DE4405249A1 - Stabilisierte Troponin-Zubereitung für Immunoassays und Verfahren zur Stabilisierung von Troponin für Immunoassays - Google Patents

Stabilisierte Troponin-Zubereitung für Immunoassays und Verfahren zur Stabilisierung von Troponin für Immunoassays

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Description

Die vorliegende Erfindung betrifft eine stabilisierte Zubereitung von Troponin, die als Vergleichsprobe bei Immunoassays verwendet werden kann, die darauf abzielen, Troponin im Blutserum oder Blutplasma zu bestimmen.
Es ist bekannt, daß Troponin ein in den Muskelfasern vorliegender Proteinkom­ plex ist, der aus drei Proteinen, den Troponinen C, I und T, besteht, der die Steu­ erung der Muskelkontraktion durch Ca2⁺ auslöst, eine Kontraktion, die sich durch die Wechselwirkung von Myosin und Aktin in den Muskelfasern ergibt.
Wenn der Muskel geschädigt ist, so der Herzmuskel im Fall eines Myokardin­ farkts, oder ein Skelettmuskel bei langanhaltenden physischen Belastungen, erscheinen hierbei freigesetzte kontraktile Proteine mehr oder weniger schnell in dem Blutkreislauf.
Es wurde bereits die Bestimmung von Troponinen als vorbeugende Diagnose von Myokardinfarkten vorgeschlagen, sei es nun die Bestimmung von Troponin T in Circulation 83 (1991), 902-912 oder die von Troponin I in Am. Heart J. 110 (1987), 1333-44 und Molecular Immunology 29 (2) (1992), 271-278.
Jeder enzymatische Immunoassay oder jeder Radioimmunoassay, die in Krank­ heitsanalyselaboratorien durchgeführt werden, setzen im allgemeinen neben der Lieferung der für die Bestimmung notwendigen Reagenzien, d. h. markierte oder unmarkierte Antikörper, Zeichner (tracer) und Verdünnungslösungen, durch den Hersteller auch die Lieferung einer Eichlösung der zu probierenden Verbindung ein, die bei der Anwendung unter Bedingungen, die analog sind je­ nen der zu untersuchenden Probe, als Vergleichsmaßstab zur Berechnung der Ergebnisse und/oder als positive Kontrolle dient.
Es ist bekannt, daß Proteine in Lösung wenig stabil sind und daß sie enthalten­ de Reagenzien häufig in gefriergetrockneter Form vertrieben werden zusammen mit einem Lösungsmittel geeigneter Zusammensetzung, indem sie vor der Ver­ wendung von dem Benutzer aufgelöst werden müssen. Wenn man die in dieser Weise erhaltenen Lösungen bei 4°C aufbewahrt, kann man sie während mehre­ rer Tage benutzen, selbst wenn die tägliche Bestimmung eine gewisse Verände­ rung der Konzentrationen des Reagens zeigt. So werden im allgemeinen - und es wird auch im Fall von Troponin T empfohlen - die ausgehend von dem gefrierge­ trockneten Material erhaltenen Vergleichslösungen in Einheitsdosisform einge­ froren.
Wäßrige gepufferte Lösungen von Troponin, und insbesondere von Troponin I und T, können mehrere Monate bei -80°C aufbewahrt werden. Es hat sich jedoch gezeigt, daß sie nicht mehr als einige Stunden bei +4°C stabil sind, selbst wenn man Proteaseinhibitoren oder antibakterielle Mittel zusetzt, so daß es für die Krankheitsanalyselaboratorien erforderlich ist, ihre Eichlösungen häufig und in einigen Fällen zweimal täglich herzustellen.
Die vorliegende Erfindung ermöglicht die Aufbewahrung von mehr oder weniger stark verdünnten Eichlösungen von Troponin I oder Troponin T, die bei spezifi­ schen Immunoassays als Vergleichssubstanz dienen, während einiger Tage bei +4°C.
Die stabilisierte Zubereitung der vorliegenden Erfindung umfaßt in wäßrigen Medium in Abhängigkeit von dem durchzuführenden Assay eines der beiden Troponine I oder T und 1 bis 10 Moläquivalente Troponin C und vorzugsweise 2 bis 5 Äquivalente, sowie eine große Menge von Mg++- und/oder Ca++-Ionen, ins­ besondere in Form von CaCl2. Die Mg++- und/oder Ca++-Ionen liegen in Form von Salzen vor, insbesondere des Chlorids, Bromids oder Nitrats. Die Menge der Mg++- und/oder Ca++-Salze, insbesondere von CaCl2, kann dem 100- bis 10.000-fachen des Gewichts von Troponin I oder Troponin T entsprechen.
Das Troponin C kann menschlichen oder tierischen Ursprungs sein.
Die Konzentration von Troponin I oder T in den erfindungsgemäßen Lösungen entspricht jener, die im allgemeinen bei den Immunoassays angewandt wird, d. h., sie kann zwischen 0,01 ng/ml und 1 µg/ml und vorzugsweise zwischen 0,2 ng/ml und 25 ng/ml liegen, während die Konzentration der Mg++- und/oder Ca++-Salze, die nicht kritisch ist, zwischen 20 µM und 10 mM liegen kann; wo­ bei diese Konzentration in klassischer Weise bei etwa 2 mM liegt.
Die Lösung kann in klassischer Weise auf einen pH-Wert zwischen 4 und 10, vorzugsweise zwischen 5,5 und 7,5, gepuffert werden und das Lösungsmittel kann teilweise oder vollständig aus normalem menschlichem Plasma bestehen, so daß es möglich wird, über eine Vergleichsprobe zu verfügen, die eine Zusam­ mensetzung aufweist, die äquivalent ist der zu untersuchenden Probe, die das Plasma oder das Serum des Patienten enthält.
Die Erfindung betrifft weiterhin eine pulverförmige Zubereitung von Troponin I oder T, vorzugsweise in gefriergetrockneter Form, die gegebenenfalls Mg++- und/oder Ca++-Ionen, wie zum Beispiel CaCl2, und 1 bis 10 Moläquivalente Troponin C umfaßt, wobei in diesem Fall die Anwesenheit von Troponin C nur dazu dient, die Stabilität der anderen Troponine zu dem Zeitpunkt sicherzustel­ len, da die Zubereitung von dem Benutzer in eine wäßrige Lösung überführt wird.
Wenn die gefriergetrocknete Zubereitung keine Mg++- und/oder Ca++-Ionen enthält, müssen diese beim Inlösungbringen des Materials zugegeben werden.
Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Stabilisierung einer Lösung von Troponin I oder T für Immunoassays, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß es darin besteht, 1 bis 10 Moläquivalente Troponin C pro Moläquivalent Tro­ ponin I oder T und Mg++- und/oder Ca++-Ionen, beispielsweise CaCl2, zuzuge­ ben.
Im folgenden seien Beispiele der Ausführung der Erfindung und die Ergebnisse entsprechender Aufbewahrungsuntersuchungen angegeben.
Menschliches Troponin I (TnI) wurde nach der in FEBS Lett. 40 (1974), 253-257 beschriebenen Methode aus Herzen isoliert. Die erhaltene Lösung kann bei ei­ ner Konzentration oberhalb 10 µg/ml in einem Phosphatsalzpuffer, der 0,5% Kasein enthält, mehrere Monate bei -80°C aufbewahrt werden.
Troponin T (TnT) kann nach der in J. Biochem. 72 (1972), 723-725 oder in J. Biol. Chem. 249 (1974), 4742-4748 beschriebenen Verfahrensweise erhalten werden.
Troponin C (TnC) kann nach der in Acta Chem. Scand. B 42 (1988), 211-215 be­ schriebenen Weise ausgehend von dem im Handel erhältlichen, aus Rindern ge­ wonnenen Komplex der drei Troponine (T, C, I) gewonnen werden.
Die Konzentrationen der hergestellten Lösungen wurden mit Hilfe des Bradford- Reagens bestimmt, das in Ann. Biochem. 72 (1976), 248 beschrieben und im Handel erhältlich ist. Das Vergleichsprodukt ist eine bekannte Mischung aus Troponin I, C und T, die von der Firma Sigma in gefriergetrockneter Form unter der Bezugsziffer T 4895 vertrieben wird.
Herstellung einer erfindungsgemäßen Zubereitung
- Zubereitung enthaltend 5 Mol Troponin C pro Mol Troponin I.
Man gibt zu 940 µl des Puffers KH2PO4 (0,1M; pH-Wert = 6,8), der 10% norma­ les menschliches Plasma enthält, 276 µg CaCl2 · 2H2O, 10 µl einer Lösung von Troponin I mit einer Konzentration von 10 µg/ml und 50 µl einer Lösung von Tro­ ponin C mit einer Konzentration von 10 µg/ml.
Vorzugsweise bewirkt man die Maßnahmen in sterilem Milieu unter Verwen­ dung von sterilisierten Lösungen von Troponin I und Troponin C, beispielsweise indem man sie durch ein Filter mit einem Porendurchmesser von 0,22 µm führt.
Die erhaltene Lösung mit einer TnI-Konzentration von etwa 100 ng/ml und einer TnC-Konzentration von 500 ng/ml wird anschließend zur Herstellung einer Ver­ dünnungsreihe von 1 ng/ml bis 10 ng/ml, bezogen auf Troponin I, verwendet.
- Man bereitet in gleicher Weise Lösungen, die 1 oder 2 oder 10 Moläqui­ valente Troponin C, bezogen auf Troponin I, enthalten.
Die pulverförmige Zubereitung kann durch Gefriertrocknen einer in der obigen Weise hergestellten wäßrigen Zubereitung, aber ohne menschliches Plasma er­ halten werden.
Man bereitet in analoger Weise Lösungen, welche 1 bis 10 Moläquivalente Tropo­ nin C, bezogen auf Troponin T, enthalten, indem man Troponin I durch Troponin T wechselt.
Durchführung der Immunoassays
Man probiert die bei 4°C während 6 Wochen aufbewahrten Lösungen an den ausgewählten Tagen, wobei man als Vergleichsmaßstab eine Eichprobe verwen­ det, die man unmittelbar ausgehend von einer bei -80°C aufbewahrten Lösung von Troponin I hergestellt hat.
Das Assay erfolgt mit zwei monoklonalen Antikörpern, die gegen das Myokard- Troponin I gerichtet sind; wobei der erste Antikörper in den Wandungen von Reagenzgläsern für Immunoassays adsorbiert ist, die von der Firma NUNC (USA) unter der Bezeichnung Maxisorp, Startube, vertrieben werden; während der zweite Antikörper mit Peroxidase markiert ist. Die angewandte Methode ist die Sandwich-Methode.
Die Bildung der Antikörper ist in Molecular Immunology 29 (2) (1992), 271-278 beschrieben. Es hat sich gezeigt, daß sich bei diesem Assay keine Interferenz mit den anderen Isoformen von Troponin I, Troponin C oder anderen Myokard-Pro­ teinen ergibt.
In Abwesenheit von TnC beobachtet man vom ersten Tag der Aufbewahrung an eine merkliche Verminderung der TnI-Konzentration bei allen Verdünnungen. Wenn TnC durch Actomyosin oder Tropomyosin ersetzt wird in einer Menge von 5 Moläquivalenten, bezogen auf TnI, so beträgt die nach Ablauf von 12 Tagen ge­ messene TnI-Konzentration nur noch 2/3 der Ausgangskonzentration von 10 ng/ml, während die mit TnC und CaCl2 stabilisierten Lösungen keine Verände­ rung zeigen.
Nach Ablauf von 40 Tagen zeigen die mit unterschiedlichen Konzentrationen von TnC und CaCl2 stabilisierten TnI-Lösungen keine Veränderung, während die nichtstabilisierten Lösungen eine scheinbare Konzentration zeigen, die auf bis zu 80% absinken kann.

Claims (11)

1. Stabilisierte Zubereitung von Troponin I oder Troponin T für Immunoas­ says, gekennzeichnet durch eine wäßrige Lösung, die Troponin I oder Troponin T, 1 bis 10 Moläquivalente Troponin C pro Moläquivalent Troponin I oder T und Mg++- und/oder Ca++-Ionen enthält.
2. Zubereitung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie Salze von Mg++ und/oder Ca++, insbesondere MgCl2, in einer Menge enthält, die dem 100- bis 10.000-fachen des Gewichts von Troponin I oder Troponin T entspricht.
3. Zubereitung nach einem der Ansprüche 1 und 2, dadurch gekennzeich­ net, daß sie Troponin I und 2 bis 5 Moläquivalente Troponin C pro Moläquiva­ lent Troponin I enthält.
4. Zubereitung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeich­ net, daß sie in wäßriger gepufferter Lösung mit einem pH-Wert zwischen 4 und 10 vorliegt.
5. Zubereitung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß das Lö­ sungsmittel aus bis zu 100%-igem menschlichem Plasma gebildet ist.
6. Zubereitung nach einem der Ansprüche 3 bis 5, dadurch gekennzeich­ net, daß die Troponin I-Konzentration zwischen 0,01 ng/ml und 1 µg/ml und die Konzentration der Salze von Mg++ und/oder Ca++, insbesondere von MgCl2, zwischen 20 µM und 10 mM liegen.
7. Pulverförmige Zubereitung zur Herstellung einer stabilisierten Zuberei­ tung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß sie Troponin I oder Troponin T, 1 bis 10 Moläquivalente Troponin C pro Mol­ äquivalent Troponin I oder T und gegebenenfalls Mg++- und/oder Ca++-Ionen enthält.
8. Zubereitung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch ge­ kennzeichnet, daß sie CaCl2 enthält.
9. Zubereitung nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß sie in ge­ friergetrockneter Form vorliegt und frei von Mg++- und/oder Ca++-Ionen ist.
10. Verfahren zur Stabilisierung einer wäßrigen Zubereitung von Troponin I oder T für Immunoassays, dadurch gekennzeichnet, daß es darin besteht, 1 bis 10 Moläquivalente Troponin C pro Moläquivalent Troponin I oder T und Mg++- und/oder Ca++-Ionen zuzugeben.
11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß es darin be­ steht, eine Menge von Salzen von Mg++ und/oder Ca++, insbesondere in Form von CaCl2, zuzugeben, die vorzugsweise dem 100- bis 10.000-fachen des Ge­ wichts von Troponin I oder Troponin T entspricht.
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996027661A1 (en) * 1995-03-07 1996-09-12 Dade International Inc. Stabilizing solutions for proteins and peptides
WO1996033415A1 (en) * 1995-04-18 1996-10-24 Biosite Diagnostics Incorporated Novel methods for the assay of troponin i and t and complexes of troponin i and t and selection of antibodies for use in immunoassays
EP0743522A1 (de) * 1995-05-16 1996-11-20 Pasteur Sanofi Diagnostics Stabilisierte Troponin-Zubereitung für Immunoassays und Verfahren zur Herstellung dieser stabilisierten Zubereitung
WO1997026534A1 (en) * 1996-01-15 1997-07-24 Finnish-Russian Joint Biotechnology Laboratory Detection of cardiac muscle necrosis by immunoassay and appropriate antibodies therefor
US6991907B1 (en) 1995-04-18 2006-01-31 Biosite, Inc. Methods for the assay of troponin I and T and complexes of troponin I and T and selection of antibodies for use in immunoassays
US7723059B2 (en) 1995-04-18 2010-05-25 Biosite Incorporated Methods for improving the recovery of troponin I and T in membranes, filters and vessels

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE281648T1 (de) 1995-04-18 2004-11-15 Biosite Diagnostics Inc Verfahren zum assay von troponin i und t und komplexen von troponin i und t und auswahl von antikörpern zur verwendung in immunoassays
DE19524572A1 (de) * 1995-07-06 1997-01-09 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung eines synthetischen Kalibrators für den Einsatz in Immunoassays, bestehend aus den Analyten oder Teilsequenzen davon, die an inerten Trägermoleküle konjugiert sind
DE19548028A1 (de) * 1995-12-21 1997-06-26 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung eines synthetischen Kalibrators für den Einsatz in Sandwich-Immunoassays, bestehend aus einem Antikörper gegen einen der im Assay benutzten Antikörper und einer Sequenz des Analyten
US6586401B1 (en) 1996-02-16 2003-07-01 Children's Medical Center Corporation Troponin subunit I fragment and homologs thereof
US6589936B1 (en) * 1996-02-16 2003-07-08 Children's Medical Center Corporation Pharmaceutical compositions comprising recombinant troponin subunits
US5837680A (en) 1996-02-16 1998-11-17 Children's Medical Center Corporation Pharmaceutical compositions comprising troponin subunits, fragments and analogs thereof and methods of their use to inhibit angiogenesis
US6465431B1 (en) 1999-11-17 2002-10-15 Boston Life Sciences, Inc. Pharmaceutical compositions comprising troponin subunits, fragments and homologs thereof and methods of their use to inhibit angiogenesis
WO1997039132A1 (en) * 1996-04-16 1997-10-23 University Of Miami Stabilized preparations of human troponins and modifications thereof, diagnostic assay methods and assay kits
US7285418B2 (en) 1996-06-25 2007-10-23 Hytest Ltd. Method and kit for the diagnosis of troponin I
WO1997049994A1 (en) * 1996-06-25 1997-12-31 Oy Aboatech Ab Method and kit for the diagnosis of troponin i
WO1998016255A2 (en) 1996-10-15 1998-04-23 Navix, Inc. Stabilized conjugates of uncomplexed subunits of multimeric proteins
DE19647927A1 (de) * 1996-11-20 1998-05-28 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung einer stabilen Troponin I Präparation und dessen Verwendung als Kalibrator in Immunoassays
US6156521A (en) * 1997-12-19 2000-12-05 Biosite Diagnostics, Inc. Methods for the recovery and measurement of troponin complexes
WO1998029726A2 (en) * 1996-12-27 1998-07-09 Coulter International Corp. Method of detecting and determining the concentration of total troponin i in a biological sample
US5947124A (en) * 1997-03-11 1999-09-07 Biosite Diagnostics Incorporated Diagnostic for determining the time of a heart attack
US5834210A (en) * 1997-05-23 1998-11-10 Spectral Diagnostics, Inc. Stable troponin subunits and complexes
US6248869B1 (en) 1997-05-29 2001-06-19 Medical Analysis Systems, Inc. Troponin I forms and use of the same
US6077676A (en) * 1997-12-18 2000-06-20 Spectral Diagnostics, Inc. Single-chain polypeptides comprising troponin I and troponin C
US6475785B1 (en) 1997-12-18 2002-11-05 Spectral Diagnostics, Inc. Single-chain polypeptides comprising troponin I N-terminal fragments and troponin C
US6190916B1 (en) * 1999-06-29 2001-02-20 Spectral Diagnostics, Inc. Troponin I composition
US7078486B2 (en) * 1999-12-10 2006-07-18 Spectral Diagnostics, Inc. Single-chain polypeptides comprising troponin I and troponin C
US6538104B2 (en) 2001-04-27 2003-03-25 Medical Analysis Systems, Inc. Stabilization of cardiac troponin I subunits and complexes
US20050136542A1 (en) * 2003-12-19 2005-06-23 Beckman Coulter, Inc. Stabilized liquid reference solutions
US20070130009A1 (en) * 2005-06-01 2007-06-07 Chad Steelberg System and method for media play pricing
US8468561B2 (en) 2006-08-09 2013-06-18 Google Inc. Preemptible station inventory
US20110076697A1 (en) * 2009-04-28 2011-03-31 Innovative Laboratory Technologies, Inc. Lateral-flow immuno-chromatographic assay devices
US20110306148A1 (en) 2010-06-14 2011-12-15 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Composition for use as an assay reagent
JP5782712B2 (ja) * 2010-12-28 2015-09-24 東ソー株式会社 心疾患マーカー標品およびその製造法
KR101975993B1 (ko) * 2011-02-25 2019-05-07 가부시키가이샤 엘에스아이 메디엔스 심근 트로포닌의 측정법
JP5759211B2 (ja) * 2011-03-11 2015-08-05 三洋化成工業株式会社 凍結乾燥方法
JP7425459B2 (ja) * 2019-10-11 2024-01-31 株式会社シノテスト 安定化されたｈｍｇｂ１含有溶液

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0394819A2 (de) * 1989-04-25 1990-10-31 Roche Diagnostics GmbH Spezifische Antikörper gegen Troponin T, ihre Herstellung und Verwendung in einem Reagenz zur Bestimmung von Herzmuskelnekrosen
DE4122886A1 (de) * 1990-10-12 1992-04-16 Georg Dr Jackowski Diagnostischer kit fuer die diagnose und charakterisierung von brustschmerzen bei ihrem ersten auftreten

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0394819A2 (de) * 1989-04-25 1990-10-31 Roche Diagnostics GmbH Spezifische Antikörper gegen Troponin T, ihre Herstellung und Verwendung in einem Reagenz zur Bestimmung von Herzmuskelnekrosen
DE4122886A1 (de) * 1990-10-12 1992-04-16 Georg Dr Jackowski Diagnostischer kit fuer die diagnose und charakterisierung von brustschmerzen bei ihrem ersten auftreten

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CUMMINS, B. et al.: Am. Heart J. 113 (1987) 6, 1333-1344 *
EISENBERG, E. et al.: J.Biol.Chem. 249 (1974) 15, 4742-4748 *
KATUS, H.A. et al.: Circulation 83 (1991) 3, 902-912 *
LARUE, C. et al.: Molecular Immunology 29 (1992) 2, 271-278 *
STAPRANS, J. et al.: J.Biochem. 72 (1972),723-735 *
SYSKA, H. et al.: FEBS Letters 40 (1974)2,253-257 *
THULIN, E., VOGEL, H.J.: Acta Chem.Scand., B42 (1988), 211-215 *

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996027661A1 (en) * 1995-03-07 1996-09-12 Dade International Inc. Stabilizing solutions for proteins and peptides
US6165981A (en) * 1995-03-07 2000-12-26 Dade Behring Inc. Stabilizing solutions for proteins and peptides
WO1996033415A1 (en) * 1995-04-18 1996-10-24 Biosite Diagnostics Incorporated Novel methods for the assay of troponin i and t and complexes of troponin i and t and selection of antibodies for use in immunoassays
EP0935140A3 (de) * 1995-04-18 2005-04-20 Biosite Diagnostics Inc. Verffahren zum Assay von Troponin I und T und Komplexen von Trpponon I und T und Auswahl von Antikörpern zur Verwendung in Immunoassays
US6991907B1 (en) 1995-04-18 2006-01-31 Biosite, Inc. Methods for the assay of troponin I and T and complexes of troponin I and T and selection of antibodies for use in immunoassays
US7604946B2 (en) 1995-04-18 2009-10-20 Biosite Incorporated Methods for the assay of troponin I and T and complexes of troponin I and T and selection of antibodies for use in immunoassays
US7723059B2 (en) 1995-04-18 2010-05-25 Biosite Incorporated Methods for improving the recovery of troponin I and T in membranes, filters and vessels
US8084224B2 (en) 1995-04-18 2011-12-27 Alere San Diego, Inc. Methods for improving the recovery of troponin I and T in membranes, filters and vessels
US8114612B2 (en) 1995-04-18 2012-02-14 Alere San Diego, Inc. Methods for the assay of troponin I and T and complexes of troponin I and T and selection of antibodies for use in immunoassays
EP0743522A1 (de) * 1995-05-16 1996-11-20 Pasteur Sanofi Diagnostics Stabilisierte Troponin-Zubereitung für Immunoassays und Verfahren zur Herstellung dieser stabilisierten Zubereitung
FR2734267A1 (fr) * 1995-05-16 1996-11-22 Pasteur Sanofi Diagnostics Composition stabilisee de troponine pour immunoessais et procede de preparation d'une telle composition stabilisee
WO1997026534A1 (en) * 1996-01-15 1997-07-24 Finnish-Russian Joint Biotechnology Laboratory Detection of cardiac muscle necrosis by immunoassay and appropriate antibodies therefor

Also Published As

Publication number Publication date
DE4405249C2 (de) 1996-04-04
FR2701954A1 (fr) 1994-09-02
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GB2275774A (en) 1994-09-07
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CA2116066A1 (en) 1994-08-24

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