DE68903031T2 - N-acetyl-3-fluoroneuraminsaeure als antivirales arzneimittel. - Google Patents

N-acetyl-3-fluoroneuraminsaeure als antivirales arzneimittel.

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DE68903031T2 DE8989108596T DE68903031T DE68903031T2 DE 68903031 T2 DE68903031 T2 DE 68903031T2 DE 8989108596 T DE8989108596 T DE 8989108596T DE 68903031 T DE68903031 T DE 68903031T DE 68903031 T2 DE68903031 T2 DE 68903031T2
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Description

  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein antivirales Arzneimittel.
  • Es ist bekannt, daß Sialinsäuren am Ende der Zuckerketten bestimmter Glykoproteine oder Glykolipide stehen und für die physiologische Wirkung der Zuckerketten eine bedeutende Rolle spielen. Für die Erforschung der Funktion der Sialinsäure ist es wichtig, daß Sialinsäurederivate hergestellt werden.
  • Die fluorierten Derivate von N-Acetylneuraminsäure, die ein Fluoratom in 2-Stellung (M. N. Shana und R. Eby, Carbohydr. Res., Bd. 127, S. 201, 1984) oder in 9-Stellung (M. Sharma und W. Korytnyl, J. Carbohydr. Chem., Bd. 1, S. 311, 1982 bis 1983) aufweisen, wurden bereits hergestellt. N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure-Derivate und ein Verfahren zu deren Herstellung werden in EP-A-281 067 (veröffentlicht nach dem Prioritätstag der vorliegenden Erfindung) beschrieben.
  • Jetzt ist gefunden worden, daß N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure die Aktivität von Sialidase deutlich hemmt, die bei viralen und bakteriellen Infektionen eine wichtige Rolle spielt.
  • Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung eines antiviralen Arzneiinittels, das N-Acetyl-3- fluoroneuraminsäure oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon umfaßt.
  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein antivirales Arzneimittel, das N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure der nachstehenden Formel
  • oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon umfaßt, wobei der Arzneistoff in Form eines Präparats zur Injektion, Inhalation oder oralen Verabreichung vorliegt.
  • Fig. 1 zeigt die Dixon-Darstellung eines Hemmmusters von N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure.
  • N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure der vorstehenden Formel (I) wird beispielsweise folgendermaßen hergestellt: entweder wird (1) ein inertes Gas, das Fluor enthält, oder (2) Acetylhypofluorit, das hergestellt wird, indem ein Fluor enthaltendes inertes Gas in ein Gemisch aus Essigsäure und einem Essigsäuresalz eingeführt wird, in eine wässerige Essigsäurelösung oder Dichlormethanlösung eines Alkyl(z.B. CH&sub3;)-5-acetamido-2,6-anhydro-4,7,8,9-tetra-O-acetyl-2,3,5-tridesoxy-D-glycero-D-galacto-2-enonats der nachstehenden Formel (II) eingeführt,
  • in der R&sup4; eine Methylgruppe bedeutet und Ac eine Acetylgruppe darstellt, dabei wird die Additionsreaktion durchgeführt.
  • Die Verbindung der vorstehenden allgemeinen Formel (II) kann beispielsweise durch ein Verfahren hergestellt werden, das in "Dai-9-kai T shitsu Symposium K en voshish", (9. Glucide Symposium) S. B11, beschrieben wird.
  • Als Fluor enthaltendes inertes Gas wird Argongas verwendet, das 1 bis 2% Fluor enthält. Das Gas wird in die Lösung der Verbindung der vorstehenden Formel II in wässeriger Essigsäurelösung oder in Dichlormethan bei einer niedrigen Temperatur von etwa 7ºC ein bis zwei Stunden lang eingeführt, wobei ein difluoriertes Produkt, das ein Fluoratom in 2-Stellung und 3-Stellung in cis-Form aufweist, und außerdem zwei verschiedene monofluorierte Produkte gebildet werden, die eine Gruppe der Formel -OCOCH&sub3; in 2-Stellung und ein Fluoratom in 3-Stellung in cis- und trans-Form aufweisen. Wenn Acetylhypofluorit verwendet wird, wird hauptsächlich das monofluorierte Produkt gebildet.
  • Das monofluorierte Produkt wird aus der Reaktionsflüssigkeit abgetrennt und gereinigt, indem das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert, der Rückstand einer Säulenchromatographie mit Kieselgel unterworfen, das Produkt z.B. mit einem Essigsäureethylester/Diethylether-Gemisch eluiert und umkristallisiert wird.
  • Das auf diese Weise gebildete monofluorierte Produkt wird desacetyliert, wodurch N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäureester gebildet wird, anschließend wird dessen Estergruppe entfernt, wodurch die vorstehend beschriebene N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure hergestellt wird.
  • N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure ist bei verschiedenen viralen Infektionen wirksam. Diese Tatsache wird durch ihre Hemmwirkung auf die Sialidase (Neuraminidase) bestätigt [vgl. "Tanpakushitsu Kakusan K so (Protein, Nucleic Acid and Enzyme)", Bd. 25, Nr. 1 (1980), Seiten 30 bis 48].
  • Die wirksame Dosis von N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure beträgt üblicherweise 1 ug bis 10 mg.
  • N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure kann in verschiedenen Formen eingesetzt werden. Sie wird durch Injektion, Inhalation oder oral verabreicht.
  • Um das antivirale Arzneimittel der vorliegenden Erfindung herzustellen, können verschiedene Zusatzstoffe zum Arzneistoff hinzugefügt werden. Solche Zusatzstoffe umfassen ein Verdünnungsmittel, ein Bindemittel, ein Sprengmittel, ein Gleitmittel oder einen Filmbildner.
  • Das Verdünnungsmittel umfaßt Glucose, Stärke, Lactose, Mannit, Sorbit, Saccharose, Kaolin, Dextrin, Cyclodextrin, Titanoxid, wasserfreies Calciumphosphat, leichtes wasserfreies Silicat, Talkum, natürliches Magnesiumsilicathydrat, gefälltes Calciumcarbonat, Magnesiummetasilicataluminat, kristalline Cellulose, Calciumcarboxymethylcellulose und Gemische davon.
  • Das Bindemittel umfaßt Stärke, Dextrin, Traganth-Gummi, Gelatine, Polyvinylpyrrolidon, Polyvinylalkohol, Methylcellulose, Ethylcellulose, Hydroxyethylcellulose, Hydroxypropylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Hydroxypropylstärke, kristalline Cellulose, Pektin, Polypektin, Natriumpolypektinat, Polyhydroxyethylmethacrylat, Carboxymethylcellulose, Natriumcarboxymethylceilulose, Akaziengummi, Natriumalginat und Gemische davon.
  • Das Sprengmittel umfaßt Stärke, kristalline Cellulose, Carboxymethylcellulose, Calciumcarboxymethylcellulose, Carboxymethylstärke, Hydroxypropylstärke, pulverisierten Agar, Mannan und Gemische davon.
  • Das Gleitmittel umfaßt Talkum, Stearinsäure, Magnesiumund Calciumstearat, hydriertes Öl, Sesamöl, Paraffin und Gemische davon.
  • Der Filmbildner umfaßt Cellulosederivate, wie z.B. Ethylcellulose (EC), Carboxymethylcellulose (CMEC), Celluloseacetat (CA), Celluloseacetatphthalat (CAP), Hydroxypropylmethylcellulose (HPMC), Methylcellulose (MC) und Hydroxypropylcellulose (HPC), sowie Polyvinylderivate, wie z.B. Polyvinylacetaldiethylaminoacetat, Methacrylsäure/Acrylsäureethylester-Copolymer, Methacrylsäure/Acrylsäuremethylester-Copolymer, Methacrylsäureethylester/Methacrylsäuretrimethylammoniumchloridethyl-Copolymer und Dimethylaminoethylmethacrylat/Acrylsäuremethylester-Copolymer.
  • Wenn der Arzneistoff mit dem Filmbildner überzogen wird, werden zu dem erfindungsgemäßen Arzneistoff ein gebräuchlicher Überzugs-Hilfsstoff hinzugefügt, wie z.B. ein Weichmacher, und außerdem verschiedene andere Zusatzstoffe, die verhindern, daß die Arzneimittel während der Bildung des Überzugs aneinander kleben, wodurch die Eigenschaften des Filmbildners verbessert werden und das Verfahren zur Bildung des überzugs einfacher durchgeführt werden kann.
  • Ferner können die nachstehenden Zusatzstoffe verwendet werden, um den vorliegenden Arzneistoff in Form eines Inhalations- oder Injektionspräparats herzustellen.
  • Calciumchlorid, Kaliumchlorid, Natriumchlorid, Salzsäure, Zitronensäure, Natriumcitrat, Bernsteinsäure, Essigsäure, Kaliumacetat, Natriumacetat, Weinsäure, Kaliumhydroxid, Natriumhydroxid, Wasser zur Injektion, Natriumchloridlösung zur Injektion, Natriumcarbonat, Natriumbicarbonat, Milchsäure, Natriumlactat, Maleinsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Kaliumphosphat, Natriumphosphat, Kaliumhydrogenphosphat, Calciumhydrogenphosphat, Kaliumdihydrogenphosphat, Natriumhydrogenphosphat, Natriumdihydrogenphosphat, Natriumphosphit, Natriumdihydrogenphosphit, Kaliumpyrophosphit, Natriumpyrophosphit, L-Arginin, gereinigtes Eidotterlecithin, gereinigte Gelatine, Gelatine, Lactose, menschliches Serumalbumin, Polyethylenglykol 400, 1500, 4000 und 6000, Polyethylenoxid-hydriertes Rizinusöl 60 und Natriumsalz der Ethylendiamintetraessigsäure.
  • Die vorliegende Erfindung wird in den nachstehenden Bezugsbeispielen und Beispielen weiter erläutert.
    • Bezugsbeispiel 1
  • Argongas, das 1,7% (6,1 mMol) Fluor (F&sub2;) enthielt, wurde 2 Stunden lang in 25 ml (7ºC) einer essigsauren Lösung von 2,3 g (4,8 mMol) Methyl-5-acetamido-2,6-anhydro-4,7,8, 9-tetra-O- acetyl-2,3,5-tridesoxy-D-glycero-D-galacto-2-enonat der nachstehenden Formel IIa eingeführt,
  • in der Ac eine Acetylgruppe bedeutet (dies gilt auch für das Nachstehende).
  • Anschließend wurde das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert, wodurch 2,5 g eines Sirups erhalten wurden. Der Sirup wurde einer Säulenchromatographie mit Kieselgel (250 g G 60; Produkt von Merck Co.) unterworfen, sodann mit einem Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Diethylether (Volumenverhältnis: 3/1) eluiert und in einem Lösungsmittelgemisch aus Dichlormethan und Isopropylether umkristallisiert, wodurch die nachstehenden drei Produkte erhalten wurden: (1) Methyl-5-acetamido-4,7,8,9-tetra-O-acetyl-2,3,5-tridesoxy- 2,3-difluor-D-erythro-β-L-gluco-2-nonulosonat [Molekularstruktur]
  • Ausbeute: 900 mg (36%)
  • [Physikalische Eigenschaften]
  • Schmelzpunkt: 92ºC
  • [α] - 48,12º (C=0,55, Chloroform)
  • Elementaranalyse: C&sub2;&sub0;H&sub2;&sub7;N&sub1;O&sub1;&sub1;F&sub2;
  • Berechnet: C: 46,97; H: 5,32; N: 2,73
  • Gefunden: C: 47,00; H: 5,37; N: 3,00
  • Rf = 0,54 (Essigsäureethylester)
  • ¹H-NMR δ (CDCl&sub3;)
  • 5.00(H-3, J 3.4 = 9.85 Hz)
  • 5.39(H-4, J 4.5 = 10.26 Hz)
  • 4.40(H-5, J 5.6 = 10.66 Hz)
  • 4.27(H-6, J 6.7 = 2.38 Hz)
  • 5.39(H-7, J 7.8 = 8.06 Hz)
  • 5.16(H-8, J 8.9 = 5.68 Hz, J8.9 = 2.71 Hz)
  • 4.01, 4.32(H-9, H-9', J9.9' = 12.55 Hz)
  • 5.49(NH, JNH, 5 = 10.20 Hz)
  • 3.91(COOCH&sub3;)
  • 1.91(NCOCH&sub3;)
  • 2.05, 2.10, 2.11, 2.13(OAc) (2) Methyl-5-acetamido-2,4,7,8,9-penta-O-acetyl-3,5-didesoxy- 3-fluor-D-erythro-β-L-gluco-2-nonulosonat: [Molekularstruktur]
  • Ausbeute: 190 mg (7%)
  • [Physikalische Eigenschaften]
  • Schmelzpunkt: 119ºC
  • [α] - 56,5º (C=0,21, CHCl&sub3;)
  • Elementaranalyse: C&sub2;&sub2;H&sub3;&sub0;NO&sub1;&sub4;F
  • Berechnet: C: 47,91; H: 5,48; N: 2,53
  • Gefunden: C: 48,10; H: 5,35; N: 2,30
  • Rf = 0,26
  • ¹H-NMR δ (CDCl&sub3;)
  • 4.62(H-3, J 3.4 = 9.60 Hz
  • 5.48(H-4, J 4.5 =10.05 Hz)
  • 4.24(H-5, J 5.6 =10.54 Hz)
  • 4.11(H-6, J 6.7 = 2.29 Hz)
  • 5,35(H-7, J 7.8 = 4.66 Hz)
  • 5.02(H-8, J 8.9 = 6.69 Hz, J8.9 = 2.44 Hz)
  • 4.14, 4.51(H-9, H-9', J9.9' = 12.46 Hz)
  • 5.58(NH, JNH,5 = 10.08 Hz)
  • 3.85(COOCH&sub3; )
  • 1.89(NCOCH&sub3;)
  • 2.04, 2.06, 2.10, 2.15, 2.24(OAc) (3) Methyl-5-acetamido-2,4,7,8,9-penta-0-acetyl-3,5-didesoxy-3-fluor-D-erythro-β-L-manno-2-nonulosonat: [Molekularstruktur]
  • Ausbeute: 30 mg (7%)
  • [Physikalische Eigenschaften]
  • Schmelzpunkt 194ºC
  • [α] - 24,5º (C=0,19, Chloroform)
  • Elementaranalyse: C&sub2;&sub2;H&sub3;&sub0;NO&sub1;&sub4;F
  • Berechnet: C: 47,91; H: 5,48; N: 2,53
  • Gefunden: C: 47,85; H: 5,53; N: 2,55
  • Rf = 0,23 (Essigsäureethylester)
  • ¹H-NMR δ (CDCl3)
  • 4.94(H-3, J 3.4 = 2.57 Hz)
  • 5.50(H-4, J 4.5 =10.68 Hz)
  • 4.14(H-5, J 5.6 =10.61 Hz)
  • 4.25(H-6, J 6.7 =1.84 Hz)
  • 5.35(H-7, J 7.8 = 5.13 Hz)
  • 5.13(H-8, J 8.9 = 6.60 Hz, J8.9 2.20 Hz)
  • 4.57(H-9, J 9.9 = 12.46 Hz)
  • 5.43(NH, JNH, 5 = 8.79 Hz)
  • 3.84(COOCH&sub3; )
  • 1.92(NCOCH&sub3; )
  • 2.04, 2.05, 2.11, 2.17, 2.18(OAc)
    • Bezugsbeispiel 2
  • Argongas, das 1,5% (10 mMol) Fluor (F&sub2;) enthielt, wurde in eine Vorrichtung eingeführt, die ein Gemisch aus Kaliumacetat und Essigsäure enthielt, wodurch Acetylhypofluorit (AcOF) gebildet wurde. AcOF wurde in 10 ml einer essigsauren Lösung von 480 mg (1,0 mMol) Methyl-5-acetamido-2,6-anhydro-4,7,8,9- tetra-0-acetyl-2,3,5-tridesoxy-D-glycero-D-galacto-2-enonat (die gleiche Lösung wie diejenige, die in Beispiel 1 verwendet wurde) bei Raumtemperatur eine Stunde lang eingeführt. Anschließend wurde das Lösungsmittel bei 60ºC unter vermindertem Druck abdestilliert, wodurch 520 mg eines Sirups erhalten wurden.
  • Der Sirup wurde einer Säulenchromatographie mit Kieselgel (60 g G 60; Produkt von Merck Co.) unterworfen, anschließend mit einem Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Diethylether (Volumenverhältnis: 3/1) eluiert und in einem Lösungsmittelgemisch aus Dichlormethan und Isopropylether umkristallisiert, wodurch die gleichen Produkte wie im Bezugsbeispiel 1 wie folgt gebildet wurden:
  • (1) Methyl-5-acetamido-4,7,8,9-tetra-O-acetyl-2,3,5-tridesoxy- 2,3-difluor-D-erythro-β-L-gluco-2-nonulosonat,
  • [Ausbeute: 40 mg (7,7%)], und
  • (2) Methyl-5-acetamido-2,4,7,8,9-penta-O-acetyl-3,5-didesoxy- 3-fluor-D-erythro-β-L-gluco-2-nonulosonat
  • [Ausbeute: 190 mg (34%)].
    • Bezugsbeispiel 3
  • 1 ml Methanol, das 2 mMol Natriummethoxid (NaOCH&sub3;) enthielt, wurde zu 3 ml einer Lösung von 55 mg Methyl-5-acetamido-2,4,7,8,9-penta-O-acetyl-3,5-didesoxy-3-fluor-D-erythro- β-L-gluco-2-nonulosonat [(2) hergestellt in Bezugsbeispiel 1 oder 2] in wasserfreiem Methanol hinzugefügt und das Gemisch 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Zur Reaktionsflüssigkeit wurde sodann eine solche Menge Dowex 50 [H&spplus;] hinzugefügt, daß ein leichter Überschuß vorlag, und das Gemisch gerührt. Das Harz wurde abfiltriert und sodann mit 5 ml Methanol gewaschen. Das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt und in einem Lösungsmittelgemisch aus Methanol, Essigsäureethylester und Petrolether umkristallisiert, wodurch die nachstehende Verbindung (6) erhalten wurde [Ausbeute: 24 mg (75%)]. (6) Methyl-5-acetamido-3, 5-didesoxy-3-fluor-D-erythro-ß-L- gluco-2-nonulosonat [Molekularstruktur]
  • [Physikalische Eigenschaften]
  • Schmelzpunkt: 209ºC (umkristallisiert in einem Lösungsmittelgemisch aus Methanol, Essigsäureethylester und Petrolether
  • [α] - 41,14º (C=O,86, H&sub2;O)
  • Elementaranalyse: C&sub1;&sub2;H&sub2;&sub0;NO&sub9;F
  • Berechnet: C: 42,23; H: 5,9; N: 4,1
  • Gefunden: C: 42,37; H: 6,0; N: 4,3
  • ¹H-NMR δ (D&sub2; O)
  • 4.75(H-3, J3.4 = 8.98 Hz)
  • 4.09-4.18(3H, H-4, H-5, H-6)
  • 3.56(H-7, J6.7 = 1.10 Hz)
  • 3.71(H-8, J7.8 = 8.79 Hz
  • J8.9 = 6.05 Hz,
  • J8.9 = 3.43 Hz)
  • 3.63, 3.8(H-9, H-9', J9.9 =11.9 Hz)
    • Bezugsbeispiel 4
  • 20 mg (0,036 mMol) Methyl-5-acetamido-2,4,7,8,9-penta-O- acetyl-3,5-didesoxy-3-fluor-D-erythro-β-L-gluco-2-nonulosonat, hergestellt in Bezugsbeispiel 1 oder 2, wurden zu 1 ml einer Methanollösung, die 20% einer 1 N wässerigen NaOH-Lösung enthielt, hinzugefügt und das resultierende Gemisch eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt.
  • Anschließend wurde 1 ml einer Methanollösung, die 2 mMol Natriuminethoxid (NaOCH&sub3;) enthielt, zu der Reaktionsflüssigkeit 5 hinzugefügt und das Gemisch 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Eine Menge Dowex 50 [H&spplus;] wurde mit leichtem überschuß zu der Reaktionsflüssigkeit hinzugefügt und das Gemisch gerührt. Nach Filtration wurde das Harz mit 10 ml Wasser gewaschen. Das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde in Wasser gelöst. Eine kleine Menge Aktivkohle wurde zu der Lösung hinzugefügt und das Gemisch gerührt. Anschließend wurde die Aktivkohle abfiltriert und das Filtrat im Vakuum getrocknet, wodurch die nachstehende Verbindung (7) erhalten wurde.
  • [Ausbeute: 9 mg (76%)]. (7) 5-Acetamido-3, 5-didesoxy-3-fluor-D-erythro-β-L-gluco-2-nonulosonsäure [Molekularstruktur]
  • [Physikalische Eigenschaften]
  • Schmelzpunkt: 205ºC
  • [α] - 40,02 (C=O,86,H&sub2;O)
  • Elementaranalyse: C&sub1;&sub1;H&sub1;&sub8;NO&sub9;F
  • Berechnet: C: 40,37; H: 5,54; N: 4,27
  • Gefunden: C: 40,07; H: 5,51; N: 4,21
  • ¹H-NMR δ (D&sub2;O)
  • 4.71(H-3, J3.4 = 8.42 Hz)
  • 4.10-4.15(3H, H-4, H-5, H-6)
  • 3.54(H-7, J6.7 = 0 Hz)
  • 3.73(H-8, J 7.8 = 8.79 Hz
  • J 8.9 = 6.05 Hz,
  • J 8.9 = 2.75 Hz)
  • 3.63, 3.83(H-9, H-9', J 9.9' = 11.91 Hz)
  • 2.06(NCOCH&sub3; )
    • Beispiel 1
  • 100 ul einer 0,5 mM Lösung von 4-Methylumbelliferyl-N- acetylneuraminsäure (4-MU-NeuAc) (Produkt von Nakarai Kagaku Co., Ltd.) der nachstehenden Formel,
  • 100 ul eines 200 mM Natriumacetat-Puffers (pH 4,2) und 100 ul N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure (Verbindung 1), 4 bis 400 uM, wurden zu einer Sialidase-Enzymlösung (100 ml) (10 mU/ml) (Produkt von Nakarai Kagaku Co., Ltd.), Produkt von Arthrobacter ureafaciens, in ein Teströhrchen hinzugefügt und die Umsetzung im Wasserbad bei 37ºC 15 Minuten durchgeführt. An schließend wurden 3,6 ml eines 200 mM Glycin/NaOH-Puffers (pH 10,4) zu dem Reaktionsgemisch ins Reagenzglas hinzugefügt, um die Umsetzung zu beenden. Die Konzentration von 4-Methylumbelliferon, das in der Reaktionslösung gebildet wurde, wurde aus seiner Fluoreszenzintensität bei einer Anregungswellenlänge von 360 nm und einer Emissionswellenlänge von 440 nm mit einem Fluoreszenz-Spectrophotometer (Produkt von Hitachi, Ltd.) bestimmt. Die Menge der freien Sialinsäure wurde aus diesem Wert ermittelt.
  • Die Hemmung der Sialidase-Aktivität wurde mit der nachstehenden Formel bestimmt:
  • Hemmung (%)
  • = 1- [Menge der freien Sialinsäure in Gegenwart von Verbindung 1/Menge der freien Sialinsäure in Abwesenheit von Verbindung 1] x 100
  • Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 und Fig. 1 dargestellt.
  • Aus Tabelle 1 ist ersichtlich, daß Verbindung 1 die Aktivität von Sialidase deutlich hemmt.
  • Fig. 1 zeigt die Dixon-Darstellung der Reaktionsgeschwindigkeiten, die unter Verwendung von zwei verschiedenen Substratkonzentrationen in Gegenwart von Verbindung 1 erhalten wurden. Aus Fig. 1 ist ersichtlich, daß Verbindung 1 die Umsetzung des Substrats kompetitiv hemmt. Tabelle 1 Hemmwirkung auf die von Arthrobacter ureafaciens gebildete Sialidase Verbindung 1 (mM) freiges. NeuAc (nMol) Hemmung (%) keine
    • Beispiele 2 und 3
  • Das gleiche Verfahren wie in Beispiel 1 wurde wiederholt, mit der Ausnahme, daß die von Vibrio colerae und Streptococcus sp. produzierten Sialidasen verwendet wurden, anschließend wurde das Ausmaß der Hemmung durch Verbindung 1 bestimmt. Die Ergebnisse sind in den nachstehenden Tabellen 2 und 3 dargestellt. Tabelle 2 Hemmwirkung auf die von Vibrio colerae gebildete Sialidase Verbindung 1 (mM) freiges. NeuAc (nMol) Hemmung (%) keine Tabelle 3 Hemmwirkung auf die von Streptococcus sp. gebildete Sialidase Verbindung 1 (mM) freiges. NeuAc (nMol) Hemmung (%) keine
  • Aus den vorstehenden Tabellen ist ersichtlich, daß Verbindung 1 auf die von verschiedenen Mikroorganismen gebildeten Sialidasen eine Hemmwirkung ausübte.
    • Akute Toxizität
  • Der Test auf akute Toxizität von Verbindung 1 wurde an weiblichen Mäusen mit intravenöser Injektion durchgeführt.
    • Versuchsbedingungen
  • Eingesetzte Tiere: weibliche ICR-Mäuse (6 Wochen alt)
  • Arzneimittel-Konzentration: 13 bis 15 % (Gew./Vol.) in destilliertem Wasser
  • Anzahl der Mäuse für jede Konzentration: 10
  • Beobachtungszeitraum: 14 Tage
    • Ergebnisse
  • Die Ergebnisse sind in Tabelle 4 dargestellt. Hieraus ist ersichtlich, daß die Toxizität von Verbindung 1 ziemlich niedrig ist. Tabelle 4 Verabreichungsweg Intravenöse Injekt. Dosis (mg) Anzahl toter Mäuse

Claims (3)

1. Antivirales Arzneimittel, das N-Acetyl-3-fluoroneuramin säure der folgenden Formel umfaßt,
oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon, wobei das Arzneimittel in Form eines Präparats zur Injektion, Inhalation oder oralen Verabreichung vorliegt.
2. Antivirales Arzneimittel nach Anspruch 1, wobei die N- Acetyl-3-fluoroneuraminsäure in einer Menge von 1 ug bis 10 mg enthalten ist.
3. N-Acetyl-3-fluoroneuraminsäure der Formel I zur Verwendung als antivirales Arzneimittel in Form eines Präparats zur Injektion, Inhalation oder oralen Verabreichung.
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