DE60226334T2

DE60226334T2 - Neue antiphlogistische androstan derivate - 17-carboxy-lactone substituiert mit einer aryl-carboxylic estergruppe in der 17.alpha.-stelle

Info

Publication number: DE60226334T2
Application number: DE60226334T
Authority: DE
Inventors: Keith Stevenage BIGGADIKE; Paul Stevenage JONES; Jeremy John Stevenage PAYNE
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Current assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 2001-10-20
Filing date: 2002-10-17
Publication date: 2009-06-04
Anticipated expiration: 2022-10-18
Also published as: ATE393771T1; DE60226334D1; AU2002350561A1; JP2005509642A; JP4495456B2; ES2304457T3; EP1444248B1; US20050054622A1; GB0125259D0; US7405206B2; WO2003035668A3; EP1444248A2; WO2003035668A2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue entzündungshemmende und antiallergische Verbindungen der Androstan-Reihe und Verfahren zu ihrer Herstellung. Die vorliegende Erfindung betrifft darüber hinaus pharmazeutische Formulierungen, die die Verbindungen enthalten, und deren therapeutische Verwendung, insbesondere für die Behandlung von entzündlichen und allergischen Zuständen.
Glucocorticosteroide, die entzündungshemmende Eigenschaften besitzen, sind bekannt und werden weitverbreitet in der Behandlung von Entzündungsstörungen oder Krankheiten wie Asthma und Rhinitis angewendet. Die Glucocorticosteroide können jedoch im allgemeinen unter dem Nachteil des Verursachens unerwünschter systemischer Effekte nach Verabreichung büßen. Die befürchteten Nebenwirkungen schließen die Unterdrückung der Hypothalamus-hypophysären-adrenalen (HPA) Achse ein, Wirkungen auf Knochenmark in Kindern und Knochendichte in älteren Menschen, okulare Komplikationen (Kataraktbildung und Glaukom) und Hautatropie ein. Bestimmte Glucocorticoid-Verbindungen besitzen auch komplexe Stoffwechselwege, wobei die Erzeugung aktiver Metabolite die Pharmakodynamik und Pharmakokinetik solcher Verbindungen schwer verständlich machen kann. Während die modernen Steroide viel sicherer sind als die ursprünglich eingeführten, bleibt es ein Forschungsziel, neue Moleküle herzustellen, die herausragende entzündungshemmende Eigenschaften bei vorhersagbaren pharmakokinetischen und pharmakodynamischen Eigenschaften, bei einem attraktiven Nebenwirkungsprofil und bei einem zweckmäßigen Behandlungsschema aufweisen.
WO 94/13690 , WO 94/14834 , WO 92/13873 , WO 92/13872 , WO 97/24365 , WO 97/24367 und WO 97/24368 offenbaren alle Glucocorticosteroide, die vermeintlich eine entzündungshemmende Aktivität verknüpft mit einer reduzierten systemischen Wirksamkeit besitzen. Bestimmte neue Androstan-Derivate sind in WO 02/12265 , WO 02/12266 (Glaxo Group) und WO 02/00679 (Novartis) offenbart, wobei diese drei Dokumente nach dem ersten Prioritätstag dieser Patentanmeldung veröffentlicht wurden.
Die vorliegende Erfindung stellt eine neue Gruppe an Verbindungen bereit, die eine nützliche und langanhaltende entzündungshemmende Aktivität besitzen, mit wenig oder keiner systemischen Aktivität. Daher stellen die Verbindungen der vorliegenden Erfindung eine sichere Alternative zu den bekannten Glucocorticoiden dar, die ein schlechtes Nebenwirkungsprofil aufweisen.
Entsprechend wird gemäß einem Aspekt der Erfindung eine Verbindung der Formel (I)
worin
R₁ O, S oder NH darstellt;
R₂ -C(=O)-Aryl oder -C(=O)-Heteroaryl darstellt;
R₃ Wasserstoff, Methyl (das entweder in α- oder β-Konfiguration vorliegen kann) oder Methylen darstellt;
R₄ und R₅ gleich oder verschieden sind und jedes Wasserstoff oder Halogen darstellt; und
----- eine Einfach- oder Doppelbindung darstellt;
und Salze und Solvate davon bereitgestellt.
Verweise auf den Begriff "Aryl" schließen Verweise auf Phenyl ein, das gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert sein kann.
Verweise auf den Begriff "Heteroaryl" schließen Verweise auf 5- oder 6-gliedrige heterocyclische aromatische Ringe ein, die 1 bis 3 Heteroatome enthalten, ausgewählt aus N, O und S (z. B. Thiophenyl (z. B. Thiophen-2-yl oder Thiophen-3-yl), Furanyl (z. B. Furan-2-yl oder Furan-3-yl), Pyrrolyl (z. B. 1H-Pyrrol-2-yl), Thiadiazolyl (z. B. 1,2,3-Thiadiazol-5-yl oder 1,2,3-Thiadiazol-4-yl)). Weitere Beispiele schließen Thiazolyl (z. B. 1,3-Thiazolyl-5-yl oder 1,3-Thiazolyl-4-yl), Isoxazolyl (z. B. Isoxazol-5-yl, Isoxazol-4-yl oder Isoxazol-3-yl), Isothiazolyl (z. B. Isothiazol-3-yl oder Isothiazol-5-yl) und Pyrazolyl (z. B. 1H-Pyrazol-5-yl) ein.
Alle der zuvor genannten Heterocyclyle können gegebenenfalls mit einem oder mehreren (z. B. 1 oder 2) Substituenten substituiert sein.
Beispiele für Substituenten für Aryl und Heteroaryl schließen C_1-6-Alkyl (z. B. Methyl), Halogen (z. B. Chlor oder Brom) oder C_1-6-Alkoxy (z. B. Methoxy oder Ethoxy) ein.
Beispiele für substituiertes Furanyl schließen 3-Me-Furan-2-yl, 5-Br-Furan-2-yl, 2-Me-Furan-3-yl und 2,5-diMe-Furan-3-yl ein. Beispiele für substituiertes Thiophenyl schließen 5-Me-Thiophen-2-yl, 5-Cl-Thiophen-2-yl, 3-Cl-Thiophen-2-yl, 3-Br-Thiophen-2-yl, 4-Methoxy-thiophen-3-yl, 2,5-diCl-Thiophen-3-yl und 4-Methoxy-5-Cl-thiophen-3-yl ein. Beispiele für substituiertes Pyrrolyl schließen 1-Me-1H-pyrrol-2-yl ein. Beispiele für substituiertes Thiadiazolyl schließen 4-Me-1,2,3-thiadiazolyl-5-yl ein. Beispiele für substituiertes Isoxazolyl schließen 3-Me-Isoxazol-5-yl, 5-Me-Isoxazol-3-yl und 3,5-diMe-Isoxazol-4-yl ein. Beispiele für substituiertes Pyrazolyl schließen 1,3-diMe-1H-Pyrazol-5-yl ein.
Beispiele für Solvate schließen Hydrate ein.
Beispiele für Salze der Verbindungen der Formel (I) schließen physiologisch annehmbare Salze ein, die mit einer basischen Verbindung (wie, wenn Heteroaryl basisch ist) gebildet werden können, z. B. Acetat, Benzoat, Citrat, Succinat, Lactat, Tartrat, Fumarat und Maleat.
Nachstehende Verweise auf eine erfindungsgemäße Verbindung schließen sowohl Verbindungen der Formel (I) als auch Salze und Solvate davon ein, insbesondere pharmazeutisch annehmbare Salze und Solvate.
Insbesondere enthalten die Verbindungen der Formel (I) ein asymmetrisches Zentrum an der Stelle der Verknüpfung der Lacton-Einheit. Daher schließt die Erfindung in ihrem Umfang sowohl Diastereoisomere an diesem asymmetrischen Zentrum als auch Gemische davon ein.
Wir bevorzugen, daß R₁ O oder S darstellt, im speziellen S.
R₁ kann an die alpha-, beta- oder gamma-Kohlenstoffatome der Lacton-Gruppe gebunden sein.
Wir bevorzugen, daß R₁ an das alpha-Atom der Lacton-Gruppe gebunden ist.
Wir bevorzugen, daß R₂ -C(=O)-Heteroaryl darstellt. Vorzugsweise ist das Heteroaryl ein 5-gliedriger heterocyclischer aromatischer Ring, der 1 bis 3 Heteroatome enthält, die ausgewählt sind aus O, N und S, die gegebenenfalls substituiert sein können. In einer Hinsicht stellt Heteroaryl vorzugsweise Furanyl, Pyrrolyl oder Thiophenyl, besonders bevorzugt Furanyl oder Thiophenyl, z. B. 2-Furanyl, 3-Furanyl, 2-Thiophenyl oder 3-Thiophenyl, speziell Furanyl, insbesondere 2-Furanyl dar.
Von besonderem Interesse sind Verbindungen, in denen das Heteroaryl ein 5-gliedriger heterocyclischer aromatischer Ring ist, der 2 Heteroatome enthält, die ausgewählt sind aus O, N und S. Daher ist eine weitere Gruppe von bevorzugten Verbindungen solch eine, worin R₂ ein gegebenenfalls substituiertes Thiazolyl darstellt. Eine weitere Gruppe an bevorzugten Verbindungen ist solch eine, worin R₂ ein gegebenenfalls substituiertes Isothiazolyl darstellt. Eine weitere Gruppe von bevorzugten Verbindungen ist solch eine, worin R₂ ein gegebenenfalls substituiertes Pyrazolyl darstellt. Eine weitere Gruppe an bevorzugten Verbindungen ist solch eine, worin R₂ ein gegebenenfalls substituiertes Isoxazolyl darstellt.
Von besonderem Interesse sind Verbindungen, in denen das Heteroaryl ein 5-gliedriger heterocyclischer aromatischer Ring ist, der 3 Heteroatome enthält, die ausgewählt sind aus O, N und S. Daher ist eine weitere Gruppe an bevorzugten Verbindungen solche eine, worin R₂ ein gegebenenfalls substituiertes Thiadiazolyl darstellt.
Verbindungen, worin R₂ -C(=O)-Aryl darstellt (bevorzugt stellt Aryl Phenyl dar), sind ebenfalls von besonderem Interesse.
Wir bevorzugen, daß R₃ Methyl darstellt, im speziellen Methyl in der α-Konfiguration. Verbindungen, worin R₃ Methyl in der β-Konfiguration darstellt, sind ebenfalls von besonderem Interesse.
Verbindungen der Formel (I), worin R₄ und R₅, die gleich oder verschieden sein können, jeweils Wasserstoff, Fluor oder Chlor darstellen, insbesondere Wasserstoff oder Fluor, werden bevorzugt. Speziell bevorzugt werden Verbindungen, worin beide R₄ und R₅ Fluor sind.
Vorzugsweise stellt ----- eine Doppelbindung dar. Verbindungen, worin ----- eine Einfachbindung darstellt, sind ebenfalls von besonderem Interesse.
Eine besonders bevorzugte Gruppe an Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), worin R₁ S ist; R₂ -C(=O)-2-Furanyl ist; R₃ Methyl ist; R₄ und R₅, die gleich oder verschieden sein können, jeweils Wasserstoff oder Fluor darstellen, speziell Fluor, und ----- eine Einfach- oder Doppelbindung darstellt.
Es ist selbstverständlich, daß die vorliegende Erfindung alle Kombinationen von besonderen und bevorzugten Gruppen, auf die vorstehend Bezug genommen wurde, umfaßt.
Bevorzugte Verbindungen der Formel (I) schließen ein:
6α,9α-Difluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester oder ein Solvat davon, insbesondere 6α,9α-Difluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester oder ein Solvat davon.
Es wird anerkannt werden, daß jede der vorstehenden Verbindungen der Formel (I) die individuellen R- und S-Diastereoisomere am asymmetrischen Zentrum am Verknüpfungspunkt der Lacton-Einheit sowie Gemische daraus einschließt. Daher sind die individuellen R- und S-Diastereoisomere, die so isoliert sind, daß sie im wesentlichen frei von anderen Diastereoisomeren sind, d. h. rein, und Gemische davon im Umfang der vorliegenden Erfindung eingeschlossen. Ein individuelles R- oder S-Diastereoisomer, das so isoliert ist, daß es im wesentlichen frei des anderen Diastereoisomers ist, d. h. rein, wird vorzugsweise so isoliert, daß weniger als 10%, vorzugsweise weniger als 1%, im speziellen weniger als 0,1% des anderen Diastereoisomers vorliegt.
Die Verbindungen der Formel (I) haben potentiell nützliche entzündungshemmende oder antiallergische Wirkungen, insbesondere nach einer topischen Verabreichung, wie gezeigt durch zum Beispiel ihre Fähigkeit, an den Glucocorticoid-Rezeptor zu binden und eine Reaktion über diesen Rezeptor auszulösen. Daher sind die Verbindungen der Formel (I) nützlich in der Behandlung von entzündlichen und/oder allergischen Zuständen. Ferner besitzen die Verbindungen der Formel (I) den Vorteil, daß sie wenig oder keine systemische Aktivität aufweisen. Daher können die Verbindungen der Erfindung eine sichere Alternative zu den bekannten entzündungshemmenden Glucocorticoiden sein, die schlechte Nebenwirkungsprofile besitzen.
Beispiele für Krankheitszustände, in denen die Verbindungen der Erfindung Nützlichkeit haben, schließen Hauterkrankungen wie Ekzem, Psoriasis, allergische Dermatitis, Neurodermatitis, Pruritis und hypersensitive Reaktionen; entzündliche Zustände der Nase, des Rachens oder der Lungen, wie z. B. Asthma (einschließlich Allergen-induzierte asthmatische Reaktionen), Rhinitis (einschließlich Heuschnupfen), nasale Polypen, chronisch-obstruktive Lungenerkrankung, interstitielle Lungenerkrankung und Fibrose, entzündliche Darmerkrankungen wie ulzeröse Kolitis und Morbus Crohn; und Autoimmunerkrankungen wie rheumatoide Arthritis ein.
Die Verbindungen der Erfindung können ebenfalls Verwendung in der Behandlung von Konjunktivs und Konjunktivitis haben.
Es wird von den Fachleuten anerkannt werden, daß hier ein Verweis auf Behandlung sich auf die Prophylaxe sowie die Behandlung von etablierten Zuständen erstreckt.
Wie vorstehend angemerkt, sind die Verbindungen der Formel (I) nützlich in der Human- oder Veterinärmedizin, insbesondere als entzündungshemmende und antiallergische Mittel.
Daher wird in einem weiteren Aspekt der Erfindung eine Verbindung der Formel (I) oder ein physiologisch annehmbares Salz oder Solvat davon zur Verwendung in der Human- oder Veterinärmedizin, insbesondere bei Behandlung von Patienten mit entzündlichen und/oder allergischen Zuständen bereitgestellt.
Gemäß einem anderen Aspekt der Erfindung wird die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines physiologisch annehmbaren Salzes oder Solvats davon in der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung eines Patienten mit entzündlichen und/oder allergischen Zuständen bereitgestellt.
Die Verbindungen der Formel (I) können für die Behandlung eines Menschen oder eines Tiers mit einem entzündlichen und/oder allergischen Zustand verwendet werden, wobei das Verfahren das Verabreichen einer effektiven Menge einer Verbindung der Formel (I) oder eines physiologisch annehmbaren Salzes oder Solvats davon an den Menschen oder das Tier umfaßt. Es wird ebenfalls die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines physiologisch annehmbaren Salzes oder Solvats davon für die Behandlung eines Patienten mit entzündlichen und/oder allergischen Zuständen bereitgestellt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können für die Verabreichung in jeder zweckmäßigen Art und Weise formuliert sein, und die Erfindung schließt daher ebenfalls in ihrem Umfang pharmazeutische Zusammensetzungen ein, die eine Verbindung der Formel (I) oder ein physiologisch annehmbares Salz oder Solvat davon zusammen, falls erwünscht, im Gemisch mit einem oder mehreren physiologisch annehmbaren Verdünnungsstoffen oder Träger umfaßt.
Des weiteren wird hier ein Verfahren zur Herstellung solcher pharmazeutischer Zusammensetzungen bereitgestellt, das das Vermischen der Bestandteile umfaßt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können zum Beispiel für die orale, bukkale, sublinguale, parenterale, lokale oder rektale Verabreichung, im speziellen für die lokale Verabreichung formuliert sein.
Die lokale Verabreichung, wie hier verwendet, schließt die Verabreichung durch Insufflation oder Inhalation ein. Beispiele von verschiedenen Arten von Zubereitungen für eine lokale Verabreichung schließen Salben, Lotionen, Cremes, Gele, Schäume, Zubereitungen für die Übertragung durch transdermale Pflaster, Pulver, Sprays, Aerosole, Kapseln oder Kartuschen zur Verwendung in einem Inhalator oder Insufflator oder Tropfen (z. B. Augen- oder Nasentropfen), Lösungen/Suspensionen zum Vernebeln, Suppositorien, Pessare, Retentionsklistiere und kaubare oder lutschbare Tabletten oder Kügelchen (z. B. für die Behandlung von Aphthe) oder Liposome oder Mikroeinkapselungszubereitungen ein.
Vorteilhafterweise schließen Zusammensetzungen für die topische Verabreichung an die Lunge Trockenpulverzusammensetzungen und Sprayzusammensetzungen ein.
Trockenpulverzusammensetzungen für die topische Übertragung an die Lunge können beispielsweise in Kapseln oder Kartuschen zur Verwendung in einem Inhalator oder Insufflator dargeboten werden, zum Beispiel aus Gelatine. Die Formulierungen enthalten im allgemeinen eine Pulvermischung zur Inhalation der Verbindung der Erfindung und eine geeignete Pulverbasis wie Lactose oder Stärke. Jede Kapsel oder Kartusche kann im allgemeinen zwischen 20 μg bis 10 mg der Verbindung der Formel (I) enthalten. Alternativ dazu kann die Verbindung der Erfindung ohne Exzipienten dargeboten werden. Die Verpackung der Formulierung kann für eine Einheitsdosis- oder Mehrfachdosis-Übertragung geeignet sein. Im Fall der Mehrfachdosis-Übertragung kann die Formulierung vorher abgemessen sein (z. B. in Diskus, siehe GB 2242134 oder Dishaler, siehe GB 2178965 , 2129691 und 2169265 ) oder zur Verwendung abgemessen werden (z. B. wie im Turbohaler, siehe EP 69715 ). Ein Beispiel einer Einheitsdosis-Vorrichtung ist Rotahaler (siehe GB 2064336 ). Die Diskus-Inhalationsvorrichtung umfaßt einen verlängerten Streifen, der von einer Grundschicht mit einer Vielzahl an Aussparungen gebildet wird, die entlang seiner Länge aufgeteilt sind, und eine Deckschicht, die hermetisch aber abziehbar hierauf versiegelt ist, um eine Vielzahl an Behältnissen zu definieren, wobei jedes Behältnis hierin eine inhalierbare Formulierung enthält, die eine Verbindung der Formel (I) gegebenenfalls in Kombination mit Lactose enthält. Vorzugsweise ist der Streifen ausreichend flexibel, um in einer Rolle aufgewickelt zu werden. Die Deckschicht und die Grundschicht haben vorzugsweise Hauptabschlußteile, die nicht miteinander versiegelt sind, und mindestens eines dieser Hauptabschlußteile ist so konstruiert, daß es an einer Aufwindvorrichtung befestigt werden kann. Ebenfalls bevorzugt erstreckt sich das hermetische Siegel zwischen Grund- und Deckschicht über ihre gesamte Breite aus. Die Deckschicht kann vorzugsweise von der Grundschicht in Längsrichtung von einem ersten Ende dieser Grundschicht abgezogen werden.
Sprayzusammensetzungen können zum Beispiel als wäßrige Lösung oder Suspension oder als Aerosole formuliert sein, die aus unter Druck stehenden Verpackungen übertragen werden, wie einem Dosierinhalator mit der Verwendung eines geeigneten verflüssigten Treibmittels. Aerosol-Zusammensetzungen, die für die Inhalation geeignet sind, können entweder eine Suspension oder Lösung sein und im allgemeinen die Verbindung der Formel (I) und ein geeignetes Treibmittel, beispielsweise ein Fluorkohlenstoff oder Wasserstoff-haltiges Chlorfluorkohlenstoff oder ein Gemisch daraus enthalten, insbesondere Fluorwasserstoffalkane, im speziellen 1,1,1,2-Tetrafluorethan, 1,1,1,2,3,3,3-Heptafluor-n-propan oder ein Gemisch daraus. Die Aerosol-Zusammensetzung kann gegebenenfalls zusätzliche Formulierungsexzipienten enthalten, die auf dem Gebiet wohlbekannt sind, wie zum Beispiel Tenside, z. B. Oleinsäure oder Lecithin, und Co-Lösungsmittel, z. B. Ethanol. Eine beispielhafte Formulierung ist frei von Exzipienten und besteht im wesentlichen aus (z. B. sie besteht aus) einer Verbindung der Formel (I) (gegebenenfalls zusammen mit einem weiteren wirksamen Bestandteil) und einem Treibmittel, ausgewählt aus 1,1,1,2-Tetrafluorethan, 1,1,1,2,3,3,3-Heptafluor-n-propan und Mischungen daraus. Eine andere beispielhafte Formulierung umfaßt die partikuläre Verbindung der Formel (I), ein Treibmittel, ausgewählt aus 1,1,1,2-Tetrafluorethan, 1,1,1,2,3,3,3-Heptafluor-n-propan und Mischungen daraus, und ein Suspendiermittel, das im Treibmittel löslich ist, zum Beispiel eine Oligomilchsäure oder ein Derivat davon, wie in WO 94/21229 beschrieben. Das bevorzugte Treibmittel ist 1,1,1,2-Tetrafluorethan. Unter Druck gesetzte Formulierungen sind im allgemeinen in einem Behälter enthalten (z. B. in einem Aluminiumbehälter), der mit einem Ventil verschlossen ist (z. B. mit einem Meßventil) und in einer Betätigungsvorrichtung eingesetzt ist, die mit einem Mundstück ausgerüstet ist.
Medikamente zur Verabreichung durch Inhalation haben wünschenswerterweise eine kontrolliert Partikelgröße. Die optimale Partikelgröße zur Inhalation in das Bronchialsystem beträgt für gewöhnlich 1 bis 10 μm, bevorzugt 2 bis 5 μm. Partikel mit einer Größe über 20 μm sind im allgemeinen zu groß, wenn sie inhaliert werden, um die kleinen Luftwege zu erreichen. Um diese Partikelgrößen zu erreichen, können die Partikel der Verbindung der Formel (I), wenn sie hergestellt werden, auf herkömmlichen Wege größenreduziert werden, z. B. durch Mikronisierung. Die gewünschte Fraktion kann durch Luft-Klassifizierung oder Sieben abgetrennt werden. Vorzugsweise sind die Partikel kristallin, hergestellt zum Beispiel durch ein Verfahren, das das Mischen in einer kontinuierlichen Fließzelle in einer Fließlösung der Verbindung der Formel (I) als Medikament in einem flüssigen Lösungsmittel mit einem fließenden flüssigen Anti-Lösungsmittel für dieses Medikament (z. B. wie in der internationalen Patentanmeldung PCT/GB99/04368 beschrieben) in Gegenwart von Ultraschall umfaßt oder ansonsten durch ein Verfahren, das das Zulassen eines Lösungsstroms der Substanz in einem flüssigen Lösungsmittel und eines Stroms des flüssigen Anti-Lösungsmittels in dieser Substanz tangential in eine zylindrische Mischkammer mit einer axialen Auslaßöffnung umfaßt, so daß diese Ströme dadurch durch Bildung von Wirbeln gut vermischt werden, und hierdurch die Präzipitierung von Kristallpartikel der Substanz verursacht wird (z. B. wie in der internationalen Patentanmeldung PCT/GB00/04327 beschrieben). Wenn ein Exzipient wie Lactose eingesetzt wird, wird die Partikelgröße des Exzipienten im allgemeinen viel größer sein als die des inhalierten Medikaments bei der vorliegenden Erfindung. Wenn der Exzipient Lactose ist, wird es typischerweise als gemahlene Lactose vorliegen, wobei nicht mehr als 85% der Lactosepartikel einen MMD von 60–90 μm haben, und nicht weniger als 15% einen MMD von weniger als 15 μm haben.
Formulierungen für die topische Verabreichung an die Nase schließen unter Druck gesetzte Aerosol-Formulierungen und wäßrigen Formulierungen ein, die durch eine Druckpumpe an die Nase verabreicht werden.
Wäßrige Formulierungen zur Verabreichung an die Lunge oder Nase können mit herkömmlichen Exzipienten wie Puffermitteln, Tonizitäts-modifizierenden Mitteln und ähnlichen bereitgestellt werden. Wäßrige Formulierungen können ebenfalls durch Vernebelung an die Nase verabreicht werden.
Weitere mögliche Zubereitungen schließen die folgenden ein:
Salben, Cremes und Gele können zum Beispiel mit einer wäßrigen oder öligen Basis mit dem Zusatz eines geeigneten Verdickungs- und/oder Geliermittels und/oder Lösungsmittels formuliert werden. Solche Basen können daher zum Beispiel Wasser und/oder ein Öl wie flüssiges Paraffin oder ein Pflanzenöl wie Erdnußöl oder Rizinusöl oder ein Lösungsmittel wie Polyethylenglykol einschließen. Verdickungsmittel und Geliermittel, die gemäß der Natur der Basis verwendet werden können, schließen Weichparaffin, Aluminiumstearat, Cetostearylalkohol, Polyethylenglykole, Wollfette, Bienenwachs, Carboxypolymethylen und Cellulose-Derivate und/oder Glycerylmonostearat und/oder nicht-ionische Emulgatoren ein.
Lotionen können mit einer wäßrigen oder öligen Basis formuliert werden, und werden im allgemeinen ebenfalls einen oder mehrere Emulgatoren, Stabilisatoren, Dispergiermittel, Suspendiermittel oder Verdickungsmittel enthalten.
Pulver für die äußerliche Anwendung können mit Hilfe jeder geeigneten Pulverbasis formuliert werden, wie zum Beispiel Talkum, Lactose oder Stärke. Tropfen können mit einer wäßrigen oder nicht-wäßrigen Basis formuliert werden, die ebenfalls ein oder mehrere Dispergiermittel, Solubilisierungsmittel, Suspendiermittel oder Konservierungsmittel umfaßt.
Falls angebracht, können die Formulierungen der Erfindung durch die Zugabe von geeigneten Puffermitteln gepuffert werden.
Das Verhältnis der aktiven Verbindung der Formel (I) in den erfindungsgemäßen lokalen Zusammensetzungen hängt vom genauen Typ der herzustellenden Formulierung ab, wird aber im allgemeinen innerhalb des Bereichs von 0,001 bis 10 Gew.% sein. Im allgemeinen wird das verwendete Verhältnis jedoch für die meisten Zubereitungstypen vorteilhaft im Bereich von 0,005 bis 1% und bevorzugt von 0,01 bis 0,5% sein. Jedoch wird das in Pulvern für die Inhalation oder Insufflation verwendete Verhältnis normalerweise im Bereich von 0,1 bis 5% sein.
Aerosol-Formulierungen sind bevorzugt so ausgestattet, daß jede Dosiseinheit oder jeder "Sprühstoß" des Aerosols 1 μg bis 2000 μg, z. B. 20 μg bis 2000 μg, bevorzugt ca. 20 μg bis 500 μg einer Verbindung der Formel (I) enthält. Die Verabreichung kann einmal oder mehrmals am Tag erfolgen, beispielsweise 2-, 3-, 4- oder 8-mal, um beispielsweise jedes Mal 1, 2 oder 3 Dosen zu ergeben. Bevorzugt wird die Verbindung der Formel (I) einmal oder zweimal täglich übertragen, besonders bevorzugt einmal am Tag. Die gesamte Tagesdosis mit einem Aerosol wird typischerweise innerhalb des Bereichs von 10 μg bis 10 mg, zum Beispiel 100 μg bis 10 mg, bevorzugt 200 μg bis 2000 μg sein.
Topische Zubereitungen können durch eine oder mehrere Anwendungen pro Tag auf die betroffene Stelle verabreicht werden; über Hautstellen können okklusive Verbände vorteilhaft verwendet werden. Kontinuierliche oder verzögerte Übertragung kann durch ein adhäsives Reservoir-System erreicht werden.
Für die internale Verabreichung können die erfindungsgemäßen Verbindungen beispielsweise in herkömmlicher Weise für die orale, parenterale oder rektale Verabreichung formuliert werden. Formulierungen zur oralen Verabreichung schließen Sirupe, Elixiere, Pulver, Granalien, Tabletten und Kapseln ein, die typischerweise herkömmliche Exzipienten wie Bindemittel, Füllstoffe, Gleitmittel, Sprengmittel, Benetzungsmittel, Suspendiermittel, Emulgatoren, Konservierungsmittel, Puffersalze, Aromastoffe, Färbe- und/oder Süßungsmittel, wo angebracht, enthalten. Dosierungseinheitsformen sind jedoch wie im folgenden beschrieben bevorzugt.
Bevorzugte Formen einer Zubereitung für die internale Verabreichung sind Dosierungseinheitsformen, d. h. Tabletten und Kapseln. Solche Dosierungseinheitsformen enthalten 0,1 mg bis 20 mg, bevorzugt 2,5 bis 10 mg der Verbindungen der Erfindung.
Die erfindungsgemäße Verbindungen können im allgemeinen durch internale Verabreichung in Fällen, in denen systemische adreno-kortikale Therapie indiziert ist, gegeben werden.
Im allgemeinen können die Zubereitungen für die internale Verabreichung 0,05 bis 10% des aktiven Bestandteils enthalten, abhängig vom involvierten Typ der Zubereitung. Die tägliche Dosis kann von 0,1 mg bis 60 mg variieren, zum Beispiel 5 bis 30 mg, abhängig vom zu behandelnden Zustand und der Dauer der gewünschten Behandlung.
Formulierungen für langsame Freisetzung oder enterisch beschichtete Formulierungen können vorteilhaft sein, insbesondere für die Behandlung von entzündlichen Darmerkrankungen.
Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen können ebenfalls in Kombination mit anderen Therapeutika verwendet werden, zum Beispiel mit einem β₂-Adrenorezeptoragonist, einem Antihistaminikum oder einem Antiallergikum. Die Erfindung stellt daher in einem weiteren Aspekt eine Kombination bereit, die die Verbindung der Formel (I) oder ein physiologisch annehmbares Solvat davon zusammen mit einem weiteren Therapeutikum umfaßt, wie zum Beispiel einem β₂-Adrenorezeptor-Agonist, einem Antihistaminikum oder einem Antiallergikum.
Zusammensetzungen mit langwirkenden β₂-Adrenorezeptor-Agonisten werden bevorzugt, im speziellen solche, die in der Lage sind, eine therapeutische Wirkung über 24 Stunden bereitzustellen. Es ist daher zum Beispiel eine pharmazeutische Zusammensetzung bereitgestellt, die für die einmal tägliche Verabreichung geeignet ist und eine Verbindung der Formel (I) oder ein Salz oder Solvat davon in Kombination mit einem langwirkenden β₂-Adrenorezeptor-Agonisten umfaßt.
Beispiele für β₂-Adrenorezeptor-Agonisten schließen Salmeterol (z. B. als Racemat oder als einfaches Enantiomer wie das R-Enantiomer), Salbutamol, Formoterol, Salmefamol, Fenoterol oder Terbutalin und Salze davon ein, wie zum Beispiel das Xinafoatsalz von Salmeterol, das Sulfatsalz oder die freie Base von Salbutamol oder das Fumaratsalz von Formoterol. Langwirkende β₂-Adrenorezeptor-Agonisten wie Salmeterol oder Fomoterol werden bevorzugt.
Bevorzugte langwirkende β₂-Adrenorezeptor-Agonisten schließen solche in WO 266422A beschriebenen ein.
Speziell bevorzugte langwirkende β₂-Adrenorezeptor-Agonisten sind Verbindungen der Formel (X)
oder ein Salz oder Solvat davon, worin:
m eine ganze Zahl von 2 bis 8 ist;
n eine ganze Zahl von 3 bis 11 ist, vorzugsweise von 3 bis 7;
mit der Maßgabe, daß m + n 5 bis 19 ist, vorzugsweise 5 bis 12;
R¹¹ -XSO₂NR¹⁶R¹⁷ ist,
worin X -(CH₂)_p- oder C_2-6-Alkylen ist;
R¹⁶ und R¹⁷ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C_3-7-Cycloalkyl, C(O)NR¹⁸R¹⁹, Phenyl und Phenyl (C_1-4-Alkyl)-,
oder R¹⁶ und R¹⁷ zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen stickstoffhaltigen Ring mit 5, 6 oder 7 Gliedern bilden und R¹⁶ und R¹⁷ jeweils gegebenenfalls mit einer oder zwei Gruppen substituiert sind, die ausgewählt sind aus Halogen, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Halogenalkyl, C_1-6-Alkoxy, Hydroxy-substituiertem C_1-6-Alkoxy, -CO₂R¹⁸, -SO₂NR¹⁸R¹⁹, -CONR¹⁸R¹⁹, -NR¹⁸C(O)R¹⁹ oder einem heterocyclischen Ring mit 5, 6 oder 7 Gliedern;
R¹⁸ und R¹⁸ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, Phenyl und Phenyl (C_1-4-Alkyl)-; und
p eine ganze Zahl von 0 bis 6 ist, vorzugsweise von 0 bis 4;
R¹² und R¹³ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy, Halogen, Phenyl und C_1-6-Halogenalkyl; und
R¹⁴ und R¹⁵ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff und C_1-4-Alkyl mit der Maßgabe, daß die Gesamtzahl der Kohlenstoffatome in R¹⁴ und R¹⁵ nicht mehr als 4 ist.
In den Verbindungen der Formel (I) ist die Gruppe R¹¹ an die meta-Position relativ zur -O-(CH₂)_n-Verknüpfung gebunden.
R¹¹ stellt vorzugsweise -SO₂NR¹⁶R¹⁷ dar, worin R¹⁶ und R¹⁷ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl, besonders bevorzugt ist R¹¹ -SO₂NH₂.
R¹⁴ und R¹⁵ sind vorzugsweise unabhängig ausgewählt aus Wasserstoff und Methyl, besonders bevorzugt sind R¹⁴ und R¹⁵ beide Wasserstoff.
m ist geeigneterweise 4, 5 oder 6, und n ist geeigneterweise 3, 4, 5 oder 6. Vorzugsweise ist m 5 oder 6, und n ist 3 oder 4, so daß m + n 8, 9 oder 10, vorzugsweise 9 ist.
Im speziellen bevorzugte Verbindungen der Formel (X) sind Verbindungen der Formel (Xa).
oder ein Salz oder Solvat davon, worin
R¹¹ wie vorstehend für die Formel (X) definiert ist.
Weitere im speziellen bevorzugte Verbindungen der Formel (X) sind Verbindungen der Formel (Xb):
oder ein Salz oder Solvat davon, worin
R¹¹ wie vorstehend für die Formel (X) definiert ist.
In den Verbindungen der Formeln (Xa) und (Xb) ist die R¹¹-Gruppe vorzugsweise an die meta-Position relativ zur -O-(CH₂)₄- oder -O-(CH₂)₃-Verknüpfung gebunden.
In den Verbindungen der Formeln (Xa) und (Xb) ist R¹¹ vorzugsweise -SO₂NR¹⁶R¹⁷, worin R¹⁶ und R¹⁷ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl, besonders bevorzugt ist R¹¹ -SO₂NH₂.
In der Bezeichnung von R¹¹, worin "R¹⁶ und R¹⁷ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen stickstoffhaltigen Ring mit 5, 6 oder 7 Gliedern bilden", bedeutet der Begriff "stickstoffhaltiger Ring mit 5, 6 oder 7 Gliedern" einen 5-, 6- oder 7-gliedrigen, gesättigten oder ungesättigten Ring, der das Sulfonamid-Stickstoffatom und gegebenenfalls 1 oder 2 andere Heteroatome einschließt, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Schwefel und Sauerstoff. Geeignete Beispiele solch eines Rings schließen Piperidinyl, Morpholinyl und Piperazinyl ein.
In der Bezeichnung von R¹¹, im speziellen die optionalen Substituenten auf R¹⁶ und R¹⁷, bedeutet der Begriff "heterocyclischer Ring mit 5, 6, oder 7 Gliedern" einen 5-, 6- oder 7-gliedrigen, vollständig oder partiell gesättigten oder ungesättigten Ring, der 1, 2, 3 oder 4 Heteroatome einschließt, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Schwefel und Sauerstoff. Geeignete Beispiele für solch einen Ring schließen Pyrrolyl, Furyl, Thienyl, Pyridinyl, Pyrazinyl, Pyridazinyl, Imidazolyl, Tetrazolyl, Tetrahydrofuranyl, Oxazolyl, Thiazolyl, Thiadiazolyl, Piperidinyl, Morpholinyl und Piperazinyl ein.
In der Bezeichnung von X schließt der Begriff "Alkenylen" sowohl cis- als auch trans-Strukturen ein. Geeignete Beispiele für Alkenylen-Gruppen schließen -CH=CH- ein.
Die Verbindungen der Formeln (X), (Xa) und (Xb) schließen ein asymmetrisches Zentrum ein, nämlich das Kohlenstoffatom der
Gruppe. Die vorliegende Erfindung schließt sowohl (S)- als auch (R)-Enantiomere, entweder in im wesentlich reiner Form oder in jeglichen Verhältnissen gemischt ein.
Geeigneterweise, wo R¹⁴ und R¹⁵ unterschiedliche Gruppen sind, ist das Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, ein asymmetrisches Zentrum, und die vorliegende Erfindung schließt sowohl (S)- als auch (R)-Enantiomere an diesem Zentrum, entweder in im wesentlichen reiner Form oder in jeglichen Verhältnissen gemischt ein.
Daher schließen die Verbindungen der Formeln (X), (Xa) und (Xb) alle Enantiomere und Diastereoisomere sowie Gemische daraus in jeglichen Verhältnissen ein.
Die am meisten bevorzugte Verbindung der Formel (X) ist 3-(4-{[6-({(2R)-2-Hydroxy-2-[4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)phenyl]ethyl}amino)hexyl}oxy}butyl)benzolsulfonamid oder ein Salz oder Solvat davon.
Salze und Solvate der Verbindungen der Formeln (X), (Xa) und (Xb), die zur Verwendung in der Medizin geeignet sind, sind solche, worin das Gegenion oder das assoziierte Lösungsmittel pharmazeutisch annehmbar ist. Jedoch sind Salze und Solvate mit nicht-pharmazeutisch annehmbaren Gegenionen oder assoziierten Lösungsmitteln innerhalb des Umfangs der vorliegenden Erfindung, zum Beispiel zur Verwendung als Zwischenstufen in der Herstellung anderer Verbindungen der Formeln (X), (Xa) und (Xb) und ihrer pharmazeutisch annehmbaren Salze und Solvate.
Geeignete Salze gemäß der Erfindung schließen solche ein, die mit sowohl organischen als auch anorganischen Säuren oder Basen gebildet werden können. Pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze schließen solche ein, die aus Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Zitronensäure, Weinsäure, Phosphorsäure, Milchsäure, Pyruvinsäure, Essigsäure, Trifluoressigsäure, Triphenylessigsäure, Sulfaminsäure, Sulfanilsäure, Bernsteinsäure, Oxalsäure, Fumarsäure, Maleinsäure, Äpfelsäure, Glutaminsäure, Asparaginsäure, Oxalessigsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Arylsulfonsäure (zum Beispiel p-Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphthalinsulfonsäure oder Naphthalindisulfonsäure), Salicylsäure, Glutarsäure, Gluconsäure, Tricarballylsäure, Cinnaminsäure, substituierte Cinnaminsäure (zum Beispiel Phenyl-, Methyl-, Methoxy- oder Halogensubstituierte Cinnaminsäure, einschließlich 4-Methyl- und 4-Methoxycinnaminsäure), Ascorbinsäure, Oleinsäure, Naphthoesäure, Hydroxynaphtoesäure (zum Beispiel 1- oder 3-Hydroxy-2-naphthoesäure), Naphthalinacrylsäure (zum Beispiel Naphthalin-2-acrylsäure), Benzoesäure, 4-Methoxybenzoesäure, 2- oder 4-Hydroxybenzoesäure, 4-Chlorbenzoesäure, 4-Phenylbenzoesäure, Benzolacrylsäure (zum Beispiel 1,4-Benzoldiacrylsäure) und Isethionsäure gebildet werden. Pharmazeutisch annehmbare Basensalze schließen Ammoniumsalze, Alkalimetallsalze, wie zum Beispiel solche aus Natrium und Kalium, Erdalkalimetallsalze, wie zum Beispiel solche aus Calcium und Magnesium, und Salze mit organischen Basen, wie zum Beispiel Dicyclohexylamin und N-Methyl-D-glucamin ein.
Verbindungen der Formel (X), (Xa) und (Xb) können durch Verweis auf Beispiel (X), nachstehend erwähnt, durch analoge Verfahren oder durch andere herkömmliche, an sich bekannte Verfahren hergestellt werden.
Da für die Verbindungen der Formel (I) erwartet wird, daß sie langwirkend sind, wird die Zusammensetzung, die die Verbindung der Formel (I) und den langwirkenden β₂-Adrenorezeptoragonisten umfaßt, vorzugsweise einmal täglich übertragen, und die Dosis wird jeweils so ausgewählt, daß die Zusammensetzung eine therapeutische Wirkung in der Behandlung von Atemwegsstörungen aufweist (z. B. in der Behandlung von Asthma oder COPD, insbesondere Asthma) mit einer Wirkung über 24 Stunden oder mehr.
Beispiele für Antihistaminika schließen Methapyrilen oder Loratadin ein.
Andere geeignete Kombinationen schließen zum Beispiel andere entzündungshemmende Mittel wie NSAIDs (z. B. Natriumcromoglycat, Nedocromilnatrium, PDE4-Inhibitoren, Leukotrien-Antagonisten, iNOS-Inhibitoren, Tryptase- und Elastase-Inhibitoren, beta-2-Integrin-Antagonisten und Adenosin-2a-Agonisten) oder infektionshemmende Mittel (z. B. Antibiotika, antivirale Mittel) ein. Die Verbindungen der Formel (I) können ebenfalls mit anticholinergen Verbindungen kombiniert sein, Beispiele dieser schließen Ipratropium (z. B. als Bromid), Tiotropium, Atropin oder Oxitropium ein. Jede der vorstehenden Substanzen kann in der Form eines alternativen Salzes oder Solvats davon eingesetzt werden.
Von besonderem Interesse ist die Verwendung der Verbindung der Formel (I) in Kombination mit einem Phosphodiesterase 4 (PDE4)-Inhibitor. Der in diesem Aspekt der Erfindung nützliche PDE4-spezifische Inhibitor kann jede Verbindung sein, die dafür bekannt ist, daß sie das PDE4-Enzym inhibiert, oder für die eine PDE4-inhibitorische Aktivität entdeckt wurde, und die einzig ein PDE4-Inhibitor ist, also keine Verbindung, die andere Mitglieder der PDE-Familie rieben PDE4 inhibiert. Im allgemeinen ist es bevorzugt, einen PDE4-Inhibitor zu verwenden, der ein IC₅₀-Verhältnis von ungefähr 0,1 oder größer in bezug auf den IC₅₀-Wert für die PDE4-katalytische Form, die Rolipram mit einer hohen Affinität bindet, geteilt durch den IC₅₀-Wert für die Form, die Rolipram mit einer niedrigen Affinität bindet, hat. Für den Zweck dieser Offenbarung wird das cAMP-katalytische Zentrum, das R- und S-Rolipram mit einer niedrigen Affinität bindet, als die "niedrig-affine" Bindungsstelle (LPDE4) bezeichnet und die andere Form dieses katalytischen Zentrums, die Rolipram mit einer hohen Affninität bindet, als die "hochaffine" Bindungsstelle (HPDE4) bezeichnet. Der Ausdruck "HPDE4" sollte nicht mit dem Ausdruck "hPDE4" verwechselt werden, der für die Kennzeichnung des humanen PDE4 verwendet wird.
Ursprüngliche Experimente wurden durchgeführt, um einen [³H]-Rolipram-Bindungstest zu etablieren und zu validieren. Details dieser Arbeit sind in den unten im Detail beschriebenen Bindungstests wiedergegeben.
Die bevorzugten PDE4-Inhibitoren für die Verwendung in dieser Erfindung sind solche Verbindungen, die ein heilsames therapeutisches Verhältnis haben, d. h. Verbindungen, die bevorzugt cAMP-katalytische Aktivität inhibieren, wenn das Enzym in der Form ist, die Rolipram mit einer niedrigen Affninität bindet, wodurch die Nebenwirkungen reduziert werden, die offensichtlich mit der Inhibierung der Form, die Rolipram mit einer hohen Affninität bindet, verknüpft sind. Anders ausgedrückt werden die bevorzugten Verbindungen ein IC₅₀-Verhältnis von ungefähr 0,1 oder größer in bezug auf den IC₅₀-Wert für die PDE4-katalytische Form, die Rolipram mit einer hohen Affninität bindet, geteilt durch den IC₅₀-Wert für die Form, die Rolipram mit einer niedrigen Affinität bindet, haben.
Eine weitere Verbesserung dieses Standards ist solch eine, worin der PDE4-Inhibitor ein IC₅₀-Verhältnis von ungefähr 0,1 oder größer hat; das Verhältnis ist das Verhältnis des IC₅₀-Werts für das Konkurrieren mit der Bindung von 1 nM von [³H]R-Rolipram an eine Form des PDE4, die Rolipram mit einer hohen Affinität bindet, gegenüber dem IC₅₀-Wert für das Inhibieren der PDE4-katalytischen Aktivität einer Form, die Rolipram mit einer niedrigen Affinität bindet, unter der Verwendung von 1 μM [³H]-cAMP als das Substrat.
Beispiele für nützliche PDE4-Inhibitoren sind:
(R)-(+)-1-(4-Brombenzyl)-4-[(3-cyclopentyloxy)-4-methoxyphenyl]-2-pyrrolidon;
(R)-(+)-1-(4-Brombenzyl)-4-[(3-cyclopentyloxy)-4-methoxyphenyl]-2-pyrrolidon;
3-(Cyclopentyloxy-4-methoxyphenyl)-1-(4-N'-[N2-cyano-S-methylisothioureido]benzyl)-2-pyrrolidon;
cis-4-Cyano-4-(3-cyclopentyloxy-4-methoxyphenyl)cyclohexan-1-carbonsäure];
cis-[4-Cyano-4-(3-cyclopropylmethoxy-4-difluormethoxyphenyl)cyclohexan-1-ol];
(R)-(+)-Ethyl[4-(3-cyclopentyloxy-4-methoxyphenyl)pyrrolidin-2-yliden]acetat und
(S)-(–)-Ethyl[4-(3-cyclopentyloxy-4-methoxyphenyl)pyrrolidin-2-yliden]acetat.
Am meisten bevorzugt sind solche PDE4-Inhibitoren, die ein IC₅₀-Verhältnis von größer als 0,5, und insbesondere solche Verbindungen, die ein Verhältnis von größer als 1,0 haben. Bevorzugte Verbindungen sind cis-4-Cyano-4-(3-cyclopentyloxy-4-methoxyhenyl)cyclohexan-1-carbonsäure, 2-Carboxymethoxy-4-cyano-4-(3-cyclopropylmethoxy-4-difluormethoxyphenyl)cyclohexan-1-on und cis-[4-Cyano-4-(3-cyclopropylmethoxy-4-difluormethoxyphenyl)cyclohexan-1-ol]; dies sind Beispiele für Verbindungen, die bevorzugt an die niedrig-affine Bindungsstelle binden, und die ein IC₅₀-Verhältnis von 0,1 oder größer haben.
Andere Verbindungen von Interesse schließen ein:
Verbindungen, die dargelegt werden im US-Patent 5,552,438 , erteilt am 3. September 1996; dieses Patent und die darin offenbarten Verbindungen werden hier vollständig durch Referenz eingeführt. Die Verbindung von besonderem Interesse, die im US-Patent 5,552,438 offenbart wird, ist cis-4-Cyano-4-[3-(cyclopentyloxy)-4-methoxyphenyl]cyclohexan-1-carbonsäure (ebenfalls bekannt als Cilomalast) und ihre Salze, Ester, Prodrugs oder physikalische Formen; AWD-12-281 von Astra (N. Hofgen et al, 15th EFMC Ing. Symp. Med. Chem. (6.–10. September, Edinburgh) 1998, Abst. S. 98); ein 9-Benzyladenin-Derivat, bezeichnet als NCS-613 (INSERM); D-4418 von Chiroscience and Schering-Plough; ein Benzodiazepin PDE4-Inhibitor, identifiziert als CI-1018 (PD-168787; Parke-Davis/Warner-Lambert); ein Benzodioxol-Derivat von Kyowa Hakko, offenbart in WO 9916766 ; V-11294A von Napp (L.J. Landells et al., Eur. Resp. J. [Annu. Cong. Eur. Resp. Soc. (19.–23. September, Geneva) 1998] 1998, 12 (Suppl 28): Abst. S.2393); Roflumilast (CAS-Referenz-Nr. 162401-32-3) und ein Pthalazinon ( WO 9947505 ) von Byk-Gulden; oder eine Verbindung, die als T-440 identifiziert wird (Tanabe Seiyaku; K. Fuji et al.; J. Pharmacol. Exp. Ther. 1998, 284(1): 162).
Phosphodiesterase- und Rolipram-Bindungstests
Testmethode 1A
Isoliertes PDE4 aus humanen Monocyten und hrPDE (humanes rekombinantes PDE4) wurden primär in der niedrig-affinen Form gefunden. Infolgedessen kann die Aktivität von Testverbindungen gegen die niedrig-affine Form von PDE4 unter Verwendung von Standardtests für PDE4-katalytische Aktivität durch Einsetzen von 1 μM [³H]cAMP als Substrat getestet werden (Trophy et al., J. of Biol. Chem., Bd. 267, Nr. 3, S. 1798–1804, 1992).
Hochgeschwindigkeitsüberstände aus Rattengehirnen wurden als Proteinquellen verwendet, und beide Enantiomere von [³H]-Rolipram wurden mit einer spezifischen Aktivität von 25,6 Ci/mmol hergestellt. Standardtestbedingungen wurden insoweit von dem publizierten Verfahren modifiziert, als das sie hier mit den PDE-Testverbindungen identisch sind, ausgenommen letzteres, das cAMP: 50 mM Tris HCl (pH 7,5), 5 mM MgCl₂, 50 μM 5'-AMP und 1 nM [³H]-Rolipram (Torphy et al., J. of Biol. Chem., Bd. 267, Nr. 3, S. 1798–1804, 1992). Der Test wurde für 1 Stunde bei 30°C durchgeführt. Die Reaktion wurde beendet, und gebundener Ligand wurde unter Verwendung eines Brandel-Zell-Ernters von freiem Ligand getrennt. Die Konkurrenz um die hochaffine Bindungsstelle wurde unter Bedingungen getestet, die mit solchen identisch waren, die für die Messung der niedrig-affinen PDE-Aktivität verwendet wurden, mit der Ausnahme, daß [³H]-cAMP nicht gegenwärtig war.
Testmethode 1B
Messung von Phosphodiesterase-Aktivität
Die PDE-Aktivität wurde unter Verwendung eines [³H]-cAMP-SPA- oder [³H]-cGMP-SPA-Enzymtests, wie durch den Anbieter beschrieben (Amersham Life Sciences), untersucht. Die Reaktionen wurden in Platten mit 96 Vertiefungen bei Raumtemperatur in 0,1 ml des Reaktionspuffers durchgeführt, der folgendes enthielt (Endkonzentration): 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 8,3 mM MgCl₂, 1,7 mM EGTA, [³H]-cAMP oder [³H]-cGMP (ungefähr 200 dpm(pmol), Enzym und verschiedene Konzentrationen an Inhibitoren. Der Test wurde für eine weitere Stunde durchgeführt und wurde durch Zugabe von 50 μl von SPA-Yttrium-Perlen in Gegenwart von Zinksulfat beendet. Die Platten wurden geschüttelt und für 20 Minuten bei Raumtemperatur stehengelassen. Radioaktiv markierte Produktbildung wurde durch Szintillationsspektrometrie gemessen.
[³H]R-Rolipram-Bindungstest
Der [³H]R-Rolipram-Bindungstest wurde durch Modifikation der Methode von Schneider und Kollegen durchgeführt, siehe Nicholson et al., Trends Pharmacol. Sci., Bd. 12, S. 19–27 (1991) und McHale et al., Mol. Pharmacol., Bd. 39, 109–113 (1991). R-Rolipram bindet an das katalytische Zentrum von PDE4, siehe Torphy et al., Mol. Pharmacol., Bd. 39, S. 376–384 (1991). Infolgedessen stellt die Konkurrenz um die [³H]R-Rolipram-Bindung einen unabhängigen Nachweis für die PDE4-inhibitorischen Potentiale von unmarkierten Konkurrenten dar. Der Test wurde bei 30°C für 1 h in 0,5 μl Puffer durchgeführt, der folgendes enthielt (Endkonzentration): 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 5 mM MgCl₂, 0,05% Rinderserumalbumin, 2 nM [³H]R-Rolipram (5,7 × 10⁴ dpm/pmol) und verschiedene Konzentrationen nicht-radioaktiv markierter Inhibitoren. Die Reaktion wurde durch die Zugabe von 2,5 ml eines eiskalten Reaktionspuffers (ohne [³H]R-Rolipram) und rascher Vakuumfiltration (Brandel-Zell-Ernter) durch Whatman GF/B-Filter, die in 0,3% Polyethylenimin getränkt worden waren, beendet. Die Filter wurden zusätz lich mit 7,5 ml des kalten Puffers gewaschen, getrocknet und durch Flüssigszintilationspektrometrie gezählt.
Die Erfindung stellt daher in einem weiteren Aspekt eine Kombination bereit, die die Verbindung der Formel (I) oder ein physiologisch annehmbares Salz oder Solvat davon zusammen mit einem PDE4-Inhibitor umfaßt.
Die vorstehend genannte Kombination kann zweckmäßig zur Verwendung in Form einer pharmazeutischen Formulierung angeboten werden, und folglich stellen pharmazeutischen Formulierungen, die eine zuvor stehend definierte Kombination mit einem physiologisch annehmbaren Verdünnungsmittel oder Träger umfassen, einen weiteren Aspekt der Erfindung dar.
Die individuellen Verbindungen solcher Kombinationen können entweder sequentiell oder simultan, in getrennten oder kombinierten pharmazeutischen Formulierungen verabreicht werden.
Angemessene Dosen bekannter Therapeutika werden leicht vom Fachmann eingesehen werden.
Die Verbindungen der Formel (I) und Salze und Solvate davon können durch die hier beschriebene Methodologie hergestellt werden, die einen weiteren Aspekt dieser Erfindung darstellt.
Daher kann eine Verbindung der Formel (I) gemäß eines ersten Verfahrens (A) durch Behandeln einer Verbindung der Formel (II)
worin R₂, R₃, R₄, R₅ und ----- wie vorstehend für die Verbindung der Formel (I) definiert sind und X OH, SH oder ein aktiviertes Derivat davon wie ein Triazol oder gemischtes Anhydrid darstellt, mit einer Verbindung der Formel (III)
und Salzen davon, worin
Z OH, NH₂ oder SH darstellt, hergestellt werden.
Die Verbindungen der Formel (I), worin R₁ O oder S darstellt, können ebenfalls gemäß eines zweiten Verfahrens (B) hergestellt werden, worin eine Verbindung der Formel (II), worin R₂, R₃, R₄, R₅ und ----- wie vorstehend definiert sind und X OH oder SH oder ihre entsprechenden Salze darstellt, mit einer Verbindung der Formel (IV) oder Formel (V)
worin Q eine geeignete Abgangsgruppe (wie zum Beispiel Cl, Br, OSO₂A, worin A zum Beispiel CH₃, CF₃, p-CH₃C₆H₄ ist), unter Standardverfahren behandelt wird.
Das vorstehend allgemeine Verfahren (B), das Verbindungen der Formel (IV) einsetzt, kann verwendet werden, um Verbindungen der Formel (I), worin R₁ an die alpha-, beta- oder gamma-Kohlenstoffatome der Lacton-Gruppe verknüpft ist, herzustellen.
Die Verbindungen der Formel (I), worin R₁ O oder S darstellt, können gemäß dem vorstehenden Verfahren (B) durch Alkylierung einer Verbindung der Formel (II), worin X OH bzw. SH darstellt, mit einer Verbindung der Formel (IV), worin Q eine geeignete Abgangsgruppe darstellt, unter Verwendung fachbekannter Verfahren oder einer Anpassung dieser Verfahren hergestellt werden.
Daher kann zum Beispiel eine Verbindung der Formel (I), worin R₁ O darstellt, durch Alkylierung einer Verbindung der Formel (II), worin X OH darstellt, zweckdienlich in der Form eines entsprechenden Salzes (wie zum Alkalimetallsalz, z. B. Natrium, oder ein quaternäres Ammoniumsalz) mit einer Verbindung der Formel (IV), worin Q eine geeignete Abgangsgruppe darstellt, vorzugsweise Chlor, Brom oder Mesylat, hergestellt werden. Die Alkylierungsreaktion wird vorzugsweise in Gegenwart eines Lösungsmittels, geeigneterweise einem polaren Lösungsmittel, unter inerten Bedingungen, zum Beispiel unter Stickstoff oder dgl. zweckdienlich bei einer Temperatur zwischen ca. 0°C bis 100°C durchgeführt. Geeignete polare Lösungsmittel können Aceton, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Dimethylsulfoxid, Dichlormethan oder Chloroform einschließen.
Gleichsam können Verbindungen der Formel (I), worin R₁ S darstellt, gemäß dem vorstehenden Verfahren (B) durch Alkylierung einer Verbindung der Formel (II), worin X SH darstellt, mit einer Verbindung der Formel (IV), worin Q eine geeignete Abgangsgruppe darstellt, durch Anpassung der durch Phillipps et al. beschriebenen Verfahren (Journal of Medicinal Chemistry, 1994, 37, 3717–3729) hergestellt werden. Daher kann eine Verbindung der Formel (I), worin R₁ S darstellt, durch Alkylierung der entsprechenden Verbindung der Formel (II), worin X SH darstellt, zweckdienlich in der Form eines entsprechenden Salzes (wie zum Beispiel einem Alkalimetallsalz, z. B. Natrium, oder einem quaternärem Ammoniumsalz) mit einer Verbindung der Formel (IV), worin Z eine geeignete Abgangsgruppe darstellt, wie vorstehend für ähnliche Alkylierungsreaktionen beschrieben, hergestellt werden.
Alternativ können Verbindungen der Formel (I), worin R₁ O oder S darstellt, gemäß dem vorstehenden Verfahren (B) durch Alkylierung einer Verbindung der Formel (II), worin X OH oder SH darstellt, mit einer Verbindung der Formel (IV), worin Q OH darstellt, unter Mitsunobu-Bedingungen unter Verwendung von Triphenylphosphin und einem Dialkylazodicarboxylat oder durch Verwendung der Vilsmeier-Methodologie, wie durch Barrett und Procopiou in the Journal of the Chemical Society, Chemical Communications, 1995, 1403–1404 beschrieben, hergestellt werden.
Eine Verbindung der Formel (I), worin R₁ S darstellt und an das beta-Kohlenstoffatom der Lacton-Gruppe gebunden ist, kann ebenfalls durch Umsetzen der entsprechenden Verbindung der Formel (II), worin X SH darstellt, mit einer Verbindung der Formel (V) hergestellt werden. Zum Beispiel durch eine Michael-Addition der Verbindung der Formel (II) mit einer Verbindung der Formel (V) in Gegenwart einer Base wie Kaliumcarbonat und in einem geeigneten Lösungsmittel wie Dimethylformamid.
Die Verbindungen der Formel (I) können ebenfalls aus anderen Verbindungen der Formel (I) daraus unter Verwendung herkömmlicher Interkonversionsverfahren wie Epimerisation oder Veresterung hergestellt werden. Daher bildet ein Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I) durch Interkonversion aus einer anderen Verbindung der Formel (I) (Verfahren C) einen weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung.
Die Verbindungen der Formel (I) mit einer 1,2-Einfachbindung können durch partielle Reduzierung der entsprechenden Verbindung mit 1,2-Doppelbindung durch herkömmliche Verfahren hergestellt werden. Daher, zum Beispiel, durch Hydrierung der entsprechenden Verbindung der Formel (I) oder einer Zwischenstufe, die zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I) verwendet wird, unter Verwendung eines Palladium-Katalysators, zweckdienlich in einem geeigneten Lösungsmittel, z. B. Ethylacetat, oder vorzugsweise durch Verwendung von Tris(triphenylphosphin)rhodium(I)-chlorid (ebenfalls bekannt als Wilkinson-Katalysator), zweckdienlich in einem geeigneten Lösungsmittel wie Toluol, Ethylacetat oder Ethanol.
Es wird durch die Fachleute anerkannt werden, daß es wünschenswert sein kann, geschützte Derivate der Zwischenstufen, die in der Herstellung der Verbindung der Formel (I) verwendet werden, zu verwenden. Daher können die vorstehenden Verfahren das Entschützen als einen intermediären oder Endschritt zum Erhalt der gewünschten Verbindung bedürfen. Daher kann eine Verbindung der Formel (I) gemäß eines anderen Verfahrens (D) durch Unterziehen eines geschützten Derivats einer Verbindung der Formel (I) einer Reaktion zum Entfernen der vorliegenden Schutzgruppe oder -gruppen hergestellt werden, was einen weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung ausmacht.
Das Schützen und Entschützen von funktionellen Gruppen kann unter Verwendung von herkömmlichen Mitteln bewirkt werden. Daher können Hydroxyl-Gruppen unter Verwendung jeder herkömmlichen Hydroxyl-Schutzgruppe geschützt werden, zum Beispiel wie in Organic Chemistry, Hrsg. J.F.W. McOmie (PlenumPress, 1973) oder Protective Groups in Organic Synthesis von Theodors W. Green (John Wiley and Sons, 1991) beschrieben.
Beispiele für geeignete Hydroxyl-Schutzgruppen schließen Gruppen ein, die ausgewählt sind aus Alkyl (z. B. t-Butyl oder Methoxymethyl), Aralkyl (z. B. Benzyl, Diphenylmethyl oder Triphenylmethyl), heterocyclische Gruppen wie Tetrahydropyranyl, Acyl (z. B. Acetyl oder Benzoyl) und Silyl-Gruppen wie Trialkylsilyl (z. B. t-Butyldimethylsilyl). Die Hydroxyl-Schutzgruppen können durch herkömmliche Techniken entfernt werden. Daher können zum Beispiel Alkyl-, Silyl-, Acyl- und Heterocyclyl-Gruppen durch Solvolyse, z. B. durch Hydrolyse unter sauren oder basischen Bedingungen, entfernt werden. Aralkyl-Gruppen wie Triphenylmethyl können auf ähnliche Weise durch Solvolyse, z. B. durch Hydrolyse unter sauren Bedingungen, entfernt werden. Aralkyl-Gruppen wie Benzyl können durch Hydrogenolyse in Gegenwart eines Noble-Metall-Katalysators wie Palladium-auf-Kohle gespalten werden.
Die Verbindungen der Formel (III), (IV) und (V) sind entweder allgemein bekannte Verbindungen oder können durch Verfahren hergestellt werden, die zu Verfahren analog sind, die auf dem Fachgebiet zur Herstellung der bekannten Verbindungen der Formel (III), (IV) und (V) beschrieben sind, oder können durch die hier beschriebenen Verfahren hergestellt werden.
Die Verbindungen der Formel (II), worin X SH darstellt, können aus dem entsprechenden 17α-Hydroxyl-Derivat der Formel (VI):
worin R², R³, R⁴, R⁵ und ----- wie vorstehend definiert sind, unter Verwendung zum Beispiel der durch G.H. Phillipps et al. beschriebenen Methodologie (1994) Journal of Medicinal Chemistry, 37, 3717–3729, hergestellt werden können. Zum Beispiel umfaßt der Schritt typischerweise die Zugabe eines Reagenzes, das für die Durchführung der Veresterung zum Ester wie einem Aryl oder Heteroarylcarbonylhalogenid, z. B. 2-Furanoylchlorid, in Gegenwart einer milden Base, z. B. Triethylamin, geeignet ist. Allgemein würde das Aryl- oder Heteroarylcarbonylhalogenid wenigstens in 2-facher Molmenge relativ zur Verbindung der Formel (VI) eingesetzt. Das zweite Mol des Aryl- oder Heteroarylcarbonylhalogenidis tendiert zum Reagieren mit der Thiosäure-Einheit in Verbindung der Formel (VI) und würde das Entfernen durch Umsetzen mit einem Amin wie Diethylamin bedürfen.
Die Verbindungen der Formel (VI) können gemäß den in GB 2088877B beschriebenen Verfahren hergestellt werden.
Die Verbindungen der Formel (VI) können ebenfalls durch ein Verfahren hergestellt werden, das die folgenden Schritte umfaßt:
Schritt (a) umfaßt die Oxidation einer Lösung, die die Verbindung der Formel (VII) enthält.
Bevorzugt wird der Schritt (a) in Gegenwart eines Lösungsmittels durchgeführt, das Methanol, Wasser, Tetrahydrofuran, Dioxan oder Diethylenglykoldimethylether umfaßt. Um so zum Beispiel die Ausbeuten und den Durchsatz zu steigern, sind Methanol, Wasser oder Tetrahydrofuran bevorzugte Lösungsmittel und besonders bevorzugt sind Wasser und Tetrahydrofuran, im speziellen Wasser und Tetrahydrofuran als Lösungsmittel. Dioxan und Diethylenglykoldimethylether sind ebenfalls bevorzugte Lösungsmittel, die gegebenenfalls (und vorzugsweise) zusammen mit Wasser eingesetzt werden können. Vorzugsweise wird das Lösungsmittel in einer Menge von zwischen 3 und 10 Volumen relativ zu der Menge des Ausgangsmaterials (1 Gew.), besonders bevorzugt zwischen 4 und 6 Volumen, im speziellen 5 Volumen, vorliegen. Vorzugsweise liegt das Oxidationsmittel in einer Menge von 1 bis 9 Moläquivalenten relativ zu der Menge des Ausgangsmaterials vor. Zum Beispiel, wenn eine 50%ige G/G-wäßrige Lösung aus Periodsäure eingesetzt wird, kann das Oxidationsmittel in einer Menge von zwischen 1,1 und 10 Gew. relativ zu der Menge des Ausgangsmaterials (1 Gew.) vorliegen, besonders bevorzugt zwischen 1,1 und 3 Gew., im speziellen 1,3 Gew. Vorzugsweise wird der Oxidationsschritt die Verwendung eines chemischen Oxidationsmittels umfassen. Besonders bevorzugt wird das Oxidationsmittel Periodsäure oder Iodsäure oder ein Salz davon sein. Am meisten bevorzugt wird das Oxidationsmittel Periodsäure oder Natriumperiodat sein, im speziellen Periodsäure. Alternativ (oder zusätzlich) wird es ebenfalls anerkannt werden, daß der Oxidationsschritt jede geeignete Oxidationsreaktion umfassen kann, zum Beispiel eine die Luft und/oder Sauerstoff verwendet. Wenn die Oxidationsreaktion Luft und/oder Sauerstoff verwendet, wird das Lösungsmittel, das in dieser Reaktion verwendet wird, vorzugsweise Methanol sein. Vorzugsweise wird Schritt (a) das Inkubieren der Reagentien bei Raumtemperatur oder etwas wärmer, etwa bei 25°C, z. B. für 2 Stunden beinhalten. Die Verbindung der Formel (VIII) kann durch Umkristallisierung aus dem Reaktionsgemisch durch Zugabe eines Antilösungsmittels isoliert werden. Ein geeignetes Antilösungsmittel für die Verbindung der Formel (VIII) ist Wasser. Überraschenderweise haben wir festgestellt, daß es höchst wünschenswert ist, die Bedingungen, unter denen die Verbindung der Formel (VIII) durch Zugabe eines Antilösungsmittels, zum Beispiel Wasser, präzipitiert wird, zu kontrollieren. Wenn die Umkristallisierung unter Verwendung gekühlten Wassers (z. B. Wasser/Eisgemisch bei einer Temperatur von 0–5°C) durchgeführt wird, obwohl bessere Antilösungsmittel-Eigenschaften erwartet werden können, haben wir gefunden, daß das hergestellte kristalline Produkt sehr voluminös ist, einem Weichgel ähnelt und es schwer zu filtrieren ist. Ohne durch die Theorie beschränkt zu sein, nehmen wir an, daß dieses niederdichte Produkt eine große Menge an solvatisiertem Lösungsmittel innerhalb des Kristallgitters enthält. Auf der anderen Seite, wenn Bedingungen von ungefähr 10°C oder höher verwendet werden (z. B. Umgebungstemperatur), wird ein granuläres Produkt mit einer sandähnlichen Konsistenz, das sehr einfach zu filtrieren ist, hergestellt. Unter diesen Bedingungen beginnt die Kristallisierung typischerweise nach ungefähr 1 Stunde und ist typischerweise innerhalb weniger Stunden (z. B. 2 Stunden) vollendet. Ohne durch die Theorie beschränkt zu sein, gehen wir davon aus, daß dieses granuläre Produkt weniger oder kein solvatisiertes Lösungsmittel innerhalb des Kristallgitters enthält.
Schritt (b) wird typischerweise die Zugabe eines Reagenzes umfassen, das für die Umwandlung einer Carbonsäure in eine Thiocarbonsäure geeignet ist, zum Beispiel unter Verwendung von Schwefelwasserstoffgas zusammen mit einem geeigneten Kupplungsmittel, z. B. Carbonyldiimidazol (CDI) in Gegenwart eines geeigneten Lösungsmittel, z. B. Dimethylformamid.
Solvate von Verbindungen der Formel (I), die nicht-physiologisch annehmbar sind, können als Zwischenstufen in der Herstellung der Verbindungen der Formel (I) oder physiologisch annehmbare Solvate nützlich sein.
Die Vorteile der Verbindungen der Formel (I) und/oder der Salze und Solvate davon können die Tatsache einschließen, daß die Substanzen anscheinend exzellente entzündungshemmende Eigenschaften zeigten, mit einem vorhersagbaren pharmakokinetischen und pharmakodynamischen Verhalten, mit einem attraktiven Nebenwirkungsprofil (durch zum Beispiel eine niedrige Thymusgewichtsreduktion in Ratten demonstriert), einer langen Wirkungsdauer, und mit einem zweckdienlichen Behandlungsschema in humanen Patienten kompatibel. Weitere Vorteile können die Tatsache einschließen, daß die Substanzen physikalische und chemische Eigenschaften aufweisen, die eine leichte Herstellung und Lagerung ermöglichen.
Die folgenden nicht-einschränkenden Beispiele veranschaulichen die Erfindung:
Beispiele
Allgemein
¹H-NMR-Spektren wurden bei 400 MHz aufgezeichnet, und die chemischen Verschiebungen sind in ppm relativ zu Tetramethylsilan ausgedrückt. Die folgenden Abkürzungen werden verwendet, um die Multiplizitäten der Signale zu beschreiben: s (Singulett), d (Dublett), t (Triplett), q (Quartett), m (Multiplett), dd (Dublett der Dubletts), dt (Dublett der Tripletts) und b (breit). Biotage bezieht sich auf vorgepackte Kieselsäuregel-Kartuschen, die KP-Sil enthalten, ausgeführt auf einem "Flash"-12i-Chromatographie-Modul. LCMS wurden auf einer Supelcosil LCABZ+PLUS-Säule (3,3 cm × 4,6 mm ID) durchgeführt, eluiert mit 0,1% HCO₂H und 0,01 M Ammoniumacetat in Wasser (Lösungsmittel A) und 0,05% HCO₂H, 5% in Acetonitril (Lösungsmittel B) unter Verwendung des folgenden Elutionsgradienten: 0–0,7 min 9% B, 0,7–4,2 min 100% B, 4,2–5,3 min 0% B, 5,3–5,5 min 0% B bei einer Flußrate von 3 ml/min. Die Massenspektren wurden auf einem Fisons VG-Plattformspektrometer unter Verwendung eines Elektrospray-positiv- und -negativ-Moduls (ES+ve und ES–ve) aufgezeichnet.
Zwischenstufen
Zwischenstufe 1: 6α,9α-Difluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure
Eine Lösung aus 6α,9α-Difluor-11β,17α-Dihydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure (hergestellt gemäß dem in GB 2088877B beschriebenen Verfahren) (18 g, 43,64 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (200 ml) und Triethylamin (15,94 ml, 114 mmol) wurde bei < 5°C mit einer Lösung aus 2-Furoylchlorid (11,24 ml, 114 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (100 ml) über ca. 40 min behandelt. Die Lösung wurde bei < 5°C für 30 min gerührt. Der resultierende Feststoff wurde durch Filtration gesammelt, nacheinander mit 3,5%iger wäßriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung, Wasser, 1M Salzsäure und Wasser gewaschen und unter Vakuum bei 60°C getrocknet, um einen cremefarbenen Feststoff zu ergeben. Das Dichlormethan-Filtrat wurde nacheinander mit 3,5%iger Natriumhydrogencarbonat-Lösung, Wasser, 1M Salzsäure und Wasser gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft, um einen cremefarbenen Feststoff zu ergeben, der mit dem vorstehend Isolierten vereinigt wurde. Die vereinigten Feststoff (26,9 g) wurden in Aceton (450 ml) suspendiert und gerührt. Diethylamin (16,8 ml, 162 mmol) wurde hinzugegeben und das Gemisch für 4,5 h bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde aufkonzentriert, und das Präzipitat durch Filtration gesammelt und mit etwas Acetonitril gewaschen. Die Wäschen und das Filtrat wurden vereinigt, aufkonzentriert und auf eine Biotage-Kieselsäuregel-Säule geladen, die mit 21:1 Chloroform:Methanol eluiert wurde. Fraktionen, die die polarere Komponente enthielten, wurden vereinigt und eingedampft, um einen cremefarbenen Feststoff zu ergeben. Dieser wurde mit dem vorstehend Isolierten vereinigten und unter Vakuum getrocknet, um einen hell-beigefarbenen Feststoff (19,7 g) zu ergeben. Dieser wurde in warmen Wasser gelöst, der pH mit konzentrierter Salzsäure auf 2 eingestellt und das Gemisch mit Ethylacetat extrahiert. Das organische Extrakt wurde getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft, um nach Trocknung bei 50°C die Titelverbindung als einen cremefarbenen Feststoff (18,081 g, 82%) zu ergeben:
LCMS Retentionszeit: 3,88 min,
m/z 507 MH⁺,
NMR δ CDCl₃ beinhaltet: 7,61 (1H, m), 7,18-7,12 (2H, m), 6,52 (1H, dd, J 4,2 Hz), 6,46 (1H, s), 6,41 (1H, dd, J = 10, 2 Hz), 5,47 und 5,35 (1H, 2m), 4,47 (1H, bd, J 9 Hz), 3,37 (1H, m), 1,55 (3H, s), 1,21 (3H, s), 1,06 (3H, d, J 7 Hz).
Die folgenden Zwischenstufen wurden unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Zwischenstufe 1 analog ist:
Zwischenstufe 2: 6α,9α-Difluor-17α-[(3-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,75 min, m/z 507 MH⁺.

Zwischenstufe 3: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(2-thiophenylcarbonyl)oxy)-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,93 min, m/z 523 MH⁺.

Zwischenstufe 4: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(3-thiophenylcarbonyl)oxy]-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,95 min, m/z 523 MH⁺.

Zwischenstufe 5: 17α-(Benzoyl)oxy-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,02 min, m/z 517 MH⁺.

Zwischenstufe 6: 9α-Fluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16β-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure
Zwischenstufe 6 wurde aus 11β,17α-Dihydroxy-9α-fluor-16β-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure (hergestellt gemäß dem in Phillips et al. (1994), J. Med. Chem. 37, 3717–3729, beschrieben Verfahren) hergestellt.

LCMS-Retentionszeit 361 min, m/z 489 MH⁺.

Zwischenstufe 7: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(5-methylthiophen-2-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,01 min, m/z 537 MH⁺.

Zwischenstufe 8: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(isoxazol-5-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,69 min, m/z 508 MH⁺.

Zwischenstufe 9: 17a-[(5-Chlorthiophen-2-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,36 min, m/z 559 MH⁺.

Zwischenstufe 10: 6α,9α-Difluor-17α-[(3,5-dimethylisoxazol-4-carbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,71 min, m/z 536 MH⁺.

Zwischenstufe 11: 17α[(5-Chlor-4-methoxy-thiophen-3-carbonyl)oxy]-6α,9a-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,18 min, m/z 587/589 MH⁺.

Zwischenstufe 12: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(4-methyl-1,2,3-thiadiazol-5-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,06 min, m/z 539 MH⁺.

Zwischenstufe 13: 17α-[(3-Bromthiophen-2-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,31 min, m/z 601/603 MH⁺.

Zwischenstufe 14: 17α-[(2,5-Dichlorthiophen-3-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,59 min, m/z 591/593/595 MH⁺.

Zwischenstufe 15: 17α-[(5-Bromfuran-2-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,14 min, m/z 585/587 MH⁺.

Zwischenstufe 16: 6α,9α-Difluor-17α-[(2,5-dimethylfuran-3-carbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure.

LCMS-Retentionszeit 4,02 min, m/z 535 MH⁺.

Zwischenstufe 17: 17α[(3-Chlorthiophen-2-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,27 min, m/z 557/559 MH⁺.

Zwischenstufe 18: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α[(2-methylfuran-3-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,92 min, m/z 521 MH⁺.

Zwischenstufe 19: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(3-methylfuran-2-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,85 min, m/z 521 MH⁺.

Zwischenstufe 20: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(1-methyl-1H-pyrrol-2-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,78 min, m/z 520 MH⁺.

Zwischenstufe 21: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(1,3-thiazol-4-carbonyl)oxy]-androsta-1,4-dien-11β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,48 min, m/z 524 MH⁺.

Zwischenstufe 22: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(5-methylisoxazol-3-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,72 min, m/z 522 MH⁺.

Zwischenstufe 23: 6α,9α-Difluor-17α-[(1,3-dimethyl-1H-pyrazol-5-carbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,72 min, m/z 535 MH⁺.

Zwischenstufe 24: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(isoxazol-3-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,78 min, m/z 508 MH⁺.

Zwischenstufe 25: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(4-methoxy-thiophen-3-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,74 min, m/z 553 MH⁺.

Zwischenstufe 26: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(1,2,3-thiadiazol-4-carbonyl)oxy]-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,70 min, m/z 526 MH⁺.

Zwischenstufe 27: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(1,3-thiazol-5-carbonyl)oxy]-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,29 min, m/z 524 MH⁺.

Zwischenstufe 28: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(isothiazol-3-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,44 min, m/z 524 MH⁺.

Zwischenstufe 29: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(isothiazol-5-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 4,60 min, m/z 524 MH⁺.

Zwischenstufe 30: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(3-methylisoxazol-5-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure

LCMS-Retentionszeit 3,84 min, m/z 522 MH⁺.

Beispiele
Beispiel 1: 6α,9α-Difluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Eine Suspension aus Zwischenstufe 1 (500 mg, 0,987 mmol) und Methansulfonsäure-2-oxo-tetrahydrofuran-3R-ylester (179 mg, 1,0 mmol) in wasserfreiem N,N-Dimethylformamid (5 ml) wurde mit wasserfreiem Pyridin (0,162 ml, 2 mmol) behandelt. Die Lösung wurde unter Stickstoff bei Raumtemperatur für 18 h gerührt und wurde dann mit 2M Salzsäure (0,7 ml) behandelt, erhitzt auf 60°C und mit einer weiteren Menge (2,4 ml) an 2M Salzsäure behandelt. Die Reaktion wurde bei 50–60°C für 5 Minuten gerührt und Wasser (12 ml) wurde dann zugetropft. Das Gemisch wurde auf Raumtempe ratur abgekühlt, und der resultierende Feststoff durch Filtration gesammelt und unter Vakuum bei 50°C getrocknet. Der Feststoff wurde aus Propan-2-ol/Wasser umkristallisiert, um nach Trocknung bei 50°C die Titelverbindung (433 mg, 74%) als einen weißen, kristallinen Feststoff zu ergeben:
Smp.: 238–239°C;
LCMS-Retentionszeit 3,5 min, m/z 591 MH⁺,
NMR δ CDCl₃ beinhaltet: 7,60 (1H, m), 7,16 (1H, dd, J = 10, 2 Hz), 7,12 (1H, d, J 4 Hz), 6,51 (1H, dd, J 4,2 Hz), 6,45 (1H, s), 6,40 (1H, dd, J 10,2 Hz), 5,47 und 5,35 (1H, 2m), 4,51 (1H, dt, J 9,4 Hz), 4,43 (1H, m), 4,36 (1H, m), 4,18 (1H, m), 3,39 (1H, m), 1,54 (3H, s), 1,22 (3H, s), 1,08 (3H, d, J 7 Hz).
Beispiel 2: 6α,9α-Difluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester
Pulvriges wasserfreies Natriumhydrogencarbonat (332 mg, 3,95 mmol) wurde zu einer gerührten Lösung der Zwischenstufe 1 (1 g, 1,97 mmol) in trockenem Dimethylformamid (10 ml) hinzugegeben. Das Gemisch wurde gerührt und α-Brom-γ-butyrolacton (0,365 ml, 3,95 mmol) wurde hinzugegeben und das Gemisch bei Raumtemperatur für 18 h gerührt. Das Gemisch wurde zu 2M Salzsäure (300 ml) hinzugegeben und das resultierende Präzipitat durch Filtration gesammelt, mit Wasser gewaschen und unter Vakuum bei 50°C getrocknet. Das Rohprodukt wurde durch Biotage-Chromatographie auf Kieselsäuregel unter Verwendung von 3:2 Cyclohexan:Ethylacetat als Eluent aufgereinigt, um das weniger polare S-Isomer der Titelverbindung als einen kristallinen Feststoff (594 mg, 51%), Smp. 238–239°C, das identisch zum aus Beispiel 1 erhaltenen Material war, und das polarere R-Isomer der Titelverbindung als einen kristallinen Feststoff (473 mg, 44%) zu ergeben:
Smp.: 299°C (Zers.);
LCMS-Retentionszeit 3,55 min, m/z 591 MH⁺,
NMR δ (CDCl₃ + 3 Tropfen DMSO-d₆) beinhaltet: 7,64 (1H, m), 7,27 (1H, dd, J = 10, 2 Hz), 7,13 (1H, dd, J 4, < 2 Hz), 6,54 (1H, dd, J 4,2 Hz), 6,38-6,31 (2H, m), 5,50 und 5,38 (1H, 2m), 5,08 (1H, m), 4,55 (1H, dt, J 9,4 Hz), 4,42-4,34 (2H, m), 4,10 (1H, m), 3,38 (1H, m), 1,56 (3H, s), 1,19 (3H, s), 1,04 (3H, d, J 7 Hz).
Beispiel 3: 6α,9α-Difluor-17α-[(3-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 3 wurde aus Zwischenstufe 2 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,61 min, m/z 591 MH⁺.
Beispiel 4: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(2-thiophenylcarbonyl)oxy]-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 4 wurde aus Zwischenstufe 3 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,52 min, m/z 607 MH⁺.
Beispiel 5: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(3-thiophenylcarbonyl)oxy]-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 5 wurde aus Zwischenstufe 4 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,69 min, m/z 607 MH⁺.
Beispiel 6: 17α-(Benzoyl)oxy-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 6 wurde aus Zwischenstufe 5 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,74 min, m/z 601 MH⁺.
Beispiel 7: 9α-Fluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16β-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 7 wurde aus Zwischenstufe 6 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,45 min, m/z 573 MH⁺.
Beispiel 8: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(5-methylthiophen-2-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 8 wurde aus Zwischenstufe 7 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,65 min, m/z 621 MH⁺.
Beispiel 9: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(isoxazol-5-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 9 wurde aus Zwischenstufe 8 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,39 min, m/z 592 MH⁺.
Beispiel 10: 17α-[(5-Chlorthiophen-2-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 10 wurde aus Zwischenstufe 9 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,77 min, m/z 641/643 MH⁺.
Beispiel 11: 6α,9α-Difluor-17α-[(3,5-Dimethylisoxazol-4-carbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 11 wurde aus Zwischenstufe 10 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
ICMS-Retentionszeit 3,52 min, m/z 620 MH⁺.
Beispiel 12: 17α-[(5-Chlor-4-methoxy-thiophen-3-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 12 wurde aus Zwischenstufe 11 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,89 min, m/z 671/673 MH⁺.
Beispiel 13: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(4-methyl-1,2,3-thiadiazol-5-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 13 wurde aus Zwischenstufe 12 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,54 min, m/z 623 MH⁺.
Beispiel 14: 17α-[(3-Bromthiophen-2-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 14 wurde aus Zwischenstufe 13 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,83 min, m/z 685/687 MH⁺.
Beispiel 15: 17α-[(2,5-Dichlorthiophen-3-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 15 wurde aus Zwischenstufe 14 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 4,08 min, m/z 675/677/679 MH⁺.
Beispiel 16: 17α-[(5-Bromfuran-2-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 16 wurde aus Zwischenstufe 15 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,77 min, m/z 669/671 MH⁺.
Beispiel 17: 6α,9α-Difluor-17α-[(2,5-dimethylfuran-3-carbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 17 wurde aus Zwischenstufe 16 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,82 min, m/z 619 MH⁺.
Beispiel 18: 17α-[(3-Chlorthiophen-2-carbonyl)oxy]-6α,9α-difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 18 wurde aus Zwischenstufe 17 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,80 min, m/z 641/643 MH⁺.
Beispiel 19: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(2-methylfuran-3-carbonyl)oxy]-3-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 19 wurde aus Zwischenstufe 18 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,66 min, m/z 605 MH⁺.
Beispiel 20: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(3-methylfuran-2-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 20 wurde aus Zwischenstufe 19 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,60 min, m/z 605 MH⁺.
Beispiel 21: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(1-methyl-1H-pyrrol-2-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 21 wurde aus Zwischenstufe 20 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,53 min, m/z 604 MH⁺.
Beispiel 22: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(1,3-thiazol-4-carbonyl)oxy]-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 22 wurde aus Zwischenstufe 21 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,26 min, m/z 608 MH⁺.
Beispiel 23: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(5-methylisoxazol-3-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 23 wurde aus Zwischenstufe 22 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,58 min, m/z 606 MH⁺.
Beispiel 24: 6α,9α-Difluor-17α-[(1,3-dimethyl-1H-pyrazol-5-carbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 24 wurde aus Zwischenstufe 23 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,40 min, m/z 619 MH⁺.
Beispiel 25: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(isoxazol-3-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 25 wurde aus Zwischenstufe 24 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,36 min, m/z 592 MH⁺.
Beispiel 26: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(4-methoxy-thiophen-3-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 26 wurde aus Zwischenstufe 25 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,54 min, m/z 637 MH⁺.
Beispiel 27: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α[(1,2,3-thiadiazol-4-carbonyl)oxy]-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 27 wurde aus Zwischenstufe 26 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,34 min, m/z 609 MH⁺.
Beispiel 28: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-17α-[(1,3-thiazol-5-carbonyl)oxy]-androsta-1,4-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 28 wurde aus Zwischenstufe 27 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,30 min, m/z 608 MH⁺.
Beispiel 29: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(isothiazol-3-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 29 wurde aus Zwischenstufe 28 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,38 min, m/z 608 MH⁺.
Beispiel 30: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-17α-[(isothiazol-5-carbonyl)oxy]-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 30 wurde aus Zwischenstufe 29 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,46 min, m/z 608 MH⁺.
Beispiel 31: 6α,9α-Difluor-11β-hydroxy-16α-methyl-17α-[(3-methylisoxazol-5-carbonyl)oxy]-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester
Beispiel 31 wurde aus Zwischenstufe 30 unter Verwendung eines Verfahrens hergestellt, das zu dem für Beispiel 1 beschriebenen analog ist.
LCMS-Retentionszeit 3,42 min, m/z 606 MH⁺.
Herstellung eines langwirkenden β₂-Adrenorezeptoranonisten
Beispiel X: 3-(4-{[6-({(2R)-2-Hydroxy-2-[4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)phenyl]ethyl}amino)-hexyl]oxy}butyl)benzolsulfonamidacetat
i) Di(tert-butyl)-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxoethylimidocarbonat
Cäsiumcarbonat (70,4 g) wurde zu einer gerührten Suspension aus 2-Brom-1-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)ethanon (Glaxo, DE 3513885 , 1985) (61,8 g) und Di-t-butyliminodicarboxylat (47,15 g) in Acetonitril (600 ml) unter Stickstoff zugesetzt. Nach ausgiebigen Rühren bei 21°C für 24 Stunden wurde das Gemisch mit Wasser (ca. 800 ml) verdünnt und das Produkt mit Diethylether (1 1, dann 200 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten wurden mit Salzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und auf ca. 400 ml aufkonzentriert. Die weißen Kristalle wurden durch Filtration gesammelt, mit Diethylether gewaschen und getrocknet, um die Titelverbindung (24,4 g) zu ergeben.
δ (CDCl₃): 7,78 (1H, dd, J 8, 2 Hz), 7,65 (1H, brs), 6,87 (1H, d, J 8 Hz), 4,97 (2H, s), 4,88 (2H, s), 1,56 (6H, s) und 1,48 (18H, s).
Weitere Aufreinigung der Stammflüssigkeit ergab zusätzliches Produkt (13,8 g). Eine dritte Ausbeute (7,1 g) wurde durch Chromatographie der Stammflüssigkeit auf Kieselsäuregel, Eindampfung des entsprechenden Eluats und Zerreiben mit Diethylether erhalten.
ii) tert-Butyl-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxoethylcarbamat
Trifluoressigsäure (92 ml) wurde zu einer gerührten Lösung aus Di(tert-butyl)2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxoethylimidocicarbonat (352,55 g) in Dichlormethan (3,6 l) bei 21°C zugegeben und die Reaktion für 1,5 h gerührt. Eine wäßrig NaOH-Lösung (1,75 l) wurde zugegeben und die Phasen wurden nach 10 min getrennt. Die organische Schicht wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und zu einem Öl eingedampft. Dieses wurde unter Hochvakuum über Nacht gelagert und mit Hexan:Ether (3:1) zerrieben, um das Rohprodukt (226,61 g) zu ergeben. Dieses wurde durch Umkristallisierung aus Diethylether aufgereinigt, um die Titelverbindung (122,78 g) zu ergeben. Weiteres Produkt (61,5 g) wurde aus der Stammflüssigkeit durch Eindampfen und Chromatographie auf einer Biotage unter Verwendung von 15% Ethylacetat in Hexan erhalten.
LCMS RT = 3,37 min.
iii) tert-Butyl(2R)-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-hydroxyethylcarbamat
Eine 2M Lösung aus Boran-Dimethylsulfid in THF (28 ml) wurde langsam zu einer 1M Lösung aus (R)-Tetrahydro-1-methyl-3,3-diphenyl-1H,3H-pyrrolo[1,2-c][1,3,2]oxazaborol in Toluol (56 ml) bei 0°C unter Stickstoff zugegeben. Eine Lösung aus tert-Butyl-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxoethylcarbamat (108,2 g) in THF (1,3 1) wurde langsam zugegeben, wobei die Temperatur unter 5°C gehalten wurde, gefolgt von einer 2M Lösung aus Boran-Dimethylsulfid in THF (252 ml) über 50 min. Nach 1 h wurde 2M HCl (170 ml) unter Kühlung zugegeben und das Gemisch wurde zwischen Ethylacetat und Wasser aufgeteilt. Die organische Schicht wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung und Salzlösung gewaschen und getrocknet (MgSO₄). Die Lösung wurde aufkonzentriert und das Produkt durch Chromatographie auf "Flash"-Kieselsäuregel (800 g), nacheinander eluiert mit Hexan:Ethylacetat (4:1, dann 3:1) aufgereinigt, um die Titelverbindung (93,3 g) zu ergeben.
LCMS RT = 3,31 min.
iv) (5R)-5-(2,2-Dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-1,3-oxazolidin-2-on
tert-Butyl-(2R)-2-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-hydroxyethylcarbamat (86,37 g) in DMF (600 ml) wurde zu einer gerührten Suspension aus Natriumhydrid (60%ige Öl-Dispersion, 11,9 g) in DMF (160 ml) unter Kühlung zugetropft, so daß die anfängliche Temperatur bei 0°C unter Stickstoff beibehalten wurde. Das Gemisch wurde bei 21°C für 2 h gerührt. Das Gemisch wurde erneut auf 0°C abgekühlt und 2M HCl (134 ml) wurde zugegeben. Das Gemisch wurde mit Wasser verdünnt und das Produkt wurde mit Ethylacetat zweimal extrahiert. Die Lösung wurde mit Salzlösung zweimal gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und eingedampft, um die Titelverbindung (63,55 g) zu ergeben.
LCMS RT = 2,66 min.
v) 6-Bromhexylbut-3-inylether
3-Butin-1-ol (42,4 ml) wurde ausgiebig mit 1,6-Dibromhexan (260 ml) und Tetrabutylammoniumbisulfat (2,4 g) in 50% wäßriger Natriumhydroxid-Lösung (200 ml) unter Stickstoff für 3 Tage verrührt. Wasser (ca. 700 ml) wurde zugegeben und die organische Schicht wurde abgetrennt. Die wäßrige Schicht wurde zweimal mit Dichlormethan (2 × 100 ml) extrahiert, und die vereinigten organischen Schichten wurden mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und aufkonzentriert. Der Rückstand in Petrolether (Sip. 40–60°C) wurde auf eine Kieselsäuregel-Säule (1,5 kg) geladen, und die Säule wurde mit Petrolether (Sip. 40–60°C), dann mit 10% Diethylether in Petrolether (Sip. 40–60°C) eluiert, um die Titelverbindung (103,3 g) zu ergeben.
δ (CDCl₃): 3,56 (2H, t, J 7 Hz), 3,47 (2H, t, J 7 Hz), 3,42 (2H, t, J 7 Hz), 2,45 (2H, m), 1,99 (1H, t, J 2 Hz), 1,87 (2H, m), 1,60 (2H, m) und 1,50 bis 1,33 (4H, m).
vi) (5R)-3-[6-(But-3-inyloxy)hexyl)-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-1,3-oxazolidin-2-on
(5R)-5-(2,2-Dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-1,3-oxazolidin-2-on (10 g) in DMF (100 ml) wurde zu einer gerührten Suspension aus Natriumhydrid (60%ige Öl-Dispersion, 2,33 g) in DMF (50 ml) unter Rühren und unter Stickstoff und unter Beibehaltung der anfänglichen Temperatur bei 0°C zugetropft. Das Rühren wurde bei 0–5°C für 1 h fortgesetzt. Das Gemisch wurde erneut auf 0°C abgekühlt und eine Lösung aus 6-Bromhexylbut-3-inylether (14,7 g) in DMF (50 ml) wurde über 1 min zugesetzt. Das Gemisch wurde dann bei 20–30°C für 2 h gerührt. 2M HCl (9 ml) wurde zugegeben und das Gemisch wurde zwischen Wasser und Diethylether aufgeteilt. Die wäßrige Schicht wurde mit mehr Diethylether extrahiert und die vereinigten organischen Schichten wurden zweimal mit Salzlösung gewaschen. Nach Trocknung (MgSO₄) wurde die Lösung aufkonzentriert und auf eine Säule aus Kieselsäuregel (600 g) geladen, eingestellt in Diethylether:Petrolether (Sdp. 40–60°C) (1:2). Die Säule wurde nacheinander mit diesem Gemisch, dann (1:1) und dann mit Diethylether eluiert, um die Titelverbindung (13,88 g) zu ergeben.
LCMS RT = 3,45 min.
vii) 3-[4-({6-[(5R)-5-(2,2-Dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]hexyl}oxy)but-1-inyl]benzolsulfonamid
(5R)-3-[6-(But-3-inyloxy)hexyl-5-(2,2-dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-1,3-oxazolidin-2-on (1,79 g) wurde mit 3-Iodbenzolsulfonamid (1,4 g) in Acetonitril:Triethylamin (1:1, 42 ml) unter Stickstoff für 10 min gerührt. Kupferiodid (0,083 g) und Dichlorbis(triphenylphosphin)palladium (0,129 g) wurden zugegeben und das Gemisch wurde für 17 h unter Stickstoff bei 21°C gerührt. Das Gemisch wurde auf Trockenheit eingedampft und der Rückstand auf Kieselsäuregel (250 g) in 30% Ethylacetat:Petrolether (Sdp. 40–60°), dann 50%, dann 75% und schließlich mit Ethylacetat chromatographisch aufgetrennt, um die Titelverbindung (2,35 g) zu ergeben.
LCMS RT = 3,44 min.
viii) 3-[4-({6-[(5R)-5-(2,2-Dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]hexyl}oxy)butyl]benzolsulfonamid
3-[4-({6-[(5R)-5-(2,2-Dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]hexyl}oxy)but-1-inyl]benzolsulfonamid (2,35 g) wurde mit Platinumoxid (0,3 g) in THF (30 ml) unter Wasserstoff für 2 h gerührt. Der Katalysator wurde durch Filtration unter Verwendung einer Filterhilfe entfernt, und der Filterkuchen wurde mit Ethylacetat ausgelaugt. Die vereinigten Filtrate wurden durch Kieselsäuregel (200 g) in Ethylacetat geleitet, und das Eluat wurde eingedampft, um die Titelverbindung (2,32 g) zu ergeben.
LCMS RT = 3,49 min.
ix) 3-{4-[(6-{[(2R)-2-(2,2-Dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-hydroxyethyl]amino}hexyl)oxy]butyl}benzolsulfonamid
3-[4-({6-[(5R)-5-(2,2-Dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]hexyl}oxy)butyl]benzolsulfonamid (0,43 g) wurde in THF (10 ml) gerührt, während es mit einem heftigen Stickstoffstrom für 5 min durchspült wurde. Kaliumtrimethylsilanoat (0,43 g) wurde zugegeben, und das Gemisch wurde bei 70°C unter Stickstoff für 2,5 h gerührt. Das Gemisch wurde zwischen Dichlormethan und Phosphatpuffer, pH 6,4, aufgeteilt, und die wäßrige Schicht wurde mit mehr Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten wurden mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und aufkonzentriert. Der Rückstand wurde auf Kieselsäuregel (60 g), eluiert nacheinander mit Ethylacetat:Petrolether (Sip. 40–60°C) (1:1), Ethylacetat, 10% dann 20% Methanol in Ethylacetat, aufgereinigt, um die Titelverbindung (0,286 g) zu ergeben.
LCMS RT = 2,56 min.
x) 3-(4-{[6-({(2R)-2-Hydroxy-2-[4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)phenyl]ethyl}amino)hexyl]oxy}butyl)benzolsulfonamidacetat
3-{4-[(6-{[(2R)-2-(2,2-Dimethyl-4H-1,3-benzodioxin-6-yl)-2-hydroxyethyl]amino}hexyl)oxy]butyl}benzolsulfonamid 0,283 g) wurde mit Essigsäure (8 ml) und Wasser (4 ml) bei 70°C für 35 min gerührt, bevor es bis auf Trockenheit eingedampft wurde. Der Rückstand wurde zweimal mit Toluol rückverdampft, um die Titelverbindung (0,318 g) zu ergeben.
LCMS RT = 2,34 min, ES+ve 495 (MH)⁺.
Pharmakologische Aktivität
pharmakologische in vitro Aktivität
Die pharmakologische Aktivität wurde in einem funktionellen In-vitro-Test für Glucocorticoid-Agonistenaktivität bewertet, der im allgemeinen für eine entzündungshemmende oder antiallergische Aktivität in vivo vorhersagend ist.
Dieser Funktionstest wurde auf dem basiert, der durch K.P. Ray et al., Biochem. J. (1997), 328, 707–715 beschrieben wurde. A549-Zellen, stabil mit einem Reportergen, enthaltend das NF-κB-responsive Element des ELAN-Gen-Promotors verknüpft an eine sPAP (sekretierte alkalische Phosphatase), transfiziert, wurden mit Testverbindungen bei entsprechenden Dosen für 1 Stunde bei 37°C behandelt. Die Zellen wurden dann mit dem Tumor-Nekrose-Faktor (TNF, 10 ng/ml) 16 Stunden stimuliert, wobei bei diesem Zeitpunkt die Menge der gebildeten alkalischen Phosphatase durch einen standardmäßigen Colorimetrie-Test gemessen wurden. Die Dosis-Reaktionskurven wurden erstellt, von denen EC₅₀-Wert bestimmt wurden.
In diesem Test zeigten die Verbindungen der Beispiele 1 bis 10, 13, 14 und 16 bis 31 einen EC₅₀-Wert von < 20 nM. In diesem Test zeigten die Verbindungen der Beispiele 11, 12 und 15 EC₅₀-Werte von 28, 40 bzw. 16 nM. Die Verbindung des Beispiels 1 war signifikant wirksamer (EC₅₀, 0,95 nM) in diesem Test als das kürzlich beschriebene 17α-Propionatester-Analog (Beispiel 2, WO 97/24365 ) (EC₅₀ 2,7 nM).
pharmakologische in vivo Aktivität
Die pharmakologische Aktivität wurde in vivo unter Verwendung einer durch Oxazolon-induzierten Kontakt-Hypersensitivitäts-Modell in Balb/c-Mäusen beurteilt, der zu dem durch Cumberbatch et al., Immunology (2002), 105, 466–477, beschriebenen ähnlich ist.
Weibliche Balb/c-Mäuse (18–20 g) wurden durch die Zugabe von 50 μl von 2,5% Oxazolon in Aceton:Olivenöl (4:1), aufgetragen auf die rasierte rechte Körperseite, gegen Oxazolon empfindlich gemacht. Kontrollmäuse (nicht empfindlich gemacht) wurden mit Aceton:Olivenöl behandelt. 5 Tage später wurden allen Mäuse durch die Zugabe von 25 μl an 0,25% Oxazolon in Aceton:Olivenöl (4:1), aufgetragen auf die dorsale Oberfläche beider Ohren unter Isofluoran-Anästhesie, exponiert. 10 μl einer Lösung der Testverbindung bei der entsprechenden Konzentration oder Träger (absolutes Ethanol) wurden auf die dorsale Oberfläche des rechten Ohrs 1 Stunde und 3 Stunden nach Oxazolonexposition unter Isoflouran-Anästhesie aufgetragen. Das linke Ohr blieb unbehandelt, um die Bewertung der systemischen Exposition zu beurteilen. Messungen der Ohrendicke wurden unter Verwendung eines Ingenieur-Mikrometers vor der Zugabe des Steroids und erneut 24 Stunden nach der Oxazolon-Exposition durchgeführt. Die Resultate wurden als der Prozentwert der Inhibition der Ohrenschwellung ausgedrückt, von dem EC₅₀-Werte berechnet wurden.
In diesem Modell zeigte die Verbindung des Beispiels 1 ähnliche Wirksamkeit (EC₅₀ 0,3 μg) zu Betamethasonvalerat und war signifikant wirksamer als das entsprechend 17α-Propionatester (Beispiel 2, WO 97/24365 ) (EC₅₀ 1 μg).
Systemische Steroidwirkungen wurden in einem Rattenmodell der Thymus-Rückbildung beurteilt. Männliche CD-Ratten wurden täglich für 3 Tage intratracheal mit Salzlösungsträger (20 μl Tween 80 in 100 ml Salzlösung) oder mit einer Suspension der Testverbindung (Dosisvolumen 200 μl) behandelt. Am Tag 4 wurden die Tiere ausgelesen und der Thymus entfernt und gewogen.
In diesem Modell zeigte die Verbindung von Beispiel 1 keine Wirkung auf das Thymus-Gewicht wenn bei 1000 μg/Tag dosierte, während in der gleichen Untersuchung eine 100 mg/Tag-Dosis von Budesonid zu einer 65%igen Reduktion des Thymus-Gewichts führte.
Hydrolyse im Humanplasma
Verbindungen wurden bei 37°C in Humanplasma bei einer Konzentration von 5 μg/ml inkubiert. Teilproben wurden zum Zeitpunkt 0 und alle 30 Sekunden für die nächsten 10 Minuten genommen und wurden durch Proteinpräzipitation extrahiert und durch LC-MS/MS analysiert. Die Verbindung von Beispiel 1 wurde schneller hydrolysiert mit einer Halbwertszeit von 1,2 min.

Claims

Verbindung der Formel (I):
worin R₁ O, S oder NH darstellt; R₂ -C(=O)-Aryl oder -C(=O)-Heteroaryl darstellt; R₃ Wasserstoff, Methyl (das entweder in α- oder β-Konfiguration vorliegen kann) oder Methylen darstellt; R₄ und R₅ gleich oder verschieden sind und jedes Wasserstoff oder Halogen darstellt; und ----- eine Einfach- oder Doppelbindung darstellt; und Salze und Solvate davon.
Verbindung gemäß Anspruch 1, worin R₁ O oder S darstellt.
Verbindung gemäß Anspruch 2, worin R₁ S darstellt.
Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3, worin R₁ an das alpha-Kohlenstoffatom des Lacton-Restes gebunden ist.
Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 4, worin R₂ -C(=O)-Heteroaryl darstellt.
Verbindung gemäß Anspruch 5, worin Heteroaryl einen 5-gliedrigen heterocyclischen aromatischen Ring darstellt, der 3 Heteroatome enthält, die ausgewählt sind aus O, N und S, die gegebenenfalls substituiert sein können.
Verbindung gemäß Anspruch 5, worin R₂ -C(=O)-Furanyl, -C(=O)-Thiophenyl oder -C(=O)-Thiophenyl darstellt.
Verbindung gemäß Anspruch 7, worin R₂ -C(=O)-Furanyl darstellt.
Verbindung gemäß Anspruch 8, worin R₂ -C(=O)-2-Furanyl darstellt.
Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 9, worin R₃ Methyl ist.
Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 10, worin R₄ und R₅ gleich oder verschieden sind und jedes Wasserstoff, Fluor oder Chlor darstellt.
Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 11, worin R₄ und R₅ gleich oder verschieden sind und jedes Wasserstoff oder Fluor darstellt.
Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 12, worin beide R₄ und R₅ Fluor sind.
Verbindung gemäß Anspruch 1, worin R₁ S ist; R₂ -C(=O)-2-Furanyl ist; R₃ Methyl ist; R₄ und R₅ gleich oder verschieden sind und jeweils Wasserstoff oder Fluor darstellen; und ----- eine Einfach- oder eine Doppelbindung darstellt.
Verbindung gemäß Anspruch 14, worin R₄ und R₅ jeweils Fluor sind.
Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 15, worin ----- eine Doppelbindung darstellt.
Verbindung der Formel (I) gemäß Anspruch 1, die 6α,9α-Difluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3-yl)ester oder ein Solvat davon ist.
Verbindung der Formel (I) gemäß Anspruch 1, die 6α,9α-Difluor-17α-[(2-furanylcarbonyl)oxy]-11β-hydroxy-16α-methyl-3-oxo-androsta-1,4-dien-17β-thiocarbonsäure-S-(2-oxo-tetrahydrofuran-3S-yl)ester oder ein Solvat davon ist.
Verbindung der Formel (I) gemäß einem der Ansprüche 1 bis 18 oder ein physiologisch annehmbares Salz oder Solvat davon zur Verwendung in der Veterinär- oder Humanmedizin.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) gemäß einem der Ansprüche 1 bis 18 oder eines physiologisch annehmbaren Salzes oder Solvats davon in der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von entzündlichen und/oder allergischen Zuständen.
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung der Formel (I) gemäß einem der Ansprüche 1 bis 18 oder ein physiologisch annehmbares Salz oder Solvat davon zusammen, falls erwünscht, im Gemisch mit einem oder mehreren physiologisch annehmbaren Verdünnungsstoffen oder Trägern umfaßt.
Pharmazeutische Aerosol-Formulierung, die eine Verbindung der Formel (I) gemäß einem der Ansprüche 1 bis 18 oder ein physiologisch annehmbares Salz oder Solvat davon und einen Fluorkohlenstoff oder Wasserstoff-haltigen Chlorfluorkohlenstoff als Treibmittel umfassen, gegebenenfalls in Kombination mit einem Tensid und/oder einem Co-Lösungsmittel.
Pharmazeutische Zusammensetzung gemäß Anspruch 21, die ferner ein anderes therapeutisch wirksames Mittel umfaßt.
Pharmazeutische Zusammensetzung gemäß Anspruch 23, worin das andere therapeutisch wirksame Mittel ein lang wirkender β₂-Adrenorezeptoragonist ist.
Pharmazeutische Zusammensetzung gemäß Anspruch 24, worin der β₂-Adrenorezeptoragonist eine Verbindung der Formel (X):
oder ein Salz oder Solvat davon ist, worin: m eine ganze Zahl von 2 bis 8 ist; n eine ganze Zahl von 3 bis 11 ist, mit der Maßgabe, daß m + n 5 bis 19 ist, R¹¹ -XSO₂NR¹⁶R¹⁷ ist, worin X -(CH₂)_p- oder C_2-6-Alkenylen ist; R¹⁶ und R¹⁷ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C_3-7-Cycloalkyl, C(O)NR¹⁸R¹⁹, Phenyl und Phenyl(C_1-4-alkyl)-, oder R¹⁶ und R¹⁷ zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen Stickstoff-haltigen Ring mit 5, 6 oder 7 Gliedern bilden, und R¹⁶ und R¹⁷ jeweils gegebenenfalls mit einer oder zwei Gruppen substituiert sind, die ausgewählt ist/sind aus Halogen, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Halogenalkyl, C_1-6-Alkoxy, Hydroxy-substituiertem C_1-6-Alkoxy, -CO₂R¹⁸, -SO₂NR¹⁸R¹⁹, -CONR¹⁸R¹⁹, -NR¹⁸C(O)R¹⁹ oder einem Heterocylyl-Ring mit 5, 6 oder 7 Gliedern; R¹⁸ und R¹⁹ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C_3-6-Cycloalkyl, Phenyl und Phenyl(C_1-4-alkyl)-; und p eine ganze Zahl von 0 bis 6 ist, vorzugsweise von 0 bis 4; R¹² und R¹³ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy, Halogen, Phenyl und C_1-6-Halogenalkyl; und R¹⁴ und R¹⁵ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff und C_1-4-Alkyl, mit der Maßgabe, daß die Gesamtzahl der Kohlenstoffatome in R¹⁴ und R¹⁵ nicht mehr als 4 ist.
Pharmazeutische Zusammensetzung gemäß Anspruch 25, worin die Verbindung der Formel (X) 3-(4-{[6-({(2R)-2-Hydroxy-2-[4-hydroxy-3-(hydroxymethyl)phenyl]ethyl}amino)hexyl]oxy}butyl)benzolsulfonamid oder ein Salz oder Solvat davon ist.
Pharmazeutische Zusammensetzung gemäß einem der Ansprüche 24 bis 26, die für eine einmal tägliche Verabreichung geeignet ist.
Verfahren zum Herstellen einer Verbindung der Formel (I) gemäß Anspruch 1, wobei das Verfahren folgendes umfaßt: (A) Behandeln einer Verbindung der Formel (II):
worin R₂, R₃, R₄, R₅ und ----- wie in Anspruch 1 definiert sind und X OH, SH oder ein aktiviertes Derivat davon darstellt, mit einer Verbindung der Formel (III):
oder Salzen davon, worin Z OH, NH₂ oder SH darstellt; oder (B) Behandeln einer Verbindung der Formel (II)
worin R₂, R₃, R₄, R₅ und ----- wie in Anspruch 1 definiert sind und X OH oder SH oder ihre entsprechenden Salze darstellt, mit einer Verbindung der Formel (IV) oder Formel (V)
worin Q eine geeignete Abgangsgruppe darstellt; oder (C) Interkonversion einer anderen Verbindung der Formel (I); oder (D) Unterziehen eines geschützten Derivats einer Verbindung der Formel (I) einer Reaktion, um die vorliegende(n) Schutzgruppe oder -gruppen zu entfernen.