CZ20011145A3 - Antivirové purinové deriváty a jejich použití - Google Patents

Abstract

Sloučeniny obecného vzorce I, kde Ar je arylová skupina; Ř1 a R2 znamenají nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu, arylovou skupinu; X je atom kyslíku, skupina NH, skupina NR4 nebo atom síry, kde R4 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu; R5 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, přičemž R1 a R5 mohou být spojeny tak, že tvoří 5- nebo 6-členný kruh; a R3 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, arylovou skupinu, heterocyklickou skupinu, polycyklickou skupinu, sloučeniny vykazují jak antivirové účinky, tak stabilitu v kyselém prostředí a jsou použitelné při léčení virových infekci, zejména infekcí virem HIV a HBV. Jako příklad sloučeniny podle předmětného vynálezu je možné uvést O- [fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6- (cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-1 - methanolu.

Description

Antivirové purinové deriváty a jejich použiti

Oblast techniky

Předmětný vynález se týká chemických sloučenin, zejména takových chemických sloučenin, které jsou vhodné pro použití jako antivirová činidla. Předmětný vynález se dále týká terapeutického použití sloučenin podle předmětného vynálezu, farmaceutického prostředku, který obsahuje sloučeniny podle tohoto vynálezu a použití sloučenin podle předmětného vynálezu pro výrobu léčiva.

Dosavadní stav techniky

Od objevení lidského syndromu získaného selhání imunity (AIDS) je značná část vědeckého výzkumu zaměřena na pochopení jeho mechanismu a na vyvinutí způsobů léčení tohoto syndromu. Jako předpokládaný etiologický činidel u AIDS byl identifikován virus.HIV (z anglického označení human immunodef iciency virus). V současné době existuje mnoho publikovaných statí, které se týkají použití širokého spektra chemických sloučenin, které vykazují antivirové účinky proti viru HIV, proti viru, který způsobuje onemocnění hepatitidou typu B (který se běžně označuje zkratkou HBV), proti herpes viru a proti dalším virům.

Jednou ze tříd sloučenin, které vykazuji antivirové účinky, a které jsou předmětem velkého počtu vědeckých programů, jsou analogy nukleosidů.

·· ···'· · · · (···· • · · · · · · 'e · · • '· » » · ······« · · ' · · « · · · · · · ·· ···· »» ·· ··· je „abacavir, což je publikace Foster R. H. á

Příkladem takovéto sloučeniny substituovaný analog adeninu (viz.

Faulds D. Drugs, 1998, 55, 729-736). Tato sloučenina začala . · být klinicky využívána, díky její potenciální aktivitě a stabilitě, která byla u této sloučeniny pozorována před jejím uvedením do klinické praxe.

Mezinárodní přihláška PCT/GB96/00580 se týká třídy analogů nukleosidů, které jsou údajně vysoce aktivní vzhledem k HIV. Konkrétně se mezinárodní přihláška PCT/GB96/00580 týká sloučenin, které jsou údajně vysoce účinnými in vitro virovými inhibitory jak v TK' buňkách, tak v TK⁺ buňkách. Sloučeninami, které jsou popsány v uvedené mezinárodní přihlášce

PCT/GB96/00580 jsou fosforamidáty purinových nebo pyrimidinových analogů nukleosidů. Nicméně takovéto sloučeniny mohou vykazovat chemickou nestabilitu, například vůči kyselinám, nebo biologickou nestabilitu, například vůči. fosforylase nukleosidů,.která se projevuje štěpením glykosidové vazby. Z této skutečnosti vyplývající deaktivace může být příčinou omezení potenciální klinické účinnosti těchto sloučenin.

Nicméně sloučenina, která má být potenciálně užitečná pro potřeby klinického testování, musí kromě mnoha dalších vlastností vykazovat rovněž, alespoň při in vitro testech, dostatečnou a požadovanou antivirovou aktivitu. Uvedené další vlastnosti zahrnují v prvé řadě dobré farmakokinetičké vlastnosti, dostatečnou stabilitu sloučeniny, aby byla umožněna snadná manipulace s touto sloučeninou a její snadné dodávání, a dostatečně nízkou toxicitu, aby bylo možné danou ·· · · 9 · 9 9« ·

9 9 9 ♦.»·' 9 9 99 • «·· 9 9 .999 9 9 ' 9 • 9 9 9 · 99999«· « * • · · 9 9 9 9 · ·

9 99 99 9 9 4 9» 9 99 · ' sloučeninu podávat pacientovi, u kterého je potřeba léčit danou virovou infekci, s přijatelnou mírou vedlejších účinků.

Avšak v praxi velice často dochází ke zjištění, že pokusy o modifikaci sloučeniny vykazující in vitro antivirovou aktivitu, prováděné za účelem zlepšení shora uvedených dalších vlastností této sloučeniny, mohou vést ke snížení antivirové aktivity, kterou tato sloučenina vykazuje. Kromě dosud uvedených vlastností je třeba, aby jakoukoli sloučeninu navrženou pro.klinické testování, bylo v ideálním případě rovněž možné snadno podávat a připravit ekonomicky přijatelným způsobem.

Předmětem tohoto vynálezu tedy je nová třída sloučenin,. které vykazují výraznou antivirovou aktivitu, zejména proti viru HIV a/nebo HBV, přičemž tyto sloučeniny zároveň mají dobré farmakokinetické vlastnosti a dobrou stabilitu a vykazují dostatečně nízkou toxicitu, takže je možné je označit za sloučeniny s vlastnostmi, které jsou vhodné pro klinické použití.

Podstata vynálezu

Předmětný vynález se týká sloučeniny obecného vzorce (I)

kde

Ar je arylová skupina;

R¹ a R² jsou nezávisle na sobě vybrané ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu a arylovou skupinu;

X je vybraná ze skupiny zahrnující atom kyslíku, skupinu NH, skupinu NR⁴ a atom síry kde

R⁴ je vybraná ze skupiny zahrnující alkylovou skupinu a arylovou skupinu;

R⁵ je vybraná ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu a arylovou skupinu, přičemž pokud obě skupiny R¹ a R⁵ představují alkylové skupiny, ·· <· ·« » «« .· • · · · * 4 « « · ·

9 4 9 9 '9 9 9 · • 9 · · ···»··· « 9

9 999 9 9 · 4 · 9*9 mohou být spojeny tak, že tvoří 5- nebo 6-členný kruh; a

R³ je vybraná ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu, arylovou skupinu, heterocyklickou skupinu a polycyklickou skupinu, nebo farmaceuticky přijatelných derivátů nebo metabolitů uvedené sloučeniny.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž spadají soli a fyziologicky funkční deriváty shora definovaných sloučenin.

Pojmem alkyl nebo alkylová skupina se v tomto textu rozumí rozvětvený nebo nerozvětvený, cyklický nebo acyklický, nasycený nebo nenasycený (např. alkenylový nebo alkinylový) hydrokarbylový zbytek. Pokud je uvedená alkylová skupina cyklická, obsahuje výhodně od 3 do 12 atomů uhlíku, výhodněji od 5 do 10 atomů uhlíku a ještě výhodněji od 5 do 7 atomů uhlíku. Pokud je uvedená alkylová skupina acyklická, obsahuje výhodně od 1 do 16 atomů uhlíku, výhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku a ještě výhodněji je touto skupinou methylová skupina nebo ethylová skupina.

Pojmem aryl nebo arylová skupina se v tomto textu rozumí aromatická skupina, jako je fenylová skupina nebo naftylová skupina, nebo heteroaromatická skupina obsahující jeden nebo více, výhodně však jeden heteroatom, jako například atom kyslíku, atom dusíku a/nebo atom síry, jako je pyridylová skupina, pyrrolylová skupina, furanylová skupina a ·· 9 9 99. 9

9 9' 9 » · · · · thiofenylová skupina. Výhodnou arylovou skupinou je fenylová nebo-substituovaná fenylová skupina.

. Uvedené alkylové a arylové skupiny mohou být substituované nebo nesubstituované, výhodně však jsou nesubstituované. Pokud jsou tyto skupiny substituované, obsahují obecně 1 až substituenty, výhodně 1 substituent. Uvedené substituenty mohou být vybrány ze skupiny zahrnující atomy halogenů a halomethylové skupiny, jako je trifluormethylová skupina (CF₃) a trichlormethylová skupina (CC1₃) ; skupiny obsahující kyslík, jako je oxoskupina, hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karboxyalkýlová skupina, alkoxylové skupina, alkoylová skupina, alkoyloxyskupína, aryloxyskupina, aryloylová skupina a aryloyloxyskupina; skupiny obsahující dusík, jako jeaminoskupina, alkylaminoskupina, dialkylaminoskupina, . kyanoskupina, azidová skupina a nitroskupina; skupiny obsahující síru, jako je thiolová skupina, alkylthiolová skupina, sulfonylová skupina a sulfoxidová skupina, heterocyklická skupina,. která může být. sama o sobě substituovaná; alkylové skupiny, které mohou být samy a sobě substituované; a arylové skupiny, které.mohou být samy a sobě substituované, jako je fenylová skupina a substituovaná fenylová' skupina. Alkylovou skupinou se rozumí také benzylová a substituovaná benzylová skupina. Pojmy alkoxylová skupina a aryloxylová skupina ‘se v tomto textu rozumí alkyl-O- skupina, respektive aryl-O- skupina. Pojmy alkoylová skupina a aryloylová skupina se v tomto textu rozumí alkyl-CO- skupina, respektive aryl-CO- skupina.

Pojmem heterocyklická skupina se v tomto textu rozumí skupiny obsahující jeden,nebo více, případně přemostěných kruhů, které obsahují celkem 1 až 6 heteroatomů..Každý kruh v uvedené skupině může celkem obsahovat -od 3 do 12 atomů, výhodně od 1 do 6 atomů. Alespoň jeden kruh přítomný v uvedené •skupině obsahuje 1 až 2 heteroatomy. Pokud daná skupina obsahuje dva nebo více kruhů, mohou tyto kruhy'být kondenzované nebo nekondenzované. Uvedené kruhy'mohou rovněž obsahovat nenasycené vazby. Heteroatomy jsou vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, atom síry a atom dusíku. Jako příklad takovéto heterocyklické skupiny obsahující jeden nebo více je možné uvést pyrrolylovou skupinu, imidazolylovou skupinu, pyrazolylovou skupinu, thiazolylovou skupinu, isothiazolylovou skupinu, oxazolylovou skupinu, pyrrolidinylovou skupinu, pyrrolinylovou skupinu, imidazolidinylovou skupinu, imidazolinylovou. skupinu, pyrazolidinylovou skupinu, tetrahydrofuranylovou skupinu, pyranylovou skupinu, pyronylovou,skupinu, pyridylovou skupinu, pyrazinylovou skupinu, pyridazinylovou skupinu, piperidylovou skupinu, piperazinylovou skupinu, morfolinylovóu skupinu, thionaftylovou- skupinu, benzofuranylovou skupinu, isobenzofuranylovou skupinu, indolylovou skupinu, oxyindolylovou skupinu, isoindolylovou skupinu, indazolylovou skupinu, indolinylovou. skupinu, 7-azaindolylovou skupinu, isoindazolylovou skupinu, benzopyranylovou skupinu, kumarinylovou skupinu, isokumarinylovou skupinu, chinolylovou skupinu, isochinolylovou skupinu, napthridinylovou skupinu, cinnolinylovou skupinu, chinazolinylovou skupinu, pyridopyridylovou skupinu, benzoxazinylovou skupinu, chinoxadinylovou skupinu, chromenylovou skupinu, chromanylovou skupinu, isochromanylovou skupinu a karbolinylovou skupinu.

• · 4 9 4	• 4	4 9 4 4 4	4. 9 · 4 4 4 4	4 4 4
4 4'. 9 <· * 4 • 4	4 4 4 «	4 4 9 4	4 4 4	4 4
~ 4 4	4 4 4 4		4 4	9	4 4		4 4

Pojmem polycyklická skupina se v tomto textu rozumí skupina zahrnující dva nebo více nearomatických karbocyklických nebo heterocyklických kruhů, které mohou být samy o sobě substituované. Uvedená skupina výhodně obsahuje 2 až 4 kondenzované nebo nekondenzované kruhy, přičemž každý z těchto kruhů vhodně obsahuje od 3 do 12 atomů, vhodněji od 4 do 10 atomů a ještě vhodněji od 5 do 7 atomů, úplně nej vhodněji od 5 do 6 atomů. Definice uvedené výše pro cyklické alkylové skupiny a heterocyklické kruhy, se vztahují rovněž na kruhy obsažené v uvedené polycyklické skupině.

Pojmem halogen nebo atom halogenu se v tomto textu rozumí zbytek, kterým je atom fluoru, atom chloru, atom bromu nebo atom jodu, výhodně atom fluoru nebo atom chloru.

Skupina Ar zahrnuje substituovanou nebo nesubstituovanou arylovou skupinu, přičemž pojem „arylová skupina a její možná substituce uvedené skupiny byly popsány výše. Výhodně je skupinou Ar substituovaná nebo nesubstituovaná fenylová skupina. Zvlášť vhodnými substituenty jsou elektron akceptorové skupiny, jako jsou atomy halogenů (výhodně chlor nebo fluor), trihalomethylové skupiny (výhodně trifluormethylová skupina), kyanoskupina a nitroskupina. Výhodně skupina Ar představuje fenylovou skupinu,

3,5-dichlorfenylovou skupinu, p-trifluormethylfenylovou skupinu, p-kyanofenylovou skupinu nebo p-nitrofenylovou skupinu.

Skupina R³ je vybraná ze skupiny zahrnující alkylovou skupinu, arylovou skupinu, heterocyklickou skupinu a polycyklickou skupinu.

Výhodně představuje skupina R³ substituovanou nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu. Výhodně představuje skupina R³ substituovanou nebo nesubstituovanou alkylovou skupinu obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku, výhodněji pak skupina R³ představuje ethylovou skupinu nebo methylovou skupinu.

Skupina R³ je výhodně vybraná ze skupiny zahrnující methylovou skupinu, ethylovou skupinu a benzylovou skupinu.

Alespoň jedna ze skupin R¹ a R² výhodně představuje atom vodíku. Je zřejmé, že pokud jsou skupiny R¹ a R² různé, je atom uhlíku, ke kterému jsou vázány, asymetrický.'Výhodně je tento atom uhlíku chirální. Pokud je tento atom uhlíku chirální, může být stereochemická konfigurace v tomto místě D nebo L nebo může být smíšená, přičemž výhodnou stereochemickou konfigurací je konfigurace L.

Skupiny R¹ a R² jsou vhodně shodné nebo se liší a jsou vybrané ze skupiny -zahrnující- atom vodíku, methylovou skupinu, nebo -ethylvou skupinu. Výhodně představuje skupina.R¹ atom vodíku a R² představuje methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu.

Skupiny R⁵ a R¹ mohou být spojené, takže tvoří alkylenový můstek obsahující 3 až 4 atomy uhlíku tak, že tvoří 5- nebo 6-členný kruh. Skupina R⁵ výhodně představuje atom vodíku.

Je zřejmé, že skupina -NH-CHR¹-CO₂R³ odpovídá «-aminokyselině s ochráněnou karboxylovou skupinou. Výhodně skupina R¹ odpovídá postrannímu řetězci přírodní aminokyseliny,

jako je alanin, arginin, asparagin, kyselina aspartová, cystein, cystin, glycin, kyselina glutamová, glutamin, histidin, isoleucin, leucin, lysin, methionín, fenylalanin, prolin, serin, threonin, tryptofan, tyrosin, valin. Výhodně představuje skupina R¹ methylovou skupinu (Me) nebo benzylovou skupinu (PhCH₂) , což jsou skupiny odpovídající postrannímu řetězci alaninu, respektive fenylalaninu. Ve výhodném provedení stereochemická konfigurace na asymetrickém centru -CHR¹- odpovídá konfiguraci L-aminokyseliny.

Jedním z charakteristických rysů arylesterfosfátových sloučenin podle předmětného vynálezu je,, že tyto sloučeniny vykazují výrazně zvýšený antivirový účinek při testech in vitro, v porovnání s odpovídajícím analogem nukleosidu, kterým je (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanol, což je sloučenina známá pod označením abacavir, jejíž strukturu je možné vyjádřit následujícím chemickým vzorcem:

HN

HO

• · » « ’*· · 3

9 9 9 « 9 « ····· <· 9 ·

.. . · · 9 9' « • * · 9 9 9 9«

Dalším aspektem předmětného vynálezu je sloučenina obecného vzorce (II)

kde R¹, R², R³, R⁵ a X mají shora definovaný význam, nebo farmaceuticky přijatelný derivát nebo metabolit uvedené sloučeniny. Skupina X výhodně představuje atom kyslíku.

Nitrobuněčná tvorba takovýchto antivirových metabolitů je z několika důvodů důležitým rysem tohoto vynálezu.

V případech, kdy uvedený nukleosid není dobrým substrátem pro hostitelské nukleotidové kinasy, dochází jen k velmi nízké aktivaci a tudíž i k nízkému antivirovému ‘účinku, a to i v případech, kdy daný trifosfát je vynikajícím inhibitorem RT.

V takovýchto případech tvorba metabolitů podle předmětného vynálezu může vést k velice výraznému zesílení antivirového účinku.

Pojmem „farmaceuticky přijatelné deriváty se v tomto textu rozumí jakákoli farmaceuticky přijatelná sůl, ester nebo sůl takového esteru nebo jakákoli jiná sloučenina, která je po

11a podání příjemci schopná poskytnout (přímo nebo nepřímo) sloučeninu obecného vzorce podle tohoto vynálezu nebo metabolit podle tohoto vynálezu. Skupina výhodných „farmaceuticky přijatelných derivátů zahrnuje sodné soli, sukcináty, fumaráty, glutaráty a D-vínany.

Pojmem „farmaceuticky přijatelný metabolit se v tomto textu rozumí metabolit nebo zbytek sloučeniny obecného vzorce podle tohoto vynálezu nebo metabolitu podle tohoto vynálezu, který zvyšuje inhibici reverzní transkriptázy, vykazovanou sloučeninami podle předmětného vynálezu.

Dalším aspektem předmětného vynálezu je použití sloučeniny podle tohoto vynálezu při způsobu léčení, prevence nebo diagnózy, výhodně při prevenci nebo léčbě virové infekce.

Dalším aspektem předmětného vynálezu je použití sloučeniny podle předmětného vynálezu pro výrobu léčiva pro prevenci nebo léčbu virových infekcí.

Dalším aspektem předmětného vynálezu je způsob prevence nebo léčby virové infekce, který zahrnuje podávání účinné dávky sloučeniny podle předmětného vynálezu pacientovi, který potřebuje takovouto léčbu.

Uvedená virová infekce může být vybrána ze skupiny zahrnující jakoukoli virovou infekci, jako jsou infekce HIV a herpes viry, včetně HSV1 a HSV2, CMV, VZV, EBV, HAV, HBV, HCV, HDV, HHV6, HHV7, HHV8,' papilomu,* adenovirů, vztekliny a chřipky.

Ve výhodném provedení předmětného vynálezu je uvedená virová infekce vybrána, ze skupiny zahrnující infekci HIV nebo HBV, výhodněji infekci HIV7I nebo HIV-II. Charakteristickým rysem tohoto vynálezu je, že sloučeninyspadající do jeho rozsahu vykazují dobrou aktivitu proti virům HIV-I a HIV-II a HBV. ·

Dalším aspektem předmětného vynálezu je farmaceutický prostředek zahrnující sloučeninu podle předmětného vynálezu spolu s farmaceuticky .přijatelným excipientem.

Dalším aspektem předmětného vynálezu je způsob přípravy farmaceutického prostředku, který zahrnuje stupeň smíchání sloučeniny podle tohoto vynálezu s farmaceuticky přijatelným excipientem.

·· ·· ·· · ·· · · • · · · · · · · · · · · · · · · · · · '· · • · · · · · ···· '· · · · • · · · · · · · · ·« ···· ·· · ·· ···

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být výrazně stabilní vůči kyselému hydrolytickému rozkladu. Sloučeniny podle předmětného vynálezu tak mohou být zvlášť vhodné pro orální podávání za obvyklých dávkovačích podmínek u lidí, protože mohou být stabilní ve vysoce kyselém žaludečním prostředí.

Protože purin ve sloučeninách obecného vzorce (I) je slabá zásada (pK_a=5,0) a sloučeniny obecného vzorce (I) jsou stabilní vůči kyselinám, je možné vytvářet soli sloučenin obecného vzorce (I) s kyselinami, jako jsou karboxylové kyseliny a dikarboxylové kyseliny. Takovéto soli mohou být stabilní krystalické pevné látky, jejichž výhodou je zvýšená doba skladovatelnosti a snadná manipulovatelnost během jejich zpracovávání na farmaceutické prostředky. Skupina výhodných karboxylových a dikarboxylových kyselin zahrnuje kyselinu malonovou, kyselinu jantarovou, kyselinu glutarovou, kyselinu fumarovou a kyselinu vinnou. Na rozdíl od uvedených solí sloučenin obecného vzorce (I), mohou mít volné báze sloučenin obecného vzorce (I) nekrystalickou amorfní formu, která může být hygroskopická.

Skupina P-OH ve sloučeninách obecného vzorce (II) je slabou kyselinou a proto může tvořit jednosytné soli se zásadami za vzniku například sodné .soli, draselné soli,, amonné soli a triethylamoniové soli. V případě sloučenin obecného vzorce (II), ve kterých X představuje hydroxylovou skupinu, je možně vytvářet dvojsytné soli. Takovéto dvojsytné soli mohou mít formu stabilních pevných látek, jejichž výhodou je zvýšená doba skladovatelnosti a snadná manipulovatelnost během jejich zpracovávání na farmaceutické prostředky.

t·.

Sloučeniny podle předmětného vynálezu mohou rovněž vykazovat zvýšenou stabilitu v biologických médiích, jako například v lidské plazmě. Zvýšený poločas rozkladu sloučenin spadajících do rozsahu tohoto vynálezu v takových médiích, jako je lidská plasma, může umožnit farmakokinetické výhody . při dávkování u lidí, kteří potřebují takovouto léčbu.

Léčivo použité podle tohoto vynálezu může být podáváno orálně nebo parenterálně, což zahrnuje intravenózní podávání, intramuskulární podávání, intraperitoneální podávání, subkutánní podávání, transdermální podávání, podávání vzdušnou cestou (v aerosolu), rektální podávání, vaginální podávání a topické podávání (včetně bukálního a podjazykového podávání).

Sloučeniny podle'předmětného vynálezu, určené pro orální podávání, mají obvykle formu'tablet nebo kapslí, prášku nebo granulí nebo vodného roztoku nebo suspenze.

'Tablety pro orální podávání mohou zahrnovat aktivní - složky smíchané s farmaceuticky přijatelnými excipienty, jako jsou inertní ředidla, dezintegrační činidla, pojivá, lubrikační činidla, sladidla, chuťové látky, barviva a konzervační činidla. Skupina vhodných inertních ředidel zahrnuje uhličitan sodný a uhličitan vápenatý, fosforečnan sodný a fosforečnan vápenatý a laktosu, zatímco kukuřičný škrob a kyselina alginová jsou představiteli vhodných dezintegračních činidel. Pojivá mohou být vybrána ze skupiny zahrnující škrob a želatinu, zatímco lubrikačním činidlem, pokud je přítomné, může obecně být stearát hořečnatý, kyselina stearová a mastek.

V případě potřeby mohou být tablety potažené materiálem, jako ♦ · · · · · · . · · ·· ·· · · · · · · · · • · · '· · ······· · · • · · ··· · · · ·· ···· ·· · ·· ··· je glycerylmonostearát nebo glyceryldistearát, čímž se zpozdí absorbce dané tablety v zažívacím traktu.

Kapsle pro orální podávání zahrnují tvrdé želatinové kapsle, ve kterých je uvedená aktivní složka smíchána s pevným ředicím činidlem, a měkké želatinové kapsle, ve kterých jsou aktivní složky smíchané s vodou nebo olejem, jako je podzemnicový olej, kapalný'parafín nebo olivový olej.

Farmaceutické prostředky pro rektální podávání mohou mít formu čípků tvořených vhodným základem, jako je například kakaové máslo nebo salicylát.

Farmaceutické prostředky pro vaginální podávání mohou mít formu pesarů, tampónů, krémů, gelů, past, pěn nebo sprejových prostředků, které kromě aktivní složky obsahují takové nosiče, které jsou v dané oblasti známé a považované za vhodné pro daný účel.

Farmaceutické prostředky pro intramuskulární, intraperitoneální, subkutánní a intravenózní použití mají obecně formu sterilních vodných roztoků nebo suspenzí sloučenin podle předmětného vynálezu, které jsou pomocí pufrů upraveny tak, aby měly vhodnou hodnotu pH a izotonicitu. Vhodným vodným vehikulem je například roztok Ringer a izotonický chlorid sodný. Vodné suspenze podle předmětného vynálezu mohou obsahovat suspendační činidla, jako jsou deriváty celulosy, alginát sodný, polyvinylpyrrolidon, kaučukový tragant, a smáčecí činidlo, jako je lecíthin. Vhodným konzervačním činidlem pro vodné suspenze je například ethyl-p-hydroxybenzoát a n-propyl-p-hydroxybenzoát· • · · ······ ·

4,/*, · · ············ ’·' · ···· ···· ········· «···· r

Sloučeniny podle předmětného vynálezu mohou mít rovněž podobu liposomových farmaceutických prostředků.

• Obecně je možné uvést, že vhodná.dávka sloučenin podle předmětného vynálezu leží v rozmezí od 0,01 miligramu do.

miligramů/kilogram tělesné hmotnosti a den, výhodně v rozmezí od 0,2 miligramu do 1,0 miligramů/kilogram tělesné hmotnosti a den. Požadovaná dávka je výhodně podávána jednou denně, avšak je možné ji rozdělit do dvou, tří, čtyř, pěti, šesti nebo více dílčích dávek, které se podávají ve vhodných časových odstupech během celého dne. Tyto dílčí dávky je možné podávat v jednotkových dávkovačích formách, které obsahují například od 10 miligramů do 1500 miligramů, výhodně od 20 miligramů do 1000 miligramů a ještě výhodněji od 50 miligramů do 700 miligramů aktivní složky na jednotkovou dávkovači formu.

Dalším aspektem předmětného vynálezu je způsob přípravy sloučenin podletohoto vynálezu, který zahrnuje reakci sloučeniny vzorce

se sloučeninou obecného vzorce

e.

99

O

II

ArO—P-CI N—R5 CR1R2 COXR3 kde R¹, R², R³, R⁵ a X mají shora uvedený význam.

Uvedenou reakci je možné provádět v suchém prostředí při teplotě místnosti v tetrahydrofuranu v přítomnosti N-methylimidazolu, nebo pomocí terč. butylmagnesiumchloridu a přebytku vhodného fosforchloridátového činidla.

Sloučeniny spadající- do rozsahu předmětného vynálezu, ve kterých je skupina Ar nahrazena vodíkem, je možné připravit z dané kyselinové formy reakcí příslušného esteru s vodnou zásadou.

Sloučeniny, ve kterých skupina X představuje skupinu NH nebo skupinu NR⁴ je možné připravit reakcí uvedené kyselinové formy (X = 0 a R³ = H) s aminem.

Shora uvedená výchozí látka, 'tj. (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino) -9H-purin-9-;yl] -2-cyklopenten-l-methanol, je známá pod označením abacavir a je možné ji připravit způsobem, který je v dané oblasti techniky známý, jako je například způsob popsaný v evropském patentu číslo EP 0434450, v mezinárodní přihlášce číslo PCT/GB95/02014 a· v mezinárodní přihlášce číslo PCT/EP98/02835, přičemž obsah všech citovaných dokumentů je zde zahrnut jako odkazový materiál.

• Φ φφ • · · · φ φ φ

ΦΦ φ • φ φ φ φφφ φ φ φφφφ φφφ φφ . φ φφ

Vynález bude dále popsán pomocí následujících příkladů, přičemž tyto příklady slouží jen pro ilustraci a nijak neomezují rozsah předmětného vynálezu. Rovněž je pro odborníka v dané oblasti techniky zřejmé, že v uvedených příkladech je možné provést různé modifikace, aniž by byla překročena hranice rozsahu tohoto vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Obecné postupy

Následující bezvodá rozpouštědla a reakční činidla byla zakoupena od společnosti Aldrich v nádobách opatřených tzv. uzávěry „sure seal: dichlormethan (DCM), diethylether (Et₂O) , tetrahydrofuran (THF), N-methylimidazol (NMI), methanol (MeOH), dimethylformamid' (DMF), pyridin’(pyr), dioxan a terč. butylmagnesiumchlorid (tBuMgCl). Triethylamin (NEt₃) byl sušen refluxováním nad hydridem vápenatým (CaH₂) po dobu několika hodin a poté oddestilován a okamžitě použit.

Chromatograf ie

Chromatografie na tenké vrstvě (TLC) byla prováděna na komerčně dostupných platech Merck Kiesegel 60F₂₅₄ a rozdělené složky byly vizualizovány ultrafialovýmzářením o vlnové délce 254 nanometrů a 366 nanometrů nebo postřikem 5 procentním ethanolickým roztokem kyseliny fosfomolybdenové (MPA) a následným zahřátím. Sloupcová chromatografie byla prováděna se stacionární fází (32-63 milimetrů) tvořenou silikagelem Woelm.

9,

• ···♦ « · 9 9 ·

Spektrální charakterizace

Všechna NMR spektrální data byla získána, pokud není uvedeno jinak, měřením v CDC1₃. Protonová a ¹³C spektra nukleární magnetická rezonance byla měřena na spektrometru Bruker Avance DPX300 s pracovní frekvencí 300 megahertzů, respektive 75 megahertzů. ³¹P NMR spektra byla měřena na spektrometru Bruker Avance DPX300 s pracovní frekvencí 121 megahertzů, přičemž hodnota chemických posunů je uváděna ve stupniči δ a vztahována k externímu standardu, kterým byla 85 procentní kyselina fosforečná, pozitivní signály jsou ve směru klesájícího-pole. Při popisu NMR signálů byly použity následující zkratky: s (singlet), d (dublet), t (triplet), q (kvartet), m (multiplet), bs (široký signál), dd (dublet dubletů), dt (dublet tripletů).

Nízkorozlišovací hmotnostní spektra byla měřena na přístroji VG Platform II Fisions (výrobce Fisions, Altrincham, Velká Británie) (s ionizací při atmosférickém tlaku, elektrosprejová hmotnostní spektrometrie) buď v negativním nebo v pozitivním modu.

Vysokoúčinná kapalinová chromatografie(HPLC) byla prováděna na koloně s reverzní fází SSODS2 s elucí směsí voda/acetonitril. Kolona byla postupně promývána uvedenou směsí obsahující 100 procent vody (0 minut), 20 procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut), 100 procent vody (55 minut), přičemž průtok eluentu byl 1 mililitr/minutu a detekce byla prováděna ultrafialovým zářením o vlnové délce 254 nanometrů. Použitými standardy byly: aceton (t_R 4,54 minuty), toluen (t_R 10,21 minuty). Konečné produkty

9

• · » ·

vykazovaly čistotu >99 procent s.nedetekovatelným množstvím základního nukleosidu.

Názvosloví a číslování sloučenin

Kde to bylo možné, bylo použito názvosloví podle nomenklatury IUPAC, avšak pro zjednodušení byly názvy některých sloučenin zkráceny. Sloučeniny byly číslovány způsobem, kterým se nukleosidy běžně číslují.

Standardní postupy , · .

Z praktických důvodů jsóu v následujícím textu, v případech kde je to možné, uvedeny odkazy na obecné postupy.

Standardní postup 1 .

K míchanému roztoku 10 molárních ekvivalentů bezvodého alkoholu byly při teplotě 0 °C přikapány. 2 molární ekvivalenty thionylchloridu a výsledný roztok byl míchán 1 hodinu. Po zvýšení teploty směsi na teplotu místností, byl k roztoku přidán 1 molární ekviválent příslušné aminokyseliny a reakční směs byla 6 až'16 hodin zahřívána k refluxu. Odstraněním • «'

Λΐ » · · · » • · » « · * • · · «? · · ······· φ rozpouštědla a překrystalováním ze směsi methanol/ether byly získány hydrochloridové soli aminoesterů.

Standardní postup 2

Směs 1 molárního ekvivalentu příslušné aminokyseliny,

1,1 molárního ekvivalentu kyseliny p-toluensulfonové a 1 molární ekvivalentu příslušného alkoholu byla 6 až 16 hodin zahřívána k refluxu ve 100 mililitrech toluenu za Dean-Starkových podmínek. Po ochlazení na teplotu místnosti bylo při sníženém tlaku odstraněno rozpouštědlo a zbyly olej byl rozpuštěn v 50 mililitrech dichlormethanu a promyt 50 mililitry 10 procentního'roztoku uhličitanu draselného a 50 mililitry vody, přefiltrován a filtrát odpařen do sucha. Takto získaný olej byl rozpuštěn v minimálním množství acetonu, zneutralizován 2 molární kyselinou chlorovodíkovou a lyofilizován, čímž byly získány hydrochloridové soli esterů aminokyselin.

Standardní postup 3 molární ekvivalent fenyldichlorfosfátu .a 1 molární ekvivalent příslušného hydrochloridu esteru aminokyseliny byly suspendovány ve 30 až 60 mililitrech bezvodého dichlormethanu. Ke směsi byly přikapány při teplotě -80 °C 2 molární ekvivalenty bezvodého triethylaminu ve 30 mililitrech bezvodého dichlormethanu a reakční směs byla ponechána přes noc ohřát na teplotu místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku v dusíkové atmosféře, čímž byly získány pevné bílé látky, které byly promyty 2 x 25 mililitry bezvodého etheru, přefiltrovány a filtrát byl odpařen do • · • · · · · · φ '· ’· · φ · φ ······· • · φ · · · · • · ···« φ φ « φ ί sucha, čímž byl získán surový produkt ve formě oleje. Tento .produkt byl rozpuštěn v bezvodém tetrahydrofuranu (THF) -a použit bez dalšího přečištění v dalším stupni.

Standardní postup 4 molární ekvivalent (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu byl usušen kodestilací s 3 x 5 mililitry bezvodého pyridinu a následně suspendován v 5 až 30 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF). K této suspenzi byly přikapány 1 až 2 molární ekvivalenty 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) a výsledná suspenze byla 10 minut míchána. K reakční směsi byly přikapány 3 molární ekvivalenty fosforchloridátové sloučeniny ve formě roztoku v tetrahydrofuranu (THF) a výsledný roztok byl míchán 24 až 96 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs bylá rozložena přidáním 0,1 mililitru nasyceného roztoku chloridu amonného (NH₄C1) a po 10 minutách bylo při sníženém tlaku odstraněno rozpouštědlo. Surový produkt byl přečištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu.

Hydrochlorid methylesteru L-alaninu

C₄H₁₀O₂NCl, molární hmotnost: 139,38.’

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 1, kdy bylo použito 34 mililitrů (0,84 molu) bezvodého methanolu, 8,2 mililitru (0,112 molu) thionylchloridu a 5,0 gramů (0,056 molu) L-alaninu. Bylo izolováno 2,87 gramu (36,7 procenta) produktu ve formě pevné bílé látky.

^ΧΗ NMR (D₂0): δ 4,07-4,00 (ÍH, q, CH,J=7,22Hz); 3,83 (3H, s, • φ · ··· · · ·♦ ···« 9 9 * ··

OCH₃) ; 1,39-1, 37 (3Η, t, CH₃) .

¹³C NMR (D₂0): δ 171,5 (CO); 53,9 (OCH₃) ; 49,1 (CH) ; 15,4 (CH₃) .

Fenyl-(methoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

Ci₀Hi₃O4NC1P, molární hmotnost: 277,65

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byly použity 2,0 gramy (14,34 milimolu) hydrochloridu methylesteru L-alaninu, 3,02 gramu (2,14 mililitru, 14,34 milimolu) fenylfosfordichloridátu a 2,90 gramu (4,0 mililitry, 28,68 milimolu) bezvodého triethylaminu. Bylo izolováno 3,91 gramu (98,2 procenta) produktu ve formě bezbarvého oleje, který byl rozpuštěn ve 40 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,47 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,28; 8, 97 (1:1) .

³H NMR: δ 7,39-7,34 (2H, m, o-Ph); 7,29-7,20 (3H, m, m- + p-Ph); 4,49-4,37 (1H, q, NHala); 4,27-4,09 (1H, m,

CHala); 3,78 (3H, d, OCH₃) ; 1,52-1,49 (3H, dd, CH₃) .

¹³C NMR: 173,6 (CO); 150,1 (ipso-Ph);. 130,25 (m-Ph) ;

126,4 (p-Ph) ; 120,9 (o-Ph); 53,2 (OCH₃) ; 51,0 (CH) ;

20,9 (CH₃ala) .

O-[Fenyl-(methoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl490

0₂4Η3₀θ5Ν₇Ρ, molární hmotnost: 527,53

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 500 miligramů (1,75 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 1,75 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu • · '· 24 · · · <· * « ·>· • · * 9 9 9 9 9 9

9 * 9 9 9999999 9 · · » 9 · 4 4 • · 4444 0.9 4 9 9 v tetrahydrofuranu (THF) (1,75 milimolu) a 11,17 mililitru 0,47 molárního roztoku fenyl-(methoxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (5,24 milimolu) ve 30 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 70 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí nejprve směsí 3 procent methanolu v dichlormethanu (DCM) a potom směsí 2 procent methanolu v dichlormethanu (DCM), čímž bylo získáno 442 miligramů (48 procent) produktu ve formě bílé pěny.

P NMR (MeOH-d₄) : δ 3,97; 3,88.

^XH NMR: δ 7,41 (1H, d, C8j; 7,24-7,19 (2H, m, o-Ph); 7,137,03 (3H, m, m- + p-Ph); 6,08 (1H, bs, NH); 5,98 (1H, q, H2 ' ) ; 5,78 (t, H3 ' ) ; 5,44 (1H, t, HI'); 5,09 (2H, bs, NH₂) ; 4,224,02 (3H, m, NHala + H5'), 3,99-3,87 (1H, m, CHala); 3,59 (3H, t, OCH₃) ; 3,05 (1H, d, H4'); 2,92 (1H, bs, CHcPr); 2,732,62 (1H, m, 1 z H6'); 1,62-1,53 (1H, m, 1 z H6'); 1,301,25 (3H, t, CH₃ala); 0,78-0,71 (2H, q, 2H z CH₂cPr) ; 0,540, 49 (2H, t, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: 174,6 (CO); 160,3 (C2), 156,6 (C4); 151,3 (C6) ;

151,1 (ipso-Ph); 136,8 (C8); 135,9 (C2'); 131,5 (C3');

130,0 (m-Ph); 125,2 (p-Ph); 120,5 (o-Ph); 115,0 (C5);

69,2 (C5'); 59,2 (Cl'); 52,8 (OCH₃) ; 50,5 (CHala); 46,0 (C4');

34.9 (C6') ; 24,2 (CHcPr); 21,2 (CH₃ala) ; 7,7 (CH₂cPr)\

MS ES⁺: m/z 527,86 (100 procent) (M)⁺, 546, 84 (M+K)⁺..

MS FAB: pro C₂₄H₃o0₅N₇P vypočteno 528,212431, nalezeno

528,213848.

HPLC: t_R 30,33 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

IČ: 3328,6 (N-H), 2922,1, 2862,9 (C-H) , 1734,4 (C=O),

1590.9 (arom. C-C), 1462,9 (C-H def.), 1376,8 (-CH₃ sym. def.),

9

9 ·» * 9 9 · 9 9 9 »9 9' · 9 9 9 9 4 9 « • · * * · · · 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9» A I

9» 9999 99 99 9

1207,1 (P-O-aryl), 1154,0 (C-O), 1027,7 (P-O-alkyl),

933,4 (olef. C-H def.), 721,8 (monosubstit. arom. C-H def.).

Fenyl-(methoxy-D-alaninyl)-fosforchloridát

CxoH₁₃0₄NC1P, molární hmotnost: 277,65

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byl použit 1,0 gram (7,17 mílimolu) hydrochloridu methylesteru D-alaninu, 1,51 gramu (1,07 mililitru, 7,17 mílimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 1,45 gramu (2,0 mililitry, 14,0 milimolů) triethylaminu. Bylo izolováno 1,66 gramu (83,4 procenta) surového produktu, který byl rozpuštěn v 10 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za 'vzniku·0,60 molárního roztoku, který byl bez přečištění použit v následujícím stupni. ’ ³¹P NMR: δ 9, 38; 9, 18 (1: 1) .

³H NMR: δ 7,39-7,30 (2H, t, o-Ph); 7,29-7,09 (3Ή, m, m- + p-Ph); 4,85-4,80 (1H, d, NHala); 4,19-4,11 (1H, m,

CHala); 3,75 (3H, d, OCH₃) ; 1,52-1,49 (3H, dd, CH₃ala) .

¹³C NMR: 173,6 (CO); 150,1 (ipso-Ph) ; 130,3 (o-Ph);

126>4 (p-Ph) ; 120,9 (m-Ph) ; 53,2 (OCH₃) ; 50,9 (CHala);

21,0 (CH₃ala) .

O-[Fenyl-(methoxy-D-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl583

C24H30O5N7P, molární hmotnost: 527,53

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 400 miligramů (1,4 mílimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 2,1 mililitru 1,0 molárního roztoku

1J' • · · ♦ · • · * · • '· · · · ···· terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (2,1 milimolu) a 7,0 mililitrů 0,6 molárního roztoku fenyl(methoxy-D-alaninyl)-fosforchloridátu v. tetrahydrofuranu (THF) (4,19 milimolu) v 25 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 36 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt' byl přečištěn elucí nejprve směsí 3 procent methanolu v chloroformu a potom směsí 2,5 procenta methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 318,6 miligramu (43,2 procenta) produktu ve formě bílé pěny.

³¹P NMR (MeOH-d₄) : δ 3,93; 3,70.

³H NMR: δ 7,56+7,51 (1H, d, H8); 7,37-7,32 (2H, m, o-Ph) ;

7,29 (1H, d, p-Ph); 7,25-7,15 (2H, m, m-Ph); 6,10 (1H, t, J=5,28 Hz, H2 ') ; 6,03 (1H, bs, NHcPr); 5, 94-5, 89 (1H, m, H3') ; 5,54 (1H, bs, Hl'); .5,01 (2H, bs, NH₂) ; 4,26-3,83 (4H, m,

CHala, NHala + H5'), 3,72 (3H, d, OCH₃) ; 3,18 (1H, s, CHcPr); 3,02 (1H, bs, H4 ') ; 2,86-2,75 (1H, m, 1 z H6'); 1,78-1,64 (1H, m, 1 z H6'); 1,39-1,36 (3H, dd, CH₃ala) ; 0,90-0,83 (2H, q, J=6,13 Hz, 2H z CH₂cPr) ; 0,63 (2H, bs, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: 174,5 (CO); 160,3 (C2), 156,6 (C4); 151,2 (C6) ;

151,0 (ipso-Ph); 136,8 (C2'); 136,1 (C8'); 131,5 (C3');

130,0 (m-Ph); 125,3 (p-Ph); 120,5 (o-Ph) ; 115,2 (C5) ;

69,3 (C5'); 59,3 (Cl'); 52,9 (CHala); 50,5 (OCH₃) ; 46,0 (C4');

34,9 (C6').; 24,1 (CHcPr); 21,4 (CH₃ala) ; 7,8 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/.z 527,86 (100 procent) (M)⁺, 546, 84 (M+K)⁺.

MS FAB: pro C₂₄H₃iO5N₇P vypočteno 528,212431, nalezeno 528,211505.

HPLC: t_R 29,807 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

IČ: 3333,6 (N-H), 2923,4, 2853,4 (C-H), 1734,4 (C=O),

1591,1 (arom. C-C), 1458,3 (Č-Hdef.), 1376,7 (-CH₃ sym. def.), * · 0' ·' · 0 · · · 0 .«· 0 > φ »00 9 0 0 ·»· «· 0000 0.0 «· 00 999

1208,3 (P-O-aryl), 1153,3 (C-Ο), 1026,9 (P-O-alkyl),

931,9 (olef. C-H def.), 721,6 (monosubstit. arom. C-H def.).

Fenyl-(methoxy-L-fenylalaninyl)-fosforchloridát

C16H17O4NCIP, molární hmotnost: 353,74

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byl použit 1,0 gram (4,64 milimolu) methylesteru L-fenylalaninu, 0,98 gramu (0,70 mililitru,

4,64 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a

0,94 gramu (1,30 mililitru, 9,28 milimolu) triethylaminu. Bylo izolováno 1,45 gramu (88,4 procenta) surového produktu ve formě oleje, který byl rozpuštěn v 10 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,41 molárního roztoku, který byl bez přečištění použit v následujícím stupni.

³¹P NMR: δ 9,37; 9,23 (1:1) .

³Η NMR: δ 7,60-7,16· (10H, 2 x Ph) ; 4,70-4,49 (1H, m, CHala); 4,38-4,16 (1H, m, NHala) ; .3,89 (3H, d, OCH₃) ; 3,23 (3H, m,

CH₂Ph).

0-[Fenyl-(methoxy-L-fenylalaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl585

C31H34O5N7P, molární hmotnost: 603,6

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 300 miligramů (1,05 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 1,57 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,57 milimolu) a 7,66 mililitrů 0,41 molárního roztoku fenyl-(methoxy-L-fenylalaninyl)fosforchlóridátu v tetrahydrofuranu (THF) (3,14 milimolu) ve

«'· • · ’· '· · • 4

4 b 4 4 · 9 i 4 > 4

9 9 · « · · 4 4 9_ 9 4 '» 9 9 4.

4 · 4 4 4 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 48 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí nejprve směsí 3 procent methanolu v chloroformu a potom směsí 2,5 procenta methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno

272.9 miligramu (43,15 procenta) produktu ve formě bílé pěny. ³¹P NMR (MeOH-dJ : δ 3,91; 3,80.

^ΧΗ NMR: δ 7,47+7,43 (1H, d, H8); 7,31-7,06 (10H, m, 2 x Ph) ; 6,25 (1H, d, NHcPr); 6,00-5,95 (1H, q, H2'); 5,87-5,81 (1H, t, H3') ; 5,49 (1H, s, H1') ; 5,19 (2H, bs, NH₂) ; 4,31-3,92 (4H, m, CHala, NHala + H5'), 3,64 (3H, d, OCH₃) ; 3,02-2,89 (4H, m, CH₂Ph, CHcPr + H4')‘; 2,78-2, 63 (1H, m, 1 z H6'); 1,63-1, 49 (1H, m, 1 z H6'); 0,86-0,80 (2H, q, J=6,24 Hz, 2H z CH₂cPr);

0, 60 (2H, d, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: 174,3 (CO);161,5 (C2), 157,7 (C4); 152,4 (C6) ; .

152.1 (ipso-OPh); 137,7 (ipso-Bn); 137,1 (C2'); 136,9 (C8);

132,4 (C3'); 130,9 (o- + m-Bn); 129,9 (m-OPh); 128,4 (p-Bn);

126.2 (p-OPh); 121,5 (o-OPh); 116,1 (C5); 70,1 (C5');

60,1 (Cl'); 57,2 (CHala); 53,6 (OCH₃) ; 46,9 (C6') ; 41,7 (C4');

35.9 (CH₂Ph) ; 25,1 (CHcPr); 8,7 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 603, 8 (100 procent, M⁺) , 604,8 (35 procent, M+H⁺) , 625, 7 (15 procent, M+Na⁺) .

MS FAB: pro C₃iH₃₄O₅N7P vypočteno 604,243731, nalezeno

604,242585.

HPLC: t_R 34,707, 35,020 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), 20 procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut), 100 procent vody (55 minut)).

IČ: 3331,7 (N-H), 3007,2, 2952,2 (C-H), 1741,1 (C=O), 1595,6,

1487,7 (arom. C-C), 1455,0 (C-H def.), 1393,9 (-CH₃ sym. def.), 1252,5 (P=O), 1214,3 (P-O-aryl), 1125,3 (C-O), 1025,6 (P-Oalkyl), 935,8 (olef. C-H def.), 754,8 (monosubstit. arom. C-H def.).

Fenyl-(methoxyglycinyl)-fosforchloridát

C9H11O4NCIP, molární hmotnost: 263,62

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy bylo použito 1,5 gramu (11,9 milimolu) methylesteru glycinu, 2,52 gramu (1,79 mililitru,

11,9 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 2,42 gramu (3,33 mililitru, 23,9 milimolu) triethylaminu. Bylo izolováno 3,07 gramu (97,15 procenta) surového produktu ve formě oleje, který byl rozpuštěn v 15 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,774 molárního roztoku, který byl bez přečištění použit v následujícím stupni.

³¹P NMR: δ 10,43.

^XH NMR: δ 7,43-7,38 (2H,m, o-Ph); 7,31-7,25 (3H, m, m- + p-Ph) ; 4,67 (1H, bs, NHala) ; 3,94 (2H, dd; CH₂) ; 3,83 *(3H, s, OCH₃) .

¹³C NMR: δ 170,4 (CO); 150,1 (ipso-Ph) ; 130,2 (m-Ph) ;

126,4 (p-Ph) ; 120,8 (o-Ph) ; 53,1 (OCH₃) ; 43,4 (CH₂) .

O-[Fenyl-(methoxyglycinyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl588 - . ·

C₂3H₂₈O₅N7P, molární hmotnost: 513,49

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 300 miligramů (1,05 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 1,57 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,57 milimolu) a 4,06 mililitrů 0, 774 molárního roztoku fenyl-(methoxyglycinyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (3,14 milimolu) ve 20 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána ·· ·· «« '· » · · · · · · ► · 4 4 · · · » · 4 44 »444« » · 4 » · · •4. ·4·4 ·· 4' hodin při teplotě místnosti.' Surový produkt byl přečištěn elucí. nejprve směsí 3 procent methanolu v chloroformu a potom směsí 2,5 procenta methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 82,6 miligramu (15,4 procenta) produktu ve formě bílé pěny.

³¹P NMR: δ 4,79; 4,67 (1:1).

^ΧΗ NMR: δ 7,40+7,36 (1H, d, H8); 7,24-7,19 (2H, t, o-Ph); 7,157,10 (2H, t, m-Ph); 7,07-7,02 (1H, t, p-Ph), 6,00-5,96 (2H, m, H2 ^z + NHcPr); 5,80-5,76 . (1H, m, H3'); 5,45-5,41 (1H, t, H1^z) ; 4,99 (2H, bs, NH2) ; 4,14-4,00 (3H, m, NHala + H5'), 3,62 (3H, s, OCH3) ; 3,03 (1H, d, H4') ; 2,91 (1H, d, CHcPr) ; 2,732,62 (1H, m, 1 z H6'); 1,62-1,51 (1H, m, 1 z H6^Z); 1,451,43 (6H, t, 2 x CH3) ; 0,78-0,71 (2H, q, 2H z CH₂cPr) ; 0,540,49 (2H, t, 2H z CH₂cPr).

¹³C NMR: 172,1 (CO); 160,2 (C2), 156,6 (C4); 152,0 (C6) ;

151.7 (ipso-Ph); 137,7 (C8); 137,1 (C2'f; 132,0 (C3^Z);

130.8 (m-Ph); 126,0 (p-Ph); 121,2 (o-Ph); 115,5 (C5);

69.9 (C5^Z); 60,0 (Cl'); 53,5 (OCH3) ; 46,7 (C4^Z); 43,9 (CH2) ;

35,4 (C6^Z); 25,0 (CHcPr); 8,5 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 513,9 (100 procent, M⁺) , 514,8 (25 procent, M+H⁺) , 535, 8 (40 procent, M+Na⁺) .

MS FAB: pro C23H29O5N7P vypočteno 514,196781, nalezeno .

514,195321.

HPLC: t_R 28,419 (99,9 procenta)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut).

IČ: 3342,0 (N-H), 1749,8 (C=0), 1596,2, 1488,4 (arom. C-C),

1451.9 (C-Hdef.), 1394,7 (-CH₃sym. def.), 1259,6 (P=O),

1212,1 (P-O-aryl), 1151,6 (C-0), 1026,8 (P-O-alkyl),

937.8 (olef. C-H def.), 760,7 (monosubstit. arom. C-H def.).

Γ .V

Hydrochlorid methyl-2-amino-2-methylpropanoátu

C5H12O2NCI, molární hmotnost: 153,61

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 1, kdy byly použity 4 gramy (0,039 molu) kyseliny 2-aminoisomáselné, 5,66 mililitru (0,078 molu) thionylchloridu a 23,5 mililitru (0,58 molu) bezvodého methanolu. Bylo izolováno 5,805 gramu (97,4 procenta) produktu ve formě pevné bílé látky.

^XH NMR (DMSO): δ 8,85 (3H, s, NH₃ ⁺Cl) ; 3,72 (3H, s, OMe);

1,48 (6H, s, 2 x Me) .

¹³C NMR (DMSO): δ 172,8 (COOMe) ; 56,6 (OMe); 53,9 (CMe₂) .

MS ES⁺: m/z 117,71 M+H⁺, 142,88 M+Na⁺.

Fenyl-(methyl-2-amino-2-methylpropanoát)-fosforchloridát C11H15O4NCIP, molární hmotnost: 291,67

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byl použit 1 gram (6,51 milimolu) hydrochloridu methylesteru kyseliny 2-aminoisomáselné,

1,37 gramu (0,97 mililitru, 6,51 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 1,32 gramu (1,18 mililitru, 13,02 milimolu) triethylaminu. Bylo izolováno 1,73 gramu (91 procent) surového produktu ve formě oleje, který byl rozpuštěn v 10 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,593 molárního roztoku, který byl bez přečištění použit v následujícím stupni.

³¹P NMR: δ 6,86.

³H NMR: δ 7,43-7,38 (2H, t, o-Ph); 7,32-7,21 (3H, m, m- + p-Ph); 4,84 (1H, d, NHala); 3,83 (3H, s, OCH₃) ; 1,72 (6H, d, 2 x CH₃) .

• · ¹³C NMR: δ 175,7 (CO); 150,3 (ipso-Ph) ; 130,3 (m-Ph) ;

126.3 (p-Ph); 121,0 (o-Ph) ; 58,8 (OCH₃) ; 53,6 (C[CH₃]₂);

27.3 + 27,0 (2 x CH₃) .

O-[Fenyl-(methoxy-α,a-dimethylglycinyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl584

C25H32O5N7P, molární hmotnost: 542,23

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 300 miligramů (1,05 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 1,57 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,57 milimolu) a 5,3 mililitru 0,59 molárního roztoku fenyl-(methoxydimethylglycinyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (3,14 milimolu) ve 20 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 96 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí nejprve směsí 3 procent methanolu v chloroformu a potom směsí 2,5 procenta methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 193,7 miligramu (34,14 procenta) produktu ve formě bílé pěny. ³¹P NMR: δ 2,49.

³H NMR: δ 7,40+7,36 (1H, d, H8); 7,24-7,19 (2H, t, o-Ph); 7,15-

7,	10	(2H,	t,	m-Ph); 7,07-7,02 (1H, t,	P-Ph),	6,00-5,96	(2H, m
H2	' +	NHc	Pr)	; 5,80-5,76 (1H, m, H3') ;	5,45-5,	41 (1H, t,	Hl');
4,	99	(2H,	bs	, NH2); 4,14-4,00 (3H, m,	NHala +	H5') , 3,62	! (3H,
s,	OC	H3) ;	3,<	03 (1H, d, H4'); 2,91 (1H,	d, CHc	Pr); 2,73-
2,	62	(1H,	m,	1 z H6'); 1,62-1,51 (1H,	m, 1 z	H6'); 1,4 5-
1,	43	(6H,	t,	2 x CH3) ; 0,78-0,71 (2H,	g, 2H z	CH2cPr); 0	,54-
0,	49	(2H,	t,	2H z CH2cykl) .

MS ES⁺: m/z 541, 9 (100 procent, M⁺) , 563,8 (30 procent, M+Na⁺) .

* · · ·· ·····«· · • · · · · · · · • · ···· «· 9, «* «

MS FAB: pro C25H33O5N7P vypočteno 542,228081, nalezeno

542,228428.

HPLC: t_R 28,347 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

IČ: 3346,0 (N-H) , 2923,0, 2853,5 (C-H) , 1734,0 (C=0)·,

1590.2 (arom. C-C), 1458,4 (C-Hdef.), 1376,8 (~CH₃ sym. def.),

1261.3 (P=O), 1152,7 (C-O) , 1028,0 (Ρ-0-a.lkyl) , 936,0 (olef.

C-H def.), 721,7 (monosubstit. arom. C-H def.).

Hydrochlorid dimethylesteru kyseliny L-aspartové

C6H12O4NCI, molární hmotnost: 197,62

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 1, kdy bylo použito 2,5 gramu (0,019 molu)

L-asparaginu, 3,67 mililitru (0,042 molu) thionylchloridu a 12,86 mililitru (0,32 molu) bezvodého methanolu. Bylo izolováno 3,70 gramu (99 procenta) hydrochloridu dimethylesteru kyseliny L-aspartové.

^XH NMR (MeOH-d₄) : δ 4,53-4,50 (1H, t, CH) ; 3, 94 (3H, s, OCH₃) ; 3,85 (3H, s, OCH₃); 3,18 (2H, d, CH₂) .

¹³C NMR (MeOH-d₄) : δ 170,4; 168,4 (CO); 53,0 + 52,0 (2 x OMe);

49,4 (CH) ; 33,8 (CH₂) .

Fenyl-(dimethoxy-L-aspartyl)-fosforchloridát

Ci₂Hi5O₆NClP, molární hmotnost: 335, 68

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byl použit 1 gram (5,04 milimolu) dimethylesteru kyseliny L-aspartové, 1,06 gramu (0,75 mililitru, 5,04 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 1,02 gramu (1,40 mililitru, 10,1 milimolu) triethylaminu. Bylo izolováno 0,55 gramu (32,4 procenta) surového produktu ve formě oleje, který byl rozpuštěn v 5 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,33 molárního roztoku, který byl bez přečištění použit v následujícím stupni.

³¹P NMR: δ 9, 74, 9,59 (1:1).

O-[Fenyl-(dimethylester kyseliny L-aspartové)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl589 C24H30O5N7P, molární hmotnost: 527,53

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 250 miligramů (0,87 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,87 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,87 milimolu) a 5,20 mililitru 0,50 molárního roztoku fenyl-(dimethylester kyseliny Laspartové)-fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (2,62 milimolu) v 15 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 48 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl dvakrát přečištěn elucí směsí 2,5 procenta methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 163,5 miligramu (32,0 procent) produktu ve formě světle žluté pěny.

³¹P NMR: δ 4,19, 3,76 (1:1) .

³H NMR: δ 7,40 (1H, d, H8); 7,24-7,19 (2H, t, o-Ph); 7,127,03 (3H, m, m- + p-Ph); 6,05-5,95 (2H, m, H2' + NHcPr);

5,79 (1H, d, H3^Z); 5,44 (1H, s, Hl') ; 5,02 (2H, bs, NH₂) ; 4,384,07 (4H, m, H5', NHala + CHala), 3,61 (3H, s, OCH₃) ; 3,54 (3H, d, OCH₃) ; 3,05-2,52 (5H, m, CH₂aa, H4', CHcPr, + 1 z H6'); 1,64-1,52 (1H, m, 1 z H6'); 0,77-0,73 (2H, t, J=5,49 Hz, 2H z CH₂cPr) ; 0,51 (2H, bs, 2H z CH₂cPr) .

• '*· ·« • φ · φ · · · φ · ’·· ·' • φ φφφφφ • · φ ¹³C NMR. δ 173,3 (CO); 172,4 (CO); 161/5 (C2) ; 157,7 (C4);

152,3 (C8); 152,1 (ipso-Ph); 137,8 (C2^Z); 137,0 (C6) ;

132,6 (C3'); 131,1 (m-Ph); 126,4 (p-Ph); 121,6 (o-Ph);

116,2 (C5); 70,5 (C5'); 60,3 (Cl'); 54,3 (OCH₃) ; 52,6 (CHala);

47.1 (C4 ') ; 39,7 (CH₂ala) ; 36,0 (C6'); 25,1 (CHcPr);

8,8 (CH₂cPr).

MS ES⁺: m/z 585,8 (100 procent, M⁺) , 607,7 (30 procent, M+Na⁺) . MS FAB: pro C₂6H₃₃O5N₇P vypočteno 586, 217910, nalezeno 586,217510.

HPLC: t_R 29,261 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

IČ: 3347,5 (N-H) , 2850,7 (C-H), 1739, 9 (C=0)',

1596.1 (arom. C-C), 1461,9 (C-Hdef.), 1376,6 (-CH₃ sym. def.),

1262,4 (P=O), 1211,2 (P-O-aryl), 1158,3 (C-O),

1027,0 (P-O-alkyl), 935,6 (olef. C-Hdef.), 761,5,

722,0 (monosubstit. arom. C-H def.).

Hydrochlorid methylesteru 3-cyklohexyl-L-alaninu

C₉H₁₉NO₂C1, molární hmotnost: 221,75 . Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 1, kdy byly použity 3,0 gramy (17,5 milimolů) 3-cyklohexyl-L-alaninu, 30 mililitrů methanolu a 2,56 mililitru (35 milimolů) thionylchloridu. Bylo izolováno 3,23 gramu (83,9 procenta) produktu ve formě pevné bílé látky. ³H NMR (MeOH-d₄) : δ 4,12-4,07 (3H, t, CHala); 3,85 (3H, s,

OCH₃) ; 1,74-1,68 (6H, m, CH₂ + o-CH₂) ; 1,56-1,43 (1H, m, CH) ;

1,36-1,15 (4H, m, m-CH₂) ; 1,05-0,90 (2H, q, p-CH₂) .

¹³C NMR: δ 170,15 (CO); 52,7 (OCH₃) ; 50,8 (CHala) ; 38,2 (CH₂) ;'

33,6 (CH), 33, 0 + 32,7 (2 x CH₂-o) ; 26,3 (p-CH₂) ; 26,0 +

25, 9 (2 x CH₂-m) .

Fenyl-(methoxy-3-cyklohexyl-L-alaninyl)-fosforchloridát C16H23NO4CIP, molární hmotnost: 359, 82

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,7 gramu (3,16 milimolu) hydrochloridu methylesteru 3-cyklohexyl-L-alaninu,

0,47 mililitru (3,16 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 0,88 mililitru (6,31 milimolu) triethylaminu v 60 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 1,18 gramu (100 procent) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn v 7 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,45 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,79, 9,49 (1:1).

⁴H NMR: δ 7,49-7,43 (2H, m, o-Ph); 7,37-7,19 (3H, m, m- + p-Ph); 4,46-4,35 (1H, q, NHala); 4,32-4,20 (1H, m,

CHala); 3,88-3,85 (3H, dd, OCH₃) ; 1,94-1,90 (1H, d, CHcHx); 1,76-1,60.

O-Fenyl-(methoxy-3-cyklohexan-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl709

C30H40O5N7P, molární hmotnost: 609,66

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 150 miligramů (0,52 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amíno-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 1,05 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) a 3,5 mililitru

• · · - 4·4 • ···· · ·

0,45 molárního roztoku fenyl-(methoxy-3-cyklohexan-Lalaninyl)-fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,57 milimolu) ve 4 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Po 24 hodinách bylo k reakční směsi přidáno dalších 2,5 mililitru

0,45 molárního roztoku fenyl-(methoxy-3-cyklohexan-Lalaninyl)-fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,12 milimolu) v tetrahydrofuranu a reakční směs byla míchána dalších 24 hodin. Surový produkt byl přečištěn elucí nejprve směsí 3 procent methanolu v chloroformu a poté směsí 2,5 procenta methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno

79,6 miligramu (24,9 procenta) čistého produktu ve formě světle žluté pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 4,14, 3, 98 (1:1). ‘ ^ΧΗ NMR: δ 7,50 (1H, d, H8); 7,34-7,13 (5H, t, OPh); 6,20 (1H, s, NHcPr); 6,08 (1H, t, H2'); 5,89 (1H, q, H3'); 5,53 (1H, bs, H1' ) ; 5,16 (2H, bs, NH₂) ; 4,24-3,84 (4H, m, H5', NHala + . CHala), 3,66 (3H, s, OCH₃) ; 3,34 (1H, bs); 3,11 (1H, d);

3,03 (1H, bs), 2,84-2,72 (1H, m, 1 z H6'); 1,98-1,36 (8H, m) ; 1,11 (3H, bs); 0,89-0,83 (4H, m,. 2H z cPr + CH₂-p) ; 0,63 (2H, d, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR. δ 174,8 (CO); 160,2 (C2); 156,5 (C4); 151,3 (C6) ;

151,2 (ipso-Ph); 136,8 (C2'); 135,9 (C8); 131,5 (C3');

34,9

130,0 (m-Ph); 125,2 (p-Ph); 120,5 (o-Ph); 115,1 (C5);

69,4 (C5'); 59,3 (Cl'); 52,7 (CHala); 46,1 (C4' ) ; 42,5 (CH₂) ; 34,9 (C6'); 33,8 (CHcHx) ; 32,7 (CH₂-o); 26,7 (CH₂-m) ;

26,4 (CH₂-p) ; 24,2 (CH₂cPr) ; 7,8 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 610,3 (40 procent, M⁺) , 623, 6 (100 procent, M+Na⁺) , 633, 3 (25 procent, M+H, Na⁺) .

MS FAB: pro C₃oH₄o05N7NaP vypočteno 632,2726, nalezeno 632,2727.

HPLC: t_R 42,154 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

Diamonná sůl O-(L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl540

125 miligramů (0,24 milimolů) O-[fenyl-(methoxy-Lalaninyl)]-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu bylo 5 hodin mícháno při teplotě 25 až 35 °C v 10 mililitrech směsi voda/triethylamin (1:1 objemových dílů). Reakční směs byla extrahována x 20 mililitry dichlormethanu (DCM) a vodná vrstva byla odpařena do sucha. Výsledná pevná látka byla rozpuštěna v isopropylalkoholu a přečištěna mžikovou chromatografií s gradientovou elucí směsí isopropylalkohol/voda/amoniak (11:1:1 až 9:1:2). Příslušné frakce byly odpařeny do sucha a lyofilizovány, čímž bylo získáno 106 miligramů (95 procent) čistého produktu ve formě pěnové bílé pevné látky.

³¹P NMR (D₂O) : -δ 8, 62 (s) .

^XH NMR (D₂O): -δ 7,79 (1H, s, H8); 6,08 (1H, d, H2'); 5,77 (1H, d, H3'); 5,35 (1H, t, Hl'); 3,71-3,58 (2H, m, H5') ; 3,413,32 (1H, m, CHa.a); 3,02-2,94 (1H, m, NHCH); 2,70-2,59 (2H, m, H4' + 1 z CH₂) ; 1,57-1,49 (1H, dt, 1 z CH₂); 1,10 (3H, d, CH₃) ; 0,83-0,76 (2H, q, 1 z CH₂ cyklo) ; 0,61-0,56 (2H, q, z CH₂ cyklo).

MS ES⁺: m/z 437,9 (100 procent, M⁺) .

MS FAB: vypočteno m/z 438,165481, nalezeno m/z 438,163790.

»9 • · 9 9 4 • · 9 · *» 9

9

9 9 *

9999 9 9

4) 9

Diamonná sůl O-(D-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu

100 miligramů (0,19 milimolu) O-[fenyl-(methoxy-Dalaninyl)]-fosfátu (1S,4R) -4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu bylo 16 hodin mícháno v 8 mililitrech směsi voda/triethylamin (1:1 objemových dílů). Reakční směs byla extrahována 5 x 20 mililitry dichlormethanu (DCM) a vodná vrstva byla odpařena do sucha. Výsledná pevná látka byla rozpuštěna v isopropylalkoholu a přečištěna mžikovou chromatografií s gradientovou elucí směsí isopropylalkohol/voda/amoniak (11:1:1 až 9:1:2). Příslušné frakce byly odpařeny do sucha a lyofilizovány, čímž bylo získáno 88 procent čistého produktu ve formě pěnové bílé pevné látky.

³¹P NMR (MeOH-d₄) : -δ 7,81 (sj .

¹HNMR: -δ 7,74 (1H, s, H8);'6,12 (1H, d, J=5,53 Hz, H2') ;

5,78 (1H, d, H3'); 5,44. (1H, d, J=6,21 Hz, Hl' ) ; 3,74 (2H, t, J=5,42 Hz, H5 ' ) ; 3,70-3,60 (1H, m, CHala); 3,01 (1H, -bs, H4'); 2,84 (1H, d, J=3,28 Hz, CHcPr); 2,73-2,63 (1H, dt, J=8,66 Hz + 5,17 Hz, 1 z H6'); 1, 67-1,58 (1H, m, 1 z CH₂) ; 1,21 (3H, d, J=7,01 Hz, CH₃ala); 0,79-0,73 (2H, q, J=6,68 Hz, 2H z CH₂cPr); 0,53 (2H, t, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: δ 179,8 (CO); 161,2 (C2) ; 157,1 (C4); 151,1 (C6) ; 139,5 (C2'); 137,8 (C8); 130,7 (C3'); 114,6 (C5); 68,0 (C5');

60,5 (Cl'); 51,9 (CHala); 47,6 (C4'); 35,9 (C6');

24,4 (CH₂cPr); 21,7 (CH₃ala) ; 7,6 (CH₂cPr) .

MS ESt: m/z 437,9 (100 procent, M⁺) .

MS FAB: vypočteno m/z 438,165481, nalezeno m/z 438,167842.

• 4

Fenyl-(ethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C11H15NO4CIP, molární hmotnost: 291,67

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byl použit 1,0 gram (6,51 milimolu) hydrochloridu ethylesteru L-alaninu, 1,37 gramu (0,97 mililitru, 6,15 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 1,32 gramu (1,81 mililitru 13,0 milimolů) triethylaminu. Bylo izolováno 1,85 gramu (97,4 procenta) surového produktu ve formě oleje, který byl rozpuštěn v 10 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,63 molárního roztoku, který byl bez dalšího přečištění použit v dalším stupni.

³¹P NMR: δ 9,41, 9,16 (1:1) .

^XH NMR: δ 7,42-7,35 (2H, dd, o-Ph); 7,31-7,25 (3H, m, m- + p-Ph); 4,71 (1H, d, NHala) ; 4,31-4,13. (3H, m, OCH₂ + CHala); 1,55-1,52 (3H, dd, OCH₂CH₃) ; 1,33-1,30 (3H, dd,

CH₃ala) .

¹³C NMR: δ 173,1 (CO); 150,2 (ipso-Ph) ; 130,3 (m-Ph) ;

126,4 (p-Ph); 120,9 (o-Ph); 62,3 (OCH₂); 51,0 (CHala);

20,9 (CH₂CH₃) ; 14,5 (CH₃ala) .

O-Fenyl-(ethoxy-L-alaninyl)-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl587

C24H30O5N7P, molární hmotnost: 527,53

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 300 miligramů (1,4 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,57 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,57 milimolu) a 6,45 mililitru 0,49 molárního roztoku fenyl-

(ethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (3,14 milimolu) ve 20 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí

2,5 procenta methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 290 miligramů (51,1 procenta) čistého produktu ve formě světle žluté pěny.

³¹P NMR: δ 4,04, 3, 96 (1:1) .

^XH NMR: δ 7,39 (1H, d, J=7,56 Hz, H8) ; 7,23-7,18 (2H, t,

J=7,90 Hz, o-Ph); 7,12-7,10 (2H, m, m-Ph); 7,06-7,01 (1H, t, J=7,13 Hz, p-Ph); 6,18 (1H, bs, NHcPr); 5,97-5,95 (1H, t,

H2') ; 5,79-5,75 (1H, t, J=5,55 Hz, H3'); 5,43 (1H, s, H1'); 5,13 (2H, bs, NH₂); 4,30-4,14 (1H, m, NHala), 4,06-4,00 (4H, m, H5' + OCH₂) ; 3, 96-3,84 (1H, m, CHala); 3,03 (1H, d, J=5,74 Hz, H4'); 2,92' (1H, bs, CHcPr); 2,71-2,61 (1H, m, 1 z H6'); 1,601,51 (1H, m, 1 z H6');, 1,29-1,24 (3H, t, J=6,64 Hz, CH₃ala) ; 1,18-1,11 (3H, m, CH₂CH₃) ; 0,75-0,71 (2H, q, J=6,76 Hz, ‘2H z cPr) ; 0,50 (2H, bs, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR. δ 173,35 (CO);’l59,8 (C2); 156,0 (C4); 150,6 (C6) ;

150,4 (ipso-Ph); 136,1.(C2'); 135,1 (C8); 130,8 (C3');

129.3 (m-Ph); 124,5 (p-Ph); 119,8 (o-Ph); 114,4 (C5);

68,6 (C5'); 61,2 (OCH₂) ; 58,5 (Cl'); 50,0 (CHala); 45,3, (C4/);

34.3 (C6'); 23,4 (CH₂cPr) ; 20,6 (CH₃ala) ; 13,8 (CH₂CH₃) .;

7,0 (CH₂cPr)

MS ES⁺: m/z 541,9 (100 procent, M⁺) , 546, 84 (28 procent, M+H⁺) ,

563,8 (25 procent, M+Na⁺) .

MS FAB: pro C₂sH₃₃0sN7NaP vypočteno 542,228081, nalezeno 542,228131.

HPLC: t_R 31,76, 32,03 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), 20 procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut), 100 procent vody (55 minut)).

IČ: 3334,1 (N-H), 1734,5 (C=0), 1595,9, 1488,0 (arom. C-C),

1450.3 (C-H def.), 1394,2 (-CH₃ sym. def.), 1252,8 (P=O);

1210.4 (P-O-aryl), 1153,3 (C-O), 1026,0 (P-O-alkyl),

934.8 (olef. C-H def.), 759,0 (monosubstit. arom. C-H def.).

Fenyl-(benzoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C16H17NO4CIP, molární hmotnost: 353,74

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byl použit 1,0 gram (4,64 milimolu) hydrochloridu benzylesteru L-alaninu, 0,98 gramu (0,69 mililitru, 4,64 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 0,94 gramu (1,29 mililitru, 9,27 milimolu) triethylaminu. Bylo izolováno 1,61 gramu (98,2 procenta) surového produktu, který byl rozpuštěn v 10 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,46 molárního roztoku, který byl bez dalšího přečištění použit v dalším stupni.

³¹P NMR: δ 9,41, 9,23(1:1).

¹H NMR: δ 7,41-7,21 (10H, m, 2 x Ph) ; 5,24 (2H, d, CH₂Ph); 4,95-4,88 (1H, t, NHala); 4,36-4,15 (1H, m, CHala); 1,56 (3H, t, CH₃ala).

¹³C NMR: δ 172,9 (CO); 150,2 (ipso-Ph); 135,5 (ipso-CH₂Ph) ;

130.3 (m-OPh); 129,0 (o-CH₂Ph); 128,7 (m- + p-CH₂Ph);

126.4 (p-OPh); 121,0 (o-OPh) 68,0 (OCH₂) ; 51,1 (CHala);

20.8 (CH₃ala).

3 : I ' ! ϊ !; · ί Z • · * Λ · ·····<· · • · · 4 ·. 4 · 4

4'4 ♦ ··· ♦» Λ 4.4

O-Fenyl-(benzoxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu

Cfl582

C30H35O5N7P, molární hmotnost: 603,6

Uvedená sloučenina, byla syntetizována standardním 'postupem 4, kdy byla použita směs 400 miligramů (1,4 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 2,1 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (2,1 milimolu) a 9,2 mililitru 0,46 molárního roztoku fenyl(benzoxy-L-alaninyl)-fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (4,19 milimolu) ve 20 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 64 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí nejprve směsí 3 procent methanolu v chloroformu a následně směsí 2,5 procenta methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno

82,2 miligramu (9,75 procenta) produktu ve formě bílé pěny.

Druhá syntéza byla provedena z 200 miligramů (0,7 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 2,43 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (2,43 milimolu) a 2,2 mililitru 0,46 molárního roztoku fenyl-(benzoxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (2,1 milimolu) v

2,5 mililitru bezvodého tetrahydrofuranu (THF). Přečištěním sloupcovou chromatografií s elucí nejprve směsí 3 procent methanolu v chloroformu a následně směsí 2,5 procenta methanolu v chloroformu bylo získáno 90 miligramů (21,3 procenta) produktu ve formě bílé pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 3,82, 3,72 (1:1) .

• · «· · · 9 · · • ⁹ · * * · · · - · · • · « · · » « · f « fc · · ς «······ I · · 9 9 9 9 «’ »····· W · 9> 99 9 ^TH NMR: δ 7,51 (1H, d, H8); 7,37-7,15 (10H, m, OPh + CH₂Ph);

6,10-6,04	(1H,	m, H2 '	); 5,96 (1H, bs	, NHcPr);	5,89	(1H,	dd,
J=5,36 Hz,	H3'	); 5,54	(1H, t, H1z);	5,16 (2H,	bs,	NH2) ;
4,96 (2H,	bs,	CH2Ph);	4,23-4,05 (3H,	m, NHala	+ H5	'); 3,	89-
3,70 (1H,	dt,	CHala);	3,16-3,12 (1H,	t, H4');	3,03	(1H,	bs,
CHcPr); 2,	85-2	,71 (1H	, m, 1 z H6');	1,74-1,64	(1H,	m,

z H6^Z); 1,44-1,39 (3H, t, J=7,84 Hz, CH₃ala); 0,88 (2H, q, J=6,75 Hz, 2H z cPr) ; 0,64 (2H, m, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR. δ 173,3 (CO); 159,7 (C2); 156,0 (C4); 150,9 (C6) ;

150.7 (ipso-OPh); 136,4 (C2^Z); 135,7 (ipso-Ph); 135,2 (C8); 131,0 (C3^Z); 129,6 (o-Bn); 128,6 (m-Bn); 128,5 (p-Bn);

128,2 (m-OPh); 124,9 (p-OPh); 120,1 (o-OPh); 114,8 (C5);

68,8 (C5^Z); 67,2 (CH₂Ph) ; 58,9 (Cl'); 50,3 (CHala) ; 45,6 (C4^Z);

34.4 (C6') ; 23,7 (CHcPr); 21,0 (CH₃ala) ; 7,4 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 603,8 (100 procent, M⁺) , 604,8 (30 procent, M+H⁺) ,

625.7 (20 procent, M+Na⁺) .

MS FAB: pro C₃oH₃50sN7P vypočteno 604,243731, nalezeno

604,241775.

HPLC: t_R 33,39 (99,7 procenta)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

IČ: 3355,9 (N-H), 2923,3, 2853,7 (C-H), 1734,1 (C=O),

1595, 6 (arom. C-C), 1458,4 (C-H def..), 1376,5 (-CH₃ sym. def.),

1154.4 (C-O), 1028,2 (P-O-alkyl), 935,8~(olef. C-Hdef.),

721.7 (monosubstit. arom. C-H def.).

Hydrochlorid n-propylesteru L-alaninu

C₆Hi₄NO₂C1, molární hmotnost: 167,634

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 1, kdy bylo použito 42,0 mililitrů (0,56 molu) bezvodého propan-l-olu, 8,2 mililitru (0,112 molu)

• · to · • tototo

W · Š

thionylchloridu a 5,0 gramů (0,056 molu) L-alaninu. Bylo izolováno 8,88 gramu (94,3 procenta) produktu ve formě pevné bílé látky.

^XH NMR (MeOH-d₄) : δ 4,34-4,26 (2H, m, OCH₂) ; 4,24-4,17 (1H, q,

CHala); 1,88-1,78 (2H, m, CH₂) ; 1,65 (3H, d, J=7,24 Hz,

CH₃ala) ; 1,10-1,05 (3H, t, CH₂CH₃) .

¹³C NMR: δ 170,1 (CO); 68,0 (OCH₂) ; 48,9 (CHala); 21,9 (CH₂) ;

15.3 (CH₃ala), 9,5 (CH₂CH₃) .

Fenyl-(n-propoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

Ci₂Hi₇NO₄C1P, molární hmotnost: 305,79

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,5 gramu (2,98 milimolu) hydrochloridu n-propylesteru L-alaninu, 0,45 mililitru (2,98 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a .

0,83 mililitru (5,97 milimolu) triethylaminu v 70 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 0,84 gramu (92,1 procenta) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn v 5 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,55 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,41, 9,17 (1:1).

¹³C NMR: δ 173/1 (CO); 150,1 (ipso-Ph); 130,0 (m-Ph) ;

126,4 (p-Ph); 121,0 (o-Ph); 67,9 (OCH₂) ; 51,0 (CHala);

22.3 (CH₂CH₃) ; 21,0 (CH₃ala) ; 10,7 (CH₂CH₃) .

O-Fenyl-(n-propoxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl646

C₂₆H₃₄O₅N₇P, molární hmotnost: 555, 57

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů • · (0,35 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a·1,9 mililitru 0,55 molárního roztoku fenyl-(n-propyl-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) ve 3 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí směsí 3 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 123 miligramů (63,4 procenta) čistého produktu ve formě světle žluté pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 4,06, 3,98 (1:1) .

^XH NMR: δ 7,40 (1H, d, J=7,99 Hz, H8); 7,23-7,18 (2H, dd, o-Ph); 7,12-7,02 (3H, m, m- + p-Ph); 6,16 (1H, bs, H3'); 5,96 (1H, t, H2') ; 5,78 (1H, d, J=5,83 Hz, NHcykl); 5,44 (1H, bs, Hl'); 5,15 (2H, bs, NH₂) ; 4,33-4,18 (1H, m, CHala), 4,154,04 (2H, m, OCH₃) ; 4,01-3,88 (2H, m, H5'); 3,65 (1H, bs, NHala); 3,03 (1H, d, H4(); 2,92 (1H, bs, CHcykl); 2,722,62 (1H, m, 1 z H6'); 1, 60-1,47 (3H, m, 1 z H6' + CH₂CH₃) ;

1, 30-1,26 (3H, t, CH₃ala) ; 0,84-0,80 (3H, m, CH₂CH₃) ; 0,73 (2H, d, J=6,8 Hz, 1 z CH₂cykl); 0,51 (2H, bs, 1 z CH₂cykl).

¹³C NMR: δ 174,1 (CO); 160,4 (C2); 156,6 (C4) ; 151,1 (C6 + ipso-Ph); 136,8 (C2'); 135,9 (C8); 131,5 (C3'); 130,0 (m-Ph);

125.2 (p-Ph); 120,5 (o-Ph); 115,0 (C5); 69,2 (C5');

67,4 (OCH₂); 59,2 (Cl'); 50,6 (CHala); 46,0 (C4'); 35,0 (C6');

24.2 (CH₂cPr); 22,3 (CH₂CH₃) ; 21,5 (CH₃ala) ; 10,7 (CH₂CH₃) ;

7,7 (CH₂cykl) .

MS ES⁺: m/z 555,8 (100 procent, M⁺) , 557,0 (30 procent, M+H⁺) . MS FAB: pro C₂₆H₃5O₅N7P vypočteno 556, 2437, nalezeno 556,2438.

• * « · · ·'. · · φ „9 9.9 · · ·' « „ ·, · « » » i · · Φ ·· ♦ • Φ Φ · · φφφφφ·» φ • φ φ φ φ φ φφ' • •ΦΦΦΦ φφ 9) 9 9 9

HPLC: t_R 34,708 (100 procent) - (100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

Hydrochlorid n-butylesteru L-alaninu

C7H16NO2CI, molární hmotnost: 181,661

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 1, kdy bylo použito 51,4 mililitru (0,56 molu) bezvodého butan-l-olu, 8,2 mililitru (0,112 molu) thionylchloridu a 5,0 gramů (0,056 molu) L-alaninu. Bylo izolováno 8,86 gramu (86,9 procenta) produktu ve formě pevné bílé látky.

^XH NMR (MeOH-d₄) : δ 4,29-4,17 (2H, m, OCH₂) ; 4,13-4,06 (1H, q, CHala); 1,71-1,62 (2H, m, OCH₂CH₂) ; 1,53 (3H, d, J=7,25 Hz, CH₃ala); 1,47-1, 34 (2H, m, CH₂CH₃) ; 0, 96-0, 91 (3H, t, CH₂CH₃) .

¹³C NMR: δ 170,1 (CO); 66,2 (OCH₂) ; 48,9 (CHala);

30,6 (OCH₂CH₃) ; 19,0 (CH₂CH₃) ; 15,3 (CH₃ala) , 13,.0 (CH₂CH₃) .

Fenyl-(n-butoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

Ci₃Hi₉NO₄C1P, molární hmotnost: 317,82

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,5 gramu (2,75 milimolů) hydrochloridu n-butylesteru L-alaninu, 0,41 mililitru (2,75 milimolů) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 0,77 mililitru (5,5 milimolů) triethylaminu v 80 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 0,84 gramu (94,5 procenta) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn v 5 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,525 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,39, 9, 10 (1:1).

’ 48 ♦ » ·4 • · C' 9 “ · » » ^XH NMR: δ 7,43-7,15 (5H, m, Ph); 4,68-4,59 (1H, q, CHala); 4,27-4,05 (3H, m, OCH₂ + NHala); 1,73-1,59 (2H, m, OCH₂CH₂) ; 1,56-1,53 (2H, dd, CH₂CH₃) ; 1,46-1,37 (3H, m, CH₃ala) ; 1,000,92 (3H, m, CH₂CH₃) .

¹³C NMR: δ 173,2 (CO); 150,1 (ipso-Ph); 130,3 (m-Ph);

126,4 (p-Ph) ; 121,0 (o-Ph) ; 66,2 (OCH₂) ; 51,0 (CHala);

30,9 (OCH₂CH₂) ; 21,0 (CH₃ala) ; 19,4 (CH₂CH₃) ; 14,1 (CH₂CH₃) .

O-Fenyl-(n-butoxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl647

C₂7H3₆O₅N7P, molární hmotnost: 569,597

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů (0,35 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a 2,0 mililitry 0,525 molárního roztoku fenyl-(n-butyl-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) ve 3 mililitrech tetrahydrofuranu (THF) , která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí směsí 3 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 157 miligramů (78,9 procenta) čistého produktu ve formě světle žluté pěnové pevné látky.

31P	NMR: δ 4,01,	3,95 (1:1).
TH	NMR: δ 7,40	(1H, d, J=7,32	Hz, H8),
t,	o-Ph); 7,11	(2H, t, m-Ph);	7,04 (1
bs,	H3'); 5,97	(1H, t, H2')·;	5,78 (1H
bs,	Hl'); 5,06	(2H, bs, NH2) ;	4,22-3,1
H5'	+ NHala), 3	,05 (1H, d, H4	'); 2,93

5,78 (1H, bs, NHcykl); 5,44 (1H, • ·’ '9 9 · 9 » · · ·'· 9j 9' · ··

2,62 (1H, m, 1 z H.6'); 1,61-1,47 (3H, m, 1 z H6' + OCH₂CH₂) ; 1,30-1,26 (5H, t, CH₃ala + CH₂CH₃) ; 0,85-0,80 (3H, t, CH₂CH₃) ; 0,74 (2H, d, J=6,45 Hz, 1 z CH₂cykl); 0,51 (2H, bs, 1 z CH₂cykl) .

¹³C NMR. δ 174,1 (CO); 160,4 (C2) ; 156,7 (C4); 151,2 (C6) ;

151,1 (ipso-Ph); 136,7 (C2'); 135,8 (C8) ; 131,5 (C3');

130,0 (m-Ph); 125,2 (p-Ph); 120,5 (o-Ph); 115,0 ’(C5);

69.3 (C5'); 65,8 (OCH₂) ; 59,2 (Cl'); 50,6 (CHala); 46,0 (C4 ') ; 35,0 (C6'); 30,9 (OCH₂CH₂) ;. 24,1 (CHcPr); 21,5 (CH₃ala);

19.4 (CH₂CH₃) ; 14,1 (CH₂CH₃) ;. 7,8 (CH₂cykl).

MS ES⁺: m/z 569, 9 (70 procent, M⁺) , 570,9 (20 procent, M+H⁺) , 591,8 (100 procent, M+Na⁺) , 607,8 (20 procent, M+K⁺) .

HPLC: t_R 38,27 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

Hydrochlorid isopropylesteru L-alaninu

C₆H₁₄NO₂C1, molární hmotnost: 167,634

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 1, kdy bylo použito 43 mililitrů (0,56 molu) bezvodého propan-2-olu, 8,2 mililitru (0,112 molu) thionylchloridu a 5,0 gramů (0,056 molu) L-alaninu. Bylo izolováno 8,86 gramu (86,9 procenta) produktu ve formě semikrystalické pevné látky.

^XH NMR (MeOH-d₄) : δ 5,16-5,08 (1H, m CHala); 4,11-4,04 (1H, q, OCH(Me)₂); 1,55 (3H, d, J=7,21 Hz, CH₃ala); 1,34-1,31 (6H, dd, CH(Me)₂).

¹³C NMR. δ 169,5 (CO); 70,8 (COCH(Me)₂); 48,9 (CHala);

15,3 (CH(Me)₂).

0' ·· «·' 0 0 0 0 0 0 0; ·' 0 »' «' 0' 0! «a

0' '0 0 > 0 0 0 0 0 * · 0 ϊ» · 0 ·*·· ·, · · *

9 *00« ·'« 9 0-0 00*

Fenyl-(isopropoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C12H17NO4CIP, molární hmotnost: 305,79

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,5 gramu (2,98 milimolu) hydrochloridu isopropylesteru L-alaninu, 0,45 mililitru (2,98 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 0,83 mililitru (5,97 milimolu) triethylaminu v 70 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 1,12 gramu (>100 procent) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn v 5 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,597 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,45, 9,17 (1:1) .

¹³C NMR: δ 172,6 (CO); 150,2 (ipso-Ph); 130,3 (m-Ph) ;

126,4 (p-Ph); 121,0 (o-Ph); 70,1 (OCH) ; 51,1 (CHala) ;

22,1 (CH(CH₃)₂); 20/9 (CH₃ala) .

O-Fenyl-(isopropoxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl661

C26H34O5N7P, molární hmotnost: 555,57

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů (0,35 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a 1,76 mililitru 0,597 molárního roztoku fenyl-(ísopropyl-L-alaninyl)fosforchlóridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) ve 3 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 72 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl dvakrát přečištěn elucí směsí 3 procent methanolu v chloroformu, čímž • · ·· ·· 9 »9 • · · « 9 9· 9' ·' ·' •9 9 ·< 9 9 9 9· · · bylo získáno 106,8 miligramu (54,8 procenta) čistého produktu ve formě světle žluté pěnové pevné látky.

³¹P NMR:· δ 4,02, 3,98 (1:1) .

NMR: δ 7,41 (1H, d, J=8,12 Hz, H8); 7,24-7,19 (2H, m, o-Ph); 7,13-7,03 (3H, m, m- + p-Ph); 6,37 (1H, bs, NHcPr);

5.98 (1H, t, H3' ) ; 5,80-5,76 (1H, m, H2') ; 5,43 (1H, bs, H1'); 5,21 (2H, bs, NH₂); 4,94-4,86 (1H, m, OCH), 4,15-3,98 (2H, m, H5') ; 3,92-3,83 (1H, m CHala); 3,59 (1H, bs, NHala); 3,062.98 (1H, m, H4 ') ; 2,93 (1H, bs, CHcPr); 2,74-2,63 (1H, m, z H6'); 1,62-1,53 (1H, m, 1 z H6'); 1,34-1,18 (3H, m,

CH₃ala) ; 1,15-1,11 (6H, m, CH(CH₃)₂); 0,79-0,73 (2H, q, 2H z CH₂cPr); 0,53 (2H, bs, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR. δ 173,5 (CO); 159,8 (C2); 156,2 (C4); 151,1 (C6) ; 151,0 (ipso-Ph); 136,9 (C2'); 136,1 (C8); 131,3 (C3');

130,0 (m-Ph); 125,3 (p-Ph); 120,5 (o-Ph); 115,0 (C5);

69,6 (C5'); 69,2 (OCH); 59,3 (Cl'); 50,7 (CHala); 46,0 (C4');

34,9 (C6'); 24,2 (CHcPr); 22,0 (CH(CH₃)₂); 21,4 (CH₃ala) ;

, 8 (CH₂cykl) .

MS ES⁺: m/z 555,9 (100 procent, M⁺) , 556, 9 (30 procent, M+H⁺) . MS MALD/I TOF: pro C26H35O5N7P nalezeno 555,575.

HPLC: t_R 35,85 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

Fenyl-(terč. butyloxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C16H17NO4CIP, molární hmotnost: 353,74

Uvedená -sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,5 gramu (2,75 milimolu)· hydrochloridu terč. butylesteru L-alaninu, 0,41 mililitru (2,75 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 0,77 mililitru (5,5 milimolu) triethylaminu, přičemž bylo ·* 14 4 44 4 '·» • 4 4- 4 4 · '·' ?«' 4 4

4 4 4 4 4 4 4 ' 4 ' '

4 4 ’4 4 4 4 44 4 4 · 4 ,44 4444 44 4 4 4 4.

izolováno 0,77 gramu (87,5 procenta) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn v 5 mililitrech· bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,48 molárního roztoku, který byl bez dalšího přečištění použit v následujícím stupni.

³¹P NMR: δ 9,53, 9,20 (1:1).

^XH NMR: δ 7,44-7,39 (2H, t, o-Ph) ; 7,32-7,26 (3H, m, m- + p-Ph) ; 4,47-4,34 (1H, m, NHala); 4,17-4,04 (1H, m,' CHala) ;

1,53 (9H, 3s, 3 x CH₃) .

¹³C NMR: δ 170,7 (CO); 148,7 (ipso-Ph); 128,9 (o-Ph) ;

124,9 (p-Ph); 119,5 (m-Ph) ; 81,65 (CMe₃) ; 50,0 (CHala);

26, 9 (3 x CH₃) .

O-Fenyl-(terč. butyloxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl645

C24H₃o0₅N₇P, molární hmotnost: 603,6

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 140 miligramů (0,52 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Ηpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 1,05 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) a 3,3 mililitru 0,48 molárního roztoku fenyl-(terč. butyloxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,57 milimolu) ve 4 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) ,. která byla míchána 48 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí směsí 3 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 192,3 miligramu (69,0 procent) čistého produktu ve formě bílé pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 4,15 (s) .

·· ·· '·* · ·· * · ·’ .· - · · ♦' . · ·' • · · · · · · · · • · · ’· · ···'·· 9 9 ·

XH	NMR: δ	7,40 (1H, d, J=8,35	Hz,	, H8); 7,23-7,18 (2H,
t,	m-Ph);	7,12 (2H, d, o-Ph);	7,	06-7,02 (1H, t, p-Ph);
6,	09 (1H,	bs, H2') ; 5,97 (1H,	bs	, H3J; 5,77 (1H, d, NHcP	r) ;
5,	44 (1H,	bs, HI') ; 5,10 (2H,	bs	, NH2) ; 4,14-4,05 (3H, m,	H5'
NH	ala); 3	,85-3,77 (1H, q, CHa	laj	; 3,04 (1H, bs, H4') ;
2,	93 (1H,	bs, CHcPr); 2,72-2,	62	(1H, m, 1 z H6'); 1,58-
1,	53 JIH,	t, 1 z H6'); 1,34 (	9H,	d, CMe3) ; 1,27-1,23 (3H,	t,

CH₃ala); 0,73 (2H, d, 2H z CH₂cPr); 0,51 (2H, bs, 2H z CH₂cPr). ¹³C NMR. δ 173,2 (CO); 160,4 (C2); 156,7 (C4); 151,2 (C6 + ipso-Ph); 136,8 (C2J; 135,9 (C8); 131,5 (C3^Z); 130,0 (m-Ph);

125.2 (p-Ph); 120,6 (o-Ph); 115,2 (C5) ; 82,3 (C(CH₃)₃);

69,3 (C5J; 59,1 (ď); 46,0 (C4 ') ; 35,0 (C6'); 28,3 (3 x CH₃)

24.2 (CHcPr); 21,5 (CH₃ala); 7,8 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 570,0 (100 procent, M⁺) , 570,9 (32 procentM+H⁺) . MS FAB: pro C₂₇H₃₇O₅N₇P vypočteno 57 0,2594, nalezeno 570,2598. HPLC: t_R 36,158 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

Hydrochlorid n-pentylesteru L-alaninu

CsHi6NO₂Cl, molární.hmotnost: 195,69

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 1, kdy bylo použito 36,3 mililitru (0,337 molu) pentan-l-olu, 4,92 mililitru (67,4 milimolu) thionylchloridu a 3,0 gramů (33,7 milimolu) L-alaninu. Bylo izolováno 4,86 gramu (73,7 procenta) čistého produktu ve formě bílé pevné látky.

^XH NMR (MeOH-d₄) : δ 4,32-4,20 (2H, m, OCH₂) ; 4,16-4,08 (1H, m CHala); 1,77-1,68 (2H, m, OCH₂CH₂) ; 1,56 (3H, d, J=7,22 Hz, CH₃ala) ; 1,42-1,36 (4H, m, CH₂CH₂CH₃) ; 0, 97-0, 93 (3H, m,

CH₂CH₃) .

*« ť

• · · .9 9 9 · 9 9 9

9 · · · · · · · ♦ · · « · · 9 9 9·9 9 9 9

9 9 · 9 9 9 9 tt 9999 99 9 99 9 ¹³C NMR: δ 170,1 (CO); 66,5 (OCH₂) ; 48,8 (CHala);

28.2 (OCH₂CH₂) ; 28,0 (CH₂CH₂CH₃) ; 22,3 (CH₂CH₃) ; 15,2 (CH₃ala) ;

13.3 (CH₂CH₃) .

Fenyl-(n-pentoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C14H21NO4CIP, molární hmotnost: 333, 78

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,5 gramu (2,56 milimolu) hydrochloridu n-pentylesteru L-alaninu, 0,38 mililitru (2,56 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 0,71 mililitru (5,11 milimolu) triethylaminu. v 60 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 0,79 gramu (92,6 procenta) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn v 5 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,47 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,39, 9,12 (1:1) .

^XH NMR: δ 7,43-7,38 (2H, m, o-Ph); 7,32-7,25 (3H, m, m- + p-Ph); 4,63 (1H, bd, NHala);. 4,24-4,11 (3H, m, OCH₂ + CHala); 1,73-1,65 (2H, m, OCH₂CH₂) ; 1,57-1,53 (3H, dd, CH₃ala) ; 1,421,35 (4H, m, 2 x CH₂) ; 0,97-0,91 (3H, m CH₂CH₃) .

¹³C NMR. δ 173,1 (CO); 150,1 (ipso-Ph); 130,3 (m-Ph);

126,4 (p-Ph) ; 121,0 (o-Ph); 66,5 (OCH₂) ; 51,0 (CHala);

28,6 (CH₂-C2); 28,3 (CH₂-C3); 22,7 (CH₂-C4); 21,0 (CH₃ala) ;

14,1 (CH₃-C5)

O-Fenyl-(n-pentyloxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl706

0₂8Η₃₈Ο₅Ν7Ρ, molární hmotnost: 583,7

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů • to '♦« to« · • .· to¹ · · · · ·· · · · · · to · ·. (· to ···· • · · · · · • to ···· ·· · (0,35 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru l, 0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a 2,22 mililitru.

0,47 molárního roztoku fenyl-(n-pentyl-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) ve 3 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl dvakrát přečištěn elucí směsí 2,5 až 3 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 143,2 miligramu (70,2 procenta) čistého produktu ve formě světle žluté pěnové pevné látky. .

³¹P NMR: δ 3,99, 3,95 (1:1).

³H NMR: δ 7,41 (1H, d, J=7,18 Hz, H8) ; 7,24-7,19 (2H, m, o-Ph); 7,12-7,02 (3H, m, m- + p-Ph); 6,09 (1H, bs, NHcPr);

5,98 (1H, d, H2') ; 5,79 (1H, bs, H3'); 5,44 (1H, bs, Hl') ; 5,09 (2H, bs, NH₂) ; 4,16-3, 88 (6H, m, CHala, OCH₂, H5' + NHala); 3,05 (1H, bs, H4 ' ) ; 2,94 (1H, bs, CHcPr); 2,732,63 (1H, m, 1 z H6'); 1,62-1,51 (3H, m, 1 z H6' + OCH₂CH₂) ; 1,31-1,21 (7H, t, CH₃ala + 2 x CH₂) ; 0,81-0,74 (5H, m, CH₃ +

2H z CH₂cPr) ; 0,52 (2H, bs, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR. δ 174,1 (CO); 160,1 (C2) ; 156,5 (C4) ; 151,2 (C6) ;

151,1 (ipso-Ph); 136,8 (C2'); 136,1 (C8); 131,5 (C3');

130,0 (m-Ph); 125,2 (p-Ph); 120,5 (o-Ph); 115,1 (C5);

69,3 (C5'); 66,1 (OCH₂) ; 59,3 (Cl'); 50,7 (CHala); 46,0 (C4') ;

34,9 (C6'); 28,6 (CH₂-C2); 28,3 (CH₂-C3); 24,2 (CHcPr);

22,6 (CH₂-C4); 21,5 (CH₃ala) ; 14,3 ' (CH₃-C5) ; 7,8 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 584,2 (100 procent, M⁺) , 585,2 (25 procent, M+H⁺) . MS FAB: pro C₂8H₃gO5N₇P vypočteno 584,2750, nalezeno 584,2757.

'··

HPLC: t_R 40,294 (99,3 procenta)-(100 procent vody (0 minut), 20 procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

Hydrochlorid n-hexylesteru L-alaninu

C9H20NO2CI, molární hmotnost: 209,75

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 2, kdy byly použity 2,0 gramy (22,5 milimolu)

L-alaninu, 2,82 mililitru (22,5 milimolu) hexan-l-olu,

4,7 gramu (24,7 milimolu) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové a 100 mililitrů toluenu. Bylo izolováno 3,32 gramu (70,5 procenta) hydrochloridu n-hexylesteru L-alaninu ve formě bílé práškové látky.

^ΧΗ NMR (MeOH-d₄) : δ 4,31-4,18 (2H, m, OCH₂) ; 4,17-4,09 (1H, q CHala) ; 1,75-1,66 (2H, m, OCH₂CH₂) ; 1,57 (3H, d, J=7,20 Hz, CH₃ala); 1,45-1,35 (6H, m, (CH₂)₃CH₃); 0, 94-0,89 (3H, t,

CH₂CH₃) .

¹³C NMR: δ 170,1 (CO); 66,5 (OCH₂) ; 48,9 (CHala);

*

31.6 (OCH₂CH₂); 28,6 (O(CH₂)CH₂); 25,6 (CH₂CH₂CH₃) ;

22.6 (CH₂CH₃) ; 15,4 (CH₃ala) ; 13,4 (CH₂CH₃) .

Fenyl-(n-hexyloxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C₁₅H₂₃NO₄C1P, molární hmotnost: 347,81

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,5 gramu (2,38 milimolu) hydrochloridu n-hexylesteru L-alaninu, 0,36 mililitru (2,38 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a 0,66 mililitru (4,77 milimolu) triethylaminu v 60 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 0,69 gramu (83,2 procenta) surového produktu ve formě žlutého ·· ·· '57 • · oleje, který byl rozpuštěn ve 4 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,496 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,40, 9,10 (1:1).

^XH NMR: δ 7,44-7,14 (5H, m, OPh); 4,25 (1H, bs, NHala); 4,234,03 (3H, m, OCH₂ + CHala); 1,70-1,63 (2H, m, CH₂-2); 1,571,54 (2H, m, CH₂-3); 1,47-1,32 (7H, m, CH₃ala + 2CH₂-4,5);

0,93-0,91 (3H, dd, CH₃-6) .

¹³C NMR: δ 173,2 (CO); 150,1 (ipso-Ph); 130,3 (m-Ph) ;

126,4 (p-Ph); 120,9 (o-Ph); 66,4 (OCH₂) ; 51,0 (CHala);

31,7 (CH₂-C2); 28,9 (CH₂-C3); 25,8 (CH₂-C4) ; 22,9 (CH₂-C5) ;

21,0 (CH₃ala); 14,4 (CH3-C6)

O-Fenyl-(n-hexyloxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu. C₂9H₄o0₅N7P, molární hmotnost: 597,651

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů (0,35 milimolu) (1S, 4R)-4-(2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a 2,11 mililitru 0,496 molárního roztoku fenyl-(n-hexoxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) ve '3 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. K reakční směsi bylo přidáno dalších 1,5 mililitru 0,496 molárního roztoku fenyl-(n-hexoxyL-alaninyl) -fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (0,68 milimolu) a byla míchána dalších 24 hodin. Surový produkt byl dvakrát přečištěn elucí směsí 3 procent methanolu v chloroformu, čímž byl získán čistý produktu ve formě světle žluté pěnové pevné látky.

'1 ³¹P NMR: δ 3, 94, 3, 91 (1:1).

1H	NMR: δ	7,52	(1H, d,	J=8,00 Hz, H8);	7,36-7,31 (2H,
m,	o-Ph);	7,25	-7,15 (3H, m, m- + p-Ph)	; 6,26 (1H, bs, NHcPr);
6,	13-6,08	(1H,	m, H2')	; 5,93-5,88 (1H,	m, H3Z); 5,58-5,53 (1H,
m,	H1z ) ;	5,14	(2H, bs,	NH2) ; 4,28-3,89	(6H, m, CHala, OCH2, H5
+	NHala);	3, 17	(1H, t,	H4 ') ; 3,04 (1H,	bs, CHcPr); 2,87-
2,	75 (1H,	m, 1	z H 6 ' ) ;	1,74-1,61 (3H,	m, 1 z H6Z + OCH2CH2) ;
1,	43-1,31	(9H,	t, CH3ala + 3 x CH2) ; 0,	92-0,85 (5H, m, CH3 +

2H z CH₂cPr); 0,68-0,63 (2H, q, 2H z CH₂cPr).

¹³C NMR: δ 174,1 (CO); 160,1 (02); 156,5 (C4); 151,2 (06);

151,1 (ipso-Ph); 136,9 (C2^Z); 136,0 (C8); 131,4 (C3^Z);

130,0 (m-Ph); 125,3 (p-Ph); 120,5 (o-Ph); 115,0 (05);

69.2 (C5^Z); 66,1 (OCH2) ; 59,3 (Cl^z); 50,7 (CHala); 46,0 (C4') ; 34.,9 (C6^Z); 31,7 (OCH2CH₂) ; 28,8 (CH₂ ^Lester); 25,8 (CH₂-ester);

24.2 (CHcPr); 21,9 (CH₂-estér) ; 21,5 (CH₃ala); 14,4 (CH₃ester); 7,8 (CH₂cPr).

Hydrochlorid cyklohexylesteru L-alanínu

C₉Hi₆NO₂Cl, molární hmotnost: 205,71

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 2, kdy byly použity 2,0 gramy (22,5 milimolů)

L-alaninu, 2,34 mililitru (22,5 milimolů) cyklohexanolu,

4,7 gramu (24,7 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové a 100 mililitrů toluenu. Bylo izolováno 1,45 gramu p-toluensulfonátové soli ve formě světle oranžové pevné látky.

Uvedená reakce byla zopakována, přičemž byly použity 3,0 gramy (33,7 milimolů) L-alaninu, 5,26 mililitru (50,6 milimolů) cyklohexanolu, 9,62 gramu (50,6 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové a 100 mililitrů toluenu. Bylo izolováno ·· ·

3.15 gramu (45,45 procenta) hydrochloridu cyklohexylesteru L-alaninu ve formě pevné bílé látky.

^XH NMR (MeOH-d₄) : δ 4,90 (1H, m, OCH); 4,12-4,04 (1H, q CHala); '1,92-1,81 (2H, m, OCHCH₂) ; 1,80-1,63 (2H, m, OCHCH₂) ; 1,55 (3H, d, J=7,23 Hz, CH₃ala) ; 1,49-1,33 (6H, m, (CH₂)₃).

¹³C NMR: δ 169,5 (CO); 75,4 (OCH); 48,9 (CHala);

31,3 (2 x CH₂-o) ; 25,2 (2 x CH₂-m) ; 23,5 (p-CH₂) ; 15,3 (CH₃ala) .

Fenyl-(cyklohexyloxy-L-alaninyl)-fosfórchloridát

Ci5H₂iNO₄ClP, molární hmotnost: 345, 79

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,7 gramu (3,4 milimolu) hydrochloridu cyklohexylesteru L-alaninu, 0,51 mililitru (3,4 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl₂) a0,95 mililitru (6,8 milimolu) triethylaminu v 60 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 1,12 gramu (95,2 procenta) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn v 7 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,46 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9, 43, 9, 07 (1:1).

^XH NMR: δ 7,44-7,33 (2H, m, o-Ph); 7,32-7,20 (3H, m, m- + pPh); 4,92-4,83 (1H, m OCH); 4,55-4,42 (1H, m, NHala); 4,284.15 (1H, m, CHala); 1,89 (2H, bd, CH₂-o) ; 1,76 (1H, bd,

CH₂-o); 1,54 (3H, d, CH₃ala); 1,49-1,32 (6H, m,

CH3CH2- m- + p-) .

¹³C NMR: δ 172,5 (CO); 150,1 (ipso-Ph); 130,3 (m-Ph) ;

12.6,4 (p-Ph); 121,0 (o-Ph); 74,9 (OCH); 51,1 (CHala);

31,8 (CH₂-o); 25,6 (CH₂-p); 21,0 (CH₃ala).

·4 44 4 • · · · 4 4 4 4 « · • · · -4 < ·4* 4 , 4 • 4 * 44 4444444 4

444 444 44

444444 44 4 4 4 «

O-Fenyl-(cyklohexyloxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-{2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl707

C29H38O5N7P, molární hmotnost: 595,635

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů (0,35 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a 2,28 mililitru 0,46 molárního roztoku fenyl-(cyklohexoxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) ve 3 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí nejprve směsí 3 až 4 procent methanolu v chloroformu a potom směsí 2,5 až 3,0 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 199 miligramů (95,7 procenta) čistého produktu ve formě světle žluté pěnové pevné látky.

31P NMR: δ 4,06, 3, 99 (1:1).
XH NMR: δ 7,42 (1H,	d, J=8,15 Hz, H8);	7,23-7,18 (2H,
m, o-Ph); 7,12-7,02	(3H, m, m- + p-Ph)	; 6,31 (1H, bs,	NHcPr);
5, 98 (1H, bs, H2 ') ;	5,78 (1H, bs, H3')	; 5,43 (1H, bs,	H1') ;
5,21 (2H, bs, NH2) ;	4,66 (1H, bs, OCH)	; 4,17-4,02 (3H,	m, H5 '

NHala); 3,95-3,85 (1H, m, CHala); 3,05-2,94 (2H, m, H4' + CHcPr); 2,73-2,63 (1H, m, 1 z H6'); 1,69 (2H, bs, CH₂-o) ; 1,621,53 (2H, m, CH₂-o) ; 1,45-1,18 (9H, m, CH₃ala + x CH₂- m- + p-); 0,76 (2H, d, 2H z CH₂cPr) ; 0,53 (2H, bs,

2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: δ 172,0 (CO); 158,4 (C2); 154,8 (C4); 149,7 (C6) ;

149.6 (ipso-Ph); 135,5 (C2'); 134,7 (C8); 130,0 (C3');

128.6 (m-Ph); 123,8 (p-Ph); 119,1 (o-Ph); 113,1 (C5);

··

• · ♦ · • 4 * 0 • · · ·« ····

44,7 (C4');

72,9 (OCH); 67,8 (C5'); 57,9 (Cl'); 59,4 (CHala); 44 34,5 (C6') ; 30,3 (CH₂-o) ; 24,2 (CH₂-m) ; 22,8 (CHcPr);

22,5 (CH₂-p) ; 20,1 (CH₃ala) ; 6,4 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 596, 2 (100 procent, M⁺) , 597,3 (20 procent, M+H⁺) . MS FAB: pro 0₂9Η₃₉0₅Ν₇Ρ vypočteno 596,2750, nalezeno 596,2750. HPLC: t_R 40,502 (99,8 procenta)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

Hydrochlorid cyklohexanmethylesteru L-alaninu

ΟιοΗ₂₀Ν0₂01, molární hmotnost: 221,75

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 2, kdy byly použity 3,0 gramy (33,7 milimolu) L-alaninu, 4,15 mililitru (33,7 milimolu) cyklohexanmethanolu, 7,05 gramu (37,1 milimolu) .monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové a 100 mililitrů toluenu. 9,2 gramu p-toluensulfonátové (PTSA) soli bylo rozpuštěno v mililitrech dichlormethanu (DCM) a roztok byl promyt 50 mililitry 10 procentního uhličitanu draselného a 2 x 50 mililitry vody, vysušen nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrován a při sníženém tlaku zcela zbaven rozpouštědel, čímž byl získán.žlutý olej. Tento olej byl zneutralizován 2 molární kyselinou chlorovodíkovou, 2 hodiny míchán a lyofilizován za vzniku 4,32 gramu (75,8 procenta) uvedeného hydrochloridu ve formě pevné bílé látky.

NMR (MeOH-d₄) : δ 4,19-4,01 (3H, m,,OCH + CHala); 1,791,69 (5H, m, CH + o-CH₂) ; 1,58 (3H, d, J=7,21 Hz, CH₃ala) ;

1,37-1,20 (4H, m, m-CH₂) ; 1,09-0, 98 (2H, q, p-CH₂) .

¹³C NMR: δ 170,1 (CO); 71,3 (OCH₂) ; 48,9 (CHala);

37,3,(CH); 29,5 (2 x CH₂-o) ; 26,4 (p-CH₂) ; 25,7 (2 x CH₂-m) ;

15,4 (CH₃ala) .

·» • · · ® · · i> ···· f « ý · · · · · · · • * · ·· ·····«· » # • · ··«· · · * · .> ···

Fenyl-(cyklohexanmethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C16H23NO4CIP, molární hmotnost: 359,82

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 0,7 gramu (3,16 milimolu) hydrochloridu cyklohexanmethylesteru L-alaninu, 0,47 mililitru (3,16 milimolu) fenylfosfordichloridátu (PhOP(O)Cl2) a 0,88 mililitru (6,31 milimolu) triethylaminu v 70 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 1,10 gramu (96,8 procenta) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn v 6 mililitrech tetrahydrofuranu (THF) za. vzniku 0,51 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,35, 9,05 (1:1) .

^ΧΗ NMR: δ 4,61-4,50 (1H, q, NHala); 4,28-4,13 (1H, m, CHala);. 4,04-4,00 (2H, q, OCH₂) ; 1,78-1, 74 (7Η, t, CHcHx + o-CH₂) ; 1,57-1,54 (3H, dd, CH₃ala) ; 1,06-0, 96 (2H, q, p-CH₂) .

¹³C NMR: δ 173,1 (CO); 150,1 (ipso-Ph); 130,3 (m-Ph) ;

126.4 (p-Ph); 121,0 (o-Ph); 71,4 (OCH₂) ; 51,0 (CHala);

37.4 (CHcHx); 29,9 (CH₂-o) ; 26,7 (CH₂-m) ;

25,9 (CH₂-p) ; 21,1 (CH₃ala) .

O-Fenyl-(cyklohexanmethoxy-L-alaninyl)-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl708.

C30H40O5N7P, molární hmotnost: 609,66

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů (0,35 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a 2,06 mililitru 0,51 molárního roztoku fenyl-(cyklohexanmethoxy-L-alaninyl)•,,,A _;.S..

ί :

* · :/ •· ř .« • 4 · 4 4 • ······ 9 • 4 4 4 • 9 9 Μ

Ο

I >9« fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) v 5 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 48 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí nejprve směsí 4 až 6 procent methanolu v dichlormethanu (DCM) a potom směsí 3,0 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 161,1 miligramu (75,6 procenta) čistého produktu ve formě světle žluté pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 3,99, 3, 92 (1:1) .

^XH NMR: δ 7,40 (1H, d, J=7,07 Hz, H8); 7,24-7,19 (2H, t, o-Ph); 7,13-7,03 (3H, m, m- + p-Ph); 6,00-5,96 (2H, m, H2' + NHcPr); 5,79 (1H, q, H3') ; 5,45 (1H, d, Hl'); 5,05 (2H, bs, NH₂); 4,16-4,01 (3H, m, OCH₂ + NHala); 3,98-3,88 (1H, m, CHala); 3,86-3,74 (2H, m, H5'); 3,07-3,00 (1H„ t, H4 ') ;

2,94 (1H, bs, CHcPr); 2,74-2,63 (1H, m, 1 z H6'); 1,881,50 (7H, m, CHcHx + 2CH₂-o); 1,31-1,27 (3H, t, CH₃ala) ; 1,210,99 (4H, 2CH₂-m) ; 0,89-0, 79 (2H, q, CH₂-p) ; 0,75 (2H, t, 2H z CH₂cPr); 0,54-0,50 (2H, t, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: δ 174,1 (CO); 160,2 (C2); 156,4 (C4); 151,2 (C6) ; 151,1 (ipso-Ph); 136,7 (C2'); 136,0 (C8); 131,5 (C3');

130,0 (m-Ph); 125,2 (p-Ph); 120,5 (o-Ph); 115,1 (C5) ;

71,0 (OCH₂) ; 69,3 (C5'); 59,3 (ď); 50,7 (CHala); 46,1 (C4');

37,4 (CHcHx); 34,9. (C6');-29,9 (CH₂-o); 26,6 (CH₂-m) ;

25,9 (CH₂-p); 24,2 (CHcPr); 21,5 (CH₃ala) ; 7,8 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 610,3 (50’procent, M⁺) , 632,3 (100 procent, M+Na⁺) ,

633,3 (M+H+Na⁺) .

MS FAB: pro C₃oH4o05N₇NaP vypočteno 632,2726, nalezeno 632,2710. HPLC: t_R 42,859 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

f. ·' ·· 9 l?

4· t

4-Chlorfenylfosfordichloridát

C6H4O2CI3P, molární hmotnost: 246, 43 mililitry (21,5 milimolu) oxychloridu fosforečného byly míchány se 70 mililitry bezvodého diethyletheru ve

250 mililitrech RBF. K této směsi byl při teplotě -80 °C přikapán roztok 2,1 mililitru (21,5 milimolu) 4-chlorfenolu a 3,0 mililitrů (21,5 milimolu) bezvodého triethylaminu v 30 mililitrech bezvodého diethyletheru. Reakční směs byla 1 hodinu intenzívně míchána při teplotě -80 °C a ponechána během 16 hodin ohřát na teplotu místnosti. Hydrochlorid triethylaminu byl odfiltrován a z filtrátu bylo odpařeno veškeré rozpouštědlo, čímž vzniklo 4,61 gramu (87,2 procenta) surového produktu ve formě žlutého oleje.

³¹P NMR: δ 4,99 (s) .

¹³C NMR: δ 148,4 (ipso-Ph); 133,2 (p-Ph); 130,7 (m-Ph);

122,4 (o-Ph).

4-Chlorfenyl-(methoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C10H12NO4CI2P, molární hmotnost: 246, 43

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 2,61 gramu (18,7 milimolu) hydrochloridu methylesteru L-alaninu, 4,61 gramu . (18,7 milimolu) p-chlorfenylfosfordichloridátu a 5,21 mililitru (37,4 milimolu) triethylaminu ve 100 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 3,76 gramu (64,4 procenta) surového produktu ve formě bezbarvého oleje, který byl rozpuštěn ve 20 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,6 molárního roztoku, který byl bez přečištění použit v následujícím stupni.

³¹P NMR: δ 9, 48, 9, 25 (1:1) . .

• · 9 « ·<· * * · · · ? .¾ t 9 · ' · · · 9 • ♦ 9 · · 9 9

9 · 9 9 · · · «

9 9 «ί 9 *

9999 99 * ^XH NMR: δ 7,36 (2H, d, J=8,20 Hz, o-Ph); 7,32-7,22 (2H, m, m-Ph); 4,69 (1H, d, NHala); 4,27-4,15 (1H, m, CHala);

3,82 (3H, d, OCH₃) ; 1,56-1,53 (3H, dd, J=7,04 Hz, CH₃ala). ¹³C NMR: δ 173,4 (CO); 148,6 (ipso-Ph); 131,9 (p-Ph) ;

130,3 (m-Ph); 122,3 (o-Ph); 53,2 (OCH₃) ; 50,9 (CHala);

20,9 (CH₃ala) .

0-4-[Chlorfenyl-(methoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl620.

C24H29O5N7PCI, molární hmotnost: 562,02

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 250 miligramů (0,87 milimolů) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 1,75 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,75 mílimolu) a 4,37 mililitru 0,6 molárního roztoku 4-chlorfenyl-(methoxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (2,62 milimolů) ve 13 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí směsí 3 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 364,5 miligramu (74,5 procenta) čistého produktu ve formě bílé pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 4,01 (s) .

^XH NMR: δ 7,42 (1H, d, H8); 7,22-7,17 (2H, m, m-Ph); 7,097,03 (2H, t, o-Ph); 5,99 (1H, d, H2^z); 5,93 (1H, s, H3');

5,83 (1H, bs, ŇHcPr); 5,45 (1H, bs, Hl') ; 4,96 (2H, bs, NH₂) ; 4,11 (2H, bs, H5'); 4,03-3,86 (1H, m, CHala); 3,62 (3H, s,

OCH₃) ;. 3,07 (1H, d, J=5,9 Hz, H4') ; 2,92 (1H, bs, CHcPr); 2,762,64 (1H, m, 1 z K6'); 1,64-1,59 (1H, t,- 1 z H6'); 1,3266 * Φ ®. ·.. . Φ φ ·. φ'· <J , Φ · Φ Φ · ., Φ « . · *

Φ ’ · · . Φ ’ · · ,· ’^r '* ·' ·

Φ · Φ Φ’ ' · ·····«· · »· «·Φ« ΦΦ « ·*

1,26 (3Η, q, CH₃ala) ; 0,76 (2Η, d, J=6,40 Hz, 2H z CH₂cPr) ; 0,53 (2H, bs, 2H- z CH₂cPr) .

¹³C NMR: δ 174,4 (CO); 160,4 (C2) ; 156,7 (C4) ; 151,3 (C6) ; 149,7 (ipso-Ph); 136,7 (C2^Z); 135,9 (C8); 131,6 (C3^Z);

130,5 (p-Ph); 130,0 (m-Ph); 121,9 (o-Ph); 115,2 (C5);

69,4 (C5'); 59,25 (Cl'); 52,9 (OCH₃) ; 50,6 (CHala); 46,0 (C4')

34,9 (C6'); 24,1 (CHcPr); 21,4 (CH₃ala); 7,8 (CH₂cPr) .

HPLC: t_R 32,693, 33,012 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), 20 procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut), 100 procent vody (55 minut)).

4-Bromfenylfosfordichlorídát

C₆H4O₂Cl₂BrP, molární hmotnost: 289,87

Uvedená sloučenina byla připravena analogickým postupem jako 4-chlorfenylfosfordichloridát, s tím rozdílem, že bylo použito 3,29 gramu (2 mililitry, 21,5 milimolu) oxychloridu fosforečného a 3,71 gramu (21,5 milimolu) 4-bromfenolu v 70 mililitrech bezvodého diethyletheru a 2,71 gramu (3 mililitry, 21,5 milimolu) bezvodého triethylaminu ve 30- mililitrech .bezvodého diethyletheru. Reakční směs byla 16 hodin míchána při teplotě -80 °C až při -teplotě místnosti. Po přefiltrování reakční směsi a odstranění rozpouštědel bylo získáno 5,14 gramu (82,6 procenta) produktu ve formě čiré kapaliny..

³¹P NMR: δ 4,88 ' (s) .

^XH NMR: δ 7,63 (2H, d, J-8 Hz, o-Ph); 7,28 (2H, t, m-Ph).

¹³C NMR: δ 149,0 (ipso-Ph); 133,7 (m-Ph); 122,6 (o-Ph);'

120,9 (p-Ph).

• 9 · · • · · · · · • «- « · ····»: • · · * * • · · · »9

-·'· ·

4-Bromfenyl-(methoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

Ci₀H₁₂NO₄PClBr, molární hmotnost: 356, 55

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 1,0 gramu (7,16 milimolu) hydrochloridu methylesteru L-alaninu, 1,82 gramu (7,16 milimolu) 4-bromfenylfosfordichloridátu a 2 mililitrů (14,3 milimolu) triethylaminu v 70 mililitrech díchlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 2,24 gramu (87,7 procenta) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn ve 12 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,524 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,16, 9,10 (1:1).

¹³C NMR: '5 173,4.(00); 150,1 (ipso-Ph); 133,3 (m-Ph);

122,7 (o-Ph); 119,6 (p-Ph); 53,3 (OCH₃) ; 51,0 (CHala);

20, 9' (CH₃ala) .

O-[4-Bromfenyl-(methoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-β-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl710.

C₂₄H₂9O₅N7PBr, molární hmotnost: 606,42

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů (0,35 milimolu) ·(1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-čyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu. v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a 2,0 mililitrů 0,524 molárního roztoku 4-bromfenyl-(methoxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) v 5 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Surový produkt byl přečištěn elucí nejprve směsí 4 až 6 procent methanolu v díchlormethanu • 0 0 ·' · 0· ·'· 0, • · · 0 ,· 0 0 · * 0 0·· 0 · · • · · »····»· · _e · · · · · · ··> ♦» 0 00 «· (DCM) a poté směsí 4 procent methanolu v dichlormethanu (DCM), čímž bylo získáno 115,2 miligramu (54,4 procenta) čistého produktu ve formě bílé pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 3,96 (s) .

^XH NMR: δ 7,42 (1H, d, H8); 7,34-7,30 (2H, dd, J=8,73 Hz, o-Ph); 7,03-6,97 (2H, t, J-8,68 Hz, m-Ph) 6,02-5,97 .(2H, m,

H2 ' + NHcPr); 5,83-5,79 (1H, m, H3') ; 5,43 (1H, t, HI') ;

5,06 (2H, bs, NH₂) ; 4,28-4,04(3H, m, H5' + NHala); 4,023,85 (1H, m, CHala); 3,61 (3H, d, OCH₂) ; 3,05 (1H, d,

J=6,09 Hz, H4 ' ) ; 2,94 (1H, d, CHcPr); 2,75-2,66 (1H, m, z H6'); 1,66-1,56 (1H, m, 1 z H6'); 1,31-1,25 (3H, dd,

CH₃ala) ; 0,79-0,72 (2H, q, 2H z CH₂cPr) ; 0,54-0,49 (2H, t, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: δ 174,4 (CO); 160,3 (C2); 156,6 <C4); 151,3 (C6) ;

150,2 (ipso-Ph); 136,7 (C2'); 136,0 (C8); 133,0 (m-Ph);

131,6 (C3'); 122,4 (o-Ph); 118,1 (p-Ph); 115,2 (C5);

69,4 (C5'); 59,3 (Cl'); 52,9 (OCH₃) ; 50,6 (CHala); 46,0 (C4');

34,8 (C6'); 24,2 (CHcPr); 21,3 (CH₃ala) ; 7,8 (CH₂cPr) .

MS ES⁺: m/z 606,13 (40 procent, M⁺) , 628,1065 (100 procent, 79-M+Na⁺), 630,0967 (95 procent, 81-M+Na⁺) .

MS FAB: pro C2₄H₂9Q5N₇NaPBr vypočteno 628,1049, nalezeno

628,1058 a pro C24H₂₉O5N₇NaP⁸¹Br vypočteno 630, 1028, nalezeno 630,1042.

HPLC: t_R 35,882 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

4-Fluorfenylfosfordichloridát

C₆H4O₂C1₂FP, molární hmotnost: 228,97

Uvedená sloučenina byla připravena analogickým postupem jako 4-chlorfenylfosfordichloridát, s tím rozdílem, že bylo • · použito 3,29 gramu (2 mililitry, 21,5 milimolu) oxychloridu fosforečného a 2,41 gramu (21,5 milimolu) 4-fluorfenolu v 70 mililitrech bezvodého diethyletheru a 2,71 gramu (3 mililitry, 21,5 milimolu) bezvodého triethylaminu ve 30 mililitrech bezvodého diethyletheru. Reakční směs byla 4 hodiny míchána při teplotě -80 °C a následně byla míchána 2 hodiny při teplotě místnosti. Po přefiltrování reakční směsi a odstranění rozpouštědel bylo získáno 4,08 gramu (83 procent) produktu ve formě čiré kapaliny.

³¹P NMR: δ 5,50 (s) .

NMR: δ 7,29-7,24. (2H, m, o-Ph); 7,09 (2H, t, J=8,29 Hz, m-Ph).

¹³C NMR: δ 159,7 (ipso-Ph); 145,8 (m-Ph); 122,6 (o-Ph) ;

117,5 (p-Ph).

4-Fluorfenyl-(methoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

Ci₀H₁₂NO₄PC1F, molární hmotnost: 295, 65

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 1,0 gramu (7,16 milimolu) hydrochloridu methylesteru L-alaninu, 1,64 gramu (7,16 milimolu) 4-fluorfenylfosfordichloridátu a 2 mililitrů (14,3 milimolu) triethylaminu v 70 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 1,97 gramu (93,0 procent) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn ve 12 mililitrech tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,56 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9, 84, 9, 60 (1:1) .

^XH NMR: δ 7,32-7,23 (2H, m, o-Ph); 7,12-7,06 (2H, m, m-Ph); 4,69 (1H, bs, NHala); 4,22 (1H, bs, CHala); 3,82 (3H, d, OCH₃) , 1,57-1,53 (3H, m, CH₃ala).

¹³C NMR: δ 173,5 (CO); 161,6 (ipso-Ph); 145,9 (m-Ph) ;

122,5 (o-Ph); 117,0 (p-Ph); 53,2 (OCH₃) ; 50,9 (CHala);

20, 9 (CH₃ala) .

0-4-[Fluorfenyl-(methoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl737.

C_{2 4}H₂ 9O5N7 P F, molární hmotnost: 545,57

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů (0,35 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolu) a 1,89 mililitru 0,56 molárního roztoku 4-fluorfenyl-(methoxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolu) v 5 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 24 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbytek přečištěn na koloně s elucí nejprve směsí 2,5 až 5 procent methanolu v chloroformu a poté směsí 3 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 62,0 miligramů (32,5 procenta) čistého produktu ve formě žluté pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 4,24; 4,23; 4,20; 4,19.

^XH NMR: δ 7,52 (1H, d, H8); 7,21-7,14 (2H, m, o-Ph); 7,036,97 (2H, m, m-Ph); 6,16 (1H, bs, NHcPr); 6,10-6,07 (1H, q,

H2') ; 5,93-5,89 (1H, q, H3'); 5,44 (1H, d, Hl'); 5,14 (2H, bs, NH₂); 4,23-3,98 (4H, m, H5' + NHala + CHala); 3,72 (3H, d, OCH₂); 3,16 (1H, d, J=6,03 Hz, H4') ; 3,03 (1H, d, CHcPr); 2,862,74 (1H, m, 1 z H6'); 1,76-1,66 (1H, m, 1 z H6'); 1,4271 •••••99 9 · · • · · *9·· ·'·

9 9 9 9 9 · · · · φ « · •99 9 · » · *

9* 9999 99 «ί 9· «

1,35 (3Η, dd, CH₃ala); Ο,89-0,83 (2Η, q, 2H z CH₂cPr) ; 0,650,60 (2H, t, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: δ 174,4 (CO); 161,5 (C2) ; 160,3 + 156,6 (p-Ph) ;

156,6 (C4); 151,3 (C6); 150,2 (ipso-Ph); 136,8 (C2');

136,0 (C8); 131,6 (C3'); 121,9 (o-Ph); 115,1 (C5); 69,3’(C5'); 59,3 (Cl'); 52,9 (OCH₃) ; 50,6 (CHala); 46,0 (C4'); 34,9 (C6');

24,2 (CHcPr); 21,3 (CH₃ala); 7,8 (CH₂cPr).

HPLC: t_R 31,536 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

4-Jodfenylfosfordichloridát

C6H₄O₂C1₂IP, molární hmotnost: 336,07

Uvedená sloučenina byla připravena analogickým postupem jako 4-chlorfenylfosfordichloridát, s tím rozdílem, že bylo použito 3,29 gramu (2 mililitry, 21,5 milimolu) oxychloridu fosforečného a 4,72 gramu (21,5 milimolu) 4-jodfenolu v 60 mililitrech bezvodého diethyletheru a 2,71 gramu (3 mililitry, 21,5 milimolu) bezvodého triethylaminu ve 20 mililitrech bezvodého diethyletheru. Reakční směs byla 4 hodiny míchána při teplotě -80 °C a následně byla míchána 2 hodiny při teplotě místnosti. Po přefiltrování reakční směsi a odstranění rozpouštědel bylo získáno 6,2 gramu (85,8 procenta) produktu ve formě čiré kapaliny.

³¹P NMR: δ 4,72 (s) .

^XH NMR: δ 7,71 (2H, d, J=8,59 Hz, o-Ph); 7,06-7,02 (2H, dd,

J=8,80 Hz, m-Ph).

¹³C NMR: δ 149,9 (ipso-Ph); 139,8 (m-Ph); 122,9 (o-Ph) ;

91,9 (p-Ph).

4-Jodfenyl-(methoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

C10H12NO4PCII, molární hmotnost: 403,55

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3, kdy byla použita směs 1,0 gramu (7,16 milimolů) hydrochloridu methylesteru L-alaninu, 2,41 gramu (7,16 milimolů) 4-jodfenylfosfordichloridátu a 2 mililitrů (14,3 milimolů) triethylaminu v 70 mililitrech dichlormethanu (DCM). Obvyklým zpracováním bylo izolováno 3,59 gramu (>100 procent) surového produktu ve formě žlutého oleje, který byl rozpuštěn ve 14 mililitrech tetrahydrofuranu (THF) za vzniku 0,51 molárního roztoku.

³¹P NMR: δ 9,31, 9,08 (1:1) .

¹HNMR: δ 7,74-7,69 (2H, m, o-Ph); 7,32-7,05 (2H, m, m-Ph); 4,73 (1H, bs, NHala); 4,20 (1H, bs, CHala); 3,81 (3H, d, OCH₃) , 1,56-1,53 (3H, dd, J=7,06 Hz, CH₃ala).

¹³C NMR: δ 173,4 (CO); 149,9 (ipso-Ph); 139,5 (m-Ph) ;

123,0 (o-Ph); 90,4 (p-Ph); 53,3 (OCH₃) ; 50,9 (CHala);

20,9 (CH₃ala) .

O-[4-Jodfenyl-(methoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl738.

C24H29O5N7PI, molární hmotnost: 653,48

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 100 miligramů (0,35 milimolů) (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu, 0,7 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (0,7 milimolů) a 2,05 mililitru 0,51 molárního roztoku 4-jodfenyl-(methoxy-L-alaninyl)fosforchloridátu v tetrahydrofuranu (THF) (1,05 milimolů) v mililitrech tetrahydrofuranu (THF), která byla míchána 48 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbytek přečištěn na koloně s elucí nejprve směsí 3 až 6 procent methanolu v chloroformu a poté směsí 3 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 82,0 miligramů (29,9 procenta) čistého produktu ve formě bílé pěnové pevné látky.

³¹P NMR: δ 3,92.

³H NMR: δ 7,63-7,59 (2H, dd, J=8,65 Hz, m-Ph); 6,98 (2H, t, J=8,20 Hz, o-Ph); 6,25 (1H, bs, NHcPr); 6,09 (1H, t, H2');

5,91 (1H, t, H3'); 5,54 (1H, d, H1') ; 5,21 (2H, bs, NH₂) ; 4,35 4,16 (3H, m, H5', NHala); 4,07-3,95 (1H, m, CHala); 3,71 (3H, d, OCH₃ala); 3,15 (1H, d, J=7,23 Hz, H4'); 3,03 (1H, bs, CHcPr); 2,85-2,74 (1H, m, 1 z H6'); 1,76-1,65 (1H, m, 1 z H6'); 1,43-1,35 (3H, t, CH₃ala); 0,89-0,83 (2H, q, 2H z CH₂cPr) ; 0,63 (2H, bs, 2H z CH₂cPr) .

¹³C NMR: δ 174,4 (CO); 160,2 (C2); 156,5 (C4); 151,1 (C6) ; 151,0 (ipso-Ph); 139,0 (C2'); 136,8 (m-Ph); 136,0 (C8);

131,5 (C3'); 122,8 (o-Ph); 115,0 (C5); 88,9 (p-Ph);

69,4 (C5'); 59,3 (Cl'); 52,9 (OCH₃) ; 50,6 (CHala); 46,0 (C4') ; 34,8 (C6'); 24,2 (CHcPr); 21,3 (CH₃ala); 7,8 (CH₂cPr).

HPLC: t_R 33,848 (100 procent)-(100 procent vody (0 minut), procent vody (35 minut), 20 procent vody (45 minut),

100 procent vody (55 minut)).

• ·

Hydrochlorid (3-pentyl)esteru L-alaninu

NHj.HCI

1,6 mililitru (0,022 molu) thionylchloridu bylo přikapáno při teplotě 0 °C v dusíkové atmosféře k míchanému roztoku

18,2 mililitru (0,17 molu) 3-pentanolu. Směs byla míchána 30 minut a ponechána ohřát na teplotu místnosti. K reakční směsi byl přidán 1,0 gram (0,011 molu) L-alaninu, který byl předem vysušen při teplotě 60 °C nad oxidem fosforečným, a vzniklá suspenze byla přes noc zahřívána k refluxu za vzniku čirého bezbarvého roztoku. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbylý olej byl opakovaně triturován a kodestilován nejprve s diethyletherem, poté s petroletherem (60/80), aby došlo k úplnému odstranění 3-pentanolu. Získaný olejovitý zbytek ztuhl vysušením ve vysokém vakuu, čímž bylo získáno 1,96 gramu (10 milimolů, 89 procent) broskvově zbarvené pevné látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 0,94 (t, 6H, O-CH (CH₂CH₃) ₂, J=7) ;

1,57 (d, 3H, CH₃-ala, J=7); 1,67 (m, 4H, O-CH (CH₂CH₃) ₂, J=7); 4,12 (q, 1H, CH-ala, J=7); 4,88 (m, 1H, O-CH (C₂H₂) ₂) ; č_c (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 8,87 (O-CH (CH₂CH₃) ₂) ; 15,38 (CH₃-ala);

26, 39; 26, 44 (O-CH (CH₂CH₃) ₂) ; 48,82 (CH-ala);

79,88 (O-CH(C₂H₅)₂) ; 170,03 (C=0) .

·· ·· ·· · • · · · · · · · · · ·· · · · · · · · • · · · · ·«····· · ······ ·· · ·· ·

Fenyl(3-pentyloxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,45 mililitru (3,0 milimolu). fenyldichlorfosfátu, 0,8 mililitru (6,0 milimolu) triethylaminu, 0,583 gramu (3,0 milimolu) hydrochloridu (3-pentyl)esteru L-alaninu (la) a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,055 gramu (>100 procent) surového produktu ve formě žlutého oleje. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,99; 9,37

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,211 gramu/mililitr.

·· ··

Ο-[Fenyl(3-pentyloxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl685.

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF.) (1,4 milimolu) a 3,3 mililitru roztoku fenyl(3-pentyloxy-Lalaninyl )-fosforchloridátu (lb) o koncentraci

0,211 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) . 'Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 1,5 hodiny. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií nejprve s elucí směsí methanol/chloroform (4:96) a poté směsí methanol/ chloroform (3:97), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,202 gramu (0,35 milimolu, procent) bílé pěny.

δρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,89.

• 4 δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,66 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,90 (m, 8H, CH₂-cPr a CH (CH₂CH₃) ₂) ; 1,43 (m, 3H, CH₃-ala) ; 1,58 (m, 4H, CH(CH₂CH₃)₂)

1,72 (m, 1H, 6'H_a); 2,82 (m, 1H, 6'H_b); 3,05 (m, 1H, CH-cPr); 3,20 (m, 1H, 4'H); 3,77 (m, 1H, CH-ala); 4,05 (m, 1H, NH-ala);

4,22 (m, 2H, 5'H); 4,80 (m, 1H, O-CH-); 4,89 (bs, 2H, NH₂) ;

•5,56 (m, 1H, l'H); 5,78 (bs, 1H, NH-cPr); 5,93 (m, 1H, 3'H);

6,12 (m, 1H, 2'H); 7,26 (m, 5H, ArH); 7,51 (d, 1H, 8H).

5_C (CDCI3, 75 MHz) 6,37 (CH₂-cPr) ; 8,50 (CH (CH₂CH₃) ₂) ;

20,28 (CH₃-ala); 22,28 (CH-cPr); 22,68 (CH-cPr); 25,28;

25, 38 (CH (CH₂CH₃)₂) ; 33,51; 33,60 (6'C); 44,59; 44,69 (4 'C); 49,40 (CH-ala); 57,79; 57,83 (l'C); 67,90 (5'C); 77,29 (OCH); 113,86 (5C); 119,10-119,18 (o-Ph); 123/84 (p-Ph);

128,61 (m-Ph); 130,09; 130,16 (3'C); 134,45; 134,56 (8C); .135,27; 135,41 (2'C); 149,66-149,93 (6C a ipso-Ph);

155,26 (4C); 158,95 (20); 172,32; 172,44 (C=O);

m/z (FAB) 584,2751 (MH⁺, pro C28H39N7O5P vypočteno 584,2750).

Hydrochlorid (3,3-dimethyl-l-butyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,6 gramu (18 milimolů) L-alaninu, 3,8 gramu (20 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA),

2,2 mililitru (18 milimolů) 3,3-dimethylbutan-l-olu a 100 mililitrů toluenu. Přeměna na hydrochlorid: p-toluensulfonátová sůl byla rozpuštěna v chloroformu a promyta 10 procentním roztokem uhličitanu draselného a vodou.

Organická vrstva byla vysušena nad bezvodým síranem horečnatým, přefiltrována a rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku za vzniku surového produktu ve formě oleje.

K tomuto zbytku byla přidána 1 molární kyselina chlorovodíková a vzniklý roztok byl 30 minut míchán při teplotě místnosti. Roztok byl vysušen vymražením a bylo získáno 3,31 gramu (15,8 milimolu, 88 procent) hydrochloridu ve formě pevné bílé látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 0,93 (s, 9H, 0- (CH₂) 2 (CH₃) 3) ; 1,50 (d, 3H, CH₃-ala, J=7) ; 1,59 (t, 2H, O-CH₂CH₂, J=7) ; 4,05 (q, 1H,

CH-ala, J=7) ; 4,25 (m, 2H, O-CH₂) ;

5_C (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 15,18 (CH₃-ala) ; 28,91 (C(CH₃)₃);

29, 54 (C(CH₃)₃); 41,62 (O-CH₂CH₂-) ; 48,85 (CH-ala);

64,11 (O-CH2CH2-); 170,03 (C=O).

Fenyl(3,3-dimethyl-l-butoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,45 mililitru (3,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu, 0,8 mililitru (6,0 milimolů) suchého triethylaminu, 0,632 gramu (3,0 milimolů) hydrochloridu (3,3-dimethyl-l-butyl)esteru L-alaninu (2a) a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,038 gramu (99 procent) surového produktu ve formě čirého světle žlutého oleje.

- · '-ý

9 ·*>

•••99 9 9 δρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,94; 9,30

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,208 gramu/mililitr.

O-[fenyl(3,3-dimethyl-l-butoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopente.n-l-methanolu Cfl687

HN

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 3,5 mililitru roztoku fenyl(3,3-dimethyl-lbutoxy-L-alaninyl) -fosf orchlori.dátu (2b) o koncentraci 0,208 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 1,5 hodiny. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě

čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,287 gramu (0,5 milimolů, 69 procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,83.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,66 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,90 (m, 2H,

CH₂-cPr) ; 0,97 (s, 9H, C(CH₃)₃); 1,41 (m, 3H, CH₃-ala) ; 1,57 (m,

2H, O-CH2CH2)	; 1,74 (m,	1H, 6'Ha)	; 2,82 (m, 1H,	6'Hb); 3,05	(m,
1H, CH-cPr);	3,20 (m, 1H, 4'H);	3,70 (m, 1H, CH	-ala); 4,04	(m,
1H, NH-ala);	4,22 (m, 4H, 5Ή a	O-CH2CH2) ; 4,88	(bs, 2H, NH2	);
5,57 (m, 1H,	l'H); 5,75	(bs, 1H,	NH-cPr); 5,93	(m, 1H, 3Ή)	t
6,12 (m,. 1H,	2'H); 7,27	(m, 5H,	ArH); 7,52 (d,	1H, 8H).
5C (CDC13, 75	MHz) 6,35	(CH2-cPr)	; 19,95; 20,01	(CH3-ala) ;

22,69 (CH-cPr) ; 28,52 (C(CH₃)₃); 28,52 (C(CH₃)₃); 33, 49; 33,57 (6'C); 40,59; 40,63 (OCH₂CH₂-) ; 44,58; 44,68 (4'C); 49,28 (CH-ala); 57,79; 57,83 (l'C); 62,28; 62,31 (OCH₂CH₂-) ; 67,86; 67,94 (5'C); 113,81 (5C); 119,10; 119,16 (p-Ph); 123,84 (o-Ph); 128,61 (m-Ph); 130,10; 130,16 (3'C); 134,47; 134,56 (8C); 135,29; ' 135,40 (2'C) ; ‘149, 67-149, 75 (6C a ipso-Ph); 155,25 (4C); 158, 96 (2C) ; 172,55; 172,65 (C=O); m/z (FAB) 598,2896 (MH⁺, pro O9H41N7O5P vypočteno 598,2907).

p-Toluensulfonát (4-methyl-l-pentyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,6 gramu (18 milimolů) L-alaninu, 3,8 gramu (20 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA), ?

2,-24 mililitru (18 milimolů) 4-methylpentan-l-olu a ·· ·· !>.9 9 « φ

100 mililitrů toluenu. p-Toluensulfonátová sůl byla izolována ve formě 6,082 gramu (17,6 milimolu, 98 procent) pevné bílé látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 0,93 (d, 6H, CH(CH₃)₂); 1,27 (m, 2H, O-CH₂CH₂CH₂-) ; 1,54 (d, 3H, CH₃-ala) ; 1,59 (m, 1H, CH(CH₃)₂); 1,69 (m, 2H, O- (CH₂) ₂CH₂) ; 2,39 (s, 3H, CH₃, p-TSA); 4,10 (m,

1H, CH-ala); 4,24 (m, 2H, O-CH₂) ; 7,25 (d, 2H, ArH, p-TSA);

7,72 (d, 2H, ArH, p-TSA).

5_C (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 15,23 (CH₃-ala) ; 20,31 (CH₃-p-TSA) ;

21,83 (CH(CH₃)₂); 26,45 (O-CH₂CH₂CH₂-) ; 27,87 (CH(CH₃)₂);

34,93 (O-CH₂CH₂CH₂-) ; 48,85 (CH-ala); 66, 77 (O-CH₂ (CH₂) ₂) !

125, 93 (o-Ph, p-TSA); 128,83 (m-Ph, p-TSA); 140,7.5 (ipso-C-CH₃, p-TSA); 142,39 (ipso-C-S, p-TSA); 170,07 (C=O).

Fenyl(4-methyl-l-pentyloxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O ¹¹ r-M

PhO—P—ci

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,9 mililitru (6,0 milimolu) fenyldichlorfosfátu,

1,7 mililitru (12,0 milimolu) suchého triethylaminu,

2,081 gramu (6,0 milimolů) p-toluensulfonátu (4-methyl-lpentyl)esteru L-alaninu (3a) a celkem 100 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,79 gramu (85 procent) surového produktu ve formě čirého bezbarvého oleje. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,95; 9,31 «λ,

») ·

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 10 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,179 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(4-methyl-l-pentyloxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino) -9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl721

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 4,1 mililitru roztoku fenyl(4-methyl-lpentyloxy-L-alaninyl)-fosforchloridátu (3b) o koncentraci 0,179 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 10 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 3 hodinách. Surový zbytek byl přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a • 9 9· 9 9* ·« <• 9 9 9 9 99 9 99 ·· 9 9 9 9 9 9 9

9 9 999999999 9 kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,288 gramu (0,5 milimolu, 69 procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,84, 3,88.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,64 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,87 (m, 2H,

CH₂-cPr) ; 1,24 (m, 2H, CH(CH₃)₂); 1,40 (t, 3H, CH₃-alaj ;

1,60 (m, 3H, CH(CH₃)CH₃); 1,73 (m, 3H, CH(CH₃)CH₃); 2,19 (m, 1H, 6'H_a); 2,80 (m, 1H, 6'H_b); 3,03 (m, 1H, CH-cPr) ; 3,18 (m, 1H,

4'H);	3,	88 (m, 1H,	CH-ala); 4,03	(m,	3H,	OCH2 a	NH-ala);
4,21	(m,	2H, 5'H);	4,99 (bs, 2H,	NH2)	; 5,	55 (m,	1H, l'H);
5,91	(m,	2H, NH-cPr	a 3Ή) ; 6,10	(m,	1H,	2Ή) ;	7,29 (m, 5H,
ArH) ;	7,	51 (d, 1H,	8H) .

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 7,79 (CH₂-cPr) ; 21,55 (CH₃-ala) ;

21,61 (CH(CH₃)₂); 23,69 (CH-cPr); 25,66 (O-CH₂CH₂CH₂-) ;

29, 63 (CH(CH₃)₂); 35,00 (6'C); 38,81 (O-CH₂CH₂CH₂-) ; 46,01; 46,11 (4'C); 50,72 (CH-ala); 59,21 (l'C); 69,31 (5'C); 69,85 (O-CH2CH2-); 115,25 (5C); 120,52-120,62 (p-Ph); 125,25 (o-Ph); 130,04 (m-Ph); 131,59 (3'C); 135,98 (8C); 136,71; 136,79 (2'C); 151,08; 151,17 (6C a ipso-Ph); 156,70 (4C); 160,40 (2C); 174,00; 174,10 (C=O); m/z (FAB) 598,2883 (MH⁺, pro C^H^NvOsP vypočteno 598,2907)

Hydrochlorid (cyklopropylmethyl)esteru L-alaninu

1,2 mililitru (0,017 molu) thionylchloridu bylo přikapáno při teplotě 0 °C v dusíkové atmosféře k míchanému roztoku

6,8 mililitru (8,4 milimolu) cyklopropylmethanolu. Směs byla míchána 30 minut a ponechána ohřát na teplotu místnosti.

• 4 •	4 ·	• · •	4 •	4· •	4	• ·
• · ·	•
•	• 44	•	•	4 4··	4 ·	•
•	4 4	•	4	O	•	4
• «	• 444		ϋ» 4	4	• 4.		4 ·

K reakční směsi bylo přidáno 0,75 gramu (8,4 milimolu)

L-alaninu, který byl předem vysušen při teplotě 60 °C nad oxidem fosforečným, a vzniklá suspenze byla přes noc zahřívána k refluxu za vzniku čirého bezbarvého roztoku. Rozpouštědlo bylo odstraněno při sníženém tlaku a zbylý olej byl opakovaně triturován a kodestilován s diethyletherem, aby došlo k úplnému odstranění stop cyklopropylmethanolu. Ke zbytku bylo přidáno přibližně 200 mililitrů diethyletheru a směs byla míchána 30 minut. Vzniklá suspenze byla přefiltrována a bylo získáno 1,29 gramu (7,1 milimolu, 85 procent) krémovité pevné látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 0,38 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,65 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 1,24 (m, ÍH, CH-cPr) ; 1,60 (d, 3H, CH₃-ala, J=7) ;

4,13 (m, 3H, CH-ala a O-CH₂) .

5_C (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 4,17 (CH₂-cPr) ; 10,98 (CH-cPr);

16,72 (CH₃-ala); 50,33 (CH-ala); 72,70 (O-CH₂) ; 171,56 (C=O) .

Fenyl(cyklopropylmethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

II

PhO-P-CI

I

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,9 mililitru (6,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu,

1,7 mililitru (12,0 milimolů) suchého triethylaminu,

1,082 gramu (6,0 milimolů) p-toluensulfonátu (cyklopropylmethyl)esteru L-alaninu (4a) a celkem

100 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno • ·' ♦ ·

1,79 gramu (94 procent) surového produktu ve formě čirého žlutého oleje.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 9,00; 9,36

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,385 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(cyklopropylmethoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl774.

HN

NH₂

O

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolů) (1S, 4R) -4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolů) a 1,85 mililitru roztoku fenyl(cyklopropylmethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridátu (4b) o koncentraci 0,385 gramu/mililitr (2,1 milimolů) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po

3,5 hodiny. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,244 gramu (0,4 milimolu, 61 procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,88; 3,94.' δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,29 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,61 (m, 2H,

CHs-cPr) ; 0,87 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 1,17 (m, 1H, CH-cPr); 1,42 (t 3H, CH₃-ala) ; 1,69 (m, 1H, 6'H_a); 2,81 (m, 1H, 6'H_b); 3,04 (m, 1H, CH-cPr); 3,18 (m, 1H, 4'H); 4,01 (m, 4H, OCH₂, CH-ala, NH-ala); 4,21 (m, 2H, 5'H); 5,03 (bs, 2H, NH₂) ; 5,56 (m, 1H, l'H); 5,91 (m, 1H, 3'H); 6,05 (bs, 1H, NH-cPr); 6,10 (m, 1H, 2'H); 7,25 (m, 5H, ArH); 7,51 (d, 1H, 8H) .

ó_c (CDC1₃, 75 MHz) 2,24 (CH₂-cPr) ; 6,33 (CH₂-cPr);

8,66 (CH₂-cPr) ; 20, 05, 20,11 (CH₃-ala) ; 22, 68 (CH-cPr);

33,55 (6'C); 44,58; 44,68 (4'C); 49,24; 49,31 (CH-ala); 57,77; 57,82 (l'C); 67,76; 67,93 (OCH₂) ; 69,27; 69,29 (5'C);

113,74 (5C); 119,10-119,19 (p-Ph); 123,84 (o-Ph);

128,61 (m-Ph); 130,09; 130,13 (3'C); 134,42; 134,50 (8C); 135,32; 135,40 (2'C); 149,74; 149,93 (6C a ipso-Ph);

155,26 (4C); 159,00 (2C); 172,64; 172,73 (C=O).

Hydrochlorid (cyklobutylmethyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,6 gramu (18 milimolů) L-alaninu, 3,8 gramu (20 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA), • · ·

1,9 mililitru (20 milimolu) cyklobutanmethanolu a

100 mililitrů toluenu. p-Toluensulfonátová sůl byla izolována ve formě 4,249 gramu (12,9 milimolu, 72 procent) pevné bilé látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 1,54 (d, 3H, CH₃-ala) ; 1,89 (m, 4H, cBu-2/4H); 2,08 (m, 4H, cBu-3H); 2,39 (s, 3H, CH₃, p-TSA); 2,69 (m, 1H, CH-cBu); 4,11 (q, 1H, CH-ala, J=7); 4,22 (m, 2H, O-CH₂) ; 7,26 (d, 2H, ArH, p-TSA); 7,73 (d, 2H, ArH, p-TSA).

5_C (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 16,7 (CH₃-ala) ; 19,6 (CH₂-cBu) ;

21,7 (CH₃-p-TSA); 25,9 (CH₂-cBu); 35,7 (CH-cBu); 48,9 (CH-ala) 71,3 (O-CH₂); 127,4 (o-Ph, p-TSA); 130,3 (m-Ph, p-TSA);

142,2 (ipso-C-CH₃, p-TSA); 143,8 (ipso-C-S, p-TSA);

171,6 (C=O).

Fenyl(cyklobutylmethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,9 mililitru (6,0 milimolu) fenyldichlorfosfátu,

1,7 mililitru (12,0 milimolů) suchého triethylaminu,

1,98 gramu (6,0 milimolů) p-toluensulfonátu (cyklobutylmethyl)esteru L-alaninu (5a) a celkem 100 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 2,04 gramu (>100 procent) surového produktu ve formě čirého bezbarvého oleje.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 9,00; 9,34

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,408 gramu/mililitr.

0-[Fenyl(cyklobutylmethoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl773

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl] -2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního -roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 1,7 mililitru roztoku fenyl(cyklobutylmethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridátu (5b) o koncentraci 0,408 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po ;

hodinách. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž

-í

·· byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,213 gramu (0,4 milimolu, 52 procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,87, 3,91.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,65 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,89 (m, 2H,

CH₂-cPr) ; 1,41 (t, 3H, CH₃-ala); 1,74 (m, 3H, CH₂-cBu a 6'H_a); 2,06 (m, 2H, CH₂-cBu); 2,61 (m, 2H, CH₂-cBu); 2,81 (m, 1H, 6'H_b); 3,04 (m, 1H, CH-cPr); 3,19 (m, 1H, 4'H); 3,90 (m, 1H, NH-ala); 4,09 (m, 3H, OCH₂ a CH-ala); 4,22 (m, 2H, 5'H);

4,98 (bs, 2H, NH₂) ;-5,56 (m, 1H, 1Ή).; 5,92 (m, 2H, NH-cPr a 3'H); 6,11 (m, 1H, 2'H); 7,26 (m, 5H, ArH); 7,52 (d, 1H, 8H). 5_C (CDC1₃, 75 MHz) 6,37 (CH₂-cPr) ; 17,33 (CH₂-cBu) ; 20,17;

20,23 (CH₃-ala); 22,68 (CH-cPr); 23,57 (2 x CH₂-cBu);

32,86 (CH-cBu); 33,51; 33,55 (6'C) ;- 44,58; 44, 68 (4'C); 49, 23; 49,28 (CH-ala); 57,81; 57,85 (l'C); 67,78-67,94 (5'C); 68,17; 68,20 (O-CH₂); 113,83 (5C); 119,09-119,19 (p-Ph);

123,87 (o-Ph); 128,62 (m-Ph); 130,11; 130,15 (3'C); 134,51;

134,61 (8C); 135,30; 135,39 (2'C); 149,64-149,97 (6Ca ipsoPh) ; 155,20 (4C); 158,87 (2C); 172,64; 172,64 (C=O).

p-Toluensulfonát (cyklopentylmethyl)esteru L-alaninu

Me¹

O

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,6 gramu (18 milimolů) L-alaninu, 3,8 gramu (20 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA),

1,9 mililitru (18 milimolů) cyklopentanmethanolu a 100 mililitrů toluenu. p-Toluensulfonátová sůl byla izolována ·· ♦ ve formě 6,21 gramu (18 milimolu, 100 procent) pevné bílé látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 1,22 (m, 2H, cPent 2/5H_a) ; 1,46 (d, 3H, CH₃-ala); 1,56 (m, 4H, cPent-2/3/4/5H_b) ; 1,70 (m, 2H, cPent, ' 3/4H_a); 2,19 (m, 1H, CH-cPent) ; 2,31 (s, 3H, CH₃, p-TSA);

4,06 (m, 3H, O-CH₂ a CH-ala); 7,18 (d, 2H, ArH, p-TSA);

7,64 (d, 2H, ArH, p-TSA).

δ₀ (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 15,25 (CH₃-ala) ; 20,3 (CH₂-p-TSA);

25,27 (CH₂-cPent); 29,10; 29,15 (CH₂-cPent); 38,72 (CH-cPent); 48, 84 (CH-ala); 70,12 (O-CH₂) ; 125,93 (o-Ph, p-TSA);

128,82 (m-Ph, p-TSA); 140,75 (ipso-C-CH₃, p-TSA);

142,40 (ipso-C-S, p-TSA); 170,09 (C=O).

Fenyl(cyklopentylmethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

II

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,9 mililitru (6,0 milimolu) fenyldichlorfosfátu,

1,7 mililitru (12,0 milimolu) suchého triethylaminu,

2,069 gramu (6,0 milimolu) p-toluensulfonátu (cyklopentylmethyl)esteru L-alaninu (6a) a celkem

100 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,97 gramu (95 procent) surového produktu ve formě čirého žlutého oleje.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,94; 9,30

•· · 'Λ··

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 10 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,197 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(cyklopentylmethoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl722

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem .4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolů) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolů)-a 3,7 mililitru roztoku fenyl(cyklopentylmethoxy-L-alaninyl ) -fosforchloridátu (6b) o koncentraci 0,197 gramu/mililitr (2,1 milimolů) v 10 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8-procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 3 hodinách. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a ·· ·· ·· · • · •V?

kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,314 gramu (0,5 milimolu, 75 procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,86, 3,87.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,65 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,89 (m, 8H,

CH₂-cPr a (CH₂) ₃-cPent) ; 1,24 (m, 2H, CH₂-cPent) ; 1,41 (m, 3H,

CH₃-ala) ; 1,65 (m, 2H, CH-cPent a 6'H_a); 2,81 (m, 1H, 6'H_b); 3,04 (m, 1H, CH-cPr); 3,19 (m, 1H, 4'H); 3,80 (m, 1H, CH-ala)

4,07	(m, 3H	, OCH2 a	NH-ala); 4	,22	(m,	2H, 5'H); 4,92	(bs,	2H,
NH2) ;	5,55	(m, 1H,	l'H); 5,81	(bs,	1H,	NH-cPr); 5,92	(m,	1H,
3Ή) ;	6, 11	(m, 1H,	2'H); 7,26	(m,	5H,	ArHj ; 7,52 (d,	1H,	8H) ,

δ₀ (CDC1₃, 75 MHz) 6,42 (CH₂-cPr) ; 21,43 (CH₃-ala) ;

22,73 (CH-cPr); 24,59 (CH₂-cPent); 25,35 (CH₂-cPent);

26,64 (CH-cPent); 33,43; 33,51 (6'C); 44,58; 44,68 (4'C); 49,23 (CH-ala); 57,86; 57,91 (l'C); 64,69; 64, 97 (O-CH₂) ; 67,84 (5'C); 113,74 (5C); 119,09-119,18 (p-Ph); 123,88 (o-Ph)

128,62 (m-Ph); 130,05; 130,11 (3'C); 134,65; 134,76 (8C); 135,33; 135,44 (2'C); 149,63; 149,72 (6C a ipso-Ph);

154,98 (4C); 158,59 (2C) ; 172,50; 172,60 (C=0).

m/z (FAB) 598,2745 (MH⁺, pro C^HsgNvOsP vypočteno 596, 2750).

p-Toluensulfonát (cyklobutyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2, s tou výjimkou, že jako rozpouštědlo byl použit benzen, z 1,0 gramu (11 milimolů). L-alaninu, 2,35 gramu (12 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA), 0,9 mililitru (11 milimolů) cyklobutanolu a 65 mililitrů

9 ·· 99 • 999 999 9 99 *9 9 999« 99 • 99 99 9 9999 99 9 •99 999 99

9999 99 · 99 » benzenu. p-Toluensulfonátová sůl byla izolována ve formě

1.73 gramu (5,5 milimolu, 49 procent) pevné bílé látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 1,51 (d, 3H, CH₃-ala, J=7); 1,75 (m, 2H, CH₂-cBu); 2,14 (m, 2H, CH₂-cBu) ; 2,37 (m, 5H, CH₂-cBu a CH₃, p-TSA); 4,05 (q, 1H, CH-ala, J=7); 5,08 (m, 1H, CH-cBu);

7,24 (d, 2H, ArH, p-TSA); 7,70 (d, 2H, ArH, p-TSA). δ₀ (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 14,57 (CH₂-cBu) ; 16,58 (CH₃-ala);

21.73 (CH₃-p-TSA); 31,38; 31,44 (CH₂-cBu); 50,16 (CH-ala); 72,47 (CH-cBu); 127,35 (o-Ph, p-TSA); 130,23 (m-Ph, p-TSA); 142,13 (ipso-C-CH₃, p-TSA); 143,89 (ipso-C-S, p-TSA);

170,71 (C=O).

Fenyl(cyklobutoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,75 mililitru (5,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu, 1,4 mililitru (10,0 milimolů) suchého triethylaminu, 1,58 gramu (5,0 milimolů) p-toluensulfonátu (cyklopentanmethyl)esteru L-alaninu (7a) a celkem 65 mililitrů suchého díchlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,13 gramu (71 procent) surového produktu ve formě čirého bezbarvého oleje.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,96; 9,33 '94 »· ·· ·· · ·· ·

4 4 4 4 4 4 4 4 4 · ·· 4 · · 4 4 4 4 4 • · 4 · · · 4444 4 4 4 « ·······»· <--.?· 444444 44 4 44 44 4

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,226 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(cyklobutoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl775

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 2,95 mililitru roztoku fenyl(cyklobutylmethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridátu (7b) o koncentraci 0,226 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 3,5 hodiny. Surový zbytek byl přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě světle žlutého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci · · * · · · · ®· 9 • · ·

I · β··· s diethyletherem do podoby 0,238 gramu (0,4 milimolu, procent)krémovíté pevné látky. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,89, 3, 93.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,63 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,87 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 1,39 (m, 3H, CH₃-ala) ; 1,65 (m, 2H, CH₂-cBu) ;

1,81 (m, 1H, 6^zH_a); 2,04 (m, 2H, CH₂-cBu) ; 2,36 (m, 2H, ' CH₂-cBu) ; 2,80 (m, 1H, 6'H_b); 3,03 (m, 1H, CH-cPr) ; 3,17 (m, 1H, 4'H); 3,97 (m, 2H, NH-ala a CH-ala) ; 4,18 (m, 2H, 5'H);

4,98 (m, 3H, NH₂ a OCH) ; 5,55 (m, 1H, l'H); 5,91 (m, 1H, 3Ή) 6,01 (m, 1H, NH-cPr); 6,10 (m, 1H, 2'H); 7,25 (m, 5H, ArH); 7,51 (d, 1H, 8H).

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 7,80 (CH₂-cPr) ; 13,82 (CH₂-cBu) ;

21,42 (CH₃-ala); 22, 06 (CH-cPr); 30, 52-30, 63 (CH₂-cBu) ;

35,01 (6'C); 46,01; 46,12 (4'C); 50,50 (CH-ala); 59,26 (l'C) 69,30 (CH-cBu); 70,19 (5'C); 115,25 (5C); 120,53;

120,59 (p-Ph); 125,28 (o-Ph); 130,05 (m-Ph); 131,53 (3'C); 135, 97 (8C); 136, 73; 13.6,85 (2'C); 151,08-151,17 (6C a ipso-Ph); 156,71(40 ; 160,44 . (2C) ; 173,33 (C=O) .

p-Toluensulfonát (cyklopentyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2, s tou výjimkou, že jako rozpouštědlo byl použit benzen, z 1,6 gramu (18 milimolů) L-alaninu, 3,8 gramu (20 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA)

1,6 mililitru (18 milimolů) cyklopentanolu a 100 mililitrů .· · ·* 2 • > *

9999 benzenu. p-Toluensulfonátová sůl byla izolována ve formě 2,81 gramu (8,5 milimolů, 47 procent) pevné světle hnědé látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 1,51 (d, 3H, CH₃-ala, J=7); 1,71 (m, 6H, CH₂-cPnt); 1,92 (m, 2H, CH₂-cPnt) ; 2,39 (m, 5H, CH₂-cBu a CH₃, p-TSA); 4,04 (q, 1H, CH-ala, J=7); 5,28 (m, 1H, CH-cPnt);

7,26 (d, 2H, ArH, p-TSA); 7,73 (d, 2H, ArH, p-TSA).

5_C (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 16,59 (CH₃-ala) ; 21,72 (CH₃-p-TSA);

24,97 (CH₂-cPnt); 33,81; 33,97 (CH₂-cPnt); 50,31 (CH-ala); 81,37 (CH-cPnt); 127,36 (o-Ph, p-TSA); 130,25 (m-Ph, p-TSA); 142,20 (ipso-C-CH₃, p-TSA); 143,79 (ipso-C-S, p-TSA);

171,17 (C=O).

Fenyl(cyklopentyloxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

II

PhO—P—Cl I

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0., 9 mililitru (6,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu, .

1.7 mililitru (12,0 milimolů) suchého triethylaminu,

1,98 gramu (6,0 milimolů) p-toluensulfonátu (cyklopentanmethyl)esteru L-alaninu (8a) a celkem

100 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno

1.8 gramu (91 procent) surového produktu ve formě čirého bezbarvého oleje.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 9,01; 9,37 • 9 ,* *' ·· ····

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,361 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(cyklopentoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl776

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 1,93 mililitru roztoku fenyl(cyklobutylmethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridátu (8b) o koncentraci 0,361 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 3,5 hodiny.’ Surový zbyte.k byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který « « vt ·

> to '· to • to • · * ·· ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,254 gramu (0,4 milimolu, 62 procent) bílé pěny.

δ,ρ (CDC13,	121	MHz)	3,97, 3,98.
δπ (CDC13,	300	MHz)	0,64 (m, 2H,	CH2-cPr) ; 0,8 7	(m, 2H,·
CHs-cPr);	1,38	(m,	3H, CH3-ala);	1, 67 (m, 7H, 3	x CH2-cPent a

6'H_a); 1,86 (m, 2H, CH₂-cPent); 2,81 (m, 1H, 6'H_b); 3,04 (m,

1H	r	CH-cPr);	3,18' (m, 1H	, 4'	H) ;	3, 96 1	(m, 2H	, NH-ala	a CH-ala
4,	21	(m, 2H,	5'H); 5,02	(bs,	1H,	NH2) ;	5,18	(m, 1H,	OCH) ;
5,	56	(m, 1H,	l'H); 5,91	(m,	1H,	3'H) ;	5, 98	(bs, 1H,	NH-cPr);
6,	11	(m, 1H,	2'H); 7,25	(m,	5H,	ArH) ;	7,51	(d, 1H,	8H) .

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 7,78 (CH₂-cPr); 21,42; 21,48 (CH₃-ala); 24,07 (CH-cPr); 32,91 (CH₂-cPent) ; 33,05; 33,08 (6'C); 34,97; 35,02 (CH₂-cPent); 46,02; 46,12 (4'C); 50,71 (CH-ala); 59,21; 59,25 (l'C); 69,22; 69,29 (5'C); 78,90 (OCH); 115,23 (5C); 120,55-120,61 (p-Ph); 125,28 (o-Ph); 130,05 (m-Ph); 131,53; 131,59 (3'C); 135,87; 135,97 (8C); 136,73; 136,86 (2'C); 151,09; 151,18 (6C a ipso-Ph); 156,71 (4C); 160,44 (2C) ; 173,71; 173,80 (C=O).

p-Toluensulfonát (fenethyl)esteru

L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,0 gramu (11 milimolů) L-alaninu, 2,35 gramu (12 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA), 1,3 mililitru (11 milimolů) fenethylalkoholu a 65 mililitrů α

toluenu. p-Toluensulfonátová sůl byla izolována ve.formě 4,0 gramů (10,9 milimolu, 97 procent) pevné bílé látky. δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 1,46 (d, 3H, CH₃-ala, J=7); 2,32 (2, 3H, CH₃, p-TSA); 2,93 (t, 2H, CH₂Ph, J=7); 4,07 (q, 1H, CH-ala, J=7); 4,37 (m, 2H, O-CH₂) ; 7,22 (m, 7H, ArH, p-TSA a PhH);

7,78 (d, 2H, ArH, p-TSA).

δ_€ (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 16,80 (CH₃-ala) ; 22,06 (CH₃-p-TSA) ;

36, 20 (CH₂-Ph); 50,41 (CH-ala); 68,28 (O-CH₂) ; 127,70;

127,83 (o-Ar a o-Ph, p-TSA); 129,81 (p-Ar, p-TSA); 130,13; 130,48 (m-Ar a m-Ph, p-TSA); 139,23 (ipso-ArC, p-TSA);

142,3 (ipso-C-CH₃, p-TSA); 143,83 (ipso-C-S, p-TSA);

171,44 (C=O).

Fenyl(fenethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

PhO-P-CI i

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,5 mililitru (3,3 milimolů) fenyldichlorfosfátu, 0,93 mililitru (6,7 milimolu) suchého triethylaminu,

1,232 gramu (3,3 milimolu) p-toluensulfonátu (fenethyl)esteru L-alaninu (9a) a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,16 gramu (94 procent) surového produktu ve formě čirého bezbarvého oleje.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,93; 9,25

100“

9 * ϊ ; ·:

· 9 9

V ί» 9 9 9 ···

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,233 gramu/mililitr.

0-[Fenyl(fenethoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cílili

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla .použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolů) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolů) a 3,3 mililitru roztoku fenyl(fenethoxy-Lalaninyl ) -fosforchloridátu (9b) o koncentraci

0,233 gramu/mililitr (2,1 mílimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na.tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 3 hodinách. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě světle žlutého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci &

101 * · · '· «' !« • · · « · ·' · 9 · · .

» · · · · · · * · f .

» · <*' « · · ♦ · · * .♦. · «ί · '· · · · f. « ·'· · • » * · · * · · · · ·' · · ·.

s diethyletherem do podoby 0,181 gramu (0,3 milimolu, procent) krémovité pevné látky. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,81, 3,86.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,65 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,89 (m, 2H,

CH₂-cPr) ; 1,35 (m, 3H, CH₃-ala) ; 1,71 (m, 1H, 6'H_a); 2,80 (m, 1H, 6'H_b); 2,96 (m, 2H, CH₂Ph) ; 3,03 (m, 1H, CH-cPr); 3,17 (m, 1H, 4'H); 3,91 (m, 2H, NH-ala a CH-ala); 4,18 (m, 2H, OCH); 4,36 (m, 2H, 5'H); 4,99 (bs, 1H, NH₂) ; 5,56 (m, 1H, l'H);

5,92 (m, 2H, 3Ή a NH-cPr) ; 6,09 (m, 1H, 2'H); 7,26 (m, 10H, ArH a PhH) ; '7,52’ (d, 1H, 8H) .

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 6,36 (CH₂-cPr) ; 19,98;. 20,04 (CH₃-ala) ;

22.65 (CH-cPr); 33,46; 33,54 (6'C); 33,90 (CH₂-Ph); 44,56;

44.66 (4'C); 49,21 (CH-ala); 57,79; 57,85 (l'C); 64,84 (OCH₂) ; 67,82 (5(0 ; 113,79 (5C) ; 119,11-119,17 (p-Ph); 123, 87 (p-Ar); 125, 68 (o-Ph); 127,53 (o-Ar) ; 127,83 (m-Ph) ;' 128,62 (m-Ar);. 130,07; 130,14 (3'C); 134,48 (8C); 135,30; 135,39 (2'C);

136,25 (ipso-Ar); 149,63; 149,71 (6C a ipso-Ph); 155,25 (4C); 158,94 (2C); 172,75; 172,45 (C=O). p-Toluensulfonát (3-fenyl-l-propyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,0 gramu (11 milimolů) L-alaninu, 2,35 gramu (12 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA), 1,5 mililitru (11 milimolů) 3-fenyl-l-propanolu a 65 mililitrů toluenu. Odstraněním rozpouštědla byl získán surový produkt ve '1^ t:

102

>··	44		9		•	4	4
• ·	• . ·	* ·	9'			•	9 4
• 4	•	• 9	9	•	•	4	t
f ·		9 9	9	• 4 4	9 9	4	4
4·	• 44 ·	9 4'		C	9	4	9 9 .·

formě žlutého oleje, 'ke kterému byl přidán diethylether a směs byla 30 minut chlazena. Vzniklá suspenze byla přefiltrována a bylo získáno 4,24 gramu (11,2 milimolu, 100 procent) uvedené p-toluensulfonátové soli ve formě pevné bílé látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 1,53 (d, 3H, CH₃-ala, J=7); 1,97 (m, 2H, CH₂CH₂Ph); 2,34 (2, 3H, CH₃, p-TSA); 2,67 (t, 2H, CH₂Ph, J=7); 4,10 (q, 1H, CH-ala, J=7); 4,20 (t, 2H, O-CH₂, J=7); 7,22 (m, 7H, ArH, p-TSA a PhH); 7,75 (d, 2H, ArH, p-TSA).

δ₀ (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 16,77 (CH₃-ala) ; 21,93 (CH₃-p-TSA) ;

31,63 (CH₂CH₂-Ph); 33,37 (CH₂-Ph); 50,44 (CH-ala); 67,27 (0CH₂) ; 127,26-127,58 (o-Arao-Ph, p-TSA); 129, 66-130,00 (p-Ar) 130,41 (m-Ar a m-Ph,p-TSA); 142,31 (ipso-ArC);

142,82 (ipso-C-CH₃, p-TSA); 143,82 (ipso-C-S, p-TSA);

171,47 (C=O).

Fenyl(fenethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,5 mililitru (3,3 milimolu) fenyldichlorfosfátu, 0,93 mililitru (6,7 milimolu) suchého triethylaminu,

1,27 gramu (3,3 milimolu) p-toluensulfonátu (3-fenyl-lpropyl)esteru L-alaninu (9a) a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,16 gramu (90 procent) surového produktu ve formě čirého světle hnědého oleje. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,94; 9,27

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu ' (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,231 gramu/mililitr.

J '4 4 :« · <*··* 4. 4.-4 ·<

» 4 4 4 · 4,4' · . 4 44

4 ’· 4 4 '9 ♦ 4 4 · • 4 . » · 4 4' 4 '4 4· 4 4 · · · 4

4' 4 4 4 4 -99 · *· *·♦

O-[Fenyl(3-fenyl-l-propoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S,4R)-4- [2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl778

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 3,5 mililitru roztoku fenyl(3-fenyl-lpropoxy-L-alaninyl ) -fosforchloridátu (10b) o koncentraci 0,231 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 4 hodinách. Surový zbytek byl třikrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě světle žlutého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,330 gramu (0,5 milimolu, procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,89, 3,91.

· 9 9 9 9 '9' · · · · · · · 9 ·.<£ ·. .4 ·· δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,63 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,88 (m, 2H,

CH₂-cPr); 1,42 (m, 3H, CH₃-ala); 1,72 (m, 1H, 6'H_a);

1,98 (CH₂CH₂Ph) ; 2,69 · (CH₂Ph) ; 2,80 (m, 1H, 6'H_b) ; 3,04 (m, 1H, ' CH-cPr) ; 3,18 (m, 1H, 4Ή);. 4,07 (m, 6H, NH-ala, CH-ala, OCH a 5Ή); 5,00 (bs, 1H, NH₂) ; 5,56 (m, 1H, 1Ή); 5,91 (m, 2H, 3'Ha NH-cPr); 6,10 (m, 1H, 2Ή); 7,25 (m, 10H, ArH a PhH) ; 7,52 (d, 1H, 8H).

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 6,35 (CH₂-cPr) ; 20,06; 20,12 (CH₃-ala);

22,65 (CH-cPr); 29,02 (CH₂CH₂Ph) ; 30,97 (CH₂Ph) ; 33,48;

33,55 (6'C); 44,57; 44,67 (4'C); 49,26 (CH-ala); 57,78;

57,84 (l'C); 63, 84 (OCH₂) ; 67,88 (5'C); 113,83 (5C) ; 119,10; 119,15' (p-Ph a p-Ar); 123,, 86 (o-Ph); 125, 09 (o-Ar) ; .127,33; 127,47 (m-Ph); 128/63 (m-Ar); 130,10; 130,17 (3'C); 134,47;

134.58 (8C); 135,27; 135,37 (2'C); 139,81 (ipso-Ar); 149,65; 149, 74 (6C a ipso-Ph); . 155,27 (4C); 158,98 (2C); 172,49;

172.58 (C=O).

p-Toluensulfonát (4-fenyl-l-butyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,0 gramu (11 milimolů) L-alaninu, 2,35 gramu (12 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA), 1,7 mililitru (11 milimolů) 4-fenyl-l-butanolu a 65 mililitrů toluenu. Odstraněním rozpouštědla byl získán surový produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodešTTlaci s petroletherem (60/80) za vzniku 4,4 gramu

105 • 4 '99 94 <· '4 . · ♦ 4 ·.♦'*' » - *

9 9 9 9 '9 >9 9 • 4 '»! « · ·····«* • 44 · 9 9-9

9' 99 9 9 9 9 '4 (11,2 milimolu, 100 procent) uvedené p-toluensulfonátové soli ve formě pevné bilé látky.

δΗ (d4-CH3OH,	300 MHz) 1,55	(d,	3H, CHa-ala, J=7)	; 1,74 (m, 4H,
-(CH2)2CH2Ph)	; 2,41 (2, 3H,	ch3,	p-TSA); 2,67 (m,	2H, CH2Ph) ;
4,12 (q, 1H,	CH-ala, J=7);	4,28	(m, 2H, O-CH2) ;	7,25 (m, 7H,
ArH, p-TSA a	PhH); 7,75 (d,	2Η,	ArH, p-TSA).
δ0 (d4-CH3OH,	75 MHz) 16,65	(CH3-	-ala) ; 21,74 (CH3·	-p-TSA); 29,18;

29, 50 (OCH₂ (CH₂) ₂CH₂-Ph) ; 36, 72 (CH₂-Ph) ; 50,27 (CH-ala);

67,74 (O-CH₂) ; 127,31; 127,36 (o-Ar a o-Ph, p-TSA);

129,79 (p-Ar); 130,25 (m-Ar a m-Ph, p-TSA); 142,14 (ipso-ArC); 143,64; 143,87 (ipso-C-CH₃ a ipso-C-S, p-TSA);.171,47 (C=O).

Fenyl(4-fenyl-l-butoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

II

PhO—P—CI I

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3.z 0,5 mililitru (3,3 milimolu) fenyldichlorfosfátu, 0,93 mililitru (6,7 milimolu) suchého triethylaminu,

1,32’gramu (3,3 milimolu) p-toluensulfonátu (4-fenyl-lbutyl)esteru L-alaninu (11a) a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,13 gramu (85 procent) surového produktu ve formě čirého světle hnědého oleje. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,89; 9,24

ί 06

·.· ·

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,226 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(4-fenyl-l-butoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl779

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu,(0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku , terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 3,7 mililitru roztoku fenyl(4-fenyl-l-butoxyL-alaninyl ) -fosf orchloridátu (11b) o koncentraci

0,226 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 4 hodinách. Surový zbytek byl přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí · methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a ·· ·4

4 4.

.9.9

107 kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,314 gramu (0,5 milimolu, 69 procent) bílé pěny. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,87, 3, 90.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,65 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,87 (m, 2H,

CH₂-cPr) ; 1,41 (m, 3H, CH₃-ala) ; 1,71 (m, 5H, (CH₂)₂CH₂Ph a 6'H_a); 2,65 (m, 2H, CH₂Ph) ; 2,80 (m, 1H, 6'H_b); 3,04 (m, 1H,. CH-cPr); 3,17 (m, 1H, 4'H); 4,06 (m, 6H, NH-ala, CH-ala, OCH₂ a 5'H); 5,02 (bs, 1H, NH₂) ; 5,56 (m, 1H, l'H); 5,90 (m, 1H, 3'H); 5,98 (bs, 1H, NH-cPr); 6,10 (m, 1H, 2'H); 7,25 (m, 10H, ArH a PhH); 7,52 (d, 1H, 8H). .

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 6,35 (CH₂-cPr) ; 20,05; 20,11 (CH₃-ala);

22,65 (CH-cPr); 26,51 (CH₂CH₂CH₂Ph) ; 27,02 (CH₂ (CH₂) ₂Ph) ; 33,48; 33,55 (6'C); 34,32 (CH₂Ph) ; 44,56/ 44,67 (4'C); 49, 22;

49, 26 (CH-ala); 57,79; 57,83 (l'C); 64,40 (OCH₂) ; 67,86;

67,94 (5'C); 113,75 (5C); 119,10; 119,15 (p-Ph a p-Ar);

123,85 (o-Ph); 124,88 (o-Ar); 127,33; 127,35 (m-Ph);

128,61 (m-Ar); 130,07; 130,12 (3'C); 134,44; 134,54 (8C); 135,30; 135,39 (2'C); 140,76 (ipso-Ar); 149,64-149,87 (6C a ipso-Ph); 155,26 (4C); 158,98 (2C); 172,53; 172,63 (C=O).

p-Toluensulfonát (2-cyklohexylethyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,0 gramu (11 milimolů) L-alaninu, 2,35 gramu (12 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA), 1,56 mililitru (11 milimolů) 2-cyklohexylethanolu a

108

• · • 4 4 4 • 4	4 4 . 4 4 • 4.4 4 '4 ·'· 4 4 4 4 4	•4 • 4 '4 .4 « <»'4 4 4 '4 4	4 4 4 4 4	4.4 4
• ·	4444 44	·	• ·	4 4 4

mililitrů toluenu. Odstraněním rozpouštědla byl získán surový produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem za vzniku 2,8 gramu (7,5 milimolu, 67 procent) pevné bílé látky. δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 0,97 (m, 2H, CH₂) ; 1,24 (m, 4H, 2 x CH₂) ; 1,42 (m, 1H, CH-cHx); 1,54 (d, 3H, CH₃-ala, J=7); 1,63 (m, 2H, CH₂); 1,63 (m, 2H, CH₂) ; 1,75 (m, 4H, 2 x CH₂) ; 2,39 (s, 3H,

CH₃, p-TSA); 4,09 (q, 1H, CH-ala, J=7); 4,28 (m, 2H, O-CH₂) ; 7,25 (d, 2H, ArH, p-TSA); 7,72 (d, 2H, ArH, p-TSA).

5_C (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 16,65 (CH₃-ala) ; 21,74 (CH₃-p-TSA) ;

27,68 (CH₂); 27,93 (CH₂) ; 34,58 (CH₂); 34,62 (CH₂) ; '

36,10 (CH-cHx); 50,27 (CH-ala) ; 66,05 (O-CH₂ (CH₂) ₂) ; 127,36 (oPh, p-TSA); 130,24 (m-Ph, p-TSA); 142,13 (ipso-C-CH₃) ;

143,89 (ipso-C-S, p-TSA); 171,49 (C=O). .

Fenyl(2-cyklohexylethoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

II

PhO— p—Cl I

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,9 mililitru (6,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu,

1,7 mililitru (12,0 milimolů) suchého triethylaminu,

2,24 gramu (6,0 milimolů) p-toluensulfonátu (cyklohexylethyl)esteru L-alaninu (12a) a celkem 100 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,86 gramu (83 procent) surového produktu ve formě čirého bezbarvého oleje.

109 δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,96; 9,31

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,372 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(2-cyklohexyl-l-ethoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl780

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolů) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolů) a 2,1 mililitru roztoku fenyl(cyklohexylethoxyL-alaninyl)-fosforchloridátu (12b) o koncentraci

0,372 gramu/mililitr (2,1 milimolů) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 2,5 hodiny. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí

9

110

• 9

methanol/chloroform (4:96), čímž· byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,302 gramu (0,5 milimolů, 69 procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,91, 3,94.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,64 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,91 (m, 4H, CH₂ a CH₂-cPr) ; 1,21 (m, 2H, CH₂) ; 1,41 (m, 3H, CH₃~ala) ; 1,52 (m, 2H, CH-cHx a 6'H_a); 1,70 (m, 6H, 3 x CH₂) ; 2,80 (m, 1H, 6'H_b) 3,04 (m, 1H, CH-cPr); 3,18 (m, 1H, 4'H); 4,10 (m, 6H, NH-ala CH-ala, OCH₂ a 5'H); 5,03 (bs, 1H, NH₂) ; 5,56 (m, 1H, l'H); 5,96 (m, 1H, 3'H); 5,98 (m, 1H, NH-cPr) ;. 6, 10 (m, 1H, 2'H); 7,25 (m, 5H, Ar); 7,51 (d, 1H, 8H) .

č_c (CDC1₃, 75 MHz) 6,35 (CH₂-cPr) ; 20,05; 20,12 (CH₃-ala) ; 22,69 (CH-cPr); 25,11 (CH₂) ; 25, 37 (CH₂) ; 32,04; 32,07 (6'C); 33, 45; 33,58 (CH-cHx); 34,76 (CH₂) ; 44,58; 44, 69 (4 'C);

49, 28 (CH-ala); 57,78; 57,83 (l'C); 62,88 (OCH₂) ; 67,86 (5'C) 113,82 (5C); 119,10-119,19 (p-Ph); 123,85 (o-Ph);

128,61 (m-Ph); 130,12 (3'C); 134,44; 134,54 (8C); 135,28; 135,38 (2'C); 149, 66-149, 94 (6C a ipso-Phj; 155,28 (4C); 155,99 (2C); 172,57; 172,66 (C=O).

p-Toluensulfonát (3-cyklohexyl-l-propyl)esteru L-alaninu

Me¹

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 1,0 gramu (11 milimolů) L-alaninu, 2,35 gramu (12 milimolů) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA)

111

1,7 mililitru (11 milimolů) 3-cyklohexyl-l-propanolu a

65' mililitrů toluenu. Po odstranění rozpouštědla byl ke zbytku přidán diethylether a po přefiltrování vzniklé suspenze bylo získáno 3,9 gramu (10,1 milimolu, 90 procent) produktu ve formě pevné bílé látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 0,92 (m, 2H, CH₂) ; 1,23 (m, 6H, 3 x CH₂) ; 1,54 (d, 3H, CH₃-ala, J=7); 1,71 (m, 7H, CH-cHx a 3 x CH₂) ;

2,39 (s, 3H, CH₃, p-TSA); 4,10 (q, 1H, CH-ala, J=7); 4,22 (m, 2H, O-CH₂) ; 7,25 (d, 2H, ArH, p-TSA); 7,72 (d, 2H, ArH, p-TSA). δ₀ (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 16,66 (CH₃-ala) ; 21,74 (CH₃-p-TS_A) ;

27,36 (CH₂) ; 27,83 (CH₂) ; 28,11 (CH₂) ; 34,80 (CH₂) ; 34, 90 (CH₂) ; 39, 03 (CH-cHx); 50,27 (CH-ala); 68,27 (O-CH₂) ; 127,36 (o-Ph, p-TSA); 130,24 (m-Ph, p-TSA);'142,12 (ipso-C-CH₃, p-TSA);

143,89 (ipso-C-S, p-TSA); 171,49 (C=O).

Fenyl(3-cyklohexyl-l-propoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

Uvedená sloučenina' byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,9 mililitru (6,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu,

1,7 mililitru (12,0 milimolů) suchého triethylaminu,

2,32 gramu (6,0 milimolů) p-toluensulfonátu (3-cyklohexyl-lpropyl)esteru L-alaninu (13a) a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 2,31 gramu (99 procent) surového produktu ve formě čirého světle žlutého oleje. δ“( CDC1I7“ Τ2Ώ4Ηζ Γ~879 9?“ 9ý3 5 ' ~~

112 • · ····

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,463 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(3-cyklohexyl-l-propoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R) -4- [2-amino-6- (cyklopropylamino) -9H-purin-9-yl] -2cyklopenten-l-methanolu Cfl781

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu. (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 1,8 mililitru roztoku fenyl(3-cyklohexyl-lpropoxy-L-alaninyl)-fosforchlóridátu (13b) o koncentraci' 0,463 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) . Chromatografií na tenké vrstvě (TLC) , v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 2,5 hodiny. Surový zbytek byl přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čirého Běžbarvého^oleje, který ztuhl po trituraci a

113

« 9 9 9 9 · 9 9	9« 9. 9 9 . 9 9	9 9 9 . 9 9 9 9 * 9	9 - 9 9 9 - 9999	• 9 9 9 9 9 9 ,9	9 9
99	9 9 9 9	• 9	9	• 9	9 9

kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,276 gramu (0,4 milimolu, 62 procent) bílé pěny. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,89, 3,91.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,64 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,89 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 1,21 (m, 6H, 3 x CH₂) ; 1,41 (m, 3H, CH₃-ala);

1,66 (m, 8H, CH-cHx, 3 x CH₂ a 6'H_a); 2,81 (m, 1H, 6'H_b);

3,04 (m, 1H, CH-cPr); 3,18 (m, 1H, 4'H); 4,04 (m, 6H, NH-ala CH-ala, OCH₂ a 5'H); 4,98 (bs, 1H, NH₂) ; 5,56 (m, 1H, l'H); 5,91 (m, 1H, 3Ή a NH-cPr); 6,11 (m, 1H, 2'H); 7,26 (m, 5H, Ar); 7,57 (d, 1H, 8H).

δ₀ (CDC1₃, 75 MHz) 6,37 (CH₂-cPr) ; 20,09; 20,15 (CH₃-ala) ;

22, 66 (CH-cPr); 24,85 (CH₂) ; 25,27 (CH₂) ; 25,55 (CH₂) ;

29, 92 (CH₂) ; 32,20; 32,33 (6'C); 33,49; 33,57 (CH-cHx);

36,22 (CH₂); 44,58,-.44,68 (4'C); 49,27 (CH-ala); 57,78 ;

57,83 (l'C); 65,01 (OCH₂) ; 67,84 (5'C); 113,86 (5C); 119,10119,19 (p-Ph); 123,85 (o-Ph); 128,61 (m-Ph); 130,12 (3'C); 134,47; 134,57 (8C); 135,28; 135,38 (2'C); 149,65-149,74 (6C ipso-Ph); 155,27 (4C) ; 158,96 (2C) ; 172,53'; 172,64 (C=O) .

p-Toluensulfonát (4-cyklohexyl-l-butyl)esteru L-alaninu

Uvedená sloučenina byla připravena podle standardního postupu 2 z 0,51 gramu (5,8 milimolu) L-alaninu, 1,21 gramu (6,3 milimolu) monohydrátu kyseliny p-toluensulfonové (p-TSA) 1,0 mililitru (5,8 milimolu) 4-cyklohexyl-l-butanolu a 65 mililitrů toluenu. Bylo získáno 2,15 gramu (5,4 milimolu, v

3''

114 ·· ·* ·« • »· · « · • · · · · ··· · · · • · · · · •« ···· ·· • · ····

procent uvedené p-toluensulfonátové soli ve formě bílé krystalické látky.

δ_Η (d₄-CH₃OH, 300 MHz) 0,92 (m, 2H, CH₂j ; 1,17 (m, 6H, 3 x CH₂) ; 1,39 (m, 2H, CH₂) ; 1,54 (d, 3H, CH₃-ala, J=7); 1,69 (m, 7H, CH-cHx a 3 x CH₂) ; 2,39 (s, 3H, CH₃, p-TSA); 4,10 (q, 1Ή, CH-ala, J=7); 4,24 (m, 2H, O-CH₂) ; 7,25 (d, 2H, ArH, p-TSA); 7,72 (d, 2H, ArH, p-TSA).

5_C (d₄-CH₃OH, 75 MHz) 16,66 (CH₃-ala) ; 21,74 (CH₃-p-TSA);

24,51 (CH₂) ; 27,89 (CH₂); 28,18 (CH₂) ; 30,25 (CH₂) ; 34,90 (CH₂) ; 38,59 (CH₂); 39, 27 (CH-cHx); 50,27 (CH-ala) ;. 67,94 (O-CH₂) ; 127,36 (o-Ph, p-TSA); 130,23 (mrPh, p-TSA); 142,15 (ipso-C-CH₃, p-TSA); 143,89 (ipso-C-S, p-TSA); 171,49 (C=O).

Fenyl (4-cyklohexyl-l-butoxy-L-alaninyl)-fosforchloridát

O

II

PhO—P—Cl I

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním . postupem 3 z 0,45 mililitru (3,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu, 0,8 mililitru (6,0 milimolů) suchého triethylaminu, 1,2 gramu (3,0 milimolů) p-toluensulfonátu (4-cyklohexyl-lbutyl)esteru L-alaninu (14a) a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,36 gramu (>100 procent) surového produktu ve formě čirého hnědého oleje. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,91; 9,28 • · • ···

115 ·· ·· ·« · · · « « • · · · · • · « · · · • · · · · « ·· ···· ·· « •η

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,272 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(4-cyklohexyl-l-butoxy-L-alaninyl)]-fosfát.

(1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl782

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy.byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 3,1 mililitru roztoku fenyl(3-cyklohexyl-lpropoxy-L-alaninyl)-fosforchloridátu (14b) o koncentraci 0,272 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 8 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent' methanolu,v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 2,5 hodiny. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čΪrého bezbárveho oTejě, )<ter/Ttuh 1 po trituraci a

116

9 9 9 9 9 * « W· · * 9 9

9 β · · ······«· · • 9 9 9 9 9 9 9

9 999 9 9 · · · kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,341 gramu (0,5 milimolu, 75 procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3,89, 3,91.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,65 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,86 (m, 2H, CH₂-cPr); 1,21 (m, 8H, 4 x CH₂) ; 1,41 (m, 3H, CH₃-ala) ;

1,65 (m, 8H, CH-cHx, 3 x CH₂ a 6'H_a); 2,81 (m, ÍH, 6'H_b);

3,04 (m, ÍH, CH-cPr); 3,19 (m, ÍH, 4'H); 4,04 (m, 6H, NH-ala, CH-ala, OCH₂ a 5'H); 4,96 (bs, ÍH, NH₂) ; 5,56 (m, ÍH, l'H);

5, 92 Ar) ;	(m, ÍH, 7,52 (d,	3 Ή a NH-cPr); • ÍH, 8H).	6,11 i	(m, ÍH,	2Ή) ;	7,26 (m, 5H,
čc (CDC13, 75	MHz) 6,37 (CH;	>-cPr) ;	20,10;	20, 16	(CH3-ala);
22,00	(CH2) ;	22,65 (CH-cPr)	; 25,34	(CH2) ;	25, 64	(CH2) ;
27,77	(CH2) ;	32,28 (CH-cHx)	; 33,48	; 33,56	(6'C)	; 36, 45 (CH2)
44,58	; 44,68	(4'C); 49,24 (	CH-ala.)	; 57,79	; 57,84 (l'C);
64, 69	(OCH2) ;	67,84; 67,94	(5'C);	113,86	(5C) ;	119,10-

119,19 (p-Ph); 123,86 (o-Ph); 128,62 (m-Ph); 130,11; 130,17 (3'C); 134,47; 134,57 (8C); 135,28; 135,39 (2'C); 149, 65-149,74 (6C a ipso-Ph); 155,26 (4C); 158,96 (2C); 172,54; 172, 64 (C=O) .

Fenyl(methoxy-L-valinyl)-fosforchloridát

O

II

PhO-P—Cl I

NH

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,45 mililitru (3,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu, 0,8 mililitru (6,0 milimolů) suchého triethylaminu,

117 • · ·« · « · · *.

* · · ·' . · · * * 9 ·

Λ · ·..···· · '4 • · · · · ·«····'« '</> «>*···· © · · * · 6

0,5 gramu (3,0 milimolů) hydrochloridu methylesteru L-valinu a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 0,922 gramu (>100 procent) surového produktu ve formě čirého bezbarvého oleje.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 8,99; 9,37

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,184 gramu/mililitr.

O-[Fenyl(methoxy-L-valinyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl686

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 3,5 mililitru roztoku fenyl(methoxyvalinyl)fosforchloridátu (15a) o koncentraci 0,184 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Reakční směš~byla míchana^-l6hočlin a po uplynutí této doby

118 ·>«

• · · . » . · • · · · « t • · · · · · «> 4 4 fc · · fc » bylo do směsi přidáno dalších 1,5 mililitru roztoku sloučeniny (15a) a reakční směs byla míchána další 4 hodiny. Surový zbytek byl' přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/dichlormethan (DCM) (5:95), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,161 gramu (0,3 milimolu, 41 procent) bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 4,65, 4,74.

δΗ (C	DC13, 30	0 MHz) 0,66	(m, 2H, CH2-cPr);	o,	94	(m,	8H,
CH2-c	Pr a CHI	:CH3)2); 1,71	(m, . 1H, 6'Ha); 2	, 06	(m	, 1H	, CH(CH3)2)
2,81	(m, 1H,	6'Hb); 3,04	(m, 1H, CH-cPr);	3,	18	(m,	1H, 4'H);
3,52	(m, 1H,	CH-val); 3,	70 . (d, 3H, OCH3) ;	3,	83	(m,	1H, NH-val)
4,22	(m, 2H,	5'H); 4,86	(bs, 2H, NH2) ; 5,	56	(m,	1H,	l'H);

5,74 (bs, 1H, NH-cPr); 5,93 (m, 1H, 3'H); 6,11 (m, 1H,* 2'H); 7,27 (m, 5H, Ar); 7,52 (d, 1H, 8H).

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 6,37 (CH₂-cPr) ; 16,36; 16,45 (CH(CH₃)₂);

22, 65 (CH-cPr); 31,08; 31,16 (CH(CH₃)₂); 33,61 (6'C); 44,60; 44,70 (4 'C); 51,05; 51,10 (OCH₃) ; 57,78 (l'C); 58, 96;

.59,01 (CH-val); 67,90 (5'C); 113,91 (5C); 11.9,03119.13 (o-Ph); 123,80 (p-Ph); 128,58 (m-Ph); 130,05;

130.14 (3'C); 134,47 (8C); 135,27; 135,39 (2'C); 149,66149,84 (6C a ipso-Ph); 155,28 (4C); 158,96 (2C); 172,10;

172,19 (C=O). ' m/z (FAB) 556, 2428 (MH⁺) , pro C₂₆H₃₅N7O₅P vypočteno 556,2437.

119

Fenyl(methoxy-L-leucinyl)-fosforchloridát

O

PhO—P-CI

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,41 mililitru (2,8 milimolu) fenyldichlorfosfátu, 0,77 mililitru (5,5 milimolu) suchého triethylaminu, 0,5 gramu (2,8 milimolu) hydrochloridu methylesteru L-leucinu a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,062 gramu (>100 procent) surového produktu ve formě čirého světle žlutého oleje.

δ_Ρ (CDCla, 121 MHz) 9,33; 9,51

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,212 gramu/mililitr.

O—[Fenyl(methoxy-L-leucinyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl718

HN r v

Ua

PhO—P—O—»

ŮÓ.

NH_z

120 • · « · · · ·' · '· e » · '« 0 _ · 0' 0 '· ·

·.· 0' · · • · · · ·

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 3,2 mililitru roztoku fenyl(methoxy-Lleucinyl)-fosforchlóridátu (16a) o koncentraci

0,212 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 10 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 2 hodinách. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,211 gramu (0,4 milimolu, 53 procent) bílé pěny. δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 3, 98, 4,06.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,64 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,89 (m, 8H,

CH₂-cPr a CH(CH₃)₂); 1,51 (m, 2H, CH₂-leu) ; 1,69 (m, 2H, CH(CH₃)₂a 6'H_a); 2,80 (m, 1H, 6'H_b); 3,04 (m, 1H, CH-cPr);

3.16 (m, 1H, 4'H); 3,67 (m, 1H, CH-leu) ; 3,69 (d, 3H, OCH₃) ;

3,98 (m, 1H, NH-leu); 4,19 (m, 2H, 5'H); 4,97 (bs, 2H, NH₂) ;

5,55 (m, 1H, l'H); 5,91 (m, 1H, NH-cPr a 3'H); 6,09 (m, 1H,

2'H); 7,25 (m, 5H, Ar); 7,51 (d, 1H, 8H).

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 6,37 (CH₂-cPr); 20, 69; 20,82 (CH₃-leu) ;

22, 69 (CH-cPr); 23,28; 23,41 (CH(CH₃)₂); 33, 54 (6'C); 42, 6042,81 (CH₂-leu); 44,59; 44,70 (4'C); 51,19 (OCH₃) ; 52,07;

52.16 (CH-leu); 57,80 (l'C); 67,91; 67,98 (5'C); 113,88 (5C); 118,99-119,14 (o-Ph); 123,80 (p-Ph); 128,58 (m-Ph); 130,06;

130,14 (3'C); 134,53 (8C); 135,27; 135,34 (2'C); 149,68121

149,76 (6C a ipso-Ph); 155,28 (4C); 158,97 (2C); 173,12; 173,23 (C=0) m/z (FAB) 570,2610 (MH⁺) , pro C27H37N7O5P vypočteno 570,2594.

Fenyl(methoxy-L-prolinyl)-fosforchloridát

II

PhO-P-CI

I

N·

MeO.

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním, postupem 3 z 0,54 mililitru (3,6 milimolu) fenyldichlorfosfátu, 1,0 mililitru (7,2 milimolu) suchého triethylaminu, 0,6 gramu (3,6 milimolu) hydrochloridu methylesteru L-prolinu a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 1,24 gramu (>100 procent) surového produktu ve formě čirého bezbarvého oleje.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 9,02; 9,22

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,248 gramu/mililitr.

9

122 • · · ·' φ φ φ . .. · · φ » 9 9 9 9 9 9 » > Φ ·»····· ·

9 φ Φ Φ · · ·»·· ΦΦ « · ·\ ,φ

Ο-[Fenyl(methoxy-L-prolinyl)]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl719

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,2 gramu (0,7 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,4 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,4 milimolu) a 2,6 mililitru roztoku fenyl(methoxy-Lprolinyl )-fosforchloridátu (17a) o koncentraci

0,248 gramu/mililitr (2,1 milimolu) v 10 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 20 hodinách. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (4:96), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,168 gramu (0,3 milimolu, 44 procent)' bílé pěny.

δ_Ρ (CDC1₃, 121 MHz) 2,83, 2, 90.

δ_Η (CDC1₃, 300 MHz) 0,65 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 0,90 (m, 2H,

CH₂-čPr)7~1792“7m7“5H“ČH₂CH₂-pro a“T'H_a) ; 27§3 (m, 1H, 6'H_b);

123

3,04 (m, 1H, CH-cPr); 3,17 (m, 1H, 4^Η); 3,45 (m, 2H, N-CH₂-pro) ; 3,70 (d, 3H, OCH₃);4,13 (m, 1H, CH-proj; 4,30 (m, 2H, 5'H); 4,87 (bs, 2H, NH₂) ; 5,56 (m, 1H,· l'H); 5,73 (bs, 1H, NH-cPr); 5,91 (m, 1H, 3'H); 6,12 (m, 1H, 2 'H) ;' 7,27 (m, 5H,

Ar); 7,55 (d, 1H, 8H).

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 6,42 (CH₂-cPr) ; 22,62 (CH-cPr); 23,91;

24,02 (CH₂-pro); 30,38; 30,49 (CH₂-pro); 33,54 (6'C); 44,61; 44,72 (4'C); 46, 89 (N-CH₂) ; 51,07; 51,19 (OCH₃) ; 57,80 (l'C); 58,84; 58,92 (CH-pro) ; .67,67 ; 67,75 .(5 ' C) ; 113,87 (5C) ; .118,90-119,22 (o-Ph); 123, 64; 123,73 (p-Ph); 128,55; .

128,59 (m-Ph); 130,00 (3'C); 134,46 (8C); 135,42;

135,63 (2'C); 149,81; 149,90 (6C a ipso-Ph); 155,20 (4C); 158,87 (2C); 172,72; 173,23 ,(C=0) .

m/z (FAB) 554,2283 (MH⁺) , pro C26H33N7O5P vypočteno 554,2281.

Fenyl(dibenzyloxy-L-aspartinyl)-fosforchloridát

O

II

PhO— P—Cl I

NH (’· ’^CO₂Bn _;

CO₂Bn

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 3 z 0,45 mililitru (3,0 milimolů) fenyldichlorfosfátu, 0,8 mililitru (6,0 mílimolu) suchého triethylaminu, 1,46 gramu (3,0 milimolů) p-toluensulfátu dibenzylesteru kyseliny L-aspartové a celkem 60 mililitrů suchého dichlormethanu (DCM). Bylo získáno 0,8024 gramu (55 procent) surového produktu ve formě čirého žlutého oleje. 57“(CDC1“T21⁼“MHŽ)”“974'37“9758^““‘ ^: ‘ ~~

124

Uvedený produkt byl znovu rozpuštěn v 5 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF) a použit ve formě roztoku o koncentraci 0,16 gramu/mililitr.

O- [Fenyl (dibenzyloxy-L-aspartinyl) ] -fosfát (1S,.4R) -4- [2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl720

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, kdy byla použita směs 0,157 gramu. (0,55 milimolu) (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu, 1,1 mililitru 1,0 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,1 milimolu) a 5,0 mililitrů roztoku fenyl(dibenzyloxy-Laspartinyl) -fosforchloridátu (18a) o koncentraci

0,16 gramu/mililitr (1,6 milimolu) v 10 mililitrech suchého tetrahydrofuranu (THF). Chromatografií na tenké vrstvě (TLC), v soustavě 8 procent methanolu v chloroformu, bylo prokázáno, že reakce zcela proběhla po 1,5 hodiny. Surový zbytek byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí směsí methanol/chloroform (3:97), čímž byl získán produkt ve formě čirého bezbarvého oleje, který ztuhl po trituraci a

125 kodestilaci s diethyletherem do podoby 0,284 gramu (0,4 milimolu, 70 procent) bílé pěny.

δρ (CDC13,	121	MHz)	3,68,	4,24.
δΗ (CDC13,	300	MHz)	0, 63	(m, 2H, CH2-cPr); 0,85	(m, 2H,
CH2-cPr) ;	1,63	(m,	1H, 6'	Ha); 2,71 (m, 1H, 6'Hb)	; 3,06 (m, 2H,

CH-cPr a 4'H); 4,14 (m, 2H, CH-asp, NH-asp); 4,34 (m, 2H,

5'H); 4,98 (bs, 2H, NH₂) ; 5,06 (d, 2H, OCH₂Ph); 5,13 (d, 2H, OCH₂Ph); 5,53 (m, 1H, l'H); 5,88 (m, 2H, NH-cPr a 3'H);

6,01 (m, 1H, 2'H); 7,25 (m, 15H, ArH); 7,49 (d, 1H, 8H).

5_C (CDC1₃, 75 MHz) 6,35 (CH₂-cPr) ; 22,64 (CH-cPr); 33,40 (6C); 37,44; 37,60 (CH₂-asp); 44,50; 44,57 (4'C); 50,20;

50,33 (CH-asp); 57,79 (IX); 65,77 (OCH₂Ph) ; 66, 65 (OCH₂Ph) ; 67,86; 68,00 (5'C); 113,85 (5C)'; 119,09-119,34 (o-Ph) ;

123,92 (p-Ph); 127,34-127,55 (m-Ph a m/p-Bn); 128,61 (o-Bn); 130, 06 (3'C); 134,00 (ipso-Bn) ; '134,03 (ipso-Bn); 134,61 (8C) ; 135,23; 135,27 (2'C); 149,47-149,91 (6C a ipso-Ph);

155.28 (4C); 158,95 (2C); 169,22; 169,43; 170,00;

170.29 (C=O).

O-[Fenyl(2-methylpropyl)oxy-L-alaninylfosfát ] (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu

Cfl672

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem.70 procent. δ_Ρ 3,87, 3,91.

δ_Η 0,64 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,92 (8H, m, CH_aH_b,

CH_a-H_b- cyklopropyl, CH(CH₃)₂); 1,42 (3H, m, CH₃ alaninyl);

1,71 (1H, m, 6'-H_aH_b); 1,92 (1H, m, CH(CH₃)₂); 2,81 (1H, m,

6'-H_aH_b); 3,03 (1H, m CH cyklopropyl); 3,19 (1H, m, 4'-H);

‘3787“Γ3Ή—m7-CH-a±anřny-l-r-GH2GH-{-CH-₃);₂-)-;-4.,.0-9—(.ΙΗ-,-m^---1— _ *

126

NH-alaninyl) ; 4,20 (2H, m 5'-H); 4,91 (2H, brs, NH₂) ; 5,53 (1H, brm, l'-H); 5,80 (1H, brs NH-cyklopropyl); 5,92 (1H, m, 3'H);

6,12 (1H, m, 2'-H); 7,31 (5H, m, Ph-H); 7,48 (1H, brd, 8H).

5_C 5,45 (CH₂-cyklopropyl x 2); 17,01 (CH(CH₃)₂); 19,23;

19,29 (Me alaninyl); 21,74 (CH-cyklopropyl); 25,72 (CH(CH₃)₂); 32,58; 32,64 (6'-C); 43,66; 43, 76 (4'-C); 48,35 (CH alaninyl);

56,90 (l'-C); 66,88; 66,96; 67,03 (5'-C); 69,57;

69,60 (CH₂CH(CH₃) ₂) ; 118,17; 118,20; 118,24; 118,27 (o-Ph,

5-C); 122,94 (p-Ph); 127,70 (m-Ph); 129,19; 129,24 (3'-C);

134,35; 134,45 (8-C, 2'-C); 148,81; 148,72 (i-Ph); 149,62; 149,76 (6-C); 154,34 (4-C); 158,91; 158,96 (2-C);

171,58 (C(O) alaninyl).

MS ES⁺: m/z 570,2505 (M⁺, pro C₂-7H₃6O₅N₇P vypočteno 570,2515). HPLC: t_R 33,11 minuty (0 procent acetonitrílu (0 minut), procent acetonitrílu (35 minut), 80 procent acetonitrílu (45 minut), 0 procent acetonitrílu (55 minut)).

O-[Fenyl(2,2-dimethylpropyl)oxy-L-alaninylfosfát] (1S, 4R) -4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl673

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 94 procent. δ_Ρ 3, 88, 3, 94 .

δ_Η 0,61 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,85 (2H, brm,

CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,91 (9H, s, C(CH₃)₃); 1,41 (3H, m, CH₃ alaninyl) ; 1,70 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,78 (1H, m, 6 -H_aíí_b) ;

3,03 (1H, m CH cyklopropyl); 3,18 (1H, m, 4'-H); 3,81 (3H, m, CH alaninyl, CH₂CH(CH₃) ₂) ; 4,09 (1H, m, NH-alaninyl); 4,20 (2H, m, 5'-H); 4,97 (2H, brs, NH₂) ; 5,52 (1H, brm, l'-H); 5,86 (1H, brs NH-cyklopropyl, 3'-H); 6,08 (1H, m, 2 -H); 7,25 (5H, m, Pff^H )7“774 8“( ΤΗ“brd“8 H)-—--—-----—-—--_ ··.·< '}-Áf_>

• · 9 · ·-—<-*_·• 9 β • '9 · • · · ·'· ·»·♦ 'l&b > 9 ’· 9 • 9 · · 9

-· . · ,·₍·

5_C 7,89 (CH₂-cyklopropyl x 2); 21,74; 21,77 (Me alaninyl);'

26,81 (C(CH₃)₃); 24,21 (CH-cyklopropyl); 31,90 (C(CH₃)₃);

35,06 (6'-C); 46,10; 46,20 (4'-C); 50,79; 50,83 (CH alaninyl); 59,42 (l'-C); 66,35 (5'-C); 69,34; 69,41; 69, 49 (CH₂C (CH₃) ₃) ;

116,41 (5-C); 120,62; 120,66; 120,68; 120,72 (o-Ph);

125,39 (p-Ph); 130,15 (m-Ph); 131,61; 131,65 (3'-.C); 136,82; 136,90 (8-C, 2'-C); 151,16; 151,25 (6-C, i-Ph); 156,78 (4-C); 158,91; 160,44 (2-C); 174,09; 174,20 (C(0) alaninyl).

MS ES⁺: m/e 584,2640 (MH⁺, pro C₂eH₃₉O₅N₇P vypočteno 584,2672). HPLC: t_R 34,97 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

0-[Fenyl(3-methylbutyl)oxy-L-alaninylfosfát] (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl674

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 47 procent.

δ_Ρ 3,87, 3,89.

δ_Η 0,57 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,80 (8H, m, CH_aH_b,

CH_a-H_b- cyklopropyl, CH(CH₃)₂); 1,30 (3H, m, CH₃ alaninyl); 1,42 (2H, m, OCH₂CH₂) ; 1,62 (1H, m, 6'-H_aH_b, CH(CH₃)₂);

2,70 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,92 (1H, brs, CH cyklopropyl);

3,07 (1H, m, 4'-H); 3,88 (3H, m, CH alaninyl, OCH₂CH₂) ;

4,07 (3H, m, NH-alaninyl, 5'-H); 4,91 (2H, brs, NH₂) ; 5,48 brm, l'-H); 5,83 (2H, brs, NH-cyklopropyl, 3'-H); 6,03 (IP 2'-H); 7,18 (5H, m, Ph-H); 7,42 (1H, brd, 8H) .

5_C 7,81 (CH₂-cyklopropyl x 2); 21,49; 21,56 (Me alaninyl); 22,79; 22,83 (CH(CH₃)₂); 24,10 (CH(CH₃)₂); 25,38 (CHcyklopropyl); 34,91; 34,99 (OCH₂CH₂) ; 37,54 (6 -C) ; 46,01;

4‘6, Γ1 ’(A' -C);5O770“CCH~al*anlnyid*;—5-9—25; -59, 29—(-l—-C)-,-. -64,*63;.——128

4 44

-> .· ·-»'-4• · · • » · • 4 9 ·«·* υprávej

64,66 (OCH₂CH₂) ; 69, 22; 69, 30; 69, 38 (5-C); 120,53; 120,55; 120,59; 120,61 (o-Ph); 125,28 (p-Ph); 130,05 (m-Ph); 131,54; 131,60 (3'-C); 135,96 (8-C); 136,70; 136,81 (2'-C); 151,09; 151,17 (6-C, i-Ph); 156,68 (4-C); 160,34 (2-C); 173,94; 175,05 (C(O) alaninyl).

MS ES⁺: m/e 584,2664 (MH⁺, pro C28H39O5N7P vypočteno 584,2672). HPLC: t_R 38,51 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

O-[Fenyl(cykloheptanyl)oxy-L-alaninylfosfát] (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl752

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 41 procent. δ_Ρ 3, 96, 3, 98.

δ_Η 0,68 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b· cyklopropyl) ; 0,99 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 1,36 (5H, m, CH₃ alaninyl, 5''-H_aH_b, 6-H_aH_b); 1,80 (11H, m, 6' -H_aH_b, 2-H, 3-H, 4-H,

7-H, 5''-H_aH_b, 6-H_aH_b); 2,80 (1H, m, 6'-H_aH_b); 3,12 (1H, brs, CH cyklopropyl); 3,22 (1H, m, 4'-H); 3,97 (2H, m, CH alaninyl, NH-alaninyl); 4,20 (2H, m, 5'-H); 4,95 (1H, m O-CH); 5,18 (2H, brs, NH₂) ; 5,57 (1H, brm, l'-H); 5,90 (1H, m, 3'-H);

6,12 (1H, m, 2'-H); 6,25 (1H, brs, NH cyklopropyl); 7,25 (5H, m, Ph-H); 7,51 (1H, brd, 8H).

5_C 15,08 (CH₂-cyklopropyl x 2); 28,76; 28,82 (Me alaninyl);

30, 40; 30,44 (3-C, 6-C); 24,10 (CH(CH₃)₂); 31,57 (CHcyklopropyl); 35,87 (4''-C, 5''-C); 41,26; 41,29; 41,31;

41,36 (6'-C); 42,24 (2-C, 7-C); 53, 32; 53, 42 (4'-C);

58,08 (CH alaninyl); 61,15 (l'-C); 66, 62. (5'-C); 116,17 (5-C); T277’81“12 77*8 5 ;~1'2 778 8·;--127τ9·1“(’θ-ΡΗ^;—1Ό2·Λ54-Μρ·-Ρύ)-;—13.7.,.-32

.. ... ... . 'Vpr&^Í_tSt

129 ~ í ϊ * / · :: * : :

137,49 (m-Ph); 138,75 (3'-C); 143,21 (8-C) ; 144., 13;

144,22 (2'-C); 158,40; 158,49 (6-C, i-Ph); 164,42 (4-C);

167,41 (2-C); 180,47; 180,51; 180,59 (C(O) alaninyl).

MS ES⁺: m/e 632,2719 (M(Na)⁺, pro C₃oH4o0₅N₇NaP vypočteno 632,2726).

HPLC: t_R 41,92 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

O-(Eenyldiethoxy-L-aspartylfosfát) (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cf-1714

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním _; postupem 4, s výtěžkem 54 procent. δ_Ρ 3,_:76, 4,19.

δ_Η 0,62 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,88 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 1,25 (6H, m, CH₃-CH₂-O aspartyl x 2);

1,68 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,75 (2H, m, -(CO)-CH_aH_b aspartyl, 6'-H_aH_b); 2,97 (2H, m, CH cyklopropyl, -(CO)-CH_aH_b aspartyl);

3,16 (1H, m, 4'-H); 4,15 (8H, m, CH aspartyl, CH₂-0 aspartyl x 2, NH aspartyl, 5'-H); 4,90 (2H, brs, NH₂) ;

5,52	(1H,	brm,	l'-H)	; 5,80 (1H, brs, NH-cyklopropyl);
5, 90	(1H,	m, 3	'-H) ;	6,08 (1H, m, 2'-H); 7,21 (5H, m, Ph-H);
7,48	(1H,	brd,	8H) .

δ₀ 8,65 (CH₂-cyklopropyl x 2); 15,31 (CH₃-CH₂-O aspartyl x 2);

24,92 (CH-cyklopropyl); 35,72 J (CO)-CH₂ aspartyl); 39,74;

39,91 (6'-C); 46,82; 46,90 (4'-C); 52,41; 52,47 (CH aspartyl); 60,11 (l'-C); 62,22 (CH₃-CH₂-O (CO) CH₂ aspartyl) ;

63,15 (CH₃-CH₂-O(CO)CH₂ aspartyl); 70,14; 70,27; 70,35 (5'-C);

116,12 (5-C); 121,33; 121,40; 121,49; 121,55 (o-Ph);

126,'15 “ (ρ-Ph)¹;Ε3 678 6-(m-PhT;—1-32-,-36-(-313-6^90-(8 =Ch;-130

137,54 (2'-C); 151,81; 151,85 (6-C, i-Ph); 157,39 (4-C);

161,01 (2-C); 171,67; 171,81 (C(O)CH₂ aspartyl); 172,38; 172,48; 172,52; 172,62 (C(O) aspartyl).

MS ES⁺: m/e 614,2393 (MH⁺, pro C28H37O7N7P vypočteno 614,2492). HPLC: t_R 30,37 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

O-(Fenylmethoxy-L-methionylfosfát) (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu C11715

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 49 procent. δ_Ρ 3,90, 4,03.

δ_Η 0,61 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl) ; 0,86 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 1,71 (1H, m, CH-CH_aCH_b methioninyl) ;

l, 90 (1H, m, CH-CH_aCH_b methionyl) ; 2,01 (3H, d, CH₃-S);

2.30 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,47 (2H, m, 5'-CH₂); 2,78 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,97 (lH,,brm, CH cyklopropyl); .3,14 (1H, m, 4'-H); 3,70 (3H, d, CH₃-O-)'; 3,80 (1H, m, CH methioninyl); 4,17 (3H, m, NH methioninyl, 5'-H); 4,89 (2H, brs, NH₂) ; 5,49 (1H, m, 1 H) ; 5,80 (1H, brs, NH-cyklopropyl); 5,90 (1H, m, 3'-H);

6,08 (1H, m, 2'-H); 7,24 (5H, m, Ph-H); 7,43 (1H, brd, 8H) . δα 6,52 (CH₂-cyklopropyl x 2); 14,42; 14,47 (CH₃-S);

22.81 (CH-cyklopropyl); 28,63; 28,78 (S-CH₃) ; 32,62; 32,73;

32.81 (CH-CH₂-methioninyl); 33,65 (6'-C); 44,73; 44,83 (4'-C); 51,67 (CH methioninyl); 57,99 (l'-C); 68,13; 68,20;

68,27 (5'-C); 114,03 (5-C); 119,15; 119,22; 119,24;

119.30 (o-Ph); 124,05; 124,10 (p-Ph); 128,80 (m-Ph); 130,26;

130.30 (3'-C); 134,72 (8-C); 135, 42; 135,47 (2'-C); 149,76;

, '♦ · ·>'

131

• ·	• : -—
> ’·	•
. · *	•
• ·
• ·	• · ·

149,80; 149,84; 149,89 (i-Ph); 150,08 (6-C); 155,38 (4-C); 159,06 (2-C); 172,25; 172,28; 172,32; 172,36 (C(O)).

MS ES⁺: m/e 588,2053 (MH⁺, pro C26H34O5N7PS vypočteno 588,2080). HPLC: t_R 29,64 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

O-(Fenylmethoxy-L-tryptofanylfosfát) (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl750

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 70 procent.δ_Ρ 3,88, 4,01.

δ_Η 0,68 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl) ; 0,92 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 1,53 (1H, m, 6.'-H_aH_b); 2,68 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,99 (2H, brm, CH cyklopropyl, 4'-H); 3,22.(2H, m, CH₂-Trp); 3,66 (3H, d, CH3-O-); 3,93 (3H, m, NH Trp, 5'-H); 4,35 (1H, m, CH Trp); 4,94' (2H, brs, NH₂) ; 5,49 (1H, m, l'-H); 5,87 (2H, m, NH-cyklopropyl, 3'-H); 5,97 (1H, m, 2'-H);

7,01 (1H, m, 6''-H); 7,26 (7H, m, Ph-H, 4''-H, 5'-H);

7,46 (1H, m, 7-H); 7,52 (1H, m, 2-H); 8,63 (1H, brd, 8H) . δ₀ 7,81 (CH₂-cyklopropyl x 2); 24,10 (CH-cyklopropyl); 34,86; 34,91 (6'-C); 45,81; 45,90; 46,00 (4'-C); 52,97 (CH Trp) ; 59,24; 59,29 (l'-C); 69,14; 69/20 (5'-C); 109,86;

110,11 (3-C); 111,72 (7-C); 118,91 (5-C) ; 119,95;

120,04 (4-C, 5-C); 120,40; 120,47; 120,57; 120,63 (o-Ph); 122,49; 122,56 (6-H); 123,70 (2-C); 125,23; 125, 29 (p-Ph) ; 127,79; 127,98 (9-C); 130,04 (m-Ph); 131,27 (3'-C);

136, 08 (8-C) ; 136, 50; 136, 55; 136, 76; 136, 87 (2'-C, 8-C); 151,05; 151,14; 151,17; 151,26 (i-Ph, 6-C); 156,68 (4-C);

T6 0?3 5“( 2”CjT“17 3?5 8';~TT37'6 6“CC-(O)-)~

132

MS ES⁺: m/e 643,2432 (MH⁺, pro C₃₂H₃6C>5N₈P vypočteno 643,2346). HPLC: t_R 31,46 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

0-(Fenylmethoxy-L-isoleucinylfosfát) (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl751

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 60 procent. δ_Ρ 4, 48, 4,54 .

δ_Η 0,68 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b-' cyklopropyl) ; 0,91 (8H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl, CH₃’x 2 isoleucinýl); 1,15 (1H, m, CH_aCH_b isoleucinyl); 1,45 (1H, m, CH_aCH_b isoleucinýl); 1,75 (2H, m, 6'-H_aH_b, CH₃CH) ; 2,83 (1H, m,'6'-H_aH_b); 3,05 (2H, brm, CH cyklopropyl); 3,19 (1H, m, 4'-H); 3,62 (1H, m, NH isoleucinyl); 3,71 (3H, d, CH₃-O-) ; 3,88 (1H, m, CH isoleucinýl); 4,21’ (2H, m, 5'-H); 4,91 (2H, brs, NH₂);

5,55 (1H,. m, l'-H); 5,81 (1H, brs, NH-cyklopropyl); 5,93 (1H, m, 3'-H); 6,12 (ÍH, m, 2'-H); 7,28 (5H, m, Ph-H); 7,52 (1H, brd, 8H).

5_C 7,82 (CH₂-cyklopropyl x 2); 11,89 (CH₃CH₂) ; 15,72 (CH₃CH₂) ;

24,08 (CH-cyklopropyl); 25, 04; 25,13 (CH₃CH₂) ; 34,99 (6'-C);

39, 49; 39, 56.; ' 39, 64 (CH₂CH) ; 46, 04/ 46, 14 (4 '-C) ; .52,46;

52,50 (CH isoleucinyl); 59, 24; 59,44; 59, 54 (l'-C);

69, 34 (5'-C); 116,12 ’ (5-C); 120,47; 120, 53; 120,58 (o-Ph);

125.27 (p-Ph); 130,03 (m-Ph); 131,50; 131,57 (3'-C);

136,04 (8-C); 136,84; 136,74 (2'-C); 151,10; 151,18;

151.27 (i-Ph, 6-C); 156,69 (4-C); 161,06; 161,09; 161,35;

161,41 (2-C); 173,48; 173,53 (C(O)).

MS“eŠ^+j5 m/ě™57 072496^-(^^7—pro-C₂7H₃7©5N₇P—vypočteno -570,2594)___,_

··' ·

133

HPLC: t_R 32,83 minuty (O procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

O- (Fenyldimethoxy-L-glutamylfosfát) (1S, 4R) -4- [2-amino^-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu Cfl749

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 38 procent. δ_Ρ 3,99.

δ_Η 0, 68 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,91 (2H, m, CH_aH_b, CH_a'-H_b- cyklopropyl); 1,73 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,12 (1H, m,

C (O) CH₂CH_aCH_b) ; 2,38 (2H, m, C(O)CH₂); 2,82 (1H, m, 6'-H_aH_b); 3,05 (1H, m, CH cyklopropyl); 3,18 (1H, m, 4'-H);3,68 (3H, s, MeOC(O)CH₂); 3,72 (3H, s, MeOC(O)CH); 3,85 (1H, m, NH glutyl); 4,10 (1H, m, CH glutyl); 4,21 (2H, m, 5'-H); 4,95 (2H, brs, NH₂) ; 5,57 (1H, brm, l'-H); 5,88 (1H, brs, NH-cyklopropyl); 5,95 (1H, m, 3'-H); 6,10 (1H, m, 2'-H); 7,25 (5H, m, Ph-H);·

7,54 (1H, brs, 8H). ' 1

5_C 7,82 (CH₂-cyklopropyl x 2); 24,12 (CH-cyklopropyl); 29,66; 29, 73; 29, 88 (C (O) CH₂CH₂) ; (C (O) CH₂CH₂) ; 34,91 (6 '-C) ; .4 6, 02;

46,12 (4'-C); 52,19 - (CH₃OC (O) CH₂CH₂) ; 54,17;

54,28 (CH₃OC(O)CH₂) ; 54,17 (CH glutyl); 59,31 (l'-C);

69, 50 (5'-C); 115,42 (5-C) ;’ 120,48; 120,51; 120,55;

120,58 (o-Ph); 125,39 (p-Ph) ; 130,09; 130,22' (m-Ph) ; 131,55; 131,60 (3'-C); 136,13 (8-C); 136,68; 136,77 (2'-C); 150,98; 151,05; 151,13 (6-C); 151,76 (i-Ph); 156, 65 ‘ (4-C); 160,99; 161,02; 161,08; 161,12 (2-C); 173,33; 173,43 (C(O) x2 glutyl).

MS ES⁺: m/e 600,2216 (MH⁺, pro C₂7H₃₅O7N₇P vypočteno 600,2335).

134

HPLC: t_R 27,25 minuty (O procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

O-[Fenyl(methoxy-a-ethyl-L-glycinyl)fosfát] (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl783

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 44 procent. δ_Ρ 4,10.

δ_Η 0,59 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,83 (5H,brm, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl, CH₃-CH₂) ; 1,68 (3H, m, CH₃-CH₂, 6'-H_a);.

2,69 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,91 (1H, m, 4'-H); 3,06 (1H, m, CH cyklopropyl); 3,58 (3H, d, J=3,0, MeO); 3,90 (2H, m, NH glycinyl, CH glycinyl); 4,07 (2H, m,,5'-H); 5,02 (2H, brs,

NH₂) ; 5,42 (1H, m, l'-H); 5,75 (1H, m,'3'-H); 5,98 (1H, m, 2'-H); 6,03 (1H, m, NH cyklopropyl); 7,18 (5H, m, Ph-H);

7,41 (1H, brd, 8H). , ' 7

5_C 7,76 (CH₂-cyklopropyl x 2); 9,68; 9,76 (CH₃-CH₂) ;

24.12 (CH-cyklopropyl); 28,05 (CH₃-CH₂) ; 35,01. <6'-C); 46, 02;

46.13 (4'-C); 52,70; 52,73 (CH₃O) ; 56, 02 (l'-C);

59,25 (CH-ala); 69,38 (5'-C); 116,10 (5-C); 120,48; 120,50; 120,55; 120,57 '(o-Ph); 125, 27 (p-Ph); 130,0'4 (m-Ph) ;

131,51 (3'-C); .135,86 (2'-C); 151,08; 151,13; 151,22 (6-C, i-Ph); 156,67 (4-C); 160,40 (2-C); 173,84; 173,87;

173,92 (C(O) alaninyl).

MS ES⁺: m/e 564,2094 (M(Na)⁺, pro C₂5H32O5N₇NaP vypočteno 564,2100).

HPLC: t_R 16,82, 16,84 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), 80 procent acetonitrilu (15 minut), 80 procent acetonitrilu “(25“τηΐηΰΰ)) 0^J'pro'cenť^-a‘cetOnrtri'i’u“(C5“minut)’)“-'--——

135

• ·< · · · ··· '·· · . Τ·«

Ο-(Fenyl(methoxy-a-fenyl(RS)glycinylfosfát) (1S,4R)-4-[2amino-β-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl784

Uvedená sloučenina byla syntetizována postupem 4, s výtěžkem 46 procent. δ_Ρ 3,18; 3,28; 3,42; 4,29. '

Měřením protonových - a ¹³C NMR spekter byla spektra odpovídající uvedenému racemickému MS ES⁺: m/e 612,2086 (M(Na)⁺, pro C29H32O5N7N standardním získána složitá produktu. aP vypočteno

612,2100).

HPLC: t_R 17,63, 18,50 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (15 minut), 80 procent acetonitrilu * (25 minut), 0 procent acetonitrilu (35 minut)) . (Podíl racemizace podle HPLC byl 1:1,08)

O-[Fenyl (methoxy-oř-butyl-L-glycinyl) fosfát] (1S, 4R)-4-[2- ' amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl786

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 51 procent*, δρ 4,10; 4,16.

δ_Η 0,51 (2H, m, CH_aH_b, CH_a'H_b- cyklopropyl) ; 0,72 (5H,brm, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl, CH₃-CH₂) ; 1,18 (4H, m, CH₃-CH₂-CH₂-) ;

1,54 (3H, m, CH₂-CH₂-O, 6'-H_aH_b); 2,73 (1H, m, 6'-H_aH_b);

2,93 (1H, m, 4'-H); 3,09 (1H, m, CH cyklopropyl); 3,52 (1H, m, CH glycinyl); 3,62 (3H, s, MeO); 3,87.(1H, m, NH glycinyl);

4,12	(2H,	m, 5'-H); '4,75 (2H, brs, NH2) ; 5,45 .(1H,	m, ' l'-H);
5,79	(2H,	brs, NH-cyklopropyl·, 3'-H); 6,00 (1H, m,	2'-H);'
7,20	(5H,	m, Ph-H); 7,42 (1H, brd, 8H).

δc 7,76 (CH₂-cyklopropyl x 2);' 14,23 (CH₃CH₂) ; 22,56 (CH₃CH₂) ; __

24,14 (CH-cyklopropyl); 27,43; 27,50 (CH₃CH₂CH₂); 34,50;

136

-♦-·• 9 · • · · · ·

34,58 (CH3CH2O); 35,01 (β'-C); 46,02; 46,12 (4'-C); 52,66; 52,68 (CH₃O) ; 54,87; 54,94 (l'-C); 59,20 (CH-ala); 69,30;

69,37 (5'-C); 115,18 (5-C); 120,29; 120,42; 120,50;

120,57 (o-Ph); 125,21 (p-Ph); 130,00 (m-Ph); 131,51

131,54 (3'-C); 135,86 (8-C); 136,71; 136,76 (2'-C); 151,12; 151,16; 151,20; 151,25 (6-C, i-Ph); 156,73 (4-C); 160,49; 160,96 (2-C); 174,19; 174,26 (C(0) glycinyl).

MS ES⁺: m/e 592,2428 (M(Na)⁺, pro C₂7H₃₆O₅N₇NaP vypočteno 592,2413).

HPLC: t_R 18,34, 18,41 minuty a 16,64 minuty (6:1) (0 procent acetonitrilu (0 minut), 80 procent acetonitrilu (35 minut), procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent acetonitrilu (55 minut)).

*Poznámka: Sloučenina byla izolována ve formě směsi stereoizomerů (S:R = 6:1) na uhlíku a-aminokyselinového zbytku. Byly zaznamenány další signály ve spektru ³¹P NMR, jejichž hodnota chemického posunu byla 4,35 a 5,18, přičemž tyto signály odpovídaly minoritní konfiguraci (R) aminokyselinového zbytku obsahujícího diastereoizomery.

O-[Fenyl(methoxy-a-propyl-L-glycinyl)fosfát] (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl785

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 50 procent. δ_Ρ 4,14; 4,21.

δ_Η 0,62 (2H, m, CH_aH_b, CH_a'H_b- cyklopropyl); 0,86 (5H, brm,

CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl, CH₃-CH₂) ; 1,32 (2H, m, CH₃-CH₂-) ;

l, 63 (3H, m, CH₃-CH₂, 6'-H_aH_b); 2,79 (1H, m, 6'-H_aH_b); 3,03 (1H, m, 4'-H); 3,18 (1H, m, CH cyklopropyl); 3,71 (3H, d, J=3,0, MeO) ; 3,97 (1H, m, CH glycinyl); 4,15 (3H, m, 5'-H, NH

137 glycinyl); 5,09 (2H, brs, NH₂);'5,55 (ÍH, m, l'-H); 5,90 (ÍH, m, 3'-H); 6,08 (2H, m, 2'-H, NH-cyklopropyl; 7,23 (5H, m, PhH); 7,52 (ÍH, brd, 8H).

5_C 7,55 (CH₂-cyklopropyl x 2); 13,98 (CH₃CH₂) ; 18,62;

18,70 (CH₃CH₂) ; 24,15 (CH-cyklopropyl); 35,00 (6'-C); 36, 89; · 36, 96 (CH₂CH₂O); 46, 02; 46,12 (4'-C); 52,68 (CH₃O); 54,70;

54,77 (l'-C); 59,21 (CH-ala); 69,31; 69,38 (5'-C);

115.24 (5-C); 120,45; 120,51; 120,57 (o-Ph); 125,22 (p-Ph); 130,01 (m-Ph); 131,54 (3'-C); 135,89' (8-C) ; 136, 72;

136,78 (2'-C); 151,11; 151,16; 151,20; 151,25 (6-C, i-Ph);

156, 72 (4-C) ; 160,45; 160, 95 '(2-C) ; 174,18;

174.25 (C(O) aláninyl).

MS ES⁺: m/e 578,2259 (M(Na)⁺, pro C₂₆H₃₄O₅N7.NaP vypočteno 578,2257) .

HPLC: t_R 17,57 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), .

procent acetonitrilu (35 minut), 80 procent acetonitrilu (45 minut), 0 procent.acetonitrilu (55 minut)).

O-((p—(Methylester kyseliny 22''-dimethoxypropionové)- fenyl)methoxy-L-alaninylfosfát) (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu

Cfl671

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 24 procent. δ_Ρ 3,72; 3,84.

δ_Η 0,56 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,79 (2H,m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 1,30 (3H, m, CH₃ alaninyl) ; 1,63 (ÍH, m, 6'-H_aH_b); 2,70 (ÍH, m, 6'-H_aH_b); 2,95 (ÍH, brs, 4'-H); 3,07 (3H, m, CH cyklopropyl, Ph-CH₂-) ; 3,26 (6H, s, (MeO)₂); 3,52 (3H, s, C (OMe) ₂C00Me) ; 3,61 (3H, s, COOMe alaninyl); 3, 84-4,08 (4H, m, CH alaninyl, NH alaninyl, 5'-H,); 4,99 (2H, brs, NH₂) ;

*138

• ·

5,46 (1H, brm, 1^Z-H); 5,81 (1H, brs, 3'-H); 6,02 (2H, m, 3'-H, NH-cyklopropyl); 6/02 (1H, m, 2'-H); 7,02 (4H, m,.Ph-H);

7,45 (1H, brd, 8H). · ·

5_C 7,77 (CH₂-cyklopropyl x 2); 21,37 (Me alaninyl);

24,01 (CH-cyklopropyl); 34,89 (6'-C); 39,55 (Ph-CH₂); 45,97; 46,09 (4'-C); 50,53 ((MeO)₂, CH₃OO alaninyl);

52,65 (C(OMe)₂C00Me); 59,28 (l'-C); 69,29 (5'-C);

103,27 (C(OMe)₂; 120,31; 120,38 (o-Ph); 122,94 (p-Ph);

131,35 (m-Ph); 131,39 (3'-C); 136,79 (8-C, 2'-C); 150,14; . 150,05 (i-Ph, 6-C); 152,12 (4-C); 160,24 (2-C);

169,08 (C(OMe)₂COOMe); 174,36; 174,46 (C(O) alaninyl).

MS ES⁺: m/e 696, 2531 (M⁺, pro C₃oH4o09N₇NaP vypočteno 696,2523). HPLC: t_R 29,02 minuty (0 procent acetonitrilu (0,minut), procent acetonitrilu (3,5 minut), 80 procent acetonitrilu (.45 minut) , 0 procent acetonitrilu (55 minut) ) .

O-((p-Methoxyfenyl)methoxy-L-alaninylfosfát) (lS,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl815

- Uvedená.sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 23 procent. δ_Ρ 4,23; 4,.28. ‘ δ_Η 0,72 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl) ; 1,0 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 1,48 (3H, m, CH₃ alaninyl); 1,82 (1H, m, 6'-H_aH_b); 2,80 (1H, m, 6'-H_aH_b); 3,11 (1H, brs, 4'-H); 3,25 (1H, m, CH cyklopropyl); 3,67 (1H, m, NH alaninyl); 3,77 (3H, s, COOMe alaninyl); 3,89 (3H, s, MeO-Ar); 4,14 (1H, m, CH alaninyl); 4,30 (2H, m, 5'-H, ); 4,94 (2H, brs, NH₂) ; 5,65 (1H, brm, l'-H); 5,83 (1H, brs, NH-cyklopropyl); 6,00 (1H, m,

3'-H); 6,17 (1H, m, 2'-H); 6,92 (2H, m, m-Ar); 7,23 (2H, m, o-Ar); 7,63 (1H, s, 8H).

>« ♦

139

5_C 7,81 (CH₂-cyklopropyl χ 2); 21,46; 21,52 (Me alaninyl); 24,00 (CH-cyklopropyl); 34,96 (6'-C); 46,04; 46,14 (4'-C); 50, 64 (CH₃OO alaninyl); 52,89 (CH-alaninyl); 56, 02 (CH₃O-Ar) ; 59,28 (l'-C); 69,30 (5'-C); 114,98 (m-Ph, 5-C); 121,42; 121,46; 121,52 (o-Ph); 131,52; 131,56 (3'-C); 135,98 (2'-C); 136,76; 136,87 (i-Ph); 144,61 (8-C); 156,71 (4-C);

157.,01 (p-Ar); 161,40; 160, 99 (2-C); 174,39; 174,50 (C(O) alaninyl).

HPLC: t_R 16,28 minuty (0 procent acetonitrílu (0 minut), procent acetonitrílu (15 minut), 80 procent acetonitrílu (25 minut), 0 procent acetonitrílu (35 minut)).

0-((p-Propoxyfenyl)methoxy-L-alaninylfosfát) (lS,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl816 .

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4, s výtěžkem 56 procent, δρ 4,33; 4,41.

δ_Η 0,62 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 0,82 (2H, m, CH_aH_b, CH_a-H_b- cyklopropyl); 1,03 (3H, t, J=6,0, CH₃-CH₂) ; 1,39 (3H, m, CH₃ alaninyl); 1,66 (1H, m, 6'-H_aH_b); 1,80 (2H, h, J=6,0,

CH₃-CH₂) ; 2,79 (ÍH, m, 6'-H_aH_b); 3,01 (1H, brs, 4'-H); 3,12 (1H, m, CH cyklopropyl); 3,72 (3H, s, COOMe alaninyl); 3,89 (2H, t, J=6,0, CH₂-O); 4,04 (2H, m, CH alaninyl, NH alaninyl);

4,17 (2H, ’m, 5'-H); 5,10 (2H, brs, NH₂) ; 5,.52 (ÍH, brm, l'-H); 5,51 (lH, brs, NH-cyklopropyl); 5,89 ’(1H, m, 3'-H); 6,04 (1H, m, 2'-H); 6,81 (2H, m, m-Ar); 7,11 (2H, m, o-Ar); 7,51 (ÍH, s, 8H) .

ó_c 7,77 (CH₂-cyklopropyl x 2); 10,91 (CH₃-CH₂) ; 21,39; 21,46 (Me alaninyl); 22, 97 (CH₃-CH₂) ; 24,14 (CH-cyklopropyl);

7T,~96 7 6 ' -c) ; 4 6, 02; 4 6,13 (4 '-C)’ ; 5 0,5 7; 5 0,6 5 (CH₃OO —

9 alaninyl); 52,85; 52,87 (CH-alaninyl); 53,89 (); 59,25 (l'-C); 69,16; 69,24; 69,33 (5'-C); 70,30 (CH₂-O); 115,24;

115,26 (5-C); 115,57 (m-Ph)'; 121,37; 121,40; 121,43;

121,46 (o-Ph); 131,51; 131,57 (3'-C); 135, 93 (2'-C);

136,77; 136,85 (i-Ph); 144,47; 144,55 (8-C); 156,54;

156,73 (4-C); 160,45 (p-Ar); 160,91 (2-C); 174,48;

174,59 (C(O) alaninyl).

HPLC: t_R minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), 80 procent acetonitrilu (15 minut), 80 procent acetonitrilu (25 minut), procent acetonitrilu (35 minut)).

O-[4-Hydroxyacetofenon-(methoxy-L-alaninyl)-fosforamidát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl794

Uvedená sloučenina byla syntetizována standardním postupem 4. Surový produkt byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí nejprve směsí methanol/chloroform (3:97), poté směsí methanol/ethylacetát (5:95), čímž bylo získáno 30 miligramů (17 milimolů; 15 procent) produktu ve formě bílé pěny.

δρ'3, 496.

δ_Η 0,66 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,85 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 1,33 (m, 3H, CH₃-CH); 1,7 (m, 1H, H'6); 2,53 (s, 3H, CH₃-COPhj ; 2,8 (m, 1H, 6'H); 2,9 (m, 1H, CH-cPr); 3,1 (m, 1H, H'4);3,6 (s, 3H,

CH₃-O); 3,9 (m, 1H, CH₃-CH); 4,1 (m, 2H, H'5); 4,9 (m, 2H, . NH₂) ; 5,5 (m, 1H, H'l); 5,85 (m, 1H, H'3); 6,1 (m, 2H, H'2, . NHcPr); 7,2 (dd, 2H,o-Ar); 7,5 (m, 1H, H8); 7,8 (dd, 2H, p-Ar).

5_C 6,371 (CH₂cPr) ; 20 (CH-CH₃ aa) ; 21,671 (NHCH₃) ; 25 (CH₃CO) ;

33, 458 (C'6); 44,55 (C'4); 49,5 (CHaa) ; 51,4 (OCH₃); 5779“(θ·'Τ)Τ~6ΤΓ9~7θ^5) ; 113,787 (C5) ; ' 12θ'.....(o-Ar); ~ ’· ·'

141 • · ·'. ' · 4' ······· 4 •« · 4 · 4 ' 4 · « · · 4

122,22 (p-Ar); 128,743 ’ (m-Ar);'130 (C'3); 134,53 (C'2);

135,31 (C8); 150,31 (i-Ar); 155,18 (C6); 156,342 (C2);

158,8 (C4); 173,004 (COOCH₃) ; 198 (CO-Ar).

HPLC: t_R 15,976 minuty, (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (15 minut), 80 procent acetonitrilu (25 minut), 0 procent acetonitrilu (35 minut)).

O-[4-n-Butylfenyl-(methoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl795

Surový produkt byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí nejprve směsí methanol/chloroform (3:97), poté směsí methanol/dichlormethan (5:95), čímž bylo získáno 15 miligramů (0,025 milimolu; 4 procenta) produktu ve formě bílé pěny.

δ_Ρ 3,93-4,00.

δκ 0,66	(m,	2H, CH2-cPr); 0,85 (m, 2H, CH2-cPr) ; 1,1	(m,	3H,
CH3-CH2) ;	' 1,	2 (m, 4H, CH2-CH2); 1,33	(m, 3H, CH3-CH);	1,7	(m,
1H, H'6)	; 2	,5 (m, 2H, CH2-Ar); 2,8	(m, 1H, H'6); 2,9	(m,	1H,
CH-cPr);	3,	1 (m, 1H, H'4); 3,6 (s,	3H, CH3-O); 3,9 (m, 1H,
CH3-CH);	4,:	L (m, 2H, H'5) ; 4,9 (m,	2H, NH2) ; 5,5 (m,	1H,	Η' 1) ;
5,85 (m,	1H	, H'3); 6,1 (m, 2H, H'2,	NHcPr); 7,2 (dd,	2H,	o-Ar).;
7,5 (m,	1H,	H8); 7,8 (dd, 2H, p-Ar)
δ0 6,371	(CH2cPr) ; 14,345 (CH3-CH3) ;	21,49 (CH-CH3aa) ;

22, 66 (CH₂-CH₃); 21,671 (NHCH₃) ; 30,127 (CH₂-CH₂-CH₂) ;

33,458 (C'6); 34,047 (CH₂-Ar); 44,55 (C'4); 49,5 (CHaa);

51,4 (OCH₃); 57,9 (C'l); 67,9 (C'5); 113, 787 (C5) ; 120 (o-Ar);

122,22 (p-Ar); 128,743 (m-Ar); 130 (C'3); 134,53 (C'2);

135,31 (C8); 146, 58 (1-Ar) ; 155,18 (C6) ; 156, 342 (C2);

158,8 (C4); 173,004 (COOCH₃) .

142

9 <« «

9 9> 9 9 9 9 999

9 '· · ~'9 9 9 9 ' 9 ' 9

9 * ·9 · 9999 9 · 9

9999

HPLC: t_R 19,591 minuty. (O procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (15 minut), 80 procent acetonitrilu (25 minut), 0 procent acetonitrilu (35 minut)).

O-[Fenylfenyl-(methoxy-L-alaninyl)]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl788

Surový produkt byl třikrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí nejprve směsí methanol/chloroform (3:97), poté směsí methanol/dichlormethan (5:95) a nakonec směsí methanol/ethylacetát (3:97), čímž bylo získáno 35 miligramů (0,058 milimolu; 8 procent) produktu ve formě žluté ‘pěny.

δρ 3,94-3,96.

δ_Η 0,66 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,85 (m, 2H, CH₂-cPr) ; 1,33 (m, 3H,

CH3-CH); 1,7 (m,	1H, H'6); 2,8 i	[m, 1H, H'6) ; 2,9	(m, 1H, . .
CH-cPr); 3,25 (m,	1H, H'4); 3,6	(s, 3H, CH3-O); 4	,1 (m, 1H,
CH3-CH); 4,25 (m,	2H, H'5); 4,9	(m, 2H, NH2) ; 5,5	(m, 1H, H'l);
5,85 (m, 1H, H'3)	; 6,15 (m, 2H,	H'2, NHcPr) ; 7,35	(m, 9H, Ar) ;
7,6 (m, 1H, H8) .

5_C 6,371 (CH₂cPr) ; 21,49 (CH-CH₃aa) ; 21,671 (NHCH₃) ;

33,458 (C'6); 46,14 (C'4); 50,671' (CHaa); 52,9 (OCH₃) ;

59,9 (C'l); 65,9 (C'5); 115,787 (C5); 120 (o-Ar);'

122,22 (p-Ar); 128,743 (m-Ar); 130 (C'3); 134,53 (C'2);

135,31 (C8); 145,25 (i-Ar); 155,18 (C6); 156,342 (C2);

158,8 (C4); 173,004 (COOCH₃).·

HPLC: t_R 19,147 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (15 minut), 80 procent acetonitrilu (25 minut), 0 procent acetonitrilu (35 minut)).

143 « 9 9 9 • · 9 9

9 9 · · ····*· *

9 9 9 9

O- [Fenoxyfenyl- (methoxy-L-alaninyl) ].-fosfát (1S, 4R) -4- [2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl787

Surový produkt byl dvakrát přečištěn sloupcovou chromatografií s elucí nejprve směsí methanol/chloroform (3:97), poté směsí methanol/dichlormethan (5:95), čímž bylo získáno 35 miligramů (0,058 milimolu; 8 procent). δ_Ρ 4,212-4,184 .

δ_Η 0,66 (m, 2H, CH₂-cPr); 0,85 (m, 2H, CH₂-cPr); 1,33 (m, 3H, CH₃-CH); 1,7 (m, 1H, H'6).; 2,8 (m, 1H, H'6); 2,9 (m, 1H, CH-cPr)·; 3,25 (m, 1H, H'4); 3,6 (s, 3H, CH₃-O) ; 4,1 (m, 1H, CH3-CH) ; 4,25 (m, 2H, H'5); 4,9 (m, 2H, NH₂) ; 5,5 (m, 1H, H'l); 5,85 (m, 1H, H'3); 6,15 (m, 2H, H'2, NHcPr); 7,35 (m,9H, Ar) ; 7,6 (m, 1H, H8).

5_C 6,371 (CH₂cPr); 21,49 (CH-CH₃aa) ; 21,671 (NHCH₃) ;

33,458 (C'6); 46,14 (C'4); 50,671 (CHaa) ; 52,9 (OCH₃) ;

59,9 (C'l); 65,9 (C'5); 115,787 (C5); 120 (o-Ar);

122,22 (p-Ar₂) ; 128,743 (m-Ar); 130 (C'3); 134,53 (C'2);

135,31 (C8); 153, 83 (i-Ar₂, m-ArJ ; 155,18 (C6) ; 156, 342 (C2) ;

158,8 (C4); 173,004 (COOCH₃) .

HPLC: t_R 18,830 minuty (0 procent acetonitrilu (0 minut), procent acetonitrilu (15 minut), 80 procent acetonitrilu (25 minut), 0 procent acetonitrilu (35 minut)).

0- [ Fenylmethoxy-oí, α-cyklopentylglycinyl] - fosfát (lS,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl763

Uvedená sloučenina byla připravena standardním postupem 4 ve výtěžku 77 procent.

³¹P (CDC1₃) 3,02, 3, 09.

• to · · to « to to · · · ·' · · ,· to . * to · ^XH (CDC1₃) 0,56-0,61 (2H, m, CH₂(cpro)); 0,81-0,89 (2H, m, CH₂(cpro)); 1, 58-1,78 (5H, m, CCH₂CH₂CH₂CH₂C a H'6); 1,872,18 (4H, m, CCH₂CH₂CH₂CH₂C) ; 2,64-2,74 (1H, m, H'6); 2,833,09 (2H, m, CH(cpro), H'4); 3,60-3,62 (3H, s, OCH₃(ala)); 4,04-4,19 (2H, m, H'5); 5,20 (2H, bs, NH₂) ; 5,42-5, 47 (1H, m, H'l)’; 5,77-5,83 (1H, m, H' 3) ; . 5, 98-6, 02 (1H, m, H'2);

6,20 (NH(cpro)); 7,06-7,27 (5H, m, Ar); 7,42-7,48 (1H, s, H8). ¹³C (CDCI3) 8,02 (CH₂(cpro)); 24,37; 24,41 (CCH₂CH₂CH₂CH₂C) ;

34,73 (C'6); 38,48; 38,68; 38,79; 38,87 (CCH₂CH₂CH₂CH₂C) ; 46, 05;

46.15 (C'4); 52,99 (OCH₃(ala)); 59,56; 59,60 (C'l);

67.16 (C(aa)j;'69,28; 69,37 (C'5); 114,76 (C5); 120,46;

120,52 (o-Ph); 125,22 (p-Ph); 130,0.4 (m-Ph)'; 131,19 (C'3); 136,72 (C8); 137,13; 137,20 (C'2); 151,27; 151,31; 151,36; 151,40 (C6); 155,56 (C4);'158,95 (C2); 175,96; 176,00 (CO).

O- [Fenylmethoxy-α, cť-cyklohexylglycinyl] -fosfát (1S, 4R) -4- [2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl764

Uvedená sloučenina byla připravena standardním postupem 4 ve výtěžku 15 procent.

³¹P (CDCI3) 2,89, 3,00.

^XH (CDCI3) 0,74’(2H, m, CH₂(cpro)); 1,01-1,03 (2H, m,

CH₂(cpro)); 1,29-2,23 (11H, m, CCH₂CH₂CH₂CH₂CH₂C . a H'6); 2,722,83 (1H, m, H'6); 3,17 (1H, bs, CH(cpro)); 3,35-3,43 (1H, m, H'4); 3, 69-3, 70 (3H, s, OCH₃(aa)); 4,16-4,29 (2H, m, H'5); 5,52-5,66 (1H, m, H'l); 5,79 (1H, bs, NH(cpro)); 5,855,90 (1H, m, H'3); 6,08-6,10 (1H, m, H'2); 7,15-7,35 (5H, m, Ar); 7,37-7,63 (1H, m, H8).

¹³C (CDCI3) 8,30 (CH₂(cpro)); 21,49; 21,68; 21,84; 22, 02;

22,11 (CCH₂CH₂CH₂CH₂CH₂C) ; 25,14; 25,47;

25,72 (CCH₂CH₂CH₂CH₂CH₂C) ; 34,37; 34,59 (C'6); 46,06;

145 • * · · 0 · · • «I · ♦ · · · · · • · · 0 · · · • » · · ·····'♦'· · • · 0 0 · · · ···· ·0 · ·· ·

46,16 (C'4); 52,75 ; 53,12 (OCH₃(aa)); 59,95; 60,19 (C'l);

69,22 (C'5); 120,41; 120,47 (o-Ph); 125,22 (p-Ph);

130,04 (m-Ph); 130,72; 130,82 (C'3); 137,41 <C8);

137,56 (C'2); 151,33; 151,43 (C6); 175,37 (CO).

O- [ Fenylmethoxy-oí, α-cyklopropylglycinyl ] -fosfát (lS,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu Cfl762

Uvedená sloučenina byla připravena standardním postupem 4 ve výtěžku 69 procent.

³¹P (CDC1₃) 3,84.

^XH (CDC1₃) 0,68 (2H, m, CH₂(cpro)); 0,90-0,92 (2H, m,

CH₂(cpro)); 1,16-1,49 (4H, m, CCH₂CH₂C(aa)); 1,66-1,72 (1H, m, H'6); 2,72-2,82 (1H, m, H'6).; 3,08-3,15 (2.4, m, CH(cpro),

H'4); 3,61-3,63 (3H, d, OCH₃(aa).); 4,24-4,26 (2H,. m, H'5);

5,24 (2H, bs, NH₂) ; 5,53 (1H, bs, H'l); 5,87 (1H, m, H'3);· 6,07 (1H, m, H'2); 6,42-6,45 (1H, bs, NH(cpro)); 7,157,35 (5H, m, Ar); 7,56-7,61 (1H, m, H8).

¹³C (CDC1₃) 7,92 (CH₂(cpro)); 18,38 (CH₂(aa)); 35,20 (C6');. 52,88 (OCH₃(aa)); 59,45 (C'l); 69,32 (C'5); 120,52 (o-Ph); . 125,29 (p-Ph); 130,04 (m-Ph); 137,03 (C'2); 151,13 (C6); 160,96; 160,98 (C2); 174,35 (CO).

O-[p—(Methoxykarbonyl)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát · (1S, 4R)-4-[2-amíno-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl766

Uvedená sloučenina byla připravena standardním postupem 4 ve výtěžku 37 procent.

³¹P (CDC1₃) 3,54; 3,58.

^XH (CDCI3) 0,66-0, 69 (2H, m, CH₂(cpro)); 0,88-0,94 (2H, m, ϋΗΤΓόρτοΠΤΊΓΤΤδ^ιΤ^ '37 3h7X“ch7( alayjTT.?7 0-17 81~( ih 717

146 ·· 44

9·· 4, · • · · · · • 4 '4 · · 4 4 4 4 4 *^; 4 9

4 4 4 4 4 9 4

4 494 94 4 94 444

H'6); 2,76-2,89 (1Η, m, H'6); 3,07 (1H, m, CH(cpro));

3,21 (1H, m, H'4); 3,71-3,73 (3H, d, OCH₃(ala)); 3,94 (3H, s, COOCH₃) ; 3,98-4,12 (1H, m, CH(ala)); 4,20-4,31 (2H, m, H'5);

5,19 (2H, bs, NH₂) ; 5,54-5,57 (1H, m, H'l); 5,91-5,96 (1H, m, H'3); 6,09-6,14 (1H, m, H'2); 6,21 (1H, bs, NH(cpro)); 7,277.32 (2H, m, ArO, 2H); 7,53-7,54 (1H, m, H8); 8,02-8,06 (2H, m, COAr, 2H).

¹³C (CDC1₃) 7,75 (CH₂(cpro)); 21,22; 21,29; 21,46 (CH₃(ala));

24,16 (NHCH); 34,83 (C6'); 45,97; 46,07 (C4^Z);

50,59 (CH(ala)); 52,57; 59,32 (OCH₃(ala), OCH₃(Ph)); 59,27;

59.32 (Cl'); 69,43 (C5'); 115,07; 115,11 (C5); 120,28; 120,31; 120,34; 120,38 (o-Ph); 127,07 (p-Ph); 131,58; 131,66 (m-Ph); 131,88 (C3'); 135,94; 136,04 (C2'); 136,61; 136,73 (C8);

151,31 (C6); 156,52 (C2); 160,97 (C4); 171,57 (CO); 174,30; 174,39 (CO).

O-[p—(Trifluormethylthio)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R) -4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl769

Uvedená sloučenina byla připravena standardním postupem 4 ve výtěžku 34 procent.

³¹P (CDCI3) 3,67; 3,88.

¹H (CDCI3) 0,81 (2H, bs, CH₂(cpro)); 1,06-1, 08 (2H, m,

CH₂(cpro)); 1,50-1,54 (3H, t, CH₃(ala)); 1,83-1,93 (1H, m,

H6'); 2,87-2,99 (1H, m, H6'); 3,23-3,31 (1H, m, CH(cpro)); 3,82-3,84 (3H, d, OCH₃(ala)); 4,14-4,15 (1H, m, CH(ala)); 4,324,40 (2H, m, H5') ; 5,65 (3H, bs, Hl', NH₂) ; 6,01-6,04 (1H, m, H3'); 6,19-6,23 (1H, m, H2'); 6,64 (1H, bs, NH(cpro)); 7,377,43 (2H, m, Ar); 7,67 (1H, d, H8); 7,73-7,76 (2H, m, Ar).

¹³C (CDCI3) 8,16 (CH₂(cpro)); 21,39; 21,45 (CH₃(ala)); 3471^(7677^ 6709”(C4'')7“ 5‘076'6”ÍCH''{áía)')7~ 5'3?0'l“( OCH 7(aíaT)T

147

•	·· • ·	•	• · •	• •	•	·· •	• • ·
•	- ·	•	-·	• ·	- ·	•	•
•	•	• «1	•	• · · ·	• ·	•	•
	• · · ·		• ·	•		• ·	·· ·

59,87 (Cl'); 69,34 (C5'); 77,47; 77,67 (CF₃S?); 121,64;

121.69 (o-Ph); 127,07 (p-Ph); 136,99; 137,14 (C2^Z);

138,56 (C8); 153,36; 153,45 (C6) ; 160, 93 (C4); 174,27 (CO).

O-[p—(2-Methoxyvinyl)fenylmethoxy-L-alaninyl] -fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl767

Uvedená sloučenina byla připravena standardním postupem 4 ve výtěžku 38 procent.

³¹P (CDCls) 3,70; 3,74.

³H (CDC1₃) 0,58-0,61 (2H, bs, CH₂(cpro)); 0,81-0,85 (2H, m, CH₂(cpro)); 1/30-1,36 (3H, t, CH₃(ala)); 1,61-1,72 (ÍH, m,

H6^Z); 2,33 (3H, s, CH3CO); 2,70-2,79 (ÍH, m, H6^Z); 2,99 (ÍH, m, CH(cpro)); 3,13 (ÍH, bs, H4'); 3,64-3,65 (3H, d, OCH3(ala)); 3,92-4,01 (ÍH, m, CH(ala)); 4,11-4,21 (2H, m, H5'); 5,14 (3H, bs, H1^z, NH2) ; 5,47-5,49 (ÍH, m, Hl^z); 5,82-5, 87 (ÍH, m, H3'); 6,01-6,06 (ÍH, m, H2'); 6,12.(1H, bs, NH(cpro)); 6,576,63 (ÍH, dd, CH3COCH=CH) ; 7,.14-7,46 (6H, m, H8, Ar, CH₃COCH=) . ¹³C (CDCI3) 7,95 (CH₂(cpro) ); 21,45 (CH₃(ala)); 28,02 (CH₃CO) ;

34.69 (C6^Z); 46,11 (C4^z ) ; 50, 64 (CH(ala)j; 52/99 (OCH₃(ala)); 59,53 (Cl') ; 121,03; 121, Ίθ;. 121,17 (o-Ph); 127,39 (p-Ph) ; 130,13 (CH₃COCH=CH); 131,44; 131,55 (C3'); 136,76 (C2^Z);

142,59 (CH₃COCH=CH) ; 152,72 (C6).; 174,26; 174,36 (CO(ala)); 198,70 (C0CH3) .

O-[p—(2-Fenylkarbonylvinyl)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl771

Uvedená sloučenina byla připravena standardním postupem 4 ve výtěžku 26 procent.

³¹'F7cdciT)“377ΈΤ37797· “ ' ^; ·· • · · · • · · • · » • · · ·· ····

148 • · · • · ·’ · • · ···· • · · • · · ·· · ^XH (CDC1₃) 0,61-0,66 (2H, m, CH₂(cpro)); 0,85-0,91 (2H, m, CH₂(cpro)); 1,39-1,44 (3H, m, CH₃(ala)); 1,67-1,86 (1H, m, H6'); 2,77-2,87 (1H, m, H6'); 3,04-3,05 (1H, bs, CH(cpro)); 3,19-3,21 (1H, bs, H4'); 3,72-3,73 (3H, d, OCH₃(ala)); 4,024,13 (1H, m, CH(ala)); 4,19-4,29 (2H, m, H5'); 5,17 (3H, bs, Hl', NH₂) ; 5,53-5,58 (1H, m, Hl'); 5, 90-5, 95 (1H, m, H3') ; 6,09-6,15 (2H, m, H2 ', NH(cpro)); 7,24-8,08 (12H, m, Ar, CH=CH-, Ar-, H8).

¹³C (CDC1₃) 7,85 (CH₂(cpro)); 21,35; 21,41; 21,48 (CH₃ (ala) ) ;

24,22 (CH(NH)); 34,80 (C6'); 46,01 (C4'); 50,67 (CH(ala)); 52,97 (OCH₃(ala)); 59,37 (Cl'); 69, 40 (C5'),· 115,07 (C5) ; 121,01; 121,07; 121,14 (o-Ph); 128,92; 129,06 (p-Ph);

133,27 (C3'); 136,13; 136,23 (C2'); 138,53 (C8); 152,77; 152,86 (C6); 156,31 (C2); 160,97; 160,99 (C4); 174,31;

174,41 (CO(ala)); 190,76 (CO(Ar)).

O-[p-(2,2-Dikyanovinyl)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl768

Uvedená sloučenina byla připravena standardním postupem 4 ve výtěžku 10 procent.

³¹P (CDC1₃) 4,54; 4,65.

^XH (CDC1₃) 0,61-0,66 (2H, m, CH₂(cpro)); 0,85-0,91 (2H, m, CH₂(cpro)); 1,34-1,41 (3H, m, CH₃(ala)); 1,67-1,83 (1H, m,

H6'); 2,77-2,88 (1H, m, H6'); 2,95-2,97 (1H, m, CH(cpro));

3,23 (lH,.bs, H4'); 3, 68-3,70 (3H, d, OCH₃(ala)); 3,994,03 (1H, m, CH(ala)); 4,22-4,32 (2H, m, H5'); 5,49-5,53 (1H, m, Hl'); 5,99-6,03 (1H, m, H3 '); 6,16-6,22 (1H, m, H2'); 6,946,97 (1H, dd, Ar-CH=CH); 7,36-7,41 (Ar); 7,64-7,65 (1H, d,

H8); 7,92-8,16 (Ar).

·· · ¹³C (CDC1₃) 6,56 (CH₂ (cpro)); 19,85 (CH₃(ala));

23,33 (CH(cpro)); 34,23 (C6^Z); 46,07 (C4'); 50,47;

50,53 (OCH₃(ala)); 51,78 (CH(ala)); 59,51 (ď); 69,19;

69,29 (C5^Z); 113,84; 114,08 (C5); 121,14; 121,21;

121,27 (o-Ph); 128,49 (p-Ph); 130,74; 130,85 (m-Ph);

132,84 (C3^Z); 136,01 (C2^Z); 136,88; 136,99 (C8); 156,47 (C2); 160,99; 161,03 (C4); 174,27 (CO).

O-[o-(Karboxylátethylester)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu Cfl798

Uvedená sloučenina byla připravená standardním postupem 4 ve výtěžku 24 procent.

³¹P (CDC1₃) 4,03; 4,16.

^XH (CDC13) 0, 64-0,70 (2H, m, CH2(cpro)); 0,92-0, 93 (2H, d, CH2(cpro)); 1,38-1, 47 (6H, m, CH3(ala), CH3CH2O); 1,73-1,83 -(.ÍH, m, H6^Z); 2,78-3,24 (3H, m, H6', H4', CH(cyklo)); 3,643,72 (3H, d, OCH3(ala)); 4,08-4,20 (1H, m, CH(ala)); 4,234,45 (4H, m, H5', CH₂CH₃) ; 5,21 (2H, bs, NH₂) ; 5, 55-5, 60' (1H, m, Hl'); 5,89-5,93 (1H, m, H3'); 6,13-6,18 (1H, m, H2'); 7,237,61 (1H, m, H8); 7,88-7,92 (1H, d, Ar).

¹³C (CDC1₃) 7,95 (CH₂(cpro) ); 14,65 (CH₃CH₂) ; 21,33; 21,39;

21,68; 21,74 (CH₃(ala)); 24,30 (NHCH); 34,80 (C6'); 46,04;

46,14 (C4^Z); 50,4.9 (CH(ala)); 52,74; 52,83 (OCH₃(alaj);

59, 45 (Cl'); 61,76; 61,82 (CH₂CH₃) ; 69,43; 69,51; 69, 64 (C5'); 114,92 (C5); 122,93; 123,09; 123,60; 123,67; 125,26 (Ar);

131,34 (Ar); 131,77; 131,86 (C3'); 134,00 (Ar); 136,48 (C2'); 137,05 (C8); 150,20; 150,28 (C6); 155,88 (C2); 160,78;

160,86 (C4); 174,28; 174,39; 174,55; 174,65 (CO).

150 ·· ·· ·· · ·· • · · · ··· · · • · ”” '· · · · a · r Příklad A (IR, 4S)-9-[4-(Hydroxymethyl)-2-cyklopenten-2-yl]guanin-5'[fenyl-(methoxy-L-alaninyl)]-fosfát C2iH₂5O6N₆P, molární hmotnost 488,45

R. Vince a M. Hua v publikaci J. Med. Chem. 1990, 33, 1721, jejíž obsah je zahrnut v tomto textu jako odkazový materiál, popsali způsob syntézy (IR,4S)-9-[4-(hydroxymethyl)2-cyklopenten-l-yl] guaninu.

400 miligramů (1,618 milimolu) (IR,4S)-9-[4-(hydroxymethyl)-2cyklópenten-l-yl]guaninu bylo usušeno kodestilováním s 4 x 10 mililitry bezvodého pyridinu, udržováno v dusíkové atmosféře a suspendováno ve 30 mililitrech bezvodého . tetrahydrofuranu (THF). Ke směsi bylo přikapáno 1,6 mililitru 1 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (THF) (1,618 milimolu) a vzniklá tmavší suspenze byla 10 minut intenzívně míchána. Poté bylo ke směsi přikapáno 4,79 mililitru (2,43 milimolu) fosforchloridátu a reakční směs byla 69 hodin míchána při teplotě místnosti. Po uplynutí této doby byla uvedená suspendovaná pevná látka částečně rozpuštěna, avšak na stěnách reakční nádoby bylo stále možné pozorovat usazené pevné podíly. K reakční směsi bylo přidáno dalších·4,79 mililitru (2,43 milimolu) fosforchloridátu a reakční směs byla míchána dalších 55 hodin a následně rozložena přidáním 0,25 mililitru nasyceného roztoku chloridu amonného. Směs byla míchána dalších 10 minut a.bylo z ní při sníženém tlaku odstraněno rozpouštědlo, čímž byl získán surový produkt ve formě žluté gumy, která byla rozpuštěna v methanolu. Vzniklý methanolický roztok byl vysušen nacl~bežv^rbdým~s í r a nem“ h oře č na t ým?“p ř e f i-11 r o v á n—a-—— ·· ·· · ··' r151 filtrát byl zahuštěn do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v methanolu, byl k němu přidán silikagel a následně bylo odstraněno rozpouštědlo, takže byl získán produkt předem naabsorbovaný na silikagelu, který byl nanesen kolonu naplněnou silikagelem a eluován směsí 8 procent methanolu v chloroformu. Získaný produkt byl dále přečištěn grandientovou elucí směsí 5 až 9 procent methanolu v dichlormethanu (DCM) na koloně pro mžikovou chromatografií „biotage flash-40 a po odpaření příslušných frakcí bylo získáno 70 miligramů (8,6 procenta) požadovaného produktu ve formě bílé pěny.

Strukturu takto připravené sloučeniny je možné znázornit chemickým vzorcem

/

Me—O ³¹P (MeOH-d₄): δ 5,18; 4,86 (1:1).

NMR: δ 7,67 (1H), 7,37-7,30 (2H); 7,21-7,14 (3H); 6,176,10 (1H); 5,97-5, 94’ (1H) ; 5,53-5, 48 (1H) ; 4,28-4,15 (2H) ; 4,00-3,87 (1H); 3,66 (3H); 3,18 (1H); 2,83-2,71 (1H); 1,821,66 (1H); 1,36-1,29 (3H).

¹³C NMR: δ 174,4*; 158,5; 154,1; 151,7; 151,1*; 136,9*; 136,5; 130,7; 129,7; 125,0; 120,4*; 116,8; 68,9*; 59,8; 51,7; 50,5*;

“4'670*7“3'472’;~T973*d—---———-——-—----3

152 ·· ·· «· · ·· • <· « · · ♦ · · · • ♦ · '···· · · • · · · · ·····»· · • · · ·· · · ·

Αϊ /*·

MS ES⁺: m/z 488,86 (100 procent)(M)⁺, 500,04 (12 procent) (M+Na)⁺, 507,96 (25 procent) (M+K)⁺.

MS FAB: vypočteno 489,165146, nalezeno 489,164677.

Testy in vitro

Buňky byly infikovány virem HIV-1, a to způsobem, který byl již dříve popsán v publikaci Balzarini a spolupracovníci, AIDS, 1991, 5, 21-28. Uvedený způsob se stručně popsat takto:

x 10⁵ buněk/mililitr bylo infikováno virem HIV-1 nebo HIV-2 při 100 CCID₅₀ (CCIDso je zkratka označující dávku, která postačuje k infikování 50 procent buněčné kultury)/mililitr buněčné suspenze. 100 míkrolitrů takto infikované buněčné suspenze bylo převedeno do jímek mikrotitrového plata a smícháno se 100 mikrolitry příslušně naředěných testovaných sloučenin. Po 4 dnech bylo u buněčných kultur infikovaných HIV (CEM) mikroskopicky zaznamenáváno vytvoření obrovských buněk. Hodnoty 50 procentní účinné koncentrace (označované zkratkou EC₅₀) a 50 procentní cytotoxické koncentrace (označované zkratkou CC₅₀) byly definovány jakožto koncentrace dané sloučeniny potřebná pro 50 procentní snížení počtu obrovských buněk nebo životaschopných buněk v uvedených kulturách infikovaných, respektive neinfikovaných virem.

Hodnoty ve sloupcích následující tabulky udávají:

HIV1 CEM: EC₅₀ v mikromolech na litr pro inhibici viru HIV-1 v CEM buňkách.

HIV2 CEM: EC₅₀ v mikromolech na litr pro inhibici viru HIV-2 . _ 7 v CEM búňkáchl ' “ ““ ¹ ~ ¹ “—

· • · · · · < * * ·

O · ···· ·· · v* · ··

CC50 CEM: CC₅₀ v mikromolech na litr pro toxicitu vůči CEM buňkám.

V níže uvedené tabulce 1 jsou shrnuty a vzájemně porovnány údaje zjištěné při in vitro testech biologické aktivity sloučeniny Cfl490 a abacaviru, což je nefosforamidátovaný analog sloučeniny Cfl490, a sloučeniny podle srovnávacího příkladu A a jejího nefosforamidátovaného analogu. Abacavir se v současné době používá při léčení pacientů nakažených virem HIV.

Tabulka 1

Sloučenina	EC50/pM	EC50/pM	CC50/pM	Pozorované zlepšení
	HIV-1	HIV-2	CEM	>
CEM	CEM
1490	0,07	0,09	13,1	30,2x
Abacavir	1,9	3	78
Příklad A	1,3	0,85 .	123	1,9x
Nefosforamidátovaný analog sloučeniny z příkladu A	2	2,3	157

Jak je možné odvodit z údajů v tabulce 1, sloučenina Cfl490 podle předmětného vynálezu vykázala in vitro mnohem vyšší účinnost (27 až 33krát) vůči viru HIV, než její známý nefosforamidátovaný analog abacavir. Hodnota pozorovaného zlepšení, uvedená v tabulce 1, je střední hodnota zvýšení účinnosti fosforamidátovaných sloučenin oproti jejich

i

154 nefosforamidátovaným analogům, tj. oproti nukleosidům, které tvoři základ těchto sloučen, vůči virům HIV-1 a HIV-2.

Poněkud neočekávaná povaha tohoto výsledku je patrná z porovnání účinnosti sloučeniny podle srovnávacího příkladu A a jejího nefosforamidátovaného analogu. Struktura nefosforamidátovaného analogu sloučeniny podle srovnávacího příkladu A je na první pohled podobná struktuře abacaviru. Avšak fosforamidát podle příkladu A vykazuje účinnost vůči viru HIV, která je pouze Srovnatelná s účinností jeho nefosforamidátovaného analogu, jehož strukturu je možné znázornit vzorcem:

o

V níže uvedené tabulce 2 je uvedeno srovnáni údajů o in vitro účinnosti sloučeniny 1490 s obdobnými údaji pro známé fosforamidátované sloučeniny, které byly uvedeny v mezinárodní přihlášce číslo PCT/GB96/00580. Ve všech případech byly uvedené údaje zjištěny při in vitro testech, které byly prováděny shora popsaným způsobem.

i

155 ty

Tabulka 2

Sloučenina	EC50/11M	ECso/μΜ	CC5o/pM
	HIV-1	HIV-2’	CEM
CEM	CEM
1490	0,07	0,09	13, 1
951	' 0,1	0,07	55
1078	0,55	0,65	209
1093	0, 016	0,035	2,57

Každá ze sloučenin 951, 1078'a 10.93 je fosforamidátem analogu nukleosidu.

Sloučenina 951 je 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydrothymidin-5'(fenylethoxyalaninyl)fosforamidát.

Sloučenina 1078 je 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydrothymidin-5'(fenyídimethoxyaspartyl)fosforamidát..

Sloučenina 1093 je 2',3'-dideoxy-adenosin-5'(fenylmethoxyalaninyl)fosforamidát.

Jak je patrné z údajů v tabulce 2, sloučenina 1490 podle předmětného vynálezu vykazuje vysoký stupeň účinnosti vůči viru HIV.

Údaje o účinnosti a'toxicitě širšího rozsahu sloučenin jsou uvedeny v tabulce 3, ve které:

156

4 · V . '· 4 <4 • · · 4 · 4 '4

I 4 4 4 4 4

4 4 '4 ·

4 · 4 4 4 4·

Cpd a Init se vztahují k číselnému označení dané sloučeniny;

X se vztahuje k dané aryl(fosfátové) skupině;

Y se vztahuje ke skupině obecného vzorce

I ,

N—

C-R¹R² I ^C'

X-R3

Z se vztahuje k typu vazby v pětičlenném kruhu sacharidu; přičemž = označuje nenasycený penten.a H označuje nasycený pentan;

B je ve všech případech „1592, což se vztahuje k bázi přítomné v abacaviru.

Údaje ve sloupcích jsou uspořádány následovně:

4 4 4 '* * · ·

4 I • · ·

444

HIV1	CEM:	EC5o v v CEM	mikromolech na buňkách.	litr	pro	inhibici	viru’	HIV-1
HIV2	CEM:	EC50 v	mikromolech na	litr	pro	inhibici	viru	HIV-2
		v CEM	buňkách.

HIV2 CEM.TK-: EC₅₀ v mikromolech na litr pro inhibici viru HIV-2 v CEM/TK buňkách.

1¾.

					9 · 9 · 4 9 9 ·	9 9' 9 • .· f		• 9 . '9 9·
		t · , --'V t r 1-	157		• t »	'4 9 9 •9 9 9	«· 999 4	• 9 *' s
					9 9 9	9 _ ·	9	9 ·
					9« ···	9'9·	.<	9 4
CC50	CEM: CC50.	v mikromolech	na litr	pro	toxicitu	vůči
	CEM	buňkám.
EC50	MSV: EC50	v mikromolech	na litr	pro	inhibici	viru	MSV

MCC MSV: minimální cytotoxická koncentrace při testech MSV.

158

9 <»'·: ··' ·? «'·' «

Μ · ·' ·' ♦ ·. . ♦ · «· «9 · 9 · ·9 · «ί 9 9

Í 9 9 * 9 9 9 9 9 9 9 9' · 9

9 · 9 9 9 9 · 9 • C 999'·' · · ·.- 9'·. 9C9

Tabulka 3

CM ci

Cl

Cl

Cl o

10

Cl Cl O O 10 to to

Ni Cl oj O to 10

Cl Cl

O O 10 ϊδζ

Sřís δδ

ΪΪ $s

S5

O « tv « e

J X ?ÍS tú li

Cl

ŽŽŽ

ŽÉŽ

ŽŽ »

e co

10

179

159

Stabilita vůči kyselinám

Sloučeniny byly testovány na jejich stabilitu vůči kyselé hydrolýze, a to pomocí testu, který byl vytvořen tak, aby simuloval podmínky v žaludku. Každá sloučenina byla inkubována po dobu 24 hodin ve zředěné kyselině chlorovodíkové o pH 1 při teplotě 25 °C. 0,3 miligramu každé sloučeniny bylo při teplotě 25 °C přidáno k 1 mililitru 0,1 normální kyseliny chlorovodíkové. Okamžitě po přidání sloučeniny (v čase=0) byla provedena analýza vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) a dále v pravidelných intervalech až do přibližně 24 hodin od přidání dané sloučeniny ke.kyselině.

Zjištěné výsledky pro sloučeninu 1587 a pro srovnávací sloučeniny označené čísly 1001 a 1093, které byly popsány v mezinárodní přihlášce číslo PCT/GB96/00580, jsou shrnuty v následující tabulce 4..

Tabulka 4

Sloučenina	Doba od přidání (hodina)	Zbývající sloučenina (procento)
	0	100
1587	22	77
	0	0
1001	17	0
	0	100
1093	13	0

K rozložení sloučeniny 1001 došlo okamžitě (tj. za dobu kratší než 1 minuta). K rozkladu sloučeniny 1093 došlo po méně

160 ·· ··· 4 4 • · ' e · · ·’ · · · ·' '» ·».·· · , · ·;.· « ·*· ·····'·· .4 než 13 hodinách. Většina sloučeniny 1587 zůstala nedotčena i po 22 hodinách od okamžiku přidání ke kyselině.

Obě sloučeniny 1001 al093 byly fosforamidáty analogů adenosinu. Sloučeninou 1001 byl 2',3'-dideoxy-2',3·didehydroadenosin-5'-(fenylmethoxyalaninyl)fosfát.

Sloučeninou 1093 byl 2',3'-dideoxy-adenosin-5'(fenylmethoxyalaninyl)fosfát.

Z výsledků uvedených v tabulce 4 vyplývá, že.stabilita sloučenin podle, předmětného vynálezu v kyselém prostředí je vyšší v porovnání se stabilitou dosud známých sloučenin.

Biologická stabilita

Sloučenina 1587 podle předmětného vynálezu a uvedené dvě srovnávací sloučeniny 1.001 , a 1093 byly testovány ná.jejich stabilitu vůči biologickému rozkladu. Každá z uvedených, sloučenin byla inkubována 4 hodiny v normální heparinizované lidské plazmě při teplotě 37 °C. Ve vybraných časových okamžicích (tj . 0, 15, 30 minut a 1, 2, a 4 hodiny) byly odebrány vždy dva vzorky, které byly zbaveny bílkovin extrakcí v acetonitrilu. Poté byly standardním postupem pomocí LC/MS/MS analýzy stanoveny koncentrace jednotlivých sloučenin. Zjištěné výsledky jsou shrnuty v tabulce 5.

161

a a		• ·	» «		a		a a
•	•	• <	a	•	·'	•	•	a a
·'	a	•	•	•	♦ a	•	a
	<·	·'	0· ·'	•	• · · ·	•j ·	a
• a		• · · ·	• i		•		a »	a a

Tabulka 5

Sloučenina	Zbývající sloučenina po 4 hodinách (procento)	Poločas rozkladu (hodina)
1587	91	26
1001	. 52	4, 6
1093	50	4,2

Z dat získaných za podmínek uvedeného testu vyplývá, že sloučenina 1587 podle předmětného vynálezu vykazuje šestkrát vyšší stabilitu ve srovnání se sloučeninou 1001, respektive 1093.

Sukcinát O-(fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R)-4-[2amino-β-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu (a) Fenylethoxy-L-alaninylfosforchloridát

3;0 gramy (0,02 molu) hydrochloridu ethylesteru L-alaninu byly suspendovány ve 40 mililitrech suchého dichlormethanu.

K této suspenzi bylo přidáno 2,9 mililitru (0,02 molu) fenylfosfordichloridátu a vzniklá směs byla ochlazena na . teplotu -80 °C. Do reakční směsi bylo během 1 hodiny přidáno (postupně v dávkách o objemu 1 až 2 mililitry) 6,8 mililitru (0,04 molu) N,N-diisopropylethylaminu (získaného od společnosti Aldrich). Směs. byla ponechána pomalu ohřát na teplotu místnosti za současného míchání po dobu 2 hodin. Organické rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a ke zbytku bylo přidáno 100 mililitrů diethyletheru. Ze vzniklého etherického roztoku byly filtrací odstraněny nerozpustné

- ·*'· ···*-'·

162 · · · * * · ··♦· ·· · * •LOZ. 9 9· 9 9 9 9'9 ·< ·«·· · · ti 9·9 9 anorganické podíly a filtrát byl zahuštěn ve vakuu, čímž byl získán produkt ve formě bezbarvého sirupu. Tento produkt byl bez dalšího přečištění použit v následujícím stupni (b).

(b) 0-(Fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu

1,5 gramu (5,2 milimolu) (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu bylo usušeno smícháním s dioxanem a odpařením ve vakuu.

K takto vysušenému nukleosidu bylo přidáno 10 mililitrů bezvodého pyridinu a 20 mililitrů tetrahydrofuranu. Poté bylo do reakční směsi pomalu přidáno 6 mililitrů 1 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (6 milimolů). Reakční směs byla 20 minut míchána a byly k ní přidány 3 gramy (0,01 molu) fenylethoxy-L-alaninylfosforchloridátu ze stupně (a) rozpuštěné ve 20 mililitrech tetrahydrofuranu. Reakční směs byla 10 hodin míchána při teplotě místnosti a zahuštěna ve vakuu, čímž byl získán hnědý sirup. Tento sirup byl rozpuštěn ve 100 mililitrech dichlormethanu, vzniklý roztok byl extrahován x 100. mililitry vody, vysušen nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltrován a zahuštěn za vzniku hnědé pevné pěny. Tato pěna byla přečištěna mžikovou chromatografií s elucí směsí 5 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 1,7 gramu (60 procent) směsi fosfátových izomerů (4:6) ve formě pevné bílé pěny.

NMR (CDC1₃) : δ 7,47 (2 x s, ÍH) ; 7,10-7,46 (m, 5H) ; 6,07 (m, 1H) ; 5,9 (m, ÍH); 5,78 (s, 1H); 5,5 (m, ÍH); 4,84 (bs, 2H) ;

4,1 (m, 4H); 4,00 (m, ÍH); 3,64 (m, ÍH); 3,14 (m, 1H); 3,0 (m, ÍH); 2,78 (m, ÍH); 1,68 (m, ÍH); 1,36 (2 x d, 3H);

1,22 ’ (2 x ť/'3H)'; 0,8 6 (m, 2H) ; 0, 6 (m, 2hT7~™~ ~~~~~ ~~~ • β ·

163 ³¹Ρ NMR (CDC1₃) : δ 3,05; 3,02.

Analýza: Vypočteno pro C25H32N7O5P. 0,25 CHCI3: C, 53,07; Η, 5,70;

N, 17,15. Nalezeno: C, 52,81; H, 5,95; N, 16,91.

(c) Sukcinát O-(fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu

376 miligramů (0,7 milimolu) O-[fenylethoxy-L-alaninyl)]fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9yl]-2-cyklopenten-l-methanolu (připraveného .ve stupni lb) bylo rozpuštěno v ethanolu. K roztoku bylo přidáno 82 miligramů (0,7 milimolu) kyseliny jantarové a výsledný roztok byl odpařen do sucha. Zbytek byl za tepla rozpuštěn v

10-20 mililitrech acetonitrilu.. Po ochlazení roztoku došlo ke vzniku sraženiny. Směs byla uložena přes noc do mrazáku a odfiltrováním pevného podílu bylo získáno 330 miligramů (72 procent) směsi fosfátových izomerů (4:6) ve formě pevné látky.

NMR (DMSO-de) : δ 12,14 (s, 2H); 7,58 (s, 1H) ; 7,1-7,4 (m,

6H); 5,9-6,1 (m, 3H); 5,85 (brs, 2H); 5,42 (m, 1H); 3,954,15 (m, 4H); 3,8 (m, 1H); 3,05 (m, 2H); 2,65 (m, 1H); 2,4 (s, 4H); 1,63 (m, 1H); 1,4 (2 x d, 3H); 1,12 (t, 3H);

O, 5-0,7 (m, 4H).

³¹P NMR (DMSO-d₆) : δ 4,00; 3,68.

Vysokorozlišovací hmotnostní spektrum: Vypočteno pro C25H32N7O5P (M+H)⁺ m/z 542,2281, nalezeno 542,2282.

Analýza: Vypočteno pro C25H32N7O5P.C4H6O4.0,5 H₂O: C, 52,09;

H, 5,87; N, 14,66. Nalezeno: C, 52,13; H, 5,72; N, 14,61.

ΆϊήίΒ'ί;’

164 ** ·· ’· • · · φ * · ·' • φ » · • ·> φ · · ·'

Příklad 2

Sukcinát Ο-(fenylmethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu (a) Fenylmethoxy-L-alaninylfosforchloridát

10,0 gramů (0,072 molu) hydrochloridu methylesteru L-alaninu bylo suspendováno ve 100 mililitrech suchého dichlormethanu. K této. suspenzi bylo přidáno 10,7 gramu (7,6 mililitru) fenylfosfordichloridátu a vzniklá směs byla ochlazena na teplotu -80 °C. Do reakční směsi byl během.

hodiny přidáno (postupně v dávkách o objemu 1 až mililitry) 25 mililitrů N,N-diisopropylethylamin (získaného od společnosti Aldrich). Směs byla 30 minut míchána při teplotě -80 °C a poté ponechána pomalu ohřát na teplotu místnosti·za současného míchání po dobu 2 hodin. Organické rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a ke zbytku bylo přidáno 100 mililitrů diethyletheru. Ze vzniklého etheríckého roztoku byly filtrací odstraněny nerozpustné anorganické podíly a filtrát byl zahuštěn ve vakuu, čímž byl získán produkt ve formě bezbarvého sirupu. Tento produkt byl bez dalšího přečištění použit v následujícím stupni (b).

³¹P NMR (CDC1₃) : δ 8,61; 8,37.

(b) O-(Fenylmethoxy-L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu

5,5 gramu (0,018 molu) (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu bylo usušeno smícháním s dioxanem a odpařením ve vakuu.

K takto vysušenému nukleosidu bylo přidáno 30 mililitrů

165 ·· ·· · ·*' « · · » ·' · · 9 i · ·;». · · ·.· • i* · ···>· ·’9ι 9 9·

99 9 9 9 9 ' 9 · · bezvodého tetrahydrofuranu a 40 mililitrů pyridinu. Poté bylo do reakční směsi pomalu přidáno 23 mililitrů 1 molárního roztoku terč. butylmagnesiumchloridu v tetrahydrofuranu (1,3 ekvivalentu). Reakční směs byla 20 minut míchána a byl k ní přidán roztok 12 gramů (0,043 molu, 2,5 ekvivalentu) fenylmethoxy-L-alaninylfosforchloridátu ve 20 mililitrech tetrahydrofuranu. Reakční směs byla 12 hodin míchána při teplotě místnosti a zahuštěna ve vakuu, čímž byl získán hnědý sirup. Tento sirup byl rozpuštěn ve 100 - mililitrech dichlormethanu, vzniklý dichlormethanový roztok byl extrahován 2 x 100 mililitry vody, vysušen nad bezvodým síranem hořečnatým,' přefiltrován a zahuštěn za vzniku hnědé pěny. Tato pěna byla přečištěna mžikovou chromatografií s elucí směsí 5 procent methanolu v chloroformu, čímž bylo získáno 6,9 gramu (75 procent) směsi fosfátových izomerů ve formě pevné bílé pěny.

T NMR (CDC1₃) : 5 7,5 (2xs, 1H); 7,1-7,4 (m, 5H) ; 6,1 (m,

1H) ;	5,9 (m,	2H) ;	5,5-5,6 (m, 1H)	; 4,9	(bs,'2H); 4,2 (m, 2H);
4,05	(m, 1H)	; 3,7	(s, 3H); 3,6-3,	8 (m,	1H); 3,17 (m, 1H);
3,0	(m, 1H) ;	2,8	(m, 1H); 1,7 (m,	1H) ;	1,4 (2 x d, 3H);
0,9	(m, 2H);	0,6	(m, 2H).

³¹P NMR (CDCI3) : δ 3,07; 3,02.

Analýza: Vypočteno pro C24H30N7O5P. 2/5 CHC1₃: C, 50, 94; H, 5,33; N, 17,00. Nalezeno: C, 50,83; H, 5,39; N, 16,94.

(c) Sukcinát O-(fenylmethoxy-L-alaninyl)]-fosfátu (lS,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu

100 miligramů (0,19 milimolu) O-(fenylmethoxy-L-alaninyl) fosfátu (lS,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9yl] -2-cyklopenten-l^methanolu (připravenéhč”vě*”stufyn 1“b)^—By lo~ φ φ

166 rozpuštěno v methanolu. K roztoku bylo přidáno 22 miligramů (0,19 milimolu) kyseliny jantarové a výsledný roztok byl odpařen do sucha. Zbytek byl za tepla rozpuštěn v 10 mililitrech acetonitrilu. Po ochlazení roztoku došlo ke vzniku sraženiny. Směs byla uložena přes noc do mrazáku a odfiltrováním pevného podílu bylo získáno 70 miligramů (57 procent) směsi fosfátových izomerů ve formě pevné látky.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 12,15 (s, 2H, vyměnitelné v D₂O) ; 7,61 (s, 1H) ; 7,36 (3H, postupně 2H po výměně v D₂O); 7,20 (3H); 5,96,1 (m, 3H) ; 5,88 (brs, 2H, vyměnitelné v D₂0) ; 5-,44 (m, 1H) ; 4,0-4,2 (m, 2H); 3,85 (m, 1H); 3,60 (s, 3H); 3,05 (2H);

2,65 (m, 1H); 2,44-(s, 4H); 1,64 (m, 1H); 1,23 (m, 3H); 0,50,7 (m, 4H).

³¹P NMR (DMSO-d₆) : δ 3,99; 3,66.

Analýza: Vypočteno pro C^HaoNvOsP. C4H6O4.0,5 H₂O: C, 51,38;

H, 5,70; N, 14,98. Nalezeno: C, 51,36; H, 5,66; N, 14,99.

Příklad 3

Fumarát O-(fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu

198 miligramů (0,37 milimolu) O-[fenylethoxy-L-alaninyl)]fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9yl]-2-cyklopenten-l-methanolu bylo rozpuštěno v ethanolu.

K roztoku bylo přidáno 43 miligramů (0,37 milimolu) kyseliny fumarové a výsledný roztok byl odpařen do suchá. Zbytek byl za tepla rozpuštěn v 10 mililitrech acetonitrilu. Po ochlazení roztoku došlo ke vzniku sraženiny. Směs byla uložena přes noc do mrazáku a odfiltrováním pevného podílu bylo získáno 185 miligramů (75 procent) směsi fosfátových izomerů (4:6) ve formě pevné látky.

··

167

·'· · · · · · · ·· ··· ^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 7,6 (s, 1H) ; 7,1-7,4 (m, 6H) ; 6,64 (s, 2H) ; 5,9-6,1 (m, 3H); 5,87 (brs, 2H); 5,44 (m, 1H); 3,95-4,15 (m, 4H); 3,84 (m, 1H); 3,05 (m, 2H); 2,65 (m, 1H); 1,63 (m, 1H);

1,23 (m, 3H); 1,15 (t, 3H); 0,5-0,7 (m, 4H).

³¹P NMR (DMSO-d₆) : δ 4,00; 3,67.

Analýza: Vypočteno pro C25H32N7O5P. C4H4O4.0,5 H₂O: C, 52,25;

H, 5,59; N, 14,71. Nalezeno: C, 52,25; H, 5,51; N, 14,49.

Příklad 4

Glutarát O-(fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu

200 miligramů (0,38 milimolu) O-(fenylethoxy-L-alaninyl)fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9yl]-2-cyklopenten-l-methanolu připraveného v příkladu lb bylo rozpuštěno v ethanolu. K roztoku bylo přidáno 50 miligramů (0,38 milimolu) kyseliny glutarové a výsledný roztok byl odpařen do sucha. Zbytek byl za tepla rozpuštěn v mililitrech acetonitrilu. Směs byla uložena přes noc do mrazáku a odfiltrováním pevného podílu bylo získáno 130 miligramů (50 procent) směsi fosfátových izomerů (67:33) ve formě pevné látky.

^XH NMR (DMSO-dg): δ 7,6 (s, 1H) ; 7,1-7,4 (m, 6H) ; 5,9-6,1 (m, 3H); 5,87 (brs, 2H); 5,44 (m, 1H); 3,95-4,2 (m, 4H) ; 3,8 (m,

1H); 3,1 (m, 2H); 2,65 (m, 1H); 2,25 (t, 4H); 1,7 (m, 3H) ;

1,23 (m, 3H); 1,15 (t, 3H); 0,5-0,7 (m, 4H).

³¹P NMR (DMSO-d₆) : δ 4,00; 3,68.

Analýza: Vypočteno pro C25H32N7O5P.C5H8O4.0,5 H₂O: C, 52,78;

H, 6,05; N, 14,36. Nalezeno: C, 52,97; H, 6,07; N, 14,33.

* 3*

168 •1.·' ·!.·

Příklad 5

D-Vínan O-(fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfátu· (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu

157 miligramů (0,29 milimolu) O-(fenylethoxy-L-alaninyl)fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6- (cyklopropylamino)-9H-purin-9yl]-2-cyklopenten-l-methanolu bylo rozpuštěno v ethanolu.

K roztoku bylo přidáno 44 miligramů (0,29 milimolu) kyseliny D-vinné a výsledný roztok byl odpařen do sucha. Zbytek byl za tepla rozpuštěn v 10 mililitrech acetonitrilu. Směs byla uložena přes noc do mrazáku a odfiltrováním pevného podílu bylo získáno 112 miligramů směsi fosfátových izomerů (53:47) ve formě pevné látky.

NMR (DMSO-dg).: δ 7,6 (s,. 1H) ; 7,1-7,4 (m, 6H) ; 5,8-6,2 (m,

5H); 5,44 (m, 1H); 4,3 (s, 2H); 3,95-4,2 (m, 4H); 3,8 (m, 1H); 3,35 (brs, 2H) ; 3,1 (m, 2H) ; 2,65 (m, 1H) 1,7 (m, 1H) ;

1,23 (m, 3H); 1,15 (t, 3H); 0,5-0,7 (m, 4H).

³¹P NMR (DMSO-d₆) : δ 4,00; 3,67.

Příklad 6

Diastereoizomery O-(fenylmethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R) -4- [2-amino-6- [cyklopropylamino) -9H-pur.in-9-yl] -2cyklopenten-1-methanolu

Postupem, který byl podobný výše popsanému byla připravena směs diastereoizomerů O-(fenylmethoxy-L-alaninýl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu v poměru přibližně 1:1.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,5 (2 x s, 1H) ; 7,1-7,4 (m, 5H) ; 6,1 (m, (m, ^2ηΓ7 5,5-5, 6Frrp ^_1H)TÁ?9~fbs7~2h5TT,Á~7m/*2h77~ ··

169 «· ·» ► ·,· « > · « ·· ····

4,05	(m, 1H); 3,7	(s	, 3H); 3,6-3,8 (m,	1H) ;	3, 17 (m, 1H) ;
3,0	(m, 1H); 2,8	(m,	1H); 1,7 (m, 1H) ;	1,4	(2 x d, 3H);
0,9	(m, 2H) ; 0,6'	(m,	2H) .
31P NMR (CDCI3) : δ	3,	07;. 3,02.

Analýza: Vypočteno pro C₂₄H₃₀N₇O₅P. 2/5 CHCI3: C, 50,94;

H, 5,33; N, 17,00. Nalezeno: C, 50,83; H, 5,39; N, 16,94.

Uvedené fosfátové izomery byly od sebe odděleny chromatografií v nadkritických tekutinách na koloně Chiralpak AS, kde se jako eluent používala směs 25 procent methanolu v oxidu uhličitém, přičemž průtok kolonou byl 2 mililitry/minutu při teplotě 40 °C a tlaku 2,068428 χ 10⁷ pascalů (3000 psi). První izomer vytékal z kolony s retenčním časem 2,.9 minuty a byl 100 procentně enantiomerně čistý. Odpařením rozpouštědel byl získán produkt ve formě pevné bílé pěny.

^XH NMR (CDCI3) : δ 7,50. (s, 1H) ; 7,3-7,4 (m, 2H) ; 7,15-7,25 (m, 3H) ;. 6,11 (m, 1H) ; 5,91 (m, 1H) ; 5,86 (s, 1H) ; 5,55 (m, 1H) ;

4,89 (s,	2H); 4,24	(m,	2H); 4,05	(m,	1H) ,	3,72	(s,	3H) ;
3, 65 (m,	1H); 3,20	(m,	1H); 3,02	(m,	1H) ;'	2,83	(m,	1H) ;
1,72 (m,	1H) ;. 1,37	(d,	3H); 0,89	(m,	2H)„;	0, 62	(m,	2H) .
31P NMR	(CDCI3) : δ	3,07 .
Analýza:	Vypočteno	pro	C24H3oN705P	. 1/7	CHC13	: C,	53,	25;
H, 5,58;	N,.18,00.	Nalezeno: C,	53,27	; h,	5, 69	; N,	17:, 72

Druhý izomer vytékal z kolony s retenčním časem 6,7 minuty' a byl 100 procentně enantiomerně čistý. Odpařením rozpouštědel byl získán'produkt ve formě pevné bílé pěny.

^XH NMR . (CDCI3) : δ 7,52 (s, 1H) ; 7,25-7,4 (m, 2H) ; 7,15-7,22 (m, 3H); 6,11 (m, 1H); 5,94 (m, 1H); 5,85 (s, 1H); 5,55 (m, 1H);

• Ϊ'

4,88 (s, 2H); 4,22 (m, 2Hj; 4,04 (m, ÍH); 3,75 (s, 3Hj; 3,7:'· · · · · ·,· · '· • « - · .· ·ί»- 9 .· r• » · /·' 0 ·'···· \· · ·

3,75 (m,	1H); 3,17	(m,	1H); 3,04	(m,	1H) ;	2,8 0	(m,	1H) ;
1,73 (m,	1H); 1,42	(d,	3H); 0,89	(m,	2H) ;	0,67	(m,	2H) .
31P NMR	(CDC13) : δ	3,0.
Analýza:	Vypočteno	pro	C24H30N7O5P	.1/5	CHCI3	: C,	52,	71;
Η, 5,52;	N, 17,78.	Nalezeno: C,	52,61	; H,	5, 67	; N,	17,53

Příklad 7

Sodná sůl 0-(fenyl-N-methylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu.

0,060 gramu (0,11 milimolu) 0-(fenylmethoxy-L-alaninyl)fosfátu (1S, 4R) -4- [2-amino-6- (cyklopropylamino) -9H-pur.in-9yl 1-2-cyklopenten-l-methanolu býló suspendováno v mililitrech 40 procentního vodného roztoku methylaminu a mícháno 18 hodin při teplotě místnosti. Odpařením ve vakuu byly odstraněny těkavé podíly a zbytek byl rozpuštěn.v 50 mililitrech vody, extrahován 2 x 50 mililitry . dichlormethanu a přečištěn iontovýměnnou chromatografií na patroně Sep-Pak® Vac 35cc Accell® Plus QMA (v’HCO₃~ formě) (což je produkt dodávaný společností Waters Corp. pod katalogovým, číslem P/N WAT054725), přičemž produkt byl eluován celkem 1 litrem pufru na bázi vodného roztoku hydrogenuhličitanu amonného, jehož koncentrace se postupně zvyšovala od .

molů/litr do 0,5 molu/litr. Příslušné frakce byly spojeny a odpařením ve vakuu z nich byly odstraněny těkavé složky.

Zbytek byl dvakrát rozpuštěn v deionizované vodě a .odpařen ve vakuu, čímž byl získán 0-(fenyl-N-methylamino-L-alaninyl)fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]2-cyklopenten-l-methanolu ve formě amonné soli. Tato sůl byla rozpustěna· v-deionizované-vodě—a'ponechána-projít· skrz ·patronu

171 • · · • 9 ‘9 9 9

Sep-Pak® Vac 20cc Accell® Plus CM (v Na⁺ formě) (což je produkt dodávaný společností Waters Corp. pod katalogovým číslem P/N WAT054675), přičemž jako eluent sloužila deionizovaná voda. Příslušné frakce byly spojeny a lyofilizovány za vzniku 0,026 gramu (46 procent) 2,2 hydrátu sodné soli O-(fenyl-Nmethylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu ve formě pevné bílé látky.

MS (ES') m/e 449 (MH')

Analýza: Vypočteno pro C₁₈H₂₆N₈NaO₄P. 2,2 H₂0: C, 42,22;

H, 5,98; N, 21,88. Nalezeno: C, 42,36; H, 5,77; N, 21,66.

Příklad 8

Sodná sůl O-(fenyl-N-cyklopropylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu

Sodná sůl O-(fenyl-N-cyklopropylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu byla připravena analogickým postupem, jako sůl v příkladu 7, avšak v tomto případě byl 40 procentní vodný roztok methylaminu nahrazen roztokem 5 mililitrů (72 milimolů) cyklopropylaminu v 50 mililitrech deionizované vody. Lyofilizací spojených frakcí bylo získáno 35 miligramů (58 procent) 2,5 hydrátu sodné soli O-(fenyl-Ncyklopropylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu ve formě pevné bílé látky.

MS (ES') m/e 475 (MH)

Analýza: Vypočteno pro C₂₀H₂8N₈NaO₄P. 2,5 H₂O: C, 44,20;

H, 6,12; N, 20,61. Nalezeno: C, 44,27; ~H, 5? 81 ™N,‘~20 ,'491 ”

Ite i.,

Λ ·'

172 i* · ····

Příklad 9

Sodná sůl O-(fenyl-N,N-dimethylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu

Sodná sůl 0-(fenyl-N,N-dimethylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu byla připravena analogickým postupem, jako sůl v příkladu 7, avšak v tomto případě byl 40 procentní vodný roztok methylaminu nahrazen 50 mililitry 40 procentního vodného roztoku dimethylaminu. Lyofilizací spojených frakcí bylo získáno 39 miligramů (59 procent) trihydrátu sodné soli O-(fenyl-N,N-dímethylamino-L-alaninyl)-fosfátu·(1S, 4R)-4-[2amino-β-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu ve formě pevné bílé látky.

MS (ES') m/e 463 (MH')

Analýza: Vypočteno pro CigřhsNsNaChP. 3,0 H₂0:. C, 42,22;

H, 6,34; N, 20,73. Nalezeno: C, 42,40; H, 6,01; N, 20,51.

Příklad 10

Disodná sůl O-(L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu

0,5 gramu (0,95 milimolu) 0-(fenylmethoxy-L-alaninyl)fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9yl]-2-cyklopenten-l-methanolu bylo suspendováno v roztoku 30 mililitrů triethylaminu a 30 mililitrů deionizované vody a mícháno 18 hodin při teplotě místnosti. Odpařením ve vakuu byly odstraněny těkavé podíly a zbytek byl rozpuštěn v 50 mililitrech vody, extrahován 2 x 50 mililitry dichlormethanu’apřečištěn 'iontovýměnnou-chromatograf ií-na——

173 ·4 4 ·· · • 4 4 · · ·;· · ·· 9 4 • 4 4 · 4'4 4 4-4 9

4 4 4-4 ·····«· 4 ·

444 444 444

4444 44 4 44 44 patroně Sep-Pak® Vac 35cc Accell® Plus QMA (v HCO₃' formě) (což je produkt dodávaný společností Waters Corp. pod katalogovým číslem P/N WAT054725), přičemž produkt byl eluován celkem 1 litrem pufru na bázi vodného roztoku hydrogenuhličitanu amonného, jehož koncentrace se postupně zvyšovala od 0 molů/litr do 0,5 molu/litr. Příslušné frakce byly spojeny a odpařením ve vakuu z nich byly odstraněny těkavé složky.

Zbytek byl dvakrát rozpuštěn v deionizované vodě a odpařen ve vakuu, čímž byl získán O-(L-alaninyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu ve formě amonné soli. Tato·sůl byla rozpuštěna v deionizované vodě a ponechána projít skrz patronu Sep-Pak® Vac 20cc Accell® Plus CM (v Na⁺ formě) (což je produkt dodávaný společností Waters Corp. pod katalogovým číslem

P/N WAT054675)., přičemž jako eluent sloužila deionizované voda. Příslušné frakce byly spojeny a lyofilizovány za vzniku 0,430 gramu (86 procent) 2,5 hydrátu sodné soli O-(Lalaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4- [2-amino-6-(cyklopropylamino)-9Hpurin-9-yl]-2-cyklopenten-i-methanoiu've formě pevné bílé látky.

MS (ES^-) m/e 436 (MH)

Analýza: Vypočteno pro Ci7H₂₂N7Na₂O₅P. 2,5 H₂O: C, 38,7 9;

H, 5,17; N, 18,63. Nalezeno: C, 38,62; H, 5,11; N, 18,43.

Aktivita proti viru hepatitidy B

Sloučeniny připravené podle příkladů 1 až 10 byly testovány za účelem zjištění jejich případné aktivity proti viru, který způsobuje onemocnění hepatitidou typu (který je označován' 'zkráceně--jako - vír hepatitidy B) . Uvedené- testy, byly—

174 • · · · · ·'···· · · · ··· ·· · » · ······ ·· · ·· prováděny postupem popsaným v publikaci Jansen, R. a spolupracovníci, Antimicrobial Agents and Chemotherapy,

Vol. 37, číslo 3, 441-447, 1993. Zjištěné hodnoty IC₅₀ se pohybovaly v rozmezí od 0,017 mikromolu/litr do

3,0 mikromolů/litr.

Rozpustnost a stabilita roztoku/pevné látky tří různých solí O-(fenylethoxy-L-alanininyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu

Uvedené soli mají manipulační a formulační výhody spočívající v tom, že jsou stabilní, volně sypatelné krystalické.pevné látky, které nemění své složení, a to ani při zvýšené teplotě a vlhkosti. Na druhé straně volný O-(fenylethoxy-L-alanininyl)-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu je hygroskopická, amorfní pevná pěna, kterou není možné krystalizovat.

Forma	Typ pevné látky	0,1 N HCI	PBS
		Rozpustnost (mg/ml)	Stabilita (%)	Rozpustnost (mg/ml)	Stabilita (%)
Volná báze	amorfní hygroskopická	>5	69,1	0, 054	98,5
Glutarát	krystaly	>5	69, 3	0,084	99, 9
Fumarát	krystaly	>5	70,0	0,086	98,5
Sukcinát	krystaly	>5	66, 0	0,069	99, 8

175 • Φ ·· *· · ·· • · t · · Φ· · · · • ·’ φ · ·>· · · · • · · « t · ···· · · · • · · φ * . . φ ·

Tabulka-dokončení

Forma	Typ pevné látky	HPMC/Tween	Stabilita pevné látky (%)
		Rozpustnost (mg/ml)	Stabilita (%)
Volná báze	amorfní hygroskopická	0,04	97,6	93, 7
Glutarát	krystaly	>0,25<l	98, 6	98, 9
Fumarát	krystaly	0, 22	98,3	97,1
Sukcinát	krystaly	>0,25<l	98,8 ·	99, 6

Stabilita roztoku = % základní látky (AUC) po 27 hodinách při teplotě místnosti, normalizované k počáteční hodnotě AUC.

Stabilita pevné látky = % základní látky (AUC) po 2 týdnech při teplotě 60 °C, normalizované k počáteční hodnotě AUC.

Volné báze fosforamidátů 2',3'-dideoxyadenosinu a 2', 3'-dideoxy-2',3'-didehydroadenosinu jsou hygroskopičké amorfní pěny nebo gumy. Avšak jejich nestabilita v kyselém prostředí brání výhodnému použití jejich komplexů s kyselinami, kdy dochází k tvorbě solí se zlepšenými fyzikálními vlastnostmi. Vystavení těchto sloučenin působení kyselin vede k jejich rychlému rozkladu. Abacavir, tedy (1S, 4R) - 4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanol, má, v porovnání s nukleosidy, které obsahují, labilní glykosidické vazby mezi sacharidem a heterocyklickou bází, zvýšenou stabilitu ke kyselinám. Proto tedy fosforamidátové deriváty abacaviru tvoří stabilní soli, u kterých byly zjištěny výhodné fyzikální vlastnosti, které jsou vhodné-pro·vývojfarmaceutických„prostředků.______

Claims (19)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   Sloučenina obecného vzorce (I) kde

   Ar je arylová skupina;

   „ 1

   K“ a R² jsou nezávisle na zahrnující atom vodíku skupinu;

   sobě vybrané ze skupiny alkylovou skupinu a arylovou

   X je vybraná ze skupiny zahrnující atom kyslíku, skupinu NH, skupinu NR⁴ a atom síry kde

   R⁴ je vybraná ze skupiny zahrnující alkylovou skupinu a arylovou skupinu;

   R⁵ je vybraná ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu a arylovou skupinu, přičemž pokud — -«obě -s kup i n y- R^x_a.^RL.předs t ayu j í _ a 1 ky 1 oxé_s_kupi n y,___
2. 4*» • · f · • · e

   177 mohou být spojeny tak, že tvoří 5- nebo 6-členný kruh; a

   R³ je vybraná ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu, arylovou skupinu, heterocyklickou skupinu a polycyklickou skupinu, nebo farmaceuticky přijatelný derivát nebo metabolit uvedené sloučeniny.

   Sloučenina podle nároku 1, kde

   Ar je fenylová skupina nebo substituovaná fenylová skupina.

   Sloučenina podle nároku 1 nebo 2, kde

   R³ je vybrána ze skupiny zahrnující methylovou skupinu (—CH₃), ethylovou skupinu (~C₂H₅) a benzylovou skupinu (-Ch₂Ph).

   178

   4.

   Sloučenina obecného vzorce (II) kde R¹, R², R³, R⁵ a X mají význam definovaný v nároku 1.
3. 5. Sloučenina podle kteréhokoli z nároku 1 až 4, kde

   R¹ a R² jsou stejné nebo se liší a jsou vybrané ze skupiny zahrnující atom vodíku, .methylovou skupinu (—CH₃) nebo ethylovou skupinu (-CH₂CH₃) .
4. 6. Sloučenina podle kteréhokoli z nároku 1 až 4, kde

   R¹ je atom vodíku a

   R² je methylová skupina (-CH₃)' nebo benzylová skupina (-CH₂Ph) .
5. 7. Sloučenina podle kteréhokoli z nároku 1 až 6, ve které atom uhlíku, ke kterému jsou vázány skupiny R¹ a R², je * .. chi rá 1 ní______._________________________________________ • ·

   179 • · · · · · · · ·

   9 9 '· 9 ,.9 9- 9 9 · · » · · • · » · · · » » »····· toto · « «
6. 8. Sloučenina podle kteréhokoli z nároku 1 až 6, která má na chirálním atomu uhlíku, ke kterému jsou vázány skupiny R¹ a R², konfiguraci L.
7. 9. Sloučenina podle kteréhokoli z nároku 1 až 8, kde

   X je atom kyslíku.
8. 10. Sloučenina vybraná ze skupiny zahrnující

   0-[fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamíno)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   diamonnou sůl 0-[L-alaninyl]-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   0- [fenylbenzyloxy-L-alaninyl] -fosfát (1S, 4R.) -4- [2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   0-[fenylmethoxy-D-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   0- [ fenylmethoxy-oí, α-dimethylglycinyl] - fosfát (1S, 4R) - 4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   180

   • · • · · · • • · • 9 9 9 9 i? 9 9 • • • · 9 • '· '« · ·' 999 9 • · • • • 9 9 9 • • • • • • · 9999 99 • « · 9 9 9

   O-[fenylmethoxy-L-fenylalaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6- (cyklopropylamino) -9H-purin-9-yl] -2-cyklopentenl-methanolu;

   O-[fenylethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   O-[fenylmethoxyglycinyl]-fosfát (lS,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   O-[feny1-L-aspartyldimethylester]-fosfát (lS,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   O-[4-chlorfenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten1-methanoiu;

   O-[fenyl-terc. butoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   O-[fenyl-n-propoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   O-[fenyl-n-butoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l

   9 ·

   181 ' « · · * · ·····«· ·

   99 9999 99 '9 99 9

   O-[fenylisopropoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu; ’

   0-[(p-(methylester kyseliny 22 -dimethoxypropionové)fenyl)methoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   0-[fenyl(2-methylpropyl)oxy-L-alaninyij-fosfát (1S,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;·

   0-[fenyl(2,2-dimethylpropyl)oxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenyl-3-methylbutoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin

   9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[fenyl-3-pentyloxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amíno-β- (cyklopropylamino) -9H-purin-9-yl] -2-cyklopenten-r 1-methanolu;

   0-[fenylmethoxy-L-valinyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   • 9

   182 •99 · · · · 9 9 99 • . · · 9 999 9 9 9

   9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

   O-[fenyl-3,3-dimethyl-l-butyloxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenyl-n-pentyloxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4- [2amino-β-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[fenylcyklohexyloxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0- [fenyl cyklohexa.nmethoxy-L-alaninyl] - fosfát (1S,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl] - 2cyklopenten-l-methanolu; .

   0-[fenylmethoxy-3-cyklohexán-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[4-bromfenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (lS,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl] -2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[fenyldiethoxy-L-ašpartyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   0-[fenylmethoxy-L-methioninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu,·

   183

   O-[fenylmethoxy-L-leucinyl ]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   0-[fenylmethoxy-L-prolínyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2 cyklopenten-l-methylen-[fenyldibenzyloxy-L-aspartinyl]fosfát

   0-[fenyl-4-methyl-l-pentyloxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R) 4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenylcyklopentylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[4-fluorfenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[4-jodfenylmethoxy-L-alaniňyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[fenyldimethoxy-L-glutamyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-l-

   184 ·· ···« ·· · ·· ···

   O-[fenylmethoxy-L-tryptófanyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   0-[fenylmethoxy-L-isoleucinyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   O-[fenylcykloheptanyloxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yij-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[fenylcyklobutylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu;

   0-[fenylcyklopropylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenylcyklobutyloxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[fenylcyklopentyloxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[fenylfenethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu;

   185

   O-[fenyl-3-fenyl-Tpropoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenyl-4-fenyl-Tbutoxy-L-alaninyl]-fosfát'(1S,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenyl-2-cyklohexyl-l-ethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenyl-3-cyklohexyl-l-propoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenyl-4-cyklohexyl-1-butoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenylmethoxy-a-ethyl-L-glycinyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[fenylmethoxy-a-fenyl(RS)glycinyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0- [fenylmethoxy-a-propyl-L-glycinyl] -fosfát (1S, 4R) —4—[2— amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten1 rme t hanolu; ________________ _

   186 ·· ·· • · 9 <

   • » ' · • · r

   9 9 9 ·· 9999 '9 9 · • · « • · · · * · ·· ·· •9 «

   99 9

   9 ·

   O-[fenylmethoxy-a-butyl-RS-glycinyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   O-[p-fenoxyfenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   O-[p-fenylfenylmethoxy-L-alaninyl ]-fosfát (lS,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[4-hydroxyacetofenonmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu;

   0-[4-butylfenylmethoxy-L-alaninyl]'-fosfát (1S, 4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   0-[p-methoxyfenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   O^-[p-propoxyfenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2amino-β-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl] -2-cyklopentenl-methanolu;

   O-[fenylmethoxy-a,α-cyklopentylglycinyl]-fosfát {1S,4R)4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cy klopen ťe n-l-me t h ano 1u;----*—— ----—

   187 ·· ··

   O- [ fenylmethoxy-α, a-cyklohexyl gly činy 1 ] -fosfát (1S, 4R) -4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[fenylmethoxy-α,a-cyklopropylglycinyl]-fosfát (1S,4R)4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[p—(methoxykarbonyl)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu;

   0-[p—(trifluormethylthio)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-puřin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[p—(2-methoxyvinyl)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S, 4R)-4-[2-amino-6- (cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   0-[p-(2-fenylkarbonylvinyl)fenylmethoxy-L-alaninyl]fosfát (lS,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin9-yl]-2-cyklopenten-l-methanolu;

   0-[p-(2,2-dikyanovinyl)fenylmethoxy-L-alaninyl]-fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-l-methanolu;

   0-[o-(karboxylátethylester)fenylmethoxy-L-alaninyl]fosfát (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin'9-yl]-‘2-cýkl'openten-1-methanolu;-------188 sukcinát O-(fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (lS,4R)-4-[2 amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   sukcinát 0-(fenylmethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (lS,4R)-4[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   fumarát O-(fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   glutarát 0-(fenylethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R)-4-[2 amino-β-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   D-vínan 0-(fenyletho.xy-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopentenl-methanolu;

   diastereoizomery 0-(fenylmethoxy-L-alaninyl)-fosfátu (1S, 4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2 cyklopenten-l-methanolu;

   sodnou sůl 0-(fenyl-N-methylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2 cyklopenten-l-methanolu;

   sodnou sůl 0-(fenyl-N-cyklopropylamino-L-alaninyl)fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin 9^y 1 ]~2^čyklopeňťěň-l”methanolu';* * ~ ~~ ¹ i

   189 ·' ·

   Φ·· sodnou sůl O-(fenyl-N,N-dimethylamino-L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino-6-(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2cyklopenten-1-methanolu;

   disodnou sůl 0-(L-alaninyl)-fosfátu (1S,4R)-4-[2-amino—6(cyklopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyklopenten-lmethanolu .
9. 11. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 10 pro použití při způsobu léčení, prevence nebo diagnózy.
10. 12. ’ Použití sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 10 pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci virové infekce.
11. 13. Použití sloučeniny podle nároku 12, vyznačující se tím, že uvedená virová infekce zahrnuje infekci virem HIV.
12. 14. Použití sloučeniny podle nároku 12, vyznačující se tím, že uvedená virová infekce zahrnuje infekci virem HBV.
13. 15. Způsob prevence nebo léčení virové infekce, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinné dávky sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 10 pacientovi, který potřebuje takovouto léčbu.
14. 16. Způsob podle nároku 15, vyznačující se tím, že uvedená virová infekce zahrnuje infekci virem HIV.

    190

    ΦΦ φφ » φ φ · » · φ φ φ φφφ φ ···<
15. 17. Způsob podle nároku 15, vyznačující se tím, že uvedená virová infekce zahrnuje infekci virem HBV.
16. 18. Způsob podle kteréhokoli z nároků 15 až 17, vyznačující se tím, že zahrnuje orální podávání účinné dávky uvedené sloučeniny pacientovi.
17. 19. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoli z nároků 1 až 10 spolu s farmaceuticky přijatelným excipientem.
18. 20. Farmaceutický prostředek podle nároku 19, vyznačující se tím, že má formu pro orální podávání.
19. 21. Způsob výroby sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci sloučeniny vzorce ' se sloučeninou obecného vzorce.