DE60207416T2

DE60207416T2 - Imidazotriazin-derivate als gaba-rezeptor-liganden

Info

Publication number: DE60207416T2
Application number: DE60207416T
Authority: DE
Inventors: William Robert Carling; David James Hallett; Michael Geoffrey Neil Russell; Leslie Joseph Street
Original assignee: Merck Sharp and Dohme Ltd
Current assignee: Organon Pharma UK Ltd
Priority date: 2001-07-16
Filing date: 2002-07-08
Publication date: 2006-08-03
Anticipated expiration: 2022-07-09
Also published as: ATE310002T1; US20030216395A1; GB0117277D0; PE20030432A1; US20030055060A1; AU2002317957B2; ES2249598T3; US6696444B2; JP2004536862A; CA2451445A1; JP4373780B2; EP1409488A1; US6617326B2; EP1409488B1; WO2003008418A1; DE60207416D1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft eine Klasse von substituierten Imidazotriazin-Derivaten und deren Verwendung bei der Therapie. Insbesondere betrifft diese Erfindung Imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-Analoga, die in der 7-Position durch einen substituierten Phenylring substituiert sind. Diese Verbindungen sind Liganden für GABA_A-Rezeptoren und deshalb bei der Therapie von gestörten Geisteszuständen geeignet.
Rezeptoren für den bedeutendsten inhibierenden Neurotransmitter, Gamma-Aminobuttersäure (GABA), werden in zwei Hauptklassen unterteilt: (1) GABA_A-Rezeptoren, die Mitglieder der Oberfamilie der ligandengesteuerten Ionenkanäle sind, und (2) GABA_B-Rezeptoren, die Mitglieder der Oberfamilie der G-Protein-verknüpften Rezeptoren sein können. Seit die ersten cDNAs codierenden einzelnen GABA_A-Rezeptor-Untereinheiten geklont worden waren, ist die Anzahl der bekannten Mitglieder der Säugetierfamilie angewachsen und umfaßt wenigstens sechs α-Untereinheiten, vier β-Untereinheiten, drei γ-Untereinheiten, eine δ-Untereinheit, eine ε-Untereinheit und zwei ρ-Untereinheiten.
Obwohl das Wissen über die Vielseitigkeit der GABA_A-Rezeptor-Genfamilie für unser Verständnis dieses ligandengesteuerten Ionenkanals einen gewaltigen Schritt vorwärts bedeutet, befindet sich die Kenntnis über das Ausmaß der Unterart-Vielseitigkeit noch in einem Anfangsstadium. Es ist gezeigt worden, daß eine α-Untereinheit, eine β-Untereinheit und eine γ-Untereinheit die Minimalanforderung für die Bildung eines vollfunktionellen GABA_A-Rezeptors, der durch transiente Transfektion von cDNAs in Zellen exprimiert wird, darstellen. Wie oben angegeben, existieren auch δ, ε und ρ-Untereinheit, diese sind jedoch in GABA_A-Rezeptorpopulationen nur in geringem Maße vorhanden.
Die Untersuchungen der Rezeptorgröße und die Sichtbarmachung durch Elektronenmikroskopie lassen schließen, daß, wie andere Mitglieder der Familie der ligandengesteuerten Ionenkanäle, der natürliche GABA_A-Rezeptor in pentamerer Form existiert. Die Auswahl von wenigstens einer α-, einer β- und einer γ-Untereinheit aus einem Repertoire von siebzehn läßt die mögliche Existenz von mehr als 10000 pentameren Untereinheitenkombinationen zu. Darüber hinaus berücksichtigt diese Berechnung nicht die zusätzlichen Permutationen, die möglich wären, wenn die Anordnung von Untereinheiten um den Ionenkanal herum keinen Beschränkungen unterliegt (d.h., es könnten für einen Rezeptor, der aus fünf verschiedenen Untereinheiten besteht, 120 mögliche Varianten existieren).
Rezeptor-Unterart-Zusammenstellungen, die existieren, sind u.v.a. α1β2γ2, α2βγ1, α2β2/3γ2, α3βγ2/3, α4βδ, α5β3γ2/3, α6βγ2 und α6βδ. Unterart-Zusammenstellungen, die eine α1-Untereinheit enthalten, sind in den meisten Bereichen des Hirns vorhanden, und man nimmt an, daß sie über 40% der GABA_A-Rezeptoren in der Ratte ausmachen. Man nimmt an, daß Unterart-Zusammenstellungen, die α2- bzw. α3-Untereinheiten enthalten, etwa 25% und 17% der GABA_A-Rezeptoren in der Ratte ausmachen. Unterart-Zusammenstellungen, die eine α5-Untereinheit enthalten, sind überwiegend im Hippocampus und in der Hirnrinde exprimiert, und man nimmt an, daß sie etwa 4% der GABA_A-Rezeptoren in der Ratte ausmachen.
Eine charakteristische Eigenschaft aller bekannten GABA_A-Rezeptoren ist die Gegenwart einer Reihe von Modulatorstellen, eine davon ist die Benzodiazepin(BZ)-Bindungsstelle. Die BZ-Bindungsstelle ist die am meisten untersuchte GABA_a-Rezeptormodulatorstelle und ist die Stelle, durch die Anxiolytika, wie z.B. Diazepam und Temazepam, ihre Wirkung entfalten. Vor dem Klonen der GABA_A-Rezeptor-Genfamilie war die Benzodiazepin-Bindungsstelle historisch in zwei Unterarten, BZ1 und BZ2, unterteilt, basierend auf Radioligandenbindungsuntersuchungen. Es ist gezeigt worden, daß die BZ1-Unterart mit einem GABA_A-Rezeptor, der die α1-Untereinheit in Kombination mit einer β-Untereinheit und γ2 enthält, pharmakologisch äquivalent ist. Diese ist die am weitesten verbreitete GABA_A-Rezeptor-Unterart, und man nimmt an, daß sie nahezu die Hälfte aller GABA_A-Rezeptoren im Hirn darstellt.
Zwei andere bedeutende Populationen sind die α2βγ2- und α3βγ2/3-Unterarten. Zusammen machen sie etwa weitere 35% des gesamten GABA_A-Rezeptor-Repertoires aus. Pharmakologisch scheint diese Kombination mit der zuvor durch Radioligandenbindung definierten BZ2-Unterart äquivalent zu sein, obwohl die BZ2-Unterart auch bestimmte α5-haltige Unterart-Zusammenstellungen umfassen kann. Die physiologische Rolle dieser Unterarten war bisher unklar, da keine ausreichend selektiven Agonisten oder Antagonisten bekannt waren.
Es wird jetzt angenommen, daß Mittel, die als BZ-Agonisten an α1βγ2-, α2βγ2- oder α3βγ2-Untereinheiten wirken, wünschenswerte anxiolytische Eigenschaften besitzen werden. Verbindungen, die durch Wirkung als BZ-Agonisten Modulatoren der Benzodiazepin-Bindungsstellen des GABA_A-Rezeptor sind, werden hierin nachfolgend als "GABA_A-Rezeptoragonisten" bezeichnet. Die α1-selektiven GABA_A-Rezeptorago nisten Alpidem und Zolpidem werden klinisch als Hypnotika verschrieben, was nahelegt, daß wenigstens ein Teil der Sedation, die mit bekannten Anxiolytika, die an der BZ1-Bindungsstelle wirken, assoziiert ist, durch GABA_A-Rezeptoren vermittelt wird, welche die α1-Untereinheit enthalten. Demgemäß geht man davon aus, daß GABA_A-Rezeptoragonisten, die wirkungsvoller an die α2- und/oder α3-Untereinheit binden als an α1, bei der Behandlung von Angst wirksam sein werden, bei verringerter Neigung zur Herbeiführung von Sedation. Auch können Mittel, die Antagonisten oder inverse Agonisten an α1 sind, eingesetzt werden, um eine von α1-Agonisten verursachte Sedation oder Hypnose umzukehren.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind selektive Liganden für GABA_A-Rezeptoren und daher bei der Behandlung und/oder Prävention von einer Reihe von Störungen des Zentralnervensystems geeignet. Solche Störungen sind u.a. Angststörungen, wie z.B. Panik mit oder ohne Agoraphobie, Agoraphobie ohne Panik-Vorgeschichte, Tier- und anderen Phobien, einschließlich sozialer Phobien, Zwangsstörung, Streßstörungen, einschließlich posttraumatischer und akuter Streßstörung, und generalisierte oder substanzinduzierte Angststörung; Neurosen; Konvulsionen; Migräne; depressive oder bipolare Störungen, zum Beispiel einmalige oder rezidivierende schwere depressive Störung, dysthymische Störung, manische Bipolar-I- und Bipolar-II-Störungen und zyklothyme Störung; psychotische Störungen, einschließlich Schizophrenie; Neurodegeneration, die durch zerebrale Ischämie entsteht; Aufmerksamkeitsdefizit; Hyperaktivitätsstörung und Störungen des zirkadianen Rhythmus, z.B. bei Subjekten, die an den Auswirkungen des Jet-Lags oder der Schichtarbeit leiden.
Weitere Störungen, gegen die selektive Liganden für GABA_A-Rezeptoren von Nutzen sein können, sind u.a. Schmerz und Nozizeption; Erbrechen, einschließlich akutem, verzögertem oder erwartetem Erbrechen, insbesondere durch Chemotherapie oder Bestrahlung hervorgerufenes Erbrechen sowie Bewegungsschwindel, postoperativer Übelkeit und postoperativem Erbrechen; Eßstörungen, einschließlich Anorexia nervosa und Bulimia nervosa; prämenstruelles Syndrom; Muskelkrämpfe oder Spastizität, z.B. bei paraplegischen Patienten; Gehörschädigung, einschließlich Tinnitus und altersbezogene Höhrschwäche; Harninkontinenz und die Auswirkungen von Drogenmißbrauch und -abhängigkeit, einschließlich Alkoholentzug. Selektive Liganden für GABA_A-Rezeptoren können auch als Prämedikation vor der Anästhesie oder kleineren Eingriffen, wie z.B. der Endoskopie, einschließlich der Magen-Endoskopie, wirksam sein.
Darüber hinaus können die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung als Radioliganden bei Assays zum Nachweis von Verbindungen, die in der Lage sind, an den menschlichen GABA_A-Rezeptor zu binden, geeignet sein.
Die vorliegende Erfindung stellt eine Klasse von Imidazotriazin-Derivaten zur Verfügung, welche an verschiedenen GABA_A-Rezeptor-Unterarten wünschenswerte Bindungseigenschaften besitzen. Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung besitzen eine gute Affinität als Liganden für die α2- und/oder α3-Untereinheit des menschlichen GABA_A-Rezeptors. Die Verbindungen dieser Erfindung können vorteilhafter mit der α2- und/oder α3-Untereinheit wechselwirken als mit der α1-Untereinheit. Wünschenswerterweise werden die Verbindungen der Erfindung eine funktionelle Selektivität bezüglich einer selektiven Wirksamkeit für die α2- und/oder α3-Untereinheit relativ zur α1-Untereinheit aufweisen.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind GABA_A-Rezeptorunterartliganden mit einer Bindungsaffinität (K_i) für die α2- und/oder α3-Untereinheit, gemessen in dem hier nachstehend beschriebenen Assay, von 200 nM oder weniger, typischerweise 100 nM oder weniger und idealerweise 20 nM oder weniger. Die Verbindungen gemäß dieser Erfindung können wenigstens eine 2fache, geeigneterweise wenigstens eine 5fache und vorteilhafterweise wenigstens eine 10fache selektive Affinität für die α2- und/oder α3-Untereinheit relativ zur α1-Untereinheit besitzen. Verbindungen, die im Hinblick auf ihre Bindungsaffinität für die α2- und/oder α3-Untereinheit relativ zur α1-Untereinheit nicht selektiv sind, sind jedoch ebenfalls vom Umfang der vorliegenden Erfindung umfaßt, solche Verbindungen werden wünschenswerterweise eine funktionelle Selektivität von keiner oder einer schwachen (positiven oder negativen) Wirksamkeit an der α1-Untereinheit und ein Profil eines Voll- oder Teilagonisten an der α2- und/oder α3-Untereinheit aufweisen.
Die US 3 422 194 beschreibt Dihydrodiphenylimidazo[1,2-b]-as-triazine zur Behandlung von Depression.
Die vorliegende Erfindung stellt eine Verbindung der Formel I oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon zur Verfügung:
wobei
X¹ Wasserstoff oder Fluor bedeutet,
R¹¹ Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Halogen(C_1-6)alkyl, Dihalogen(C_1-6)alkyl, Hydroxy(C_1-6)alkyl, Heteroaryl, Halogen, Trifluormethyl, C_1-6-Alkoxy, Formyl, C_2-6-Alkylcarbonyl, C_2-6-Alkoxycarbonyl oder -CR⁴=NOR⁵ bedeutet,
R⁴ Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl bedeutet,
R⁵ Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Hydroxy(C_1-6)alkyl oder Di(C_1-6)alkylamino(C_1-6)alkyl bedeutet und
R⁶ Fluor bedeutet.
Zur medizinischen Verwendung werden die Salze der Verbindungen der Formel I pharmazeutisch annehmbare Salze sein. Andere Salze können jedoch zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen oder ihrer pharmazeutisch annehmbaren Salze geeignet sein. Geeignete pharmazeutisch annehmbare Salze der Verbindungen dieser Erfindung sind u.a. Säureadditionssalze, die beispielsweise durch Mischen einer Lösung der erfindungsgemäßen Verbindung mit einer Lösung einer pharmazeutisch annehmbaren Säure, wie z.B. Salzsäure, Schwefelsäure, Methansulfonsäure, Fumarsäure, Maleinsäure, Succinsäure, Essigsäure, Benzoesäure, Oxasäure, Citronensäure, Weinsäure, Kohlensäure oder Phosphorsäure, gebildet werden können.
Geeignete Alkylgruppen sind u.a. geradkettige und verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Typische Beispiele sind u.a. Methyl- und Ethylgruppen und geradkettige oder verzweigte Propyl-, Butyl- und Pentylgruppen. Spezielle Alkylgruppen sind Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, Isobutyl, tert.-Butyl und 2,2-Dimethylpropyl. Abgeleitete Ausdrücke, wie z.B. "C_1-6-Alkoxy", sollen entsprechend aufgefaßt werden.
Geeignete Heteroarylgruppen sind u.a. Pyridinyl-, Chinolinyl-, Isochinolinyl-, Pyridazinyl-, Pyrimidinyl-, Pyrazinyl-, Furyl-, Benzofuryl-, Dibenzofuryl-, Thienyl-, Benzthienyl-, Pyrrolyl-, Indolyl-, Pyrazolyl-, Indazolyl-, Oxazolyl-, Isoxazolyl-, Thiazolyl-, Isothiazolyl-, Imidazolyl-, Benzimidazolyl-, Oxadiazolyl-, Thiadiazolyl-, Triazolyl- und Tetrazolylgruppen.
Die Bezeichnung "Halogen", so wie sie hier verwendet wird, umfaßt Fluor, Chlor, Brom und Iod, insbesondere Fluor oder Chlor.
Wenn die erfindungsgemäßen Verbindungen wenigstens ein Asymmetriezentrum besitzen, können sie entsprechend als Enantiomere existieren. Wenn die erfindungsgemäßen Verbindungen zwei oder mehrere Asymmetriezentren besitzen, können sie darüber hinaus als Diastereoisomere existieren. Es ist zu verstehen, daß alle solchen Isomere und Mischungen davon in beliebigen Proportionen vom Umfang der vorliegenden Erfindung umfaßt sind.
Bei einer Ausführungsform bedeutet X¹ Wasserstoff. Bei einer weiteren Ausführungsform bedeutet X¹ Fluor.
Geeigneterweise bedeutet R⁴ Wasserstoff oder Methyl.
Geeigneterweise bedeutet R⁵ Wasserstoff, Methyl, Ethyl, Hydroxyethyl oder Dimethylaminoethyl. Spezielle Werte für R⁵ sind u.a. Wasserstoff, Hydroxyethyl und Dimethylaminoethyl.
Wenn R¹¹ Heteroaryl bedeutet, ist diese Gruppe geeigneterweise Furyl.
Repräsentative Werte für R¹¹ sind u.a. Wasserstoff, Methyl, Fluormethyl, Difluormethyl, Trifluormethyl, Hydroxymethyl, Difluorethyl, Hydroxyethyl, Fluorpropyl, Hydroxypropyl, tert.-Butyl, Furyl, Chlor, Methoxy, Formyl, Acetyl, Methoxycarbonyl und -CR²=NOR³, wobei R² und R³ wie oben definiert sind.
Spezielle Werte für R¹¹ sind u.a. Wasserstoff, Methyl, Difluorethyl (insbesondere 1,1-Difluorethyl), Fluorpropyl (insbesondere 2-Fluorprop-2-yl), Hydroxypropyl (insbesondere 2-Hydroxyprop-2-yl), tert.-Butyl und Trifluormethyl.
Bei einer Ausführungsform bedeutet R¹¹ Methyl. Bei einer weiteren Ausführungsform bedeutet R¹¹ Trifluormethyl. Bei einer weiteren Ausführungsform bedeutet R¹¹ 2-Hydroxyprop-2-yl. Bei einer weiteren Ausführungsform bedeutet R¹¹ 2-Fluorprop-2-yl.
Das Fluoratom R⁶ ist vorzugsweise in der 4-, 5- oder 6-Position (relativ zur Cyanogruppe an Position 2), vorzugsweise in der 6-Position, an den Phenylring gebunden.
Spezielle Verbindungen innerhalb des Umfangs der vorliegenden Erfindung sind u.a.:
4,2'-Difluor-5'-[3-(1-fluor-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril,
5,2'-Difluor-5'-(3-trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl)biphenyl-2-carbonitril,
4,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril,
4-Fluor-3'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril,
6,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril,
und pharmazeutisch annehmbare Salze davon.
Die Bindungsaffinität (K_i) der Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung für die α3-Untereinheit des menschlichen GABA_A-Rezeptors wird zweckmäßigerweise in dem hierin nachstehend beschriebenen Assay gemessen. Die α3-Untereinheit-Bindungsaffinität (K_i) der Verbindungen der Erfindung beträgt idealerweise 50 nM oder weniger, vorzugsweise 10 nM oder weniger und besonders bevorzugt 5 nM oder weniger.
Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung rufen idealerweise eine wenigstens 40%ige, vorzugsweise eine wenigstens 50%ige und besonders bevorzugt eine wenigstens 60%ige Potenzierung der GABA-EC₂₀-Reaktion in stabil transfektierten rekombinanten Zellinien, welche die α3-Untereinheit des menschlichen GABA_A-Rezeptors exprimieren, hervor. Darüber hinaus werden die Verbindungen der Erfindung idealerweise eine höchstens 30%ige, vorzugsweise höchstens 20%ige und besonders bevorzugt höchstens 10%ige Potenzierung der GABA-EC₂₀-Reaktion in stabil transfektierten rekombinanten Zellinien, welche die α1-Untereinheit des menschlichen GABA_A-Rezeptors exprimieren, hervorrufen.
Die Potenzierung der GABA-EC₂₀-Reaktion in stabil transfektierten Zellinien, welche die α3- und α1-Untereinheiten des menschlichen GABA_A-Rezeptors exprimieren, kann zweckmäßigerweise durch Verfahren gemessen werden, die analog sind zu der in Wafford et al., Mol. Pharmacol., 1996, 50, 670–678, beschriebenen Vorschrift. Das Verfahren wird geeigneterweise unter Verwendung von Kulturen aus stabil transfektierten eukaryotischen Zellen, typischerweise stabil transfektierten Maus-Ltk^–-Fibroblastenzellen, durchgeführt.
Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung weisen eine anxiolytische Wirkung auf, wie es durch eine positive Reaktion im Elevated-Plus-Maze-Test und im Test mit konditionierter Trinkunterdrückung gezeigt werden kann (vgl. Dawson et al., Psychopharmacology, 1995, 121, 109–117). Darüber hinaus sind die Verbindungen der Erfindung wahrscheinlich im wesentlichen nichtsedatierend, wie es durch ein entsprechendes Ergebnis, das aus dem Reaktionssensitivitäts(Kettenzieh)-Test (vgl. Bayley et al., Psychopharmacol., 1996, 10, 206–213) erhalten wird, bestätigt werden kann.
Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung können auch eine antikonvulsive Wirkung ausüben. Dies kann durch ihre Fähigkeit, durch Pentylentetrazol hervorgerufene Anfälle bei Ratten und Mäusen zu blockieren, gezeigt werden, wobei eine Vorschrift analog zu der von Bristow et al. in J. Pharmacol. Exp. Ther., 1996, 279, 492–501, beschriebenen Vorschrift befolgt wird.
Um ihre Verhaltensauswirkungen zu entfalten, sind die Verbindungen der Erfindung idealerweise hirnpenetrierend; in anderen Worten, diese Verbindungen sind in der Lage, die sogenannte "Blut-Hirn-Schranke" zu durchqueren. Vorteilhafterweise sind die Verbindungen der Erfindung in der Lage, ihre nutzbringende therapeutische Wirkung nach der Verabreichung auf dem oralen Weg zu entfalten.
Die Erfindung stellt auch pharmazeutische Zusammensetzungen zur Verfügung, die eine oder mehrere Verbindungen dieser Erfindung in Verbindung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthalten. Vorzugsweise liegen diese Zusammensetzungen in Einheitsdosisformen, wie z.B. Tabletten, Pillen, Kapseln, Pulvern, Granulaten, sterilen parenteralen Lösungen oder Suspensionen, dosierten Aerosol- oder Flüssigsprays, Tropfen, Ampullen, Autoinjektionsvorrichtungen oder Zäpfchen, zur oralen, parenteralen, intranasalen, sublingualen oder rektalen Verabreichung oder zur Verabreichung durch Inhalation oder Insufflation vor. Zur Herstellung fester Zusammensetzungen, wie z.B. Tabletten, wird der Hauptwirkstoff mit einem pharmazeutischen Träger, z.B. herkömmlichen Tablettierungsbestandteilen wie Maisstärke, Lactose, Saccharose, Sorbit, Talk, Stearinsäure, Magnesiumstearat, Dicalciumphosphat oder Gummen, und anderen pharmazeutischen Verdünnungsmitteln, z.B. Wasser, zu einer festen Vorformulierungszusammensetzung vermischt, die eine homogene Mischung einer Verbindung der vorliegenden Erfindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon enthält. Wenn diese Vorformulierungszusammensetzungen als homogen bezeichnet werden, bedeutet dies, daß der Wirkstoff gleichmäßig in der Zusammensetzung dispergiert ist, so daß die Zusammensetzung leicht in gleichwirksame Einheitsdosisformen, wie z.B. Tabletten, Pillen und Kapseln, unterteilt werden kann. Diese feste Vorformulierungszusammensetzung wird dann in Einheitsdosisformen des oben beschriebenen Typs unterteilt, wobei diese 0,1 mg bis etwa 500 mg des Wirkstoffes der vorliegenden Erfindung enthalten. Typische Einheitsdosisformen enthalten 1 bis 100 mg, zum Beispiel 1, 2, 5, 10, 25, 50 oder 100 mg des Wirkstoffes. Die Tabletten oder Pillen der neuen Zusammensetzung können überzogen oder auf andere Weise compoundiert werden, um eine Dosierungsform zu erhalten, die den Vorteil einer verlängerten Wirkung besitzt. Zum Beispiel kann die Tablette oder Pille eine innere Dosierungs- und eine äußere Dosierungskomponente enthalten, wobei letztere in Form einer Hülle über der ersteren liegt. Die zwei Komponenten können durch eine magensaftresistente Schicht getrennt sein, die die Auflösung im Magen verhindert und die es der inneren Komponente ermöglicht, intakt in den Zwölffingerdarm zu gelangen oder deren Freisetzung zu verzögern. Verschiedene Materialien können für solche magensaftresistente Schichten oder Überzüge verwendet werden, wobei solche Materialien eine Reihe von Polymersäuren und Mischungen von Polymersäuren mit Materialien, wie z.B. Schellack, Cetylalkohol und Celluloseacetat, einschließen.
Die flüssigen Formen, in welche die neuen Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung zur oralen Verabreichung oder Verabreichung durch Injektion eingebracht werden können, sind u.a. wäßrige Lösungen, geeignet aromatisierte Sirupe, wäßrige oder Ölsuspensionen und aromatisierte Emulsionen mit eßbaren Ölen wie Baumwollsamenöl, Sesamöl, Kokosnußöl oder Erdnußöl, wie auch Elixiere und ähnliche pharmazeutische Vehikel. Geeignete Dispersions- oder Suspensionsmittel für wäßrige Suspensionen sind u.a. synthetische und natürliche Gummen wie Tragantgummi, Akaziengummi, Alginat, Dextran, Natriumcarboxymethylcellulose, Methylcellulose, Polyvinylpyrrolidon oder Gelatine.
Bei der Behandlung von Angst beträgt eine geeignete Dosismenge etwa 0,01 bis 250 mg/kg pro Tag, vorzugsweise etwa 0,05 bis 100 mg/kg pro Tag und insbesondere etwa 0,05 bis 5 mg/kg pro Tag. Die Verbindungen können auch in einem Regime 1 bis 4 Mal pro Tag verabreicht werden.
Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung können durch ein Verfahren hergestellt werden, das die Umsetzung einer Verbindung der Formel II mit einer Verbindung der Formel III umfaßt:
wobei X¹, R¹¹ und R⁶ wie oben definiert sind, L¹ eine geeignete Abgangsgruppe bedeutet und M¹ einen Boronsäurerest -B(OH)₂ oder einen cyclischen Ester davon, gebildet mit einem organischen Diol, z.B. Pinacol oder Neopentylglycol, bedeutet, oder M¹ -Sn(Alk)₃ bedeutet, wobei Alk eine C_1-6-Alkylgruppe, typischerweise n-Butyl, bedeutet, in Gegenwart eines Übergangsmetallkatalysators.
Die Abgangsgruppe L¹ ist typischerweise ein Halogenatom, z.B. Brom.
Der Übergangsmetallkatalysator zur Verwendung bei der Reaktion zwischen den Verbindungen II und III ist geeigneterweise Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0). Die Reaktion wird zweckmäßigerweise bei einer erhöhten Temperatur in einem Lösungsmittel, wie z.B. N,N-Dimethylacetamid, 1,2-Dimethoxyethan, Tetrahydrofuran oder 1,4-Dioxan, vorteilhafterweise in Gegenwart von Kaliumphosphat, Natriumcarbonat oder Kupfer(I)iodid durchgeführt. Alternativ kann der eingesetzte Übergangsmetallkatalysator Dichlor[1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocen]palladium(II) sein, wobei in diesem Fall die Reaktion zweckmäßigerweise bei einer erhöhten Temperatur in einem Lösungsmittel, wie z.B. N,N-Dimethylformamid, typischerweise in Gegenwart von Kaliumphosphat durchgeführt wird.
Bei einem alternativen Verfahren können die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung durch ein Verfahren hergestellt werden, das die Umsetzung einer Verbindung der Formel IV mit einer Verbindung der Formel V umfaßt:
wobei X¹, R¹¹, R⁶, L¹ und M¹ wie oben definiert sind, in Gegenwart eines Übergangsmetallkatalysators unter Bedingungen, analog zu den oben für die Reaktion zwischen den Verbindungen II und III beschriebenen Bedingungen.
Wenn M¹ bei den Zwischenprodukten der obigen Formeln III und IV einen Boronsäurerest -B(OH)₂ oder einen daraus mit Pinacol oder Neopentylglycol gebildeten cyclischen Ester bedeutet, kann die relevante Verbindung III oder IV durch Umsetzung von Bis(pinacolato)diboron bzw. Bis(neopentylglycolato)diboran mit einer Verbindung der Formel VI oder VII:
wobei X¹, R¹¹ und R⁶ wie oben definiert sind und L² Hydroxy oder eine geeignete Abgangsgruppe bedeutet, in Gegenwart eines Übergangsmetallkatalysators hergestellt werden.
Wenn L² eine Abgangsgruppe bedeutet, ist diese typischerweise Trifluormethansulfonyloxy (Triflyloxy) oder ein Halogenatom, wie z.B. Brom.
Der Übergangsmetallkatalysator, der bei der Reaktion zwischen Bis(pinacolato)diboron oder Bis(neopentylglycolato)diboran und Verbindung VI oder VII verwendet wird, ist geeigneterweise Dichlor[1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocen]palladium(II). Die Reaktion wird zweckmäßigerweise bei einer erhöhten Temperatur in einem Lösungsmittel, wie z.B. 1,4-Dioxan, gegebenenfalls in einer Mischung mit Dimethylsulfoxid, typischerweise in Gegenwart von 1,1'-Bis(diphenylphosphino)ferrocen und/oder Kaliumacetat durchgeführt.
Wenn L² bei den Zwischenprodukten der obigen Formel VII Triflyloxy bedeutet, kann die relevante Verbindung durch Umsetzung der entsprechenden Verbindung der Formel VII, bei der L² Hydroxy bedeutet, mit N-Phenyltriflylimid typischerweise in Gegenwart von Triethylamin oder mit Trifluormethansulfonsäureanhydrid typischerweise in Gegenwart von Pyridin hergestellt werden. Analoge Bedingungen können zur Umwandlung eines Zwischenprodukts der obigen Formel VI, bei der L² Hydroxy bedeutet, in die entsprechende Verbindung, bei der L² Triflyloxy bedeutet, angewandt werden.
Die Zwischenprodukte der obigen Formel VII, bei der L² Hydroxy ist, können geeigneterweise aus dem entsprechenden methoxysubstituierten Vorläufer der Formel VIII:
bei der X¹ und R¹¹ wie oben definiert sind, durch Behandlung mit Bortribromid typischerweise in Chloroform oder mit Bromwasserstoff typischerweise in Essigsäure am Rückfluß hergestellt werden.
Die Zwischenprodukte der obigen Formel VIII können durch Umsetzung einer Verbindung der Formel II, wie sie oben definiert ist, mit der entsprechenden Verbindung der Formel IX:
wobei X¹ und M¹ wie oben definiert sind, in Gegenwart eines Übergangsmetallkatalysators unter Bedingungen, analog zu den oben für die Reaktion zwischen den Verbindungen II und III beschriebenen Bedingungen, hergestellt werden.
Wenn L¹ bei den Zwischenprodukten der obigen Formel II Brom bedeutet, kann diese Verbindung durch Bromierung der entsprechenden Verbindung der Formel X:
wobei R¹¹ wie oben definiert ist, typischerweise durch Behandlung mit Brom in Essigsäure in Gegenwart von Natriumacetat und gegebenenfalls auch Kaliumbromid hergestellt werden.
Die Zwischenprodukte der Formel X können durch Umsetzung von Bromacetaldehyd mit der erforderlichen Verbindung der Formel XI:
wobei R¹¹ wie oben definiert ist, hergestellt werden.
Die Reaktion wird zweckmäßigerweise durch Erwärmen der Reaktanden in 1,2- Dimethoxyethan oder einem Niederalkanol, wie z.B. Methanol und/oder Ethanol, bei einer Temperatur typischerweise im Bereich von 60–80°C durchgeführt.
Bei noch einem weiteren Verfahren können die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung durch ein Verfahren hergestellt werden, das die Umsetzung einer Verbindung der Formel XI, wie sie oben definiert ist, mit einer Verbindung der Formel XII umfaßt:
wobei X¹ und R⁶ wie oben definiert sind und L³ eine geeignete Abgangsgruppe bedeutet, unter Bedingungen, analog zu den oben für die Reaktion zwischen Bromacetaldehyd und Verbindung XI beschriebenen Bedingungen.
Die Abgangsgruppe L³ ist geeigneterweise ein Halogenatom, z.B. Brom.
Bei noch einem weiteren Verfahren können die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung, bei denen X¹ Wasserstoff bedeutet und R¹¹ einen Heteroarylrest bedeutet, durch ein Verfahren hergestellt werden, das die Reaktion einer Verbindung der Formel XIII mit einer Verbindung der Formel XIV umfaßt:
wobei R⁶ wie oben definiert ist, R^1a einen Heteroarylrest bedeutet und L⁴ eine geeignete Abgangsgruppe bedeutet, in Gegenwart eines Übergangsmetallkatalysators.
Die Abgangsgruppe L⁴ ist typischerweise ein Halogenatom, z.B. Chlor.
Der Übergangsmetallkatalysator, der bei der Reaktion zwischen den Verbindungen XIII und XIV verwendet wird, ist geeigneterweise Tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0), wobei in diesem Fall die Reaktion zweckmäßigerweise bei einer erhöhten Temperatur in einem Lösungsmittel, wie z.B. 1,4-Dioxan, typischerweise in Gegenwart von Tri-tert.-butylphosphin und Cäsiumcarbonat durchgeführt wird.
Wenn L⁴ bei den Verbindungen der obigen Formel XIV ein Halogenatom bedeutet, entsprechen diese Verbindungen den Verbindungen der Formel I, wie sie oben definiert sind, wobei R¹¹ Halogen bedeutet, und sie können daher durch ein beliebiges der oben für die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen beschriebenen Verfahren hergestellt werden.
Wenn sie nicht im Handel erhältlich sind, können die Ausgangsmaterialien der Formeln V, IX, XI und XII durch Verfahren, analog zu den in den begleitenden Beispielen beschriebenen Verfahren, oder durch im Stand der Technik gut bekannte Standardverfahren hergestellt werden.
Man wird erkennen, daß eine beliebige ursprünglich aus irgendeinem der obigen Verfahren erhaltene Verbindung der Formel I, wo passend, anschließend durch im Stand der Technik bekannte Verfahren in eine weitere Verbindung der Formel I umgewandelt werden kann. Zum Beispiel kann eine ursprünglich erhaltene Verbindung der Formel I, bei der R¹¹ C_2-6-Alkoxycarbonyl bedeutet, mit Lithiumaluminiumhydrid zur entsprechenden Verbindung der Formel I, bei der R¹¹ Hydroxymethyl bedeutet, reduziert werden. Letztere Verbindung kann dann durch Behandlung mit Mangandioxid zur entsprechenden Verbindung der Formel I, bei der R¹¹ Formyl bedeutet, oxidiert werden. Das dabei erhaltene Formylderivat kann mit einem Hydroxylaminderivat der Formel H₂N-OR⁵ kondensiert werden, um eine Verbindung der Formel I zu ergeben, bei der R¹¹ -CH=NOR⁵ bedeutet. Alternativ kann die Verbindung der Formel I, bei der R¹¹ Formyl bedeutet, mit einem Grignard-Reagenz der Formel R^aMgBr, wobei R^a C_1-5-Alkyl bedeutet, umgesetzt werden, um eine Verbindung der Formel I zu ergeben, bei der R¹¹ -CH(OH)R^a bedeutet, und diese Verbindung kann wiederum unter Verwendung von Mangandioxid zur entsprechenden Verbindung der Formel I, bei der R¹¹ -COR^a bedeutet, oxidiert werden. Die letztere Verbindung kann dann mit einem Hydroxylaminderivat der Formel H₂N-OR⁵ kondensiert werden, um eine Verbindung der Formel 1 zu ergeben, bei der R¹¹ -CR^a=NOR⁵ bedeutet.
Wenn aus irgendwelchen der oben beschriebenen Verfahren zur Herstellung von Verbindungen gemäß der Erfindung ein Produktgemisch erhalten wird, kann das erwünschte Produkt daraus zu einem geeigneten Zeitpunkt durch herkömmliche Verfahren, wie z.B. durch präparative HPLC oder durch Säulenchromatographie unter Verwendung von zum Beispiel Silica und/oder Aluminiumoxid in Verbindung mit einem passenden Lösungsmittelsystem, abgetrennt werden.
Wenn die oben beschriebenen Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen Stereoisomerenmischungen ergeben, können diese Isomere durch herkömmliche Verfahren, wie z.B. präparative Chromatographie, getrennt werden. Die neuen Verbindungen können in racemischer Form hergestellt werden, oder die einzelnen Enantiomere können entweder durch enantiospezifische Synthese oder durch Auftrennung hergestellt werden. Die neuen Verbindungen können zum Beispiel durch Standardverfahren, wie z.B. präparative HPLC oder die Bildung von Diastereomerenpaaren durch Salzbildung mit einer optisch aktiven Säure, wie z.B. (–)-Di-p-toluoyl-d-weinsäure und/oder (+)-Di-p-toluoyl-l-weinsäure, gefolgt von der fraktionierten Kristallisation und Gewinnung der freien Base, in ihre Enantiomerenkomponenten aufgetrennt werden. Die neuen Verbindungen können auch durch Bildung diastereomerer Ester oder Amide, gefolgt von der chromatographischen Trennung und der Entfernung des chiralen Hilfsstoffes, aufgetrennt werden.
Während irgendwelcher der obigen Synthesesequenzen kann es notwendig und/oder erwünscht sein, empfindliche oder reaktive Gruppen an irgendwelchen der betroffenen Moleküle zu schützen. Dies kann durch herkömmliche Schutzgruppen erreicht werden, wie diejenigen, die in Protective Groups in Organic Chemistry, Hrsg. J. F. W. McOmie, Plenum Press, 1973, und T. W. Green & P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1991, beschrieben sind. Die Schutzgruppen können an einem zweckmäßigen nachfolgenden Punkt unter Verwendung von im Stand der Technik bekannten Verfahren entfernt werden.
Die folgenden Beispiele veranschaulichen die Herstellung von erfindungsgemäßen Verbindungen.
Die Verbindungen gemäß dieser Erfindung inhibieren wirksam die Bindung von [³H]-Flumazenil an die Benzodiazepin-Bindungsstelle von menschlichen GABA_A-Rezeptoren, die die α2- und/oder α3-Untereinheit enthalten, die stabil in LtK^–-Zellen exprimiert ist/sind.
Reagenzien

• Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS).
• Assay-Puffer: 10 mM KH₂PO₄, 100 mM KCl, pH 7,4 bei Raumtemperatur.
• [³H]-Flumazenil (18 nM für α1β3γ2-Zellen; 18 nM für α2β3γ2-Zellen; 10 nM für α3β3γ2-Zellen) in Assay-Puffer.
• Flunitrazepam 100 μM in Assay-Puffer.
• Zellen, die in Assay-Puffer resuspendiert sind (1 Schale auf 10 ml).

Ernten von Zellen
Der Überstand wird von den Zellen entfernt. PBS (etwa 20 ml) wird zugegeben. Die Zellen werden abgeschabt und in ein 50-ml-Zentrifugenröhrchen gegeben. Der Vorgang wird mit weiteren 10 ml PBS wiederholt, um sicherzustellen, daß der Großteil der Zellen entfernt wurde. Die Zellen werden durch 20minütiges Zentrifugieren bei 3000 U/Minute in einer Labor-Zentrifuge pelletiert und, falls erwünscht, anschließend eingefroren. Die Pellets werden in 10 ml Puffer pro Schale (25 cm × 25 cm) Zellen resuspendiert.
Assay
Kann in Platten mit 96 Vertiefungen oder in Röhrchen durchgeführt werden. Jedes Röhrchen enthält:

• 300 μl Assay-Puffer.
• 50 μl [³H]-Flumazenil (Endkonzentration für α1β3γ2: 1,8 nM; für α2β3γ2: 1,8 nM; für α3β3γ2: 1,0 nM).
• 50 μl Puffer oder Lösungsmittelträger (z.B. 10% DMSO), wenn die Verbindungen in 10% DMSO (gesamt) gelöst werden; Testverbindung oder Flunitrazepam (um die nichtspezifische Bindung zu ermitteln), 10 μM Endkonzentration.
• 100 μl Zellen.

Die Assays werden 1 Stunde bei 40°C inkubiert, dann auf GF/B-Filtern filtriert, wobei entweder ein Tomtec- oder ein Brandel-Zellernter verwendet wird, gefolgt von Waschen mit 3 × 3 ml eiskaltem Assay-Puffer. Die Filter werden getrocknet und durch Flüssigszintillationszählung gezählt. Die erwarteten Werte für die Gesamtbindung sind 3000–4000 dpm für alle Zählungen und weniger als 200 dpm für die nichtspezifische Bindung, wenn die Flüssigszintillationszählung verwendet wird, oder 1500–2000 dpm für alle Zählungen und weniger als 200 dpm für die nichtspezifische Bindung, wenn mit einem Meltilex-Festszintillationszähler gezählt wird. Die Bindungsparameter werden durch nichtlineare Kleinste-Quadrate-Regressionsanalyse ermittelt, woraus die Inhibierungskonstante K_i für jede Testverbindung berechnet werden kann.
Die Verbindungen der begleitenden Beispiele wurden in dem obigen Assay getestet, und es wurde gefunden, daß sie alle einen K_i-Wert für die Verdrängung von [³H]-Flumazenil aus der α2- und/oder α3-Untereinheit des menschlichen GABA_A-Rezeptors von 100 nM oder weniger besitzen.
HERSTELLUNGSBEISPIEL A
7-Brom-3-trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin
a) 3-Amino-5-trifluormethyl-1,2,4-triazin
Zu einer gerührten Lösung von Natriumacetat-Trihydrat (22,62 g, 166,2 mmol) in Wasser (80 ml) wurde 1,1-Dibrom-3,3,3-trifluoraceton (21,57 g, 79,9 mmol) zugegeben. Die Lösung wurde unter Stickstoff 30 Minuten zum Rückfluß erhitzt, dann ließ man sie auf Raumtemperatur abkühlen, bevor festes Aminoguanidinhydrogencarbonat (10,88 g, 79,9 mmol) zugegeben wurde. Die resultierende hellgelbe Lösung (pH 5) wurde 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 4 N wäßriger NaOH-Lösung (40 ml, 160 mmol) versetzt, was zum Auftreten eines Niederschlags führte. Die Mischung (pH 10) wurde unter Stickstoff weitere 39 Stunden gerührt. Der Feststoff wurde durch Filtration gesammelt, mit Wasser gewaschen und bei 60°C unter Vakuum getrocknet, um 6,96 g einer Mischung aus zwei Isomeren in einem Verhältnis von 28:72 zu ergeben. Dieses wurde durch Flashchromatographie (Kieselgel, 30% EtOAc/Isohexan) weiter gereinigt und dann aus Ethanol umkristallisiert, um 3,53 g (27%) der Titelverbindung zu ergeben: ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8,00 (2H, br. s), 9,08 (1H, s).
b) 3-Trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin
Eine gerührte Mischung aus Bromacetaldehyddiethylacetal (2,30 ml, 14,8 mmol) in konzentrierter Bromwasserstoffsäure (0,73 ml) und Wasser (0,73 ml) wurde 2 Stunden zum Rückfluß erhitzt, dann in Ethanol (25 ml) gegossen. Die Lösung wurde mit festem Natriumhydrogencarbonat bis pH 7 neutralisiert, dann filtriert. Zu dem Filtrat wurde 3-Amino-5-trifluormethyl-1,2,4-triazin (1,0079 g, 6,14 mmol) zugegeben und die Mischung 20 Stunden bei 60°C, dann 23 Stunden bei 80°C gerührt. Die Mischung wurde im Vakuum eingedampft und der Rückstand durch Flashchromatographie (Kieselgel, 35–50% EtOAc/Isohexan) gereinigt, um 0,2593 g (22%) der Titelverbindung zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 8,20 (1H, d, J = 0,8 Hz), 8,30 (1H, d, J = 0,9 Hz), 8,73 (1H, s).
c) 7-Brom-3-trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin
Zu einer Lösung von 3-Trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin (0,2211 g, 1,18 mmol) in Essigsäure (6 ml) wurde Natriumacetat (0,1470 g, 1,79 mmol), dann Brom (90,8 μl, 1,76 mmol) zugegeben. Die Lösung wurde 6 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, dann zwischen wäßrigem NaHCO₃ (100 ml) und Ethylacetat (100 ml) aufgetrennt. Die wäßrige Schicht (pH 9) wurde weiter mit Ethylacetat (100 ml) extrahiert, und die vereinten organischen Extrakte wurden getrocknet (Na₂SO₄) und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde durch Flashchromatographie (Kieselgel, 25% EtOAc/Isohexan) gereinigt, um 0,2073 g (66%) der Titelverbindung zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 8,30 (s, 1H), 8,83 (1H, s).
HERSTELLUNGSBEISPIEL B
2-(2-Fluor-5-nitrophenyl)-4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan
Eine Mischung aus 2-Brom-1-fluor-4-nitrobenzol (A. Groweiss, Org. Process Res. Dev., 2000, 4, 30–33) (50,10 g, 0,228 mol), getrocknetem Kaliumacetat (44,70 g, 0,455 mol) und Bis(pinacolato)diboron (59,16 g, 0,233 mol) in 1,4-Dioxan (539 ml) und Dimethylsulfoxid (11 ml) wurde durch 1stündiges Hindurchleiten von Stickstoff durch die Mischung entgast. Dichlor[1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocen]palladium(II)-Dichlormethan-Addukt (5,58 g, 6,83 mmol) wurde zugegeben und die Mischung 18,5 Stunden bei 90°C unter Stickstoff gerührt, wobei nach 2,5 Stunden weiteres Bis(pinacolato)diboron (7,34 g, 0,029 mol) zugegeben wurde. Nach dem Abkühlenlassen wurde die Mischung durch Glasfaserpapier filtriert und der Feststoff mit etwas Dichlormethan gewaschen. Die vereinten Filtrate wurden im Vakuum eingedampft und der Rückstand zwischen 2 M wäßrigem NaOH (800 ml) und Diethylether (800 ml) aufgetrennt. Die wäßrige Schicht wurde anschließend mit konzentrierter Salzsäure (120 ml) auf pH 6 angesäuert, wodurch ein Feststoff ausfiel. Nach dem Stehenlassen im Kühlschrank für 3 Tage wurde der Feststoff durch Filtration gesammelt, mit Wasser gewaschen und unter Vakuum getrocknet, um 54,82 g (90%) 2-(2-Fluor-5-nitrophenyl)-4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, DMSO-d₆) δ 1,33 (12H, s), 7,48 (1H, m), 8,40–8,45 (2H, m).
HERSTELLUNGSBEISPIEL C
3-(1-Fluor-1-methylethyl)-7-[4-fluor-3-(pyridin-3-yl)phenyl]imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-Dihydrochloridsalz
a) 3-Methyl-3-fluor-2-butanon
Diese Verbindung wurde aus 3-Brom-3-methyl-2-butanon wie von Fry und Mignon (Tetrahedron Lett., 1979, 3357–3360) beschrieben hergestellt, um nach der Destillation mit einer Vigreux-Kolonne eine 47%ige Ausbeute an einer 94:6-Mischung der Titelverbindung und 3-Methyl-3-buten-2-on als ein farbloses Öl zu ergeben: Sdp. 74–76°C; ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,45 (6H, d, J 21,5 Hz), 2,28 (3H, d, J 5,0 Hz).
b) 1,1-Dibrom-3-fluor-3-methyl-2-butanon
Zu einer gerührten Lösung von 3-Methyl-3-fluor-2-butanon (0,1031 g, 0,990 mmol) in wasserfreiem Dichlormethan (5 ml) unter Stickstoff wurde festes Pyridiniumtribromid (0,7035 g, 1,98 mmol) zugegeben und die Mischung 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde anschließend mit Dichlormethan (5 ml) verdünnt, mit verdünntem wäßrigem Natriumhydrogensulfit (10 ml), dann mit gesättigtem wäßrigem NaCl (10 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und unter Niedrigvakuum ohne Erwärmen eingedampft. Der Rückstand wurde durch Flashchromatographie [Kieselgel, 5% Et₂O/Petrolether (40–60°C)] gereinigt, um 0,1869 g, (72%) der Titelverbindung als ein farbloses Öl zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,65 (6H, d, J 21,5 Hz), 6,51 (1H, d, J 1,5 Hz).
c) 3-Amino-5-(1-fluor-1-methylethyl)-1,2,4-triazin
Diese Verbindung wurde in 45%iger Ausbeute als einzelnes Isomer durch ein Verfahren, ähnlich dem in Beispiel A, Schritt a, beschriebenen Verfahren, hergestellt, außer daß 1,1-Dibrom-3-fluor-3-methyl-2-butanon anstelle von 1,1-Dibrom-3,3,3-trifluoraceton verwendet wurde: ¹H-NMR (360 MHz, DMSO-d₆) δ 1,63 (6H, d, J = 8,0 Hz), 7,32 (2H, br. s), 8,73 (1H, d, J 1,0 Hz); MS (ES⁺) m/z 157 [M + H]⁺.
d) 3-(1-Fluor-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin
Eine gerührte Mischung aus Bromacetaldehyddiethylacetal (1,20 ml, 7,73 mmol) in konzentrierter Bromwasserstoffsäure (0,38 ml) und Wasser (0,38 ml) wurde 40 Minuten zum Rückfluß erhitzt, dann in Ethanol (3 ml) gegossen. Die Lösung wurde mit festem Natriumhydrogencarbonat auf pH 7 neutralisiert, dann filtriert und der Feststoff mit weiterem Ethanol (3 ml) gewaschen. Zu dem Filtrat wurde 3-Amino-5-(1-fluor-1-methylethyl)-1,2,4-triazin (1,0046 g, 6,43 mmol) zugegeben und die Mischung 17 Stunden bei 70–80°C gerührt. Die Mischung wurde im Vakuum eingedampft und der Rückstand durch Flashchromatographie (Kieselgel, 70% EtOAc/Isohexan bis 15% MeOH/EtOAc, dann 20% EtOAc/CH₂Cl₂) gereinigt, um 0,2000 g (17%) der Titelverbindung als einen hellgelben Feststoff zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,82 (6H, d, J 22,1 Hz), 7,97 (1H, d, J 1,3 Hz), 7,99 (1H, d, J 1,2 Hz), 8,69 (1H, d, J 1,0 Hz).
e) 7-Brom-3-(1-fluor-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin
Diese Verbindung wurde in 92%iger Ausbeute durch ein Verfahren, ähnlich dem in Beispiel A, Schritt c, beschriebenen Verfahren, hergestellt, außer daß 3-(1-Fluor-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin anstelle von 3-Trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin verwendet wurde: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,82 (6H, d, J 22,1 Hz), 7,99 (1H, s), 8,81 (1H, d, J 1,1 Hz).
f) 3-(1-Fluor-1-methylethyl)-7-[4-fluor-3-(pyridin-3-yl)phenyl]imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-Dihydrochloridsalz
Zu einer Lösung von 2-Brom-1-fluor-4-nitrobenzol (A. Groweiss, Org. Process Res. Dev., 2000, 4, 30–33) in Tetrahydrofuran (75 ml) und Ethanol (75 ml) wurde Zinn(II)chlorid-Dihydrat zugegeben, und man ließ die Mischung 4 Stunden bei Umgebungstemperatur rühren. Das Lösungsmittel wurde abgedampft und der Rückstand mit eiskalter 2 N Natriumhydroxidlösung (200 ml) behandelt. Die resultierende Aufschlämmung wurde 30 Minuten gerührt, dann mit Dichlormethan (3 × 200 ml) extrahiert. Die vereinte organische Phase wurde mit Wasser (200 ml) und Salzlösung (200 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO₄), filtriert und eingedampft, um 3-Brom-4-fluorphenylamin (7,92 g, 92%) als ein gelbes Öl zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 3,53 (2H, s), 6,53–6,57 (1H, m), 6,83–6,85 (1H, m), 6,90 (1H, dd, J 9, 9 Hz).
Eine Mischung aus 3-Brom-4-fluorphenylamin (7,92 g, 41,7 mmol), Diethyl(3-pyridyl)boran (6,74 g, 45,9 mmol), Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (0,96 g, 0,83 mmol) und Kaliumcarbonat (17,26 g, 125 mmol) in 1,2-Dimethoxyethan (30 ml) und Wasser (15 ml) wurde 20 Stunden auf 80°C erhitzt. Nach dem Abkühlen auf Umgebungstemperatur wurde die Reaktion zwischen Ethylacetat (500 ml) und Wasser (500 ml) aufgetrennt. Die organischen Bestandteile wurden mit Salzlösung (400 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und im Vakuum eingeengt. Die Reinigung des Rückstandes durch Flashchromatographie (Kieselgel, 0%–20% EtOAc/CH₂Cl₂) ergab 4-Fluor-3-(pyridin-3-yl)phenylamin (3,64 g, 46%) als ein farbloses Öl, das sich beim Stehen verfestigte und einen weißen Feststoff bildete: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 3,65 (2H, s), 6,65–6,72 (2H, m), 6,99 (1H, dd, J 9, 9 Hz), 7,33–7,37 (1H, m), 7,84–7,86 (1H, m), 8,58 (1H, d, J 4 Hz), 8,76 (1H, m).
Eine warme Lösung von 4-Fluor-3-(pyridin-3-yl)phenylamin (3,64 g, 19,3 mmol) in 1,4-Dioxan (10 ml) wurde mit einer Lösung von 48%iger wäßriger Bromwasserstoffsäure (100 ml) behandelt. Die resultierende Suspension wurde auf 0°C abgekühlt, bevor sie tropfenweise innerhalb von 20 Minuten mit einer Lösung von Natriumnitrit (1,53 g, 22,2 mmol) in Wasser (4 ml) behandelt wurde. Nach 2stündigem Rühren bei 0°C wurde eine gekühlte (0°C) Lösung von Kupfer(I)bromid (8,31 g, 57,9 mmol) in 48%iger wäßriger Bromwasserstoffsäure (30 ml) zu der Reaktion hinzugegeben, die 10 Minuten bei 0°C und anschließend 20 Minuten bei 50°C gerührt wurde. Die Reaktion wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt, auf eiskalten konzentrierten Ammoniak (500 ml) gegossen und das Produkt in Ethylacetat (500 ml) extrahiert. Die organischen Bestandteile wurden mit Wasser (300 ml) und Salzlösung (300 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und im Vakuum eingeengt, um ein dunkles Öl zu ergeben. Die Reinigung durch trockene Flash-Säulenchromatographie (Kieselgel, 10–30% EtOAc/Isohexan) ergab 3-(5-Brom-2-fluorphenyl)pyridin (3,1 g, 64%) als einen weißen Feststoff: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,09 (1H, dd, J 9, 1 Hz), 7,37–7,40 (1H, m), 7,46–7,51 (1H, m), 7,56–7,59 (1H, m), 7,83–7,86 (1H, m), 8,63–8,65 (1H, m), 8,77–8,79 (1H, m).
3-(5-Brom-2-fluorphenyl)pyridin (3,1 g, 12,3 mmol), Kaliumacetat (3,62 g, 36,9 mmol) und Bis(pinacolato)diboron (3,75 g, 14,8 mmol) wurden in 1,4-Dioxan (40 ml) und Dimethylsulfoxid (0,8 ml) gelöst und die Mischung mit N₂ 15 Minuten entgast. Dichlor[1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocen]palladium(II)-Dichlormethan-Addukt (300 mg, 0,37 mmol) wurde zugegeben und die Mischung 18 Stunden auf 90°C erwärmt. Die Mischung wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt und zwischen Diethylether (200 ml) und 2 N Salzsäure (50 ml) aufgetrennt. Die organischen Bestandteile wurden verworfen und die wäßrige Phase durch Zugabe von 4 N Natriumhydroxidlösung auf pH 8 eingestellt und mit Diethylether (2 × 500 ml) extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Salzlösung (50 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und auf Kieselgel voradsorbiert. Die Reinigung durch Flash-Säulenchromatographie (Kieselgel, 25% EtOAc/Isohexan) ergab 3-[2-Fluor-5-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)phenyl]pyridin (2,64 g, 72%) als ein gelbes Öl, das beim Stehen kristallisierte: ¹H- NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,35 (12H, s), 7,20 (1H, dd, J 10, 8 Hz), 7,35–7,39 (1H, m), 7,81–7,91 (3H, m), 8,61 (1H, dd, J 5, 2 Hz), 8,82 (1H, s).
Eine gerührte Mischung aus 7-Brom-3-(1-fluor-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin (0,1059 g, 0,409 mmol) und 3-[2-Fluor-5-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)phenyl]pyridin (0,1832 g, 0,612 mmol) in 1,2-Dimethoxyethan (2 ml) und 2 M wäßrigem Na₂CO₃ (0,613 ml, 1,23 mmol) wurde durch 15minütiges Hindurchleiten von Stickstoff entgast. Anschließend wurde Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (23,4 mg, 0,020 mmol) zugegeben und die Mischung 16 Stunden bei 80°C unter Stickstoff gerührt. Die Mischung wurde zwischen Ethylacetat (25 ml) und Wasser (10 ml) aufgetrennt und die wäßrige Phase mit Ethylacetat (2 × 25 ml) weiter extrahiert. Die organischen Extrakte wurden vereint, getrocknet (Na₂SO₄) und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde durch Flashchromatographie (Kieselgel, EtOAc) gereinigt, um 0,1047 g (73%) der Titelverbindung als ein gelbes Öl zu ergeben. Das Hydrochloridsalz wurde in Diethylether hergestellt: Schmp. 113–126°C; ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1,81 (6H, d, J 22,2 Hz), 7,68 (1H, dd, J 10,6, 8,6 Hz), 8,03 (1H, dd, J 7,8, 5,5 Hz), 8,36 (1H, m), 8,43 (1H, dd, J 7,4, 2,3 Hz), 8,63 (1H, dd, J 7,4, 1,2 Hz), 8,67 (1H, s), 8,91 (1H, d, J 4,3 Hz), 9,07 (1H, d, J 0,8 Hz), 9,16 (1H, s); MS (ES⁺) m/z 352 [M + H]⁺. Anal. Gefunden: C, 51,65; H, 4,48; N, 15,28%. Benötigt für C₁₉H₁₅F₂N₅·2HCl·0,07C₄H₁₀O·H₂O: C, 51,75; H, 4,44; N, 15,65%.
BEISPIEL 1
4,2'-Difluor-5'-[3-(1-fluor-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril
Eine Mischung aus 2-Brom-5-fluorbenzonitril (20 g, 100 mmol), 2-(2-Fluor-5-nitrophenyl)-4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan (von Beispiel B) (34,7 g, 130 mmol) und Kaliumfluorid (19,2 g, 330 mmol) in Tetrahydrofuran (350 ml) und Wasser (20 ml) wurde 30 Minuten mit Stickstoff entgast, dann mit Tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) (1,83 g, 2 mmol) behandelt, gefolgt von Tri-tert.-butylphosphin (4 ml einer 0,2 M Lösung in 1,4-Dioxan, 0,8 mmol). Diese Mischung wurde 30 Minuten bei Umgebungstemperatur gerührt, bevor sie 18 Stunden auf 50°C erwärmt wurde. Die resultierende dunkle Suspension wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt, mit 0,5 M Natriumhydroxid (2,5 l) verdünnt und 4 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt. Der Feststoff wurde durch Filtration gesammelt, mit Wasser gewaschen und unter Saugdruck getrocknet, um 4,2'-Difluor-5'-nitrobiphenyl-2-carbonitril als einen schwarzen Feststoff (28,1 g, > 100%) zu ergeben, der mit Dibenzylidenaceton verunreinigt war: ¹H- NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,38–7,56 (4H, m), 8,33–8,40 (2H, m).
Eine Suspension von 4,2'-Difluor-5'-nitrobiphenyl-2-carbonitril (26 g, 100 mmol) in Ethanol (180 ml) und Ethylacetat (180 ml) wurde mit Platin(IV)oxid (1,02 g, 4,5 mmol) behandelt und dann unter einer Wasserstoffatmosphäre (40 psi) 1 Stunde geschüttelt. [Die Reaktion war sehr exotherm, und die vollständige Auflösung wird durch eine Temperaturerhöhung erzielt]. Der Katalysator wurde durch Filtration durch Mikroglasfaserfilterpapier entfernt [wenn ein kristallines Produkt vorhanden ist, wird der Filterkuchen mit Dichlormethan gewaschen] und das Filtrat zur Trockene eingedampft, um 5'-Amino-4,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril als einen strohfarbenen Feststoff zu ergeben (23 g, 100%): ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 3,66 (2H, s), 6,66–6,70 (1H, m), 6,71–6,74 (1H, m), 7,00 (1H, dd, J 9, 9 Hz), 7,33–7,38 (1H, m), 7,44–7,49 (1H, m).
5'-Amino-4,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril (23 g, 100 mmol) wurde in heißem 1,4-Dioxan (20 ml) gelöst, dann mit einer gekühlten (5°C) Bromwasserstoffsäurelösung (200 ml einer 48%igen Lösung in Wasser) behandelt. Die resultierende Suspension wurde auf 2°C abgekühlt (Innentemperatur), bevor sie mit einer Lösung von Natriumnitrit (6,9 g, 100 mmol) in Wasser (14 ml) mit einer derartigen Geschwindigkeit versetzt wurde, daß die Innentemperatur 4°C nicht überstieg. Sobald die Zugabe beendet war, wurde die Reaktion bei < 4°C 1 Stunde gerührt, bevor die Reaktion in eine gekühlte (5°C) Lösung von Kupfer(I)bromid (21,5 g, 150 mmol) in 48%iger wäßriger Bromwasserstoffsäure (75 ml) gegossen wurde. Die resultierende dunkle Mischung ließ man bei Umgebungstemperatur 15 Minuten stehen, dann erwärmte man sie 40 Minuten lang auf 50°C. Nach dem Abkühlen auf Umgebungstemperatur wurde die Mischung mit Wasser (1 l) verdünnt und dann mit Ethylacetat (2 × 400 ml) extrahiert. Die organischen Bestandteile wurden vereint, dann mit 10%igem Ammoniumhydroxid (500 ml), Wasser (500 ml), Salzlösung (400 ml) gewaschen und getrocknet (MgSO₄). Die Filtration und das Eindampfen zur Trockene ergaben ein braunes Öl, das beim Stehen kristallisierte. Die Reinigung dieses Rückstandes durch trockene Flashchromatographie (Kieselgel, 2–4% EtOAc/Isohexan) ergab 5'-Brom-4,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril als einen weißen Feststoff (27,5 g, 94%): ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,11 (1H, dd, J 9, 9 Hz), 7,37–7,58 (5H, m).
Eine Mischung aus 5'-Brom-4,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril (1,26 g, 4,3 mmol), Kaliumacetat (1,26 g, 12,8 mmol) und Bis(neopentylglycolato)diboron (1,07 g, 4,7 mmol) in 1,4-Dioxan, das 2% Vol./Vol. Dimethylsulfoxid (20 ml) enthielt, wurde 10 Minuten mit Stickstoff entgast. Anschließend wurde Dichlor[1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocen]palladium(II)-Dichlormethan-Addukt (105 mg, 0,13 mmol) zugegeben und die Mischung 16 Stunden auf 90°C erwärmt. Nach dem Abkühlen auf Umgebungstemperatur wurde die Reaktionsmischung filtriert, um anorganische Bestandteile zu entfernen, und der Filterkuchen wurde mit Diethylether gewaschen. Das Filtrat wurde zur Trockene eingedampft und der Rückstand mit eiskalter 2 N Natriumhydroxidlösung (50 ml) 45 Minuten gerührt. Diese basische Mischung wurde mit Diethylether gewaschen, und die organischen Bestandteile wurden verworfen. Der pH-Wert der wäßrigen Phase wurde mit 36%iger Salzsäure auf 5 eingestellt, dann extrahierte man mit Diethylether (50 ml). Die organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO₄), filtriert und im Vakuum eingeengt, um 5'-(5,5-Dimethyl-[1,3,2]dioxaborinan-2-yl)-4,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril als ein braunes Öl zu ergeben, das beim Stehen kristallisierte (1,15 g, 82%): ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,03 (6H, s), 3,76 (4H, s), 7,20 (1H, dd, J 10, 8 Hz), 7,33–7,38 (1H, m), 7,44–7,50 (2H, m), 7,81 (1H, dd, J 8, 2 Hz), 7,85–7,90 (1H, m).
5'-(5,5-Dimethyl-[1,3,2]dioxaborinan-2-yl)-4,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril wurde in 77%iger Ausbeute mit 7-Brom-3-(1-fluor-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin gekuppelt, wobei ein Verfahren angewandt wurde, das dem in Beispiel C, Schritt f, beschriebenen Verfahren ähnlich war, um einen gelben Feststoff zu ergeben: Schmp. 156–159°C (EtOAc-Isohexan); ¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1,84 (6H, d, J 22,0 Hz), 7,36–7,46 (2H, m), 7,54 (1H, dd, J 7,8, 2,7 Hz), 7,57–7,60 (1H, m), 8,10–8,16 (2H, m), 8,30 (1H, s), 8,79 (1H, d, J 1,2 Hz); MS (ES⁺) m/z 394 [M + H]⁺. Anal. Gefunden: C, 64,07; H, 3,66; N, 17,60%. Benötigt für C₂₁H₁₄F₃N₅: C, 64,12; H, 3,59; N, 17,80%.
BEISPIEL 2
5,2'-Difluor-5'-(3-trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl)biphenyl-2-carbonitril
a) 5,2'-Difluor-5'-nitrobiphenyl-2-carbonitril
Eine Suspension von 2-Brom-4-fluorbenzonitril (2,50 g, 12,5 mmol), Kaliumfluorid (2,40 g, 41,3 mmol) und 2-(2-Fluor-5-nitrophenyl)-4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolan (4,67 g, 17,5 mmol) in Tetrahydrofuran (50 ml) wurde 30 Minuten mit Stickstoff entgast. Tris(dibenzylidenaceton)dipalladium(0) und Tri-tert.-butylphosphin (0,2 M Lösung in 1,4-Dioxan, 3,7 ml) wurde zugegeben und die Mischung 15 Minuten bei Umgebungstemperatur, dann 18 Stunden bei 50°C gerührt. Nach dem Abkühlen auf Umgebungstemperatur wurde die resultierende dunkle Suspension auf 0,5 M Natriumhydroxidlösung (500 ml) gegossen und 2 Stunden kräftig gerührt. Der dunkle Feststoff wurde durch Filtration gesammelt, mit Wasser (100 ml) und Isohexan (50 ml) gewaschen und an Luft getrocknet, wodurch die Titelverbindung als braun/schwarzer Feststoff erhalten wurde: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,25–7,33 (2H, m), 7,40–7,44 (1H, m), 7,86 (1H, dd, J 9, 6 Hz), 8,35–8,42 (2H, m).
b) 5'-Amino-5,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril
5,2'-Difluor-5'-nitrobiphenyl-2-carbonitril (3,25 g, 12,5 mmol) in Tetrahydrofuran (20 ml) und Ethanol (20 ml) wurde mit Zinn(II)chlorid-Dihydrat (9,86 g, 43,8 mmol) behandelt, und man ließ die Mischung 18 Stunden bei Umgebungstemperatur rühren. Das Lösungsmittel wurde abgedampft und der Rückstand mit 2 N Natriumhydroxidlösung (40 ml) 2 Stunden gerührt. Die resultierende Suspension wurde mit Wasser (100 ml) verdünnt und mit Dichlormethan (3 × 200 ml) extrahiert. Die vereinten organischen Bestandteile wurden mit Wasser (200 ml), Salzlösung (200 ml) gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft, um die Titelverbindung als einen braunen Feststoff zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 3,68 (2H, s), 6,67–6,76 (2H, m), 7,02 (1H, dd, J 9, 9 Hz), 7,12–7,27 (2H, m), 7,78 (1H, dd, J 9, 6 Hz).
c) 5'-Brom-5,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril
5'-Amino-5,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril (2,87 g, 12,5 mmol) wurde in heißem 1,4-Doxan (4 ml) gelöst, 48%ige wäßrige Bromwasserstoffsäure (40 ml) wurde zugegeben und die Mischung auf 0°C abgekühlt, bevor tropfenweise Natriumnitrit (0,86 g, 12,5 mmol) in Wasser (1,5 ml) innerhalb von 20 Minuten zugegeben wurde. Die resultierende Mischung wurde 1,5 Stunden bei 0°C gerührt, dann auf eine gekühlte (0°C) Lösung von Kupfer(I)bromid (5,38 g, 37,5 mmol) in 48%iger Bromwasserstoffsäure (10 ml) gegossen. Die Lösung wurde 15 Minuten bei 0°C gerührt, dann 20 Minuten auf 50°C erwärmt. Die Mischung wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt, mit Wasser (500 ml) verdünnt und mit Ethylacetat (2 × 300 ml) extrahiert. Die vereinten organischen Bestandteile wurden mit 10%iger wäßriger Ammoniaklösung (200 ml), Wasser (200 ml) und Salzlösung (200 ml) gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft, um einen schwarzen Feststoff zu ergeben. Die Reinigung durch Chromatographie [Kieselgel, 2–6% EtOAc/Isohexan (das 0,5% Methanol enthielt)] ergab die Titelverbindung als einen hellbraunen Feststoff: ¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7,13 (1H, dd, J 9, 9 Hz), 7,19–7,23 (2H, m), 7,52–7,60 (2H, m), 7,81 (1H, dd, J 8, 5 Hz).
d) 5'-(5,5-Dimethyl-[1,3,2]dioxaborinan-2-yl)-5,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril
Eine Mischung aus 5'-Brom-5,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril (2,48 g, 8,43 mmol), Kaliumacetat (2,48 g, 25,3 mmol) und Bis(neopentylglycolato)diboron (2,48 g, 11,0 mmol) in 1,4-Dioxan (40 ml), die Dimethylsulfoxid (0,8 ml) enthielt, wurde 20 Minuten mit Stickstoff entgast. Anschließend wurde Dichlor[1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocen]palladium(II)-Dichlormethan-Addukt (200 mg, 0,25 mmol) zugegeben und die Reaktion 24 Stunden auf 90°C erwärmt. Die Mischung wurde auf Umgebungstemperatur abgekühlt, dann zwischen 2 N Natriumhydroxid (75 ml) und Diethylether (100 ml) aufgetrennt und die organischen Bestandteile verworfen. Der wäßrige Extrakt wurde mit 36%iger Salzsäure angesäuert (pH 5) und dann mit Diethylether (2 × 75 ml) extrahiert. Der organische Extrakt wurde mit Wasser (50 ml) und Salzlösung (75 ml) gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft, um 5'-(5,5-Dimethyl[1,3,2]dioxaborinan-2-yl)-5,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril als ein braunes Öl zu ergeben, das beim Stehen kristallisierte: ¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1,03 (6H, s), 3,77 (4H, s), 7,15–7,24 (3H, m), 7,77 (1H, dd, J 9, 6 Hz), 7,83 (1H, dd, J 8, 2 Hz), 7,87–7,91 (1H, m).
7-Brom-3-trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin wurde mit 5'-(5,5-Dimethyl[1,3,2]dioxaborinan-2-yl)-5,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril wie in Beispiel C beschrieben gekuppelt, um 68,7 mg (46%) 5,2'-Difluor-5'-(3-trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl)biphenyl-2-carbonitril als einen gelben Feststoff zu ergeben: Schmp. 200–201°C; ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,25–7,34 (2H, m), 7,44 (1H, t, J 8,9 Hz), 7,87 (1H, dd, J 5,4, 8,6 Hz), 8,18–8,26 (2H, m), 8,63 (1H, s), 8,82 (1H, s); MS (ES⁺) m/z 401. Anal. Gefunden: C, 55,98; H, 2,13; N, 17,49%. Benötigt für C₁₉H₈F₅N₅·0,3H₂O: C, 56,11; H, 2,13; N, 17,22%.
BEISPIEL 3
4,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril
a) 1,1-Dibrom-3-hydroxy-3-methylbutan-2-on
Zu einer gerührten Lösung von 3-Methyl-3-hydroxy-2-butanon (40 g, 0,392 mol) in wasserfreiem Dichlormethan (2,2 l) unter Stickstoff wurde festes Pyridiniumtribromid (250,4 g, 0,784 mol) portionsweise zugegeben und die Mischung bei Raumtemperatur 14 Stunden gerührt. Anschließend wurde die Mischung mit verdünntem wäßrigem Natriumhydrogensulfit (500 ml), dann mit wäßrigem NaCl (500 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde durch Flashchromatographie (Kieselgel, CH₂Cl₂) gereinigt, um 31,4 g (31%) der Titelverbindung als ein farbloses Öl zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,54 (6H, s), 2,45 (1H, br. s), 6,62 (1H, s).
b) 2-(3-Amino-[1,2,4]triazin-5-yl)propan-2-ol und 2-(3-Amino[1,2,4]triazin-6-yl)propan-2-ol
Zu einer gerührten Lösung von Natriumacetat-Trihydrat (32,9 g, 0,342 mol) in Wasser (90 ml) wurde 1,1-Dibrom-3-hydroxy-3-methylbutan-2-on (29,6 g, 0,114 mol) zugegeben. Die Lösung wurde 30 Minuten unter Stickstoff zum Rückfluß erhitzt, dann ließ man sie auf Raumtemperatur abkühlen, bevor feste Aminoguanidinhydrogencarbonat (15,54 g, 0,114 mol) zugegeben wurde. Die resultierende hellgelbe Lösung (pH 5) wurde 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt, dann wurde 4 N wäßrige NaOH-Lösung (56,9 ml, 0,228 mol) zugegeben und die Mischung (pH 10) unter Stickstoff weitere 14 Stunden gerührt. Die Lösung wurde über einen Zeitraum von 24 Stunden kontinuierlich mit warmem Dichlormethan extrahiert. Anschließend wurde das Lösungsmittel abgedampft, wobei ein Rückstand zurückblieb, der mit Diethylether behandelt wurde, um einen Feststoff zu ergeben. Der Feststoff wurde durch Filtration gesammelt und bei 60°C unter Vakuum getrocknet, um 8,17 g (47%) einer Mischung aus zwei Isomeren in einem 60:40-Verhältnis mit dem benötigten 2-(3-Amino[1,2,4]triazin-5-yl)propan-2-ol als Hauptprodukt zu ergeben: NMR (360 MHz, DMSO-d₆ 1,38 (Haupt) und 1,47 (Neben) (6H, s), 5,30 (Haupt) und 5,43 (Neben) (1H, br. s), 7,01 (Haupt) und 7,06 (Neben) (2H, br. s), 8,43 (Haupt) und 8,80 (Neben) (1H, s); MS (ES⁺) m/z 155 [M + H]⁺.
c) 2-(Imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-yl)propan-2-ol
Eine gerührte Mischung aus Bromacetaldehyddiethylacetal (16,5 ml, 0,106 mol) in konzentrierter Bromwasserstoffsäure (4,13 ml) und Wasser (4,13 ml) wurde 40 Minuten zum Rückfluß erhitzt, dann in Ethanol (175 ml) gegossen. Die Lösung wurde mit festem Natriumhydrogencarbonat bis zu einem pH-Wert von 7 neutralisiert, dann filtriert und der Feststoff mit weiterem Ethanol (30 ml) gewaschen. Zu dem Filtrat wurde eine 60:40-Mischung aus 2-(3-Amino-[1,2,4]triazin-5-yl)propan-2-ol und 2-(3-Amino[1,2,4]triazin-6-yl)propan-2-ol (8,17 g, 0,053 mol) zugegeben und die Mischung 6 Stunden lang bei Rückflußtemperatur gerührt. Die Mischung wurde im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit heißem Dichlormethan behandelt und filtriert. Der gesammelte Feststoff wurde mit heißem Aceton behandelt und erneut durch Filtration gesammelt, um einen weißen Feststoff (14 g) zu ergeben. Der Feststoff wurde in Wasser (30 ml) gelöst und über einen Zeitraum von 24 Stunden kontinuierlich mit heißem Dichlormethan extrahiert. Die organische Schicht wurde abgetrennt und unter Vakuum eingeengt, um ein dickes gelbes Öl (3 g) zu ergeben, bei dem das benötigte Isomer mit einem Verhältnis von 4:1 überwog. Das benötigte Produkt wurde durch Flashchromatographie (Kieselgel, 2% MeOH/CH₂Cl₂) in reiner Form erhalten, wobei 2,12 g (23%) der Titelverbindung als hellgelber Feststoff erhalten wurden: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,69 (6H, s), 3,69 (1H, br. s), 7,93 (2H, s), 8,70 (1H, s).
d) 2-(7-Bromimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-yl)propan-2-ol
Diese Verbindung wurde in 75%iger Ausbeute durch ein Verfahren, ähnlich dem in Beispiel A, Schritt c, beschriebenen Verfahren, hergestellt, außer daß 2-(Imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-yl)propan-2-ol anstelle von 3-Trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin verwendet wurde: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,70 (6H, s), 3,12 (1H, br. s), 7,95 (1H, s), 8,80 (1H, s).
e) 4,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril
5'-(5,5-Dimethyl[1,3,2]dioxaborinan-2-yl)-4,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril (siehe Beispiel 1) wurde in 54%iger Ausbeute mit 2-(7-Bromimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-yl)propan-2-ol gekuppelt, wobei ein Verfahren verwendet wurde, ähnlich dem in Beispiel C, Schritt f, beschriebenen Verfahren, um einen gelben Feststoff zu ergeben: Schmp. 215°C; ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,71 (6H, s), 3,27 (1H, br. s), 7,35–7,59 (4H, m), 8,09–8,15 (2H, m), 8,26 (1H, s), 8,78 (1H, s); MS (ES⁺) m/z 392 [M + H]⁺. Anal. Gefunden: C, 64,38; H, 3,88; N, 17,66%. Benötigt für C₂₁H₁₅F₂N₅O: C, 64,45; H, 3,86; N, 17,89%.
BEISPIEL 4
4-Fluor-3'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril
2-Brom-5-fluorbenzonitril und 3-Nitrophenylboronsäure wurden durch Nacharbeiten des in Beispiel 1 beschriebenen Verfahrens gekuppelt, um 4-Fluor-3'- nitrobiphenyl-2-carbonitril als einen schwarzen Feststoff zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,39–7,48 (2H, m), 7,52–7,64 (1H, m), 7,71 (1H, ddd, J 8, 8 Hz), 7,89 (1H, d, J 8 Hz), 8,33–8,37 (2H, m).
4-Fluor-3'-nitrobiphenyl-2-carbonitril wurde durch Nacharbeiten des Verfahrens in Beispiel 1 reduziert, um 3'-Amino-4-fluorbiphenyl-2-carbonitril als einen braunen Feststoff zu ergeben: ¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6,76 (1H, dd, J 8, 2, 2 Hz), 6,80 (1H, dd, J 2, 2 Hz), 6,87 (1H, ddd, J 8, 1, 1 Hz), 7,27 (1H, dd, J 8, 8 Hz), 7,35 (1H, ddd, J 8, 8, 3 Hz), 7,41–7,51 (2H, m).
3'-Amino-4-fluorbiphenyl-2-carbonitril wurde durch Nacharbeiten des Verfahrens in Beispiel 1 bromdesaminiert, um 3'-Brom-4-fluorbiphenyl-2-carbonitril als einen weißen Feststoff zu ergeben: ¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7,35–7,40 (2H, m), 7,46–7,50 (3H, m), 7,59 (1H, dd, J 2, 1 Hz), 7,64 (1H, dd, J 2, 2 Hz).
3'-Brom-4-fluorbiphenyl-2-carbonitril wurde durch Nacharbeiten des Verfahrens in Beispiel 1 in 4-Fluor-3'-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)biphenyl-2-carbonitril umgewandelt, um ein braunes Öl zu ergeben, das beim Stehen kristallisierte: ¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1,36 (12H, s), 7,32–7,37 (1H, m), 7,43–7,54 (3H, m), 7,63–7,68 (1H, m), 7,88–7,90 (2H, m).
4-Fluor-3'-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)biphenyl-2-carbonitril wurde in 32%iger Ausbeute mit 2-(7-Bromimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-yl)propan-2-ol gekuppelt, wobei ein Verfahren, ähnlich dem in Beispiel C, Schritt f, beschriebenen Verfahren verwendet wurde, um einen gelben Feststoff zu ergeben: Schmp. 175°C; ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,71 (6H, s), 3,25 (1H, br. s), 7,41–7,67 (5H, m), 8,01 (1H, m), 8,24 (1H, s), 8,31 (1H, s), 8,78 (1H, s); MS (ES⁺) m/z 374 [M + H]⁺. Anal. Gefunden: C, 67,38; H, 4,27; N, 18,51%. Benötigt für C₂₁H₁₆FN₅O: C, 67,55; H, 4,32; N, 18,76%.
BEISPIEL 5
6,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril
Eine Mischung aus 2,3-Difluorbenzonitril (19,0 g, 137 mmol) und Ethanol (200 ml), die zuvor mit Ammoniakgas gesättigt worden war, wurde in einem Autoklaven 8 Stunden lang (Enddruck 200 psi) auf 140°C erhitzt. Man ließ die Mischung auf Umgebungstemperatur abkühlen und dampfte sie zur Trockene ein. Der Rückstand wurde in Wasser (400 ml) gelöst und mit Diethylether (2 × 300 ml) extrahiert. Die vereinten organischen Bestandteile wurden mit Wasser (300 ml) und Salzlösung (250 ml) getrocknet, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingedampft. Die Behandlung mit Isohexan (150 ml) ergab 2-Amino-3-fluorbenzonitril (9,8 g, 50%) als einen nicht ganz weißen Feststoff: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 4,47 (2H, s), 6,65–6,71 (1H, m), 7,14–7,20 (2H, m).
2-Amino-3-fluorbenzonitril (9,8 g, 71,9 mmol) wurde wie in Beispiel 1 beschrieben bromdesaminiert, um 2-Brom-3-fluorbenzonitril als einen hellbraunen Feststoff zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,62–7,68 (1H, m), 7,74–7,85 (1H, ddd, J 9, 9, 1 Hz), 7,74–7,85 (1H, ddd, J 8, 1, 1 Hz).
2-Brom-3-fluorbenzonitril (2,50 g, 12,5 mmol) wurde an 2-(2-Fluor-5-nitrophenyl)-4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan wie in Beispiel 1 beschrieben gekuppelt, um 6,2'-Difluor-5'-nitrobiphenyl-2-carbonitril als einen schwarzen Feststoff zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,40–7,44 (1H, m), 7,47–7,52 (1H, m), 7,59–7,67 (2H, m), 8,37–8,44 (2H, m).
6,2'-Difluor-5-nitrobiphenyl-2-carbonitril (3,25 g, 12,5 mmol) wurde durch Anwendung des in Beispiel 1 beschriebenen Verfahrens reduziert, um 5'-Amino-6,2'-Difluorbiphenyl-2-carbonitril als ein braunes Öl zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 3,74 (2H, s), 6,68 (1H, m), 6,73–6,77 (1H, m), 7,02 (1H, dd, J 9, 9 Hz), 7,37–7,49 (2H, m), 7,56–7,65 (1H, m).
5'-Amino-6,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril wurde wie in Beispiel 1 beschrieben desaminiert, um 5'-Brom-6,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril als einen hellbraunen Feststoff zu ergeben: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 7,13 (1H, dd, J 9, 9 Hz), 7,37–7,49 (2H, ddd, J 9, 9, 1 Hz), 7,57–7,62 (4H, m).
5'-Brom-6,2'-difluorbiphenyl-2-carbonitril wurde durch Anwendung des in Beispiel 1 beschriebenen Verfahrens in 6,2'-Difluor-5'-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)biphenyl-2-carbonitril umgewandelt. Dies ergab ein braunes Öl, das beim Stehen kristallisierte: ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,34 (12H, s), 7,21 (1H, dd, J 8, 2 Hz), 7,38–7,51 (2H, m), 7,57–7,59 (1H, m), 7,85 (1H, dd, J 8, 2 Hz), 7,90–7,94 (1H, m).
6,2'-Difluor-5'-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)biphenyl-2-carbonitril wurde in 32%iger Ausbeute mit 2-(7-Bromimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-yl)propan-2-ol gekuppelt, wobei ein Verfahren, ähnlich dem in Beispiel C, Schritt f, beschriebenen Verfahren, angewandt wurde, um einen gelben Feststoff zu ergeben: Schmp. 206°C; ¹H-NMR (360 MHz, CDCl₃) δ 1,71 (6H, s), 3,28 (1H, br. s), 7,37–7,66 (4H, m), 8,15 (2H, m), 8,26 (1H, s), 8,78 (1H, s); MS (ES⁺) m/z 392 [M + H]⁺. Anal. Gefunden: C, 64,66; H, 3,93; N, 17,71%. Benötigt für C₂₁H₁₅F₂N₅O: C, 64,45; H, 3,86; N, 17,89%.

Claims

Eine Verbindung der Formel I oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon:
wobei X¹ Wasserstoff oder Fluor bedeutet, R¹¹ Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Halogen(C_1-6)alkyl, Dihalogen(C_1-6)alkyl, Hydroxy(C_1-6)alkyl, Heteroaryl, Halogen, Trifluormethyl, C_1-6-Alkoxy, Formyl, C_2-6-Alkylcarbonyl, C_2-6-Alkoxycarbonyl oder -CR⁴=NOR⁵ bedeutet, R⁴ Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl bedeutet, R⁵ Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Hydroxy(C_1-6)alkyl oder Di(C_1-6)alkylamino(C_1-6)alkyl bedeutet und R⁶ Fluor bedeutet.
Eine wie in Anspruch 1 beanspruchte Verbindung, wobei das Fluoratom R⁶ an der 6-Position (relativ zur Cyanogruppe an Position 2) an den Phenylring gebunden ist.
Eine wie in Anspruch 1 oder Anspruch 2 beanspruchte Verbindung, wobei X¹ Fluor bedeutet.
Eine wie in irgendeinem der vorhergehenden Ansprüche beanspruchte Verbindung, wobei R¹¹ 2-Hydroxyprop-2-yl bedeutet.
Eine Verbindung, ausgewählt aus: 4,2'-Difluor-5'-[3-(1-fluor-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril, 5,2'-Difluor-5'-(3-trifluormethylimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl)biphenyl-2-carbonitril, 4,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril, 4-Fluor-3'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril, 6,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril, und pharmazeutisch annehmbaren Salzen davon.
Eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine wie in Anspruch 1 definierte Verbindung der Formel I oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon in Verbindung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
Die Verwendung einer wie in Anspruch 1 definierten Verbindung der Formel I oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung und/oder Prävention von nachteiligen neurologischen Zuständen.
6,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.
Eine pharmazeutische Zusammensetzung, die 6,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon in Verbindung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger enthält.
Die Verwendung von 6,2'-Difluor-5'-[3-(1-hydroxy-1-methylethyl)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-yl]biphenyl-2-carbonitril oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung und/oder Prävention von Angst.