DK160613B - Fremgangsmaade til fremstilling af konventionelle penicilliner - Google Patents

Description

DK 160613B

i

Den foreliggende opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til fremstilling af konventionelle penicilliner, såsom ampicillin og amoxicillin.

Det første kommercielle penicillin med en α-aminogruppe på 6-5 acylamidosidekæden var ampicillin, som er 6-(D-a-amino-a-phenylacet-amido)penicillansyre (se U.S.A. patentskrift nr. 2.985.648).

Amoxicillin er et antibakterielt middel, som anvendes i humanterapien og markedsføres som tri hydratet af den frie syre (dvs. zwitter-ionen). Forbindelsen er f.eks. beskrevet i britisk patentskrift nr.

10 978.178, J.Chem.Soc. (London), side 1920-1922 (1971) og Antimicrobial Agents and Chemotherapy - 1970, side 407-430 (1971). Dens kemiske navn er 6-[D-a-amino-a-(p-hydroxyphenyl)acetamido]penici11ansyre.

Anvendelsen af aminosyrechlorid,hydrochlorider til fremstilling af sådanne penicilliner var omhandlet i patentlitteraturen, f.eks. i 15 britisk patentskrift nr. 938.321 og 959.853 under vandfri betingelser (sidstnævnte anvendte beskyttelse under acyleringen af 6-aminopeni-cillansyrens carboxylgruppe med en silylgruppe, såsom også omhandlet i britisk patentskrift nr. 1.008.468 og U.S.A. patentskrift nr. 3.249.622) samt i britisk patentskrift nr. 962.719 i kold vandig acetone. Disse 20 penicilliner er amfotere aminosyrer, og der anvendtes derfor til deres isolering (f.eks. som omhandlet i U.S.A. patentskrift nr. 3.157.640 og 3.271.389) visse alifatiske usymmetriske forgrenede sekundære aminer (ofte kaldet flydende aminharpikser), der tidligere havde været anvendt til isolering af 6-aminopenicillansyre, som også er en amfoter aminosyre 25 (se U.S.A. patentskrift nr. 3.008.956). Forbedrede fremgangsmåder til isolering og rensning af sådanne penicilliner var omhandlet i f.eks.

U.S.A. patentskiift nr. 3.180.862 via /J-naphthalensulfonater og i U.S.A. patentskrift nr. 3.198.804 via mellemliggende isolering og efterfølgende let hydrolyse af hetacillin.

30 Anvendelsen af en silylgruppe til beskyttelse af carboxyl gruppen i et naturligt penicillin under kemisk spaltning til 6-aminopenicillansyre var omhandlet i U.S.A. patentskrift nr. 3.499.909. Anvendelsen af si 1y-leret 6-aminopenicillansyre under vandfri acylering med aminosyre-chlorid,hydrochlorider var omhandlet i talrige patentskrifter, f.eks.

35 U.S.A. patentskrift nr. 3.478.018, U.S.A. patentskrift nr. 3.595.855, U.S.A. patentskrift nr. 3.654.266, U.S.A. patentskrift nr. 3.479.338 og U.S.A. patentskrift nr. 3.487.073. Nogle af disse patentskrifter omhandler også brugen af flydende aminharpikser. Se også U.S.A. patentskrif- 2

DK 1 60613 B

ter nr. 3.912.719, 3.980.637 og 4.128.547.

Britisk patentskrift nr. 1.339.605 indeholder forskellige specifikke og detaljerede eksempler på fremstillingen af amoxicillin ved omsætning af et silyleret derivat af 6-aminopeniciliansyre med et reak-5 tionsdygtigt derivat (herunder chlorid,hydrochloridet) af D-(-)-a-amino- p-hydroxyphenyleddikesyre, hvori aminogruppen er beskyttet, derefter i fjernelse af silylgruppen eller -grupperne ved hydrolyse eller alkoho- i lyse og derefter, om muligt, udvinding af amoxicillin, sædvanligvis som det krystallinske trihydrat. Således opnåedes krystallinsk amoxicillin i 10 eksempel 1 ved isoelektrisk fældning fra en vandig opløsning, f.eks. ved pH-værdi 4,7. Rensning opnåedes formentlig i dette eksempel ved opløsning af det rå produkt (før isoelektrisk fældning) i vand ved en sur pH- i værdi, såsom 1,0 (f.eks. i vandig hydrogenchloridsyre) i nærværelse af et med vand ublandbart organisk opløsningsmiddel, såsom methyliso- | 15 butyl keton (4-methylpentan-2-on). I væsentlig grad samme fremgangsmåde j anvendtes i U.S.A. patentskrift nr. 3.674.776. Fra US patentskrift nr.

4.064.151 er det kendt at fremstille isocyanater direkte fra aminer ved en fremgangsmåde, som omfatter omsætning med halogensilylforbindel ser til dannelse af halogensilylcarbonater. Dette patentskrift indeholder 20 dog intet, som kan henlede opmærksomheden på, at penicillinforbindelser kan underkastes en lignende reaktion til opnåelse af carbamat-mellem-produkter, som tåler acylering under dannelse af de ønskede penicilliner, da det er kendt at β-λactamri ngen i penicillin er meget følsom.

Den foreliggende opfindelse tilvejebringer en fremgangsmåde til 25 fremstilling af et konventionelt penicillin med formlen

η Η H

S = = R -C-NH—r—γ |\ 30 . J- N-; CH3 P°

^ OH

0 35 hvori R-C- betegner resten efter fjernelse af hydroxyl gruppen fra en organisk carboxylsyre indeholdende fra 2 til 20 carbonatomer, ved hvilken man med syrechloridet af den organiske carboxylsyre acylerer en si lyleret kerne med forml en

DK 160613 B

3

Η H

i i c XH, (CH3)-SiNH—5 5 i-N- CH3 ° if

X)-B

hvori B betyder en let fraspaltelig ester-beskyttende gruppe, og dernæst 10 omdanner gruppen B til hydrogen, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at man før acyleringen omdanner den silylerede kerne til en forbindelse med formlen o S? S i S/S^/CH 15 (CH,)3Si-0-C-NH—f—r

Jr- N- CtI3 0 hf

X)-B

20 hvori B har den samme betydning som ovenfor anført, ved at man sætter tørt carbondioxid til en opløsning af en forbindelse med formlen

Η H

25 I l/K/CH3

(CH^si.NK-pr'K

J~*- C 3 ° hf

X)~B

30 hvori B har den ovenfor anførte betydning, i et vandfrit inert organisk opløsningsmiddel ved en temperatur i intervallet fra 0°C til 100°C, til omsætningen er tilendebragt.

Et konventionelt penicillin som her defineret er et penicillin, der 35 tidligere har været beskrevet i patentlitteraturen eller den videnskabelige litteratur, herunder sammendrag deraf.

I en foretrukket udførelsesform tilvejebringer den foreliggende opfindelse en fremgangsmåde til fremstilling af en 6-a-aminoarylacet-

DK 160613 B

4 amidopenicillansyre, fortrinsvis ampicillin eller amgxicillin, ved hvilken man omsætter en forbindelse med formlen , , II /CH, 5 (CH-) Si-O-C-BH-CH—CH C 5 73 | I I^CH, λ-N-CH >

tf I

C-O-Si^H^

O

10 i et vandfrit inert organisk opløsningsmiddel og fortrinsvis i methylenchlorid, fortrinsvis i nærværelse af en svag base, der fortrinsvis er propylenoxid, og fortrinsvis ved en temperatur over -10°C, mere foretrukket i intervallet fra -8°C til 20°C, endnu mere foretrukket 15 i intervallet fra 0°C til 20°C, og mest foretrukket ved ca. 20°C, med omtrentlig en ækvimolær mængde af et D-(-)-a-aminoarylacetyl -chlorid,hydrochlorid, fortrinsvis D-(-)-2-phenylglycylchlorid,hydro-chlorid eller D-(-)-2-p-hydroxyphenylglycylchlorid,hydrochlorid, hvor sidstnævnte fortrinsvis tilsættes portionsvis til opløsningen af 20 førstnævnte.

Et af de overraskende træk ved den hidtil ukendte fremgangsmåde er stabiliteten af den vandfrie acyleringsopløsning. Denne kan holdes i lange tidsrum, selv ved stuetemperatur, uden bemærkelsesværdig dekomponer! ng af penicillinm'olekylet. Dette står i kontrast til opførslen af 25 acyleringsopløsninger i de tidligere beskrevne fremgangsmåder. Denne stabilitetsfordel muliggør, at man kan udføre acyleringsreaktionen ved langt højere temperaturer (her anvendtes stuetemperatur) end normalt anvendt i ampicillinfremstillingen, der normalt er under 0°C og typisk ca. -10°C.

30 Forbindelsen med formlen

0 Q

, λ II / \ /CH5 (CH,),Si-0-C-BH-CH— CH C 3 * 3 II I^CH, λ-N-CH >

35 / I

υ C“0-Si(CH-.

11 53

O

DK 160613 B

5 omtales her ved forskellige trivialnavne, såsom bis-silyleret carbamat af 6-APA, SCA, 6-trimethylsilyloxycarbonylpenicillansyre TMS-ester og TMS02C,APA,TMS.

Selve eksistensen af denne forbindelse er overraskende i betragt-5 ning af den velkendte kendsgerning, at omsætning af 6-APA med carbondioxid ødelægger 6-APA og giver 8-hydroxypenicillansyre som omhandlet f.eks. i U.S.A. patentskrift nr. 3.225.033.

Et middel til opnåelse af kvantitative udbytter af 6-trimethyl-silyloxycarbonylaminopenicillansyre trimethylsi lylester (TMS01C,APA,TMS) 10 ligger i fuldstændigt at fremstille 6-APA bis-TMS-prækursoren i første omgang. Dette er blevet opnået ved, at man omsætter 6-APA med hexa-methyldisilazan (HMDS) som i følgende reaktionsskema: 15 6-APA + HMDS + Imidazol- Til bagesval inq ^ 1 mol 1,1 mol katalysator 6-8 timer 3-5 mol% 20 Fuldstændig carboxyl Tilsæt 5 mo!% TMCS oq^ "silylering" & ca. tilbagesvaling natten 40-65% 6-NH2 over "silylering" 25 TMSNH g \-S (6-APA,bis-TMS) J-N-\ 6' *co2tms 30

Afslutningen af bis-trimethylsilyleringsreaktionen kan let følges ved anvendelse af NMR. 3-trimethylsilyloxycarbonylgruppen viser en methyl silyl-si ngiet ved 0,31 ppm (tetramethylsilan = 0), medens 6-tri-35 methyl silylamingruppen viser en methylsilyl-singlet ved 0,09 ppm.

6-APA-trimethylsilyleringsreaktionen er hidtil kun blevet udført i methylenchlorid. Andre opløsningsmidler kan imidlertid anvendes, som f.eks. acetonitril, dimethyl formamid eller endog selve HMDS.

6

DK 160613 B

Omdannelse af trimethyl silylaminogruppen til trimethylsilyloxy-carbonylaminogruppen opnås let ved at boble tør COg i reaktionsopløsningen. Omdannelsen følges let ved hjælp af NMR, fordi trimethylsilyl-amino-singletten ved 0,09 ppm deklinerer efterhånden, som der optræder 5 en ny singlet for trimethyl silyloxycarbonylaminogruppen ved 0,27 ppm.

Når fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse anvendes til fremstilling af ampicillin, ampicillinanhydrat, ampicillintrihydrat, j amoxicillin og amoxicillintrihydrat, isoleres slutprodukterne og renses j i henhold til konventionelle metoder, der er velkendte inden for tek- j 10 nikken, som belyst af U.S.A. patentskrifter nr. 3.912.719, 3.980.637 og 4.128.547, samt andre deri angivne patentskrifter og publikationer.

De i de følgende eksempler anvendte syrechlorider kan erstattes af ! en lang række andre syrechlorider til fremstilling af konventionelle penicilliner.

15 Således kan acylhal ogenidet udvælges til indføring af en vilkårlig ønsket acylgruppe i 6-aminostillingen, som velkendt i teknikken, f.eks.

U.S.A. patentskrift nr. 3.741.959. Det er derfor muligt at indføre specifikke acylradikal er, herunder, men ikke alene, de som er defineret ved følgende almene formler: 20 (i) RUcnH2nco_> hvor rU betyder aryl (carboxyl i sk eller hetero- cyklisk), cycloalkyl, substitueret aryl, substitueret cycloalkyl eller en non-aromatisk eller mesoionisk heterocyklisk gruppe, og n er et helt tal fra 1 til 4. Eksempler på denne gruppe omfatter phenyl acetyl, j substitueret phenyl acetyl, f.eks. fluorphenylacetyl, nitrophenylacetyl, 25 aminophenylacetyl, acetoxyphenylacetyl, methoxyphenylacetyl, methphenyl-acetyl eller hydroxyphenylacetyl; N,N-bis-(2-chlorethyl)aminophenyl-propionyl; thien-3-og -3-acetyl; 4-isoxazolyl og substitueret 4-isoxa-zolylacetyl; pyridylacetyl; tetrazolylacetyl eller en sydnonacetyl-gruppe. Den substituerede 4-isoxazolylgruppe kan være en 3-aryl-5-30 methyl isoxazol-4-yl-gruppe, hvor arylgruppen f.eks. er phenyl eller halogenphenyl, f.eks. chlor- eller brom-phenyl. En acylgruppe af denne type er 3-o-chlorphenyI-5-methylisoxazol-4-yl-acetyl.

(ii) CnH2n+lC0~’ hvor n er et tal ^ra 1 7* kan være ligekædet eller forgrenet og om ønsket afbrudt af et oxygen-35 eller svovlatom eller substitueret med f.eks. en cyanogruppe. Eksempler på sådanne grupper omfatter cyanoacetyl, hexanoyl, heptanoyl, octanoyl og butyl thi oacetyl.

(iii) ^η^η.ι^Ο-, hvor n er et helt tal fra 2 til 7. Gruppen kan

DK 160613 B

7 være ligekædet eller forgrenet og om ønsket afbrudt af et oxygen- eller svovlatom. Et eksempel på en sådan gruppe er ally!thi oacetyl.

(iv>

Rus__—-C------

RW

10 hvor Ru har den under (i) anførte betydning og herudover kan være benzyl, og Rv og Rw, som kan være ens eller forskellige, hver betegner hydrogen, phenyl, benZyl, phenethyl eller lavere al kyl. Eksempler på sådanne grupper omfatter phenoxyacetyl, 2-phenoxy-2-phenylacetyl, 2-15 phenoxypropionyl, 2-phenoxybutyryl, benzyloxycarbonyl, 2-methyl-2-phen-oxypropionyl, p-cresoxyacetyl og p-methylthiophenoxyacetyl.

(v) |V

20 Rus-c-CO-

RW

hvor Ru har den under (i) anførte betydning og herudover kan være 25 benzyl, og Rv og Rw har de under (iv) anførte betydninger. Eksempler på sådanne grupper omfatter S-phenylthi oacetyl, S-chlorphenylthioacetyl, S-fluorphenylthi oacetyl, pyridylthi oacetyl og S-benzylthi oacetyl.

(vi) RuZ(CH2)mC0-, hvor Ru har den under (i) anførte betydning og herudover kan være benzyl, m er et oxygen eller svovl atom, og m er et 30 helt tal fra 2 til 5. Et eksempel på en sådan gruppe er S-benzylthio-propionyl.

(vii) RuCO-, hvor Ru har den under (i) anførte betydning. Eksempler på sådanne grupper omfatter benzoyl, substitueret benzoyl (f.eks. amino-benzoyl), 4-isoxazolyl og substitueret 4-isoxazolylcarbonyl, 35 cyclopentan-carbonyl, sydoncarbonyl, naphthoyl og substitueret naphthoyl (f.eks. 2-ethoxynaphthoyl), quinoxalinylcarbonyl og substitueret quinoxalinyl-carbonyl (f.eks. 3-carboxy-2-quinoxalinylcarbonyl). Andre mulige substi-tuenter for benzoyl indbefatter al kyl, alkoxy, phenyl 8

DK 160613 B

eller phenyl sub-stitueret med carboxy, alkylamido, cycloalkylamido, allylamido, phenyl-(lavere)-al kyl amido, morpholinocarbonyl, pyrrolidi-nocarbonyl, piperi-dinocarbonyl, tetrahydropyridino, furfurylamido eller N-al kyl-N-anilino eller derivater deraf, og sådanne substituenter kan 5 være i 2- eller 2- og 6-stilli ngerne. Eksempler på sådanne substituerede benzoylgrupper er 2,6-dimethoxybenzoyl, 2-biphenyl carbonyl, 2-methyl- j amidobenzoyl og 2-carboxybenzoyl. Hvor gruppen Ru betegner en i substitueret 4-isoxazolyl-gruppe, kan substituenterne være som anført ovenfor under (i). Eksempler på sådanne 4-isoxazolgrupper er 3-phenyl-5- ! 10 methyl isoxazol-4-yl-carbonyl, 3-o-chlorphenyl-5-methylisoxazol-4-yl-carbonyl og 3-(2,6-dichlorphenyl)-5-methylisoxazol-4-yl-carbonyl.

(viii) RU-CH-CO-

15 I

x hvor Ru har den under (i) anførte betydning, og X betegner amino, 20 substitueret amino (f.eks. acylamido eller en gruppe opnået ved omsætning af aminogrupper og/eller gruppen eller grupperne i 7-sidekæden med et aldehyd eller en keton, f.eks. acetone, methyl ethyl keton eller ethyl-acetoacetat), hydroxy, carboxy, esterificeret carboxy, triazolyl, tetra-zolyl, cyano, halogeno, acyloxy (f.eks. formyloxy eller lavere alkanoyl-25 oxy) eller etherificeret hydroxygruppe. Eksempler på sådanne acylgrupper er a-aminophenylacetyl, α-carboxyphenylacetyl og 2,2-dimethyl-5-oxo-4-phenyl-l-imidazolidinyl.

(ix)

RX

30 j

Ry-c-co- I,

RZ

hvor Rx, Ry og Rz, som kan være ens eller forskellige, hver kan betegne lavere alkyl, phenyl eller substitueret phenyl. Et eksempel på en sådan acylgruppe er tri phenyl carbonyl.

35 (X)

II

9

DK 160613 B

Ru-NH—C-

O

hvor Ru har den under (i) anførte betydning og herudover kan være hydrogen, lavere alkyl eller halogen-substitueret lavere alkyl, og Y betegner oxygen eller svovl. Et eksempel på en sådan gruppe er 10 ci(ch2)2nhco.

(xi) (CHJn J>C-C°-

15 X

\ch2 hvor X har den ovenfor under (viii) anførte betydning, og n er et helt 20 tal fra 1 til 4. Et eksempel på en sådan acylgruppe er l-aminocyclo-hexancarbonyl.

(xii) Aminoacyl, f.eks. RWCH(NH2).

(CH2)nCO, hvor n er et helt tal fra 1 til 10, eller NH2,

Si^2nAr^CH2^mC®‘ hvor m er 0 e^er et helt ta^ ^ra * til 10, og n er 0, 25 1 eller 2, Rw betegner et hydrogenatom eller en al kyl-, aralkyl- eller carboxygruppe eller en gruppe som defineret ovenfor under Ru, og Ar betegner en arylengruppe, f.eks. p-phenylen eller 1,4-naphthylen.

Eksempler på sådanne grupper er anført i britisk patentskrift nr.

1.054.806. En gruppe af denne type er p-aminophenylacetylgruppen. Andre 30 acylgrupper af denne type indbefatter de, f.eks. α-aminoadipoyl, der er afledt af naturligt forekommende aminosyrer og derivater deraf, f.eks.

N-benzoyl-α-aminoadipoyl.

(xiii) Substituerede giyoxylylgrupper med formlen R^,C0,C0-, hvor Ry betegner en alifatisk, en aralifatisk eller en aromatisk gruppe, 35 f.eks. en thienyl gruppe, en phenylgruppe eller en mono-, di- eller tri -substitueret phenylgruppe, hvor substituenterne f.eks. er et eller flere halogenatomer (F, Cl, Br eller I), methoxygrupper, methyl grupper eller aminogrupper eller en kondenseret benzenring.

DK 160613 B

10 Når acylgruppen, som skal indføres, indeholder en aminogruppe, kan det være nødvendigt at beskytte denne under de forskellige reaktionsstadier. Den beskyttende gruppe er hensigtsmæssigt en, som kan fjernes ved hydrolyse uden at påvirke resten af molekylet, især lactam- og 7-5 amido-bi ndingerne. Den amin-beskyttende gruppe og den esterificerende gruppe i 4-C00H-sti11 ingen kan fjernes under anvendelse af samme reagens. En fordelagtig fremgangsmåde består i at fjerne begge grupper i det sidste trin i sekvensen. Beskyttede amin-grupper omfatter urethan, arylmethyl (f.eks. trityl)-amino, arylmethylenamino, sul phenyl amino 10 eller enamin-typer. Enamin-blokerende grupper er særligt værdifulde i tilfælde af o-aminomethylphenyl eddikesyre. Sådanne grupper kan i almindelighed fjernes ved hjælp af et eller flere reagenser udvalgt blandt fortyndede mineralsyrer, f.eks. fortyndet saltsyre, koncentrerede organiske syrer, f.eks. koncentreret eddikesyre, tri fluoreddikesyre og 15 flydende hydrogenbromid ved meget lave temperaturer, f.eks. -80°C. En hensigtsmæssig beskyttende gruppe er t-butoxycarbonylgruppen, der let fjernes ved hydrolyse med fortyndet mineral syre, f.eks. fortyndet saltsyre, eller fortrinsvis med en stærk organisk syre (f.eks. myresyre eller trifluoreddikesyre), f.eks. ved en temperatur på 0-40°C, 20 fortrinsvis ved stuetemperatur (15-25°C). En anden hensigtsmæssig beskyttende gruppe er 2,2,2-trichlorethoxycarbonylgruppen, der kan fraspaltes med et middel, såsom zink/eddikesyre, zink/myresyre, zink/lavere alkoholer eller zink/pyridin.

NH2-gruppen kan også beskyttes som NHg+ ved anvendelse af amino-25 syrehal ogenidet som et syreadditionssalt under betingelser, hvor aminogruppen forbliver protoniseret.

Den til dannelse af syreadditionssaltet anvendte syre er fortrinsvis en syre med en pK -værdi (i vand ved 25°C) på >X+1, hvor X er α pK -værdien (i vand ved 25°C) af aminosyrens carboxygrupper. Syren er

CL

30 fortrinsvis monovalent. I praksis vil syren HQ (se nedenfor) i almindelighed have en pK <3, fortrinsvis <1.

α Særligt fordelagtige resultater har vist sig at blive opnået med fremgangsmåden ifølge opfindelsen, når syrehalogenidet er et salt af et aminosyrehalogenid. Aminosyrehalogenider har formlen 35

HgN-R^COHal hvori R* betyder en divalent organisk gruppe, og Hal betyder chlorid

DK 160613 B

π eller bromid. Salte af sådanne aminosyrehalogenider har formlen [H3N-R1-COHal]+Q" 5 hvori R* og Hal har den ovenfor anførte betydninger, og Q" betyder anionen af syren, idet HQ har en pKa som defineret ovenfor. Syren HQ er fortrinsvis en stærk mineralsyre, som f.eks. en hydrohalogenidsyre, såsom saltsyre eller hydrogenbromidsyre. Et vigtigt aminosyrehalogenid er, på grund af de værdifulde penici1 linantibiotika, som indeholder den 10 deraf afledte gruppe, D-N-(a-chlorcarbonyl-a-phenyl)methylammoniuni“ chlorid, D-[PhCH(NH^)COCl]+Cl, der her af nemheds grunde omtales som D- α-phenylgiycylchlori d,hydrochlori d.

Penicilliner, som opnås ved hjælp af fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse, og som har en acylamidogruppe RUCH(NH2)-C0NH-, 15 hvor Ru har den ovenfor anførte betydning, kan omsættes med en keton 2 3 2 3 R .R CO, hvori R og R betyder lavere alkylgrupper (Cj-C^), til dannelse af forbindelser, som antages at indeholde gruppen:

CO

2° \ RU.-CH N- HN___R2 25 R3

Forbindelser af denne type omfatter hetacillin, sarpi ci11 i n, p-hydroxyhetacillin og sarmoxicillin.

Inden for rammerne heraf falder endvidere de acylgrupper, som er 30 anført i U.S.A. patentskrift nr. 4.013.648, spalte 7-20 inklusive, som betragtes som en del af den foreliggende beskrivelse.

Når acyleringsprocessen ifølge den foreliggende opfindelse anvendes til fremstilling af penicilliner, isoleres slutprodukterne og renses i henhold til konventionelle metoder, som er velkendte inden for 35 teknikken.

Foretrukne acylchlorider, som ifølge opfindelsen anvendes til acylering af en forbindelse med formlen 12

DK 16061-3 B

η Η H

8 i §^S^CH3 (CH,),Si-0-C-NH—f—f 33 l CH-.

/y ^- 3

O

5 N)-a ; hvori A er (CHg)gSi- eller en let spaltelig ester-beskyttende gruppe, omfatter følgende: 10 0 a) A-CHgC-lh, hvori A betyder _XH2NHR! ^\XH2MHR’ 15 — eller eller ^CHpNHR1 gl 20 ^ hvori R betyder hydrogen, hydroxy eller methoxy, og R' betyder hydrogen eller methyl, og aminogruppen er blokeret, om ønsket, ved hjælp af 25 konventionelle blokerende grupper, herunder specielt ved protonisering, 0 b) B-CH-C-h,HC1, hvori B betegner nh2 30 R2 — eller eller

UL

DK 160613 B

13 1 2 hvori R betyder hydrogen, hydroxy eller acetoxy, og R betyder 1 2 hydrogen, chlor eller hydroxy, hvor R er hydroxy, og R betyder hydrogen, når R* er hydrogen eller acetoxy.

5 c) fi [1 O

I I π

Vs^CHgC-Cl; * 1° d) Π il ° 11 Ji-C-C-Ol; 0 S-och3 15 e) ° 20 hvori R betyder phenyl, 4-hydroxyphenyl, 3,4-dihydroxyphenyl eller cyclohexa-l,4-dien-l-yl, f) 00 li II O o / \ II II ,

CnHc-N N-C-NH-CH-C-C1 25 2 5 v_y . Å hvori R betyder phenyl, 4-hydroxyphenyl, 3,4-dihydroxyphenyl eller cyclohexa-l,4-dien-l-yl, 30 g) /=\ i? \\ >iH-c-cl

N-' O-C-H

II

o 35 o o h) HN^^v-C-NH-CH-C-Cl

O^N^O R

H

DK 160613B

14 hvori R betyder phenyl, 4-hydroxyphenyl, 3,4-dihydroxyphenyl eller cyclohexadien-l-yl, i) R2 0 O O * 5 U^n^^N-c-nh-ck-c-ci

WaJ i 10 hvori R* betyder phenyl, 4-hydroxyphenyl, 3,4-dihydroxyphenyl eller 2 cyclohexadien-l-yl, og R betyder hydrogen eller hydroxy,

O

II n j) F3C-S-CH2C-C1 k) p=\ ’ ? ^i-ch2c-ci; 15

DK 160613 B

O

1) NC-CH2C-C1, m> /=\ s N χ />"S-CH2C-C1;

O

x II

n) Br-CH2C-Cl

o) H,iL_lT

ά J—1< \J i? N-uCH2C-C1 o

, II

p) N=C-CH2-S-CH2-C-C1,

g) >TU S

ιΗΎ^ ^ 0 I il HN-U—C-C-Cl 5 I! N-OCH3 r-π I-1 0 0 • Γ I ii ii r> U^0^>-CH=N-N JJ-C-NH-CH-C-C1

O R

t 16

DK 160613 B

hvori R betyder phenyl, 4-hydroxyphenyl, 3,4-dihydroxyphenyl eller cyclohexadien-l-yl,

s) O

li x O

5 11 H

A-N N-C-NH-CH-C-Cl

\-1 R

i 10 hvori A betegner hydrogen eller alkyl med 1-4 carbonatomer eller CH.3SO2, X betegner oxygen eller svovl, og R betegner phenyl, 4-hydroxyphenyl, 3,4-dihydroxyphenyl eller cyclohexa-l,4-dien-l-yl, 15 t> /=Λ R ft / 7)-o-c-o-ci ' c„3 20 hvori R betyder hydrogen eller methyl, ’ /=/°¾ o (Ty-c-ci : 25 OCH ' v> _/R1 o 30 O—lMp"C1

Mr2 >k0ACH3 35 2 hvori hver af R og R betyder hydrogen, chlor eller fluor,

DK 160613 B

17

O

5 Cif-ci OCH2CK3 10 o

II

x) B-CH-C-Cl,HCl, hvori B betegner

NH

C=NH

15 ^2 H2 R1-^- eller jj eller 1 i 25 1 2 hvori R betyder hydrogen, hydroxy eller acetoxy, og R betyder hydro- 1 2 gen, chlor eller hydroxy, når R er hydroxy, og R betyder hydrogen, nar R* er hydrogen eller acetoxy, 30

OtLli

-I

18

DK 160613 B

z) _x;h2n3 I

4 /)--2-1 · j > 0 0

^—CH-C-C1 \rrr/ NH

/=\ H

II 5 0 bb) )=\ ii 0=\ N-CH0C-C1 Cl , k 0

cc) / — \ II

^ /]-CH2“C-C1 dd) .1 —CKgC-ci

DK 160613 B

19

O

H

ee) B-CH-C-C1 !

NH

i C=0

5 NHR

hvori B betegner 1° B2

Ri^r^ eiier 15 C1- 1 2 hvori R betegner hydrogen, hydroxy eller acetoxy, og R betegner hydro- 1 2 gen, chlor eller hydroxy, når R er hydroxy, og R betegner hydrogen, 20 når R* er hydrogen eller acetoxy, og R betegner hydrogen eller cyanomethyl,

DK 160613 B

20 ί ff) _ o N-OH^-Cl j i o II , gg) CH2=CH-CH2-S-CH2-C-C1 hh> ΓΥξΗ5 LAc-d O i o

II

ii) B-CH-C-C1, hvori B betegner NH .NH !

1 X

0=C-NH-C^

Xnh2 R2 ..

- eller eller i i -

DK 160613 B

21 1 2 hvori R betegner hydrogen, hydroxy eller acetoxy, og R betegner hydrogen, chlor eller hydroxy, når R er hydroxy, og R betegner hydrogen, når R1 er hydrogen eller acetoxy,

/=\ S

/ \—CH-C-Cl - \J/ S0 % /r o '—' 10 hvori R betegner hydrogen eller methyl, 15 kk> /=\ 3 20

11) O

' Il 25 V_/NnH2 og aminogruppen er blokeret, om ønsket, ved konventionelle blokerende 30 grupper, herunder især ved protonisering,

DK 160613 B

22 mm) il

Cl CH-C-C1 '*1 11°0¾

Cl nn) H° ..

Y^i O L IL » .^X^CHC-Cl NH O ^KH ! 0=C-CH„-NH-C-!H-C^ d nh2

HO

" Χλ

CH-C-C1 I OH

HH i 0=0-ΝΗ_^^γΝ^

pp) O

(CH^CHC^CHC-Cl - o-fi-k0/

O

M) /=\' li / V-CH-C-C1 h-CH-

V

DK 160613B

23 som hydrochloridet, om ønsket,

O

rr) B-CH-C-Cl 5 ft 0 "-ύ 10 hvori B betegner R2 15 — eller eller i i 20 1 2 hvori R betegner hydrogen, hydroxy eller acetøxy, og R betegner hydro- 1 2 gen, chlor eller hydroxy, når R er hydroxy, og R betegner hydrogen, når R^ er hydrogen eller acetoxy, 25

SS) O

B-CH-C-Cl 0=C-ChTgNH-C—(( j'

30 xmzJ

hvori B betegner R2 35 r1"v^— eiier (iiL eiier i-! 24 DK 1606138 5 1 2 hvori R betegner hydrogen, hydroxy eller acetoxy, og R betegner hydro- 1 2 gen, chlor eller hydroxy, når R er hydroxy, og R betegner hydrogen, når R er hydrogen eller acetoxy, j i i j 10 tt)

B-CH-C-C1 ® OH

°=c /L

15 L ]! J—K N-CKO

hvori B betegner 20 R^_ ..

— eller 25 O- 30 1 2 hvori R betegner hydrogen, hydroxy eller acetoxy, og R betegner hydro- 1 2 gen, chlor eller hydroxy, når R er hydroxy, og R betegner hydrogen, når R* er hydrogen eller acetoxy, 35

DK 160613 B

25 " A.

M II

5 <Η·^1-C-Cl iL\ ''CHj 0 w) ,___CHC-C1 ” 5X r» 0 15

K

hvori R betegner hydrogen eller methyl, 20 ww) 0 B-CH-C-C1

KH

c=o 25 H5C-C-CH3 0 <* 30 *

Cl hvori B betegner 35 H2_ eller ML eller

DK 160613 B

26 - | Ό- 5 1 2 hvori R betegner hydrogen, hydroxy eller acetoxy, og R betegner hydro- 1 2 gen, chlor eller hydroxy, når R er hydroxy, og R betegner hydrogen, når R* er hydrogen eller acetoxy.

Syrechlorider fremstilles normalt under kraftige betingelser, såsom 10 ved behandling af syren under tilbagesvaling med thionylchlorid, men de kan, når følsomme grupper er til stede, herunder følsomme blokerende grupper, fremstilles under praktisk taget neutrale betingelser ved omsætning af et salt af syren med oxalylchlorid.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere i de følgende 15 eksempler.

Eksempel 1

Til en blanding af 6-aminopenicillansyre (6-APA) og 10 ml CD2C12 og 1,13 ml trimethylchlorsil an ved en temperatur på 25-27°C sattes dråbevis 20 1,23 ml triethylamin over et tidsrum af 30 minutter. Omrøring fortsattes i yderligere 2 timer. Tør carbondioxidgas bobledes dernæst i blandingen i ca. 3 timer. Ved slutningen af dette tidsrum viste NMR (kernemagnetisk resonans) tilstedeværelsen af 60% silyleret carboxy-6-APA (SCA) med strukturen 25 (CH^Si-O-C-HN-j-f P'CHj 30 - y~N_

O C-0-Si(CH,U

Il 33 0 35

Blandingen holdtes i køleskab natten over. Næste morgen tilsattes 0,77 ml Ν,Ν-dimethylanilin, og blandingen afkøledes til -8°C. Dernæst til sattes 1,2 g D-(-)-p-hydroxy-2-phenylglycylchlorid,hydrochlorid (79%

DK 160613 B

27 renhed) i portioner som følger:

Tid i Temperatur Gram, tilsat minutter _°C_ 50 -8 0,30 20 -4 0,30 40 -4 0,30 60 -4 0,30 120 +8 10 220 +15 310 +20

Ved afslutningen af de 310 minutters reaktionsperiode viste tyndt-lagskromatografi (TLC) foretaget på en prøve af reaktionsblandingen 15 under anvendelse af et opløsningsmiddel system, som var 60% ethyl acetat, 20% eddikesyre og 20% vand, tilstedeværelsen af amoxicillin.

Til en kold, 2 ml prøve af den endelige reaktionsblanding sattes 1,0 ml D20. Efter adskillelse ved centrifugering viste den vandige fase sig ved NMR at indeholde 78% amoxicillin og ca. 20% 6-APA. Tilstede-20 værelsen af amoxicillin bekræftedes også ved TLC.

Eksempel 2

En blanding af 5,4 g (0,025 mol) 6-aminopenicillansyre og 6,2 ml 93% hexamethyldisilazan (HMDS; 0,0275 mol) samt 0,07 g (ca. 0,001 mol) 25 imidazol i 40 ml CH2C12 tilbagesval edes under nitrogenskylning i ca.

17,5 timer. Ved slutningen af denne periode tilsattes 0,13 ml (ca. 0,001 mol) trimethylchlorsilan (TMCS). Opløsningen blev uklar. Tilbagesvaling fortsattes i yderligere 7 timer, og afsætninger af NH^Cl iagttoges i kondensatoren. På dette tidspunkt viste NMR ca. 100% silylering af både 30 amino- og carboxyl gruppen i 6-APA. Der tilsattes dernæst 0,2 ml HMDS (0,00125 mol; ca. 5 molprocent) og 0,06 ml TMCS (ca. 0,0005 mol), og tilbagesvaling med nitrogenskylning fortsattes i yderligere 17 timer. På dette tidspunkt var NMR-spektret det samme som før med tilføjelsen af små mængder HMDS og TMCS. Tør carbondioxid bobledes dernæst i reaktions-35 blandingen ved stuetemperatur i 75 minutter, hvorefter NMR ikke viste HMDS og mere end 92% silyleret carboxy-6-APA (SCA). Der tilsattes dernæst 4,45 ml Ν,Ν-dimethylanilin (DMA) (0,035 mol), og blandingen afkøledes til -3°C. Der tilsattes dernæst 5,65 g D-{-)-2-phenylglycylchlorid DK 160613B : i 28 (95% renhed; 0,026 mol) i portioner som følger:

Tid i Temperatur Gram, tilsat minutter _°C__ 5 0-3 1,05 20 0 1,30 40 0 1,30 50 0 1,00 60 0 1,00 10

Reaktionen fulgtes ved NMR, som viste meget lille ændring ca. 5 timer efter starten af reaktionen. Temperaturen var da 3°C. Reaktions-blandingen holdtes pakket i is i de næste 16 timer. Den fjernedes dernæst fra køling og omrørtes i 3,5 timer ved stuetemperatur (ca. 20-15 24°C). En stor mængde fast materiale var stadig tilstede. Reaktionsblandingen omrørtes dernæst ved stuetemperatur (22-24°C) i ca. 63 timer.

Ved slutningen af dette tidsrum var der kun let uklarhed. Ved DgO-ekstraktion af en prøve viste NMR ampicillin og 6-APA. !

Reaktionsblandingen afkøledes til ca. 0°C og omrørtes 5 minutter i j 20 kulden efter tilsætning af 35 ml isvand. Efter poleringsfiltrering vaskedes blandingen med koldt vand og CH^Clg. Den vandige fase viste | efter fraskil!el se, ved hjælp af TLC en stor zone, som var langsommere end ampicillin og 6-APA, og som repræsenterede nyt mellemprodukt X.

Den vandige fase indstilledes på pH-værdi 3,0 med NH^OH og podedes j 25 med ampicillin. Methyl isobutylketon (MIBK; 35 ml) tilsattes, og blandingen omrørtes, indstilledes på pH-værdi 5,2 med mere NH^OH, omrørtes ved 20°C i 1 time, omrørtes i et isbad i yderligere 1 time og køledes natten over. Bundfaldet af ampicillin opsamledes ved filtrering, vaskedes først med 25 ml koldt vand og dernæst med 40 ml MIBK og endelig med 40 ml af 30 en bl anding af 85 dele isopropylal kohol og 15 dele vand, tørredes ved 50°C og viste sig at veje 4,5 g med dets identitet som ampicillin bekræftet ved TLC.

Eksempel 3 35 En blanding af 5,4 g 6-APA, 6,2 ml HMDS (93%) og 0,06 g imidazol i 50 ml CHgC^ til bagesval edes under nitrogenskylning i 18 timer. Dernæst tilsattes 0,1 ml TMCS, som bevirkede uklarhed. Tilbagesvaling i yderligere 2 timer gav en klar opløsning med NH^Cl i kondensatoren. Der

DK 160613 B

29 tilsattes dernæst yderligere 0,1 ml TMCS, som kun efterlod meget ringe uklarhed. Tilbagesvaling fortsattes uden nitrogenskylning i de næste 65 timer. Blandingen afkøledes dernæst til ca. 22°C, og tilsætning af tør carbondioxid påbegyndtes. Efter 75 minutter viste NMR dannelsen af mere 5 end 90% bis-silyleret carbamat (SCA). Der tilsattes dernæst 4,45 ml DMA og dernæst 5,6 g D-(-)-2-phenylglycylchlorid,hydrochlorid (97% renhed) i portioner som følger:

Tid i Temperatur Gram, tilsat 10 minutter _°C_ 0 20 1,35 20 20 1,30 32 20 1,00 48 20 1,00 15 75 20 1,00

Efter at denne blanding var blevet omrørt i yderligere 17 timer foretoges TLC på prøver af reaktionsblandingen og på fortyndet reaktionsblanding (1 ml af reaktionsblandingen fortyndet med 2 ml CHgClg) og 20 viste i hver en lille zone af ampicillin og en stor zone af nyt mellemprodukt X.

Reaktionsblandingen afkøledes dernæst til 0°C, 40 ml isvand tilsattes, og blandingen omrørtes i 5 minutter, poleringsfiltreredes og vaskedes med vand og med Ch^Clg. Den vandige fase fraskiltes, 10% fjer-25 nedes til prøvning, og resten indstilledes på pH-værdi 3,0 med NH^OH, podedes med ampicillin og omrørtes. Efter tilsætning af yderligere 40 ml MIBK omrørtes blandingen, og pH-værdien indstilledes på 5,2 med NH^OH og omrørtes ved stuetemperatur i i time oq dernæst på et isbad i yderligere 1 time. Krystaller udfældede. Efter afkøling natten over opsamledes det 30 krystallinske produkt ved filtrering, vaskedes successivt med MIBK, vand og MIBK Og dernæst med 40 ml isopropanol-vand (85-15) og tørredes ved 45°C til dannelse af 6,25 g ampicillin (6,8 g korrigeret for prøvning eller et udbytte på 68%).

35 Eksempel 4

Til en blanding af 1,0 g 6-APA og 1,13 ml TMCS i 10 ml CDgC^ sattes dråbevis 1,23 ml TEA over 30 minutter, og blandingen omrørtes i yderligere 2 timer. Tør carbondioxid tilbobledes dernæst i 4 timer. På

DK 160613B

30 · dette tidspunkt viste NMR ca. 55-60% carboxysilylering. Blandingen holdtes i køleskab natten over. Om morgenen tilsattes 0,77 ml DMA, blandingen omrørtes, afkøledes til -8°C, og der tilsattes 1,2 g D-(-)-p-hydroxy-2-phenylglycylchlorid,hydrochlorid i portioner som følger: 5

Tid i Temperatur Gram, tilsat minutter __°C_; 0 -8 0,30 20 -4 0,30 10 40 -4 0,30 60 -4 0,30 120 8 220 15 310 20 15 ! ;

Ved slutningen af 310 minutters perioden viste NMR ca. 78% amoxi- j cillin og ca. 20% 6-APA. ' i

Eksempel 5 20 Tør 6-aminopenicillansyre (10,0 g, 46,24 mmol, 1,0 ækv.) suspenderedes i vandfri methylenchlorid (175 ml) under omrøring ved 25°C. Tri-ethylamin (10,76 g, 106,36 mmol, 2,30 ækv.) tilsattes ved 25°C efterfulgt af tilsætning af trimethylchlorsil an (11,70 g, 107,75 mmol, 2,33 ækv.) over et 10-15 minutters tidsrum, idet temperaturen holdtes under 25 ca. 32°C ved hjælp af tilsætningshastigheden for trimethylchlorsilan.

Efter omrøring i 20-30 minutter analyseredes blandingen, som indeholdt udfældet triethylamin,hydrochlorid, for fuldstændig silylering ved 80 MHz NMR. Blandingen forgassedes dernæst med carbondioxid ved 20°C i ca.

2 timer og analyseredes for fuldstændig carboxylering ved 80 MHz NMR.

30 Yderligere gastilsætning var undertiden nødvendig. Volumenet af carboxyleringsblandingen genindsti11 edes om nødvendigt til ca. 175 ml med tør methylenchlorid. Da carboxyleringen var fuldstændig, behandledes opslæmningen med propylenoxid (2,95 g, 3,56 ml, 50,87 mmol, 1,1 ækv.) og afkøledes til 0-5°C. D-(-)-2-(p-hydroxyphenyl)glycylchlorid,hydrochlorid 35 hemidioxansolvat tilsattes i 5 X 2,71 g portioner ved ca. 2°C [i alt 13,54 g (50,87 mmol, 1,1 ækv.) tilsattes]. Hver portion syrechlorid fik lov at opløse, før den næste portion tilsattes. (Omrørinq blev afbrudt og blandingen undersøgt for eventuelt fast stof på bunden af kolben.

DK 160613 B

31

Opslæmningen må ikke opvarmes under 5°C til denne test, da resultaterne kan blive fejlagtige). Dette krævede ca. 20 minutter pr. portion. Denne portionsvise tilsætning var meget vigtig. Den endelige acyleringsblånding undersøgtes for eventuelt uopløst syrechlorid,hydrochlorid. Blan-5 dingen holdtes ved 0-5°C i 30 minutter og behandledes med koldt (0-5°C) deioniseret vand (DI) (100 ml) under meget hurtig omrøring i 10 minutter. Blandingen fik lov at separere, og den nedre methylenchloridfase fjernedes. Den vandrige fase poleringsfiltreredes (meget ringe mængde fast stof) gennem en tynd (Dicalite) forbelægning af diatoméjord, og 10 kagen vaskedes med koldt (0-5°C) DI vand (15 ml). Eventuel nedre fase af organisk lag fjernedes før krystallisering. Den klare, lysegule vandige opløsning (pH 2-2,5) indstilledes på pH-værdi 3,5 ved 0-5°C og podedes om nødvendigt. Opslæmningen holdtes ved 0-5°C i 40 minutter, og pH-værdien indstilledes på 4,8-5,0 med 6N ammoniumhydroxid og krystal-15 liseredes i 2 timer. Opslæmningen filtreredes, og det således opsamledes faste amoxicillin vaskedes med en blanding af kold (0-5°C) 1:1 isopropanol/vand, og kagen vaskedes med methylenchlorid (30 ml), hvilket gav ca. 13,5 g (ca. 70%) snehvid amoxici11 in,tri hydrat.

20 Eksempel 6 6-aminopeniciliansyre (108 g, 0,5 mol), 1,0 g imidazol (0,017 ml), 800 ml tør methylenchlorid og 120 ml (0,56 mol) HMDS (ca. 98% renhed) omrørtes og opvarmedes til tilbagesvaling i 3,3 timer. Reaktionsblandingen skylledes med tør nitrogengas under tilbagesvalingen for at 25 fjerne NHg dannet under reaktionen. Dernæst tilsattes 2,0 ml trimethyl-chlorsilan (TMCS) (0,016 mol). Tilbagesvaling fortsattes med N2-skylning i yderligere 19 timer, og dernæst var det i kondensatoren sublimerede NH^Cl fjernet, og 2,6 ml TMCS (0,0206 mol) tilsattes til reaktionen. Tilbagesvaling med N2-skylning fortsattes i yderligere 34 timer. Volume-30 net af reaktionsblandingen bragtes til 1000 ml med tør methylenchlorid.

NMR viste da 100% silylering af amino- og carboxyl gruppen på 6-amino-peniciliansyren. Opløsningen dækkedes med N2-gas og holdtes i 9 dage.

NMR bekræftede ovenstående og stabiliteten. Opløsningen omrørtes, og C02 tilbobledes i ca. 90 minutter. Temperatur 20-22°C. NMR viste 100% omdan-35 nelse af bis-trimethylsilyl-6-aminopenicillansyren til bis-trimethyl-silylcarboxy-6-aminopenicillansyre (SCA).

Denne basisblanding anvendtes til de nedenfor beskrevne acylerings-forsøg. Den kemiske forbindelse i denne opløsning havde formlen

DK 160613 B

32 S /s 5 (CH^Si-O-C-HN-j-f p-CH5 i }~ K-1 ' i

O C-O-Si(CH^)-^ I

O i i 10 i NMR viste, at bis-trimethylsilylcarboxy-6-aminopenicinansyren var stabil efter 9 dage. j i 100 ml af basisblandingen (SCA ækvivalent med 10,8 g 6-aminopeni- | cillansyre, 0,05 mol) omrørtes ved 22°C, og 0,0 g TEA,HC1 (0,058 mol) og 15 4,2 ml propylenoxid (0,06 mol) (se U.S.A. patentskrift nr. 3.741.959) tilsattes. Noget TEA,HC1 bundfældede. Blandingen omrørtes og afkøledes j til +3°C. 15,5 g D-(-)-p-hydroxyphenylglycylchlorid,hydrochlorid hemi-dioxansolvat (79% renhed, 0,055 mol) tilsattes reaktionsblandingen i portioner som følger: 20

Gram, tilsat Tid i Temperatur minutter _°C_ 3.0 0 +3 3.0 7 +2 25 3,0 20 +2 6,5 33 +2 15,5

Efter yderligere 70 minutter tilsattes ca. 50 ml tør methylen-30 chlorid til reaktionsblandingen for at reducere viskositeten.

Efter yderligere 160 minutter fjernedes en 2 ml prøve og sattes til 1,0 ml DgO. Efter centrifugering viste NMR-analyse af den vandige fase ca, 6% uacyleret 6-aminopenicillansyre.

10 minutter senere overførtes reaktionsblandingen til et 600 ml 35 bægerglas, og overføringen afsluttedes ved vaskning med 50 ml methylen-chlorid. Under omrøring i et isbad tilsattes 60 ml koldt deioniseret isvand til frembringelse af en opløsning af to faser uden indhold af faste stoffer og med en pH-værdi på 1,0.

DK 160613 B

33 15,0 ml flydende anionbytterharpiks ("LA-1") sattes til tofase-systemet under omrøring og podning ved pH-værdi 2,0. Krystallisation beqyndte. Yderligere 10,0 ml LA-1 tilsattes langsomt over ca. 5 minutter. pH-værdien var 3,0. Der tilsattes dernæst 0,15 g NaBH4. Dernæst 5 tilsattes 5,0 ml LA-1; pH-værdien var 4,5. Omrøring fortsattes, og der tilsattes 1,0 g NaHS03 (natriumbisulfit) i 4,0 ml vand dråbevis. Der tilsattes dernæst 10,0 ml LA-1; pH-værdien fortsatte med at stige. I alt 40 ml LA-1, den endelige pH-værdi var 5,6. Der tilsattes dernæst 5 ml acetone. På dette tidspunkt tilsattes 1,5 g NaH503 opløst i 6,0 ml vand, 10 over 30 minutter. Omrøring i isbad fortsattes. Det udfældede produkt opsamledes ved filtrering, og kagen vaskedes successivt med 50 ml methylenchlorid, 40 ml vand, 100 ml isopropyl al kohol-vand (80:20) og 100 ml methylenchlorid. Kagen tørredes dernæst ved atmosfæretryk og 45°C til opnåelse af 18,2 g amoxicillin,tri hydrat, der var et udbytte på 87% 15 baseret på 6-aminopenicillansyre; korrigeret for 1% til prøVning var det samlede udbytte ca. 88%.

"LA-1" flydende anionbytterharpiks er en blanding af 10 sekundære aminer, hvori hver sekundær amin har formlen 20 R1 ch3c(ch3)2ch2c(ch3)2ch2ch=ch-ch2nhc-r2 H3 12 3 hvori hver af R , R og R er en al i fati sk carbonhydridgruppe, og hvori 25 R , R og R i aggregatet indeholder fra 11 til 14 carbonatomer; denne særlige blanding af sekundære aminer, der undertiden omtales som "Liquid Amine Mixture No. I", er en klar ravgul væske med følgende fysiske egenskaber: viskositet ved 25°C på 70 cps; specifik vægtfylde ved 20°C på 0,845; brydningsindeks ved 45°C på 1,467; desti 11ationsinterval ved 30 10 mm: indtil 160°C 4%, 160 til 210°C - 5%, 210 til 220°C - 74%, over 220°C - 17%.

Eksempel 7

En methylenchloridopløsning (5,0 ml) af trimethylsilyl-6-35 trimethylsilyloxycarbonylaminopenicillinat (0,54 g, 2,497 mmol) behandledes med triethylamin,hydrochlorid (0,20 g, 1,45 mmol) efterfulgt af propylenoxid (0,162 g, 2,75 mmol) ved 25°C. Blandingen omrørtes ved 25°C i 20 minutter for at lette opløsning af det meste af tri ethyl-

DK 160613 B

/34 amin,hydrochloridet, Phenoxyacetylchlorid (0,43 g, 2,75 mmol) tilsattes dråbevis ved 25°C, og blandingen omrørtes ved 25°C i 30 minutter. En prøve fjernedes og analyseredes ved CMR ved 20,0 MHz. CMR (carbon-13 kernemagnetisk resonans-spektroskopi)-data viste fuldstændig forsvinden 5 af phenoxyacetylchlorid samt APA-carbamatet og forekomsten af penicillin V trimethylsilylester. Tilstedeværelsen af penicillin V trimethylsilyl- ester påvistes ved spektralsammenligning med en identisk prøve fremstillet ved silylering af den frie penicillin V syre med triethylamin og trimethylchlorsilan. Udbyttet skønnedes ud fra CMR-spektret at være 85- .

10 90%. j På tilsvarende måde fremstilledes under anvendelse af de samme molære mængder reagenser og det passende syrechlorid cloxacillin, ! dicloxacillin, staphci1lin og nafcillin. CMR data på disse acylerings- j blandinger viste en ekstremt ren acyleringsblånding med udbytter skønnet 15 til mindst 85%. j

Eksempel 8 j

Omsætning i henhold til de foregående fremgangsmåder af en forbindelse med formlen 20

n HH

8 ij/KzCH3 (CH3)3Si-0-C-NH-W2J\CH3 25 cT Lo _ ^O-B____ 30 hvori B er en let fraspaltelig ester-beskyttende gruppe udvalgt fra gruppen bestående af trimethylsilyl, benzhydryl, benzyl, p-nitrobenzyl, p-methoxybenzyl, trichlorethyl, phenacyl, acetonyl, methoxymethyl, 5-indanyl, 3-phthalidyl, l-[(ethoxycarbonyl)oxyl]ethyl, pivaloyloxy- 35 methyl og acetoxymethyl med et reagens, som et det passende syrechlorid eller syrechlorid,hydrochlorid, hvilket reagens indeholder blokerende grupper efter behov, efterfulgt af fjernelse af eventuelle blokerende grupper, hvis fjernelse er ønskelig, giver følgende forbindelser: 35

DK 160613 B

almecillin, armecillin, azidocillin, azlocillin, bacampicillin, Bay K 4999 med formlen 5 H°~fX *' ' S VCH5 j—CH-CONH—r—f

Xk— . CH3

I« 0 o COOH

10 0=C 8,' ]j Π 0 BL-P1654 med formlen 15 /=\ CH_ \J-f - COHH-pY3^ " I J—N- Cti3 m o^ i

COOH

20 0=C-NH-(r XNH2 BL-P1908 med formlen 25 HO—CH, X ii—CH - CONH—-S X'

jT ^ C HL

Λ—H- j)

OH 0 COOH

30 I

0=cli f

H

35 carfecillin, carindacillin, cyclacillin, clometocillin, cl oxacillin, dicloxacillin, EMD-32412 med formlen 40

DK 160613 B

36

H°—CH

S / 3 ^/^“CH-CONH—-r

| J—N- CH3 I

5 f* ° OH COOH ! 0=C-NH^I^^ ^ isr^' 10 epicillin, floxacillin (flucloxacillin), furbucillin, hetacillin, I.S.F.-2664 med formlen 15

S

L CH - CONH—j-S

VJ^i T3_b«,8 N-Cl·^ 0^ O^-OCHgOC-CCCK^)^ 20 ' .

nh2 isopropici1 lin, methicillin, mezlocillin, nafcillin, oxacillin, 25 phenbenicillin, PC-455 med formlen /=\ .s Λ H°—(\ /)—CH - CONH—-f V v I_jr__ CH3

30 :ra o 0 C00H

"'ύ 35 aparcillin (PC-904) med formlen

DK 160613 B

37 /ch5 \ y—CH-CONH—r—f S>1\ \=/ I Ti- CH?

5 ψ- 0 COOH

I HO

°=C^ls_^r 10 piperacillin, 3,4-dihydroxypiperaciHin, pirbenicillin, pivampicillin, PL-385 med formlen 15 w~f^il s./c"3 JJ- CH-CONH·—i-f \ I . Λ.τ ' CH-, I Ori ^—N- 3

on ® i ° COOH

0=C I / \

'S--N N - CHO

N \_/ 25 prazocillin, sarmoxicillin, sarpicillin, ticarcillin, cresylnatrium, ticarcillin, carbenicillin, carfecillin, fibracillin og Bay-e-6905 med formi en Q>-ch - connjY^fcib

iH COOH

c=o

35 I

N /0 rΫ

«-NH

Claims (5)

5 DK 160613 B 38 .

1. Fremgangsmåde til fremstilling af et konventionelt penicillin med formlen s ! Ls/*3 R-C-NHtl>cH3 *

10. OH 0 hvori R-i- betegner resten efter fjernelse af hydroxyl gruppen fra en organisk carboxylsyre indeholdende fra 2 til 20 carbonatomer, ved 15 hvilken man med syrechloridet af den organiske carboxylsyre acylerer en si lyleret kerne med formlen i | CH, 20 (ch3)3sinh (\CH Λ-Ν--\ 3

0 K ^O-B 25 hvori B betyder en let fraspaltelig ester-beskyttende gruppe, og dernæst omdanner gruppen B til hydrogen, KENDETEGNET ved, AT man før acyleringen omdanner den silylerede kerne til en forbindelse med formlen 30 n Η H » I :V^/ch3 0. u°

35 Nd-B hvori B har samme betydning som ovenfor anført, ved at man sætter tørt DK 160613 B carbondioxid til en opløsning af en forbindelse med formlen i L^/ch3 o U° ^O-B 10 hvori B har den ovenfor anførte betydning, i et vandfrit inert organisk opløsningsmiddel ved en temperatur i intervallet fra 0°C til 100°C, til omsætningen er tilendebragt.

2. Fremgamgsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af en 6-a-aminoarylacetamidopenicillansyre, KENDETEGNET ved, AT man omsætter en 15 forbindelse med formlen O - ς /C'rL· II /S\ / 3 (CH^Si-O-C-HH-CH-CH C.^ .

20 J-K-

0 C-0-Si(CH,), II 33 O 25. et vandfrit inert organisk opløsningsmiddel med omtrentlig en ækvimolær mængde af et D-(-)-a-aminoarylacetylchlorid,hydrochlorid, fortrinvsi s ved en temperatur over -10°C.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af amoxicillin, KENDETEGNET ved, AT man omsætter en forbindelse med formlen 30 ' \ (CH^)^Si-O-C-NH-CH—CH ]-N-CH

35 CT C-0-Si(CH,) ' II 3 3 o DK 1606.13 B i et vandfrit inert organisk opløsningmiddel med omtrentlig en ækvimolær mængde D-(-)-2-p-hydroxyphenylglycylchlorid,hydrochlorid, fortrinsvis ved en temperatur over -10°C.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af ampicillin,

5 KENDETEGNET ved, AT man omsætter en forbindelse med formlen ! 10 (CH5)3Si-0-C-NK-CH-CH i-K-CH 0/. C-0-3i(CHO, ^11 33 o 15 i et vandfrit inert organisk opløsningsmiddel med omtrentlig en ækvimolær mængde D-(-)-2-phenylglycylchlorid,hydrochlorid, fortrinsvis ved en temperatur over -10°C. 20 25 30 35