DK167810B1 - Alkylphyosphonoserin, fremgangsmaade til fremstilling deraf og farmaceutisk praeparat indeholdende en saadan forbindelse - Google Patents

Alkylphyosphonoserin, fremgangsmaade til fremstilling deraf og farmaceutisk praeparat indeholdende en saadan forbindelse Download PDF

Info

Publication number
DK167810B1
DK167810B1 DK250090A DK250090A DK167810B1 DK 167810 B1 DK167810 B1 DK 167810B1 DK 250090 A DK250090 A DK 250090A DK 250090 A DK250090 A DK 250090A DK 167810 B1 DK167810 B1 DK 167810B1
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
compound
general formula
serine
chloroform
methanol
Prior art date
Application number
DK250090A
Other languages
English (en)
Other versions
DK250090A (da
DK250090D0 (da
Inventor
Hans Brachwitz
Reinhild Schoenfeld
Peter Langen
Friedrich Paltauf
Albin Hermetter
Original Assignee
Asta Medica Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DD31486888A external-priority patent/DD299727A7/de
Priority claimed from DD31835988A external-priority patent/DD289892A7/de
Application filed by Asta Medica Ag filed Critical Asta Medica Ag
Publication of DK250090A publication Critical patent/DK250090A/da
Publication of DK250090D0 publication Critical patent/DK250090D0/da
Application granted granted Critical
Publication of DK167810B1 publication Critical patent/DK167810B1/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/091—Esters of phosphoric acids with hydroxyalkyl compounds with further substituents on alkyl
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/113—Esters of phosphoric acids with unsaturated acyclic alcohols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
    • C07F9/40—Esters thereof
    • C07F9/4071—Esters thereof the ester moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/4075—Esters with hydroxyalkyl compounds
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

i DK 167810 B1
Opfindelsen angår hidtil ukendte alkylphosphonoseriner, en fremgangsmåde til fremstilling deraf samt farmaceutiske præparater indeholdende sådanne forbindelser.
5 IR. Hirt, R. Berchthold Pharmaceutica Acta .Helvetica, 33 (1958), 349-356 er der beskrevet en fremgangsmåde til fremstilling af alkylphosphocoliner. Den cytostatiske aktivitet og toxiciteten af hexadecylphosphocholin er beskrevet i H. R. Scherf et al., Lipids 22, (1987), 927- 10 929, i C. Muschol et al., Lipids 22, (1987) 930-934. Fra DE 36 39 084 kendes phosphorsyreestere, bl.a. også alkyl-phosphoseriner, der anvendes som emulgatorer eller fugtbevarende midler. Endvidere kendes fra DE 36 06 633 cyto-statisk virksomme phosphocholiner, phosphoseriner og 15 phosphoethanolaminer med en modificeret glyceroldel. Fra DD 238 978, DD 238 979 og DD 239 405 kendes endvidere fremgangsmåder til fremstilling af substituerede glycero-phosphoseriner, hvilke forbindelser har cytostatisk virkning. Fra Chemical Abstracts, bind 87, (1977), s 652, 20 184938η kendes en fremgangsmåde til fremstilling af phos- phonat- og etheranaloge af phosphatidyl-L-serin.
De til teknikkens stade hørende kendte forbindelser er diestere af phosphorsyre, hvis cytostatiske virkning be-25 ror på phospholipase C's angrebsmulighed på C-O-P-bindin-gen. Det har nu overraskende vist sig, at hidtil ukendte alkylphosphonoseriner, der er monoestere af phosphonsyre, har en udpræget cytostatisk og virustatisk virkning, skønt forudsætningen, C-0-P-bindingen som angrebsmulig-30 hed for phospholipase C, mangler.
Den foreliggende opfindelse angår således forbindelser med den i krav 1 angivne almene formel 35 DK Ί678Ί0 Bl 2 0 «
R - P - O - CH0 - CH - COOH I
1 2 I
OH NH2 5 hvori R betegner en ligekædet eller forgrenet mættet eller umættet alifatisk carbonhydridgruppe med 6-30 carbon-atomer.
I formlen I betyder R en ligekædet eller forgrenet, mæt-10 tet eller umættet alifatisk carbonhydridgruppe med 6-30 carbonatomer, fortrinsvis med 10-25 carbonatomer. Eksempler på sådanne grupper er decyl-, dodecyl-, tetradecyl-, hexadecyl-, octadecyl-, arachyl-, 17-methyl-n-octadecyl-grupper eller cis-9-n-octadecenylgruppen.
15
Alkylphosphonoserinerne udviser visse strukturelle ligheder med fysiologisk aktive naturligt forekommende phos-pholipider, f.eks. phosphatidylseriner. De adskiller sig dog fra disse derved, at de ikke indeholder nogen glyce-20 rolkomponter. I sammenligning med de naturligt forekommende phosphatidylseriner har alkylphosphonoserinerne ifølge opfindelsen højere biostabilitet. De udgør potentielle cytostatika og virustatika.
25 Opfindelsen angår endvidere en fremgangsmåde til fremstilling af de hidtil ukendte forbindelser med formlen I, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at man a) omsætter en forbindelse med den almene formel 30
0 A
»/
R - P II
\
B
35 DK 167810 B1 3 hvori R har den i det foregående angivne betydning, og A og B betegner en hydroxygruppe, eller eventuelt et salt af en sådan forbindelse, med et serinderivat med den almene formel 5 0
II
HO - CH0 - CH - C III
2 I \
NH-Y OX
10 hvori X betegner benzyl, t-butyl, phthalimidomethyl, isopropyl eller benzhydryl, og Y betegner N-benzoyloxy-carbonyl, N-t-butoxycarbonyl eller N-phthaloyl, eventuelt i nærværelse af et kondensationsmiddel, til dannelse af en forbindelse med den almene formel 15 0 0
II II
R - P - 0 - CH0 - CH - C IV
1 2 I \
OH NH-Y OX
20 hvori R, X og y har de i det foregående angivne betydninger, fraspalter beskyttelsesgrupperne og om ønsket overfører produktet i et salt deraf, eller b) omsætter en forbindelse med den almene formel 25
°/°-z R - P
X (-) V 0^ ' 30 hvori R har den i det foregående angivne betydning, og Z betegner en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer, der eventu- 35 4
Ulv 10/0 IU D l elt er substitueret med Cl, Br eller F, eller betegner en af grupperne
C
5 lCVn\ ' <CH2>nN+(E)3
D
hvori C og D uafhængigt af hinanden betegner H eller methyl, og E betegner methyl, og n betegner 2-6, i nærvæ-10 relse af phospholipase D med L-serin.
De som udgangsmaterialer anvendte forbindelser med den i krav 4 angivne almene formel II kan fremstilles på i og for sig kendt måde, idet man ud fra det tilsvarende 15 alkylbromid R-Br og trimethylphosphit først syntetiserer alkylphosphonsyredimethylesterne, der ved omsætning med en blanding af trimethylsilylchlorid og natriumiodid overføres i trimethylsilylesteren, hvorpå denne hydrolyseres ved vandindvirkning.
20
Omsætningen af forbindelserne med den almene formel II sker i almindelighed på den måde, at man overfører forbindelserne i saltet af en base, f.eks. pyridin, og dernæst omsætter dette salt med serinderivatet. Omsætningen 25 sker fortrinsvis i nærværelse af et kondensationsmiddel, f.eks. i nærværelse af 2,4,6-triisopropylbenzolsulfo-chlorid under vandfri betingelser og fortrinsvis i nærværelse af et inert organisk opløsningsmiddel. Som opløsningsmiddel kommer f.eks. pyridin på tale.
30
Reaktionspartneren anvendes sædvanligvis i ækvimolær mængde, skønt det også er muligt at anvende et op til firmolært overskud af serinderivat.
35 DK 167810 B1 5
Omsætningen sker ved temperaturer på ca. 5-60 “C, fortrinsvis ved stuetemperatur. Efter afslutning af reaktionen ødelægges endnu tilstedeværende syrechlorid på sædvanlig måde, f.eks. ved tilsætning af vand til reaktions-5 opløsningen, og produktet isoleres på sædvanlig måde, f.eks. ved ekstraktion med diethylether. De således opnåede forbindelser med den almene formel IV kan eventuelt før fraspaltning af beskyttelsesgrupperne renses yderligere, f.eks. ved søjlekromatografi på silicagel. Det er 10 dog også muligt at overføre dem i forbindelserne med den almene formel I uden yderligere rensning.
Dernæst fraspaltes beskyttelsesgrupperne på sædvanlig måde, f.eks. ved katalytisk hydrogenolyse, hydrazinolyse, 15 behandling med HC1 eller myresyre, fortrinsvis i et inert opløsningsmiddel. Forbindelserne med den almene formel I kan dernæst isoleres på i og for sig kendt måde og eventuelt renses yderligere, f.eks. kromatografisk.
20 Alkylphosphonoserinerne ifølge opfindelsen kan også fremstilles ad enzymatisk vej. Herved omsættes forbindelserne med den almene formel V med L-serin i nærværelse af phospholipase D. Derved omsættes en opløsning eller en suspension af en forbindelse med den almene formel V med 25 et overskud af L-serin i et vandigt puffersystem, f.eks. i en acetat- eller trispufferopløsning ved pH-værdier på ca. 4-8,5, fortrinsvis 5-6, særlig foretrukkent 5,6, i nærværelse af ca. 0,01-0,1 M CaC^ og i nærværelse af phospholipase D under tilsætning af diethylether eller en 30 blanding af diethylether med et andet organisk opløsningsmiddel, f.eks. chloroform.
Omsætningen sker ved temperaturer på ca. 5-60 °C, fortrinsvis 35-45 °C. Under reaktionen omrøres reaktions- 35 blandningen intensivt eller rystes. Reaktionsvarigheden andrager ca. 0,5-48 timer. Efter afsluttet reaktion aktiveres enzymet phospholipase D f.eks ved tilsætning af DK 167810 B1 6 0,1 M EDTA-opløsning, og forbindelserne med den almene formel I isoleres på i og for sig kendt måde.
De hidtil ukendte alkylphosphonoseriner udviser en stærk 5 cytostatisk og virustatisk virkning. Til bestemmelse af den cytostatiske virkning blev den antiproliferative virkning undersøgt ved hjælp af Ehrlich-ascites tumorceller. Derved viste det sig, at forbindelserne ifølge opfindelsen har fremragende cytostatisk virkning. De kan 10 derfor alene eller i blanding med andre aktive stoffer anvendes i form af sædvanlige galeniske præparater som cytostatika og virustatika. Den foreliggende opfindelse angår følgelig farmaceutiske præparater indeholdende en forbindelse med formlen I i kombination med sædvanlige 15 galeniske hjælpemidler, bærere og/eller fortyndingsmidler.
Forbindelserne med den almene formel I er bestemt til anvendelse på mennesker og kan indgives på sædvanlig 20 måde, f.eks. peroralt eller parenteralt. Fortrinsvis indgives de peroralt, idet dagsdosis andrager ca. 0,05-20 mg/kg legemsvægt, fortrinsvis 0,05-5 mg/kg legemsvægt.
Den behandlende læge kan dog afhængigt af patientens almentilstand og alder, den specielle forbindelse med 25 formlen I, sygdommens art og formuleringen også fore skrive lavere eller højere doser uden for dette område.
Forbindelserne med formlen I kan indgives alene eller i forbindelse med andre farmaceutisk aktive stoffer, idet 30 indholdet af forbindelserne med den almene formel I ligger mellem 0,1 og 99%. I almindelighed foreligger de farmaceutisk aktive forbindelser i blanding med egnede inerte hjælpe- og/eller bærestoffer eller fortyndingsmidler, f.eks. farmaceutisk acceptable opløsningsmidler, 35 gelatine, gummi arabicum, mælkesukker, stivelse, magnesi-umstearat, talkum, planteolier, polyalkylenglycol, vaseline eller lignende. De farmaceutiske præparater kan DK 167810 B1 7 foreligge på fast form, f.eks. som tabletter, dragéer, suppositorier, kapsler og lignende, på halvfast form, f.eks. som salver, eller på flydende form, f.eks. som suspensioner eller emulsioner. De er eventuelt sterili-5 seret og indeholder hjælpestoffer, såsom konserverings-, stabiliserings- og emulgeringsmidler, salt til ændring af det osmotiske tryk og lignende. Farmaceutiske præparater kan specielt indeholde forbindelser ifølge opfindelsen i kombination med et andet terapeutisk værdifuldt stof. Så-10 danne kombinationer kan f.eks. formuleres til kombina tionspræparater ved hjælp af de i det foregående nævnte hjælpe- og/eller bærestoffer eller fortyndingsmidler.
Opfindelsen forklares nærmere ved hjælp af de efterføl-15 gende eksempler.
EKSEMPEL 1 n-Hexadecylphosphono-L-serin 20 n-Hexadecylphosphonsyre
En blanding af 4,89 g (16 mmol) n-hexadecylbromid og 2,48 g (20 mmol) friskdestilleret trimethylphosphit omrøres i 24 timer ved 116 °C. Dernæst afdestilleres overskud af 25 trimethylphosphit i vakuum, og resten henstår i 24 timer over phosphorpentoxid i vakuum. Den tilsvarende n-hexa-decylphosphonsyredimethylester isoleres fra resten ved to gange ekstraktion, hver gang med 10 ml methanol. De to methanolekstrakter forenes og inddampes i vakuum. Den 30 således opnåede olieagtige, farveløse rest, der foruden n-hexadecylphosphonsyremethylesteren indeholder n-hexadecylbromid, omsættes yderligere i 4,7 ml vandfri aceto-nitril med 1,02 g (9,4 mmol) trimethylsilylehlorid og 1,4 g (9,4 mmol) natriumiodid. Omsætningen sker under omrø-35 ring ved stuetemperatur og varer i 15 minutter. Det ved reaktionen dannede natriumchlorid frafiltreres. Filtratet inddampes i vakuum, og den resulterende rest· omsættes med DK 167810 Bl 8 4 ml vand, hvorved der ved hydrolyse dannes n-hexadecyl-phosphonsyre. For samtidig at fjerne det dannede
Me^SiOSiMe^ efterdestilleres flere gange med ethanol/vand i forholdet 1:1 efter volumen. Efter behandling af resten 5 med 7 ml tørret acetone opnås 346 mg n-hexadexylphosphon-syre II. Tyndtlagskromatografi på "kieselgel 60", Merck-færdigplader med chloroform/methanol/vand i volumenforholdet 65:25:4 giver Rf=0,15.
10 Analyse beregnet for ci5H35P03 (306,42): C 62,71, H 11,51 Fundet: C 62,81, H 11,89 n-Hexadecylphosphono-N-t-butoxycarbonyl-L-serinbenz-15 hydrylester
En opløsning af 92 mg (0,3 mmol) n-hexadecylphosphonsyre i 1 ml pyridin bliver inddampet i vakuum, og det således opnåede pyridiniumsalt bliver dernæst tørret over phos-20 phorpentoxid i vakuum. Derefter opløses det i 5 ml vandfri pyridin. 356 mg (0,96 mmol) beskyttet serin (X = CH(CgH^Y = CO-O-C(CH^)2, tørret over phosphorpentoxid i vakuum, opløses i 4 ml vandfri pyridin. De to opløsninger blandes og til blandingen sættes 581 mg (1,92 25 mmol) triisopropylbenzensulfochlorid. Reaktionsblandingen omrøres under vandfri betingelser ved stuetemperatur i 24 timer. Dernæst inddampes blandingen i vakuum, efterdestilleres flere gange med toluen, og resten tørres over phosphorpentoxid i vakuum. Denne rest ekstraheres dernæst 30 med 15 ml diethylether og eftervaskes tre gange med 4 ml diethylether. Etheropløsningerne forenes og inddampes i vakuum. Ud fra den således opnåede rest opnås ved omkrystallisering fra acetonitril 118 mg af n-hexadexylphos-phonoserinderivatet IV. En yderligere rensning sker ved 35 søjlekromatografi på 8 g "Kieselgel 60" (partikelstørrel se 0,04-0,063 mm, 230 - 400 mesh, Merck). Den til kromatografien anvendte chloroform og opløsningsmiddelblandin- DK 167810 B1 9 gerne til eluering indeholder 0,5% vandig 25%'s ammoniak.
Der elueres med 50 ml chloroform, 50 ml chloroform/metha-nol i volumenforholdet 98:2, 200 ml chloroform/methanol i volumenforholdet 95:5, 200 ml chlororform/methanol i 5 volumenforholdet 90:10. Fraktionsstørrelsen er 15 ml. Fraktionerne 15-20 indeholder 72 mg ren hexadecylphos-phono-N-t-butoxycarbonyl-L-serinbenzhydrylester. Tyndt- lagskromatografi på "kieselgel 60", Merck-færdig-plader under eluering med chloroform/methanol i volumenforholdet 10 80:20 giver Rf = 0,2.
Analyse beregnet for C37H6iN2P07 (NH4~salt, 676,87): C 65,65, H 9,08, N 4,14 Fundet: C 65,44, H 9,15, N 3,73 15 n-Hexadecylphosphono-L-serin 69 mg (0,1 mmol) af den beskrevne forbindelse tørres i vakuum over phosphorpentoxid og opløses dernæst i 13 ml 20 vandfri chloroform. Under opløsningen bliver der i 10 minutter tilført tør nitrogen og dernæst under vandfri betingelser ved 0 "C i 20 minutter gasformig hydrogen-chlorid. Dernæst lukkes reaktionsbeholderen fast, og der omrøres i yderligere 1 time ved 0 °C. Til fjernelse af 25 gasformig hydrogenchlorid ledes der dernæst i 1 time ved stuetemperatur nitrogen gennem reaktionsblandingen. Derpå inddampes reaktionsblandingen i vakuum, og resten tilsættes en blanding af 10 ml chloroform/methanol i volumenforholdet 2:1, 1 ml vand og 0,02 ml 25%'s vandig ammoni-30 ak, der omrystes, og efter faseadskillelse fraskilles den dannede organiske fase. Den vandige fase ekstraheres tre gange, hver gang med 5 ml chloroform/methanol/vand i volumenforholdet 2:1:0,18, de organiske opløsninger forenes, og der inddampes i vakuum. Til fjernelse af reste-35 rende vand efterdestilleres flere gange med 1 ml benzen/-ethanol i volumenforholdet 2:3. Det opnåede produkt, hexadecylphosphono-L-serin I, tørres over phosphorpent- UK Ib/dIU b l ίο oxid i vakuum og vaskes dernæst med acetone. Udbytte: 43 mg (95%). Til fjernelse af spor af ammoniumchlorid kroma-tograferes stoffet på 2,2 g "kieselgel 60" (partikelstørrelse 0,04-0,063 mm, 230-400 mesh, Merck). Søjlen bringes 5 i ligevægt med chloroform/methanol/vandig 25%'s ammoniak i volumenforholdet 80:20:0,5. Der elueres med 20 ml chloroform/methanol/vandig 25%'s ammoniak i volumenforholdet 80:20:0,5, 20 ml chloroform/methanol/vandig 25%'s am moniak i volumenforholdet 75:25:0,5, 20 ml chloroform/me-10 thanol/vandig 25%'s ammoniak i volumenforholdet 70:30:0,5, 20 ml chloroform/methanol/vandig 25%'s ammoniak i volumenforholdet 65:35:0,5, 200 ml chloroform/methanol/vandig 25%'s ammoniak i volumenforholdet 60:40:0,5. Forbindelsen opnås fra fraktionerne 7-19 ved inddampning.
15 (Fraktionstørrelse 20 ml). Tyndtlagskromatografi ("kie selgel 60", Merck-færdigplader, chloroform/methanol/ace-tone/eddikesyre/vand i volumenforholdet 10:2:4:2:1) giver RF= 0,1. Pletterne gøres synlige ved hjælp af molybdat-reagens og med ninhydrinreagens.
20
Analyse beregnet for cigH45N2P06 (NH^-salt, monohydrat, 428,55): C 53,24, H 10,58, N 6,54 Fundet: C 53,80, H 10,55, N 5,73. · 25 FAB-massespektrometri:
Anionspektrum: m/z 414, (M-2H+Na)~; m/z 392, (M-H)”; m/z 305 (M-CH2CH(NH2)C00H)-;
Kationspektrum: m/z 416, (M+Na)+; m/z 438, (M+2Na)+.
30 EKSEMPEL 2 n-Hexadecylphosphono-L-serin 35 0,8 g L-serin (7,6 mmol) opløses i 1,52 ml 0,1 M acetat puffer (pH 5,6), der er 0,09 M med hensyn til CaCl2, ved 45 °C. Til denne opløsning sættes 31 mg (0,075 mmol) n- DK 167810 Bl 11 hexadecylphosphonocholin, 1,6 ml diethylether/chloroform i volumenforholdet 9:1, ethanolfri, og 200 mg af et phos-pholipase-D-enzympræparat, der er fremstillet ud fra hvidkål, og som i reakionsblandingen har en aktivtet på 5 0,9 U/ml (1 enhed (U) omsætter ved 27 °C 1 umol substrat pr. minut). Reaktionsblandingen omrøres 2,2 timer ved 45 °C. Efter afkøling til stuetemperatur tilsættes 3,31 ml 0,1 M EDTA-opløsning, og ved tilføring af nitrogen fjernes det organiske opløsningsmiddel. Den tilbageblivende 10 vandige fase omrøres med det 4,3-dobbelte volumen chloro-form/methanol i volumenforholdet 5:8 i 30 minutter og suges fra uopløst stof (L-serin). Filtratet tilsættes 1 volumen vand og 3,7 volumen chloroform, blandingen rystes i 10 minutter, den organiske fase fraskilles, inddampes i 15 vakuum, og den opnåede rest skilles søjlek'romatografisk på carboxymethylcellulose (CM 52 Whatman, Na+-form). Elu-eringen sker successivt med 75 ml chloroform, hver gang med 300 ml chloroform/methanol i volumenforholdet 9:1, 8:2, 7:3, dernæst med 1750 ml chloroform/methanol i volu-20 menforholdet 1:1. Fraktionstørrelsen andrager 50 ml. 5 mg ren n-hexadecylphosphono-L-serin (I, R= opnås ud fra fraktionerne 20-39. Tyndtlagskromatografi på "kiesel-gel 60”, Merck-færdigplade under eluering med CHCl3/CH30H/acetone/eddikesyre/vand i volumenforholdet 25 50:10:20:10:5 giver Rf = 0,1.
På analog måde fremstilledes yderligere følgende forbindelser.
30 Analogt med eksempel 1 fremstilledes: EKSEMPEL 3 n-Decylphosphono-L-serin
Ud fra n-decylphosphonsyre og beskyttet serin (formel III, X = CH(C6H5)2, Y = C0-0C(CH3)3). Tyndtlagskromato- 35 DK 167810 Bl 12 grafi på "kieselgel 60", Merck-færdigplader under elue-ring med chloroform/methanol/acetone/eddikesyre/vand i volumenforholdet 10:2:4:2:1 gav Rf = 0,1.
5 EKSEMPEL 4 n-Dodecylphosphono-L-serin
Ud fra n-dodecylphosphonsyre og beskyttet serin (formel 10 HI, X = CH(C6H5)2, Y = C0-0C(CH3)3). Tyndtlagskromato- grafi på "kieselgel 60", Merck-færdigplader under elue-ring med chloroform/methanol/acetone/eddikesyre/vand i volumenforholdet 10:2:4:2:1 gav Rf = 0,1.
15 EKSEMPEL 5 n-Tetradecylphosphono-L-serin
Ud fra n-tetradecylphosphonsyre og beskyttet serin (for-20 mel III, X = CH(C6H5)2, Y = C0-0C(CH3)3). Tyndtlagskroma- tografi på "kieselgel 60", Merck-færdigpiader under elue-ring med chloroform/methanol/acetone/eddikesyre/vand i volumenforholdet 10:2:4:2:1 gav Rf = 0,1.
25 EKSEMPEL 6 n-Octadecylphosphono-L-serin
Ud fra n-octadecylphosphonsyre og beskyttet serin (formel 30 HI, X = CH(CgHg)2, Y = C0-0C(CH3)3) · Tyndtlagskromato- grafi på "kieselgel 60", Merck-færdigplader under elue-ring med chloroform/methanol/acetone/eddikesyre/vand i volumenforholdet 10:2:4:2:1 gav Rf = 0,1.
35 13 DK 167810 B1 EKSEMPEL 7
Arachylphosphono-L-serin 5 Ud fra arachylphosphonsyre og beskyttet serin (formel III, X = CH(C6H5)2, y = C0-0C(CH3)3). Tyndtlagskromato-grafi på "kieselgel 60", Merck-færdigplader under elue-ring med chloroform/methanol/acetone/eddikesyre/vand i volumenforholdet 10:2:4:2:1 gav Rf = 0,1.
10
EKSEMPEL A
Koncentrationsafhængig væksthæmning af Ehrlich-ascites-tumorceller 15
Koncentration (M) lxlO-4 3xl0~5 lxlO-5 3xl0-6 Hæmning (%) n-Hexadecylphosphono-L-serin 89 45 13 9 20 25 30 35

Claims (5)

1. Alkylphosphonoserin med den almene formel 5 0 II R - P - 0 - CH- - CH - COOH I I 2 I OH NH2 10 hvori R betegner en ligekædet eller forgrenet mættet eller umættet alifatisk carbonhydridgruppe med 6-30 car-bonatomer.
2 I \ NH-y ox hvori X betegner benzyl, t-butyl, phthalimidomethyl, iso-20 propyl eller benzhydryl, og Y betegner N-benzoyloxy-carbonyl, N-t-butoxycarbonyl eller N-phthaloyl, eventuelt i nærværelse af et kondensationsmiddel til dannelse af en forbindelse med den almene formel 25 0 0 II II R - P - 0 - CH0 - CH - C IV I 2 I \ OH NH-Y OX hvori R, X og Y har de i det foregående angivne betydnin-30 fraspalter beskyttelsesgrupperne og om ønsket over fører produktet i et salt deraf, eller 35 DK 167810 Bl b) omsætter en forbindelse med den almene formel °/0-Z R - P 5 \ (.) V 0' ' hvori R har den i det foregående angivne betydning, og Z betegner en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer, der eventuelt er substitueret med Cl, Br eller F, eller betegner en 10 af grupperne C / (CH2}nNx ' ^Vn* (E)3 15 ° hvori C og D uafhængigt af hinanden betegner H eller methyl, og E betegner methyl, og n betegner 2-6, i nærværelse af phospholipase D med L-serin.
2. Forbindelse ifølge krav 1 med formlen 15 0 II R - P - 0 - CH,, - CH - COOH I I 2 I OH NH2 20 hvori R betegner en ligekædet eller forgrenet mættet eller umættet alifatisk carbonhydridgruppe med 10-25 car-bonatomer.
3. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, 25 at den er n-hexadecylphosphono-L-serin. 30 35 DK 167810 B1
4. Fremgangsmåde til fremstilling af en forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man a) omsætter en forbindelse med den almene formel 5
0 A 11/ R - P II \ B 10 hvori R har den i det foregående angivne betydning, og A og B betegner en hydroxygruppe, eller eventuelt et salt af en sådan forbindelse, med et serinderivat med den almene formel 15 0 II HO - CH0 - CH - C III
5. Farmaceutisk præparat indeholdende en forbindelse ifølge krav 1 i kombination med sædvanlige galeniske hjælpemidler, bærere og/eller fortyndingsmidler. 25 30 35
DK250090A 1988-04-19 1990-10-17 Alkylphyosphonoserin, fremgangsmaade til fremstilling deraf og farmaceutisk praeparat indeholdende en saadan forbindelse DK167810B1 (da)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DD31486888A DD299727A7 (de) 1988-04-19 1988-04-19 Alkyl- und alkenylphospho-l-serine, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung
DD31486888 1988-04-19
DD31835988 1988-07-27
DD31835988A DD289892A7 (de) 1988-07-27 1988-07-27 Verfahren zur herstellung von alkylphosphonserinen
PCT/EP1989/000393 WO1989010370A1 (en) 1988-04-19 1989-04-13 New alkylphosphono- and phosphoserines, method for preparing them, and pharmaceutical substances containing them
EP8900393 1989-04-13

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK250090A DK250090A (da) 1990-10-17
DK250090D0 DK250090D0 (da) 1990-10-17
DK167810B1 true DK167810B1 (da) 1993-12-20

Family

ID=25748200

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK250090A DK167810B1 (da) 1988-04-19 1990-10-17 Alkylphyosphonoserin, fremgangsmaade til fremstilling deraf og farmaceutisk praeparat indeholdende en saadan forbindelse

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5155099A (da)
EP (2) EP0338407B1 (da)
JP (1) JPH03504965A (da)
DE (1) DE58904595D1 (da)
DK (1) DK167810B1 (da)
ES (1) ES2056998T3 (da)
FI (1) FI91966C (da)
GR (1) GR3008598T3 (da)
HU (1) HU204278B (da)
NO (1) NO177712C (da)
WO (1) WO1989010370A1 (da)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5117034A (en) * 1989-10-24 1992-05-26 Fuji Photo Film Co., Ltd. Phosphatidylserine derivatives
EP0581793A1 (en) * 1991-04-25 1994-02-09 University Of British Columbia Phosphonates and phosphinates as anti-cancer, -inflammatory, -allergy and -myocarditis agents
US5369097A (en) * 1991-04-25 1994-11-29 The University Of British Columbia Phosphonates as anti-cancer agents
US5506217A (en) * 1991-04-25 1996-04-09 The University Of British Columbia Phosphonates as anti-cancer agents
DE4132344A1 (de) * 1991-09-27 1993-04-01 Max Planck Gesellschaft Verfahren zur herstellung eines arzneimittels zur oralen oder topischen verabreichung bei der behandlung von leishmaniasis
US6254879B1 (en) * 1991-09-27 2001-07-03 Max-Planck-Gessellschaft zun Förderung der Wissenschaften e.V. Methods of treating protozoal diseases
DE4229877C2 (de) * 1992-09-04 1994-09-15 Max Delbrueck Centrum Phospho- bzw. Phosphono-(N-acyl)-serine und ihre Herstellung
WO2003024423A1 (en) * 2001-09-18 2003-03-27 Vasogen Ireland Limited Apoptosis-mimicking synthetic entities and use thereof in medical treatment
US6878532B1 (en) 2003-04-28 2005-04-12 Sioux Biochemical, Inc. Method of producing phosphatidylserine
EP1963343A1 (en) * 2005-12-14 2008-09-03 Novo Nordisk A/S Polypeptide protracting tags

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DD238979A1 (de) * 1985-07-03 1986-09-10 Akad Wissenschaften Ddr Verfahren zur herstellung von o-alkylglycerophosphoserin-analogen
DD238978A1 (de) * 1985-07-03 1986-09-10 Akad Wissenschaften Ddr Verfahren zur herstellung von 2-o-alkyl-i-des oxy-1-halogenglycero-3-phospho-l-serinen
US4916249A (en) * 1985-07-03 1990-04-10 Hans Brachwitz Glycero-3(2)-phospho-L-serine derivatives and salts thereof
DD239405A1 (de) * 1985-07-15 1986-09-24 Akad Wissenschaften Ddr Verfahren zur herstellung von trifluoralkyl-glycerophospho-l-serinen
US4751320A (en) * 1985-11-27 1988-06-14 Kao Corporation Phosphoric ester and process for producing same
JPH064651B2 (ja) * 1985-11-27 1994-01-19 花王株式会社 リン酸エステルおよびその製造方法
DE3606633A1 (de) * 1986-02-28 1987-09-03 Max Planck Gesellschaft Neue phosphoverbindungen und diese enthaltende arzneimittel
JPH0761276B2 (ja) * 1986-11-14 1995-07-05 名糖産業株式会社 酵素法リン脂質−ｄ−セリン誘導体の製造法

Also Published As

Publication number Publication date
HU204278B (en) 1991-12-30
JPH03504965A (ja) 1991-10-31
GR3008598T3 (da) 1993-10-29
FI91966C (fi) 1994-09-12
NO177712C (no) 1995-11-08
HUT51632A (en) 1990-05-28
FI91966B (fi) 1994-05-31
DK250090A (da) 1990-10-17
DK250090D0 (da) 1990-10-17
NO904416L (no) 1990-10-12
EP0338407B1 (de) 1993-06-09
EP0413700A1 (de) 1991-02-27
NO904416D0 (no) 1990-10-12
DE58904595D1 (de) 1993-07-15
US5155099A (en) 1992-10-13
NO177712B (no) 1995-07-31
WO1989010370A1 (en) 1989-11-02
EP0338407A1 (de) 1989-10-25
ES2056998T3 (es) 1994-10-16
FI905051A0 (fi) 1990-10-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6713623B2 (en) Tetraphosphonate bicyclic trisanhydrides
LU87290A1 (fr) Derives de 4&#39;-phosphates de glucosides d&#39;epipodophyllotoxine
AU8102491A (en) Phosphorous prodrugs
DK167810B1 (da) Alkylphyosphonoserin, fremgangsmaade til fremstilling deraf og farmaceutisk praeparat indeholdende en saadan forbindelse
Turcotte et al. Cytotoxic liponucleotide analogs: I. Chemical synthesis of CDP-diacylglycerol analogs containing the cytosine arabinoside moiety
PL188604B1 (pl) Nowe inozytoglikany, sposób wytwarzania nowych inozytoglikanów, środek farmaceutyczny, sposób wytwarzania środka farmaceutycznego i zastosowanie nowych inozytoglikanów do wytwarzania środka farmaceutycznego przeznaczonego do stosowania w leczeniu cukrzycy
JP3102798B2 (ja) イノシトールの誘導体、それを含む製剤及びそれらの使用法
de Almeida et al. Stereoselective synthesis of inositol mono, bis and trisphosphate analogues from 6-deoxy-d-inositol precursors
FR2654106A1 (fr) Derives phosphores de cytosine, leur preparation et leur application en therapeutique.
EP0145739B1 (en) Novel antiviral agents
EP0229128B1 (de) Glycero-3(2)-phospho-l-serinderivate und diese enthaltende pharmazeutischen präparate
Dabkowslri et al. Synthesis and reactions of a nucleoside derivative of phosphoric sulfonic anhydride. Studies related to the mechanisms of coupling reactions in the chemical synthesis of oligodeoxyribonucleotides by phosphotriesier procedures
RU2126413C1 (ru) Производные фосфолипидов, способ их получения, фармацевтическая композиция на их основе и способ получения фармацевтической композиции
Calogeropoulou et al. Synthesis and anti-HIV evaluation of alkyl and alkoxyethyl phosphodiester AZT derivatives
FI65261B (fi) Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt anvaendbart dinatriumsalt av n-(fosfonoacetyl)-l-asparaginsyra
Baer et al. PHOSPHONOLIPIDS: XII. Synthesis of Phosphonolipid Metobolites. L-α-Glyceryl-(2-aminoethyl) phosphonate
FR2694935A1 (fr) Dérivés du désoxy-cyclitol, procédé pour leur préparation et leur utilisation dans des médicaments.
RU2057133C1 (ru) Фосфорилированные серины
KR100481746B1 (ko) 인슐린-유사작용을갖는이노시톨글리칸및이를포함하는약제학적제제
Belsito et al. Straightforward synthesis of lipophilic thymidine glucopyranosyl monophosphates as models for a drug delivery system across cellular membranes
JPH0560476B2 (da)
Trigalo et al. Chemistry of bacterial endotoxins. Part 4. Synthesis of anomeric 2-deoxy-2 [(3 R)-3-hydroxytetradecanamido]-D-glucopyranosyl phosphate and pyrophosphate derivatives related to ‘Lipid A’
US20040181078A1 (en) Tetraphosphonate bicyclic trisanhydrides
Mukherjee Investigation on some 2-alkylamido-6-bromo/chloro/nitro saligenin cyclic phosphorus compounds having pesticidal activities
CZ20011145A3 (cs) Antivirové purinové deriváty a jejich použití

Legal Events

Date Code Title Description
B1 Patent granted (law 1993)
PBP Patent lapsed