FI65261B - Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt anvaendbart dinatriumsalt av n-(fosfonoacetyl)-l-asparaginsyra - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt anvaendbart dinatriumsalt av n-(fosfonoacetyl)-l-asparaginsyra Download PDFInfo
- Publication number
- FI65261B FI65261B FI783467A FI783467A FI65261B FI 65261 B FI65261 B FI 65261B FI 783467 A FI783467 A FI 783467A FI 783467 A FI783467 A FI 783467A FI 65261 B FI65261 B FI 65261B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- pala
- ethanol
- phosphonoacetyl
- disodium
- water
- Prior art date
Links
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 106
- ZZKNRXZVGOYGJT-VKHMYHEASA-N (2s)-2-[(2-phosphonoacetyl)amino]butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CP(O)(O)=O ZZKNRXZVGOYGJT-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 95
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 73
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 47
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 28
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 24
- PEOGKOTVGUTAEM-UHFFFAOYSA-N (2-chloro-2-oxoethyl)phosphonic acid Chemical compound OP(O)(=O)CC(Cl)=O PEOGKOTVGUTAEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N dibenzyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1COCC1=CC=CC=C1 MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 12
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 11
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 8
- 150000003946 cyclohexylamines Chemical class 0.000 claims description 8
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 claims description 7
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 6
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 5
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 4
- WZCWSQWJAAXHCP-QVTWQEFQSA-J tetrasodium;(2s)-2-[(2-phosphonatoacetyl)amino]butanedioate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)CP([O-])([O-])=O WZCWSQWJAAXHCP-QVTWQEFQSA-J 0.000 claims description 4
- CYTYCFOTNPOANT-UHFFFAOYSA-N Perchloroethylene Chemical group ClC(Cl)=C(Cl)Cl CYTYCFOTNPOANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229950011008 tetrachloroethylene Drugs 0.000 claims description 3
- JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N benzathine Chemical class C=1C=CC=CC=1CNCCNCC1=CC=CC=C1 JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 47
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 37
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 25
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 22
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 22
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 21
- 239000000463 material Substances 0.000 description 18
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 16
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 16
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 16
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- -1 phosphonoacetyl Chemical group 0.000 description 14
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 12
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N cyclohexylamine Chemical compound NC1CCCCC1 PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 10
- XUYJLQHKOGNDPB-UHFFFAOYSA-N phosphonoacetic acid Chemical compound OC(=O)CP(O)(O)=O XUYJLQHKOGNDPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 8
- MHLMRBVCMNDOCW-UHFFFAOYSA-N acetic acid;butan-1-ol;hydrate Chemical compound O.CC(O)=O.CCCCO MHLMRBVCMNDOCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 7
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 7
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 7
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 7
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 6
- JDWFOTLBRARKLZ-UHFFFAOYSA-N azanium;ethanol;hydroxide;hydrate Chemical compound [NH4+].O.[OH-].CCO JDWFOTLBRARKLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 6
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 6
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 4
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SOBHUZYZLFQYFK-UHFFFAOYSA-K trisodium;hydroxy-[[phosphonatomethyl(phosphonomethyl)amino]methyl]phosphinate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OP(O)(=O)CN(CP(O)([O-])=O)CP([O-])([O-])=O SOBHUZYZLFQYFK-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- BQAMWLOABQRMAO-INIZCTEOSA-N dibenzyl (2s)-2-aminobutanedioate Chemical compound C([C@H](N)C(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 BQAMWLOABQRMAO-INIZCTEOSA-N 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012258 stirred mixture Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 235000019502 Orange oil Nutrition 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- HLMUYZYLPUHSNV-NTISSMGPSA-N [(2s)-1,4-dioxo-1,4-bis(phenylmethoxy)butan-2-yl]azanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1.C([C@H](N)C(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 HLMUYZYLPUHSNV-NTISSMGPSA-N 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000010502 orange oil Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 2
- ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N triethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CC ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GTLWADFFABIGAE-UHFFFAOYSA-N 1-chloroethylbenzene Chemical compound CC(Cl)C1=CC=CC=C1 GTLWADFFABIGAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000005660 chlorination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010549 co-Evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 201000003866 lung sarcoma Diseases 0.000 description 1
- NIQQIJXGUZVEBB-UHFFFAOYSA-N methanol;propan-2-one Chemical compound OC.CC(C)=O NIQQIJXGUZVEBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 150000004685 tetrahydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- GGUBFICZYGKNTD-UHFFFAOYSA-N triethyl phosphonoacetate Chemical compound CCOC(=O)CP(=O)(OCC)OCC GGUBFICZYGKNTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
- C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
- C07F9/3804—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)] not used, see subgroups
- C07F9/3808—Acyclic saturated acids which can have further substituents on alkyl
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
- C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
- C07F9/40—Esters thereof
- C07F9/4003—Esters thereof the acid moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
- C07F9/4006—Esters of acyclic acids which can have further substituents on alkyl
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
P5Sr*l ΓβΙ ««kuulutusjulraisu , r 0 * λ lJ ' * UTLÄGGN I NGSSKRI FT 65261 • jSöjS C (45) Fai.v.-.·:, 11 .:.;CnnL t ly 10 04 1934 0¾¾ Patent meddelat y (S1) Kv.lk.3/tnt.C!.3 C 07 F 9/38 SUOMI-FINLAND (21) P*tenttlhalc«rrm* — Ptttntansdknlng 703467 (22) H»keml*ptlvl — An*eknlng*dag l4.ll.78 * ' (23) AlkuplivI— Giltlghetsdag 14.11.78 (41) Tullut fulklMktl — BIMt offaotllg 15.05.79
Patentti- ja rekisterihallitut .... .... „ ...
, . (44) Nlhtlvlkilpanon Ja kuuL|ulkalsun pvm. —
Patent· och registerstyrelaen Anaökan utlagd och utl.akrlftan publkerad 30.12.83 (32)(33)(31) Pyydetty etuolkeua —Begird prlorltet 14.H.77 USA(US) 851382 (71) Starks Associates, Inc., 1280 Niagara Street, Buffalo, New York 14213, USA(US) (72) Robert John Schultz, Amherst, New York, Fred William Starks, Kenmore,
New York, USA(US) (74) Oy Jalo Ant-Wuorinen Ab (54) Menetelmä farmakologisesti käyttökelpoisen N-(fosfonoasetyyli)-L--asparagiinihapon dinatriumsuolan valmistamiseksi - Förfarande för framställning av farmakologiskt användbart dinatriumsalt av N-(fos-fonoacetyl)-L-asparaginsyra _ Tämä keksintö koskee uutta menetelmää uuden# farmakologisia ominaisuuksia omaavan N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dinatriumsuolan (dinatrium-PALA) valmistamiseksi, jonka kaava on
O O
^nhcch2p-oh CH0-CH ONa / 2 \ H02c xC02Na
Vapaa tetrahappo, N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo (josta seuraavassa käytetään myös nimitystä PALA) on tunnettu yhdiste.
Tunnettua tetrahappoyhdistettä. N-(fosfonoasetyyli)-L-aspara-giinihappoa (PALA) valmistivat ensimmäisinä Stark et ai, J.Biol.Chem. 246, 6599 (1971). PALA:n tetranatriumsuola on tunnettu kasvaimia vastustava aine, kuten on esitetty kirjallisuudessa, erityisesti julkaisussa Cancer Research, 36.# 2720 (1976). Esimerkiksi intra-peritoneaalista P388-leukemiaa sairastavien hiirien elinaika piteni jopa 64 %:lla käsiteltäessä niitä PALA-tetranatriumsuolalla annosten ollessa 188-750 mg/kg i.p. Lewis-keuhkosarkooma oli erittäin herkkä PALA—tetranatriumsuolalle hiiressä i.p. annoksissa 240-490 mg/ kg. B16-melanoomaa sairastavat hiiret elivät 77-86 % kauemmin kontrolleihin verrattuna käsiteltäessä niitä PALA-tetranatriumsuolalla 2 65261 (490 mg/kg i.p.).
Vaikkakin tetrahappo-PALA:n synteesi on yksinkertainen, on tetrana triumsuolan valmistus, erityisesti kg-määrinä, osoittautunut ongelmalliseksi. Keksinnön mukainen uusi menetelmä sopii erityisen hyvin tällaisten määrien valmistamiseksi.
Keksinnön mukaisesti valmistetulla uudella dinatrium-PALA-yh-disteellä on kasvaimia vastustava aktiviteetti in vivo.
Uusi dinatrium-PALA-yhdiste voi esiintyä vedettömässä muodossa tai solvatoidussa (myös hydratoidussa) muodossa. Molemmat muodot sopivat keksinnön tarkoituksia varten. Keksinnön mukaisella menetelmällä saadaan dinatrium-PALA-yhdiste hydraattina, jonka hydraus-vesipitoisuus vaihtelee eri valmisteissa, ollen tyypillisesti noin 0,2-2 moolia vettä. Yhdiste voi sisältää solvaattina myös etanolia (esim. noin 0,1-0,5 moolia), etikkahappoa (esim. noin 0,03-0,4 moolia) ja natriumasetaattia (esim. noin 0,2 moolia). Etikkahappo ja etanoli voidaan poistaa jäähdytyskuivaamalla. Lyofilisoimalla kaksi tai kolme kertaa saadaan liuotinvapaata ainetta. Näillä menetelmillä valmistettu dinatrium-PALA-yhdiste voi sisältää myös huomattavia määriä trinatrium-PALA:a, jopa niinkin paljon kuin 30-40 % trinatrium-PALA:a. Kaikki tällaiset dinatrium-PALA:n solvaatit ja dinatrium-PALA:n ja trinatrium-PALArn seokset kuuluvat tässä käsitteeseen "dinatriura-PALA", koska näitä yhdisteitä voidaan vaihtaa keskenään ja käyttää aktiivisina kasvannaisia vastustavina aineina keksinnön mukaisissa koostumuksissa. Käytettynä kasvaimia vastustavana aineena uusi dinatriron-PALA on aktiviteetiltaan ja myrkyllisyydeltään pääasiassa ekvivalentti tunnetun tetranatrium-PALA:n kanssa. Dinatrium-PALAra voidaan käyttää kasvaimia vastustavan aktiviteettinsa ansiosta keksinnön mukaisesti farmaseuttisten koostumusten muodossa yhdessä hyväksyttävän farmaseuttisen kantaja-aineen kanssa. Koostumukset voivat myös sisältää muita antimikrobisia aineita ja muita kasvaimia vastustavia aineita. Koostumukset voidaan valmistaa missä tahansa ko. annostustapaa varten sopivassa farmaseuttisessa muodossa. Esimerkkejä tällaisista koostumuksista ovat kiinteät koostumukset oraalista annostusta varten, kuten tabletit, kapselit, pillerit, jauheet ja granulaatit, nestemäiset koostumukset topi-kaalista tai oraalista annostamista varten, kuten liuokset, suspensiot, siirapit ja eliksiirit, ja valmisteet parenteraalista annostusta varten, kuten steriilit liuokset, suspensiot tai emulsiot. Käytettäessä koostumuksia kasvaimia vastustavina aineina, niitä an 65261 netaan sellainen annos että kasvaimien kasvu estyy. Sopiva annos-alue käytettäessä niitä kasvaimia vastustavina aineina (erityisesti edellämainittuja kiinteitä kasvaimia vastaan) imettäväisillä on 50-500 mg dinatrium-PALA:a kg kohti yksittäistä päivittäistä parente-raalista käsittelyä varten (esim. infuusio suoneen 2 %:sena vesipitoisena liuoksena).
Uusi dinatrium-PALA on edullisesti liikkuva, vapaasti juokseva hienojakoinen kiinteä aine, jota on helppo käsitellä, analysoida ja punnita koostumuksia muodostettaessa. Verrattuna tunnettuun tetra-natrium-PALA:an se on verraten ei-hygroskooppinen. Tetranatrium-PALA absorboi atmosfääristä kosteutta 1,5 kertaa nopeammin kuin dinatrium-PALA, ja on näinollen vaikea käsitellä ja analysoida. Siinä missä tetranatrium-PALA on veteen liukeneva, dinatrium-PALA:n liukoisuus veteen on edullisesti suurempi kuin 950 mg/ml. Dinatrium-PALA: n 2 %:sen vesiliuoksen (paino/tilavuus) pH-arvo on tyypillisesti noin 4; tähän verrattavalla trinatrium-PALA- ja tetranatrium-PALA- liuoksi 11a on pH-arvot noin 6 vastaavasti noin 9. Dinatrium-PALA: lie on myös tunnusomaista 60 Mc:n ydinmagneettiresonanssispektri (NMR), jossa tyypillisesti on metyleeniryhmää (-CI^) vastaava duplet-ti α-asemassa -CH-ryhmään nähden, kun taas tetranatrium-PALA:11a on karakterisesti NMR-spektri, jossa on kolmeviivainen multipletti, joka vastaa edellämainittua metyleeniryhmää.
Keksinnön mukainen menetelmä käsittää sen, että tetranatrium-PALA tai tätä sisältävä tuoteseos liuotetaan jääetikkaan, saatu liuos laimennetaan etanolilla dinatrium-PALA:n saostamiseksi ja dinatrium-PALA otetaan talteen.
Tetranatrium—PALA voidaan puolestaan valmistaa saattamalla L-asparagiinihappo reagoimaan bentsyylialkoholin ja p-tolueenisulfoni-hapon kanssa L-asparagiinihapon dibentsyyliesterin p-tolueenisulfo-naatin valmistamiseksi, minkä jälkeen L-asparagiinihapon dibentsyyliesterin p-tolueenisulfonaatti saatetaan reagoimaan trietyyliamii-nin kanssa, lisätään fosfonoasetyylikloridia PALA-dibentsyyliesterin valmistamiseksi, ja erotetaan PALA-dibentsyyliesteri reagoimattomasta fosfonoasetyylikloridista. PALA-dibentsyyliesteri erotetaan millä tahansa sopivalla tavalla. Koska se on liukenematon veteen, PALA-dibentsyyliesteri ja reagoimaton fosfonoasetyylikloridi erotetaan mieluimmin pesemällä reaktioseos vedellä fosfonoasetyyliklo- 4 65261 ridin poistamiseksi. Dibentsyyliesteri saatetaan hydrolyysille alttiiksi vesipitoisella natriumhydroksidilla tuoteseoksen valmistamiseksi, joka sisältää tetranatrium-PALA:a.
Tuoteseos voidaan saattaa ioninvaihtoreaktiolle alttiiksi N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon valmistamiseksi vapaassa happo-muodossa, titrataan saatu vapaa happo pH-arvoon 9,2 ja erotetaan puhdistettu tetranatriumsuola.
PALA-dibentsyyliesteri voidaan myös saattaa reagoimaan Ν,Ν'-di-bentsyylietyleenidiamiinin kanssa PALA-dibentsyyliesterin Ν,Ν'-dibent-syylietyleenidiamiinisuolan valmistamiseksi, minkä jälkeen mainittu suola saatetaan hydrolyysille alttiiksi PALA-tetranatriumsuolaa sisältävän tuoteseoksen valmistamiseksi, joka saatetaan reagoimaan edelleen keksinnön mukaisesti PALA-dinatriumsuolan valmistamiseksi.
Erään toisen suoritusmuodon mukaan käytetään esteröintiväli-aineena perkloorietyleeniä L-asparagiinihapon reaktiossa bentsyyli-alkoholin ja p-tolueenisulfonihappomonohydraatin kanssa. Valmistettaessa dibentsyyli-asparaattia, on edullisin liuotin perkloorietylee-ni. Se muodostaa erinomaisen atseotroopin veden kanssa; se kiehuu riittävän korkealla jotta suurmittakaavassa tapahtuva esteröinti olisi nopeasti suoritettavissa (noin kolmessa tunnissa) ja samanaikaisesti lämpötila ei vaikuta tuotteen stabiliteettiin, ainakaan ei tämän lyhyen termaalisen kosketuksen aikana.
Erään toisen suoritusmuodon mukaan - valmistettaessa PALA-yhdis-teitä, joissa PALA-dibentsyyliesterin sykloheksyyliamiinisuola saatetaan reagoimaan natriumhydroksidin kanssa N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatriumsuolan valmistamiseksi ja mainittu tetranatriumsuola saatetaan reagoimaan etikkahapon kanssa dinatrium-PALA:n muodostamiseksi - saostetaan saatu dinatriumsuola kahdesti vedestä, jolloin toisen saostuksen aikana lisätään mainitun dinatrium-suolan vesiliuos tipoittain keskelle voimakkaasti hämmennettyä etanolia täten poistaen epäpuhtaudet etikkahapon ja natriumasetaatin muodossa.
Dibentsyyli-PALA:n sykloheksyyliamiinisuola voidaan puolestaan valmistaa saattamalla L-asparagiinihapon dibentsyyliesterin p-toluee-nisulfonaatti reagoimaan trietyyliamiinin kanssa, lisäämällä fosfono-asetyylikloridia PALA-dibentsyyliesterin valmistamiseksi, ja saattamalla mainittu dibentsyyliesteri reagoimaan sykloheksyyliamiinin kanssa.
Dinatrium-PALA:n valmistuksella keksinnön mukaisesti on seuraa-vat edut: 5 65261 (1) Aineen syntetisoimiseksi tarvittava aika on lyhyempi johtuen siitä, että (a) ioninvaihtopylväiden käyttö voidaan jättää kokonaan pois ja (b) poishaihdutettavaa vedentilavuutta voidaan huomattavasti vähentää; (2) kustannusarvio 5 kg:n ainemäärän valmistamiseksi on ainakin 39 % pienempi kuin 5 kg:lie tetranatrium-PALA:a; (3) tetranatrium-PALA:n jatkuvasti alhaiset vetyanalyysit eivät enää ole ongelmana; (4) synteesi on helposti sovellettavissa suuremmassa mittakaavassa; (5) saatu tuote on vähemmän hygroskooppinen kuin tetranatrium-PALA, ja päinvastoin kuin tetranatrium-PALA, se on liikkuva, vapaasti juokseva hienojakoinen kiinteä aine, joka on helposti käsiteltävissä ja punnittavissa formulointitarkoituksia varten, ja (6) aine liukenee erittäin hyvin veteen.
Seuraavat esimerkit havainnollistavat keksintöä. Lämpötila on ilmoitettu Celsius-asteina.
Esimerkki 1: L-asparagiinihappo-dibentsyyliesteri-p-tolueenisulfonaatti (I) Hämmennettyä seosta, jossa on L-asparagiinihappoa (399 g, 3,00 moolia) bentsyylialkoholia (1,95 kg, 18,0 moolia), p-tolueenisulfoni-happomonohydraattia (582 g, 3,06 moolia) ja kuivaa bentseeniä (1,2 litraa) kuumennettiin palautusjäähdyttäen 16 tuntia. Reaktiossa muodostunut vesi (145 ml) poistettiin Dean-Stark-loukun avulla. Saatu liuos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan, laimennettiin sitten bentsee-nillä (1,2 litraa) ja eetterillä (3,6 litraa). Saatu kiinteä aine kerättiin suodattimelle, pestiin eetterillä (7,0 litraa) ja kuivattiin; saanto 1195 g (82 %). Raakatuote kiteytettiin metanolista (1720 ml) jolloin saatiin 959 g (80 %:n saanto) puhdistettua tuotetta (I); sul.p. 158-159,5°; kirjallisuus sul.p. 158-160°.
Lisäreaktioita suoritettiin, jolloin saatiin yhteensä 4,27 kg tuotetta, joka sopi seuraavia muutosreaktioita varten. Fosfonoetikkahappo (II) Hämmennettyä liuosta, jossa oli trietyylifosfonoasetaat-tia (900 g; 4,01 moolia) 6M kloorivetyhapossa (6,1 litraa), kuumennettiin palautusjäähdyttäen 6,5 tuntia. Liuos väkevöitiin tyhjössä, sen jälkeen viimeiset vesimäärät poistettiin haihduttamalla yhdessä bent-seenin kanssa (2 kertaa 300 ml). Kiinteä jäännös kiteytettiin kahdesti 1,0 litrasta jääetikkaa, jolloin saatiin 342 g (60,8 %) happoa (II); sul.p. 140-141°; kirjallisuus sul.p. 143°. Suoritettiin lisäreaktioita jolloin saatiin yhteensä 1020 g tuotetta, joka sopi seuraavia muutosreaktioita varten.
6 65261
Fosfonoasetyylikloridi (III) Hämmennettyä seosta, jossa oli fosfonoetikkahappoa (II) (355 g; 2,54 moolia) ja tionyylikloridia (1770 ml) kuumennettiin 50-55°: ssa 4,5 tuntia. Saatu liuos väkevöitiin tyhjössä (alle 35°; aspi-raattorin paine tällöin 1 mm Hg), jolloin saatiin 395,7 g (98,3 %) tuotetta. öljymäistä keltaista ainetta käytettiin seuraavassa reaktiossa ilman enempää karakterisointia.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-dibentsyyliesteri (IV)
Kylmään (15°), hämmennettyyn suspensioon, jossa oli L-aspara-giinihapon dibentsyyliesterin p-tolueenisulfonaattia (I) (812 g; 1,67 moolia) kuivassa dioksaanissa (5,2 litraa) lisättiin tipoittaan trietyyliamiinia (486 g; 4,80 moolia) 30 minuutin kuluessa. Saatua liuosta hämmennettiin 15°:ssa 30 minuuttia, sen jälkeen lisättiin fosfonoasetyylikloridia (III) (395,7 g; 2,500 moolia) liuotettuna kuivaan dioksaaniin (600 ml) tipoittain tunnin sisällä. Lämpötila pidettiin alle 15° lisäyksen aikana. Jäähdytyshaude poistettiin ja reaktioseosta hämmennettiin tunnin ajan. Liukenemattomat aineet suodatettiin pois ja pestiin dioksaanilla (2,0 litraa) . Suodos väkevöitiin tyhjössä, minkä jälkeen öljymäinen jäännös liuotettiin bentseeniin (10,1 litraa). Orgaaninen liuos pestiin vedellä (6 x 4,0 litraa), kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin sitten tyhjössä, jolloin saatiin 568 g (78,1 %) tuotetta keltaisena rapeana kiinteänä aineena joka oli käyttökelpoinen seuraavia muutosreaktioita varten.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-tetranatriumsuola · 4,5 H-0 (PALA) (VII)_ Jäähdytettyyn (10°) hämmennettyyn liuokseen, jossa oli natrium-hydroksidia (312 g; 7,80 moolia) 10,0 litrassa vettä lisättiin yhtenä annoksena N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-dibentsyyli-esteriä (IV) (568 g; 1,30 moolia). Seosta hämmennettiin 10-15°:ssa 6 tuntia, minkä jälkeen liukenemattomat aineosat suodatettiin pois. Suodos väkevöitiin tyhjössä 3,0 litran tilavuuteen ja uutettiin sitten metyleenikloridilla (1 x 1,3 litraa) ja eetterillä (1 x 1,3 litraa). Saatu vesipitoinen liuos lisättiin 12,0 litraan etanolia, jolloin puolikiinteä aine saostui. Dekantoimisen jälkeen aine liuotettiin veteen (680 ml) ja yhtä suuria määriä liuosta lisättiin kahteen AG50W-X8 (vetymuoto) kationinvaihtohartsipylvääseen (9,6 cm x 25 cm). Kukin pylväs eluoitiin 2,0 litralla vettä (20 fraktiota, kukin 100 ml). Kunkin pylvään fraktiot 7-14, joka sisälsi halutun 6 5 2 61 7 tuotteen määritettynä ohutkerroskromatograafisesti, yhdistettiin ja haihdutettiin tyhjössä (kylvyn lämpötila alle 30°). öljymäinen jäännös liuotettiin asetoniin (2,0 litraa), lisättiin hiiltä (50 g) ja seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Liukenemattomat aineosat suodatettiin pois ja sen jälkeen suodos haihdutettiin tyhjössä. Puolikiinteä jäännös (tetrahappo; 227,1 g) liuotettiin 2,0 litraan vettä. Hämmennetty liuos jäähdytettiin 10°: seen ja titrattiin sen jälkeen pH-arvoon 9,2 IN vesipitoisella natriumhydroksidilla (3123 ml) . Emäksinen liuos väkevöitiin alennetussa paineessa (1-2 mm Hg; alle 30°) ja öljymäinen jäännös tri-turoitiin asetonilla (5,8 litraa). Kiinteä aine kuivattiin osittain tyhjössä ja trituroitiin sitten asetonilla (2,0 litraa) ja eetterillä (2,0 litraa). Saatu jauhe kuivattiin alennetussa paineessa fosforipentoksidilla 9 päivää huoneen lämpötilassa ja saatiin 272,2 g haluttua tuotetta.
Laskettu C6H6NOgP:lle C H N P Na • 4Na · 4,5 H20 16,99 3,56 3,30 7,30 21,68
Saatu 16,76 2,29 3,46 7,31 21,61
Spektriarvot:
Ydinmagneettinen resonanssi (D20) 6 2,29 (m, 4, -CH2 α-asemassä P+ -CH2:ään α-asemassa -CH:ään); 4,13 (m, 1, -CH).
Optinen kierto:
Havaittu Kirjallisuus + 9,44 (c, 3,743 vedessä) (a)^ + 10,30 (c, 3,798 vedessä) Kromatografia:
Ohutkerroskromatografia (selluloosa, Quanta/Gram Q2F-lasilevyt) Liuotinsysteemi R^-arvo 1. etanoli-ammoniumhydroksidi-vesi (6:1:3) 0,13 2. n-butanoli-etikkahappo-vesi (5:2:3) 0,30 (häntä) 3. litiumkloridi (0,6 M)-etanoli-ammonium- hydroksidi (5:5:1) 0,61 4. etanoli-vesi (2:3) 0,81 Täplien määrä: 112 yg.
Määritys:
Fospray (kaupallinen reagenssi, jota käytetään fosforipitoisten yhdisteiden osoittamiseksi).
8 65261
Tulokset:
Yhdiste liikkuu yhtenä ainoana täplänä jokaisessa liuotinsys-teemissä. Tetranatrium-suolasta kloorivetyhapolla vapautetun vapaan hapon ohutkerroskromatogrammi oli negatiivinen asparagiinihapol-le ruiskutettuna ninhydriinillä.
Esimerkki 2: N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dinatriumsuola · 1,1 H90 N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatrium-suolaa • 4,5 H2O (VII) (10,1 g; 0,236 moolia) liuotettiin kuumaan (90°) jääetikkaan (125 ml). Kuumaan sameaan liuokseen lisättiin Celite'ä (5 g), sen jälkeen liukenemattomat aineosat suodatettiin pois. Kirkas jäähdytetty tummankeltainen suodos laimennettiin etanolilla (300 ml) ja saatua seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Saostunut kiinteä aine kerättiin suodattimelle, pestiin suspendoimalla uudestaan etanoliin (3 x 300 ml) ja eetteriin (1 x 300 ml) ja kuivattiin, jolloin saatiin 5,7 g (80,8 %) dinatriumsuo-laa valkoisena jauheena. Valmistettiin vielä 5,0 g tuotetta vastaavalla tavalla. Yhdistetty aine (10,7 g) joka epäpuhtauksina sisälsi etikkahappoa ja etanolia (määritettynä NMRrllä) liuotettiin veteen (250 ml). Vesipitoinen liuos tehtiin kirkkaaksi suodattamalla ja sen jälkeen se jäähdytyskuivattiin. Lyofilisointi-mene-telmä toistettiin vielä kahdesti, sen jälkeen tuote kuivattiin va-kiopainoon tyhjössä 40°:ssa fosforipentoksidilla; analyyttisesti puhtaan tuotteen saanto oli 9,0 g (24,1 %:n saanto).
Analyysi:
Laskettu CgHgNOgP · 2 Na · 1,1 H20 C H N P Na 22,60 3,22 4,39 9,71 14,42
Saatu 22,68 3,21 4,36 9,62 14,37
Spektriarvot:
Ydinmagneettinen resonanssi (D20) δ 2,75 (d, 2, J=20 Hz, -CH2 α-asemassa P:hen); 2,80 (d, 2, -CH2 α-asemassa -CH:een)j 4,53 (t, 1, -CH).
Optinen kierto:
Havaittu (a)p5 + 15,95 (c, 2,000 vedessä)
Kromatografia:
Ohutkerroskromatograf ia (selluloosa, Quanta/Gram Q2F-lasilevyt) 9 65261
Liuotinsysteemi Rf-arvo 1. litiumkloridi (0,6 M)-etanoli-ammonium- hydroksidi (5:5:1) 0,47 2. etanoli-vesi (2:3) 0,75 3. n-butanoli-etikkahappo-vesi (5:2:3) 0,19 Määritys:
Fospray (kaupallinen reagenssi, jota käytetään fosforipitoisten yhdisteiden osoittamiseksi).
Tulokset:
Yhdiste liikkuu yhtenä täplänä kussakin liuotinsysteemissä. Esimerkki 3: N- (fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dinatriumsuola, monohydraat-ti · 0,3 etikkahappoa ♦ 0,1 etanolia _____ 2,0 litraan kuumaa (85°) jääetikkaa lisättiin yhtenä annoksena N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-tetranatriumsuolaa, tetra-hydraattia (VII) (214 g; 0,516 moolia). Seosta hämmennettiin 85-90 :ssa 30 minuuttia, minkä jälkeen lisättiin Celite'ä (50 g), sen jälkeen liukenemattomat aineosat suodatettiin pois. Kirkas tummankeltainen suodos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja laimennettiin etanolilla (4,5 litraa). Saatua seosta hämmennettiin 30 minuuttia, sen jälkeen saostunut kiinteä aine kerättiin suodattimelle. Aine pestiin suspendoimalla se uudestaan etanoliin (2 x 3,5 litraa) ja eetteriin (1 x 1,2 litraa) ja kuivattiin sen jälkeen tyhjössä 55°: ssa fosforipentoksidilla jolloin saatiin 111,8 g (63,8 %) analyyttisesti puhdasta dinatriumsuolaa.
Analyysi:
Laskettu CgHgNOgP · 2 Na · H20 · 0,3 C2H4C>2 · 0,1 C-^HgO
C H N P Na 24,04 3,50 4,12 9,12 13,53
Saatu 24,19 3,56 4,14 8,96 13,48
Spektriarvot:
Ydinmagneettinen resonanssi (D20) 6 0,92 (t, 0,3, etanolin -CH^); 1,83 (s, 0,9, etikkahapon -CHj); 2,55 (d, 2, J=20 Hz, -CH2 α-asemassa P:hen); 2,58 (d, 2, -CH2 α-asemassa -CH:ään); 3,33 (q, 0,2, etanolin -CH2); 4,32 (t, 1, -CH).
Optinen kierto:
Havaittu (a)p^ + 15,31 (c, 2,103 vedessä).
6 5 2 61 10
Kromatografia:
Ohutkerroskromatografia (selluloosa, Quanta/Gram Q2F-lasilevyt) liuotinsysteemi R^-arvo 1. litiumkloridi (0,6 M)-etanoli-ammonium- hydroksidi (5:5:1) 0,54 2. etanoli-vesi (2:3) 0,69 3. etanoli-ammoniumhydroksidi-vesi (6:1:3) 0,18 (pitkä) 4. n-butanoli-etikkahappo-vesi (5:2:3) 0,20 (häntä) Määritys:
Fospray (kaupallinen reagenssi, jota käytetään fosforipitoisten yhdisteiden osoittamiseksi).
Tulokset:
Yhdiste liikkuu yhtenä täplänä kussakin liuotinsysteemissä. Esimerkki 4: N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dinatriumsuola, monohydraat-ti » 0,3 etikkahappoa · 0,1 etanolia_ N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatriumsuolaa * 4,5 H2O (VII) (716,8 g; 1,690 moolia) lisättiin yhtenä annoksena kuumaan (95°) jääetikkaan (7,0 1). Seosta hämmennettiin 90-95°:ssa 45 minuuttia, sen jälkeen lisättiin Celite'a (250 g). Kuumaa seosta (90-95°) hämmennettiin 20 minuuttia, liukenemattomat aineosat kerättiin suodattimelle ja pestiin etikkahapolla (0,5 1). Kirkas tummanoranssinen suodos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja laimennettiin etanolilla (16,1 1). Saatua seosta hämmennettiin tunnin ajan ja sen jälkeen saostunut kiinteä aine kerättiin suodattimelle. Aine suspendoitiin etanoliin (7,5 1) ja suspensiota hämmennettiin voimakkaasti 3 tuntia. Kiinteä aine kerättiin suodattimelle ja pestiin kuten edellä etanolilla (2 x 7,5 1) ja eetterillä (1 x 7,5 1). Aine kuivattiin tyhjössä 50-55°:ssa fosforipentoksidilla, jolloin saatiin 426,5 g (74,3 %) analyyttisesti puhdasta dinatriumsuolaa. Analyysi:
Laskettu CgNgNOgP · 2 Na * HjO · 0,3 C2H4C>2 · 0,1 C2H60 C H N P Na 24,04 3,50 4,12 9,12 13,53
Saatu 24,35 3,46 4,19 8,78 13,44 11 65261
Spektriarvot:
Ydinmagneettinen resonanssi (D2O) δ 0,98 (t, 0,3, etanolin -CH3); 1,88 (s, 0,9, etikkahapon -CH^); 2,61 (d, 2, J=20 Hz, -CH2 α-asemassa P:hen); 2,63 (d, 2, -CH2 α-asemassa -CH:ään); 3,44 (q, 0,2, etanolin -CH2); 4,36 (t, 1, -CH) .
Optinen kierto:
Havaittu + 14,86 (c, 1,998 vedessä)
Kromatografia:
Ohutkerroskromatograf ia (selluloosa, Quanta/Gram Q2F-lasilevyt)
Liuotinsysteemi Rf-arvo 1. litiumkloridi (0,6 M) -etanoli-ammonium- hydroksidi (5:5:1) 0,60 2. etanoli-vesi (2:3) 0,78 3. etanoli-ammoniumhydroksidi-vesi (6:1:3) 0,19 4. n-butanoli-etikkahappo-vesi (5:2:3) 0,22 (pitkä) Täplien määrä: 80 yg.
Määritys:
Fospray (kaupallinen reagenssi, jota käytetään fosforipitoisten yhdisteiden osoittamiseksi.
Tulokset:
Yhdiste liikkuu yhtenä täplänä kussakin liuotinsysteemissä. Esimerkki 5: N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dibentsyyliesterin N,N'--dibentsyylietyleenidiamiinisuola (XII)_
Kylmään (5°) hämmennettyyn liuokseen, jossa oli N-(fosfonoase-tyyli)-L-asparagiinihappo-dibentsyyliesteriä (IV) (2449 g; 5,625 moolia) metyleenikloridissa (9,5 1) lisättiin tipoittain Ν,Ν'-di-bentsyylietyleenidiamiinia (1488 g; 6,191 moolia) liuotettuna mety-leenikloridiin (1,65 1) 3,0 tunnin ajan. Lämpötila pidettiin alle 15° lisäyksen aikana. Jäähdytyshauteen poistamisen jälkeen reaktio-liuosta hänmennettiin huoneen lämpötilassa 16 tuntia ja väkevöitiin sitten tyhjössä öljyksi. Jäännös liuotettiin asetoniin (5,0 1) ja liuosta säilytettiin yli yön 18 tuntia huoneen lämpötilassa. Liuoksesta saostunut hienojakoinen valkea kiinteä aine suodatettiin pois, sen jälkeen suodos haihdutettiin alennetussa paineessa. Raaka aine liuotettiin etyyliasetaattiin (12,0 1). Orgaaninen liuos pestiin vedellä (3 x 3,5 1), kuivattiin magnesiumsulfaatilla, hämmennettiin 12 65261
Norit A:n kanssa (125 g) 45 minuuttia ja haihdutettiin pyörivässä haihduttimessa tyhjössä. Jäännös (lasi) trituroitiin jauheeksi hämmentämällä voimakkaasti eetteri-petrolieetterillä (k.p. 30-60°) (5,0 1; 7,0 1). Kiinteä tuote kerättiin suodattimelle, jolloin saatiin 1609 g vaaleanruskeata suolaa; sul.p. yli 300°. Suoritettiin vielä toinen reaktio samalla tavalla, jolloin saatiin yhteensä 2308,5 g yhdistettä (XII), joka oli sopiva käytettäväksi seuraavaa muutosreaktiota varten.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatriumsuola (V) Jäähdytettyyn (14°) hämmennettyyn liuokseen, jossa oli natrium-hydroksidia (240 g; 6,00 moolia) vedessä (7,8 1) lisättiin annoksittain huolellisesti jauhettua N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiini-happo-dibentsyyliesterin Ν,Ν'-dibentsyylietyleenidiamiinisuolaa (XII) (675,7 g) 5 minuutin ajan. Reaktioseosta hämmennettiin 10-15°:ssa 6 tuntia, lisättiin Celite'ä (250 g), minkä jälkeen liukenemattomat aineosat suodatettiin pois. Suodos uutettiin metyleeni-kloridilla (2 x 1,5 1) ja eetterillä (1 x 1,5 1) ja väkevöitiin sitten tyhjössä (< 40°; 3,5 mm Hg). Vesiliuos (3,8 litran tilavuus) tehtiin kirkkaaksi suodattamalla ja laimennettiin etanolilla (13,5 1) jolloin öljy erottui. Annettiin seistä 18 tuntia huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen vesipitoinen etanoliliuos poistettiin, jolloin saatiin 600 ml raakaa yhdistettä (V) oranssinvärisenä öljynä. Suoritettiin vielä uusia hydrolyysireaktioita vastaavalla tavalla, jolloin saatiin yhteensä 1350 ml seuraavia muutosreaktioita varten sopivaa öljyä.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dinatriumsuola * 0,2 1^0 - 0,2 natriumasetaattia · 0,4 etikkahappoa · 0,15 etanolia_ N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatriumsuolaa (V) (1350 ml öljyä) liuotettiin jääetikkaan (6,5 1) huoneen lämpötilassa. Oranssinväristä liuosta hämmennettiin 30 minuuttia ja tehtiin kirkkaaksi suodattamalla ja laimennettiin sitten etanolilla (18,0 1). Saatua seosta hämmennettiin tunnin ajan, sen jälkeen liuotin poistettiin käyttämällä suodatinkynttilöitä. Kiinteä aine suspendoi-tiin etanoliin (10,5 1) ja seosta hämmennettiin voimakkaasti tunnin ajan. Etanoli poistettiin kuten edellä, sen jälkeen aine pestiin vielä kahdesti etanolilla (10,5 1; sitten 6,0 1). Kiinteä aine kerättiin kolmelle suodattimelle typpiatmosfäärissä ja pestiin eetterillä (2 x 1,0 1/suppilo) ja kuivattiin sitten osittain haihduttamalla pyörivässä haihduttimessa alennetussa paineessa (30-45°; 3-5 mm Hg). Paakkuinen kiinteä aine jauhettiin huolellisesti typ- 6 5 2 61 13 piatmosfäärissä, kuivattiin sitten tyhjössä fosforipentoksidilla (33,5 tuntia huoneen lämpötilassa ja 12,5 tuntia 50°:ssa), jolloin saatiin 945,1 g analyyttisesti puhdasta tuotetta.
Analyysi:
Laskettu CgHgNOgP ♦ 2 Na · 0,2 H20 · 0,2 C2H302Na · 0,4 C2H4C>2 * 0,15 C2H60 C H N P Na 25,74 3,31 4,00 8,85 14,45
Saatu 25,55 3,35 4,06 9,19 14,30
Spektriarvot:
Ydinmagneettinen resonanssi (D20) δ 0,89 (t, 0,45, etanolin -CH^); 1,78 (s, 1,8, asetaatin + etikkahapon -CH^); 2,54 (d, 2, -CH2 α-asemassa -CH:ään); 2,54 (d, 2, J=20,3 Hz, “CH2 α-asemassa P:hen); 3,36 (q, 0,30, etanolin —CH2)} 4,28 (t, 1 -CH).
Optinen kierto:
Havaittu (et)22 + 16,39 (c, 1,885 vedessä).
Kromatografia:
Ohutkerroskromatograf ia (selluloosa, Quanta/Gram Q2F-lasilevyt) liuotinsysteemi R^-arvo 1. litiumkloridi (0,6 M)-etanoli-ammoniumhyd- roksidi (5:5:1) 0,64 2. etanoli-vesi (2:3) 0,78 3. etanoli-ammoniumhydroksidi-vesi (6:1:3) (pitkä) 0,24 4. n-butanoli-etikkahappo-vesi (5:2:3) (häntä) 0,28 Määritys:
Fospray (kaupallinen reagenssi, jota käytetään fosforipitoisten yhdisteiden osoitttamiseksi).
Tulokset:
Yhdiste liikkuu yhtenä täplänä kussakin liuotinsysteemissä. Esimerkki 6: N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dibentsyyliesteri (IV) Jäähdytettyyn (10°) hämmennettyyn suspensioon, jossa on L-aspa-ragiinihappo-dibentsyyliesterin p-tolueenisulfonaattia (I) (5785 g; 11,91 moolia) kuivassa dioksaanissa (30,0 1) lisättiin yhtenä annoksena trietyyliamiinia (3238 g; 32,00 moolia). Saatua liuosta hämmennettiin tunnin ajan ja sen jälkeen lisättiin fosfonoasetyyli- 6 5 2 61 14 kloridia (III) (2236 g; 14,11 moolia) liuotettuna kuivaan dioksaaniin (5,5 1) tipoittain 3 tunnin aikana. Lämpötila pidettiin alle 30° lisäyksen aikana. Jäähdytyshaude poistettiin ja reaktioseosta hämmennettiin tunnin ajan. Liukenemattomat aineosat suodatettiin pois ja pestiin dioksaanilla (12,0 1). Suodos väkevöitiin tyhjössä, minkä jälkeen öljymäinen jäännös liuotettiin metyleenikloridiin (64,0 1) . Orgaaninen liuos pestiin vedellä (6 x 19,0 1), kuivattiin natrium-sulfaatilla ja haihdutettiin alennetussa paineessa 5,0 litran tilavuuteen.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatriumsuola (V) Jäähdytettyyn (15°) hämmennettyyn liuokseen, jossa oli natrium-hydroksidia (1323 g; 33,08 moolia) vedessä (43,0 1) lisättiin yhtenä annoksena 2,4 litraa edellävalmistetun N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dibentsyyliesterin (IV) (2,4 1 = 2400 g; 5,512 moolia) metyleenikloridiliuosta. Reaktioseosta hämmennettiin 10-15°:ssa 8 tuntia, minkä jälkeen lisättiin Celite'ä (825 g) ja liukenemattomat aineosat suodatettiin pois (600 g, Celite-tyyny). Suodos uutettiin metyleenikloridilla (2 x 9,0 1) ja eetterillä (1 x 9,0 1). Vesipitoinen liuos yhdistettiin identtisestä reaktiosta saadun vesiliuoksen kanssa ja väkevöitiin tyhjössä (<35°; 3-5 mm Hg). Liuos (25,0 litran tilavuus) tehtiin kirkkaaksi suodattamalla (400 g Celite-tyyny) ja laimennettiin etanolilla (88,0 1) jolloin öljy saostui. Annettiin seistä 7,5 tuntia huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen vesipitoinen etanoliliuos poistettiin ja jäljelle jäi 4,4 litraa raakaa yhdistettä (V) oranssinvärisenä öljynä. Vielä 6695 g yhdistettä (IV) hydrolysoitiin vastaavalla tavalla, jolloin yhteensä saatiin 9,98 litraa jatkoreaktioita varten sopivaa öljyä.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dinatriumsuola N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatriumsuolaa (V) (4,4 1 öljyä) liuotettiin jääetikkaan (14,0 1) huoneen lämpötilassa. Oranssinväristä liuosta hämmennettiin tunnin ajan, tehtiin kirkkaaksi suodattamalla ja laimennettiin sitten etanolilla (44,0 1). Saatua seosta hämmennettiin 1,5 tuntia, minkä jälkeen liuotin poistettiin käyttämällä suodatinkynttilöitä. Kiinteä aine suspendoitiin etanoliin (30,0 1) ja seosta hämmennettiin voimakkaasti 2 tuntia. Etanoli poistettiin kuten edellä, minkä jälkeen aine pestiin suspen-doimalla uudestaan etanoliin (2 x 30,0 1) ja eetteriin (1 x 14,0 1). Kiinteä aine kerättiin kahdelle suodattimelle typpiatmosfäärissä ja kuivattiin sitten osittain pyörivässä haihduttimessa tyhjössä (30-45°; aspiraattorin paine 3-5 mm Hg). Vielä 2,93 litraa öljyä 15 65261 (V) saatettiin reagoimaan vastaavalla tavalla. Yhdistetty kokkare-mainen aine jauhettiin huolellisesti typpiatmosfäärissä ja kuivattiin tyhjössä fosforipentoksidilla (40 tuntia huoneen lämpötilassa ja 17 tuntia 45-50°:ssa), jolloin saatiin 4562,5 g vaaleankeltaista jauhetta. Tämän aineen ydinmagneettinen resonanssispektri ja ele-mentaarianalyysi osoittivat että siinä oli natriumasetaattia (0,1 moolia), etikkahappoa (0,5 moolia) ja etanolia (0,15 moolia). Tuotteesta lisättiin 2000 g annoksittain 11,5 litraan voimakkaasti hämmennettyä jääetikkaa 20 minuutin kuluessa. Seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan, sen jälkeen liuos tehtiin kirkkaaksi suodattamalla. Suodos laimennettiin etanolilla (26,0 1) ja saatua seosta hämmennettiin 2 tuntia. Liuotin poistettiin (suoda-tinkynttilät), sen jälkeen kiinteä aine pestiin kahdesti suspendoi-malla uudestaan etanoliin (7,0 1, sitten 15,0 1), kerättiin suodat-timelle ja kuivattiin pyörivässä haihduttimessa alennetussa paineessa. Ydinmagneettisella resonanssilla voitiin todeta että valkoinen kiinteä aine (1989 g) sisälsi etikkahappoa (1,25 moolia) ja etanolia (0,25 moolia). Tästä aineesta liuotettiin 1974 g:n määrä veteen (4,0 1) ja vesipitoinen liuos laimennettiin etanolilla (16,0 1). Saatua seosta hämmennettiin 30 minuuttia ja sen jälkeen saostuneen öljyn annettiin laskeutua. Vesipitoinen etanoliliuos poistettiin ja öljy pestiin kerran etanolilla (3,5 1). Tämä aine, joka sisälsi etikkahappoa (0,03 moolia) ja etanolia (0,8 moolia) määritettynä ydinmagneettisella resonanssilla, liuotettiin veteen (32,1 1). Vesipitoinen liuos tehtiin kirkkaaksi suodattamalla ja sen jälkeen se jäähdytyskuivattiin, jolloin saatiin 1512,4 g höytelömäistä keltaista kiinteätä ainetta.
Analyysi:
Laskettu CgHgNOgP · 2 Na · H20 - 0,03 C2^/p2 · 0,35 C2H60 C H N P Na 24,23 3,68 4,18 9,24 13,72
Saatu 24,39 3,56 4,15 9,03 13,44
Spektriarvot:
Ydinmagneettinen resonanssi (D20) 6 1,19 (t, etanolin -CH^); 2,11 (s, etikkahapon -CH^); 2,83 (d, 2, J=20 Hz, -CH2 α-asemassa P:hen); 2,87 (d, 2, -CH2 a-asemassa -CH:ään); 3,67 (q, etanolin -CH2); 4,61 (t, 1, -CH). Optinen kierto:
Havaittu 2 2 (a)D + 14»68 (c, 1,873 vedessä).
16 65261
Kromatograf ia:
Ohutkerroskromatografia (selluloosa, Quanta/Gram Q2F-lasilevyt)
Liuotinsysteemi R^-arvo 1. litiumkloridi (0,6 M)-etanoli-ammonium- hydroksidi (5:5:1) 0,65 2. etanoli-vesi (2:3) 0,33 3. etanoli-ammoniumhydroksidi-vesi (6:1:3) (pitkä) 0,31 4. n-butanoli-etikkahappo-vesi (5:2:3) 0,28 Määritys:
Fospray (kaupallinen reagenssi, jota käytetään fosforipitoisten yhdisteiden osoittamiseksi).
Tulokset:
Yhdiste liikkuu yhtenä täplänä kussakin liuotinsysteemissä. Puhtaan suolan suurmittakaavatuotantoon tähtäävän kehitystyön tuloksena on eräitä potentiaalisesti vaikeita käsittelyongelmia voitu ratkaista. Dibentsyyli-PALA:n sykloheksyyliamiinisuola valmistetaan lisäämällä noin 0,9- noin 1,0 sykloheksyyliamiiniekvivalent-tia dibentsyyli-PALA:n asetoniliuokseen. Tuote on liukenematon asetoniin kun taas suuri osa epäpuhtauksista jää liuokseen. Tuotteen puhtaus voidaan parantaa hyväksyttäväksi kiteyttämällä uudestaan absoluuttisesta metanolista.
Eräitä vaikeuksia esiintyy käytettäessä dioksaania dibentsyyli-PALA: n valmistuksessa. Trietyyliamiini-hydrokloridi on liukenematon reaktiosivutuote ja tarvitaan suuria määriä liuotinta riittävän sekoituksen ylläpitämiseksi. Lisäksi reaktio on eksoterminen ja dioksaanin käyttö rajoittaa jäähdyttämisen noin 12°:seen, joka on dioksaanin jäätymislämpötila.
Tässä reaktiossa dioksaanin asemesta käytetty liuotin oli me-tyleenikloridi. Tällä liuottimena on seuraavat edut: a) se on palamaton; b) se sallii alhaisempien jäähdytyslämpötilojen käytön; c) liuotintilavuus vähenee puoleen; d) trietyyliamiinihydro-kloridin poistaminen suodattamalla on eliminoitu koska se liukenee reaktioseokseen; ja e) liuottimen poishaihduttaminen ennen edelleen-käsittelyä ei enää ole tarpeen.
Muut parannukset käsittävät sen että sykloheksyyliammonium-suola hydrolysoituu suoraan tetranatrium-PALA:ksi. Tämä eliminoi sen ylimääräisen työvaiheen, jossa dibentsyyli-PALA vapautetaan amii-nisuolasta ennen hydrolyysiä.
6 5 2 61 17
Viimeisenä näkökohtana voidaan mainita että hydrolyysiin tarvittavan veden tilavuus on voitu vähentää 63 %:lla verrattuna alkuperäisessä synteesityössä käytettyyn määrään. Tämä luonnollisesti sallii suurempien määrien valmistamisen samaa laitteistoa käyttäen. Laboratoriomittakaavassa tätä menetelmää on käytetty dinatrium-PALA:n valmistamiseksi 2 kg:n erinä, käytettäessä maksimaalisesti 50 litran pulloja. Käyttäen kaikkia edellämainittuja parannusmuunnoksia on menestyksellisesti suoritettu työsarjoja joissa on käytetty 50 ja 100 gallonan Pfaudler'eitä. Täydessä mittakaavassa voidaan keksinnön kohteena olevaa ainetta valmistaa aina noin 15 kg:n määrinä työ-sarjaa kohti käyttäen tämän suuruista laitteistoa.
Nykyisellä kehitysasteella olevaa menetelmää rajoittaa vain laitteiston koko.
Nykyisten menetelmien mukaan on halutun dinatrium-PALA-aineen puhtaus voitu nostaa tasolle, joka on hyväksyttävä parenteraalista annostusta varten sopivassa kantaja-aineessa ihmissyövän hoitamiseksi, erityisesti suurmittakaavaista tutkimustyötä varten. Tähän on päästy (1) eliminoimalla täydellisesti etikkahappo ja natriumasetaat-ti käyttäen pyörteissaostusta; ja (2) eristämällä dibentsyyli-PALA sykloheksyyliammoniumsuolana. Lisäksi on menetelmää optimoitu suurempaan mittakaavaan siirtymisen helpottamiseksi ja proses-sitoimenpiteisiin liittyvät ongelmat on ratkaistu.
Esimerkki 7:
Fosfonoasetyylikloridi (III) Hämmennettyyn seokseen, jossa on fosfonoetikkahappoa (II) (2000 g* 14,28 moolia), N,N-dimetyyliformamidia (208,8 g; 2,856 moolia) ja dioksaania (7,15 1) lisättiin tipoittain tionyylikloridia (3568 g; 29,99 moolia) 1,5 tunnin aikana. Lämpötila pidettiin alle 30° lisäyksen aikana. Saatua liuosta kuumennettiin 45°:ssa 2,5 tuntia ja jäähdytettiin sitten 5°:seen. Vettä (283 ml; 15,7 moolia) liuotettuna dioksaaniin (2,5 1) lisättiin sitten tipoittain 2 tunnin aikana. Lämpötila pidettiin alle 10° lisäyksen aikana. Tätä happo-kloridin (III) liuosta hämmennettiin 5-10°:ssa 40 minuuttia ja käytettiin sitten seuraavassa reaktiossa ilman enempää karakterisointia. Suoritettiin toinen klooraus samanaikaisesti samoissa olosuhteissa käyttäen identtisiä määriä reagenssia.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dibentsyyliesteri (IV) Hämmennettyyn suspensioon, jossa oli N-asparagiinihappo-dibent-syyliesterin p-tolueenisulfonaatti (I) (4625 g; 9,525 moolia) diok- saanissa (20,0 1), jäähdytettiin 15°:seen sen jälkeen lisättiin tri- 18 65261 etyyliamiinia (4820 g; 47,63 moolia) ohuena virtana tunnin kuluessa. Saatua liuosta hämmennettiin 20 minuuttia, sen jälkeen fosfonoasetyy-likloridin (III) edellä mainittu liuos, joka oli valmistettu 14,28 moolista vastaavaa happoa, lisättiin tipoittain 5 tunnin kuluessa. Lämpötila pidettiin alle 20° lisäyksen aikana. Sen jälkeen lisättiin lisää trietyyliamiinia (1162 g; 11,48 moolia) ja reaktioseosta hämmennettiin tunnin verran. Annettiin seistä 8 tuntia huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen seos laimennettiin asetonilla (5,5 1), hämmennettiin 15 minuuttia, minkä jälkeen liukenemattomat aineosat kerättiin suodattimelle ja pestiin dioksaanilla (10,0 1). Suoritettiin toinen reaktio samanaikaisesti samoissa olosuhteissa, käyttäen identtisiä määriä aineita. Molemmista sarjoista saadut suodokset yhdistettiin ja haihdutettiin pyörivässä haihduttimessa tyhjössä. Jäännös (oranssinvärinen viskoosi öljy) liuotettiin metyleenikloridiin (110,0 1), sen jälkeen orgaaninen liuos pestiin varovasti vedellä (6 x 30,0 1),. Sen jälkeen kun liuos oli kuivattu natriumsulfaatilla (11,3 kg) ja magnesiumsulfaatilla (2,3 kg) liukenemattomat aineosat suodatettiin pois (Celite-tyyny), suodos haihdutettiin tyhjössä va-kiopainoon; dibentsyyli-PALA:n (IV) saanto oli 7970 g (96,1 %). Tämä keltainen viskoottinen öljy oli sopiva seuraavia muutosreaktioi-ta varten.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-dibentsyyliesterin-syklohek- syyliamiinisuola__
Sykloheksyyliamiinia (1815 g; 18,30 moolia) lisättiin tipoittain kylmään (7°) hämmennettyyn liuokseen, jossa oli N-(fosfonoasetyyli) -L-asparagiinihapon dibentsyyliesteriä (IV) (7970 g; 18,30 moolia) asetonissa (24,0 1) 1,25 tunnin ajan. Lämpötila pidettiin alle 15° lisäyksen aikana. Jäähdytyshaude poistettiin ja saatua seosta hämmennettiin tunnin ajan. Seosta varastoitiin huoneen lämpötilassa 6 tuntia, sen jälkeen saostunut kiinteä aine kerättiin suodattimelle, pestiin asetonilla (15,0 1) ja kuivattiin; saanto 4932 g; sul.p. 176,5-177,5°. Tämä aine kiteytettiin uudestaan kiehuvasta metanolista (35,0 1) ja kuivattiin, jolloin saatiin 1663 g puhdistettua suolaa, sul.p. 178-181°; emäliuos väkevöitiin tyhjössä 20,0 litran tilavuuteen. Liuos laimennettiin asetonilla (6,0 1) ja jäähdytettiin (-10°) jolloin saatiin vielä 967 g tuotetta, sul.p. 177-18o°. Kolmas erä ainetta (429 g) saatiin haihduttamalla edellämainittu me-tanoli-asetonisuodos melkein kuiviin ja suspendoimalla jäännös asetoniin (5,0 1); kokonaismäärä puhdistettua amiinisuolaa joka sopii seuraavia muutosreaktioita varten oli 3059 g (62,0 %:n talteenotto).
19 65261 N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatriumsuola (V)
Kylmään (5°), hämmennettyyn liuokseen, jossa oli natriumhydrok-sidia (1291 g; 32,28 moolia) vedessä (20,5 1) lisättiin annoksittain 30 minuutin kuluessa N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-dibent-syyliesterin sykloheksyyliamiinisuolaa (3059 g; 5,378 moolia). Reak-tioseosta hämmennettiin 5-15°:ssa 3,5 tuntia, uutettiin sitten mety-leenikloridilla (2 x 8,5 1) ja eetterillä (1 x 8,5 1). Vesiliuos tehtiin kirkkaaksi suodattamalla, väkevöitiin tyhjössä (<35°; 3-5 mm Hg) 14,6 litran tilavuuteen ja laimennettiin sitten etanolilla (51,4 1). Saatua seosta hämmennettiin tunnin verran ja pidettiin huoneen lämpötilassa 12 tuntia. Vesipitoinen etanoliliuos poistettiin jolloin saatiin raakaa yhdistettä (V) vaaleankeltaisena öljynä, joka oli sopiva seuraavia muutosreaktioita varten.
N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon dinatriumsuola Jääetikkaa (8,9 1) lisättiin edellä saostettuun öljyyn (raakaa N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihapon tetranatriumsuolaa (V), joka on valmistettu 3059 g:sta amiinisuolaa). Seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, sen jälkeen liivatemainen liukenematon aine suodatettiin pois. Kirkas vaaleankeltainen suodos laimennettiin etanolilla (24,0 1). Saatua seosta hämmennettiin 1,75 tuntia, sen jälkeen saostunut aine kerättiin suodattimelie. Kiinteä aine suspendoitiin etanoliin (14,5 1) ja seosta hämmennettiin voimakkaasti tunnin verran. Tuote kerättiin neljälle suodattimetle ja kuivattiin sitten osittain pyörivässä haihduttimessa tyhjössä (30-45°; aspiraattorin paine tällöin 3-5 mm Hg). Kokkaremainen aine (2870 g) liuotettiin veteen (5,25 1), sen jälkeen liuos tehtiin kirkkaaksi suodattamalla, sen jälkeen suodos (noin 6,9 litran tilavuus) laimennettiin etanolilla (21,0 1). Saatua seosta hämmennettiin sen jälkeen 30 minuuttia, sen jälkeen saostuneen öljyn annettiin laskeutua (1 tunti) . Vesipitoinen etanoliliuos poistettiin ja öljy pestiin kerran etanolilla (4,3 1). Tämä aine liuotettiin veteen (8,15 1) ja liuos (9,8 1) jaettiin 3 osaan (2 niistä oli 4,0 1; yksi 1,8 1). Kukin annos lisättiin 13 tunnin sisällä keskelle voimakkaasti hämmennettyä etanolia (10 x veden tilavuus: 2 x 40,0 1; 1 x 18,0 1). Seoksia hämmennettiin 2 tuntia, minkä jälkeen vesi-etanoliliuokset sifonoi-tiin pois, ja kolmesta saostuksesta saatu kiinteä aine yhdistettiin. Tätä ainetta hämmennettiin 30 minuuttia etanolissa (10, 1 1), kerättiin suodattimelle ja kuivattiin vakiopainoon tyhjössä huoneen lämpötilassa fosforipentoksidilla. Kuiva tuote (1748,0 g) puristettiin 150 μ:n ruostumatonta terästä olevan seulan läpi ja sekoitettiin huo-
2Q
65261 lellisesti, jolloin saatiin dinatrium-PALA:a valkoisena jauheena. Analyysi:
Laskettu C6H? gNOgP * 2,4 Na * 2 H20 · 0,5 C^HgO
C H N P Na 22,91 4,01 3,82 8,44 15,04
Saatu 23,16 3,76 3,79 8,57 15,18
Natriumanalyysi osoittaa että koostumus sisältää 60 % di-Na-PALA:a 40 % tri-Na-PALA:a Empiirisestä kaavasta laskettuna: % H20 = 9,8 % % EtOH = 6,3 %
Spektriarvot:
Ydinmagneettinen resonanssi (D20) δ 1,17 (t, 1,5, etanolin -CH-j) j 2,74 (d, 2, -CH2 a-ase-massa -CH:ään) ; 2,77 (d, 2, J=20 Hz, -CH2 ct-asemassa P: hen)i 3,63 (q, 1, etanolin -CH2); 4,48 (t, 1, -CH). Optinen kierto:
Havaittu (a)^'^ + 14,73 (c, 2,098 vedessä).
Kromatografia:
Ohutkerroskromatografia (selluloosa, Quanta/Gram Q2F-lasilevyt)
Liuotinsysteemi R^-arvo 1. litiumkloridi (0,6 M) -etanoli-airunonium- hydroksidi (5:5:1) 0,52 2. etanoli-vesi (2:3) 0,72 3. etanoli-ammoniumhydroksidi-vesi (6:1:3) 0,16 (pitkä) 4. n-butanoli-etikkahappo-vesi (5:2:3) 0,22 (häntä) Määritys: (a) ninhydriini (b) fospray
Tulokset:
Yhdiste liikkuu yhtenä fospray-positiivisena täplänä kussakin liuotinsysteemissä. Asparagiinihappoa ei havaittu suihkutuk- sen jälkeen ninhydriinillä.
21 65261
Esimerkki 8: N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-dibentsyyliesterin syklohek-syyliamiinisuola 138 g (0,317 moolia) N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-dibentsyyliesteriä liuotettiin asetoniin (500 ml). Hämmennetty liuos jäähdytettiin 10°:seen, sen jälkeen lisättiin sykloheksyyliamiinia (69,2 g; 0,700 moolia) tipoittain 30 minuutin kuluessa. Saatua suspensiota hämmennettiin huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Saostunut kiinteä aine kerättiin suodattimelle ja pestiin asetonilla (500 ml) ja eetterillä (400 ml) ja kuivattiin, jolloin saatiin 47,2 g N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-dibentsyyliesteri-sykloheksyy-liamiinisuolaa. 24,8 g tätä ainetta kiteytettiin uudestaan kiehu vasta metanolista (500 ml), jolloin saatiin 18,3 g (73,8 %:n saanto) puhdistettua sykloheksyyliamiinisuolaa, sul.p. 186-188°.
Claims (3)
1. Menetelmä farmakologisia ominaisuuksia omaavan N-(fosfono-asetyyli)-L-asparagiinihappo-dinatriumsuolan (dinatrium-PALA:n) valmistamiseksi, tunnettu siitä, että N-(fosfonoasetyyli)-L-asparagiinihappo-tetranatriumsuola (tetranatrium-PALA) liuotetaan jääetikkaan, muodostunut dinatrium-PALA saostetaan lisäämällä etanolia ja otetaan talteen.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että saatu dinatrium-PALA saostetaan kahdesti vedestä, jolloin toisen saostuksen aikana lisätään dinatrium-PALA:n vesipitoinen liuos tipoittain keskelle voimakkaasti hämmennettyä etanolia, jääetikan ja natriumasetaatin muodossa olevien epäpuhtauksien poistamiseksi.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineena käytetty tetranatrium-PALA valmistetaan saattamalla L-asparagiinihappo reagoimaan bentsyylialkoholin ja p-tolueenisulfonihapon kanssa, edullisesti perkloorietyleenin läsnäollessa L-asparagiinihappo-dibentsyyliesteri-p-tolueenisulfonaatin valmistamiseksi, joka trietyyliamiinin läsnäollessa saatetaan reagoimaan fosfonoasetyylikloridin kanssa PALA-dibentsyyliesterin valmistamiseksi, joka erotetaan, edullisesti pesemällä vedellä, reagoimattomasta fosfonoasetyylikloridista ja hydrolysoidaan sellaisenaan tai N,N'-dibentsyylietyleenidiamiinisuolan tai sykloheksyyliamiini-suolan muodossa tetranatrium—PALA:a sisältävän tuoteseoksen valmistamiseksi, joka haluttaessa muutetaan vapaaksi hapoksi ionivaihto-käsittelyllä ja titrataan natriumhydroksidilla pH-arvoon 9,2 puhtaan tetranatrium—PALA:n valmistamiseksi. li
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US85138277A | 1977-11-14 | 1977-11-14 | |
| US85138277 | 1977-11-14 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI783467A FI783467A (fi) | 1979-05-15 |
| FI65261B true FI65261B (fi) | 1983-12-30 |
| FI65261C FI65261C (fi) | 1984-04-10 |
Family
ID=25310650
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI783467A FI65261C (fi) | 1977-11-14 | 1978-11-14 | Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt anvaendbart dinatriumsalt av n-(fosfonoacetyl)-l-asparaginsyra |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5492920A (fi) |
| AT (1) | AT374485B (fi) |
| AU (1) | AU520966B2 (fi) |
| CA (1) | CA1110266A (fi) |
| CH (1) | CH636595A5 (fi) |
| DE (1) | DE2849396A1 (fi) |
| DK (1) | DK149134C (fi) |
| FI (1) | FI65261C (fi) |
| FR (1) | FR2408617A1 (fi) |
| GB (2) | GB2008118B (fi) |
| GR (1) | GR65247B (fi) |
| NL (1) | NL7811252A (fi) |
| NZ (1) | NZ188909A (fi) |
| SE (1) | SE439774B (fi) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4284579A (en) * | 1979-07-17 | 1981-08-18 | The United States Of America As Represented By The Of The Department Of Health & Human Services | (N-Phosphonacetyl-L-aspartato)(1,2-diaminocyclchexane)platinum(II) or alkali metal salt |
-
1978
- 1978-11-13 AU AU41528/78A patent/AU520966B2/en not_active Expired
- 1978-11-14 SE SE7811736A patent/SE439774B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-11-14 DE DE19782849396 patent/DE2849396A1/de not_active Withdrawn
- 1978-11-14 CH CH1170578A patent/CH636595A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1978-11-14 GB GB7844508A patent/GB2008118B/en not_active Expired
- 1978-11-14 AT AT0813278A patent/AT374485B/de active
- 1978-11-14 JP JP13947278A patent/JPS5492920A/ja active Pending
- 1978-11-14 GB GB8024584A patent/GB2051070B/en not_active Expired
- 1978-11-14 GR GR57650A patent/GR65247B/el unknown
- 1978-11-14 CA CA316,224A patent/CA1110266A/en not_active Expired
- 1978-11-14 NZ NZ188909A patent/NZ188909A/xx unknown
- 1978-11-14 FR FR7832098A patent/FR2408617A1/fr active Granted
- 1978-11-14 FI FI783467A patent/FI65261C/fi not_active IP Right Cessation
- 1978-11-14 DK DK506278A patent/DK149134C/da not_active IP Right Cessation
- 1978-11-14 NL NL7811252A patent/NL7811252A/xx not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SE7811736L (sv) | 1979-05-15 |
| DK149134C (da) | 1986-07-14 |
| DK506278A (da) | 1979-05-15 |
| CH636595A5 (fr) | 1983-06-15 |
| AU520966B2 (en) | 1982-03-11 |
| GB2008118A (en) | 1979-05-31 |
| AT374485B (de) | 1984-04-25 |
| DK149134B (da) | 1986-02-10 |
| NZ188909A (en) | 1980-10-08 |
| DE2849396A1 (de) | 1979-05-17 |
| NL7811252A (nl) | 1979-05-16 |
| SE439774B (sv) | 1985-07-01 |
| FR2408617A1 (fr) | 1979-06-08 |
| FR2408617B1 (fi) | 1983-11-18 |
| GB2008118B (en) | 1982-08-04 |
| ATA813278A (de) | 1983-09-15 |
| FI783467A (fi) | 1979-05-15 |
| AU4152878A (en) | 1979-05-24 |
| JPS5492920A (en) | 1979-07-23 |
| CA1110266A (en) | 1981-10-06 |
| GB2051070B (en) | 1982-08-04 |
| FI65261C (fi) | 1984-04-10 |
| GB2051070A (en) | 1981-01-14 |
| GR65247B (en) | 1980-07-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2002360682B2 (en) | Process for preparing water-soluble phosphonooxymethyl derivatives of alcohol and phenol | |
| KR100347423B1 (ko) | 구아니딘알킬-1,1-비스포스폰산유도체,이의제조방법및이를함유하는약제 | |
| EP0219936B1 (en) | Novel platinum complexes | |
| DE68906183T2 (de) | 2'-desoxy-5-fluoruridinderivate. | |
| EP1916251A1 (en) | Erianin salts, their preparation methods and pharmaceutical compositions containing the same | |
| FI91966C (fi) | Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden alkyylifosfonoseriinien valmistamiseksi | |
| FI65261B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt anvaendbart dinatriumsalt av n-(fosfonoacetyl)-l-asparaginsyra | |
| CA1315278C (fr) | Derives n-(vinblastinoyl-23) d'acide amino-1 methylphosphonique, et leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
| US4348522A (en) | N-(phosphonacetyl)-L-aspartic acid salts with piperazine, cyclohexylamine and calcium | |
| KR100255436B1 (ko) | 옥타데실-[2-(n-메틸피페리디노)-에틸]-포스페이트, 이의 제조방법 및 이 화합물을 포함하는 약제 | |
| EP0128370B1 (en) | Diazotetracyclic compounds and process for preparing the same | |
| US4215070A (en) | N-(Phosphonoacetyl)-L-aspartic acid compounds and methods for their preparation | |
| US4267126A (en) | N-(Phosphonoacetyl)-L-aspartic acid compounds | |
| EP3456725A1 (en) | Pentafluorophosphate derivative, its uses and an appropriate manufacturing method | |
| EP0548834B1 (en) | Stable hexahydrate of etoposide 4'-phosphate disodium salt | |
| US4179464A (en) | Preparation of N-(phosphonoacetyl)-L-aspartic acid | |
| JP3688304B2 (ja) | 燐脂質誘導体、該誘導体の製造法、該誘導体の精製法、該誘導体を含有する医薬品および該医薬品の製造法 | |
| EP0302181B1 (en) | A process for preparing platinum-(ii)-cis-dichlorobis-(trishydroxymethylphosphine) | |
| CA2112250A1 (en) | Dimethylamino-hydroxy-alkan diphosphonic acids and pharmaceutical compositions containing them | |
| US20040138182A1 (en) | Colchicine derivatives, process for preparing them, products obtained therefrom and use thereof | |
| KR940007419B1 (ko) | 고순도의 l-아스코빌-2-인산에스테르마그네슘의 정제방법 | |
| KR20030046269A (ko) | 엘-아스코빌-2-인산에스테르마그네슘의 제조방법 | |
| JPS5920274A (ja) | セレン含有化合物及びそれを有効成分とする医薬 | |
| JPH0948793A (ja) | ３′−アジド−３′−デオキシチミジル−（５′，５′）−２′，３′−ジデオキシ−５′−イノシン酸（ａｚｔ−ｐ−ｄｄｉ）カルシウム塩、その製造法及びその用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: STARKS ASSOCIATES INC. |