DK156098B - Thixotropt middel til brug ved fraktionering af blod - Google Patents

Description

DK 156098 B

Den foreliggende opfindelse angâr et thixotropt mid-del til brug ved fraktionering af blod.

Det omhandlede thixotrope middel anvendes til at udskil-5 le en specifik komponent fra andre komponenter i blod ved udnyttelse af forskellen imellem den specifikke masse af den enkelte komponent og de 0vrige komponenter i en blodpr0ve. Til dette formai er det 0nskeligt, at det thixotrope middel har en specifik massefylde, som ligger 10 imellem de specifikke massefylder af de 0vrige komponenter. Det er endvidere 0nskeligt, at det thixotrope middel kan str0mme frit under den centrifugale adskillelse, hvorimod det ikke skal kunne str0mme frit, samtidig med, at det skal være stabilt efter afslutningen af den cen-15 trifugale adskillelse.

Et kendt thixotropt middel af denne type er et gel-lig-nende materiale bestâende af siliconeolie, siliciumoxid og et geldannende middel. Et flydende middel med denne 20 sammensætning udviser imidlertid visse problemer. F.eks. sker der en mekanisk blanding af bestanddele, som ikke er forligelige, og herved opnâs en thixotrop gel som f0lge af indvirkningen af det geldannende middel/ hvor-ved der sker en for0gelse af dannelsen af hydrogenbin-25 dinger imellem siliciumoxid-partiklerne (et middel, som opretholder den specifikke masse), og som f0lge heraf sker der en koagulering. Dette resulterer i en fasead-skillelse og i en ringe fluiditet under den centrifugale adskillelse. For at im0degâ dette problem har det været 30 foreslâet at tilsætte et overfladeaktivt middel med hen-blik pâ at undgâ denne faseadskillelse, men herved op-stâr et andet problem, nærmere bestemt hæmolyse pâ grund af den store mængde af tilstedeværende overfladeaktivt middel.

35 2

DK 156098 B

Derudover har thixotrope midler af den ovenfor angivne sammensætning en tendens til at ændre deres sammensæt-ning pâ grund af tværbinding, og sammensætningen kan og-sâ pàvirkes af andre kemiske ændringer som f0lge af ste-5 rilisation ved gammastrâling efter indkapsling af en passende mængde af midlet i en blodpr0ve-beholder. Her-ved nedsættes den fraktionerende funktion, hvilket ogsâ medf0rer en forsinkelse af blodkoaguleringen og af af-sætningen af koaguleret blod ved afdampning af lavmole-10 kylære komponenter i det gel-lignende materiale, hvorved den indre overflade af beholderen bliver hydrofob. Der-til kommer, at disse fraktionerende midler er forholds-vis kostbare.

15 Et andet kendt thixotropt middel bestâr af et gel-lignende materiale pâ polyesterbasis. Dette materiale er ikke fuldt tilfredsstillende, fordi det g0r den indre overflade i beholderen vandskyende, hvilket forsinker blodkoaguleringen og afsætningen af det koagulerede 20 blod. De thixotrope midler af denne type har yderligere den ulempe, at de lugter ubehageligt.

Det er derfor formâlet med den foreliggende opfindelse af tilvejebringe et thixotropt middel, som ikke er be-25 hæftet med de ulemper, som kendetegner de hidtil kendte midler. Det er endvidere et formai med den foreliggende opfindelse at tilvejebringe et thixotropt middel, som har en god stabilitet over lange tidsperioder, som kan underkastes stérilisation ved gammastrâling, som i det 30 væsentlige ikke er vandskyende, som i det væsentlige ikke lugter ubehageligt, og som kan fremstilles under for-holdsvis ringe omkostninger. Med et middel af denne type bliver det muligt at undgâ haemolyse og at undgâ den forsinkelse af blodkoaguleringen og af den afsætning af det 35 3

DK 156098 B

koagulerede blod pâ indersiden af pr0vebeholderenf som hidtil har været et problem, ogsâ i det tilfaelde, hvor blodet pâ forhând indf0res i pr0vebeholderen.

5 Med den foreliggende opfindelse tilvejebringes et thixo-tropt middel til brug ved fraktionering af sérum fra koaguleret blod, og det omhandlede serum-udskillende middel er ejendommeligt ved, at det som hovedkomponent indeholder en α-olefin-dialkylmaleat-copolymer med en 10 viskôsitet pâ mellem 10000 og 80000 cP ved 25 °C, og at det endvidere indeholder et middel til kontrol af visko-siteten og den specifikke massefylde, som er iblandet med det formâl at indstille den specifikke massefylde af det samlede middel til mellem 1,035 og 1,055.

15 I det serum-udskillede middel if0lge opfindelsen kan a-olefin-dialkylmaleat-copolymeren typisk hâve den almene formel .

h . ? ? i y 20 -4ç - c - ç - ç ή U RI o=ç ç-o/ “ v or2 °% hvori Ri betegner en alkylgruppe, der indeholder 2-58 25 carbonatomer, og som i copolymer-molekylet enten betegner den samme alkylgruppe eller forskellige alkyl-grupper. R2 og R3 kan hver for sig betegne methyl, et-hyl, butyl eller 2-ethylhexyl, og n er et helt tal, som er valgt sâledes, at viskositeten af copolymeren ligger 30 pâ mellem 10000 og 80000 cP, fortrinsvis pâ mellem 40000 og 80000 cP ved 25 °C. Disse værdier gælder, nâr copolymeren indgâr som hovedkomponent, hvilket svarer til et antal carbonatomer pâ mellem 30 og 60, nâr copolymeren indgâr i form af en voksagtig forbindelse.

35 4

DK 156098 B

Den nævnte a-olefin-dialkylmaleat-copolymer er lysegul, gennemskinnelig, lugtfri, inert overfor blod samt befri-et for tendenser til blodabsorption, eluering og lignen-de, og endvidere er den nævnte copolymer stabil over 5 lange tidsperioder. Den g0r det rauligt for den indre overflade af blodpr0vebeholderen at forblive ren og glatf eftersom den ikke producerer noget vandskyende ma-teriale. Den kemiske og fysiske natur af polymeren æn-drer sig ikke væsentligt ved stérilisation med gamma-10 strâler eller lignende.

Nâr det thixotrope middel if0lge opfindelsen anvendes til udskillelse af blodserum, ligger den specifikke mas-sefylde af α-olefin-dialkylmaleat-copolymeren pâ mellem 15 1,00 og 1,038, fortrinsvis imellem 1,027 og 1,035.

De alifatiske aminderivater af smektiske lerarter kan være derivater af alifatiske primære, sekundære, ter-tiære eller kvarternære aminer af smektiske lerarter.

20 Disse aminderivater er i sig selv kendte. Blandt disse derivater er alifatiske kvaternære aminderivater af smektiske lerarter særligt foretrukne. Som eksempler pâ sâdanne lerarter kan nævnes lerarter indeholdende mellem 8 og 24 carbonatomer, sâsom Bentone 34, Bentone 38, Ben-25 tone 27 og Bentone 128 (kvarternære ammoniumsalte af halvflydende lerarter fremstillet af NL Industry Co.).

Det uorganiske finkrystallinske materiale, som anvendes til justering af viskositeten og den specifikke masse-30 fylde, kan være valgt blandt calcinerede siliciumoxider, udfældede siliciumoxider og lignende, og disse forbin-delser kan tilsættes under hensyn til den specifikke massefylde og viskositeten af hovedkomponenten i en sâ-dan mængde, at den samlede blanding bliver gelagtig og 35 5

DK 156098 B

opnâr den ovenfor beskrevne specifikke massefylde.

Det strukturdannende middel, som anvendes i midlet if0l-ge opfindelsen, tilsættes for at frembringe og oprethol-5 de den gelagtige tilstand af det flydende thixotrope middel, og det kan anvendes, nâr det sk0nnes vanskeligt at g0re den samlede blanding gelagtig uden tilsaetning af et sâdant additiv. F.eks. kan man anvende en dimethyl-polysiloxan-polyoxyalkylen-copolymer (f.eks. SH-3771, 10 SH-190 eller SH-192 fra Toray Silicone Co., Ltd.) eller

Carbitol (f.eks. ethyldiglycol). Mængden af det strukturdannende middel kan udvælges under hensyn til arten af hovedkomponenten og arten af de viskositets- og massefylde- justerende midler, sâledes at det er geldannende 15 samtidig med, at det er blandbart med andre komponenter.

Midlet if0lge den foreliggende opfindelse kan foruden a-olefin-dialkylmaleat-copolymeren, de viskositets- og massefylde-justerende midler samt det strukturdannende 20 middel indeholde et ikke-ionisk overfladeaktivt middel (f.eks. polyoxyethylen-hydrogeneret castorolie-monolau-rat, polyoxyethylen-hydrogeneret castorolie-tri-isostea-rat eller lignende). En tilsaetning af en lille mængde (f.eks. mellem 0,47 og 2,7 vægt-%) af det overfladeakti-25 ve middel er nyttigt, hvis man 0nsker at undgâ fasead-skillelse efter længere tidsperioder, og eftersom det overfladeaktive middel er ikke-ionisk, er der ikke nogen mulighed for hæmolyse. Anvendelsen af det overfladeaktive middel er specielt nyttig, nâr der kun anvendes sili-30 ciumoxid som viskositets- og massefylde-justerende middel .

Opfindelsen illustreres nærmere under henvisning til tegningen, hvor 35 6

DK 156098 B

fig. 1 viser et skematisk snit af det thixotrope middel if0lge opfindelsen i form af en blodserum-separator ind-kapslet i en blodpr0vebeholder, og 5 fig. 2. er et tværsnit af den i fig. 1. viste blodpr0ve-beholder efter adskillelse ved centrifugering.

I de efterf0lgende tabeller 1 og 2 er vist nogle mulige samraensætninger af det thixotrope middel if0lge opfin-10 delsen. I disse tabeller er α-olefin-dialkylmaleat-copo-lymeren (A) en η-α-olefin-dimethylmaleat-copolymer med en gennemsnitlig molekylvægt pâ mellem 3000 og 4000 og en specifik massefylde pâ mellem 1,027 og 1,035 ved 25 °C. Viskositeten er mellem 40000 og 70000 cP ved 25 °C, 15 og copolymeren mellem 12 og 14 carbonatomer. Copolymeren (B) er en η-α-olefin-dimethylmaleat-copolymer med en gennemsnitlig molekylvægt pâ mellem 2000 og 3000 og en specifik massefylde pâ 1,005 ved 28 °C. Viskositeten er mellem 10000 og 15000 cP ved 28 °C, og denne copolymer 20 er en blanding af a-olefin-bestanddele med mellem 6 og 8 carbonatomer. Copolymeren (C) er en voksagtig n-a-olef-in-dimethylmaleat-copolymer bestâende af α-olefin-kompo-nenter med et gennemsnitlig indhold af carbonatomer pâ mellem 30-60. Copolymeren (D) er en η-α-olefin-dimethyl-25 maleat-copolymer med en gennemsnitlig molekylvægt pâ mellem 3600 og 4000 og en specifik massefylde pâ omkring 0,995 ved 28 °C. Viskositeten er omkring 10000 cP ved 28 °C, og copolymeren bestâr af en blanding af a-olefin-komponenter indeholdende mellem 16 og 18 carbonatomer.

30 Endelig er copolymeren (E), som er nævnt i tabel 2, en η-α-olefin-dimethylmaleat-copolymer med en gennemsnitlig molekylvægt pâ mellem 3000 og 4000 og en specifik massefylde pâ mellem 1,027 og 1,035 ved 25 °C. Viskositeten er mellem 40000 og 70000 cP ved 25 °C, og copolymeren 35 7

DK 156098 B

bestâr af en blanding af α-olefin-komponenter med mellem 12 og 14 carbonatomer (forhandlet under navnet PAR - 124 af MITSUBISHI KASEI Industries Ltd.)· 5 Som andre eksempler pâ a-olefin-dimethylmaleat-copolyme-re kan foruden de ovenfor nævnte eksempler anf0res n-a-olefin-dibutylmaleat-copolymeren og n-a-olefin-di-2-et-hyl-hexyl-copolymeren.

10 15 20 25 30 35

8 DK 156098 B

0 Ό

G

0 0 t) χ5 td • Cî i—( -—' _;_I I I I I 0 0 <

Ό G

^ (d >s C/D

rH tfl

* 0 I—! S

HI G Ή

-d· G -G

O · Ο Φ ω

•v *» bû s i—i tyi O

oo o Al l l H CJD β -HOU

O H MD -H -G

H H β !>i

-d- G &1 G G

ιΓν Ο Ο Φ O \ +J

^ - *> bû = ω

Φ Ο- Ο H Ο I I I H <f β β ai G

H OH MD *H G i—i Ό

Φ H MD \ G

•G IA G «id—> H

-P Ο Ο Φ vo a · bû - - &0=rH— QGl

8 MD lO II I CO I I I H IA G Q 0 Eri S

> O N Ή HBlJJ

'—' H AJ h-I r—1 td

<f β *· 0 *· G

O OO Ο Φ 0 · G · M-i

λ ·» ** ·» foi) ~ w Ο Μ O

IA OOI I H I <f" H I I H G r-iUSUG

ΙΑ ΙΑ ΙΑ -H Φ -P Φ

O G G WG -P

<j- β Ghhh^

* Ο Ο Ο Φ Q Cfl 0CO G

- -> ·> Μ = -ΡΟΧΟΌ

-d- Ο I ΙΑ I Al I I I l I H ΙΑ β (fl & -G (¾ O

O H r-1 w -P H G

H Al 0 C GC a λ IA G X (d o oo oo φ -h s as

~ ·* - - bû = -G O O G

IA OlHlAllHIlAI HOO G Gft tT>fG (1)

O IA -H (d (¾ -H (¾ -G

Τ' H OD . a H i—IH G

G ÎA G S PS (ri

® OO .Ο Φ Cn -H G

rH ·* t» foQ ~ ._ι rf rj rri m

'O AJ Ol I I IHHIII H Al G I—I G CQ G t—I

-H O MD -H. -G P £ P

1-1 a: -h φ φ

ni n ^ H G -G G -G TD

3; ° OO _ ω Λ! Grk G

a *" ** ·» 60 ” g 3 n\ H ni O H Olll HlItAlHfAG 0 £ &V0 $ H 9 Η « 0 O >i "G M G G G G r-i H Φ a 0 am .5 · t7"- — > Γ1 G 'O f—l U m G - 0 - (d

-0 S 0 rH βιΗ ,G

R \ \ °? v "G tn G trm-i 04 O — — — —- * G a C ffl O Q ^ B S m 2 O w w w w ü « £

Oj i o g £ J τι c -P ΙΑ εή ^ id d (i ιί § S ai « G°'düe jS h ω a â' *tat* ® S 3 ° <h S § s . Ά & « 3 -S oS% h B 3 îlb 1111 Ί 3 I SBa·*

Φ -H ODOwffiwCOcd G-'-,<Um^(U

vA ω Ό i O CD -d- l>- Al s +3 ,Q (fl m en G

WH I CCjCMlAtAAlH Φ 8 ω -G en «

PQ Φ β ,y .p φ h -G rd r-ι id G

C tJ ·η ηηφφφφηη ta ^ igGgG

H β «G ·Η·Η.βββΰ^Μ>>£ίΟΡ0

•H Φ tQWOOOOH OH φ P Λ1 0 M -G

/D H 00-P-P-P-PO.ÎrfOSO-H GH td GO G G β β·β β φ ω g I GPI'OP^

Ο 1 φφφφφφα1Η8(3ΓΟΗ >Η W

a a <l <! w w w ffl co > ffi w £ p e υ ffi d) ü) û* a*

.......—........... * m 1*1 ω X

9

DK 156098 B

__;- I

^ O

• Q. ·

P O CM EH ü O

P i

ci O

CM CD 00

<J- · H CM

O MD O Ci O ÏN

CM - - Φ O P I

^ H IOI IN I IA O H H bû = _ H

Φ O IA Ci S cd Q

i—I i—I 1 -H O MD

φ H X CM

-d ω o

+3 P >> «U

h0 A p H Pi æ p· s o

i> O O IA O Ci P Pt -P

v ' [—j λ ^ *> »> φ I Φ Η ΟΟΙ IN I Η Ο Η CM bû= S Ci -Ρ

ΙΑ A A Ci Q Cd -H

H ffi X W

H O O

O S H P

<f -HW

O O CM O Ci Cd W H

O - - Φ p ÎN î> H Ο I A A I I O H CO b0 = 'HP., O MD Ci O Ci H -H -P ft Φ

A P H

<f" Çj i>> MO

ooo o ci H p o

»\ *\ f» λ Q) O -P

(J\ Ο I m I H 1 U Q) ^

O IN Ci ft S O

^ H Ή ^ H

i_i PO

Φ -PO

H CM cd ^ CM

V <t· P · w •H O O O Ci d d g - — - φ cd-ΡΟ 00 Oll I MD H Ο H Ο bfl = ΗΡ00 φ ο co ci oo

Q, H -H

Ο O · H

u CM S O

ij 00 P- IOI

0 A H O Ci Φ

s4 - Φ ·Η Φ O

-A IN Oll MD I O O · H <f" MO - H Ci MD

ri O A Ci O O -

4J H -H P O O

____._____ O -H

«rd -P H «d 0, P Φ -H ft φ cd co H I ° . Ά

φ VN P

, H -P cd H

Ο, ° ω Φ P fiN

g CM —' ^ ^ X p Ο 4H

g O H W Ο X ^ -P Φ EH CD

$ ov_/wv^x «X o cd ci w ïï i XX h φ cd ra <n -P X H O p b0 P Cd Z. cd H Φ A 5) O <H g Φ φ P cm cd p H d'd \ o P -p λ cd 'd-pajOM M în ,¾ -h cm g h g P o p o «h H gH <h i -d ·Η

P · ÎN Φ ÎN -Cf cd Ci O O

P P P -P P <H Ο ΦΡΦ PQ 3 H Χ Χ!>53ΦΗ bp Hftft <i Cd CM X H Φ CQ X Ci >,v^03 EH Φ-H IN X -P Ci K> w H p ra P od o p 3 cd ci H -p - 3

Hl lOcdcdg-P .PH Φ H CD

Φ Ci li CM φ -d Φ 8 H !N

P -H ΡΡΡ -ΡΦΗΗΦΧΙΝ

Ci <H H H cd d -H ·Η W P Φ P O IA P

•H Φ HHH-P'H W !>, g p cd >> I Φ PH m w y il *h oh φ cd -p H ffi g

po oopgopog-p O CQ

o i ρρφρ φ ra a a φρμ ρ P a φ φ -p cm h J ® ω ω 8 ‘,<î <Jj O CQ CQ > ffi W W w S S Ë,

__‘_I_ X X X X H

i 10

DK 156098 B

I det f0lgende beskrives fremstillingen af det serum-ud- i skillende middel if0lge opfindelsen.

F0rst fremstilles α-olefin-dialkylmaleat-copolymeren ved 5 at polymerisere ethylen, hvorved der opnâs en n-a-ole-fin. Denne opdeles derefter i fraktioner i afhængighed af antallet af carbonatomer/ f.eks. i fraktioner med 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16 og 18 carbonatomer, og fraktioner med mellem 30 og 60 carbonatomer opnâs ved fraktioneret 10 destination. I afhængighed af den specifikke massefylde af væsken, som skal fraktioneres, kan fraktionerne enten anvendes hver for sig eller i kombination, og fraktioner indeholdende 12 og 14 eller 6 og 8 carbonatomer fore-trækkes ved serumudskillelsen af hensyn til viskositeten 15 og den specifikke massefylde. Den udskilte fraktion un-derkastes en copolymerisering ved hjælp af en maleinsy-rediester pâ konventionel mâde, hvorved man opnâr det 0nskede produkt.

20 Denne α-olefin-dialkylmaleat-copolymer med en viskositet ! pâ mellem 10000 og 80000 cP, fortrinsvis mellem 40000 og 80000 cP (ved 25 °C), anvendes som basis, og man kan ef-ter behov tilsætte et alifatisk aminderivat af en halv-flydende lerart, et viskositets- og massefylde-justeren-25 de middel sâsom findelt siliciumoxid, et strukturdannen-de middel, et ikke-ionisk overfladeaktivt middel og en voks bestâende af en α-olefin-maleinsyrediester-copoly-mer (f.eks. den ovennævnte η-α-olefin indeholdende 60-80 carbonatomer). Blandingen findeles ved hjælp af enten en 30 valsem0lle, en formalingsm0lle, en planetmixer eller lignende.

Det sâledes fremstillede thixotrope middel b0r, sâfremt det skal anvendes til serumudskillelse, fortrinsvis hâve 35

DK 156098B

11 en viskositet pâ mellm 250000 og 800000 cP ved 25 °C og en specifik massefylde pâ mellem 1,035 og 1,055. Samt-lige komponenter, som er anf0rt i de foregâende tabel-ler, er i sig selv thixotrope, idet de bliver letflyden-5 de, nâr der pâtrykkes en centrifugalkraft eller lignen-de, mens de forbliver i normal tilstand i form af en stabil ensartet gel under andre omstændigheder.

Det fremgâr af de foregâende tabeller 1 og 2, at selv om 10 blodet pâ forhând opbevares i en blodpr0vebeholder, bliver den indre overflade af beholderen ikke vandskyende, og pâ denne mâde undgâr man, at der sker en sammenklæb-ning af koaguleret materiale, eller at blodkoaguleringen forsinkes. Disse fordele kan tilskrives anvendelsen af 15 en α-olefinmaleat-diester-copolymer, som ikke tilveje-bringer lavmolekylære flygtige materialer. Som f0lge heraf er det muligt, nâr det omhandlede thixotrope mid-del anvendes i en blodpr0vebeholder, at danne en stabil aflukning i grænseomrâdet imellem serumfasen og den koa-20 gulerede fase ved en almindelig centrifugering i 10 mi-nutter ved 700 til 1000 G. Herved kan man let undgâ en indeslutning af fibrin ved fraktionering af sérum ved dekantering. Da det omhandlede middel endvidere befinder sig i stabil tilstand imellem serumfasen og den koagule-25 rede fase efter centrifugeringen, er der kun ringe risi-ko for, at den koagulerede fase blandes med serumfasen under transporten af blod fra et hospital til et labora-torum eller lignende.

30 I det f0lgende gives et eksempel pâ anvendelse af et thixotropt middel if0lge opfindelsen, som pâ forhând er anbragt i en blodpr0vebeholder.

35

DK 156098 B

12

Som det er vist pâ fig. 1. anbragtes omkring 1,7 ml af hvert væske-udskillende middel (1) (forbindelse nr. 1-12 som angivet i de ovenstâende tabeller) i bunden af en blodp'r0vebeholder (2) med volumen 10 cm^. Et ikke-vævet 5 poLyesterklæde (3) belagt med 1-5 mg diatoméjord (f.eks.

"Caper Flattery Sand", handelsnavn WG-200, fra Kyoritsu Ceramic Materials Co., Ltd.) eller med glaspulver blev derefter anbragt pâ skrâ i hver blodpr0vebeholder. Hver af beholderne blev derefter lukket med en prop af butyl-10 gummi (4), hvorpâ beholderne blev anbragt under reduce-ret tryk. En blodpr0ve anbragtes derefter i hver blod-pr0vebeholder og fik lov at henstâ i 7-8 minutter. Dette bevirkede, at diatoméjorden dispergerede i blodet, da dette blev indf0rt i beholderen, og sammen med det ikke-15 vævede klæde (3) bevirkede diatoméjorden en accélération af blodkoaguleringen. Sâledes opnâedes en passende koa-gulering inden for et kort tidsrum. Hver blodpr0vebehol-der blev anbragt i en centrifuge i 10 minutter ved 700-1000 G, og de thixotrope midler blev derved pâ stabil 20 mâde fordelt imellem serumfasen og den koagulerede fase.

Denne tilstand er vist pâ fig. 2. Pâ grund af, at det omhandlede middel er thixotropt og har en specifik mas-sefylde mellem massefylden af serumfasen (5) og masse-fylden af det koagulerede blod (6), forbliver midlet 25 imellem serumfasen (5) og det koagulerede blod (6), idet det danner en gel, som adskiller disse to faser.

Idet diatoméjorden og det ikke-vævede klæde (3) har hojere specifikke massefylder, indgâr de ikke i fasen af blodserum (5). Den opnâede fase af blodserum (5) er 30 sâledes af h0j renhed og uden indhold af fibrin. Blod-serumfasen (5) kan let udvindes fra blodpr0vebeholderen ved dekantering eller ved afsugning igennem en fin dyse.

35 13

DK 156098 B

Der er ogsâ mulighed for, at man foruden det ovenfor be-skrevne ikke-vævede klæde (3) til fremskynding af blod-koaguleringen kan anvende klædestoffer, som indeholder en passende mængde pulveriseret koagulerings-fremskyn-5 dende middel pâ en hydrofil bærer, som har en h0jere specifik massefylde end blodcellerne, ved hjælp af et o serum-opl0seligt bindemiddel.

Blandt de anvendelige bærere kan anf0res textiler, fil-10 terpapir, ikke-vævet klæde, borauldsfr0 og lignende. Det er imidlertid pâkrævet, at bæreren har en h0jere specifik massefylde end blodcellerne, sâledes at der ikke op-stâr nogen problemer med hensyn til hæmolyse og bioke-misk karakterisering. Bæreren skal ogsâ hâve vandtilba-15 geholdende egenskaber (den skal f.eks. være hydrofil), og den skal hâve en vandtilbageholdende struktur (f.eks. âbne celler), ligesom den skal hâve en tilstrækkelig stivhed eller elasticitet til at kunne holdes inden for den intermediære del af en blodpr0vebeholder. Endelig 20 skal bæreren hâve en tilstrækkelig fleksibilitet til at kunne bevæges ind i en fase og blodceller under indvirk-ning af en centrifugalkraft, og den skal hâve en st0r-relse, som muligg0r, at den kan nedsænkes i en fase af blodceller.

25

Med hensyn til midlet der fremmer blodkoagulering, er der ikke nogen begrænsninger, eftersom det ikke i væ-sentlig grad fremkalder hæmolyse, og eftersom det har en evne til at flyde oven pâ blod. F.eks. er det muligt at 30 anvende pulvere af diatoméjord, glas, kaolin og bentonit med en partikelst0rrelse mellem 0,4 og 20 μπι.

Mængden af blodkoagulerings-fremkaldende middel, som skal afsættes pâ bæreren, kan være mellem 0,3 og 5,0 mg, 35 14

DK 156098 B

fortrinsvis mellem 0,3 og 3,5 mg pr. 10 ml blod. Hvis mængden af midlet overskrider den 0vre grænse, kan det pâvirke blodpr0ven pâ grund af dispergering af pulveret.

Hvis pà den anden side mængden af midlet ligger under 5 den nedre grænse, kan det være vanskeligt at opnâ en tilstrækkelig blodkoaguleringsvirkning.

r Mængden af det blodkoagulerings-fremkaldende middel, som skal afsættes pâ en bærer, kan pâ passende vis justeres 10 ved kontrol af blandingsforholdet imellem det koagule-ringsfremmende middel og bindemidlet.

Det er pâkrævet, at bindemidlet er opl0seligt i sérum.

Af denne ârsag foretrækker man at opl0se det blodkoagu-15 lerings-fremmende middel i blod og umiddelbart derefter at dispergere det i blodet, sâ snart blodet er anbragt i en blodpr0vebeholder. Derved fremskynder man dannelsen af koaguleret materiale. Det kræves ogsâ, at bindemidlet har en passende grad af klæbrighed og ikke-flygtighed, 20 at det er hæmatologisk inaktivt, og at det praktisk tait ikke pâvirkes af sterilisationsoperationer (f.eks. strâ-ling med gamma-strâler). Som eksempler pâ sâdanne binde-midler kan anf0res vandopl0selig silicone, polyethylen-glycol, polyvinylpyrrolidon, dextran, carboxymethylcel-25 lulose, hydroxypropylmethylcellulose og andre cellulose-derivater.

Specielt er cellulosederivater og polyvinylpyrrolidon at foretraekke med hensyn til opl0selig og hygroskopi. Dex-30 tran har en ringere opl0selighed end de 0vrige materi- aler. Polyethylenglycol er en hygroskopisk forbindelse, og den er derfor ikke egnet til opbevaring ved stuetem-peratur i længere tidsperioder efter fremstillingen.

35

DK 156098B

15

Det ikke-vævede klæde, som er forsynet med en pâ forhând fastlagt mængde af det blodkoagulerings-fremmende middel, kan let fremstilles ved neddypning eller pâ lignen-de mâde.

5 I det ovenfor beskrevne eksempel er omtalt et tilfælde, hvori det omhandlede thixotrope middel pâ forhând indf0-res i en pr0vebeholder. Imidlertid er opfindelsen ikke afgrænset til det ovenfor beskrevne eksempel. Sâledes 10 kan det thixotrope middel anbringes i sin beholder i den 0verste del af en blodpr0vebeholder, efter at gummiprop-pen er fjernet og blodpr0ven er pâfyldt. I dette tilfælde indf0res midlet i blodpr0vebeholderen ved centrifuge-ring, idet der dannes en blokerende fase i grænsefladen 15 imellem serum-fasen og den koagulerede fase.

Nâr det thixotrope middel anvendes som serum-adskillende middel/ danner det ikke nogen vandskyende film i blod-pr0vebeholderne ved frig0relse af vandskyende forbindel-20 ser, og af denne grund sker der ikke nogen forsinkelse af blodkoaguleringen. Eftersom blodpr0vebeholderne er fremstillet af glas, sker der en accélération af koagu-leringen, nâr blodet kommer i kontakt med glassets over-flade, og af denne grund er det n0dvendigt at holde den 25 indre overflade af beholderen ren. 1 sammenligning med konventionelle midler, som har den ulempe, at de danner vandskyende film, sker der en reduktion i den tid, som er n0dvendig til opsamling af det 0nskede blodserum.

Denne reduktion bliver endnu mere effektiv ved kombina-30 tion med anvendelsen af diatoméjord og ikke-vævet klæde. Tidsbesparelsen kan bel0be sig til helt op til 30 minut- ter.

35 16

DK 156098 B

Nâr man foretager indkapslingen i blodpr0vebeholderen, er det 0nskeligt at foretage en stérilisation. Ved kli-niske fors0g har det vist sig, at der ikke forekommer nogen kemiske eller fysiske ændringer, som giver u0n-5 skede virkninger, efter stérilisation med gammastrâler i en dosis pâ 2,5 megarad.

En α-olefinmaleat-diester-copolymer, som indeholder en alkylgruppe med mellem 4 og 60 carbonatomer i a-olefin-10 delen, og en maleatester, som indeholder en funktionel gruppe valgt blandt methyl, ethyl, butyl og 2-ethyl-hexyl, og som har en viskositet pâ mellem 10000 og 80000 cP ved 25 °C, er meget stabile forbindelser over lange tidsperioder. Nâr man derfor anvender en sâdan copolymer 15 som hovedbestanddel og blander den med en viskositets-og massefylde-justerende forbindelse til fremstiling af et thixotropt middel, kan man let omdanne blandingen til en gel og justere den pâ en sâdan mâde, at den har en specifik massefylde, som ligger imellem massefylden 20 af sérum og massefylden af koaguleret blod, og der er ikke i væsentlig grad taie om faseadskillelse eller ned-sættelse af fluiditeten.

Som det ogsâ fremgâr af det foregâende (tabel 1), opnâr 25 man, nâr man anvender et alifatisk aminderivat med mellem 8 og 24 carbonatomer valgt blandt halvflydende eller finkrystallinske uorganiske materialer sâsom hydrofobt siliciumoxidpulver som viskositets- og massefylde-justerende middel, et thixotropt middel, som ikke undergâr 30 faseadskillelse eller nedsættelse af fluiditeten, og hvis thixotrope karakteristika er stabile. Hvis det om-handlede middel indbefatter et alifatisk aminderivat af en halvflydende lerart med 8-24 carbonatomer, kan man let efterkontrollere dispergeringsgraden i midlet ved 35 17

DK 156098 B

hjælp af et mikroskop eller lignende, hvilket letter kvalitetskontrollen, eftersom partiklerne i den smek-tiske lerart ikke er lystransmitterende.

5 Eftersom de alifatiske aminderivater af smektiske lerar-ter, sâsom kvarternære ammoniumsalt-derivater, har en fortykkende virkning, sâledes som det fremgâr af tabel 1, er det muligt at opnâ et stabilt thixotropt middel, uden at det er n0dvendigt at anvende et strukturdannende 10 middel.

Blandt de i tabel 1 og 2 viste eksempler er a-olefinma-leat-diester-copolymererne (A), (B), (C) og (E) aile n-α-olefin-dimethylmaleat-copolymere, og nâr de anvendes 15 som hovedbestanddele i et middel if0lge opfindelsen, g0r de det muligt pâ bekvem mâde at opnâ et middel, hvis specifikke massefylde ligger omtrent midt imellem den specifikke massefylde af sérum og den specifikke massefylde af koaguleret blod, som har en passende viskosi-20 tetsgrad, og som kræver en mindre mængde tilsat viskosi-tets- og massefylde-justerende middel. Desuden er sâdan-ne forbindelser i det væsentlige uden ændringer i l0bet af tiden, og de er i det væsentlige befriet for proble-mer vedr0rende faseadskillelse og formindskelse af flui-25 diteten.

Den ovenfor beskrevne voksagtige forbindelse er specielt nyttig, nâr man 0nsker at undgâ, at det thixotrope middel undergâr faseadskillelse.

30 35

Claims (10)

1. Middel med thixotrope karakteristika til brug ved 5 fraktionering af blod ved anvendelse af centrifugering, kendetegnet ved, at det som hovedbestanddel indeholder en α-olefin-dialkylmaleat-copolymer med en viskositet pâ mellem 10000 og 80000 cP ved 25 °C, og at det endvidere indeholder et middel til kontrol af vis-10 kositeten og den specifikke massefylde, hvilket er iblandet med det formai at indstille den specifikke massefylde af det samlede middel til mellem 1,035 og 1,055.

2. Middel if0lge krav 1, kendetegnet ved, at 15 α-olefin-dialkylmaleat-copolymeren har den almene formel: h ? ? ? \ —f c - C - Ç - ç -J \h Ri °=ç Ç-O/ n

20 OR2 or3 hvori Rx betegner en alkylgruppe indeholdende mellem 2 og 58 carbonatomer, idet carbonatomerne kan indgâ i ens eller forskellige grupper i copolymer-molekylet, R2 og 25 R3 betegner methyl, ethyl, butyl eller 2-ethylhexyl, og n er et helt tal.

3. Middel if0lge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at midlet til kontrol af viskositeten og den speci- 30 fikke massefylde bestâr af mindst en forbindelse valgt blandt alifatiske amin-derivater af smektiske lerarter indeholdende mellem 8 og 24 carbonatomer og uorganiske finkrystallinske materialer. 35 DK 156098 B

4. Middel if0lge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at de alifatiske amin-derivater af smektiske lerar-ter er kvaternære ammoniumsalte af disse lerarter.

5. Middel if0lge krav 1 eller 2,kendetegnet ved, at de uorganiske finkrystallinske materialer bestâr af calcineret siliciumoxid eller precipiteret silicium-oxid.

6. Middel if0lge krav 2, kendetegnet ved, at r2 °9 r3 i den viste formel begge er methyl.

7. Middel if0lge krav 6, kendetegnet ved, at Rl er en kombination af alkylgrupper med mellem 10 og 12 15 carbonatomer.

8. Middel if0lge krav 6, kendetegnet ved, at Rl er en kombination af alkylgrupper med mellem 4 og 6 carbonatomer. 20

9. Middel if0lge krav 6, kendetegnet ved, at det yderligere indeholder et strukturdannende middel i en mængde pâ mellem 0,04 og 0,6 vægtdele for hver 100 vægtdele α-olefin-dialkylmaleat-copolymer. 25

10. Middel if0lge krav 6, kendetegnet ved, at det yderligere indeholder mellem 1,0 og 3,0 vægt-%, be-regnet pâ mængden af hovedkomponenten, af en voksagtig forbindelse i form af en α-olefin-dialkylmaleat-copoly- 30 mer, hvis a-olefin-komponent indeholder mellem 30 og 60 carbonatomer. 35