DE4137761A1 - Verfahren zur delignifizierung von lignocellulosehaltigem material, bleiche und behandlung von abwaessern mittels laccasen mit erweiteter wirksamkeit - Google Patents

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein neuartiges Verfahren zur Delignifizierung und/oder Bleiche von lignocellulosehaltigem Material und zur Behandlung von Abwässern, insbesondere von Papierfabrikations- oder Zellstoffabrikationsabwässern.

I. Stand der Technik chemischer Verfahren zur Zellstoffherstellung, Einsatz lignolytischer Enzyme: Biopulping, andere Anwendungen A. Chemische Verfahren zur Zellstoffherstellung und Erzeugung von Holzstoffen

Als heute hauptsächlich zur Zellstoffherstellung verwendete Verfahren sind das Sulfat- und das Sulfitverfahren zu nennen. Mit beiden Verfahren wird unter Kochung und unter Druck Zellstoff erzeugt. Das Sulfat-Verfahren arbeitet mit den wirksamen Chemikalien NaOH und Na₂S, das Sulfit-Verfahren mit Ca(HSO₃)₂ + SO₂.

Daneben existieren einige umweltfreundlichere Kochverfahren mit Hilfe von organischen Lösungsmitteln.

Alle Verfahren haben ein Hauptziel: Die Entfernung des Lignins aus dem verwendeten Pflanzenmaterial. Holz oder Einjahrespflanzen. Das Lignin, das mit der Cellulose und der Hemicellulose den Hauptbestandteil des Pflanzenmaterials (Stengel oder Stamm) ausmacht, muß entfernt werden, da es sonst nicht möglich ist, nicht vergilbende und hochbelastbare Papiere herzustellen.

Die Holzstofferzeugungsverfahren arbeiten mit Steinschleifen (Holzschliff) oder mit Refinern (TMP), die das Holz nach entsprechender Vorbehandlung (chemisch, thermisch oder chemisch-thermisch) durch entsprechende Mahlung defibrillieren.

Diese Holzstoffe besitzen noch einen Großteil des Lignins und werden v. a. zum Zeitungspapierdruck oder zum Druck von Illustrierten oder Reklame, hier allgemein als gestrichene Papiere, eingesetzt.

B. Biopulping

Lignolytische Systeme sind erst seit wenigen Jahren in ihrem Wirkmechanismus erforscht, als es gelang, durch geeignete Anzuchtbedingungen und Induktorzusätze bei dem Weißfäulepilz Phanerochaete chrysosporium zu ausreichenden Enzymmengen zu kommen. Es wurden bei diesem Pilz Enzymspezies gefunden: Ligninperoxidasen und Manganperoxidasen, die in dieser Form vorher unbekannt waren. Da dieser Pilz in-vivo ein hoch effektiver Ligninabbauer ist, wurde zunächst geschlossen, daß es auch beim pilzfreien Enzymeinsatz zum Ligninabbau kommen würde. Diese Vorstellung stellte sich als falsch heraus, da die Enzyme unter anderem zu einer Repolymerisation des Lignins führen und nicht zu dessen Abbau.

Ähnliches gilt auch für andere lignolytische Peroxidasen und für andere lignolytische Enzymspezies wie Laccasen, die das Lignin anstelle von H₂O₂ mit Hilfe von O₂ oxidativ abbauen. In allen Fällen kommt es beim Abbau zu ähnlichen Prozessen, nämlich zu einer Radikalbildung, die, wenn diese Radikale nicht in irgendeiner Form abgefangen werden, wieder selbst miteinander reagieren und so repolymerisieren. So war man gezwungen, beim Biopulping auf in-vivo-Systeme zurückzugreifen.

Man brachte Pilz und z. B. Holzschnitzel zusammen, um so zu einer Teildelignifizierung zu kommen, die zumindest die Bleichbarkeit erhöhte und die erforderliche Energie bei der mechanischen Nachbehandlung (Defibrillierung) herabsetzte. Unter einem Biopulping versteht man allgemein die mittels biologisch, enzymatischer Prozesse durchgeführte Herstellung von Zellstoff oder zellstoffähnlichen Stoffen oder Vorstufen. Bei Biopulping wird also vor allem versucht, Stämme zu züchten, die keine Cellulase bilden, sogenannte Cellulase-less-Mutanten, da nur die lignolytischen Enzyme erwünschte sind, die Weißfäulepilze aber in Gegenwart von Lignocellulose auch Cellulasen bilden. Die Cellulasen würden zu unerwünschten Ausbeuteverlusten durch Celluloseabbau beim Zellstoff führen.

Eine weitere Schwierigkeit ist, daß die Weißfäulepilze das Lignin nicht als Kohlenstoffquelle benutzen können, und so auf die Cellulose bzw. Hemicellulose als Kohlenstoffquelle angewiesen sind. Diese Schwierigkeiten werden zur Zeit so umgangen, indem das Substrat mit einer zusätzlichen Kohlenstoffquelle z. B. Glucose unter anderem imprägniert wird, um so den Cellulose-less-Mutanten überhaupt ein Wachstum zu ermöglichen.

Dabei ist die Hauptschwierigkeit die sehr langsame Abbaugeschwindigkeit des Lignins (Tage bis Wochen), so daß man bei dem in-vivo-Verfahren: Holzhackschnitzel + Cellulase-less-Mutanten (Phanerochaete chrysosporium) u. a. am Screening neuer besserer Wildstämme arbeitet. Als Endziel will man so zu schnellerem und effektiverem Ligninabbau kommen, um so den oben bereits erwähnten Ansatz: Herabsetzung der Mahlenergie und verbesserte Bleichbarkeit zu verbessern.

Man würde so, wenn es gelingt die Cellulose- und Hemicellulose-Verluste gering zu halten, zu Hochausbeutestoff kommen, der aber im Gegensatz zu den bisher durch Mahlung hergestellten Holzschliffen u. a. wesentlich energieärmer hergestellt werden könnte, leichter bleichbar wäre und bessere mechanische Eigenschaften zeigen würden.

Wie erwähnt bleiben die Hauptnachteile:

• 1. der sehr langsame Ligninabbau
• 2. der nur sehr begrenzte Ligninabbau (wenige %)
• 3. wahrscheinlich unumgängliche Zudosage von zusätzlicher C-Quelle
• 4. Schwierigkeiten durch die Prozeßführung wie großes Ansatzvolumen wegen der langsamen Wachstums- und Abbauzeiten, durch spezielle Belüftung, pH-Konstanthaltung und erforderliche Kontaminationsfreiheit.
  Es existieren auch Ansätze mit zellfreien Enzymsystemen bei Phanerochaete chrysosporium.

Hier liegt aber die Anwendung v. a. bei der Bleiche von "Kraftpulp" (das ist die teilweise delignifizierte Pulpe, die nach der Sulfatkochung mit ca. 5-8% Restligningehalt), bei der Verbesserung der mechanischen Eigenschaften von mechanischen Pulpen, d. h. Pulpen, die bei der mechanisch-thermischen oder chemo-mechanischen oder chemo-thermo-mechanischen Behandlung von Holzstoffen entstehen, wie TMP (thermo-mechanical Pulp), CMP (chemo-mechanical Pulp) und CTMP (chemo-thermo-mechanical Pulp) und bei der Entfärbung von E1-Abwässern (dies sind solche, die nach der 1. Bleichstufe von Kraftpulp anfallen).

Hier ist die Anwendung auf den Abbau von Lignin-Prozentbruchteilen bei ("Kraftpulp") bis wenigen Prozenten (Holzschliff) innerhalb von 12 bis 48 Stunden beschränkt. Die Bleiche ist ebenfalls unbefriedigend.

In neuerer Zeit gibt es einige Versuche, zu besseren Bleichergebnissen zu kommen mit Hilfe von Hämverbindungen, wie z. B. auch Hämoglobin, die quasi die aktive Hämkomponente in den Ligninperoxidasen nachstellen. Dabei sind die Verbindungen im allgemeinen für einen industriellen Einsatz zu teuer und zeigen auch z. T. unerwünschte Begleiteffekte, wie Abbau der Zellulose.

Auch Spezies einer anderen Enzymgruppen, die Hemizellulasen, hier u. a. die Xylanasen, werden als Bleichenzyme eingesetzt, da man hier einen Effekt auf die Bindungen zwischen Hemizellulosen (Xylanen) und dem Lignin vermutet.

Hier sind ebenfalls lange Wirkzeiten des Enzyms (16-24 Stunden) bei relativ geringer Bleichwirkung und Ligninentfernungen noch erhebliche Nachteile.

Weitere Anwendungen der lignolytischen Enzyme sind Entfärbung und Entgiftung von Zellstoffabrikationsabwässern und die Oxidation und damit Entgiftung von chlorierten Aromaten und anderen Verbindungen. Auch auf diesem Gebiet gibt es zur Zeit keine befriedigenden Problemlösungen, da bei Entfärbungs- bzw. Entgiftungsversuchen bisher in in-vivo Pilzsystemen entweder mit freien oder immobilisierten Pilzen gearbeitet wurde. Es wurden nur in längeren Zeiten (Tagen) Resultate mit befriedigenden Abbau - bzw. Oxidationswerten erreicht.

Die vorliegende Erfindung hat sich nunmehr die Aufgabe gestellt, Verfahren zum Abbau von Lignin aus lignocellulosehaltigem Material und/oder Bleiche von lignocellulosehaltigem Material zum enzymatischen Deinken von Altpapier und zur Behandlung von Papierfabrikations- und Zellstoffabrikationsabwässern zur Verfügung zu stellen, welches die zuvor genannten Nachteile nicht aufweist.

Diese Aufgabe wird dadurch gelöst, daß aus Coriolus versicolor gewonnene Laccasen unter gleichzeitiger Zugabe und/oder Zudosage von nicht-aromatischen Reduktions- und Oxidationsmitteln sowie solchen phenolischen Verbindungen und/oder nicht phenolischen Aromaten eingesetzt werden, die entweder die phenolischen und nicht phenolischen Strukturen des Lignins direkt durch die Wirkung dieser phenolischen und/oder nicht-phenolischen Aromaten oxidieren oder mittels durch diese Verbindungen vermittelter Oxidation weiterer phenolischer und/oder nicht phenolischer Verbindungen das Lignin oxidieren.

Erfindungsgemäß wird demnach Laccase v. a. von Coriolus versicolor benutzt. Diese Laccase wird zusammen mit Laccasesubstraten (phenolische Verbindungen bzw. nicht-phenolischen Aromaten) und/oder Phenolverbindungen und/oder nicht-phenolische Aromaten eingesetzt, wobei diese Verbindungen oxidiert werden, dann ihrerseits direkt Lignin als Red-/Ox-Meditatoren oxidieren oder durch zwischengeschaltete weitere Red-/Ox-Meditatoren (phenolische Verbindungen oder nicht-phenolischen Aromaten, wie z. B. Veratrylalkohol) die Oxidation bewirken. Hiermit wird also bewirkt, daß Laccase, welche nur die phenolischen Bestandteile des Lignins angreift (diese umfassen nur ca. ¹/₃ der Substrukturen), auch die nicht-phenolischen Substrukturen angreifen kann und so theoretisch zu einem vollständigen Abbau des gesamten Ligninmoleküls fähig ist, also ebenso wirkt wie eine Ligninperoxidase. Dies ist der neue Ansatz.

Ein Hauptvorteil im Gegensatz zu den in den obengenannten Patenten beschriebenen Verfahren für den Einsatz von Laccase ist die wesentlich vereinfachte Anzucht von coriolus versicolor im Gegensatz zu den schwerer in größeren Fermentationsgefäßen anziehbaren Ligninperoxidasenbildern v. a. Phanerochaete chrysosporium. Die eigenen Ausbeuten liegen mit einem speziellen Induktor bei ca. 20 Mill IU/l. Durch die Erweiterung der Laccasewirkung auf die Quasispezifität einer Ligninperoxidase wird eine wirkliche großtechnische Nutzung dieser Enzyme erst möglich, stellt also einen erheblichen Vorteil dar. Ligninabbauversuche mit Laccase alleine (d. h. ohne das oben beschriebene System mit Laccasen und zwischen Lignin und Enzym geschalteten Red-/Ox-Meditatoren phenolischer oder nicht-phenolischer Art) mit Fichten/Holzschliff als Substrat mit einem Anfangsligningehalt ca. 27% zeigen eine Delignifizierung bis maximal 22% Restligningehalt, also um ca. 19% Abbauversuche mit dem neuen System zeigen z. Z. einen Ligninabbau bis zu 16% Restligningehalt, also um 41%, d. h. um mehr als das Doppelte.

Durch Zusatz von Reduktions- und/oder Oxidationsmitteln, Salzen und/oder phenolischen Verbindungen wird erfindungsgemäß ein Redoxpotential von 200-600 mV eingestellt. Es kann bei dem erfindungsgemäßen Verfahren mittels einer Red-Ox-Elektrode ermittelt und mittels eines Reglers und Stellgliedes während der gesamten Reaktionszeit durch die Zugabe von Oxidations- und Reduktionsmitteln, Salzen und phenolischen Verbindungen konstant gehalten werden.

Als Oxidationsmittel werden vorzugsweise Wasserstoffperoxid eingesetzt. Als Reduktionsmittel kommen Natrium-Bisulfit, Ascorbinsäure, Dithionit und Thiolverbindungen in Frage.

Als Salze werden Metallsalze vorzugsweise eingesetzt. Hier kommen insbesondere FeSO₄, MnSO₄, TiO₂, CuSO₄ und Mn₃-Acetat in Betracht. Außerdem sei darauf hingewiesen, daß der Zusatz von Komplexbildnern erfindungsgemäß bevorzugt wird. Als solche kommen beispielsweise Ethylendiamin-tetraessigsäure (EDTA) oder Diethylentriamin-penta-essigsäure (DTPA) zum Einsatz.

Zusätzlich zu den genannten Stoffen können der wäßrigen zellstoffhaltigen Lösung weitere Substanzen zugesetzt werden. Als solche kommen NaOCl, Detergenzien und Polysaccharide in Frage. Hierzu zählen unter anderem nicht-ionische, ionische, anionische, kathionische und ampholytische Tenside sowie Glukane und Xanthane. Ferner ist es möglich, zusätzlich zu den lignolytischen Enzymen auch Hemizellulasen und/oder Pektinasen und/oder Lipasen zu verwenden.

Der Hauptunterschied zu der in der Arbeit "Oxidation of non phenolic substrates" (FEBS 267, 1990, S. 99-102) von R. Bourbonnais und M. G. Paice besteht u. a. in der völlig anderen Verfahrensführung durch die gleichzeitige Zudosage von Reduktions- und Oxidationsmitteln zur Bevorzugung der Depolymerisation des Lignins durch "Radikalabfangung" und Unterdrückung der Repolymerisation bei gleichzeitiger Aufrechterhaltung der Reaktion durch H₂O₂ Zuführung. Es ist bekannt, daß Laccasen auch mit H₂O₂ wirken und daß bei bestimmten Substraten die Oxidationswirkung der Laccase durch Peroxid verstärkt ist (R. Blaich, Analytische Elektrophoreseverfahren, Thieme-Verlag 1978, S. 59).

Das erfindungsgemäße System wird entweder mittels Laccase allein oder mit Ligninperoxidasen und/oder Manganperoxidasen von z. B. Phanerochaete chrysosporium oder anderen Weißfäulepilzen zusammen eingesetzt. Bei dem letzteren Ligninperoxidase + Laccase, wird bei einem pH-Wert um 4 gearbeitet, bei dem beide Enzymspezies noch aktiv sind. Der eigentliche Ligninabbau, die Bleiche (mit Ligninabbau) oder der Quellvorgang beim enzymatischen Deinken, wird durch gleichzeitige Zudosage von Reduktions- und Oxidationsmitteln, d. h. durch Abfangen von beim Ligninabbau entstehenden Radikalen bewirkt bei gleichzeitigem Vorhandensein von bestimmten Metallsalzen wie Fe²⁺, Cu²⁺, Ti³⁺ von NaOCl ect., welche zu bestimmten Radikalen führen wie das .O₂ H-Radikal (Fe²⁺ und/oder Ti³⁺ + H₂O₂), wie das .O₂H-Radikal (Ti³⁺ und O₂) oder zu Singulettsauerstoff (NaOCl + H₂O₂ = <NaCl + H₂O + ↑↓O₂), die den Ligninabbau beschleunigen können, bei Vorhandensein von Polysacchariden, die z. T. vom Pilz selbst erzeugt werden oder aus Hefezellwänden stammen, die bei Mischkulturen zwischen Weißfäulepilz und Hefen anfallen und bei Vorhandensein von bestimmten Detergenzien, die bei der Delignifizierung und/oder Bleiche eine bessere Penetration des Enzyms zwischen die Faser erlauben und beim Deinken für die Schäum- und Sammlerwirkung der Druckfarbenteilchen unerläßlich ist.

A. Beispiel 1) Beispiel: enzymatische Bleiche von Sulfatzellstoff

50 g atro Zellstoff (Sulfatzellstoff) werden in einem Rührgefäß bei 1% Stoffdichte bei ca. 500 rpm und 40°C gerührt. Der pH-Wert wird mit 1 n HCl auf pH 5 eingestellt. Es werden 0,1-1,5% H₂O₂ auf atro Stoff bezogen, ca. 0,1% ETDA oder DTPA, 0,01-0,5% Kupfer(II)sulfat bezogen auf atro Stoff zugesetzt. Nach Zugabe von 500-8000 IU (1 IU = Umsatz 1 µm Syringaladazin/min/ml Enzym) Laccase von Coriolus versicolor werden ca. 2 × 10 -3% -1 × 10 -1% Veratrylalkohol und 0,01-0,1% 2,2-Bis-propan pro atro Stoff zugegeben und der Bleichprozeß durch gleichzeitige Dosierung von H₂O₂ und Natrium-Bisulfit-Lösung in Gang gesetzt. Hierbei wird das Redoxpotential von ca. 400 mV aufrechterhalten. Nachdem der Prozeß eingeleitet ist, wird dieser für 2-4 Stunden fortgesetzt. Die Steuerung und Regelung des Prozesses wird mittels einer Redox-Elektrode und einer Pumpensteuerung durchgeführt.

B. Beispiel 2) Beispiel eines enzymatischen Flotationsdeinkens

12 g atro Stoff (Altpapier/Tageszeitung) werden in etwa 2 cm × 2 cm große Stücke zerrissen. Daraufhin werden 300 ml Wasser mit einer ungefähren Calciumhärte von 2,5 mmol zugegeben und bei ca. 40°C per Hand homogenisiert und daraufhin bei 3000 rpm 5 Minuten im Desintegrator desintegriert. Anschließend wird bei einer Stoffdichte von 3,5% 2 Minuten bei 3000 rpm erneut desintegriert. Anschließend wird auf 1,5 l mit Wasser von 40°C aufgefüllt und der Stoff in eine 1,5 l Flotationszelle gegeben. Der pH-Wert wird mit 1 m HCl auf pH 6-6,5 eingestellt. Es werden 0,1-1,5% H₂O₂ auf atro Papier bezogen zugegeben.

Nach Zugabe von 500-8000 IU Laccase (1 IU = Umsatz von 1 µm Syringaladazin/min/ml Enzym), 2 × 10^3- - 1 × 10^-1% Veratrylalkohol und 0,01-0,1% 2,2-Bis-propan und 0,05% Schäumer pro atro Probe wird der Deink-Flotationsprozeß durch gleichzeitige Zugabe von 60 l Luft/Std. und 1200 rpm Rührerdrehzahl in Gang gesetzt. Gleichzeitig wird über eine eingetauchte Redoxelektrode über eine Pumpensteuerung die Dosierung von H₂O₂ und Natrium-Bisulfit-Lösung so dosiert, daß ein mittleres Redoxpotential von ca. 400 mV eingestellt bleibt. Der Prozeß wird 10-15 Minuten bei 40°C fortgeführt und der Schmutzstoff mittels eines Schabers abgeschöpft.

C. Beispiel 3) Delignifizierung von Holzstoffen (TMP)

1 g atro TMP (1%ig) in 100 ml Wasser wird mit 1 m HCl auf pH 5 eingestellt. Es werden 8 µmol Veratrylalkohol, 400 µmol H₂O₂ und 0,01-0,1% 2,2-Bis-propan pro atro Stoff zugegeben. Als Zudosage (1 ml/Std.) werden gleichzeitig als Lösungen (je 9,80 mmolar) Natriumbisulfit und H₂O₂ zugegeben. Die Reaktion wird durch Zugabe von ca. 100 000 IU Enzym (Laccase von Coriolus versicolor) gestartet. Die Reaktionszeit beträgt 4 Stunden bei 40°C unter ca. 500 rpm Rührung.

D. Beispiel 4) Beispiel: Enzymatisches Deinken mit Vorbehandlung

100 g atro Altpapier (50% Zeitung/50% Illustrierte) werden in 2 × 2 cm große Stücke zerrissen. Daraufhin werden 2 l Wasser zugegeben (ca. 45°C) und der pH mit Alaun auf pH 7-7,5 eingestellt. Dann werden 80-800 IU Laccasen (1 IU = Umsatz von 1 µmol Syringaladazin/min/ml Enzym), 0,001-0,1% 2,2 Bispropan, 0,175-0,6% auf atro bezogen Detergenz als Sammler und 20-200 µl Na-Hydrogensulfitlösung (38-40%) zugegeben. Daraufhin wird 15 min bei 3000 rpm im Desintegrator aufgeschlagen, der pH-Wert mit Alaun auf pH 7-7,5 nachgestellt und der Stoff bei ca. 45°C für 75 min stehengelassen. Danach wird für 20 min in einer kommerziellen 20 l Flotationszelle flotiert.

Claims (20)

1. Verfahren zum Abbau von Lignin aus lignocellulosehaltigem Material und/oder Bleiche von lignocellulosehaltigem Material zum enzymatischen Deinken von Altpapier und zur Behandlung von Papierfabrikations- und Zellstoffabrikationsabwässern, dadurch gekennzeichnet, daß aus Coriolus versicolor gewonnene Laccasen unter gleichzeitiger Zugabe und/oder Zudosage von nicht-aromatischen Reduktions- und Oxidationsmitteln sowie solchen phenolischen Verbindungen und/oder nicht phenolischen Aromaten eingesetzt werden, die entweder die phenolischen und nicht phenolischen Strukturen des Lignins direkt durch die Wirkung dieser phenolischen und/oder nicht-phenolischen Aromaten oxidieren oder mittels durch diese Verbindungen vermittelter Oxidation weiterer phenolischer und/oder nicht phenolischer Verbindungen das Lignin oxidieren.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich zu den Laccasen Ligninperoxidasen und/oder Manganperoxidasen eingesetzt werden.

3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß Ligninperoxidasen und/oder Manganperoxidasen aus Phanerochaete chrysosporium oder anderen Weißfäulepilzen eingesetzt werden.

4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß Hemicellulasen, Pektinasen und/oder Lipasen der Reaktionslösung zusätzlich zugegeben werden.

5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß der pH-Wert zwischen 3 und 7 eingestellt wird.

6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Temperatur zwischen 25 und 55°C eingestellt wird.

7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß ein Redoxpotential zwischen 200 und 600 mV eingestellt wird.

8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich Metallsalze der Reaktionslösung zugesetzt werden.

9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß als Metallsalze FeSO₄, MnSO₄, TiO₂, CuSO₄ und Mn₃-Acetat eingesetzt werden.

10. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß NaOCl eingesetzt wird.

11. Verfahren nach einem der Ansprüche 8 bis 10, dadurch gekennzeichnet, daß als Reduktionsmittel Natrium-Bisulfit, Natrium-Dithionit, Ascorbinsäure, Thiolverbindungen oder Gluthation eingesetzt werden.

12. Verfahren nach einem der Ansprüche 8 bis 11, dadurch gekennzeichnet, daß als Oxidationsmittel H₂O₂ oder organische Peroxide eingesetzt werden.

13. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich Detergenzien eingesetzt werden.

14. Verfahren nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß als Detergenzien nicht-ionische, ionische, anionische, kathionische und ampholytische Tenside eingesetzt werden.

15. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 14, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich Polysaccharide der Reaktionslösung zugesetzt werden.

16. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, daß als Polysaccharide Glucane, Mannane, Dextran, Lävan oder Pflanzengummis und/oder eigene von den Pilzen gebildete oder in der Mischkultur mit Hefen produzierte Polysaccharide zugesetzt werden.

17. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 11, dadurch gekennzeichnet, daß Hemicellulasen und/oder Pektinasen und/oder Lipasen zugesetzt werden.

18. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 17, dadurch gekennzeichnet, daß zusätzlich Komplexbildner der Reaktionslösung zugegeben werden.

19. Verfahren nach Anspruch 18, dadurch gekennzeichnet, daß als Komplexbildner Ethylendiamin-tetraessigsäure (EDTA) oder Diethylentriamin-penta-essigsäure (DTPA) eingesetzt werden.

20. Verfahren nach Anspruch 1 bis 18, dadurch gekennzeichnet, daß Wasserglas zugesetzt wird.