NO158541B - Fremgangsmaate for fremstilling av et penicillin. - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en spesiell fremgangsmåte for fremstilling av antibakterielle midler av den klasse som vanligvis kalles semi-syntetiske penicilliner, og fortrinnsvis av den underklasse som karakteriseres ved en oc-aminogruppe på acylsiden i 6-stilling, slik som i ampicillin og amoksicillin.

Det første kommersielle penicillin med en a-aminogruppe på 6-acylamidosidekjeden var ampicillin, som er 6-(D-a-amino-a-fenylacetamido)penicillansyre (se US-patent 2 985 648).

Amoksicillin er et antibakterielt middel som anvendes i humanterapien og markedsføres som et trihydrat av den frie syre (dvs. zwitterionet). Forbindelsen er f. eks. beskrevet i britisk patent nr. 978 178, i "J. Chem. Soc." (London), s. 1920-1922 (1971) og i "Antimicrobial Agents and Chemother-apy", 1970, s. 407-430 (1971). Det kjemiske navn er 6-[D-a-amino-a-(p-hydroksyfenyl )acetamido]penicillansyre.

Anvendelse av aminosyreklorid, hydroklorider for fremstilling av slike penicilliner er omhandlet i patentlitteraturen, f. eks. i GB-PS 938 321 og 959 853, under vannfrie betingelser, (sistnevnte anvendte beskyttelse under acyleringen av 6-aminopenicillansyrens karboksygruppe med en silylgruppe, slik som også omhandlet i GB-PS 1 008 468 og US-PS 3 249 622) samt i GB-PS 962 719, i kald vandig aceton. Disse penicilliner er amfotære aminosyrer og det anvendes derfor til deres isolering (slik som f. eks. omhandlet i US-PS 3 157 640 og 3 271 389) visse alifatiske usymmetriske forgrenede sekundære aminer (ofte kalt flytende aminharpikser), som tidligere hadde vært anvendt til isolering av 6-aminopenicillansyre som også er en amfotær aminosyre (se US-PS 3 008 956). Forbed-rede fremgangsmåter for isolering og rensing av slike penicilliner er omhandlet f. eks. i US-PS 3 180 862 via p-naftalensulfonater og i TJS-PS 3 198 804 via mellomliggende isolering og etterfølgende lett hydrolyse av hetacillin.

Anvendelsen av en silylgruppe til beskyttelse av karboksy-gruppen i et naturlig penicillin under kjemisk spalting til 6-aminopenicillansyre er omhandlet i US-PS 3 499 909. Anvendelsen av silylert 6-aminopenicillansyre under vannfri acylering med aminosyreklorid, hydroklorid er omhandlet i tallrike patenter, f. eks. US-PS 3 479 018, 3 595 855, 3 654 266, 3 479 338 og 3 487 073. Noen av disse patenter omhand-ler også bruken av flytende aminharpikser, se også US-PS 3 912 719, 3 980 637 og 4 128 547.

GB-PS 1 339 605 inneholder forskjellige spesifikke og detaljerte eksempler på fremstilling av amoksicillin ved omsetning av et silylert derivat av 6-aminopenicillansyre med et reaksjonsdyktig derivat (herunder klorid, hydroklorid) av D-(-)-a-amino-p-hydroksyfenyleddiksyre, der aminogruppen er beskyttet, deretter fjerning av silylgruppen eller -gruppene ved hydrolyse eller alkoholyse og deretter, hvis mulig, utvinning av amoksicillin, vanligvis som det krystallinske trihydrat. Således ble det oppnådd krystallinsk amoksicillin i Eks. 1 ved isoelektrisk utfelling fra en vandig oppløsning, f. eks. ved en pH-verdi på 4,7. Rensing oppnås formentlig i dette eksempel ved oppløsning av råproduktet (før isoelektrisk utfelling) i vann ved en sur pH-verdi som 1,0 (f. eks. i vandig saltsyre) i nærvær av et med vann ublandbart organisk oppløsningsmiddel, slik som metylisobutylketon (4-metylpentan-2-on). I det vesentlige samme fremgangsmåte ble anvendt i US-PS 3 674 776.

Fra "Synthesis", mai 1970, s. 259-260, kjennes en fremgangsmåte for fremstilling av N-silyloksykarbonylaminosyrederi-vater fra N-silylerte aminosyrederivater ved tilførsel av karbondioksyd. Artikkelen inneholder dog intet som kan henlede tanken på å anvende en slik reaksjon på en penicil-1 inforbindelse for å oppnå et karbamatmellomprodukt som tåler acylering under dannelse av ønskede penicilliner, da det er kjent at p<->laktamringen i penicillin er meget følsom.

Foreliggende oppfinnelse har til hensikt å forbedre den kjente teknikk og angår således en fremgangsmåte for fremstilling av et penicillin med formelen

hvor R-CO- er a-aminofenylacetyl hvor fenylringen eventuelt kan være substituert med en hydroksygruppe i parastilling, eller fenyloksyacetyl, og denne fremgangsmåte karakteriseres ved at:

a) en N-silylert forbindelse med formelen:

der B er en lett avspaltbar esterbeskyttende gruppe i form asv trimetylsilyl, omdannes før acylering til en forbindelse med formelen:

der B har den ovenfor angitte betydning, ved at man til en oppløsning av den silylerte forbindelse i et vannfritt organisk oppløsningsmiddel, tilsetter tørr karbondioksyd ved en temperatur innen området 0 til 100°C inntil reaksjonen er ferdig,

b) hvoretter den oppnådde forbindelse omsettes med et syreklorid med formelen RC0C1, hvor R har den ovenfor angitte

betydning ved en temperatur over -10°C og fortrinnsvis innen intervallet 0 til 20°C, hvoretter gruppen B omdannes til hydrogen.

Et av de overraskende trekk ved den hittil ukjente fremgangsmåten er stabiliteten av den vannfrie acyleringsoppløsningen. Denne kan holdes i lange tidsrom, selv ved romtemperatur, uten merkbar dekomponering av penicillinmolekylet. Dette står i motsetning til oppførselen av acyleringsoppløsninger i tidligere beskrevne fremgangsmåter. Denne stabilitetsfordel muliggjør at man kan utføre acyleringsreaksjonen ved langt høyere temperaturer (her ble det anvendt romtemperatur) enn vanligvis anvendt i ampicillinfremstillingen, som normalt er under 0°C og karakteristisk ca. -10°C.

De overraskende og uventede trekk ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen kan oppsummeres som følger: a) Acyleringen kan gjennomføres ved en langt høyere temperatur enn vanlig uten utbyttetap; b) Acyleringsblandingen er meget stabil og holdes i 24 timer ved 5°C uten noe utbyttetap. Dette er i sterk motsetning til andre vannfrie acyleringsprosesser som. viser utstrakt nedbrytning i løpet av dette tidsrom ved denne temperatur; c) Det oppnås alltid meget høye utbytter på 85$ eller mer; d) Fremgangsmåten kan anvendes til fremstilling av amoksycillin av meget høy kvalitet og som ikke inneholder toksiske baser slik som N,N-dimetylanilin eller N-metylmorfolin. e) Den karboksylerte blanding som inneholder det nye mellomprodukt har en i praksis uendelig stabilitet.

Intet tap av utbytte kan bemerkes etter oppbevaring ved romtemperatur i flere uker;

f) Det opptrer ingen eksoterm reaksjon under acyleringen, noe som ville kreve avkjøling på samme måte som ved

andre acyleringsprosesser.

Forbindelsen med formelen

omtales her ved forskjellige tivialnavn slik som bis-silylert karbamat av 6-APA, SCA, 6-trimetylsilyloksykarbonylpenicil-lansyre TMS-ester og TMSO2C, APA, TMS.

Selve eksistensen av denne forbindelse er overraskende i betraktning av den velkjente kjennsgjerning at omsetning av 6-APA med karbondioksyd ødelegger 6-APA og gir 8-hydroksypen-icillansyre slik som omtalt i US-PS 3 225 033.

Et middel for å oppnå kvantitative utbytter av 6-trimetyl-silyloksykarbonylaminopenicillansyre trimetylsilylester (TMS02C, APA, TMS) ligger i fullstendig å fremstille 6-APA bis-TMS-forløperen i første omgang. Dette ble oppnådd ved at man omsetter 6-APA med heksametyldisilazan (HMDS) som i følgende reaksjonsskjerna:

Avslutningen av bis-trimetylsilyleringsreaksjonen kan lett følges ved anvendelse av NMR. 3-trimetylsilyloksykarbonyl-gruppen viser en metylsilyl-singlett ved 0,31 ppm (tetrame-tylsilan = 0), mens 6-trimetylsilylaminogruppen viser en metylsilyl-singlett ved 0,09 ppm.

6-APA-trimetylsilyleringsreaksjonen er hittil kun blitt utført i metylenklorid. Andre oppløsningsmidler kan imidler-tid anvendes slik som f. eks. acetonitril, dimetylformamid eller endog sogar HMDS.

Omdannelse av trimetylsilylaminogruppen til trimetylsilyloksykarbonylaminogruppen oppnås lett ved å boble tørr C02 gjennom reaksjonsoppløsningen. Omdannelsen følges lett ved hjelp av NMR fordi triemtylsilylamino-singletten ved 0,09 ppm deklinerer etterhvert som det opptrer en ny singlett for trimetylsilyloksykarbonylaminogruppen ved 0,27 ppm.

Når fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse anvendes til fremstilling av ampicillin, ampicillinanhydrat, ampicil-lintrihydrat, amoksicillin og amoksicillintrihydrat, isoleres sluttproduktene og renses i henhold til konvensjonelle metoder som er velkjente innenfor teknikken, slik som angitt i US-PS 3 912 719, 3 980 637 og 4 128 547, samt andre deri angitte patentskrifter og publikasjoner.

Syreklorider fremstilles normalt under kraftige betingelser slik som ved behandling av syren under tilbakeløpskoking med tionylklorid, men de kan, når følsomme grupper er tilstede, herunder følsomme blokkerende grupper, fremstilles under praktisk talt nøytrale betingelser ved omsetning av et salt av syren med oksalylklorid.

Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen skal belyses nærmere i de følgende eksempler.

Eksempel 1

Til en blanding av 6-aminopenicillansyre (6-APA) og 10 ml CH2CI2 og 1,13 ml trimetylklorsilan ved en tempeatur på 25-27"C ble det dråpevis tilsatt 1,23 ml trietylamin i løpet av 30 minutter. Omrøring ble fortsatt i ytterligere 2 timer. Tørr karbondioksydgass ble deretter boblet gjennom blandingen i 2 timer. Tørr karbondioksydgass ble deretter boblet gjennom blandingen i ca. 3 timer. Ved slutten av dette tidsrom vist NMR-spektra nærvær av 60$ silylert karboksy-6-APA (SCA) med strukturen:

Blandingen ble holdt i kjøleskap over natten. Neste morgen ble det tilsatt 0,77 ml N,N-dimetylanilin og blandingen ble avkjølt til -8'C. Deretter ble det tilsatt 1,2 g D-(-)-p-hydroksy-2-fenylglycylklorid, hydroklorid med en renhet på 79 % i porsjoner som følger:

Ved slutten av reaksjonsperloden på 310 minutter viser tynnsjiktkromatografi (TLC), foretatt på en prøve av reaksj onsblandingen under anvendelse av et oppløsningsmiddel-system som var 60$ etylacetat, 20% eddlksyre og 20-% vann, nærvær av en amoksicillin.

Til en kald prøve på 2 ml av den endelige reaksjonsblanding ble det, satt 1,0 ml D2O. Etter separering ved sentrifugering viste den vandige fase ved hjelp av NMR å inneholde 78% amoksicillin og ca. 20$ 6-APA. Nærværet av amoksicillin ble også bekreftet ved TLC.

Eksempel 2

En blanding av 5,4 g eller 0,025 mol 6-aminopenicillansyre og 6,2 ml 93% heksametyldisilazan (HMDS; 0,0275 mol), samt 0,07 g eller ca. 0,001 mol imidazol i 40 ml CH2CI2 ble kokt under tilbakeløp under nitrogenspyling i ca. 17,5 timer. Ved avslutningen av denne periode ble det tilsatt 0,13 ml eller ca. 0,001 mol trimetylklorsilan (TMCS). Oppløsningen ble uklar. Tilbakeløpskokingen fortsatt i ytterligere 7 timer og avsetninger av NH4CI ble observert i kondensatoren. På dette tidspunkt viste NMR-spektra ca. 100% silylering både av amino- og karboksylgruppen i 6-APA. Det ble deretter tilsatt 0,2 ml eller 0,00125 mol (ca. 5 mol-%) HMDS og 0,06 ml eller ca. 0,0005 mol TMCS, og tilbakeløpskokingen under nitrogenspyling ble fortsatt i ytterligere 17 timer. På dette tidspunkt var NMR-spekteret det samme som før, men med tillegg av små mengder HMDS og TMCS. Tørr karbondioksyd ble deretter boblet gjennom reaksjonsblandingen ved romtemperatur 1 75 minutter, hvoretter NMR-spektra ikke viste HMDS og mer enn 92% silylert karboksy-6-APA (SCA). Det ble deretter tilsatt 4,45 ml eller 0,035 mol N,N-dimetylanilin (DMA), og blandingen ble avkjølt til -3°C. Det ble deretter tilsatt 5,65 g eller 0,026 mol D-( -)-2-fenylglycylklorid med en renhet på 95% i porsjoner som følger:

Reaksjonen ble fulgt ved NMR-spektra som viste meget liten endring ca. 5 timer etter reaksjonens begynnelse. Temperaturen var da 3°C. Reaksjonsblandingen ble holdt pakket i is de neste 16 timer. Den ble deretter fjernet fra kjøling og omrørt i 3,5 timer ved romtemperatur (ca. 20 - 24°C). En stor mengde faststoff var stadig tilstede. Reaksjonsblandingen ble deretter omrørt ved romtemperatur, 22 - 24°C i ca. 63 timer. Ved avslutningen av dette tidsrom var det kun en liten uklarhet. Ved D20-ekstraksjon av en prøve viste NMR-spektra ampicillin og 6-APA.

Reaksjonsblandingen ble avkjølt til ca. 0°C og omrørt i 5 minutter i kulden etter tilsetning av 35 ml isvann. Etter filtrering ble blandingen vasket med kaldt vann og CBtøC^. Den vandige fase viste etter fraskillelse ved hjelp av TLC en stor sone som var langsommere enn ampicillin og 6-APA, og som representerte et nytt mellomprodukt X.

Den vandige fase ble innstilt til en pH-verdi på 3,0 ved hjelp av NH4OH og ble podet med ampicillin. Metylisobutylketon (MIBK) ble tilsatt i en mengde på 35 ml og blandingen ble omrørt, innstilt til en pH-verdl på 5,2 med mere NH40H, omrørt ved 20° C i 1 time, omrørt i et isbad i ytterligere 1 time og avkjølt over natt. Bunnfallet av ampicillin ble oppsamlet ved filtrering, først vasket med 25 ml kaldt vann og deretter med 40 ml MIBK og til slutt med 40 ml av en blanding av 8 deler Isopropylalkohol og 15 deler vann, tørket ved 50°C og viste seg å veie 4,5 g idet identiten som ampicillin ble bekreftet ved TLC.

Eksempel 3

En blanding av 5,4 g 6-APA, 6,2 ml 93% HMDS og 0,06 g imidazol i 50 ml CH2CI2 ble kokt under tilbakeløp og nitrogenspyling i 18 timer. Deretter ble det tilsatt 0,1 ml TMCS som bevirket uklarhet. Tilbakeløpskoking i ytterligere 2 timer ga en klar oppløsning med NH4CI i kondensatoren. Det ble deretter tilsatt ytterligere 0,1 ml TMCS som kun etterlot en meget liten uklarhet. Tilbakeløpskokingen ble fortsatt under nitrogenspyling i de neste 65 timer. Blandingen ble deretter avkjølt til ca. 22°C og man påbegynte tilsetningen av tørr karbondioksyd. Etter 75 minutter viste NMR-spektra dannelse av mer enn 90% bis-silylert karbamat (SCA). Det ble deretter tilsatt 4,45 ml DMA og deretter 5,6 g D-(-)-2-fenylglycylklorid.hydroklorid med 97% renhet i andeler som følger:

Etter at denne blanding var omrørt i ytterligere 17 timer foretok man TLC på prøver av reaksj onsblandingen og på en fortynnet reaksjonsblandlng (1 ml av blandingen fortynnet med 2 ml CH2CI2) og man fant i hver en liten sone av ampicillin og en stor sone av et nytt mellomprodukt X.

Reaksjonsblandingen ble deretter avkjølt til 0°C, det ble tilsatt 40 ml isvann og blandingen ble omrørt i 5 minutter, filtrert og vasket med vann og med CH2C12- Den vandige fase ble separert, 10% fjernet til prøving og resten innstilt til en pH-verdi 3,0 med NH4OH, podet med ampicillin og omrørt. Etter tilsetning av ytterligere 40 ml MIBK ble blandingen omrørt og pH-verdien ble innstilt til 5,2 med NH4OH og omrørt ved romtemperatur i 1 time og deretter i et isbad i ytterligere 1 time. Det ble felt ut krystaller. Etter avkjøling over natt ble det krystallinske produkt samlet ved filtrering, vasket suksessivt med MIBK, vann og MIBK og deretter med 40 ml isopropanol-vann i et forhold 85:15 og tørket ved 45°C til oppnåelse av 6,25 g ampicillin (6,8 g korrigert for prøvetaking, tilsvarende et utbytte på 68%).

Eksempel 4

Til en blanding av 1,0 g 6-APA og 1,13 ml TMCS i 10 ml CD2C12 ble det dråpevis tilsatt 1,23 ml TEA i løpet av 30 minutter, og blandingen ble omrørt i ytterligere 2 timer. Tørr karbondioksyd ble boblet gjennom i 4 timer. På dette tidspunkt viste NMR ca. 55 - 60% karboksilylering. Blandingen ble holdt i kjøleskap over natt. Om morgenen ble det tilsatt 0,77 ml DMA, blandingen ble omrørt, avkjølt til -8°C og det ble tilsatt 1,2 g D_(- )-p-hydroksy-2-fenylglycylklor-id, hydroklorid i porsjoner som følger:

Ved slutten av 310-minuttersperioden viste NMR ca. 78% amoksicillin og ca. 20% 6-APA.

Eksempel 5

10,0 g eller 46,24 mmol tilsvarende 1,0 ekvivalent tørr 6-aminopenicillansyre ble suspendert i 175 ml vannfri metylenklorid under omrøring ved 25°C. 10,76 g eller 106,23 mmol tilsvarende 2,30 ekvivalenter trietylamin ble tilsatt ved 25°C fulgt av tilsetning av 11,70 g eller 107,75 mmol tilsvarende 2,33 ekvivalenter trimetylklorsilan i løpet av 10

- 15 minutter, idet temperaturen ble holdt under ca. 30°C ved hjelp av tilsetningshastigheten for trimetylklorsilan. Etter omrøring i 20 - 30 minutter analyserte man blandingen som inneholdt utfelt trietylamin-hydroklorid for fullstendig silylering ved 80 MHz NMR. Blandingen ble deretter behandlet med karbondioksyd ved 20° C i 2 timer og analysert med henblikk på fullstendig karboksylering ved 20 MHz NMR. Ytterligere gasstilsetning var undertiden nødvendig. Volumet av karboksyleringsblandingen ble, hvis nødvendig, gjeninn-stilt til ca. 175 ml med tørr metylenklorld. Etter fullstendig karboksylering ble oppslemmingen behandlet med 2,95 g eller 3,56 ml eller 50,87 mmol tilsvarende 1,1 ekvivalent propylenoksyd og avkjølt til 0 - 5°C. D-(-)-2-(p-hydroksyfe-nyl)-glycylklorid-hydroklorid-hemidioksansolvat ble tilsatt i fem porsjoner å 2,71 g ved ca. 2°C (tilsammen 13,54 g eller 50,87 mmol tilsvarende 1,1 ekvivalent). Hver porsjon

syreklorid fikk lov å oppløse seg før den neste porsjon ble tilsatt. (Omrøringen ble avbrutt og blandingen undersøkt med henblikk på eventuelt faststoff på bunnen av kolben. Oppslemmingen må ikke oppvarmes over 5°C til denne prøve, da resultatene kan bli feilaktige). Dette krevet ca. 20 minutter pr. porsjon. Denne porsjonsvise tilsetning var meget viktig. Den endelige acyleringsblanding ble undersøkt med henblikk på eventuelt uoppløst syreklorid-hydroklorid. Blandingen ble holdt ved 0 - 5°C i 30 minutter og behandlet med kaldt (0 - 5' C) deionisert vann (DI) i en mengde av 100 ml under meget hurtig omrøring i 10 minutter. Blandingen fikk skille seg og den nedre metylenkloridfase ble fjernet. Den vandige fase ble filtrert (meget liten mengde faststoff) gjennom et tynt ("Dicalite") sjikt av diatomerjord, og kaken ble vasket med kaldt (0 - 5°C) DI-vann I en mengde av 15 ml. Eventuell nedre fase av organisk sjikt ble fjernet før krystallisering. Den klare, lysegule, vandige oppløsning med en pH-verdi på 2 - 2,5 ble innstilt til pH 3,5 ved 0 - 5°C og hvis nødvendig podet. Oppslemmingen ble holdt ved 0 - 5°C i 40 minutter og pH-verdien ble innstilt til 4,8 - 5,0 med 6N ammoniumhydroksyd og krystallisert i 2 timer. Oppslemmingen ble filtrert og det således oppsamlede faste amoksicillin ble vasket med en kald (0 - 5°C) blanding av 1:1 isopropanol:vann og kaken ble vasket med metylenklorid i en mengde av 30 ml, noe som ga ca. 13,5 eller rundt 70% snehvitt amoksicillin-trihydrat.

Eksempel 6

108 geiler 0,5 mol 6-aminopenicillansyre, 1,0 g eller 0,017 ml imidazol, 800 ml tørr metylenklorid og 120 ml eller 0,56 mol 98% HMDS ble omrørt og oppvarmet til tilbakeløp i 3,3 timer. Reaksjonsblandingen ble skylt med tørr nitrogengass under tilbakeløpskokingen for å fjerne den NH som ble dannet under reaksjonen. Deretter ble det tilsatt 2,0 ml eller 0,016 mol trimetylklorsilan (TMSC). Tilbakeløpskokingen fortsatte med ^-spyling i ytterligere 19 timer, og deretter ble det i kondensatoren sublimerte NH4CI fjernet og 2,6 ml

eller 0,0206 mol TMCS tilsatt til reaksjonen. Tilbakeløps-koking med ^-spyling fortsatte i ytterligere 34 timer. Volumet av reaksjonsblandingen ble bragt til 1000 ml med tørr metylenklorid. NMR viste da 100% silylering av amino- og karboksylgruppen på 6-aminopenicillansyren. Oppløsningen ble dekket med N2~gass og holdt slik i 9 dager. NMR-spektra bekreftet det ovenfor anførte og stabiliteten. Oppløsningen ble omrørt og CO2 boblet gjennom i ca. 90 minutter. Temperaturen var 20 - 22"C. NMR viste 100% omdanning av bis-trimetylsilyl-6-aminopenicillansyre til bis-trimetylsilylkar-boksy-6-aminopenicillansyre (SCA).

Denne basisblanding ble anvendt for de nedenfor beskrevne acyleringsforsøk. Den kjemiske forbindelse i denne oppløsn-ing hadde formelen:

NMR viste at bis-trimetylsilylkarboksy-6-aminopenicillansyre var stabil ennu etter 9 dager.

100 ml av basisblandingen (SCA ekvivalent med 10,8 g 6-aminopenicillansyre, 0,05 mol) ble omrørt ved 22°C og det ble tilsatt 8,0 g eller 0,058 mol TEA, HC1 og 4,2 m 1 eller 0,06 mol propylenoksyd (se US-PS 3 741 959). Noe TEA, HC1 ble bunnfelt. Blandingen ble omrørt og avkjølt til +3"C. Deretter ble 15,5 g, eller 0,55 mol D-(-)-p-hydroksyfenyl-glycylklorid-hydroklorid-hemidioksansolvat med en renhet på 75% tilsatt i porsjoner som følger:

Etter ytterligere 70 minutter ble det tilsatt ca. 50 ml tørr metylenklorid til reaksjonsblandingen for å redusere viskosi-teten .

Etter ytterligere 160 minutter ble en 2 ml prøve fjernet og satt til 1,0 ml D2O. Etter sentrifugering viste NMR-analyse av den vandige fase ca. 6% ikke-acylert 6-aminopenicillansyre . 10 minutter senere ble reaksjonsblandingen overført til et 600 ml begerglass og overføringen ble avsluttet ved vasking med 50 ml metylenklorid. Under omrøring i et isbad ble det tilsatt 60 ml kaldt deionisert isvann for å frembringe en oppløsning av to faser uten innhold av faste stoffer og med en pH-verdi på 1,0.

15,0 ml flytende anionbytteharpiks av typen "LA-1" ble tilsatt til tofasesystemet under omrøring og poding ved en pH-verdi på 2,0. Det begynte en krystallisering. Ytterligere 10,0 ml "LA-1" ble langsomt tilsatt i løpet av 5 minutter. Deretter ble det tilsatt 5,0 ml "LA-1" og pH-verdien var 4,5. Omrøringen ble fortsatt og det ble tilsatt 1,0 g NaHS03, natriumbisulfitt, 14,0 ml vann og dråpevis. Deretter ble det tilsatt 10,0 ml "LA-1" og pH-verdien fortsatte å stige. Ialt ble det tilsatt 40 ml "LA-1" og den endelige pH-verdi var 5,6. Deretter ble det tilsatt 5 ml aceton. På dette tidspunkt ble tilsatt 1,5 g NaHSOs oppløst i 6,0 ml vann i løpet av 30 minutter. Omrøring i isbad ble fortsatt.

Det utfelte produkt ble samlet ved filtrering og kaken ble vasket suksessivt med 50 ml metylenklorid, 40 ml vann, 100 ml isopropylalkohol-vann i et forhold på 80:20 samt 100 ml metylenklorid. Kaken ble deretter tørket ved atmosfæretrykk og 45°C for oppnåelse av 18,2 g amoksicillin-trihydrat, noe som representerte et utbytte på 87% beregnet på 6-aminopenicillansyre, korrigert for 1% til prøving var det samlede utbytte ca. 88%.

"LA-1" flytende anionbytteharpiks er en blanding av sekundære aminer, der hvert sekundært amin har formelen

hvori hver R<*>, R<2> og R<3> er en alifatisk hydrokarbongruppe og der R<1>, R<2> og R<3> i aggregatet inneholder fra 11 - 14 karbon-atomer, denne spesielle blanding av sekundære aminer som av og til omtales som "Liquid Amine Mixture No. I", er en klar ravgul væske med følgende fysikalske egenskaper: viskositet ved 2'C lik 70 eps; spesifikk vekt ved 20' C lik 0,845; brytningsindeks ved 45°C lik 1,467; destillasjonsin-tervall ved 10 mm: inntil 160°C - 4%, 160 - 210°C - 5%, 210-220°C - 75%, over 220°C - 17%.

Eksempel 7

En metylenkloridoppløsning (5,0 ml) av 0,54 g eller 2,497 mmol trimetylsilyl-6-trimetylsilyloksykarbonylaminopenicilli-nat ble. behandlet med 0,20 g eller 1,45 mmol trietylamin-hydroklorid fulgt av 0,162 g eller 2,75 mmol propylenoksyd ved 25"C. Blandingen ble omrørt ved 25°C i 20 minutter for å lette oppløsning av mesteparten av trietylaminhydrokloridet. 0,45 g eller 2,75 mmol fenoksyacetylklorid ble tilsatt dråpevis ved 25"C og blandingen ble omrørt ved 25°C i 30 minutter. En prøve ble fjernet og analysert ved CMR-analyse ved 20,0 MHz. CMR (karbon-13 kjernemagnetisk resonans) viste fullstendig forsvinning av fenoksyacetylklorldet samt APA-karbamatet og forekomsten av penicillin V trimetylsilylester. Nærværet av penicillin V trimetylsilylester ble påvist ved spektralsammenligning med en Identisk prøve fremstilt ved silylering av den frie penicillin V syre med trietylamln og trimetylklorsilan. Utbyttet ble ut fra CMR-spekteret anslått å være 85 - 90%.

Claims (1)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av et penicillin med formelen:

   hvor R-CO- er a-aminofenylacetyl hvor fenylringen eventuelt kan være substituert med en hydroksygruppe i parastilling eller fenyloksyacetyl, karakterisert ved at: a) en N-silylert forbindelse med formelen:

   der B er en lett avspaltbar esterbeskyttende gruppe i form av trimetylsilyl, omdannes før acylering til en forbindelse med formelen: der B har den ovenfor angitte betydning, ved at man til en oppløsning av den silylerte forbindelse i et vannfritt organisk oppløsningsmiddel, tilsetter tørr karbondioksyd ved en temperatur innen området 0 til 100°C inntil reaksjonen er ferdig, b) hvoretter den oppnådde forbindelse omsettes med et syreklorid med formelen RC0C1, hvor R har den ovenfor angitte betydning, ved en temperatur over -10°C og fortrinnsvis Innen intervallet 0 til 20°C, hvoretter gruppen B omdannes til hydrogen.