DE69724130T2

DE69724130T2 - Substituierte benzocycloheptapyridine derivate verwendbar als farnesyl protein transferase inhibitoren

Info

Publication number: DE69724130T2
Application number: DE69724130T
Authority: DE
Inventors: G. Arthur TAVERAS; K. Alan MALLAMS; Adriano Afonso; J. Ronald DOLL
Original assignee: Schering Corp
Current assignee: Merck Sharp and Dohme Corp
Priority date: 1996-09-13
Filing date: 1997-09-11
Publication date: 2004-06-03
Anticipated expiration: 2017-09-12
Also published as: ES2205255T3; HUP0000126A2; EP0927179A1; CN1109685C; SK33999A3; JP2001500509A; DE69724130D1; CZ84499A3; CN1237171A; WO1998011100A1; NZ334451A; BR9712825A; KR20000036112A; NO991232L; ATE247106T1; ID22002A; AU4337897A; EP0927179B1; IL128927A0; CA2264508A1

Description

Hintergrund
WO 95/10516, veröffentlicht am 20. April 1995, offenbart tricyclische Verbindungen, die zur Inhibierung der Farnesylproteintransferase brauchbar sind.
WO 95/10514 offenbart tricyclische Sulfonamidverbindungen zur Inhibierung der Ras-Funktion und des zellulären Wachstums. Die Verbindungen sind durch die Anwesenheit einer -SO₂-Linkergruppe gekennzeichnet, die an das Stickstoffatom einer Piperidinyl-, Piperidyliden- oder Piperazinylgruppe gebunden ist.
US-A-4 282 233 offenbart tricyclische Verbindungen mit Antihistamineigenschaften. Die Verbindungen sind durch die Anwesenheit einer Piperidylidengruppe gekennzeichnet, die ein N(substituiertes Carboxylat) oder eine N(substituierte Sulfonyl)gruppe enthält.
In Anbetracht des momentanen Interesses an Inhibitoren der Farnesylproteintransferase wären Verbindungen, die zur Inhibierung von Farnesylproteintransferase brauchbar sind, ein willkommener Beitrag zum Stand der Technik. Diese Erfindung liefert einen solchen Beitrag.
Zusammenfassung der Erfindung
Diese Erfindung liefert Verbindungen, die zur Inhibierung von Farnesylproteintransferase (FPT) brauchbar sind. Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden durch die Formel
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Solvat davon wiedergegeben, worin
R¹, R³ Halogen sind und R⁴ H wiedergibt, oder
R¹, R³ und R⁴ Halogen sind;
X N, CH oder C wiedergibt, wobei C eine optionale Doppelbindung (dargestellt durch die gestrichelte Linie) zu Kohlenstoffatom 11 enthalten kann;
die gestrichelte Linie zwischen den Kohlenstoffatomen 5 und 6 eine optionale Doppelbindung wiedergibt, so dass, wenn eine Doppelbindung vorhanden ist, A und B unabhängig -R¹⁰, Halogen, -OR¹¹, -OCO₂R¹¹ oder -OC(O)R¹⁰ wiedergeben, und wenn keine Doppelbindung zwischen den Kohlenstoffatomen 5 und 6 vorhanden ist, A und B jeweils unabhängig H₂, -(OR¹¹)₂; H und Halogen, Dihalogen, Alkyl und H, (Alkyl)₂, -H und -OC(O)R¹⁰, H und -OR¹⁰, =O, Aryl und H, =NOR¹⁰ oder -O(CH₂)_p-O- wiedergeben, wobei p 2, 3 oder 4 ist; und
W eine Gruppe ausgewählt aus -SO₂R¹² oder -P(O)R¹³R¹⁴ wiedergibt;
R¹² ausgewählt ist aus

(1) Alkyl;
(2) Aralkyl;
(3) Cycloalkyl;
(4) Aryl;
(5) Heteroaryl;
(6) substituiertem Heteroaryl, wobei das Heteroaryl wie nachfolgend definiert ist und die Substituenten ausgewählt sind aus (a) Heteroaryl, (b) Alkyl, (c) Aryl, (d) Aralkyl, (e) -OR¹⁰ und (f) N(R¹⁰)₂;
(7) Kampher oder
(8) -NR¹⁵R¹⁵, wobei R¹⁵ und R¹⁶ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus (a) H, (b) Alkyl, (c)

¹³

¹⁴

(1) H;
(2) Alkyl;
(3) Aryl;
(4) Aralkyl; oder
(5) -OR¹³, wobei R¹³ wie oben definiert ist.

Die Verbindungen dieser Erfindung (i) inhibieren potent in vitro Farnesylproteintransferase, jedoch nicht Geranylgeranylproteintransferase I, (ii) blockieren die phänotypische Veränderung, die durch eine Form von transformierender Ras herbeigeführt wird, die ein Farnesyl-Akzeptor ist, jedoch nicht durch eine Form von transformierender Ras, die so verändert wurde, dass sie ein Geranylgeranyl-Akzeptor ist; (iii) blockieren die intrazelluläre Verarbeitung von Ras, die ein Farnesyl-Akzeptor ist, jedoch nicht von Ras, die so verändert wurde, dass sie ein Geranylgeranyl-Akzeptor ist; und (iv) blockieren abnormales Zellenwachstum in Kultur, das durch tranformierende Ras herbeigeführt worden ist.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen inhibieren Farnesylproteintransferase und die Farnesylierung des Onkogenproteins Ras. Diese Erfindung liefert somit ferner Verbindungen, die zum Inhibieren von Farnesylproteintransferase (z. B. ras-Farnesylproteintransferase) in Säugetieren, insbesondere Menschen brauchbar sind, durch Verabreichung einer wirksamen Menge der oben beschriebenen tricyclischen Verbindungen. Die Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen an Patienten zur Inhibierung der Farnesylproteintransferase ist brauchbar für die Behandlung der nachfolgend beschriebenen Krebsarten.
Diese Erfindung liefert Verbindungen, die zum Inhibieren oder Behandeln des abnormalen Wachstums von Zellen einschließlich transformierter Zellen durch Verabreichung einer wirksamen Menge einer erfindungsgemäßen Verbindung brauchbar sind. Abnormales Wachstum von Zellen bezieht sich auf Zellwachstum, das von normalen Regulierungsmechanismen unabhängig ist (z. B. Verlust der Kontaktinhibierung). Dies schließt das abnormale Wachstum von (1) Tumorzellen (Tumoren), die ein aktiviertes Ras-Onkogen exprimieren; (2) Tumorzellen, in denen das Ras-Protein als Ergebnis von onkogener Mutation in einem anderen Gen aktiviert ist; und (3) gutartige und bösartige Zellen anderer proliferierender Krankheiten ein, in denen fehlgeleitete Ras-Aktivierung stattfindet.
Diese Erfindung liefert auch Verbindungen, die zum Inhibieren oder Behandeln von Tumorwachstum durch Verabreichen einer wirksamen Menge der hier beschriebenen tricyclischen Verbindungen an ein Säugetier (z. B. einen Menschen) brauchbar sind, das diese Behandlung benötigt. Insbesondere liefert diese Erfindung eine Verbindung, die zum Inhibieren des Wachstums von Tumoren brauchbar ist, die ein aktiviertes Ras-Onkogen exprimieren, durch die Verabreichung einer wirksamen Menge der oben beschriebenen Verbindungen. Beispiele für Tumoren, die inhibiert oder behandelt werden können, schließen Lungenkrebs (z. B. Lungenadenocarcinom), Bauchspeicheldrüsenkrebse (z. B. Pankreascarcinom, wie beispielsweise exokrines Pankreascarcinom), Colonkrebse (z. B. colonrektale Carcinome wie beispielsweise Colonadenocarcinom und Colonadenom), myeloide Leukämien (beispielsweise akute myelogene Leukämie (AML)), Schilddrüsenfollikelkrebs, myelodysplastisches Syndrom (MDS), Blasencarcinom, epidermale Carcinome, Brustkrebs und Prostatakrebs ein.
Es wird angenommen, dass diese Erfindung auch Verbindungen liefert, die zum Inhibieren oder Behandeln sowohl gutartiger als auch bösartiger proliferierender Krankheiten brauchbar sind, bei denen Ras-Proteine als Ergebnis von onkogener Mutation in anderen Genen irrtümlich aktiviert werden, d. h. das Ras-Gen selbst wird nicht durch Mutation zu einer onkogenen Form aktiviert, wobei die Inhibierung oder Behandlung durch Verabreichen einer wirksamen Menge der hier beschriebenen tricyclischen Verbindungen an ein Säugetier (z. B. einen Menschen) erfolgt, das diese Behandlung benötigt. Die gutartige proliferierende Störung Neurofibromatose, oder Tumoren, bei denen Ras aufgrund von Mutation oder Überexprimierung von Tyrosinkinase-Onkogenen (z. B. neu, src, abl, lck und fyn) aktiviert wird, können beispielsweise durch die hier beschriebenen tricyclischen Verbindungen inhibiert oder behandelt werden.
Die in den erfindungsgemäßen Verfahren brauchbaren tricyclischen Verbindungen inhibieren oder behandeln das abnormale Wachstum von Zellen. Ohne sich auf eine Theorie festlegen zu wollen, wird angenommen, dass diese Verbindungen über die Inhibierung der G-Proteinfunktion wie Ras p21 wirken können, indem die G-Protein-Isoprenylierung blockiert wird, wodurch sie zur Behandlung proliferierender Krankheiten wie des Tumorwachstums und des Krebses brauchbar sind. Ohne sich auf eine Theorie festlegen zu wollen, wird angenommen, dass diese Verbindungen Ras-Farnesylproteintransferase inhibieren und somit antiproliferierende Aktivität gegen Ras-transformierte Zellen zeigen.
Detaillierte Beschreibung der Erfindung
Die folgenden Begriffe werden hier wie nachfolgend definiert verwendet, wenn nicht anders angegeben:
MH⁺ steht für das Molekülion plus Wasserstoff in dem Molekül des Massenspektrums;
Benzotriazol-1-yloxy steht für
1-Methyltetrazol-5-ylthio steht für
Alkenyl steht für geradkettige und verzweigte Kohlenstoffketten mit mindestens einer Kohlenstoff-Kohlenstoff-Doppelbin dung und enthält 2 bis 12 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 2 bis 6 Kohlenstoffatome und am meisten bevorzugt 3 bis 6 Kohlenstoffatome;
Alkinyl steht für geradkettige und verzweigte Kohlenstoffketten mit mindestens einer Kohlenstoff-Kohlenstoff-Dreifachbindung und enthält 2 bis 12 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 2 bis 6 Kohlenstoffatome;
Alkyl (einschließlich des Alkylanteils von Alkoxy, Aralkyl und Heteroarylalkyl) steht für geradkettige und verzweigte Kohlenstoffketten und enthält 1 bis 20 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 1 bis 6 Kohlenstoffatome;
Aralkyl steht für eine Arylgruppe wie nachfolgend definiert, die an eine Alkylgruppe wie oben definiert gebunden ist, wobei die Alkylgruppe vorzugsweise -CH₂- ist (z. B. Benzyl);
Aryl (einschließlich des Arylanteils von Aralkyl) steht für eine carbocyclische Gruppe, die 6 bis 15 Kohlenstoffatome enthält und mindestens einen aromatischen Ring aufweist (Aryl ist z. B. ein Phenylring), wobei alle verfügbaren substituierbaren Kohlenstoffatome der carbocyclischen Gruppe als mögliche Bindungspunkte vorgesehen sind, wobei die carbocyclische Gruppe gegebenenfalls mit einem oder mehreren (z. B. 1 bis 3) von Halogen, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Phenoxy, CF₃, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, -COOR¹⁰ oder -NO₂ substituiert ist;
-CH₂-Imidazolyl steht für eine Imidazolylgruppe, die über jedes substituierbare Kohlenstoffatom des Imidazolrings an ein -CH₂- gebunden ist, das heißt:
wie -CH₂-(2-, 4- oder 5)-Imidazolyl-, beispielsweise
Cycloalkyl steht für gesättigte carbocyclische Ringe mit 3 bis 20 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise 3 bis 7 Kohlenstoffatomen, die verzweigt oder unverzweigt sind;
Halogen steht für Fluor, Chlor, Brom und Iod;
Heteroaryl steht für cyclische Gruppen, die gegebenenfalls mit R³ und R⁴ substituiert sind, mindestens ein Heteroatom ausgewählt aus O, S oder N aufweisen, wobei das Heteroatom eine carbocyclische Ringstruktur unterbricht, und eine ausreichende Anzahl delokalisierter n-Elektronen aufweisen, um aromatischen Charakter zu liefern, wobei die aromatischen heterocyclischen Gruppen 2 bis 14 Kohlenstoffatome enthalten, z. B. Thienyl, (2-, 4- oder 5-)Imidazolyl), Triazolyl, 2-, 3- oder 4-Pyridyl oder Pyridyl-N-oxid (gegebenenfalls mit R³ und R⁴ substituiert), wobei Pyridyl-N-oxid durch
wiedergegeben wird;
Heteroarylalkyl steht für eine Heteroarylgruppe wie oben definiert, die an eine Alkylgruppe wie oben definiert gebunden ist, wobei die Alkylgruppe vorzugsweise -CH₂- ist, beispielsweise -CH₂- (4- oder 5-) Imidazolyl;
Heterocycloalkyl steht für einen gesättigten, verzweigten oder unverzweigten carbocyclischen Ring, der 3 bis 15 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 4 bis 6 Kohlenstoffatome enthält, wobei der carbocyclische Ring durch 1 bis 3 Heterogruppen ausgewählt aus -O-, -S- oder -NR¹⁰- unterbrochen ist; geeignete Heterocycloalkylgruppen schließen (1) 2- oder 3-Tetrahydrofuranyl, (2) 2- oder 3-Tetrahydrothienyl, (3) 2-, 3- oder 4-Piperidinyl, (4) 2- oder 3-Pyrrolidinyl, (5) 2- oder 3-Piperizinyl, (6) 2- oder 4- Dioxanyl, (7) Tetrahydropyranyl und (8) substituertes Tetrahydropyranyl ein, wobei die Substituenten ausgewählt sind aus Hy droxy und Hydroxyalkyl (z. B. Hydroxymethyl), beispielsweise D-Galaktosyl, d. h.
Die folgenden Lösungsmittel und Reagentien werden hier durch die angegebenen Abkürzungen bezeichnet: Ethanol (EtOH), Methanol (MeOH), Essigsäure (HOAc oder AcOH), Ethylacetat (EtO-Ac), N,N-Dimethylformamid (DMF), Trifluoressigsäure (TFA), Trifluoressigsäureanhydrid (TFAA), 1-Hydroxybenzotriazol (HOBT); 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidhydrochlorid (DEC); Diisobutylaluminiumhydrid (DIBAL) und 4-Methylmorpholin (NMM).
Bezeichnung der Position der Substituenten R¹, R², R³ und R⁴ basiert auf der nummerierten Ringstruktur:
Fachleute werden erkennen, dass die S- und R-Stereochemie an der C-11-Bindung wie folgt ist:
Verbindungen der Formeln 1.2 und 1.3 schließen Verbindungen ein, in denen R⁴ H ist und R¹ und R³ Halogen sind (vorzugsweise unabhängig ausgewählt sind aus Br oder Cl). Beispielsweise ist R¹ Br und R³ ist Cl. Diese Verbindungen schließen Verbindungen ein, in denen R¹ in der 3-Position und R³ in der 8-Position vorliegt, z. B. 3-Br und 8-Cl. Verbindungen der Formeln 1.2 und 1.3 schließen auch Verbindungen ein, bei denen R¹, R³ und R⁴ Halogen sind (vorzugsweise unabhängig ausgewählt aus Br oder Cl).
Vorzugsweise sind R¹, R³ und R⁴ Halogen; A und B sind jeweils H₂; die optionale Bindung zwischen C5 und C6 fehlt; und X ist CH. Insbesondere sind R¹, R³ und R⁴ unabhängig ausgewählt aus Br oder Cl. Besonders bevorzugt ist R¹ Br, und R³ und R⁴ sind unabhängig ausgewählt aus Cl und Br.
Insbesondere werden Verbindungen der Formeln 1.2 und 1.3 durch Verbindungen der Formeln 1.4 und 1.5
wiedergegeben, wobei R¹, R³ und R⁴ jeweils unabhängig ausgewählt sind aus Halogen, vorzugsweise Br oder Cl; und A, B, X und W wie für Formeln 1.2 und 1.3 definiert sind. Insbesondere sind A und B jeweils H₂; die optionale Bindung zwischen C5 und C6 fehlt; und X ist CH. Am meisten bevorzugt ist R¹ Br; R³ und R⁴ sind unabhängig Br oder Cl, und besonders bevorzugt ist R³ Cl und R⁴ ist Br; A und B sind jeweils H₂; die optionale Bindung zwischen C5 und C6 fehlt; X ist CH, und R⁵, R⁶, R⁷ und R⁸ sind H.
Wenn W -SO₂R¹² wiedergibt, ist R¹² vorzugsweise ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (1) Alkyl (z. B. Methyl, Ethyl, n- Propyl oder Isopropyl), (2) Aryl (z. B. Phenyl), (3) Heteroaryl (z. B. Thienyl), (4) substituiertem Heteroaryl (z. B.
d. h. 2-(Pyrid-2-yl)thien-5-yl oder N-Methylimidazol-4-yl, d. h.
(5) Aralkyl (z. B. Benzyl), (6) Kampher (z. B.
(7) -NR¹⁵R¹⁶ wobei R¹⁵ und R¹⁶ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus H oder Alkyl (z. B. Methyl).
Insbesondere ist R¹² ausgewählt aus Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, N-Methylimidazol-4-yl, -NH₂ oder -N(CH₃)₂.
Wenn W -P(O)R¹³R¹⁴ wiedergibt, sind R¹³ und R¹⁴ vorzugsweise unabhängig Alkyl (z. B. sind sie jeweils gleich und jeder ist Methyl).
Verbindungen der Formeln 1.2A und 1.3A:
sind bevorzugt, wenn X CH oder N ist und R¹, R³ und R⁴ Halogen sind.
Die bevorzugten erfindungsgemäßen Verbindungen werden durch die Verbindungen der Formeln
wiedergegeben, in denen R¹, R³ und R⁴ Halogen sind und die verbleibenden Substituenten wie oben definiert sind, wobei die Verbindungen der Formel 1.5A bevorzugter sind.
Repräsentative Verbindungen der Formel 1.0, in der W -SO₂R¹² ist, schließen auch ein:
Repräsentative Verbindungen der Formel 1,0, in der W -SO₂R¹² ist, schließen auch ein:
Repräsentative Verbindungen der Formel 1.0, in der W -P(O)R¹³R¹⁴ ist, schließen ein:
Die erfindungsgemäßen Verbindungen schließen auch die 1-N-Oxide ein, d. h. beispielsweise Verbindungen mit der Formel:
wobei ~~~~~~ den Rest der Verbindung wiedergibt, oder pharmazeutisch annehmbare Salze oder Solvate davon.
Die optische Drehung der Verbindungen ((+) oder (–)) wird in Methanol oder Ethanol bei 25°C gemessen.
Diese Erfindung schließt die obigen Verbindungen im amorphen Zustand oder im kristallinen Zustand ein.
In die Ringsysteme gezogenen Linien zeigen, dass die angegebene Bindung an ein beliebiges der substituierbaren Ringkohlenstoffatome gebunden sein kann.
Bestimmte erfindungsgemäße Verbindungen können in unterschiedlichen isomeren Formen (z. B. Enantiomere und Diastereoisomere) einschließlich Atropisomeren (d. h. Verbindungen, bei denen der 7-gliedrige Ring aufgrund der Anwesenheit eines 10-Bromsubstituenten in einer fixierten Konformation vorliegt, so dass das Kohlenstoffatom 11 oberhalb oder unterhalb der Ebene der kondensierten Benzolringe angeordnet ist) vorliegen. Die Erfindung schließt alle diese Isomere sowohl in reiner Form als auch gemischt, einschließlich racemischer Mischungen ein. Enolformen sind auch eingeschlossen.
Bestimmte tricyclische Verbindungen sind von saurer Beschaffenheit, z. B. jene Verbindungen, die eine Carboxyl- oder phenolische Hydroxylgruppe besitzen. Diese Verbindungen können pharmazeutisch annehmbare Salze bilden. Beispiele für diese Salze können Natrium-, Kalium-, Calcium-, Aluminium-, Gold- und Silbersalze einschließen. Ebenfalls eingeschlossen sind Salze, die mit pharmazeutisch annehmbaren Aminen gebildet sind, wie mit Ammoniak, Alkylaminen, Hydroxyalkylaminen, N-Methylglucamin und dergleichen.
Bestimmte basische tricyclische Verbindungen können auch pharmazeutisch annehmbare Salze bilden, z. B. Säureadditionssalze. Die Pyrido-Stickstoffatome können beispielsweise Salze mit starker Säure bilden, während Verbindungen mit basischen Substituenten wie Aminogruppen auch Salze mit schwächeren Säuren bilden. Beispiele für geeignete Säuren für die Salzbildung sind Salz-, Schwefel-, Phosphor-, Essig-, Citronen-, Oxal-, Malon-, Salicyl-, Äpfel-, Fumar-, Bernstein-, Ascorbin-, Malein-, Methansulfon- und andere Mineral- und Carbonsäuren, die Fachleuten wohl bekannt sind. Die Salze werden hergestellt, indem die freie Basenform mit einer ausreichenden Menge der gewünschten Säure kontaktiert wird, um in konventioneller Weise ein Salz herzustellen. Die freien Basenformen können regeneriert werden, indem das Salz mit einer geeigneten verdünnten wässrigen Basenlösung wie verdünnter wässriger NaOH, Kaliumcarbonat, Ammoniak und Natriumbicarbonat behandelt wird. Die freien Basenformen unterscheiden sich von ihren entsprechenden Salzformen etwas in bestimmten physikalischen Eigenschaften, wie Löslichkeit in polaren Lösungsmitteln, aber die Säure- und Basensalze sind in ande rer Hinsicht für erfindungsgemäße Zwecke äquivalent zu ihren jeweiligen freien Basenformen.
Alle dieser Säure- und Basensalze sollen innerhalb des erfindungsgemäßen Bereichs pharmazeutisch annehmbare Salze sein, und alle Säure- und Basensalze werden für erfindungsgemäße Zwekke als den freien Formen der entsprechenden Verbindungen äquivalent angesehen.
Erfindungsgemäße Verbindungen können gemäß Verfahren hergestellt werden, die in WO 95/10516, veröffentlicht am 20. April 1995, der Anmeldung mit dem Aktenzeichen Nr. 08/410 187, eingereicht am 24. März 1995, der Anmeldung mit dem Aktenzeichen Nr. 08/577 951, eingereicht am 22. Dezember 1995 (nun aufgegeben); der Anmeldung mit dem Aktenzeichen Nr. 08/615 760, eingereicht am 13. März 1996 (nun aufgegeben), WO 97/23478, veröffentlicht am 3. Juli 1997, die den Gegenstand von Aktenzeichen Nr. 08/577 951 und 08/615 760 offenbart, und der Anmeldung mit dem Aktenzeichen Nr. 08/712 924, eingereicht am 13. September 1996, beschrieben sind, wobei hier jeweils auf die Offenbarungen Bezug genommen wird, sowie nach den nachfolgend beschriebenen Verfahren.
Erfindungsgemäße Verbindungen können hergestellt werden, indem eine Verbindung mit der Formel
, in der alle Substituenten wie für Formeln 1.2 und 1.3 definiert sind, mit der geeigneten geschützten Piperidinylessigsäure (z. B. 1-N-t-Butoxycarbonylpiperidinylessigsäure) zusammen mit DEC/HOBT/NMM in DMF bei etwa 25°C für 18 Stunden umgesetzt wird, um eine Verbindung mit der Formel
zu erzeugen. Die Verbindung mit der Formel 17.0 wird dann entweder mit TFA oder 10% Schwefelsäure in Dioxan und Methanol umgesetzt, gefolgt von NaOH, um die Verbindung mit der Formel 18.0
zu produzieren. Die Verbindung mit der Formel
kann beispielsweise durch Umsetzung einer Verbindung mit der Formel 16.0 mit 1-N-t-Butoxycarbonylpiperidinyl-4-essigsäure wie oben beschrieben hergestellt werden.
Verbindungen der Formel 19.0 schließen beispielsweise Verbindungen

ein.
Die Herstellung dieser Verbindung ist in den folgenden präparativen Beispielen 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 beziehungsweise 13 beschrieben.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können durch Umsetzung einer Verbindung mit der Formel
mit der geeignet geschützten Piperidinylessigsäure (z. B. 1-N-t-Butoxycarbonylpiperidinylessigsäure) zusammen mit DEC/HOBT/NMM in DMF bei etwa 25°C für etwa 18 Stunden hergestellt werden, um eine Verbindung mit der folgenden Formel zu erzeugen:
Die Verbindung der Formel 17.1 wird nachfolgend entweder mit TFA oder 10% Schwefelsäure in Dioxan und Methanol umgesetzt, gefolgt von NaOH, um die Verbindung mit der Formel 19.1
Die erfindungsgemäßen Amidverbindungen, die durch Formel
wiedergegeben werden, können durch Umsetzung der Verbindung der Formel 19.1 mit der geeigneten Carbonsäure in Gegenwart eines Kupplungsmittels wie DEC oder HOBT in Dimethylformamid hergestellt werden. Alternativ kann die Verbindung der Formel 19.1 mit einem Säurechlorid oder -anhydrid in einem Lösungsmittel wie Pyridin umgesetzt werden.
Verbindungen mit einer 1-N-O-Gruppe:
können aus den entsprechenden Pyridylverbindungen:
durch Oxidation mit meta-Chlorperoxybenzoesäure hergestellt werden. Diese Reaktion wird in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, z. B. Dichlormethan (üblicherweise wasserfrei) oder Methylenchlorid bei einer geeigneten Temperatur durchgeführt, um die erfindungsgemäßen Verbindungen mit dem N-O-Substituenten an Position 1 von Ring I des tricyclischen Ringsystems herzustellen.
Die Lösung des tricyclischen Ausgangsreaktanten in organischem Lösungsmittel wird im Allgemeinen vor der Zugabe der m-Chlorperbenzoesäure auf etwa 0°C abgekühlt. Die Reaktion wird dann während des Reaktionszeitraums auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Das gewünschte Produkt kann durch Standardtrennmittel gewonnen werden. Die Reaktionsmischung kann beispielsweise mit einer wässrigen Lösung einer geeigneten Base, z. B. gesättigtem Natriumbicarbonat oder NaOH (z. B. 1 N NaOH) gewaschen und dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet werden. Die das Produkt enthaltende Lösung kann im Vakuum konzentriert werden. Das Produkt kann durch Standardmittel gereinigt werden, z. B. durch Chromatographie unter Verwendung von Silikagel (z. B. Flash-Säulenchromatographie).
Alternativ können N-O-Verbindungen aus Intermediat:
nach dem obigen Verfahren mit m-Chlorperoxybenzoesäure und
hergestellt werden, wobei Q eine Schutzgruppe ist, z. B. BOC. Nach Oxidation wird die Schutzgruppe nach im Stand der Technik wohl bekannten Techniken entfernt. Das N-O-Intermediat kann dann weiter umgesetzt werden, um die erfindungsgemäßen Verbindungen zu produzieren.
Verbindungen der Formel 16.0 schließen die Verbindungen mit den Formeln
beispielsweise die Verbindung mit der Formel
ein. Die Verbindung der Formel 16.0A oder 16.0B wird nach im Stand der Technik bekannten Verfahren hergestellt, beispielsweise nach Verfahren, die in WO 95/10516, in US-A-5 151 423 beschrieben sind, und den nachfolgend beschriebenen Verfahren. Die obige Intermediatverbindung kann auch nach einem Verfahren hergestellt werden, das die folgenden Stufen aufweist:

(a) Umsetzen eines Amids der Formel
, in der R^11a Br ist, R^5a Wasserstoff ist und R^6a C₁- bis C₆-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl ist; R^5a C₁- bis C₆-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl ist und R^6a Wasserstoff ist; R^5a und R^6a unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus C₁- bis C₆-Alkyl und Aryl; oder R^5a und R^6a zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen Ring bilden, der 4 bis 6 Kohlenstoffatome aufweist oder 3 bis 5 Kohlenstoffatome und eine Heterokomponente ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus -O- und -NR^9a- aufweist, wobei R^9a H, C₁- bis C₆-Alkyl oder Phenyl ist, mit einer Verbindung mit der Formel
, in der R^1a, R^2a, R^3a und R^4a unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und Halogen, und R^7a Cl oder Br und, in Gegenwart einer starken Base, um eine Verbindung mit
zu erhalten;
(b) Umsetzen einer Verbindung aus Stufe (a) mit
(i) POCl₃, um eine Cyanoverbindung mit der Formel
zu erhalten; oder
(ii) DIBALH, um einen Aldehyd der Formel
zu erhalten;
(c) Umsetzen der Cyanoverbindung oder des Aldehyds mit einem Piperidinderivat der Formel
wobei L eine Abgangsgruppe ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Cl und Br ist, um ein Keton beziehungsweise einen Alkohol mit der folgenden Formel
zu erhalten;
(d)(i) Cyclisieren des Ketons mit CF₃SO₃H, um eine Verbindung der Formel 16.OA oder 16.OB zu erhalten, wobei die gestrichelte Linie eine Doppelbindung wiedergibt; oder
(d)(ii) Cyclisieren des Alkohols mit Polyphosphorsäure, um eine Intermediatverbindung zu erhalten, wobei die gestrichelte Linie eine einfache Bindung wiedergibt.

Verfahren zur Herstellung von Intermediatverbindungen, die in WO 95/10516, US-A-5 151 423 offenbart und nachfolgend beschrieben sind, verwenden ein tricyclisches Ketonintermediat. Diese Intermediate der Formel
, in der R^11b, R^1a, R^2a, R^3a und R^4a unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff und Halogen, können nach dem folgenden Verfahren hergestellt werden, umfassend:

(a) Umsetzen einer Verbindung der Formel
(i) mit einem Amin mit der Formel NHR^5aR^6a, wobei R^5a und R^6a wie in dem obigen Verfahren definiert sind, in Gegenwart von Palladiumkatalysator und von Kohlenmonoxid, um ein Amid mit der Formel
zu erhalten; oder
(ii) mit einem Alkohol mit der Formel R^10aOH, wobei R^10a niederes C₁- bis C₆-Alkyl oder C₃- bis C₆-Cycloalkyl ist, in Gegenwart von Palladiumkatalysator und Kohlenmonoxid, um den Ester mit der Formel
zu erhalten, gefolgt von Umsetzung des Esters mit einem Amin der Formel NHR^5aR^6a um das Amid zu erhalten;
(b) Umsetzen des Amids mit Todsubstituierter Benzylverbindung mit der Formel
, wobei R^1a, R^2a, R^3a, R^4a und R^7a wie oben definiert sind, in Gegenwart einer starken Base, um eine Verbindung der Formel
zu erhalten; und
(c) Cyclisieren einer Verbindung aus Stufe (b) mit einem Reagenz der Formel R^8aMgL, wobei R^8a C₁- bis C₈-Alkyl, Aryl oder Heteroaryl ist und L Br oder Cl ist, vorausgesetzt, dass Verbindungen, in denen R^5a oder R^6a Wasserstoff ist, vor der Cyclisierung mit einer geeigneten N-Schutzgruppe umgesetzt worden sind.

(+)-Isomere von Verbindungen der Formel 16.2,
können mit hoher Enantioselektivität durch Verwendung eines Verfahrens hergestellt werden, das enzymkatalysierte Umesterung beinhaltet. Vorzugsweise wird eine racemische Verbindung der For
mit einem Enzym wie Toyobo LIP-300 und einem Acylierungsmittel wie Trifluorethylisobutyrat umgesetzt. Das resultierende (+)-Amid wird dann aus dem (–)-enantiomeren Amin durch im Stand der Technik wohl bekannten Techniken isoliert, und dann wird das (+)-Amid hydrolysiert, beispielsweise durch Halten unter Rückfluss mit einer Säure wie H₂SO₄, und die resultierende Verbindung wird dann nach im Stand der Technik wohl bekannten Techniken mit DIBAL reduziert, um das entsprechende optisch angereicherte (+)-Isomer der Formel 16.2 zu erhalten. Alternativ wird eine racemische Verbindung der Formel 16.3 zuerst zu der entsprechenden racemischen Verbindung der Formel 16.2 reduziert und danach mit dem Enzym (Toyobo LIP-300) und Acylierungsmittel wie oben behandelt, um das (+)-Amid zu erhalten, das hydrolysiert wird, um das optisch angereicherte (+)-Isomer zu erhalten.
Fachleute werden erkennen, dass Verbindungen der Formel 1.0 mit anderen R¹-, R²-, R³- und R⁴-Substituenten nach dem obigen Enzymverfahren hergestellt werden können.
Zur Herstellung der Verbindungen der Formel 1.0 werden die Verbindungen der Formeln 18.0 oder 19.0 mit dem entsprechenden Sulfonylchlorid (R¹²SO₂Cl) oder Sulfamoylchlorid (R¹⁵R¹⁶NSO₂Cl), wenn X -SO₂R¹² ist, oder dem geeigneten Phosphinylchlorid (R¹³R¹⁴P(O)Cl), wenn W -P(O)R¹³R¹⁴ ist, umgesetzt. Diese Reaktion wird nach im Stand der Technik wohl bekannten Verfahren durchgeführt. Die Verbindungen der Formeln 18.0 und 19.0 werden beispielsweise mit dem geeigneten Sulfonylchlorid oder Sulfamoylchlorid in einem geeigneten organischen Lösungsmittel (z. B. Dichlormethan) mit einer geeigneten Base (z. B. Triethylamin) umgesetzt.
Die Umsetzung der Verbindung mit der Formel
mit (R¹²SO₂Cl) oder R¹³R¹⁴P(O)Cl in Dichlormethan und Triethylamin oder R¹⁵R¹⁶NSO₂Cl in Acetonitril und Triethylamin ergibt Verbindungen mit den Formeln
In ähnlicher Weise ergibt die Reaktion der Verbindung mit der Formel
mit R¹²SO₂Cl in Dichlormethan und Triethylamin Verbindungen mit
Alternativ ergibt die Reaktion der Verbindung der Formel 23.1 vorzugsweise mit einem Überschuss Sulfamid in Wasser bei etwa 100°C oder mit Sulfamid in einer Schmelze bei etwa 150°C oder mit Sulfamid in Isopropanol bei etwa 86°C eine Verbindung mit der Formel:
Beispiele für erfindungsgemäße Verbindungen finden sich in den folgenden Beispielen, die nicht als den Umfang der Offenbarung einschränkend angesehen werden sollen.
Präparatives Beispiel 1
Stufe A:
10 g (60,5 mmol) Ethyl-4-pyridylacetat und 120 ml trockenes CH₂Cl₂ wurden bei –20°C kombiniert, 10,45 g (60,5 mmol) MCPBA zugefügt und bei –20°C 1 Stunde gerührt und dann 67 Stunden bei 25°C gerührt. Weitere 3,48 g (20,2 mmol) MCPBA wurden zugegeben und 24 Stunden bei 25°C gerührt. Es wurde mit CH₂Cl₂ verdünnt und mit gesättigter NaHCO₃ (wässrig) und nachfolgend Wasser gewaschen. Es wurde über MgSO₄ getrocknet, im Vakuum bis zu einem Rückstand konzentriert und chromatographiert (Silikagel, 2%– 5,5% (10% NH₄OH in MeOH)/CH₂Cl₂), um 8,12 g der Produktverbindung zu ergeben. Massenspektrum: MH⁺ = 182,15.
Stufe B:
Es wurden 3,5 g (19,3 mmol) des Produkts aus Stufe A, 17,5 ml EtOH und 96,6 ml 10% NaOH (wässrig) kombiniert und die Mischung 2 Stunden auf 67°C erhitzt. Es wurde 2 N HCl (wässrig) zugegeben, um den pH-Wert auf 2,37 einzustellen, und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Es wurden 200 ml trockener EtOH zugegeben, durch Celite^® filtriert und der Filterkuchen mit trockenem EtOH (2 × 50 ml) gewaschen. Die kombinierten Filtrate wurden im Vakuum konzentriert, um 2,43 g der Titelverbindung zu ergeben.
Präparatives Beispiel 2
Die Titelverbindung wurde nach dem Verfahren hergestellt, das in der internationalen PCT-Veröffentlichung Nr. WO 95/10516 offenbart ist.
Präparatives Beispiel 3
Stufe A:
14,95 g (39 mmol) 8-Chlor-11-(1-ethoxycarbonyl-4-piperidinyl)-11H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin und 150 ml CH₂Cl₂ wurden kombiniert, danach 13,07 g (42,9 mmol) (nBu)₄NNO₃ zugefügt und die Mischung auf 0°C abgekühlt. Langsam (tropfenweise) wurde eine Lösung aus 6,09 ml (42,9 mmol) TFAA in 20 ml CH₂Cl₂ über 1,5 Stunden zugegeben. Die Mischung wurde über Nacht auf 0°C gehalten, dann nacheinander mit gesättigtem NaHCO₃ (wässrig), Wasser und Salzlösung gewaschen. Die organische Lösung wurde über Na₂SO₄ getrocknet, im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert und der Rückstand chromatographiert (Silikagel, EtOAc/Hexan-Gradient), um 4,32 g und 1,90 g der beiden Produktverbindungen 3A(i) beziehungsweise 3A(ii) zu ergeben.
Massenspektrum für Verbindung 3A(i): MH⁺ = 428,2;
Massenspektrum für Verbindung 3A(ii): MH⁺ = 428,3;
Stufe B:
22,0 g (51,4 mmol) des Produkts 3A(i) aus Stufe A, 150 ml 85% EtOH (wässrig), 25,85 g (0,463 Mol) Fe-Pulver und 2,42 g (21,8 mmol) CaCl₂ wurden kombiniert und über Nacht auf Rückfluss erwärmt. 12,4 g (0,222 Mol) Fe-Pulver und 1,2 g (10,8 mmol) CaCl₂ wurden zugegeben und 2 Stunden auf Rückfluss erwärmt. Es wurden weitere 12,4 g (0,222 Mol) Fe-Pulver und 1,2 g (10,8 mmol) CaCl₂ zugegeben und 2 weitere Stunden auf Rückfluss erwärmt. Die heiße Mischung wurde durch Celite^® filtriert, das Celite^® mit 50 ml heißem EtOH gewaschen und das Filtrat im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Es wurden 100 ml wasserfreies EtOH zugegeben, zu einem Rückstand konzentriert und der Rückstand chromatographiert (Silikagel, MeOH/CH₂Cl₂-Gradient), um 16,47 g der Produktverbindung zu ergeben.
Stufe C:
16,47 g (41,4 mmol) des Produkts aus Stufe B und 150 ml 48% HBr (wässrig) wurden kombiniert und auf –3°C abgekühlt. Es wurden langsam (tropfenweise) 18 ml Brom zugegeben, danach langsam (tropfenweise) eine Lösung von 8,55 g (0,124 Mol) NaNO₂ in 85 ml Wasser. Es wurde 45 Minuten bei –3°C bis 0°C gerührt, dann der pH-Wert durch Zugabe von 50% NaOH (wässrig) auf pH 10 eingestellt. Es wurde mit EtOAc extrahiert, die Extrakte mit Salzwasser gewaschen und die Extrakte über Na₂SO₄ getrocknet. Es wurde zu einem Rückstand konzentriert und chromatographiert (Silikagel, EtOAc/Hexan-Gradient), um 10,6 g und 3,28 g der beiden Produktverbindungen 3C(i) beziehungsweise 3C(ii) zu ergeben.
Massenspektrum für Verbindung 3C(i): MH⁺ = 461,2;
Massenspektrum für Verbindung 3C(ii): MH⁺ = 539.
Stufe D:
Das Produkt 3C(i) aus Stufe C wurde hydrolysiert, indem es in konzentrierter HCl aufgelöst und 16 Stunden auf etwa 100°C erwärmt wurde. Die Mischung wurde abgekühlt, dann mit 1 M NaOH (wässrig) neutralisiert. Es wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, die Extrakte über MgSO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert, um die Titelverbindung zu ergeben.
Massenspektrum: MH⁺ = 466,9.
Stufe E:
1,160 g (2,98 mmol) der Titelverbindung aus Stufe D wurden in 20 ml DMF aufgelöst, bei Raumtemperatur gerührt und 0,3914 g (3,87 mmol) 4-Methylmorpholin, 0,7418 g (3,87 mmol) DEC, 0,5229 g (3,87 mmol) HOBT und 0,8795 g (3,87 mmol) 1-N-t-Butoxy-carbonylpiperidinyl-4-essigsäure zugegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur 2 Tage gerührt, dann im Vakuum zu einem Rück stand konzentriert und der Rückstand zwischen CH₂Cl₂ und Wasser partitioniert. Die organische Phase wurde nacheinander mit gesättigtem NaHCO₃ (wässrig), 10% NaHP₂O₄ (wässrig) und Salzlösung gewaschen. Die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Der Rückstand wurde chromatographiert (Silikagel, 2% MeOH/CH₂Cl₂ + NH₃), um 1,72 g des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 94,0 bis 94,5°C.
Massenspektrum MH⁺ = 616,3,
Elementaranalyse: berechnet: C, 60,54; H, 6,06, N, 6,83
gefunden: C, 59,93; H, 6,62, N, 7,45.
Stufe F:
Es wurden 1,67 g (2,7 mmol) des Produkts von Stufe E und 20 ml CH₂Cl₂ kombiniert und bei 0°C gerührt. 20 ml TFA wurden zugegeben, die Mischung 2 Stunden gerührt, dann die Mischung mit 1 N NaOH (wässrig) basisch gemacht. Es wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, die organische Phase über MgSO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert, um 1,16 g des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 140,2 bis 140,8. Massenspektrum = 516,2.
Präparatives Beispiel 4
Stufe A:
25,86 g (55,9 mmol) 4-(8-Chlor-3-brom-5,6-dihydro-11H-benzo[5,6]cyclohepta[1,1-b]pyridin-11-yliden)-1-piperidin-1-carbonsäureethylester und 250 ml konzentrierte H₂SO₄ wurden bei –5°C kombiniert, nachfolgend 4,8 g (56,4 mmol) NaNO₃ zugegeben und 2 Stunden gerührt. Die Mischung wurde in 600 g Eis gegossen und mit konzentriertem NH₄OH (wässrig) basisch gemacht. Die Mischung wurde filtriert, mit 300 ml Wasser gewaschen, danach mit 500 ml CH₂Cl₂ extrahiert. Der Extrakt wurde mit 200 ml Wasser gewaschen, über MgSO₄ gewaschen, danach filtriert und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Der Rückstand wurde chromatographiert (Silikagel, 10% EtOAc/CH₂Cl₂), um 24,4 g (86% Ausbeute) des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 165 bis 167°C, Massenspektrum: MH⁺ 506 (Cl).
Elementaranalyse: berechnet: C, 52,13; H, 4,17; N, 8,29
gefunden: C, 52,18; H, 4,51; N, 8,16
Stufe B:
20 g (40,5 mmol) des Produkts aus Stufe A und 200 ml konzentrierte H₂SO₄ wurden bei 20°C kombiniert, danach die Mischung auf 0°C abgekühlt. Es wurden 7,12 g (24,89 mmol) 1,3-Dibrom-5,5-dimethylhydantoin zu der Mischung gegeben und 3 Stunden bei 20°C gerührt. Es wurde auf 0°C gekühlt, weitere 1,0 g (3,5 mmol) des Dibromhydantoins zugefügt und 2 Stunden bei 20°C gerührt. Die Mischung wurde in 400 g Eis gegossen, mit konzentriertem NH₄OH (wässrig) bei 0°C basisch gemacht und der resultierende Feststoff durch Filtration gewonnen. Der Feststoff wurde mit 300 ml Wasser gewaschen, in 200 ml Aceton aufgeschlämmt und filtriert, um 19,79 g (85,6% Ausbeute) des Produkts zu liefern. Schmelzpunkt 236 bis 237°C, Massenspektrum: MH⁺ = 584 (Cl).
Elementaranalyse: berechnet: C, 45,11; H, 3,44; N, 7,17
gefunden: C, 44,95; H, 3,57; N, 7,16
Stufe C:
25 g (447 mmol) Fe-Späne, 10 g (90 mmol) CaCl₂ und eine Suspension von 20 g (34,19 mmol) des Produkts in Stufe B würden in 700 ml 90 : 10 EtOH/Wasser bei 50°C kombiniert. Die Mischung wurde über Nacht auf Rückfluss erwärmt, durch Celite filtriert und der Filterkuchen mit 2 × 200 ml heißem EtOH gewaschen. Das Filtrat und die Waschflüssigkeiten wurden kombiniert und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Der Rückstand wurde mit 600 ml CH₂Cl₂ extrahiert, mit 300 ml Wasser gewaschen und über MgSO₄ getrocknet. Es wurde filtriert und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert, nachfolgend chromatographiert (Silikagel, 30 EtOAc/CH₂Cl₂), um 11,4 g (60% Ausbeute) des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 211 bis 212°C, Massenspektrum: MH⁺ 554 (Cl).
Elementaranalyse: berechnet: C, 47,55; H, 3,99; N, 7,56
gefunden: C, 47,45; H, 4,31; N, 7,49
Stufe D:
Es wurde langsam (portionsweise) bei –10°C 20 g (35,9 mmol) des Produkts aus Stufe C zu einer Lösung von 8 g (116 mmol) NaNO₂ in 120 ml konzentrierter HCl (wässrig) gegeben. Die resultierende Mischung wurde 2 Stunden bei 0°C gerührt, danach wurde langsam (tropfenweise) 150 ml (1,44 Mol) 50% HP₃O₂ bei 0°C über einen Zeitraum von 1 Stunde zugegeben. Es wurde 3 Stunden bei 0°C gerührt, danach in 600 g Eis gegossen und mit konzentriertem Nh₄OH (wässrig) basisch gemacht. Es wurde mit 2 × 300 ml CH₂Cl₂ extrahiert, die Extrakte über MgSO₄ getrocknet, nachfolgend filtriert und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Der Rückstand wurde chromatographiert (Silikagel, 25% EtOAc/Hexane), um 13,67 g (70% Ausbeute) des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 163 bis 165°C, Massenspektrum: MH⁺ 539 (Cl).
Elementaranalyse: berechnet: C, 48,97; H, 4,05; N, 5,22
gefunden: C, 48,86; H, 3,91; N, 5,18
Stufe E:
6,8 g (12,59 mmol) des Produkts aus Stufe D und 100 ml konzentrierte HCl (wässrig) wurden kombiniert und bei 85°C über Nacht gerührt. Die Mischung wurde abgekühlt, in 300 g Eis gegossen und mit konzentriertem NH₄OH (wässrig) basisch gemacht. Es wurde mit 2 × 300 ml CH₂Cl₂ extrahiert, danach die Extrakte über MgSO₄ getrocknet. Es wurde filtriert, im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert, danach chromatographiert (Silikagel, 10 MeOH/EtOAc + 2% NH₄OH (wässrig)), um 5,4 g (92% Ausbeute) der Titelverbindung zu ergeben. Schmelzpunkt 172 bis 174°C, Massenspektrum: MH⁺ = 467 (FAB).
Elementaranalyse: berechnet: C, 48,69; H, 3,65; N, 5,97
gefunden: C, 48,83; H, 3,80; N, 5,97
Stufe F:
Nach im Wesentlichen dem gleichen Verfahren wie Stufe C des folgenden präparativen Beispiels 5 wurde die obige Titelverbindung aus Stufe E mit 1-N-t-Butoxycarbonylpiperidinyl-4-essigsäure umgesetzt, um die Verbindung
herzustellen.
Stufe G:
Nach im Wesentlichen dem gleichen Verfahren wie in Stufe D des folgenden präparativen Beispiels 5 wurde die Titelverbindung der obigen Stufe F entschützt, um die Titelverbindung des präparativen Beispiels 4 zu ergeben.
Präparatives Beispiel 5
Stufe A:
2,42 g 4-(8-Chlor-3-Brom-5,6-dihydro-11H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yliden)-1-piperidin-1-carbonsäureethylester wurde nach im Wesentlichen dem gleichen Verfahren wie in präparativem Beispiel 3, Stufe D, beschrieben hydrolysiert, um 1,39 g (69% Ausbeute) des Produkts zu ergeben.
Stufe B:
1 g (2,48 mmol) des Produkts von Stufe A und 25 ml trockenes Toluol wurden kombiniert, 2,5 ml 1 M DIBAL in Toluol zugefügt und die Mischung auf Rückfluss erwärmt. Nach einer halben Stunde wurden weitere 2,5 ml 1 M DIBAL in Toluol zugegeben und 1 Stunde auf Rückfluss erwärmt. (Die Reaktion wurde durch Dünnschichtchromatographie (DC) unter Verwendung von 50% MeOH/CH₂Cl₂ + NH₄OH (wässrig) überwacht.) Die Mischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, 50 ml 1 N HCl (wässrig) zugegeben und 5 Minuten gerührt. Es wurden 100 ml 1 N NaOH (wässrig) zugegeben, dann mit EtOAc (3 × 150 ml) extrahiert. Die Extrakte wurden über MgSO₄ ge trocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert, um 1,1 g der Titelverbindung zu ergeben.
Stufe C:
0,501 g (1,28 mmol) der Titelverbindung von Stufe B und 20 ml trockenes DMF wurden kombiniert, nachfolgend 0,405 g (1,664 mmol) 1-N-t-Butoxycarbonylpiperidinyl-4-essigsäure, 0,319 g (1,664 mmol) DEC, 0,225 g (1,664 mmol) HOBT und 0,168 g (1,664 mmol) 4-Methylmorpholin zugegeben und die Mischung bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Mischung wurde im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert, dann der Rückstand zwischen 150 ml CH₂Cl₂ und 150 ml gesättigtem NaHCO₃ (wässrig) partitioniert. Die wässrige Phase wurde mit weiteren 150 ml CH₂Cl₂ extrahiert. Die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Der Rückstand wurde chromatographiert (Silikagel, 500 ml Heran, 1 L 1% MeOH/CH₂Cl₂ + 0,1 NH₄OH (wässrig), nachfolgend 1 L 2% MeOH/CH₂Cl₂ + 0,1% NH₄OH (wässrig)), um 0,575 g des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 115 bis 125°C, Massenspektrum MH⁺ = 616.
Stufe D:
0,555 g (0,9 mmol) des Produkts von Stufe C und 15 ml CH₂Cl₂ wurden kombiniert und die Mischung auf 0°C abgekühlt. Es wurden 15 ml TFA zugegeben und bei 0°C 2 Stunden gerührt. Es wurde im Vakuum bei 40 bis 45°C zu einem Rückstand konzentriert, dann der Rückstand zwischen 150 ml CH₂Cl₂ und 100 ml gesättigtem NaHCO₃ (wässrig) partitioniert. Die wässrige Phase wurde mit 100 ml CH₂Cl₂ extrahiert, die Extrakte kombiniert und über MgSO₄ getrocknet. Es wurde im Vakuum konzentriert, um 0,47 g des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 140° bis 150°C, Massenspektrum MH⁺ = 516. Präparatives Beispiel 6
[racemisch sowie (+)- und (–)-Isomere]
Stufe A:
16,6 g (0,03 Mol) des Produkts des präparativen Beispiels 4, Stufe D, wurden mit einer 3 : 1 Lösung aus CH₃CN und Wasser (212,65 ml CH₃CN und 70,8 ml Wasser) kombiniert und die resultierende Aufschlämmung über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Es wurden 32,833 g (0,153 Mol) NaIO₄ und nachfolgend 0,31 g (2,30 mmol) RuO₂ zugegeben und bei Raumtemperatur gerührt, um 1,39 g (69% Ausbeute) des Produkts zu ergeben. (Die Zugabe von RuO wurde von einer exothermen Reaktion begleitet, und die Temperatur stieg von 20° auf 30°C.). Die Mischung wurde 1,3 h gerührt (nach 30 Minuten kehrte die Temperatur auf 25°C zurück), danach filtriert, um die Feststoffe zu entfernen, und die Feststoffe wurden mit CH₂Cl₂ gewaschen. Das Filtrat wurde im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert, und der Rückstand wurde in CH₂Cl₂ aufgelöst. Es wurde filtriert, um unlösliche Feststoffe zu entfernen, und die Feststoffe wurden mit CH₂Cl₂ gewaschen. Das Filtrat wurde mit Wasser gewaschen, auf ein Volumen von etwa 200 ml konzentriert und mit Bleiche, danach mit Wasser gewaschen. Es wurde mit 6 N HCl (wässrig) extrahiert. Der wässrige Extrakt wurde auf 0°C ab-gekühlt und langsam 50% NaOH (wässrig) zugegeben, um den pH-Wert auf 4 einzustellen, während die Temperatur < 30°C gehalten wurde. Es wurde zwei Mal mit CH₂Cl₂ extrahiert, über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Der Rückstand wurde in 20 ml EtOH aufgeschlämmt und auf 0°C abgekühlt. Die resultierenden Feststoffe wurden durch Filtration aufgefangen, und die Feststoffe wurden im Vakuum getrocknet, um 7,95 g des Produkts zu ergeben. ¹H-NMR (CDCl₃, 200 MHz): 8,7 (s, 1H); 7,85 (m, 6H); 7,5 (d, 2H); 3,45 (m, 2H); 3,15 (m, 2H).
Stufe B:
21,58 g (53,75 mmol) des Produkts aus Stufe A und 500 ml wasserfreie 1 : 1-Mischung aus EtOH und Toluol wurden kombiniert, 1,43 g (37,8 mmol) NaBH₄ zugefügt und die Mischung 10 Minuten unter Rückfluss erwärmt. Die Mischung wurde auf 0°C abgekühlt, 100 ml Wasser zugefügt, nachfolgend der pH-Wert mit 1 M HCl (wässrig) auf 4 bis 5 eingestellt, während die Temperatur < 10°C gehalten wurde. 250 ml EtOAc wurden zugegeben und die Phasen getrennt. Die organische Phase wurde mit Salzlösung (3 × 50 ml) gewaschen, nachfolgend über Na₂SO₄ getrocknet. Es wurde im Vakuum zu einem Rückstand (24,01 g) konzentriert und der Rückstand chromatographiert (Silikagel, 30% Hexan/CH₂Cl₂), um das Produkt zu ergeben. Unreine Fraktionen wurden durch erneute Chromatographie gereinigt. Es wurden insgesamt 18,57 g des Produkts erhalten. ¹H-NMR (DMSO-d₆, 400 MHz): 8,5 (s, 1H); 7,9 (s, 1H); 7,5 (d von d, 2H); 6,2 (s, 1H); 6,1 (s, 1H); 3,5 (m, 1H); 3,4 (m, 1H); 3,2 (m, 2H).
Stufe C:
18,57 g (46,02 mmol) des Produkts aus Stufe B und 500, ml CHCl₃ wurden kombiniert, nachfolgend 6,70 ml (91,2 mmol) SOCl₂ zugegeben und die Mischung bei Raumtemperatur 4 h gerührt. Es wurde eine Lösung aus 35,6 g (0,413 Mol) Piperazin in 800 ml THF über einen Zeitraum von 5 Minuten zugegeben und die Mischung 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde über Nacht auf Rückfluss erwärmt, nachfolgend auf Raumtemperatur abgekühlt und die Mischung mit 1 L CH₂Cl₂ verdünnt. Es wurde mit Wasser (5 × 200 ml) gewaschen und die wässrige Waschflüssigkeit mit CHCl₃ (3 × 100 ml) extrahiert. Die gesamten organischen Lösungen wurden kombiniert, mit Salzlösung (3 × 200 ml) gewaschen und über MgSO₄ getrocknet. Es wurde im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert und chromatographiert (Silikagel, Gradient von 5%, 7,5%, 10 MeOH/CH₂Cl₂ + NH₄OH), um 18,49 g der Titelverbindung als racemische Mischung zu ergeben.
Stufe D – Trennnung von Enantiomeren:
Die racemische Titelverbindung von Stufe C wurde durch präparative chirale Chromatographie. (Chiralpack AD, 5 cm × 50 cm Säule, Fließgeschwindigkeit 100 ml/Min, 20% iPrOH/Hexan + 0,2 Diethylamin), um 9,14 g des (+)-Isomers und 9,30 g des (–)-Isomers zu ergeben.
Physikalisch-chemische Daten für (+)-Isomer: Schmelzpunkt = 74,5 bis 77,5°C; Massenspektrum MH⁺ = 471,9; [α]_D ²⁵ = +97,4° (8,48 mg/2 ml MeOH).
Physikalisch-chemische Daten für (–)-Isomer: Schmelzpunkt = 82,9 bis 84,5°C; Massenspektrum MH⁺ = 471,8; [α]_D ²⁵ = –97,4° (8,32 mg/2 ml MeOH).
Stufe E:
(–)-Isomer
3,21 g (6,80 mmol) des (–)-Isomerprodukts aus Stufe D und 150 ml wasserfreies DMF wurden kombiniert. Es wurden 2,15 g (8,8 mmol) 1-N-t-Butoxycarbonylpiperidinyl-4-essigsäure, 1,69 g (8,8 mmol) DEC, 1,19 g (8,8 mmol) HOBT und 0,97 ml (8,8 mmol) N-Methylmorpholin zugegeben und die Mischung über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde im Vakuum konzentriert, um das DMF zu entfernen, und es wurde 50 ml gesättigtes NaHCO₃ (wässrig) zugefügt. Es wurde mit CH₂Cl₂ (2 × 250 ml) extrahiert, die Extrakte mit 50 ml Salzlösung gewaschen und über MgSO₄ getrocknet. Es wurde im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert und chromatographiert (Silikagel, 2% MeOH/CH₂Cl₂ + 10% NH₄OH), um 4,75 g des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 75,7° bis 78,5°C, Massenspektrum MH⁺ = 697, [α]_D ²⁵ = –5,5° (6,6 mg/ml MeOH).
Stufe F:
4,70 g (6,74 mmol) des Produkts der Stufe E und 30 ml MeOH wurden kombiniert, dann 50 ml 10% H₂SO₄/Dioxan in 10 ml aliquoten Mengen über einen Zeitraum von 1 Stunde zugegeben. Die Mischung wurde in 50 ml Wasser gegossen und 15 ml 50% NaOH (wässrig) zugegeben, um den pH auf 10 bis 11 zu bringen. Es wird filtriert, um die resultierenden Feststoffe zu entfernen, und das Filtrat wurde mit CH₂Cl₂ (2 × 250 ml) extrahiert. Die wässrige Phase wurde im Vakuum konzentriert, um das MeOH zu entfernen, und wurde wieder mit 250 ml CH₂Cl₂ extrahiert. Die kombinierten Extrakte wurde über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert, um das Produkt zu ergeben. Schmelzpunkt = 128,1° bis 131,5°C, Massenspektrum MH⁺ = 597, [α]_D ²⁵ = –6,02° (9,3 mg/2 ml MeOH).
Präparatives Beispiel 7
Stufe A:
15 g (38,5 mmol) 4-(8-Chlor-3-brom-5,6-dihydro-11H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yliden)-1-piperidin-1-carbonsäureethylester und 150 ml konzentrierte H₂SO₄ wurden bei –5°C kombiniert, danach wurden 3,89 g (38,5 mmol) KNO₃ zugegeben und 4 h gerührt. Die Mischung wurde in 3 L Eis gegossen und mit 50 NaOH( (wässrig) basisch gemacht. Extrahiere mit CH₂Cl₂, trockne über MgSO₄ filtriere dann und konzentriere im Vakuum zu einem Rückstand. Der Rückstand wurde aus Aceton umkristallisiert, um 6,69 g des Produkts zu ergeben. ¹H-NMR (CDCl₃), 200 MHz): 8,5 (s, 1H); 7,75 (s, 1H); 7,6 (s, 1H); 7,35 (s, 1H); 4,15 (q, 2H); 3,8 (m, 2H); 3,5 bis 3,1 (m, 4H); 3,0 bis 2,8 (m, 2H); 2,6 bis 2,2 (m, 4H); 1,25 (t, 3H).
Stufe B:
6,69 g (13,1 mmol) des Produkts aus Stufe A und 100 ml 85 EtOH/Wasser wurden kombiniert, 0,66 g (5,9 mmol) CaCl₂ und 6,56 g (117,9 mmol) Fe zugegeben und die Mischung über Nacht unter Rückfluss gehalten. Die heiße Reaktionsmischung wurde durch Celite^® filtriert und der Filterkuchen mit heißem EtOH gespült. Das Filtrat wurde im Vakuum konzentriert, um 7,72 g des Produkts zu ergeben. Massenspektrum: MH⁺ = 478,0.
Stufe C:
7,70 g des Produkts von Stufe B und 35 ml HOAc wurden kombiniert, nachfolgend 45 ml einer Lösung von Br₂ in HOAc zugefügt und die Mischung bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Es wurden 300 ml 1 N NaOH (wässrig), nachfolgend 75 ml 50% NaOH (wässrig) zugegeben und mit EtOAc extrahiert. Der Extrakt wurde über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Der Rückstand wurde chromatographiert (Silikagel, 20 bis 30% EtOAc/Hexan), um 3,47 g des Produkts (zusammen mit weiteren 1,28 g teilweise gereinigtem Produkt) zu ergeben.
Massenspektrum: MH⁺ = 555,9.
¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz): 8,5 (s, 1H); 7,5 (s, 1H); 7,15 (s, 1H); 4,5 (s, 2H); 4,15 (m, 3H); 3,8 (br s, 2H); 3,4 bis 3,1 (m, 4H); 2,9 bis 2,75 (m, 1H); 2,7 bis 2,5 (m, 2H); 2,4 bis 2,2 (m, 2H); 1,25 (m, 3H).
Stufe D:
0,557 g (5,4 mmol) tert.-Butylnitrit und 3 ml DMF wurden kombiniert und die Mischung auf 60 bis 70°C erwärmt. Es wurde langsam (tropfenweise) eine Mischung aus 2,00 g (3,6 mmol) des Produkts aus Stufe C und 4 ml DMF zugegeben und nachfolgend die Mischung auf Raumtemperatur abgekühlt. Es wurden weitere 0,64 ml tert.-Butylnitrit bei 40°C zugegeben und die Mischung 0,5 h auf 60 bis 70°C erwärmt. Es wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und die Mischung in 150 ml Wasser gegossen. Es wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Der Rückstand wurde chromatographiert (Silikagel, 10% bis 20% EtOAc/Hexan), um 0,74 g des Produkts zu ergeben.
Massenspektrum: MH⁺ = 541,0.
¹H-NMR CDCl₃, 200 MHz): 8,52 (s, 1H); 7,5 (d, 2H); 7,2 (s, 1H); 4,15 (q, 2H); 3,9 bis 3,7 (m, 2H); 3,5 bis 3,1 (m, 4H); 3,0 bis 2,5 (m, 2H); 2,4 bis 2,2 (m, 2H); 2,1 bis 1,9 (m, 2H); 1,26 (t, 3H).
Stufe E:
0,70 g (1,4 mmol) des Produkts aus Stufe D und 8 ml konzentrierte HCl (wässrig) wurden kombiniert und die Mischung über Nacht auf Rückfluss erwärmt. Es wurden 30 ml 1 N NaOH (wässrig) zugegeben, danach 5 ml 50% NaOH (wässrig), und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Der Extrakt wurde über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert, um 0,59 g der Titelverbindung zu ergeben. Massenspektrum: M⁺ = 468,7. Schmelzpunkt = 123,9 bis 124,2°C.
Stufe F:
6,0 g (12,8 mmol) der Titelverbindung auf Stufe E und 3,78 g (16,6 mmol) 1-N-t-Butoxycarbonylpiperidinyl-4-essigsäure wurden unter Verwendung von im Wesentlichen denselben Verfahren wie für präparatives Beispiel 5, Stufe C, beschrieben umgesetzt, um 8,52 g des Produkts zu ergeben. Massenspektrum MH⁺ = 694,0 (FAB). ¹H-NMR (CDCl₃, 200 MHz): 8,5 (d, 1H); 7,5 (d, 2H), 7,2 (d, 1H), 4,15 bis 3,9 (m, 3H), 3,8 bis 3,6 (m, 1H), 3,5 bis 3,15 (m, 3H), 2,9 (d, 2H), 2,8 bis 2,5 (m, 4H), 2,4 bis 1,8 (m, 6H), 1,8 bis 1,6 (br d, 2H), 1,4 (s, 9H), 1,25 bis 1,0 (m, 2H).
Stufe G:
8,50 g des Produkts von Stufe F und 60 ml CH₂Cl₂ wurden kombiniert, dann auf 0°C abgekühlt und 55 ml TFA zugegeben. Die Mischung wurde 3 Stunden bei 0°C gerührt, dann 500 ml 1 N NaOH (wässrig) zugegeben, gefolgt von 30 ml 50% NaOH (wässrig). Es wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert, um 7,86 g des Produkts zu ergeben. Massenspektrum M⁺ = 593,9 (FAB). ¹H-NMR (CDCl₃, 200 MHz): 8,51 (d, 1H), 7,52 (d von d, 2H), 7,20 (d, 1H), 4,1 bis 3,95 (m, 2H), 3,8 bis 3,65 (m, 2H), 3,5 bis 3,05 (m, 5H), 3,0 bis 2,5 (m, 6H), 2,45 bis 1,6 (m, 6H), 1,4 bis 1,1 (m, 2H). Präparatives Beipiel 8
[racemisch sowie (+)- und (–)-Isomere]
Stufe A:
Es wurde eine Lösung von 8,1 g der Titelverbindung des präparativen Beispiels 7, Stufe E, in Toluol hergestellt und 17,3 ml einer 1 M Lösung von DIBAL in Toluol zugegeben. Die Mischung wurde auf Rückfluss erwärmt und langsam (tropfenweise) weitere 21 ml 1 M DIBAL/Toluol-Lösung über einen Zeitraum von 40 Minuten zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde auf etwa 0°C abgekühlt und 700 ml 1 M HCl (wässrig) zugegeben. Die organische Phase wurde abgetrennt und verworfen. Die wässrige Phase wurde mit CH₂Cl₂ gewaschen, der Extrakt verworfen, danach die wässrige Phase durch Zugabe von 50% NaOH (wässrig) basisch gemacht. Es wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert, der Extrakt über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert, um 7,30 g der Titelverbindung zu ergeben, die eine racemische Mischung von Enantiomeren ist.
Stufe B – Trennung von Enantiomeren
Die racemische Titelverbindung aus Stufe A wurde durch präparative chirale Chromatographie (Chiralpack AD, 5 cm × 50 cm Säule, unter Verwendung von 20% iPrOH/Hexan + 0,2% Diethylamin) getrennt, um das (+)-Isomer und das (–)-Isomer der Titelverbindung zu ergeben.
Physikalisch-chemische Daten für (+)-Isomer: Schmelzpunkt = 148,8°C; Massenspektrum MH⁺ = 469; [α]_D ²⁵ = +65,6° (12,93 mg/2 ml MeOH).
Physikalisch-chemische Daten für (–)-Isomer: Schmelzpunkt = 112°C; Massenspektrum MH⁺ = 469; [α]_D ²⁵ = –65,2° (3,65 mg/2 ml MeOH).
Stufe C:
(+)-Isomer
1,33 g des (+)-Isomers der Titelverbindung des präparativen Beispiels 8, Stufe B, wurde mit 1,37 g 1-N-t-Butoxycarbonylpiperidinyl-4-essigsäure unter Verwendung von im Wesentlichen den gleichen Verfahren umgesetzt, die für das präparative Beispiel 5, Stufe C, beschrieben wurden, um 2,78 g des Produkts zu ergeben. Massenspektrum: MH⁺ = 694,0 (FAB), [α]_D ²⁵ 0 +34,1° (5,45 mg/2 ml, MeOH).
Stufe D:
2,78 g des Produkts von Stufe C wurde im Wesentlichen nach dem gleichen Verfahren behandelt, wie für das präparative Beispiel 5, Stufe D, beschrieben wurde, um 1,72 g des Produkts zu ergeben. Schmelzpunkt 104,1°C, Massenspektrum MH⁺ = 594; [α]_D ²⁵ = +53,4° (11,42 mg/2 ml MeOH). Präparatives Beispiel 9
[racemisch sowie (+)- und (–)-Isomere]
Stufe B:
40,0 g (0,124 Mol) des Ausgangsketons und 200 ml H₂SO₄ wurden kombiniert und auf 0°C abgekühlt. Es wurden langsam 13,78 g (0,136 Mol) KNO₃ über einen Zeitraum von 1,5 h zugegeben, danach auf Raumtemperatur erwärmt und über Nacht gerührt. Die Reaktion wurde im Wesentlichen unter Verwendung des gleichen Verfahrens wie für das präparative Beispiel 4, Stufe A, beschrieben aufgearbeitet. Es wurde chromatographiert (Silikagel, 20%, 30%, 40%, 50% EtOAc/Hexan, dann 100% EtOAc), um 28 g des 9-Nitroprodukts zusammen mit einer kleineren Menge des 7-Nitroprodukts und 19 g einer Mischung der 7-Nitro- und 9-Nitroverbindungen zu ergeben.
Stufe B:
28 g (76,2 mmol) des 9-Nitroprodukts aus Stufe A, 400 ml 85% EtOH/Wasser, 3,8 g (34,3 mmol) CaCl₂ und 38,28 g (0,685 Mol) Fe wurden unter Verwendung von im Wesentlichen dem gleichen Verfahren umgesetzt, wie für das präparative Beispiel 4, Stufe C, beschrieben wurde, um 24 g des Produkts zu ergeben.
Stufe C:
13 g (38,5 mmol) des Produkts aus Stufe B, 140 ml HOAc wurden kombiniert und langsam über einen Zeitraum von 20 Minuten eine Lösung von 2,95 ml (57,8 mmol) Br₂ in 10 ml HOAc zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur gerührt, dann im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. CH₂Cl₂ und Wasser wurden zugegeben, nachfolgend der pH-Wert mit 50% NaOH (wässrig) auf 8 bis 9 eingestellt. Die organische Phase wurde mit Wasser, danach mit Salzlösung gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Es wurde im Vakuum konzentriert, um 11,3 g des Produkts zu ergeben.
Stufe D:
100 ml konzentrierte HCl (wässrig) wurde auf 0°C abgekühlt, danach 5,61 g (81,4 mmol) NaNO₂ zugefügt und 10 Minuten gerührt. Es wurde langsam (in Portionen) 11,3 g (27,1 mmol) des Produkts aus Stufe C zugegeben und die Mischung bei 0° bis 3°C für 2,25 h gerührt. Es wurde langsam (tropfenweise) 180 ml 50% HP₃O₂ (wässrig) zugegeben und die Mischung über Nacht bei 0°C stehen gelassen. Es wurden langsam (tropfenweise) im Verlauf von 30 Minuten 150 ml 50% NaOH zugegeben, um den pH-Wert auf 9 einzustellen, nachfolgend mit CH₂Cl₂ extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser, nachfolgend Salzlösung gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Es wurde im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert und chromatogra phiert (Silikagel, 2% EtOAc/CH₂Cl₂), um 8,6 g des Produkts zu ergeben.
Stufe E:
8,6 g (21,4 mmol) des Produkts aus Stufe D und 300 ml MeOH wurden kombiniert und auf 0 bis 2°C abgekühlt. Es wurden 1,21 g (32,1 mmol) NaBH₄ zugegeben und bei ~0°C eine Stunde gerührt. Es wurden weitere 0,121 g (3,21 mmol) NaBH₄ zugegeben, 2 h bei 0°C gerührt, nachfolgend über Nacht bei 0°C stehen gelassen. Es wurde im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert, danach der Rückstand zwischen CH₂Cl₂ und Wasser partitioniert. Die organische Phase wurde abgetrennt und im Vakuum konzentriert (50°C), um 8,2 g des Produkts zu ergeben.
Stufe F:
8,2 g (20,3 mmol) des Produkts von Stufe E und 160 ml CH₂Cl₂ wurden kombiniert, auf 0°C abgekühlt, danach langsam (tropfenweise) 14,8 ml (203 mmol) SOCl₂ über einen Zeitraum von 30 Minuten zugegeben. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmt und 4,5 h gerührt, nachfolgend im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert, CH₂Cl₂ zugegeben und mit 1 N NaOH (wässrig), danach Salzlösung gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Es wurde im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert, danach trockenes THF zugegeben und 8,7 g (101 mmol) Piperazin zugegeben und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert, CH₂Cl₂ zugegeben und mit 0,25 N NaOH (wässrig), Wasser, danach Salzlösung gewaschen. Es wurde über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert, um 9,46 g des Rohprodukts zu ergeben. Es wurde chromatographiert (Silikagel, 5% MeOH/ CH₂Cl₂ + NH₃), um 3,59 g der Titelverbindung als Racemat zu ergeben. ¹H-NMR (CDCl₃, 200 MHz): 8,43 (d, 1H); 7,55 (d, 1H); 7,45 (d, 1H); 7,11 (d, 1H); 5,31 (s, 1H); 4,86 bis 4,65 (m, 1H); 3,57 bis 3,40 (m, 1H); 2,98 bis 2,55 (m, 6H); 2,45 bis 2,20 (m, 5H).
Stufe G – Trennung der Enantiomere:
Die racemische Titelverbindung aus Stufe F (5,7 g) wurde wie für präparatives Beispiel 6, Stufe D, beschrieben unter Verwendung von 30% iPrOH/Hexan + 0,2% Diethylamin chromatographiert, um 2,88 g des R-(+)-Isomers und 2,77 g des S-(–)-Isomers der Titelverbindung zu ergeben.
Physikalisch-chemische Daten für R-(+)-Isomer: Massenspektrum MH⁺ = 470; [α]_D ²⁵ = +12,1° (10,9 mg/2 ml MeOH).
Physikalisch-chemische Daten für S-(–)-Isomer: Massenspektrum MH⁺ = 470; [α]_D ²⁵ = –13,2° (11,51 mg/2 ml MeOH).
Stufe H:
Nach im Wesentlichen dem gleichen Verfahren wie in dem präparativen Beispiel 5, Stufen C und D, wurde die racemische Titelverbindung des präparativen Beispiels 9 aus der racemischen Verbindung von Stufe F erhalten. In ähnlicher Weise wurde unter Verwendung des (–)- oder (+)-Isomers der Stufe G das (–)- beziehungsweise (+)-Isomer der Titelverbindung des präparativen Beispiels 9 erhalten. Präparatives Beispiel 10
[racemisch sowie (+)- und (–)-Isomere]
Stufe A:
13 g (33,3 mmol) der Titelverbindung aus präparativem Beispiel 4, Stufe E, und 300 ml Toluol wurden bei 20°C kombiniert, danach 32,5 ml (32,5 mmol) einer 1 M Lösung von DIBAL in Toluol zugefügt. Die Mischung wurde 1 h auf Rückfluss erwärmt, auf 20°C abgekühlt, weitere 32,5 ml 1 M DIBAL-Lösung zugegeben und 1 h auf Rückfluss erwärmt. Die Mischung wurde auf 20°C abgekühlt und in eine Mischung aus 400 g Eis, 500 ml EtOAc und 300 ml 10 NaOH (wässrig) gegossen. Die wässrige Phase wurde mit CH₂Cl₂ (3 × 200 ml) extrahiert, die organischen Phasen über MgSO₄ getrocknet, danach im Vakuum zu einem Rückstand konzentriert. Es wurde chromatographiert (Silikagel, 12% MeOH/CH₂Cl₂ + 4% NH₄OH), um 10,4 g der Titelverbindung als Racemat zu ergeben. Massenspektrum: MH⁺ = 469 (FAB). Partielles ¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,06 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
Stufe B – Trennung von Enantiomeren:
Die racemische Titelverbindung aus Stufe A wurde durch präparative chirale Chromatographie (Chiralpack AD, 5 cm × 50 cm Säule, unter Verwendung von 5% iPrOH/Hexan + 0,2% Diethylamin) getrennt, um das (+)-Isomer und das (–)-Isomer der Titelverbindung zu ergeben.
Physikalisch-chemische Daten für (+)-Isomer: Massenspektrum MH⁺ = 469 (FAB); [α]_D ²⁵ = +43,5° (c = 0,402, EtOH); partielles ¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,05 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
Physikalisch-chemische Daten für (–)-Isomer: Massenspektrum MH⁺ = 469; [α]_D ²⁵ = –41,8° (c = 0,328, EtOH); partielles ¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,05 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
Stufe C:
Nach dem Verfahren von dem präparativen Beispiel 9, Stufe H, können die racemische Verbindung, das (+)-Isomer oder das (–)-Isomer der Titelverbindung des präparativen Beispiels 10 erhalten werden. Präparatives Beispiel 11
[racemisch sowie R-(+) – und S-(–)-Isomere]
Die Verbindung
wurde gemäß den Verfahren des präparativen Beispiels 40 von WO 95/10516 (veröffentlicht am 20. April 1995) hergestellt, indem die in Beispiel 193 von WO 95/10516 beschriebenen Verfahren nachgearbeitet wurden.
Die (+)- und (–)-Isomere können getrennt werden, indem im Wesentlichen das gleiche Verfahren wie in Stufe D des präparativen Beispiels 6 nachgearbeitet wird.
Physikalisch-chemische Daten für das R-(+)-Isomer: ¹³C-NMR (CDCl₃): 155,8 (C); 146,4 (CH); 140,5 (CH); 140,2 (C); 136,2 (C); 135,3 (C); 133,4 (C); 132,0 (CH); 129,9 (CH); 125,6 (CH); 119,3 (C); 79,1 (CH); 52,3 (CH₂); 52,3 (CH); 45,6 (CH₂); 45,6 (CH₂); 30,0 (CH₂); 29,8 (CH₂). [α]_D ²⁵ = +25,8° (8,46 mg/2 ml MeOH).
Physikalisch-chemische Daten für das S-(–)-Isomer: ¹³C-NMR (CDCl₃): 155,9 (C); 146,4 (CH); 140,5 (CH); 140,2 (C); 136,2 (C); 135,3 (C); 133,3 (C); 132,0 (CH); 129,9 (CH); 125,5 (CH); 119,2 (C); 79,1 (CH); 52,5 (CH₂); 52,5 (CH); 45,7 (CH₂; 45,7 (CH₂); 30,0 (CH₂); 29,8 (CH₂). [α]_D ²⁵ = –27,9° (8,90 mg/2 ml MeOH).
Nach im Wesentlichen dem gleichen Verfahren wie in dem präparativen Beispiel 5, Stufen C und D, können die racemische Verbindung, das (+)-Isomer oder (–)-Isomer der Titelverbindung des präparativen Beispiels 11 aus der entsprechenden racemischen Verbindung, dem (+)-Isomer oder (–)-Isomer der Verbindung erhalten werden.
Beispiel 1
Zu der Verbindung der Formel 20.0
(Präparatives Beispiel 8) (0,10 g, 0,17 mmol) und Triethylamin (0,04 ml, 0,26 mmol), gelöst in wasserfreiem Dichlormethan (10 ml) wurde Benzolsulfonylchlorid (0,03 ml, 1,2 Äq.) gegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur über Nacht wurde die Lösung mit Dichlormethan verdünnt, mit 1 M Salzsäure gewaschen, dann mit 1 N wässrigem Natriumhydroxid gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Filtration und Konzentration im Vakuum ergab die Verbindung der Formel 6.0 (0,11 g, 89%, Schmelzpunkt 102 bis 105°C).
Beispiel 2
Zu der Verbindung der Formel 20.0 (Präparatives Beispiel 8) (0,11 g, 0,19 mmol) und Triethylamin (0,04 ml, 0,28 mmol), gelöst in wasserfreiem Dichlormethan (10 ml), wurde Methansulfonylchlorid (0,02 ml, 1,2 Äq) gegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur über Nacht wurde die Lösung mit Dichlormethan verdünnt, mit 1 M Salzsäure gewaschen, dann mit 1 N wässrigem Natriumhydroxid gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Filtration und Konzentration im Vakuum ergab die Verbindung der Formel 2.0 (0,10 g, 80%, Schmelzpunkt 133 bis 136°C).
Beispiel 3
Zu der Verbindung der Formel 20.0 (Präparatives Beispiel 8) (0,20 g, 0,34 mmol) und Triethylamin (0,08 ml, 0,50 mmol), gelöst in wasserfreiem Dichlormethan (10 ml), wurde N,N-Dimethylsulfamoylchlorid (0,04 ml, 1,2 Äq) gegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur über Nacht wurde die Lösung mit Dichlormethan verdünnt, mit 1 M Salzsäure gewaschen, dann mit 1 N wässrigem Natriumhydroxid gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Filtration und Konzentration im Vakuum ergab die Verbindung der Formel 13.0 (0,22 g, 93%, Schmelzpunkt 107,4 bis 109,5°C).
Beispiel 4
Verfahren 1:
Zu der Verbindung der Formel 20.0 (Präparatives Beispiel 8) (0,30 g, 0,50 mmol) und Triethylamin (0,2 ml, 3 Äq) gelöst in wasserfreiem Acetonitril (10 ml) bei 0°C, wurde langsam eine Acetonitrillösung (2 ml) von Sulfamoylchlorid (0,12 ml, 2 Äq) (Chem. Ber., Band 91, Seite 1339 (1958)) gegeben. Nach Rühren bei 0°C für 1 Stunde, anschließend bei Raumtemperatur für 72 Stunden, wurde die Mischung im Vakuum konzentriert, mit Dichlormethan verdünnt, mit 1 M Salzsäure gewaschen, dann mit 1 N wässrigem Natriumhydroxid gewaschen und über wasserfreiem Magnesium-Sulfat getrocknet. Filtration und Konzentration im Vakuum ergab einen Feststoff, der durch präparative Plattenchromatographie (Silikagel) unter Verwendung von 5% Methanol-Dichlormethan und konzentriertem Ammoniumhydroxid gereinigt wurde, um die Verbindung der Formel 14.0 (0,05 g, 14%, Schmelzpunkt 151,5 bis 155,6°C) zu liefern.
Verfahren 2:
Wasserfreies Pyridin (2 ml, 24,8 mmol) wurde in einem Eis/-Wasserbad abgekühlt. SO₂Cl₂ (0,3 ml, 3,8 mmol) wurde tropfenweise im Verlauf von etwa 5 Minuten zugegeben und die resultierende Mischung wurde etwa 5 Minuten gerührt. Die Verbindung der Formel 20.0 (Präparatives Beispiel 8) (150 mg) wurde als Dichlormethanlösung tropfenweise im Verlauf von etwa einer Minute zugegeben, und die Mischung wurde bei 0°C für etwa 10 Minuten gerührt. Konzentriertes NH₄OH (40 ml) wurde tropfenweise zugegeben und die Mischung bei Raumtemperatur etwa eine Stunde gerührt. Dichlormethan wurde zugegeben und die Mischung bei Raumtemperatur gerührt. Die Phasen wurden getrennt, und 1 M HCl wurde zu der organischen Phase gegeben und die resultierende Mischung gerührt. Die Phasen wurden getrennt, die organische Phase wurde mit 1 M HCl (aq) gewaschen, und die Phasen wurden getrennt. Die organische Phase wurde mit gesättigtem NaHCO₃ (aq) gewaschen, über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, filtriert und am Rotationsverdampfer konzentriert. Der Rückstand wurde durch präparative Plattenchromatographie (Silika) unter Verwendung von 5% MeOH/CH₂Cl₂ + NH₄OH gereinigt, um die Verbindung der Formel 14.0 (18 mg, 14%) zu ergeben. MS-FAB DMSO: 673 (MH⁺), Schmelzpunkt 151,5 bis 155,6°C.
Beispiel 5
Zu der Verbindung der Formel 20.0 (Präparatives Beispiel 8) (0,15 g, 0,25 mmol) und Triethylamin (0,14 ml, 1,0 mmol), gelöst in wasserfreiem Dichlormethan (5 ml), wurde Dimethylphosphinylchlorid (0,12 g, 4 Äq) gegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur für 48 Stunden wurde die Lösung mit Dichlormethan verdünnt, mit 1 M Salzsäure gewaschen, dann mit 1 N wässrigem Natriumhydroxid gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Filtration und Konzentration im Vakuum ergab ein Öl, das durch präparative Plattenchromatographie (Silikagel) unter Verwendung von 2% Methanol-Dichlormethan und konzentriertem Ammoniumhydroxid gereinigt wurde, um die Verbindung mit der Formel 15.0 (0,03 g, 18%) zu liefern.
Beispiele 6 bis 14
Nach Verfahren ähnlich denen von Beispiel 1, wobei jedoch die Sulfonylchloride in Spalte 1 von Tabelle 1 anstelle von Benzolsulfonylchlorid verwendet wurden, wurden die Verbindungen der Formel 24
erhalten, wobei R¹⁷ in Spalte 3 von Tabelle 1 definiert ist. Die Zahl in Klammern in Spalte 3 ist die Formelnummer der erhaltenen Verbindung.
Tabelle 1
Beispiel 15
1-(3-Brom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]-pyridin-11-yl)-4-(4-piperidinylacetyl)piperazin (1,5 g) (1 Äquivalent) (hergestellt wie in dem präparativen Beispiel 11 beschrieben) wurde in wasserfreiem Dichlormethan (50 ml) gelöst, und Triethylamin (0,8792 g.) (1,211 ml) (3 Äquivalente) und Methansulfonylchlorid (0,498 g) (0,336 ml) (1,5 Äquivalente) wurden zugesetzt. Die Mischung wurde bei 25°C unter Argon für 18 Stunden gerührt. Weiteres Methansulfonylchlorid (0,259 g) (0,118 ml) (0,75 Äquivalente) wurde zugegeben und das Rühren weitere 6 Stunden fortgesetzt. Es wurde weiteres Methansulfonylchlorid (0,259 g) (0,118 ml) (0,75 Äquivalente) und Triethylamin (0,8792 g) (1,211 ml) (3 Äquivalente) zugegeben und das Rühren insgesamt 90 Stunden fortgesetzt. Die Mischung wurde mit Dichlormethan verdünnt und mit gesättigtem wässrigem Natriumbicarbonat und dann mit Wasser gewaschen. Die Dichlormethanphase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und zur Trockne eingedampft. Das resultierende Produkt wurde an einer Silikagelsäule (60 × 2,5 cm) unter Verwendung von 1% (10% konzentriertes Ammoniumhydroxid) in Methanol als Eluierungsmittel chromatographiert, um die Titelverbindung (Formel 14.1) (1,2505 g, 72%) zu ergeben, FABMS: m/z 595,1 (MH⁺).
Beispiel l6
Verfahren 1:
1-(3-Brom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-4-[(4-piperidinyl)acetyl] piperazin (0,555 g) (1 Äquivalent) (hergestellt wie im präparativen Beispiel 11 beschrieben) und Sulfamid (1,03 g) (10 Äquivalente) wurden zu Wasser (20 ml) gegeben, und die Mischung unter Rückfluss 43 Stunden auf 100°C erhitzt. Die resultierende Lösung wurde zur Trockne eingedampft. Der Feststoff wurde in Methanol-Wasser-Dichlormethan aufgenommen und Silikagel zugegeben. Die Mischung wurde zur Trockne eingedampft. Der resultierende Feststoff wurde auf eine Silikagelsäule (60 × 2,5 cm) gebracht und die Säule mit 3% ansteigend auf 7% (10% konzentriertes Ammoniumhydroxid in Methanol)-Dichlormethan als Eluierungsmittel eluiert, um die Titelverbindung zu ergeben (Formel 14.2) (0,5282 g, 83%), FABMS: m/z 596,0 (MH⁺).
Verfahren 2:
1-(3-Brom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-4-[(4-piperidinyl)acetyl]piperazin (1,25 g) (1 Äquivalent) (hergestellt wie im präparativen Beispiel 11 beschrieben) und Sulfamid (2,32 g) (10 Äquivalente) wurden in einem mit einem Rückflusskühler ausgestatteten Kolben auf 150°C erhitzt. Die Feststoffe schmolzen und die Mischung wurde 73 Stunden gerührt und anschließend abgekühlt. Der Feststoff wurde in Methanol-Wasser-Dichlormethan aufgenommen und Silikagel zugegeben. Die Mischung wurde zur Trockne eingedampft. Der resultierende Feststoff wurde auf eine Silikagelsäule (60 × 2,5 cm) gebracht und die Säule mit 2% ansteigend auf 7% (10% konzentriertes Ammoniumhydroxid in Methanol)-Dichlormethan als Eluierungsmittel eluiert, um die Titelverbindung zu ergeben (Formel 14.2) (0,3788 g, 26%).
Verfahren 3:
1-(3-Brom-8-chlor-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b] pyridin-11-yl)-4-[(4-piperidinyl) acetyl] piperazin (1,5 g) (1 Äquivalent) (hergestellt wie im präparativen Beispiel 11 beschrieben) und Sulfamid (2,79 g) (10 Äquivalente) wurden zu Isopropanol (100 ml) gegeben, und die Mischung unter Rückfluss 241 Stunden auf 86°C erhitzt. Die Lösung wurde zur Trockne eingedampft. Der Feststoff wurde in Methanol-Wasser-Dichlormethan aufgenommen und Silikagel zugegeben. Die Mischung wurde zur Trockne eingedampft. Der resultierende Feststoff wurde auf eine Silikagelsäule (60 × 2,5 cm) gebracht und die Säule mit 0,5 ansteigend auf 7% (10% konzentriertes Ammoniumhydroxid in Me thanol)-Dichlormethan als Eluierungsmittel eluiert, um die Titelverbindung zu ergeben (Formel 14.2) (0,088 g, 5%).
Assays
FPT-IC₅₀ (Inhibierung von Farnesylproteintransferase, in-vitro Enzym-Assay) und COS-Zellen-IC₅₀ (Assay auf Zellbasis) wurden gemäß den in WO 95/10516, veröffentlicht am 20. April 1995, beschriebenen Assay-Verfahren ermittelt. GGPT-IC₅₀ (Inhibierung von Geranylgeranylproteintransferase,in-vitro-Enzym-Versuch), Zellmatten-Assay und Antitumoraktivität (in-vivo-Antitumoruntersuchungen) können nach den in WO 95/10516 beschriebenen Assay-Verfahren ermittelt werden. Auf die Offenbarung von WO 95/10516 wird hier Bezug genommen.
Weitere Assays können durchgeführt werden, indem im Wesentlichen das gleiche Verfahren wie oben beschrieben nachgearbeitet wird, wobei statt der T24-BAG-Zellen jedoch alternative Indikatortumorzelllinien verwendet werden. Die Assays können unter Verwendung von entweder menschlichen Coloncarcinomzellen DLD-1-BAG, die ein aktiviertes K-ras-Gen exprimieren, oder menschlichen Coloncarcinomzellen SW620-BAG durchgeführt werden, die ein aktiviertes K-ras-Gen exprimieren. Unter Verwendung anderer Tumorzelllinien, die in der Technik bekannt sind, kann die Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen gegen andere Typen von Krebszellen gezeigt werden.
Weichangar-Assays
Verankerungsunabhängiges Wachstum ist ein Charakteristikum von tumorigenen Zelllinien. Menschliche Tumorzellen werden in Wachstumsmedium suspendiert, das 0,3% Agarose und eine angegebene Konzentration eines Farnesyltransferaseinhibitors enthält. Die Lösung wird auf Nährmedium überschichtet, das mit 0,6% Agarose verfestigt ist, das die gleiche Konzentration an Farnesyltransferaseinhibitor als Deckschicht enthält. Nach Erstarrung der Deckschicht wurden Platten 10 bis 16 Tage bei 37°C unter 5 CO₂ inkubiert, um Koloniewachstum zu ermöglichen. Nach dem Inkubieren wurden die Kolonien gefärbt, indem der Agar mit einer Lösung von MTT (3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazoliumbromid, Thiazolylblau) (1 mg/ml in PBS) überschichtet wurde. Kolonien können gezählt werden, und die IC₅₀'S können ermittelt werden.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 angegeben. In Tabelle 1 steht "B-NR" für "Beispielnummer".
Die folgenden Verbindungen hatten die folgenden FPT IC₅₀ (Kras)-Ergebnisse: 2,0, 8,2 nM; 3,0, 16,4 nM; 4,0, 14,2 nM, 5,0, 22,9 nM, 10,0, 52,5 nM, 12,0, 23 nM und 13,0, 10 nM.
Die folgenden Verbindungen hatten die folgenden Weichagar-Ergebnisse: 2,0, 50 nM; 3,0, 100 nM; 4,0, 250 nM; 7,0, > 250 nM und 13,9, 100 nM.
Zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen aus den erfindungsgemäß beschriebenen Verbindungen können inerte, pharmazeutisch annehmbare Träger fest oder flüssig sein. Zubereitungen in fester Form schließen Pulver, Tabletten, dispergierbare Körner, Kapseln, Arzneikapseln und Zäpfchen ein. Die Pulver und Tabletten können aus etwa 5 bis etwa 70% aktivem Bestandteil zusammengesetzt sein. Geeignete feste Träger sind in der Technik bekannt, z. B. Magnesiumcarbonat, Magnesiumstearat, Talkum, Zucker, Laktose. Tabletten, Pulver, Kapseln und Arzneikapseln können als feste Dosierungsformen verwendet werden, die zur oralen Verabreichung geeignet sind.
Zur Herstellung von Zäpfchen wird zuerst ein niedrig schmelzendes Wachs wie eine Mischung aus Fettsäureglyceriden oder Kakaobutter geschmolzen, und der aktive Bestandteil wird darin homogen dispergiert, wie durch Rühren. Die geschmolzene homogene Mischung wird dann in zweckmäßig bemessene Formen gegossen, abkühlen gelassen und dadurch verfestigt.
Zubereitungen in flüssiger Form schließen Lösungen, Suspensionen und Emulsionen ein. Als Beispiel können Wasser oder Wasser/Propylenglykol-Lösungen für die parenterale Injektion genannt werden.
Zubereitungen in flüssiger Form können auch Lösungen für intranasale Verabreichung einschließen.
Aerosolzubereitungen, die zur Inhalation geeignet sind; können Lösungen und Feststoffe in Pulverform einschließen, die in Kombination mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger wie inertem komprimiertem Gas vorliegen können.
Ebenfalls eingeschlossen sind Zubereitungen in fester Form, die kurz vor Gebrauch in Zubereitungen in flüssige Form für orale oder parenterale Verabreichungen überführt werden. Diese flüssigen Formen schließen Lösungen, Suspensionen und Emulsionen ein.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch transdermal verabreicht werden. Die transdermalen Zusammensetzungen können die Form von Cremes, Lotionen, Aerosolen und/oder Emulsionen annehmen, und können einem Transdermalpflaster vom Matrix- oder Depottyp zugefügt werden, wie in der Technik zu diesem Zweck konventionell ist.
Die Verbindung wird vorzugsweise oral verabreicht.
Die pharmazeutische Zubereitung liegt vorzugsweise in Einzeldosisform vor. In einer solchen Form wird die Zubereitung in Einzeldosen unterteilt, die geeignete Mengen der aktiven Komponente enthalten, z. B. eine wirksame Menge, um den gewünschten Zweck zu erreichen.
Die Menge an aktiver Verbindung in einer Einzelzubereitungsdosis kann gemäß der speziellen Anwendung auf etwa 0,1 mg bis 1000 mg, vorzugsweise etwa 1 mg bis 300 mg, variiert oder eingestellt werden.
Die tatsächlich verwendete Dosis kann gemäß den Erfordernissen des Patienten und dem Schweregrad des behandelten Zustands variiert werden. Das Ermitteln der richtigen Dosierung für eine spezielle Situation liegt innerhalb des Wissens des Fachmanns. Die Behandlung wird im Allgemeinen mit geringeren Dosierungen begonnen, die unter der Optimaldosis der Verbindung liegen. Nachfolgend wird die Dosierung in kleinen Schritten erhöht, bis die optimale Wirkung unter den Bedingungen erreicht wird. Der Bequemlichkeit halber kann die gesamte Tagesdosis unterteilt und auf Wunsch portionsweise über den Tag verabreicht werden.
Menge und Frequenz der Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen und der pharmazeutisch annehmbaren Salze derselben werden gemäß der Beurteilung des behandelnden Arztes unter Berücksichtigung von Faktoren wie Alter, Zustand und Größe des Patienten sowie des Schweregrads der zu behandelnden Symptome festgelegt. Eine typische empfohlene Dosierweise ist orale Verabreichung von 10 mg bis 2000 mg/Tag, vorzugsweise 10 bis 1000 mg/Tag, in in zwei bis vier Dosen unterteilter Form, um Tumorwachstum anzuhalten. Die Verbindungen sind bei Verabreichung innerhalb dieses Dosierungsbereichs nicht giftig.
Es folgen Beispiele für pharmazeutische Dosierungsformen, die eine erfindungsgemäße Verbindung enthalten. Der Bereich der Erfindung gemäß ihrem Aspekt der pharmazeutischen Zusammensetzung soll durch die gegebenen Beispiele nicht eingeschränkt werden.
Beispiele für pharmazeutische Dosierformen Beispiel A Tabletten
Herstellungsverfahren
Positionen Nr. 1 und 2 wurden in einem geeigneten Mischer 10 bis 15 Minuten gemischt. Die Mischung wurde mit Position Nr. 3 granuliert. Die feuchten Körper wurden nach Bedarf durch ein grobes Sieb (z. B. 1/4", 0,63 cm) gemahlen. Die feuchten Körper wurden getrocknet. Die getrockneten Körner wurden nach Bedarf gesiebt und mit Position Nr. 4 gemischt und 10 bis 15 Minuten gemischt. Position Nr. 5 wurde zugegeben und 1 bis 3 Minuten gemischt. Die Mischung wurde mit einer geeigneten Tablettiermaschine auf geeignete Größe und geeignetes Gewicht gepresst.
Beispiel B Kapseln
Herstellungsverfahren
Positionen Nr. 1, 2 und 3 wurden in einem geeigneten Mischer 10 bis 15 Minuten gemischt. Position Nr. 4 wurde zugegeben und 1 bis 3 Minuten gemischt. Die Mischung wurde mittels einer geeigneten Verkapselungsmaschine in geeignete zweiteilige Hartgelatinekapseln gefüllt.

Claims

Verbindung mit der Formel
oder einpharmazeutisch annehmbares Salz oder Solvat davon, worin R¹ und R³ Halogen sind und R⁴ H wiedergibt; oder R¹, R³ und R⁴ Halogen sind; X N, CH oder C wiedergibt, wobei C eine optionale Doppelbindung (dargestellt durch die gestrichelte Linie) zu Kohlenstoffatom 11 enthalten kann; die gestrichelte Linie zwischen den Kohlenstoffatomen 5 und 6 eine optionale Doppelbindung wiedergibt, so dass, wenn eine Doppelbindung vorhanden ist, A und B unabhängig -R¹⁰, Halogen, -OR¹¹, -OCO₂R¹¹ oder -OC(O)R¹⁰ wiedergeben, und wenn keine Doppelbindung zwischen den Kohlenstoffatomen 5 und 6 vorhanden ist, A und B jeweils unabhängig H₂, -(OR¹¹)₂; H und Halogen, Dihalogen, Alkyl und H, (Alkyl)₂, -H und -OC(O)R¹⁰, H und -OR¹⁰, =O, Aryl und H, =NOR¹⁰ oder -O(CH₂)_p-O- wiedergeben, wobei p 2, 3 oder 4 ist; und W eine Gruppe ausgewählt aus -SO₂R¹² oder -P(O)R¹³R¹⁴ wiedergibt; R¹² ausgewählt ist aus (1) Alkyl; (2) Aralkyl; (3) Cycloalkyl; (4) Aryl; (5) Heteroaryl; (6) substituiertem Heteroaryl, wobei das Heteroaryl wie nachfolgend definiert ist und die Substituenten ausgewählt sind aus (a) Heteroaryl, (b) Alkyl, (c) Aryl, (d) Aralkyl, (e) -OR¹⁰ und (f) N(R¹⁰)₂; (7) Campher oder (8) -NR¹⁵R¹⁶, wobei R¹⁵ und R¹⁶ unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus (a) H, (b) Alkyl, (c) Aryl, (d) Aralkyl, (e) Heteroaryl und (f) Heterocycloalkyl; und R¹³ und R¹⁴ unabhängig ausgewählt sind aus (1) H; (2) Alkyl; (3) Aryl; (4) Aralkyl; oder (5) -OR¹³, wobei R¹³ wie oben definiert ist, wobei, wenn nicht anderweitig angegeben, "Alkyl" (einschließlich Alkylanteilen von Alkoxy, Aralkyl und Heteroarylalkyl) geradkettige und verzweigte Kohlenstoffketten wiedergibt und ein bis zwanzig Kohlenstoffatome, vorzugsweise ein bis sechs Kohlenstoffatome enthält; "Aralkyl" eine Arylgruppe wie nachfolgend definiert wiedergibt, die an eine Alkylgruppe wie zuvor definiert gebunden ist, wobei die Alkylgruppe vorzugsweise -CH₂ ist ( z. B. Benzyl); "Aryl" (einschließlich des Arylanteils von Aralkyl) eine carbocyclische Gruppe wiedergibt, die 6 bis 15 Kohlenstoffatome enthält und mindestens einen aromatischen Ring aufweist (z. B. ist Aryl ein Phenylring), wobei alle verfügbaren substituierbaren Kohlenstoffatome der carbocyclischen Gruppe als mögliche Bindungspunkte vorgesehen sind, wobei die carbocyclische Gruppe gegebenenfalls mit einem oder mehreren (z. B. 1 bis 3) von Halogen, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Phenoxy, CF₃, Amino, Alkylamino, Dialkylamino, -COOR¹⁰ oder -NO₂ substituiert ist; "Cycloalkyl" gesättigte, verzweigte oder unverzweigte, carbocyclische Ringe mit 3 bis 20 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise 3 bis 7 Kohlenstoffatomen wiedergibt; "Halogen" Fluor, Chlor, Brom und Iod wiedergibt; "Heteroaryl" cyclische Gruppen wiedergibt, die gegebenenfalls mit R³ und R⁴ substituiert sind, mindestens ein Heteroatom ausgewählt aus O, S oder N aufweisen, wobei das Heteroatom eine carbocyclische Ringstruktur unterbricht und eine ausreichende Anzahl delokalisierter n-Elektronen aufweist, um aromatischen Charakter zu liefern, wobei die aromatischen heterocyclischen Gruppen 2 bis 14 Kohlenstoffatome enthalten, z. B. Thienyl, (2-, 4- oder 5-)-Imidazo-lyl, Triazolyl, 2-, 3- oder 4-Pyridyl oder -Pyridyl-N-Oxid (das gegebenenfalls mit R³ und R⁴ substituiert ist), wobei Pyridyl-N-Oxid wiedergegeben werden kann als
"Heteroarylalkyl" eine Heteroarylgruppe wie oben definiert wiedergibt, die an eine Alkylgruppe wie oben definiert gebunden ist, wobei die Alkylgruppe vorzugsweise -CH₂- (z. B. -CH₂- (4- oder 5-) imidazolyl) ist; "Heterocycloalkyl" einen gesättigten, verzweigten oder nicht verzweigten, carbocyclischen Ring wiedergibt, der 3 bis 15 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 4 bis 6 Kohlenstoffatome enthält, wobei der carbocyclische Ring durch 1 bis 3 Heterogruppen ausgewählt aus -O-, -S- oder -NR¹⁰ unterbrochen ist; wobei geeignete Heterocycloalkylgruppen (1) 2- oder 3-Tetrahydrofuranyl, (2) 2- oder 3-Tetrahydrothienyl, (3) 2-, 3- oder 4-Piperidinyl, (4) 2- oder 3-Pyrrolidinyl, (5) 2- oder 3-Piperazinyl, (6) 2- oder 4-Dioxanyl, (7) Tetrahydropyranyl und (8) substituiertes Tetrahydropyranyl bedeuten, wobei die Substituenten ausgewählt sind aus Hydroxy und Hydroxyalkyl (z. B. Hydroxymethyl), beispielsweise D-Galactosyl, d. h.
Verbindung nach Anspruch 1, bei der R¹, R³ und R⁴ jeweils unabhängig ausgewählt sind aus Br oder Cl.
Verbindung nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, bei der R¹ ausgewählt ist aus Br oder Cl; R³ ausgewählt ist Br oder Cl; R⁴ ausgewählt ist aus H, Br oder Cl; A und B jeweils H₂ sind und die optionale Bindung zwischen C5 und C6 fehlt.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, bei der R¹ Br ist, und R³ und R⁴ unabhängig ausgewählt sind aus Cl und Br.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, bei der W ausgewählt ist aus (A) -SO₂R¹², wobei R¹² ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus (1) Alkyl, (2) Aryl, (3) Heteroaryl, (4) substituiertem Heteroaryl, (5) Aralkyl, (6) Campher und (7) -NR¹⁵R¹⁶ oder (B) -P(O)R¹³R¹⁴, wobei R¹³ Alkyl ist und R¹⁴ Alkyl ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, bei der R⁴ H ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 6, bei der R⁴ ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Cl und Br.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, bei der X CH ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, bei der R¹² ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, Phenyl, Thienyl,
Benzyl, -NH₂ und -N(CH₃)₂; und R¹³ und R¹⁴ Methyl sind.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 ausgewählt aus
wobei R¹, R³ und R⁴ jeweils unabhängig ausgewählt sind aus Halogen.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 10, bei der R¹ Br ist und R³ Cl ist und R⁴ Br ist.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11, bei der die Verbindung eine Verbindung mit der Formel
Verbindung nach Anspruch 1 ausgewählt aus
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 13 zur Behandlung von Tumorzellen.
Verbindung nach Anspruch 14 zur Behandlung von Pankreastumorzellen, Lungenkrebszellen, myeloiden Leukämie-Tumorzellen, Thyroid-follikulären Tumorzellen, myelodysplastischen Tumorzellen, epidermalen Carcinomtumorzellen, Blasencarcinomtumorzellen, Kolontumorzellen, Brusttumorzellen und Prostatatumorzellen.
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine wirksame Menge von Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 13 in Kombination mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
Verbindung einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 13 zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Tumorzellen.
Verwendung einer Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 13 zur Herstellung eines Medikaments zur Inhibierung von Farnesylproteintransferase.