DE69835824T2

DE69835824T2 - Antitumorkombination aus 3-amino-1,2,4-benzotriazine 1,4-dioxid/paclitaxel/platin

Info

Publication number: DE69835824T2
Application number: DE69835824T
Authority: DE
Inventors: L. Daniel Holcombe DEXTER; E. Paul West Chester JUNIEWICZ; B. James Glenmoore RAKE; D. Daniel San Antonio VON HOFF
Original assignee: Sanofi Aventis US LLC
Current assignee: Sanofi Aventis US LLC
Priority date: 1997-03-07
Filing date: 1998-02-17
Publication date: 2007-03-29
Anticipated expiration: 2018-02-18
Also published as: EP1014990A4; DE69835824D1; CA2281807A1; HRP980095A2; US6319923B1; WO1998039009A1; AU6178198A; US6063780A; ES2268764T3; NO994330D0; ZA981609B; EP1014990A1; ATE338553T1; DK1014990T3; CA2281807C; NO994330L; EP1014990B1; NO324974B1; PT1014990E; BR9808221A

Description

Gebiet der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft das Gebiet von Behandlungen gegen Krebstumore. Spezieller betrifft die vorliegende Erfindung die Behandlung von Krebstumoren mit Tirapazamin, Paclitaxel und einem Platinkomplex.
Hintergrund der Erfindung
Tirapazamin ist ein bioreduktives Mittel, das vorzugsweise hypoxische Zellen tötet. Tirapazamin; d.h. 3-Amino-1,2,4-benzotriazin-1,4-dioxid (SR-4233), hat die Strukturformel
Gegeben als Mehrfachinjektionen in Verbindung mit fraktionierter Bestrahlung, tötet Tirapazamin hypoxische Zellen, erhöht die Tumorzellenabtötung unter Bewahren von normalem Gewebe bei Maus-SCCVII und anderen Tumoren, wie berichtet von: Brown, J. M., Potentiation by the hypoxic cytotoxin SR 4233 of cell killing produced by fractionated irradiation of mouse tumors, Cancer Res. 50:7745-7749 (1990) und Brown, J. M. et al., SR 4233: A tumor specific radiosensitizer active in fractionated radiation regimens, Radiother., and Oncol., 20:151-156 (1991). Brown hat festgestellt, dass Tumorhypoxie tatsächlich ein therapeutischer Vorteil sein kann, wenn ein hypoxisches Cytotoxin, wie Tirapazamin, mit fraktionierter Bestrahlung kombiniert wird: Brown, J. M. et al., Tumor hypoxia: the picture has changed in the 1990s, Int. J. Radiat. Biol., 65:95-102 (1994); und Brown, J. M. et al., Therapeutic advantage of hypoxic cells in tumors: a theoretical study, J. Nat. Can. Inst., 83:178-185 (1991).
Die Internationale Anmeldung Nr. PCT/US89/01037 offenbart 1,2,4-Benzotriazinoxide als Radiosensibilisatoren und selektive zytotoxische Mittel. Damit in Beziehung stehende Patente schließen ein: US-Patent 5 175 287, das die Verwendung von 1,2,4-Benzotriazinoxiden in Verbindung mit Strahlung für die Behandlung von Tumoren offenbart. Die 1,2,4-Benzotriazinoxide sensibilisieren die Tumorzellen gegenüber Strahlung und machen sie für diese Behandlungsbedingung zugänglicher. US-Patente Nummern 3 868 372 und 4 001 410 offenbaren die Herstellung von 1,2,4-Benzotriazinoxiden, und US-Patente Nummern 3 991 189 und 3 957 799 offenbaren, die Derivate von 1,2,4-Benzotriazinoxiden.
Paclitaxel ist ein Naturprodukt mit Antitumorwirkung. Der chemische Name für Paclitaxel ist 5β,20-Epoxy-1,2α,4,7β,10β,13α-hexahydroxytax-11-en-9-on-4,10-diacetat-2-benzoat-13-ester mit (2R,3S)-N-Benzoyl-3-phenylisoserin. Paclitaxel hat die nachstehende Strukturformel:
Paclitaxel ist ein weißes bis weißliches, kristallines Pulver mit der empirischen Formel C₄₇H₅₁NO₁₄ und einem Molekulargewicht von 853,9. Es ist stark lipophil, in Wasser unlöslich und schmilzt bei rund 216–217°C.
Paclitaxel ist ein Antimikrotubulusmittel, das den Zusammenbau von Mikrotubuli aus Tubulindimeren fördert und Mikrotubuli durch Verhindern von Depolymerisation stabilisiert. Diese Stabilisierung führt zur Hemmung der normalen dynamischen Reorganisation des Mikrotubulusnetzwerks, das für die lebenswichtige Interphase und für mitotische Zellfunktionen wesentlich ist. Außerdem induziert Paclitaxel anormale Anordnungen oder „Bündel" von Mikrotubuli über den gesamten Zellzyklus hinweg und multiple Teilungssterne von Mikrotubuli während der Mitose.
Cisplatin ist ein Platinkoordinationskomplex, der als ein chemotherapeutisches Krebsmittel verwendet wird. Cisplatin; d.h. cis-Diammindichlorplatin, hat ein Zentralatom von Platin, das von zwei Chloridatomen und zwei Ammoniakmolekülen in cis-Position umgeben ist, und hat die Strukturformel:
Es ist ein weißes Pulver (Fp. ≈207°C) mit der Molekülformel PtCl₂H₆N₂ und einem Molekulargewicht von 300, 1. Es ist in Wasser oder Salzlösung mit 1 mg/ml und in Dimethylformamid bei 24 mg/ml löslich. Aufgrund seiner chemischen Struktur sind die Chloratome von Cisplatin für chemische Austauschreaktionen durch Nukleophile, wie Wasser oder Sulfhydrylgruppen, anfälliger, als für einen Enzym-katalysierten Metabolismus.
Carboplatin ist eine Platinkoordinationsverbindung, die als ein chemotherapeutisches Krebsmittel verwendet wird. Der chemische Name für Carboplatin ist Platin, Diammin[1,1-cyclobutan-dicarboxylato(2)-0,0']-, (SP-4-2). Carboplatin hat die nachstehende Strukturformel:
Carboplatin ist ein kristallines Pulver mit der Molekülformel C₆H₁₂N₂O₄Pt und einem Molekulargewicht von 371, 25. Es ist in Wasser mit einer Rate von ungefähr 14 mg/ml löslich und der pH-Wert einer 1 %igen Lösung ist 5–7. Es ist in Ethanol, Aceton und Dimethylacetamid eigentlich unlöslich. Carboplatin, wie Cisplatin, erzeugt vorwiegend Zwischenstrang-DNA-Vernetzungen, anstatt DNA-Proteinvernetzungen. Diese Wirkung ist scheinbar Zellzyklus-unspezifisch. Die Aquation von Carboplatin, von der angenommen wird, dass sie die aktive Spezies erzeugt, findet bei einer langsameren Geschwindigkeit als im Fall von Cisplatin statt. Trotz dieses Unterschieds scheint es, dass sowohl Carboplatin als auch Cisplatin gleiche Anzahlen von Arzneistoff-DNA-Vernetzungen induzieren, was äquivalente Läsionen und biologische Wirkungen verursacht. Die Unterschiede in Potenzen für Carboplatin und Cisplatin scheinen direkt mit dem Unterschied in den Aquationsraten in Beziehung zu stehen.
Ein weiterer Platinkomplex, der klinische Hoffnung zeigt, ist Oxaliplatin. Oxaliplatin; d.h. cis-Oxalato(trans-1-1,2-cyclohexandiamin)platin(II) mit der Struktur
wird in US-Patent 4 169 846 beschrieben. Damit in Beziehung stehende Patente schließen ein: US-Patent 5 290 961, US-Patent 5 298 642, US-Patent 5 338 874, US-Patent 5 420 319 und PCT/IB/00614.
Holden et al. (1992) „Enhancement of Alkylating Agent Activity by SR-4233 in the FSaIIC Murine Fibrosarcoma" JNCI 84:187-193 offenbart die Verwendung von SR-4233, auch bekannt als Tirapazamin, in Kombination mit einem Antitumoralkylierungsmittel. Die vier Antitumoralkylierungsmittel, Cisplatin, Cyclophosphamid, Carmustin und Melphalan, wurden jeweils getestet, um die Fähigkeit von Tirapazamin zu prüfen, die Resistenz von hypoxischen Tumorzellen gegen Antitumoralkylierungsmittel zu überwinden. Tirapazamin wurde einzeln und in Kombination mit variierenden Mengen von jedem der Antitumoralkylierungsmittel getestet. Wenn SR-4233 kurz vor Einzeldosierungsbehandlung mit Cyclophosphamid, Carmustin oder Melphalan verabreicht wurde, wurde bemerkenswerte Dosiserhöhung, die zu synergistischen zytotoxischen Effekten auf Tumorzellen führte, beobachtet. Wenn SR-4233 kurz vor der Einzeldosisbehandlung mit Cisplatin verabreicht wurde, führte jedoch die Dosisverstärkung zu einem additiven Effekt, ausgenommen bei dem höchsten Dosisspiegel von Cisplatin.
Brown, US-Patent Nr. 5 484 612, offenbart die Behandlung von Krebstumoren mit Kombinationen von Chemotherapiemitteln und 1,2,4-Benzotriazinoxiden.
Dorie et al. (Cancer Chemotherapy and Pharmacology; 1997: Seiten 361-366) beschreiben die in vivo Aktivität von verschiedenen Kombinationen von zwei chemotherapeutischen Mitteln gegen Tumore. Tirapazamin und Carboplatin hatten einen synergistischen Effekt, während Tirapazamin und Taxol einen additiven Effekt erzeugten.
US 5 484 612 offenbart die Verwendung einer Kombination von Tirapazamin und Platinverbindungen zum Behandeln von soliden Tumoren.
Die Verwendung von Paclitaxel in Kombination mit Platinverbindungen in der Tumortherapie wird in „Martindale – The Extra Pharmacopoeia" (Hrsg. J. Reynolds 31. Ausgabe 1996 Seite 594) offenbart.
Kurzdarstellung der Erfindung
Wir haben gefunden, dass die Dreifachkombination von Tirapazamin, Paclitaxel und einem Platinkomplex unerwartet stärkere Wirksamkeit bereitstellt als additive, d.h. synergistische, wenn bei der Behandlung von Säugertumoren verabreicht, verglichen mit Doppelkombinationen von diesen Antikrebsmitteln.
Die vorliegende Erfindung stellt eine Verwendung von

a) 3-Amino-1,2,4-benzotriazin-1,4-dioxid;
b) Paclitaxel und
c) einem Platinkomplex

Die vorliegende Erfindung stellt weiterhin ein Kit für die Behandlung von Säugertumoren bereit, umfassend:
3-Amino-1,2,4-benzotriazin-1,4-dioxid,
Paclitaxel und
einen Platinkomplex.
Beschreibung der Figuren
1 und 2 erläutern das mittlere Tumorgewicht gegen die Zeit für Verfahren zur Behandlung unter Anwendung von Tirapazamin, Paclitaxel und einem Platinkomplex als einzelne Mittel und in Kombination.
Beschreibung von den bevorzugten Ausführungsformen
Die Erfindung wird anschließend insbesondere bezüglich bevorzugter Ausführungsformen beschrieben, die Tirapazamin und Paclitaxel charakterisieren. Außerdem ist es denkbar, dass die Erfindung in Verbindung mit Analogen von Tirapazamin und Analogen von Paclitaxel ausgeführt werden kann.
Die in der Praxis dieser Erfindung verwendbaren Antikrebsmittel, beispielsweise Tirapazamin, Paclitaxel und der Platinkomplex, sind bekannte Verbindungen und/oder können durch auf dem Fachgebiet bekannte Techniken hergestellt werden.
Zusätzlich zu den vorstehend beschriebenen Platinkomplexen wird angenommen, dass die Erfindung mit anderen Platinkomplexen ausgeführt werden kann. Geeignete Platinkomplexe werden in US-Patent Nr. 5 562 925 beschrieben.
Die in der erfindungsgemäßen Praxis verwendbaren Antikrebsmittel werden an Säuger durch bekannte herkömmliche Wege, die für das einzelne Antikrebsmittel geeignet sind, verabreicht. Die hierin beschriebenen Antikrebsmittel können durch den gleichen Weg oder durch verschiedene Wege verabreicht werden. Beispielsweise können die Antikrebsmittel an Patienten oral oder parenteral (intravenös, subkutan, intramuskulär, intraspinal, intraperitoneal und dergleichen) verabreicht werden. Wenn parenteral verabreicht, werden die Verbindungen normalerweise in einer injizierbaren Einheitsdosierungsform (Lösung, Suspension, Emulsion) mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger formuliert. Solche Träger sind typischerweise nichttoxisch und nichttherapeutisch. Beispiele für solche Träger sind Wasser, wässrige Träger, wie Salzlösung, Ringer's-Lösung, Dextroselösung und Hank's-Lösung, und nichtwässrige Träger, wie fixierte Öle (beispielsweise Mais, Baumwollsamen, Erdnuss und Sesam), Ölsäureethylester und Myristinsäureisopropylester. Sterile Salzlösung ist ein bevorzugter Träger. Der Träger kann geringe Mengen von Additiven, wie Substanzen, die die Löslichkeit, Isotonizität und chemische Stabilität verstärken, beispielsweise Antioxidantien, Puffer, und Konservierungsmittel enthalten. Wenn oral (oder rektal) verabreicht, werden die Verbindungen gewöhnlich zu einer Einheitsdosierungsform, wie eine Tablette, Kapsel, ein Suppositorium oder Klistier, formuliert. Solche Formulierungen schließen typischerweise einen festen, halbfesten oder flüssigen Träger oder ein Verdünnungsmittel ein. Beispielhafte Verdünnungsmittel und Träger sind Lactose, Dextrose, Saccharose, Sorbit, Mannit, Stärken, Akaziengummi, Calciumphosphat, Mineralöl, Kakaobutter, Oleum cacao, Alginate, Tragakanth, Gelatine, Methylcellulose, Polyoxyethylen, Sorbitanmonolaurat, Hydroxybenzoesäuremethylester, Hydroxybenzoesäurepropylester, Talkum und Magnesiumstearat. In bevorzugten Ausführungsformen werden die Antikrebsmittel intravenös verabreicht.
Hierin verwendbare Antikrebsmittel können gleichzeitig oder aufeinander folgend verabreicht werden. Es wird angenommen, dass die beobachtete erhöhte Wirksamkeit nicht von der Verabreichungszeit abhängt. In bevorzugten Ausführungsformen wird Tirapazamin an den Säuger von einer halben Stunde bis 24 Stunden vor der Verabreichung von dem Paclitaxel und Platinkomplex verabreicht.
Die Antikrebsmittel werden an den Säuger in Mengen verabreicht, die wirksam sind, um anfällige Tumore zu behandeln. Solche Mengen sind auf dem Fachgebiet gut bekannt und können, mit Bezug auf, im Fall von Paclitaxel, Cisplatin und Carboplatin, auf die Produktliteratur, die durch den Hersteller bereitgestellt wird, herausgefunden werden. Außerdem können die Mengen durch Bezug auf die wissenschaftliche Literatur herausgefunden werden.
Beispielsweise wird Tirapazamin an den Säuger in Mengen verabreicht, die wirksam sind, um zytotoxische Wirkungen auf hypoxische Tumorzellen zu erzeugen, oder um diese abzutöten. Die verabreichte Menge an Tirapazamin wird von solchen Faktoren, wie der Art des Krebstumors, dem Alter und der Gesundheit des Säugers, der maximal tolerierten und/oder letalen Dosierung und der Wechselwirkung mit den anderen Antikrebschemotherapiemitteln abhängen. In bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung wird Tirapazamin in Mengen von 10 mg/m² bis 450 mg/m², bevorzugter 20 mg/m² bis 350 mg/m², besonders bevorzugt 30 mg/m² bis 250 mg/m², verabreicht.
In bevorzugten Ausführungsformen kann das Taxanderivat in Mengen von 30 mg/m² bis 300 mg/m², bevorzugter von 50 mg/m² bis 250 mg/m², besonders bevorzugt 100 mg/m² bis 200 mg/m², verabreicht werden. Paclitaxel ist unter dem Handelsnamen TAXOL in 30 mg (5 ml) Einzeldosisfläschchen erhältlich. Jeder ml von steriler, nichtpyrogener Lösung enthält 6 mg Paclitaxel, 527 mg Cremophor^® EL (polyethoxyliertes Rizinusöl) und 49,7 % (Volumen/Volumen) dehydratisierten Alkohol, USP. Diese nichtwässrige Lösung ist zur Verdünnung mit einem geeigneten parenteralen Fluid vor der intravenösen Infusion vorgesehen. Paclitaxel kann mit 0,9 % Natriumchloridinjektion, USP, 5 % Dextroseinjektion, USP, 5 % Dextrose, und 0,9 Natriumchloridinjektion, USP, oder 5 % Dextrose in Ringer's-Injektion, zu einer Endkonzentration von 0,3–1,2 mg/ml verdünnt werden. Bevorzugte Dosierungsregimes für Paclitaxel schließen jene, die in the Edition of the Physicians Desk Reference 1996 beschrieben wurden, ein.
In bevorzugten Ausführungsformen kann der Platinkomplex in Mengen von 10 mg/m² bis 250 mg/m², bevorzugter von 20 mg/m² bis 200 mg/m², besonders bevorzugt 30 mg/m² bis 180 mg/m², verabreicht werden. Das Oxaliplatin wird vorzugsweise in der Form eines gefriergetrockneten Pulvers zur Infusion in Fläschchen, die 50 mg oder 100 mg Oxaliplatin und 450 mg oder 900 mg Lactosemonohydrat enthalten, dargereicht. Das gefriergetrocknete Pulver kann durch Zusetzen von 10 bis 20 ml (für die 50 mg Flasche) oder 20 bis 40 ml (für die 100 mg Flasche) Wasser zur Injektion oder 5 % Glucoselösung und dann Verdünnen in eine Infusionslösung von 250 ml oder 500 ml von 5 %iger Glucoselösung wiederaufgebaut werden. Der Wiederaufbau oder letztendliche Verdünnung sollten vorzugsweise nicht mit einer Natriumchloridlösung ausgeführt werden. Das Oxaliplatin kann intravenös, vorzugsweise über einen Zeitraum von bis zu 4 Stunden, infundiert werden. Gegenwärtig bevorzugte Dosierungsregimes für Oxaliplatin schließen Verabreichung von wiederholten Dosierungen von Oxaliplatin in Zyklen von 1, 3 und 5 Tagen, wobei die Anzahl der Zyklen von 1 bis 6 variiert, ein. Bevorzugte Dosierungsregimes für Carboplatin und Cisplatin schließen jene, die in der Edition of the Physicians Desk Reference 1996 beschrieben wurden, ein.
Verfahren und Ergebnisse
MV-522 Human-Lungen-Tumor-Transplantat
Nacktmäuse mit dem Gewicht von ungefähr 20 g wurden subkutan durch Hohlnadel mit Frägmenten von MV-522 Humanlungenkarzinomen, geerntet aus subkutanen Wachstumstumoren in nackten Mauswirten, implantiert. Wenn Tumore ungefähr 5 mm × 5 mm in der Größe (gewöhnlich zehn Tage nach Inokulation) waren, wurden die Tiere in Behandlungs- und Kontrollgruppen paarweise zusammengestellt. Jede Gruppe enthielt 8 Tumormäuse, wobei jede davon am Ohr markiert wurde und individuell durch den Versuch verfolgt wurde. Die Verabreichung von Arzneistoffen oder Träger begann an dem Tag, an dem die Tiere paarweise zusammengestellt wurden (Tag 1). Die Dosen, der Arzneistoffverabreichungsweg und Zeitpläne wurden in geeigneter Weise für die Studie ausgewählt. Wenn die MTD-Dosis von einem Mittel nicht bekannt war, wurde sie in einem Anfangsdosierungsversuch in nicht tumorbesetzter Maus bestimmt.
Die Mäuse wurden zweimal wöchentlich gewogen, und Tumormessungen wurden durch Tastzirkel zweimal wöchentlich, beginnend am Tag 1, vorgenommen. Diese Tumormessungen wurden zu mg Tumorgewicht durch eine gut bekannte Formel, L² × W/2 umgewandelt. Der Versuch wurde beendet, wenn die Kontrolltumore eine Größe von ungefähr 1 Gramm erreicht hatten. Nach Beendigung wurden alle Mäuse gewogen, geopfert und deren Tumore herausgeschnitten. Die Tumore wurden gewogen und das mittlere Tumorgewicht pro Gruppe wurde berechnet. In diesen Modellen wird das mittlere behandelte Tumorgewicht/mittleres Kontrolltumorgewicht × 100 % (T/C) von 100 % subtrahiert, um die Tumorwachstumsinhibierung (TGI) für jede Gruppe zu ergeben.
Einige Arzneistoffe verursachten Tumorschrumpfung in dem MV-522 Humanlungentumor-Xenograftmodell. Mit diesen Mitteln wurde das Endgewicht von einem gegebenen Tumor von seinem ursprünglichen Gewicht am Beginn der Behandlung am Tag 1 subtrahiert. Dieser Unterschied, geteilt durch das Anfangstumorgewicht, ist die % Schrumpfung. Eine mittlere % Tumorschrumpfung kann aus Daten von der Maus in einer Gruppe, die Tumorregressionen empfangen hat, berechnet werden. Wenn der MV-522-Tumor in einer Maus vollständig verschwunden ist, wird dies als vollständige Regression oder vollständige Tumorschrumpfung betrachtet. Falls erwünscht, können Mäuse mit teilweiser oder vollständiger Tumorregression nach dem Beendigungsdatum am Leben gehalten werden, um zu sehen, ob sie leben oder für lange Zeit tumorfrei Überlebende werden.
Die Studie des Vergleichs der Carboplatin-Paclitaxel-Tirapazamin-Regimes mit den Oxaliplatin-Paclitaxel-Tirapazamin-Regimen wurde in einem großen, gesteuerten Versuch, der zweihundert Mäuse einbezog, durchgeführt. Die Wirkungen von jedem der drei Arzneistoffe als Einzelmittel wurden bestimmt und die Wirksamkeiten der verschiedenen dreiwegigen (dreifachen) Kombinationen der Mittel wurde auch bewertet. Eine Anzahl von Mäusen in dieser Studie zeigte Tumorschrumpfung am Ende des Versuchs. In diesem Bericht wird, um die Beschreibung der Ergebnisse zu erleichtern, beliebige Lungentumorschrumpfung zwischen 1 % und 99 % in einem Lebewesen als eine Teil-Reaktion (PR) bewertet, und jede Maus mit vollständiger Schrumpfung (Verschwinden) von seinem Neoplasma wird als eine vollständige Reaktion (CR) betrachtet. Die Wirksamkeit der Behandlung im Rest der Mäuse wird als Tumorwachstumsinhibierungswerte wiedergegeben.
ERGEBNISSE
Beispiel 1
Oxaliplatin-Paclitaxel-Tirapazamin-Regime
Hohe und niedrige Dosen von Oxaliplatin, Paclitaxel und Tirapazamin wurden gegen den MV-522-Tumor in allen möglichen Dreifachkombinationen der drei Arzneistoffe kombiniert. Jede Dreifachkombination war wirksam. Tumorschrumpfung trat am Ende der Studie in sieben von acht Kombinationsgruppen auf; nur die Dreifachkombination der niedrigen Dosen von allen drei Mitteln erzeugte keine Tumorschrumpfung. Sieben Fälle von vollständiger Tumorschrumpfung (CRs) werden unter Gruppen in diesem Regime aufgezeichnet, und acht Fälle von Teil-Tumorschrumpfung (PRs) wurden notiert. Drei CRs wurden in der Gruppe von acht Mäusen erhalten, die mit niedrig dosiertem Oxaliplatin – hoch dosiertem Paclitaxel – hoch dosiertem Tirapazamin behandelt wurden, die höchsten Zahlen an CRs, erhalten in jeder Gruppe in der gesamten Studie.
Dieses Regime wurde durch die Maus sehr gut toleriert. Gewichtsverluste am Tag 6 (der Tag vom Spitzengewichtsverlust) lagen im Bereich von 3,2 % bis 10,7 % unter den acht Gruppen und keine toxischen Todesfälle wurden in dieser Gruppe von 64 Mäusen aufgezeichnet.
Beispiel 2
Carboplatin-Paclitaxel-Tirapazamin-Regime
Hohe und niedrige Dosen von Carboplatin, Paclitaxel und Tirapazamin wurden in dem MV-522-Versuch unter Anwendung von allen möglichen Dreifachkombinationen von den drei Mitteln kombiniert. Wie mit dem Oxaliplatin-enthaltenden Regime waren alle Dreifachkombinationen der Carboplatinregimes wirksam. Zwei Fälle von vollständiger Tumorschrumpfung (CRs) und sechs Fälle von teilweiser Tumorschrumpfung (PRs) wurden mit diesen Regimen am Ende der Studie aufgezeichnet. Vier der acht Tumorschrumpfungsfälle wurden in der Gruppenstudie erhalten. Vier von den acht Tumorschrumpfungsfällen wurden in der Gruppe erhalten, die Hochdosis-Carboplatin – Hochdosis-Paclitaxel – Niederdosis-Tirapazamin empfing.
Die Carboplatin-enthaltenden Kombinationen wurden sehr gut durch die 64 Tiere, die dieses Regime empfingen, toleriert. Gewichtsveränderungen lagen im Bereich von einem Gewichtszuwachs von 1,7 % bis zu einem Gewichtsverlust von 14,9 % unter den acht Gruppen. Ein toxischer Todesfall trat mit diesem Regime (Hochdosis-Carboplatin – Niederdosis-Paclitaxel – Hochdosis-Tirapazamin) auf.
Die vorstehend beschriebenen Ergebnisse wurden in der nachstehenden Studie bestätigt.
Nacktmäuse mit einem Gewicht von ungefähr 20 g wurden s.c. durch Hohlnadel-Fragmente von MV-522-Humanlungenkarzinomen, geerntet aus s.c. Wachstumstumoren in nackten Mauswirten, implantiert. Wenn die Tumore ungefähr 5 mm × 5 mm in der Größe (gewöhnlich zehn Tage nach Inokulation) waren, wurden die Tiere in Behandlungs- und Kontrollgruppen paarweise zusammengestellt. Jede Gruppe enthielt 8 Tumormäuse, wobei jede davon am Ohr markiert war und individuell durch den Versuch verfolgt wurde. Tirapazamin wurde drei Stunden vor Oxaliplatin, Carboplatin und Paclitaxel verabreicht. Der Weg und Zeitplan für alle Arzneistoffe war i.p., qdxl.
Die Mäuse wurden zweimal wöchentlich gewogen, und Tumormessungen wurden durch Tastzirkel zweimal wöchentlich, be ginnend am Tag 1, genommen. Diese Tumormessungen wurden umgewandelt zu mg Tumorgewicht durch eine gut bekannte Formel, L × W²/2. Der Versuch wurde beendet, wenn Kontrolltumore eine Größe von 1 Gramm erreichten. Nach Beendigung wurden alle Mäuse gewogen, geopfert und deren Tumore herausgeschnitten. Die Tumore wurden gewogen und das mittlere Tumorgewicht pro Gruppe wurde berechnet. In diesen Modellen wird das mittlere behandelte Tumorgewicht/mittleres Kontrolltumorgewicht × 100 % (T/C) von 100 % subtrahiert, um die Tumorwachstumsinhibierung (TGI) für jede Gruppe zu ergeben.
Einige Arzneistoffkombinationen verursachten Tumorschrumpfung in dem MV-522-Humanlungentumor-Xenograftmodell. Mit diesen Mitteln wurde das Endgewicht eines gegebenen Tumors von seinem ursprünglichen Gewicht am Beginn der Behandlung am Tag 1 subtrahiert. Dieser Unterschied, geteilt durch das anfängliche Tumorgewicht, ist % Schrumpfung. Mittlere Tumorschrumpfung kann aus Daten von der Maus in einer Gruppe berechnet werden, die Tumorregressionen wahrgenommen haben. Wenn der Mv-522-Tumor bei einer Maus vollständig verschwunden war, wurde dies als eine vollständige Regression oder vollständige Tumorschrumpfung betrachtet.
ERGEBNISSE
Beispiel 3
Carboplatin-Tirapazamin-Paclitaxel
Die Ergebnisse des Großversuchs, worin Carboplatin, Paclitaxel und Tirapazamin als einzelne Mittel in Zwei- und Dreiwegskombinationen gegen den MV-522-Tumor getestet wurden, werden in Tabelle 1 und 1 wiedergegeben. Paclitaxel und Tirapazamin wurden i.p. als ein einzelner Bolus bei Dosen von 20 mg/kg (2/3 MTD) bzw. 70 mg/kg (MTD) verabreicht. Carboplatin wurde als ein einzelner i.p. Bolus bei Dosen von 100 mg/kg (MTD) oder 50 mg/kg (1/2 MTD) gegeben. Paclitaxel und Carboplatin (100 mg/kg), gegeben als einzelne Mittel, verursachten jeweils eine kleine Tumorwachstumsinhibierung (TGI) von ungefähr 40 %. Tirapazamin war als ein einzelnes Mittel nicht aktiv. Die Paclitaxel-Tirapazamin-Kombination zeigte gute Wirksamkeit, was eine TGI = 73 % verursachte. Das Paclitaxel-Hochdosis-Carboplatinregime war auch wirksamer, unter Erzeugen einer mittleren 53 %igen Tumorschrumpfung bei zwei Mäusen und einer 68,8 %igen TGI bei den verbleibenden sechs Tieren in dieser Gruppe. Die Tirapazamin-Carboplatin-Kombinationen waren nicht mehr wirksamer als Carboplatin allein.
Dreifache Kombinationen von diesen drei Arzneistoffen waren hoch wirksam gegen die MV-522-Karzinome. Die dreifache Arzneistoffkombination mit Hochdosis-Carboplatin verursachte eine mittlere 77,3 %ige Tumorschrumpfung bei zwei Mäusen, eine vollständige Tumorregression bei vier Mäusen und eine TGI = 85,9 % in den anderen zwei Tieren in dieser Gruppe. Das dreifache Arzneistoffregiment mit niedriger Dosis an Carboplatin war auch stark wirksam unter Erzeugen von drei Fällen von vollständiger Tumorschrumpfung, vier Fällen mit einer mittleren 54,7 %igen Tumorschrumpfung und einer TGI von 61,2 % in einer Maus.
Eine statistische Analyse wurde auf diesen Daten (siehe Tabelle 2) unter Verwendung des vereinigten Varianzen-T-Tests ausgeführt. Es gab einen starken Trend für die Gruppe mit der Dosis von 100 mg/kg einzelnen Mittels Carboplatin, um statistische Signifikanz gegenüber der Kontrollgruppe (p = 0,075) zu erreichen. Paclitaxel, als ein einzelnes Mittel, erzeugte eine statistisch signifikante Tumorwirkung, verglichen mit der Kontrollgruppe (p = 0,024). Ein hoher Grad an statistischer Signifikanz wurde sowohl mit Paclitaxel-Tirapazamin- und Paclitaxel-Carboplatin- (100 mg/kg) -Kombinationen, verglichen mit Paclitaxel allein (p = 0,013 in jedem Fall), erreicht. Die Dreifachkombination mit Carboplatin, gegeben bei 100 mg/kg, war wirksamer als die Paclitaxel-Carboplatin-Doppelkombination (100 mg/kg), mit einem p-Wert von 0,059. Diese Dreifachkombination gegen die Paclitaxel-Tirapazamin-Doppelkombination war statistisch stark signifikant aktiver, mit einem p-Wert von 0,007, bestimmt für den Vergleich von diesen zwei Gruppen.
TABELLE 2 STATISTISCHE ANALYSE – CARBOPLATIN-ARM
Eine sehr wichtige Erkenntnis aus diesem Versuch war, dass alle Regimes sehr gut toleriert wurden (Tabelle 1). Keine Gruppe verlor mehr als 4,2 % Körpergewicht am Tag 6, und es gab nur einen toxischen Tod, der unter den 96 Mäusen in dem Versuch aufgezeichnet wurde (in der Gruppe von dem einzelnen Mittel Paclitaxel). Somit wurden Dreifachkombinationen von diesen drei Mitteln genauso toleriert, wie die gegebenen Arzneistoffe allein.
Die Dreifachkombination von Paclitaxel und Tirapazamin mit Carboplatin, gegeben bei Dosen von 100 mg/kg oder 50 mg/kg, erzeugten vollständige oder teilweise Tumorschrumpfung bei sechs bzw. sieben Mäusen von sechzehn behandelten Tieren. Die Oxaliplatin-Paclitaxel-Tirapazamin-Regimes, die in unabhängigen Versuchen getestet wurden, waren ebenfalls stark wirksam.
Die Ergebnisse waren statistisch stark signifikant.
Beispiel 4
Oxaliplatin-Tirapazamin-Paclitaxel
Die Ergebnisse des Anfangsversuchs mit Oxaliplatin, Paclitaxel und Tirapazamin, die als Einzelmittel oder in verschiedenen Zwei- und Dreiwegskombinationen verabreicht wurden, gegen das MV-522-Humanlungenkarzinom-Xenograft werden in Tabelle 3 und 2 gezeigt. Paclitaxel und Tirapazamin wurden mit Dosen von 20 mg/kg bzw. 70 mg/kg (i.p.; qd × 1) gegeben. Oxaliplatin wurde mit 15 mg/kg (MTD) gegeben. Oxaliplatin und Tirapazamin, die als einzelne Mittel gegeben wurden, waren in diesem Test nicht wirksam. Paclitaxel allein erzeugte marginal TGI = 30,9 %. Die Paclitaxel-Oxaliplatin-Kombination war wirksamer als Paclitaxel allein (TGI = 55,4 %). Die Paclitaxel-Tirapazamin-Kombination war sehr wirksam, unter Erzeugen einer mittleren 29,2 %igen Tumorschrumpfung bei drei Mäusen und einer TGI = 73,1 % bei den anderen fünf Tieren dieser Gruppe. Die Dreifachkombination ergab unerwartet beeindruckende Ergebnisse, was eine mittlere 72,4 %ige Tumorschrumpfung bei vier Mäusen und TGI = 87,0 % bei den anderen vier Tieren in dieser Behandlungsgruppe verursachte.
Der vereinigte Varianzen-T-Test wurde auch an den Daten von dem Wiederholungsversuch ausgeführt (Tabelle 4). Der Wirksamkeitsunterschied zwischen Paclitaxel plus Oxaliplatin gegen Paclitaxel allein zeigte statistische Grenzsignifikanz (p = 0,076). Im Gegensatz dazu war der Unterschied zwischen der Paclitaxel-Tirapazamin-Kombination-Behandlungsgruppe gegen die Paclitaxelgruppe allein stark signifikant (p = 0,005). Die Dreichfachkombinationsergebnisse, verglichen mit der Wirkung, verursacht durch die Paclitaxel-Oxaliplatin-Kombination, war extrem signifikant (p = 0,001). Es gab keinen statistisch signifikanten Unterschied zwischen den Ergebnissen, die mit der Dreifachkombination erreicht wurden, verglichen mit der Paclitaxel-Tirapazamin-Kombination (p = 0,401).
Wie im Fall mit dem ersten Versuch in dieser Studie tolerierten alle Gruppen bei dem wiederholten Versuch alle Regimes sehr gut. Kein toxischer Tod trat in diesem Versuch auf und Körpergewichtsverlust war im Allgemeinen minimal (Tabelle 4).
TABELLE 4 STATISTISCHE ANALYSE – OXALIPLATIN-ARM

Claims

Verwendung von a) 3-Amino-1,2,4-benzotriazin-1,4-dioxid; b) Paclitaxel und c) einem Platinkomplex zur Herstellung eines Arzneimittels für die Behandlung eines soliden Tumors.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei der Platinkomplex Cisplatin ist.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei der Platinkomplex Carboplatin ist.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei der Platinkomplex Oxaliplatin ist.
Verwendung nach einem der Ansprüche 1-4, wobei Komponenten (a), (b) und (c) des Arzneimittels zur aufeinander folgenden oder gleichzeitigen Verabreichung angezeigt sind.
Kit, umfassend 3-Amino-1,2,4-benzotriazin-1,4-dioxid, Paclitaxel und einen Platinkomplex, als eine kombinierte Zubereitung für gleichzeitige, getrennte oder aufeinander folgende Verwendung zur Behandlung eines Säugertumors.
Kit nach Anspruch 6, wobei der Platinkomplex Cisplatin ist.
Kit nach Anspruch 6, wobei der Platinkomplex Carboplatin ist.
Kit nach Anspruch 6, wobei der Platinkomplex Oxaliplatin ist.