DK159153B

DK159153B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af penicillinforbindelser

Info

Publication number: DK159153B
Application number: DK412980A
Authority: DK
Inventors: Osamu Makabe; Yasushi Murai; Tuneo Okonogi; Masahiro Onodera; Takashi Yoshida; Shunzo Fukatsu
Original assignee: Meiji Seika Kaisha
Priority date: 1979-10-02
Filing date: 1980-09-30
Publication date: 1990-09-10
Also published as: GB2061270B; US4331597A; BE885484A; BR8006252A; DK159153C; NZ195115A; DK412980A; SE8006862L; FR2466466B1; JPS5651488A; CA1149799A; ZA805787B; IT1143099B; DE3037284A1; IT8049770A0; ES495519A0; AU520127B2; NL8005461A; DE3037284C2; CH645903A5

Description

i

DK 159153 B

Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af penicillinforbindelser med formlen I

r2 J* *«· 5 \ιΓ\ yCONH-CH-CONH-,-3

¾ Øj σΏ-^cooH

(i)

Rs 10 hvori R^, R2 og R^ hver betegner hydrogen, en lavere al-kylgruppe, et halogenatom, en lavere alkoxygruppe, en hydroxylgruppe eller en eventuelt med en methoxy- og/el-ler en formylaminogruppe substitueret phenylalkoxygruppe med 1-3 C-atomer i alkoxydelen, idet dog , R2 og Rg 15 ikke alle samtidig kan betegne hydrogen, R4 betegner hydrogen eller en lavere alkylgruppe, og R,. betegner hydrogen eller en hydroxylgruppe, eller farmaceutisk acceptable salte deraf.

Fremgangsmåden er ejendommelig ved det i krav 1's 20 kendetegnende del anførte.

Forbindelser af penicillintypen har antibakteriel virkning,og der er blevet fremstillet mange derivater deraf.

Der er i den senere tid udført forskning vedrø-25 rende penicillinforbindelser med henblik på at udvikle en effektiv forbindelse mod gramnegative forbindelser, specielt Pseudomonas aeruginosa, og mod bakterier, som har en lactamase. Imidlertid er der meget få penicillinforbindelser, som udviser tilfredsstillende antibakteri-30 el virkning mod nævnte bakterier. :

De kendte penicillinforbindelser, som i strukturmæssig henseende er nærmest beslægtet med forbindelserne med formlen (I), er beskrevet i dansk patentansøgning 149/75, tysk offentliggørelsesskrift nr. 23 22 750, i 35 US patentskrift nr. 3 873 523 samt i The Journal of Antibiotics, vol. 32, 1979, side 621-625.

Blandt de i nævnte danske patentansøgning nr.

149/75 kendte forbindelser har den, som er nærmest be-

DK 159153B

2 slægtet med forbindelserne med formel (I) følgende formel: f—-v CONH-CH-CONH—-\ /°Η3 • o«v. 5

COOH

10 Den antimikrobielle virkning af denne forbindelse er imidlertid ikke anført i ansøgningens beskrivelse.

Den forbindelse, hvis mikrobielle virkning er specifikt angivet, har følgende formel: i c fi^V-CONH-CH-CONH-j-/S\ F*3 φ ρΎ·~,

XCOOH

20 Ifølge nævnte ansøgnings beskrivelse har denne forbindelse en minimal hæmningskoncentration (MIC) overfor Pseudomonas aeroginosa på 6,3 yg/ml. Af forsøgsresultater, som fremgår af nedenstående Tabel 1, har forbindelserne med formel (1), som fremstilles ifølge de neden- 25 stående Eksempler 1 og 3, en mindre MIC-værdi, dvs. en større aktivitet.

Tysk offentliggørelsesskrift nr. 23 22 750 angår ampicillinderivater med formlen i .VcH-CONH—i-3

I 0 COOH

RCONH

De af disse forbindelser, som er nærmest beslægtede med forbindelserne med formlen (1), som fremstilles 35 ved analogifremgangsmåden ifølge opfindelsen, er sådanne, hvori R betegner

DK 159153 B

* I« R1 5 Definitionen af B udelukker imidlertid identitet med forbindelser med formlen (1).

I nævnte offentliggørelsesskrift er der kun gengivet specifikke oplysninger om den antimikrobielle aktivitet for forbindelser, hvori R betegner jl

10 OCT

R1

MlC-værdien overfor Pseudomonas aeruginosa er 3 yg/ml eller mere, hvilket, ved sammenligning med re-15 sultaterne i nedenstående Tabel 1, antyder en svagere virkning, end virkningen af forbindelserne med formel (I).

I US patentskrift nr. 3 873 523 omhandles forskellige ampicillinderivater, af hvilke den antimikrobielle 20 virkning er anført for N-[6-(2-cyclopentenylmethyl)-1,2-oxonicotinyl]ampicillin-natriumsalt. For Pseudomonas aeroginosa anføres en MIC-værdi på 6,3 yg/ml, hvilket antyder en svagere virkning, end hvad der nedenfor dokumenteres for forbindelsernemedformel (I).

25 The Journal of Antibiotics, vol. 32, 1979, side 621-625 beskriver et penicillinderivat med følgende formel : g ^^CONH-CH-CONH-S X/^3 30 (HO.CH2.CH2)2NS02^InXo 0- I n_AH3

H OH ° 'COOH

Forbindelsen betegnes CI-867, og resultater, op-35 nået ved dens afprøvning, er anført i nedenstående Tabel 1, hvoraf fremgår, at dens virkning gennemgående er svagere end virkningen af forbindelser med formlen (I).

I definitionerne af R^-r^ betyder "en lavere al- DK 159153 Β 4 kylgruppe" en sådan med 1-4 carbonatomer, d.v.s. methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl og t-butyl, og "en lavere alkoxygruppe" betyder en med fra 1 til 4 carbonatomer, d.v.s. roethoxy, ethoxy, propoxy og butoxy.

5 Fremgangsmåden b) udføres i et opløsningsmiddel på kendt måde til dannelse af en CONH-binding (peptidbinding) mellem amoxycillinen med formlen (A) og carboxylsyren med formlen II.

Specielt kan denne reaktion gennemføres under sæd-70 vanlige betingelser til fremstilling af polypeptider, penicilliner eller cephalosporiner som beskrevet af Miklos Bodanszky et al.: "Peptide Synthesis", Interscience Publishers (1966), side 75-125 (reference 1) og E.H.

Flynn: "Cephalosporins and Penicillins, Chemistry and 15 Biology", Academic Press (1972) (reference 2),

Denne reaktion forløber hensigtsmæssigt, selv om aminogruppen og carboxylgruppen i amoxycillinen ikke er beskyttet. Ved omsætning af amoxycillin, hvis aminogrup-pe og carboxylgruppe ikke er beskyttet, kan der anvendes 20 et organisk opløsningsmiddel, såsom estere, ethere og amider. Specielt kan der med fordel anvendes et aprotisk polært orgnisk middel, såsom dimethylformamid og diethyl-formamid. Reaktionen kan udføres ved en temperatur på fra ca. -50°C til 100°C i fra ca. 30 minutter til 24 25 timer.

Ved reaktionen mellem amoxycillin med formlen (A) og carboxylsyren med formlen II kan der med fordel anvendes amoxycillin, der er beskyttet ved aminogruppen eller carboxylgruppen eller ved begge disse grupper.

30 Carboxylgruppen og aminogruppen i amoxycillin kan beskyttes med et trialkylsilyleringsmiddel. Hvis amoxycillinen f.eks. skal omsættes under vandfri betingelser, såsom i et organisk opløsningsmiddel, kan den ubeskyttede amoxycillin opløses i et organisk opløsnings-35 middel, såsom alkylhalogenid, og ved behandling med et trialkylsilyleringsmiddel, såsom trimethylchlorsilan eller haxamethyldisilazan, kan den ubeskyttede amoxycillin omdannes til trimethylsilylesteren eller N,0-bis-trimeth- 5

DK 159153 B

ylsilylderivater.

Benzhydrylester, benzylester, trichlorethylester, p-nitrobenzylester, alkoxymethylester, t-butylester og lignende kan anvendes til beskyttelse af amoxycillinens 5 carboxylgruppe.

En beskyttelse af aminogruppen i amoxycillin kan foretages efter en metode beskrevet i "Cephalosporins and penicillins, Chemistry and Biology", side 81, Academic Press (1972). F.eks. kan en aminogruppe hensigtsmæssigt 10 beskyttes af en t-butoxycarbonylgruppe, enamid-form-beskyttende gruppe eller en beskyttelsesgruppe af silazan-typen.

Når en hydroxylgruppe er til stede i R^, Rj og/ eller R^ i carboxylsyren med formlen II eller det carbo-15 xylisk reaktionsdygtige derivat deraf, er hydroxylgruppen beskyttet af p-nitrobenzylether, p-methoxybenzylether, methoxymethylether, methoxyethylether, pyranylether eller phenacylether.

Penicillinforbindelserne, der fås ved fremgangs-20 måden ifølge opfindelsen, kan med fordel esterificeres, og esterificeringsprodukterne, der fås således, kan oparbejdes og administreres til opnåelse af forbedrede administreringsbetingelser, f.eks. oral absorption, intestinal absorption samt god stabilitet ved oparbejdningen.

25 Til dette formål udføres esterificeringen enten ved este-rificering af slutproduktet eller ved at underkaste den esterificerede amoxycillin en omsætning til dannelse af en peptidbinding. I sidste tilfælde er det en fordel, at amoxycillinesterne kan reagere under vandfri betin-30 gelser som følge af deres opløselighed i organiske opløsningsmidler. Disse estere kan f.eks. være en alkano-yloxyalkylester, såsom pivaloyloxymethylester og 1-acet-oxy-l-ethylestere, phthalidylester, phenylester og inda-nylester.

35 Reaktionsdygtige derivater ved carboxylgruppen af carboxylsyren med formlen II, der kan anvendes ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan fremstilles på kendt måde (f.eks. referencerne 1 og 2). Typiske eksempler på 6

DK 159153 B

disse forbindelser er et syrehalogenid, såsom syrechlo-rid, blandet syreanhydrid, der kan opnås ud fra adskillige organiske og uorganiske syrer (svovlsyre, phosphorsy-re, hemialkylester af kulsyre), aktive estere med flere 5 elektrofile alkoholgrupper eller phenolgrupper, aktive thioestere, aktive amider og pseudohalogenider, såsom syre-azid og sulfonat.

Eksempler på dehydratiserings-kondenseringsmidler, som giver reaktionsdygtige derivater ved carboxyl- eller 10 aminogruppen under dannelse af den Ønskede peptidbinding, kan være carbodiimider, en alkoxyacetylen, Woodword's reagens, amidphosphater, cyanidphosphat, phosphorsyrling-estere, phorphorsyrlinganhydrid, polyphosphorsyreestere, Willsmeier reagens, phosphorsyrlingesterhalogenid og 15 phosphorsyrlinghalogenider.

De reaktionsdygtige derivater ved carboxylgruppen af carboxylsyren med formlen II og amoxycillin omsættes i et molforhold fra 2:1 til 1:1, sædvanligvis i et organisk opløsningsmiddel indeholdende vand, i et vandfrit 20 organisk opløsningsmiddel, eller i et aprotisk polært organisk opløsningsmiddel ved en temperatur fra -50°C til 100°C eller ved kogepunktsområdet for det pågældende opløsningsmiddel i fra 30 minutter til 24 timer til dannelse af peptidbindingen.

25 Reaktionsbetingelserne er ikke begrænset til de anførte værdier,og betingelserne kan vælges i afhængighed af de anvendte reagenser, den krævede aktiveringsgrad, de anvendte mængder, .det anvendte opløsningsmiddel etc.

30 Efter omsætningen isoleres produktet på sædvanlig måde, f.eks. under anvendelse af en adskillelse med opløsningsmidler, adsorptionschromatografi, ionbytnings-chromatografi, udfældningsmetoder, omkrystallisation eller ved kombinationer deraf.

35 De opnåede forbindelser kan, når de er estere som beskrevet ovenfor, anvendes direkte til deres formål, men hvis det ønskes at opnå forbindelserne med formlen I ud fra de beskyttede produkter, kan der foretages deesterifi- 7

DK 159153 B

cering til opnåelse af de ønskede produkter.

Deesterificeringen kan udføres ved hydrolyse i et neutralt til surt medium, ved reduktion,såsom katalytisk reduktion, og reduktion med zinkstøv, eller deesterifi-5 cering med en stærk syre (f.eks. trifluoreddikesyre, myresyre, eddikesyre etc.) under så skånsomme betingelser, at penicillinforbindelserne ikke nedbrydes.

Ved fremgangsmåden, å) omsætter man 6-aminopeni-cillansyre eller et derivat deraf, som er beskyttet enten 10 ved både aminogruppen og carboxylgruppen eller kun ved carboxylgruppen, med formlen V: r^„_/sVCH3 H ΊΖΓ r<*3 15 o>—N-N coor7 hvori Rg betegner hydrogen eller en amino-beskyttende gruppe, og R? betegner hydrogen eller en carboxyl-be-skyttende gruppe, med en forbindelse med formlen IV (se 20 krav 1), hvori R^, R2, R^, R^ og R,. har den ovenfor anførte betydning, eller et reaktionsdygtigt derivat deraf (ved carboxylgruppen) (såsom syrehalogenid, blandet sy-reanhydrid etc.) eller et hydroxyl-beskyttet derivat af forbindelsen med formlen IV eller et reaktionsdygtigt 25 derivat deraf, når R^, R2, R3 og/eller R,. betegner hydroxy lgrupper .

Reaktionsdygtige derivater (ved carboxylgruppen) af forbindelser med formlen IV kan fås på lignende måde som nævnt ovenfor i forbindelse med fremstilling af reak-30 tive carboxyderivater af forbindelsen med formlen II.

Ovennævnte anden fremgangsmåde ifølge opfindelsen er en i sig selv kendt metode, og den kan udføres på lignende måde som omsætningen mellem amoxycillin eller et beskyttet derivat deraf med carboxylsyren med formlen 35 II som beskrevet ovenfor.

For de carboxyl- og amino-beskyttede derivater med formlen V er arten af carboxylbeskyttende og amino-beskyttende grupper samt formålet med og udøvelsen af 8

DK 159153 B

beskyttelsen den samme som beskrevet for amoxycillin.

Endvidere kan der til beskyttelse af én eller flere hydroxylgrupper, som måtte være til stede som R-^, R2> R^ og/eller R^, i forbindelsen med formlen IVf anvenr-5 des samme hydroxylbeskyttende grupper som beskrevet ovenfor for hydroxylgruppen i carboxylsyren med formlen II.

Esterforbindelserne, der fås ved fremgangsmåden, kan om ønsket underkastes en deesterificering som beskrevet ovenfor til opnåelse af de ønskede forbindelser.

10 Penicillinforbindelserne, der fås ved fremgangs måden ifølge opfindelsen, kan omdannes til farmaceutisk acceptable salte på kendt måde som beskrevet f.eks. i "Cephalosporins and Penicillins, Chemistry and Biology", Academic Press (1972). Disse salte omfatter alkalimetal-15 salte, såsom natriumsalt, kaliumsalt, calciumsalt og magnesiumsalt, jordalkalimetalsalte, salte med organiske a-miner, såsom ethylamin, benzylamin, benzathin, dimethyl-, benzylamin, dibenzylamin, dicyclohexylamin, 2-hydroxy-ethylamin, triethylamin og procain, samt salte med ami-20 nosyrer, såsom lysin, glutaminsyre, aminoravsyre og arginin.

Forbindelserne, der fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er hidtil ukendte forbindelser med ringe toksicitet, som hæmmer β-lactamase (penicilli-25 nase, cephalosporinase), har et bredt antibakterielt spektrum og endvidere udviser antibakteriel hæmning mod gramnegative bakterier, der er resistente mod kendte syntetiske penicilliner, specielt mod gramnegative bakterier, der ikke fermenterer glucose. Antimikrobielle 30 forsøg (f.eks. bestemmelse af minimal hæmningskoncentration og ED5Q-værdien) med forbindelser fremstillet efter fremgangsmåden ifølge opfindelsen er blevet gennemført efter den i Japan standardiserede kemoterapeutiske metode under anvendelse af Apalcillin (PC-904) Piperacillin og 35 CI-867 til sammenligning.

Resultaterne er anført i Tabel 1 og 2, hvori de kendte forbindelser har følgende strukturformler: 9

DK 159153 B

(HOCH.CH.) .NSO-^^-Vy-CONH-CH-CONH-j-3 w η Λ J-2—C^a CI-867 y °

0.’I

OH

M I c CH,

CONH-CH-CONK --f V

' |^Jj o COOH

Apalcillin O O

}Mf c iH3 C2Hs N N-CONH-CH-CONHn- 25 w l J_A_L 3

r jj cr COOH

Piperacillin 10

DK 159153 B

TABEL 1

Minimal hæmningskoncentration (γ/ml) ifølge agar fortyn-dingsmetoden (plade)_

Forbindelse Forbindelse fremstillet fremstillet ifølge øks. ifølge eks.

Mikroorganisme. 1 3 Αρ» I e i 11 i Piaeracillia Cl-867

Staphylococcus urtii 209PJC-1 0,39 039 0,39 0^78 1,56

Staphylococcus aureus Stilks- 4 2 4 0,39 020 0,39 0,78 1,36

Streptococcus faecal is ATCC6 6 3 3 3,1 3 3, 1 3 6, 2 5 - 3, 1 3

Escherichia coli 2 S 5 12, S 6, 25 50 50 100

Escherichia coli C N 2 0 6 (CSise) 3,13 1,56 25 6, 2 5 25

Citrobcctcr freundii G N 3 4 6 (C Sue) 6, 2 5 1,5 6 12,5 25 >100

Klebsiella pneuooniae G N 6 9 (PCasc) 25 25 50 25 >100

Proteus aorpaaii 15 10 (C S ase) 100 50 100 · >100

Proteus vulgaris OX 1 9 0,3 9 0. 3 9 0, 3 9 3, 1 3 6,2 5

Serratia earcesceas No. 1 0,78 1,5 6 1,56 0,78 6,25 • · T-26 50 50 - 100

Serratia species GN 6 2 9 (C S ase) 6, 2 5 6, 25 25 6,25 >100

Eoterobactcr eloaeae 363 12,5 12, S - 25 —

Psevdooonas aerugiaosa E - 2 3, 13 6,25 1,56 6, 25 6,25 • · M-0 0 0 2 0,7 8 3, 1 3 0,7 8 6, 2 5

Psendoooois eapacia M—0501 1 2,5 3, 1 3 12,5 — — M-0 5 1 3 1 2,5 3, 1 3 2 5 • * M-0 52 7 0,7 8 1,5 6 - 0,7 8

Pseudoooois sal tophi i ia 602 1 2, S 2 5 50 — — » · M-0 6 2 7 6,2 5 3, 1 3 - 1 00 TABBL. 2 (ED SO (mg/mus)

Forbindelse Forbindelse fremstillet fremstillet

Mikroorganisme ^^9^ e^<s- ^pl|cjn;> Piperacillin Cl —S67

Staphrlococcus aureus Saitk 0,073 0,064 0,15 0,115 0,16

Klebsiella pneuaoaiae PCI-602 0,62 0,44 - 0.38 —

Serratia species CN 629(CSt$e) 0,64 1,00 2,SO 1,90 1,70 w' 11

DK 159153 B

Opfindelsen belyses nærmere i det følgende ved hjælp af eksempler, der dels illustrerer udøvelsen af fremgangsmåden ifølge opfindelsen og dels belyser fremstilling af udgangsmaterialer herfor.

5

Præparationseksempel 1 (1) 30 g natriummethylat blev suspenderet i 500 ml isopropylether, hvortil der blev sat en opløsning af 90 g 3,4-dimethoxyacetophenon opløst i 37 g ethylformat 10 under omrøring og iskøling, og suspensionen blev omrørt i yderligere 2 timer ved stuetemperatur. Isopropylethe-ren blev fjernet under reduceret tryk og remanensen opløst i 500 ml vand, hvortil var sat 59 g α-cyanoacetamid og 22 ml piperidin-eddikesyre-stødpude (pH 8).

15 12

DK 159153 B

Den resulterende blanding blev opvarmet til 110°C i 7 timer og blev derpå tilsat eddikesyre til pH 4 under iskøling.

Det resulterende bundfald blev filtreret fra, va-5 sket med 200 ml vand og krystalliseret med 300 ml ethanol efterfulgt af vaskning med 100 ml ether til opnåelse af 41 g 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-3-cyano-l,2-dihydro-2-oxopyridin. Smp. 268-270°C.

IR (nujol): 2250 cm-1 (-CN).

10 (2) De 41 g 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-3-cyano-l,2- dihydro-2-oxypyridin blev suspenderet i 300 ml 25% vandig kaliumhydroxidopløsning og opvarmet til 110°C under omrøring i 13 timer. I varm tilstand blev blandingen udhældt i 1 liter 6 N vandig HC1 og derpå omrørt under kø-15 ling med is.

Det resulterende bundfald blev filtreret fra, vasket med 500 ml vand og derpå 3 gange med 300 ml acetone. Bundfaldet blev omkrystalliseret fra dimethyl formamid til opnåelse af 41 g 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-l,2-dihydro-2-20 oxonicotinsyre. Smp. 273°C (sønderdeling).

IR (nujol): 1705 cm-1 (carboxylsyre), 1632 cm”1 (pyridon).

Præparationseksempel 2

Syntese af 6-[4-(3,4-dimethoxybenzyloxy)-3-methoxy-25 phenyl] -2-oxopyridin-3-carboxylsyre.

CH30-^ \ch2^o-X \-COOH

CH-jCT / CH3<J / H S} 30 (1)235 g veratrylalkohol blev opløst i 1,4 liter absolut methylchlorid, hvortil blev sat 200 g thionyl-chlorid dråbevis under iskøling, og blandingen blev om-rørt ved stuetemperatur natten over.

Den mørkebrune klare opløsning blev hældt ud i 35 1 liter iskoldt vand, og pH-værdien indstillet til 7,0 med natriumhydrogencarbonat. Methylenchloridlaget blev 13

DK 159153 B

blev isoleret, vasket med vand, tørret og inddampet til tørhed under reduceret tryk til opnåelse af 220 g 3,4-dimethoxybenzylchlorid. Smp. 50-51°C.

(2) 36 g 60% natriumhydridopløsning blev sat til 5 200 ml tør dimethylformamid under omrøring og iskøling, hvorpå der dråbevis blev tilsat 120 g acetovanillin opløst i 400 ml vandfri dimethylf ormamid. Man lod blandingen reagere ved stuetemperatur under omrøring i 1 1/2 time, hvorpå 200 g 3,4-dimethoxybenzylchlorid opløst i 10 400 ml vandfri dimethylformamid blev tilsat, og der blev opvarmet til 110°C under omrøring natten over.

Dimethylformamidet blev fjernet under reduceret tryk, og den resulterende remanens blev opløst i 600 ml methylenchlorid, vasket 3 gange med 400 ml vand, tørret 15 og koncentreret til opnåelse af en sirup, der derpå blev krystalliseret fra ethanol til opnåelse af 16,7 g 4-(3,4-dimethoxybenzyloxy)-3-methoxyacetophenon. Smp. 119-120°C.

(3) 12,6 g 60% natriumhydrid blev suspenderet i 100 ml absolut tetrahydrofuran ogkølet med is, hvorpå 50 20 g 4-(3,4-dimethoxybenzyloxy)-3-methoxyacetophenon,og 17.6 g ethylformat opløst i 700 ml absolut tetrahydrofuran blev tilsat dråbevis under omrøring. OPløsningsblan-dingen blev derpå opvarmet til 50°C under omrøring natten over. Tetrahydrofuranopløsningen blev inddampet under re-

25 duceret tryk til opnåelse af et pulver, der blev opløst i 350 ml vand, og hvortil der blev sat 20 g a-cyanoacet-amid og 20 ml piperidin-eddikesyre-stødpudeopløsning (pH

8), og opløsningen blev opvarmet til 110°C under omrøring natten over.

30 Reaktionsopløsningen blev afkølet med is og ind stillet til pH 4 med eddikesyre til opnåelse af et bundfald, der blev filtreret fra, vasket med 300 ml acetone og omkrystalliseret fra dimethylformaraid til opnåelse af 16.7 g 6- [4- (3,4-dimethoxybenzyloxy) -3-methoxyphenyl] -35 l,2-dihydro-2-oxo-cyanopyridin. Smp. 220-221°C.

(4) 16,7 g 6-[4-(3,4-dimethoxybenzyloxy)-3-methoxyphenyl] -l,2-dihydro-2-oxo-3-cyanopyridin blev suspenderet i 400 ml 25% vandig kaliumhydroxid og opvarmet til 14

DK 159153 B

110°C under omrøring i 42 timer/ hvorpå der blev tilsat 600 ml 6 N vandig HCl, opløsningen blev afkølet med is til opnåelse af et pulverformet bundfald, der blev filtreret fra, vasket med vand og omkrystalliseret fra meth-5 ylcellosolve til opnåelse af 10 g 6-[4-(3,4-dimethoxy-benzyloxy) -3-methoxyphenyl] -1,2-dihydro-2-oxo-nicotin-syre. Smp. 217-218°C.

IR (nujol): 1710 cm”1 (-COOH), 1640 cm”1 (pyridon).

Præparationseksempel 3 10 8 g 6- (3,4-dimethoxyphenyl) -1,2-dihydro-2-oxoni- cotinsyre blev opløst i en blanding af 48 ml dimethyl-formamid og 19 ml pyridin. Der blev tilsat 10 g p-nitro-phenyl-trifluoracetat under iskøling efterfulgt af omrøring ved stuetemperatur natten over til opnåelse af et 15 bundfald, der blev filtreret fra, vasket med diethyl-ether og omkrystalliseret fra dimethylsulfoxid til opnåelse af 7,9 g p-nitrophenylester af 6-(3,4-dimethoxyphenyl) -1,2-dihydro-2-oxonico tinsyre.

IR (nujol): 1700 cm 1 (ester) 20 1668 cm 1 (pyridon) 1525, 1350 cm 1 (nitro).

Præparationseksempel 4 2,75 g 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-1,2-dihydro-2-oxo-nicotinsyre blev suspenderet i 25 ml dimethylformamid, 25 hvortil blev sat 2 g carbonyldiimidazol.Efter omrøring ved stuetemperatur natten over blev de resulterende krystaller filtreret fra og vasket med ether til opnåelse af 2,8 g imidazolamid af 6-(3,4-dimethoxyphenyl )-l,2-di-hydro-2-oxonicotinsyre.

30 IR (nujol): 1690 cm 1 (amid) 1642 cm 1 (pyridon).

Præparationseksempel 5 55 g 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-l,2-dihydro-2-oxo-nicotinsyre blev suspenderet i 550 ml methylenchlorid, 35 hvortil blev sat 66,6 ml triethylamin. Efter omrøring 15

DK 159153 B

ved stuetemperatur i 1 time blev blandingen afkølet til 5°C, og 38 ml ethyl-chlorformat blev tilsat dråbevis ved en temperatur mellem 0 og 10°C.

Efter omrøring i 2 timer blev 46 g N-hydroxyrav-5 syreamid opløst i 78 ml dimethylformamid tilsat dråbevis ved en temperatur fra 5 til 10°C, hvorpå der blev omrørt natten over ved stuetemperatur.

Det resulterende bundfald blev filtreret fra og vasket med vand og en lille mængde acetone. Omkrystalli-10 sation fra 140 ml dimethylformamid gav 45 g succinimid-ester af 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-1,2-dihydro-2-oxonico-tinsyre.

IR (nujol): 1798, 1772 cm ^ (amid) 1730 cm ^ (ester) 15 1640 cm ^ (pyridon).

Præparationseksempel 6 2,0 g D-p-hydroxyphenylglycin blev suspenderet i en blanding af 20 ml dimethylformamid og 10 ml vand, hvortil yderligere blev sat 3,34 ml triethylamin.

20 3,96 g p-nitrophenylester af 6-(3,4-dimethoxyphe nyl )-l,2-dihydro-2-oxonicotinsyre blev sat til suspensionen under iskøling, og reaktionstemperaturen blev hævet til stuetemperatur, hvorpå der blev omrørt natten over.

Opløsningsmidlet blev fjernet under reduceret 25 tryk til opnåelse af en sirup, der blev suspenderet i 50 ml vand, og pH-værdien blev indstillet til 2 med vandig 1 N HC1.

Det resulterende bundfald blev filtreret fra og vakset med vand. Omkrystallisation fra ethanol gav 4 g 30 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-l,2-dihydro-2-oxonicotinyl-p-hy-droxyphenyl-glycin. Smp. 181-183°C. (sønderdeling).

IR (nujol): 1700 cm-1 (carboxylsyre) -i 1665, 1648 cm (pyridon, amid).

Præparationseksempel 7 35 6 g 6- [4- (3,4-*dimethoxybenzyloxy)-3-methoxyphe- nyl]-l,2-dihydro-2-oxonicotinsyre blev suspenderet i en 16

DK 159153 B

blanding af 60 ml dimethylformamid og 10 ml pyridin, hvortil blev sat 5 g p-nitrophenyltrifluoracetat under iskøling, hvorpå suspensionen blev omrørt ved stuetemperatur natten over. Bundfaldet blev filtreret fra og va-5 sket med isopropylether.

Omkrystallisation fra dimethylsulfoxid gav 6,2 g p-nitrophenylester af 6-[4-(3,4-dimethoxybenzyloxy)-3-methoxyphenyl]-1,2-dihydro-2-oxonicotinsyre.

IR (nujol): 1710 cm 1 (ester) 10 1650 cm 1 (pyridon) 1515, 1345 cm-1 (nitro).

Eksempel 1 3,7 g succinimidester af 6-(3,4-dimethoxyphenyl)- l,2-dihydro-2-oxonicotinsyre blev suspenderet i 37 ml 15 vandfri dimethylacetamid, hvortil blev sat 4,2 g amoxy-cillin-trihydrat under omrøring, og suspensionen blev kølet med is i 2 timer.

Reaktionssuspensionen blev udhældt i 140 ml isvand og indstillet til pH 2 med vandig 1 N HC1.

20 Det resulterende bundfald blev filtreret fra, vasket med vand og tørret.

Bundfaldet blev opløst i 15 ml methanol-dichlor-methan (1:1), hvortil blev sat natriumsalt af 2-ethyl-hexansyre og 45 ml acetone til udfældelse af krystaller, 25 der blev filtreret fra til opnåelse af 5,6 g natriumsalt af 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-1,2-dihydro-2-oxonicotinyl-amoxycillin.

IR (nujol): 1765 cm1- (&-lactam) 1655 cm”1 (amid) 30 1605 cm 1 (carboxylat) NMR (DMSO d-6) δ = 10,55 (d, IH, -NH), 8,95 (d, IH, -NH), 8,29, 6,80 (d, IH, hyrodon), 7,22, 6,70 (d, 2H, p-hydroxyphenyl), H <jj 35 5,78 (d, IH, -C-C- ),

N

5,35 (m, 2H, Cg-H, C5-H), 3,93 (S, IH, Cj-H), ψ 17

DK 159153 B

3,85, 3,80 (S, 3H, -OMe), 1,55, 1,37 (S, 3H, Gem-CHj).

Eksempel 2 1,1 g 6-(3,4-dimethoxyphenyl)-l,2-dihydro-2-oxo-5 nicotinyl-D- (-)-p-hydroxyphenylglycin og 5 ml absolut dimethylformamid blev suspenderet i 25 ml absolut tetra-hydrofuran, hvortil blev sat 0,55 g N-methylmorpholin.

Suspensionen blev omrørt ved 0°C i 15 minutter og afkølet til -30°C, hvorpå dråbevis blev tilsat 0,59 g 10 ethylchlorformat opløst i 5 ml absolut tetrahydrofuran, og man lod suspensionen reagere i 30 minutter.

877 mg 6-amino-penicillansyre-triethylaminsalt opløst i 10 ml dimethylformamid blev dråbevis sat til suspensionen, og reaktionstemperaturen blev gradvis hæ-15 vet til stuetemperatur, hvorpå der blev omrørt i 2 timer.

Opløsningsmidlet blev fjernet under reduceret tryk til opnåelse af en sirup, der blev suspenderet i 100 ml vand og indstillet til pH 2 med vandig 1 N HC1 under omrøring og iskøling.

20 Det rå produkt, der fældede ud, blev filtreret fra, vasket med vand og opløst i vandig natriumhydrogen-carbonat til indstilling af pH-værdien til 7. Opløsningen blev chromatograferet på HP-50 harpiks (Daiaion HP-50, et produkt fra Mitsubushi Chemical Industries Ltd.), 25 som derpå blev vasket med vand og elueret med 50% vandig ethanol til opnåelse af 350 mg af samme forbindelse, som blev fremstillet i eksempel 1.

Eksempel 3 2,9 g amoxycillin-trihydrat blev suspenderet i 50 30 ml vandfri dimethylformamid, hvortil blev sat 0,76 ml triethylamin og 2,5 g p-nitrophenylester af 6—[4—(3,4— dimethoxybenzylphenyl)-3-methoxyphenyl]-1,2-dihydro-2-oxonicotinsyre under iskøling efterfulgt af omrøring ved stuetemperatur natten over.

35 Opløsningsmidlet blev fjernet under reduceret tryk til opnåelse af en sirup, der blev suspenderet i 18

DK 159153 B

vand og indstillet til pH 2 med vandig 1 N HC1. Bundfaldet blev filtreret fra, vasket med vand og opløst i vandig natriumhydrogencarbonat til indstilling af pH-værdi-en til 7/0. Opløsningen blev chromatograferet på HP-50 5 harpiks, der blev vasket med vand og elueret med vandig 80% 's methanol til opnåelse af 2 g 6-[4-(3,4-dimethoxy-benzyloxy)-3-methoxyphenyl]-1,2-dihydro-2-oxonicotinyl-amoxycillin.

IR (nujol): 1760 cm ^ (β-lactam) 10 1657 cm ^ (amid) 1600 cm ^ (carboxylat) NMR (DMSO d-6) 6: 10,68 (d, IH, NH), 8,90 (d, IH, NH) , 8,50, 6,80 (d, IH, pyridon), 7,25, 6,70 (d, IH, p-hydroxy- 15 phenyl), 7,20 (m, 6H, dimethoxyphenyl), 5,80 (d, IH), 5,30 (m, 2H, C.--H, Cfi-H) , OMe 5,05 (S, 2H, -CH2-^ ^-OMe), 20 3,92 (S, IH, C3-H), 3,85 (S, 3H, -OMe), 3,77 (S, 6H, -OMe), 1,56, 1,45 (S, 3H, Gem-CH3).

Eksempel 4-33 25 På lignende måde som i ovenstående eksempel blev fremstillet forbindelser med formlen la λ—Tk .sv ch3 R8~\ 'y-CONH-CH-CONH { n/ .. A J-L-C. “

V

r5 35 hvori R5 og Rg har de nedenfor anførte betydninger.

r

Eksem- Rg Rg IR

pel nr._ (cm”1) 19

DK 159153 B

4 -H H3c{5) 1760, 1660> 1600 5 -OH H3c{5) 1760, 1660» 1600 CH3 6 -H <0> 1760, 1660, ' 1655, 1600 CH\ 7 "H \0/ 1760, 1660» 1602 . -» »A<0> 1760, 1652, 1600

Cl - . .

9 -η 1761* 166Z*1610

Cl 10 -H <Q> 1787, 1660, 1603 11 -H 1760, 1656> 1600 12 -H f{5) 1760, 1660, 1605 13 -H Br{5> 1760, 1660» 1600

Eksem- Rc R0 IR

pel nr. 5_®_ (cm-1) 20

DK 159153 B

14 -H H3c0{5> 1761, 1662» 1605 15 -OH H3C0{5> 1760, 1660, 1600 h3co 16 -H (5) 1761, 1660, 1600 H3cO - 17 -OH ύ (oV 1760» 166°* 1605 _OcH3 18 "H <0/ 1762, 1663, 1600 0CH3 19 -OH 1760, 1660, 1600 °CH3 20 -H 1760, 1661, 1602

H3CO

οοη3 21 -OH \0/ 1760, 1660> 1600

H3CO

_9CH3 22 -OH H3CO-/O/ 1763, 1660, 1600

Eksem- Rc RQ IR

pel nr. 5_°_ (cm 1) 21

DK 159153 B

H-CO 3 \_ 23 -OH (n\ 1762, 1660. 1600 h3co H3C0 24 -H HgCO-^Q^- 1765, 1660, 1605 H3C0 25 -H H3C°^> 1760, 1660, 1600 H3C0 h3c 26 -H HjC/O/· 1760, 1660, 1600 H-CO 3 \_ 27 -OH H3Co/q\ 1760, 1660, 1600 h3co H3Cv 28 -OH H3c/q V 1761, 1660, 1600 H3C° 29 -OH H3C0 1755 * 1650» 1600 CH3° 30 -OH Η300·^Ο^0Η20-^Ο^ 1765, 1660, 1610 22

DK 159153 B

Eksem- R5 Rg IR

pel nr.

(cm”1) 5 31 -OH HC0NH^)CH20{5> 1760, 1660, 1600 CH3° 32 -OH HCONH ch20 <°> 1760, 1660, 1600 CH-0 CH-0 O \ O \ 33 -OH . HC0Nh/O/CH2o/0 / 1760, 1660, 1600 15

Selv om opfindelsen er beskrevet detaljeret i forbindelse med specielle udførelsesformer herfor, vil det for fagmanden være klart, at de forskellige ændringer og modifikationer kan foretages inden for opfindel-20 sens rammer.

Claims

1. Fremgangsmåde til fremstilling af penicillinforbindelser med formel I ,! b Λ, VCONH-CH-CONH-T-3 X 1 I_π», H & (T1—N—SoOH

10 CD Rs hvori , R2 og R^ hver betegner hydrogen, en lavere al-15 kylgruppe, et halogenatom, en lavere alkoxygruppe, en hydroxylgruppe eller en eventuelt med en methoxy- og/el-ler en formylaminogruppe substitueret phenylalkoxygruppe med 1-3 C-atomer i alkoxydelen, idet dog R^, R2 og R^ ikke alle samtidig kan betegne hydrogen, R4 betegner 20 hydrogen eller en lavere alkylgruppe, og R,. betegner hydrogen eller en hydroxylgruppe, eller farmaceutisk acceptable salte deraf, kendetegnet ved, at man a) omsætter 6-amino-penicillansyre eller et derivat deraf, hvis funktionelle gruppe er beskyttet, med en 25 forbindelse med formlen (IV) R1 D r2 j _r* <A \V// M-CONH-CH-COOH ,T„, \ -L / V. / I (IV) t «° d 30 Rs hvori R1, R2> R3, R4 og R5 har den ovenfor anførte betydning, eller et reaktionsdygtigt derivat deraf, eller et hydroxyl-beskyttet derivat af nævnte forbindel-35 se med formlen (IV) eller af nævnte reaktionsdygtige derivat deraf, når R^, R2f R3 og/eller R5 betegner hydroxyl, eller O DK 159153 B b) til fremstilling af penicillinforbindelser med formlen (I), hvori Rj. betegner hydroxyl, omsætter amoxicillin med formlen (A) ς .CHg 5 Η,Ν-CH-CONH-,-S XS J_l—t™3 (A) y jj cooh OH 10 eller amoxicillin med beskyttet funktionel gruppe med en carboxylsyre med formlen (IX) Å /-f ‘ 15 tf-f/ W ‘ k, H o hvori R.j, R2, R3 og R4 har den ovenfor anførte betydning, eller et reaktionsdygtigt derivat deraf, eller et hydroxyl-beskyttet derivat af nævnte carboxylsyre 20 eller nævnte reaktionsdygtige derivat deraf, når R^, R2 og/eller R^ betegner hydroxyl.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R^, R2 og R^ er valgt blandt hydrogen, methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, 25 t-butyl, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, phenylmethoxy, phenylethoxy, phenylpropoxy, dimethoxybenzyloxy, meth-oxibenzyloxy, formylaminobenzyloxy, 3-methoxi-4-formyl-amino-benzyloxy, fluor, chlor, brom, iod og hydroxyl, og R^ er valgt blandt hydrogen, methyl, ethyl, n-propyl, 30 i-propyl, n-butyl, i-butyl og t-butyl.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at amoxicillin eller derivatet deraf omsættes med en forbindelse med formel (II) ved en temperatur fra -50°C til 100°C til tilvejebringelse af peptidbin- 35 dingen.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man omsætter 6-amino-penicillansyre eller ψ DK 159153 B. et derivat deraf med en forbindelse med formlen (IV) ved en temperatur fra -50°C til 100°C til tilvejebringelse af peptidbindingen.