FI91966B - Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden alkyylifosfonoseriinien valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden alkyylifosfonoseriinien valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI91966B
FI91966B FI905051A FI905051A FI91966B FI 91966 B FI91966 B FI 91966B FI 905051 A FI905051 A FI 905051A FI 905051 A FI905051 A FI 905051A FI 91966 B FI91966 B FI 91966B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
general formula
compounds
serine
tai
chloroform
Prior art date
Application number
FI905051A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI905051A0 (fi
FI91966C (fi
Inventor
Friedrich Paltauf
Albin Hermetter
Hans Brachwitz
Peter Langen
Reinhild Schoenfeld
Original Assignee
Asta Medica Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DD31486888A external-priority patent/DD299727A7/de
Priority claimed from DD31835988A external-priority patent/DD289892A7/de
Application filed by Asta Medica Ag filed Critical Asta Medica Ag
Publication of FI905051A0 publication Critical patent/FI905051A0/fi
Publication of FI91966B publication Critical patent/FI91966B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI91966C publication Critical patent/FI91966C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/091—Esters of phosphoric acids with hydroxyalkyl compounds with further substituents on alkyl
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/113—Esters of phosphoric acids with unsaturated acyclic alcohols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
    • C07F9/40—Esters thereof
    • C07F9/4071—Esters thereof the ester moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/4075—Esters with hydroxyalkyl compounds
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

91966
Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden alkyylifosfonoseriinien valmistamiseksi - Förfaranden för framställning av farmako-logiskt värdefulla alkyl fosfonoseriner
Keksintö koskee menetelmää farmakologisesti arvokkaiden yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava (I) 0
II
R - P - 0 - CH2 - CH - COOH (I)
1 I
OH NH2 jossa P. on suoraketjuinen tai haaroittunut tyydyttynyt tai tyydyttymätön alifaattinen hii1ivetyryhmä, jossa on 6 - 30 C-atomia, joka voi mahdollisesti olla substituoitu halogeenilla, ryhmillä OR^, SR]^, NR]^R2, jolloin R^ ja R2 voivat kulloinkin olla vetyatomi tai alkyyli- tai asyyliryhmä, jossa on 1-6 C-atomia.
Julkaisussa: R. Hirt, R. Berchthold; Pharmaceutica Acta Helvetica 33 (1958) 349-356 kuvataan menetelmä alkyylifosfokolii-nien valmistamiseksi. Julkaisussa: H.R. Scherf et ai., Lipids 22 (1987) 927-929; ja C. Muschol et ai., Lipids 22 (1987) 930-934 kuvataan heksadekyy1 ifosfokoliinin sytostaattinen vaikutus tai toksisuus. DE-patenttijulkaisusta 3639084 tunnetaan fosforihappoesterit, mm. myös alkyylifosfoseriinit, joita voidaan käyttää emulgaattoreina tai kosteutta säilyttävinä aineina .
Edelleen DE-patenttijulkaisusta 3606633 tunnetaan sytostaat-tisesti vaikuttavat fosfokoliinit, fosfoseriinit ja fosfoeta-. noliamiinit, joissa on modifioitu glyseriiniosa. DD-patentti- julkaisuista 238978, 238979 ja 239405 tunnetaan edelleen menetelmät valmistaa substituoituja glyserofosfoseriinejä, jolloin näillä yhdisteillä on sytostaattista vaikutusta. Teoksesta Chemical Abstracts, voi. 87, (1977), s. 652, 184938η tunnetaan 2 91966 menetelmä fosfatidyyli-L-seriinin fosfonaatti- ja eetteriana-logien valmistamiseksi.
Nyt voitiin keksiä uusia alkyy1ifosfonoseriinejä, joilla on erinomainen sytostaattinen tai virusten kasvun pysäyttävä vaikutus .
Edellä esitetyssä kaavassa I: R tarkoittaa suoraketjuista tai haaroittunutta, tyydyttynyttä tai tyydyttymätöntä alifaattista hii1ivetyryhmää, jossa on 6-30 C-atomia, edullisesti 10-25 C-atomia. Esimerkkejä sellaisista ryhmistä ovat dekyyli-, dodekyyli-, tetradekyyli-, hek-sadekyyli-, oktadekyyli-, arakyyli-, 17-metyyli-noktadekyyli-ryhmät tai cis-9-n-oktadekyyliryhmä.
Myös nämä ryhmät voivat olla substituoituja halogeenillä, esimerkiksi Cl, Br, F tai ryhmillä OR^, SR^, NR^R2. R]_ ja R2 ovat tällöin toisistaan riippumatta vety tai alkyyli- tai asyyli-ryhmä, jossa on 1 - 6 C-atomia, esimerkiksi metyyli-, etyyli-, npropyyli, i-propyyli, n-butyyli, i-butyyli, pentyyli-, hek-syyliryhmä tai esimerkiksi formyyli-, aseryyli, propionyyli-, butyryyli-, i-butyryyliryhmä.
AI kyy 1ifosfonoseriinei11ä on varmoja rakenteellisia yhteyksiä fysiologisesti aktiivisiin luonnollisesti esiintyviin fosfoli-pideihin, esimerkiksi fosfatidyyliseriineihin. Ne eroavat kuitenkin näistä siten, ettei niissä ole lainkaan glyserolikompo-nentteja. Verrattuna luonnollisesti esiintyviin fosfatidyyli-seriineihin keksinnön mukaisilla aikyylifosfonoseriinei11ä on suurempi biostabii1isuus. Ne ovat mahdollisia sytostaattisia ja virusten kasvun pysäyttäviä aineita.
Uudet alkyylifosfonoseriinit voidaan valmistaa siten, että a) yleisen kaavan II mukainen yhdiste
O
ll/A
R - P (II) 3 91966 jossa R on edellä mainittu, ja A ja B merkitsevät hydroksiryh-miä, tai mahdollisesti näiden yhdisteiden suolat, saatetaan reagoimaan yleisen kaavan III mukaisen seriinijohdannaisen kanssa ho-ch2 - ch - c (III)
I "'"OX
nh-y jossa X on bentsyyli, t-butyyli, ftaiimidometyy1i, isopropyy-li, bentshydryyli, Y on N-bentsoyylioksikarbonyy1i, N-t-butok-sikarbonyyli, N-ftaloyyli, mahdollisesti kondensointireagens-sin läsnäollessa yleisen kaavan IV mukaisiksi yhdisteiksi 0
Il R - P - O - CH2 - CH - C^ (IV) I I °x
OH NH-Y
suojaryhmät lohkaistaan, ja tuote muutetaan mahdollisesti suolaksi, tai b) yleisen kaavan V mukainen yhdiste 0
||^0-Z
R - p , . (V) o(' ' jossa R on edellä esitetty ja Z on alkyyliryhmä, jossa on 1-6 C-atomia, ja joka on mahdollisesti olla substituoitu ryhmällä Cl, Br tai F, tai ryhmä
C
(CH2)nN^ , (CH2)nN(E)3
^ D
4 91966 jossa C ja D ovat toisistaan riippumatta H tai metyyli, ja E on metyyli ja n on 2 - 6, saatetaan reagoimaan L-seriinin kanssa fosfolipaasi D:n läsnäollessa.
Yleisen kaavan II mukaiset, lähtöaineina käytetyt yhdisteet voidaan valmistaa sinänsä tunnetulla tavalla, jolloin alkyyli-fosfonihappodimetyy1iesteri syntetisoidaan ensin vastaavasta ai kyy 1ibromidista R-Br ja trimetyylifosflitistä, tämä muutetaan reaktiolla trimetyylisi1yylikioridin ja natriumjodidin seoksen kanssa trimetyylisi1yyliesteriksi, ja tämä hydrolysoidaan veden vaikutuksella.
Yleisen kaavan II mukaisten yhdisteiden reaktio tapahtuu yleensä siten, että yhdisteet muutetaan emäksen, esimerkiksi pyridiinin suolaksi, ja tämä suola saatetaan lopuksi reagoimaan seriinijohdannaisen kanssa. Reaktio tapahtuu edullisesti kondensointireagenssin läsnäollessa, esimerkiksi 2,4,6-tri-isopropyylibentseenisulfokloridin, vedettömissä olosuhteissa inertin orgaanisen liuottimen läsnäollessa. Liuottimena tulee kyseeseen esimerkiksi pyridiini.
Reagoivia aineita käytetään tavallisesti ekvimolaariset määrät, mutta on myös mahdollista käyttää jopa 4-kertaista seriini johdannaisen ylimäärää.
Reaktio tapahtuu lämpötiloissa noin 5 - 60°C, edullisesti huoneeniämpöti1 assa.
Reaktion päättämisen jälkeen vielä läsnäoleva happokloridi hajotetaan tavallisella tavalla, esimerkiksi lisäämällä reak-tioliuokseen vettä, ja tuote eristetään tavallisella tavalla, esimerkiksi dietyy1ieetteri11ä uuttamalla. Näin saatuja yleisen kaavan IV mukaisia yhdisteitä voidaan mahdollisesti puhdistaa ennen suojaryhmien lohkaisemista edelleen, esimerkiksi pyiväskromatografialla silikageelillä. Mutta on myös mahdollista muuttaa ne enempää puhdistamatta yleisen kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi.
5 91566
Sitä varten suojaryhmät lohkaistaan tavallisella tavalla, esimerkiksi katalyyttisellä hydrogenolyysillä, hydratsinolyysi1 -lä, käsittelemällä HCl:llä tai muurahaishapolla, edullisesti inertissä 1iuottimessa. Yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan lopuksi eristää tunnetulla tavalla ja mahdollisesti puhdistaa edelleen, esimerkiksi kromatografisesti.
Keksinnön mukaiset ai kyy1ifosfonoseriinit voidaan valmistaa myös entsymaattisesti.
Tällöin yleisen kaavan V mukaiset yhdisteet saatetaan reagoimaan L-seriinin kanssa fosfolipaasi D:n läsnäollessa. Tätä varten yleisen kaavan V mukaisten yhdisteiden liuos tai suspensio saatetaan reagoimaan L-seriinin ylimäärän kanssa vesipohjaisessa puskurijärjestelmässä, esimerkiksi asetaatti-tai trispuskuri1iuoksessa pH-arvossa noin 4 - 8,5, edullisesti 5-6, erityisen edullisesti 5,6, noin 0,01 - 0,1 M CaCl2:n läsnäollessa ja fosfolipaasi D:n läsnäollessa lisäämällä dietyylieetteriä tai dietyylieetterin seosta toisen orgaanisen liuottimen, esimerkiksi kloroformin kanssa.
Reaktio tapahtuu lämpötiloissa noin 5 - 60°C, edullisesti 35 - 45°C. Reaktioseosta sekoitetaan tai ravistetaan voimakkaasti reaktion aikana.
Reaktion kesto on noin 0,5 - 48 tuntia. Reaktion edettyä loppuun entsyymi fosfolipaasi D inaktivoidaan esimerkiksi lisäämällä 0,1 M EDTÄ-1iuosta, ja yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet eristetään tavallisella tavalla.
Uusilla alkyylifosfonoseriineillä on voimakas sytostaattinen . ta virusten kasvun pysäyttävä vaikutus. Sytostaattisen vaiku tuksen määrittämiseksi tutkittiin kasvun estävä vaikutus Ehr1ich-vatsaontelonesteen kasvainsoluilla. Tällöin osoittautui, että keksinnön mukaisilla yhdisteillä on erinomainen sytostaattinen vaikutus.
6 91966 Tämän vuoksi niitä voidaan käyttää yksinään tai seoksena muiden vaikuttavien aineiden kanssa tavanomaisten galeenisten formulaatioiden muodossa sytostaattisina tai virusten kasvun pysäyttävinä aineina.
Yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet on tarkoitettu ihmisten käyttöön, ja ne voidaan antaa tavallisella tavalla, esimerkiksi oraalisesti tai parenteraalisesti. Ne annetaan edullisesti oraalisesti, jolloin päiväannos on noin 0,05 - 20 mg/kg kehonpainoa, edullisesti 0,05 - 5 mg/kg kehonpainoa. Mutta hoitava lääkäri voi kuitenkin määrätä potilaan yleiskunnosta ja iästä, yleisen kaavan I mukaisesta yhdisteestä, sairauden luonteesta ja formulaation luonteesta riippuen myös alhaisempia tai korkeampia annoksia, jotka ovat tämän alueen ulkopuolella.
Yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan antaa yksinään tai muiden farmaseuttisesti aktiivisten yhdisteiden yhteydessä, jolloin kaavalehden yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden sisältö on välillä 0,1 ja 99 %. Yleensä farmaseuttisesti aktiiviset yhdisteet ovat seoksena sopivien apu- ja/tai väliaineiden tai 1aimennusaineiden, esimerkiksi farmaseuttisesti hyväksyttävien liuottimien, gelatiinin, arabikumin, maitosokerin, tärkkelyksen, magnesiumstearaatin, talkin, kasviöljyjen, polyalkyleeniglykolin, vaseliinin tai vastaavien kanssa. Farmaseuttiset formulaatiot voivat olla kiinteässä muodossa, esimerkiksi tabletteina, rakeina, peräpuikkoina, kapseleina ja vastaavina, puolikiinteässä muodossa esimerkiksi voiteina tai nestemäisessä muodossa, esimerkiksi suspensioina tai emulsioina. Ne on mahdollisesti steriloitu ja sisältävät apuaineita, kuten säilöntä-, stabilointi- ja emulgoimisaineita, suoloja osmoottisen paineen muuttamiseksi ja vastaavia. Erityisesti farmaseuttiset formulaatiot voivat sisältää keksinnön mukaisia yhdisteitä yhdistelmänä muiden terapeuttisesti arvokkaiden aineiden kanssa. Keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan formuloida näiden kanssa esimerkiksi yhdessä edellä mainittujen apu- ja/tai väliaineiden tai laimennusaineiden kanssa yhdistelmä valmisteiksi.
7 91 966
Esimerkki 1: n-heksadekyyli£osfono-L-seriini n-heksadekyylifosfonihappo
Seosta, jossa oli n-heksadekyylibromidia (4,89 g, 16 mmol) ja juuri tislattua trimetyylifosfiittia (2,48 g, 20 mmol), sekoitettiin 24 tuntia 116 °C:ssa. Lopuksi ylimääräinen trimetyyli-fosfiitti tislattiin pois tyhjössä, ja jäännöstä säilytettiin 24 tuntia fosforipentoksidin yläpuolella tyhjössä. Vastaava n-heksadekyylifosfonihappodimetyyliesteri eristetään jäännöksestä uuttamalla kahdesti kulloinkin 10 ml:11a metanolia. Molemmat metanoliuutteet yhdistetään ja konsentroidaan tyhjössä. Näin saatu öljymäinen, väritön jäännös, joka sisältää n-heksadekyy-lifosfonihappometyyliesterin ohella vielä n-heksadekyylibromidia, saatetaan reagoimaan edelleen 4,7 ml:ssa vedetöntä aseto-nitriiliä trimetyylisilyylikloridin (1,02 g, 9,4 mmol) ja natrium jodidin (1,4 g, 9,4 mmol) kanssa. Reaktio tapahtuu huoneenlämpötilassa sekoittaen ja kestää 15 min.
Reaktiossa muodostunut natriumkloridi suodatetaan pois. Suodos konsentroidaan tyhjössä, ja tulokseksi saatuun jäännökseen lisätään 4 ml vettä, jolloin hydrolyysillä muodostuu n-heksade-kyylifosfonihappoa. Samanaikaisesti muodostuneen Me3SiOSiMe3 :n poistamiseksi jälkitislataan useita kertoja etanoli/veden kanssa (1:1, tilavuus/tilavuus). Kun jäännös on käsitelty 7 ml:11a kuivaa asetonia, saadaan 346 mg kaavan II mukaista n-heksade-kyylifosfonihappoa. Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, kloroformi/metanoli/vesi, 65:25:4, tilavuus/tila-vuus/tilavuus): Rf * 0,15.
Alkuaineanalyysi Ci6H35p03:He (306,42): laskettu: C 62,71, H 11,51; saatu: C 62,81, H 11,89 (%).
8 91966 n-heksadekyylifosfono-N-t-butoksikarbonyyli-L-seriinibentshyd-ryyliesteri
Liuos, jossa on 92 mg (0,3 mmol) n-heksadekyylifos£onihappoa 1 ml:ssa pyridiiniä, konsentroidaan tyhjössä, ja näin saatu pyri-diniuxnsuola kuivataan lopuksi fosforipentoksidin päällä tyhjössä. Tämän jälkeen se liuotetaan 5 ml:aan vedetöntä pyridiiniä. 356 mg (0,96 mmol) suojattua seriiniä (X » CH(CgH5)2, Y * CO-O-C(CH3)3) kuivattu tyhjössä fosforipentoksidin päällä, liuotetaan 4 ml:aan vedetöntä pyridiiniä. Molemmat liuokset sekoitetaan keskenään, ja seokseen lisätään 581 mg (1,92 mmol) tripro-pyylibentseenisulfokloridia. Reaktioseosta sekoitetaan 24 tuntia huoneenlämpötilassa vedettömissä olosuhteissa. Tämän jälkeen seos konserntroidaan tyhjössä, jälkitislataan useita kertoja tolueenin kanssa, ja jäännös kuivataan fosforipentoksidin päällä tyhjössä. Seuraavaksi tämä uutetaan 15 ml:11a dietyyli-eetteriä ja jälkipestään kolmesti 4 ml:11a dietyylieetteriä. Eetteriliuokset yhdistetään konsentroidaan tyhjössä. Näin saadusta jäännöksestä saadaan asetonitriilistä uudelleenkiteyttä-mällä 118 mg kaavan IV mukaista n-heksadekyylifosfonoseriini-johdannaista. Edelleenpuhdistus tapahtuu pylväskromatografiällä 8 g:lla Kieselgel 60:tä (hiukkaskoko 0,04 - 0,063 mm, 230 - 240 mesh, Merck).
Kromatografiaan käytetty kloroformi ja eluointiin tarkoitetut liuotinseokset sisältävät 0,5 % 25-% ammoniakin vesiliuosta. Eluoidaan 50 ml:11a kloroformia, 50 ml:11a kloroformi/metano-lia, 98:2, tilavuus/tilavuus, 200 ml:11a kloroformi/metanolia 95:5, tilavuus/tilavuus, 200 ml:lla kloroformi/metanolia 90:10, tilavuus/tilavuus. Jakeet ovat kooltaan 15 ml. Jakeet 15-20 sisältävät 72 mg puhdasta heksadekyylifosfono-N-t-butoksikar-bonyyli-L-seriinibentshydryyliesteriä.
Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, kloroformi /metanoli, 80:20, tilavuus/tilavuus): Rf 0,2. Alkuaineanalyysi C37HgiN2P07:lle (NH^suola, 676,87): laskettu: C 65,65, H 9,08, N 4,14: saatu: C 65,44, H 9,15, N 3,73 (%).
9 91966 n-heksadekyylifosfono-L-seriini 69 mg (0,01 mmol) kuvattua yhdistettä kuivataan tyhjössä fos-foripentoksidin päällä, ja liuotetaan seuraavaksi 13 ml:aan vedetöntä kloroformia. Tämän liuoksen läpi ohjataan 10 minuutin ajan kuivattua typpeä, ja seuraavaksi vedettömissä olosuhteissa 0 °C:ssa 20 minuutin ajan kloorivetykaasua. Tämän jälkeen reaktori suljetaan tiukasti, ja sekoitetaan edelleen 1 tunnin ajan 0 °C:ssa. Seuraavaksi reaktioseoksen läpi ohjataan kloorivety-kaasun poistamiseksi 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa typpeä. Tämän jälkeen reaktioseos konsentroidaan tyhjössä, ja jäännökseen lisätään 10 ml kloroformi/metanoli-seosta, 2:1, tilavuus/-tilavuus, 1 ml vettä ja 0,02 ml ammoniakin 25-% vesiliuosta, ravistellaan, ja faasien erottumisen jälkeen alas vajoava orgaaninen faasi erotetaan. Vesifaasi uutetaan kolmesti kulloinkin 5 ml:11a kloroformi/metanoli/vedellä, 2:1:0,18, tilavuus/-tilavuus/tilavuus, ja orgaaniset liuokset yhdistetään ja konsentroidaan tyhjössä.
Jäännösveden poistamiseksi jälkitislataan vielä useita kertoja 1 ml:11a bentseeni/etanolia, 2:3, tilavuus/tilavuus. Saatu tuote, kaavan I mukainen heksadekyylifosfono-L-seriini, kuivataan tyhjössä fosforipoentoksidin päällä, ja pestään tämän jälkeen asetonilla.
Saanto: 43 mg (95 %).
Ammoniumkloridijäänteiden poistamiseksi aine kromatografoidaan 2,2 g:lla Kieselgel 60:tä (hiukkaskoko 0,04 - 0,063 mm, 230 -240 mesh, Merrck). Pylväs tasapainotetaan kloroformi/metanoli/-ammoniakin 25-% vesiliuoksella, 80:20:0,5, tilavuus/tilavuus/-tilavuus. Eluoidaan 20 ml:11a kloroformi/metanoli/ammoniakin 25-% vesiliuosta, 80:20:0,5, tilavuus/tilavuus/tilavuus, 20 ml:11a kloroformi/metanoli/ammoniakin 25-% vesiliuosta, *' 75:25:0,5, tilavuus/tilavuus/tilavuus, 20 ml:lla kloroformi/- metanoli/ammoniakin 25-% vesiliuosta, 70:30:0,5, tilavuus/tilavuus/tilavuus, 20 ml:11a kloroformi/metanoli/ammoniakin 25-% vesiliuosta, 65:35:0,5, tilavuus/tilavuus/tilavuus, 200 ml:lla kloroformi/metanoli/ammoniakin 25-% vesiliuosta, 60:40:0,5, tilavuus/tilavuus/tilavuus.
10 91966
Yhdiste saadaan konsentroimalla jakeista 7-19.
(Jakeiden koko 20 ml).
Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, kloro-formi/metanoli/asetoni/etikkahappo/vesi, 10:2:4:2:1, tilavuus/-tilavuus/tilavuus/tilavuus/tilavuus): Rf 0,1.
Tehdään näkyväksi molybdaattireagenssilla ja ninhydriinirea-genssilla.
Alkuaineanalyysi C19H45N2PO5:lle (NH4-suola, monohydraatti, 428,55): laskettu: C 53,24, H 10,58, N 6,54: saatu: C 53,80, H 10,55, N 5,73 (%).
FAB-massaspektrometri: anionispektri: m/z 414, (M-2H+Na)"; m/z 392, (M-H)"; m/z 305 (M-CH2CH(NH2)COOH)-; kationispektri: m/z 416, (M+Na)+; m/z 438, (M+2Na)+.
Esimerkki 2: n-heksadekyylifosfono-L-seriini 0,8 g L-seriiniä (7,6 mmol) liuotetaan 45 °C:ssa 1,52 ml:aan 0,1 M asetaattipuskuria (pH 5,6), jossa on 0,09 M CaCl2:ta. Tähän liuokseen lisätään 31 mg (0,075 mmol) n-heksadekyylifos-fonokoliinia, 1,6 ml dietyylieetteri/kloroformia (9:1, tila-vuus/tilavuus, etanolitonta) ja 200 mg fosfolipaasi-D-entsyymi-valmistetta, joka on valmistettu valkokaalista, ja jolla on reaktioseoksessa aktiivisuus 0,9 U/ml (1 yksikkö (U) muuttaa 27 °C:ssa 1 μπιοί substraattia/min) . Seosta sekoitetaan 2,2 tuntia 45 °C:ssa. Huoneenlämpötilaan jäähdyttämisen jälkeen lisätään 3,31 ml 0,1 M EDTA-liuosta, ja orgaaninen liuotin poistetaan johtamalla läpi typpeä. Jäljelle jäävää vesifaasia sekoitetaan 30 minuutin ajan 4,3-kertaisen tilavuuden kanssa kloroformi/metanolia (5:8, tilavuus/tilavuus), ja liukenematon aine (L-seriini) suodatetaan imupullolla. Suodokseen lisätään 1 tilavuus vettä ja 3,7 tilavuutta kloroformia, seosta ravistellaan 10 minuuttia, orgaaninen faasi erotetaan, konsentroidaan tyhjössä, ja saatu jäännös erotetaan karboksimetyyliselluloosa (CM 52 Whatman, Na+-muoto)-pylväskromatografiällä. Eluointi 11 91966 tapahtuu peräjälkeen 75 ml:11a kloroformia, kulloinkin 300 ml:11a kloroformi/metanolia, 9:1, 8:2, 7:3, seuraavaksi 1750 ml:11a kloroformi/metanolia, 1:1 (kulloinkin tilavuus/tilavuus). Jakeet olivat suuruudeltaan 50 ml. Jakeista 20 - 39 saatiin 5 mg puhdasta n-heksadekyylifosfono-L-seriiniä (I, R * C16H33)·
Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, CHCI3/-CH30H/asetoni/etikkahappo/H20, 50:10:20:10:5, tilavuus/tila-vuus/tilavuus/tilavuus/tilavuus: Rf * 0,1.
Analogisella tavalla valmistettiin muita yhdisteitä.
Esimerkille 1 analogisesti valmistettiin seuraavat yhdisteet:
Esimerkki 3 n-dekyylifosfono-L-seriini n-dekyylifosfonihaposta ja suojatusta seriinistä (kaava III, X ® CH(CgH5)2/ Y * C0-0C(CH3)3). Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, kloroformi/metanoli/asetoni/etikkahappo/-vesi, 10:2:4:2:1; tilavuus/tilavuus/tilavuus/tilavuus/tilavuus ) :
Rf = 0,1.
Esimerkki 4 n-dodekyylifosfono-L-seriini n-dodekyylifosfonihaposta ja suojatusta seriinistä (kaava III, X « CH(CgH5)2f Y * C0-0C(CH3)3). Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, kloroformi/metanoli/asetoni/etikka-. .. happo/vesi 10:2:4:2:1; tilavuus/tilavuus/tilavuus/tilavuus/ti- lavuus):
Rf = 0,1.
12 91 966
Esimerkki 5 n-tetradekyylifosfono-L-seriini n-tetradekyylifosfonihaposta ja suojatusta seriinistä (kaava III, X » CH(C5H5)2/ Y * CO-OC(CH3)3). Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, kloroformi/metanoli/asetoni/-etikkahappo/vesi 10:2:4:2:1; tilavuus/tilavuus/tilavuus/tila-vuus/tilavuus):
Rf = 0,1.
Esimerkki 6 n-oktadekyylifosfono-L-seriini n-oktadekyylifosfonihaposta ja suojatusta seriinistä (kaava III, X CH(CgH5)2f Y “ CO-OC(CH3)3). Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, kloroformi/metanoli/asetoni/-etikkahappo/vesi 10:2:4:2:1; tilavuus/tilavuus/tilavuus/tilavuus /tilavuus):
Rf * 0,1.
Esimerkki 7 n-arakyylifosfono-L-seriini n-arakyylifosfonihaposta ja suojatusta seriinistä (kaava III, X CH(CgH5)2f Y ” CO-OC(CH3)3). Ohutlevykromatografia (Kieselgel 60, Merck-valmislevy, kloroformi/metanoli/asetoni/etikkahappo/-vesi 10:2:4:2:1; tilavuus/tilavuus/tilavuus/tilavuus/tilavuus): Rf - 0,1.
Esimerkki A
Konsentraatiosta riippuva Ehrlich-vatsaontelonesteen kasvain-solujen kasvun esto konsentraatio (M) 1 x 10”* 3 x 10”^ 1 x 10"^ 3 x 10~® esto (%) n-heksadekyylifos- fono-L-seriini 89 45 13 9

Claims (2)

  1. 91966 Patenttivaatimus Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava (I) 0 II R - P - 0 - CH2 - CH - COOH (I) I I OH NH2 jossa R on suoraketjuinen tai haaroittunut tyydyttynyt tai tyydyttymätön alifaattinen hiilivetyryhmä, jossa on 6 - 30 C-atomia, joka voi mahdollisesti olla substituoitu halogeenilla, ryhmillä ORj, SR^, NR1R2, jolloin Rj^ ja R2 voivat kulloinkin olla vetyatomi tai alkyyli- tai asyyliryhmä, jossa on 1-6 C-atomia, tunnettu siitä, että a) yleisen kaavan II mukainen yhdiste 0 Il ^ A R - P^ (II) B jossa R on edellä mainittu, ja A ja B merkitsevät hydroksiryh-miä, tai mahdollisesti näiden yhdisteiden suolat, saatetaan reagoimaan yleisen kaavan III mukaisen seriinijohdannaisen kanssa HO-CH2 -CH-C^ (III) | """OX NH-Y « jossa X on bentsyyli, t-butyyli, ftaiimidometyyli, isopro-pyyli, bentshydryyli, Y on N-bentsoyylioksikarbonyyli, N-t-butoksikarbonyyli, N-ftaloyyli, mahdollisesti kondensointi-reagenssin läsnäollessa yleisen kaavan IV mukaisiksi yhdisteiksi 91966 0 Il R - P - 0 - CH, - CH - C (IV)
FI905051A 1988-04-19 1990-10-15 Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden alkyylifosfonoseriinien valmistamiseksi FI91966C (fi)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DD31486888 1988-04-19
DD31486888A DD299727A7 (de) 1988-04-19 1988-04-19 Alkyl- und alkenylphospho-l-serine, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung
DD31835988A DD289892A7 (de) 1988-07-27 1988-07-27 Verfahren zur herstellung von alkylphosphonserinen
DD31835988 1988-07-27
PCT/EP1989/000393 WO1989010370A1 (fr) 1988-04-19 1989-04-13 Nouvelles alkylphosphono- et phosphoserines, procede pour leur preparation, et substances pharmaceutiques les contenant
EP8900393 1989-04-13

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI905051A0 FI905051A0 (fi) 1990-10-15
FI91966B true FI91966B (fi) 1994-05-31
FI91966C FI91966C (fi) 1994-09-12

Family

ID=25748200

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI905051A FI91966C (fi) 1988-04-19 1990-10-15 Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden alkyylifosfonoseriinien valmistamiseksi

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5155099A (fi)
EP (2) EP0338407B1 (fi)
JP (1) JPH03504965A (fi)
DE (1) DE58904595D1 (fi)
DK (1) DK167810B1 (fi)
ES (1) ES2056998T3 (fi)
FI (1) FI91966C (fi)
GR (1) GR3008598T3 (fi)
HU (1) HU204278B (fi)
NO (1) NO177712C (fi)
WO (1) WO1989010370A1 (fi)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5117034A (en) * 1989-10-24 1992-05-26 Fuji Photo Film Co., Ltd. Phosphatidylserine derivatives
US5506217A (en) * 1991-04-25 1996-04-09 The University Of British Columbia Phosphonates as anti-cancer agents
EP0581793A1 (en) * 1991-04-25 1994-02-09 University Of British Columbia Phosphonates and phosphinates as anti-cancer, -inflammatory, -allergy and -myocarditis agents
US5369097A (en) * 1991-04-25 1994-11-29 The University Of British Columbia Phosphonates as anti-cancer agents
DE4132344A1 (de) * 1991-09-27 1993-04-01 Max Planck Gesellschaft Verfahren zur herstellung eines arzneimittels zur oralen oder topischen verabreichung bei der behandlung von leishmaniasis
US6254879B1 (en) 1991-09-27 2001-07-03 Max-Planck-Gessellschaft zun Förderung der Wissenschaften e.V. Methods of treating protozoal diseases
DE4229877C2 (de) * 1992-09-04 1994-09-15 Max Delbrueck Centrum Phospho- bzw. Phosphono-(N-acyl)-serine und ihre Herstellung
MXPA04002561A (es) * 2001-09-18 2004-07-30 Vasogen Ireland Ltd Entidades sistematicas que limitan la apoptosis y el uso de las mismas en el tratamiento medico.
US6878532B1 (en) 2003-04-28 2005-04-12 Sioux Biochemical, Inc. Method of producing phosphatidylserine
JP2009519296A (ja) * 2005-12-14 2009-05-14 ノボ・ノルデイスク・エー／エス ポリペプチド延長タグ

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DD238978A1 (de) * 1985-07-03 1986-09-10 Akad Wissenschaften Ddr Verfahren zur herstellung von 2-o-alkyl-i-des oxy-1-halogenglycero-3-phospho-l-serinen
DD238979A1 (de) * 1985-07-03 1986-09-10 Akad Wissenschaften Ddr Verfahren zur herstellung von o-alkylglycerophosphoserin-analogen
US4916249A (en) * 1985-07-03 1990-04-10 Hans Brachwitz Glycero-3(2)-phospho-L-serine derivatives and salts thereof
DD239405A1 (de) * 1985-07-15 1986-09-24 Akad Wissenschaften Ddr Verfahren zur herstellung von trifluoralkyl-glycerophospho-l-serinen
US4751320A (en) * 1985-11-27 1988-06-14 Kao Corporation Phosphoric ester and process for producing same
JPH064651B2 (ja) * 1985-11-27 1994-01-19 花王株式会社 リン酸エステルおよびその製造方法
DE3606633A1 (de) * 1986-02-28 1987-09-03 Max Planck Gesellschaft Neue phosphoverbindungen und diese enthaltende arzneimittel
JPH0761276B2 (ja) * 1986-11-14 1995-07-05 名糖産業株式会社 酵素法リン脂質−ｄ−セリン誘導体の製造法

Also Published As

Publication number Publication date
DK250090D0 (da) 1990-10-17
DK167810B1 (da) 1993-12-20
ES2056998T3 (es) 1994-10-16
HUT51632A (en) 1990-05-28
DE58904595D1 (de) 1993-07-15
FI905051A0 (fi) 1990-10-15
EP0338407B1 (de) 1993-06-09
HU204278B (en) 1991-12-30
JPH03504965A (ja) 1991-10-31
NO904416D0 (no) 1990-10-12
DK250090A (da) 1990-10-17
US5155099A (en) 1992-10-13
WO1989010370A1 (fr) 1989-11-02
NO177712C (no) 1995-11-08
NO177712B (no) 1995-07-31
EP0338407A1 (de) 1989-10-25
FI91966C (fi) 1994-09-12
NO904416L (no) 1990-10-12
GR3008598T3 (fi) 1993-10-29
EP0413700A1 (de) 1991-02-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kates et al. pH-dissociation characteristics of cardiolipin and its 2′-deoxy analogue
EP0837630B1 (en) Prodrugs of pharmaceuticals with improved bioavailability
EP0009183B1 (en) Phosphoryl aminoacid derivatives and composition for treating hypertension containing the same
AU681619B2 (en) Lipid prodrugs for oral administration
CH675422A5 (fi)
FI91966B (fi) Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden alkyylifosfonoseriinien valmistamiseksi
EP0593595B1 (en) Derivatives of inositol, preparations containing them and their use
EP0609440A1 (en) Phosphorus-substituted isoprenoid derivative
Solovyov et al. Calix [4] arenes bearing α‐amino‐or α‐hydroxyphosphonic acid fragments at the upper rim
US4916249A (en) Glycero-3(2)-phospho-L-serine derivatives and salts thereof
Hancock et al. Analogs of natural lipids. VII. Synthesis of cyclopentanoid analogs of phosphatidylcholine.
EP0229128B1 (de) Glycero-3(2)-phospho-l-serinderivate und diese enthaltende pharmazeutischen präparate
JPH08509470A (ja) 抗がん剤としてのファルネシル：タンパク質トランスフェラーゼ阻害剤
Macomber et al. Reactions of oxaphospholenes. 2. Hydrolysis of neopentyl esters, phenyl esters, and amides
RU2057133C1 (ru) Фосфорилированные серины
FI65261B (fi) Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt anvaendbart dinatriumsalt av n-(fosfonoacetyl)-l-asparaginsyra
Hong et al. Nucleoside conjugates. 13. Synthesis and antitumor activity of 1-. beta.-D-arabinofuranosylcytosine conjugates of thioether lipids with improved water solubility
FI92208B (fi) Menetelmä valmistaa farmaseuttisesti arvokkaita sytidiini-5'-fosfaattialkanoleja ja glyseroleja
Baer et al. PHOSPHONOLIPIDS: XII. Synthesis of Phosphonolipid Metobolites. L-α-Glyceryl-(2-aminoethyl) phosphonate
CA2610647C (en) Novel inhibitors of pyruvate kinase as therapeutic agents for cancer
KR0149217B1 (ko) 이노시톨 유도체와 그의 제조방법
EP0091525A2 (en) Phosphonoalkanoylamino acids
EP0239109A2 (en) Phosphonate angiotensin converting enzyme inhibitors
MXPA94001344A (en) Inhibitors of farnesil: protein transferasacomo agents anticancero

Legal Events

Date Code Title Description
GB Transfer or assigment of application

Owner name: ASTA MEDICA AKTIENGESELLSCHAFT

BB Publication of examined application
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: ASTA MEDICA AKTIENGESELLSCHAFT