5 Hz), 4,40-4,20 (3H, m incluindo 2H, ddd, J=9,9, 4,9, 1,5 Hz), 3,11 (3H, s) , 2,15-1,98 (2H, m) , 1,80-1,40 (6H, m) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (670 mg, 1,95 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 9(3)) em dimetilformamida (34 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,34 g, 11,7 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e 477 ΡΕ1340757 solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol- 2- il)azetidina (550 mg, rendimento de 87%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,40 (1H, s) , 7,10 (1H, d, J=8, 0 Hz), 4,53 (2H, dd, J=9,2, 6,9 Hz), 4,48-4,38 (1H, m) , 4,38-4,26 (1H, m) , 3,99 (2H, dd, J=9,2, 4,6 Hz), 2,36 (3H, s), 2,12-2,06 (2H, m), 1, 80-1,40 (6H, m) .
Exemplo de Referência 10 3- Acetiltio-l-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,0 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de ciclo-hexilamina 0, 67M-trimetilaluminio em benzeno (6,42 ml) à 478 ΡΕ1340757 temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e, em seguida, a mistura foi aquecida sob refluxo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura de reacção foi, em seguida, agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Foi adicionado, gradualmente, acetato de etilo à mistura de reacção, e a mistura resultante foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (5:1 -* 1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclo-hexil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,09 g, rendimento de 99%) , sob a forma de um sóli do castanho- pál .ido. 1H-RMN (40 0 MHz, CDC13) : : δ (ppm) 7, 66-7 , 58 i (4H , m) , 7,50- 7,38 (6H, m) , 7, 34 (1H , s) , 7,04 (1H, d ig, J=8, 8 Hz) , 4,80-4 ,70 (1H, m) , 4, , 11 (2H, dd, J= 8,8, 6, 6 Hz) , 4,02 (2H, dd, J= = 8,8, 5, 1 H: z) , 3,98-3, 80 (1H, m) , 2, 02-1, 94 (2H , m) , 1,80-1 ,70 (2H, m) , 1, 70- 1,10 (6H, m) , 1, 07 (9H, s) . (2) 1- (4-N -Ciclo- hexi -lcarbamoil-1,3- tiaz ol- 2-il) -3-hidroxi- azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N- 479 ΡΕ1340757 ciclo-hexilcarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,09 g, 2,10 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 10(1)) em tetra-hidrofurano anidro (55 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,52 ml) num banho de gelo e, em seguida, a mistura foi agitada no banho de gelo durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) -* acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (570 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,36 (1H, s) , 7,07 (1H, d, J=8, 1 Hz), 4, 99-4,78 (1H, m) , 4,33 (2H, dd, J=9,0, 7,3 Hz), 4, 00-3, 80 (3H, m incluindo 2H, dd, J=9,0, 4,4 Hz), 2,56 (1H, d, J=8,3 Hz), 2,02-1, 92 (2H, m) , 1, 80-1,70 (2H, m) , 1,70-1,10 (6H, m). (3) 1-(4-N-Ciclo-hexilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il) -3-metanos-sulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (570 mg, 2,03 mmol) (obtida 480 ΡΕ1340757 tal como descrito no Exemplo de Referência 10(2)) em cloreto de metileno (17 ml) foram adicionados cloreto de meta-nossulfonilo (0,471 ml, 6,08 mmol) e trietilamina (0,852 ml, 6,08 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos, e, em seguida, agitada à temperatura ambiente durante 17 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao residuo obtido foi adicionado éter isopropilico, e a mistura resultante foi filtrada de modo a proporcionar 1-(4-N- ciclo-hexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il) -3- metanossulfoniloxiazetidina (739 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,43 (1H, s) , 7,02 (1H, d lg, J=8,1 Hz), 5, 48-5, 39 (1H, m) , 4,46 (2H, ddd, J=9,5, 6,6, 1,5 Hz), 4,27 (2H, dd, J=9,5, 5,1 Hz), 3, 98-3, 84 (1H, m) , 3,11 (3H, s), 2,01-1,94 (2H, m) , 1,80-1,70 (2H, m) , 1,70-1,10 (6H, m). (4) 3-Acetiltio-l-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (730 mg, 2,03 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 481 ΡΕ1340757 10 (3)) em dimetilformamida (37 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (1,39 g, 12,2 mmol) à temperatura ambiente, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 15 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -> 1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-N-ciclo-hexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (372 mg, rendimento de 54%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,40 (1H, s) , 7,06 (1H, d lg, J=8,0 Hz), 4,53 (1H, dd, J=9,5, 8,2 Hz), 4,48-4,40 (1H, m) , 3,99 (2H, dd, J=9,5, 3,7 Hz), 3, 95-3, 85 (1H, m) , 2,37 (3H, s), 2,01-1,96 (2H, m) , 1,80-1,10 (8H, m) .
Exemplo de Referência 11 3-Acetiltio-l-(4-morfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina /\
AcS·
CO-N O \_/ 482 ΡΕ1340757 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-morfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,0 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de morfolina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (6,42 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura de reacção foi aquecida sob refluxo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t- butildifenil-sililoxi-1-(4-morfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina (1,05 g, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7, 64-7,58 (4H, m) , 7,50- 7,36 (6H, m) , 7,12 (1H, s) , 4, 80-4,70 (1H, m) , 4,10 (2H, 483 ΡΕ1340757 dd, J=9, 6, 8,0 Hz), 4,00 (2H, dd, J=9, 6, 4,8 Hz), 3,96-3,60 (8H, m), 1,06 (9H, s). (2) 1-(4-N-Morfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiaze-tidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,05 g, 2,07 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 11(1)) em tetra-hidrofurano anidro (32 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,48 ml, 2,48 mmol) e a mistura de reacção foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► metanol a 10% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-morfoli-nocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (542 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,15 (1H, s) , 4,90 (1H, m) , 4,32 (2H, dd, J=8,8, 7,3 Hz), 3,95 (2H, dd, J=8,8, 4,4
Hz), 4,00-3,60 (8H, m), 2,45 (1H, s lg). (3) 1-(4-N-Morfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossul-foniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-morfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (540 mg, 2,01 mmol) (obtida 484 ΡΕ1340757 tal como descrito no Exemplo de Referência 11(2)) em cloreto de metileno (27 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,467 ml, 6,03 mmol) e trietilamina (0,845 ml, 6,03 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos, e agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando metanol a 5% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-morfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3- metanossulfoniloxiazetidina (688 mg, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,23 (1H, s) , 5,45-5,40 (1H, m) , 4,45 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,26 (2H, ddd, J=9,5, 4,4, 1,5 Hz), 4,00-3, 60 (8H, m) , 3,10 (3H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-N-morfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il) -azetidina A uma solução de 1-(4-morfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (680 mg, 1,96 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 11 (3)) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (671 mg, 5,87 mmol) à temperatura ambiente, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada num 485 ΡΕ1340757 banho de óleo (80°C) durante 18 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:3) -» acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (411 mg, rendimento de 64%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,20 (1H, s) , 4,52 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,48-4,38 (1H, m) , 3,98 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 4, 00-3, 60 (8H, m) , 2,36 (3H, s) .
Exemplo de Referência 12 3-Acetiltio-l-(4-t-butildimetilsililoximetil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina
(1) 1-(4-Hidroximetil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (548,5 mg, 1,29 486 ΡΕ1340757 irunol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(2)) em tetra-hidrofurano anidro (28 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,56 ml, 1,56 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi, em seguida, agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-hidroximetil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (230 mg, rendimento de 96%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 6,54 (1H, s), 4,76-4,68 (1H, m) , 4,46 (2H, s) , 4,32-4,24 (2H, m) , 3, 88-3, 82 (2H, m) . (2) 1-(4-t-Butildimetilsililoximetil-l,3-tiazol-2-il)-3- hidroxiazetidina A uma solução de 1-(4-hidroximetil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (226,5 mg, 1,22 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 12(1)) em dimetilformamida (11,5 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (220 mg, 1,46 mmol) e imidazole (120 mg, 1,76 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi, em seguida, levada até à temperatura ambiente em 10 minutos, e agitada durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, metanol (2 ml) foi adicionado a isso num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção 487 ΡΕ1340757 foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar l-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (300,4 mg, rendimento de 82%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6,43 (1H, s), 4,86-4,78 (1H, m) , 4,66 (2H, s) , 4,30 (2H, dd, J=9,5, 7,0 Hz), 3,93 (2H, dd, J=9, 5, 4,4 Hz), 2,80 (1H, s lg) , 0,94 (9H, s) , 0,10 (6H, s) . (3) 1-(4-t-Butildimetilsililoximetil-l,3-tiazol-2-il)-3- metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-t-butildimetilsililoxi-metil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (300,4 mg, 1,00 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 12(2)) em cloreto de metileno (15 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,2 ml, 2,49 mmol) e trietilamina (0,35 ml, 2,51 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi, em seguida, agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e ΡΕ1340757 solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexa-no:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-t-butildimetilsililoximetil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (326,5 mg, rendimento de 86%), sob a forma de um xarope amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6,50 (1H, s) , 5,44-5,38 (1H, m) , 4,43 (2H, dd, J=9, 9, 5,5 Hz), 4,23 (2H, dd, J=9, 9, 4,1 Hz), 3,10 (3H, s), 0,90 (9H, s), 0,10 (6H, s). (4) 3-Acetiltio-l-(4-t-butildimetilsililoximetil-l,3-tia-zol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-t-butildimetilsililoxi-metil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (326,5 mg, 0,86 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 12(3)) em dimetilformamida (16 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (780 mg, 5,41 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi, em seguida, agitada num banho de óleo (80°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, 489 ΡΕ1340757 filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (4:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-t-butildi-metilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (191 mg, rendimento de 62%), sob a forma de um xarope castanho. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6, 45 (1H, s), 4,66 (2H s), 4,50 (2H, t, J=8,6 Hz) , 3, 95 (2H, dd, J=8, 6, 5,1 Hz) 2,35 (3H, s), 0,93 (9H, s), 0,10 (6H, s) .
Exemplo de Referência 13 4-Acetiltio-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperidina /-v N^^-COOEt
AcS -ckt (1) Éster de etilo de ácido (4-hidroxipiperidino-l-carbo-tioil)carbâmico A uma solução de 3-hidroxipiperidina (1,0 g, 9,89 mmol) em tetra-hidrofurano (50 ml) foi adicionado isotio-cianato de etoxicarbonilo (1,4 ml, 11,9 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos e, em seguida, agitada de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo 490 ΡΕ1340757 obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar éster de etilo de ácido (4-hidroxipiperidino-l-carbotioil)carbâmico (2,3 g, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 4,26 (1H, s lg) , 4,19 (2H, q, J=8,3 Hz) , 4,06 (1H, m) , 4,0-3,4 (3H, s encoberto), 2,10 (2H, m), 1,80- -1, 60 (4H, m) , 1,29 (3H, t, J=8,3 Hz). (2) 1-(4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina A uma solução de éster de etilo de ácido (4-hidroxipiperidino-l-carbotioil)carbâmico (2,3 g, 9,89 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 13(1)) em etanol (23 ml) e água destilada (23 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (1,98 g, 49,5 mmol), e a mistura foi, em seguida, aquecida sob refluxo durante 15 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente e foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em dioxano (12,4 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, foram adicionados a isso 2-bromopiruvato de etilo (2,5 ml, 19,8 mmol) e trietilamina (2,8 ml, 20,1 mmol), e, em seguida, a mistura de reacção foi aquecida sob refluxo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de 491 ΡΕ1340757 magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxi-piperidina (0,99 g, rendimento de 39%), sob a forma de um xarope amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,46 (1H, s) , 4,35 (2H, q, J=7, 8 Hz), 3,96 (1H, m) , 3,88 (2H, dt, J=13,5, 3,0 Hz), 3,31 (2H, ddd, J=13,5, 9,0, 3,0 Hz), 2,04-1, 96 (2H, m) , 1,74-1,56 (3H, m), 1,37 (3H, t, J=7,8 Hz).
Espectro de massa: 256 [M+] (3) 1- (4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-metanossulfonilo-xipiperidina A uma solução de 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (128 mg, 0,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 13(2)) em cloreto de metileno (6,5 ml) foi adicionado cloreto de metanossul-fonilo (0,043 ml, 0,56 mmol) e trietilamina (0,084 ml, 0,60 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos e, em seguida, agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso etanol (1 ml) num banho de gelo e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi 492 ΡΕ1340757 lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo obtido foi recris-talizado a partir de uma solução de acetato de etilo:n-hexano (5:1) de modo a proporcionar 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-metanossulfoniloxipiperidina (81,0 mg, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,49 (1H, s) , 5,01-4,90 \—1 m) , 4,45 (2H, h> C-| II oo o Hz), 3,80 (2H, ddd, J=12, 6, 8,4, 4,2 Hz) , 3,52 (2H, ddd, J=12,6, 8,4, 4,2 Hz), 3,05 (3H, s) , 2,20-1,90 (4H, m), 1, 36 (3H, t, J=8,0 Hz).
Espectro de massa: 334 [M+] (4) 4-Acetiltio-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperi-dina A uma solução de 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-metanossulfoniloxipiperidina (76 mg, 0,23 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 13(3)) em dimetilformamida (4,0 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (145 mg, 1,3 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi, em seguida, agitada num banho de óleo (80°C) durante 8 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi purificado através 493 ΡΕ1340757 de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 4-acetiltio-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperidina (67 mg, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,45 (1H, s) , 4,34 (2H, q, J=7, 1 Hz), 3,88 (2H, dt, J=13,4, 3,2 Hz), 3, 80-3, 60 (1H, m) , 3,33 (ddd, J=13, 6, 8,5, 3,2 Hz), 2,33 (3H, s) , 2,15- 1,95 (2H, m) , 1,85-1, 65 (2H, m) , 1,37 (3H, t, J=7,l Hz). Espectro de massa: 314 [M+]
Exemplo de Referência 14 4-Acetiltio-l-(4-p-nitrobenzilcarbonil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina
AcS
COOPNB (1) 4-t-Butildimetilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1,00 g, 3,90 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 13(2)) em dimetil-formamida (50 ml) foram adicionados cloreto de t-butildi-metilsililo (1,2 g, 7,96 mmol) e imidazole (0,6 g, 8,8 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos e, em seguida, agitada durante 18 horas. Depois de se verificar que a 494 ΡΕ1340757 reacção estava completa, foi adicionado a isso etanol num banho de gelo, e a mistura de reacção foi, em seguida, agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (4:1) como eluente de modo a proporcionar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (1,38 g, rendimento de 95%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,42 (1H, s), 4,35 (2H, q, <q II <1 1 Hz) , 4, 03-3,89 (1H, m), 3,70 (2H, ddd, J=12,4, LO 00 3,7 Hz) , 3,46 (2H, ddd, 12,4, 8,5, 3,7 Hz), 1,90-1,77 (2H, m) , 1,71- 1,59 (2H, m) , 1,37 (3H, t, J=7,1 Hz), 0,90 (9H, s) , 0,08 (6H, s) .
Espectro de massa: 370 [M+] (2) 4-t-Butildimetilsililoxi-l-(4-carboxil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1,00 g, 2,7 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 14(1)) em etanol (20 ml) foi adicionado solução aquosa IN de hidróxido de sódio (5,4 ml, 5,4 mmol) num banho de gelo, e 495 ΡΕ1340757 a mistura de reacção foi, em seguida, agitada à temperatura ambiente durante 3,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada a isso solução aquosa 2N de ácido clorídrico (1,8 ml) num banho de gelo. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo obtido foi recristalizado a partir de uma solução de metanol em acetato de etilo, de modo a originar um cristal branco (471 mg), sob a forma de um cristal primário. Subsequentemente, o residuo obtido por meio de concentração do líquido-mãe foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:2-propanol:água (10:4:1 -► 5:2:1) como eluente de modo a proporcionar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)piperidina (440 mg, quantidade total 911 mg, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13 + D20) : δ (ppm) 7,35 (1H, s) , 4, ΙΟ 3,85 (1H, m) , 3,75-3,50 (2H, m), 3,50-3,25 (2H, m) , Ι, 90- 1,70 (2H, m) . m) , 1,70-1,50 (2 H, m), 0,90 (9H, s) , 0,07 (6H,
Espectro de massa (BAR+) : 343 [M+H] (3) 4-t-Butildimetilsililoxi-l-(4-p-nitrobenziloxicarboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (902 mg, 2,63 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 14(2)) 496 ΡΕ1340757 em cloreto de metileno anidro (40 ml) foram adicionados hidroxibenzotriazole (710 mg, 5,3 mmol), hidrocloreto de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (WSC) (1,254 g, 6,6 mmol) e álcool p-nitrobenzilico (788 mg, 5,2 inmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, e a mistura foi, em seguida, agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina (916 mg, rendimento de 73%), sob a forma de um sólido amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,5 Hz), 7, 60 (2H, d, LO 00 II Hz) , 7 ,49 (1H , s) , 5, , 42 (2H, s), 4,05- 3, 95 (1H, m) , 3,70 (2H r ddd, J= 42,6, 8 ,6, 3/ 9 Hz), 3,48 (2H, ddd, J= 12,6, 6,2, 4, 2 Hz) , 1,92-1, 76 (2H, m) , 1,75- 1,50 (2H, m) , 0, 90 (9H, s) , 0,07 (6H, s) .
Espectro de massa (BAR+) : 478 [M+H] + (4) 1-(4-p-Nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidro- xipiperidina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (300 497 ΡΕ1340757 mg, 0,628 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 14(3) ) em tetra-hidrofurano anidro (15 ml) foram adicionados ácido acético (0,22 ml, 0,628 mmol) e uma solução de fluoreto de tetrabutilamónio 1M em tetra-hidrofurano (3,76 ml, 3,76 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi, em seguida, agitada à temperatura ambiente durante 21 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipi-peridina (123 mg, rendimento de 54%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13 + D20) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,0
Hz) , 7, 60 (2H, d, II co 0 N , 7,50 (1H, s) , 5, 42 (2H, s), CN O -3, 94 (1H, m), 3,89 (2H, dt, J=12,0, 4,0 Hz) , 3,33 (2H, ddd, J=12 ,0, 8,0, 4,0 Hz), 2,05-1,94 (2H, m) , 1,75-1,55 (2H, m) .
Espectro de massa: 363 [M+] (5) 4-Metanossulfoniloxi-1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 1- (4-p-nitrobenziloxicarbonil- 498 ΡΕ1340757 1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (0,75 g, 2,06 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 14(4)) em cloreto de metileno anidro (38 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,18 ml, 2,33 mmol) e trietilamina (0,35 ml, 2,51 mmol) num banho de gelo. A mistura foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos, e, em seguida, agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 4-metanossulfoniloxi-1-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (0,87 g, rendimento de 96%), sob a forma de um sólido incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,59 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,54 (1H, s) , 5,42 (2H, s) , 5,05- 4,95 (1H, m) , 3,79 (2H, ddd, J=12,2, 7,6, 4,0 Hz), 3,55 (2H, ddd, J=12,2, 7,2, 4,0 Hz), 3,07 (3H, s) , 2,18-2,06 (2H, m) , 2,00-1,80 (2H, m) .
Espectro de massa (BAR+) : 441 [M+H]+ (6) 4-Acetiltio-l-(4-p-nitrobenziloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 4-metanossulfoniloxi-1-(4-p- 499 ΡΕ1340757 nitrobenziloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1,2 g, 2,72 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 14(5)) em dimetilformamida (60 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (625 mg, 5,47 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 3,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 4-acetiltio-l-(4-p-nitroben-ziloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (769 mg, rendimento de 88%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,4 Hz), (2H, d, 00 II •d Hz) , 7,51 (1H, s), 5 ,42 (2H, s), 3,95- (2H, m) , 3,80 -3, 60 (1H, m) , 3,34 (2H, . ddd, J=13,1, 3,1 Hz) , , 2,34 (3H, s) , 2,25-1,95 (2H, m) , 1,85-1,65 (2H, m).
Espectro de massa (BAR+) : 422 [M+H]+
Exemplo de Referência 15 4-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidina
AcS
CONH 2 500 ΡΕ1340757 (1) 4-t-Butildimetilsililoxi-l-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (4,99 g, 14,6 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 14 (2)) em cloreto de metileno (150 ml) foi adicionado carbonildi-imidazole (2,80 g, 17,3 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto, e a mistura de reacção foi agitada durante 1,5 horas sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada solução aquosa de amoníaco a 28% a isso e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos.
Subsequentemente, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidina (2,90 g, rendimento de 59%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,39 (1H, s), 7,03 (1H, s lg) , 5,50 (1H, s lg) , 4, 05-3, 95 (1H, m) , 3,66 (2H, ddd, 501 ΡΕ1340757 J= 12,5, 8,6, 3,7 Hz), 3,43 (2H, ddd, J=12,5, 6,5, 4,2 Hz), 1, 92-1,75 (2H, m) , 1,75-1,55 (2H, m) , 0,90 (9H, s) , 0,08 (6H, s) .
Espectro de massa (BAR+) : 342 [M+H] + (2) 1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1,226 g, 3,59 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 15(1)) em tetra-hidrofurano anidro (30 ml) foram adicionados ácido acético (1,85 ml) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (32,3 ml, 32,3 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 24 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica de modo a proporcionar 1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (0,82 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 7,38 (1H, s) , 3,95-3,80 (1H, m), 3, 40-3,20 (2H, m) , 2,00-1,85 (2H, m) , 1,75-1,50 (2H, m) . Espectro de massa (BAR+) : 228 [M+H]+ (3) 1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-4-metanossulfoniloxipi-peridina A uma solução de 1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1,93 g, 8,49 mmol) (obtida tal como 502 ΡΕ1340757 descrito no Exemplo de Referência 15(2)) em cloreto de metileno (100 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (10,0 ml, 129 mmol) e trietilamina (18,0 ml, 129 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 24 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)-4-metanossulfoniloxipiperidina (1,59 g, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CD30D) : δ (ppm) 7,42 (1H, s) , 5,10-4,90 (1H, m) , 3,77 (2H, ddd, J=13,0, 7,4, 4,0 Hz), 3,53 (2H, ddd, J=13,0, 7,7, 4,0 Hz), 3,12 (3H, s), 2,18-2,07 (2H, m) , 2,00-1,89 (2H, m).
Espectro de massa: 305 [M+] (4) 4-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il) -4-metanossulfoniloxipiperidina (1,59 g, 5,21 mmol) (obtida 503 ΡΕ1340757 tal como descrito no Exemplo de Referência 15(3)) em dimetilformamida (80 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,19 g, 10,4 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:n-hexano (10:1) como eluente de modo a proporcionar 4-acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pi-peridina (1,01 g, rendimento de 68%), sob a forma de um sólido castanho. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,41 (1H, s), 7,00 (1H, s lg) , 5,55 (1H, s lg) , 3, 90-3, 78 (2H, m) , 3, 78-3, 64 (1H, m) , 3, 35-3,25 (2H, m) , 2,32 (3H, s) , 2,10-2,00 (2H, m) , 1,80-1, 65 (2H, m) .
Espectro de massa (BAR+) : 285 [M+H] +
Exemplo de Referência 16 4-Acetiltio-l-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina
AcS
CONHMe 504 ΡΕ1340757 (1) 4-t-Butildimetilsililoxi-l-(4-N-metilcarbamoil-l,3- tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (200 mg, 0,584 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 14 (2)) em dimetilformamida (6,0 ml) foi adicionado carbo- nildiimidazole (114 mg, 0,703 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto, e a mistura de reacção foi, em seguida, agitada num banho de óleo (50°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada solução aquosa de metilamina a 40% (0,23 ml) a isso e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos.
Subsequentemente, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cro-matografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (5:4) como eluente de modo a proporcionar 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (202,5 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,36 (1H, s) , 7,20 (1H, s ig), 4,10-3,98 \—1 m) , 3,68 (2H, ddd, J=12,6, 8,5, 3,7 Hz) , 3,45 (2H, ddd, J=12,6, 6,4, 4,2 Hz), 2,99 (3H, d, 505 ΡΕ1340757 J=4, 8 Hz), 1, 95-1,78 (2H, m) , 1,78-1, 60 (2H, m) , 0,93 (H, s) , 0,11 (6H, s) .
Espectro de massa (BAR+) : 356 [M+H] + (2) 1-(4-N-Metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperi- dina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1,69 g, 4,75 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 16(1)) em tetra-hidrofurano anidro (85 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (23,8 ml, 23,8 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada num banho de óleo (50°C) durante 14,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il) -4-hidroxipiperidina (1,48 g, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ 7,35 (1H, s) , 7,18 (1H, s lg) , 4,05-3, 90 (1H, m) , 3,74 (2H, ddd, J=12,7, 4,7 Hz), 3,28 (2H, ddd, J=12,7, 9,0, 3,6 Hz), 2,10-1,90 (2H, m) , 1,80-1,50 (3H, m) .
Espectro de massa: 241 [M+] 506 ΡΕ1340757 (3) 4-Metanossulfoniloxi-1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tia-zol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1,143 g, 4,74 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 16(2)) em cloreto de metileno (35 ml) foram adicionados cloreto de meta-nossulfonilo (0,44 ml, 5,63 inmol) e trietilamina (0,86 ml, 5,68 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, metanol foi adicionado à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado acetato de etilo, e a mistura foi filtrada de modo a proporcionar 4-metanossulfoniloxi-1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1,438 g, rendimento de 95%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,38 (1H, s) , 7,14 (1H, s lg) , 5, 06-4, 93 (1H, m) , 3,74 (2H, ddd, J=13,2, 7,5, 4,2 Hz), 3,48 (2H, ddd, J=13,2, 7,2, 4,2 Hz), 3,07 (3H, s) , 2,97 (3H, d, J=5,1 Hz), 2,20-1,90 (4H, m).
Espectro de massa (BAR+) : 320 [M+H] + 507 ΡΕ1340757 (4) 4-Acetiltio-l-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)pipe-ridina A uma solução de 4-metanossulfoniloxi-1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina (1,438 g, 4,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 16(3)) em dimetilformamida (72 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (1,03 g, 9,00 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo: n-hexano (10:1) ->· acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 4-acetiltio-l-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)piperidina (1,22 g, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,38 (1H, s) , 7,15 (1H, s lg), 3,82 (2H, dt, J=12,7, 4,8 Hz), 3,78-3,63 (1H, m), 3,30 (2H, ddd, J=12,7, 11,1, 4,7 Hz), 2,95 (3H, d, J=6, 4 Hz), 2,35 (3H, s), 2,15-1,95 (2H, m) , 1,85-1,35 (2H, m) .
Espectro de massa (BAR+) : 300 [M+H] +
Exemplo de Referência 17 4-Acetiltio-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina 508 ΡΕ1340757
AcS
CONMe2 (1) 4-t-Butildimetilsililoxi-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)piperidina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (0,98 g, 2,86 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 14 (2)) em dimetilformamida (30 ml) foi adicionado carbonildiimi-dazole (559 mg, 3,45 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto, e a mistura de reacção foi, em seguida, agitada num banho de óleo (50°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso solução aquosa a 50% de dimetilamina (100 ml) e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos.
Subsequentemente, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e uma solução aquosa. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:3) como eluente até 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-N,N-dimetilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (440 mg, quantidade total 995 mg, rendimento de 94%), sob a forma de um óleo amarelo. 509 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz , CDCI3) : δ (ppm) 7,04 ω \—1 4, 05-3,95 \—1 m) , 3, 67 (2H, ddd, J= = 12,6, 8,4, 4,3 Hz), 3, 41 (2H, ddd, J=12,6, 7, 0, 4 ,3 Hz), 3,26 (3H, s lg), 3, 07 (3H, s 1—1 1,92-1, 75 (2H, m) , 1, 72-1,50 (2H, m) , 0,90 ( 9H, s), 0,08 (6H, s) e
Espectro de massa (BAR+) : 370 [M+H] + (2) 1-(4-N,N-Dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipi- peridina A uma solução de 4-t-butildimetilsililoxi-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (2,13 g, 5,76 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 17(1)) em tetra-hidrofurano anidro (85 ml) foram adicionados ácido acético (1,65 ml, 28,8 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (28,8 ml, 28,8 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi, em seguida, agitada num banho de óleo (50°C) durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1,47 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,07 (1H, s) , 4,03-3,89 (1H, m), 3,83 (2H, ddd, J=12,0, 5,0 Hz), 3, 35-3,20 (5H, m) , 3,08 (3H, s lg) , 2,05-1, 90 (2H, m) , 1, 90-1,55 (3H, m) . Espectro de massa: 255 [M+] 510 ΡΕ1340757 (3) 1-(4-N,N-Dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-4-metanos- sulfoniloxipiperidina A uma solução de 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1,47 g, 5,76 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 17(2)) em cloreto de metileno (60 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,82 ml, 10,6 mmol) e trietilamina (1,48 ml, 10,6 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il) -4- metanossulfoniloxipiperidina (1,38 g, rendimento de 72%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,12 (1H, s) , 5,05-4,90 (1H, m) , 3, 85-3, 65 (2H, m) , 3, 60-3,40 (2H, m) , 3,23 (3H, s lg) , 3,08 (6H, s lg) , 2,20-1, 90 (4H, m) .
Espectro de massa (BAR+) : 334 [M+H] + 511 ΡΕ1340757 (4) 4-Acetiltio-l-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-piperidina A uma solução de 1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-4-metanossulfoniloxipiperidina (1,33 g, 3,99 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 17(3)) em dimetilformamida (66 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (940 mg, 8,23 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 3,0 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:n-hexano (5:1 -► 7:1) como eluente de modo a proporcionar 4-acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (629 mg, rendimento de 50%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,07 (1H, s) , 3,90-3,78 (3H, m) , 3, 75-3, 60 (2H, m) , 3,40-3,15 (5H, m) , 3,08 (3H, s lg) , 2,32 (3H, s) , 2,12-1,98 (2H, m) , 1,82-1, 60 (2H, m) . Espectro de massa (BAR+) : 314 [M+H] +
Exemplo de Referência 18 (3 S)-3-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina 512 ΡΕ1340757
,CONH 2 (1) Éster de etilo de ácido [(3R)-3-hidroxipirrolidino-l-carbotioil]carbâmico
Hidrocloreto de (3R)-3-hidroxipirrolidina (15 g, 121,4 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (450 ml), e foi adicionado a isso isotiocianato de etoxicarbonilo (15,7 ml) num banho de gelo. A solução da mistura foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos e, em seguida, agitada de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de uma mistura de acetato de etilo e n-hexano de modo a proporcionar éster de etilo de ácido [(3R)-3-hidroxipirrolidino-l-carbotioil]-carbâmico (24, 62 g, rendimento de 93%), sob a forma de um cristal amarelo. ^-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,38-7,25 (1H, s lg) , 4,35-3, 63 (5H, m) , 4,16 (2H, q, J=6, 8 Hz), 2,19-2,05 (2H, m), 1,30 (3H, t, J=6,8 Hz). (2) (3R)-1-(4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina 513 ΡΕ1340757 A uma solução de hidrocloreto de ácido [(3R)—3— hidroxipirrolidino-l-carbotioil]carbâmico (24,6 g, 113 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 18(1)) em etanol (125 ml) e água destilada (125 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (31,6 g, 789 mmol), e a mistura foi aquecida sob refluxo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente. À mistura de reacção foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em dioxano foi adicionado num banho de gelo até o pH da mistura de reacção se tornar 7, foram adicionados a isso 2-bromopiruvato de etilo (28,4 ml, 226 mmol) e trietilamina (31,7 ml, 226 mmol), e a mistura de reacção foi aquecida sob refluxo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (1:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar (3R)-1-(4-etoxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (19,26 g, rendimento de 70%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,39 (1H, s) , 4, 66-4,61 (1H, m) , 4,36 (2H, q, J=7,3 Hz), 3,72-3,65 (2H, m) , 3,62- 3, 56 (2H, m), 2,23-2,15 (1H, m) , 2,14-2,07 (1H, m) , 1,37 (3H, t, J=7,3 Hz) . 514 ΡΕ1340757 (3) (3R)-3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l, 3- tiazol-2-il)pirrolidina A uma solução de (3R)-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tia-zol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (3,0 g, 12,4 inmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 18(2)) em dimetilformamida (90 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (6,45 ml, 24,8 mmol) e imidazole (1,69 g, 24,8 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura num banho de gelo durante 10 minutos, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado etanol (2,59 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (4:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar (3R)-3-t-butildifenil-sililoxi-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina (5,85 g, rendimento de 90%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,69-7,60 (4H, m) , 7,48- 515 ΡΕ1340757 7,35 (6Η, m) , 7,39 (1H, s) , 4,56-4,50 (1H, m) , 4,12 (2H, q, J=7,3 Hz), 3,77-3,70 (1H, m), 3,56-3,46 (3H, m), 2,06-1,90 (2H, m), 1,38 (3H, t, J=7,3 Hz), 1,05 (9H, s) . (4) (3R)-3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l, 3-tiazol- 2-il)pirrolidina A uma solução de (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina (300 mg, 0,624 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 18(3) ) na mistura de etanol (12 ml) e água destilada (3 ml) foi adicionada solução aquosa 1 N de hidróxido de sódio (1,56 ml, 1,56 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada a isso solução aquosa IN de ácido clorídrico (1,8 ml) num banho de gelo até o pH da mistura de reacção ter atingido 4 a 5. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida de modo a proporcionar (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l, 3-tiazol-2-il) pirrolidina (305 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,68-7,60 (4H, m) , <! CO 1 7,35 (6H, m) , 7,40 (1H, s), 4, 57-4,50 (1H, m) , 3,72-3,62 (1H, m) , 3,50-3,36 s) . (3H, m) , 2,10-1,92 (2H, m) , 1,05 (9H, 516 ΡΕ1340757 (5) (3R)-3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-carbamoil-l, 3-tia- zol-2-il)pirrolidina A uma solução de (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina (910 mg, 2,01 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 18(4)) em dimetilformamida (30 ml) foi adicionado carbonildi-imidazole (652 mg, 4,02 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto, e a mistura de reacção foi, em seguida, agitada num banho de óleo (50°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada a isso solução aquosa de amoniaco a 28% e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos.
Subsequentemente, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica de modo a proporcionar (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-carbamoil-l,3-tiazol-2-il) pirrolidina (730 mg, rendimento de 80%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,71-7,64 (4H, m) , 7,48- 7,38 (6H, m) , 7,09-7,05 (1H, s lg) , 5, 50-5, 44 (1H, s lg) 517 ΡΕ1340757 4,57-4,52 (1H, m) , 3,72-3,66 (1H, m) , 3,51-3,45 (1H, m), 3,45-3,43 (2H, m) , 2,09-2,02 (1H, m) , 2,08-1,93 (1H, m), 1,08 (9H, s) . (6) (3R)-1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirroli- dina A uma solução de (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina (950 mg, 2,10 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 18 (5)) em tetra-hidrofurano anidro (20 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,52 ml, 2,52 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) -► metanol a 10% em acetato de etilo como eluen-te de modo a proporcionar (3R)-1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (428 mg, rendimento de 96%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, DMS0-d6) : δ (ppm) 7,42-7,36 (1H, s lg) , 7,30-7,23 (1H, s lg), 7,27 (1H, s), 5,08 (1H, d, J=3,7 Hz), 4,42-4,37 (1H, m), 3,51 (1H, dd, J=11,0, 4,4 Hz), 3,90-3,43 (2H, m) , 3, 30-3,27 (1H, m) , 2,14-2,01 (1H, m) , 1,99-1,86 (1H, m). 518 ΡΕ1340757 (7) (3R)-1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoni- loxipirrolidina e (3R)-1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulf oniloxipirrolidina A uma solução de (3R)-1-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (290 mg, 1,36 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 18(6))suspensa em cloreto de metileno (9 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,684 ml, 8,85 mmol) e trietilamina (1,24 ml, 8,85 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol (0,33 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando metanol a 5% em acetato de etilo -> metanol a 10% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3R)-1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulf oniloxipirrolidina (148 mg, rendimento de 40%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. (3R)-1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxipirrolidina (a) 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,41 (1H, s) , 7,10-6,98 (1H, s lg) , 5, 60-5,52 (1H, s lg) , 5,50-5,40 (1H, 519 ΡΕ1340757 m) , 3, 88-3,76 (2H, m) , 3, 65-3, 60 (2H, m) , 3,08 (3H, s) , 2,50-2,41 (1H, m) , 2,39-2,32 (1H, m) . (3R)-1- (4-Ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxi-pirrolidina (b) 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,23 (1H, s) , 5, 45-5,42 (1H, m) , 3, 88-3,76 (2H, m) , 3, 69-3, 62 (2H, m) , 3,08 (3H, s), 2,55-2,47 (1H, m), 2,43-2,32 (1H, m) . (8) (3 S)-3-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirro- lidina A uma solução de (3R)-1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxipirrolidina (190 mg, 0,652 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 18(7)) em acetonitrilo (6 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (223 mg, 1,96 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:1) -► acetato de etilo -► metanol a 2% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3 S)-3-acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3- 520 ΡΕ1340757 tiazol- 2-il )pirrc ilidina (135 mg, rendimento de 77 %), sob a forma de um sólido castanho- -pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCls) : δ (ppm) 7,37 (1H, s) , 7,08-7, 02 (1H, s ig), 5,50 -5,44 ( 1H, s lg) , 4,26- 4,12 (1H, m) , 3, 94 (1H, dd V j = n,o, 6,6 Hz' ), 3 ,62-3, 50 (2H, m) , 3,44 (1H, dd, J=ll,0, 5,1 Hz) , 2,54-2, 45 (1H, m ), 2,36 (3H, s) , 2,13-2, 04 (1Η, m).
Exemplo de Referência 19
(3 S)-3-Acetiltio-l-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina N^/CN A uma solução de (3R)-1-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxipirrolidina (300 mg, 1,10 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 18 (7)) em acetonitrilo (9 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (376 mg, 3,30 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (5:1 ->· 1:1) como eluente de modo a proporcionar (3S)-3-acetiltio-l-(4-ciano- 521 ΡΕ1340757 1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (137 mg, rendimento de 50%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,19 (1H, s) , 4,19-4,12 (1H, m) , 3,94 (1H, dd, J=11,0, 6,6 Hz), 3, 64-3, 53 (2H, m) , 3,43 (1H, dd, J=11,0, 5,1 Hz), 2,55-2,48 (1H, m), 2,36 (3H, s), 2,15-2,06 (1H, m).
Exemplo de Referência 20 (3R)-3-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina
AcS
CONH 2 (1) (3R)-1-(4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossul- foniloxipirrolidina A uma solução de (3R)-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (970 mg, 4,00 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 18(2)) em cloreto de metileno (30 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (1,24 ml, 16,0 mmol) e trietilamina (2,24 ml, 16,0 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso etanol (0,81 ml) e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto 522 ΡΕ1340757 de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (4:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar (3R)-1-(4-etoxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxipirrolidina (1,00 g, rendimento de 78%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,43 (1H, s) , 5,44-5,41 (1H, m) , 4,36 (2H, q, J=7,0 Hz), 3,92 (1H, dd, J=12,5, 1,5 Hz), 3,85 (1H, dd, J=12,5, 3,7 Hz), 3,72-3,65 (2H, m), 3,06 (3H, s), 2,52-2,46 (1H, m) , 2,40-2,31(lH ,m), 1,38 (3H, t, J=7,0 Hz). (2) (3 S)-3-Acetil-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)pirro- lidina A uma solução de (3R)-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxipirrolidina (1,0 g, 3,12 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 20(1)) em dimetilf ormamida (30 ml) foi adicionado tio-acetato de potássio (919 mg, 9,36 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 5,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão 523 ΡΕ1340757 reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando toluenorace-tonitrilo (3:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar (3S)-3-acetil-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)pirroli-dina (877 mg, rendimento de 99%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,41 (1H, s) , 5,45-5,41 (1H, m) , 4,36 (2H, q, J=7,3 Hz) , 3, . 44 (1H, dd, J=ll,7, 5,1 Hz) , 3,70-3,60 (3H, m), 2,35-2,17 (2H , m) , 2,05 (3H, s) , 1,38 (3H, t, 7,3 Hz) . (3) (3S)-1- (4-Etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipir- rolidina A uma solução de (3 S)-3-acetil-l-(4-etoxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)pirrolidina (5,0 g, 17,6 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 20(2)) em etanol (150 ml) foi adicionado etóxido de sódio (60 mg, 0,879 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada de um dia para o outro sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa foi adicionada a isso, uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (0,22 ml) a fim de neutralizar a mistura de reacção. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia 524 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:aceto-nitrilo (1:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar (3S)-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirro-lidina (4,16 g, rendimento de 98%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,39 (1H, s) , 4,67-4,61 (1H, m) , 4,36 (2H, q, J=7,3 Hz), 3, 72-3, 56 (4H, m) , 2,24- 2,07 (2H, m), 1,37 (3H, t, J=7,3 Hz). (4) (3S)-3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l,3- tiazol-2-il)pirrolidina A uma solução de (3S)-1-(4-etoxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (4,1 g, 16,9 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 20 (3)) em dimetilformamida (120 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (8,8 ml, 33,8 mmol) e imidazole (2,3 g, 33,8 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos, e agitada de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso etanol (1,18 ml) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão 525 ΡΕ1340757 reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (4:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (7,60 g, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,68-7,61 (4H, m) , 7,52-7,35 (6H, m) , 7,37 (1H, s) , 4,56-4,51 (1H, m) , 4,36 (2H, q, J=7,0 Hz), 3,77-3,69 (1H, m), 3,58-3,48 (3H, m), 2,05-1,88 (2H, m), 1,38 (3H, t, J=7,0 Hz), 1,05 (9H, s) . (5) (3S)-3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l, 3-tiazol-2-il)pirrolidina A uma solução de (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina (5,0 g, 10,4 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 20(4)) numa mistura de etanol (200 ml) e água destilada (50 ml) foi adicionada solução aquosa 1 N de hidróxido de sódio (26,0 ml, 26,0 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 7,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada a isso solução aquosa IN de ácido clorídrico num banho de gelo até o pH da mistura de reacção ter atingido 4 a 5. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida de modo a proporcionar (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil- 526 ΡΕ1340757 1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (4,71 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : 7,25 (6H, m) , 7,40 (1H, (1H, m) , 3,48-3,24 (3H, branco. δ (ppm) 7,70-7,52 (4H, s), 4, 57-4,40 (1H, m) , m) , 2,04-1, 86 (2H, m) , m) , 7,52- 3,68-3,55 1,07 (9H, s) . (6) (3S)-3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-carbamoil-l,3-tia- zol-2-il)pirrolidina A uma solução de (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina (4,7 g, 10,4 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 20 (5)) em dimetilformamida (140 ml) foi adicionado carbonildiimi-dazole (3,37 g, 20,8 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (50°C) durante 3,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada a isso solução aquosa de amoníaco a 28% e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (4:1 ->· 2:1) como eluente de modo a proporcionar (3S)-3-t- 527 ΡΕ1340757 butildifenilsililoxi-1-(4-N-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pir-rolidina (3,14 g, rendimento de 67%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 68-7, 62 (4H, m) , 7,48- 7,36 (6H, m), 7,34 (1H, s), 7, 08-7,05 (1H, s lg) , 5,49-5,44 (1H, s lg) , 4,57-4,51 (1H, m) , 2,10-1,93 (2H, m) , 1,06 (9H, s) . (7) (3 S)-1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirroli- dina A uma solução de (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirrolidina (3,1 g, 6,86 iranol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 20(6)) em tetra-hidrofurano anidro (90 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra- hidrofurano (8,24 ml, 8,24 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1, 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► metanol a 10% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3S) — 1- (4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (1,42 g, rendimento de 98%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) : δ (ppm) 7,43-7,36 (1H, s lg) , 7,74-7,22 (1H, s lg), 7,27 (1H, s), 5,09 (1H, d, J=3,7 Hz), 4,44-4,38 (1H, m), 3,51 (1H, dd, J=11,0, 4,4 Hz), 3,49-3,42 (2H, m) , 3, 33-3,28 (1H, m) , 2,15-2,02 (1H, m) , 1,97-1,89 (1H, m). 528 ΡΕ1340757 (8) (3 S)-1-(4-Carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoni- loxipirrolidina A uma solução de (3S)-1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (1,42 g, 6,66 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 20(7))suspensa numa mistura de cloreto de metileno (40 ml) e piridina (9 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (2,58 ml, 33,3 mmol) e trietilamina (4,67 ml, 33,3 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso metanol (1,2 ml) num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando metanol a 5% em acetato de etilo -► metanol a 10% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3S)-1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxipirrolidina (1,15 g, rendimento de 60%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MH :z, CDC13) : δ (ppm) 7,41 (1H, s) , 7,08 -7 , 02 (1H, s lg) , 5, 57- -5,46 1 (1H, s lg) , 5,45-5,43 (1H , m) , 3 ,86 (1H, dd, J= 12, 5 Hz) , 3, 80 (1H, dd , J=12,5, 4 ,4 Hz) , 3, 68- 3, 60 (2H, m), 3, 08 (3H , s) , 2,52- -2,40 (1H, m) , 2,39 -2 ,31 (1H, m) . 529 ΡΕ1340757 (9) (3R)-3-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il)pirro- lidina A uma solução de (3S)-1-(4-carbamoil-l,3-tiazol- 2- il)-3-metanossulfoniloxipirrolidina (1,15 g) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 20(8)) em acetoni-trilo (35 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,35 g, 11,8 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi aquecida sob refluxo durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► metanol a 2% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3R)-3-acetiltio-l-(4-carbamoil-l, 3-tiazol-2-il)pirrolidina (962 mg, rendimento de 90%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,37 (1H, s) , 7,13-6,99 (1H, s lg) , 5,59-5, 45 (1H, s lg) , 4,19-4,09 (1H, m) , 3,94 (1H, dd, J=11,0, 6,6 Hz), 3,61-3,50 (2H, m) , 3,44 (1H, dd, J=11,0, 5,1 Hz), 2,54-2,45 (1H, m), 2,37 (3H, s), 2,14-2,05 (1H, m).
Exemplo de Referência 21 3- Acetiltio-l-(4-N-metilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina 530 ΡΕ1340757
(1) l-Carbamoil-3-hidroxiazetidina
Uma solução de N-benzidril-3-hidroxiazetidina (5,36 g, 22,4 mmol) em metanol (250 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 10% (5,36 g) num banho de água (50°C) à pressão de hidrogénio de 1 atmosfera. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e água destilada. A camada orgânica foi extraída com água destilada. A camada aquosa obtida foi concentrada sob pressão reduzida, de modo a originar um produto oleoso castanho-avermelhado.
Subsequentemente, o produto foi seco sob pressão reduzida e dissolvido numa mistura de ácido acético (10 ml) e água destilada (20 ml), foi adicionado a isso uma solução aquosa (20 ml) de cianeto de sódio (2,91 g) à temperatura ambiente e a mistura de reacção foi agitada durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno:me- 531 ΡΕ1340757 tanol (5:1) como eluente de modo a proporcionar 1-carba-moil-3-hidroxiazetidina, sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (500 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 4,54-4,50 (1H, m) , 4,16- 4,12 (2H, m) , 3,74 (2H, dd, J=4,4, 9,7 Hz). (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-carbamoilazetidina A uma solução de l-carbamoil-3-hidroxiazetidina (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 21(1)) em dimetilformamida (100 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (18,0 ml, 66,9 mmol) e imidazole (4,55 g, 66,9 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura num banho de gelo durante 10 minutos, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado etanol (1 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-carbamoil-azetidina (1,45 g, rendimento total de 18%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,60 (4H, d, J=8,l Hz), 532 ΡΕ1340757 7,46-7,36 (6Η, m) , 4,59-4,54 (1H, m) , 4,26 (2H, s lg) , 3,96 (2H, t, J=8, 8 Hz), 3,91 (2H, dd, J=5,l, 8,8 Hz), 1,06 (9H, s) . (3) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l, 3-oxazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-carbamoilazetidina (3,47 g, 9,79 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 21(2)) em tetra- hidrofurano (170 ml) foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (4,11 g, 48,95 mmol) e 2-bromopiruvato de etilo (2,5 ml, 19,58 mmol), e a mistura de reacção foi aquecida sob refluxo durante 8 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (5:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (2,96 g, rendimento de 45%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,76 (1H, s) , 7,60 (4H, d, J=7,8 Hz), 7,46-7,37 (6H, m), 4,71-4,67 (1H, m) , 4,34 (2H, q, J=6,8 Hz), 4,14 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,09 (2H, dd, J=5,9, 9,8 Hz), 1,34 (3H, t, J=6, 8 Hz), 1,05 (9H, s) . 533 ΡΕ1340757 (4) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N-metilcarbamoil-l,3-oxa-zol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-etoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (325 mg, 0,72 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 21 (3)) em benzeno (7 ml) foi adicionada uma solução de metilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (2,7 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada solução aquosa de ácido acético a 10% (20 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-N-metilcarbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (236 mg, rendimento de 75%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,72 (1H, s), 7,61 (4H, d, J=7,8 Hz) , 7, 47-7,38 (6H, m), 6, 88 (1H, s ig) / . 4,74-4,68 (1H, m), 4,10 (2H, t, J=8,7 Hz), 4,04 (2H, dd, J=5,6, 8,8 Hz), 2,92 (3H, d, J=5, 0 Hz) , 1,06 (9H, s) . 534 ΡΕ1340757 (5) 1-(4-N-Metilcarbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (662 mg, 1,52 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 21(4)) em tetra-hidrofurano (33 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,5 ml, 1,5 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-oxazol-2-il) azetidina (210 mg, rendimento de 70%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 7,83 (1H, s), 4,86-4,66 (1H, m) , 4,33 (2H, dd, J=6, 6, 8,1 Hz), 3,93 (2H, dd, J=5,l, 8,8 Hz), 2,85 (3H, s). (6) 1-(4-N-Metilcarbamoil-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfo-niloxiazetidina A uma solução de 1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (209 mg, 1,06 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 21 (5)) numa mistura de cloreto de metileno (5 ml) e piridina (15 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,41 ml, 5,30 mmol) e 535 ΡΕ1340757 trietilamina (0,74 ml, 5,30 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso metanol (1 ml) e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-metilcarbamoil-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfoniloxi-azetidina (253 mg, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz , CDCls) : δ (ppm) 7,78 (1H, s! ) , 6, 80 (1H, s ig), 5, 41-5,35 (1H, m) , 4,48 (2H, dd, J=6, 6, 10,3 Hz), 4,30 (2H, dd ί, J=4,4, 10, 3 Hz) , 3,10 (3H, s), 2, r 94 (3H, d, J=5,1 Hz) . (7) 3- Acetilti o-l- (4-N- metilcarbamoil-1,3 -oxazol- -2-il)aze- tidina A uma solução de 1-(4-N-metilcarbamoil-l, 3-oxa-zol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (252 mg, 0,92 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 21(6)) em dimetilformamida (12 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (0,63 g, 5,52 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 8 horas. Depois de se verificar que a reacção estava comple- 536 ΡΕ1340757 ta, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-N-metilcar-bamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (136 mg, rendimento de 58%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,75 (1H, s) , 6,79 (1H, s lg), 4,55 (2H, t, J=8,4 Hz) , 4,43-4,37 (1H, m), 4,02 (2H, dd, J=5,8, 8, 9 Hz), 2,94 (3H, d, J=5,1 Hz) , 2,36 (3H, s).
Exemplo de Referência 22 3-Acetiltio-l-(4-N-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,70 g, 3,77 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 21 (3)) em benzeno (38 ml) foi adicionada uma solução de metilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (13,7 ml) à temperatura 537 ΡΕ1340757 ambiente sob uma atmosfera de azoto, e, em seguida, a mistura foi agitada em banho de água (50°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) foi adicionado à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (0,83 g, rendimento de 52%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,75 (1H, s), 7,61 (4H, d, J=6,7 Hz), 7,47-7,36 (6H, m) , 6,72 (1H, s lg) , 5,69 (1H, s lg) , 4,74-4, 69 (1H, m) , 4,12 (2H, t, J=6,7 Hz), 4,05 (2H, dd, J=5,0, 7,8 Hz), 1,06 (9H, s). (2) 1-(4-Carbamoil-l,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,30 g, 3,08 mmol) em tetra-hidrofurano (60 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (3,1 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 538 ΡΕ1340757 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (0,43 g, rendimento de 75%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 7,87 (1H, s) , 4,70-4,65 (1H, m) , 4,34 (2H, dd, J=6, 6, 9,5 Hz), 3,94 (2H, dd, J=5, 9, 9,5 Hz) . (3) 1- (4-Carbamoil-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfoniloxi- azetidina A uma solução de 1-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (423 mg, 2,31 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 22 (2)) numa mistura de cloreto de metileno (10 ml) e piridina (30 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,90 ml, 11,55 mmol) e trietilamina (1,60 ml, 11,55 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol (1 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de 539 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossul-foniloxiazetidina (470 mg, rendimento de 78%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 7,91 (1H, s), 5,45-5,42 (1H, m) , 4,51 (2H, dd, J=6, 6, 9,5 Hz), 4,28 (2H, dd, J=4,4, 9,5 Hz) , 3,16 (3H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (469 mg, 1,80 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 22 (3)) em dimetilformamida (23 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,23 g, 10,80 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 8 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (275 mg, rendimento de 63%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,79 (1H, s) , 6,69 (1H, s 540 ΡΕ1340757 ig), 5, 60 (1H, s lg), 4,56 (2H, C+ C-| II co co Hz) (1H, m) , 4, 03 (2H, dd, J=5,1, 8,8 Hz), 2,36 (3H,
Exemplo de Referência 23 3-Acetiltio-l-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)-azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (357 g, 0,79 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 21 (3)) em benzeno (8 ml) foi adicionada uma solução de metilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (2,8 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada num banho de água (60°C) durante 7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada solução aquosa de ácido acético a 10% (10 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob 541 ΡΕ1340757 pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (5:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-ciano-l,3-oxa-zol-2-il)azetidina (130 mg, rendimento de 41%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,66 (1H, s) , 7,60 (4H, d, J=8,1 Hz), 7,48-7,38 (6H, m) , 4,73-4,70 (1H, m) , 4,14 (2H, dd, J=6, 6, 8,8 Hz), 4,08 (2H, dd, J=5,l, 9,5 Hz), 1,06 (9H, s) . (2) 1-(4-Ciano-l,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina (0,61 g, 1,51 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 23(1)) em tetra-hidrofurano (30 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,5 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (0,21 g, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,70 (1H, s) , 4,83-4,81 (1H, m) , 4,40 (2H, dd, J=6, 6, 9,5 Hz), 4,06 (2H, dd, J=4,4, 8,8 Hz), 2,26 (1H, d, J=5,9 Hz). 542 ΡΕ1340757 (3) 1- (4-Ciano-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazeti- dina A uma solução de 1-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (214 mg, 1,30 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 23(2)) numa mistura de cloreto de metileno (10 ml) e piridina (5 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,50 ml, 6,50 mmol) e trietilamina (0,90 ml, 6,50 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso metanol (1 ml) num banho de gelo e, em seguida, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (310 mg, rendimento de 98%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,76 (1H, s) , 5,42-5,36 (1H, m) , 4,53 (2H, dd, J=6, 6, 11,0 Hz), 4,34 (2H, dd, J=4,4, 11,0 Hz), 3,11 (3H, s). (4) 3-Acetiltio-l- (4-ciano-l,3-oxazol-2-il)azetidina 543 ΡΕ1340757 A uma solução de 1-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (309 mg, 1,27 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 23(3)) em dimetilformamida (15 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (0,87 g, 7,62 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge- nocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)azeti-dina (157 mg, rendimento de 55%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,72 (1H, s) , 4,60 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,45-4,38 (1H, m) , 4,07 (2H, dd, J=5, 9, 8,8 Hz), 2, 37 (3H, s) .
Exemplo de Referência 24 3-t-Acetiltio-l-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)azetidina
544 ΡΕ1340757 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,0 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de azetidina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (4,6 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-azetidinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina (0,60 g, rendimento de 55%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,62 (4H, dd, J=8,0, 1,4
Hz) , 7,51· -7,36 (6H, m) , 7,42 (1H, s) , 4,80-4,68 (1H, m) 4,56 (2H, t, J= =7,7 Hz) , 4,16 (2H, t, J=7,7 Hz), 4,09 (2H t, J= = 8,7 Hz) , 4,00 (2H, dd, J=8,7, 4,9 Hz), 2,28 (2H quinteto, J=7, 7 Hz) , 1,06 (9H, s) . 545 ΡΕ1340757 (2) 1-(4-Azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiaze- tidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (0,60 g, 1,18 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 24 (1)) em tetra-hidrofurano anidro (25 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,42 ml, 1,42 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando metanol a 5% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (242 mg, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,35 (1H, s) , 4,86-4,78 (2H, t, J=7,7 Hz), 4,30 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,16 (2H, t, J=7,7 Hz), 3,93 (2H, dd, J=9,5, 5,0 Hz), 2,29 (2H, quinteto, J=7,7 Hz), 1,95-1,5 (s embotado incluindo 1H de grupo OH). 546 ΡΕ1340757 (3) 1-(4-Azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfo-niloxiazetidina A uma solução de 1-(4-azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (242 mg, 1,01 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 24(2)) em cloreto de metileno (10 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,43 ml, 3,04 mmol) e trietilamina (0,24 ml, 3,04 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado éter isopropílico e a mistura resultante foi filtrada de modo a proporcionar 1-(4-azetidinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (302 mg, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,44 (1H, s) , 5,46-5,38 (1H, m) , 4,58 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,43 (2H, ddd, J=9, 6, 6,6, 1,0 Hz), 4,24 (1H, ddd, J=9, 6, 4,6, 1,0 Hz), 4,17 (2H, t, J=7,8 Hz), 3,10 (3H, s), 2,30 (2H, quinteto, J=7,8 Hz). (4) 3-Acetiltio-l-(4-azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidina A uma solução de 1-(4-azetidinocarbonil-l,3-tia- 547 ΡΕ1340757 zol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (302 mg, 0,95 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 24 (3)) em dimetilformamida (10 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (0,65 g, 5,70 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (247 mg, rendimento de 87%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,40 (1H, s) , 4,57 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,51 (2H, t, J=8,4 Hz), 4,46-4,36 (1H, m), 4,16 (2H, t, J=7,8 Hz), 3,96 (2H, dd, J=8,4, 5,3 Hz), 2,36 (3H, s), 2,29 (2H, quinteto, J=7,8 Hz).
Exemplo de Referência 25 3-Acetiltio-l-(4-tiomorfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
AcS·
/ \ CO-N S \_/ 548 ΡΕ1340757 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-tiomorfolinocarbonil-l,3- tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,0 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de tiomorfolina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (4,6 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura de reacção foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexa-no:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,16 g, rendimento de 98%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,32 (4H, dd, J=7, 9, 1,4
Hz), 7,54-7,35 (6H, m) , 7,07 (1H, s) , 4,80-4,70 (1H, m) , 4,10 (2H, dd, J=8,8, 6,5 Hz), 4,10-3,86 (6H, m incluindo 549 ΡΕ1340757 2Η, dd em 4,00, J=8,8, 4,8 Hz), 2,80-2,55 (4H, m) , 1,06 (9H, s) . (2) 1-(4-Tiomorfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxi- azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,16 g, 2,10 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 25(1)) em tetra-hidrofurano anidro (35 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,52 ml, 2,52 mmol), e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida, e o residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-tiomorfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (599 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,09 (1H, s), 4,89-4,77 (1H, m) , 4,32 (2H, dd, J=9,l, 6,7 Hz), 4,10-3,90 (6H, m incluindo 2H, dd em 3,96, J=9,l, 4,3 Hz), 2,80-2,58 (4H, m) , 2,50 (1H, s lg) . (3) 1- (4-Tiomorfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanos- sulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-tiomorfolinocarbonil-l,3- 550 ΡΕ1340757 tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (599 g, 2,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 25(2)) em cloreto de metileno (30 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,49 ml, 6,30 mmol) e trietilamina (0,88 ml, 6,30 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 40 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando metanol a 5% em acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-tiomorfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (709 mg, rendimento de 93%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,17 (1H, s) , 5,46-5,38 (1H, m) , 4,45 (2H, dd, J=9,8, 6,7 Hz), 4,26 (2H, ddd, J=9, 8, 4,4, 1,1 Hz), 4, 08-3, 93 (4H, m) , 3,11 (3H, s) , 2,80-2, 60 (4H, m) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-tiomorfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2-il)-azetidina A uma solução de 1-(4-tiomorfolinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (709 g, 1,95 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 551 ΡΕ1340757 25 (3) ) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado tio-acetato de potássio (1,34 g, 11,7 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:n-hexano:cloreto de metileno (1:1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (413 mg, rendimento de 64%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,13 (1H, s) , 4,53 (2H, t, J=8,4 Hz), 4, 48-4,40 (1H, m) , 4,13-3,86 (6H, m incluindo 2H, dd em 3,98, J=8,4, 5,2 Hz), 2,80-2, 60 (4H, m) , 2,36 (3H, s) .
Exemplo de Referência 26 3-Acetiltio-l-(4-pirrolidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il) azetidina
552 ΡΕ1340757 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-pirrolidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de pirrolidina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (7,6 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-pirrolidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (775 mg, rendimento de 78%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,70-7,56 (4H, m) , 7,35-7,50 (6H, m) , 7,21 (1H, s) , 4, 80-4,70 (1H, m) , 4,18-4,06 (2H, m) , 4,00 (2H, dd, J= 8,6. 5,1 Hz), 3,80 (2H, t, J= 6,5 553 ΡΕ1340757
Hz), 3,60 (2H, t, J= 6,5 Hz), 1,83-1, 98 (4H, m) , 1,06 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-(4-pirrolidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (775 mg, 1,58 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 26(1)) em tetra-hidrofurano anidro (30 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,01 ml, 2,01 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo :metanol (20:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-(4-pirrolidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (290 mg, rendimento de 72%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,42 (1H, s) , 4, 88-4 ,78 (1H, m) 1 , 4,32 (2H, dd, J= 9,0, 6, 8 Hz) , 3, 95 (2H, dd, J= 9,0, 4, 3 Hz) , 3,82 (2H, t, J= 6,5 Hz) , 3, 61 (2H, t, J= 6, 5 Hz) , 2, 43 (1H, d, J= 6,8 Hz), 1,83- -1, 97 (4 H, m) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-l,3-tia-zol-2-il)azetidina 554 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-pirrolidinocar-bonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (290 mg, 1,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 26(2)) em cloreto de metileno (9 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,30 ml, 5,12 mmol) e trietilamina (0,70 ml, 5,12 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno:acetato de etilo (1:1) ->· acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-(4-pirrolidinocarbo-nil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (335 mg, rendimento de 89%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,33 (1H, s) , 5,48-5,38 (1H, m) , 4,45 (2H, ddd, J= 10,1, 6,6, 1,2 Hz), 4,26 (2H, ddd, J= 10,1, 4,4, 1,1 Hz), 3,82 (2H, t, J= 6,6 Hz), 3,62 (2H, t, J= 6,6 Hz), 3,10 (3H, s) , 2,00-1,83 (4H, m) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-pirrolidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)-azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (335 mg, 1,01 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 555 ΡΕ1340757 26(3)) em dimetilformamida (15 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (1,10 g, 8,80 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-pirrolidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (235 mg, rendimento de 75%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 7,28 (1H, s) , 4, 52 (2H, 00 00 II >"0 T3 Hz), 4,39-4,48 (1H, m) 1 , 3, 98 (2H, dd, J= 8,4, 5,2 Hz), 3, 82 (2H, t, J= 6, 5 Hz), 3, 61 (2H, t, J= 6,5 Hz), 2,36 (3H, s ) , 1, 98-1,82 (4H, m) .
Exemplo de Referência 27 3-Acetiltio-l-(4-piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
556 ΡΕ1340757 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de piperidina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (7,3 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (607 mg, rendimento de 56%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,61 (4H, dd, J= 6,2 Hz), 7,35-7,50 (6H, m) , 6,95 (1H, s) , 4,78-4,70 (1H, m) , 4,17- 4,05 (2H, m) , 4,01 (2H, dd, J= 8,6, 4,9 Hz), 3,64 (4H, t, J= 5,4 Hz), 1,75-1,48 (6H, m), 1,06 (9H, s) . 557 ΡΕ1340757 (2) 3-Hidroxi-l-(4-piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (607 mg, 1,20 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 27(1)) em tetra-hidrofurano anidro (25 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,40 ml, 1,40 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-(4-piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (310 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6,97 (1H, s) , 4,87-4,77 (1H, m) , 4,33 (2H, ddd, J= 9,8, 6,6, 1,1 Hz), 3,96 (2H, dd, J= 9,8, 4,4 Hz), 3, 57-3, 72 (4H, t, J= 5,4 Hz), 1,81-1,45 (6H, m) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-l-(4-piperidinocarbonil-l,3-tia-zol-2-il)azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-piperidinocarbonil-l ,3-tiazol-2-il)azetidina (310 mg, 1,16 mmol) (obtida 558 ΡΕ1340757 tal como descrito no Exemplo de Referência 27(2)) em cloreto de metileno (10 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,27 ml, 3,48 mmol) e trietilamina (0,49 ml, 3,48 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-(4-piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (346 mg, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,06 (1H, s), 5,37-5,47 (1H, m) r 4, 46 (2H, dd, J= 9,8, 6,7 Hz), 4,27 (2H, dd, J= co 4, 3 Hz ) , 3, 65 (4 H, t, J= 5,2 Hz), 3,10 (3H, t, J = 5,2 Hz) , 1, 78 -1 ,47 (6H, m) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il) -azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (346 mg, 1,00 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 27(3)) em dimetilf ormamida (15 ml) foi adicionado tio-acetato de potássio (687 g, 6,01 mmol) à temperatura ambi- 559 ΡΕ1340757 ente. A mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-piperidinocarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (276 mg, rendimento de 85%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,02 (1H, s) , 4,54 (2H, dd, J= 8,5 Hz), 4,39-4,49 (1H, m) , 3,99 (2H, dd, J= 8,5, 5,4 Hz), 3,65 (4H, t, J= 5,4 Hz), 2,36 (3H, s) , 1,90-1,40 (6H, m) .
Exemplo de Referência 28 3-Acetiltio-l-(4-N-ciclopentilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina 560 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de ciclopro-pilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (7,20 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) foram adicionados à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclopropil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (979 mg, rendimento de 90%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,70-7, 60 (4H, m) , 7,33- 7,50 (6H, m) , 7,36 (1H, s) , 4, 80-4, 68 (1H, m) , 4,18-4,06 (3H, m) , 4,02 (2H, dd, J= 8,2, 5,8 Hz), 3, 80-3, 70 (1H, m), 1,06 (9H, s), 0,83 (1H, t, J= 6,9 Hz), 0,82 (1H, t, J= 6,9
Hz), 0,70-0,58 (2H, m). 561 ΡΕ1340757 (2) 1-(4-N-Ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxi-azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (907 mg, 1, 94 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 28(1)) em tetra-hidrofurano anidro (40 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,30 ml, 2,30 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (367 mg, rendimento de 81%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,37 (1H, s) , 7,23 (1H, s), 4, 67-4, 80 (1H, m) , 4,32 (2H, dd, J= 9,0, 6,7 Hz), 3,96 (2H, dd, J= 9,0, 4,3 Hz), 2,82-2,70 (1H, m) , 0,84 (1H, t, J= 7,1 Hz), 0,83 (1H, t, J= 7,1 Hz), 0,55-0,70 (2H, m) . (3) 1-(4-N-Ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanos-sulfoniloxiazetidina 562 ΡΕ1340757 A uma solução de 1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (376 mg, 1,57 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 28(2)) em cloreto de metileno (10 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,36 ml, 4,71 mmol) e trietilamina (0,66 ml, 4,71 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (343 mg, rendimento de 88%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,45 (1H, s) , 7,18 (1H, s), 5, 48-5, 36 (1H, m) , 4,44 (2H, dd, J= 10,2, 6,6 Hz), 4,26 (2H, dd, J= 10,2, 4,4 Hz), 3,11 (3H, s), 2,91-2,79 (1H, m), 0,85 (1H, d, J= 6,9 Hz), 0,84 (1H, d, J= 6,9 Hz), 0,72-0,66 (2H, m). (4) 3-Acetiltio-l-(4-N-ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina 563 ΡΕ1340757 A uma solução de 1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (433 mg, 1,31 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 28 (3) ) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado tio-acetato de potássio (895 mg, 7,84 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)aze-tidina (343 mg, rendimento de 88%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,14 (1H, s) , 7,20 (1H, s lg) , 4,52 (2H, t, J= 8,6 Hz), 4,49-4,38 (1H, m) , 3,98 (2H, dd, J= 8,6, 5,9 Hz), 3,98 (2H, dd, J= 8,6, 5,9 Hz), 2,90- 2,82 (1H, m) , 2,36 (3H, s) , 0,84 (1H, t, J= 7,0 Hz), 0,83 (1H, t, J= 7,0 Hz), 0,70-0,56 (2H, m).
Exemplo de Referência 29 3-Acetiltio-l-(4-N-ciclobutilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina 564 ΡΕ1340757
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (50 ml) foi adicionada uma solução de ciclobutil-amina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (7,30 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclobutil-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (965 mg, rendimento de 565 ΡΕ1340757 87%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 7,62 (4H, d, J= 8,0 Hz), 7,28-7,39 (6H, m) , 7,34 (1H, s) , 4,70-4, 80 (1H, m) , 4,58- 4,46 (1H, m) , 4,11 (2H, dd, J= 8,8, 6,5 Hz), 4,02 (2H, dd, J= 8,8, 4,0 Hz), 2,35-2,20 (2H, m) , 2,05-1, 92 (2H, m) , 1, 69-1, 80 (2H, m) , 1,07 (9H, s) . (2) 1-(4-N-Ciclobutilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxi- azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (966 mg, 1,86 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 29(1)) em tetra-hidrofurano anidro (40 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,20 ml, 2,20 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano: acetato de etilo (1:1) -> acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (433 mg, rendimento de 95%) , sob a forma de um sólido branco. 566 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,35 (1H, s) , 4,89-4,78 (1H, m) , 4, 60-4,45 (1H, m) , 4,34 (2H, dd, J= 9,3, 6,7 Hz), 3,96 (2H, dd, J= 9,3, 6,7 Hz), 2,32-2,48 (2H, m) , 2,48-2,32 (1H, m), 1,72-1,68 (2H, m). (3) 1-(4-N-Ciclobutilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanos- sulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (433 mg, 1,71 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 29(2)) em cloreto de metileno (10 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,30 ml, 5,12 mmol) e trietilamina (0,70 ml, 5,12 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (567 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,43 (1H, s) , 5,48-5,38 (1H, m) , 4, 60-4,38 (3H, m incluindo 4,47 (2H, dd, J= 9,6, 6,6 Hz)), 4,28 (2H, dd, J= 9,6, 4,6 Hz), 3,11 (3H, s) , 2,48 - 2,33 (2H, m) , 2,07-1, 92 (2H, m) , 1, 85-1, 68 (2H, m) . 567 ΡΕ1340757 (4) 3-Acetiltio-l-(4-N-ciclobutilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (567 mg, 1,71 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 29(3)) em dimetilformamida (10 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (1,17 g, 10,3 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (318 mg, rendimento de 75%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,33 (1H, s) , 4,62-4,37 (4H, m incluindo 4,54 (2H, t, J= 8,6 Hz), 4,00 (2H, dd, J= 8,6, 2,5 Hz)), 2,31-2,48 (5H, m incluindo 2,37 (3H, s) ) , 2,07-1, 93 (2H, m) , 1, 84-1, 67 (2H, m) . 568 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 30 3-Acetiltio-l-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2 — i1]azetidina CO-N NMe
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(4-metilpiperazino-l-car-bonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em tolueno (50 ml) foi adicionada uma solução de 1-metil-piperazina 0, 67M-trimetilalumínio em tolueno (7,40 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia 569 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (941 mg, rendimento de 85%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,62 (4H, dd, J= 8,0, 1,4
Hz), 7,50-7,36 (6H, m) , 7,08 (1H, s) , 4,10 (2H, dd, J= 10,3, 6,9 Hz), 4,00 (2H, dd, J= 10,3, 5,0 Hz)), 3,98-3,65 (4H, m) , 2, 63-2,42 (4H, m) , 2,37 (3H, m) , 1,06 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (941 mg, 1,81 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 30(1)) em tetra-hidrofurano anidro (47 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,17 ml, 2,17 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilotmetanol (3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil) -1,3-tiazol-2-il]azetidina (422 mg, rendimento de 83%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,01 (1H, s) , 4,88-4,80 (1H, m) , 4,26 (2H, dd, J= 8,6, 7,1 Hz), 3,96 (2H, dd, J= 570 ΡΕ1340757 8,6, 4,8 Hz), 3, 89-3, 68 (4H, m) , 2,80-2,58 (4H, m) , 2,31 (3H, s) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-[4-(4-metilpiperazino-l-carbo-nil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-[4-(4-metilpipera-zino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (422 mg, 1,49 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 30(2)) em cloreto de metileno (21 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,14 ml, 1,79 mmol) e tri-etilamina (0,25 ml, 1,79 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:metanol (3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-[4-(4-metilpiperazino-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (537 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,36 (1H, s) , 5,47-5,40 (1H, m) , 4,46 (2H, dd, J= 10,0, 6,6 Hz), 4,27 (2H, dd, J= 10,0, 4,3 Hz), 3,56-3,47 (4H, m) , 3,11 (3H, s) , 2,96-2,86 (4H, m), 2,81 (3H, s). 571 ΡΕ1340757 (4) 3-Acetiltio-l-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (537 mg, 1,49 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 20(3)) em dimetilformamida (16 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,02 g, 8,94 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-[4-(4-metilpiperazino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il] azetidina (261 mg, rendimento de 51%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,15 (1H, s) , 4,53 (2H, t, J= 8,5 Hz), 4,48-4,38 (1H, m) , 3,98 (2H, dd, J= 8,5, 5,4 Hz), 3, 96-3, 74 (4H, m), 2, 63-2,42 (4H, m) , 3,49 (6H, s) .
Exemplo de Referência 31 3-Acetiltio-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina 572 ΡΕ1340757
(1) l-t-Butoxicarbonil-3-metoxiazetidina
Uma solução de l-benzidril-3-hidroxiazetidina (10,0 g, 41,8 mmol) em metanol (300 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% (10,0 g) sobre carvão vegetal à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador. Ao filtrado foi adicionado anidrido di-t-butoxicarbónico (18,2 g, 83,6 mmol), e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar l-t-butoxicarbonil-3-hidroxiazetidina (7,05 g, rendimento de 97%).
Subsequentemente, a uma solução de 1-t-butoxi-carbonil-3-hidroxiazetidina (2,5 g, 14,4 mmol) em dimetil-formamida (125 ml) foi adicionado hidreto de sódio (dispersão em óleo a 55%) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura durante 10 minutos no banho de gelo, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 573 ΡΕ1340757 minutos. À mistura de reacção foi adicionado iodeto de metilo (1,79 ml, 28. mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura num banho de gelo durante 10 minutos, a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso solução aquosa de ácido acético a 10% num banho de gelo e a mistura de reacção foi agitada no banho de gelo durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar l-t-butoxicarbonil-3-metoxi-azetidina (2,18 g, rendimento de 81%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 4,16-4,10 (1H, m) , 4,09- 4,03 (2H, m), 3,82 (2H, dd, J=10,2, 4,4 Hz), 3,28 (3H, s), 1,44 (9H, s) . (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-car-bonil)-l,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de l-t-butoxicarbonil-3-metoxiaze-tidina (2,60 g, 13,9 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 31(1)) em 1,4-dioxano (26 ml) foi 574 ΡΕ1340757 adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (26 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada, e ao residuo foi adicionado acetato de etilo e éter diisopropílico. A mistura resultante foi filtrada, e o residuo foi lavado com éter diisopropilico e, em seguida, seco sob pressão reduzida, de modo a originar hidrocloreto de 3-metoxiazetidina (1,84 g, rendimento de 100%), sob a forma de cristais brancos.
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butildife-nilsililoxi-1- (4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,07 mmol) em tolueno (25 ml) foi adicionada uma solução de 3-metoxiazetidina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (3,21 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada num banho de água (80°C) durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (20 ml) e acetato de etilo (50 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma 575 ΡΕ1340757 coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (366 mg, rendimento de 67%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 64-7, 60 (4H, m) , 7,49- 7,38 (6H, m) , 7,36 (1H, s) , 4, 78-4,70 (2H, m) , 4,42-4,36 (1H, m) , 4,32-4,25 (1H, m) , 4,24-4,18 (1H, m) , 4,09 (2H, t, J=7,3 Hz), 4,03-3,96 (3H, m), 3,33 (3H, s), 1,07 (9H, s). (3) 3-Hidroxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tia-zol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (870 mg, 1,71 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 31(2)) em tetra-hidrofurano anidro (45 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,06 ml, 2,06 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (481 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,38 (1H, s) , 4,85-4,79 576 ΡΕ1340757 (1H, m) , 4,75 (1H, dd, J= 10,3, 5,9 Hz) , 4, 41 (1H, dd, J=ll ,0, 2, 9 Hz) , 4, 34-4, 25 (3H, m) , 4,22 (1H, f 11 / J 6 f 6 f 4,4 Hz) , 4,01 (1H, dd, J= 10,3, 2,9 Hz) , 3, 93 (2H, dd, OD II •~0 'RT 00 Hz) , 3,32 (3H, s) (4) 3-Metanossulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbo-nil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-[4-(3-metoxiaze-tidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (480 mg, 1,71 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 31(3) ) em cloreto de metileno (25 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (397 μΐ, 5,13 mmol) e tri- etilamina (71 9 μΐ, 5, 13 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (568 mg, rendimento de 96%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,46 (1H, s) , 5,45-5,39 577 ΡΕ1340757 (1Η, m) , 4,74 (1H, dd, J=10,6, 6,2 Hz), 4,47-4,37 (3H, m) , 4,33-4,19 (4H, m) , 4, 04-3, 99 (1H, m) , 3,33 (3H, s) , 3,10 (3H, s) . (5) 3-Acetiltio-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (560 mg, 1,61 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 31(4)) em dimetilformamida (28 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,10 g, 9,67 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo :metanol (97:3) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-[4-(3-metoxi-azetidino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (356 mg, rendimento de 68%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,43 (1H, s) , 4,73 (1H, dd, J=10,3, 5,1 Hz), 4,51 (2H, t, J=8,l Hz), 4,46-4,37 (2H, m) , 4,32-4,26 (1H, m), 4,21 (1H, tt, J=6,6, 4,4 Hz), 4,00- 578 ΡΕ1340757 3,93 (2Η, m) , 3, 78-3, 72 (1H, m) , 3,32 (3H, s) , 2,36 (3H, s) .
Exemplo de Referência 32 3-Acetiltio-l-(4-fenilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-fenilcarbamoil-l,3-tia-zol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em tolueno (100 ml) foi adicionada uma solução de anilina 0,67M-trimetilalumínio em benzeno (14,6 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (200 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de 579 ΡΕ1340757 sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildife-nilsililoxi-1-(4-fenilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (2,20 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,73-7,61 (6H, m) , 7,51- 7,30 (9H, m) , 7,14-7,08 (1H, m) , 4,82-4,76 (1H, m) , 4,14 (2H, dd, J= 15,2, 8,2 Hz), 4,06 (2H, dd, J= 8,9, 4,6 Hz), 1,08 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-(4-fenilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,20 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 32 (1)) em tetra-hidrofurano anidro (110 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (5,15 ml, 5,15 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 2 horas.
Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-(4-fenilcarba-moil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,18 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 9,04 (1H, s lg) , 7,76-7,65 580 ΡΕ1340757 (2Η, m) , 7,51-7,37 (3H, m) , 7,18-7,08 (1H, m) , 4,90-4,80 (1H, m) , 4,36 (2H, dd, J= 9,1, 6,6 Hz), 3,99 (2H, dd, J= 9,1, 4,3 Hz) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-(4-fenilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,18 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 32(2)) em cloreto de metileno (60 ml) foram adicionados cloreto de metanossul-fonilo (0,50 ml, 6,44 mmol) e trietilamina (0,90 ml, 6,44 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno:acetato de etilo (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,36 g, rendimento de 89%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,98 (1H, s lg) , 7,68 (2H, d, J= 7,6 Hz) , 7, 55 (1H, s) , 7, 36 (2H, d, J= 8,0 Hz), 7,18- 7, 08 (1H, m) , 5, 50 -5,40 (1H, m) , 4,51 (2H, ddd, J= 9,6, 6, 6, 1,0 Hz) , 4, 32 (2H, ddd, J= 9, 6, 4 ,3, 1,0 Hz), 3,12 (3H, s) . 581 ΡΕ1340757 (4) 3-Acetiltio-l-(4-fenilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il) azeti-dina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-(4-fenilcarbamoil-l, 3-tiazol-2-il)azetidina (1,28 g, 3,85 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 32 (3)) em dimetilformamida (40 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (2,60 g, 23,1 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (893 mg, rendimento de 70%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 9,01 (1H, s lg) , 7,68 (2H, d, J= 8,6 Hz), 7,35 (2H, t, J = 7,5 Hz), 7,20-7,28 (1H, m) , 4,58 (2H, t, J= 8,5 Hz), 4,52-4,02 (1H, m) , 4,04 (2H, dd, J= 8,5, 5,3 Hz), 2,83 (3H, s) .
Exemplo de Referência 33 3-Acetiltio-l-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina 582 ΡΕ1340757
AcS
CONH
OTBDMS (1) Éster de benzilo de ácido [2-(t-butildifenilsililo-xi) etil]carbâmico A uma solução de aminoetanol (2,0 g, 32,7 mmol) em cloreto de metileno (60 ml) foram adicionados éster de benzilo de ácido clorofórmico (5,6 ml, 41,3 mmol) e trietilamina (5,5 ml, 39,5 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (3:2) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido (2-hidroxi-etil)carbâmico (5,37 g, rendimento de 840%), sob a forma de um sólido branco.
Subsequentemente, a uma solução de éster de benzilo de ácido (2-hidroxietil)carbâmico (5,37 g, 27,5 mmol) em dimetilformamida (160 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (8,6 ml, 33,0 mmol) e imidazole (2,3 g, 33,8 mmol) num banho de gelo, e a mistura 583 ΡΕ1340757 foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso etanol e a mistura de reacção foi agitada durante 2 horas. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (5:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)etil]carbâmico (11,93 g, rendimento de 100%), sob a forma de um xarope incolor e transparente. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,64 (4H, d, J=6, 8 Hz), 7,46-7,28 (12H, m) , 5,10 (2H, s) , 3,73 (2H, t, J=4, 9 Hz), 3,35 (2H, q, J=4,9 Hz), 1,05 (9H, s) . (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi) etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Uma solução de éster de benzilo de ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)etil]carbâmico (3,01 g, 6,9 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 33(1)) em metanol (150 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (3,0 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o 584 ΡΕ1340757 filtrado concentrado sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 2-(t-butildifenilsili-loxi)etilamina (1,49 g, rendimento de 72%), sob a forma de um xarope castanho-pálido.
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butildi-fenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (1,16 g, 2,49 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (8,5 ml) foi adicionada uma solução de 2-(t-butildifenilsililoxi)etilamina 0,67M-tri-metilalumínio em benzeno (6,42 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (50 ml) e acetato de etilo (200 ml) à mistura de reacção, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azeti- 585 ΡΕ1340757 dina (1,68 g, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. -RMN (40 0 MHz r CDC13) : δ (ppm) 7, 74 (1H, t ig, J=4, 6 Hz), 7, 67 (4H, d, J: = 7 ,5 Hz) , 7,60 (4H, d, J=7, , 5 Hz) , 7,42-7,32 d 3H, m) , 4,78- "4, , 68 (1H, m) , 4,08 (2H , t, J= = 7,8 Hz), 4,03- 3, 98 (2H, m) , 3, 79 (2H, t, J=4,6 Hz) , 3, 56 (2H , t, J=4,6 Hz ) , 1,08 (9H, s) r 1,06 (9H, s) . (3) 3-Hidroxi-l-(4-hidroxietilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il)-azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-iljazetidina (1,68 g, 2,33 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 33(2)) em tetra-hidrofurano anidro (75 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (5,6 ml, 5,6 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1-(4-hidroxietilcarbamoil-l,3-tiazol-2-il) azetidina (481,2 mg, rendimento de 85%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 7,39 (1H, s) , 4,78 (1H, m) , 4,31 (2H, dd, J=8,4, 7,0 Hz), 3,89 (2H, dd, J=8,4, 4,8
Hz), 3,67 (2H, t, J=5,9 Hz), 3,46 (2H, t, J=5,9 Hz). 586 ΡΕ1340757 (4) 1-{4-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3- tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-hidroxietilcar-bamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (481,2 mg, 1,98 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 33(3)) em dimetilformamida (24,0 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (352 mg, 2,3 mmol) e imidazole (116,3 mg, 2,4 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso metanol e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (2: 3) como eluente de modo a proporcionar 1-{4-[2-(t-butildimetilsi-liloxi)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (531,1 mg, rendimento de 75%), sob a forma de um xarope incolor e transparente. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,60 (1H, t, J=5, 9 Hz) , 7,35 (1H, s), 4,88-4,76 (1H, m), 4,30 (2H, dd, J=9,8, 7,8 Hz) , 3, 93 (2H, dd, J=9, 8, 4, 9 Hz) , 3,75 (2H, t, J=5, 9 Hz) , 3,52 (2H, q, J=5, 9 Hz), 2,85 (1H , d, J=6, 8 Hz) , 0, 92 (9H, s) , 0,08 (6H, s) . 587 ΡΕ1340757 (5) 1-{4-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3- tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-{4-[2-(t-butildimetilsili-loxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (531,1 mg, 1,49 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 33(4)) em cloreto de metileno (26,6 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,3 ml, 3,9 mmol) e trietilamina (0,52 ml, 3,7 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol à mistura de reacção e a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil] -1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina (647,1 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. ^-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7 ,54 (1H, t ig, J= =5, 9 Hz) , 7,44 ( 1H, s), 5,46- -5, 39 (1H, m), 4,43 (2H, dd, J= = 9, 7, 6, 8 Hz) , 4 ,24 (2H, dd, J=9, 7 , 3,9 Hz) , 3,76 (2H, t, J= =5, 9 Hz) , 3, 53 ( 2H, t, J=5, 9 Hz) , 3,11 (3H , s), 0,93 (9H r s) r 0,08 (6H, s ) . 588 ΡΕ1340757 (6) 3-Acetiltio-l-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarba-moil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 1-{4-[2-(t-butildimetilsili-loxi)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxi-azetidina (647,1 mg, 1,49 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 33(5)) em dimetilformamida (32,0 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,28 mg, 8,9 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (3:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[2-(t-butildimetilsi-liloxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (398,2 mg, rendimento de 65%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,55 (1H, t lg, J=5,4 Hz), 7, 40 (1H, s) , 4,51 (2H, dd, J: = 8,8, 7,8 Hz) , 4,48-4,40 (1H, m) r 3, 96 (2H, dd, J=8,8, r 4,9 Hz) , 3, 75 (2H, t, J=5,4 Hz) , 3, 52 (2H, q, J=5, 4 Hz) , 2,37 (3H, s) , 0, 92 (9H, s), 0,08 (6H, s) . 589 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 34 3-Acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)pro-pilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
(1) Éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(t-butildifenilsili-loximetil)propil]carbâmico A uma solução de L-etilglicinol (2,00 g, 22,4 mmol) em cloreto de metileno (60 ml) foram adicionados éster de benzilo de ácido clorofórmico (3,84 ml, 26,9 mmol) e trietilamina (3,77 ml, 26,9 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(hidroximetil)propil]carbâmico (4,27 g, 85%), sob a forma de um óleo incolor. 590 ΡΕ1340757
Subsequentemente, a uma solução de éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(hidroximetil)propil]carbâmico (4,27 g, 19,1 mmol) em dimetilf ormamida (128 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (5,97 ml, 22,9 mmol) e imidazole (1,56 g, 22,9 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (6:1 -► 4:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-propil] carbâmico (9,48 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz , CDC13) : δ (ppm) 7,65-7, 60 (4H, m) , 7,44- 7,29 (11H, m) , 5,09 (2H, s), 4,92-4,86 (1H, d lg, J=8,8 Hz) , 3,71-3 ,47 (3H, m) , 1,68-1,60 (2H, m) , 1,05 (9H, s) , 0,88 (3H, t, J=7,3 Hz). (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[ (IS)-1- (t-butildifenilsililoximetil) propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Uma solução de éster de benzilo de ácido [ (IS)—1 — 591 ΡΕ1340757 (t-butildifenilsililoximetil)propil]carbâmico (3,70 g, 8,00 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 34(1)) em metanol (185 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (3,70 g) à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno:me-tanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar (lS)-l-(t-butildifenilsililoximetil)propilamina (2,32 g, rendimento de 88%), sob a forma de um óleo incolor.
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butildife-nilsililoxi-1- (4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (100 ml) foi adicionada uma solução de (IS)-1-(t-butildifenilsililoximetil)propilamina 0,67M-trimetilalumínio em benzeno (12,9 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (200 ml) à mistura de reacção num banho de gelo e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reacção foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e 592 ΡΕ1340757 solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (6:1 -* 2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-1-(t-butildifenil-sililoximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,52 g, rendimento de 79%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,57-7, 69 (8H, m) , 7,28- 7,46 (12H, m) , 7,36 (1H, s) , 4, 69-4,74 (1H, m) , 3,76-4,11 (5H, m) , 3,74 (1H, dd, J=10,3, 2,9 Hz), 3,70 (1H, dd, J=10,3, 4,1 Hz), 1,08 (9H, s) , 1,05 (9H, s) , 0,93 (3H, t, J=7,3 Hz). (3) 3-Hidroxi-l-{4-[(IS)-1-(hidroximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,52 g, 3,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 34(2)) em tetra-hidrofurano anidro (126 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (8,40 ml, 8,40 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica 593 ΡΕ1340757 utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[(IS)-1-(hidroximetil)-propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-azetidina (947 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,36 (1H, s) , 4,86-4,75 (1H, m) , 4,33 (2H, dd, J=8,l, 6,6 Hz), 4,02-3,91 (3H, m) , 3,79 (1H, dd, J=11,0, 1,2 Hz), 3,67 (1H, dd, J=11,0, 6,6 Hz), 3,19-3,10 (1H, s lg), 3,02-2,97 (1H, s lg), 1,73-1,64 (2H, m), 1,00 (3H, t, J=7,3 Hz). (4) 1—{4—[(IS)—1—(t-Butildimetilsililoximetil)-propilcarba moil] -1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(IS)-1-(hidroximetil )-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (940 mg, 3,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 34 (3)) em dimetilformamida (47 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (633 mg, 4,20 mmol) e imidazole (286 mg, 4,20 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia 594 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 1—{4 —[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcar-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (1,00 g, rendimento de 74%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) O LO l> -7,44 (1H, m) , 7, 36 (1H, s) , 4 ,86 -4,79 (1H, m) , 4,33 -4,27 (2H, m), 4,01- -3, 92 (3H, m) , 3, 72 (1H, dd, J= = 9,9, , 2,6 Hz) , 3,65 (1H, dd, J= = 9, 9, 4,0 Hz) , 1, ,70- -1, 60 (2H, m) , 0, 95 (3H, t, J=7,3 Hz) , 0, 92 (9H, s) , 0, 06 (6H, s) . (5) 1 — {4 —[(IS)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)propilcarba-moil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-{4-[ (IS)-1-(t-butildimetilsi-liloximetil)propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (1,00 mg, 2,59 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 34(4) ) em cloreto de metileno (50 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (602 μΐ, 7,78 mmol) e trietilamina (1,09 ml, 7,78 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de 595 ΡΕ1340757 cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (2:1 -> 1:2) como eluente de modo a proporcionar 1-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiaze-tidina (1,02 g, rendimento de 85%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 44 (1H, s) , 7,44- 7,38 (1H, m) , 5,45-5, , 39 (1H, m) , 4,47 -4, 40 (2H, m) , 4,29- 4,21 (2H, m), 4,02-3, 95 (1H, m) , 3 ,73 (1H , dd, J= =10, 3, 2,9 Hz) , 3,65 (1H, dd, J= =10, 3, 4 ,4 Hz) , 3, 11 (3H, s) , 0 ,95 (3H , t, J=7,3 Hz), 0,92 (9H, r S) , 0,06 (6H, s) (6) 3-Acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 1-{4-[ (IS)-1-(t-butildimetilsi-liloximetil)propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanos-sulfoniloxiazetidina (1,02 g, 2,20 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 34 (5)) em dimetilforma-mida (50 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,51 mg, 13,2 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi 596 ΡΕ1340757 purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (4:1 -» 2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol- 2-il} az< etidina (618 mg, rendimento de 63%), sob a forma de um óleo castanho-pálido. 1H-RMN (400 MH z, CDCls) : δ (ppm) 7, 43- 7,39 (1H, r m) , 7,40 (1H, s) , 4,53- 4,47 (2H, m) , 4,46- 4, 41 (1H, m) , 4,00 -3, 93 (3H, m) , 3,74- 3,70 (1H, m) , 3, 67- 3, 62 (1H, m) , 2,37 (3H, s), 1,72-1,56 (2H, m) , 0, 95 (3H, t, J= = 7,3 Hz) , 0, 91 (9H, s) , 0,06 (6H, s) .
Exemplo de Referência 35 3-Acetiltio-l-{4-[(IS)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina
AcS·
N
CONH
OTBDMS (1) Éster de benzilo de ácido [(IS)-2-(t-butildifenil-sililoxi)-1-metil-etil]carbâmico A uma solução de L-alaninol (2,00 g, 26,6 mmol) em cloreto de metileno (60 ml) foram adicionados éster de benzilo de ácido clorofórmico (4,57 ml, 32,0 mmol) e tri-etilamina (4,48 ml, 32,0 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a 597 ΡΕ1340757 mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (2:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [ (IS)-2-hidroxi-l-metiletil]carbâmico (4,61 g, rendimento de 83%), sob a forma de cristais brancos.
Subsequentemente, a uma solução de éster de benzilo de ácido carbâmico [(IS)-1-(hidroximetil)etil](4,61 g, 22,0 mmol) em dimetilformamida (140 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (6,87 ml, 26,4 mmol) e imidazole (1,80 g, 26,4 mmol) num banho de gelo. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (8:1 -► 6:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [(IS)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletil]carbâmico (10,7 g, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo incolor. 598 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 67-7, 60 (4H, m) , 7,42- 7,29 (11H, m) , 5,10 (2H, s) , 4, 96-4,85 (1H, s lg) , 3,91-3,80 (1H, m) , 3,67 (1H, dd, J=10,3, 2,6 Hz), 3,56 (1H, dd, J=10,3, 3,7 Hz), 1,55 (3H, d, J=ll,7 Hz), 1,09 (9H, s) . (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-2-(t-butildifenil-sililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Uma solução de éster de benzilo de ácido [ (lS)—2 — (t-butildifenilsililoxi)-1-metiletil]carbâmico (6,71 g, 15,0 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 35(1)) em metanol (340 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (6,71 g) à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno -► cloreto de metileno:metanol (85:15) como eluente de modo a proporcionar (1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metil-etil-amina (3,93 g, rendimento de 84%), sob a forma de um óleo amarelo.
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butildife-nilsililoxi-1- (4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (2,0 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (100 ml) foi adicionada uma solução de (IS)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletilamina 599 ΡΕ1340757 0,67M-trimetilalumínio em benzeno (12,9 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (200 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (6:1 -* 2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(1S)-2-(t-butildife-nilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azeti-dina (2,77 g, rendimento de 88%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (4 :00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,69-7, 65 (4H, m) , 7 1 \—1 ^0 7,57 (4H, m) , 7,46· -7,30 (12H, nf ), 7,35 (1H( - s) , 4, . 75- 4, 68 (1H, m) , 4,28 -4,18 (1H, m) , 4, 10-4,03 (H, m) , 4 / , 03- 3, 97 (2H, m) , 3,72 (1H, dd. J= 9, 9, 4,1 Hz) , 3 ,64 (1H, dd, , J= 9, 9, 3,3 Hz) , 1,31 (3H, d, J= = 6, 6 Hz) , 1/09 (9H, s) , 1, 05 (9H, s) . (3) 3-Hidroxi-l-[4-((IS)-2-hidroxi-l-metiletilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina 600 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,77 g, 3,77 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 35(2)) em tetra-hidro-furano anidro (140 ml) foi adicionada uma solução de fluo-reto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (9,06 ml, 9,06 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 3,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-[4-((IS)-2-hidroxi-l-metiletilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (911 mg, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,34 (1H, s) , 7, 26- -7,1 \—1 s lg) , , 4,86-4,77 (1H, - m) , 4,32 (2H, dd, J = 8 ,8, 6, Hz) , 4,24-4 ,12 (1H, m), 3, 99-3, 92 (2H, m) , 3,79- 3, 71 (1H m) , 3 ,66-3, 58 (1H, m), 3,28 -3,21 (1H, s lg), 2, 99- 2, 92 (1H d lg, J=5, 1 Hz), 1,25 (3H, d, J=7 ,2 Hz) e (4) 1 — {4 —[(IS)-2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarba-moil]-l,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-[4-((IS)-2-hidroxi-l-metiletilcarbamoil )-1,3-tiazol-2-il]azetidina (910 mg, 3,54 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referên- 601 ΡΕ1340757 cia 35(3)) em dimetilformamida (46 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (586 mg, 3,89 mmol) e imidazole (265 mg, 3,89 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1 -► 1:4) como eluente de modo a proporcionar 1 — {4 — [(IS)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3- tiazol-2-il} -3-hidroxiazetidina (935 mg, rendimento de 71%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,48-7,42 (1H, d lg, J = 8,8 Hz), 7,36 (1H, s), 4,86-4,79 (1H, m), 4,30 (2H, ddd, J=15, 6, 5,9, 2, 9 Hz), 4,34-4,27 (1H, m), 3, 97-3,91 (2H, m) , 3,68 (1H, dd, J=9,5, 4,4 Hz), 3,63 (1H, dd, J=9,5, 2,9 Hz), 1,25 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,93 (9H, s), 0,07 (6H, s). (5) 1 — {4 —[(IS)-2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil] -l,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-{4-[ (IS)-2-(t-butildimetilsi-liloxi)-1-metiletilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il]-3-hidroxi-azetidina (930 mg, 2,50 mmol) (obtida tal como descrito no 602 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 35(4)) em cloreto de metileno (47 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (480 μΐ, 6,20 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 35(4)) e trietilamina (869 μΐ, 6,20 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (2:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar 1-{4-[ (IS)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxi- azet idina (1,16 g, rendimento de 100 %) , sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 43 (1H, s) , 7, 43 -7,39 (1H, s lg), 5,44 -5 ,39 (1H, m) , 4 ,43 (2H , ddd, J=6, 6, 5, 9, 1,5 Hz), 4,27-4, 21 (2H, m), 4,21-4, 13 (1H, m) , 3, 68 (1H, dd, J=9, 5, 4,4 Hz) , 3,63 (1H, dd, J=9 ',5, 2, 9 Hz ), 3, 11 (3H, s) , 1,25 (3H, d, J= 6,6 Hz), 0, 93 (9H, s) , r 0,1 07 (6H, s) . (6) 3-Acetiltio-l-{4-[(IS)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 1-{4-[(IS)-2-(t-butildimetilsi- 603 ΡΕ1340757 liloxi)-1-metiletilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanos-sulfoniloxiazetidina (1,16 g, 2,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 35(5)) em dimetilfor-mamida (60 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,71 mg, 15,0 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (4:1 -► 2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[(IS)- 2- (t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tia-zol-2-il}azetidina (709 mg, rendimento de 60%), sob a forma de um óleo castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,45-7,40 (1H, s lg) , 7,39 (1H, s), 4,54-4,47 (2H, m) , 4,46-4,41 (1H, m) , 4,20-4,15 (1H, m) , 4,00-3, 93 (2H, m) , 3,67 (1H, dd, J=10,3, 4,4 Hz), 3,62 (1H, dd, J =10,3, 3,7 Hz), 2,37 (3H, s) , 1,24 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,92 (9H, s), 0,07 (6H, s).
Exemplo de Referência 36 3- Acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoxi)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina 604 ΡΕ1340757
AcS
N
OTBDMS (1) Éster de benzilo de ácido [ (IS)-1-(t-butildifenilsi-liloxi)-2-metilpropil]carbâmico A uma solução de L-valinol (2,00 g, 19,4 inmol) em cloreto de metileno (60 ml) foram adicionados éster de benzilo de ácido clorofórmico (3,32 ml, 23,3 mmol) e trietil-amina (3,27 ml, 23,3 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 ->· 1:2) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(hidroximetil)-2-metilpropil]-carbâmico (4,56 g, rendimento de 99%), sob a forma de cristais brancos.
Subsequentemente, a uma solução de éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(hidroximetil)-2-metilpropil]carbâmico (4,56 g, 19,2 mmol) em dimetilformamida (140 ml) foram 605 ΡΕ1340757 adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (6,00 ml, 23,1 mmol) e imidazole (1,57 g, 23,1 mmol) num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (8:1 -► 6:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(t-butildifenilsi-liloxi)-2-metil-propil]-carbâmico (10,1 g, rendimento de 100%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 65-7, 60 (4H, m) , 7,45-7,29 (11H, m) , 5,09 (2H, s) , 4, 92-4,84 (1H, d lg, J=9,5
Hz), 3,71 (1H, dd, J=10,3, 4,4 Hz), 3,66 (1H, dd, J=10,3, 4,4 Hz), 3,55-3,46 (1H, m) , 1, 99-1,87 (1H, m) , 1,05 (9H, s) , 0,89 (6H, d, J=7,3 Hz). (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-1-(t-butildifenil-sililoxi)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Uma solução de éster de benzilo de ácido [ (IS)—1 — (t-butildifenilsililoxi)-2-metilpropil]carbâmico (7,14 g, 15,0 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 36(1)) em metanol (215 ml) foi submetida a hidrogenação 606 ΡΕ1340757 catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (7,14 g) à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno:metanol (98:2 -► 9:1) como eluente de modo a proporcionar (IS)-1-(t-butil-difenilsililoximetil)-2-metilpropilamina (3,73 g, rendimento de 73%), sob a forma de um óleo incolor.
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butildife-nilsililoxi-1- (4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (2,0 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (100 ml) foi adicionada uma solução de (IS)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilpropilamina 0,67M-trimetilalumínio em benzeno (12,9 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (200 ml) foram adicionados à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão 607 ΡΕ1340757 reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (6:1 -► 4:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-1-(t-butildife-nilsililoxi)-2-metilpropilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azeti-dina (1,98 g, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 69-7,56 (8H, m) , 7,44- 7,31 (12H , m) , 7,37 (1H, s), 4,74-4, 67 (1H, m), 4,09- 3, 94 (4H, m) , 3, 87- -3, 78 (1H, m) , 3,85 (1H, dd L, J= 10,3, 2,1 Hz) , 3, 67 (1H, dd, J=10, 3, 3, 9 Hz), 2, 17-2, , 05 (1H, m) , 1,09 (9H, s) , 1,06 (9H, s) , 0,99 (3H, d, J=6 ,9 Hz) , 0,97 (3H , d, J=6, 8 Hz) • (3) 3-Hidroxi- -1 - { 4 - [ (IS)-1- (hidro xime' til) -2-metilpropilcar- bamo i 1 ] — 1 ,3-tiazol- 2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-1-(t-butildifenilsililoxi)-2-metil-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,98 g, 2,60 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 36(2)) em tetra-hidrofurano anidro (100 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (6,23 ml, 6,23 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de 608 ΡΕ1340757 etilormetanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1-{4-[(IS)-1-(hidroximetil)-2-metilpropilcarba-moil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (755 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,34 (1H, s) , 7,35-7,31 (1H, s lg) , 4, 84-4,75 (1H, m) , 4,32 2H, dd, J=8,8, 6,8 Hz), 3,97 (1H, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 3,94 (1H, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 3,87-3,77 (2H, m), 3,73 (1H, dd, J=10,7, 6,8 Hz), 3,33-3,21 (1H, s lg) , 3,24-2, 94 (1H, s lg), 1,98 (1H, septeto, J=6,8
Hz), 1,01 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,98 (3H, d, J=6,8 Hz). (4) 1 — {4 —[(IS)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-2-metilpro- pilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(IS)-1-(hidro ximetil ) -2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (750 mg, 2,60 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 36(3)) em dimetilformamida (38 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (470 mg, 3,12 mmol) e imidazole (212 mg, 3,12 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia 609 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 1—{4 —[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpro-pilcarbamoil]-1, 3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (700 mg, rendimento de 67%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,54-7,50 (1H, d lg, J=9, 8
Hz) , 7,37 (1H, s) , 4,8' 6-4,80 (1H, m) , 4,35- -4,27 (2H, m) 3, 98- -3, 92 (2H, m) , 3, 84 (1H, dd, J= = 9,8, 2,9 Hz) , 3, 84- •3,7' (1H, m) , 3, 62 (1H, dd, J=9,8, • 3,9 Hz) , 2,00 (1H, septeto J=6, í 5 Hz) , 0,98 (3H , d, J=6, 8 Hz) , 0, 96 (3H, d, J = 6, 8 Hz) 0, 91 (9H, s), 0 ,06 (6H, s) . (5) 1—{4—[(IS)—1—(t-Butildimetilsililoximetil)-2-metilpro- pilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiaze-tidina A uma solução de 1-{4-[(IS)-1-(t-butildimetil-sililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (700 mg, 1,75 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 36(4)) em cloreto de metileno (35 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (406 μΐ, 5,25 mmol) e trietilamina (736 μΐ, 5,25 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, 610 ΡΕ1340757 seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar 1-{4-[ (IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfo- nilox iazetidina (895 mg, rendimento de 100%) , sob a forma de um óleo amare lo. 1H-RMN (400 MHz, CDC1 3) : δ (ppm) 7,50· -7, 45 (1H, d ig, J=9, 5 Hz) , 7,44 (1H, s) , 5, 45-5,39 (1H, m ) , 4, 43 (2H, ddd, J=ll, 0, 6,6, 1,5 Hz) , 4, 24 (2H, ddd, J= 11, 0, 4,4, 1,5 Hz) , 3, 83 (1H, dd, J= 10,7, 2, 6 Hz), 3, , 84-3 ,7S > (1H, m) , 3, 62 (1H, dd, J =10,7, 4,8 Hz) , 3,1 .1 (3H, s ;), 2 ,04 -1, 94 (1H, m) , 0, 98 (3H, d, J=7,3 H: z), 0 ,96 (3H, d, J=6 ,6 Hz) r 0, 91 (9H , s) , 0,06 (6H, s) . (6) 3-Acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 1-{4-[ (IS)-1-(t-butildimetilsi-liloximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina (890 mg, 1,75 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 36(5)) em dimetil-formamida (45 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,20 g, 10,5 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica 611 ΡΕ1340757 foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (3:1 -* 1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (502 mg, rendimento de 63%), sob a forma de um óleo castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,50-7,45 (1H, d lg, J=9,5
Hz), 7,40 (1H, s), 4,54-4,43 (2H, m), 4,47-4,40 (1H, m) , 4,00-3,93 (2H, m) , 3,86-3,78 (2H, m) , 3,64-3,59 (1H, m) , 2,04-1,94 (1H, m) , 0,98 (3H, d, J=6, 6 Hz) , 0, 96 (3H, d, J=6,6 Hz), 0, 91 (9H, s), 0,05 (6H, s) .
Exemplo de Referência 37 3-Acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina
(1) Éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(t-butildifenil-sililoximetil)-3-metilbutil]carbâmico 612 ΡΕ1340757 A uma solução de L-leucinol (1,00 g, 8,53 iranol) em cloreto de metileno (30 ml) foram adicionados éster de benzilo de ácido clorofórmico (1,46 ml, 10,2 mmol) e trietilamina (1,43 ml, 10,2 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(hidroximetil)-3-metilbutil]-carbâmico (2,31 g, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo incolor.
Subsequentemente, a uma solução de éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(hidroximetil)-3-metilbutil]carbâmico (4,84 g, 19,3 mmol) em dimetilformamida (145 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (6,01 ml, 23,1 mmol) e imidazole (1,57 g, 23,1 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 8 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com 613 ΡΕ1340757 solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (19:1 -► 7:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [(IS)-1-(t-butildifenilsi-liloximetil)-3-metilbutil]carbâmico (9,22 g, rendimento de 98%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,65-7,61 (4H, m) , 7,45-7,32 (11H ,m), 5,09 (2H, d, J=2,9 Hz), 4,85-4,80 (1H, d lg, J=8, 8 Hz), 3, 86-3, 77 (1H, m) , 3,70 (1H, dd, J=9,8, 2,9 Hz), 3,59 (1H, dd, J=9,8, 2,9 Hz), 1, 63-1,54 (1H, m) , 1,43-1,37 (2H, m) , 1,06 (9H, s) , 0,91 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,89 (3H, d, J=6,8 Hz). (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[(1S)-1-(t-butildifenil-sililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}aze-tidina
Uma solução de éster de benzilo de ácido [ (IS)—1 — (t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutil]carbâmico (7,35 g, 15,0 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 37(1)) em metanol (220 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (7,35 g) à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. 614 ΡΕ1340757 O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno:me-tanol (98:2 -► 9:1) como eluente de modo a proporcionar (IS)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutilamina (4,50 g, rendimento de 84%), sob a forma de um óleo incolor .
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butil-difenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azeti-dina (2,00 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (100 ml) foi adicionada uma solução de (IS)-1-(t-butildifenilsililoximetil) -3-metilbutilamina 0,67M-trimetilalumínio em benzeno (12,9 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (200 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada no banho de gelo durante 0,5 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (6:1 -* 4:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-1-(t-butildifenil- 615 ΡΕ1340757 sililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze-tidina (2,14 g, rendimento de 64%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,68-7,62 (4H, m) , 7, 62- 7,56 (4H, m) , 7,46-7,28 (12H, m) , 7,37 (1H, s) , 4,74 -4, 69 (1H, m) , 4,24-4,16 (1H, m) , 4,11-4,03 (2H, m) , 1,00 (1H, dd, J=10,7, 4,9 Hz), 3, 98 (1H, dd, J=11,7, 4,9 Hz) , 3,72 (1H, dd, J=9, 8, 3,9 Hz ), 3,67 (1H, dd, J= = 9,8, 2, 9 Hz) , 1, 65-1,46 (3H, m) , 1,08 (9H, s) , 1,05 (9H, s) , 0,94 (3H, d, J=5,9 Hz), 0,92 (3H, d, J=5,9 Hz). (3) 3-Hidroxi-l-{4-[(IS)-1-(hidroximetil)-3-metilbutilcar-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutilcarba-moil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,14 g, 3,72 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 37 (2)) em tetra-hidrofurano anidro (107 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (8,94 ml, 8, 94 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 4 horas. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de eti-lo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hi-droxi-l-{4-[(IS)-1-(hidroximetil)-3-metil-butilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (825 mg, rendimento de 74%), sob a forma de um óleo amarelo. 616 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,36 (1H, s), 7,24-7,17 (1H, d ig, J=8 ,8 Hz) , 4,85-4,77 (1H, m) , 4, 32 (2H, dd, J=8, 8, 7,3 Hz), 4, 20-4 ,12 (1H, m), 3, 96 (2H, ddd , J=8,8, 8,8, 4, 4 Hz) , 3, r 77 (1H, dd, J=10,9, 1,3 H; 7-) , 3 ,61 (1H, dd, O \—1 II , 9, 5, 9 Hz) , : 3, 17- -3,08 (1H, s lg) r 3, 08- -2, 95 i (1H, s ig), 1, 75-1, 65 (1H , m) \—1 1 LO LO \—1 (1H, m) , 1, 46-1 ,37 (1H, m) , 0,95 (3H t d- f J= = 6, 6 Hz), 0,94 (3H, d, 0Γ = 6, 6 Hz) . (4) 1—{4 —[(IS)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-3-metilbu- tilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(IS)-1-(hidroxi-metil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (820 mg, 2,74 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 37 (3)) em dimetilformamida (41 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (495 mg, 3,29 mmol) e imidazole (224 mg, 3,29 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada no banho de gelo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar 1—{4 —[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metil- 617 ΡΕ1340757 butilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (731 mg, rendimento de 65%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,40-7,37 (1H, s lg) , 7,36 (1H, s), 4, 87-4,79 (1H, m) , 4,31 (2H, dd, J=15,0, 8,4 Hz), 4,21-4,12 (1H, m) , 3, 98-3, 92 (2H, m) , 3, 68-3, 65 (2H, m) , 1, 68-1, 60 (1H, m) , 1,56-1,40 (2H, m) , 0,95 (3H, d, J=6, 6
Hz), 0,94 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,92 (9H, s,), 0,06 (6H, s). (5) 1—{4 —[(IS)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-3-metilbu- tilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidi- na A uma solução de 1-{4-[ (IS)-1-(t-butildimetilsi-liloximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (730 mg, 1,76 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 37 (4)) em cloreto de metileno (37 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (409 μΐ, 5,29 mmol) e trietilamina (741 μΐ, 5,29 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (2:1 -► 1:2) como eluente de modo 618 ΡΕ1340757 a proporcionar 1-{4-[ (ls)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfo-niloxiazetidina (846 mg, rendimento de 98%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,43 (1H, s), 7,36-7,30 (1H, d lg, J=9,5 Hz), 5,45-5,39 (1H, m) , 4,47-4,39 (2H , m) 4,28- 4,20 (2H, m) , 4,20-4,14 (1H, m ), 3,66 (2H, d, J=3, Hz) , 3, 11 (3H, s), 1,70-1,58 (1H, m) , 1,53 (1H, ddd J=13, 9, 8, 8, 5, 9 Hz) , 1,44 (1H, ddd, J=13,9, 8,8, 5, 9 Hz) 0, 95 (6H, t, J=6,3 Hz), 0,92 (9H, s), 0,09 (6H, s) 1 ' (6) 3-Acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 1-{4-[ (IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil) -3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina (840 mg, 1,71 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 37 (5)) em dimetil-formamida (42 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,17 mg, 10,2 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel 619 ΡΕ1340757 de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[(IS)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metil-butilcarbamoil]- 1,3-t ;ia zol -2-il}azetidina (452 mg, rendimento de 56%) , sob a forma de um óleo castanho-pálido. 1H-RMN (40 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 39 (1H, s) , 7, 36 - 7,31 (1H, d ig, J=9,5 Hz), 4, 54-4,39 (3H , m) , 4,20- -4,11 (1H, m) , 3, 97 (1H, dd, J=8,8 Hz), 3,96 (1H, dd, J=8,8 Hz) , 3, 66 (2 H, d, J= =3, 7 Hz), 1,70-1,60 (1H, m), 1,58-1,40 (2 H, m) , 0, 95 (3H, d, J= = 6,6 Hz), 0,94 (3H, d, J = 6,6 Hz) , 0, 91 (9H, s) , 0,05 (6H, s) .
Exemplo de Referência 38 3-Acetiltio-l-{4-[(IS,2S)—1—(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina
N
CONH ^wdJTBDMS μ
AcS
N '/ (1) Éster de benzilo de ácido [(IS,2S)-1-(t-butildifenilsi-liloximetil)-2-metilbutil]carbâmico A uma solução de L-isoleucinol (2,20 g, 18,8 mmol) em cloreto de metileno (66 ml) foram adicionados éster de benzilo de ácido clorofórmico (3,22 ml, 22,5 mmol) e trietilamina (3,15 ml, 22,5 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 620 ΡΕ1340757 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -> 1:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [(IS, 2S)-1-(hidroximetil)-2-metilbu-til]carbâmico (4,17 g, rendimento de 88%), sob a forma de um óleo incolor.
Subsequentemente, a uma solução de [(2S)-(N-benziloxicarbonil)-2-amino-3-metilbutanol (4,17 g, 16,6 mmol) em dimetilformamida (125 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (5,18 ml, 19,9 mmol) e imidazole (1,35 g, 19,9 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (19:1 -► 5:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de 621 ΡΕ1340757 ácido [(IS,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbu-til]carbâmico (6,72 g, rendimento de 83%), sob a forma de cristais incolores. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 65-7, 60 (4H, m) , 7,45- 7,30 (11H, m) , 5,09 (2H, m) , 4, 93-4,84 (1H, d lg, J=8,8
Hz), 3,74-3,60 (2H, m) , 3,60-3,52 (1H, m), 1,74-1,64 (1H, m), 1,53-1,44 (1H, m) , 1,14-1,06 (1H, m), 1,04 (9H, s), 0,92-0,8 (6H, m). (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4 —[(1S,2S)-1-(t-butildife-nilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Uma solução de éster de benzilo de ácido [ (IS,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutil]carbâmico (6,72 g, 13,7 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 38(1)) em metanol (200 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (6,72 g) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno rmetanol (98:2 -► 9:1) como eluente de modo a proporcionar (1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2- metilbutilamina (4,04 g, rendimento de 83%).
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butil- 622 ΡΕ1340757 difenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azeti-dina (2,00 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (100 ml) foi adicionada uma solução de (IS,2S)-1-(t-butildifenilsili-loximetil)-2-metilbutilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (12,9 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (200 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (6:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenil-sililoxi-l-{4-[ (IS,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,89 g, rendimento de 57%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,70-7,57 (8H, m) , 7,46- 7,26 (12H, m) , 7,36 (1H, s) , 4,73-4, 67 (1H, m) , 4,09-3,94 (4H, m) , 3, 93-3, 86 (1H, m) , 3,84 (1H, dd, J=10,7, 2,0 Hz), 3,67 (1H, dd, J=10,7, 3,4 Hz), 1, 90-1,82 (1H, m) , 1,22-1,11 623 ΡΕ1340757 (1Η, m) , 1,07 (9H, s) , 1,04 (9H, s) , 0,93 (3H, d, J=6, 9
Hz) , 0, 90 (3H, t, J=7,3 Hz) . (3) 3-Hidroxi-l-{4-[(IS,2S)—1—(hidroximetil)-2-metilbutil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(IS,2 S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutilcar-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,89 g, 2,45 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 38 (2)) em tetra-hidrofurano anidro (95 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra- hidrofurano (5,87 ml, 5,87 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo de um dia para 0 outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[(IS,2S)-1-(hidroximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1, 3-tiazol-2-il}azetidina (811 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,37 (1H, s) , 7,35-7,31 (1H, s lg) , 4,87-4,78 (1H, m) , 4,33 (2H, dd, J=10,3, 6,6 Hz), 4,00-3, 93 (2H, m) , 3, 92-3, 86 (1H, m) , 3, 86-3, 78 (1H, m) , 3, 78-3, 70 (1H, m), 3, 05-2, 98 (1H, s lg), 2,75-2,71 (1H, d lg, J=7,3 Hz), 1,80-1,70 (1H, m) , 1,59-1,50 (1H, m) , 1,27-1,13 (1H, m) , 0,98 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,93 (3H, t, J=7,3 Hz). 624 ΡΕ1340757 (4) 3-Hidroxi-l-{4 —[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoxime-til)-2-metilbutilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(IS, 2S)-1-(hidroximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}aze-tidina (1,34 g, 4,48 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 38(3)) em dimetilformamida (67 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (810 mg, 5,37 mmol) e imidazole (527 mg, 5,37 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada no banho de gelo durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno: acetonitrilo (5:1 -* 3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[(IS,2S)-1-(t-butildime-tilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-azetidina (1,35 g, rendimento de 97%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,57-7,51 (1H, d lg, J=8,8
Hz), 7,36 (1H, s) , 4,86-4,79 (1H, m) , 4,34-4,26 (2H, m) 3,98-3,91 (2H, m) , 3,90-3,84 (1H, m) , 3,84 (1H, dd, J=9, 8 2,4 Hz), 3 ,63 (1H, dd, J=9,8, 3,9 Hz), 2,63-2,59 (1H, d lg 625 ΡΕ1340757 J=5,9 Hz), 1,80-1,71 (1H, m) , 1,60-1,51 (1H, m), 1,20-1,12 (1H, m) , 0,95 (3H, d, J=6, 8 Hz), 0,91 (9H, s) , 0,90 (2H, t, J=6,8 Hz), 0,05 (6H, s) . (5) 1—{4—[ (1S,2S)—1—(t-Butildimetilsililoximetil)-2-metil- butilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazeti-dina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(IS,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,35 g, 3,26 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 38(4)) em cloreto de metileno (68 ml) foram adicionados cloreto de metanossul-fonilo (758 μΐ, 9,79 mmol) e trietilamina (1,37 ml, 9,79 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (2:1 -> 1:2) como eluente de modo a proporcionar 1-{4-[ (IS,2S)-1-(t-butildi-metilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,55 g, rendimento de 97%), sob a forma de um óleo amarelo. 626 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,50-7,46 (1H, d lg, J=9, 8
Hz) , 7,43 (1H, s) , 5,45-5 ),39 (1H, m) , 4,45 (1H, . dd, J= = 8,8, 6, 8 Hz) , 4,42 (1H, dd, J= 8,8, 6, 8 Hz) , 4,26 (1H , dd, J= = 9,8, 3,9 Hz) , 4,23 (1H, dd, J: = 9,8, - 3,Ç ) Hz; ), 3,91-3, 85 ( 1H, m) , 3, 84 (1H, dd, J=10 ,3, 2, 4 Hz ), 3 , 63 (1H, dd, J=10 ,3, 3,4 Hz) , 3, 11 (3H, s) , 1,80- 1,71 (1H , m) , 1,59-1, 51 ( 1H, m) , 1,22 -1,12 (1H, m) , 0, 95 (3H, d, J=3, 8 Hz), 0, 91 ( 9H, s) , 0, 91 (3H, t, J: = 6, 8 Hz) , 0 , 05 (6H, s) . (6) 3-Acetiltio-l-{4 —[(IS,2S)-1-(t-butildimetilsililoxime-til)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 1-{4-[ (IS,2S)-1-(t-butildimetil-sililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,55 g, 3,15 inmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 38 (5)) em dimetil-formamida (78 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (2,16 g, 18,9 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1 -► 2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4- 627 ΡΕ1340757 [(IS,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metil-butilcar-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (910 mg, rendimento de 61%), sob a forma de um óleo castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,52-7,46 (1H, d lg, J=9,5 Hz), 7,39 (1H, s), 4,54-4,40 (3H, m) , 4,00-3, 92 (2H, m) , 3,91-3,84 (1H, m) , 3,83 (1H, dd, J=10,3, 2,2 Hz), 3,63 (1H, dd, J=10,3, 3,7 Hz), 2,37 (3H, s), 1,81-1,70 (1H, m), 1,58-1,50 (1H, m) , 1,20-1,09 (1H, m) , 0,95 (3H, d, J=6, 6 Hz), 0,91 (9H, s), 0,90 (3H, t, J=7,3 Hz), 0,05 (6H, s).
Exemplo de Referência 39 3-Acetiltio-l-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildi-metilsililoximetil)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina
.OTBDMS
AcS
OTBDMS (1) Éster de metilo de t-butildifenilsililoxi-N-carboben-ziloxi-L-serina A uma solução de N-carbobenziloxi-L-serina (4,0 g, 16,7 mmol) em benzeno (200 ml) e metanol (50 ml) foi adicionada uma solução de trimetilsilildiazometano 2M em hexano (10,9 ml, 21,7 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi 628 ΡΕ1340757 purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar éster de metilo de N-carbobenziloxi-L-serina (4,40 g, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo incolor.
Subsequentemente, a uma solução de éster de metilo de N-carbobenziloxi-L-serina (4,40 g, 16,7 mmol) em dimetilformamida (210 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (5,20 ml, 20,0 mmol) e imidazole (1,36 g, 20,0 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (8:1 -► 6:1) como eluente de modo a proporcionar éster de metilo de t-butil-difenilsililoxi-N-carbobenziloxi-L-serina (18,8 g, 99%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,61-7,56 (4H, m) , 7,45-7,31 (11H, m) , 5, 69-5, 62 (1H, d lg, J=8,8 Hz), 5,12 (2H, s), 4,45 (1H, dt, J=8,1, 2,9 Hz), 4,09 (1H, dd, J=10,3, 2,9 Hz), 3,90 (1H, dd, J=10,3, 2,9 Hz), 3,74 (3H, s). 629 ΡΕ1340757 (2) Éster de benzilo de ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etil]carbâmico A uma solução de éster de metilo de t-butil-difenilsililoxi-N-carbobenziloxi-L-serina (11,5 g, 24,8 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 39(1)) numa mistura de tetra-hidrofurano (115 ml) e etanol (230 ml) foram adicionados boro-hidreto de sódio (1,88 g, 49,6 mmol) e cloreto de litio (2,10 g, 49,6 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre cloreto de metileno e solução aquosa de ácido acético a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (3:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(hidroximetil)etil]carbâmico (9,26 g, rendimento de 81%), sob a forma de um óleo incolor.
Subsequentemente, a uma solução de éster de benzilo de ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(hidroximetil ) etil ] carbâmico (9,26 g, 20,0 mmol) em dimetilformamida (280 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo 630 ΡΕ1340757 (7,79 ml, 30,0 mmol) e imidazole (2,04 g, 30,0 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (19:1 -► 9:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etil]carbâmico (13,6 g, 97%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 65-7, 60 (8H, m) , 7,44- 7,29 (17H, m) , 5,05 (2H, s) , 4, 99-4, 93 (1H, d lg, J=8,8
Hz), 3, 94-3, 87 (1H, m) , 3,85 (2H, dd, J=9,8, 3,9 Hz), 3,76 (2H, dd, J= 9, 8, 5,9 Hz), 1,02 (18H, s) . (3) 3-t-Butildifeniloxi-l-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Uma solução de éster de benzilo de ácido [2 — (t — butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etil]-carbâmico (13,6 g, 19,5 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 39(2)) em metanol (410 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de paládio 631 ΡΕ1340757 a 10% sobre carvão vegetal (13,6 g) à temperatura ambiente durante 3,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno: metanol (98:2 -► 9:1) como eluente de modo a proporcionar 2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsi-liloximetil)etilamina (9,34 g, rendimento de 84%), sob a forma de um óleo incolor.
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butildi-fenilsililoxi-l-(4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (100 ml) foi adicionada uma solução de 2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsi-liloximetil)etilamina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (12,9 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava comple ta, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (200 ml) e acetato de etilo (200 ml) à mistura de reacção, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão 632 ΡΕ1340757 reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (6:1 -► 4:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifeniloxi-l-{4-[2-(t-butildifenilsililo-xi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (3,19 g, rendimento de 75%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,70-7, 65 (8H, m) , 7,59- 7,55 (4H, m) , 7,44-7,28 (18H, m) , 7,33 (1H, s) , 4,71-4,64 (1H, m) , 4,31-4,22 (1H, m) , 4, 04-3, 97 (4H, m) , 3,94 (2H, dd, J=9,2, 4,4 Hz), 3,82 (2H, dd, J=9,2, 6,2 Hz). (4) 3-Hidroxi-l-{4-[2-hidroxi-l-(hidroximetil)etilcarbamoil ]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifeniloxi-l-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoil ] -1 , 3-tiazol-2-il } azetidina (3,19 g, 3,23 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 39(3)) em tetra-hidrofurano anidro (160 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (11,6 ml, 11,6 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (9:1 ->· 8:2) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1—{4 —[2-hidroxi-l-(hidroximetil)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol- 633 ΡΕ1340757 2-il}azetidina (1,21 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) : δ (ppm) 7,47-7,41 (1H, d lg, J=8,8 Hz), 7,42 (1H, s), 5,84 (1H, d, J=6, 6 Hz), 4,80 (2H, t, J=5,5 Hz), 4, 66-4,58 (1H, m) , 4,28-4,21 (2H, m) , 3,88- 3,81 (1H, m) , 3,80 (2H, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 3,53 (2H, m) , 3, 45 (2H, m) . (5) 1 — (4 —[2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsili-loximetil)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazeti-dina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[2-hidroxi-l-(hidroximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (750 mg, 2,74 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 39(4)) em dimetilformamida (38 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (951 mg, 6,31 mmol) e imidazole (430 mg, 6,31 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi agitada no banho de gelo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporei- 634 ΡΕ1340757 onar 1 — {4 —[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsi-liloximetil)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiaze-tidina (070 mg, rendimento de 71%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) : δ (ppm) 7, 62-7,57 (1H, d lg, J=8,1 Hz), 7,38 (1H, s) , 4,87-4,78 (1H, m) , 4,30 (2H, dd, J=10,3, 6,6 Hz), 4,12-4,04 (1H, m) , 3,93 (2H, dd, J=9,5, 4,4 Hz), 3,84 (2H, dd, J=9,5, 3,7 Hz), 3,62 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 2,26-2,22 (1H, d lg, J=6, 6 Hz), 0,92 (18H, s) , 0, 08 (12H, s) . (6) 1-{4-[2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsili-loximetil)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanossul-foniloxiazetidina A uma solução de 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi) -1-(t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (1,27 g, 2,53 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 39(5)) em cloreto de metileno (64 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (587 μΐ, 7,59 mmol) e trietilamina (1,06 ml, 7,59 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e 635 ΡΕ1340757 concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (3:1 ->· 1:2) como eluente de modo a proporcionar 1-{4-[2-(t-butildimetilsili-loxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,56 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3):ô (ppm) 7,58-7,53 (1H, d lg, J=8,8
Hz ) , 7,44 (1H, - s) , 5,43- -5, 38 V \—1 m), 4 ,41 (2H, dd, J= = 9,5, 6, 6 Hz) , 4,23 (2H, dd, J=9, 5 , 5,9 Hz) , 4, 12-4, 03 (1H, m) , 3, 84 (1H, dd, J=9, 5 , 2,9 Hz) , 3, 64 (2H, dd, J=9, 5, 5,9 Hz) , 3, 11 (3H, s) , 0, 91 (18H, s) , 0,07 (12H, s) . (7) 3-Acetiltio-l-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-bu- tildimetilsililoximetil)-etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-azetidina A uma solução de 1-{4-[2-(t-butildimetilsi-liloxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,56 g, 2,53 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 39(6)) em dimetilformamida (78 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,73 g, 15,2 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e 636 ΡΕ1340757 solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (4:1 -► 2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-bu-tildimetilsililoximetil)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-azetidina (773 mg, rendimento de 57%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,59-7,53 (1H, d lg, J=8,8
Hz ) , 7,40 (1H , s) , 4,52-4,42 (3H, m) , 4, 11-4,06 (1H, m) 3, 94 (2H, dd, J=8,4, 4,8 Hz) , 3, 83 (2H, dd, , J= 9,5, 3, 3 Hz) 3, 61 (2H, dd, J=9,5, 6, 6 Hz), 2,37 (3H, s) , 0,91 (18H, s) 0, 07 (12H, s) .
Exemplo de Referência 40 3-Acetiltio-l-4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il}azetidina
AcS
.CO-N I
/^^OTBDMS (1) Éster de benzilo de ácido N-[2-(t-butildifenilsililo-xi)etil]-N-metil-carbâmico A uma solução de N-metilaminoetanol (1,20 ml, 15,0 mmol) em cloreto de metileno (36 ml) foram adicionados éster de benzilo de ácido clorofórmico (2,56 ml, 18,0 mmol) 637 ΡΕ1340757 e trietilamina (2,52 ml, 18,0 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbâmico (2,8 g, rendimento de 90%), sob a forma de um óleo amarelo.
Subsequentemente, a uma solução de éster de benzilo de ácido N-(2-hidroxietil)-N-metilcarbâmico (2,82 g, 13,5 mmol) em dimetilformamida (85 ml) foram adicionados cloreto de t-butildifenilsililo (4,21 ml, 16,2 mmol) e imidazole (1,10 g, 16,2 mmol) num banho de gelo. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, metanol foi adicionado a isso e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando 638 ΡΕ1340757 hexano: acetato de etilo (9:1) como eluente de modo a proporcionar éster de benzilo de ácido N-[2-(t-butildifenil-sililoxi)etil]-N-metil-carbâmico (5,7 g, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,72 (1H, dd, J= 7,4, 1,6 Hz), 7,47-7,20 (11H, m), 7,64 (4H, t, J= 6,1 Hz), 5,12 (1H, s), 5,05 (1H, s), 3,80 (1H, t, J= 5,5 Hz), 3,73 (1H, t, J= 5,5 Hz), 3,45 (1H, t, J= 5,6 Hz), 3,41 (1H, t, J= 5,6 Hz), 2,99 (3H, s), 1,03 (9H, s). (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-{N-[2-(t-butildifenilsi-liloxi)etil]-N-metil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina
Uma solução de éster de benzilo de ácido N-[2-(t-butildifenilsililoxi)-etil]-N-metil-carbâmico (5,7 g, 12,7 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 40(1)) em metanol (285 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (5,7 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo: metanol (19:2) ->· acetato de etilo:metanol (1:1) como eluente de modo a proporcionar [2-(t-butildifenilsililoxi)etil]metilamina (2,67 g, rendimento de 69%), sob a forma de um óleo transparente.
Subsequentemente, a uma solução de 3-t-butildife- 639 ΡΕ1340757 nilsililoxi-1- (4-etoxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (1,91 g, 4,09 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(1)) em benzeno (100 ml) foi adicionada uma solução de [2-(t-butildifenilsililoxi)-etil]-metil-amina 0,67M-trimetilaluminio em benzeno (13,6 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi aquecida sob refluxo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados solução aquosa de ácido acético a 10% (100 ml) e acetato de etilo (100 ml) à mistura de reacção num banho de gelo, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se adicionar acetato de etilo, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{N-[2-(t-butildifenilsililoxi)-etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,54 g, rendimento de 85%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,74-7, , 55 (8H, m), 7,50- 7,31 (12H, m) , 7, 00 (1H, s) , 4,7 9-4,64 (1H, m) , 4,08-3,59 (7H, m, incluindo 1 4,80-4 , 00 (2H, m) , 3 , 85- 3,73 (2H, m)), 3,27 (0,3 H, s), 3,07 (0, , 7 H, s) , 1,06 (9H, s) , 1,02 (9H, s) . 640 ΡΕ1340757 (3) 3-Hidroxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-{N-[2-(t-butildifenilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,24 g, 3,05 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 40(2)) em tetra-hidrofurano anidro (70 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (7,32 ml, 7,32 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (20:1) -► acetato de etilo:metanol (15:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-car-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (833 mg, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,18 (1H, s) , 4,86-4,74 (1H, m) , 4,29 (2H, t, J= 8,4 Hz), 3,94 (2H, dd, J= 8,4, 4,9 Hz), 3,86 (2H, t, J= 5,0 Hz), 3,65 (2H, t, J= 5,0 Hz), 3,07 (3H, s) . (4) 1-(4-(N-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carba-moil}-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil )-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (576 mg, 641 ΡΕ1340757 2,24 iranol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 40 (3)) em dimetilformamida (29 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (354 mg, 2,35 mmol) e imidazole (160 mg, 2,35 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (3:1) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar l-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (489 mg, rendimento de 60%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDCls) : δ (ppm) 7 ,n (0 ,7H, s), 7,01 (0,3H , s), 4 ,87-4, . 7 6 (1H, m) , , 4,31 (2H , t, J= = 8,3 Hz), 3, 96 (2 H, dd, J= 8,3, 4,5 Hz) , 3 ,91-3,83 ( :ih, m) , 3,79 (1H , d, J= 4, 5 Hz) , 3,74 (1H , d, OP = 4,5 Hz) , 3, 66- -3,52 (1H, m) , 3,28 (0, 9H, s), 3 ,n (2,1H, s) , 0, 88 (9H, s) , 0,05 (6H , d, J= 14 , 0 Hz) . (5) 1 -(4-{N- [2- (t- -Butildimet: ilsililoxi ) eti i]- N-metil-carba- moil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsili-loxi)-etil]-N-metil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxi- 642 ΡΕ1340757 azetidina (442 mg, 1,19 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 40(4)) em cloreto de metileno (15 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,12 ml, 1,49 mmol) e trietilamina (0,20 ml, 1,49 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-{N-[2-(t-butildimetil-sililoxi)-etil]-N-metil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (517 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,18 (0, 6H, s) , 7,08 (0,4H, s) , 5, 45-5, 35 (1H, m), 4,42 (2H, t, J= 8,7 Hz), 4,23 (2H, dd, J= 8,7, 3,7 Hz), 3,91-3,81 (1H, m) , 3,81-3,74 (1H, m) , 3, 74-3, 67 (1H, m) , 3, 62-3, 53 (1H, m) , 3,26 (1,2H, s) , 3,09 (1,8H, s), 0,85 (9H, s), 0,01 (6H, s) . (6) 3-Acetiltio-l-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsili-loxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanos-sulfoniloxiazetidina (516 mg, 1,14 mmol) (obtida tal como 643 ΡΕ1340757 descrito no Exemplo de Referência 40 (5)) em dimetilfor-mamida (15 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (815 mg, 7,14 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (279 mg, rendimento de 57%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (4 0 ( D MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 08 (0,7H, s) , 7, .16 (0,4H, s) , 4,52 (2 H , t, J= 7,3 Hz) , 4,48- 4,39 (1H , m) , 3, . 97 (2H, t, J= 7,3 Hz), 3,92-3, 82 (1H, m) , 3 ,78 (1H, d, J= L 1,1 Hz) , 3 ,75 (1H, d, J= 4,1 Hz) , 3 , 66- -3, 50 (1H, m) , 3, .59 (0, 9H, s) , 3,92 (2 , 1H, s), 2,39 (3H, s) , 0,88 (9H, d r J= 4,7 Hz) , o, 04 (6H, d, J= 1, 5 Hz) .
Exemplo de Referência 41 (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(p-Nitrobenziloxicarbonilmetil)carba-moil-l,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butil-dimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 644 ΡΕ1340757
(1) 1-(4-Aliloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenil-sililoxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (6,73 g, 15,3 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em dimetilformamida (330 ml) foram adicionados brometo de alilo (1,59 ml, 18,4 mmol) e diisopropiletilamina (3,21 ml, 18,4 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 10 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (5:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-aliloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (5,31 g, rendimento de 73%), sob a forma de um óleo castanho. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7, 63-7,59 (4H, m) , 7,46 645 ΡΕ1340757 (1H, s) , 7,47-7,36 (6H, m) , 6,04-5,95 (1H, m) , 5,40-5,35 (1H, m) , 5,28-5,24 (1H, m) , 4,80-4,78 (2H, m) , 4,77-4,71 (1Η, m) , 4,16 (2H, dd, J=8,8, 6,6 Hz), 4,06 (2H, dd, J=8,8, 4,4 Hz), 1,06 (9H, s). (2) 1-(4-Aliloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidi- na A uma solução de 1-(4-aliloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (5,31 g, 11,1 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 41(1)) em tetra-hidrofurano anidro (266 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetrabutilamónio 1M em tetra-hidrofurano (13,3 ml, 13,3 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-aliloxicarbonil-l, 3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,91 g, rendimento de 100%), sob a forma de cristais castanho-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,4 9 (1H, s) , 6,06-5,96 (1H, m) , 5,42-5,35 (1H, m) , 5,29-5,24 (1H, m) , 4,87-4,80 (1H, m) , 4,79 (2H, d, J= =5,9 Hz), 4,38 (2H, t, J=8, 8 Hz) , 4,02 (2H, dd, J=9,8, 3, 9 Hz), 2,52-2,37 (1H, s lg) . (3) 1-(4-Aliloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfo- niloxiazetidina 646 ΡΕ1340757 A uma solução de 1-(4-aliloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,91 g, 11,1 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 41(2)) em cloreto de metileno (146 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (2,58 ml, 33,3 mmol) e trietilamina (4,67 ml, 33,3 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao residuo foram adicionados acetato de etilo e éter diisopropílico, e, em seguida, a mistura foi filtrada e o residuo resultante foi lavado com éter diisopropilico, de modo a originar 1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxi-azetidina (2,71 g, rendimento de 77%), sob a forma de cristais castanho-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,55 (1H, s) , 6,07-5,96 (1H, m), 5, 45-5,35 (2H, m) , 5,30-5,25 (1H, m) , 4,81 (2H, dt, J=5,9, 1,5 Hz), 4,51 (2H, dd, J=11,0, 6,6, 1,5 Hz), 4,31 (2H, ddd, J=11,0, 4,4, 1,5 Hz), 3,10 (3H, s). (4) 3-Acetiltio-l-(4-aliloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)azeti-dina 647 ΡΕ1340757 A uma solução de 1-(4-aliloxicarbonil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (2,70 g, 8,51 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 41 (3)) em dimetilformamida (135 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (5,83 g, 51,1 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 10 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-aliloxicarbonil-l , 3-tiazol-2-il)azetidina (1,61 g, rendimento de 63%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,51 (1H, s) , 6,06-5,96 (1H, m) , 5,41-5,35 (1H, m) , 5,29-5,26 (1H, m) , 4,58 (2H, t, J=8, 1 Hz), 4,47-4,40 (1H, m) , 4,04 (2H, dd, J=9,5, 5,9 Hz), 2,36 (3H, s) . (5) (IR,5S,6S)-6-[(R)-1-t-Butildimetilsililoxietil] -2-(di-fenilfosforiloxi)-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de(IR,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi) -6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo (5,00 g, 8,41 mmol) em dimetilfor- 648 ΡΕ1340757 mamida (250 ml) foram adicionados cloreto de t-butildime-tilsililo (2,54 g, 16,8 mmol) e imidazole (1,14 g, 16,8 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi agitada no banho de gelo durante 7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, metanol foi adicionado a isso e a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-2-(difenilfosforilo-xi)-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (5,27 g, rendimento de 88%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,14 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,56 (2 H, d, J=8, ,8 Hz), 7, 39-7,29 (4H, m) , 7,28- 7,17 (6H, m) , 5,34 (1H, d, J=13,9 Hz) , 5,23 (1H, d, J=13,9 Hz) , 4,24 (1H, dq, J=5, 9, 5, 9 Hz ) , 4,20 (1H, dd, J=10,3, 2, 9 Hz) , 3,43 (1H, dq, J= 10,3, 7,3 Hz) , 3 ,28 (1H, dd, J =5, 9, 2,9 Hz) , 1,23 (3H, , d, J=5, 9 Hz ), 1,20 (3H, d, J=7,3 Hz) , 0,86 (9H, s) , 0,06 (6H , d, J= :3,7 Hz) . (6) (IR,5S,6S) -2- [1-(4-Alil oxicarbonil-1,3- -tiazol- -2-il) i aze- tidi η-3-i 1]tio-6- [(R)-1- t-butildimetilsililoxietil -] -í- metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 649 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-acetiltio-l-(4-aliloxicarbo-nil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,61 g, 5,40 mmol) (Exemplo de Referência 41(4) obtido) em dimetilformamida (80 ml) foi adicionado acetato de hidrazina (596 mg, 6,47 mmol) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto, e a mistura foi agitada durante 1,5 horas sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada uma solução de (IR, 5S, 6S)-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-2-(difenilfosforiloxi) -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (3,83 g, 5,40 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41(5)) em acetonitrilo (190 ml), gota a gota, à mistura de reacção num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto.
Subsequentemente, foi adicionada diisopropiletil-amina (3,76 ml, 21,6 mmol) à mistura de reacção, e a mistura foi agitada de um dia para o outro enquanto que, gradualmente, se aumentava a temperatura da mistura de reacção até à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e, em seguida, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel 650 ΡΕ1340757 de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-aliloxi-carbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (3,73 g, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 65 (2H, d, J=8,8 Hz) , 7,53 (1H, s) , 6, 07 -5, 96 (1H, m) , 5,45 (1H, d, J=13,9 Hz) , 5,42· -5,35 (1H, m) / 5, 30- 5,25 (1H, m) , 5 ,26 (1H, . d, j=: 13, 9 Hz) , 4,80 (2H, d, J =5, 1 Hz) , 4,55 (2H, q# > J=8, 1 HZ), 4,32 -4,22 (3H, m) , 4, 15- -4, 09 (3H, m) , 3,26 (1H, dd , J=5,l , 2, 9 Hz) , 3,13 (1H, J= = 9, 5, 7,3 Hz) , 1,25 (3H, d, J=5,9 1 Hz) , 1,24 (3H, d, J= =7, 3 Hz) r 0,87 (9H, s) , 0 , 08 (6H, d, J=5 , 1 Ης o. (7) (IR, 5S,6S)-2- [1 - (4-Carbox : i — 1,3 -tiaz ol- -2- il ) az :etidi .n-3- il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-[1-(4-aliloxicarbo-nil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil ] -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (3,73 g, 5,2 mmol) (Exemplo de Referência 41(6) obtido) em cloreto de metileno (180 ml) foram adicionados dimedona (1,46 g, 10,4 mmol), tetraquis(trifenil-fosfina)paládio (0) (603 mg, 0,522 mmol) e trifenilfosfina (205 mg, 0,783 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de 651 ΡΕ1340757 reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) -► cloreto de metileno:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]-tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,91 g, rendimento de 54%), sob a forma de um sólido castanho-pálido.
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 675 [M+H]+ (8) Éster de p-nitrobenzilo de N-(t-butoxicarbonil)glicina A uma solução de N-(t-butoxicarbonil)glicina (1,51 g, 8,62 mmol) em cloreto de metileno anidro (75 ml) foram adicionados álcool p-nitrobenzílico (2,63 ml, 17,2 mmol), hidrocloreto de l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)car-bodiimida (daqui em diante referido como WSC) (3,3 g, 17,2 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (106 mg, 0,87 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi 652 ΡΕ1340757 purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar éster de p-nitrobenzilo de N-(t-butoxicarbonil)glicina (2,67 g, rendimento de 100%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=7,5 Hz), 7,53 (2H, d, J=7,5 Hz), 5,28 (2H, s), 5,02 (1H, t lg, J=3,3
Hz), 4,00 (2H, d, J=3,3 Hz), 1,46 (9H, s) . (9) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(p-Nitrobenziloxicarbonilmetil)car- bamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-t-butildimetilsililoxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-car-boxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de éster de nitrobenzilo de N- (t-butoxicarbonil)glicina (2,67 g, 8,62 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41(8)) em 1,4-dioxano (27 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (27 ml) num banho de gelo. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado éter dietilico a isso e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção resultante foi filtrada, e o residuo obtido foi lavado com éter dietilico e seco, de modo a originar hidrocloreto de éster de p-nitrobenzilo de glicina (1,59 g, rendimento de 75%), sob a forma de cristais brancos.
Subsequentemente, a uma suspensão de (1R,5S,6S)- 653 ΡΕ1340757 2-[1-(4-carboxi-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (207,4 mg, 0,31 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41(7)) e hidro-cloreto de éster de p-nitrobenzilo de glicina (116 mg, 0,47 mmol) (obtido tal como anteriormente descrito) em dimetil-formamida (10,5 ml) foram adicionados cianeto de dietilfos-forilo (0,072 ml, 0,47 mmol) e trietilamina (0,14 ml, 1,00 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com uma solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolue-no:acetonitrilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil)carba-moil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildi-metilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (209,7 mg, rendimento de 77%), sob a forma de um xarope amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,65 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,59 (1H, t, J=3,3 Hz), 7,54 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,47 (1H, s) , 5,46 654 ΡΕ1340757 (1H, d, J= 13, 9 Hz), 5, r 30 (2H, s), 5,27 (1H, d, j= 13, 9 Hz) , 4, 51 (1H, t, J= = 8,3 Hz ), 4,47 (1H, t, J=8,3 Hz) , 4,37- 4,23 (5H, m) , 4 ,08 ( 1H, dd, J=8,3, 3,3 Hz), 4,06 (1H, dd, J= 8,3, 3,3 Hz) , 3,27 (1H, dd, J=6,2, 3,6 Hz), 3,16 (1H, dq, J=ll ,5, 8, 8 Hz) , 1,27 (3H, d, J=8, 8 Hz), 1,25 (3H, d, J = 8,8 Hz) , 0,87 (9H, s) , 0,0 9 (3H, s), 0 ,08 (3H, s ) . Exemplo de Refe rência 42 (IR, 5S,6S) -2-{1 — [4 — (3 — t-Butildifen ilsililoxi azetidino-1 - carbonil)- 1,3-t iazol-2 -il]azetidin -3-il}tio- 6-[ (R) -1-t- butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo
(1) l-Benziloxicarbonil-3-t-butildifenilsililoxiazetidina
Uma solução de l-benzidril-3-hidroxiazetidina (10 g, 41,8 mmol) em metanol (300 ml) foi submetida a hidroge-nação catalítica na presença de paládio a 10% (10 g) sobre carvão vegetal num banho de água (50°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e o resíduo lavado com metanol. O filtrado combinado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e água destilada. A camada orgânica foi concentrado sob 655 ΡΕ1340757 pressão reduzida, e o resíduo obtido seco sob pressão reduzida. 0 produto bruto resultante foi dissolvido numa mistura de cloreto de metileno (120 ml) e metanol (120 ml), foram adicionados a isso éster de benzilo de ácido clorofórmico (8,95 ml, 62,7 mmol) e trietilamina (8,79 ml, 62,7 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:1) ->· acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar l-benziloxicarbonil-3-hidroxiazetidina (1,91 g, rendimento de 22%).
Subsequentemente, a uma solução de 1-benziloxi-carbonil-3-hidroxiazetidina (1,91 g, 9,22 mmol) em dimetil-formamida (96 ml) foram adicionados cloreto de t-butil-difenilsililo (2,88 ml, 11,1 mmol) e imidazole (756 mg, 11,1 mmol) num banho de gelo. A mistura resultante foi agitada no banho de gelo durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca 656 ΡΕ1340757 sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (6:1) como eluente de modo a proporcionar l-benziloxicarbonil-3-t-butildifenilsililoxi-azetidina (4,04 g, rendimento de 98%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,73-7,70 (1H, m) , 7,60- 7,56 (4H, m) , 7,46-7,29 (10H, m) , 5,07 (2H, s) , 4,58-4,52 (1H, m) , 4,01 (2H, m) , 3,95 (2H, dd, J=9,8, 4,9 Hz), 1,05 (9H, s) . (2) (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-t-Butildifenilsililoxiazetidino- 1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-l-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo
Uma solução de l-benziloxicarbonil-3-t-butildife-nilsililoxiazetidina (4,04 g, 9,07 mmol) em metanol (200 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (4,04 g) à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida, e o resíduo obtido foi seco sob pressão reduzida, de modo a originar 3-t-butildifenilsililoxiazetidina (2,70 g, rendimento de 96%), sob a forma de um óleo incolor.
Subsequentemente, a uma solução de (IR,5S,6S)-2- 657 ΡΕ1340757 [1- (4-carboxi-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R) -1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxi-lato de p-nitrobenzilo (1,71 g, 2,53 mmol) e 3-t-butildi-fenilsililoxiazetidina (947 mg, 3,04 mmol) (obtida tal como anteriormente descrito) em dimetilformamida (86 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (461 μΐ, 3,04 mmol) e trietilamina (426 μΐ, 3,04 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (4:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(3-t-butildifenilsililoxiazeti-dino-l-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (789 mg, rendimento de 32%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 66 (2H, d, CD «>. oo II •~D Hz) , 7, 62 (2 H, p. C-I II co co Hz) , 7,47- 7,36 (6H, m) , 7,39 (1H, s), 5 ,46 (1H, d, J=13,7 Hz) , 5,27 (1H, d, J= = 13,7 Hz) , , 4,65 -4,52 (2H, m) , 4,50-4,42 (2H, m) , 4 ,40- 4, 34 (1H, m) , 4,32- 4,26 (3H, m) , 4,19-4,11 (1H, m) , 4 ,06- 4, 00 (3H, m) , 3,28 (1H, dd, J=4, 9 , 2, 9 Hz), 3, 18 (1H, dq, 658 ΡΕ1340757 J=8,8, 7,8 Hz), 1,27 (3H, d, J=7,8 Hz), 1,26 (3H, d, J=5,9
Hz), 1,07 (9H, s), 0,87 (9H, s), 0,09 (6H, d, J=5,9 Hz).
Exemplo de Referência 43 (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[N-Metil-N-(p-nitrobenziloxicarbonil)me-til-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo
(1) Éster de p-nitrobenzilo de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético A uma solução de sarcosina (3,56 g, 40 inmol) numa mistura de metanol (180 ml) e água destilada (90 ml) foi adicionada solução aquosa 1M de hidróxido de sódio (80 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso Dowex-50W no banho de gelo a fim de ajustar o pH da mistura de reacção para 5 a 4. A mistura de reacção foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida, de modo a originar ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético (7,57 g), sob a forma de um produto bruto. 659 ΡΕ1340757
Subsequentemente, a uma solução de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético (2,52 g, 13,3 mmol) e álcool p-nitrobenzílico (4,07 g, 26,6 mmol) em cloreto de metileno (125 ml) foram adicionados WSC (5,10 g, 26,6 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (252 mg, 1,33 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar éster de p-nitrobenzilo de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético (4,30 g, rendimento de 88%), sob a forma de um óleo amarelo. (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,2 8 cn CM OO 1 C\l m) , 7,58- 2H, m) , 5, 72 (2H, d, J= 2,2 Hz) , 4,07 (11 2H, r S) , 3, 99 s) , 2, 95 (3H, d, J= = 5,8 Hz), 1,47 (5,4H, s) , 1,39 (3, 6H, s) . (2) Hidrocloreto de éster de p-nitrobenzilo de sarcosina A uma solução de éster de p-nitrobenzilo de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético (4,30 g, 133 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 43(1)) foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (4,3 ml) num banho de gelo, e a mistura 660 ΡΕ1340757 foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado éter dietilico a isso e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção resultante foi filtrada e o resíduo obtido foi lavado com éter dietilico e seco, de modo a originar hidrocloreto de éster de p-nitrobenzilo de sarcosina (3,04 g, rendimento de 88%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,32-8,23 (2H, m) , 7,72- 7,60 (2H, m) , 5,42 (2H, s) , 4,08 (2H, s) , 2,77 (3H, s) . (3) (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-Metil-N-(p-nitrobenziloxicarbo- nil)metil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-(t-butildimetilsililoxi)etil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma suspensão de (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetil-sililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-ni-trobenzilo (1,00 g, 1,51 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41 (7)) e hidrocloreto de éster de p-nitrobenzilo de sarcosina (590 mg, 2,26 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 43(2)) em dimetilformamida (30 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (0,37 ml, 2,26 mmol) e trietilamina (0,95 ml, 6,80 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de 661 ΡΕ1340757 sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) -> acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[N-metil-N-(p-nitrobenzilo-xicarbonil)metil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-(t-butildimetilsililoxi)etil]-1-metilcar-bapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (997 mg, rendimento de 76%). -RMN (400 MHz , CDC13) : δ (ppm) 8, 29 -8, 15 (4H, m) , 7, 71- 7, 62 (2H, m) , 7,58-7,42 ( 2H t m) , 7 ,40 (0, 6H, s) , 7 , 25 (0 ,4H, s) , 5,4 6 (1H, d, J= 13 ,8 Hz ) , 5, . 34-5, 22 (3H, m incluindo 5,26 (1H, d, J: 13, 9 Hz) ) , 4, 63 (1H, s) , 4, 57- 4, 45 (1H, m) , 4 ,27 (2H, t r J= 9, 6 H: z) , 4 / ,2Í 5 (2H, t, J= 9, 6 Hz ), 3,89 (1H, dd, J= 7, 7, 5, 8 Hz) r 3,3 6 (1,2H , s) , 3 ,15 d , 8H, s) , 3,26 (1H, dd, J: = 5, 0, 2, 6 Hz) r 1,25 (6H, d, J= 7,2 Hz), 0,86 (9H, s), 0,08 (6H, d, J= 5,0 Hz).
Exemplo de Referência 44 (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[N-Metil-N-(carbamoil)metil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetil-sililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo 662 ΡΕ1340757
(1) éster de t-butilo de ácido N-carbamoilmetil-N-metil-carbâmico A uma solução de ácido N-(t-butoxicarbonil-N-metil-amino)-acético (5,03 g, 26,6 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 43(1)) em cloreto de metileno (250 ml) foram adicionados 1-hidroxibenzotriazole (7,19 g, 53,2 mmol), WSC (10,2 g, 53,2 mmol) e 4-dime-tilaminopiridina (325 mg, 2,66 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto durante 2 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada a isso solução aquosa de amoníaco a 28% e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno :metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar éster de t-butilo de ácido N-carbamoilmetil-N-metil-carbâmico (848 mg, rendimento de 17%), sob a forma de um óleo amarelo. 663 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 3,87 (2H, s) , 2,96 (3H, s), 1,47 (9H, s). (2) (IR,5S,6S)-2-(1-(4-[N-Metil-N-(carbamoil)metil-carba-moil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butil-dimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de éster de t-butilo de ácido N-carbamoilmetil-N-metil-carbâmico (848 mg, 4,50 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 44(1)) em 1,4-dioxano (8,50 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (8,50 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso éter dietílico, e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção resultante foi filtrada, e o resíduo obtido foi lavado com éter dietilico e seco, de modo a originar hidrocloreto de 2-metilaminoacetamida (421 mg, rendimento de 75%).
Subsequentemente, a uma suspensão de (1R,5S,6S)-2-[l-(4-carboxi-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-l-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo (1,00 g, 1,51 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41 (7)) e hidrocloreto de 2-metilamino-acetamida (282 mg, 2,26 mmol) (obtido 664 ΡΕ1340757 tal como anteriormente descrito) em dimetilformamida (30 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (0,37 ml, 2,26 mmol) e trietilamina (0,95 ml, 6,80 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3,5 horas. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aguosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[N-metil-N-(carbamoil)metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-(t-butildimetil-sililoxi)etil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (932 mg, rendimento de 84%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J= 7,9 Hz), 7,65 (2H, d, J= 7,9), 7,35 (0,7H, s) , 7,23 (0,3H, s) , 5,46 (1H, d, J= 13,9 Hz), 5,26 (1H, d, J= 13. 9 Hz), 4,62 = 4,40 (2H, m) , 4,40-4,22 (3H, m), 4,20 (1H, s), 4,12 (2H, dd, J= 14,2, 7,1 Hz), 4,07-3, 97 (1H, m) , 4,04 (0,6H, s lg) , 3,27 (1H, dd, J= 5,0, 2,8 Hz), 3,15 (1H, dq, J= 9,5, 7,3 Hz), 3,11 (2,4H, s lg) , 1,25 (6H, d, J= 5,8 Hz), 0,87 (9H, s) , 0,08 (6H, d, J= 5,0 Hz). 665 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 45 (IR,5S,6S)-2-{l-[4-(Carbamoilmetil)carbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo
(1) Éster de t-butilo de ácido (carbamoilmetil)carbâmico A uma solução de N-(t-butoxicarbonil)glicina (3,01 g, 17,2 mmol) em cloreto de metileno anidro (150 ml) foram adicionados 1-hidroxibenzotriazole (4,63 g, 34,3 mmol), WSC (6,60 g, 34,4 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (210 mg, 1,72 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada a isso solução aquosa de amoniaco a 28% e a mistura resultante foi agitada durante 15 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre cloreto de metileno e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar éster de t- 666 ΡΕ1340757 butilo de ácido (carbamoilmetil)carbâmico (717,7 mg, rendimento de 24%) , sob a forma de um xarope incolor e transparente . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6,202 (1H, s lg) , 5,763 (1H, s lg), 5,267 (1H, t lg, J-5,1 Hz), 3,820 (2H, d, J=5,l Hz), 1,456 (9H, s). (2) (lR,5S,6S)-2-(l-[4-(Carbamoilmetil)carbamoil-1,3- tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsi-liloxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitro-benzilo A uma solução de éster de t-butilo de ácido (carbamoilmetil)carbâmico (717,2 mg, 4,12 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 45(1)) em 1,4-dioxano (7,2 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (7,2 ml) num banho de gelo. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso éter dietilico, e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção resultante foi filtrada, e o residuo obtido foi lavado com éter dietilico e seco, de modo a originar hidrocloreto de glicinamida (389 mg, rendimento de 86%), sob a forma de cristais brancos.
Subsequentemente, a uma suspensão de (1R,5S,6S)-2 - [1- (4-carboxi-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[ (R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo- 667 ΡΕ1340757 xilato de p-nitrobenzilo (566,6 mg, 0,85 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41(7)) e hidro-cloreto de glicinamida (154,3 mg, 1,40 mmol) (obtido tal como anteriormente descrito) em dimetilformamida (28,0 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (0,2 ml, 1,32 mmol) e trietilamina (0,36 ml, 2,6 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido cloridrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (2:3) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-(carba-moilmetil)carbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (428,6 mg, rendimento de 70%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J 00 II Hz) , 7,70 (1H, t, J=5, 3 Hz) , 7, 65 (2H, d, J = 8, 4 Hz) r 7,46 (1H, s) , 6, , 15 (1H, s lg) , 5,4 6 (1H , d, J=13 ,4 Hz) , 5, 43 (1H, s ig), J 5,27 (1H, d, J: = 13, 4 H: 7-) , 4,52 (1H, t, J=8, 3 Hz) , 4,50 (1H, t, J =8,3 Hz) r 4,345 -4 ,24 (3H, . m) , 4, 12-4, 04 (4H, m) , 3,265 (1H , dd, J= = 5, 1, 2, 7 Hz) , 3, 155 (1H , dq, J = 9,4, 7,0 668 ΡΕ1340757
Hz), 1,264 (3H, d, J=7,0 Hz), 1,22 (3H, d, J=4,8 Hz), 0,86 (9H, s), 0,09 (3H, s), 0,08 (3H, s) .
Exemplo de Referência 46 (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-2-Metil-l-(p-nitrobenziloxi-carbonil)-propilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo
COOPNB
TBC (1) Éster de p-nitrobenzilo de N-(t-butoxicarbonil)-L-valina A uma solução de N-(t-butoxicarbonil)-L-valina (2,50 g, 11,5 inmol) em cloreto de metileno (125 ml) foram adicionados álcool p-nitrobenzílico (3,52 g, 23,0 mmol), WSC (4,41 g, 23,0 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (140 mg, 1,15 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel 669 ΡΕ1340757 de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar éster de p-nitrobenzilo de N-(t-butoxicarbonil)-L-valina (3,07 g, rendimento de 76%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (2H, d, J=8, 8 Hz), 5,26 (2H, d, J=5,l Hz), 5,00-4,94 (1H, m) , 2,21-2,10 (1H, m) , 1,45 (9H, s) , 0,97 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,88 (3H, d, J=6,6 Hz). (2) Hidrocloreto de álcool p-nitrobenzílico de L-valina A uma solução de éster de p-nitrobenzilo de N- (t-butoxicarbonil)-L-valina (3,07 g, 8,71 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 46(1)) em 1,4-dioxano (31 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (31 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida, ao resíduo obtido foi adicionado acetato de etilo, e a mistura foi filtrada. O resíduo resultante foi lavado com acetato de etilo e seco de modo a originar hidrocloreto de éster p-nitrobenzílico de L-valina (2,21 g, rendimento de 88%).
Análise elementar:
Valor observado: C,44,77% H,5,63% N,9,49% Cl,12,38%
Valor calculado: C,49,92% H,5,93% N,9,70% Cl,12,28% 670 ΡΕ1340757 (3) (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-2-Metil-l-(p-nitrobenziloxi-carbonil)-propilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil ]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,0 g, 1,48 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41(7)) e hidrocloreto de éster p-nitrobenzílico de L-valina (541 mg, 1,78 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 46(2)) em dimetil-formamida (50 ml) foram adicionados cianeto de dietilfos-forilo (275 μΐ, 1,78 mmol) e diisopropiletilamina (620 μΐ, 3,56 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((IS)-2-metil-l-(p-nitrobenziloxicarbo-nil)-propilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3- 671 ΡΕ1340757 carboxilato de p-nitrobenzilo (1,15 g, rendimento de 86%). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,21 (2 H, d, II co 00 Hz) , 7, 65 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 7,58- LO LO V Γ- 1 (1H, s lg), 7 , 54 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7, 45 (1H, r S) , 5,46 (1H, d, J= = 13, 9 Hz) , 5,28 (2H, s) , ! 5,27 (1H, , d, J= = 13, 9 Hz) , 4,74 (1H, dd, J=9, 5, 5,9 Hz) , 4,51 (2H, t, J= = 8,8 Hz) , 4,33- -4,24 (3H, m) , 4,08 (2H, dd, J: = 8,8, 5,9 Hz), 3 ,27 (1H, dd, J= =5,1, 2,9 Hz) , 3, 17 (1H, dq, J= 9,5, 7,3 Hz) r 2,33 i-2,24 (1H, m) , 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz) , 1,25 (3H, d, j= =5,9 Hz) , 1,01 (3H, d, J = 6, 6 Hz) , 0, 97 (3H, d, J= =7,3 Hz) r 0,87 (9H, s) , 0,09 (6H, d, J =5,1 Hz) .
Exemplo de Referência 47 (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-Carbamoil-2-metil-propilcarba-moil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butil-dimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo
(1) Éster de t-butilo de ácido (IS)-l-carbamoil-2-metil-carbâmico A uma solução de N-(t-butoxicarbonil)-L-valina (3,00 g, 13,8 mmol) em cloreto de metileno anidro (150 ml) foram adicionados 1-hidroxibenzotriazole (3,73 g, 27,6 672 ΡΕ1340757 mmol), WSC (5,29 g, 27,6 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (169 mg, 1,38 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso solução aquosa de amoniaco a 28% e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar éster de t-butilo de ácido (IS)-l-carbamoil-2-metilcarbâmico (2,81 g, rendimento de 94%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 5, 93-5, 84 (1H, s lg) , 5, 45-5, 36 (1H, s lg) , 5, 06-5, 00 (1H, s lg) , 3,98-3,91 (1H, m) , 2,21-2,12 (1H, m) , 1,45 (9H, s) , 0,99 (3H, d, J=6, 6 Hz), 0,94 (3H, d, J=6,6 Hz). (2) Hidrocloreto de (2S)-2-amino-3-metilbutiramida A uma solução de éster de t-butilo de ácido (IS)— l-carbamoil-2-metilcarbâmico (2,81 g, 13,0 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 47(1)) em 1,4-dioxano (28 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (28 ml) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada à temperatura ambiente de 673 ΡΕ1340757 um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso acetato de etilo, a mistura de reacção foi filtrada e o residuo obtido lavado com acetato de etilo e seco, de modo a originar hidro-cloreto de (2S)-2-amino-3-metilbutiramida (1,94 g, rendimento de 98%) .
Análise elementar:
Valor observado: C,39,21% H,8,34% N,18,31% Cl,23,38%
Valor calculado: C,39,35% H,8,59% N,18,35% Cl,23,23% (3) (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-Carbamoil-2-metil-propilcar-bamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carbo-xilato de p-nitrobenzilo A uma solução de (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetil-sililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobenzilo (1,00 g, 1,48 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 41 (7)) e hidrocloreto de L-valinamida (272 mg, 1,78 mmol) obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 47 (2) em dimetilformamida (50 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (275 μΐ, 1,78 mmol) e diisopropiletilamina (620 μΐ, 3,56 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida 674 ΡΕ1340757 foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:3) cloreto de metileno:acetato de etilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar (IR,5S,6S)-2-{1-[4-((IS)-l-carbamoil-2-metilpropilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-l-metilcarbapen-2-em-3- carboxilato de p-nitroben lzíIo (934 mg, rendimento de 1 82 %) . 1H-RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8 ,8 Hz) , 7, 65 (2H, d, J=8, 8 Hz), 7,61-7, 56 (1H, d ig, J=9 ,5 Hz) , 7,43 (1H, s) , 6,06-6,00 (1H, s ig), 5, ,46 (1H, d, J= = 13, 9 Hz) , 5,42 -5,37 (1H, s lg), 5 ,27 (1H, d , J= = 13, 9 Hz ) , 4,50 (1H, dt, J=8, 1, 4,4 Hz) , 4, 36 (1H, dd, J: = 8,8, 6 , 6 Hz) , 4,32 -4,25 (3H, m) , 4,08 (2H, dd, J-8,1, 5,1 Hz) , 3, 27 (1H, dd, J=5,1 , 2,2 Hz), 3,16 (1H, dq, J=9,5, 7,3 Hz) , 2, 34- 2,24 (1H, m) , 1,26 (3H, d, J= =7,3 Hz) , . 1,25 (3H, d, J=6 ,6 Hz) , 1,03 (3H, d, J=6, 6 Hz), 1,01 (3H , d, j= :6, 6 Hz) , 0, 87 (9H, s) , 0,08 (6H, d, J=4,4 Hz ;) .
Exemplo de Referência 48 3-Acetiltio-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbonil-metil)-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1) Éster de metilo de ácido N-(t-butoxicarbonil-N-iso-propil-amino)acético 675 ΡΕ1340757 A uma solução de hidrocloreto de éster de metilo de glicina (3,03 g, 24,1 mmol) em metanol (150 ml) foram adicionados trietilamina (3,4 ml, 24,4 mmol) e acetona (17,7 ml, 241,1 mmol), e a mistura foi agitada num banho de água (50°C) durante 1,5 horas. Subsequentemente, foi adicionado a isso cianoboro-hidreto de sódio (3,03 g, 48,2 mmol) num banho de gelo, e foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio a 10% em metanol à mistura de reacção a fim de ajustar o pH da mistura de reacção para 3 a 4, e a mistura de reacção resultante foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida, e o residuo foi seco sob pressão reduzida. A uma suspensão do produto bruto obtido numa mistura de metanol (45 ml) e cloreto de metileno (90 ml) foram adicionados anidrido di-t-butoxicarbónico (10,5 g, 48,1 mmol) e trietilamina (13,5 ml, 96,9 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetato de etilo (5:1) como eluente de modo a proporcionar éster de metilo de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (3,93 g, rendimento de 70%), sob a forma de um xarope incolor transparente. 676 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 4,54-4,40 (0, 6H, m) , 4,24-4,10 (0,4H, m) , 3,86 (0,8H, s) , 3,74 (1,2H, s) , 3,72 (3H, s), 1,48 (3, 6H, s), 1,42 (5,4H, s) , 1,11 (2,4H, d, J=7,7 Hz), 1,09 (3,6H, d, J=7,7 Hz). (2) Éster de p-nitrobenzilo de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético A uma solução de éster de metilo de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (5,59 g, 24,2 mmol) numa mistura de metanol (112 ml) e água destilada (56 ml) foi adicionado solução aquosa 1M de hidróxido de sódio (37 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, Dowex-50W foi adicionado a isso no banho de gelo a fim de ajustar o pH da mistura de reacção para 5 a 4. A mistura de reacção foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida, de modo a originar ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)acético (5,25 g), sob a forma de um produto bruto.
Subsequentemente, a uma solução de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (2,05 g, 9,44 mmol) e álcool p-nitrobenzí lico (2,89 g, 18,9 mmol) em cloreto de metileno (100 ml) foram adicionados WSC (3,62 g, 18,9 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (120 mg, 0,98 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, e, em seguida, a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava 677 ΡΕ1340757 completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (5:2) como eluente de modo a proporcionar éster de p-nitrobenzilo de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)acético (1,93 g, rendimento de 58%) , sob a forma de um xarope transparente amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,24 (1H, d, J=8,0 Hz), 8,22 (1H, d, J=8, 0 Hz), 7,53 (2H, d, J=8,0 Hz), 5,26 (2H, s), 4,54-4,42 (0,5H, m) , 4,28-4,16 (0,5H, m) , 3,94 (1H, s) , 3,84 (1H, s), 1,48 (4,5H, s) , 1,36 (4,5H, s) , 1,12 (3H, d, J=7,7 Hz), 1,10 (3H, d, J=7,7 Hz). (3) Hidrocloreto de éster de p-nitrobenzilo de ácido (isopropilamino)acético A uma solução de éster de p-nitrobenzilo de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (1,93 g, 5,48 mmol) em 1,4-dioxano (20 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (20 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado éter dietílico a isso, a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos e filtrada, e o resíduo obtido foi lavado com éter dietílico e seco, de modo a originar hidrocloreto de éster de p- ΡΕ1340757 678 nitrobenzilo de ácido rendimento de 95%), sob a 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : (isopropilamino)acético (1,50 g, forma de cristais brancos, δ (ppm) 8,26 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 67 (2H, d, J=8,8 Hz) 3, 40 (1H, m) , 1,34 (6H, 5,43 (2H, s), 4,11 (2H, s) , 3,50- , J=5,9 Hz). (4) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitro-benziloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de hidrocloreto de éster de p-nitrobenzilo de ácido (isopropilamino)acético (500 mg, 1,73 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 48(3)) e 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l, 3-tiazol-2-il) azetidina (506 mg, 1,15 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em dimetilformamida (15 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (0,28 ml, 1,73 mmol) e trietilamina (0,60 ml, 4,32 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como 679 ΡΕ1340757 eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil)carba-moil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (578 mg, rendimento de 75%), sob a forma de um xarope amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,28-8,18 (2H, m) , 7,70-7,30 (12H, m) , 7,38 (0,4H, s lg) , 7,10 (0,6H, s lg) , 5,29 (0, 8H, s lg) , 5,16 (1,2H, s lg) , 5, 04-4,44 (3H, m) , 4,20-3,85 (5H, m), 1,17 (6H, s lg), 1,06 (9H, s lg). (5) 3-Hidroxi-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil) carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,81 g, 2,69 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 48(4)) em tetra-hidrofurano anidro (90 ml) foram adicionados ácido acético (0,18 ml, 3,23 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (3,23 ml, 3,23 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil) carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (968 mg, rendimento de 83%), sob a forma de um sólido branco. 680 ΡΕ1340757 1H-RMN (40 0 MHz , CDC1 3) : δ (ppm) 7,22 (2H, d, J= 8,0 Hz ) , 7,55 (1H, d, J = 8,0 Hz) r 7,42 (1H, d, J= 8, 0 Hz) , 7, 39 (0,4H, s) , 7,12 (0, 6H, s) r 5,29 (1,2H, s lg) , 5 ,22 (0, 8H, s ig), 5, 03- 4,89 (0,5H, m) r 4,89- 4,76 (1H , m) , 4,59 (: 1H, s 1—1 32 (1H, t, J= 7,3 H: z), 4, . 22-4, 02 (2H, m ), 4,02 -3, 85 1—' , 3 ,85 C 1H, m) , 1, 10 -1,03 (6H, m) . (6) l-{4-[N-Isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil)car-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[N-isopropil-(p-N-nitrobenziloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (968 mg, 2,23 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 48 (5)) em cloreto de metileno (50 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,42 ml, 5,34 mmol) e trietilamina (0,37 ml, 2,67 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbonilmetil) carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanossulfoniloxiazetidina (835 mg, rendimento de 73%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 681 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J= 7,9 Hz), 7,55 (1H, d, J= 7,9 Hz), 7,48 (0,4H, s lg), 7,43 (1H, d, J= 7,9 Hz), 7,2 6 (0, 6H , s lg), 5,51-5,16 (3H, m incluindo 5,29 (1,2H, s) , 5,22 (0, 8H, s)), 5,04-4,89 (0,4H, m), 4,89-4,72 (1H, m) , 4,59-4,48 (1H, m) , 4,48-4, 37 (1H, m) , 4,37-4,18 CM m) , 4,18-3,96 (2H, m) , 3,11 (3H , s), 1,30 -1,17 (6H, m) . (7) 3-Acetiltio-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenziloxicarbo-nilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitroben-ziloxicarbonilmetil)carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-3-metanos-sulfoniloxiazetidina (835 mg, 1,63 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 48(6)) em dimetilfor-mamida (42 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,12 g, 9,77 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reac-ção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar cloreto de metileno (50 ml) foram adicionados 3-acetiltio-l-{4-[N-isopropil-N-(p-nitoroben- 682 ΡΕ1340757 ziloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (312 mg, rendimento de 39%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J= 6,9 Hz), 7,55 (1H, d, J= 8,3 Hz), 7,44 (0,6H, s lg) , 7,43 (1H, d, J= 8,3 Hz), 7,17 (0, 6H, s lg) , 5,19 (1,2H, s) , 5,22 (0,8H, s lg) , 5, 02-4, 90 (0, 6H, m) , 4, 90-4,78 (0,4H, m) , 4,65-3,65 (7H, m), 2,36 (3H, s lg), 1,40-1,18 (6H, m) .
Exemplo de Referência 49 3-Acetiltio-l-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
NH2 (1) Éster de t-butilo de ácido N-Carbamoilmetil-N-iso-propil-carbâmico A uma solução de ácido (t-butoxicarbonil-N-iso-propil-amino)-acético (3,20 mg, 14,7 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 48 (2)) e 1-hidroxi-benzotriazole (4,0 g, 29,6 mmol) em cloreto de metileno (150 ml) foram adicionados WSC (5,6 g, 29,2 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (200 mg, 1,64 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a 683 ΡΕ1340757 isso solução aquosa de amoníaco a 28% (40 ml) e a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre cloreto de metileno e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metilenormetanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar éster de t-butilo de ácido N- carbamoilmetil-N-isopropil-carbâmico (2,67 g, rendimento de 84%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 5, 434 (1H, s lg) , 4,25 (1H, s lg) , 3,735 (2H, s) , 1,478 (9H, s) , 1,14 (6H, d, J=6,6 Hz). (2) Hidrocloreto de 2-isopropilaminoacetamida A uma solução de éster de t-butilo de ácido N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbâmico (2,67 g, 12,3 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 49(1)) em 1,4-dioxano (30 ml) foi adicionada uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (30 ml) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso éter dietílico e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura resultante foi filtrada, e o resíduo foi lavada com éter dietílico e, em seguida, seco sob pressão 684 ΡΕ1340757 reduzida, de modo a originar hidrocloreto de 2-isopro-pilaminoacetamida (1,82 g, rendimento de 97%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (500 MHz, CD3OD) : δ (ppm) 3,80 (2H, s) , 3,46-3,38 (1H, m) , 1,34 (6H, d, J=6,8 Hz) (3) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(N-carbamoilmetil-N-iso-propil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de hidrocloreto de 2-isopro-pilamino-acetamida (500 mg, 3,28 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 49(2)) e 3-t-butildife-nilsililoxi-1- (4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (961 mg, 2,19 mmol) em dimetilformamida (29 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (0,54 ml, 3,29 mmol) e trietilamina (1,15 ml, 8,19 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(N-carbamoilmetil- 685 ΡΕ1340757 N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,18 g, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,62 (4H, d, J= 6,6 Hz), 7,52-7,36 (6H, m) , 7,21-6,85 (1H, m) , 4, 80-4,72 (1H, m) , 4,28 (1H, t, J= 7,3 Hz), 4,24 (1H, t, J= 7,3 Hz), 4,16-4,01 (2H, m) , 4,01-3,88 (2H, m) , 1,25 (6H, d, J= 6,7 Hz), 1,07 (9H, s lg). (4) 1-[4-(N-Carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3- tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (6,52 g, 11,8 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 49(3)) em tetra-hidrofurano anidro (326 ml) foi adicionado uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (14,2 ml, 14,2 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (2,35 g, rendimento de 67%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,20-7,02 (0, 6H, m) , 7,02- 6,80 (0,6H, m) , 5, 86-5, 62 (0,4H, m) , 5, 62-5,32 (0, 6H, m) , 5,25-5,14 (0,3H, m) , 4, 90-4,75 (0,7H, m) , 4,67 (0,7H, 686 ΡΕ1340757 quint., J= 6,6 Hz), 4,43-4,34 (0,4H, m) , 4,34-4,22 (0, 6H, m) , 4, 03 (2H, s) , 4,00-3,91 (2H, m) , 3,89 (0,3H, quint., J= 6,0 Hz), 1,26 (6H, dd, J= 6,7, 2,4 Hz). (5) 1-[4-(N-Carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3- tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina e l-[4-(N-cia-nometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3- metanos-sulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-[ 4-(N-carbamoilmetil-N-iso-propil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (2,35 g, 7,88 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 49(4)) em cloreto de metileno (120 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,91 ml, 11,8 mmol) e trietilamina (1,66 ml, 11,8 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilormetanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (516 mg, rendimento de 17%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido e 1 — [ 4 — (cianometil-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il] -3- 687 ΡΕ1340757 metanossulfoniloxiazetidina (634 mg, rendimento de 22%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1-[4-(N-Carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,15-6,72 (1H, m) , 5,65- 5,15 (1H, m) , 4,79-4, 62 (1H, m) , 4,44 (2H, t, J= 6,7 Hz), 4,26 (2H, d, J= 6,7 Hz), 4,05 (2H, m) , 3,11 (3H, s) , 1,26 (6H, m) . 1-[4-(N-Cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,55-7,10 (1H, m) , 5,50- 5,38 (1H, m), 4,93-4,78 (1H, m), 4,60-4,00 (6H, m incluindo 4,51 (2H, t, J= 9,6 Hz), 4,32 (2H, dd, J= 9,6, 3,7 Hz)), 3,11 (3H, s), 1,31 (6H, d, J= 6,8 Hz). (6) 3-Acetiltio-l-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carba-moil)-l,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopro-pil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (516 mg, 1,37 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 49(5)) em dimetilformamida (15 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (939 mg, 8,22 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de 688 ΡΕ1340757 sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo :metanol (20:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (347 mg, rendimento de 71%) , sob a forma de um sólido castanho- pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7 ,45-6,72 (1H, ιη) , 4,76- 4,61 (1H, m) , 4,51 (2H, t, J= 7,4 Hz), 4,47-4,40 (1H, m), 4,40 (2H, s), 3,98 (2H, t, J= 7,4 Hz), 2,37 (3H, s), 1,26 (6H, d, J= 6,8 Hz).
Exemplo de Referência 50 3-Acetiltio-l-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
O
(1) 3-Acetiltio-l-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (635 mg, 1,77 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de 689 ΡΕ1340757
Referência 49(5)) em dimetilformamida (19 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,21 g, 10,6 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano: acetato de etilo (1:1) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (344 mg, rendimento de 57%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,58-7,18 (1H, m) , 4,96- 4,82 (1H, m) , 4,82-4,10 (5H, m incluindo 4,54 (2H, t, J= 8,4 Hz), 4,50-4,40 (1H, m)) , 4,01 (2H, t, J= 8,4 Hz), 2,36 (3H, s), 1,30 (6H, d, J= 6,8 Hz).
Exemplo de Referência 51 3-Acetiltio-l-{4-[1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
690 ΡΕ1340757 (1) 4-Hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)piperidina A uma solução de hidrocloreto de 4-hidroxi-piperidina (3,0 g, 21,8 mmol) numa mistura de cloreto de metileno (90 ml) e piridina (15 ml) foram adicionados éster de p-nitrobenzilo de ácido clorofórmico (15,4 g, 72,0 mmol) e trietilamina (13,1 ml, 93,8 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 dias. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) ->· acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 4-hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)piperidina (2,96 g, rendimento de 48%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,l Hz), 8,51 (2H, d, J=8, 1 Hz), 5,23 (2H, s) , 3, 98-3, 87 (3H, m) , 3,30-3,15 (2H, m) , 1, 96-1,85 (2H, m) , 1,59-1,48 (2H, m) . (2) 4-Metanossulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)piperidina A uma solução de 4-hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil )piperidina (2,96 g, 14,8 mmol) (obtida tal como 691 ΡΕ1340757 descrito no Exemplo de Referência 51 (1)) em cloreto de metileno (90 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (1,15 ml, 14,8 mmol) e trietilamina (2,07 ml, 14,8 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos, e, em seguida, agitada durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo obtido foi recristalizado a partir de uma solução de n-hexano:acetato de etilo (1:1) de modo a proporcionar 4-metanossulfoniloxi-l-(p-nitrobenzi-loxicarbonil)piperidina (3,31 g, rendimento de 87%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 51 (2H, d, 00 00 II •"0 Hz) , 5,23, (2H, s) , 4, 96-4,90 (1H, m), 3, 79- -3, 72 (2H, m), 3,51- -3,44 (2H, m) , 3,05 (3H, s), 2,10- 1, 96 (2H, m) , 1, 92- 1,84 (2H, m). (3) 4-Azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)piperidina A uma solução de 4-metanossulfoniloxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil) piperidina (3,31 g, 9,24 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 51(2)) em dimetilf ormamida (100 ml) foi adicionado azeto de sódio (660 mg, 10,2 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (100°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a 692 ΡΕ1340757 reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar 4-azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)piperidina (2,81 g, rendimento de 100%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,22 (2H, s), 3,86 (2H, dt, J=13,9, 5,1 Hz), 3, 68-3, 62 (1H, m) , 3,32-3, 20 (2H, m) , 1,98-1,85 (2H, m), 1,68-1,61 (2H, m). (4) 4-Amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)piperidina A uma solução de 4-azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil) -piperidina (2,81 g, 9,17 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 51 (3)) em acetonitrilo (84 ml) foi adicionada trifenilfosfina (2,53 g, 9,63 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (70°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso deca-hidrato de sulfato de sódio (3,10 g, 9,63 mmol) e a mistura de reacção foi agitada durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e partilhada entre cloreto de metileno e solução aquosa 0,1 693 ΡΕ1340757 M de cloreto de hidrogénio. À camada aquosa obtida foram adicionados cloreto de metileno e hidrogenocarbonato de sódio, e a camada aquosa foi extraida com cloreto de metileno. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi seco sob pressão reduzida, de modo a originar 4-amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)-piperidina (2,33 g, rendimento de 91%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, OO OO Hz), 7,51 (2H, d, 8,8 Hz) , 5,22 (2H, s), 4,18-4, 06 (2H, m) , 3,01-2,83 (2H, m) , 1, 88-1,80 (2H, m) , 1,34-1,22 (2H, m) e (5) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[1-(p-nitrobenziloxicar-bonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 4-amino-l-(p-nitrobenziloxi-carbonil) piperidina (382 mg, 1,37 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 51(4)) e 3-t-butildi-fenilsililoxi-1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em dimetilformamida (25 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (208 μΐ, 1,37 mmol) e trietilamina (192 μΐ, 1,37 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada suces- 694 ΡΕ1340757 sivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[1-(p-nitro-benziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (574 mg, rendimento de 72%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. ΧΗ· -RMN (4 0 0 MHz r CDC13) : δ (ppm) 8,24 (2H, d, J: = 8, 8 Hz) , 7, 62 (4H, d, J= = 8, 8 Hz) , 7, , 54-7,38 (6H , m) , 7, 36 (1H, s) , 7, 09- -7, 04 (1H, d lg, J= = 8, 8 Hz) , 5,23 (2H, s) r 4,79- -4,72 (1H, m) r 4,22-4 ,04 (5H, m) , 4,01 (2H, dd, J= = 8, 8, 5,1 Hz) , 3, 08· -2, 97 (2H, m) , 2,08- -2, 00 (2H, m) , 1,55- •1, 42 (2H, m) , 1,07 (9H, s). (6) 3-Hidroxi-l-{4-[1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[1- (p-nitrobenziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (570 mg, 0,820 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 51 (5)) em tetra-hidro-furano anidro (17 ml) foram adicionados sucessivamente ácido acético (56 μΐ, o, 984 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (984 μΐ, 0, 984 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a 695 ΡΕ1340757 reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com a solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e a solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:3) -> acetato de etilo:metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[l-(p-nitrobenziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (360 mg, rendimento de 95%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,39 (1H, s), 7,11-7,06 (1H, d lg, J=8, 1 ISI 5,23 (2H, s), co co 1 80 (1H, m) , 4,32 (2H, dd, OD 00 II •"D 6, 6 Hz), 4,24-4,04 (3H, m) , 3,96 (2H, dd, J=9,5, 4,4
Hz), 3,12-2,95 (2H, m), 2,37-2,32 (1H, d, J=5,9 Hz), 2,04- 1,99 (2H, m) , 1,55-1,43 (2H, m) . (7) 3-Metanossulfoniloxi-1-{4-[1-(p-nitrobenziloxicarbonil) -piperidin-4-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[1-(p-nitrobenziloxicarbonil ) -piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (360 mg, 0,780 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 51(6)) em cloreto de metileno (18 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (181 μΐ, 2,34 mmol) e trietilamina (328 μΐ, 2, 34 mmol) num banho de 696 ΡΕ1340757 gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -* acetato de etilo :metanol (98:2) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-l-{4-[1-(p-nitro-benziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (390 mg, rendimento de 93%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (2H , d, J=8,8 Hz) i, 7,52 (1H, s), 7 , Οδ 7,02 (1H, d lg, J=7,7 Hz ), 5,45-5,40 (1H, m), 5,2 3 (2H, έ) , 4,45 (2H, dd, J=10, 3, 6,8 Hz) , 4,27 (2H, dd, J= :10,3, 4,3 Hz), 4,24-4,06 (3H, m) , 3,11 (3H, s) i, 3,10-2,95 (2H, m) , 2,07-2,00 (2H, m) , 1 ,56- -1,44 (2H, m). (8) 3-Acetiltio-l-{4-[1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-piperi-din-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tia-zol-2-il}azetidina (390 mg, 0,723 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 51 (7)) em dimetilfor-mamida (20 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (496 697 ΡΕ1340757 mg, 4,34 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-{4-[1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-piperidin-4- ilcarbamo 00 V \—1 1 1-1 -H -tiazol- - 2 — i1}azeti dina (262 mg, rendimento de 7 0 %) , sob a forma de um sólido castanho-pálido 1 . 1H-RMN (4 0 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8, 1 Hz) , 7,51 (2H, d, J=8 ,1 Hz), 7,41 (1H, s) , 7,08- 7,04 (1H, d lg, J=7, 8 Hz) , 5,23 (2H, s) , 4,53 (2H , t, J=8,8 Hz) , 4,46 -4,40 (1H, m) , 4,22-4, 04 (3H, m) , 3,98 (2H, dd, J=8, 8 , 5,9 Hz) , 3, 12- 2, 96 (2H, m 0, 2,37 (3H, s), 2,06- -2,00 (2H, m) , 1,55- 1,43 (2H, m) .
Exemplo de Referência 52 3-Acetiltio-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina
AcS- N.
,CO-NHfc*< | \^NPNZ 698 ΡΕ1340757 (1) (3R)-3-Hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina A uma suspensão de hidrocloreto de (3R)-3-hidroxipirrolidina (7,00 g, 56,6 mmol) em cloreto de metileno (210 ml) foram adicionados éster de p-nitrobenzilo de ácido clorofórmico (13,4 g, 62,3 mmol) e trietilamina (17,4 ml, 125 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:1) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3R)-3-hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidina (13,6 g, rendimento de 90%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,l Hz), 7,53 (2H, d, J=8, 1 Hz), 5,24 (2H, s), 4,55-4,50 (1H, m) , 3, 63-3,53 (3H, m) , 3,51-3,44 (1H, m) , 2,09-1, 93 (2H, m) (2) (3R)-3-Metanossulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) -pirrolidina A uma solução de (3R)-3-hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil) pirrolidina (9,0 g, 33,8 mmol) em cloreto de ΡΕ1340757 - 6 9 9 - metileno (270 ml) foram adicionados cloreto de metanossul-fonilo (2,88 ml, 37,2 mmol) e trietilamina (5,21 ml, 37,2 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3R)-3-metanos-sulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidina (11,5 g, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,l Hz), 7,53 (2H, m) , 5, 33-5,23 (1H, m) 5,24 (2H, s) , 3,82 (1H, dd, J=12,5, 5,1 Hz), 3,72-3,53 (3H, m), 3,06 (3H, s), 2,42-2,26 (1H, m), 2,26-2,11 (1H, m). (3) (3 S)-3-Azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina A uma solução de (3R)-3-metanossulfoniloxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidina (4,00 g, 11,6 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 52 (2)) em dimetilformamida (120 ml) foi adicionado azeto de sódio (831 mg, 12,8 mmol), e a mistura foi agitada num banho de 700 ΡΕ1340757 óleo (100°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1 -> 1:2) como eluente de modo a proporcionar (3S) — 3-azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina (3,43 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7 Hz), 7,54 (2H, d, J=8,7 Hz), 5,18 (2H, s) , 4,24-4,38 (1H, m) , 3, 62-3, 48 (4H, m) , 2,19-2,11 (2H, m) . (4) (3 S)-3-Amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina A uma solução de (3S)-3-azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil) pirrolidina (3,43 g, 11,6 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 52 (3)) em acetonitrilo (103 ml) foi adicionada trifenilfosfina (3,19 g, 12,2 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (70°C) durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso deca-hidrato de sulfato de sódio (3,93 g, 12,2 mmol) e a mistura de reacção foi agitada durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e partilhada entre cloreto de metileno e solução aquosa 0,1 701 ΡΕ1340757 M de cloreto de hidrogénio. À camada aquosa obtida foram adicionados cloreto de metileno e hidrogenocarbonato de sódio, e a camada aquosa foi extraida com cloreto de metileno. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi seco sob pressão reduzida, de modo a originar (3 S)-3-amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina (2,83 g, rendimento de 92%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,7 Hz), 7, 52 (2H, d, J=8,7 Hz), 5,23 (2H, s), 3, 68 -3,57 (3H, m) , 3, 52-3,44 (1H, m), 3,19-3,11 (1H, m), 2,14- -2,04 (1H, m) , 1,77-1,64 (1H, m). (5) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[(3 S)-1-(p-nitrobenzilo-xicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze- tidina A uma suspensão de (3S)-3-amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil) pirrolidina (363 mg, 1,37 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 52 (4)) e 3-t-butil-difenilsililoxi-1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (4)) em dimetilformamida (25 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (208 μΐ, 1, 37 mmol) e trietilamina (192 μΐ, ir 37 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi parti- 702 ΡΕ1340757 lhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (566 mg, rendimento de 72%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7,61 (4H, d, J= :8, ( 3 Hz) , 7,53 (2H, m) , 7, 48-7,38 (6H, m) , 7,37 (1H / s) , 7, 22- -7, 15 (1H, t lg, J= = 8,3 Hz) , 5 ,24 (2H, d, J= 10,7 Hz) , 4, 80- -4, 74 (1H, m) , 4 , 67 -4,E 59 (1H, m) , 4,11 (2H, t, J=7,3 Hz ) , 4 ,07- -4,00 (2H, m) , r 3, ,81 (1H , dt, J= 10,7, 5, 9 Hz) , 3, 67- -3, 52 (2H, m) , 3, 40 (1H, dd, J= 11,2, 5,4 Hz) , 2,33 -2,22 (1H, m) , 2,08-1, 92 (1H, m) , 1,07 (9H, s) . (6) 3-Hidroxi-l-{4-[ (3S)-1- (p-nitrobenziloxicarbonil)-pir-rolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarba-moil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (560 mg, 0,816 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 52 (5)) em tetra-hidrofurano anidro (17 ml) foi adicionado sucessivamente ácido acético (56 μΐ, 0,980 mmol) e uma solução de 703 ΡΕ1340757 fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (980 μΐ, 0, 980 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foram adicionados a isso acetato de etilo e água e a camada aquosa foi extraida com acetato de etilo. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de eti-lo:metanol (95:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4 - [ (3S)-1- (p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (359 mg, rendimento de 98%), sob a forma de um sólido branco. ^-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7,53 (2H, m) , 7, 40 (1H, s), 7,24-7,17 (1H, s ig), O PO LO 5, 18 (2H , m) , 4,89 -4, , 82 (1H, m) , 4,66-4,58 (1H, m) , 4,33 (2 H, t, J=7, 8 Hz) , 3 , 96 (2H , dd, J=8,8, 3, r 9 Hz) , 3, í 30 (1H , dt , J= 11,2, 5, 8 Hz ) , 3, 66 -3,52 (2H, m), 3,46- 3,39 (1H, m) , 2,44 -2,37 (1H, s ig) , 2, 33-2, 22 (1H, m) , 2,10 -1,95 (1H, m) . (7) 3-Metanossulfoniloxi-1-{4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicar-bonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil )-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (350 mg, 0,782 mmol) (obtida tal como descrito 704 ΡΕ1340757 no Exemplo de Referência 52(6)) em cloreto de metileno (18 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (182 μΐ, 2,35 mmol) e trietilamina (329 μΐ, 2,35 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (98:2) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-{ 4-[ (3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (410 mg, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido.
-RMN (4i 00 MHz, CDCls) : δ (ppm) E S, 21 (2H, m) , 7 , 53 (2H m) , 7, 46 (1H, s) , 7,20-7 ,14 (1H, s ig), 5,45-5,40 (1H, m) 5, 24 (2H, d r J=8 ,8 Hz), 4 / .66-4,59 (1H , m) , 4,46 (2H , t J= :8, 1 Hz) r 4, 27 (2H, dd, J=9,9, 4,0 Hz), 3,81 (1H, dt J= = 11,0 , 6 ,3 H: 7-) , 3, 67-3, 52 (2H, m) , 3, 42 (1H, dd, J=1 1,0 5, 1 H 2 0 , 3, 12 (3H, s), 2,3 d-2,24 (1H, m), 2,07-1 ,95 (1H m) . (8) 3-Acetiltio-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina 705 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(3S)-1- (p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (410 mg, 0,780 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 52(7)) em dimetilfor-mamida (21 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (534 mg, 4,68 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexa-no: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) -pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (287 mg, rendimento de 73%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7,52 (2H, m), 7,42 (1H, s), 7,20-7,15 (1H, s lg), 5,24 (2H, d, J=10,7 Hz), 4, 66-4,59 (1H, m) , 4,53 (2H, t, J=8,3 Hz), 4,47-4,41 (1H, m) , 3,99 (2H, t, J=6,4 Hz), 3, 84-3, 76 (1H, m) , 3,65-3,53 (2H, m), 3,41 (1H, dd, J=ll,7, 4,9 Hz), 2,37 (3H, s), 2,33-2,20 (1H, m), 2,07-1,93 (1H, m). 706 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 53 3-Acetiltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
(1) (3 S)-3-Acetoxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina A uma solução de (3R)-3-metanossulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina (7,50 g, 21,8 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 52(2)) em dimetilformamida (225 ml) foi adicionado acetato de potássio (6,41 g, 65,3 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar (3S)-3-acetoxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina (5,51 g, rendimento de 82%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,l Hz), 707 ΡΕ1340757 7,53 (2Η, d, J=8,1 Hz), 5, 33-5,29 (1H, m) , 5,24 (2H, s) , 3, 68-3, 50 (4H, m) , 2,19-2,02 (2H, m) , 2,04 (3H, s) . (2) (3 S)-3-Hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina A uma solução de (3 S)-3-acetoxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil ) -pirrolidina (5,51 g, 17,8 inmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53(1)) em metanol (200 ml) foi adicionada uma quantidade catalitica de metóxido de sódio, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionada a isso uma solução de cloreto de hidrogénio 4N em 1,4-dioxano (4,3 ml) a fim de neutralizar a mistura de reacção. A mistura de reacção resultante foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3S) — 3-hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina (4,00 g, rendimento de 84%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J= = 8,1 Hz) 7,53 (2H, d, r J=8,1 Hz), 5,24 (2H, s), 4,55-4,50 (1H, m) 3, 63 - - 3,52 (3H, m), 3,52-3,44 (1H, m), 2,09-1,92 (2H, m) . 708 ΡΕ1340757 (3) (3S)-3-Metanossulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) - pirrolidina A uma solução de (3 S)-3-hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil) pirrolidina (4,00 g, 15,0 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53(2)) em cloreto de metileno (120 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (1,28 ml, 16,5 mmol) e trietilamina (2,31 ml, 16,5 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar (3S)-3-meta-nossulfoniloxi-1- (p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina (5,33 g, rendimento de 100%), sob a forma de um xarope incolor e transparente. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (2H, dd, J=8,1, 3,7 Hz), 5, 33-5,23 (1H, m) , 5,24 (2H, s), 3,82 (1H, dd, J=12,5, 5,1 Hz), 3,72-3,53 (3H, m), 3,06 (3H, s), 2,42-2,26 (1H, m), 2,26-2,11 (1H, m). 709 ΡΕ1340757 (4) (3R)-3-Azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidina A uma solução de (3S)-3-metanossulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina (5,33 g, 15,0 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53(3)) em dimetilformamida (159 ml) foi adicionado azeto de sódio (1,07 g, 16,5 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (100°C) durante 3,5 horas. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa de cloreto de sódio a 10% e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (3:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar (3R)-3-azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidina (4,48 g, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo incolor. XH-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,53 (2H, d, J=8, 8 Hz), 5,24 (2H, s) , 4,24-4,18 (1H, m) , 3, 62-3,48 (4H, m) , 2,19-2,02 (2H, m) . (5) (3R)-3-Amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina A uma solução de (3R)-3-azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil ) pirrolidina (4,48 g, 15,4 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53(4)) em acetonitrilo 710 ΡΕ1340757 (134 ml) foi adicionada trifenilfosfina (4,22 g, 16,1 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (70°C) durante 1,5 horas. Depois de se verificar o desaparecimento dos materiais de partida, foi adicionado a isso deca-hidrato de sulfato de sódio (5,19 g, 16,1 mmol) e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e partilhada entre cloreto de metileno e solução aquosa 0,1 M de cloreto de hidrogénio. À camada aquosa obtida foram adicionados cloreto de metileno e hidrogenocarbonato de sódio, e a camada aquosa foi extraída com cloreto de metileno. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi seco sob pressão reduzida, de modo a originar (3R)-3-amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidina (3,53 g, rendimento de 86%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 52 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 5,23 (2H, s) , 3,66-3, 58 (3H, m) , 3, 52-3,45 (1H, m) , 3,19-3,12 (1H, m) , 2,13-2, 04 (1H, m) , 1,76-1,66 (1H, m). (6) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenzilo-xicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}aze- tidina A uma suspensão de (3R)-3-amino-l-(p-nitrobenzi-loxicarbonil)pirrolidina (363 mg, 1,37 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53 (5)) e 3-t- 711 ΡΕ1340757 butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azeti-dina (500 mg, 1,14 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (4)) em dimetilformamida (25 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (208 μΐ, 1,37 mmol) e trietilamina (192 μΐ, 1,37 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenil-sililoxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirroli-din-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (598 mg, rendimento de 51%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. -RMN (4 C i0 MHz , CDC13) : δ (ppm) 8 , 22 (2H, d, J·· CO OO II Hz) , 7, 62 (4H, d, J= = 8,1 Hz) r 7,5 .6-7,38 (8H, m) , 7, 37 (1H, s) , 7, 22- 7,16 (1H / s lg) , 5, 24 (2H, d , J= 8,8 E íz) r 4,76 (1H, ddd, J=6, í 5, ,1 Hz), 4, 67 -4, 58 (1H, m) , 4,15 "4, . 07 (2H, m) , 4, 06- 3, 98 (2H / m) , 3,8 6- 3,7 8 (1H, m) , 3, 67- 3, 52 (2H, m) , 3, 40 (1H, dd, J= = 11,0, 5 ,1 Hz ), 2,34- 2,20 (1H, m ) , 2,02- -1, 90 (1H, m), 1,07 (9H, s) . 712 ΡΕ1340757 (7) 3-Hidroxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pir-rolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma suspensão de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarba-moil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (590 mg, 0,860 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53(6)) em tetra-hidrofurano anidro (18 ml) foram adicionados sucessivamente ácido acético (59 μΐ, 1,03 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,03 ml, 1,03 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo :metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) -pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (378 mg, rendimento de 98%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8 \—1 C\l (2H, m), 7 ,53 (2H, m) , 7,40 (1H, s), 7,24-7,18 (1H, s ig), 5,30-5,18 (2H, m), 4,88-4,81 (1H, m) , 4, 66-4,58 (1H, m) , 4,32 (2H, t, J=7,8
Hz), 3,96 (2H, dd, J=8,8, 4,9 Hz), 3,80 (1H, dt, J=12,2, 713 ΡΕ1340757 6,8 Hz), 3, 66-3,52 (2H, m) , 3,46-3, 40 (1H, m) , 2,49-2,41 (1H, s lg) , 2,33-2,22 (1H, m) , 2,09-1, 95 (1H, m) . (8) 3-Metanossulfoniloxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicar-bonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitro-benziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (370 mg, 0,827 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53(7)) em cloreto de metileno (19 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (192 μΐ, 2,48 mmol) e trietilamina (348 μΐ, 2,48 mmol) num banho de gelo. A mistura de reacção foi levada até à temperatura ambiente em 10 minutos, e, em seguida, agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo :metanol (98:2) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarba-moil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (422 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, m) , 7,53 (2H, m) , 7,46 (1H, s), 7,19-7,13 (1H, s lg), 5, 45-5, 40 (1H, m), 714 ΡΕ1340757 5, 24 (2H, d, J=10,7 Hz), 4,66- 4,59 (1H, m), 4,46 (2H, t J= 1,8 Hz) , 4,27 (2H, dd, J=9, 8, 2 ,9 Hz), 3, ,81 (1H, dt J= 43,7, 5 ,9 Hz), 3, 66-3, 54 (2H, , m) , 3, 43 (1H, dd, J=ll,2 4, 4 Hz), 3,12 (3H, s), 2,30-2, 22 ( 1H, m) , 2, 09-1 ,95 (1H m) . (9) 3-Acetiltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) -pirrolidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (420 mg, 0,799 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53(8)) em dimetilfor-mamida (21 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (548 mg, 4,79 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilormetanol (99:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) -pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azeti- 715 ΡΕ1340757 dina (280 mg, rendimento de 69%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7,3 (2H, m) , 7,42 (1H, s), 7,21-7,15 (1H, s lg) , 5,24 (2H, d, J=10,7
Hz), 4,66-4,58 (1H, m), 4,53 (2H, dd, J=8,8, 7,8 Hz), 4,47-4,41 (1H, m) , 3,99 (2H, dd, J=6,8, 5,9 Hz), 3, 84-3, 76 (1H, m) , 3, 66-3, 53 (2H, m) , 3,41 (1H, dd, J=ll,7, 4,9 Hz), 2,37 (3H, s), 2,33-2,23 (1H, m) , 2,03-1, 94 (1H, m) .
Exemplo de Referência 54 3-Acetiltio-l-{4-[(1-p-nitrobenziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina
NPNZ (1) 3-Hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)azetidina
Uma solução de l-benzidril-3-hidroxiazetidina (9,00 g, 37,6 mmol) em metanol (270 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (9,00 g) num banho de água (50°C) durante 5,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e água destilada. A camada orgânica foi concentrada sob pressão reduzida e seca in vacuo, de modo a originar um 716 ΡΕ1340757 produto bruto. A uma solução do produto bruto numa mistura de cloreto de metileno (82 ml) e metanol (55 ml) foram adicionados éster de p-nitrobenzilo de ácido clorofórmico (8,90 g, 41,3 mmol) e trietilamina (5,79 ml, 41,3 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) -> acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)aze-tidina (3,52 g, rendimento de 37%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8, 8 Hz), 7,50 (2H, d, J=8, 8 Hz), 5,19 (2H, s) , 4,71-4,64 (1H, m) , 4,27 (2H, dd, J=9, 9, 7,0 Hz), 3,93 (2H, dd, J=9, 9, 4,0 Hz), 2,20-2,16 (1H, d lg, J=5,9 Hz). (2) 3-Metanossulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)aze-tidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(p-nitrobenziloxi-carbonil)azetidina (3,52 g, 14,0 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 54(1)) em cloreto de metileno (106 ml) foram adicionados cloreto de metanos- 717 ΡΕ1340757 sulfonilo (1,19 ml, 15,4 mmol) e trietilamina (2,16 ml, 15,4 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:1 -> 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-azetidina (4,63 g, rendimento de 100%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (2H, d, 00 00 II >"0 Hz), 5,29-5,22 (1H, m) , 5,20 (2H, s) , 4,40 (2H, dd, 0 \—1 II >"0 2, 6,2 Hz), 4,22 (2H, dd, J=10,2, 4,0 Hz) , 3, 08 (3H, s). (3) 3-Azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) azetidina (4,63 g, 14,0 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 54(2)) em dimetil-formamida (140 ml) foi adicionado azeto de sódio (1,37 g, 21,0 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (100°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi 718 ΡΕ1340757 partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexa-no: acetato de etilo (2:1 -► 1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)azetidina (2,15 g, rendimento de 55%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,19 (2H, s), 4,33-4,28 (3H, m) , 4,03-3,96 (2H, m). (4) 3-Amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)azetidina A uma solução de 3-azido-l-(p-nitrobenziloxicarbonil ) azetidina (2,15 g, 7,76 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 54(3)) em acetonitrilo (65 ml) foi adicionada trifenilfosfina (2,14 g, 8,14 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (70°C) durante 2 horas. Depois de se verificar o desaparecimento dos materiais de partida, foi adicionado a isso deca-hidrato de sulfato de sódio (2,62 g, 8,14 mmol) e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada e partilhada entre cloreto de metileno e solução aquosa 0,1 M de cloreto de hidrogénio. À camada aquosa obtida foram adicionados cloreto de metileno e 719 ΡΕ1340757 hidrogenocarbonato de sódio, e a camada aquosa foi extraída com cloreto de metileno. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi seco sob pressão reduzida, de modo a originar 3-amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil)-azetidina (1,87 g, rendimento de 96%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (2H, d, J=8, 8 Hz), 5,18 (2H, s) , 4,27 (2H, dd, J=8,6, 8,6 Hz), 3,87 (1H, tt, J=5,l, 7,3 Hz), 3,70 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz). (5) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(1-p-nitrobenziloxicar-bonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-amino-l-(p-nitrobenziloxicarbonil ) -azetidina (549 mg, 2,18 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 54(4)) e 3-t-butildife- nilsililoxi-1- (4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (800 mg, 1,82 mmol) em dimetilformamida (40 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (331 μΐ, 2,18 mmol) e trietilamina (306 μΐ, 2,18 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, 720 ΡΕ1340757 seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(1-p-nitro-benziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,06 g, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,l Hz), 7, 62 (4H, d, J=8, 1 Hz), 7,54 -7, 39 (8H, m) , 7,37 (1H, s), 5,21 (2H, s) , 4,89-4,81 (1H, m) , 4,81-4,73 (1H, m), 4,41 (2H, dd, J=8, 8, 8,8 Hz ) , 4, 12 (2H, dd, J= 8,8, 8,8 Hz), 1 LO O 3, 98 (4H, m) , 1,07 (9H, s) . (6) 3-Hidroxi-l-{4-[(1-p-nitrobenziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(1-p-nitrobenziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,06 g, 1,58 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 54 (5)) em tetra-hidro-furano anidro (53 ml) foram adicionados sucessivamente ácido acético (109 μΐ, 1,90 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,90 ml, 1,90 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com 721 ΡΕ1340757 solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[(1-p-nitrobenziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (649 mg, rendimento de 95%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,58-7,50 (1H, s lg), 7,52 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,40 (1H, s), 5,20 (2H, s), 4, 90-4, 80 (1H, m) , 4,42 (2H, dd, J=8,8, 8,8 Hz), 4,34 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,02 (2H, dd, J=9,5, 5,2 Hz), 4,00-3,96 (2H, m). (7) 3-Metanossulfoniloxi-l-{4-[(1-p-nitrobenziloxicarbo-nil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(1-p-nitroben-ziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-azetidina (640 mg, 1,48 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 54(6)) em cloreto de metileno (20 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (343 μΐ, 4,43 mmol) e trietilamina (621 μΐ/ 4' 43 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre 722 ΡΕ1340757 acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (98:2) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(1-p-nitro-benziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (611 mg, rendimento de 81%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50-7,46 (1H, s lg), 7,46 (1H, s), 5,46-5,41 (1H, m) , 5,20 (2H, s) , 4,89-4,80 (1H, m) , 4,49- 4,38 (4H, m) , 4,28 (2H, dd, J=ll,8, 4,4 Hz), 4,01 (2H, dd, J=9, 5, 5,3 Hz), 3,12 (3H, s) . (8) 3-Acetiltio-l-{4-[(1-p-nitrobenziloxicarbonil)-azeti-din-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(1-p-nitrobenziloxicarbonil ) -azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (610 mg, 1,19 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 54(7)) em dimetil-formamida (81 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (817 mg, 7,15 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (80°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato 723 ΡΕ1340757 de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexa-no: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[(1-p-nitroben-ziloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}-azetidina (405 mg, rendimento de 69%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 ME :z, CDCls) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, 00 II *“0 8 Hz) , 7,53· -7,49 (1H, m) , 7,51 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7, 43 (1H, s) , 5,20 (2H, s) , 4,89-4,79 (1H, m), 4,54 (2H, dd, J=8, 1, 8,1 Hz) , 4,48- 4,18 (3H, m), 4 ,04-3,97 (2H, m) , 2, r 37 (3H, s) φ
Exemplo de Referência 55 3-Acetiltio-l-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
(1) Hidrocloreto de 4-(p-nitrobenziloxicarbonil)piperazina A uma solução de 4-(t-butoxicarbonil)piperazina (1,50 g, 8,05 mmol) em cloreto de metileno (68 ml) foram 724 ΡΕ1340757 adicionados éster de p-nitrobenzilo de ácido clorofórmico (1,90 g, 8,86 iranol) e trietilamina (1,24 ml, 8,86 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano: acetato de etilo = (1:3) como eluente de modo a proporcionar 1- (t-butoxicarbonil)-4-(p-nitrobenziloxicar-bonil)piperazina (2,60 g, rendimento de 89%), sob a forma de um óleo amarelo.
Subsequentemente, a uma solução deste produto (2,60 g, 7,12 mmol) em acetonitrilo (100 ml) foi adicionada uma solução 4N de cloreto de hidrogénio em acetato de etilo (15,0 ml) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura de reacção foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso éter dietilico e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção foi separada por filtração e lavada com éter dietilico, de modo a originar hidrocloreto de 4-(p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazina (2,4 g, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido branco. 725 ΡΕ1340757 (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[(4-p-nitrobenziloxicar-bonil)-piperazino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de hidrocloreto de 4- (p-nitroben-ziloxicarbonil)piperazina (874 mg, 2,19 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 55(1)) e 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azeti-dina (800 mg, 1,82 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em dimetilformamida (40 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (0,33 ml, 2,19 mmol) e trietilamina (0,30 ml, 2,19 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com uma solução aquosa 0,5M de ácido cloridrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (915 mg, rendimento de 73%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,24 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,61 (4H, dd, J= 7,9, 1,4 Hz), 7,52 (2H, d, J= 8,7 Hz) 726 ΡΕ1340757 7,49- •7,37 (6H, m) , 7,14 (1H, s) , 5,25 (2H, s), 4,80-4,71 (1H, m) , 4,11 (2H, dd, J= 8,7, 6,6 Hz) , 4, 01 (2H, dd, J= 8,7, 4,9 Hz) , 3, 95- -3, 66 (4H, m) , 3, 65- 3,52 (4H, m) , 1,06 (9Η, s) . (3) 3-Hidroxi-l-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazi-no-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,77 g, 1,71 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 55(2)) em tetra-hidro-furano anidro (35 ml) foram adicionados sucessivamente ácido acético (0,11 ml, 1,88 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,88 ml, 1,88 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -> acetato de eti-lormetanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1-{4- [ (4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil ]-1, 3-tiazol-2-il} azetidina (726 mg, rendimento de 95%), sob a forma de um sólido branco. 727 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,24 (2H, d, J= 8,6 Hz), 7,52 (2H, d, J= 8,6 Hz), 7,17 (1H, s) , 5,25 (2H, s) , 4,89- 4,79 (1H, m), 4,32 (2H, dd, J= 9,1, 6,7 Hz), 3,96 (2H, dd, J= 9,1, 4,5 Hz), 3, 93-3, 68 (4H, m) , 3, 66-3, 52 (4H, m) . (4) 3-Metanossulfoniloxi-l-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbo- nil)-piperazino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3—hidroxi-1-(4-[(4-p-nitroben-ziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}aze-tidina (804 mg, 1,80 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 55(3)) em cloreto de metileno (40 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,30 ml, 2,15 mmol) e trietilamina (0,17 ml, 2,15 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo: metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (550 mg, rendimento de 58%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,5 Hz), 728 ΡΕ1340757 7,53 (2H, d, J= 8,5 Hz) , 7,25 (1H, s) , 5,50-5,39 (1H, m), 5,26 (2H, s) , , 4,49 (2H, t, J= = 9,6 Hz) , 4,26 (2H, dd, J= 9, 6, 4,2 Hz) , , 4,00- 3, 66 (4H, m) , 3 , 66- -3,47 (4H, m) , 3,11 (3H, s) . (5) 3-Acetiltio-l-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbonil)-pipera-zino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il} azetidina (550 mg, 1,05 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 55(4)) em dimetilformamida (40 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (717 mg, 6,28 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3—acetiltio-1-{4-[(4-p-nitrobenziloxicarbonil)-piperazino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (345 mg, rendimento de 64%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= 8,7 Hz), 729 ΡΕ1340757 7,53 (2Η, d, J= 8,7 Hz), 7,22 (1H, s) , 5,25 (2H, s) , 4,52 (2H, t, J= 8,4 Hz), 4,48-4,39 (1H, m) , 3,98 (2H, dd, J= 8,4, 5,3 Hz), 3, 95-3, 68 (4H, m) , 3,45-3, 68 (4H, m) , 2,33 (3H, s) .
Exemplo de Referência 56 3-Acetiltio-l-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)etilcar-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
O
(1) Éster de t-butilo de ácido (2-hidroxietil)carbâmico A uma solução de aminoetanol (2,51 g, 41,1 mmol) numa mistura de cloreto de metileno (50 ml) e metanol (50 ml) foram adicionados anidrido di-t-butoxicarbónico (13,5 g, 61,9 mmol) e trietilamina (8,6 ml, 61,7 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo obtido foi partilhado entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar éster de t-butilo 730 ΡΕ1340757 de ácido (2-hidroxietil)carbâmico (6,18 g, rendimento de 93%), sob a forma de um xarope incolor e transparente. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 5,01 (1H, s lg) , 3,70 (2H, s lg) , 3,29 (2H, q, J=5,l Hz), 2,65 (1H, s lg) , 1,45 (9H, s) . (2) Éster de t-butilo de ácido (2-azidoetil)carbâmico A uma solução de éster de t-butilo de ácido (2-hidroxietil)carbâmico (1,5 g, 6,2 mmol) em tetra-hidro-furano (75 ml) foram adicionados difenilfosforil-azida (3,0 ml, 13,9 mmol), trifenilfosfina (3,7 g, 14,1 mmol), e uma solução a 40% de azodicarboxilato de dietilo em tolueno (5,1 g, 13,9 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 4 horas sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar éster de t-butilo de ácido (2-azidoetil)carbâmico (1,24 g, rendimento de 72%), sob a forma de um xarope incolor e transparente. 1H-RMN (500 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 4,85 (1H, s lg) , 3,42 (2H, t, J=4,8 Hz), 3,31 (2H, t, J=4,8 Hz), 1,45 (9H, s). 731 ΡΕ1340757 IV (película líquida): 2103, 1697, 1521, 1368, 1272, 1253 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : 187 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : Valor observado: 187,1186 [M+H]+, Valor calculado: 187,1195 (C7H1502N4) (3) Éster de p-nitrobenzilo de ácido (2-t-butoxicarbo-nilaminoetil)carbâmico
Uma solução de éster de t-butilo de ácido (2-azidoetil)carbâmico (1,22 g, 6,55 mmol) em metanol (60 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (1,22 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada, e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. A uma solução do produto bruto obtido em cloreto de metileno (60 ml) foram adicionados éster de p-nitrobenzilo de ácido clorofórmico (2,12 g, 9,8 mmol) e trietilamina (1,37 ml, 9,8 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (3:1) como eluente de modo a propor- 732 ΡΕ1340757 cionar éster de p-nitrobenzilo de ácido (2-t-butoxi-carbonilaminoetil)carbâmico (1,46 g, rendimento de 66%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=9, 0 Hz), 7,51 (2H, d, J=9, 0 Hz), 5,37 (1H, s lg) , 5,20 (2H, s) , 4,82 (1H, s lg), 3,35-3,25 (4H, m), 1,45 (9H, s). IV (KBr): 3355, 1708, 1692, 1534, 1350, 1263, 1170 cm-1 Espectro de massa (BAR+) : 340 [M+H]+
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : Valor obser vado: 340,1512 [M+H]+, Valor calculado: 340,1508 (C15H22O6N3) (4) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[2-(p-nitrobenziloxicar-bonilamino)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de éster de p-nitrobenzilo de ácido (2-t-butoxicarbonilaminoetil)carbâmico (1,46 g, 4,3 mmol) em 1,4-dioxano (15 ml) foi adicionada uma solução 4N de cloreto de hidrogénio em 1,4-dioxano (15 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso éter dietilico e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção resultante foi separada por filtração e lavada com éter dietilico, de modo a originar hidrocloreto de 1-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)etilamina (1,18 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco.
Subsequentemente, a uma suspensão de hidrocloreto de 2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)etilamina (490 mg, 1,77 733 ΡΕ1340757 mmol) anteriormente descrita e 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (530 mg, 1,21 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em dimetilformamida (26,5 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (0,3 ml, 1,98 mmol) e trietilamina (0,5 ml, 3,59 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:ace-tonitrilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilami-no)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (630 mg, rendimento de 79%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,16 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 62 (4H, d, J=6,8 Hz), 7,50-7,38 (9H, m) , 7,35 (1H, s) , 5, 62 (1H, t lg, J=5,9 Hz), 5,17 (2H , s), 4,79-4,72 (1H, m) , 4,09 (2 H, dd, J=8,8, 6,6 Hz), 4,00 (2H, dd, J=8, 8, 4,9 Hz) , 3,55 (2H, q, J=5, 9 Hz), 3,43 (2H, q, J=5,9 Hz) , 1,07 (9H, s) . IV (KBr): 1724, 1660, 1547, 1523, 1346, 1318, 1255, 1113 cm 1 734 ΡΕ1340757
Espectro de massa (BAR+) : 660 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : Valor observado: 660,2324 [M+H]+, Valor calculado: 660,2312 (C33H38O6SSÍ) (5) 3-Hidroxi-l-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)etil- carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,21 g, 1,84 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 56(4)) em tetra-hidro-furano anidro (60,6 ml) foram adicionados sucessivamente ácido acético (0,13 ml, 2,27 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,2 ml, 2,2 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada durante 2,5 horas sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado éter isopropílico, e a mistura foi agitada, lavada e separada por filtração, de modo a originar 3-hidroxi-l-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (667 mg, rendimento de 86%), sob a forma de um sólido amarelo. 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz),
8,03 (1H, t, J=5, 9 Hz), 7,59 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (1H 735 ΡΕ1340757 t, J= = 5, 9 Hz) , 7,41 (1H, s) , 5,83 (1H, d, J= =5, 9 Hz) , 5, 17 (2H, s) , 4, 66- -4,58 (1H, m) , 4,23 (2H, dd, J= = 8, 8, 7,0 Hz) , 3,79 (2 H, dd, J=8,8, 4,9 Hz) , 3,31 (2H, q# J: =5, 9 Hz) , 3,16 (2 H, q, J: = 5, 9 Hz) . IV (KBr): 1698 . 1655 , 1552, 1520, 1343, 127 9 cm" -1
Espectro de massa (BAR+) : 422 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : Valor observado: 444,0952 [M+Na]+, Valor calculado: 444,0953 (Ci7Hi906N5SNa) (6) 3-Metanossulfoniloxi-1-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonil-amino)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3—hidroxi-1-{4-[2-(p-nitrobenzi-loxicarbonilamino)etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina (658,4 mg, 1,56 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 56(5)) numa mistura de cloreto de metileno (33 ml) e piridina (5 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,31 ml, 4,00 mmol) e trietilamina (0,57 ml, 4,09 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio 736 ΡΕ1340757 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossul-foniloxi-1-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etilcar-bamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (607,3 mg, rendimento de 78%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. XH· -RMN (400 MHz, DMSO-d6) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8, 8 Hz), 8, 10 (1H, t, J=5, 9 Hz), 7,59 (2H, d, J= = 8,8 Hz) , 7,51 (1H, t, J=5, 9 Hz), 7,50 (1H, s) , 5,46- -5, 41 (1H, m) , 5,17 (2H, s) , 4,45 (2H, dd, J=9, 9, 6, 6 Hz) , 4,17 (2H, dd, J=9, 9, 4,0
Hz), 3,29 (3H, s) . IV (KBr) : 1720, 1658, 1547, 1523, 1348, 1255, 1184, 1169 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : 500 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : Valor observado: 500,0910 [M+H]+, Valor calculado: 500,0910 (C18H22O8N5S2) (7) 3-Acetiltio-l-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (607,3 mg, 1,22 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 56(6)) em dimetilformamida (33 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,06 g, 7,35 mmol) à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi 737 ΡΕ1340757 agitada num banho de óleo (80°C) durante 7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[2-(p-nitrobenziloxicar-bonilamino)-etilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina (335,8 mg, rendimento de 58%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,3 Hz), 8,05 (1H, t, J=5, 9 Hz), 7,58 (2H, d, J=8,3 Hz), 7,50 (1H, t, J=5, 9 Hz), 7,47 (1H, s) , 5,17 (2H, s) , 4,50 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,42-4,36 (1H, m) , 3,92 (2H, dd, J=8,8, 4,6 Hz), 3, 305 (2H, q, J=5, 9 Hz), 3,16 (2H, q, J=5, 9 Hz), 2,36 (3H, s) . IV (KBr): 3368, 1690, 1677, 1543, 1520, 1494, 1349, 1255, 1239, 1108 cm-1
Espectro de massa (BAR+) : 480 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : Valor observado: 480,1002 [M+H]+, Valor calculado: 480,1011 (C19H22O6N5S2) 738 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 57 3-Acetiltio-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
O
NHPNZ (1) l-t-Butoxicarbonil-3-(metanossulfoniloxi)azetidina A uma solução de l-t-butoxicarbonil-3-hidroxi-azetidina (3,24 g, 18,7 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 31(1)) em cloreto de metileno (160 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (1,59 ml, 20,6 mmol) e trietilamina (2,89 ml, 20,6 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar l-t-butoxicarbonil-3-(metanossulfoniloxi)-azetidina (4,71 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo amarelo. 739 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 5,23-5,17 (1H, m) , 4,28 (2H, dd, J=6, 6, 1,5 Hz), 4,10 (2H, m) , 3,07 (3H, s) , 1,46 (9Η, s) . (2) 3-Azido-l-(t-butoxicarbonil)azetidina A uma solução de l-t-butoxicarbonil-3-(metanos-sulfoniloxi)azetidina (4,71 g, 18,7 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 57(1)) em dimetilfor-mamida (140 ml) foi adicionado azeto de sódio (3,65 g, 56,1 mmol), e a mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (4:1) como eluente de modo a proporcionar 3-azido-l-(t-butoxicarbonil)-azetidina (3,44 g, rendimento de 93%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 4,25-4,15 (3H, m) , 3,92- 3,87 (2H, m), 1,45 (9H, s). (3) l-t-Butoxicarbonil-3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidina 740 ΡΕ1340757
Uma solução de 3-azido-l-(t-butoxicarbonil)azeti-dina (3,44 g, 17,4 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 57(2)) em metanol (170 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (3,44 g) à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, de modo a originar 3-amino-l-t-butoxicarbonilazetidina, sob a forma de um produto bruto. Este produto foi dissolvido em cloreto de metileno (170 ml), e foram adicionados a isso éster de p-nitrobenzilo de ácido clorofórmico (5,63 g, 26,1 mmol) e trietilamina (3,66 ml, 26,1 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1 -► 1:2) como eluente de modo a proporcionar l-t-butoxicarbonil-3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)azetidina (4,84 g, rendimento de 79%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,l Hz), 7, 50 (2H, d, J=8,1 Hz), 5,26-5, 18 (1H, s ig), 5,26 (2H, s), 5, 84 (1H, d, J=5, 1 Hz) , 4,50- 4,40 (1H, m) , 4,24 (2H, t, J= = 9,5 Hz) , 3, 76 (2H, dd, J=9,5, 5,1 Hz) , 1,43 (9H, s) . 741 ΡΕ1340757 (4) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicar-bonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de l-t-butoxicarbonil-3-(p-nitro-benziloxicarbonilamino)azetidina (4,84 g, 13,8 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 57 (3)) em 1,4-dioxano (50 ml) foi adicionada uma solução 4N de cloreto de hidrogénio em 1,4-dioxano (50 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado acetato de etilo, e a mistura resultante foi filtrada, e o resíduo foi lavado com acetato de etilo e, em seguida, seco sob pressão reduzida, de modo a originar hidrocloreto de 3-(p-nitro-benziloxicarbonilamino)azetidina (2,31 g, rendimento de 58%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos.
Subsequentemente, a uma suspensão de hidrocloreto de 3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidina (944 mg, 3,28 mmol) (obtido tal como anteriormente descrito) e 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (1,2 g, 2,74 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em dimetilformamida (60 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (498 μΐ, 3'28 mmol) e trietilamina (922μ1, 6,58 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se 742 ΡΕ1340757 verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[3-(p-nitro-benziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (853 mg, rendimento de 53%), sob a forma de um sóli do amarelo -pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J = 8, 8 Hz) , 7, 64 -7 ,59 (4H, m) , 7,52 (2H, d, J = 8,8 Hz) , 7,48- 7,37 (6H, m) , 7, 37 (1H, s), 5,58-5 ,51 (1H, d lg, , J=8, 1 Hz) , 5,22 (2H, s) , 4, 93-4,84 (1H, m), 4,76-4,70 (1H, m) , 4, 60- 4,50 (1H, m) , 4, 50-4,41 (1H, m), 4,39-4,30 (1H, m) , 4, 11- 4,03 (2H, m) , 3, 97 (2H, dd, 0=8,1, , 5,1 Hz) , 4,00 -3, 92 (1H, m) , 1,06 (9H, s ) · (5) 3-Hidroxi-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)- azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (850 mg, 1,27 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 57(4)) em tetra-hidrofurano anidro (43 ml) foram adicionados sucessivamente 743 ΡΕ1340757 ácido acético (87 μΐ, 1,52 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,52 ml, 1,52 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao residuo foram adicionados acetato de etilo e éter diisopropilico, e a mistura resultante foi separada por filtração e lavada com éter diisopropilico, de modo a originar 3-hidroxi-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)- azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2· -il}azetidina (486 mg, rendimento de 88%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,25 (2H, d, J=8,8 Hz) , 8,14 (1H, d, J=7,3 Hz), 7,61 (2H, d, J= = 8,8 Hz), 7,43 (1H, s), 5,83 (1H, d, J=5,9 Hz), 5,19 (2H, s) , 4,74-4,67 (1H, m) , 4,66-4,58 (1H, m) , 4,40-4,34 (1H, m) , 4,32-4,26 (1H, m) , 4,24-4,17 (3H, m) , 3,86-3,80 (1H, m) , 3,79-3,71 (2H, m) . (6) 3-Metanossulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonil-amino)-azetidino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[3-(p-nitroben-ziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (630 mg, 1,45 mmol) (obtida tal como descrito 744 ΡΕ1340757 no Exemplo de Referência 57(5) ) numa mistura de cloreto de metileno (32 ml) e piridina (12 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (377 μΐ, 4,36 mmol) e trietil-amina (611 μΐ, 4, 36 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foram adicionados acetato de etilo e éter diisopropílico, e a mistura foi separada por filtração e lavada com éter diisopropílico de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (766 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,25 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,15 (2H, d, J=7,3 Hz), 7,61 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,52 (1H, s), 5,50-5,43 (1H, m) , 5,19 (2H, s) , 4,72 (1H, t, J=8,8 Hz), 4,46-4,27 (4H, m) , 4,25-4,11 (3H, m) , 3,85 (1H, dd, J=9, 9, 5,5 Hz) , 3,29 (3H, s) . (7) 3-Acetiltio-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3- 745 ΡΕ1340757 tiazol-2-il}azetidina (760 mg, 1,45 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 57(6)) em dimetilforma-mida (38 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (993 mg, 8,70 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 9 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. Ά camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azeti-dino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (397 mg, rendimento de 56%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (40 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J= = 8,8 Hz), 7,52 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,44 (1H, s) , 5, 36- -5, 30 (1H, m), 5,21 (2H, s) , 4,74-4,83 (1H, m) , 4, 60- -4,34 (6H, m) , 3,95 (3H, m) , 2 ,37 (3H, s) .
Exemplo de Referência 58 3-Acetiltio-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino) -etil]carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina
AcS
N
S
O ,ΝΗΡΝΖ 746 ΡΕ1340757 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[N-metil-N-(2-hidroxi-etil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma suspensão de N-metilaminoetanol (1,0 ml, 12,4 mmol) e 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (3,64 g, 8,3 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em dimetilformamida (180 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (1,9 ml, 12,5 mmol) e trietilamina (1,73 ml, 12,4 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 7 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[N-metil-N-(2-hidroxietil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-azetidina (3,41 g, rendimento de 83%), sob a forma de xarope amarelo-pálido e transparente. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,61 (4H, d, J=7,0 Hz), 7,48-7,36 (6H, m) , 7,17 (1H, s) , 4,79-4,71 (1H, m) , 4,17 (2H, t, J=6, 8 Hz), 4,05 (2H, dd, J=6,8, 2,7 Hz), 3,84 (2H, 747 ΡΕ1340757 t, J=5,4 Hz), 3,64 (2H, t, J=5,4 Hz), 3,28 (1H, s lg), 3,05 (3H, s), 1,06 (9H, s) . (2) 3—t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-azidoetil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3—t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-metil-N-(2-hidroxietil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze-tidina (997,5 mg, 2,0 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 58(1)) em tetra-hidrofurano (50 ml) foram adicionados difenilfosforil-azida (0,65 ml, 3,02 mmol), trifenilfosfina (793 mg, 3,02 mmol), e uma solução a 40% de azodicarboxilato de dietilo em tolueno (1,12 g, 3,04 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, e a mistura foi agitada de um dia para o outro sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-azidoetil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,05 g, rendimento de 100%), sob a forma de um xarope incolor e transparente. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 80-7, 00 (11H, m) , 4,90-3,00 (11H, m), 1,06 (9H, s). 748 ΡΕ1340757 (3) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitro-benziloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
Uma solução de 3—t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-azidoetil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,05 g, 2,02 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 58(2)) em metanol (60 ml) foi submetido a hidro-genação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (1,05 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador, e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. A uma solução do produto bruto obtido em cloreto de meti-leno (52,3 ml) foram adicionados éster de p-nitrobenzilo de ácido clorofórmico (650,7 mg, 3,02 mmol) e trietilamina (0,42 ml, 3,01 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando tolueno:acetonitrilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina (699,5 mg, rendimento de 52%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 749 ΡΕ1340757 RMN (500 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 8,12 (2H, d, J: = 7, 8 Hz ) , 8 (1H, s ; ig), 7,68-7, 30 (13H, m) , 5,18 (0,5H, s) , 5, 13 5H, s), 4,80- 4,64 (1H, r m) , 4,1C ) (2H , t, J=7,3 Hz) , 4, 01 dd, J= ‘7,3, 5,4 Hz), 3, 72 (2H , m) , , 3,50 (2H, m) , 3, 25 75H, s), 3, 02 (2,25H, s) , 1,03 (9H, s) .
Espectro de massa (BAR+) : 674 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : Valor observado: 674,2490 [M+H]+, Valor calculado: 674,2468 (C34H40O6N5SSÍ) (4) 3-Hidroxi-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonil-amino)-etil]carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]carbamoil }-1,3-tiazol-2-il)azetidina (806, 9 mg, 1,20 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 58 (3)) em tetra-hidrofurano anidro (40 ml) foram adicionados sucessivamente ácido acético (0,09 ml, 1,57 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,44 ml, 1,44 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada no banho de gelo durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia 750 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (15:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (428,2 mg, rendimento de 84%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,71 (1H, t, J=5,5 Hz) , 7,49 (2H, d, J=8, 8 Hz), 7, s) , 5, 18 (2 H, s), 4,88 -4,70 (1H, m), 4,27 (2H, dd, 7,8 Hz) , 3,93 (2H, dd, J=9,1 , 4,8 Hz) , 3, 68 (2H, t Hz) , 3,47 (2H, q, J=5, 5 Hz) , 3,25 (0 , 8H, s) , 3,03 s) , 2,40 (1H, d, J= =5,9 Hz) . (5) 3-Metanossulfoniloxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitroben ziloxicarbonilamino) etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (428,2 mg, 1,01 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 58(4)) em cloreto de metileno (21,4 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (0,25 ml, 3,23 mmol) e trietilamina (0,45 ml, 3,23 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto 751 ΡΕ1340757 de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilormetanol (15:1) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (480,1 mg, rendimento de 93%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,l Hz), 7, 60- 7,44 (3H, m incluindo d, em 7, 50 ppm, 00 II ,1 Hz) , 7,26 (0 , 3H , s) , 7,24 (0,7H, s), 5, 41 (0, 3H, m) , 5,34 ( 0,7H, m) , 5, 18 (2H, s) , 4,42 (2H, dd, , J=9, 0, 7, 4 Hz) , 4 ,25 (2H, dd, J= 9, 0 , 3,2 Hz) , 3,66 (2H, t ., J=5 ,2 Hz) , 3,60-3 ,42 (2H, m) , 3, 26 (0, 9H , s O O \—1 V cn 1—1 9H, s ig), 3, 08 (2, 1H, s) , 3, 03 (2,1H, s) . (6) 3-Acetiltio-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarboni lamino) etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (480,1 mg, 0,93 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 58 (5)) em dimetil-formamida (24 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (820 mg, 5,69 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada 752 ΡΕ1340757 orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (15:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)etil]carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina (348,9 mg, rendimento de 76%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,73 (1H, s lg) , 7,49 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,29 (0,4H, s) , 7,20 (0,6H, s), 5,18 (2H, s), 4,47 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,40-4,28 (1H, m) , 3,92 (2H, dd, J=8,8, 5,7 Hz), 3,66 (2H, t, J=5,4 Hz), 3,52-3,44 (2H, m) , 3,26 (1,2H, s) , 3,03 (1,8H, s), 2,36 (1,2H, s), 2,34 (1,8H, s) .
Exemplo de Referência 59 3-Acetiltio-l- (4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil)-N- isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina 753 ΡΕ1340757 A uma suspensão de N-isopropilaminoetanol (0,61 ml, 1,38 mmol) e 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,14 mmol) em dimetil-formamida (15 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosfo-rilo (0,23 ml, 1,38 mmol) e trietilamina (0,19 ml, 0,23 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada durante 2 horas sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,5M de ácido clorídrico, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (318 mg, rendimento de 56%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H· -RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7 ,57 (4H , d r J= 6,5 Hz), 7, 50- •7,30 (6H, m) , 7,07 (0, , 6H, s) , 6 ,92 (0, 4H , s), 4,81- 4, 63 (1H, m), 4,49 (0,5 H, s) , 4, 33 (0,5H, s) , 4,22-3,88 (4H, m, incluindo 4,06 (2H, dd, J = 14,3, 7, 7 Hz)), 3,88- 3, 62 (2H, m) , 1,39-1,08 (6H, m) , 1, 02 (9H, s) (2) 3-Hidroxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil] -l,3-tiazol-2-il}azetidina 754 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,49 g, 4,75 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 59(1)) em tetra-hidrofurano anidro (100 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (5,70 ml, 5,70 mmol) num banho de gelo. A mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,33 g, rendimento de 98%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,13 (0,7H, s) , 7,03 (0,3H, s), 4, 62-4,48 (1H, m) , 4,48-4,36 (1H, m) , 4,29 (2H, t, J= 8,0 Hz), 3,94 (2H, dd, J= 8,0, 4,1 Hz), 3,80 (2H, s lg), 3,57 (2H, s lg), 1,35 (3H, s lg), 1,20 (3H, s lg). (3) 1—(4—{N—[2—(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil- carbamoil } -1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil) -N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,33 g, 4,66 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 59(2)) em dimetilformamida (40 ml) foram adicionados cloreto de t-butildimetilsililo (738 mg, 4,89 755 ΡΕ1340757 mmol) e imidazole (333 mg, 4,89 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado a isso metanol e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4 —{N—[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N- isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (1,26 g, rendimento de 69%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (40 0 MHz , CDC13) : δ (ppm) 6, 99 (0 ,2H, s) , 6, 91 O co s) , 4,84- 4,72 (1H, m) , 4,72- -4,35 (1H, m) , 4,27 (2H, dd, J= = 9,4 , 6,8 Hz) , 3,91 (2H , dd, J= 9, 4, 4,8 Hz) , 3, 71- 3, 35 (1H, m) , 3 ,71-3 ,50 (2H, m) , 3,50-3 ,28 (1H , m) , 1,17 (6H, s ig), , 0, 87 (9H, s lg), 0 ,06 ( 6H, d, J= 2,8 Hz) . (4) 1-(4-{N-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil- carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-(4-{N-[2-(t-butildime-tilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (1,24 g, 3,23 mmol) (obtida tal como 756 ΡΕ1340757 descrito no Exemplo de Referência 59(3)) em cloreto de metileno (62 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (0,30 ml, 3,88 mmol) e trietilamina (0,54 ml, 3,88 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada no banho de gelo durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-{N-[2-(t-butildi-metilsililoxi)-etil]-N-isopropil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (649 mg, rendimento de 42%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,16-6,95 (1H, m) , 5,46- 5,36 (1H, m) , 4,49-3, 68 (3H, m incluindo 4,41 (2H, ddd, J= 9, 6, O \—1 k·. Hz) ) , 4,23 (2H, dd, J= 9,6, 4,4 Hz) , 3, 91- 3, 72 (1H, m), 3,72- 3,51 (2H, m) , 3,51-3,30 (1H , m) , 3,07 (3H, s), 1,24 (6H, s ig), 0,83 (9H, s) , 0,06 (6H, d, J= 3,4
Hz) . (5) 3-Acetiltio-l- (4 —{N—[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi) etil] -N-isopropil-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-meta- 757 ΡΕ1340757 nossulfoniloxiazetidina (649 mg, 1,35 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 59(4)) em dimetil-formamida (19 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (930 mg, 8,14 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano: acetato de etilo (3:1) -> acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (618 mg, rendimento de K 00%) , sob a forma de um sólido castanho- pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCls) : δ (ppm) 7 ,20- -6, . 8 9 (1H, m) , 4,68- 4,18 (4H, m incluindo 4,48 (2H, t, J= 8 ,5 Hz) ) , 3,94 (2H, dd, J= 8,5, 5,3 Hz), 3,88-3, , 23 (4H, m) r 2,39 (3H , s), 1,16 (6H, s ig), 0, 86 (9H, s), 0, 04 (6H, d, j= = 1,4 Hz)
Exemplo de Referência 60 3-Acetiltio-l- (4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbo-nilamino)etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina 758 ΡΕ1340757
(1) 1 — {4 —[N-(2-Azidoetil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3- tiazol-2-il}azetidina-3-t-butildifenilsililoxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-iljazetidina (1,46 g, 2,79 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 59(1)) em tetra-hidrofurano (73 ml) foram adicionados difenilfosforil-azida (0,90 ml, 4,18 mmol), trifenilfosfina (1,10 g, 4,18 mmol), e uma solução a 40% de azodicarboxilato de dietilo em tolueno (1,54 g, 4,18 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, e, em seguida, a mistura foi agitada durante 3 horas sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar l-{4-[N-(2-azidoetil)-N-isopropil-carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}aze-tidina-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,38 g, rendimento de 87%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,62 (4H, dd, J= 8,0, 1,4
Hz), 7,36-7,26 (6H, m) , 7,26-6, 90 (1H, m) , 4, 80-4,76 (1H, 759 ΡΕ1340757 m) , 4,75-4,61 (1H, m) , . 4,13 (1H, t, J= 7,4 Hz), 4,10 (1H, t, J= 7,4 Hz), 4,01 (2H, dd, J= 8, 7, 4,0 Hz), 3, 80 -3, 33 (4H, m incluindo 3,56 (2H, s lg)), 1,20 (6H, s lg), 1,06 (9Η, s) . (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-ni-trobenziloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina
Uma solução de 1-{4-[N-(2-azido-etil)-N-isopro-pil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina-3-t-butildifenil-sililoxiazetidina (1,33 g, 2,42 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 60(1)) em metanol (65 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (1,33 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. A uma solução do produto bruto obtido em cloreto de metileno (63 ml) foram adicionados éster de p-nitro-benzilo de ácido clorofórmico (627 mg, 2,90 mmol) e trietilamina (0,41 ml, 2,90 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1 hora sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica obtida foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel 760 ΡΕ1340757 de sílica utilizando acetato de etilo -* acetato de etilormetanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitroben-ziloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)aze-tidina (945 mg, rendimento de 56%), sob a forma de um óleo amarelo. XH -RMN (4 0 0 MHz , CDC13 ) : δ (ppm) 7, , 60 (4H , d , J= 1,0 Hz) , 7, 55- 7, 32 (10H, m) , 7, , 12 (0,4H, s lg) r 6, 95 (0,6H, s lg), 5, 28- 5, 18 (2 H, m) , 4, 81- 4,67 (1H, m) r 4, 24- 4,06 (2H, m) , 4, 00 (2H, dd, J: = 8, 7, 4, 9 Hz), 3,70 -3, 1 8 ( 4H, m) , 1,20 (6H, s lg) r 1, 06 (9H , d, J= 1, 6 Hz) . (3) 3-Hidroxi-l-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxicar-bonilamino)etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina
Uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil }-1,3-tiazol-2-il)azetidina (945 mg, 1,38 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 60(2)) em tetra-hidrofurano anidro (50 ml) foram adicionados sucessivamente ácido acético (0,10 ml, 1,66 mmol) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,66 ml, 1,66 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio 761 ΡΕ1340757 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilormetanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitroben-ziloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)aze-tidina (433 mg, rendimento de 66%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (4( D0 MHz, CDC1 3) : δ (ppm) 8 ,21 (2H, d C-i 11 co ,5 Hz ) / 7,49 (2H, d, J= 8,5 Hz) , 7,11 (0, 4H, s) , 6, 95 (0, 6H, s ) , 5, 18 (2H, s) , 4, . 88-4 , 62 (1H, m), 4,62-4,1 8 (3H, m ) , 3, 93 (2H, dd, J= 8,8, 4,4 Hz) , 3,72-3, 36 (4H, m) , 1/30 (3H, s ig), 1,20 (3H, s ig) . (4) 1-(4-{N-Isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)- etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiaze-tidina
Uma solução de 3-hidroxi-l-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,43 g, 3,09 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 60(3) ) em cloreto de metileno (72 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (0,29 ml, 3,70 mmol) e trietilamina (0,52 ml, 3,70 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada 762 ΡΕ1340757 com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -* acetato de etilo:metanol (20:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenzi-loxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (766 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,20 (2H, d, J= 8,4 Hz), 7,50 (2H, d, J= 8,4 Hz), 7,20 (0,4H, s lg) , 7,07 (0,6H, s lg) , 5,41 (1H, s lg) , 5,19 (2H, s) , 4,66-4,18 (5H, m incluindo 4,44 (2H, t, J= 8,8 Hz), 4,25 (2H, t, J= 8,8
Hz)), 3, 68-3, 36 (4H, m) , 3,10 (3H, s) , 1,31 (3H, s lg) , 1,22 (3H, s lg) . (5) 3-Acetiltio-l-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxi-carbonilamino)etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina
Uma solução de 1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitro-benziloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (776 mg, 1,43 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 60(4)) em dimetil-formamida (23 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (982 mg, 8,60 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi 763 ΡΕ1340757 lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidro-genocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina (746 mg, rendimento de 46%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J= 8,4 Hz), 7,50 (2H, d, J= 8,4 Hz), 7,15 (0,4H, s lg) , 7,04 (0,6H, s lg) , 5,19 (2H, s), 4, 66-4,20 (4H, m) , 4,08-3, 88 (2H, m) , 3, 66-3,26 (4H, m) , 2,96 (3H, s) , 2,36 (3H, s lg) , 1,63 (3H, s lg) .
Exemplo de Referência 61 3-Acetiltio-l-(4 —{ (IS)-2-metil-[1-(2-(p-nitrobenziloxicar-bonilamino)metil)propilcarbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina
(1) Éster de t-butilo de ácido ((IS)-l-hidroximetil-2-metilpropil)carbâmico A uma solução de L-valinol (2,00 g, 19,4 mmol) 764 ΡΕ1340757 numa mistura de cloreto de metileno (50 ml) e metanol (50 ml) foi adicionado anidrido di-t-butoxicarbónico (5,08 g, 23,3 mmol) num banho de gelo, e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar éster de t-butilo de ácido ( (IS)—1 — hidroximetil-2-metilpropil)carbâmico (4,19 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 4,70-4,59 (1H, s lg) , 3, 74-3, 66 (1H, m) , 3, 65-3, 57 (1H, m) , 3, 48-3, 39 (1H, m) , 2, 38-2,30 (1H, s lg), 1,89-1,78 (1H, m) , 1,45 (9H, s) , 0,96 (3H, d, J=6,6 Hz), 0,94 (3H, d, J=6,6 Hz). (2) Éster de t-butilo de ácido ((IS)-l-azidometil-2-metil-propil)carbâmico A uma solução de éster de t-butilo de ácido ((IS)-l-hidroximetil-2-metilpropil)carbâmico (3,00 g, 14,8 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 61(1)) em tetra-hidrofurano (150 ml) foram adicionados difenilfosforil-azida (4,78 ml, 22,2 mmol), trifenilfosfina (5,82 g, 22,2 mmol) e uma solução a 40% de azodicarboxilato 765 ΡΕ1340757 de dietilo em tolueno (9,67 g, 22,2 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto, e a mistura foi agitada durante 2 horas sob as mesmas condições. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo obtido foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (9:1) como eluente de modo a proporcionar éster de t-butilo de ácido ( (IS)-1-azidometil-2-metilpropil)carbâmico (3,26 g, rendimento de 90%), sob a forma de um óleo incolor. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 4,59-4,45 (1H, m) , 3,56- 3, 47 1—> 3,42 (2H, II T3 Hz) , 1,86-1,74 (1H 1,45 (9H, s), 0,95 (3H, d, J=6,6 Hz) , 0,93 (3H, d,
Hz) . (3) Éster de p-nitrobenzilo de ácido ( (2S)-2-t-butoxicar-bonilamino-3-metilbutil)carbâmico
Uma solução de éster de t-butilo de ácido ((1S)-l-azidometil-2-metilpropil)-carbâmico (3,26 g, 13,3 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 61 (2)) em metanol (160 ml) foi submetida a hidrogenação catalitica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal (3,26 g) à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o 766 ΡΕ1340757 filtrado concentrado sob pressão reduzida. A uma solução do produto bruto obtido em cloreto de metileno (160 ml) foram adicionados éster de p-nitrobenzilo de ácido clorofórmico (4,31 g, 20,0 mmol) e trietilamina (2,80 ml, 20,0 mmol) num banho de gelo, e, em seguida, a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica obtida foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (8:1 -> 1:1) como eluente de modo a proporcionar éster de p-nitrobenzilo de ácido ((2S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutil)car-bâmico (3,13 mg, rendimento de 62%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,50 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,43-5,31 (1H, s lg) , 5,19 (2H, s) , 4,57-4,49 (1H, d lg, J=8,8 Hz), 3, 60-3,49 (1H, m) , 3,40- 3,29 (1H, m) , 3,26-3,13 (1H, m) , 1,82-1,71 (1H, m) , 1,43 (9H, s), 0,96 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,93 (3H, d, J=6,6 Hz). (4) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-{(IS)-2-metil-[1-(p-ni-trobenziloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de éster de p-nitrobenzilo de ácido 767 ΡΕ1340757 ( (2S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutil)-carbâmico (3,13 g, 8,21 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 61(3)) em 1,4-dioxano (31 ml) foi adicionada uma solução 4N de cloreto de hidrogénio em 1,4-dioxano (31 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. Foi adicionado acetato de etilo ao resíduo, e a mistura resultante foi separada por filtração e lavada com acetato de etilo, de modo a originar hidrocloreto de éster de p-nitrobenzilo de ácido ((2S)—2— amino-3-metilbutil)carbâmico (1,82 g, rendimento de 70%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos.
Subsequentemente, a uma suspensão de hidrocloreto de éster de p-nitrobenzilo de ácido ((2S)-2-amino-3-metilbutil)carbâmico (1,29 g, 4,05 mmol) obtido tal como anteriormente descrito e 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,48 g, 3,37 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(4)) em dime t i1fo rmami da (74 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (615 LO O l—1 d. mmol) e trietilamina (1, 14 ml, 8,10 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e 768 ΡΕ1340757 solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4 —{ (IS)-2-metil-[1-(p-nitroben-ziloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina (1,55 g, rendimento de 74%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,11 (2H, d, J=8,8 Hz), 7, 64-7, 60 (4H, m) , 7,49-7,39 (8H, m) , 7,35 (1H, s) , 7,20- 7,18 (1H, d lg, J=9,8 Hz), 5, 56-5, 48 (1H, s lg) , 5,20 (1H, d, J=13,7 Hz), 5,08 (1H, d, J=13,7 Hz), 4,78-4,72 (1H, m) , 4,14-4,06 (2H, m), 4,04-3,94 (3H, m), 3,46 (1H, dt, J=13,7, 3,9 Hz), 3,31 (1H, ddd, J=13,7, 10,7, 5,9 Hz), 1,95-1,86 (1H, m), 1,07 (9H, s), 1,01 (3H, d, J=6,8 Hz), 0,99 (3H, d, J=6,8 Hz). (5) 3-Hidroxi-l-(4-{(IS)-2-metil-[1-(p-nitrobenziloxicarbo-nilamino)metil]-propilcarbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-{(IS)-2-metil-[1-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)metil]propilcarbamoil }-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,54 g, 2,20 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 61(4)) em tetra-hidrofurano anidro (78 ml) foi adicionado sucessivamente ácido acético (151 μΐ) e uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (2,64 ml, 2,64 mmol) num banho de gelo. A mistura foi 769 ΡΕ1340757 agitada no banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica obtida foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-(4-{(IS)-2-metil-[1- (p-nitrobenziloxicarbonilamino)metil]-propilcar-bamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (927 mg, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido branco. -RMN (400 MHz , CDC13) : δ (ppm) 8,09 (2H, d, J= OO OO II Hz) 7, 41 (2H, d, J= 8,8 Hz) , 7 ,3! 9 (1H, s) , 7 ,19-7 ,14 ( 1H, d ig. J= ‘9,5 Hz) , 5, 54- LO LO 1 (1H, m) r 5,22 (1H, d, J= 43 ,6 Hz) , 5,0 (1H, d, J= = 13, r 6 Hz) , 4,87- -4, 78 (1H , m) , 4,37- -4, 26 (2H, m) , 4, 04- 3, 90 (3H, m) , 3, 47- 3, 40 (1H, m) , l OO 00 00 -3, 30 (1H, m) , 2, 38 (1H, d, J= =7,3 Hz) , 1, 94 \—1 00 OO \—1 1 r m), 1 , 00 (3H , d J= ‘7,3 Hz) , 0, 99 (3H, d, J= =7, 3 Hz) . (6) 3-Metanossulfoniloxi-l-(4-{(IS)-2-metil-[1-(p-nitroben-ziloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-{(IS)-2-metil-[1-(nitrobenziloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (920 mg, 1,98 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 61(5)) em cloreto de 770 ΡΕ1340757 metileno (46 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (461 μΐ, 5,95 mmol) e trietilamina (834 μΐ, 5,95 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura no banho de gelo durante 10 minutos, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:4) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-l-(4-{(IS)-2-metil-[1- (p-nitrobenziloxicarbonilamino)metil]-propilcar-bamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,06 g, rendimento de 99%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. -RMN (40 0 MHz , CDC13) : δ (ppm) 8,10 (2H, d, C-| II co co Hz) , 7, 45 (1H, s) , 7 ,41 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,18-7 ,12 (1H, d ig, J= 8,8 Hz) , 5,50 -5,45 (1H, r s lg), 5,42 (1H, tt, J=6,6, 4,4 Hz ) , 5,22 (1H, d, J: = 13, 2 Hz) , 5,08 (1H, d, J = 13,2 Hz) , 4, 49- 4,40 (2H, m) , 4 ,29- 4,20 (2H, m) , 4,04- -3,95 (1H, m) , 3, 44 (1H, dt, J= =13,9, 4,4 Hz), 3,38-3,24 (1H, m) , 3, 12 (3H, s) , 1 , 94 - - 1,85 (1H, m) , 1,01 (3H, d, J=6, 6 Hz) , 0, 99 (3H, d, J=6,6 Hz). (7) 3-Acetiltio-l-(4-{(IS)-2-metil-[1-(p-nitrobenziloxicarbonilamino) metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina 771 ΡΕ1340757 A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-(4-{ (IS) -2-metil-[1-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)metiljpropilcar-bamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,06 g, 1,96 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 61(6)) em dimetilformamida (53 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,34 mg, 11,7 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 8,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:3) como eluente de modo a proporcionar 3-acetil-tio-1-(4 — { (IS)-2-metil-[1-(p-nitrobenziloxicarbonilami-no)metil]-propilcarbamoil}-l,3-tiazol-2-il)azetidina (785 mg, rendimento de 77%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,12 (2H, d, J =8,8 Hz), 7,42 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,41 (1H, s), 7,20-7,16 (1H, d lg, J=9,5 Hz), 5,54-5,45 (1H, s lg) , 5,21 (1H, d, J=13,2 Hz), 5,09 (1H, d, J=13,2 Hz), 4,51 (2H, dt, J=11,0, 8,4 Hz), 4,47-4,39 (1H, m) , 4,03-3, 93 (3H, m), 3,45 (1H, dt, J=13,2, 4,0 Hz), 3, 37-3, 68 (1H, m) , 2,37 (3H, s) , 1, 95-1,84 (1H, m), 1,00 (3H, d, J=7,3 Hz), 0,99 (3H, d, J=7,3 Hz). 772 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 62 3-Acetiltio-l-{4-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il}azetidina
NHPNZ S (1) 1-(4-Azidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsili- loxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,02 g, 2,39 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (2)) em tetra-hidrofurano (50 ml) foram adicionados difenilfos-foril-azida (0,8 ml, 3,71 mmol), trifenilfosfina (950 mg, 3,62 mmol) e solução de azodicarboxilato de dietilo a 40% em tolueno (1,32 g, 3,59 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada num banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (8:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-azidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,06 g, rendimento de 99%), sob a forma de um xarope incolor. 773 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,66-7 , 36 (10H, m) , 6,45 (1H, s), 4,78-4,71 (1H, m) , 4,24 (2H, s) , 4,12 (2H, dd, J=8, 6, 6,2 Hz) , 4,02 (2H, dd, J=8,6, 5,7 Hz) , 1,06 (9H, s) . IV (película liquida): 2858, 2170, 2100, 1527, 1313, 1182, 1143, 1114 cm-1
Espectro de massa (BAR+) 450 [M+H] +
Espectro de massa de alta resolução (BAR+) : calculado para C23H28ON5SSÍ: 450,1784;
Encontrado: 450,1793[M+H]+ (2) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(p-nitrobenziloxicarbo-nilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina 1-(4-Azidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildife-nilsililoxiazetidina (1,06 g, 2,37 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62(1)) em metanol (53 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão vegetal (1,05 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em cloreto de metileno (53,2 ml). À mistura foram adicionados cloroformato de p-nitrobenzilo (0,76 g, 3,52 mmol) e trietilamina (0,5 ml, 3,59 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi destilada sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de 774 ΡΕ1340757 hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetato de etilo (3:2) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxil-1-[4-(p-nitrobenziloxicarbonil-aminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (867,2 mg, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido amarelo. 1H-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,3 Hz), 7, 62 (4H, d, 00 00 II Hz) , 7,50 (2H, d, 00 CO II >"0 Hz) , 7, 50- -7,34 ( 6H, m) , 6, 37 (1H, s), 5 ,38 (1H, t ig, LO II >"0 Hz) , 5, 20 (2H, s) , 4,78- 4,71 (1H, m) , 4,26 (2H, d, J=5, 4 Hz) , 4, 10 (2H, dd, II co co , 6, 8 Hz) , 4,00 (2H, dd, J=8, 3, 4,7 Hz) , 1, 06 (9H, s) . (3) 3-Hidroxi-l-[4-(p-nitrobenziloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxil-l-[4-(p-nitrobenziloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (867,2 mg, 1,44 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62(2)) em tetra-hidrofurano anidro (45 ml) foram adicionados ácido acético (0,1 ml, 1,75 mmol) e fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,72 ml, 1,72 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 4,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada 775 ΡΕ1340757 de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (15:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-[4-(p-nitrobenziloxicar-bonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (457 mg, rendimento de 87%), sob a forma de um sólido amarelo. 1H-RMN (500 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J II CO Hz) , 7,51 (2H, d, J=8,6 Hz) , 6, 40 (1H, s) , 5,38 (1H, s ig), 5,21 (2H, s), 4,88-4,80 (1H, m) , 4,32 (2H, dd, J= 9,1, 6, 8 Hz) , 4,27 (2H, d, J=5,7 Hz) , 3, 95 (2H, dd, J=9,l, 4,5 Hz) , 2,23 (1H, d, J=7,9 Hz) . (4) 3-Metanossulfoniloxi-1-[4-(p-nitrobenziloxicarbonilami-nometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-[4-(p-nitrobenzi-loxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (457 mg, 1,25 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62 (3)) em cloreto de metileno (25 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,29 ml, 3,75 mmol) e trietil-amina (0,53 ml, 3,80 mmol) num banho de gelo. Depois de agitação da mistura durante 10 minutos no banho de gelo, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de 776 ΡΕ1340757 sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossul-foniloxi-1-[4-(p-nitrobenziloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (499,4 mg, rendimento de 90%), sob a forma de um sólido amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=7,8 Hz), 7,51 (2H, d, J=7,8 Hz) , 6, 46 (1H, s) , 5,44-5,38 (2H, m) , 5,26 (2H, s), 4,43 (2H, dd, J=9,8, 6, 8 Hz), 4,28 (2H, d, J=5,9 Hz), 4,24 (2H, dd, J=9, 8, 4,4 Hz) , 3,10 (3H, s) . (5) 3-Acetiltio-l-[4-(p-nitrobenziloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-[4-(p-nitrobenziloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (499,4 mg, 1,13 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62(4)) em dimetilformamida (25 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,0 g, 6,93 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 6,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com ácido clorídrico 0,5 M, solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de 777 ΡΕ1340757 sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (2:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-[4-(p-nitrobenziloxicarbo-nilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (265,2 mg, rendimento de 56%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,42 Hz), 7,51 (2H, d, J=8,4 Hz), 6,42 (1H, s) , 5,39 (1H, t lg, J=7,5 Hz), 5,21 (2H, s), 4,51 (2H, t, J=8,l Hz), 4.,50-4,38 (1H, m) , 4,27 (2H, d, J=7,5 Hz), 3,96 (2H, dd, J=8,l, 5,1 Hz), 2,36 (3H, s) .
Exemplo de Referência 63 3-Acetiltio-l-[4-(metoxicarbonilamino)metil-l,3-tiazol-2-il]azetidina
AcS· NN- s NHCOOMe (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(metoxicarbonilaminome-til)-1,3-tiazol-2-il]azetidina 1-(4-Azidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildife-nilsililoxiazetidina (2,12 g, 4,71 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 62(1)) em metanol (106 ml) foi submetida a redução catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (2,12 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a 778 ΡΕ1340757 mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. 0 residuo foi dissolvido em cloreto de metileno (100 ml). À mistura foram adicionados cloroformato de metilo (0,43 ml, 5,65 mmol) e trietilamina (0,79 ml, 5,65 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi destilada sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,88 g, rendimento de 45%), sob a forma de um óleo amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,60 (4H, d, J= 1,5 Hz), 7,48-7,31 (6H, m) , 7,19 (1H, t, J= 8,1 Hz), 7,00 (1H, s) , 4,78-4, 68 (1H, m) , 4,24 (2H, d, J= 5,8 Hz), 4,09 (2H, t, J= 9,0, 6,6 Hz), 3,99 (2H, t, J= 9,0, 5,0 Hz), 3,67 (3H, s) , 1,06 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,88 779 ΡΕ1340757 g, 3, 90 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 63(1)) em tetra-hidrofurano anidro (94 ml) foram adicionados ácido acético (0,27 ml, 4,68 mmol) e fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (4,68 ml, 4, 68 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (426 mg, rendimento de 45%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6,39 (1H, s), 4,79-4,39 (1H, m) , 4,31 (2H, dd, J= 9,1, 6,7 Hz), 4,25 (2H, d, J= 5,8 Hz), 3,94 (2H, dd, J= 9,1, 4,3 Hz), 3,68 (3H, s) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-[4-(metoxicarbonilamino-metil) -1, 3-tiazol-2-il] azetidina (426 mg, 1,75 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 63(2)) em cloreto de metileno (20 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,16 ml, 2,10 mmol) e trietilamina (0,29 780 ΡΕ1340757 ml, 2,10 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-[4-(metoxicarbonil-aminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (448 mg, rendimento de 80%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 6,45 (1H, s) , 5,45-5,36 (1H, m) , 4,43 (2H, dd, J= 9,6, 6,7 Hz), 4,25 (2H, s) , 4,25 (1H, t. J= 5,8 Hz), 4,23 (1H, t. J= 5,8 Hz), 3,69 (3H, s), 3, 10 (3H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2 — i1]azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (448 mg, 1,39 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 63(3)) em dimetilformamida (13 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (952 mg, 8,34 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 781 ΡΕ1340757 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (441 mg, rendimento de 100%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6,41 (1H, s), 4,50 (2H, t, J= 8,5 Hz), 4,49-4,45 (1H, m) , 4,25 (2H, d, J= 5,7 Hz), 3,56 (2H, dd, J= 8,5, 5,3 Hz), 3,68 (3H, s) , 2,05 (3H, s) .
Exemplo de Referência 64 3-Acetiltio-l-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
(1) 1-[4-(Benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-t-butildi- fenilsililoxiazetidina 1-(4-Azidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildife-nilsililoxiazetidina (2,53 g, 5,60 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62(1) em metanol (120 ml) foi submetida a redução catalítica na presença de hidróxido 782 ΡΕ1340757 de paládio a 20% (2,53 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador. Ao filtrado foi adicionado anidrido benzóico (1,90 ml, 8,40 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 2,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi destilada sob pressão reduzida. O residuo foi partilhado entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (3:1) -> acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-[4-(benzoilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,49 g, rendimento de 50%), sob a forma de um óleo amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,79 (2H, d, J= 7,3 Hz), 7, 63-7,55 (4H, m) , 7,55-7,31 (9H, m) , 6,79 (1H, s lg) , 6,44 (1H, s), 4,79-4, 68 (1H, m) , 4,51 (2H, d, J= 5,4 Hz), 4,11 (2H, dd, J= 8,4, 7,3 Hz), 4,01 (2H, dd, J= 8,4, 5,0 Hz), 1,06 (9H, s) . (2) 1-[4-(Benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiaze-tidina A uma solução de 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,49 g, 783 ΡΕ1340757 2,82 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 64(1)) em tetra-hidrofurano anidro (75 ml) foi adicionada uma solução 1,0 M de fluoreto de tetra-n-butil-amónio em tetra-hidrofurano (3,39 ml, 3,39 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilormetanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (582 mg, rendimento de 71%) , sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,7 9 (2H, dd, J= 7,4 Hz), 7, 60-7,36 (3H, m) , 6,82 (1H, s lg) , 6,46 (1H, s) , 4,85-4,77 (1H, m) , 4,51 (2H, d, J= 5,6 Hz), 4,31 (2H, dd, J= 8,9, 6,6 Hz), 3,95 (2H, dd, J= 8,5, 4,4 Hz). (3) 1-[4-(Benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossul- foniloxiazetidina A uma solução de 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (582 mg, 2,01 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 64(2)) em cloreto de metileno (30 ml) foram adicionados cloreto de 784 ΡΕ1340757 metanossulfonilo (0,19 ml, 2,41 mmol), trietilamina (0,34 ml, 2,41 mmol) e piridina (5,8 ml) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-[4-(benzoil-aminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (739 mg, rendimento de 100%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,80 (2H, d, J= 6,9 Hz), 7,57 -7,41 (3H, m) , 6 ,71 (1H, s ig), 6,53 (1H, s) , 5,46- -5, 38 (1H, m) , 4,54 (2H, d, J= 5,2 Hz) , 4,44 (2H, ddd, J= 9,6, 6, 6, 0, 9 Hz) , 4,25 (2H, ddd, J= 9,6, 9 ,3, 0,9 Hz), 3, 10 (3H, s) . (4) 3-Acetiltio -1- [4 -(benzoilamino- -metil) -1,3 -tiazol-2- -il] - azet idina A uma solução de 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (739 mg, 2,01 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 64 (3) ) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado tio-acetato de potássio (1,38 g, 12,1 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) 785 ΡΕ1340757 durante 3,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano: acetato de etilo = (1:1) -> acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azeti-dina (698 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,08 (2H, d, J= 7,8 Hz), 7,55-7,46 (3H, m) , 6,77 (1H, s lg) , 6,49 (1H, s) , 4,47-4,38 (4H, m) , 4,47-4,38 (1H, m) , 3,97 (2H, dd, J= 8,6, 5,2 Hz), 2,37 (3H, s).
Exemplo de Referência 65 3-Acetiltio-l-[4-(benzenossulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
AcS (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(benzenossulfonilamino)-metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina 786 ΡΕ1340757 1-(4-Azidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildife-nilsililoxiazetidina (2,12 g, 4,71 iranol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62(1)) em metanol (106 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (2,12 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em cloreto de metileno (100 ml). À mistura foram adicionados cloreto de benzenossulfonilo (0,90 g, 7,07 mmol) e trietilamina (0,98 ml, 7,07 mmol) num banho de gelo, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi destilada sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(benzenossulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (755 mg, rendimento de 28%) , sob a forma de um óleo amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,80 (2H, d, J= 7,5 Hz), 7,61 (4H, d, J= 6,3 Hz), 7,54-7,30 (9H, m) , 6,21 (1H, s) , 5.07 (1H, t, J= 6,0 Hz), 4,74-4, 66 (1H, m) , 4,05 (2H, d, J= 6,3 Hz), 3,99 (2H, dd, J= 7,6 Hz), 3,89 (2H, dd, J= 8,8, 4.8 Hz), 1,07 (9H, s). 787 ΡΕ1340757 (2) 1- [4 - (Benzenossulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il] - 3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(benzenossulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (2,79 g, 4,95 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 65(1)) em tetra-hidrofurano anidro (140 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (5,94 ml, 5,94 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-[4-(benzenossulfonilamino)metil-1,3-tia-zol-2-il]-3-hidroxiazetidina (1,06 g, rendimento de 66%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,79 (2H, d, J= 7,5 Hz), 7,50-7,41 (3H, m), 6,25 (1H, s), 5,51 (1H, s lg), 4,80-4,70 (1H, m) , 4,19 (2H, t, J= 9,1 Hz), 4,03 (2H, t, J= 3,5 Hz), 3, 83 (2H, dd, J= 9,1, 4. Hz) . (3) 1-[4-(Benzenossulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il] -3-metanossulfoniloxiazetidina 788 ΡΕ1340757 A uma solução de 1-[4-(benzenossulfonilamino)-metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (1,06 g, 3,26 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 65(2)) em cloreto de metileno (50 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,38 ml, 4,89 mmol) e trietil-amina (0,68 ml, 4,89 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-[4-(benzenossulfonilamino) metil-1, 3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,16 mg, rendimento de 91%) , sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,82 (2H, d , J= = 7, 3 Hz), 7,61-7,46 (3H, m) , 6,33 (1H, s) , 5,42-5,33 (1H, m) , 5,15 (1H, t, J= 5,9 Hz), 4,34 (2H, dd, J= 9,8, 6,7 Hz) , 4,14 (2H, dd, J= 9,8, 4,1 Hz) 1 , 4,08 (2H, d, J= 6, 3 Hz) , 3, 10 (3H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-[4- (benzenossulfonilamino)metil-1,3-tia-zol-2-il]azetidina A uma solução de 1-[4-(benzenossulfonilamino)metil-1 ,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,16 g, 789 ΡΕ1340757 2,98 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 65 (3)) em dimetilformamida (35 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (2,04 g, 17,9 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno:acetato de etilo (5:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-[4-(benzenossulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,00 g, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,82 (2H, d, J= 7,4 Hz), 7,58-7,42 (3H, m) , 6,23 (1H, s) , 5, 40-5, 50 (1H, m) , 4,48- 4,30 (3H, m) , 4,09 (2H, d, J= 5,8 Hz), 3,90 (2H, dd, J= 8,3, 4,5 Hz) , 2,37 (3H, s) .
Exemplo de Referência 66 3-Acetiltio-l-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-l,3-tiazol-2 — i1]azetidina
AcS
N
NHCO
790 ΡΕ1340757 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(tiofeno-2-carbonilami-no)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina 1-(4-Azidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildife-nilsililoxiazetidina (2,47 g, 5,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62(1)) em metanol (120 ml) foi submetida a hidrogenação catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (2,47 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em cloreto de metileno (115 ml). À mistura foram adicionados cloreto de tenoílo (0,71 ml, 6,60 mmol) e trietilamina (0,92 ml, 6,60 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi destilada sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,88 g, rendimento de 64%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,75-7,32 (13H, m) , 7,11- 791 ΡΕ1340757 7,03 (1Η, m) , 6,65 (1H, s lg) , 4,80-4,70 (1H, m) , 4,47 (2H, d, J= 5,0 Hz), 4,11 (2H, t, J= 8,5 Hz), 4,01 (2H, dd, J= 8,5, 5,0 Hz), 1,06 (9H, s). (2) 3-Hidroxi-l-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tia-zol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (2,18 g, 4,08 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 66(1)) em tetra-hidrofurano anidro (110 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (4,90 ml, 4,90 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilormetanol (10:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-[4-(tiofeno-2-carbonil-amino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (571 mg, rendimento de 47 %), sob a forma de um sólido branco. ΧΗ- -RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,53 (1H, d , J= 3, 5 Hz) 7, 46 (1H, d, J= 5,4 Hz), 7, 60 1 ;iH, dd, J= 4,9, 3, 8 Hz) 6, 87 (1H, s lg), 6,46 (1H, s), 4, 87-4,78 (1H, m) , 4,48 (2H d, J= 5,6 Hz), 4, 33 (2H, dd ., J= 8 ,7, 4,6 Hz) , 3, 98 (2H, • dd J= 8, 7, 4, 6 Hz) . 792 ΡΕ1340757 (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)me-til-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-[4-(tiofeno-2-carbo-nil-amino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (571 mg, 1,93 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 66(2)) em cloreto de metileno (28 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,18 ml, 2,32 mmol) e trietilamina (0,33 ml, 2,32 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonil-amino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (490 mg, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,56 (1H, d, J= 5,4 Hz), 7,47 (1H, d, J= 5,4 Hz) , 7,07 (1H, dd, J= 5,1, 3 ,7 Hz) , 6, 87 (1H, s ig), 6,50 (1H, s), 4,57 (2H, t, J= 8 , 6 Hz) , 4,50 (2H, t, J= 5 ,4 Hz) , 4,50 (2H, d, J= 5,4 Hz) , 4, 48 -4,37 (1H, m) , 4 ,36 (2H , dd, J= 8,6, 5,5 Hz) i , 2,36 (3H, s) . 793 ΡΕ1340757 (4) 3-Acetiltio-l-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-l-[4-(tio-feno-2-carbonilamino)metil-l,3-tiazol-2-il]azetidina (623 mg, 1,67 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 66(3)) em dimetilformamida (18 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,14 g, 10,0 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) -► acetato de etilo como eluente de modo a propor cionar 3-acetiltio-l-[4-(tiofeno-2-carbonil-amino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (490 mg, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 'Κ -RMN (400 MHz, CDC13) 1 : δ (ppm) 7,56 (1H, d, J= 5,4 Hz) , Ι, 47 (1H, d , J= 5,4 H z) , 7,07 (1H, dd, J= 5,1, 3,7 Hz) , 6, 87 (1H, s ig), 6, 50 (1H , s) , 4,57 (2H, t, J= 8, 6 Hz) , 4, 50 (2H, t, J= 5 ,4 Hz) , 4, 50 (2H, d, J= 5,4 Hz) , 4,48- -4,37 (1H, m) , 4,3 6 (2H , dd, J= 8 / 6 / 5 / 5 Hz), 2,36 (3H, s) . 794 ΡΕ1340757
Exemplo de Referência 67 3-Acetiltio-l-[4-(furano-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2 — i1]azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(furano-2-carbonilamino)-metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina 1-(4-Azidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-t-butildife-nilsililoxiazetidina (2,47 g, 5,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 62(1)) em metanol (120 ml) foi submetida a redução catalítica na presença de hidróxido de paládio a 20% (2,47 g) à temperatura ambiente. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi filtrada a fim de remover o catalisador e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O residuo foi dissolvido em cloreto de metileno (115 ml). À mistura foram adicionados cloreto de 2-furoilo (0,65 ml, 6,60 mmol) e trietilamina (0,92 ml, 6,60 mmol), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi destilada sob pressão reduzida. O residuo foi partilhado entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão 795 ΡΕ1340757 reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(furano-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,60 g, rendimento de 60%), sob a forma de um óleo amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,75-7,58 (4H, m) , 7,50- 7,09 (9H, m) , 6,68 (1H, s lg) , 4,82-4,70 (1H, m) , 4,47 (2H, d, J= 5,5 Hz), 4,11 (2H, t, J= 8,3 Hz), 4,02 (2H, dd, J= 8,3, 5,0 Hz) , 1,06 (9H, s) . (2) 1-[4-(Furano-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3- hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(furano-2-carbonil-amino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,90 g, 3,68 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 67(1)) em tetra-hidrofurano anidro (95 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (4,41 ml, 4,41 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (10:1) como eluente de 796 ΡΕ1340757 modo a proporcionar 1-[4-(furano-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (426 mg, rendimento de 47%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,44 (1H, s) , 7,12 (1H, d, J= : 3, 5 Hz), 7,04 (1H, s ig), 6, 49 (1H, dd, J= 3,4, 1,7 Hz) 6, 45 (1H, s), 4,86-4,78 (1H, m) , 4,48 (2H, d, J= 5,7 Hz) 4, 33 (2H, t, J= 8,8 Hz) , 3, 98 (2H, dd, J= 8,8, 4,4 Hz) , (3) 1-[4-(Furano-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3- metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-[4-(furano-2-carbonilami-no)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (426 mg, 1,72 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 67(2)) em cloreto de metileno (20 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (0,16 ml, 2,07 mmol) e tri-etilamina (0,29 ml, 2,07 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (20:1) como eluente de modo a proporcionar ΙΕ 4- (furano-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (481 mg, rendimento de 78%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 797 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,45 (1H, d, J= 0,9 Hz), 7,13 (1H, d, J= LO 00 H) , 7,00 (1H, s), 6, 53 (1H, s), 6, , 50 (1H, dd, J= 3,5, 1,8 Hz) , 5,49-5,38 (1H, m) , 4,51 (2H, d, J= 5, 8 Hz), 4,48 (2H, dd, J= 3,1, 1,0 Hz) , 4, 29 (2H, dd, J= 5,8, 4,9 Hz), 3,10 (3H, s). (4) 3-Acetiltio-l-[4-(furano-2-carbonilamino)metil-1,3- tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 1-[4-(furano-2-carbonilami-no) metil-1,3-tiazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (481 mg, 1,34 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 67(3)) em dimetilformamida (14 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (921 mg, 8,07 mmol) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-[4-(furano-2-carbonilamino)metil-l,3-tiazol-2-il]azetidina (341 mg, rendimento de 83%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : 5 (ppm) 7,45 (1H, s) , 7,12 (1H, d, 798 ΡΕ1340757 J= 3,5 Hz), 7,09-6, 94 (2H, m) , 6,49 (2H, t, J= 2,5 Hz), 4,56 (2H, t, J= 8,5 Hz), 4,50 (2H, d, J= 5,7 Hz), 4,48-4,38 (1H, m) , 4,02 (2H, dd, J= 8,5, 6,1 Hz), 2,36 (3H, s) .
Exemplo de Referência 68 3-Acetiltio-l-(4-ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)azetidina
O
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-ftalimidometil-l, 3-tia- zol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,50 g, 3,53 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2(2)) em tetra-hidrofurano (75 ml) foram adicionados ftalimida (519 mg, 5,30 mmol), trifenilfosfina (1,39 g, 5,30 mmol) e solução de azodicarboxilato de dietilo a 40% em tolueno (2,03 ml, 5,30 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada num banho de gelo durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:5) como eluente de 799 ΡΕ1340757 modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-ftalimi-dometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,52 mg, rendimento de 78%), sob a forma de um óleo amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,88 (2H, dd, J= 5,5, 3,1
Hz), 7,33 (2H, dd, J= 5,5, 3,1 Hz), 7,60 (4H, dd, J= 7,9, 1,4 Hz), 7,47-7,34 (6H, m) , 6,26 (1H, s) , 4,83 (2H, s) , 4, 76-4, 68 (1H, m) , 4,26-4,08 (2H, m) , 4,08-3, 92 (2H, m) , 1, 05 (9H, s) . (2) 1-(4-Ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,52 g, 2,57 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 68(1)) em tetra-hidrofurano anidro (76 ml) foi adicionada uma solução 1,0 M de fluoreto de tetra-n-butilamónio em tetra-hidrofurano (3,29 ml, 3,29 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (864 mg, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido branco. 800 ΡΕ1340757 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,87 (2H, dd, J= 5,4, 3,1 Hz) , 7,73 ( 2H, dd, J= 5,4 , 3,1 Hz ), 6,32 (1H, s), 4,79 (2H, s) , 4,78-4, 70 (1H, m) , 4, 27 (2H, dd, J= 9,2, 6,9 Hz) , 3, 91 (2H, dd, J= 9,2, 4, 6 Hz) . (3) 1-(4-Ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfo- niloxiazetidina A uma solução de 1-(4-ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (864 mg, 2,74 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 68(2)) em cloreto de metileno (35 ml) foram adicionados cloreto de metanossul-fonilo (0,25 ml, 3,29 mmol) e trietilamina (0,46 ml, 3,29 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi adicionada a éter dietilico e agitada durante 30 minutos. A mistura foi, em seguida, filtrada e o sólido foi recolhido por meio de filtração e lavado com éter dietilico de modo a proporcionar 1-(4-ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (726 mg, rendimento de 67%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 7,91 (2H, dd, J= 5,5, 2,8 Hz) , 7,86 (2H, dd, J= 5,5, 3,5 Hz) , 6,70 (1H, s ) , 5,46-5,39 (1H, m) , 4,63 (2H, s) , 4,36 (2H, dd, J= 10,0, 6 ,6 Hz), 4,09 Dd cu dd, J= 10,0, 3,4 Hz) , 3,27 (3H, s). (4) 3-Acetiltio-l-(4-ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)azeti-dina 801 ΡΕ1340757 A uma solução de 1-(4-ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (726 mg, 1,85 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 68 (3)) em dimetilformamida (22 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,26 g, 11,1 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada num banho de óleo (90°C) durante 6,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-ftalimidometil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (599 mg, rendimento de 87%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,88 (2H, dd, J= 5,4, 2,9
Hz) , , 7,73 (2H, dd, J= 5,4, 3,1 Hz), 6,35 (1H, s), 4,82 (2H, s) , 4,52 (2H, t, J= 8,4 Hz), 4,45-4,35 (1H, m), 3, 98 (2H, dd, J= 8, 4, 5, 7 Hz), 2,34 (3H, s).
Exemplo de Referência 69 3-Acetiltio-l-(4-succinimidometil-l,3-tiazol-2-il) azetidina
O
802 ΡΕ1340757 (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-succinimidometil-l,3- tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,50 g, 3,53 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 2 (2)) em tetra-hidrofurano (75 ml) foram adicionados succinimida (525 mg, 5,30 mmol), trifenilfosfina (1,39 g, 5,30 mmol) e solução de azodicarboxilato de dietilo a 40% em tolueno (2,03 ml, 5,30 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. A mistura foi agitada num banho de gelo durante 4 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando hexano:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-succini-midometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,79 g, rendimento de 100% ), sob a forma de um óleo amarei o-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 65- 7,57 (4H, m) , 7,4 9- 7,36 (6H, m) , . 6,30 (1H, s), 4,75 -4 , 66 (1H, m), 4,60 (2H, s) , 4,21 (4H, dd, J= 14, 2, 7,1 Hz ) , 4, 12 (4H, dd, J= 14,2, 7,1 Hz), 4,09 (2H, t, J= 8,5 Hz), 3, 99 (2H, dd, J= = 8,5, 4,9 Hz) , 1,05 (9H , s) . 803 ΡΕ1340757 (2) 3-Hidroxi-l-(4-succinimidometil-l,3-tiazol-2-il)azeti-dina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,79 g, 3,53 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 69(1)) em tetra-hidrofurano anidro (141 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (4,24 ml, 4,24 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (20:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (456 mg, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6,34 (1H, s) , 4,84-4,74 (1H, m) , 4,62 (2H, s) , 4,31 (2H, dd, J= 9,9, 6,6 Hz), 3,94 (2H, dd, J= 9,9, 4,4 Hz), 2,76 (4H, m) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-(4-succinimidometil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-succinimidometil- 804 ΡΕ1340757 1.3- tiazol-2-il)azetidina (459 mg, 1,72 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 69(2)) em cloreto de metileno (50 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (0,16 ml, 2,06 mmol) e trietilamina (0,29 ml, 2,06 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-l-(4-succiimidometil- 1.3- tiazol-2-il)azetidina (515 mg, rendimento de 87%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 6, . 43 (1H, s) , 5, 44- PO LO 1 (1H, m) , 4, 62 (2H, s), 4, 44 (2H, dd, J= 10,3, 6, 6 Hz) , 4,24 (2H, dd , J= 10,3, 4,2 Hz) , 3,09 (3H, s) , 2,76 (4H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-succinimidometil-l,3-tiazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-l- (4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (515 mg, 1,49 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 69(3)) em dimetilformamida (15 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (1,02 g, 8,95 mmol) à temperatura ambiente, e, em seguida, agitou-se num banho de óleo (90°C) 805 ΡΕ1340757 durante 8 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-succinimidometil-l,3-tiazol-2-il)azetidina (238 mg, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. XH- RMN (400 MHz , CDC13) : δ (ppm) 6, 37 (1H, s) , 4, 62 (2H s) , 4, 51 (2H, t , J= 8,5 Hz), 4,45 -4,35 (1H, m) , 3, 97 (2H dd, J= 8,4, 5,4 Hz), 2,76 (4H, s), 2,35 (3H, m) .
Exemplo de Referência 70 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-l, 3-oxazol-2-il)azetidina
(1) Éster de metilo de ácido (2S)-3-(t-butildifenilsili-loxi)-2-isotiocianatopropiónico Éster de metilo de t-butildifenilsililoxi-N-benziloxicarbonil-L-serina (32,0 g, 65,1 mmol) (obtido tal 806 ΡΕ1340757 como descrito no Exemplo de Referência 39(1)) em metanol (960 ml) foi submetido a hidrogenação catalítica na presença de paládio a 10% sobre carvão vegetal à temperatura ambiente durante 2 horas. Ao fim deste tempo, a mistura de reacção foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno:metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar éster de metilo de t-butildife-nilsililoxi-L-serina (19,7 g, rendimento de 85%), sob a forma de um óleo incolor. A uma solução do produto (éster de metilo de t-butildifenilsililoxi-L-serina) (19,7 g, 55,0 mmol) em cloreto de metileno (590 ml) foram adicionados dissulfureto de carbono (6,62 ml, 110 mmol) e trietilamina (19,3 ml, 138 mmol) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada de um dia para o outro. À mistura resultante foram adicionados cloroformato de etilo (13,2 ml, 138 mmol) e trietilamina (19,3 ml, 138 mmol) e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol à mistura de reacção e a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno como eluente de modo a proporcionar éster de metilo de ácido (2S)-3-(t-butildifenilsililoxi)-2-isotiocianatopropiónico (14,8 g, rendimento de 67%), sob a 807 ΡΕ1340757 forma de cristais amarelos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,70-7, 62 (4H, m) , 7,48-7,38 (6H, m) , 4,28 (1H, dd, J=3,7, 5,1 Hz), 4,05 (1H, dd, J=5,1, 10,3 Hz), 3,95 (1H, dd, J=3,7, 10,3 Hz), 3,80 (3H, s), 1,06 (9H, s). (2) Éster de metilo de ácido (2 S)-3-(t-butildifenilsili-loxi)-2-[(3-hidroxiazetidino-l-carbotioil)amino]propiónico A uma solução de éster de metilo de ácido 3- (t-butildifenilsililoxi)-2-isotiocianatopropiónico (13,4 g, 33,5 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de
Referência 70(1)) em tetra-hidrofurano (245 ml) foi adicionada uma solução de 3-hidroxiazetidina (4,90 g, 67,1 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 31(1)) em água (50 ml) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno e tolueno:acetonitrilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar éster de metilo de ácido (2S)-3-(t-butildifenilsi-liloxi)-2-[(3-hidroxiazetidino-l-carbotioil)amino]propiónico (9,60 g, rendimento de 61%), sob a forma de um sólido amarelo. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,61-7,55 (4H, m) , 7,47- 808 ΡΕ1340757 7,36 (6Η, m) , 5,94 (1H, d lg, J=8,l Hz), 5,19 (1H, dt, J=2,9, 8,1 Hz), 4,71-4,64 (1H, m), 4,40-4,33 (1H, m), 4,31-4,23 (1H, m) , 4,18 (1H, dd, J=2,2, 10,3 Hz), 4,04 (1H, dd, J=2, 9, 10,3 Hz), 4,02-3, 96 (1H, m) , 3, 94-3, 88 (1H, m) , 3,76 (3H, s), 2,24 (1H, d lg, J=5,9 Hz), 1,04 (9H, s) . (3) Éster de metilo de ácido (2S)-2-{ [3-(benzoiloxi)- azetidino-l-carbotioil]amino}-3-(t-butildifenilsililoxi)-propiónico A uma solução de éster de metilo de ácido (2S)— 3 — (t-butildifenilsililoxi)-2-[(3-hidroxiazetidino-l-carbo-tioil)-amino]propiónico (21,1 g, 44,6 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 70(2)) em piridina (630 ml) foram adicionados uma solução de anidrido benzóico (30,0 g, 133 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (545 mg, 4,46 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com ácido clorídrico 0,5 N, solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (4:1) como eluente de modo a proporcionar éster de metilo de ácido (2S)—2—{[3 — (benzoiloxi)-azetidino-l-carbotioil]amino}-3-(t-butildife- 809 ΡΕ1340757 nilsililoxi)propiónico(23,3 g, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (40 0 MHz, CDCI3) : δ (ppm) 8 OD 1 0 \—1 , 05 (2H, m) , 7 , 65- 7, 54 (4H, m) , 7 , 52-7,45 (3H, m) , 7,44- 7,35 (6H, m) , 5, 96 (1H, d lg , J=8, 1 Hz), 5,47-5 ,40 (1H, m) , 5,20 (1H, dt, J=8, 1 , 2,9 Hz) , 4,57-4,51 (1H, m) , 4,49- 4,40 (1H, m) , 4 ,27- 4,20 (1H, m) , 4, 20 (1H, dd, J= 2,2, 10,3 Hz) , 4,06 i (1H, dd, J=2, 9 , 10, 3 Hz) , 3,77 (3H, s), 1,04 (9H, s) . (4) Éster de metilo de ácido (2S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidino-l-carbotioil]amino}-3-hidroxipropiónico A uma solução de éster de metilo de ácido (2S)—2 — {[3-(benzoiloxi)-azetidino-l-carbotioil]amino}-3-(t-butil-difenilsililoxi)propiónico (23,3 g, 40,0 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 70 (3)) em tetra-hidrofurano (700 ml) foi adicionada uma solução 1,0 M de fluoreto de tetra-n-butilamónio em tetra-hidrofurano (48,4 g, 48,4 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar éster de metilo de ácido (2 S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidino-l-carbotioil]amino}-3-hidroxi-propiónico (12,6 g, rendimento de 92%), sob a forma 810 ΡΕ1340757 de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,08-8,04 (2H, m) , 7,64- 7,59 a \—1 m) , \—1 LO LO ο ι (2H, m) , 6,00 a \—1 d, J=7,3 Hz), 5,49 5,43 (1H, m) , 5,25 (1H, dt, J=7,3, 3,7 Hz) , 4,63-4,56 (2H, m) , 4,32- 4,24 (2H, m) , 4,12-4,02 (2H, m) , 3,82 (3H, s) . (5) 3-Benzoiloxi-l-[(4S)-4-metoxicarbonil-l,3-oxazolin-2-il]azetidina A uma solução de tetrafluoroborato de 2-cloro-3-etilbenzoxazólio (15,1 g, 55,9 mmol) em acetonitrilo (380 ml) foi adicionada, gota a gota, uma solução de éster de metilo de ácido (2S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidino-l-carbo-tioil]amino}-3-hidroxipropiónico (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 70(4)) (12,6 g, 37,2 mmol) em acetonitrilo (500 ml) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada durante 1 hora. À mistura resultante foi adicionado trietilamina (10,4 ml, 74,4 mmol) e a mistura foi agitada durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e a camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-benzoiloxi-l-[ (4S)- (4- 811 ΡΕ1340757 metoxicarbonil-1,3-oxazolin-2-il)azetidina (9,12 g, rendimento de 81%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,08-8,04 (2H, m) , 7,63- 7,58 (1H, m) , 7,49-7,44 (2H, m) , 5, 50-5, 44 (1H, m) , 4,69 (1H, dd, J=6, 6, 9,5 Hz), 4,55 (1H, dd, J=6, 6, 8,1 Hz), 4,51-4,44 (3H, m) , 4,20-4,14 (2H, m), 3,78 (3H, s) . (6) 3-Benzoiloxi-l-[4-metoxicarbonil-l,3-oxazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-benzoiloxi-l-(4-metoxicarbonil-l, 3-oxazolin-2-il) azetidina (9,12 g, 30,0 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70 (5)) numa mistura de tolueno (450 ml) e cloreto de metileno (180 ml) foi adicionado dióxido de manganês (63,8 g) e a mistura foi aquecida sob refluxo durante 5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo=l:1 como eluente de modo a proporcionar 3-benzoiloxi-l-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (5,24 g, rendimento de 58%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,08-8,04 (2H, m) , 7,84 (1H, s), 7, 63-7,58 (1H, m) , 7,50-7, 44 (2H, m) , 5,60-5,53 (1H, m), 4,61 (1H, dd, J=5,9, 9,5 Hz), 4,31 (1H, dd, J=3,4, 9, 5 Hz) , 3,89 (3H, s) . 812 ΡΕ1340757 (7) 3-Hidroxi-l-[4-metoxicarbonil-l,3-oxazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-benzoiloxi-l-(4-metoxicarbonil-l, 3-oxazol-2-il)azetidina (5,24 g, 17,3 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(6)) numa mistura de metanol (260 ml) e cloreto de metileno (80 ml) foi adicionado uma quantidade catalítica de metóxido de sódio à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi neutralizada com gás cloreto de hidrogénio 4N em dioxano e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metilenormetanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-(4-metoxicarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (2,65 g, rendimento de 77%), sob a forma de cristais castanho-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,81 (1H, s) , 4,83-4,76 (1H, s lg), 4,41 (2H, dd, J=6, 6, 9,5 Hz), 4,06 (2H, dd, J=4,4, 9,5 Hz), 3,88 (3H, s), 2,39-2,30 (1H, s lg). (8) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-metoxicarbonil-l,3-oxa-zol-2-il]azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (2,64 g, 13,4 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(7)) em dimetilformamida (80 ml) foram adicionados t-butildi- fenilsilano (6,97 ml, 26,8 mmol) e imidazole (1,82 g, 26,8 813 ΡΕ1340757 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado metanol à mistura de reacção e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A mistura resultante foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (4:3 -► 3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-metoxicarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (4,95 g, rendimento de 85%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,78 (1H, s) , 7,62-7,58 (4H, m) , 7,48-7,36 (6H, m), 4,74 -4, 67 (1H, m) , 4,15 (1H, dd, J=6, 6, 9,5 Hz), 4,08 (1H, dd, J=5,l, 9,5 Hz) , 3,87 (3H, s) , 1,06 (9H, s) . (9) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-hidroximetil-l, 3-oxazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (4,95 g, 11,3 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 70(8)) em tetra-hidrofurano anidro (100 ml) foi adicionado, gota a gota, uma suspensão de alumino-hidreto de litio (1,29 g, 33,9 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (250 ml) 814 ΡΕ1340757 num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 5 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, foi adicionado, gradualmente, deca-hidrato de sulfato de magnésio à mistura de reacção num banho de gelo. Depois de terminar a formação de espuma, a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. Foi adicionado, gradualmente, acetato de etilo à mistura de reacção. A mistura resultante foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando tolueno:acetonitrilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-l,3- oxazol-2-il)azetidina (3,88 g, rendimento de 84%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7, 63-7,59 (4H, m) , 7,47- 7,36 (6H, m) , 7,13 (1H, s), 4,73-4,66 (1H, m) , 4,45 (2H, s), 4,11 (2H, dd, J=6,6, 8,8 Hz) , 4,04 (2H, dd, J=5, 1, 8,8 Hz), 2,21 -2,15 (1H, s lg) , 1,06 (9H, s) (10) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-formil-l,3-oxazol-2-il)- azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-hidroximetil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (3,88 g, 9,50 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(9)) em cloreto de metileno (190 ml) foi adicionado dióxido de 815 ΡΕ1340757 manganês activado (19,4 g) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (3:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-formil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (3,09 g, rendimento de 80%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (4 0 0 MHz, CDC13) : δ (ppm) 9, 75 (1H, s), 7,80 (1H s) , 7, 63- 7,58 (4H , m) , 7,48-7,37 (6H, m) , 4,75-4,68 (1H s) , 4, 16 (2H, dd, J=6,6, 9,5 Hz) , 4,10 (2H, dd, J=5,1, 9, Hz), 1 ,06 (9H, s) . (11) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-carboxil-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-formil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (3,09 g, 7,60 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(10)) em cloreto de metileno anidro (18 ml) foram adicionados t-butanol (93 ml) e uma solução de 2-metil-2-buteno 2 M em tetra-hidrofurano (5,70 ml, 11,4 mmol), seguido de adição, gota a gota, de uma solução de clorito de sódio (1,72 g, 15,2 mmol) e di-hidrogenofosfato de sódio (1,82 g, 15,2 mmol) em água (18 ml) num banho de gelo, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa à mistura de reacção foi adicionado ácido clorídrico 1 M até um pH de desde 2 até 3. A mistura 816 ΡΕ1340757 resultante foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi separada, lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno e cloreto de metileno (9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-l,3-tiazol-2-il)azeti-dina (1,90 g, rendimento de 59%), sob a forma de um sólido castanho.
Espectro de massa (BAR+) : m/z: 423 [M+H]+
Exemplo de Referência 71 3-Acetiltio-l-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina
(1) 1-(4-Azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)-3-t-butildife- nilsililoxiazetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,58 mmol) em tolueno (100 ml) foi adicionada uma solução de azetidina 0,67 M-trimetilalumínio em benzeno (13,7 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada num banho de óleo (100°C) durante 5,5 horas. 817 ΡΕ1340757
Depois de se verificar que a reacção estava completa, à mistura de reacção foram adicionados ácido acético aquoso a 10% (100 ml) e acetato de etilo (200 ml) num banho de qelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reacção foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:1) e acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 1-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (875 mg, rendimento de 41%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (4 0 0 MHz, CDC13): δ (ppm) 7, 67 (1H , s) , 7, 65 -7,57 (4H, m) r 7,48-7, 37 (6H, m) , 4,72- -4, 66 (1H , m) , 4, 54 -4,47 (2H, m) r 4,18-4, 11 (2H, m) , 4,10 (2H, dd, J=6, 6, 8 ,8 Hz) , 4,04 (2 H, dd, J: = 5, 1, 8, ,8 Hz), 2, .30 (2H, quinteto, r J=7,7 Hz) , 1, 06 (9H, s) 1 ' (2) 1-(4-Azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazeti- dina
A uma solução de 1-(4-azetidinocarbonil-l, 3-oxazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (870 mg, 1,88 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 71(1)) em tetra-hidrofurano anidro (44 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M ΡΕ1340757 em tetra-hidrofurano (2,26 ml, 2,26 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (9:1) como eluente de modo a proporcionar 1-(4-azetidinocarbonil-l,3- oxazol-2-il ) -3 -hidroxiazetidina (396 mg, rendimento de 94%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (400 MHz, CDC1 3) : δ (ppm) 7,70 (1H , s) , 4, 81-4,74 (1H, m), 4, 53 (2H, dd, J=6, 8, 7,8 Hz) , 4,34 (2H, dd, J=6,8, 9, 8 Hz), 4, 16 (2H, dd, J=6, 8, 7,8 Hz) , 3, 99 (2H, dd, J=4,9, 8,8 Hz), 2, 34 (1H, . d, J=7, 8 Hz), 2,31 (2H, quinteto , J=7,8
Hz' (3) 1-(4-Azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfo- niloxiazetidina A uma solução de 1-(4-azetidinocarbonil-l, 3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (390 mg, 1,75 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 71 (2)) em cloreto de metileno (20 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (406μ1, 5,24 mmol) e trietilamina (734μ1, 5,24 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 10 minutos e, em seguida, à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de 819 ΡΕ1340757 cloreto de sódio, seca sobre cloreto de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao residuo foram adicionados acetato de etilo e éter diisopropílico, de modo a originar um sólido e o sólido foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter diisopropílico e seco in vacuo de modo a proporcionar 1-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (449 mg, rendimento de 85%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,74 (1H, m) , 5,40-5,34 (1H, m) , 4,55-4,49 (2H, t lg, J=7,3 Hz) , 4,47 (2H, ddd, J=ll, 0, 6,6, 0,7 Hz), 4,29 (2H, dd, J= =11,0, 4,4 Hz), 4,19- 4,12 (2H, t lg, J=7,3 Hz), 3,09 (3H, s) , 2,32 (2H, quinteto, J=7,3 Hz). (4) 3-Acetiltio-l-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)aze-tidina A uma solução de 1-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)-3-metanossulfoniloxiazetidina (470 mg, 1,56 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 71(3) ) em dimetilformamida (25 ml) foi adicionado tioace-tato de potássio (1,07 g, 9,36 mmol) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 8,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocar-bonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e 820 ΡΕ1340757 concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo e acetato de etilo:metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (330 mg, rendimento de 75%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,71 (1H, s) , 4,54 (2H, t, J=8, 8 Hz), 4, 55-4,49 (2H, t lg, V 00 II •o 1 Hz), 4,43-4,35 (1H, m) , 4,18-4,12 (2H, t lg, J=8,l Hz) , 4,00 (2H, dd, J=8,8, 5, 9 Hz), 2,35 (3H, s), 2,36-2,26 (2H, m) .
Exemplo de Referência 72 3-Acetiltio-l-(4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-(4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,29 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(8)) em tolueno (50 ml) foi adicionada uma solução de morfolina 0,67 M-trimetilalumínio em tolueno (6,87 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 4 horas. 821 ΡΕ1340757
Depois de se verificar que a reacção estava completa, à mistura de reacção foram adicionados ácido acético aquoso a 10% (50 ml) e acetato de etilo (100 ml) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. À mistura de reacção foi adicionado acetato de etilo. A mistura foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:2) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (400 mg, rendimento de 36%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,68 (1H, s) , 7,62-7,59 (4H, m) , 7,48- •7,37 (6H, m) , 4,73-4, 67 (1H, m), 4,15-4,09 (2H, m) , 4,05 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz) , 3,75-3, 65 (8H, s ig), 1,06 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-(4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l- (4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (730 mg, 1,48 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 822 ΡΕ1340757 72(1)) em tetra-hidrofurano anidro (37 ml) foi adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,78 ml, 1,78 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo:metanol (95:5 -> 9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi- 1- (4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (377 mg, rendimento de 100%), sob a forma de cristais brancos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,71 (1H, s) , 4,82-4,74 (1H, m) , 4,35 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,00 (2H, dd, J=9,5, 4,4 Hz), 3,76-3, 65 (8H, m) , 2,42-2,30 (1H, s lg) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-(4-morfolinocarbonil-l, 3-oxazol- 2- il)azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-morfolinocar-bonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (370 mg, 1,48 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 72(2)) em cloreto de metileno (19 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (344 μΐ, 4,44 mmol) e trietilamina (622 μΐ, 4,44 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 10 minutos e, em seguida, à temperatura ambiente durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de 823 ΡΕ1340757 cloreto de sódio, seca sobre cloreto de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilormetanol (93:7) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1- (4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (404 mg, rendimento de 100%), sob a forma de cristais amarelo-pálidos. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,75 (1H, s) , 5,41-5,34 (1H, m) , 4,48 (2H, ddd, J=9,5, 6,6, 1,5 Hz), 4,30 (2H, ddd, J=9, 5, 4,0, 1,5 Hz), 3,78-3, 65 (8H, m) , 3,10 (3H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-(4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-(4-morfolinocarbonil-l ,3-oxazol-2-il)azetidina (400 mg, 1,21 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 72 (3)) em dimetilformamida (20 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (827 mg, 7,24 mmol) à temperatura ambiente e foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo :metanol (95:5) como eluente de 824 ΡΕ1340757 modo a proporcionar 3-acetiltio-l-(4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (266 mg, rendimento de 71%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,72 (1H, s) , 4,55 (2H, t, J=8,4 Hz), 4,43-4,36 (1H, m) , 4,02 (2H, dd, J=9,5, 5,9 Hz), 3, 76-3, 66 (8H, s lg) , 2,36 (3H, s) .
Exemplo de Referência 73 3-Acetiltio-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2 — i1]azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l- carbonil) -1,3-oxazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,57 g, 3,60 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(8)) em tolueno (80 ml) foi adicionada uma solução de 3-metoxiazetidina (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 31(2)) 0,67 M-trimetilalumínio em tolueno (10,8 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada num banho de óleo (60°C) durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa , à mistura de reacção foram adicionados ácido 825 ΡΕ1340757 acético aquoso a 10% (100 ml) e acetato de etilo (200 ml) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. À mistura de reacção foi adicionado acetato de etilo. A mistura foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (1,50 g, rendimento de 90% ) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,69 (1H, s) , 7, 63-7,59 (4H, m) , 7,48-7,37 (6H, m) , 4,73-4, 76 (2H, m) , 4, 37-4,19 (3H, m), 4,10 (2H, dd, J= co co 00 o N m (2H, dd, 00 00 II >"0 5,1 Hz), 4,02-3, 98 (1H, m), 3,32 (3H, s) , 1,06 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxa-zol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (1,49 g, 3,23 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 72(1)) em tetra-hidrofurano anidro (75 ml) foi 826 ΡΕ1340757 adicionada uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (3,88 ml, 3,88 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo:metanol (95:5 9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (486 mg, rendimento de 60%), sob a forma de um sólido branco. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,71 (1H, s) , 4,81-4,66 (2H, m) , 4,34 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,39-4,20 (3H, m) , 4, 04-3, 98 (1H, m) , 3,99 (2H, dd, J=9, 6, 4,4 Hz), 3,32 (3H, s) , 2,45 (1H, d, J=6, 6 Hz). (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbo-nil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-[4-(3-metoxiaze-tidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (480 mg, 1,89 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 73(2)) em cloreto de metileno (24 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (439 μΐ, 5, 67 mmol) e trietil-amina (795 ml, 5,67 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 10 minutos e, em seguida, à temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de hidrogen- 827 ΡΕ1340757 carbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre cloreto de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao residuo foram adicionados acetato de etilo e éter diisopropilico, de modo a originar um sólido e o sólido foi recolhido por meio de filtração, lavada com éter diisopro-pílico de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (586 mg, rendimento de 94%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,76 (1H, s) , 5,41-5,34 (1H, m) , 4,72-4, 63 (1H, m), 4,29 (2H, dd, J=11,0, 4,4 Hz), 4,38-4,20 (5H, m) , 4,03-3, 97 (1H, m) , 3,32 (3H, s) , 3,10 (3H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-[4-(3-metoxi-azetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (580 mg, 1,75 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 73(3)) em dimetilformamida (30 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,20 g, 10,5 mmol) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 6 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa 828 ΡΕ1340757 saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (97:3) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-[4-(3-metoxiazetidino-l-carbo-nil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (336 mg, rendimento de 62%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,73 (1H, s) , 4,72-4,65 (1H, m) , 4,54 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,43-4,19 (4H, m) , 4,03-3,97 (1H, m) , 4,01 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 3,31 (3H, s), 2,35 (3H, s) .
Exemplo de Referência 74 3-Acetiltio-l-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina
(1) 1- [4- (3-t-butildifenilsililoxiazetidino-l-carbonil)- 1.3- oxazol-2-il]-3-hidroxiazetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-(4-metoxicarbonil- 1.3- oxazol-2-il)azetidina (500 mg, 2,52 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(7)) em tolueno 829 ΡΕ1340757 (25 ml) foi adicionada uma solução de 3-t-butildifenil-sililoxiazetidina (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 42(2)) 0,67 M-trimetilalumínio em tolueno (11,3 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 15 minutos. Depois de se verificar que a reacção estava completa , à mistura de reacção foram adicionados ácido acético aquoso a 10% (20 ml) e acetato de etilo (50 ml) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 0,5 horas. À mistura de reacção foi adicionado acetato de etilo. A mistura foi partilhada entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno: metanol (95:5 -> 9:1) como eluente de modo a proporcionar 1-[4- (3-t-butildifenilsililoxiazetidino-l- carbonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (1,24 g, rendimento de 100%), sob a forma de um sólido castanho-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,68 (1H, s) , 7,61 (4H, dd, J=8,1, 1,5 Hz), 7,47-7,36 (6H, m) , 4,81-4,74 (1H, m) , 4, 65-4,52 (2H, m) , 4,40-4,36 (1H, m) , 4,33 (2H, dd, J=9,5, 6,6 Hz), 4,18-4,11 (1H, m) , 4, 06-3, 97 (1H, m) , 3,98 (2H, dd, J=9,5, 5,1 Hz), 1,06 (9H, s) . 830 ΡΕ1340757 (2) 1-[4-(3-t-Butildifenilsililoxiazetidino-l-carbonil)- 1,3-oxazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina A uma solução de 1-[4-(3-t-butildifenilsililoxi-azetidino-l-carbonil)-1, 3-oxazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (1,68 g, 3,53 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 74(1)) em cloreto de metileno (84 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (820 μΐ, 10,6 mmol) e trietilamina (1,49 ml, 10,6 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 10 minutos e, em seguida, à temperatura ambiente durante 0,5 hora. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno:acetato de etilo (1:1) como eluente de modo a proporcionar 1- [4- (3-t-butildifenilsililoxiazetidino-l-car-bonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-metanossulfoniloxiazetidina (1,56 g, rendimento de 80%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido . 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 7,72 (1H, s) , 7,61 (4H, d, J=6, 8 Hz), 7,45 (2H, t, J=6,8 Hz), 7,39 (4H, t, J=6,8 Hz), 5, 40-5,34 (1H, m) , 4, 64-4,59 (1H, m) , 4,59-4,52 (1H, m) , 4,45 (2H, dd, J=10,7, 5,9 Hz), 4,39-4,32 (1H, m) , 4,28 (2H, 831 ΡΕ1340757 dd, J=10,7, 4,9 Hz), 4,18-4,12 (1H, m) , 4,05-4, 00 (1H, m) , 3, 10 (3H, s) , 1,07 (9H, s) . (3) 3-Acetiltio-l-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina A uma solução de 1-[4-(3-t-butildifenilsililoxi-azetidino-l-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-metanossulfonilo-xiazetidina (1,56 g, 2,81 iranol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 74(2)) em dimetilformamida (80 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,92 g, 16,8 mmol) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 7,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (2:1 ->· 1:1) como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-1-[4- (3-t-butildifenilsililoxiazetidino-l-carbo-nil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (863 mg, rendimento de 57%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 7,69 (1H, s) , 7,63-7,60 (4H, m) , 7,47-7,36 (6H, m) , 4, 64-4,54 (2H, m) , 4,53 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,43-4,32 (2H, m) , 4,18-4,13 (1H, m) , 4,06-4,00 832 ΡΕ1340757 (1Η, m) , 4,00 (2H, dd, J=8,8, 5,9 Hz), 2,36 (3H, s) , 1,06 (9H, s) .
Exemplo de Referência 75 3-Acetiltio-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)azetidi-no-l-carbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
O
NHPNZ (1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarboni lamino) azetidino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de hidrocloreto de 3- (p-nitroben-ziloxicarbonilamino)azetidina (1,39 g, 4,83 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 57(4)) e -t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (1,70 g, 4,02 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(11)) em dimetilformamida (85 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (801 μΐ, 4,83 mmol) e trietilamina (1,70 ml, 12,1 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto 833 ΡΕ1340757 de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:2) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenil-sililoxi-1-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)azetidino-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (596 mg, rendimento de 23 %) , sob a forma de um sólido amare lo-pál ido. ΧΗ· -RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8, 8 Hz) , 7, 71 (1H, s) , 7, 61 (4H, d, J=8,8 Hz) , 7,53- -7,4 9 (2H , m) , 7, 47- 7,38 (6H, m) , 5,30- 5,26 (1H, m) , 5,21 (2H, s) , 4,89- 4, 80 (1H, m) , 4,72- 4, 66 (1H, m), 4,59- •4,51 (1H, m) , 4,51- 4, 42 (1H, m) , 4,37- -4,30 (1H, m), 4,12 -4,06 (2H , m) , 4,02 (2H, dd, J=8, 8 , 4,9 Hz) , 3,97-3,90 (1H, m) , 1 ,06 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)azeti- dino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il]azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (640 mg, 0, 976 mmol) (obtido tal como descrito no Exemplo de Referência 75(1)) em tetra-hidrofurano anidro (32 ml) foi adicionada uma solução de ácido acético (67 μΐ, 1,17 mmol) e fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,17 ml, 1,17 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo durante 1,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada 834 ΡΕ1340757 orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidroge-nocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de metileno:metanol (95:5 -► 9:1) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[3-(p-nitro-benziloxicarbonilamino)azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (360 mg, rendimento de 88%), sob a forma de um sólido branco. -RMN (40 0 MHz, , CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, OO OO II •d T3 Hz) , 7, 73 ( 1H, s) , 7 ,51 (2H, d, J=8,8 Hz) , 5,46 -5,40 (1H, m) , 5, 21 ( 2H, s) , 4 ,89-4,74 (2H , m) , 4, 60- 4,40 (2H, m), 4 ,39- 4, 31 ( 1H, m) , 4 ,33 (2H, dd, J=9, 5 , 6,6 Hz) , 3,98 (2H, dd, J= 9,5 r 5,1 Hz) r 3,96-3,90 (1H, m) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonil-amino)azetidino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[3-(p-nitrobenzi-loxicarbonilamino)azetidino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}-azetidina (360 mg, 0,863 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 75(2)) em cloreto de metileno (18 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (200 μΐ, 2,59 mmol) e trietilamina (363 μΐ, 2,59 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 10 minutos e, em seguida, à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e hidrogenocarbonato de 835 ΡΕ1340757 sódio aquoso saturado. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando cloreto de metileno -* cloreto de metileno: metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)-azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (390 mg, rendimento de 91%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. ΧΗ· -RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz) , 7, 77 (1H, s), 7,51 (2H f d, J=8, 8 Hz) , 5,40- -5,34 (1H, m) , 5, 11 -5,27 (1H, m), 5,21 (2H , s) , 4,90-4,81 (1H, m), 4 , 60- 4, 53 (1H, m) , 4,45 (2H, dd, J=10,3 , 6,6 Hz) , 4,39-4,30 (1H, m) r 4,27 (2H, dd, J=10, 3, 4, .4 Hz), . 3, 99 -3, 92 (1H, m), 3, 10 (3H, s) . (4) 3-Acetiltio-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)azetidino-l-carbonil] -l, 3-tiazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenziloxicarbonilamino)azetidino-l-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (390 mg, 0,787 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 75(3)) em dimetilforma-mida (20 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (539 mg, 4,72 mmol) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 10,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de 836 ΡΕ1340757 cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:3) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[3-(p-nitrobenziloxicar-bonilamino)azetidino-l-carbonil]-l,3-tiazol-2-il}azetidina (195 mg, rendimento de 52%) , sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,24 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,75 (1H, s), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,16-5,10 (1H, d lg, J=5, 9 Hz), 5,21 (2H, s) , 4,89-4,80 (1H, m) , 4,60-4,10 (4H, m) , 4,53 (2H, t, J=8,8 Hz), 3,99 (2H, dd, J=9,5, 5,9 Hz), 3,98-3,91 (1H, m) , 2,36 (3H, s) .
Exemplo de Referência 76 3-Acetiltio-l-{4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-l-{4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) -pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina 837 ΡΕ1340757 A uma solução de (3S)-3-amino-l-p-nitrobenziloxi-carbonilpirrolidina(905 mg, 3,41 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 52(4)) e 3-t-butildife-nilsililoxi-1- (4-carboxil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (1,20 g, 2,84 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(11)) em dimetilformamida (36 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (556 μΐ, 3,41 mmol) e trietilamina (478 μΐ, 3,41 mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexa-no: acetato de etilo (1:2 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(3S)-1-(p-nitro-benziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-iljazetidina (936 mg, rendimento de 49%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. λΆ· -RMN (4 00 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8 ,22 (2H, m) , 7,72 (1H, s) r 7, 63- 7,58 (4H , m) , 7,53 (2H, m) , 7,48- -7,37 (6H, m) , 6, 85 -6, 80 (1H, t lg, J= 8,1 Hz), 5 ,24 (2H, d, J = 8,1 Hz) , 4, 75· -4, 67 (1H, m) , 4,65- -4,58 (1H, m) , 4,16- -4,09 (2H, m) , 4, 06 (2H, dd, J=8, .8, 5,1 Hz), 3,83- 3, 75 (1H, m) , 3, 64- -3,46 ΡΕ1340757 (2Η, m), 3,38 (1H, dd, J=11,0, 4,4 Hz), 2,30-2,20 (1H, m) , 2, 04-1, 90 (1H, m) , 1,06 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-{4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pir-rolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[ (3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarba-moil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (1,10 g, 1,64 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 76(1)) em tetra-hidrofurano anidro (55 ml) foi adicionada uma solução de ácido acético (113 μΐ, 1,97 mmol) e fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,97 ml, 1,97 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num banho de gelo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarba- moil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (687 mg, rendimento de 97%), sob a forma de um sólido branco. 1H· -RMN (400 MH z, CDC13) : : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7 ,75 (1H S) , 7,52 (2H, m) , 6, 89- -6,82 (1H, m) , 5,27- 5, 20 (2H, m) 4, 84-4, 77 (1H, m) , 4, 66- 4,59 (1H, m) , 4 ,36 (2H , dd -, J= = 8,8 7, 3 Hz) r 4,01 (2H, dd, J=8,8, 5,2 Hz) , 3, 82· -3, , 74 (1H, m) 3, 67-3, 52 (3H, m) , 3, 45 -3,39 (1H, m) , 2,30- -2, 20 (1H, m) 2, 03-1, 93 (1H, m) . 839 ΡΕ1340757 (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-{4-[(3 S)-1-(p-nitrobenziloxicar-bonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(3S)-1-(p-nitro-benziloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (680 mg, 1,58 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 76(2)) em cloreto de metileno (34 ml) foram adicionados cloreto de metanossulfonilo (366 μΐ, 4,73 mmol) e trietilamina (663 μΐ, 4,73 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 10 minutos e à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de sílica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilo:metanol (96:4) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossulfoniloxi-1-{4 —[(3S)-l-(p-nitro-benziloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (760 mg, rendimento de 95%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7,78 (1H, s) , 7,52 (2H, m) , 6, 85-6, 80 (1H, m) , 5, 42-5, 37 (1H, m) , 5,24 (2H, d, J=8,1 Hz), 4, 66-4,58 (1H, m) , 4,49 (2H, dd, J=10,3, 6,6 Hz), 4,31 (2H, dd, J=10,3, 4,4 Hz), 3,82-3,74 840 ΡΕ1340757 (1Η, m) , 3, 64-3, 75 (2H, m) , 3, 44-3, 38 (1H, m) , 3,11 (3H, s), 2,30-2,20 (1H, m) , 2,04-1, 96 (1H, m) . (4) 3-Acetiltio-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pir-rolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (760 mg, 1,49 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 76(3)) em dimetilfor-mamida (38 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (1,02 g, 8,95 mmol) à temperatura ambiente e foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 10,5 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:6) -► acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (533 mg, rendimento de 73%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7,76 (1H, s), 7,52 (2H, m) , 6, 87-6, 80 (1H, s lg) , 5,24 (2H, d, J=7,3
Hz), 4, 66-4,58 (1H, m) , 4,56 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,44-4,36 841 ΡΕ1340757 (1Η, m) , 4,03 (2H, dd, J=8,8, 5,9 Hz), 3,79 (1H, dt, J=11,0, 6,6 Hz), 3,65-3,51 (2H, m) , 3,40 (1H, dd, J=11,0, 4,4 Hz), 2,36 (3H, s) , 2,32-2,20 (1H, m) , 2,23-1,91 (1H, m) .
Exemplo de Referência 77 3-Acetiltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirro-lidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
O
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil) pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina A uma solução de (3R)-3-amino-l-p-nitrobenziloxi-carbonilpirrolidina (798 mg, 3,01 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 53 (5)) e 3-t-butildi-fenilsililoxi-1- (4-carboxil-l,3-oxazol-2-il)azetidina (1,06 g, 2,51 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 70(11)) em dimetilformamida (50 ml) foram adicionados cianeto de dietilfosforilo (464 μΐ, 3,01 mmol) e trietilamina (422 μΐ, 3,oi mmol) num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se verificar gue a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 842 ΡΕ1340757 10%. A camada orgânica foi lavada com hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando n-hexano: acetato de etilo (1:2 -► 1:3) como eluente de modo a proporcionar 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarba-moil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (813 mg, rendimento de 48%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7,72 (1H, s) 7, 63-7,59 (4H, m) , 7,53(2H, m) , 7,48-7,38 (6H, m) , 6,86-6,60 (1H, m) , 5,24 (2H, d, J=8,l Hz), 4,77-4, 68 (1H, m) , 4, 64-4,58 (1H, m) , 4,15-4,09 (2H, m) , 4,05 (2H, dd, J=8,8, 5,1 Hz), 3,82-3, 75 (1H, m) , 3, 64-3, 49 (2H, m) , 3,38 (1H, dd, J=11,0, 5,1 Hz), 2,30-2,20 (1H, m), 2,06-1,90 (1H, m), 1,06 (9H, s) . (2) 3-Hidroxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirro-lidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-t-butildifenilsililoxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcar-bamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (810 mg, 1,21 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 77(1)) em tetra-hidrofurano anidro (40 ml) foi adicionada uma solução de ácido acético (83 μΐ, 1,45 mmol) e fluoreto de tetra-n-butilamónio 1,0M em tetra-hidrofurano (1,45 ml, 1,45 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada num 843 ΡΕ1340757 banho de gelo de um dia para o outro. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura de reacção foi concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -> acetato de etilorme-tanol (95:5) como eluente de modo a proporcionar 3-hidroxi-1—{4 —[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcar-bamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (507 mg, rendimento de 97 %) , sob a forma de um óleo amarelo. ΧΗ· -RMN (4 0 0 MHz, CDCls) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7 ,75 (1H s) , 7, 52 (2H, m) , 6,89- 6, 83 (1H, s lg) , 5,28 -5, ,20 (2H, m) 4, 84-4 ,76 (1H, m) , . 4, 66 -4,58 (1H, m), 4 ,36 ( 2H, , dd , J= :8, 8 6, 6 Hz ) , 4,01 (2H , dd, J=8, 8, 4,4 Hz), 3, 82- -3, . 74 (1H, m) 3, 64-3 ,51 (2H, m) , 3,4· 4-3,37 (1H, m) , 2,32- 2, 20 (1H, m) 2, 08-1 , 92 (1H, m) . (3) 3-Metanossulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicar-bonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-hidroxi-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (500 mg, 1,16 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 77(2)) em cloreto de metileno (25 ml) foram adicionados cloreto de metanos-sulfonilo (269 μΐ, 3,48 mmol) e trietilamina (488 μΐ, 3,48 mmol) num banho de gelo e a mistura foi agitada durante 10 minutos e, em seguida, à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e 844 ΡΕ1340757 hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 residuo foi purificado através de cromatografia sobre uma coluna de gel de silica utilizando acetato de etilo -► acetato de etilormetanol (96:4) como eluente de modo a proporcionar 3-metanossul-foniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (546 mg, rendimento de 92%), sob a forma de um sólido amarelo-pálido. Espectro de massa (BAR+) : m/z: 510 [M+H] + (4) 3-Acetiltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxicarbonil)pir-rolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina A uma solução de 3-metanossulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1- (p-nitrobenziloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (540 mg, 1,06 mmol) (obtida tal como descrito no Exemplo de Referência 77(3)) em dimetilfor-mamida (27 ml) foi adicionado tioacetato de potássio (726 mg, 6,36 mmol) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada num banho de óleo (80°C) durante 9 horas. Depois de se verificar que a reacção estava completa, a mistura foi partilhada entre acetato de etilo e solução aquosa de cloreto de sódio a 10%. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado através de cromatografia 845 ΡΕ1340757 sobre uma coluna de gel de sílica utilizando n-hexano:acetato de etilo (1:6) -* acetato de etilo como eluente de modo a proporcionar 3-acetiltio-l-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenziloxi-carbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azeti-dina (281 mg, rendimento de 54%), sob a forma de um sólido castanho-pálido. 1H-RMN (400 MHz, CDC13) : δ (ppm) 8,22 (2H, m) , 7,76 (1H, S) , 7,52 (2H, m) , 1 OO vo -6, 80 (1H, m) , 5,23 (2H, d, J=7,3 Hz) , 4, 64 -4,58 (1H, m), 4, 56 (2H, t, J=8,8 Hz) , 4,44 -3,86 (1H, m) , 4,03 (2 H j r dd, r J=8,8, 5 ,9 Hz) , 3,79 (1H, dd, J=ll ,0, 6 , 6 Hz) , 3, 65-3, 52 (2H, m) , 3 ,40 (1H, dd , J= 11,0, 4,4 Hz) , 2,12 (3H, s), 2, 32-2,20 (1H, - m) , 2,23- 1, 92 (1H, m) .
Exemplo de Teste 1 Actividades Antibacterianas in vitro
Para avaliar as actividades antibacterianas dos compostos, foram determinadas as concentrações mínimas (μρ/ιηΐ) dos compostos para inibir o crescimento de várias bactérias patogénicas através do método de diluição em placa de agar. Os resultados são mostrados na Tabela 6. Nesta Tabela, as bactérias empregues A, B, e C foram como se segue: A: Staphylococcus aureus B: Streptococcus pneumoniae C: Haemophilis influenzae estirpe 9787 (uma estirpe que produz β-lactamase) ΡΕ1340757 846 [TABLE 6]
Compostos Concentração Mínima para Inibir o Cres
cimento (μρ/ιηΐ) das Bactérias Empregues ABC
Exemplo 3 0,05 0,20 0,10 Exemplo 4 0,05 0,20 0,20 Exemplo 5 0,05 0,20 0,20 Exemplo 6 0,05 0,20 0,20 Exemplo 19 0,05 0,20 0,10 Exemplo 22 0,05 0,20 0,10 Exemplo 24 <0,012 0,025 0,05 Exemplo 25 0,025 0,10 0,39 Exemplo 56 0,05 0,20 0,20 Exemplo 57 0,025 0,20 0,20 Exemplo 58 <0,012 0,20 0,20 Exemplo 59 <0,012 0,20 0,20 Exemplo 60 0,025 0,39 0,39 Exemplo 61 0,025 0,20 0,39 Exemplo 67 <0,012 0,39 0,20 Exemplo 69 <0,012 <0,012 0,78 Exemplo 70 <0,012 <0,012 0,78 Exemplo 71 <0,012 <0,012 0,39 Exemplo 72 <0,012 0,025 0,20 Exemplo 76 0,05 0,20 0,39 Exemplo 80 0,025 0,20 0,39 Exemplo 81 <0,012 0,20 0,39
Estes resultados indicam que os compostos da 847 ΡΕ1340757 presente invenção exercem actividades antibacterianas potentes.
Exemplo de Teste 2 Farmacocinética
Os compostos do composto da presente invenção (20 mg/kg) foram injectados subcutaneamente a ratinhos (n=3, ddY, machos, adquiridos a SLC Japan). A concentração do composto no plasma foi determinada através de um método de bioensaio a 5, 15, e 30 min, e 1, 1,5, e 2 hr depois da administração. Os parâmetros farmacocinéticos determinados estão sumariados na Tabela 7. Na Tabela, Cmax, Τχ/2, e AUCau indicam a concentração máxima no plasma, semi-vida na concentração no plasma, e área sob a curva de concentração-tempo no plasma do composto, respectivamente.
[TABELA 7]
Composto C-max (μq/ml) Tl/2 (hr) AUCall ^g-hr/ml) Exemplo 3 127,17 0,25 83, 90 Exemplo 4 157,38 1,02 165,19 Exemplo 11 56, 56 0,33 40,38 Exemplo 57 48,15 0,38 45, 31 Exemplo 58 63, 88 0,41 47,38 Exemplo 60 46, 14 0,30 27,88 Exemplo 67 40,20 0,45 34,13 Exemplo 76 52,80 0,19 27,88 ΡΕ1340757
Exemplo de Teste 3 Actividades Antibacterianas in vivo
Ratinhos-macho ddY de 4 semanas de idade (adquiridos a SLC Japan) foram inoculados intraperitonealmente com S. pneumoniae 9605 (PRSP) a um volume de 0,2 ml (contendo mucina a 5%, 1-5 x 103 unidades formadoras de colónias (cfu)/ratinho). Imediatamente após os ratinhos terem sido infectados, eles foram tratados subcutaneamente com o composto de teste unicamente a um volume de 0,1 ml. Foram utilizados sete ratinhos por grupo. Foi utilizada uma solução do composto de teste preparada através de diluição em dois passos para a experiência. Foram calculados os valores DE50 dos compostos através do método Probit a partir das taxas de sobrevivência 7 dias após a infecção. Os resultados estão sumariados na Tabela 8.
[TABELA 8]
Compostos DE50 (mg/kg) Exemplo 57 0,855 Exemplo 58 0,899 Exemplo 59 1,08 Exemplo 60 1,41 Exemplo 61 1,79 Exemplo 67 O hO V \—1 Exemplo 76 0,534 849 ΡΕ1340757
Exemplo de Preparação 1 (agente de injecção) 500 mg do composto do Exemplo 3 foram dissolvidos em 5 ml de água destilada para injecção e a solução foi seca por congelação depois de a passar através de um filtro de esterilização de modo a preparar uma preparação para injecção seca por congelação.
Exemplo de Preparação 2 (cápsulas)
Composto do Exemplo 24 50 mg Lactose 128 mg Amido de milho 70 mg Estearato de magnésio 2 mg 250 mg Pós da formulação anterior foram misturados e depois a mistura ter sido passada através de um crivo de malha 60, os pós foram carregados numa cápsula de gelatina No. 3 de 250 mg de modo a preparar uma cápsula.
Exemplo de Preparação 3 (comprimidos)
Composto do Exemplo 24 50 mg Lactose 126 mg Amido de milho 23 mg Estearato de magnésio 1 mg 200 mg Pós da formulação anterior foram misturados e depois da mistura ter sido granulada a húmido utilizando 850 ΡΕ1340757 amido de milho e seca, foi preparado um comprimido de 200 mg. Este comprimido pode ser revestido de açúcar se necessário . (Efeito da Invenção)
Os compostos 1-metilcarbapenem de fórmula (I) da presente invenção e seus sais farmacologicamente aceitáveis possuem actividade antibacteriana excelente, são estáveis contra a desidropeptidase I e β-lactamase, e têm uma levada proporção de recuperação na urina. Para além disso, dado que apresentam baixa toxicidade para o rim, os compostos são úteis como produtos farmacêuticos, particularmente agentes antibacterianos.
Lisboa, 13 de Outubro de 2006

Claims (33)

  1. ΡΕ1340757 1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto 1-metilcarbapenem representado pela fórmula (I):
    em que: R1 representa (1) um grupo representado pela fórmula COOR1 2 [em que R2 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 ou um grupo cicloalquilo C3-C6] , 1 um grupo representado pela fórmula CONR3R4 2 [em que R3 e R4 podem ser iguais ou diferentes e repre 3 senta, cada um, um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo Ci-C6 (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte A mais adiante), um grupo cicloalquilo C3-C6 ou um grupo heterociclico de 3 a 6 membros ou um grupo arilo C6-C10 (que pode estar substituído por um ou dois grupos, que podem ser iguais ou diferentes e são se 4 leccionados a partir do grupo substituinte B mais adiante), ou, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão 2 ΡΕ1340757 ligados, representam um heterociclo de 3 a 6 membros contendo azoto (que pode estar substituído por um ou dois grupos, que podem ser iguais ou diferentes e são selec-cionados a partir do grupo substituinte B mais adiante)], (3) um grupo ciano, (4) um grupo representado pela fórmula CH2OR6 [em que R6 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo CR-Ce ou um grupo cicloalquilo C3-C6] ou (5) um grupo representado pela fórmula CH2NR7R8 [em que R7 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 ou um grupo cicloalquilo C3-C6, e R8 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6, um grupo cicloalquilo C3-C6, um grupo alcanoílo Ci-Cô, um grupo (aril C6-Cio)carbonilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são selec-cionados a partir do grupo substituinte B mais adiante), um grupo (alcoxi Ci-C6) carbonilo, um grupo heterociclil aromático de 5 ou 6 membros-carbonilo, um grupo alquil Ci-C6_sulfonilo ou um grupo aril C6-Cio-sulfonilo, ou R e R , juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um grupo succinimida (que pode estar condensado com um grupo fenilo)]; R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci~Ce; 3 ΡΕ1340757 n representa 1, 2 ou 3; X representa um átomo de enxofre ou um átomo de oxigénio; o grupo substituinte A compreende um grupo hidroxilo, um grupo amino (que pode estar substituído por um ou dois grupos alquilo Ci~Ce) , um grupo carbamoílo (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos alquilo Ci-Ce) , um grupo carboxilo, um grupo ciano e um grupo alcoxi C1-C6,· e o grupo substituinte B compreende um grupo hidroxi-alquilo Ci-Cê, um grupo amino-alquilo Ci~C4 (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos alquilo Ci-C6) , um grupo carbamoílo (a porção amino do qual pode estar substituída por um ou dois grupos alquilo Ci-C6) t um grupo carboxilo, um grupo hidroxilo, um grupo amino (que pode estar substituído por um ou dois grupos alquilo Ci-Cô) , um grupo alcoxi Ci-Cõ e um grupo alquilo Ci-c6] ; ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente acei tável . 4 ΡΕ1340757
  2. 3. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que R1 representa um grupo representado pela fórmula C0NR4R5 ou um grupo representado pela fórmula CH2NR7R1.
  3. 4. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5.
  4. 5. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, em que R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3.
  5. 6. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, em que R2 representa um átomo de hidrogénio.
  6. 7. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que R3 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3. 1 Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo 5 ΡΕ1340757 com a reivindicação 1, em que R3 representa um átomo de hidrogénio, um grupo metilo ou um grupo etilo.
  7. 9. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que R4 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3.
  8. 10. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que R4 representa um átomo de hidrogénio, um grupo metilo ou um grupo isopropilo.
  9. 11. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que R5 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo Ci-C6 (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte A) ou um grupo heterocíclico de 4 a 6 membros, contendo azoto,.
  10. 12. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que R5 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do 6 ΡΕ1340757 grupo substituinte A) , ou um grupo azetidinilo, pirro-lidinilo ou piperidinilo.
  11. 13. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um heterociclo de 4 a 6 membros contendo azoto (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B).
  12. 14. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um grupo azetidino, piperazino, morfolino ou tiomorfolino (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B).
  13. 15. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que R6 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3.
  14. 16. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que R6 representa um átomo de hidrogénio. 7 ΡΕ1340757
  15. 17. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que R7 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3.
  16. 18. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que R7 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo.
  17. 19. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que R7 representa um átomo de hidrogénio.
  18. 20. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que R8 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C3, um grupo alcanoilo C1-C3, um grupo benzoilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substi-tuinte B), um grupo (alcoxi C1-C3)carbonilo, um grupo tienilcarbonilo, um grupo furilcarbonilo ou um grupo piridilcarbonilo.
  19. 21. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo ΡΕ1340757 com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que R8 representa um átomo de hidrogénio, um grupo benzoilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B), um grupo (2-tienil)carbonilo, um grupo (2-furil)carbonilo ou um grupo (3-piridil)carbonilo.
  20. 22. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, em que n representa 1.
  21. 23. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, em que X representa um átomo de oxigénio.
  22. 24. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que: R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5 (em que R4 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-C3; e R5 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C6 (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte A) ou um grupo heterocíclico de 4 a 6 membros, contendo azoto,): 9 ΡΕ1340757 R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre.
  23. 25. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que: R1 representa um grupo representado pela fórmula C0NR4R5 (em que R4 representa um átomo de hidrogénio, um grupo metilo ou um grupo isopropilo; e R5 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo Ci-Cô (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte A) , ou um grupo azetidinilo, pirrolidinilo ou piperidinilo); n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre.
  24. 26. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que: R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5 (em que R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um heterociclo de 4 a 6 membros 10 ΡΕ1340757 contendo azoto que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B); R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre.
  25. 27. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que: R1 representa um grupo representado pela fórmula CONR4R5 (em que R4 e R5, juntamente com o átomo de azoto ao qual eles estão ligados, representam um grupo azetidino, piperazino, morfolino ou tiomorfolino que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B); R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre.
  26. 28. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que: 11 ΡΕ1340757 R1 representa um grupo ciano; R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre.
  27. 29. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que: R1 representa um grupo representado pela fórmula CH2NR7R8 (em que R7 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C1-C3; e R8 representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C1-C3, um grupo alcanoilo C1-C3, um grupo benzoilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B) , um grupo (alcoxi C1-C3) -carbonilo, um grupo tienilcarbonilo, um grupo furilcar-bonilo ou um grupo piridilcarbonilo); R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre. 12 ΡΕ1340757
  28. 30. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, em que: R1 representa um grupo representado pela fórmula CH2NR7R8 (em que R7 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo; e R8 representa um átomo de hidrogénio, um grupo benzoilo (que pode estar substituído por um ou dois grupos que podem ser iguais ou diferentes e são seleccionados a partir do grupo substituinte B) , um grupo (2-tienil)car-bonilo, um grupo (2-furil)carbonilo ou um grupo (3-piri-dil)carbonilo); R2 representa um átomo de hidrogénio; n representa 1; e X representa um átomo de oxigénio ou um átomo de enxofre.
  29. 31. Um composto 1-metilcarbapenem ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com a reivindicação 1, seleccionado a partir do grupo de compostos seguinte: Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-tiazol-2-il) azeti-din-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico 13 ΡΕ1340757 Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-l,3-oxazol-2-il) azeti din-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-l,3-tiazol-2-il)aze tidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-l,3-oxazol-2-il)aze tidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-[l-(4-ciano-l,3-tiazol-2-il)azetidin-3 il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-[l-(4-ciano-l,3-oxazol-2-il)azetidin-3 il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2 il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-l,3-oxazol-2 il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, 14 ΡΕ1340757 Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-l,3-tiazol-2 il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-l,3-oxazol-2 il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-aminoazetidino)carbonil-1,3 tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-{l-[4-(3-aminoazetidino)carbonil-1,3 oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(3-hidroxiazetidino)carbonil-1,3 tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)— 2 —{1—[4-(3-hidroxiazetidino)carbonil-1,3 oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-l, 3-tiazol-2 il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, 15 ΡΕ1340757 Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-l, 3-oxazol-2 il)azetidin-3-il]tio-6-[(IR)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-tia zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-oxa zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tia zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxa zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil) 1.3- tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil) 1.3- oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, 16 ΡΕ1340757 Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil) 1.3- tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil) 1.3- oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(piperazino-l-carbonil)-1,3-tia zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-{l-[4-(piperazino-l-carbonil)-1,3-oxa zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(2-amino-etilcarbamoil)-1,3-tia zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil- carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(2-amino-etilcarbamoil)-1,3-oxa zol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)—2—{1—[4—((IS)-l-aminometil-2-metil-propil carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, 17 ΡΕ1340757 Ácido (IR, 5S, 6S)— 2 —{1—[4-((IS)-l-aminometil-2-metil-propil carbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-amino-etil)-N-isopropil-car bamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-amino-etil)-N-isopropil-car bamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-(l-{4-[N-(2-hidroxi-etil)-N-isopropil carbamoil]-l,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[N-(2-hidroxi-etil)-N-isopropil carbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3-carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-l,3-tiazol-2-il)azeti din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3 carboxilico, Ácido (IR,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-l,3-oxazol-2-il) azeti din-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-l-metil-carbapen-2-em-3 carboxilico, 18 ΡΕ1340757 Ácido (1R,5S,6S)—2—{1—[4—(benzoilaminometil)-l,3-tiazol-2 il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil- carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(benzoilaminometil)-1,3-oxazol-2 il]azetidin-3-il}tio-6-[ (R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (1R,5S,6S)-2-{l-[4-(benzenossulfonilaminometil)-1,3 tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (lR,5S,6S)-2-{l-[4-(benzenossulfonilaminometil)-1,3 oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(tiofeno-2-carbonilamino)metil] 1.3- tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)-2-(l-{4-[(tiofeno-2-carbonilamino)metil] 1.3- oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, Ácido (IR,5S,6S)—2—(1—{4—[(furano-2-carbonilamino)metil] 1.3- tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, e 19 ΡΕ1340757 Ácido (IR,5S,6S)-2-(1—{4 —[(furano-2-carbonilamino)metil]-1, 3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico; ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável .
  30. 32. Uma composição farmacêutica contendo um composto ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável tal como definido em qualguer uma das reivindicações 1 a 31 como ingrediente activo.
  31. 33. Uma composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 32, em que a composição farmacêutica é uma composição para a prevenção ou tratamento de infecções bacterianas.
  32. 34. Um composto ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 31 para utilização como medicamento.
  33. 35. Utilização de um composto ou um seu sal ou derivado éster farmacologicamente aceitável tal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 31 no fabrico de um medicamento para a prevenção ou tratamento de infecções bacterianas. Lisboa, 13 de Outubro de 2006
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