-
Fachgebiet der Erfindung
-
Die
vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer
optisch aktiven Aminosäure
und dgl.
-
Beschreibung des Stands
der Technik
-
Eine
optisch aktive Aminosäure
ist als Verbindung bekannt, die als Zwischenprodukt für ein Arzneimittel,
wie ein Mittel gegen Asthma, ein Mittel gegen Depressionen und ein
antithrombotisches Mittel, und als Futter- oder Nahrungszusatz und
dgl. geeignet ist.
-
Von
einem biochemischen Verfahren zur Herstellung einer optisch aktiven
Aminosäure
wird im Allgemeinen angenommen, dass es vorteilhaft in Bezug auf
die Einfachheit eines Verfahrens, die Ausbeute eines Produkts, die
Preise der Ausgangssubstanzen und die optische Reinheit einer gewünschten
Substanz bei Vergleichen mit einem chemischen Syntheseverfahren
ist. Ein solches biochemisches Verfahren kann zum Beispiel ein Verfahren
sein, bei dem eines der optischen Isomere einer Aminosäure als
racemisches Gemisch zersetzt wird, ein Verfahren, bei dem eine Aminoacylform
einer Aminosäure
als racemisches Gemisch auf optisch selektive Weise deacyliert wird,
ein Verfahren, bei dem eine Aminosäure als L-Form aus einer Ketosäure in Gegenwart einer Amino-Donorverbindung
hergestellt wird, und ein Verfahren unter Verwendung einer Fermentation
eines Mikroorganismus.
-
US 5316943 stellt ein enzymatisches
oder mikrobielles Bioumwandlungsverfahren bereit, das zur Herstellung
von L-Aminosäuren
aus dem entsprechenden racemischen Gemisch oder aus reinen D-Aminosäurequellen
in der Lage ist.
-
EP 310949 A bezieht
sich auf ein Verfahren zur Herstellung von D-Alanin, gekennzeichnet
durch Kultivieren eines Mikroorganismus, der zur Gattung Brevibacterium
gehört
und die Fähigkeit,
D-Alanin herzustellen, und eine Beständigkeit gegen D-Cycloserin
aufweist, wobei D-Alanin in einem Kulturmedium hergestellt und angesammelt
wird und D-Alanin aus der Kulturlösung erhalten wird.
-
Zusammenfassung der Erfindung
-
Eine
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist, ein Verfahren zur effizienten
Herstellung einer optisch aktiven Aminosäure bereitzustellen.
-
Wir
haben jetzt ein biologisches Material gefunden, das die Fähigkeit
hat, eines der optischen Isomere einer bestimmten Aminosäure in das
andere der optischen Isomere umzuwandeln, wobei die Isomerie auf
einem asymmetrischen Kohlenstoffatom beruht, an das sowohl eine
Aminogruppe als auch eine Carboxylgruppe gebunden ist und die vorstehend
beschriebene Fähigkeit
nicht ernsthaft durch einen Aminosäuretransferaseinhibitor β-Chlor-D-alanin, β-Chlor-L-alanin oder
Gabaculin inhibiert wird, und gelangten schließlich zur vorliegenden Erfindung
durch Verwenden des biologischen Materials für die Herstellung einer optisch
aktiven Aminosäure
der vorstehend beschriebenen Aminosäure.
-
Genauer
stellt die vorliegende Erfindung bereit:
- 1.
Ein Verfahren zur Herstellung aus einem der optischen Isomere (optisches
Isomer I) einer Aminosäure, die
durch Formel (1) dargestellt wird: R-CH(NH2)-COOH (1)(worin
R eine gegebenenfalls substituierte C1-C12-Alkylgruppe, eine gegebenenfalls
substituierte C4-C8-Cycloalkylgruppe oder eine gegebenenfalls substituierte
C6-C14-Arylgruppe
ist) (nachstehend wird sie manchmal als Aminosäure (1) bezeichnet) das andere
der optischen Isomere (optisches Isomer II), wobei das Verfahren
Umsetzen eines biologischen Materials, das die Fähigkeit hat, das eine der optischen Isomere
(optisches Isomer I) in das andere der optischen Isomere (optisches
Isomer II) umzuwandeln, wobei die Isomerie auf einem asymmetrischen
Kohlenstoffatom, an das sowohl eine Aminogruppe als auch eine Carboxylgruppe
gebunden ist, beruht, wobei die Fähigkeit nicht durch einen Aminosäuretransferaseinhibitor β-Chlor-D-alanin, β-Chlor-L-alanin
oder Gabaculin inhibiert wird, mit einem der optischen Isomere (optisches
Isomer I) und die Umwandlungsfähigkeit
in Gegenwart eines Inhibitors etwa 70 % oder mehr von derjenigen
in Abwesenheit des Inhibitors ist, wenn angenommen wird, dass die
Fähigkeit
in Abwesenheit des Inhibitors 100 % ist. (Nachstehend wird es manchmal
als Verfahren der vorliegenden Erfindung bezeichnet.)
- 2. Das Verfahren nach vorstehendem 1, wobei das eine der optischen
Isomere (optisches Isomer I) eine D-Form ist und das andere der
optischen Isomere (optisches Isomer II) eine L-Form ist.
- 3. Das Verfahren nach vorstehendem 1, wobei das eine der optischen
Isomere (optisches Isomer I) mit dem das biologische Material umgesetzt
wird, in einem Gemisch mit dem anderen der optischen Isomere (optisches
Isomer II) vorliegt.
- 4. Das Verfahren nach vorstehendem 1, wobei das biologische
Material eine ganze Zelle ist.
- 5. Das Verfahren nach vorstehendem 1, wobei das biologische
Material eines ist, das von einem Mikroorganismus stammt, der zur
Gattung Arthrobacter, Flavimonas, Klebsiella, Norcadia, Pseudomonas,
Rhizobium, Saccharopolyspora oder Streptomyces gehört.
- 6. Das Verfahren nach vorstehendem 1, wobei das biologische
Material eines ist, das von einem Mikroorganismus stammt, der Arthobacter
pascens, Flavimonas oryzihabitans, Klebsiella planticola, Nocardia
diaphanozonaria, Pseudomonas chlororaphis, Pseudomonas oleovorans,
Pseudomonas oxalaticus, Pseudomonas taetrolens, Rhizobium meliloti,
Saccharopolyspora hirsuta oder Streptomyces roseus zugeordnet ist.
- 7. Das Verfahren nach vorstehendem 1, wobei das biologische
Material eines ist, das vom Arthrobacter pascens-Stamm IFO12139,
Flavimonas oryzihabitans-Stamm JCM2952, Klebsiella planticola-Stamm JCM7251,
Nocardia diaphanozonaria-Stamm JCM 3208, Pseudomonas chlororaphis-Stamm
IFO3521, Pseudomonas oleovorans-Stamm IFO13583, Pseudomonas oxalaticus-Stamm
IFO13593, Pseudomonas taetrolens-Stamm IFO3460, Rhizobium meliloti-Stamm
IFO14782, Saccharopolyspora hirsuta subsp. kobensis-Stamm JCM9109
oder Streptomyces roseus-Stamm IFO12818 stammt.
- 8. Ein Verfahren zum Verbessern der optischen Reinheit einer
Aminosäure,
die durch die Formel (1) dargestellt wird: R-CH(NH2)-COOH (1)(worin R
eine gegebenenfalls substituierte C1-C12-Alkylgruppe, eine gegebenenfalls
substituierte C4-C8-Cycloalkylgruppe oder eine gegebenenfalls substituierte
C6-C14-Arylgruppe
ist), wobei das Verfahren Umsetzen eines biologisches Material,
das die Fähigkeit
hat, eines der optischen Isomere (optisches Isomer I) der Aminosäure in das
andere der optischen Isomere (optisches Isomer II) umzuwandeln,
wobei die Isomerie auf einem asymmetrischen Kohlenstoffatom, an
das sowohl eine Aminogruppe als auch eine Carboxylgruppe gebunden
ist, beruht, und wobei die Fähigkeit
nicht durch einen Aminosäuretransferaseinhibitor β-Chlor-D-alanin, β-Chlor-L-alanin
oder Gabaculin inhibiert wird, mit der Aminosäure, die durch die Formel (1)
dargestellt wird, umfasst, und wobei die Umwandlungsfähigkeit
in Gegenwart eines Inhibitors etwa 70 % oder mehr derjenigen in Abwesenheit
des Inhibitors ist, wenn angenommen wird, dass die Fähigkeit
in Abwesenheit des Inhibitors 100 % ist.
- 9. Das Verfahren nach vorstehendem 8, wobei das eine der optischen
Isomere (optisches Isomer I) eine D-Form ist und das andere der
optischen Isomere (optisches Isomer II) eine L-Form ist.
-
Detaillierte Beschreibung
der Erfindung
-
Die
Erfindung wird nachstehend im Einzelnen beschrieben.
-
Ein
biologisches Material, das in der vorliegenden Erfindung verwendet
werden kann, ist ein biologisches Material, das die Fähigkeit
hat, eines der optischen Isomere (optisches Isomer I) der Aminosäure (1)
in das andere der optischen Isomere (optisches Isomer II) umzuwandeln,
wobei die Isomerie auf einem asymmetrischen Kohlenstoffatom beruht,
an das sowohl eine Aminogruppe als auch eine Carboxylgruppe gebunden ist,
und die Fähigkeit
nicht durch einen Aminosäuretransferaseinhibitor β-Chlor-D-alanin, β-Chlor-L-alanin
oder Gabaculin inhibiert wird (nachstehend manchmal als erfindungsgemäßes biologisches
Material bezeichnet).
-
Die
Fähigkeit,
dass nicht ernsthaft durch einen hier beschriebenen Aminosäuretransferaseinhibitor β-Chlor-D-alanin, β-Chlor-L-alanin
oder Gabaculin inhibiert wird, bedeutet, dass die Umwandlungsfähigkeit
in Gegenwart des Inhibitors etwa 70 % oder mehr derjenigen in Abwesenheit
des Inhibitors ist, wenn angenommen wird, dass die Fähigkeit
in Abwesenheit des Inhibitors 100 % ist. Außerdem ist bevorzugt, dass
die Fähigkeit
nicht wesentlich durch einen hier beschriebenen Aminosäuretransferaseinhibitor β-Chlor-D-alanin, β-Chlor-L-alanin
oder Gabaculin inhibiert wird, was bedeutet, dass die Umwandlungsfähigkeit
in Gegenwart eines Inhibitors etwa 90 % oder mehr von der in Abwesenheit
des Inhibitors beträgt,
wenn angenommen wird, dass die Fähigkeit
in Abwesenheit des Inhibitors 100 % ist.
-
Während eine
vorstehend beschriebene Umwandlungsreaktion die Bildung eines Produkts
(optisches Isomer II) einbezieht, das dem Verbrauch eines Substrats
(optisches Isomer I) entspricht, bis ein Gleichgewicht erreicht
ist und folglich die Reaktionsgeschwindigkeit sich mit der Zeit
verringert, nimmt das Produkt mit der Zeit in einem frühen Stadium
der Reaktion, in dem das Substrat in großem Überschuss vorhanden ist, linear zu,
was eine Reaktionsgeschwindigkeit ergibt, die für den relevanten Zustand spezifisch
ist. Demgemäß wird ein
experimenteller Wert, der in einem frühen Stadium der Reaktion beobachtet
wird, geeigneterweise zum Beurteilen der vorstehend beschriebenen
Fähigkeit
der Umwandlung verwendet, aber ein Wert, der im Stadium des Gleichgewichts
beobachtet wird, kann ebenfalls wegen der Tatsache verwendet werden,
dass in einem frühen
Stadium der Umsetzung eine bestimmte Kombination der Art oder der
Menge eines Substrats oder der Form oder der Menge des biologischen
Materials der vorliegenden Erfindung Schwierigkeiten bei der Stabilisierung
der Umsetzung bewirken können
oder der beobachtete Wert durch geringen Verbrauch des Substrats oder
geringe Bildung des Produkts schwankt. Selbstverständlich werden
die Werte in beiden Stadien zusammen zum Bilden einer umfassenden
Entscheidung in Erwägung
gezogen.
-
β-Chloralanin
ist als Inhibitor der Aspartataminotransferase (E.C. 2.6.1.1) und
D-Alaninaminotransferase
(E.C. 2.6.1.21) bekannt und Gabaculin ist als Inhibitor von D-Alaninaminotransferase
(E.C. 2.6.1.21), β-Alaninpyruvataminotransferase
(E.C. 2.6.1.18) und 4-Aminobutyrataminotransferase (E.C. 2.6.1.19)
bekannt.
-
Das
erfindungsgemäße biologische
Material kann in verschiedenen Formen, wie einer Mikroorganismenkultur
und einer Mikroorganismenzelle, die von einer Mikroorganismenkultur
durch Zentrifugation abgetrennt wurde, sowie jenen, die daraus durch
bestimmte Behandlungen erhalten werden, verwendet werden. Jene,
die durch hier bezeichnete bestimmte Behandlungen erhalten werden,
können
zum Beispiel gefriergetrocknete Zellen, mit Aceton getrocknete Zellen,
gemahlene Zellen, autolysierte Zellen, mit Ultraschall behandelte
Zellen, mit Alkali behandelte Zellen, mit organischem Lösungsmittel
behandelte Zellen, zellfreier Extrakt, rohe Enzyme, ein gereinigtes
Enzym und dgl., sowie ein immobilisiertes Material, daraus erhalten
durch Immobilisieren eines der vorstehend aufgeführten Materialien gemäß einem
bekannten Verfahren, wie einem Träger-Aufbringungsverfahren unter Verwendung
einer Adsorption an einen anorganischen Träger, wie Kieselgel oder einem
keramischen Material, einem Polysaccharidderivat, wie DEAE-Cellulose, einem
synthetisierten Polymer, wie Amberite IRA-935 (hergestellt von Rohm
und Haas) und ein Einschlußverfahren
unter Verwendung eines Einschlusses in eine Netzwerkmatrix eines
Polymers, wie einem Polyacrylamid, einem Schwefel enthaltenden Polysaccharidgel
(z.B. Carrageenangel), einem Alginsäuregel, einem Agargel und dgl.
sein.
-
Ein
bevorzugtes Beispiel des biologischen Materials der vorliegenden
Erfindung kann ein Material sein, das von einem Mikroorganismus
stammt, der zur Gattung Arthrobacter, Flavimonas, Klebsiella, Norcadia, Pseudomonas,
Rhizobium, Saccharopolyspora und Streptomyces gehört, vorzugsweise
ein Material, das von einem Mikroorganismus stammt, der Arthrobacter
pascens, Flavimonas oryzihabitans, Klebsiella planticola, Nocardia
diaphanozonaria, Pseudomonas chlororaphis, Pseudomonas oleovorans,
Pseudomonas oxalaticus, Pseudomonas taetrolens, Rhizobium meliloti,
Saccharopolyspora hirsuta und Streptomyces roseus zugeordnet ist,
und typischerweise ein Material, das vom Athrobacter pascens-Stamm
IFO12139, Flavimonas oryzihabitans-Stamm JCM2952, Klebsiella planticola-Stamm
JCM7251, Nocardia diaphanozonaria-Stamm JCM3208, Pseudomonas chlororaphis-Stamm
IFO3521, Pseudomonas oleovorans-Stamm IFO13583, Pseudomonas oxalaticus-Stamm
IFO13593, Pseudomonas taetrolens-Stamm IFO3460, Rhizobium meliloti-Stamm IFO14782, Saccharopolyspora
hirsuta subsp. kobensis-Stamm JCM9109 und Streptomyces roseus-Stamm IFO12818
stammt.
-
Wenn
das biologische Material der vorliegenden Erfindung ein Mikroorganismus
ist, kann es ein wilder Stamm eines Mikroorganismus oder eine von
einem solchen wilden Stamm durch eine Behandlung mit einem Reagens
oder UV abgeleitete Variante sein, mit der Maßgabe, dass sie die vorstehend
beschriebene Fähigkeit aufweist.
-
Ein
solcher Mikroorganismus (nachstehend manchmal als erfindungsgemäßer Mikroorganismus
bezeichnet) kann durch die folgende Kultivierung hergestellt werden.
-
Die
Zusammensetzung des Mediums zum Kultivieren des erfindungsgemäßen Mikroorganismus
ist nicht besonders beschränkt,
und ein üblicherweise
zum Kultivieren eines Mikroorganismus verwendetes Medium, das eine
Kohlenstoffquelle und eine Stickstoffquelle, organische und anorganische
Salze, wie geeignet, enthält,
kann verwendet werden. Eine Kohlenstoffquelle kann zum Beispiel
ein Saccharid, wie Glucose, Fructose, Saccharose, Dextrin und dgl.,
ein Zuckeralkohol, wie Glycerin, Sorbit und dgl., eine organische
Säure, wie
Fumarsäure,
Citronensäure,
Brenztraubensäure
und dgl., sein. Die Menge der vorstehend aufgeführten Kohlenstoffquelle, die
zu einem Medium zuzugeben ist, beträgt üblicherweise etwa 0,1 % (Gew./Vol.)
bis etwa 10 % (Gew./Vol.). Eine Stickstoffquelle kann zum Beispiel
ein Ammoniumsalz einer anorganischen Säure, wie Ammoniumchlorid, Ammoniumsulfat,
Ammoniumphosphat und dgl., ein Ammoniumsalz einer organischen Säure, wie Ammoniumfumarat,
Ammoniumcitrat und dgl., eine natürliche organische Stickstoffquelle,
wie Fleischextrakt, Hefeextrakt, Malzextrakt, Sojabohnenpulver,
Maisquellwasser, Baumwollsaatöl,
getrocknete Hefe, Caseinhydrolysat und dgl., sowie Aminosäuren sein.
Unter den vorstehend aufgeführten
können
natürliche
organische Stickstoffquellen und Aminosäuren am häufigsten auch als Kohlenstoff-
und Stickstoffquellen verwendet werden. Die Menge der Stickstoffquelle,
die zuzugeben ist, beträgt üblicherweise
etwa 0,1 % (Gew./Vol.) bis etwa 10 % (Gew./Vol.). Ein anorganisches
Salz kann zum Beispiel ein Phosphat, wie Kaliumphosphat, Dikaliumphosphat,
Natriumphosphat, Dinatriumphosphat und dgl., ein Chlorid, wie Kaliumchlorid, Natriumchlorid,
Kobaltchlorid-Hexahydrat und dgl., ein Sulfat, wie Magnesiumsulfat,
Eisen(II)-sulfat-Heptahydrat, Zinksulfat-Heptahydrat, Mangansulfat-Trihydrat
und dgl., sein und die zuzugebende Menge beträgt üblicherweise etwa 0,0001 %
(Gew./Vol.) bis etwa 1 % (Gew./Vol.)
-
Der
Mikroorganismus der vorliegenden Erfindung kann gemäß einem
herkömmlichen
Verfahren kultiviert werden, das zum Kultivieren eines Mikroorganismus
verwendet wird, einschließlich
einer Festphasenkultivierung, einer Flüssigphasenkultivierung (eine
Röhrchenschüttelkultivierung,
eine Umkehrschüttelkultivierung,
eine Rotationsschüttelkultivierung,
eine Gefäßfermentation
(Gefäßfermenterkultivierung,
Behälterkultivierung)
und dgl. sein. Insbesondere wenn ein Gefäßfermenter verwendet wird,
sollte aseptische Luft in den Gefäßfermenter üblicherweise mit einer Belüftungsgeschwindigkeit
von dem etwa 0,1 bis etwa 2fachen des Volumens der Kulturflüssigkeit
pro Minute eingebracht werden. Die Temperatur, bei der die Kultivierung
durchgeführt
wird, kann in dem Bereich variieren, der ermöglicht, dass ein Mikroorganismus
wächst
und vorzugsweise wird die Kultivierung zum Beispiel bei einer Temperatur
im Bereich von etwa 15°C
bis etwa 40°C
und bei einem pH-Wert des Mediums im Bereich von etwa 6 bis etwa
8 durchgeführt.
Die Kultivierungsdauer kann abhängig
von verschiedenen Faktoren der Kultivierbedingungen variieren und
eine Dauer im Bereich von etwa 1 Tag bis etwa 10 Tagen wird üblicherweise
bevorzugt.
-
Der
erfindungsgemäße Mikroorganismus
kann zum Beispiel basierend auf der Fähigkeit der Umwandlung von
p-Chlorphenylalanin als racemisches Gemisch in ein optisch aktives
p-Chlorphenylalanin
gewählt werden.
Entsprechend der Stereochemie des wie vorstehend beschrieben erhaltenen
optischen Isomers kann der gewählte
Mikroorganismus bei der Herstellung des einen der optischen Isomere,
L- oder D-Form, der Aminosäure
(1) wie gewünscht
verwendet werden.
-
R
der erfindungsgemäßen Aminosäure (1)
ist ein gegebenenfalls substituierter C1-C12-Alkylrest (ein C1-C12-Alkylrest, ein
substituierter C1-C12-Alkylrest), ein gegebenenfalls substituierter
C4-C8-Cycloalkylrest (ein C4-C8-Cycloalkylrest, ein substituierter
C4-C8-Cycloalkylrest),
ein gegebenenfalls substituierter C6-C14-Arylrest (ein C6-C14-Arylrest
oder ein substituierter C6-C14-Arylrest). Der C1-C12-Alkylrest kann
zum Beispiel eine Methyl-, Ethyl-, Propyl-, 1-Methylethyl-, 2-Methylpropyl-,
1-Methylpropyl-, 1,1-Dimethylethyl-, Pentyl-, Hexyl-, Heptyl-, Octyl-,
Nonyl-, Decyl-, Undecyl-, Dodecylgruppe und dgl. sein und der C4-C8-Cycloalkylrest
kann zum Beispiel eine Cyclobutyl-, Cyclopentyl-, Cyclohexyl-, Cycloheptyl-,
Cyclooctylgruppe und dgl. sein und der C6-C14-Arylrest kann zum
Beispiel eine Phenyl- und Naphthylgruppe sein.
-
Der
hier in Bezug auf den substituierten C1-C12-Alkylrest als R verwendete
Begriff „substituiert" bedeutet, dass eins
oder mehrere, üblicherweise
1 bis 5 Wasserstoffatome im Alkylrest durch die gleichen oder unterschiedliche
Reste ersetzt sind, ausgewählt
aus einem C4-C8-Cycloalkylrest; einem C4-C8-Cycloalkylrest, substituiert
mit einem oder mehreren Resten, ausgewählt aus einem C1-C3-Alkylrest,
C1-C3-Alkoxyrest, einer Aminogruppe, einer Cyanogruppe, einer Hydroxylgruppe
und einem Halogenatom; einem C1-C2-Alkoxyrest; einem C1-C2-Alkylthiorest;
einer Methylendioxygruppe; einer Hydroxylgruppe; einer Cyanogruppe;
einer Carboxylgruppe; einem C2-C5-Alkyloxycarbonylrest; einer Aminogruppe;
einem Mono- oder Di-(C1-C5)alkylaminorest; einer Aminocarbonylgruppe;
einer Guanidinogruppe; einer 3-Indolylgruppe; einer Mercaptogruppe;
einer Phenylgruppe; einer Phenylgruppe, substituiert mit einem oder
mehreren Resten, ausgewählt
aus einem C1-C3-Alkylrest,
einem C1-C3-Alkoxyrest, einer Aminogruppe, einer Cyanogruppe, einer
Benzyloxygruppe, einer Hydroxylgruppe und einem Halogenatom; einer
Phenoxygruppe; einer Phenoxygruppe, substituiert mit einem oder
mehreren Resten, ausgewählt
aus einem C1-C3-Alkylrest,
einem C1-C3-Alkoxyrest, einer Aminogruppe, einer Cyanogruppe, einer
Benzyloxygruppe, einer Hydroxylgruppe und einem Halogenatom; einer Naphthylgruppe;
einer Naphthylgruppe, substituiert mit einem oder mehreren Resten,
ausgewählt
aus einem C1-C3-Alkylrest, einem C1-C3-Alkoxyrest, einer Aminogruppe,
einer Cyanogruppe, einer Benzyloxygruppe, einer Hydroxylgruppe und
einem Halogenatom; einer Benzyloxygruppe und einem Halogenatom.
Bevorzugte Substituenten können
zum Beispiel Methyl-, Ethyl-, Cyclohexyl-, Methoxy-, Ethoxy-, Methylthio-,
Ethylthio-, Aminocarbonyl-, Guanidino-, 3-Indolyl-, Mercapto-, Methylendioxy-,
Hydroxyl-, Cyano-, Amino-, Carboxyl-, Phenyl-, Benzyloxy-, Dibenzyloxyphenyl-
und Methylendioxyphenylgruppen, sowie Fluor-, Chlor- und Bromatome sein.
-
Der
Begriff „substituiert", der hier in Bezug
auf den substituierten C4-C8-Cycloalkylrest als R verwendet wird,
bedeutet, dass eines oder mehrere, üblicherweise 1 bis 3 Wasserstoffatome
in dem Cycloalkylrest durch gleiche oder unterschiedliche Substituenten,
ausgewählt
aus einem C1-C3-Alkylrest, C1-C3-Alkoxyrest, einer Aminogruppe,
einer Cyanogruppe, einer Hydroxylgruppe und einem Halogenatom, substituiert
sind.
-
Der
Begriff „substituiert", der hier in Bezug
auf den substituierten C6-C14-Arylrest als R verwendet wird, bedeutet,
dass eines oder mehrere, üblicherweise
1 bis 5 Wasserstoffatome im Arylrest durch gleiche oder unterschiedliche
Substituenten, ausgewählt
aus einem C1-C3-Alkylrest;
einem halogenierten C1-C2-Alkylrest; einem C1-C2-Alkoxyrest; einer
Methylendioxygruppe; einer Hydroxylgruppe; einer Cyanogruppe; einer Carboxylgruppe;
einem C2-C5-Alkyloxycarbonylrest; einer Aminogruppe; einem Mono-
oder Di(C1-C5)alkylaminorest;
einer Phenylgruppe; einer Phenylgruppe, substituiert mit einem oder
mehreren Substituenten, ausgewählt
aus einem C1-C3-Alkylrest, einem C1-C3-Alkoxyrest und einer Hydroxylgruppe;
einer Phenoxygruppe; einer Phenoxygruppe, substituiert mit einem
oder mehreren Substituenten, ausgewählt aus einem C1-C3-Alkoxyrest
und einer Hydroxylgruppe; einer Benzyloxygruppe; und einem Halogenatomatom,
und vorzugsweise durch gleiche oder unterschiedliche Substituenten,
ausgewählt
aus Methyl-, Ethyl-, Monochlormethyl-, Trifluormethyl-, Methoxy-,
Methylendioxy-, Hydroxy-, Cyano-, Amino-, Carboxyl-, Phenyl- und
Benzyloxygruppen, sowie Fluor-, Chlor- und Bromatomen, substituiert
sind.
-
Typischerweise
können
als bevorzugtes R der C1-C12-Alkylrest oder der substituierte C1-C12-Alkylrest zum
Beispiel Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl-, 1-Methylethyl-, 2-Methylpropyl-, 1-Methylpropyl-,
1,1-Dimethylethyl-, 3-Guanidinopropyl-, 3-Indolylmethyl-, Hydroxymethyl-,
1-Hydroxyethyl-, 2-Hydroxyethyl-, Methylthioethyl-, Ethylthioethyl-,
4-Aminobutyl-, Carboxymethyl-,
Carboxyethyl-, Aminocarbonylmethyl-, Aminocarbonylethyl-, Benzyl-,
p-Hydroxyphenylmethyl-, p-Chlorphenylmethyl-, p-Fluorphenylmethyl-,
m-Cyanophenylmethyl-
und Naphthylmethylgruppen sein.
-
Der
C4-C8-Cycloalkylrest oder der substituierte C4-C8-Cycloalkylrest
können
zum Beispiel Cyclohexyl- und 4-Chlorcyclohexylgruppen sein und ein
C6-C14-Arylrest oder ein substituierter C6-C14-Arylrest können zum
Beispiel Phenyl-, p-Hydroxyphenyl-, p-Chlorphenyl- und Naphthylgruppen sein.
-
Die
erfindungsgemäße Aminosäure (1)
kann zum Beispiel Alanin, Norvalin, tert-Leucin, Methionin, 2-Aminobuttersäure, 2-Aminoadipinsäure, Serin,
O-Methylserin, Threonin, Phenylglycin, Phenylalanin, p-Chlorphenylalanin,
p-Fluorphenylalanin, Naphthylglycin, Naphthylalanin und dgl. sein.
-
In
dem erfindungsgemäßen Verfahren
ist, wenn das andere der optischen Isomere (optisches Isomer II),
d.h. die Aminosäure
(1) wie gewünscht,
eine L-Form ist, dann das verwendete biologische Material der vorliegenden
Erfindung eines, das die Fähigkeit
hat, eine D-Form der Aminosäure
(1) in die L-Form davon umzuwandeln, und eine verwendete Ausgangssubstanz
kann nur das eine der optischen Isomere (optisches Isomer I), d.h.
die D-Form der Aminosäure (1)
sein oder kann ein Gemisch der D-Form und der L-Form sein. Wenn das
andere der optischen Isomere (optisches Isomer II), d.h. die Aminosäure (1),
wie gewünscht,
eine D-Form ist, dann ist das verwendete biologische Material der
vorliegenden Erfindung eines, das die Fähigkeit hat, eine L-Form der
Aminosäure
(1) in die D-Form davon umzuwandeln, und eine verwendete Ausgangssubstanz
kann nur das eine der optischen Isomere (optisches Isomer I), d.h.
die L-Form der Aminosäure
(1) sein oder kann ein Gemisch der D-Form und der L-Form sein. Wenn
ein solches Gemisch der D-Form und der L-Form der Aminosäure (1)
verwendet wird, ist das Verhältnis
zwischen ihnen nicht besonders beschränkt und industriell ist bevorzugt,
ein etwa 1:1 racemisches Gemisch zu verwenden. In einer anderen
Ausführungsform
wird ein Gemisch, in dem das gewünschte
Isomer in einem relativ hohen Verhältnis enthalten ist, vorausgehend
mit irgendeinem Verfahren hergestellt und dann wird das Gemisch
dem erfindungsgemäßen Verfahren
unterzogen.
-
Das
Verfahren der vorliegenden Erfindung wird üblicherweise in einer wässrigen
Pufferlösung
durchgeführt,
die ein Salz einer anorganischen Säure, wie ein Salz eines Alkalimetallphosphats,
wie Natriumphosphat und Kaliumphosphat, und ein Salz einer organischen
Säure,
wie ein Salz eines Alkalimetallacetats, wie Natriumacetat und Kaliumacetat,
enthält,
und die Konzentration der Aminosäure
(1) in einem Reaktionsgemisch des erfindungsgemäßen Verfahrens beträgt üblicherweise
30 % (Gew./Vol.) oder weniger, vorzugsweise 0,01 bis 20 % (Gew./Vol.).
Die Menge des erfindungsgemäßen biologischen
Materials kann basierend auf verschiedenen Faktoren, wie der Reaktionsdauer
oder der Selektivität
einer zu erhaltenden L- oder D-Form der Aminosäure (1) gewählt werden. Zum Beispiel beträgt die Menge üblicherweise
0,01 bis 200 Gew.-Teile, vorzugsweise 0,1 bis 50 Gew.-Teile, bezogen
auf die Aminosäure
(1). Die Reaktionstemperatur beträgt üblicherweise 10 bis 70°C, vorzugsweise
20 bis 60°C.
Der pH-Wert des Reaktionsgemisches beträgt üblicherweise 4 bis 12, vorzugsweise
5 bis 11. Der Zeitraum der Reaktionsdauer kann basierend auf einem
gewünschten
Isomerverhältnis
und dgl. geeignet gewählt
werden. Üblicherweise
beträgt
die Reaktionsdauer 16 bis 120 Stunden und die vollständige Umsetzung
kann mit jedem Überwachungsverfahren,
wie HPLC, sichergestellt werden.
-
Ein
Reaktionsgemisch kann ferner ein Hilfsmittel, wie ein oberflächenaktives
Mittel, ein Coenzym, ein Metallsalz, eine Spurenernährung oder
ein organisches Lösungsmittel
enthalten, um die Reaktionsdauer zu verringern und das Verhältnis der
Umwandlung zu erhöhen,
und solche Hilfsmittel können
zum Reaktionsgemisch allein oder in Kombination miteinander, wie
geeignet, gegeben werden. Ein zu verwendendes oberflächenaktives
Mittel kann zum Beispiel Natriumdodecylsulfat, Polyethylenglycolmono-p-isooctylphenylether,
Cetylpyridiniumbromid und dgl. sein, und ein Coenzym kann zum Beispiel
Nicotinamidadenindinucleotid, Nicotinamidadenindinucleotidphosphat,
Adenosin-5'-phosphat, Flavinmononucleotid,
Pyridoxalphosphat und Coenzym A und dgl. sein. Ein Metallsalz kann
zum Beispiel Monokaliumdihydrogenphosphat, Dinatriummonohydrogenphosphat,
Magnesiumsulfat-Heptahydrat, Eisen(II)-sulfat-Heptahydrat, Zinksulfat-Heptahydrat,
Mangansulfat-Trihydrat, Cobaltchlorid-Hexahydrat und dgl. sein,
und eine Spurenernährung
kann zum Beispiel ein Hefeextrakt sein. Ein organisches Lösungsmittel
kann zum Beispiel ein Alkan, wie n-Heptan, Cyclohexan und Isooctan,
ein Ether, wie Methyl-tert-butylether, ein Alkohol, wie Methanol,
Isopropanol und n-Octanol, ein Sulfoxid, wie DMSO, ein Keton, wie
Aceton, eine Ketosäure,
wie Oxalessigsäure,
Brenztraubensäure
und α-Ketobuttersäure, ein
Alkalimetallsalz einer Ketosäure,
wie Natriumpyruvat, ein Alkylester einer Ketosäure, wie Methylpyruvat, sein.
-
Das
andere der optischen Isomere (optisches Isomer II), d.h. eine so
hergestellte L- oder D-Form
der Aminosäure
(1) kann aus einem Reaktionsgemisch mit einem bekannten Verfahren
gewonnen werden. Zum Beispiel wird das erfindungsgemäße biologische
Material vom Reaktionsgemisch durch eine Zentrifugation oder ein äquivalentes
Verfahren abgetrennt, wobei ein Überstand
erhalten wird, auf den dann Verfahren, wie Ionenaustauschchromatographie,
angewandt werden, wobei die Aminosäure erhalten wird, oder der
dann sauer gemacht und mit einem organischen Lösungsmittel, wie Diethylether
und Toluol, extrahiert wird, um eine organische Schicht zu entfernen,
und dann wird die wässrige
Schicht basisch gemacht und ähnlich
mit einem organischen Lösungsmittel
extrahiert, um eine wässrige
Schicht zu entfernen, und dann wird das Lösungsmittel unter vermindertem
Druck abgedampft und eine weitere Reinigung wird, falls erforderlich,
zum Beispiel durch eine Chromatographie und dgl. durchgeführt, wobei
die Aminosäure
erhalten wird.
-
Ebenfalls
kann in der vorliegenden Erfindung die optische Reinheit der Aminosäure (1)
durch Umsetzen des erfindungsgemäßen biologischen
Materials mit der Aminosäure
erhöht
werden.
-
Ein
solches Verfahren kann unter Bedingungen ähnlich zu verschiedenen Bedingungen
durchgeführt werden,
die für
das vorstehend beschriebene Verfahren der vorliegenden Erfindung
relevant sind.
-
Eine
längere
Umsetzungsdauer ergibt im Allgemeinen höhere optische Reinheit der
erhaltenen Aminosäure
(1) durch eine Zunahme im Verhältnis
der Umsetzung. Indem man die Aminosäure (1), die im Reaktionsgemisch
noch nach der Umsetzung verbleibt, einer geeigneten Kombination
von bekannten Verfahren unterzieht, kann die Aminosäure (1),
in der das Verhältnis
des einen optischen Isomers höher
als vor der Umsetzung ist, leicht gewonnen werden.
-
Beispiele
-
Die
vorliegende Erfindung wird weiter in den folgenden Beispielen detailliert
beschrieben, die nicht zur Einschränkung der vorliegenden Erfindung
gedacht sind.
-
Beispiel 1
-
Ein
500 ml Sakaguchi-Kolben, der 100 ml eines sterilisierten Mediums
(pH-Wert 7,0) enthielt, das 1,0 % (Gew./Vol.) Glycerin, 0,2 % (Gew./Vol.)
Polypepton (Nihon Pharmaceutical Co., Ltd.), 0,3 % (Gew./Vol.) Fleischextraktpulver
(Kyokuto Pharmaceutical Ind., Co., Ltd.), 0,3 % (Gew./Vol.) Hefeextrakt
(Difco), 0,1 % (Gew./Vol.) Dikaliumphosphat, 0,1 % (Gew./Vol.) Monokaliumphosphat,
0,03 % (Gew./Vol.) Magnesiumsulfat-Heptahydrat enthielt, wurde mit
1 ml einer Kultur von Nocardia diaphanozonaria-Stamm JCM3208 angeimpft,
der zuvor in einem Medium mit ähnlicher
Zusammensetzung kultiviert worden war, und bei 30°C für 3 Tage
unter Umkehrschütteln
inkubiert. Aus dieser Kultur wurden Zellen durch Zentrifugation
(10000 g, 10 Minuten) gesammelt, die mit 10 ml 100 mmol/l Kaliumphosphatpuffer
(pH-Wert 7,0) vereinigt wurden, um wieder eine Zellsuspension zu
bilden, die zentrifugiert (10000 g, 10 Minuten) wurde, um nasse
Zellen zu erhalten. Die so erhaltenen nassen Zellen wurden in 10
ml 100 mmol/l Kaliumphosphatpuffer (pH-Wert 7,0) suspendiert, wobei
eine Zellsuspension erhalten wurde. 50 mg D-p-Chlorphenylalanin
wurden in 45 ml wässriger
Lösung (pH-Wert
7,0) gelöst,
die 0,15 % (Gew./Vol.) Monokaliumdihydrogenphosphat, 0,15 % (Gew./Vol.)
Dinatriumhydrogenmonophosphat, 0,02 % (Gew./Vol.) Magnesiumsulfat-Heptahydrat,
0,001 % (Gew./Vol.) Eisen(II)-sulfat-Heptahydrat, 0,001 % (Gew./Vol.)
Zinksulfat-Heptahydrat, 0,001 % (Gew./Vol.) Mangansulfat-Trihydrat, 0,001
% Cobaltchlorid-Hexahydrat und 0,0005 % (Gew./Vol.) Hefeextrakt
enthielt, zu der 5 ml der vorstehend beschriebenen Zellsuspension
gegeben wurden und das Reaktionsgemisch für 74 Stunden unter Rühren unter Verwendung
eines Magnetrührers
bei 1000 Upm bei 30°C
gehalten wurde. Anschließend
wurde ein Teil des Reaktionsgemisches genommen und zentrifugiert,
um die Zellen zu entfernen, und der erhaltene Überstand wurde einer HPLC unterzogen,
um sicherzustellen, dass L-p-Chlorphenylalanin
mit einer optischen Reinheit von 100 % e.e. mit 79 % Ausbeute erhalten
wurde.
-
Beispiel 2
-
Die
Umsetzung wurde mit einem ähnlichen
Verfahren zu dem in Beispiel 1 durchgeführt, außer dass racemisches p-Chlorphenylalanin
statt D-p-Chlorphenylalanin und eine Umsetzungsdauer von 24 Stunden statt
der Umsetzungsdauer von 74 Stunden verwendet wurde. Anschließend wurde
ein Teil des Reaktionsgemisches genommen und zentrifugiert, um die
Zellen zu entfernen, und der erhaltene Überstand wurde einer HPLC unterzogen,
um sicherzustellen, dass L-p-Chlorphenylalanin mit einer optischen
Reinheit von 72 % e.e. mit 82 % Ausbeute erhalten wurde.
-
Andererseits
wurde die Umsetzung mit einem ähnlichen
Verfahren zu dem in Beispiel 1 außer Verwendung von L-p-Chlorphenylalanin
statt D-p-Chlorphenylalanin durchgeführt. Anschließend wurde
ein Teil des Reaktionsgemisches genommen und zentrifugiert, um die Zellen
zu entfernen, und der erhaltene Überstand wurde
einer HPLC zur Analyse der Produkte unterzogen, was keine Bildung
von D-p-Chlorphenylalanin ergab.
-
Beispiel 3
-
Ein
10 ml Teströhrchen,
das 3 ml sterilisiertes Medium (pH-Wert 7,0) enthielt, das 1,0 %
(Gew./Vol.) Glycerin, 0,2 % (Gew./Vol.) Polypepton (Nihon Pharmaceutical
Co., Ltd.), 0,3 % (Gew./Vol.) Fleischextraktpulver (Kyokuto Pharmaceutical
Ind., Co., Ltd.), 0,3 % (Gew./Vol.) Hefeextrakt (Difco), 0,1 % (Gew./Vol.)
Dikaliumphosphat, 0,1 % (Gew./Vol.) Monokaliumphosphat, 0,03 % (Gew./Vol.)
Magnesiumsulfat-Heptahydrat enthielt, wurde mit einer „Ösenmenge" einer Kultur jedes
in Tabelle I gezeigten Mikroorganismus angeimpft, der zuvor in einer
30 %igen (Gew./Vol.) wässrigen
Lösung
von Glycerin bei –80°C gefroren
und bei 30°C
für 2 Tage unter
Umkehrschütteln
inkubiert worden war. Aus dieser Kultur wurden Zellen durch Zentrifugation
(10000 g, 10 Minuten) gesammelt, die mit 3 ml 100 mmol/l Kaliumphosphatpuffer
(pH-Wert 7,0) kombiniert wurden, wobei wieder eine Zellsuspension
gebildet wurde, die zentrifugiert (10000 g, 10 Minuten) wurde, um
nasse Zellen zu erhalten. Diese wurden mit 3 ml einer wässrigen
Lösung
(pH-Wert 7,0) kombiniert, die 0,1 % (Gew./Vol.) D-p-Chlorphenylalanin,
0,15 % (Gew./Vol.) Monokaliumdihydrogenphosphat, 0,15 % (Gew./Vol.)
Dinatriummonohydrogenphosphat, 0,02 % (Gew./Vol.) Magnesiumsulfat-Heptahydrat,
0,001 % (Gew./Vol.) Eisen(II)-sulfat-Heptahydrat, 0,001 % (Gew./Vol.)
Zinksulfat-Heptahydrat, 0,001 % (Gew./Vol.) Mangansulfat-Trihydrat, 0,001
% Cobaltchlorid-Hexahydrat und 0,0005 % (Gew./Vol.) Hefeextrakt
enthielt, und die Kultur wurde bei 30°C für einen in Tabelle 1 gezeigten
Zeitraum unter Umkehrschütteln
bei 250 Upm gehalten. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 gezeigt.
-
-
Andererseits
wurde der vorstehend beschriebene Test ähnlich durchgeführt, außer dass
L-p-Chlorphenylalanin
statt D-p-Chlorphenylalanin verwendet wurde. Die Ergebnisse sind
in Tabelle 2 gezeigt.
-
-
Beispiel 4
-
10
mg jeder Aminosäure,
die in Tabelle 3 gezeigt ist, die ein racemisches Gemisch ist, wurden
in 9 ml einer wässrigen
Lösung
(pH-Wert 7,0) gelöst,
die 0,15 % (Gew./Vol.) Monokaliumdihydrogenphosphat, 0,15 % (Gew./Vol.)
Dinatriummonohydrogenphosphat, 0,02 % (Gew./Vol.) Magnesiumsulfat-Heptahydrat,
0,001 % (Gew./Vol.) Eisen(II)-sulfat-Heptahydrat, 0,001 % (Gew./Vol.) Zinksulfat-Heptahydrat,
0,001 % (Gew./Vol.) Mangansulfat-Trihydrat, 0,001 % Cobaltchlorid-Hexahydrat
und 0,0005 % (Gew./Vol.) Hefeextrakt enthielt. 2,7 ml der wässrigen
Lösung,
die die jeweilige Aminosäure
als racemisches Gemisch enthielt, wurden mit 0,3 ml einer Zellsuspension
kombiniert, die ähnlich
wie in Beispiel 1 hergestellt worden war, und bei 30°C für den jeweiligen
in Tabelle 3 gezeigten Zeitraum unter Umkehrschütteln bei 250 Upm inkubiert.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 3 gezeigt.
-
-
Beispiel 5
-
10
mg jeder Aminosäure,
die in Tabelle 4 gezeigt ist, die eine D-Form ist, wurden in 9 ml
einer wässrigen
Lösung
(pH-Wert 7,0) gelöst,
die 0,15 % (Gew./Vol.) Monokaliumdihydrogenphosphat, 0,15 % (Gew./Vol.)
Dinatriummonohydrogenphosphat, 0,02 % (Gew./Vol.) Magnesiumsulfat-Heptahydrat,
0,001 % (Gew./Vol.) Eisen(II)-sulfat-Heptahydrat, 0,001 % (Gew./Vol.) Zinksulfat-Heptahydrat,
0,001 % (Gew./Vol.) Mangansulfat-Trihydrat, 0,001 % (Gew./Vol.)
Cobaltchlorid-Hexahydrat und 0,0005 % (Gew./Vol.) Hefeextrakt enthielt.
2,7 ml der wässrigen
Lösung,
die die jeweilige Aminosäure
als D-Form enthielt, wurden mit 0,3 ml einer Zellsuspension kombiniert,
die ähnlich
wie in Beispiel 1 hergestellt worden war, und bei 30°C für den jeweiligen
in Tabelle 4 gezeigten Zeitraum unter Umkehrschütteln bei 250 Upm inkubiert.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 4 gezeigt.
-
-
Andererseits
wurde der vorstehend beschriebene Test ähnlich außer Verwendung der jeweiligen L-Aminosäure statt
jeder D-Aminosäure
durchgeführt.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 5 gezeigt.
-
-
Beispiel 6
-
Ein
500 ml Sakaguchi-Kolben, der 100 ml eines sterilisierten Mediums
(pH-Wert 7,0) enthielt, das 1,0 % (Gew./Vol.) Glycerin, 0,2 % (Gew./Vol.)
Polypepton (Nihon Pharmaceutical Co., Ltd.), 0,3 % (Gew./Vol.) Fleischextrakt
(Kyokuto Pharmaceutical Ind., Co., Ltd.), 0,3 % (Gew./Vol.) Hefeextrakt
(Difco), 0,1 % (Gew./Vol.) Dikaliumphosphat, 0,1 % (Gew./Vol.) Kaliummonophosphat,
0,03 % (Gew./Vol.) Magnesiumsulfat-Heptahydrat enthielt, wurde mit
1 ml einer Kultur vom Nocardia diaphanozonaria-Stamm JCM3208 angeimpft,
der vorher in einem Medium mit ähnlicher
Zusammensetzung kultiviert worden war, und bei 30°C 2 Tage unter
Umkehrschütteln
inkubiert. 80 ml dieser Kultur wurden einer Zentrifugation (10000
g, 10 Minuten) unterzogen, um nasse Zellen abzutrennen. Die abgetrennten
nassen Zellen wurden zweimal mit 80 ml 100 mmol/l Kaliumphosphatpuffer
(pH-Wert 7,0) gewaschen und die so erhaltenen nassen Zellen wurden
in 4 ml 100 mmol/l Dikaliumphosphatpuffer (pH-Wert 7,0) suspendiert,
wobei eine Zellsuspension erhalten wurde.
-
0,2
ml der Zellsuspension wurden mit 1,8 ml 100 mmol/l Kaliumphosphatpuffer
(pH-Wert 7,0) kombiniert, der D-p-Chlorphenylalanin mit 5,5 mmol/l
und einen in Tabelle 6 gezeigten Aminosäuretransferaseinhibitor mit
1,1 mmol/l enthielt, und bei 30°C
2 Stunden unter Umkehrschütteln
bei 250 Upm inkubiert. Jedes Reaktionsgemisch wurde in einem frühen Stadium
der Reaktion durch HPLC analysiert, um das durch die Umsetzung hergestellte
L-p-Chlorphenylalanin
quantitativ zu bestimmen. Die Ergebnisse sind als relative Werte jeweils
basierend auf 100 % Herstellung von L-p-Chlorphenylalanin in Abwesenheit
des jeweiligen Aminosäuretransferaseinhibitors
dargestellt.
-
-
Beispiel 7
-
Die
Umsetzung wurde ähnlich
wie in Beispiel 6 außer
Verwendung jedes der in Tabelle 7 gezeigten Mikroorganismen statt
des Nocardia diaphanozonaria-Stamms JCM3208 durchgeführt. Die
Ergebnisse sind in Tabelle 7 gezeigt.
-
-
Beispiel 8
-
Die
Umsetzung wurde ähnlich
wie in Beispiel 6 außer
Verwendung jedes der in Tabelle 8 gezeigten Mikroorganismen statt
des Nocardia diaphanozonaria-Stamms JCM3208 und außer dass
die Umsetzungsdauer 24 Stunden betrug (wenn ein Gleichgewicht der
Umsetzung gebildet war) durchgeführt.
Die Ergebnisse sind in Tabelle 8 gezeigt.
-
-
Wirkung der
Erfindung
-
Gemäß der vorliegenden
Erfindung kann eine optisch aktive Aminosäure, die als Zwischenprodukt
für Arzneimittel
und als Futter- oder Nahrungszusatz geeignet ist, effizient hergestellt
werden.
