DE60214701T2

DE60214701T2 - Inhibitoren von c-jun-n-terminalen-kinasen (jnk) und anderen proteinkinasen

Info

Publication number: DE60214701T2
Application number: DE60214701T
Authority: DE
Inventors: Jingrong Newton CAO; Jeremy Burlington GREEN; Young-Choon Belle Mead MOON; Jian Newton WANG; Mark Acton LEDEBOER; Edmund South Boston HARRINGTON; Huai Harvard GAO
Original assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2001-04-13
Filing date: 2002-04-10
Publication date: 2007-09-13
Anticipated expiration: 2022-04-11
Also published as: JP2004535381A; CA2443487A1; ATE339416T1; AR035824A1; ES2271322T3; US20030096816A1; US6642227B2; AU2002338642A1; EP1389206B1; US20040023963A1; WO2002083667A3; TWI235752B; WO2002083667A2; EP1389206A2; MXPA03009378A; DE60214701D1; US7084159B2

Description

Technisches Gebiet der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft Inhibitoren von Proteinkinase, insbesondere c-Jun N-terminale Kinasen (JNK) und die Src-Familie von Kinasen, einschließlich Lck, welche Mitglieder der Mitogen-aktivierten Protein (MAP)-Kinase-Familie sind. JNK, Src und Lck wurden mit einer Reihe von unterschiedlichen menschlichen Krankheiten in Zusammenhang gebracht. Die Erfindung bietet ebenfalls pharmazeutische Zusammensetzungen, die die Inhibitoren der Erfindung aufweisen, und Verfahren zum Ausnutzen dieser Zusammensetzungen bei der Behandlung und Verhinderung von verschiedenen Krankheiten, in welchen JNK, Src und Lck eine Rolle spielen.
Hintergrund der Erfindung
Säugetierzellen reagieren auf extrazelluläre Stimuli durch das Aktivieren von Signalisierungskaskaden, die durch Mitglieder der Mitogen-aktivierten Protein (MAP) Kinase-Familie vermittelt werden, zu welchen die extrazellulären Signal-regulierten Kinasen (ERKs), die p38 MAP-Kinasen und die c-Jun N-terminalen Kinasen (JNKs) zählen. MAP Kinasen (MAPKs) werden durch eine Vielzahl von Signalen, einschließlich Wachstumsfaktoren, Zytokine, UV-Strahlung, und Stress-induzierende Mittel, aktiviert. MAPKs sind Serin/Threonin-Kinasen und ihre Aktivierung erfolgt durch die duale Phosphorylierung von Threonin und Tyrosin bei dem Thr-X-Tyr-Segment in der Aktivierungsschleife. MAPKs phosphorylieren verschiedene Substrate, einschließlich Transkriptionsfaktoren, die wiederum die Expression von spezifischen Gensätzen regulieren und somit eine spezifische Reaktion auf den Stimulus vermitteln.
Ein besonders interessante Kinase-Familie sind die c-Jun-NH₂-terminalen Proteinkinasen, die auch als JNKs bekannt sind. Drei unterschiedliche Gene, JNK1, JNK2, JNK3 wurden identifiziert und zumindest zehn unterschiedliche Spleiß-Isoformen von JNKs existieren in Säugetierzellen [Gupta et al., EMBO J., 15:2760-70 (1996)]. Mitglieder der JNK-Familie werden durch proinflammatorische Zytokine, wie Tumornekrosefaktor-α (TNFα) und Interleukin-1β (IL-1β), sowie durch umweltbedingten Stress, einschließlich Anisomycin, UV-Bestrahlung, Hypoxie und osmotischen Schock aktiviert [Minden et al., Biochemica et Biophysica Acta, 1333:F85-F104 (1997)].
Zu den stromabwärtigen Substraten von JNKs zählen die Transkriptionsfaktoren c-Jun, ATF-2, Elk1, p53 und ein Zelltod-Domänprotein (DENN) [Zhang et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95:2586-91 (1998)]. Jede JNK Isoform bindet diese Substrate mit unterschiedlichen Affinitäten, was auf eine Regulation von Signalwegen durch Substratspezifität von unterschiedlichen JNKs in vivo hinweist (Gupta et al., supra).
JNKs, zusammen mit anderen MAPKs, wurden mit einer Rolle beim Vermitteln einer zellulären Reaktion zu Krebs, Thrombin-induzierter Blutplättchenaggregation, Immundefizienzerkrankungen, Autoimmunerkrankungen, Zelltod, Allergien, Osteoporose und Herzkrankheiten in Verbindung gebracht. Die therapeutischen Ziele in Bezug auf die Aktivierung des JNK-Weges umfassen chronische myelogene Leukämie (CML), Gelenksrheumatismus, Asthma, Osteoarthritis, Ischämie, Krebs und neurodegenerative Krankheiten.
Mehrere Berichte haben die Wichtigkeit der JNK Aktivierung, die mit einer Leberkrankheit oder Vorfällen von hepatischer Ischämie assoziiert sind, detailliert [Nat. Genet. 21:326-9 (1999); FEBS Lett. 420:201-4 (1997); J. Clin. Invest. 102:1942-50 (1998); Hepatology 28:1022-30 (1998)]. Deshalb können JNK-Inhibitoren nützlich sein, um verschiedene hepatische Krankheiten zu behandeln.
Eine Rolle für JNK in kardiovaskulärer Krankheit, wie Myocardinfarkt oder kongestive Herzinsuffizienz, wurde ebenfalls berichtet, da für JNK gezeigt wurde, dass es hypertrophische Reaktionen auf verschiedene Formen von Herzstress vermittelt (Circ. Res. 83:167-78 (1998); Circulation 97:1731-7 (1998); J. Biol. Chem. 272:28050-6 (1997); Circ. Res. 79:162-73 (1996); Circ. Res. 78:947-53 (1996); J. Clin. Invest. 97:508-14 (1996)].
Es wurde demonstriert, dass die JNK Kaskade ebenfalls eine Rolle in der T-Zellen-Aktivierung, einschließlich der Aktivierung des IL-2 Promotors spielt. Somit können Inhibitoren von JNK einen therapeutischen Nutzen beim Ändern pathologischer Immunreaktionen haben [J. Immunol. 162:3176-87 (1999); Eur. J. Immunol. 28:3867-77 (1998); J. Exp. Med. 186:941-53 (1997); Eur. J. Immunol. 26:989-67 (1996)].
Es wurde ebenfalls eine Rolle für die JNK Aktivierung in verschiedenen Krebsen etabliert, was auf eine potentielle Verwendung von JNK Inhibitoren bei Krebs hinweist. Zum Beispiel ist die konstitutiv-aktivierte JNK mit HTLV-1-vermittleter Tumorigenese assoziiert [Oncogene 13:135-42 (1996)]. JNK kann eine Rolle bei dem Kaposi-Sarkoma (KS) spielen, da angenommen wird, dass die proliferativen Wirkungen von bFGF und OSM auf KS Zellen durch ihre Aktivierung des JNK-Signalwegs vermittelt werden [J. Clin. Invest. 99:1798-804 (1997)]. Andere proliferative Wirkungen von anderen Zytokinen, die in die KS Proliferation eingebunden sind, wie vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor (VEGF), IL-6 und TNFα, können ebenfalls durch JNK vermittelt sein. Zusätzlich stimmt die Regulation des c-jun Gens in p210 BCR-ABL transformierten Zellen mit der Aktivität von JNK ein, was auf eine Rolle für JNK Inhibitoren bei der Behandlung für chronische myelogene Leukämie (CML) hinweist [Blood 92:2450-60 (1998)].
JNK1 und JNK2 werden in einer Vielzahl von Geweben umfangreich exprimiert. Im Gegensatz dazu wird JNK3 im Gehirn und zu einem geringer Grad in dem Herz und den Hoden selektiv exprimiert [Gupta et al., supra; Mohit et al., Neuron 14:67-78 (1995); Martin et al., Brain Res. Mol. Brain Res. 35:47-57 (1996)]. JNK3 wurde mit der neuronalen Apoptose, die durch Kainsäure induziert wird, in Zusammenhang gebracht, was auf eine Rolle von JNK in der Pathogenese von Glutamat-Neurotoxizität hinweist. In einem menschlichen Hirn eines Erwachsenen ist die JNK3 Expression auf eine Subpopulation von pyramidenförmigen Neuronen in den CA1, CA4 und Subiculum-Regionen des Hippokampus und den Schichten 3 und 5 des Neocortex örtlich begrenzt [Mohit er al., supra]. Die CA1 Neuronen von Patienten mit akuter Hypoxie zeigten eine starke Kern-JNK3-Immunreaktivität im Vergleich zu der minimalen, diffusen cytoplasmatischen Färbung der hippokampalen Neuronen von Hirngeweben von normalen Patienten [Zhang et al., supra]. Somit scheint JNK3 in hypoxische und ischämische Schädigung von CA1 Neuronen in dem Hippokampus eingebunden zu sein.
Zusätzlich ist JNK3 immunochemisch mit Neuronen lokalisiert, die in der Alzheimer Krankheit gefährdet sind [Mohit et al., supra]. Störungen des JNK3 Gens verursachte eine Resistenz von Mäusen zu dem exzitotoxischen Glutamatrezeptor-Antagonist Kainsäure, einschließlich der Wirkungen von Anfallsaktivität, AP-1 transkripionale Aktivität und Apoptose von hippokampalen Neuronen, was darauf hinweist, dass der JNK3 Signalweg eine wichtige Komponente in der Pathogenese von Glutamat-Neurotoxizität ist (Yang et al., Nature, 389:865-870 (1997)].
Basierend auf diesen Ergebnissen, wurde die JNK Signalisierung, insbesondere die von JNK3, in die Bereiche der Apoptose-getriebenen neurodegenerativen Krankheiten, wie Alzheimer Krankheit, Parkinson Krankheit, ALS (amyotrophe Lateralsklerose), Epilepsie und Anfall, Huntington Krankheit, traumatische Hirnverletzungen, sowie Ischämie und hämorrhagischer Hirnschlag, einbezogen.
WO 01/12621 offenbart Verbindungen, die Proteinkinasen inhibieren, insbesondere die c-Jun-N-terminate Kinasen (JNK) inhibieren, und die Herstellung, Beimischung in pharmazeutische Zusammensetzung und Verwendung dieser Verbindungen.
Die Src-Familie von Kinasen wird mit Krebs, Immunsystem-Fehlfunktion, und Knochenumbau-Krankheiten in Zusammenhang gebracht. Für allgemeine Überblicke siehe Thomas und Brugge, Annu. Rev. Cell Dev. Biol. (1997) 13, 513; Lawrence und Niu, Pharmacol. Ther. (1998) 77, 81; Tatosyan und Mizenina, Biochemistry (Moskau) (2000) 65, 49; Boschelli et al., Drugs of the Future 2000, 25(7), 717, (2000).
Zu Mitgliedern der Src-Familie zählen die folgenden acht Kinasen in Säugetieren: Src, Fyn, Yes, Fgr, Lyn, Hck, Lck, blk und Yrc. Diese sind Nichtrezeptor-Proteinkinasen, deren Molekularmassen von 52 bis 62 kD reichen. Alle sind durch eine gemeinsame Strukturorganisation charakterisiert, die aus sechs unterschiedlichen funktionellen Domänen aufgebaut ist: Src Homologiedomäne 4 (SH4), eine einzigartige Domäne, SH3 Domäne, SH2 Domäne, eine katalytische domäne (SH1), und eine C-terminale regulatorische Region. Tatosyan et al. Biochemistry (Moskau) 65, 49-58 (2000).
Basierend auf veröffentlichten Studien werden Src-Kinasen als potentielle therapeutische Ziele für verschiedene menschliche Krankheiten betrachtet. Mäuse, die für Src defizient sind, entwickeln Osteopetrosis, oder Knochenanhäufung, aufgrund der verminderten Knochenresorption durch Osteoklasten. Diese weist darauf hin, dass Osteoporosis, die von einer abnormal hohen Knochenresorption herrührt, durch Inhibieren von Src behandelt werden kann. Soriano et al., Cell, 69, 551 (1992) und Soriano et al., Cell, 64, 693 (1991).
Die Unterdrückung der arthritischen Knochendestruktion wurde durch die Überexpression von CSK in rheumatoiden Synoviozyten und Osteoklasten erreicht. Takayanagi et al., J. Clin. Invest., 104, 137 (1999). CSK, oder C-terminale Src-Kinase, phosphoryliert und inhibiert dadurch die Src katalytische Aktivität. Dies impliziert, dass die Src Inhibierung die Gelenkszerstörung verhindern kann, die in Patienten, die an Gelenksrheumatismus leiden, charakteristisch ist. Boschelli et al., Drugs of the Future 2000, 25(7), 717, (2000).
Src spielt ebenfalls eine Rolle bei der Replikaton des Hepatitis B-Virus. Der viral kodierte Transkriptionsfaktor HBx aktiviert Src in einem Schritt, der für die Vermehrung des Virus benötigt ist. Klein et al., EMBO J., 18, 5019, (1999) und Klein et al., Mol. Cell. Biol., 17, 6427 (1997).
Eine Vielzahl von Studien haben die Src Expression mit Krebs, wie Kolon, Brust, hepatischer und pankreatischer Krebs, bestimmten B-Zell-Leukämien und Lymphomas, in Verbindung gebracht. Talamonti et al., J. Clin. Invest., 91, 53 (1993); Lutz et al, Biochem. Biophys. Res. 243, 503 (1998); Rosen et al., J. Biol. Chem., 261, 13754 (1986); Bolen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 2251 (1987); Masaki et al., Hepatology, 27, 1257 (1998); Biscardi et al., Adv. Cancer Res., 76, 61 (1999); Lynch et al., Leukemia, 7, 1416 (1993). Weiters wurde gezeigt, dass in Eierstock- und Kolon-Tumorzellen exprimierte Antisense-Src das Tumorwachstum inhibieren kann. Wiener et al., (Clin. Cancer Res., 5, 2164 (1999); Staley et al., Cell Growth Diff., 8, 269 (1997).
Andere Src-Familie-Kinasen sind auch potenzielle theraupeutische Ziele. Lck spielt einer Rolle bei der T-Zellen-Signalisierung. Mäuse, denen das Lck-Gen fehlt, haben eine niedere Fähigkeit, Thymozyten zu entwicklen. Die Lck Funktion als ein positiver Aktivator der T-Zellen-Signalisierung weist darauf hin, dass Lck Inhibitoren zum Behandeln von Autoimmunkrankheit, wie Gelenksrheumatismus, nützlich sind. Molina et al., Nature, 357, 161 (1992). Hck, Fgr, und Lyn wurden als wichtige Mediatoren der Integrin-Signalisierung in myeloiden Leukozyten identifziert. Lowell et al., J. Leukoc. Biol., 65, 313 (1999). Inhibitoren dieser Kinasemediatoren können deshalb zum Behandeln von Entzündung nützlich sein. Boschelli et al., Drugs of the Future 2000, 25(7), 717, (2000).
Dementsprechend gibt es nach wie vor einen großen Bedarf an dem Entwickeln von neuen potenten Inhibitoren von JNKs und Src-Familie Kinasen, die für das Behandeln verschiedener Zustände, die mit der JNK- und Src-Aktivierung assoziiert sind, nützlich sind.
Zusammenfassung der Erfindung
Die vorliegende Erfindung bietet Verbindungen der Formel I:
wobei R¹, R², R³, R⁴ und R^a wie unten beschrieben sind.
Die vorliegende Erfindung bietet auch eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung der Formel I enthält.
Die Verbindungen und pharmazeutischen Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung sind als Inhibitoren von c-Jun-N-terminale Kinasen (JNK) und Src-Familie-Kinasen, einschließlich Src und Lck, nützlich. Sie sind somit auch in Verfahren zum Behandeln oder Verhindern einer Vielzahl von Krankheiten nützlich, wie Herzkrankheiten, Immundefizienzerkrankungen, entzündliche Krankheiten, allergische Krankheiten, Autoimmunerkrankungen, destruktivve Knochenkrankheiten, wie Osteoporose, proliferative Krankheiten, infektiöse Krankheiten und virale Krankheiten. Die Zusammensetzungen sind ebenfalls nützlich in Verfahren zum Verhindern des Zelltods und Hyperplasie und können deshalb verwendet werden, um Reperfusion/Ischämie bei Anfall, Herzattacke, und Organ-Hypoxie zu behandeln oder verhindern. Die Zusammensetzungen sind ebenfalls in Verfahren zum Verhindern der Thrombin-induzierten Blutplättchen-Aggregation nützlich. Die Zusammensetzungen sind besonders für Krankheiten nützlich, wie chronische myelogene Leukämie (CML), Gelenksrheumatismus, Asthma, Osteoarthritis, Ischämie, Krebs, Leberkrankheiten, einschließlich hepatische Ischämie, Herzkrankheiten, wie Myocardinfarkt und kongestive Herzinsuffizienz, pathologische Immunzustände, die die T-Zellen Aktivierung beinhaltet, und neurodegenerative Krankheiten.
Detaillierte Beschreibung der Ausführungsform
Die vorliegende Erfindung bietet einer Verbindung der Formel I:
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon, worin
A und B unabhängig voneinander ausgewählt sind aus N oder CH;
R¹ und R² unabhängig voneinander ausgewählt sind aus Halogen CN, NO₂, N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵;
R³ ausgewählt ist aus einem 3-6 gliedrigen carbozyklischen oder heterozyklischen Ring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, einem Phenyl oder einem 5-6 gliedrigen Heteroarylring mit einem bis drei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei dieser Phenyl- oder Heteroarylring gegebenenfalls mit einem (T)_n-Ar oder einem bis zwei R⁷ substituiert ist;
jedes n unabhängig ausgewählt ist aus null oder eins;
T eine C₁-C₆ Alkylidenkette ist, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls ersetzt ist durch CO, CO₂, COCO, CONR, OCONR, NRNR, NRNRCO, NRCO, NRCO₂, NRCONR, SO₂, NRSO₂, SO₂NR, NRSO₂NR, O, S, oder NR;
jedes R unabhängig ausgewählt ist aus Wasserstoff oder einer gegebenenfalls substituierten C₁-C₆ aliphatischen Gruppe; oder zwei R am gleichen Stickstoffatom können mit dem Stickstoff zusammengenommen werden, um einen vier- bis achtgliedrigen, gesättigten oder ungesättigten heterozyklischen Ring mit einem bis drei Heteroatomen zu bilden, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel;
R⁴ ist (T)_n-R, (T)_n-Ar, oder (T)_n-Ar¹;
R^a ist ausgewählt aus R^b, Halogen, NO₂, OR^b, SR^b, oder N(R^b)₂;
R^b ist ausgewählt aus Wasserstoff oder einer C₁-C₄ aliphatischen Gruppe, die gegebenenfalls substituiert ist mit Oxo, OH, SH, NH₂, Halogen, NO₂, oder CN;
R⁵ ist ein gegebenenfalls substituierter C₁-C₆-Aliphat oder Ar;
Ar ist ein 5-6 gliedriger gesättigter, teilweise ungesättigter oder monozyklischer Arylring mit null bis drei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Schwefel oder Sauerstoff, oder ein 8-10 gliedriger gesättigter, teilweise ungesättigter, oder bizyklischer Arylring mit null bis vier Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Schwefel oder Sauerstoff, worin Ar gegebenenfalls mit einem bis drei R⁷ substituiert ist;
Ar¹ ist ein 6-gliedriger Arylring mit null bis zwei Stickstoffen, wobei dieser Ring mit mit einer Z-R⁶ Gruppe substituiert ist und gegebenenfalls substituiert ist mit einem bis drei R⁷;
Z ist eine C₁-C₆ Alkylidenkette, in der bis zu zwei nicht benachbarte Methyleneinheiten von Z gegebenenfalls ersetzt sind durch CO, CO₂, COCO, CONR, OCONR, NRNR, NRNRCO, NRCO, NRCO₂, NRCONR, SO, SO₂, NRSO₂, SO₂NR, NRSO₂NR, O, S, oder NR; unter der Bedingung, dass diese gegebenenfalls ersetzte Methyleneinheit von Z eine nicht zu R⁶ benachbarte Methyleneinheit ist;
R⁶ ist ausgewählt aus Ar, R, Halogen, NO₂, CN, OR, SR, N(R)₂, NRC(O)R, NRC(O)N(R)₂, NRCO₂R, C(O)R, CO₂R, OC(O)R, C(O)N(R)₂, OC(O)N(R)₂, SOR, SO₂R, SO₂N(R)₂, NRSO₂R, NRSO₂N(R)₂, C(O)C(O)R, oder C(O)CH₂C(O)R; und
jedes R⁷ ist unabhängig ausgewählt aus R Halogen, NO₂, CN, OR, SR, N(R)₂, NRC(O)R, NRC(O)N(R)₂, NRCO₂R, C(O)R, CO₂R, C(O)N(R)₂, OC(O)N(R)₂, SOR, SO₂R, SO₂N(R)₂, NRSO₂R. NRSO₂N(R)₂, C(O)C(O)R, oder: C(O)CH₂C (O)R; oder zwei R⁷ an benachbarten Positionen von Ar¹ können zusammengenommen werden, um einen gesättigten, teilweise ungesättigten, oder völlig ungesättigten fünf- bis siebengliedrigen Ring mit null bis drei Heteroatomen zu bilden, die ausgewählt sind aus O, S, oder N.
Die folgenden Abkürzungen werden in der ganzen Spezifikation verwendet (einschließlich in den chemischen Formeln):

iPr: = Isopropyl
t-Bu oder tBu: = tert-Butyl
Et: = Ethyl
Me: = Methyl
Cbz: = Benzoyloxycarbonyl
BOC: = tert-Butyloxycarbonyl
Ph: = Phenyl
Bn: = Benzyl
DMF: = N,N-Dimethylformamid
THF: = Tetrahydrofuran
DCM: = Dichlormethan
DMF-DMA: = N,N-Dimethylformamid-dimethylacetal
DMSO: – Dimethylsulfoxid
TLC: = Dünnschichtchromatographie

Wie hierin verwendet, sollen die folgenden Definitionen gelten, sofern nichts anderes angegeben.
Die Phrase „gegebenenfalls substituiert" wird austauschbar mit der Phrase „substituiert oder unsubstituiert" oder mit dem Begriff „(un)substituiert" verwendet. Wenn nichts anderes angegeben, kann eine gegebenenfalls substituierte Gruppe einen Substituenten an jeder substituierbaren Position der Gruppe aufweisen, und jeder Substituent ist von den anderen unabhängig.
Der Begriff „Aliphat" oder „aliphatische Gruppe", so wie hierin verwendet, bedeutet eine geradkettige oder verzweigte C₁-C₁₂ Kohlenwasserstoffkette, die vollständig gesättigt ist oder eine oder mehrere Einheiten der Unsättigung enthält, oder ein monozyklischer C₃-C₈ Kohlenwasserstoff oder ein bizyklischer C₈-C₁₂ Kohlenwasserstoff, der vollständig gesättigt ist oder der eine oder mehrere Einheiten an Unsättigung enthält, jedoch nicht aromatisch ist (hierin auch als „Carbozyklus" oder „Cycloalkyl" bezeichnet), der eine einzelne Verknüpfungsstelle zu dem Rest des Moleküls aufweist, wobei jeder individuelle Ring im besagten bizyklischen Ringsystem 3-7 Mitglieder aufweist. Zu geeigneten aliphatischen Gruppen zählen zum Beispiel, ohne darauf beschränkt zu sein, lineare oder verzweigte oder Alkyl, Alkenyl, Alkynyl-Gruppen und Hybride davon, wie (Cycloalkyl)alkyl, (Cycloalkenyl)alkyl oder (Cycloalkyl)alkenyl.
Die Begriffe „Alkyl", „Alkoxy", „Hydroxyalkyl", „Alkoxyalkyl" und „Alkoxycarbonyl", entweder allein oder als Teil eines größeren Anteils verwendet, beinhaltet sowohl gerade als auch verzweigte Ketten, die ein bis zwölf Kohlenstoffatome enthalten. Die Begriffe „Alkenyl" und „Alkynyl", entweder allein oder als Teil eines größeren Anteils verwendet, sollen sowohl gerade als auch verzweigte Ketten umfassen, die zwei bis zwölf Kohlenstoffatome enthalten.
Die Begriffe „Haloalkyl", „Haloalkenyl" und „Haloalkoxy" bedeuten Alkyl, Alkenyl oder Alkoxy, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Halogenatomen substituiert sind. Der Begriff „Halogen" bedeutet F, Cl, Br oder I.
Der Begriff „Heteroatom" bedeutet Stickstoff, Sauerstoff, oder Schwefel und beinhaltet jede oxidierte Form von Stickstoff und Schwefel, und die quaternisierte Form jedes basischen Stickstoffs. Der Begriff „Stickstoff" beinhaltet auch einen substituierbaren Stickstoff eines heterozyklischen Rings. Als ein Beispiel kann der Stickstoff in einem gesättigten oder teilweise gesättigten Ring mit 0-3 Heteroatomen, die aus Sauerstoff, Schwefel oder Stickstoff ausgewählt sind, N (wie in 3,4-Dihydro-2H-pyrrolyl), NH (wie in Pyrrolidinyl) oder NR⁺ (wie in N-substituiertem Pyrrolidinyl) sein.
Der Begriff „ungesättigt", so wie hierin verwendet, bedeutet, dass ein Anteil eine oder mehrere Einheiten an Unsättigung aufweist, und beinhaltet Aryl-Ringe.
Der Begriff „Aryl", entweder allein oder als Teil eines größeren Anteils wie in „Aralkyl", „Aralkoxy", oder Aryloxyalkyl" verwendet, bezieht sich auf monozyklische, bizyklische und trizyklische Ringsysteme mit insgesamt fünf bis vierzehn Ringgliedern, wobei zumindest ein Ring in dem System aromatisch ist und wobei jeder Ring in dem System 3 bis 7 Ringglieder enthält. Der Begriff „Aryl" kann austauschbar mit dem Begriff „Arylring" verwendet werden. Der Begriff „Aryl" bezieht sich ebenfalls auf Heteroaryl-Ringsysteme, wie hierin später definiert ist.
Der Begriff „Heterozyklus", „Heterocyclyl", oder „heterozyklisch", so wie hierin verwendet, bedeutet nicht-aromatische, monozyklische, bizyklische, oder trizyklische Ringsysteme mit fünf bis vierzehn Ringgliedern, in welchen ein oder mehrere Ringglieder ein Heteroatom ist, wobei jeder Ring in dem System 3 bis 7 Ringglieder enthält.
Der Begriff „Heteroaryl", entweder allein oder als Teil eines größeren Anteils wie in „Heteroaralkyl" oder „Heteroarylalkoxy" verwendet, bezieht sich auf monozyklische, bizyklische und trizyklische Ringsysteme mit insgesamt fünf bis vierzehn Ringmitgliedern, wobei zumindest ein Ring in dem System aromatisch ist, zumindest ein Ring in dem System ein oder mehrere Heteroatome enthält, und wobei jeder Ring in dem System 3 bis 7 Ringglieder enthält. Der Begriff „Heteroaryl" kann austauschbar mit dem Begriff „Heterarylring" oder dem Begriff „Heteroaromat" verwendet werden.
Eine Aryl- (einschließlich Aralkyl, Aralkoxy, Aryloxyalkyl und dergleichen) oder Heteroaryl- (einschließlich Heteroaralkyl und Heteroalalkoxy und dergleichen) Gruppe kann einen oder mehrere Subsituenten enhalten. Geeignete Substituenten am ungesättigten Kohlenstoff einer Aryl-, Heteroaryl-, Aralkyl-, oder Heteroaralkyl-Gruppe werden aus Halogen, -R°, -OR°, -SR°, 1,2-Methylendioxy, 1,2-Ethylendioxy, gegebenenfalls mit R° substituiertes Phenyl (Ph), gegebenenfalls mit R° substituiertes -O(Ph), gegebenenfalls mit R° substituiertes -CH₂(Ph), gegebenenfalls mit R° substituiertes -CH₂CH₂(Ph), -NO₂, -CN, -N(R°)₂, NR°C(O)R°, -NR°C(O)N(R°)₂, -NR°CO₂R°, -NR°NR°C(O)R°, -NR°NR°C(O)N(R°)₂, NR°NR°CO₂R°, -C(O)C(O)R°, -C(O)CH₂C(O)R°, -CO₂R° -C(O)R°, -C(O)N(R°)₂, -OC(O)N(R°)₂, -S(O)₂R°, SO₂N(R°)₂, -S(O)R°, NR°SO₂N(R°)₂, -NR°SO₂R°, -C(=S)N(R°)₂, -C(=NH)-N(R°)₂, oder -(CH₂)_yNHC(O)R° ausgewählt ist, wobei R° unabhängig ausgewählt ist aus Wasserstoff, gegebenenfalls substituiertem C_1-6 Aliphat, einem unsubstituierten 5-6 gliedrigen Heteroaryl oder Heterocyclylring, Phenyl, -O(Ph), oder -CH₂(Ph). Wahlweise Substituenten der aliphatischen Gruppe von R° sind ausgewählt aus NH₂, NH(C_1-4 aliphat), N(C_1-4 aliphat)₂, Halogen, C_1-4 aliphat, OH, O(C_1-4 aliphat) NO₂, CN, CO₂H, CO₂(C_1-4aliphat), O(Halo C_1-4 aliphat) oder Halo C_1-4aliphat.
Eine aliphatische Gruppe oder ein nicht-aromatischer heterozyklischer Ring kann einen oder mehrere Substituenten enthalten. Geeignete Substituenten am gesättigten Kohlenstoff einer aliphatischen Gruppe oder eines nicht-aromatischen heterozkylischen Rings werden ausgewählt aus jenen, die oben für den ungesättigten Kohlenstoff einer Aryl oder Heteroaryl-Gruppe aufgelistet sind und die Folgenden: =O, =S, =NNHR^*, =NN(R^*)₂, =NNHC(O)R^*, =NNHCO₂(Alkyl), =NNHSO₂(Alkyl), oder =NR^*, wobei jedes R^* unabhängig ausgewählt ist aus Wasserstoff oder einem gegebenenfalls substituierten C_1-6 Aliphat. Wahlweise Substituenten auf der aliphatischen Gruppe von R^* sind ausgewählt aus NH₂, NH (C_1-4 Aliphat), N(C_1-4 Aliphat)₂, Halogen, C_1-4 Aliphat, OH, O(C_1-4 Aliphat), NO₂, CN, CO₂H, CO₂(C_1-4 Aliphat), O(Halo C_1-4 Aliphat), oder Halo (C_1-4 Aliphat).
Wahlweise Substituenten am Stickstoff eines nicht-aromatischen heterozyklischen Rings werden ausgewählt aus -R⁺, -N(R⁺)2, -C(O)R⁺, -CO₂R⁺, -C(O)C(O)R⁺, -C(O)CH₂C(O)R⁺, -SO₂R⁺, SO₂N(R⁺)₂, -C(=S)N(R⁺)₂, -C(=NH)-N(R⁺)₂, oder -NR⁺SO₂R⁺; wobei R⁺ Wasserstoff, ein gegebenenfalls substituierter C_1-6 Aliphat, gegebenenfalls substituiertes Phenyl, gegebenenfalls substituiertes -O(Ph), gegebenenfalls substituiertes -CH₂(Ph), gegebenenfalls substituiertes -CH₂CH₂(Ph), oder ein unsubstituierter 5-6gliedriger Heteroaryl- oder heterozyklischer Ring ist. Wahlweise Substituenten an der aliphatischen Gruppe oder dem Phenylring von R⁺ werden ausgewählt aus NH₂, NH(C_1-4Aliphat), N(C_1-4Aliphat)₂, Halogen, C_1-4 Aliphat, OH, O(C_1-4 Aliphat), NO₂, CN, CO₂H, CO₂(C_1-4 Aliphat), O(HaloC_1-4 Aliphat), oder Halo(C_1-4 Aliphat).
Der Begriff „Alkyliden-Kette" bezieht sich auf eine gerade oder verzweigte Kohlenstoffkette, die vollständig gesättigt sein kann oder eine oder mehrere Einheiten der Unsättigung aufweist.
Eine Kombination von Substituenten oder Variablen ist nur zulässig, wenn eine solche Kombination zu einer stabilen und chemisch-durchführbaren Verbindung führt. Eine stabile Verbindung oder eine chemisch-durchführbare Verbindung ist eine, die sich nicht wesentlich verändert, wenn sie bei einer Temperatur von 40°C oder geringer, in der Abwesenheit von Feuchtigkeit oder anderen chemisch reaktiven Bedingungen für zumindest eine Woche gehalten wird.
Es ist für einen Fachmann erkennbar, dass bestimmte Verbindungen dieser Erfindung in tautomeren Formen existieren können, wobei alle solche tautomeren Formen der Verbindungen im Umfang der Erfindung sind.
Wenn nicht anders angegeben, ist beabsichtigt, dass die hierin gezeigten Strukturen alle stereochemischen Formen der Struktur beinhalten; i.e. die R und S Konfigurationen für jedes asymmetrische Zentrum. Deshalb sind stereochemische Isomere sowie enantiomere und diastereomere Mischungen der vorliegenden Verbindung innerhalb des Umfangs der Erfindung. Wenn nicht anders angegeben, ist beabsichtigt, dass die hierin gezeigten Strukturen Verbindungen beinhalten, die sich nur im Vorhandensein eines oder mehreren isotopisch-angereicherten Atomen unterscheiden. Zum Beispiel sind Verbindungen mit den vorliegenden Strukturen, mit Ausnahme des Austausches eines Wasserstoffs durch ein Deuterium oder Tritium, oder dem Austausch eines Kohlenstoffs durch ein ¹³C- oder ¹⁴C-angereicherten Kohlenstoffs, innerhalb des Umfanges dieser Erfindung.
Bevorzugte R¹-Gruppen der Formel I sind ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵, wobei T eine C₁-C₄ Alkylidenkette ist, und worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist. Noch bevorzugter sind die R¹-Gruppen der Formel I ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-Methylpiperidin-1-yl, NHEt, NHCH₂CH₂piperidin-1-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl.
Bevorzugte R²-Gruppen der Formel I sind ausgewählt aus CN, R⁵, Halogen, CO₂R⁵ oder N(R)₂. Noch bevorzugter sind die R²-Gruppen I ausgewählt aus CN oder CO₂R⁵.
Bevorzugte R³-Gruppen der Formel I sind ausgewählt aus einem 5-6 gliedrigen Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe oder einem R⁷. Noch bevorzugter sind die R³-Gruppen der Formel I ausgewählt aus Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Cyclohexyl, und Furanyl. Bevorzugte Substituenten am R³ sind ausgewählt aus (T)_n-Ar Gruppe oder R⁷, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 5-6 gliedriger Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff, oder Schwefel, und wobei R⁷ ausgewählt ist aus R, Halogen, OR, N(R)₂, oder CO₂R. Noch mehr bevorzugte Substituenten am R³ sind ausgewählt aus Phenyl, Phenoxy, Benzyl, Benzyloxy, Pyridyl, 3-Hydroxyphenyl, 2-Hydroxyphenyl, 3-Aminophenyl, N-BOC-Pyrrolyl, 4-Chlorphenyl, 3-Ethoxypyridyl, 2-Methoxypyridyl, 2,5-Dimethylisoxazolyl, 3-Ethoxyphenyl, 4-Isopropylphenyl, 4-F-3-Cl-Phenyl, Pyrrolyl, Pyrimidinyl, Halogen, wie Chlor, Brom und Fluor, Haloalkyl, wie Trifluormethyl, OH, NH₂, Alkyl wie Methyl und Alkoxy, wie Methoxy und Ethoxy.
Bevorzugte R⁴-Gruppen der Formel I sind ausgewählt aus Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 6-gliedriger, gesättigter, teilweise gesättiger, oder Arylring mit Null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel. Noch bevorzugter sind die R⁴-Gruppen der Formel I ausgewählt aus Phenyl, Benzyl, Pyridyl, Piperidinyl, oder Cyclohexyl. Bevorzugte Substituenten am R⁴ sind ausgewählt aus CO₂R, OR, OAr, Halogen, NRSO₂R, SO₂N(R)₂, NRCON(R)₂, NO₂, oder N(R)₂. Noch mehr bevorzugte Substituenten am R⁴ sind ausgewählt aus Benzyloxy, Phenoxy, SO₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, OMe, Br, Cl, CO₂Me, NHSO₂Me, NHSO₂Et, NHCON(Me)₂, NHCON(Et)₂, NHCOpyrrolidin-1-yl, oder NHCOmorpholin-4-yl.
Am meisten bevorzugte R⁴-Gruppen der Formel I sind jene, wobei R⁴ Ar¹ ist. Bevorzugte Z-R⁶ Gruppen auf der Ar¹-Guuppe der Formel I sind jene, worin Z eine C_1-4 Alkylidenkette ist, wobei eine Methyleneinheit von Z gegebenenfalls durch O, NH,NHCO, NHCO₂, NHSO₂, CONH ersetzt ist, und wobei R⁶ ausgewählt ist aus N(R)₂, NHCOR, oder Ar, wobei Ar ein 5-6 gliedriger heterozyklischer oder Heteroaryl-Ring mit einem bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel. Die Ar-Gruppe von R⁶ ist gegebenenfalls substituiert mit R, OR, N(R)₂ oder Oxo. Noch mehr bevorzugte Z-R⁶-Gruppen der Formel I sind ausgewählt aus O(CH₂)₃OH, O(CH₂)₃NH(CH₂)₂OH, O(CH₂)₂NH(CH₂)₂OH, O(CH₂)₃N(hydroxyethyl)(methyl), O(CH₂)₃pyrrolidin-1-yl, O(CH₂)₂morpholin-4-yl, O(CH₂)₃N(Me)₂, O(CH₂)₃N(Et)₂, O(CH₂)₃(4-hydroxyethylpiperazin-1-yl), O(CH₂)₃piperazin-1-yl, O(CH₂)₃(4-hydroxymethylpiperidin-1-yl), O(CH₂)₃(4-hydroxypiperidin-1-yl), NHCO(CH₂)₃N(Me)₂, NHCO(CH₂)₃NCOCH₃, NHCOCH₂pyridin-2-yl, NHCOCH₂(2-aminothiazol-4-yl), NHCOCH₂cyclopropyl, NHCO(CH₂)₂N(Et)₂, NHCO(CH₂)₂(piperazin-2,5-dion-3-yl), NHCOpyrrolidin-1-yl, NHCOmorpholin-4-yl, NHCO₂CH₂tetrahydrofuran-2-yl, NHCO₂tetrahydrofuran-2-yl, NHCO₂tetrahydropyran-4-yl, oder NHCO₂CH₂tetrahydropyran-2-yl.
Bevorzugte R^a-Gruppen der Formel I sind ausgewählt aus R^b, OR^b, SR^b oder N(R^b)₂. Noch mehr bevorzugte R^a-Gruppen der Formel I sind ausgewählt aus Methyl, OH, OMe, oder NH₂.
Eine Ausführungsform dieser Erfindung betrifft die Verbindungen der Formel IIa:
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon, wobei R¹, R², R³ oder R⁴ wie oben beschrieben sind.
Bevorzugte R¹-Gruppen der Formel IIa sind ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵, wobei T eine C₁-C₄ Alkylidenkette ist, und worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist. Noch bevorzugter sind die R¹-Gruppen der Formel IIa ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-Methylpiperidin-1-yl, NHEt, NHCH₂CH₂piperidin-1-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl; Bevorzugte R²-Gruppen der Formel IIa sind ausgewählt aus CN, R⁵, Halogen, CO₂R⁵ oder N(R)₂. Noch bevorzugter sind die R²-Gruppen ausgewählt aus CN oder CO₂R⁵.
Bevorzugte R³-Gruppen der Formel IIa sind ausgewählt aus einem 5-6 gliedrigen Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder heterozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe oder einem R⁷. Noch bevorzugter sind die R³-Gruppen der Formel IIa ausgewählt aus Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Cyclohexyl, oder Furanyl. Bevorzugte Substituenten am R³ sind ausgewählt aus (T)_n-Ar Gruppe oder R⁷, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 5-6 gliedriger Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff, oder Schwefel, und wobei R⁷ ausgewählt ist aus R, Halogen, OR, N(R)₂, oder CO₂R. Noch mehr bevorzugte Substituenten am R³ sind ausgewählt aus Phenyl, Phenoxy, Benzyl, Benzyloxy, Pyridyl, 3-Hydroxyphenyl, 2-Hydroxyphenyl, 3-Aminophenyl, N-BOC-Pyrrolyl, 4-Chlorphenyl, 3-Ethoxypyridyl, 2-Methoxypyridyl, 2,5-Dimethylisoxazolyl, 3-Ethoxyphenyl, 4-Isopropylphenyl, 4-F-3-Cl-Phenyl, Pyrrolyl, Pyrimidinyl, Halogen, wie Chlor, Brom und Fluor, Haloalkyl, wie Trifluormethyl, OH, NH₂, Alkyl, wie Methyl, Alkoxy, wie Methoxy und Ethoxy.
Bevorzugte R⁴-Gruppen der Formel IIa sind ausgewählt aus Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substiuierter 6-gliedrieger, gesättigter, teilweise gesättiger, oder Arylring mit Null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel. Noch bevorzugter sind die R⁴-Gruppen der Formel IIa ausgewählt aus Phenyl, Benzyl, Pyridyl, Piperidinyl, oder Cyclohexyl. Bevorzugte Substituenten am R⁴ sind ausgewählt aus CO₂R, OR, OAr, Halogen, NRSO₂R, SO₂N(R)₂, NRCON(R)₂, NO₂, oder N(R)₂. Noch mehr bevorzugte Substituenten am R⁴ sind ausgewählt aus Benzyloxy, Phenoxy, So₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, OMe, Br, Cl, CO₂Me, NHSO₂Me, NHSO₂Et, NHCON(Me)₂, NHCON(Et)₂, NHCOpyrrolidin-1-yl, oder NHCOmorpholin-4-yl.
Bevorzugte Verbindungen der Formel IIa sind jene, die ein oder mehrere, noch mehr bevorzugt mehr als ein, und am meisten bevorzugt, alle der Merkmale aufweisen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:

(a) R¹ ist ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵;
(b) T ist eine C_1-4 Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist.
(c) R² ist CN, R, Halogen, CO₂R⁵ oder N(R)₂;
(d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe und einem R⁷; und
(e) R⁴ ist Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 6 gliedriger gesättigter, teilweise gesättigter Ring, oder ein Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel.

Mehr bevorzugte Verbindungen der Formel IIa sind jene, die ein oder mehrere, noch mehr bevorzugt mehr als ein, und am meisten bevorzugte, alle der Merkmale aufweisen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:

(a) R¹ ist ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-methylpiperidin-1-yl, NHEt, NHCH₂CH₂piperidin-1-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl;
(b) R² ist CN oder CO₂R⁵;
(c) R³ ist ausgewählt aus Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Cyclohexyl, oder Furanyl, worin R³ gegebenenfalls substituiert ist mit Phenyl, Phenoxy, Benzyl, Benzyloxy, Pyridyl, 3-Hydroxyphenyl, 2-Hydroxyphenyl, 3-Aminophenyl, N-BOC-Pyrrolyl, 4-Chlorphenyl, 3-Ethoxypyridyl, 2-Methoxypyridyl, 2,5-Dimethylisoxazolyl, 3-Ethoxyphenyl, 4-Isopropylphenyl, 4-F-3-Cl-Phenyl, Pyrrolyl, Pyrimidinyl, Chlor, Brom, Fluor, Trifluormethyl, OH, NH₂, Methyl, Methoxy oder Ethoxy; und
(d) R⁴ ist ausgewählt aus Wasserstoff oder einem Phenyl, Benzyl, Pyridyl, Piperidinyl, oder Cyclohexyl-Ring, wobei dieser Ring gegebenenfalls substituiert ist mit Benzyloxy, Phenoxy, SO₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, OMe, Br, Cl, CO₂Me, NHSO₂Me, NHSO₂Et, NHCON(Me)₂, NHCON(Et)₂, NHCOpyrrolidin-1-yl, oder NHCOmorpholin-4-yl.

Eine andere Ausführungsform betrifft die Verbindungen der Formel IIb:
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon, wobei R¹, R², R³ oder R⁴ wie oben definiert sind.
Bevorzugte R¹, R³ und R⁴-Gruppen der Formel IIb sind jene, die oben für die Verbindungen der Formel IIa beschrieben sind.
Bevorzugte R² Gruppen der Formel IIb sind CN, R⁷, Ar, Halogen, oder N(R⁶)₂. Wenn R² Ar ist, dann ist eine bevorzugte Ar-Gruppe 4-(C_1-3alkyl)-thiazol-2-yl. Bevorzugte Verbindungen der Formel IIb sind jene, die ein oder mehrere, noch mehr bevorzugt mehr als ein, und am meisten bevorzugt, alle der Merkmale aufweisen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:

(a) R¹ ist ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵;
(b) T ist eine C_1-4 Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist.
(c) R² ist CN, R⁷, Ar, Halogen, oder N(R⁶)₂;
(d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder einen hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe und einem R⁷; und
(e) R⁴ ist Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 6 gliedriger gesättigter, teilweise gesättigter Ring, oder ein Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel.

Noch bevorzugtere Verbindungen der Formel IIb sind jene, die ein oder mehrere, noch mehr bevorzugte mehr als ein, und am meisten bevorzugt, alle der Merkmale aufweisen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:

(a) R¹ ist ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-Methylpiperidin-1-yl, NHEt, NHCH₂CH₂piperidin-1-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl;
(b) R² ist CN oder 4-(C_1-3 alkyl)-thiazol-2-yl;
(c) R³ ist ausgewählt aus Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Cyclohexyl, oder Furanyl, worin R³ gegebenenfalls substituiert ist durch Phenyl, Phenoxy, Benzyl, Benzyloxy, Pyridyl, 3-Hydroxyphenyl, 2-Hydroxyphenyl, 3-Aminophenyl, N-BOC-pyrrolyl, 4-Chlorphenyl, 3-Ethoxypyridyl, 2-Methoxypyridyl, 2,5-Dimethylisoxazolyl, 3-Ethoxyphenyl, 4-Isopropylphenyl, 4-F-3-Cl-Phenyl, Pyrrolyl, Pyrimidinyl, Chlor, Brom, Fluor, Trifluormethyl, OH, NH₂, Methyl, Methoxy oder Ethoxy; und
(d) R⁴ ist ausgewählt aus Wasserstoff oder einem Phenyl, Benzyl, Pyridyl, Piperidinyl, oder Cyclohexyl-Ring, wobei dieser Ring gegebenenfalls substituiert ist durch Benzyloxy, Phenoxy, SO₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, OMe, Br, Cl, CO₂Me, NHSO₂Me, NHSO₂Et, NHCON(Me)₂, NHCON(Et)₂, NHCOpyrrolidin-1-yl, oder NHCOmorpholin-4-yl.

Beispielhafte Strukturen der Formel IIa sind in der Tabelle 1 unten dargelegt.
Tabelle 1. Verbindungen der Formel IIa
(fortgesetzt)
(fortgesetzt)
(fortgesetzt)
Beispielhafte Strukturen der Formel IIb sind in der Tabelle 2 unten dargelegt. Tabelle 2. Verbindungen der Formel IIb
Die obigen Formel IIa und IIb-Verbindungen sind jene, die einen Pyrimidin-Ring aufweisen. Verbindungen der Formel I mit einem Pyridin- oder Triazin-Ring sind ansonsten strukturell ähnlich zu den Formel IIa und IIb-Verbindungen und sind durch die allgemeinen Formeln IIIa, IIIb, IVa und IVb, wie in Tabelle 3 gezeigt, dargestellt. Tabelle 3. Formeln IIIa, IIIb, IVa und IVb
Die oben in Tabelle 3 gezeigten Verbindungen sind strukturell ähnlich zu den Verbindungen der Formeln IIa und IIb, wo der Pyrimidin-Ring der Formel IIa durch einen Pyridin- (IIIa und IIIb) oder Triazin-Ring (IVa und IVb) ersetzt ist. Dementsprechend sind bevorzugte R¹, R², R³ und R⁴ Gruppen der oben in Tabelle 3 gezeigten Verbindungen, wie oben für die Formel IIa-Verbindungen beschrieben ist.
Beispielhafte Strukturen der Formeln IIIa und IIIb sind in Tabelle 4 unten dargelegt. Tabelle 4. Verbindungen der Formel IIIa und IIIb
(fortgesetzt)
Beispielhafte Strukturen der Formel IVa und IVb sind in Tabelle 5 unten dargelegt. Tabelle 5. Verbindungen der Formel IVa und IVb
(fortgesetzt)
Eine bevorzugte Ausführungsform diese Erfindung betrifft Verbindungen der Formel V:
oder ein pharmazeutisch-akzeptables Salz davon, wobei R^a, R¹, R², R³ und R⁴ wie oben definiert sind.
Bevorzugte Verbindungen der Formel V sind jene, die ein oder mehrere, und am meisten bevorzugt, alle der Merkmale aufweisen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:

(a) R¹ ist ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵;
(b) T ist eine C_1-4 Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist.
(c) R² ist CN, R, Halogen, CO₂R⁵ oder N(R)₂;
(d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder heterozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe und einem R⁷;
(e) R⁴ ist Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 6 gliedriger gesättigter, teilweise gesättigter Ring, oder ein Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel; und
(f) R^a ist ausgewählt aus R^b, OR^b, SR^b, oder N(R^b)₂.

Noch mehr bevorzugte Verbindungen der Formel V sind jene, die ein oder mehrere, noch mehr bevorzugt mehr als ein, und am meisten bevorzugt, alle der Merkmale aufweisen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:

(a) R¹ ist ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-Methylpiperidin-1-yl, NHEt, NHCH₂CH₂piperidin-1-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl;
(b) R² ist CN oder CO₂R⁵;
(c) R³ ist ausgewählt aus Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Cyclohexyl, oder Furanyl, worin R³ ist gegebenenfalls substituiert durch Phenyl, Phenoxy, Benzyl, Benzyloxy, Pyridyl, 3-Hydroxyphenyl, 2-Hydroxyphenyl, 3-Aminophenyl, N-BOC-Pyrrolyl, 4-Chlorphenyl, 3-Ethoxypyridyl, 2-Methoxypyridyl, 2,5-Dimethylisoxazolyl, 3-Ethoxyphenyl, 4-Isopropylphenyl, 4-F-3-Cl-Phenyl, Pyrrolyl, Pyrimidinyl, Chlor, Brom, Fluor, Trifluormethyl, OH, NH₂, Methyl, Methoxy oder Ethoxy;
(d) R⁴ ist ausgewählt aus Wasserstoff oder einem Phenyl, Benzyl, Pyridyl, Piperidinyl, oder Cyclohexyl-Ring, wobei dieser Ring gegebenenfalls substituiert ist durch Benzyloxy, Phenoxy, SO₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, OMe, Br, Cl, CO₂Me, NHSO₂Me, NHSO₂Et, NHCON(Me)₂, NHCON(Et)₂, NHCOpyrrolidin-1-yl, oder NHCOmorpholin-4-yl; und
(e) R^a ist Methyl, OH, OMe, oder NH₂.

Beispielhafte Strukturen der Formel V, wobei R CN ist, sind in Tabelle 7 unten dargelegt. Tabelle 7. Verbindung der Formel V
(fortgesetzt)
Eine noch mehr bevorzugte Ausführungsform betrifft Verbindungen der Formel VI:
oder ein pharmazeutisch-akzeptables Salz davon, wobei, R¹, R², R³, R^a, Z und R⁶ wie oben definiert sind.
Bevorzugte R¹, R², R³, und R^a Gruppen der Formel VI sind jene, die für die Formel IIa beschrieben sind. Bevorzugte Z-R⁶ Gruppen der Formel VI sind jene, wobei Z eine C_1-4 Alkylidenkette ist, worin eine Methyleneinheit von Z gegebenenfalls durch O, NH, NHCO, NHCO₂, NHSO₂, CONH, ersetzt ist und wobei R⁶ ausgewählt ist aus N(R)₂, NHCOR, oder Ar, wobei Ar ein 5-6-gliedriger heterocyclischer oder Heteroaryl-Ring mit einem oder zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel. Die Ar Gruppe von R⁶ ist gegebenfalls substituiert mit R, OR, N(R)₂, oder Oxo. Noch mehr bevorzugte Z-R⁶ Gruppen der Formel of VI sind ausgewählt aus O(CH₂)₃OH, O(CH₂)₃NH(CH₂)₂OH, O(CH₂)₂NH(CH₂)₂OH, O(CH₂)₃N(hydroxyethyl)(methyl), O(CH₂)₃pyrrolidin-1-yl, O(CH₂)₂morpholin-4-yl, O(CH₂)₃N(Me)₂, O(CH₂)₃N(Et)₂, O(CH₂)₃(4-hydroxyethylpiperazin-1-yl), O(CH₂)₃piperazin-1-yl, O(CH₂)₃(4-hydroxymethylpiperidin-1-yl), O(CH₂)₃(4-hydroxypiperidin-1-yl), NHCO(CH₂)₃N(Me)₂, NHCO(CH₂)₃NCOCH₃, NHCOCH₂pyridin-2-yl, NHCOCH₂(2-aminothiazol-4-yl), NHCOCH₂cyclopropyl, NHCO(CH₂)₂N(Et)₂, NHCO(CH₂)₂(piperazin-2,5-dion-3-yl), NHCOpyrrolidin-1-yl, NHCOmorpholin-4-yl, NHCO₂CH₂tetrahydrofuran-2-yl, NHCO₂tetrahydrofuran-2-yl, NHCO₂tetrahydropyran-4-yl, oder NHCO₂CH₂tetrahydropyran-2-yl.
Bevorzugte Verbindungen der Formel VI sind jene, die ein oder mehrere, noch mehr bevorzugt mehr als ein, und am meisten bevorzugt, alle der Merkmale aufweisen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:

(a) R¹ ist N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵;
(b) T ist eine C_1-4 Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist;
(c) R² ist CN, R⁷, Halogen, oder N(R⁶)₂;
(d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder einem hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe und einem R⁷; und
(e) Z ist eine C_1-4 Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von Z gegebenenfalls durch O, NH, NHCO, NHCO₂, NHSO₂, CONH ersetzt ist;
(f) R⁶ ist ausgewählt aus N(R)₂, NHCOR, oder Ar, worin Ar ein gegebebenfalls substituierter 5-6 gliedriger heterozyklischer Ring oder ein Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel; und
(g) R^a ist R^b, OR^b, SR^b, oder N(R^b)₂.

Noch mehr bevorzugte Verbindungen der Formel VI sind jene, die ein oder mehrere, noch mehr bevorzugt mehr als ein, und am meisten bevorzugt, alle der Merkmale aufweisen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus:

(a) R¹ ist ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-Methylpiperidin-1-yl, NHEt, NHCH₂CH₂-piperidin-1-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl ;
(b) R² ist CN;
(c) R³ ist ein Phenyl, Pyridyl, Furyl, oder Cyclohexyl-Ring gegebenenfalls substituiert durch (T)_n-Ar oder R⁷, worin Ar ein 5-6 gliedriger Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, und worin R⁷ ausgewählt ist aus R, Halogen, OR, N(R)₂, oder CO₂R;
(d) R^a ist Wasserstoff oder Methyl; und
(e) Z-R⁶ ist ausgewählt aus O(CH₂)₃OH, O(CH₂)₃NH(CH₂)₂OH, O(CH₂)₂NH(CH₂)₂OH, O(CH₂)₃N(hydroxyethyl)(methyl), O(CH₂)₃pyrrolidin-1-yl, O(CH₂)₂morpholin-4-yl, O(CH₂)₃N(Me)₂, O(CH₂)₃N(Et)₂, O(CH₂)₃(4-hydroxyethylpiperazin-1-yl), O(CH₂)₃piperazin-1-yl, O(CH₂)₃(4-hydroxymethylpiperidin-1-yl), O(CH₂)₃(4-hydroxypiperidin-1-yl), NHCO(CH₂)₃N(Me)₂, NHCO(CH₂)₃NCOCH₃, NHCOCH₂pyridin-2-yl, NHCOCH₂(2-aminothiazol-4-yl), NHCOCH₂cyclopropyl, NHCO(CH₂)₂N(Et)₂, NHCO(CH₂)₂(piperazin-2,5-dion-3-yl), NHCOpyrrolidin-1-yl, NHCOmorpholin-4-yl, NHCO₂CH₂tetrahydrofuran-2-yl, NHCO₂tetrahydrofuran-2-yl, NHCO₂tetrahydropyran-4-yl, oder NHCO₂CH₂tetrahydropyran-2-yl.

Beispielhafte Strukturen der Formel VI sind in Tabelle 8 unten dargelegt. Tabelle 8. Verbindung der Formel VI
Die obigen Formel VI Verbindungen sind jene, die einen Pyrimidin-Ring haben. Verbindungen der Formel VI mit einem Pyridin- oder Triazin-Ring sind ansonsten strukturell ähnlich zu den Formel VI Verbindungen und sind durch die folgenden allgemeinen Formeln VII und VIII, die unten gezeigt sind, dargestellt:
Die oben gezeigten Verbindungen der Formel VII und VIII sind strukturell ähnlich zu den Verbindungen der Formel VI, wo der Pyrimidin-Ring der Formel VI durch ein Pyridin (VII) oder Triazin-Ring (VIII) ersetzt ist. Dementsprechend sind bevorzugte R¹, R², R³, und Z-R⁶-Gruppen der Verbindungen der Formeln VII und VIII wie oben für die Formel VI-Verbindungen beschrieben.
Die vorliegenden Verbindungen können im Allgemeinen durch Verfahren, die Fachleuten für analoge Verbindungen bekannt sind, hergestellt werden, wie durch die allgemeinen Schemata I, II, III, IV, V, und VI und die unten gezeigten synthetischen Beispielen illustriert ist. Schema I
Reagenzien und Bedingungen: (a) K₂CO₃, DMF, CS₂, 1-Chlorpropan-2-on, Mel, in DMF bei Raumtemperatur; (b) THF, Raumtemperatur; (c) NaOEt, EtOH, 90°C.
Das obige Schema I zeigt einen allgemeinen synthetischen Weg, der für das Herstellen der Verbindungen der Formel IIa verwendet wird, wobei R² CN ist. Diese Verbindungen werden in einer parallelen Art und Weise hergestellt, in der folgenden Art. Im Schritt (a) wird α-Cyanoacetophenon (1) mit K₂CO₃ (3 Äquivalente) in DMF kombiniert und der Mischung ermöglicht, bei Raumtemperatur zu rühren. CS₂ (1,5 Äquivalente) wird dann hinzugefügt und die resultierende Mischung bei Raumtemperatur für weitere 10 Minuten gerührt. Eine Lösung 1-Chlorpropan-2-on (1,0 Äquivalent) in DMF wird hinzugefügt, dann wird eine Lösung von Mel (1,1 Äquivalente) in DMF tropfenweise hinzugefügt. Nach 30 Minuten wird die Mischung auf Wasser geschüttet und die resultierende Mischung kräftig für 12-16 Stunden gerührt, um eine Suspension der Verbindung 2 zu ergeben. Das Rohprodukt 2 wird durch Filtration isoliert. Diese Reaktion kann verwendet werden, um Verbindungen dieser Erfindung zu erhalten, die von α-Cyanoacetophenonen mit einer Vielzahl von Phenyl-Substitutenten abgeleitet sind. Beispiele von geeigneten R³-Gruppen beinhalten, ohne darauf beschränkt zu sein, jene, die in Tabelle 1 oben dargelegt sind.
Im Schritt (b) wird das Rohprodukt 2 wird mit t-Butoxybisdimethylaminomethan (Brederick's Reagenz, 3) in THF kombiniert und ermöglicht, bei Raumtemperatur für 12-16 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wird konzentriert und direkt für Schritt (c) verwendet. Das Rohkonzentrat 4 wird in EtOH aufgelöst. Verbindung 5 wird zu der ethanolischen Lösung hinzugefügt und die resultierende Mischung für 4 Stunden bei 90°C erwärmt. Obwohl Schema I bei Schritt (c) Phenylguanidin verwendet, würde es für einen Fachmann offensichtlich sein, dass andere Arylguanidine bei Schritt (c) verwendet werden können, um Verbindungen der vorliegenden Verbindung herzustellen, wobei R⁴ eine Vielzahl von gegebenenfalls substituierten Aryl-Gruppen ist. Die Reaktionsmischung wird konzentriert, dann, nach wässriger Aufarbeitung, wird das Produkt durch präparative HPLC gereinigt, um Verbindungen 6 und 7 zu liefern. Die Details der verwendeten Bedingungen für das Herstellen dieser Verbindungen sind din den Beispielen dargelegt. Schema II
Reagenzien und Bedingungen: a) (i) K₂CO₃, CS₂, DMF, CH₃CN, Chloracetonitril, 0°C, 2 Stunden; (ii) Mel, Raumtemperatur 12 Stunden; (b) DMF-DMA, CH₃CN, Rückfluss, 18 Stunden; (c) Arylguanidin, CH₃CN, Rückfluss, 24 Stunden.
Das obige Schema II zeigt einen allgemeinen synthetischen Weg, der für das Herstellen der Verbindungen der Formel IIb verwendet wird, wobei R³ Methyl ist und R⁴ eine gegebenenfalls substituierte Aryl-Gruppe ist.
Zwischenprodukt 4 wird durch Behandeln von 2,4-Pentandion (1) mit Kaliumcarbonat (3 Äquivalente), CS₂ (2) (1,5 Äquivalente) und Choracetonitril (1,0 Äquivalent) in DMF bei Raumtemperatur für 2 Stunden hergestellt. Die Mischung wird auf 0°C abgekühlt und dann wird Methyliodid (3) langsam hinzugefügt und die resultierende Mischung bei Raumtemperatur für 12 Stunden gerührt. Wasser wird hinzugefügt, um das Produkt zu präzipitieren, welches durch Filtration isoliert wird, um 4 zu ergeben.
Zwischenprodukt 5 wird durch Behandeln von 4 mit Dimethylformamid-Dimethylacetal (DMF-DMA) in Acetonitril bei Rückfluss für 18 Stunden hergestellt. Das Produkt 5 wird als ein gelber Feststoff von der Zerreibung mit Ether isoliert.
Verbindungen der Formel IIb werden aus 5 durch Kombinieren von 5 mit einem Arylguanidin in Acetonitril und Erwärmen der resultierenden Mischung unter Rückfluss für 24 Stunden hergestellt. Methanol wird zu der Reaktionsmischung hinzugefügt, um das Produkt auszufällen und die resultierende Suspension wird filtriert, um das Produkt IIb zu liefern. Die Details der verwendeten Bedingungen für das Herstellen dieser Verbindungen sind in den Beispielen dargelegt. Schema III
Reagenzien und Bedingungen: (a) DMF-DMA, CH₃CN, Rückfluss, 18 Stunden; (b) Arylguanidin, CH₃CN, Rückfluss, 24 Stunden.
Das obige Schema III zeigt einen allgemeinen synthetischen Weg, der für das Herstellen der Verbindungen der Formel IIb verwendet wird, wobei R³ Methyl ist, R⁴ eine gegebenenfalls substituierte Aryl-Gruppe ist und R² 4-Methylthiazol-2-yl ist.
1-[4-Methyl-2-methylsulfanyl-5-(4-methylthiazol-2-yl)-thiophen-3-yl]-ethanon (1) (Maybridge Chemicals) wird mit DMF-DMA in Acetonitril unter Rückfluss für 18 Stunden behandelt. Die Mischung wird im Vakuum konzentriert und der Rückstand mit Diethylether zerrieben, um 2 als einen gelben Feststoff zu liefern.
Zwischenprodukt 2 wird mit einem Arylguanidin in Acetonitril kombiniert und die resultieren Mischung unter Rückfluss für 24 Stunden erwärmt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird Methanol hinzugefügt, um das Produkt zu präzipitieren. Das Produkt 3 wird durch Filtration nach den Methanol-Waschungen isoliert. Die Details der verwendeten Bedingungen für das Herstellen dieser Verbindungen sind in den Beispielen dargelegt. Schema IV
Reagenzien und Bedingungen: (a) i LiOH, DMF, CS₂, 0°C, 10 Minuten; ii 1-Brombutan-2-on, 0°C, 1 Stunde; iii Br-Wang-Harz, 0°C → Raumtemperatur, 12 Stunden; (b) DMF-DMA, THF, 60°C, 18 Stunden; (c) N-Phenylguanidin, THF, Rückfluss, 24 Stunden; (d) TFA, CH₂Cl₂, Wasser, Raumtemperatur, 14 Stunden.
Unter Verwendung der Herstellung von Verbindung V-1 als ein Beispiel, zeigt Schema IV einen allgemeinen synthetischen Weg, der verwendet werden kann, um Verbindungen der Formel V in paralleler Art auf folgende Weise herzustellen. Im Schritt (a) wird CS₂ zu einem Schlamm von 3-Chlorbenzoylacetonitril (1) und LiOH-H₂O in DMF hinzugefügt. Die resultierende Mischung wird mit 1-Brompentan-2-on behandelt, und dann wird zu dieser Mischung dann Brom-Wang-Harz hinzugefügt. Das Lösungsmittel wird durch Filtration entfernt und das Harz mit Lösungsmittel gespült und unter Stickstoff getrocknet, um harzgebundene Verbindung 2 zu liefern.
Im Schritt (b) wird die Verbindung 2 mit THF und DMF-DMA kombiniert und der resultierende Schlamm bei 60°C für 18 Stunden erwärmt. Das Lösungsmittel wird durch Filtration entfernt und das Harz mit Lösungsmittel gewaschen, dann unter Stickstoff getrocknet, um die Harz-gebundene Verbindung 3 zu liefern.
Der Pyrimidin-Ring wird im Schritt (c) durch Behandeln von 3 mit N-Phenylguanidin in THF unter Rückfluss für 24 Stunden gebildet. Das Lösungsmittel wird durch Filtration entfernt und das Harz mehrere Male mit Lösungsmittel gewaschen. Das resultierende Harz wird erneut mit N-Phenylguanidin in THF unter Rückfluss für weitere 24 Stunden behandelt. Das Lösungsmittel wird erneut entfernt durch Filtration und das Harz mehrere Male mit Lösungsmittel gewaschen, dann unter Stickstoff getrocknet, um die Harz-gebundene Verbindung 4 zu ergeben.
Das Produkt V-1 wird von dem Harz im Schritt (d) durch Behandeln von 4 mit Trifluoressigsäure in Dichlormethan und Wasser für 3 Stunden bei Raumtemperatur gespalten. Das Harz wird filtriert und mit Dichlormethan gewaschen, dann mit Trifluoressigsäure behandelt. Der resultierenden Mischung wird ermöglicht für 14 Stunden bei Raumtemperatur zu sitzen, dann filtriert. Das Harz wird mit Dichlormethan gewaschen, das Lösungsmittel konzentriert, und das Rohprodukt durch präparative HPLC gereinigt, um die Verbindung V-1 zu liefern. Die Details der verwendeten Bedingungen für das Herstellen dieser Verbindungen sind in den Beispielen dargelegt. Schema V
Reagenzien und Bedingungen: (a) i Ethylcyanoacetat, MgCl₂, CH₃CN, 0°C, 30 Minuten; ii Cyclohexancarbonylchlorid; (b) DMSO/Wasser, 120°C, 2 Stunden; (c) i CS₂, K₂CO₃, DMF; ii Chloraceton; iii Mel.
Schema V oben zeigt ein Verfahren zum Herstellen der Zwischenprodukt-Verbindung 5, welche verwendet werden kann, um Verbindungen der Formeln IIa, IIIa, VIa, V und VI herzustellen, wobei R³ ein Cyclohexyl-Ring ist. Die Zwischenprodukt-Verbindungen 5 kann leicht zu anderen Verbindungen der Formeln IIa, IIIa, IVa, V und VI durch die in den obigen Schemata I-VI gezeigten Verfahren umgewandelt werden.
Im Schritt (a) wird eine Lösung von Ethylcyanoacetat (2) in Acetonitril mit MgCl₂ und Et₃N bei 0°C behandelt, und die resultierende Suspension bei 0°C für 30 Minuten gerührt. Zu dieser Suspension wird Cyclohexancarbonylchlorid (1) hinzugefügt und die Reaktionsmischung bei 0°C gerührt. Die wässrige Aufarbeitung ergibt 3. Eine Lösung der Verbindung 3 in DMSO/H₂O wird erwärmt, dann ergibt die wässrige Aufarbeitung Verbindung 4.
Im Schritt (c) kann die Verbindung 4 verwendet werden, um Thiophen-Verbindung 5 unter Verwendung des im Schritt (a) des obigen Schemas II beschriebenen Verfahrens herzustellen. Schema VI
Reagenzien und Bedingungen: (a) NaH, CH₃CN, Toluen, Rückfluss; (b) i CS₂, K₂CO₃, DMF; ii 1-Brombutan-2-on; iiii Mel; (c) DMF-DMA, CH₃CN, Rückfluss, 18 Stunden; (d) N-(3-Hydroxyphenyl)guanidin, CH₃CN, Rückfluss; (e) 3-Brompropan-1-ol, K₂CO₃, DMF; (f) MsCl, Et₃N, CH₂Cl₂, Umgebungstemperatur; (g) Et₃N, Dimethylamin, CH₂Cl₂, Umgebungstemperatur; (i) NH₂CN, HCl/Dioxan, Rückfluss; (ii) H₂, Pd/C.
Unter Verwendung der Herstellung der Verbindung VI-18 als ein Beispiel, zeigt das obige Schema VI ein Verfahren zum Herstellen von Verbindungen der Formel VI, wobei R³ Pyridin-3-yl ist und Z eine C_1-4 Alkylidenkette ist, wobei eine Methyleneinheit von Z durch Sauerstoff ersetzt ist.
Im Schritt (a) wird eine Lösung von Ethylnicotinat in Toluen mit NaH behandelt und die resultierende Suspension bei 90°C, während Acetonitril hinzugefügt wird, erwärmt. Nach dem Erwärmen der Reaktion über Nacht, wird der Reaktionsmischung ermöglicht abzukühlen und die resultierenden Feststoffe durch Filtration gesammelt.
Die Schritte (b), (c) und (d) können auf eine Art und Weise durchgeführt werden, die im Wesentlichen zu jenen, die im Schritt (a) des Schemas 11, im Schritt (b) des Schemas IV, und im Schritt (c) der Schemata I und II beschrieben sind, ähnlich sind. Die resultierende Verbindung 6 kann verwendet werden, um eine Vielzahl von Verbindungen der Formel VI durch Verwenden von im Stand der Technik bekannten Verfahren herzustellen. Die Verbindung VI-18 wurde hergestellt, über die Schritte (e) bis (g) aus Verbindung 6 durch Alkylieren des Phenols mit 3-Brompropanol bei Schritt (e). Ein Fachmann würde erkennen, dass die Phenolgruppe der Verbindung 6 leicht auf eine Vielzahl von Arten derivatisiert werden kann, um andere Verbindungen der Formel VI zu bilden. Im Schritt (f) wird das Propanol-OH mit MsCl behandelt, um das Mesylat zu bilden, welches mit Dimethylamin im Schritt (g) verdrängt wird, um Verbindung VI-18 zu bilden. Ein Fachmann wird erkennen, dass andere Abgangsgruppen ausgenutzt werden können, um weitere Derivatisierungen der -OH-Gruppe zu ermöglichen und dass diese Abgangsgruppe mit einer Vielzahl von Aminen verdrängt werden kann, um andere Verbindungen der Formel VI zu bilden. Die Details der verwendeten Bedingungen, um die Verbindungen des Schemas VI herzustellen, sind in den Beispielen dargelegt. Schema VII
Reagenzien und Bedingungen: (a) DMF-DMA, Toluen, Rückfluss; (b) 3-Nitrophenylguanidin, DMF; (c) H₂, 10% Pd/C, Methanol; (d) R⁶-Z-COCH, EDC, HOBt, DIPEA, CH₂Cl₂; (e) R⁶-Z-Br, NaOtBu, THF.
Das obige Schema VII zeigt ein allgemeines Verfahren für das Herstellen von Verbindungen der Formel VI, wobei Z eine C_1-4Alkylidenkette ist, worin eine Methyleneinheit von Z durch NH oder NHCO ersetzt ist. Verbindung 1 kann gemäß den oben beschriebenen allgemeinen Verfahren hergestellt werden. Verbindung V-7 kann durch die Schritte (a) und (b) gemäß den oben beschriebenen Verfahren hergestellt werden. Im Schritt (c) wird die Nitro-Gruppe in der Gegenwart von Palladium auf Kohlenstoff hydriert, um die Amino-Verbindung V-8 zu bilden. Verbindung V-8 kann verwendet werden, um eine Vielzahl von Verbindungen der Formel VI herzustellen. Zum Beispiel kann Verbindung V-8 mit einer Carbonsäure gekoppelt werden, um Amidverbindungen 5 zu bilden. Alternativ kann die Verbindung V-8 alkyliert werden, um Verbindungen 6 zu bilden. Der Fachmann wird erkennen, dass Verbindung V-8 mit einer Vielzahl von Reagenzien behandelt werden kann, um andere Verbindungen der Formel VI zu bilden.
Gemäß einer anderen Ausführungsform bietet die Erfindung ein Verfahren zum Inhibieren von JNK, Src, oder Lck Kinaseaktivität in einer biologischen Probe. Dieses Verfahren weist den Schritt des Kontaktierens besagter biologischer Probe mit einer Verbindung der Formel I auf. Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform betrifft die Erfindung ein Verfahren zum Inhibieren von JNK, Src, oder Lck Kinaseaktivität in einer biologischen Probe, welches den Schritt des Kontaktierens besagter biologischen Probe mit einer Verbindung der Formel IIa, IIb, V, oder VI aufweist. Eine noch bevorzugtere Ausführungsform betrifft das Kontaktieren der besagten biologischen Probe mit einer Verbindung der Formel IIa oder VI.
Der Begriff „biologische Probe", so wie hierin verwendet, enthält, ohne Einschränkung, Zellkulturen oder Extrakte davon, biopsiertes Material erhalten aus einem Säugetier oder Extrakte davon und Blut, Speichel, Urin, Fäzes, Samen, Tränen oder andere Körperflüssigkeiten oder Extrakte davon.
Inhibierung der JNK, Src, oder Lck Kinaseaktivität in einer biologischen Probe ist für eine Vielzahl von Zwecken nützlich, die einem Fachmann bekannt sind. Zu Beispielen für solche Zwecke zählen, ohne darauf beschränkt zu sein, Blut, Transfusion, Organ-Transplantation, biologische Probenlagerung und biologische Untersuchungen.
Verbindungen der Formel I oder Salze davon können in Zusammensetzungen formuliert werden. In einer bevorzugten Ausführungsform ist die Zusammensetzung eine pharmazeutisch-akzeptable Zusammensetzung. In einer Ausführungsform weist die Zusammensetzung eine Menge der Verbindung auf, welche wirksam ist, eine Proteinkinase, insbesondere JNK, Src oder Lck, in einer biologischen Probe oder in einem Patienten zu inhibieren. In einer anderen Ausführung können Verbindungen dieser Erfindung und pharmazeutische Zusammensetzungen davon, welche eine Menge der Verbindung, die wirksam ist, einen JNK, Src, oder Lck-vermittelten Zustand und einen pharmazeutisch akzeptabeln Träger, Adjuvans oder Vehikel aufweisen, für die Verabreichung an einen Patienten formuliert werden.
Die wirksame Menge, um die Proteinkinase zu inhibieren, zum Beispiel, JNK, Src oder Lck, ist eine, die die Kinaseaktivität im Vergleich zu der Aktivität des Enzyms in der Abwesenheit eines Inhibitors messbar inhibiert. Jedes Verfahren kann verwendet werden, um die Inhibierung zu bestimmen.
Der Begriff „pharmazeutisch akzeptabler Träger, Adjuvans, oder Vehikel" bezieht sich auf einen nicht-toxischen Träger, Adjuvans, oder Vehikel, der/das an einen Patienten, zusammen mit einer Verbindung dieser Erfindung, verabreicht werden kann, und welcher(s) die pharmakologische Aktivität davon nicht zerstört.
Der Begriff „Patient", bedeutet ein Mensch und tierische Lebewesen.
Zu pharmazeutisch akzeptablen Trägern, die in diesen pharmazeutischen Zusammensetzungen verwendet werden können, zählen, ohne darauf beschränkt zu sein, Ionenaustauscher, Aluminiumoxid, Aluminumstearat, Lecithin, Serumproteine, wie humanes Serumalbumin, Puffersubstanzen, wie Phosphate, Glycin, Sorbinsäure, Kaliumsorbat, partielle Glyceridmischungen von gesättigten pflanzlichen Fettsäuren, Wasser, Salze, oder Elektrolyte, wie Protaminsulfat, Dinatriumhydrogenphosphat, Kaliumhydrogenphosphat, Natriumchlorid, Zinksalze, kolloidales Silica, Magnesiumtrisilicat, Polyvinylpyrrolidon, Zellulose-basierende Substanzen, Polyethylenglykol, Natriumcarboxymethylzellulose, Polyacrylate, Wachse, Polyethylen-Polyoxypropylen-Blockpolymere, Polyethylenglycol und Wollfett.
Die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung kann oral, parenteral, durch Inhalationsspray, topisch, rektal, nasal, bukkal, vaginal, oder über ein implantiertes Reservoir verabreicht werden. Der Begriff „parenteral", so wie hierin verwendet, beinhaltet subkutane, intravenöse, intramuskuläre, intra-artikuläre, intrasynoviale, intrasternale, intrathekale, intrahepatische, intraläsionale, und intrakraniale Injektions- oder Infusionstechniken. Vorzugsweise, werden die Zusammensetzungen oral, intraperitoneal oder intravenös verabreicht.
Sterile injizierbare Formen der Zusammensetzungen dieser Erfindung können wässrige oder ölige Suspensionen sein. Diese Suspensionen können gemäß im Stand der Technik bekannter Techniken unter Verwendung geeigneter Dispergier- oder Benetzungsmittel und Suspendiermittel formuliert werden. Die sterile injizierbare Zubereitung kann ebenfalls eine sterile injizierbare Lösung oder Suspension in einem nicht-toxischen parenteral-akzeptablen Verdünnungsmittel oder Lösungsmittel sein, zum Beispiel als eine Lösung in 1,3-Butandiol. Unter den akzeptablen Vehikeln und Lösungsmitteln, die eingesetzt werden können, sind Wasser, Ringer's Lösung, und isotonsiche Natriumchlorid-Lösung. Zusätzlich werden sterile Fettlöle herkömmlich als ein Lösungsmittel oder Suspendiermittel eingesetzt. Für diesen Zweck kann jedes milde Fettlöl eingesetzt werden, einschließlich synthetischer Mono- oder Digylceride. Fettsäuren, wie Ölsäure und ihre Glycerid-Derivate sind bei der Herstellung von Injizierbaren, ebenso wie natürliche pharmazeutisch-akzeptable Öle, wie Olivenöl oder Rizinusöl, insbesondere in ihren polyoxyethylierten Versionen nützlich. Diese Öllösungen oder Suspensionen können ein langkettiges Alkohol-Verdünnungsmittel oder Dispergiermittel, wie Carboxymethylzellulose oder ähnliche Dispergiermittel, die häufig in der Formulierung von pharmazeutisch akzeptablen Dosierungsformen, einschließlich Emulsionen und Suspensionen, enthalten. Andere häufig verwendete oberflächenaktive Substanzen, wie Tweens, Spans und andere Emulgatoren oder Bioverfügbarkeitsverstärker, welche für gewöhnlich bei der Herstellung von pharmazeutisch-akzeptablen festen, flüssigen, oder anderen Dosierungsformen verwendet werden, können ebenfalls für den Zweck der Formulierung verwendet werden.
Die pharmazeutisch-akzeptablen Zusammensetzungen dieser Erfindung können oral in jeder oral-akzeptierbaren Dosierungsform verabreicht werden, einschließlich, ohne darauf beschränkt zu sein, Kapseln, Tabletten, wässrige Suspensionen oder Lösungen. Im Falle von Tablette für die orale Verwendung zählen zu den für gewöhnlich verwendeten Trägern Laktose und Maisstärke. Gleitmittel, wie Magnesiumstearat, werden ebenfalls typischerweise hinzugefügt. Für die orale Verabreichung in Kapselnform zählen zu nützlichen Verdünnungsmitteln Laktose und getrocknete Maisstärke. Wenn wässrige Suspensionen für die orale Verwendung benötigt werden, wird der aktive Wirkstoff mit Emulgatoren und Suspendiermittel kombiniert. Wenn gewünscht, können bestimmte Süßstoffe, Geschmacksstoffe oder Farbstoffe können auch hinzugefügt werden.
Alternativ können die pharmazeutisch-akzeptablen Zusammensetzungen dieser Erfindung in Form von Zäpfchen für die rektale Verabreichung verabreicht werden. Diese können durch Mischen des Wirkstoffes mit einem geeigneten nicht-irritierenden Exzipienten, der bei Raumtemperatur fest ist, jedoch bei rektaler Temperatur flüssig ist, und deshalb im Rektum schmelzen wird, um das Arzneimittel freizusetzen, hergestellt werden. Zu solchen Materialen zählen Kakaobutter, Bienenwachs, und Polyethylenglycolen.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können ebenfalls topisch verabreicht werden, insbesondere wenn das Ziel der Behandlung Bereiche oder Organe umfasst, die leicht für die topische Applikation zugänglich sind, einschließlich Krankheiten des Auges, der Haut, oder des unteren Darmtraktes. Geeignete topische Formulierungen werden leicht für jeden(s) dieser Bereiche oder Organe hergestellt.
Die topische Applikation für den unteren Darmtrakt kann durch eine rektale Zäpfchenformulierung (siehe oben) oder durch eine passende Klistierformulierung bewirkt werden. Topisch-transdermaler Flicken kann ebenfalls verwendet werden.
Für die topischen Applikationen können die pharmazeutisch-akzeptablen Zusammensetzungen in eine geeignete Salbe formuliert werden, die die aktive Komponente, die in einem oder mehreren Trägern suspendiert oder aufgelöst ist, enthält. Träger für die topische Verabreichung der Verbindungen dieser Erfindung enthalten, ohne darauf beschränkt zu sein, Mineralöl, flüssiges Petrolatum, weißes Petrolatum, Propylenglycol, Polyoxyethylen, Polyoxypropylen-Verbindung, Emulgatorwachs und Wasser. Alternativ können die pharmazeutischen Zusammensetzungen in eine geeignete Lotion oder Creme formuliert werden, die die aktiven Komponenten in einem oder mehreren pharmazeutisch akzeptablen Träger suspendiert oder aufgelöst enthalten. Zu geeigneten Trägern zählen, ohne darauf beschränkt zu sein, Mineralöl, Sorbitanmonostearat, Polysorbat 60, Cetylesterwachs, Cetearylalkohol, 2-Octyldodecanol, Benzylalkohol und Wasser.
Für die ophthalmische Verwendung können die pharmazeutischen Zusammensetzungen als mikronisierte Suspensionen in isotonischer, pH-eingestellter steriler Salzlösung, oder vorzugsweise, als Lösung in isotonischer, pH-eingestellter steriler Salzlösung, entweder mit oder ohne Konservierungsmittel, wie Benzylalkoniumchlorid, formuliert werden. Alternativ können die pharmazeutischen Zusammensetzungen für die ophthalmischen Verwendungen in einer Salbe, wie Petrolatum, formuliert werden.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können ebenfalls durch nasale Aerosole oder Inhalation verabreicht werden. Solche Zusammensetzungen werden gemäß im Stand der Technik der pharmazeutischen Formulierung bekannter Techniken hergestellt werden und können als Lösungen in Salzlösungen, unter Verwenden von Benzylalkohol oder anderen geeigneten Konservierungsmitteln, Absorptionspromotoren, um die Bioverfügbarkeit zu erhöhen, Fluorkohlenstoffe, und/oder anderen konventionellen Solubiliserungs- oder Dispergiermittel hergestellt werden.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform werden die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung oral verabreicht.
Gemäß einer anderen Ausführungsform betrifft die vorliegende Erfindung ein pharmazeutisch-akzeptables Salz einer Verbindung der Formel I. In einer bevorzugten Ausführungsform ist besagtes pharmazeutisch-akzeptables Salz von einer Verbindung der Formel IIa, V oder VI. Noch mehr bevorzugt ist das besagte pharmazeutisch akzeptable Salz von einer bevorzugten Verbindung der Formel IIa, V oder VI. Zusätzlich zu den Verbindungen dieser Erfindung können pharmazeutisch akzeptable Salze der Verbindungen dieser Erfindung ebenfalls in Zusammensetzungen verwendet werden, um die oben identifizierten Krankheiten oder Erkrankungen zu behandeln oder verhindern.
Ein „pharmazeutisch akzeptables Salz" bedeutet jedes pharmazeutisch akzeptable Salz, Ester, Salz eines Esters oder ein anderes Derivat einer Verbindung dieser Erfindung, das, nach Verabreichung an einen Empfänger, in der Lage ist, entweder direkt oder indirekt, eine Verbindung dieser Erfindung oder einen inhibitorischaktiven Metabolit oder Rest davon bereitzustellen. Die Verfahren zum Herstellen von Salzen oder Estern von einer Verbindung dieser Erfindung sind einem Fachmann bekannt. Besonders bevorzugte Salze sind jene, die die Bioverfügbarkeit der Verbindungen dieser Erfindung erhöhen, wenn solche Verbindungen einem Patienten verabreicht werden (z.B. durch Ermöglichen einer oral verabreichten Verbindung, leichter in das Blut absorbiert zu werden) oder welche die Abgabe der Stammverbindung an ein biologisches Kompartiment (z.B. Hirn oder lymphatisches System) in Bezug auf die Stammspezies verstärkt.
Zu pharmazeutisch akzeptablen Salzen der Verbindungen dieser Erfindung zählen, ohne Einschränkung, Ester, Aminosäureester, Phosphatester, Metallsalze und Sulfonatester.
Zu pharmazeutisch akzeptablen Salzen der Verbindungen dieser Erfindung zählen jene, die von pharmazeutisch akzeptablen anorganischen oder organischen Säuren und Basen abgeleitet sind. Zu Beispielen von geeigneten Säuresalze zählen Acetat, Adipat, Alginat, Aspartat, Benzoat, Benzensulfonat, Bisulfat, Butyrat, Citrat, Camphorat, Camphorsulfonat, Cyclopentanproprionat, Digluconat, Dodecyclsulfat, Ethansulfonat, Format, Fumarat, Glucoheptanoat, Glycerophosphat, Glycolat, Hemisulfat, Heptanoat, Hexanoat, Hydrochlorid, Hydrobromid, Hydroiodid, 2-Hydroxyethansulfonat, Lactat, Maleat, Malonat, Methansulfonat, 2-Naphthalensulfonat, Nicotinat, Nitrat, Oxalat, Palmoat, Pectinat, Persulfat, 3-Phenylproprionat, Phosphat, Picrat, Pivalat, Propionat, Salicylat, Succinat, Sulfat, Tartrat, Thiocyanat, Tosylat, und Undecanoat. Andere Säuren, wie Oxalsäure, während sie selbst nicht pharmazeutisch akzeptabel sind, können bei der Herstellung von Salzen eingesetzt werden, die als Zwischenprodukte beim Erhalten der Verbindungen der Erfindung und ihrer pharmazeutisch akzeptablen Säureadditionssalze nützlich sind.
Zu Salzen, die von geeigneten Basen abgeleitet sind, zählen Alkalimetalle (z.B. Natrium und Kalium), Erdalkali-Metalle (z.B. Magnesium), Ammonium und N⁺(C_1-4 Alkyl)₄-Salze. Diese Erfindung sieht ebenfalls die Quaternisierung von allen basischen Stickstoff-haltigen Gruppen der hierin offenbarten Verbindung vor. Wasser und Öl-lösliche und dispergierbare Produkte können durch eine solche Quaternisierung erhalten werden.
Es ist auch verständlich, dass eine spezifische Dosierung und spezifischer Behandlungsplan für jeden bestimmten Patienten von einer Reihe von Faktoren abhängen wird, einschließlich der Aktivität der spezifischen, eingesetzten Verbindung, dem Alter, dem Körpergewicht, dem allgemeinen Gesundheitszustand, dem Geschlecht, der Kost, der Verabreichungszeit, der Exrektionsrate, der Arzneimittelkombination, und der Beurteilung des behandelnden Arztes und der Schwere der bestimmten zu behandelnden Krankheit. Die Dosierung einer Verbindung wird ebenfalls abhängen, welche bestimmte Verbindung in der Zusammensetzung ist.
Die Verbindungen dieser Erfindung sind Inhibitoren von JNK, Src und Kck Kinase, wie durch enzymatische Untersuchung bestimmt ist. Dementsprechend sind diese Verbindungen für das Behandeln von JNK-, Src- oder Lck-vermittelten Krankheiten oder Bedingungen nützlich.
Ein weiterer Aspekt dieser Erfindung betrifft eine Verbindung der Formel I, oder eine pharmazeutisch akzeptable Zusammensetzung, welche besagte Verbindung aufweist, für die Verwendung beim Behandeln einer JNK-, Src- oder Lck-vermittelten Krankheit in einem Patienten. Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform betrifft die Erfindung eine Verwendung einer Verbindung der Formel IIa, IIb, IIIa, IIIb, IVa, IVb, V oder VI oder einer pharmazeutisch akzeptablen Zusammensetzung, welche besagte Verbindung aufweist. Eine noch mehr bevorzugte Ausführungsform betrifft die Verwendung einer Verbindung der Formel IIa, V oder VI oder eine pharmazeutisch akzeptable Zusammensetzung, welche besagte Verbindung aufweist.
Ein noch weiterer Aspekt dieser Erfindung betrifft eine Verbindung der Formel I, oder eine pharmazeutisch akzeptable Zusammensetzung, welche besagte Verbindung aufweist, für die Verwendung bei der Verminderung der Schwere einer JNK-, Src-, oder Lck-vermittelten Krankheit in einem Patienten. Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform betrifft die Erfindung die Verwendung einer Verbindung der Formel IIa, IIb, IIIa, IIIb, IVa, IVb, V oder VI oder einer pharmazeutisch akzeptablen Zusammensetzung, welche besagte Verbindung aufweist. Eine noch mehr bevorzugte Ausführungsform betrifft die Verwendung einer Verbindung der Formel IIa, V oder VI oder einer pharmazeutisch akzeptablen Zusammensetzung, welche besagte Verbindung enthält.
Die Aktivität der Verbindungen dieser Erfindung als Kinaseinhibitoren kann in vitro, in vivo oder in einer Zelllinie untersucht werden. In vitro Untersuchungen beinhaltet Untersuchungen, die die Inhibierung entweder der Kinaseaktivität oder der ATPase-Aktivität von aktiviertem Enzym, zum Beispiel JNK, Lck oder Src bestimmt. Ersatz in vitro Untersuchungen quantifizieren die Fähigkeit des Inhibitors an JNK, Lck oder Src zu binden und können entweder durch Radiomarkierung des Inhibitors vor der Bindung, Isolierung des Inhibitor/JNK, Inhibitor/Lck oder Inhibitor/Src-Komplexes und Bestimmen der Menge an gebundener Radiomarkierung, oder durch Durchführen eines Kompetitionsexperimentes, in welchem neue Verbindungen mit JNK, Lck, oder Src, die an bekannte Radiomarkierungen gebunden sind, inkubiert werden, gemessen werden. Man kann jede Art oder Isoform von JNK, Lck oder Src in Abhängigkeit davon, welche JNK, Lck oder Src-Art oder Isoform zu inhibieren ist, verwenden. Die Details der für die enzymatischen Untersuchungen verwendetet Bedingungen sind in den Beispielen hierin später dargelegt.
Der Begriff „JNK-vermittelte Krankheit" oder „Zustand", so wie hierin verwendet", bedeutet jede Krankheit oder anderen schädlichen Zustand, in welcher(m) JNK bekanntermaßen eine Rolle spielt. Zu solchen Bedingungen zählen, ohne Einschränkung, entzündliche Krankheiten, Autoimmunerkrankungen, destruktive Knochenerkrankungen, proliferative Krankheiten, Krebs, infektiöse Krankheiten, neurodegenerative Krankheiten, Allergien, Reperfusion/Ischämie bei Schlaganfall, Herzattacke, anigogene Krankheiten, Organhypoxie, vaskuläre Hyperplasie, Herzhypertrophie, Thrombin-induzierte Blutplättchen-Aggregation, und Zustände, die mit Prostaglandin-Endoperoxidase-Synthase-2 assoziiert sind.
Entzündliche Krankheit, welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt oder verhindert werden können, beinhalten, ohne darauf beschränkt zu sein, akute Pankreatitis, chronische Pankreatitis, Asthma, Allergien, und Atemnotsyndrom des Erwachsenen.
Autoimmunerkrankungen, welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt oder verhindert werden können, beinhalten, ohne darauf beschränkt zu sein, Glomerulonephritis, Gelenksrheumatismus, Lupus erythematodes visceralis, Skleroderma, chronische Thyroiditis, Graves Krankheit, autoimmune Gastritis, Diabetes, autoimmunhämolytische Anämie, Autoimmunneutropenie, Thromocytopenie, atopische Dermatitis, chronische aktive Hepatitis, Myasthenia gravis, Multiple Sklerose, entzündliche Darmkrankheit, Colitis ulcerosa, Crohn's Krankheit, Psoriasis, oder Transplantat vs. Wirt-Krankheit.
Destruktive Knochenkrankheiten, welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt oder verhindert werden können, beinhalten, ohne darauf beschränkt zu sein, Osteoporose, Osteoarthritis und multiple Myelom-bedingte Knochenkranheit.
Proliferative Krankheiten, welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt oder verhindert werden können, beinhalten, ohne darauf beschränkt zu sein, akute myelogene Leukämie, chronische myelogene Leukämie, metastatisches Melanom, Kaposi-Sarkom, multiples Myelom und HTLV-1-vermittelte Tumorgenese.
Angiogene Krankheiten, welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt oder verhindert werden können, beinhalten solide Tumore, Okulare Neovaskularisation, kindliches Hämangiom. Infektiöse Krankheiten, welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt oder verhindert werden können, beinhalten, ohne darauf beschränkt zu sein, Sepsis, septischer Schock, und Shigellosis.
Virale Krankheiten, welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt oder verhindert werden können, beinhalten, ohne darauf beschränkt zu sein, akute Hepatitis-Infektion (einschließlich Hepatitis A, Hepatitis B und Hepatitis C), HIV Infektion und CMV Retinitis.
Neurodegenerative Krankheiten, welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt oder verhindert werden können, beinhalten, ohne darauf beschränkt zu sein, Alzheimer Krankheit, Parkinson Krankheit, amyotrophe Lateralsklerose (ALS), Epilepsie, Ictus, Huntington Krankheit, traumatische Gehirnverletzung, ischämischer und hämorrhagischer Schlaganfall, zerebrale Ischämien oder neurodegenerative Krankheiten, einschließlich Apoptosis-angetriebe neurodegenerative Krankheit, die durch traumatische Verletzung hervorgerufen wird, akute Hypoxie, Ischämie oder Glutamat-Neurotoxizität.
„JNK-vermittelte Krankheit" oder „Zustand" enthält ebenfalls Ischämie/Reperfusion bei Schlaganfall, Herzinfarkt, Myocardischämie, Organhypoxie, vaskuläre Hyperplasie, Herzhypertrophie, hepatische Ischämie, Leberkrankheit, kongestives Herzversagen, pathologische Immunreaktionen, wie jene, die durch T-Zellen-Aktivierung und Thrombin-induzierte Blutplättchen-Aggregation verursacht werden.
Zusätzlich können JNK Inhibitoren der vorliegenden Erfindung in der Lage sein, die Expression von induzierbaren proinflammatorischen Proteinen zu inhibieren. Deshalb zählen zu anderen „JNK-vermittelten Krankheiten" oder „Zuständen", welche durch die Verbindungen dieser Erfindung behandelt werden können, Ödem, Analgesie, Fieber und Schmerz, wie neuromuskulärer Schmerz, Kopfschmerzen, Krebsschmerzen, Zahnschmerzen, und Arthritis-Schmerz.
Die Verbindungen dieser Erfindung sind ebenfalls als Inhibitoren der Src-Familie-Kinasen, insbesondere Src, nützlich. Für einen allgemeinen Überblick über diese Kinasen siehe Thomas und Brugge, Annu. Rev. Cell Dev. Biol. (1997) 13, 513; Lawrence und Niu, Pharmacol. Ther. (1998) 77, 81; Tatosyan und Mizenina, Biochemistry (Moscow) (2000) 65, 49. Dementsprechend sind diese Verbindungen für das Behandeln von Src-vermittelten Krankheiten oder Zuständen nützlich.
Der Begriff „Src-vermittelten Krankheit" oder „Zustand", so wie hierin verwendet, bedeutet jede Krankheit oder anderen schädlichen Zustand, von welcher(m) bekannt ist, durch Aktivität von einer oder mehreren Src-Familie-Kinasen beeinflusst zu werden. Zu solchen Krankheiten zählen Hyperkalzämie, Restenose, Hyperkalzämie, Osteoporose, Osteoarthritis, symptomatische Behandlung von Knochenmetastase, Gelenksrheumatismus, inflammatorische Darmkrankheit, Multiple Sklerose, Psoriasis, Lupus, Transplantat vs. Wirtskrankheit, T-Zellen vermittelte Hypersensitivitätskrankheit, Hashimoto Thyroiditis, Guillain-Barre Syndrom, chronische Bronchitis, Kontaktdermatitis, Krebs, Paget's Krankheit, Asthma, Ischämie oder Reperfusionsverletzung, allergische Erkrankung, atopische Dermatitis, und allergische Rhinitis. Zu Krankheiten, die durch die Src Aktivität beeinflusst werden, zählen insbesondere Hyperkalzämie, Osteoporose, Osteoarthritis, Krebs, symptomatische Behandlung von Knochenmetastase, und Paget's Krankheit.
Der Begriff „Lck-vermittelte Krankheit" oder „Zustand", so wie hierin verwendet, bedeutet jede Krankheit oder anderen schädlichen Zustand, von welcher(m) bekannt ist, durch die Aktivität von einer oder mehreren Lck-Kinasen beeinflusst zu werden. Zu solchen Krankheiten oder Zuständen zählen Autoimmunerkrankungen, Allergien, Gelenksrheumatismus, und Leukämie.
Eine bevorzugte Ausführungsform betrifft die Verbindungen dieser Erfindung für die Verwendung zum Behandeln oder Verhindern einer JNK-vermittelten Krankheit, die ausgewählt ist aus entzündlicher Krankheit, Autoimmunerkrankungen, destruktive Knochenkrankheiten, neurodegenerative Krankheiten, Allergien, Reperfusion/Ischämie bei Schlaganfall, Herzinfarkte, angiogene Krankheiten, Organhypoxie, vaskuläre Hyperplasie, Herzhypertrophie oder Thrombin-induzierter Blutplättchen-Aggregation.
Eine andere bevorzugte Ausführungsform betrifft die Verbindungen dieser Erfindung zum Behandeln oder Verhindern einer Src-vermittelten Krankheit, die ausgewählt ist aus Hyperkalzämie, Osteoperose, Osteoarthritis, oder symptomatische Behandlung von Knochenmetastase.
Eine andere bevorzugte Ausführungsform betrifft die Verbindungen dieser Erfindung für die Verwendung beim Behandeln oder Verhindern einer Lck-vermittelten Krankheit, die ausgewählt ist aus Autoimmunerkrankungen, Gelenksrheumatismus, und Leukämie.
In Abhängigkeit des bestimmten Proteinkinase-vermittelten Zustandes, der zu behandeln oder verhindern ist, können zusätzliche therapeutische Wirkstoffe, die normalerweise verabreicht werden, um diesen Zustand zu behandeln oder verhindern, zusammen mit den Verbindungen dieser Erfindung verabreicht werden. Zum Beispiel können bei der Behandlung von Krebs andere chemotherapeutische oder antiproliferative Wirkstoffe mit den Verbindungen dieser Erfindung kombiniert werden, um Krebs zu behandeln. Zu diesen Wirkstoffen zählen, ohne Einschränkung, Adriamycin, Dexamethason, Vincristin, Cyclophosphamid, Fluoruracil, Topotecan, Taxol, Interferone und Platin-Derivate.
Andere Beispiele von Wirkstoffen, die mit den Verbindungen dieser Erfindung ebenfalls kombiniert werden, beinhalten, ohne Einschränkung, antidiabetische Wirkstoffe, einschließlich Insulin oder Insulinanaloga in injizierbarer oder Inhalationsform, Glitazone, Alpha-Glucosidase-Inhibitoren, Biguanide, Insulin-Sensibilisatoren, und Sulfonylharnstoffe-chemotherapeutische Wirkstoffe, entzündungshemmende Wirkstoffe, wie Corticosteroide, TNF-Blocker, IL-1 RA, Azathioprin, Cyclophosphamid, und Sulfasalazin; immunmodulatorische und immunsuppressive Wirkstoffe, wie Cyclosporin, Tacrolimus, Rapamycin, Mycophenolat mofetil, Interferone, Corticosteroide, Cyclophophamid, Azathioprin, und Sulfasalazin; neurotrophische Faktoren, wie Acetylcholinesterase-Inhibitoren, MAO-Inhibitoren, Interferone, Antikonvulsiva, Ionenkanal-Blocker, Riluzol, und Anti-Parkinson-Wirkstoffe; Wirkstoffe für das Behandeln von kardiovaskulärer Krankheit, wie beta-Blocker, ACE Inhibitoren, Diuretika, Nitrate, Kalziumkanal-Blocker, und Statin; Wirkstoffe für das Behandeln von Leberkrankheiten, wie Corticosteroide, Cholestyramin, Interferone, und antivirale Wirkstoffe; Wirkstoffe für das Behandeln von Blutkrankheiten, wie Corticosteroide, antileukäemische Wirkstoffe und Wachstumsfaktoren; und Wirkstoffe für das Behandeln von Immunodefizienzerkrankungen, wie Gamma-Globulin.
Diese zusätzlichen Wirkstoffe können getrennt von der Verbindungsenthaltenden Zusammensetzung, als Teil eines Mehrfachdosierungstherapieschemas verabreicht werden. Alternativ können diese Wirkstoffe Teil einer Einzelzusammensetzung, zusammengemischt mit der Verbindung dieser Erfindung in einer Einzeldosierungsform sein. Wenn als Teil eines Mehrfachdosierungstherapieschemas verabreicht, können die zwei aktiven Wirkstoffe gleichzeitig, sequentiell oder innerhalb einer Zeitperiode voneinander, normalerweise innerhalb von fünf Stunden von einander verabreicht werden.
Die Menge von Beiden, der Verbindung und des zusätzlichen therapeutischen Wirkstoffs (in jenen Zusammensetzungen, welche einen zusätzlichen therapeutischen Wirkstoff, wie oben beschrieben, enthalten), die mit den Trägermaterialien kombiniert werden können, um eine Einzeldosierungsform zu erzeugen, wird in Abhängigkeit von dem behandelten Wirt und der bestimmten Verabreichungsart variieren. Vorzugsweise sollten die Zusammensetzungen dieser Erfindung so formuliert sein, dass eine Dosierung von zwischen 0,01 – 100 mg/kg Körpergewicht/Tag einer Verbindung der Formel I verabreicht werden kann.
In jenen Zusammensetzungen, welche einen zusätzlichen therapeutischen Wirkstoff aufweisen, können dieser zusätzliche therapeutische Wirkstoff und die Verbindung dieser Erfindung synergistisch wirken. Somit wird die Menge an zusätzlichem therapeutischem Wirkstoff, in solchen Zusammensetzungen kleiner sein, als jene die in einer Monotherapie, die nur diesen therapeutischen Wirkstoff ausnutzt, benötigt ist. In solchen Zusammensetzungen kann eine Dosierung von zwischen 0,01 bis 100 μg/kg Körpergewicht/Tag des zusätzlichen therapeutischen Wirkstoffs verabreicht werden.
Die Verbindung dieser Erfindung oder pharmazeutischen Zusammensetzungen davon können ebenfalls in Zusammensetzung für das Überziehen einer implantierbaren medizinischen Vorrichtung, wie Prothesen, künstliche Ventile, vaskuläre Transplantate, Stents und Katheter eingebunden sein. Vaskuläre Stents, zum Beispiel, wurden verwendet, um Restenose (erneutes Verengen der Gefäßwände nach der Verletzung) zu überwinden. Patienten, die Stents oder andere implantierbare Vorrichtungen verwenden, riskieren jedoch eine Gerinnselbildung oder Plättchenaktivierung. Diese ungewünschten Wirkungen können durch das Vorüberziehen der Vorrichtung mit einer pharmazeutisch-akzeptablen Zusammensetzung, welche einen Kinase-Inhibitor aufweist, verhindert oder gelindert werden. Geeignete Überzüge und die allgemeine Zubereitung von überzogenen implantierbaren Vorrichtungen werden in US Patenten 6.099.562; 5.886.026; und 5.304.121 beschrieben. Die Überzüge sind typischerweise biokompatible Polymermaterialien, wie Hydrogel-Polymer, Polymethyldisiloxan, Polycaprolacton, Polyethylen, Glycol, Polymilchsäure, Ethylenvinylacetat, und Mischungen davon. Die Überzüge können weiters durch einen geeigneten Decküberzug wie Fluorsilikon, Polysaccharide, Polyethylenglycol, Phospholipide, oder Kombinationen davon bedeckt sein, um gesteuerte Freisetzungscharakteristika in der Zusammensetzung zu vermitteln. Implantierbare Vorrichtungen, die mit einer Verbindung dieser Erfindung überzogen sind, sind eine andere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung.
Jedes der vorgenannten Verfahren, die auf die Inhibierung von JNK, Lck oder Scr, oder die Behandlung einer dadurch gelinderten Krankheit gerichtet ist, wird vorzugsweise mit einer bevorzugten Verbindung der Formel I, IIa, V oder VI, wie oben beschrieben, durchgeführt. Noch mehr bevorzugt wird jedes der vorgenannten Verfahren mit einer bevorzugten Verbindung der Formel I, IIa, V oder VI durchgeführt, und am meisten bevorzugt mit einer Verbindung der Formel IIa, V oder VI.
Damit die hierin beschriebene Erfindung besser verstanden wird, sind die folgenden Beispiele dargelegt. Es ist verständlich, dass diese Beispiele nur für Illustrationszwecke dargelegt sind und nicht dahin auszulegen sind, dass sie diese Erfindung auf irgendeine Weise einschränken
Beispiele
So wie hierin verwendet, bezieht sich der Begriff "Rt (min)" auf die HPLC-Retentionszeit, in Minuten, die mit der Verbindung unter Verwendung des spezifizierten HPLC Verfahrens assoziiert ist. Wenn nicht anders angegeben, sind die benutzten HPLC Verfahren, um die angegebenen Retentionszeiten zu erhalten, wie Folgt:

Verfahren A: Säule: YMC ODS-AQ, 30 × 100 mm
Gradient: 10% → 90% CH₃CN/Wasser (0,2% TFA) über 5 Minuten
Flussrate: 1 mL/ Minute
Verfahren B: Säule: YMC ODS-AQ, 30 × 100 mm
Gradient: 10%→90% CH₃CN/Wasser (0,01 % TFA)
Flussrate: 1 mL/Minute
Detektion: 210, 220, 254, 280, und 300 nm.
Verfahren C: Säule: Lightning, 2,1 × 50 mm
Gradient: 100% Wasser (0,1 % TFA) → 100% CH₃CN (0,1 %TFA)
Flussrate: 0,8 mL/Minute

5-Acetyl-2-methylsulfanyl-4-(4-chlorphenyl)-thiophen-3-carbonitril: 3-(4-Chlor-phenyl)-3-oxo-propionitril (5 mmol) wurde zu einer Suspension von K₂CO₃ (3 Äquivalente, 15 mmol) in DMF (4,5 mL) hinzugefügt und erlaubt, bei Raumtemperatur zu rühren. Nach 10 Minuten wurde CS₂ (1,25 equivalents, 7,5 mmol) in einem Teil hinzugegeben und die resultierende Mischung bei Raumtemperatur für weitere 10 Minuten gerührt, dann wurde eine Lösung von 1-Chlorpropan-2-on (1,0 Äquivalent, 5 mmol) in DMF (5 mL) hinzugefügt. Nach 1 Stunde wurde eine Lösung von Mel (1,1 Äquivalente, 5,5 mmol) in DMF (2 mL) tropfenweise hinzugefügt, dann, nach 30 Minuten, wurde die Mischung auf Wasser geschüttet und die resultierende Mischung für 12-16 Stunden kräftig gerührt, um eine Suspension des gewünschten Produkts zu liefern. Das Rohprodukt wurde durch Filtration isoliert. Beispiel 2
2-Methylsulfanyl-5-(2-phenylaminopyrimidin-4-yl)-4-(4-methyl-phenyl)-thiophen-3-carbonitril (IIa-10) und 2-Ethoxy-5-(2-phenylaminopyrimidin-4-yl)-4-(4-chlorphenyl)-thiophen-3-carbonitril (IIa-11): Das rohe 5-Acetyl-2-methylsulfanyl-4-(4-chlorphenyl)-thiophen-3-carbonitril (1 mmol) wurde mit Brederick's Reagens (150 μL) in THF (10 ml) kombiniert und ermöglicht bei Raumtemperatur für 12-16 Stunden zu rühren. Die Reaktionsmischung wurde konzentriert und das rohe Konzentrat wurde in EtOH (10 mL) aufgelöst. N-Phenylguanidin (1,2 Äquivalente, 1,2 mmol) und Natriumacetat (1 Äquivalent, 1 mmol) wurden zu der ethanolischen Lösung hinzugefügt und die resultierende Mischung wurde bei 90°C für 4 Stunden erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde konzentriert, dann wurde der Rückstand in Ethylacetat aufgelöst. Die resultierende organische Lösung wurde nacheinander mit Wasser und Salzlösung gewaschen. Die organische Schicht wurde konzentriert, dann wurde der rohe Rückstand durch präparative HPLC gereinigt, um die Verbindungen IIa-10 und IIa-11 zu ergeben. Beispiel 3
5-Acetyl-2-methylsulfanyl-4-(4-methylphenyl)-thiophen-3-carbonitril: 3-(4-Methylphenyl)-3-oxo-propionitril (5 mmol) wurde zu einer Suspension von K₂CO₃ (3 Äquivalent, 15 mmol) in DMF (4,5 mL) hinzugegeben und ermöglicht bei Raumtemperatur zu rühren. Nach 10 Minuten wurde CS₂ (1,25 Äquivalente, 7,5 mmol) in einer Protion hinzugegeben und die resultierende Mischung bei Raumtemperatur für weitere 10 Minuten gerührt. Eine Lösung von 1-Chloropropan-2-on (1,0 Äquivalent, 5 mmol) in DMF (5 mL) wurde hinzugefügt. Nach 1 Stunde wurde eine Lösung von Mel (1 .1 Äquivalente, 5.5 mmol) in DMF (2 mL) tropfenweise hinzugefügt. Nach 30 Minuten wurde die Mischung auf Wasser geschüttet und die resultierende Mischung kräftig für 12-16 Stunden gerührt, um eine Suspension des gewünschten Produkts zu liefern. Das Rohprodukt wurde durch Filtration isoliert. Beispiel 4
2-Methylsulfanyl-5-(2-phenylaminopyrimidin-4-yl)-4-p-tolyl-thiophen-3-carbonitril (IIa-14) und 2-Ethoxy-5-(2-phenylaminopyrimidin-4-yl)-4-p-tolyl-thiophen-3-carbonitril (IIa-15): Das rohe 5-Acetyl-2-methylsulfanyl-4-(4-methylphenyl)-thiophen-3-carbonitril (1 mmol) wurde mit Brederick's Reagens (150 μL) in THF (10 ml) kombiniert und ermöglicht bei Raumtemperatur für 12-16 Stunden zu rühren. Die Reaktionsmischung wurde konzentriert und das rohe Konzentrat wurde in EtOH (10 mL) aufgelöst. N-Phenylguanidin (1,2 Äquivalente, 1,2 mmol) und Natriumacetat (1 Äquivalent, 1 mmol) wurden zu der ethanolischen Lösung hinzugefügt und die resultierende Mischung wurde bei 90°C für 4 Stunden erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde konzentriert, dann wurde der Rückstand in Ethylacetat aufgelöst. Die resultierende organische Lösung wurde nacheinander mit Wasser und Salzlösung gewaschen. Die organische Schicht wurde konzentriert, dann wurde der rohe Rückstand durch präparative HPLC gereinigt, um die Verbindungen IIa-14 und IIa-15 zu ergeben. Beispiel 5
3-Methyl-5-methylsulfanyl-4-(2-phenylaminopyrimidin-4-yl)-thiophen-2-carbonitril (IIa-37): 4(3-Dimethylaminoacryloyl)-3,4-dimethyl-5-methylsulfanyl-4,5-dihydro-thiophen-2-carbonitril (0,2 mmol) wurde mit N-Phenylguanidin (0,2 mmol) in Acetonitril (0,25 mL) kombiniert und die resultierende Mischung unter Rückfluss für 24 Stunden erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde mit Methanol (3mL) verdünnt und der resultierende Schlamm filtriert und der Feststoff wurde mit Methanol (2 mL) gewaschen, dann unter Stickstoff getrocknet, um IIa-37 zu ergeben. M+H = 507,1, HPLC: Rt = 6,196 Minuten, ¹H NMR (500Mz, DMSO) 9,77(s, 1H), 8,25(d, 1H, J=5,3Hz), 7,69(s, 1H), 7,48(m, 2H), 7,48(m, 4H), 7,41 (t, 2H, J=7,3Hz), 7,34(t, 1H, J=7,2Hz), 7,25(d, 1H, J=8,3Hz), 7,21 (t, 1H, J=8,0Hz), 6,67(d, 1H, J=6,7Hz), 6,01 (d, 1H, J=5,3Hz), 5,11 (s, 2H), 3,32(s, 3H, CH3), 2,68(s, 3H, CH3). Beispiel 6
3-[4-(4-Cyano-5-methylsulfanyl-3-phenyl-thiophen-2-yl)-pyrimidin-2-ylamino]-benzensulfonamid (IIa-38) : M+H = 480,1, HPLC R_t=5,018 Minuten, ¹H NMR (500Mz, DMSO) 10,12(s, 1H), 8,64(s, 1H), 8,28(d, 1H, J=5,3Hz), 7,69(d, 1H, J=7,7Hz), 7,60-7,58(m, 3H), 7,51 (d, 1H, J=7,7Hz), 7,49-7,47(m, 4H), 7,32(br s, 1H), 7,00(br s, 1H), 6,06(d, 1H, J=5,3Hz), 2,90(s, 3H). Beispiel 7
2-(4-Hydroxybenzylsulfanyl)-4-phenyl-5-(2-phenylaminopyrimidin-4-yl)-thiophen-3-carbonitril (IIa-39): M+H = 493,2, HPLC: R_t=5,812 Minuten, ¹H NMR (500Mz, DMSO) 9,75 (s, 1H), 8,24 (d, 1H, J=5,2Hz), 7,73 (d, 2H, J=8,0Hz), 7,57 (m, 3H), 7,44(m, 2H), 7,34 (t, 2H, J=7,9Hz), 7,26 (d, 2H, J=8,5Hz), 7,01 (t, 1H, 7,2Hz), 6,74(d, 2H, J=8,5Hz), 6,01 (d, 1H, J=5,2Hz), 4,43(s, 2H). Beispiel 8
5-[2-(3-Hydroxy-phenylamino)-pyrimidin-4-yl]-2-methylsulfanyl-4-phenyl-thiophen-3-carbonitril (IIa-40): M+H = 417,1, HPLC: Rt = 4,682 Minuten, ¹H NMR (500Mz, DMSO) 9,62 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,22 (d, 1H, J=5,3Hz), 7,58 (m, 3H), 7,48(m, 2H), 7,30(t, 1H, J = 1,9Hz), 7,16 (d, 1H, J=8,1 Hz), 7,07 (t, 1H, J=8,OHz), 6,40 (dd, 1H, J=7,9, 2,2Hz), 5,99 (d, 1H, J=5,2Hz), 2,84 (s, 3H). Beispiel 9
5-[2-(3-Benzyloxy-phenylamino)-pyrimidin-4-yl]-2-hydroxy-4-phenyl-thiophen-3-carbonitril (IIa-42): M+H = 477,2, HPLC: Rt = 4,530 Minuten, ¹H NMR (500Mz, DMSO) 10,13 (s, 1H), 7,55 (m, 4H), 7,48-7,38 (m, 5H), 7,34 (t, 1H, J=7,2Hz), 7,29 (t, 1H, J=8,2Hz), 7,12 (d, 1H, J=7,8Hz), 6,79 (dd,1H, J=8,2, 2,1 Hz), 5,63 (d, 1H, J=7,1 Hz), 5,18 (s, 2H). Beispiel 10
5-[2-(3-Hydroxy-phenylamino)-pyrimidin-4-yl]-2-methylsulfanyl-4-(3-pyridin-4-yl-phenyl)-thiophen-3-carbonitril (IIa-105): Zu 2 ml DME in einem 10 ml Röhrchen wurde I (50mg, 0,10mmol), 4-(4,4,5,5-Tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)pyridin (25 mg, 0,12mmol) und Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (11,5 mg, 0,01 mmol) hinzugefügt. Die Mischung wurde bei Umgebungstemperatur unter Stickstoff für 30 Minuten gerührt, dann wurde 0,3 ml gesättigte NaHCO₃ wässrige Lösung zu der Reaktionsmischung hinzugefügt und die Reaktion bei 45 °C in einem versiegelten Röhrchen für 6 Stunden gerührt. Die Reaktion wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt und dann mit 2 ml Wasser verdünnt. Die Mischung wurde mit Ethylacetat (5 ml × 3) extrahiert und die kombinierten organischen Schichten wurden über Na₂SO₄ getrocknet. Das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt und der Rückstand durch Chromatographie unter Verwendung von Ethylacetat und Hexan (1:1) an Silicagel gereinigt, um 23 mg der gewünschten Verbindungen mit einer Ausbeute von 47% zu ergeben. ¹H NMR δ (Acetone-d6): 8,96 (s, 1H), 8,92 (d, 2H), 8,20 (m, 5H), 7,88 (dd, 1H), 7,80 (dd, 1H), 7,53 (d, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,22 (dd,1H), 6,56 (d, 1H), 6,26 (d, 1H), 2,92 (s, 3H).
Beispiel 11
Wir haben andere Verbindungen der Formel IIa durch Verfahren hergestellt, die im Wesentlichen zu jenen ähnlich sind, die in den obigen Beispielen 1-10 beschrieben sind und jenen, die im Schema I illustriert sind. Die Charakterisierungsdaten für diese Verbindungen sind in Tabelle 9 unten zusammengefasst und beinhalten LC/MS (beobachtet) und ¹HNMR Daten. „Y" deutet an, dass ¹HNMR Daten erhalten wurden und mit den zugeordneten Strukturen als übereinstimmend gefunden wurden. Die Verbindungsnummern entsprechen den Verbindungsnummern, die in Tabelle 1 aufgelistet sind. Tabelle 9. Charakterisierungsdaten für ausgewählte Verbindungen der Formel IIa
Beispiel 12
4-Acetyl-3-methyl-5-methylsulfanyl-thiophen-2-carbonitril: Zu einem Schlamm von 2,4-Pentandion (20 mmol) und K₂CO₃ (3 Äquivalente, 60 mmol) in DMF (10 mL) wurde CS₂ (1,2 Äquivalente, 24 mmol) hinzugefügt und die resultierende Mischung für 10 Minuten gerührt. Die Mischung wurde auf 0°C gekühlt und dann wurde Chloracetonitrie (1,0 Äquivalent, 20 mmol) hinzugefügt und die Reaktion für 1 Stunde gerührt, dann auf Raumtemperatur erwärmt und für weitere 2 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde erneut auf 0°C gekühlt und Methyliodid (1,05 Äquivalente, 22 mmol) wurde langsam hinzugefügt. Die resultierende Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmt. Nach 12 Stunden wurde Wasser hinzugefügt und die resultierende Suspension wurde über Nacht gerührt. Das gewünschte Produkt wurde nach dem Waschen mit Wasser durch Filtration isoliert. Beispiel 13
4-(3-Dimethylamino-acryloyl)-3-methyl-5-methylsulfanyl-thiophen-2-carbonitril: Zu einer Lösung von 4-Acetyl-3-methyl-5-methylsulfanyl-thiophen-2-carbonitril (10 mmol) in Acetonitril (5 mL) wurde DMF-DMA (2 mL) hinzugefügt und die resultierende Mischung unter Rückfluss für 18 Stunden erwärmt. Die Reaktion wurde konzentriert und der Rückstand mit Diethylether (20 mL) zerrieben. Die Suspension wurde filtriert und mit Ether gewaschen, um das gewünschte Produkt als einen gelben Feststoff zu erhalten. Beispiel 14
Methyl-5-methylsulfanyl-4-(2-phenylamino-pyrimidin-4-yl)-thiophen-2-carbonitril (IIb-7): Zu einer Lösung von 4-(3-Dimethylamino-acryloyl)-3-methyl-5-methylsulfanyl-thiophen-2-carbonitril (0,2 mmol) in Acetonitril (0,25 mL) wurde N-Phenylguanidin (1 Äquivalent, 0,2 mmol) hinzugefügt und die Reaktion unter Rückfluss für 24 Stunden erwärmt. Die resultierende Mischung wurde auf Raumtemperatur gekühlt, dann mit Methanol (3 mL) verdünnt. Der resultierende Schlamm wurde filtriert, mit Methanol gewaschen, um IIb-7 zu ergeben. Beispiel 15
3-Dimethylamino-1-[4-methyl-2-methylsulfanyl-5-(4-methyl-thiazol-2-yl)-thiophen-3-yl]-propenon: Zu einer Lösung von 1-[4-Methyl-2-methylsulfanyl-5-(4-methyl-thiazole-2-yl)-thiophen-3-yl]-ethanon (10 mmol, Maybridge Chemicals) in Acetonitril (5 mL) wurde DMF-DMA (2 mL) hinzugefügt und die resultierende Mischung unter Rückfluss für 18 Stunden erwärmt. Die Reaktion wurde konzentriert und der Rückstand mit Diethylether (20 mL) zerrieben. Die Suspension wurde filtriert und mit Ether gewaschen, um das gewünschte Produkt als einen gelben Feststoff zu ergeben. Beispiel 16
{4-[4-Methyl-2-methylsulfanyl-5-(4-methyl-thiazol-2-yl)-thiophen-3-yl]-pyrimidin-2-yl}-phenylamin (IIb-1 ): Zu einer Lösung von 3-Dimethylamino-1-[4-methyl-2-methylsulfanyl-5-(4-methyl-thiazol-2-yl)-thiophen-3-yl]-propenon (0,2 mmol) in Acetonitril (0,25 mL) wurde N-Phenylguanidin (1 Äquivalent, 0,2 mmol) hinzugefügt und die Reaktion für 24 Stunden unter Rückfluss erwärmt. Die resultierende Mischung wurde auf Raumtemperatur gekühlt und mit Methanol (3 mL) verdünnt. Der resultierende Schlamm wurde filtriert, mit Methanol gewaschen, um IIb-1 zu ergeben
Beispiel 17
Wir haben andere Verbindungen der Formel IIb durch Verfahren hergestellt, die im Wesentlichen zu jenen ähnlich sind, die in den obigen Beispielen 12-16 beschrieben sind und jenen, die in den Schemata II und III illustriert sind. Die Charakterisierungsdaten für diese Verbindungen sind in Tabelle 10 unten zusammengefasst und beinhalten LC/MS (beobachtet) Daten. Die Verbindungsnummern entsprechen den Verbindungsnummern, die in Tabelle 2 aufgelistet sind. Tabelle 10. Charakterisierungsdaten für ausgewählte Verbindungen der Formel IIb
Beispiel 18
Harz-gebundenes 4-(3-Chloro-phenyl)-2-(4-Harz-oxybenzylsulfanyl)-5-propionylthiophen-3-carbonitril: Zu einem gerührten Schlamm von 3-Chlorbenzoylacetonitril (Maybridge, 1 Äquivalent, 15 mmol) und LiOH-H₂O (3 Äquivalente, 45 mmol) in DMF (30 mL) wurde CS₂ (1,2 Äquivalent, 18 mmol) hinzugefügt und die resultierende Mischung für 10 Minuten bei 0°C gerührt. 1-Brom-2-butanon (1,0 Äquivalent, 15 mmol) wurde zu der Mischung bei 0~5°C hinzugefügt und für eine Stunde gerührt. Brom-Wang-Harz (Novabiochem, 3g, 3,9 mmol, 1,3 mmol/g Beladung) wurde dann bei 0~5°C hinzugefügt und die resultierende Mischung wurde bei Raumtemperatur für 12 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde durch Filtration entfernt und das Harz mit DMF (30 mL, × 3), THF (30 mL, × 3), Wasser (30 mL × 3), DMF (30 mL × 3), DCM (30 mL × 3) und Diethylether (30mL × 3) gespült, dann unter Stickstoff getrocknet, um die Titelverbindung zu ergeben. Beispiel 19
Harz-gebundenes 4-(3-Chlor-phenyl)-5-(3-dimethylamino-2-methyl-acryloyl)-2-(4-hydroxy-benzylsulfanyl)-thiophen-3-carbonitril: Die obige, in Beispiel 18 oben gebildete, Harz-gebundene Verbindung wurde in trockenem THF (20 mL) aufgeschlämmt und mit DMF-DMA (2mL) behandelt, dann wurde die resultierende Mischung bei 60 °C für 18 Stunden erwärmt. Das Lösungsmittel wurde durch Filtration entfernt und das Harz mit THF (30 mL × 5), DCM (30 mL × 3), und Diethylether (30 mL × 3) gespült, dann unter Stickstoff getrocknet, um die Titelverbindung zu ergeben. Beispiel 20
Harz-gebundenes 4-(3-Chlorphenyl)-2-(4-Harz-gebundenes-hydroxy-benzyl-sulfanyl)-5-(5-methyl-2-phenylamino-pyrimidin-4-yl)-thiophen-3-carbonitril: Die in Beispiel 19 oben gebildete Harz-gebundene Verbindung (1 g) und N-Phenylguanidin (4 mmol) wurden in trockenem THF (10 mL) kombiniert. Die resultierende Mischung wurde unter Rückfluss für 24 Stunden erwärmt, dann wurde das Lösungsmittel durch Filtration entfernt und das Harz mit THF (30 mL × 5), DMF (30mL × 3), DCM (30 mL × 3), und Diethylether (30 mL × 3) gespült, dann unter Stickstoff getrocknet. Das Harz wurde erneut einmal mit N-Phenylguanidin (4 mmol) in trockenem THF (10 mL) für 24 Stunden behandelt. Das Lösungsmittel wurde erneut durch Filtration entfernt und das Harz mit THF (30 mL × 5), DMF (30 mL × 3), DCM (30 mL × 3), und Diethylether (30 mL × 3) gespült, dann unter Stickstoff getrocknet, um die Titelverbindung zu ergeben. Beispiel 21
4-(3-Chlorphenyl)-2-(4-hydroxybenzylsulfanyl)-5-(5-methyl-2-phenylamino-pyrimidin-4-yl)-thiophen-3-carbonitril (V-1 ): Die in Beispiel 20 oben gebildete Harz-gebundene Verbindung (100 mg, 0,1 mmol) wurde in DCM (1 mL) aufgeschlämmt und mit TFA (1 mL) und einem Tropfen Wasser für 3 Stunden behandelt. Das Harz wurde filtriert und mit DCM (2 mL × 3) gewaschen. Das Harz wurde dann mit 50% TFA in DCM-Wasser (1 mL:1 mL: 0,02 mL) behandelt. Die Mischung wurde für 14 Stunden beiseite gestellt, dann filtriert. Das Harz wurde mit Dichlormethan (2 mL × 3), gewaschen, die kombinierten organischen Schichten wurden konzentriert, und das Rohprodukt durch präparative HPLC [YMC ODS-AQ Säule Gradient 10% → 90% B (Lösungsmittel A: 0.01 % TFA in Wasser; Lösungsmittel B: 0.01 % TFA in CH₃CN) über 6.5 Minuten bei 1 mL/min] gereinigt, um Verbindung V-1 (10 mg) zu ergeben. [M+H] = 541,1.
Beispiel 22
Wir haben andere Verbindungen der Formel V durch Verfahren hergestellt, die im Wesentlichen zu jenen ähnlich sind, die in den obigen Beispielen 18-21 beschrieben sind und jenen, die im Schema IV illustriert ist. Die Charakterisierungsdaten für diese Verbindungen sind in Tabelle 11 unten zusammengefasst und beinhalten HPLC, LC/MS (beobachtet) und ¹H NMR Daten.
¹H NMR Daten sind in Tabelle 11 unten zusammengefasst, wobei „Y" andeutet, dass ¹H NMR Daten verfügbar sind und mit der Struktur übereinstimmend gefunden wurden.
Die Verbindungsnummern entsprechen den Verbindungsnummern, die in Tabelle 7 aufgelistet sind. Tabelle 11. Charakterisierungsdaten für ausgewählte Verbindungen der Formel V
Beispiel 23
3-Oxo-3-pyridin-3-yl-propionitril: Zu einer Lösung von Ethylnicotinat (30,24 g, 0,20 mol) in Toluen (wasserfrei, 200 mL) wurde NaH (18,64 g, 0,47 mol, 60% in Mineralöl) hinzugefügt. Die resultierende Suspension wurde bei 90°C erwärmt und Acetonitril (wasserfrei, 24,74 ml, 0,47 mol) wurde in diese Suspension über eine Spritze unter Stickstoff hinzugefügt und die Reaktion bei 90°C über Nacht erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde auf Umgebungstemperatur gekühlt und das resultierende feste Material wurde durch Filtration gesammelt. Das Rohprodukt wurde im Vakuum getrocknet und direkt im nächsten Schritt verwendet. Für analytische Zwecke wurde der Feststoff in Wasser aufgelöst. Der pH wurde auf 5 durch wässrige HCl eingestellt und die Lösung mit DCM extrahiert. Die organische Schicht wurde über Na₂SO₄ getrocknet und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, um eine Probe des Produktes für die Charakterisierung zu ergeben. ¹H NMR(CDCl₃): δ 9,2 (s, 1H), 8,8 (d, 1H), 8,2 (d, 1H), 7,5 (dd, 1H), 4,1 (s, 2H). Beispiel 24
1-(4-Methyl-5-methylsulfanyl-3-pyridin-3-yl-thiophen-2-yl)-propan-1-on: Zu einer Lösung von 3-Oxo-3-pyridin-3-yl-propionitril (11,9 mmol) in DMF (100 mL) wurde CS₂ (0,90 ml, 15,0 mmol) bei 0°C hinzugefügt. Die Reaktion wurde bei 0°C für 45 Minuten unter Stickstoff gerührt, dann wurde 1-Brombutan-2-on (1,79g, 11,8 mmol) mittels Spritze bei 0°C hinzugefügt. Die Reaktion wurde für weitere 30 Minuten gerührt, dann wurde Methyliodid (1,69g, 11,8 mmol) mittels Spritze bei 0°C hinzugefügt. Die resultierende Mischung wurde für weitere 30 Minuten gerührt, dann auf Umgebungstemperatur erwärmt und in gesättigte wässrige NH₄Cl-Lösung (300 mL) geschüttet. Die Lösung wurde mit Ethylacetat (200 mL × 3) extrahiert und die kombinierten organischen Schichten wurden über Na₂SO₄ getrocknet, dann im Vakuum konzentriert. Die Reinigung durch Chromatographie (Silicagel, 3:1 Hexane:Ethylacetat) ergab 1,05 g des gewünschten Produkts. ¹H NMR (CDCl₃): δ 8,8 (d, 1H), 8,6 (s, 1H), 7,8 (d, 1H), 7,5 (dd, 1H), 2,8 (s, 3H), 2,3 (q, 2H), 1,0 (t, 3H). Beispiel 25
5-(3-Dimethylamino-2-methyl-acryloyl)-2-methylsulfanyl-4-pyridin-3-yl-thiophen-3-carbonitril: Eine Lösung von 1-(4-Methyl-5-methylsulfanyl-3-pyridin-3-yl-thiophen-2-yl)-propan-1-on (1,0g, 3,48 mmol) in DMF-DMA (10 mL) in einem 50 ml versiegelten Röhrchen wurde bei 90°C über Nacht gerührt. Die Reaktion wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt und das überschüssige Dimethylformamid-Dimethylacetal wurde im Vakuum entfernt. Die Reinigung des Rohprodukts durch Chromatographie, und eluieren mit Ethylacetat, ergab 964 mg (81 %) des gewünschten Produkts. ¹H NMR (CDCl₃): δ 8,6 (m, 2H), 7,7 (d, 1H), 7,3 (d, 1H), 6,7 (s, 1H), 2,8 (s, 6H), 2,7 (s, 3H), 1,9 (s, 3H). Beispiel 26
N-(3-Benzyloxyphenyl)guanidin: Zu einer Suspension von 3-Benzyloxyphenylamin (20,0 g, 100,35 mmol) in 1,4-Dioxane (150 mL) wurde Cyanamid (7,39 g, 175,95 mmol), gefolgt von 4M HCl in 1,4-Dioxan (44 ml, 176,00 mmol) hinzugefügt. Die resultierende Suspension wurde bei 80 °C über Nacht erwärmt, dann auf Umgebungstemperatur abgekühlt und 6N NaOH (35 ml, 210,00 mmol) wurde hinzugefügt. Das Volumen der Lösung wurde auf 50 ml im Vakuum reduziert und das restliche Präzipitat wurde durch Filtration gesammelt. Das feste Produkt wurde unter Vakuum über Nacht getrocknet, um 23,8 g mit einer Ausbeute von 98,4% zu ergeben. ¹H NMR (MeOH-d4) δ 6,4-7,5 (m, 9H), 5,1 (s, 2H). Beispiel 27
N-(3-Hydroxyphenyl)guanidin (5): Zu einer Lösung von N-(3-Benzyloxy-phenyl)guanidin (5,0 g, 20,6 mmol) in EtOH (150 mL) wurde Palladium auf Kohlenstoff (10%, nass, 50% Wasser, 0.5 g)) hinzugefügt. Die Mischung wurde unter Wasserstoffatmosphäre über Nacht gerührt. Die Reaktion wurde durch einen Celite-Propfen filtriert und das Filtrat im Vakuum konzentriert, mit Toluen azeotrop-destilliiert, um das gewünschte Material (2.83g, 91 %) zu ergeben. ¹H NMR (MeOH-d4) δ 6,4-7 (m, 4H), Beispiel 28
5-[5-(3-Hydroxy-phenylamino)-2-methyl-phenyl]-2-methylsulfanyl-4-pyridin-3-yl-thiophen-3-carbonitril (V-24): Zu einer Lösung von 5-(3-Dimethylamino-2-methylacryloyl)-2-methylsulfanyl-4-pyridin-3-yl-thiophen-3-carbonitrile (45 mg, 0,13 mmol) in CH₃CN (wasserfrei, 2 mL) wurde N-(3-Hydroxyphenyl)guanidin (38 mg, 0,16 mmol) hinzugefügt. Die Reaktion wurde bei 90 °C in einem versiegelten Röhrchen über Nacht gerührt, dann auf Umgebungstemperatur abgekühlt und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Chromatographie gereinigt (Silicagel, 2:1 Hexane:Ethylacetat), um die Verbindung V-24 (51 mg, 75%) zu ergeben. ¹H NMR (CDCl₃): δ 8,6 (d, 1H), 8,5 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 7,8 (d, 1H), 7,6 (s, 1H), 7,5-7,1 (m, 8H), 7,0 (d, 1H), 6,7 (d, 1H), 5,1 (s, 2H), 2,6 (s, 3H), 1,5 (s, 3H). Beispiel 29
5-{5-[3-(3-Hydroxypropoxy)phenylamino]-2-methylphenyl}-2-methylsulfanyl-4-pyridin-3-yl-thiophen-3-carbonitril (VI-29): Zu einer Lösung von 5-[5-(3-Hydroxy-phenylamino)-2-methylphenyl]-2-methylsulfanyl-4-pyridin-3-yl-thiophen-3-carbonitril (330 mg, 0,77 mmol) in DMF (wasserfrei, 5mL) wurde 3-Brompropan-1-ol(214 mL, 1,54 mmol) hinzugefügt. Die Reaktion wurde bei 70°C in der Gegenwart eines Überschusses an K₂CO₃ über Nacht gerührt, dann auf Umgebungstemperatur gekühlt und zwischen Wasser und DCM verteilt. Die Mischung wurde mit DCM (30 ml × 3) extrahiert und die kombinierten organischen Schichten wurden über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert. Reinigung durch Chromatographie (2% McOH-DCM) ergab das gewünschte Produkt (370 mg, 99%). ¹H NMR (CDCl₃) : δ 8,6 (d, 1H), 8,5 (d, 1H), 8,1 (s, 1H), 7,7 (d, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,3-7,2 (m, 3H), 7,0 (d, 1H), 6,6 (d, 1H), 4,1 (t, 2H), 3,9 (t, 2H), 2,7 (s, 3H), 2,0 (m, 2H), 1,5 (s, 3H). Beispiel 30
Methanesulfonsäure 3-{3-[3-(4-Cyano-5-methylsulfanyl-3-pyridin-3-yl-thiophen-2-yl)-4-methyl-phenylamino]-phenoxyl}-propylester: Zu einer Lösung von 5-{5-[3-(3-Hydroxypropoxy)-phenylamino]-2-methyl-phenyl}-2-methylsulfanyl-4-pyridin-3-yl-thiophen-3-carbonitril (370 mg, 0,76 mmol) in DCM (10 mL) wurde Et₃N (155 mg, 0.15 mmol) gefolgt von MsCl (130 mg, 1,15 mmol) hinzugefügt. Die resultierende Mischung wurde bei Umgebungstemperatur für 10 min unter Stickstoff gerührt, dann in 20 ml Wasser geschüttet und mit DCM (20 ml × 3) extrahiert. Dei kombinierten organischen Schichten wurden über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuuk konzentriert. Das gewünschte Produkt wurde erhalten (391 mg, 91 %) und durch LC/MS bestätigt (berechnet: 565,12; beobachtet: 565.1 +1, ES+). Beispiel 31
5-{5-[3-(3-Dimethylamino-propoxy)-phenylamino]-2-methylphenyl}-2-methylsulfanyl-4-pyridin-3-yl-thiophen-3-carbonitril (VI-18): Zu einer Lösung von Methansulfonsäure 3- {3-[3-(4-Cyano-5-methylsulfanyl-3-pyridin-3-yl-thiophen-2-yl)-4-methylphenylamino]-phenoxyl}-propylester (20 mg, 0,035 mmol) in DCM (1 mL) wurde ein Überschuss an Dimethylamin und ein Überschuss an Triethylamin hinzugegeben. Die Reaktion wurde bei Umgebungstemperatur für 3 Stunden gerührt, dann wurde Wasser (2 ml) hinzugefügt und das Produkt mit DCM (3 mL × 3) extrahiert. Die kombinierte organische Schicht wurde konzentriert, um das Rohprodukt als ein Öl zu ergeben. Reinigung durch Chromatographie (2% McOH-CH₂Cl₂) ergab das gewünschte Produkt (17 mg, 95%). ¹H NMR (CDCl₃): δ 8,6 (d, 1H), 8,5 (s, 1H), 8,1 (s, 1H), 7,7 (d, 1H), 7,4-7,0 (m, 4H), 7,0 (d, 1H), 6,5 (d, 1H), 4,1 (t, 2H), 2,9 (m, 2H), 2,7 (s, 3H), 2,6 (s, 6H), 2,1 (m, 2H), 1,6 (s, 3H). Beispiel 32
2-Cyano-3-cyclohexyl-3-oxo-propionsäure-Ethylester: Zu einer Lösung von Ethylcyanoacetat in Acetonitril wurde MgCl₂ und Et₃N bei 0°C hinzugefügt. Die resultierende Suspension wurde bei 0°C für 30 Minuten gerührt, dann wurde Cyclehexancarbonylchlorid über 20 Minuten hinzugegeben und die Reaktionsmischung bei 0°C für 1 Stunde gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zwischen 1N HCl und Ether verteilt, die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet und unter reduziertem Druck konzentriert. Beispiel 33
3-Cyclohexyl-3-oxo-propionitril: Eine Lösung von 2-Cyano-3-cyclohexyl-3-oxo-propionsäure-Ethylester in DMSO: Wasser (10:1) wurde bei 120°C für 2 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zwischen Ether und 1N HCl verteilt, die organische Phase wurde mit MgSO₄ getrocknet und das Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt. Beispiel 34
5-Acetyl-4-cyclohexyl-2-methylsulfanyl-thiophen-3-carbonitril: Zu einer Lösung von 3-Cyclohexyl-3-oxo-propionitril in DMF:CS₂ (1:1) wurde K₂CO₃ bei 0°C hinzugefügt und die Reaktionsmischung bei Umgebungstemperatur 2 Stunden gerührt. Zu der resultierenden Reaktionsmischung wurde Chloraceton (1 Äquivalent) hinzugefügt und die Reaktionsmischung bei Umgebungstemperatur für 3 Stunden gerührt. Iodmethan wurde dann hinzugefügt und die resultierende Mischung wurde bei Umgebungstemperatur über Nacht gerührt. Die Reaktionsmischung wurde zwischen Ethylacetat und Salzlösung verteilt, die organische Phase mit MgSO₄ getrocknet und das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt. Das Rohprodukt wurde durch Silicagel-Chromatographie gereinigt. Beispiel 35
5-[2-(3-Nitrophenylamino)-5-methyl-pyrimidin-4-yl]-4-cyclohexyl-2-methylsulfanylthiophen-3-carbonitril (V-7): Zu einer Lösung von 4-Cyclohexyl-5-(3-dimethylamino-2-methyl-acryloyl)-2-methylsulfanyl-thiophene-3-carbonitril (0,5g, 1,7mmol) in Toluen (3ml) wurde DMF-DMA hinzugefügt und die Reaktion wurde bei 90°C über Nacht erwärmt, was zu der Umwandlung zu dem Produkt führt, wie durch TLC (40% EtOAc:Hexane) bestimmt wurde. Das Rohprodukt wurde mit DMF (10ml) und 3-Nitrophenylguanidin (0,5g, 2,78mmol) in einem versiegeltem Röhrchen kombiniert und bei 120°C über Nacht erwärmt, was zu der Umwandlung zu dem Produkt führt, wie durch TLC (40% EtOAc:Hexane) bestimmt wurde. Die Reaktion wurde zwischen EtOAc und Wasser verteilt, die organischen Teile wurden über Natriumsulfat getrocknet, dann im Vakuum konzentriert. Das Rohprodukt wurde durch Chromatographie (Silicagel, 10% EtOAC:Hexane) gereinigt, um 0,334 g (3.05 umol) von V-7 mit einer Ausbeute von 42% für 2 Schritte zu ergeben. ¹H NMR (CDCl₃) δ 1,0-2,0 (m, 10H), 2,1 (s, 3H), 2,6(s, 3H), 7,4(m, 1H), 7,7 (d, 1H), 7,8 (d, 1H), 8,3 (s, 1H), 8,7 (s, 1H). Beispiel 36
5-[2-(3-Aminophenylamino)-5-methyl-pyrimidin-4-yl]-4-cyclohexyl-2-methylsulfanylthiophen-3-carbonitril (V-8): Eine Suspension von 5-[2-(3-Nitrophenylamino)-5-methyl-pyrimidin-4-yl]-4-cyclohexyl-2-methylsulfanyl-thiophen-3-carbonitril (0,187 g, 402 umol) und 10% Palladium auf Kohlenstoff in Methanol wurde unter einer Wasserstoffatmosphäre über Nacht gerührt, was zu der vollständigen Umwandlung zu Produkt führt, wie durch TLC (40% EtOAc:Hexane) bestimmt wurde. Die Reaktion wurde durch Celite filtriert und im Vakuum konzentriert, um das gewünschte Amin V-8 (0,186 g, 426 umol) in quantitativer Ausbeute zu ergeben. ¹H NMR (CDCl₃) δ 1,0-1,1 (m, 10H), 2,1 (s, 3H), 2,6 (s, 3H), 6,2 (d, 1H), 6,8 (d, 1H), 6,9-7,0 (m, 3H), 8,2 (s, 1H). Beispiel 37
4-Cyclohexyl-5-{2-[3-(2-diethylamino-ethylamino)-phenylamino]-5-methyl-pyrimidin-4-yl}2-methyl-sulfanyl-thiophen-3-carbonitril (VI-26): Zu einer Lösung von 5-[2-(3-Aminophenylamino)-5-methyl-pyrimidin-4-yl]-4-cyclohexyl-2-methylsulfanyl-thiophen-3-carbonitril (20mg, 45,91 Micromol) und N,N-Diethyl-2-amino-bromethan•HBr (12mg, 45,91 Micromol) in THF wurde Natrium t-butoxid (9mg, 91,82 Micromol) hinzugefügt und die Reaktion wurde bei Umgebungstemperatur über Nacht gerührt. TLC zeigte die Umwandlung zu Produkt an (10% McOH:CH₂Cl₂). Die Reaktion wurde zwischen EtOAc und Wasser verteilt, die organischen Teile wurden über Natriumsulfat getrocknet, dann im Vakuum konzentriert. Das Rohprodukt wurde durch Chromatographie (Silicagel, 5% McOH:CH₂Cl₂) gereinigt, um VI-26 mit einer Ausbeute von 33% zu ergeben. δ 0,95 (bs, 6H), 1,0-1,8 (m, 10H), 2,0 (s, 3H), 2,6 (s, 3H), 2,75 (bs, 2H), 3,4 (s, 1H), 3,6 (bs, 2H), 4,0 (bs, 2H), 5,2 (s, 1H), 6,5 (d, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,6 (d, 1H), 7,0 (t, 1H), 8,1 (s, 1H). Beispiel 38
3-Cyano-4-(3-pyridyl)-5-[2-(3-N-cyclopropylacetamido)-aminophenylamino]-pyrimidin-4-yl-2-thiomethyl-thiophen (VI-138): In einer kleinen Phiole wurden zusammen plaztiert: 5-[2-(3-Aminophenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3-cyano-4-(3-pyridyl)-2-methylthio-thiophen (25 mg; 60 umol), Cyclopropylessigsäure (25mg; 240umol), 1-(3-Dimethylaminopropy10-3-ethylcarbodiimid-hydrochlorid [EDCI] (25mg; 130umol); und eine katalytische Menge (10% Gew.%/Gew.%) N-Hydroxybenzatriazol [HOBT]. Ein Milliliter einer 2.5 mM Lösung von Diisopropylethylamin in trockenem DMF wurde zu der Phiole hinzugefügt und die resultierende Lösung wurde für 18 Stunde bei Umgebungstemperatur gerührt. Reaktion wurde durch Umkehrphasen-HPLC überwacht und als vollständig bestimmt. Entfernung des Lösungsmittels mittels Hochvakuum und nachfolgender Reinigung mittels präparativer Umkehrphasen HPLC an C18 Silica mit einem Gradienten von Wasser/Acetonitril enthaltend 0.1 % Trifluoressigsäure ergab acht Milligramm der Titelverbindung als ein mittelgelbes Pulver; eine Ausbeute von 25.8%. ¹H NMR in Methanol-d4: δ 0,25 (mult; 2H), 0,6 (mult; 2H), 1,15 (mult; 1H), 2,3 (d; 2H), 2,85 (s; 3H), 6,4 (d; 1H), 7,15 (mult; 1H), 7,21 (mult; 2H), 7,85 (mult; 1H), 8,25 (d; 1H), 8,35 (d; 1H), 8,75 (mult; 1H), 8,82 (mult; 1H), m/e (ES+) 499,0. Beispiel 39
3-Cyano-4-(3-pyridyl)-5-[-2-(3-tetrahydrofuran-3-methylenoxycarbamoyl) aminophenylamino]-pyrimidin-4-yl-2-thiomethyl-thiophen (VI-143): 5-[2-(3-Aminophenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3-cyano-4-(3-pyridyl)-2-thiomethyl-thiophen (50 mg, 120 uM) wurde in 2,0mL einer 0,25 M Lösung von Diisopropylethylamin in p-Dioxan suspendiert/aufgelöst. Zu dieser Suspension/Lösung wurde (200 uL, 120 uM) einer 0.55 M Lösung von 2-Hydroxymethyltetrahydrofuranchlorformate in trockenem p-Dioxan hinzugefügt (Das Chloroformat wurde frührer gemäß einer Literaturprozedur hergestellt und als eine Stammlösung benutzt). Die resultierende Lösung wurde bei ~35 °C für 4 Stunden gerührt. Die Reaktion wurde durch analytische Umkehrphasen-HPLC als vollständig bestimmt. Das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt und der resultierende Rückstand wurde in DMSO aufgelöst. Das Rohmaterial wurde über präparative Umkehrphasen HPLC an C18 Silica unter Vewendung eines Gradienten von Wasser/Acetonitril, enthaltend 0.1 % TFA gereinigt. Dies führte zu 10 mg der Titelverbindung als ein gelbes amorphes Pulver, mit einer Ausbeute von 15,2%. ¹H NMR in Methanol d4: δ 1,75 (mult, 1H), 2,15 (mult; 1H), 2,85 (s; 3H), 3,65 (mult; 1H), 3,76 (mult; 1H), 3,86 (mult; 2H), 4,07 (mult; 1H), 4,16 (mult; 1H),), 6,4 (d; 1H), 7,15 (mult; 1H), 7,21 (mult; 2H), 7,85 (mult; 1H), 8,25 (d; 1H), 8,35 (d; 1H), 8,75 (mult; 1H), 8,82 (mult; 1H) m/e (ES+) 545,
Beispiel 40
Wir haben andere Verbindungen der Formel VI durch Verfahren hergestellt, die im Wesentlichen zu jenen ähnlich sind, die in den obigen Beispielen 22-39 beschrieben sind und jenen, die in den Schemata I-VII illustriert sind. Die Charakterisierungsdaten für diese Verbindungen sind in Tabelle 12 unten zusammengefasst und beinhalten ¹H NMR und HPLC Daten.
¹H NMR Daten sind in Tabelle 12 unten zusammengefasst, wobei „Y" andeutet, dass ¹H NMR Daten verfügbar sind und mit der Struktur übereinstimmend gefunden wurden.
Die Verbindungsnummern entsprechen den Verbindungsnummern, die in Tabelle 8 aufgelistet sind. Tabelle 12. Charakterisierungsdaten für ausgewählte Verbindungen der Formel VI
Beispiel 41
2-Ethylamino-4-phenyl-5-propionyl-thiophen-3-carbonsäure-Ethylester: Zu einem gerührten Schlamm von Ethylbenzoylacetat (30 mmol) und K₂CO₃ (1,2 Äquivalente, 36 mmol) in DMF (30 mL) wurde Ethylthioisocyanat (1,0 Äquivalent, 30 mmol) hinzugefügt und für 16 Stunden gerührt. Das Chloraceton (1,0 Äquivalent, 30 mmol) wurde hinzugefügt zu der Mischung bei Raumtemperatur und für 3 Stunden gerührt. Zu der Mischung wurde Wasser (150 mL) bei Raumtemperatur unter kräftigem Rühren hinzugefügt. Der Feststoff wurde gesammelt und mit Wasser (30 mL) und Hexan (50 mL) gewaschen. Der Feststoff wurde unter Stickstoff-Druck getrocknet. Beispiel 42
2-Ethylamino-5-[2-(3-methoxy-phenylamino)-pyrimidin-4-yl]-4-phenyl-thiophen-3-carbonsäure-Ethylester (IIa-90): Diese Verbindung wurde aus 2-Ethylamino-4-phenyl-5-propionyl-thiophen-3-carbonsäure-Ethylester unter Verwendung im Wesentlichen derselben allgemeinen Verfahren, wie oben beschrieben, hergestellt. MS berechnet: 474,17, beobachtet [M+H]= 475,1; ¹H NMR(DMSO) 9,44(s, 1H), 8,37(t, J = 5,8Hz, 1H), 7,93(d, J = 5,5Hz, 1H), 7,63(s, 1H), 7,45(m, 3H), 7,24(m, 3H), 7,17(t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,53(dd, J = 2,4, 8,1 Hz, 1H), 5,54(d(j = 5,6Hz, 1H), 3,80(s, 3H), 3,80(q, J = 7,2Hz, 2H), 3,40(quintet, J = 7,1 Hz, 2H), 1,32(t, J = 7,2Hz, 3H), 0,67(t, J = 7,1 Hz, 3H).
Die folgenden Beispiele demonstrieren wie die Verbindungen dieser Erfindung als Inhibitoren von c-Jun-N terminalen, Src, and Lck Kinasen getestet werden können.
Beispiel 43
Klonierung, Expression und Reinigung von JNK3 Protein Eine BLAST-Suche der EST Datenbank unter Verwendung der veröffentlichten JNK3α1 cDNA als Abfrage identifizierte einen EST Klon (Nr. 632588), der die gesamte kodierende Sequenz für das menschliche JNK3α1 enthält. Polymerasekettenreaktionen (PCR) unter Verwendung von pfu Polymerase (Stratagene) wurden verwendet, um Restriktionsstellen in die cDNA für das Klonieren in den pET-15B Expressionsvektor bei den Ncol und BamHI Stellen einzuführen. Das Protein wurde in E. coli exprimiert. Aufgrund der schlechten Löslichkeit des exprimierten Proteins mit voller Länge (Met 1-Gln 422), wurde ein N-terminal verkürztes Protein, welches bei dem Serin-Rest bei Position 40 (Ser 40) beginnt, hergestellt. Diese Verkürzung entspricht Ser 2 von JNK1 und JNK2 Proteinen, und wird durch ein Methionin- (Initiierung) und einem Glycin-Rest vorangegangen. Der Glycin-Rest wurde hinzugefügt, um eine Ncol-Stelle für das Klonieren in den Expressionsvektor einzuführen. Zusätzlich wurden systematische C-terminale Verkürzungen durch PCR durchgeführt, um ein Konstrukt zu identifizieren, die zu Kristallen mit Beugungsqualität führen. Ein solches Konstrukt kodiert die Aminosäure-Reste Ser40-Glu402 von JNK3α1 und wird durch Met- und Gly-Reste vorangegangen.
Das Konstrukt wurde hergestellt durch PCR unter Verwendung der Deoxyoligonukleotide:
5' GCTCTAGAGCTCCATGGGCAGCAAAAGCAAAGTTGACAA 3' (Forward-Primer mit Startkodon unterstrichen) (SEQ ID NO:1) und 5' TAGCGGATCCTCATTCTGAATTCATTACTTCCTTGTA 3'(Umkehr-Primer mit Stoppkodon unterstrichen)(SEQ ID NO:2) als Primer und wurde durch DNA Sequenzierung bestätigt. Kontrollexperimente zeigten an, dass das verkürzte JNK3 Protein eine äquivalente Kinaseaktivität gegen Myelin basisches Protein hatte, wenn mit einer stromaufwärtigen Kinase MKK7 in vitro aktiviert wurde.
E. coli Stamm BL21 (DE3) (Novagen) wurde mit dem JNK3 Expressionskonstrukt transformiert und bei 30°C in LB, welches mit 100 μg/ml Carbenicillin supplementiert ist, in Schüttelflaschen gezüchtet, bis die Zellen in der log-Phase (OD₆₀₀ ~ 0,8) waren. Isopropylthio-β-D-galactosidase (IPTG) wurde hinzugefügt, auf eine Endkonzentration von 0,8 mM und die Zellen wurden 2 Stunden später durch Zentrifugation geerntet.
E. coli Zellpaste, die JNK3 enthält, wurde in 10 Volumen/g Lysepuffer (50 mM HEPES, pH 7,2, enthaltend 10% Glycerol (Vol.-%/ Vol.-%), 100 mM NaCl, 2 mM DTT, 0,1 mM PMSF, 2 μg/ml Pepstatin, jeweils 1 μg/ml von E-64 und Leupeptin resuspendiert). Die Zellen wurden auf Eis unter Verwendung eines Mikrofluidisierers lysiert und bei 100.000 × g für 30 Minuten bei 4°C zentrifugiert. Der 100.000 × g Überstand wurde 1:5 mit Puffer A (20 mM HEPES, pH 7,0, 10% Glycerol (Vol.-%/ Vol.-%), 2 mM DTT) verdünnt und durch SP-Sepharose (Pharmacia) Kationenaustauscherchromatographie (Säule-Abmessungen: 2,6 × 20cm) bei 4°C gereinigt. Das Harz wurde mit 5 Säulenvolumina von Puffer B, gefolgt von 5 Säulenvolumina von Puffer A, der 50 mM NaCl enthält, gewaschen. Gebundenes JNK3 wurde mit einem 7,5 Säulenvolumen-linearen Gradient von 50-300 mM NaCl eluiert. JNK3 eluierte zwischen 150-200 mM NaCl.
Beispiel 44
Aktivierung von JNK3
Fünf mg JNK3 wurden auf 0,5 mg/ml in 50 mM HEPES Puffer, pH 7.5, der 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 20 mM MgCl₂ und 1 mM ATP enthält, verdünnt. GST-MKK7(DD) wurde bei einem molaren Verhältnis von 1:2,5 GST-MMK7:JNK3 hinzugefügt. Nach der Inkubation für 30 Minuten bei 25°C wurde die Reaktionsmischung durch Ultrafiltration in einem Centriprep-30 (Amicon, Beverly, MA) 5-fach konzentriert, auf 10 ml verdünnt und zusätzliche 1 mM ATP wurden hinzugefügt. Diese Prozedur wurde drei Mal wiederholt, um ADP zu entfernen und um ATP zu regenerieren. Die Endzugabe von ATP war 5 mM und die Mischung über Nacht bei 4°C inkubiert.
Die aktivierte JNK3/GST-MMK7(DD) Reaktionsmischung wurde in 50 mM HEPES Puffer, pH 7,5, der 5 mM DTT und 5% Glycerol (w/v) enthält, durch Dialyse oder Ultrafiltration ausgetauscht. Die Reaktionsmischung wurde eingestellt auf 1,1 M Kaliumphosphat, pH 7,5, und durch hydrophobe Interaktionschromatographie (bei 25°C) unter Verwendung einer Rainin Hydropore-Säule gereinigt. GST-MKK7 und unaktivierte JNK3 banden unter diesen Bedingungen nicht, so dass wenn ein 1,1 bis 0,05 M Kaliumphosphat-Gradient über 60 Minuten bei einer Flussrate von 1 ml/Minute entwickelt wird, doppelt-phosphoryliertes JNK3 von einfach-phosphoryliertem JNK3 getrennt wird. Aktiviertes JNK3 (d.h. doppelt-phosphoryliertes JNK3) wurde bei –70°C bei 0,25-1 mg/ml gelagert.
Beispiel 45
JNK Inhibierungsuntersuchung
Verbindungen wurden auf die Inhibierung von JNK3 durch eine spektrophotometrische gekoppelte-Enzymuntersuchung untersucht. Bei dieser Untersuchung wurde eine fixierte Konzentration des aktivierten JNK3 (10 nM) mit verschiedenen Konzentrationen eines potentiellen Inhibitors, in DMSO aufgelöst, für 10 Minuten bei 30 °C in einem Puffer, welcher 0,1 M HEPES Puffer, pH 7,5, der 10 mM MgCl₂, 2,5 mM Phosphoenolpyruvat, 200 μM NADH, 150 μg/ml Pyruvatkinase, 50 μg/ml Lactatdehydrogenase, und 200 μM EGF Rezeptorpeptid aufweist, enthält, inkubiert. Das EGF Rezeptorpeptid hat die Sequenz KRELVEPLTPSGEAPNQALLR (SEQ ID NO. 3), und ist ein Phosphorylakzeptor in der JNK3-katalysierten Kinasereaktion. Die Reaktion wurde durch die Zugabe von 10 μM ATP iniitiert und die Untersuchungsplatte wird in das Spektrophotometer-Untersuchungsplattenfach eingefügt, das bei 30°C gehalten wurde. Die Abnahme der Absorption bei 340 nm wurde als eine Funktion der Zeit überwacht. Die Geschwindigkeitsdaten als eine Funktion der Inhibitorkonzentration wurden in ein kompetitives Inhibierungskinetikmodell eingefügt, um K_i zu bestimmen.
Tabelle 13 zeigt die Ergebnisse der Aktivität von ausgewählten Verbindungen dieser Erfindung in der JNK Inhibierungsuntersuchung. Die Verbindungsnummern entsprechen den Verbindungsnummern in den Tabellen 1, 2 und 7. Verbindungen mit einem K_i von weniger als 0,1 Mikromolar (μM) werden als „A" bewertet, Verbindung mit einem K_i zwischen 0,1 und 1 μM werden als „B" bewertet und Verbindungen mit einem K_i von mehr als 1 μM werden als „C" bewertet. Verbindungen mit einer Aktivität, die als „D" bezeichnet ist, bieten eine prozentuelle Inhibierung von weniger oder gleich zu 24%; Verbindungen mit einer Aktivität, die als „E" bezeichnet ist, bieten eine prozentuelle Inhibierung von zwischen 24% und 66%; und Verbindungen mit einer Aktivität, die als „F" bezeichnet ist, bieten eine prozentuelle Inhibierung von zwischen 67% und 100%. Tabelle 13. JNK3 Aktivität der ausgewählten Verbindungen
Beispiel 46
Die Verbindungen wurden entweder mittels einer Radioaktivitäts-basierenden Untersuchung oder einer spektrophotometrischen Untersuchung als Inhibitoren menschlicher Src-Kinase evaluiert.
Src-Inhibierungsuntersuchung A:Radioaktivitätsbasierende Untersuchung Die Verbindungen wurden als Inhibitoren rekombinanter menschlicher Src-Kinase mit voller Länge (von Upstate Biotechnology, Kat.-Nr. 14-117), die in Baculoviruszellen exprimiert und aus diesen gereinigt wurde, untersucht. Die Scr-Kinase Aktivität wurde überwacht, indem der Einbau von ³³P aus ATP in das Tyrosin eines beliebigen poly-Glu-Tyr-Polymer-Substrats mit der Zusammensetzung Glu:Tyr = 4:1 (Sigma, Kat.-Nr. P-0275) verfolgt wurde. Die Endkonzentrationen der Untersuchungsbestandteile waren wie folgt: 0,05 M HEPES, pH 7,6, 10 mM MgCl₂, 2 mM DTT, 0,25 mg/ml BSA, 10 μM ATP (1-2 μCi ³³P-ATP pro Reaktion), 5 mg/ml Poly-Glu-Tyr sowie 1-2 Einheiten rekombinanter menschlicher Src-Kinase. In einer typischen Untersuchung wurden alle Reaktionsbestandteile mit Ausnahme von ATP vorgemischt und in die Kammern von Mikrotiterplatten aliquotiert. In DMSO aufgelöste Inhibitoren wurden zu den Kammern hinzugegeben, so dass sich eine DMSO-Endkonzentration von 2,5 % ergab. Die Mikrotiterplatte wurde 10 min bei 30 °C inkubiert, bevor die Reaktion mit ³³P-ATP ausgelöst wurde. Nach 20-minütiger Reaktion wurden die Reaktionen mit 150 μl 10 %-iger Trichloressigsäure (TCA), die 20 mM Na₃PO₄ enthält, gelöscht. Anschließend wurden die gelöschten Proben auf eine auf einem Vakuumverteiler angebrachte Filterplatte mit 96 Kammern (Whatman, UNI-Filter GF/F Glasfaserfilter, Kat.-Nr. 7700-3310) gegeben. Die Filterplatten wurden viermal mit 10 %-iger TCA, die 20 mM Na₃PO₄ enthält, und anschließend viermal mit Methanol gewaschen. Daraufhin wurden in jede Kammer 200 μl Szintillationsflüssigkeit hinzugegeben. Die Platten wurden versiegelt, und die Menge an Radioaktivität, die mit den Filtern assoziiert ist, wurde auf einem TopCount Szintillationszähler quantifiziert. Die eingebaute Radioaktivität wurde als Funktion der Inhibitorkonzentration graphisch dargestellt. Zur Ermittlung der K_i-Werte für die Verbindung wurden die Daten an ein Kompetitionshemmungskinetikmodell angepasst.
Src-Inhibierungsuntersuchung B: Spektrophotometrische Untersuchung
Das aus ATP durch die von der menschlichen rekombinanten Src-Kinase katalysierten Phosphorylierung von poly-Glu-Tyr-Substrat erzeugte ADP wurde mittels einer gekoppelten Enzymuntersuchung quantifiziert (Fox et al., (1998) Protein Sci 7, 2249). In dieser Untersuchung wird für jedes im Rahmen der Kinasereaktion erzeugte ADP-Molekül ein Molekül NADH zu NAD oxidiert. Das Verschwinden von NADH kann bequem bei 340 nm verfolgt werden.
Die Endkonzentrationen der Untersuchungsbestandteile waren wie folgt: 0,025 M HEPES, pH 7,6, 10 mM MgCl₂, 2 mM DTT, 0,25 mg/ml poly-Glu-Tyr und 25 nM rekombinante menschliche Src-Kinase. Die Endkonzentrationen der Komponenten des gekoppelten Enzymsystems waren 2,5 mM Phosphoenolpyruvat, 200μM NADH, 30 μg/ml Pyruvatkinase und 10 μg/ml Lactatdehydrogenase.
In einer typischen Untersuchung wurden alle Reaktionsbestandteile mit Ausnahme von ATP vorgemischt und in die Kammern von Mikrotiterplatten aliquotiert. In DMSO aufgelöste Inhibitoren wurden in die Kammern hinzugegeben, so dass sich eine DMSO-Endkonzentration von 2,5 % ergab. Die Mikrotiterplatte wurde 10 min bei 30 °C inkubiert, bevor die Reaktion mit 100 μM ATP ausgelöst wurde. Die bei 340 nm mit der Zeit auftretende Absorbanzänderung – die Reaktionsgeschwindigkeit – wurde auf einem Molecular Device Plattenleser überwacht. Zur Ermittlung der K_i-Werte für die Verbindung wurden die Geschwindigkeitsdaten als eine Funktion der Inhibitorkonzentration an ein Kompetitionshemmungskinetikmodell angepasst.
Tabelle 14 zeigt die Ergebnisse der Aktivität von ausgewählten Verbindungen dieser Erfindung in der Src-Inhibierungsuntersuchung. Die Verbindungsnummern entsprechen den Verbindungsnummern in den Tabellen 1, 2, 7 und 8. Verbindungen mit einem K_i von weniger als 0,1 Mikromolar (μM) werden als „A" bewertet, Verbindung mit einem K_i zwischen 0,1 und 1 μM werden als „B" bewertet und Verbindungen mit einem K von mehr als 1 μM werden als „C" bewertet. Verbindungen mit einer Aktivität, die als „D" bezeichnet ist, bieten eine prozentuelle Inhibierung von weniger oder gleich zu 24%; Verbindungen mit einer Aktivität, die als „E" bezeichnet ist, bieten eine prozentuelle Inhibierung von zwischen 24% und 66%; und Verbindungen mit einen Aktivität, die als „F" bezeichnet ist, bieten eine prozentuelle Inhibierung von zwischen 67% und 100%. Tabelle 14. Src-Aktivität der ausgewählten Verbindungen
Beispiel 47
Die Verbindungen wurden entweder mittels einer Radioaktivitäts-basierenden Untersuchung oder einer spektrophotometrischen Untersuchung als Inhibitoren menschlicher Lck-Kinase evaluiert.
Lck Inhibierungsuntersuchung A: Radioaktivitäts-basierende Untersuchung
Die Verbindungen wurden als Inhibitoren rekombinanter boviner Thymus Lck-Kinase mit voller Länge (von Upstate Biotechnology, Kat.-Nr. 14-106), die in Baculoviruszellen exprimiert und aus diesen gereinigt wurde, untersucht. Die Lck-Kinase Aktivität wurde überwacht, indem der Einbau von ³³P aus ATP in das Tyrosin eines beliebigen poly-Glu-Tyr-Polymer-Substrats mit der Zusammensetzung Glu:Tyr = 4:1 (Sigma, Kat.-Nr. P-0275) verfolgt wurde. Die Endkonzentrationen der Untersuchungsbestandteile waren wie folgt: 0,025 M HEPES, pH 7,6, 10 mM MgCl₂, 2 mM DTT, 0,25 mg/ml BSA, 10 μM ATP (1-2 μCi ³³P-ATP pro Reaktion), 5 mg/ml Poly-Glu-Tyr sowie 1-2 Einheiten rekombinanter menschlicher Src-Kinase. In einer typischen Untersuchung wurden alle Reaktionsbestandteile mit Ausnahme von ATP vorgemischt und in die Kammern von Mikrotiterplatten aliquotiert. In DMSO aufgelöste Inhibitoren wurden zu den Kammern hinzugegeben, so dass sich eine Endkonzentration von 2,5 ergab. Die Mikrotiterplatte wurde 10 min bei 30 °C inkubiert, bevor die Reaktion mit ³³P-ATP ausgelöst wurde. Nach 20-minütiger Reaktion wurden die Reaktionen mit 150 μl 10 %-iger Trichloressigsäure (TCA), die 20 mM Na₃PO₄ enthält, gelöscht. Anschließend wurden die gelöschten Proben auf eine auf einem Vakuumverteiler angebrachte Filterplatte mit 96 Kammern (Whatman, UNI-Filter GF/F Glasfaserfilter, Kat.-Nr. 7700-3310) gegeben. Die Filterplatten wurden viermal mit 10 %-iger TCA, die 20 mM Na₃PO₄ enthält, und anschließend viermal mit Methanol gewaschen. Daraufhin wurden in jede Kammer 200 μl Szintillationsflüssigkeit hinzugegeben. Die Platten wurden versiegelt, und die Menge an Radioaktivität, die mit den Filtern assoziiert ist, wurde auf einem TopCount Szintillationszähler quantifiziert. Die eingebaute Radioaktivität wurde als Funktion der Inhibitorkonzentration graphisch dargestellt. Zur Ermittlung der K_i-Werte für die Verbindung wurden die Daten an ein Kompetitionshemmungskinetikmodell angepasst.
Lck-Inhibierungsuntersuchung B: Spektrophotometrische Untersuchung
Das aus ATP durch die von der menschlichen rekombinanten Lck-Kinase katalysierte Phosphorylierung von poly-Glu-Tyr-Substrat erzeugte ADP wurde mittels einer gekoppelten Enzymuntersuchung quantifiziert (Fox et al., (1998) Protein Sci 7, 2249). In dieser Untersuchung wird für jedes im Rahmen der Kinasereaktion erzeugte ADP-Molekül ein Molekül NADH zu NAD oxidiert. Das Verschwinden von NADH kann bequem bei 340 nm verfolgt werden.
Die Endkonzentrationen der Untersuchungsbestandteile waren wie folgt: 0,025 M HEPES, pH 7,6, 10 mM MgCl₂, 2 mM DTT, 5 mg/ml poly-Glu-Tyr und 50 nM rekombinante menschliche Lck-Kinase. Die Endkonzentrationen der Komponenten des gekoppelten Enzymsystems waren 2,5 mM Phosphoenolpyruvat, 200μM NADH, 30 μg/ml Pyruvatkinase und 10 μg/ml Lactatdehydrogenase.
In einer typischen Untersuchung wurden alle Reaktionsbestandteile mit Ausnahme von ATP vorgemischt und in die Kammern von Mikrotiterplatten aliquotiert. In DMSO aufgelöste Inhibitoren wurden in die Kammern hinzugegeben, so dass sich eine DMSO-Endkonzentration von 2,5 % ergab. Die Mikrotiterplatte wurde 10 min bei 30 °C inkubiert, bevor die Reaktion mit 100 μM ATP ausgelöst wurde. Die bei 340 nm mit der Zeit auftretende Absorbanzänderung – die Reaktionsgeschwindigkeit – wurde auf einem Molecular Device Plattenleser überwacht. Zur Ermittlung der K_i-Werte für die Verbindung wurden die Geschwindigkeitsdaten als eine Funktion der Inhibitorkonzentration an ein Kompetitionshemmungskinetikmodell angepasst.
Tabelle 15 zeigt die Ergebnisse der Aktivität der ausgewählten Verbindungen dieser Erfindung in der Lck Inhibierungsuntersuchung. Die Verbindungsnummern entsprechen den Verbindungsnummern in den Tabellen 1, 7 und 8. Verbindungen mit einem K_i von weniger als 0,1 mikromol (μM) werden als „A" bewertet, Verbindungen mit einem K_i zwischen 0,1 und 1 μM werden als „B" bewertet und Verbindungen mit einem K_i von mehr als 1 μM werden als „C" bewertet. Tabelle 15. Lck Aktivität der ausgewählten Verbindungen
Während wir eine Anzahl von Ausführungsformen dieser Erfindung beschrieben haben, ist es offensichtlich, dass unsere grundlegenden Beispiele verändert werden können, um andere Ausführungsformen bereitzustellen, die die Verbindungen und Verfahren dieser Erfindung nutzen. Es ist deshalb erkennbar, dass der Umfang dieser Erfindung vielmehr durch die beigefügten Ansprüche, anstatt durch die spezifischen Ausführungsformen, die nur als Beispiele dargestellt wurden zu definieren ist.

Claims

Verbindung der Formel I
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon, worin A und B unabhängig voneinander ausgewählt sind aus N oder CH; R¹ und R² unabhängig voneinander ausgewählt sind aus Halogen CN, NO₂, N(R)₂, OR, SR, Oder (T)_n-R⁵; R³ ausgewählt ist aus einem 3-6 gliedrigen carbozyklischen oder heterozyklischen Ring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, einem Phenyl oder einem 5-6 gliedrigen heteroarylring mit einem bis drei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei dieser Phenyl- oder Heteroarylring gegebenenfalls mit einem (T)_n-Ar oder einem oder zwei R⁷ substituiert ist; jedes n unabhängig ausgewählt ist aus null oder eins; T eine C₁-C₆ Alkylidenkette ist, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls ersetzt ist durch CO, CO₂, COCO, CONR, OCONR, NRNR, NRNRCO, NRCO, NRCO₂, NRCONR, SO₂, NRSO₂, SO₂NR, NRSO₂NR, O, S, oder NR; jedes R unabhängig ausgewählt ist aus Wasserstoff oder einer gegebenenfalls substituierten C₁-C₆ aliphatischen Gruppe; oder zwei R am gleiche Stickstoffatom können mit dem Stickstoff zusammengenommen werden, um einen vier- bis 8-gliedrigen, gesättigten oder ungesättigten heterozyklischen Ring mit einem bis drei Heteroatomen zu bilden, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel; R⁴ ist (T)_n-R, (T)_n-Ar, oder (T)_n-Ar¹; R^a ist ausgewählt aus R^b, Halogen, NO₂, OR^b, SR^b, oder N(R^b)₂; R^b ist ausgewählt aus Wasserstoff oder einer C₁-C₄ aliphatischen Gruppe, die gegebenenfalls substituiert ist mit Oxo, OH, SH, NH₂, Halogen, NO₂, oder CN; R⁵ ist ein gegebenenfalls substituierter C₁-C₆-Aliphat oder Ar; Ar ist ein 5-6 gliedriger saturierter, teilweise unsaturierter oder monozyklischer Arylring mit null bis drei Heteroatomen, unabhängig ausgewählt aus Stickstoff, Schwefel oder Sauerstoff, oder ein 8-10 gliedriger saturierter, teilweise unsaturierter, oder bizyklischer Arylring mit null bis vier Heteroatomen, unabhängig ausgewählt aus Stickstoffatomen, Schwefel oder Sauerstoff, worin Ar gegebenenfalls mit ein bis drei R⁷ substituiert ist; Ar¹ ist ein 6-gliedriger Arylring mit null bis zwei Stickstoffatomen, wobei dieser Ring mit mit einer Z-R⁶ Gruppe substituiert ist und gegebenenfalls substituiert ist mit ein bis drei R⁷; Z ist eine C₁-C₆ Alkylidenkette, in der bis zu zwei nicht benachbarten Methyleneinheiten von Z gegebenenfalls ersetzt sind durch CO, CO₂, COCO, CONR, OCONR, NRNR, NRNRCO, NRCO, NRCO₂, NRCONR, SO, SO₂, NRSO₂, SO₂NR, NRSO₂NR, O, S, oder NR; unter der Bedingung, dass diese gegebenenfalls ersetzte Methyleneinheit von Z eine nicht zu R⁶ benachbarte Methyleneinheit ist; R⁶ ist ausgewählt aus Ar, R, Halogen, NO₂, CN, OR, SR, N(R)₂, NRC(O)R, NRC(O)N(R)₂, NRCO₂R, C(O)R, CO₂R, OC(O)R, C(O)N(R)₂, OC(O)N(R)₂, SOR, SO₂R, SO₂N(R)₂, NRSO₂R, NRSO₂N(R)₂, C(O)C(O)R, oder C(O)CH₂C(O)R; und jedes R⁷ ist unabhängig ausgewählt aus Halogen, NO₂, CN, OR, SR, N(R)₂, NRC(O)R, NRC(O)N(R)₂, NRCO₂R, C(O)R, CO₂R, C(O)N(R)₂, OC(O)N(R)₂, SOR, SO₂R, SO₂N(R)₂, NRSO₂R. NRSO₂N(R)₂, C(O)C(O)R, oder: C(O)CH₂C (O)R; oder zwei R⁷ an benachbarten Positionen von Ar¹ können zusammengenommen werden, um einen saturierten, teilweise unsaturierten, oder völlig unsaturierten fünf- bis siebengliedrigen Ring mit null bis drei Heteroatomen zu bilden, die ausgewählt sind aus O, S, oder N.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei diese Verbindung die Formel IIa aufweist:
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Verbindung nach Anspruch 2, wobei diese Verbindung eines oder mehrere Merkmale aufweist, die aus der Gruppe ausgewählt sind, bestehend aus: (a) R¹ ist ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵; (b) T ist eine C₁-C₄ Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist. (c) R² ist CN, R, Halogen, CO₂R⁵ oder N(R)₂; (d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe oder einem R⁷; und (e) R⁴ ist Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 6 gliedriger gesättigter, teilweise gesättigter Ring, oder ein Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel.
Verbindung nach Anspruch 3, wobei diese Verbindung eines oder mehrere der Merkmale aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus: (a) R⁷ ist ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-methylpiperidin-I-yl, NHEt, NHCH₂CH₂piperidin-I-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl; (b) R² ist CN oder CO₂R⁵; (c) R³ ist ausgewählt aus Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Cyclohexyl, oder Furanyl, worin R³ gegebenenfalls substituiert ist mit Phenyl, Phenoxy, Benzyl, Benzyloxy, Pyridyl, 3-hydroxyphenyl, 2-hydroxyphenyl, 3-aminophenyl, N-BOC-pyrrolyl, 4-chlorophenyl, 3-ethoxypyridyl, 2-methoxypyridyl, 2,5-dimethylisoxazolyl, 3-ethoxyphenyl, 4-isopropylphenyl, 4-F-3-Cl-phenyl, pyrrolyl,pyrimidinyl, Chlor. Brom, Fluor, trifluoromethyl, OH, NH₂, Methyl, Methoxy oder Ethoxy; und (d) R⁴ ist ausgewählt aus Wasserstoff oder einem Phenyl, Benzyl, Pyridyl, Piperidinyl, oder Cyclohexyl-Ring, wobei dieser Ring gegebenenfalls substituiert ist mit Benzyloxy, Phenoxy, SO₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, OMe, Br, Cl, CO₂Me, NHSO₂Me, NHSO₂Et, NHCON(Me)₂, NHCON(Et)₂, NHCOpyrrolidin-1-yl, oder NHCOmorpholin-4-yl.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei diese Verbindung die Formel IIb:
aufweist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Verbindung nach Anspruch 5, wobei diese Verbindung eines oder mehrere Merkmale aufweist, die aus der Gruppe ausgewählt sind, bestehend aus: (a) R¹ ist ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵; (b) T ist eine C₁-C₄ Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist. (c) R² ist CN, R⁷, Ar, Halogen, oder N(R⁶)₂; (d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder einen hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe oder einem R⁷; und (e) R⁴ ist Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 6 gliedriger gesättigter, teilweise gesättigter Ring, oder ein Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel.
Verbindung nach Anspruch 6, wobei diese Verbindung eines oder mehrere Merkmale aufweist, die aus der Gruppe ausgewählt sind, bestehend aus: (a) R¹ ist ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-Methylpiperidin-I-yl, NHEt, NHCH₂CH₂piperidin-I-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl; (b) R² ist CN oder 4-(C_1-3 alkyl)-thiazol-2-yl; (c) R³ ist ausgewählt aus Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Cyclohexyl, oder Furanyl, worin R³ gegebenenfalls substituiert ist durch Phenyl, Phenoxy, Benzyl, Benzyloxy, Pyridyl, 3-hydroxyphenyl, 2-hydroxyphenyl, 3-aminophenyl, N-BOC-pyrrolyl, 4-chlorophenyl, 3-ethoxypyridyl, 2-methoxypyridyl, 2,5-dimethylisoxazolyl, 3-etho5cyphenyl, 4-isopropylphenyl, 4-F-3-Cl-phenyl, pyrrolyl, pyrimidinyl, Chlor, Brom, Fluor, trifluoromethyl, OH, NH₂, Methyl, Methoxy oder Ethoxy; und (d) R⁴ ist ausgewählt aus Wasserstoff oder einem Phenyl, Benzyl, Pyridyl, Piperidinyl, oder Cyclohexyl-Ring, wobei dieser Ring gegebenenfalls substituiert ist durch Benzyloxy, Phenoxy, SO₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, OMe, Br, Cl, CO₂Me, NHSO₂Me, NHSO₂Et, NHCON(Me)₂, NHCON(Et)₂, NHCOpyrrolidin-1-yl, oder NHCOmorpholin-4-yl.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei diese Verbindung die Formel IIIa, IIIb, IVa, oder IVb
aufweist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Verbindung nach Anspruch 8, wobei diese Verbindung eines oder mehrere Merkmale aufweist, die aus der Gruppe ausgewählt sind, bestehend aus: (a) R¹ ist ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵; (b) T ist eine C₁-C₄ Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist; (c) R² ist CN, R⁷, Ar, Halogen, oder N(R⁶)₂ (d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe oder einem R⁷; und (e) R⁴ ist Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 6 gliedriger gesättigter, teilweise gesättigter Ring, oder ein Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei diese Verbindung die Formel V
aufweist, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Verbindung nach Anspruch 10, wobei diese Verbindung eines oder mehrere Merkmale aufweist, die aus der Gruppe ausgewählt sind, bestehend aus: (a) R¹ ist ausgewählt aus N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵; (b) T ist eine C_1-4 Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist. (c) R² ist CN, R, Halogen, CO₂R⁵ oder N(R)₂; (d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe oder einem R⁷; (e) R⁴ ist Wasserstoff oder Ar, wobei Ar ein gegebenenfalls substituierter 6 gliedriger gesättigter, teilweise gesättigter Ring, oder ein Arylring mit null bis zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel; und (f) R^a ist ausgewählt aus R^b, OR^b, SR^b, oder N(R^b)₂.
Verbindung nach Anspruch 11, wobei diese Verbindung eines oder mehrere Merkmale aufweist, die aus der Gruppe ausgewählt sind, bestehend aus: (a) R¹ is selected from SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-methylpiperidin-I-yl, NHEt, NHCH₂CH₂piperidin-I-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl; (b) R² is CN or CO₂R⁵; (c) R³ ist ausgewählt aus Phenyl, Pyridyl, Pyrimidinyl, Cyclohexyl, oder Furanyl, worin R³ ist gegebenenfalls substituiert durch Phenyl, Phenoxy, Benzyl, Benzyloxy, Pyridyl, 3-hydroxyphenyl, 2-hydroxyphenyl, 3-aminophenyl, N-BOC-pyrrolyl, 4-chlorophenyl, 3-ethoxypyridyl, 2-methoxypyridyl, 2,5-dimethylisoxazolyl, 3-ethoxyphenyl, 4-isopropylphenyl, 4-F-3-Cl-phenyl, pyrrolyl, pyrimidinyl, Chlor, Brom, Fluor, trifluoromethyl, OH, NH₂, Methyl, Methoxy oder Ethoxy; (d) R⁴ ist ausgewählt aus Wasserstoff oder einem phenyl, Benzyl, Pyridyl, Piperidinyl, oder Cyclohexyl-Ring, wobei dieser Ring gegebenenfalls substituiert ist durch Benzyloxy, Phenoxy, SO₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, OMe, Br, Cl, CO₂Me, NHSO₂Me, NHSO₂Et, NHCON(Me)₂, NHCON(Et)₂, NHCOpyrrolidin-1-yl, oder NHCOmorpholin-4-yl; und (e) R^a ist Methyl, OH, OMe, oder NH₂.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei diese Verbindung die Formel VI
aufweist oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Verbindung nach Anspruch 13, wobei diese Verbindung eines oder mehrere Merkmale aufweist, die aus der Gruppe ausgewählt sind, bestehend aus: (a) R¹ ist N(R)₂, OR, SR, oder (T)_n-R⁵; (b) T ist eine C_1-4 Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von T gegebenenfalls durch S, O, N(R), oder CO₂ ersetzt ist. (c) R² ist CN, R⁷, Halogen, oder N(R⁶)₂ (d) R³ ist ein 5-6 gliedriger Ring ausgewählt aus einem carbozyklischen, phenylischen, oder einem hetrozyklischen Ring oder einem Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, wobei R³ gegebenenfalls substituiert ist mit einer (T)_n-Ar Gruppe oder einem R⁷; und (e) Z ist eine C_1-4 Alkylidenkette, worin eine Methyleneinheit von Z gegebenenfalls durch , O, NH, NHCO, NHCO₂, NHSO₂, CONH ersetzt ist; (f) R⁶ ist ausgewählt aus N(R)₂, NHCOR, oder Ar, worin Ar ein gegebebenfalls substituierter 5-6 gliedriger heterozyklischer Ring oder ein Heteroarylring mit einem oder zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel; und (g) R^a ist R^b, OR^b, SR^b, oder N(R^b)₂.
Verbindung nach Anspruch 14, wobei diese Verbindung eines oder mehrere Merkmale aufweist, die aus der Gruppe ausgewählt sind, bestehend aus: (a) R¹ ist ausgewählt aus SCH₂-4-phenol, SCH₃, OH, OEt, N(Me)₂, OMe, 4-methylpiperidin-I-yl, NHEt, NHCH₂CH₂-piperidin-I-yl, oder NHCH₂CH₂morpholin-4-yl; (b) R² ist CN; (c) R³ ist ein Phenyl, Pyridyl, Furyl, oder Cyclohexyl-Ring gegebenenfalls substituiert durch (T)_n-Ar oder R⁷ worin Ar ein 5-6 gliedriger Arylring mit null oder zwei Heteroatomen ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, und worin R⁷ ausgewählt ist aus R, Halogen, OR, N(R)₂, oder CO₂R; (d) R^a ist Wasserstoff oder Methyl; und (e) Z-R⁶ ist ausgewählt aus O(CH₂)₃OH, O(CH₂)₃NH(CH₂)₂OH, O(CH₂)₂NH(CH₂)₂OH, O(CH₂)₃N(hydroxyethyl)(methyl), O(CH₂)₃pyrrolidin-I-yl, O(CH₂)₂morpholin-4-yl, O(CH₂)₃N(Me)₂, O(CH₂)₃N(Et)₂, O(CH₂)₃(4-hydroxyethylpiperazin-1-yl), O(CH₂)₃piperazin-1-yl, O(CH₂)₃(4-hydroxymethylpiperidin-1-yl), O(CH₂)₃ (4-hydroxypiperidin-1-yl), NHCO(CH₂)₃N(Me)₂, NHCO(CH₂)₃NCOCH₃, NHCOCH₂pyridin-2-yl, NHCOCH₂(2-aminothiazol-4-yl), NHCOCH₂cyclopropyl, NHCO(CH₂)₂N (Et)₂, NHCO(CH₂)₂ (piperazin-2,5-dion-3-yl), NHCOpyrrolidin-1-yl, NHCOmorpholin-4-yl, NHCO₂CH₂ tetrahydrofuran-2-yl, NHCO₂tetrahydrofuran-2-yl, NHCO₂tetrahydropyran-4-yl, oder NHCO₂CH₂tetrahydropyran-2-yl.
Verbindung ausgewählt aus den nachstehend aufgelisteten Verbindungen: Verbindungen der Formel IIa

Verbindungen der Formel IIb
Formeln IIIa IIIb, IVa, IVb
Verbindungen der Formeln IIIa und IIIb

Verbindungen der Formeln IVa und IVb

Verbindungen der Formel V

Verbindungen der Formel VI
Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 16 enthält und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger, ein Adjuvans oder ein Vehikel.
Zusammensetzung nach Anspruch 17, welche zusätzlich einen therapeutischen Wirkstoff enthält, der ausgewählt ist aus einem antiproliferativen Wirkstoff, einem antiinflammatorischen Wirkstoff, einem immunmodulatorischen Wirkstoff, einem neurotrophen Faktor, einem Wirkstoff zur Behandlung cardiovasculärer Krankheiten, einem Wirkstoff zur Behandlung von Leberkrankheiten, einem antiviralen Wirkstoff, einem Wirkstoff zur Behandlung von Blutkrankheiten, einem Wirkstoff zur Behandlung von Diabetes, oder einem Wirkstoff zur Behandlung Immundefizienzstörungen.
Verbindung nach Anspruch 1 oder Zusammensetzung nach Anspruch 17 zur Verwendung bei der Hemmung von JNK, Lck, oder Src-Kinaseaktivität in einer biologischen Probe.
Zusammensetzung nach Anspruch 17 zur Verwendung bei der Behandlung oder Verringerung der Schwere einer JNK-, Lck-, oder Src-vermittelten Krankheit oder eines solchen Zustandes in einem Patienten.
Zusammensetzung nach Anspruch 17 zur Verwendung bei der Behandlung oder Verringerung der Schwere einer Entzündungskrankheit, einer Autoimmunkrankheit, einer destruktiven Knochenkrankheit, einer proliferativen Krankheit, einer Infektionskrankheit, einer neurodegenerativen Krankheit, einer Allergie, einer Repertusion/Ischämie bei Schlaganfall, einer Herzattacke, einer angiogenen Krankheit, einer Organhypoxie, einer Gefäßhyperplasie, einer Herzhypertrophie, einer Thrombin induzierten Plättchenaggregation oder einem Zusatnd, der mit proinflammatorischen Cytokinen verbunden ist.
Zusammmensezung nach Anspruch 21 zur Verwendung bei der Behandlung oder Verringerung der Schwere einer Entzündungskrankheit, die ausgewählt ist aus akuter Pankreatitis, chronischer Pankreatitis, Asthma, Allergien, oder posttraumatische Lungeninsuffizienz.
Zusammensetzung nach Anspruch 21 zur Verwendung bei der Behandlung oder Vermeidung einer Autoimmunkrankheit, die ausgewählt ist aus Glomerulonephritis, rheumatoider Arthritis, systemischer Lupus erythematodes, Sklerodermie, chronischer Thyroiditis, Graves' Krankheit, autimmuner Gastritis, Diabetes, autoimmuner hämolytischer Anämie, autoimmuner Neutropenie, Thrombocytopenie, atopischer Dermatitis, chronischer aktiver Hepatitis, Myasthenia gravis, Multiper Sklerose, entzündlicher Darmkrankheit, ulcerativer Colitis, Crohn's Krankheit, Psoriasis, oder Transplantat-gegen-Wirt-Erkrankung.
Zusammensetzung nach Anspruch 21 zur Verwendung bei der Behandlung oder Vermeidung einer destruktiven Knochenkrankheit, die ausgewählt ist aus Osteoarthritis, Osteoporose oder einer multiplen Myelom verwandter Knochenkrankheit.
Zusammensetzung nach Anspruch 21 zur Verwendung bei der Behandlung oder Vermeidung einer proliferativen Krankheit, die ausgewählt ist aus akuter myelogener Leukämie, chronischer myelogener Leukämie, metastatischem Myelom, Karposi-Syndrom, oder multiplem Myelom.
Zusammensetzung nach Anspruch 21 zur Verwendung bei der Behandlung oder Vermeidung einer neurodegenerativen Krankheit, die ausgewählt ist aus Alzheimer-Krankheit, Parkinson-Krankheit, amyothropher Lateralsklerose, Huntington-Krankheit, cerebraler Ischämie oder einer neurodegenerativen Krankheit, die durch eine traumatische Verletzung, Glutamat-Neurotoxizität, oder Hypoxie verursacht ist.
Zusammensetzung nach Anspruch 21 zur Verwendung bei der Behandlung oder Vermeidung von Ischämischie/Reperfusorion bei Schlaganfall oder myocardialer Ischämie, renaler Ischämie, Herzattacken, Organhypoxie oder Thrombin induzierter Plättchenaggregation.
Zusammensetzung nach Anspruch 21 zur Verwendung bei der Behandlung oder Vermeidung eines Zustandes, der mit T-Zellenaktivierung oder pathologischer Immunreaktion verbunden ist.
Zusammensetzung nach Anspruch 21 zur Verwendung bei der Behandlung oder Vermeidung einer angiogenen Krankheit, die ausgewählt ist aus soliden Tumoren, Augen-Neovasculisation, oder infantilen Haemangiomen.
Zusammensetzung nach Anspruch 20 zur Verwendung bei der Behandlung oder Verringerung der Schwere einer einer JNK-, Lck-, oder Src-vermittelten Krankheit, die ausgewählt ist aus Hypercalcämie, Restenose, Hypercalcämie, Osteoporose, Osteoarthritis, symptomatischer Behandlung von Knochenmetastasen, rheumatoider Arthritis, entzündlicher Darmkrankheit, Multipler Sklerose, Psoriasis, Lupus, Transplantat-gegen-Wirt-Krankheit, Hashimoto's Thyroiditis, Guillain-Barre-Syndrom, chronischer obstructiver Lungenerkrankung, Kontaktdermatitis, Krebs, Paget's Krankheit, Asthma, ischämischer oder reperfusorischer Verletzung, allergischer Erkrankung, atopischer Dermatitis, oder allergischer Rhinits.
Zusammensetzung nach Anspruch 30 zur Verwendung bei der Behandlung oder Verringerung der Schwere einer einer JNK-, Lck-, oder Src-vermittelten Krankheit, die ausgewählt ist aus Hypercalcämie, Osteoporose, Osteoarthritis, oder symptomatischer Behandlung von Knochenmetastasen.
Zusammensetzung nach Anspruch 20 zur Verwendung bei der Behandlung oder Verringerung der Schwere einer einer JNK-, Lck-, oder Src-vermittelten Krankheit, die ausgewählt ist aus Autoimmunkrankheiten, Allergien, rheumatoider Arthritis, und Leukämie.
Zusammensetzung nach Anspruch 20, die mit einem zusätzlichen therapeutischen Wirkstoff verwendet wird, der ausgewählt ist aus einem antiinflammatorischen Wirkstoff, einem immunmodulatorischen Wirkstoff, einem neurotrophen Faktor, einem Wirkstoff zur Behandlung cardiovasculärer Krankheit, einem Wirkstoff zur Behandlung von Leberkrankheit, einem antiviralen Wirkstoff, einem Wirkstoff zur Behandlung von Blutkrankheiten, einem Wirkstoff zur Behandlung von Diabetes, oder einem Wirkstoff zur Behandlung von Immundeffizienzerkrankung, wobei dieser zusätzliche therapeutische Wirkstoff gemeinsam mit der Zusammensetzung als eine Einzeldosisform oder getrennt von der Zusammensetzung als Mehrfachdosisform verabreicht wird.
Zusammensetzung zur Beschichtung eines implantierbaren Gerätes, welche eine Verbindung gemäß Anspruch 1 und einen für die Beschichtung dieses Gerätes geeigneten Träger aufweist.
Implantierbares Gerät, das mit einer Zusammensetzung gemäß Anspruch 34 beschichtet ist.