DE3638386A1

DE3638386A1 - Nitroanthracycline, verfahren zu deren herstellung und arzneimittel, welche diese enthalten

Info

Publication number: DE3638386A1
Application number: DE19863638386
Authority: DE
Inventors: Francesco Angelucci; Mauro Gigli; Sergio Penco; Fernando Giuliani
Original assignee: Farmitalia Carlo Erba SRL
Current assignee: Pfizer Italia SRL
Priority date: 1985-11-19
Filing date: 1986-11-11
Publication date: 1987-05-21
Anticipated expiration: 2006-11-12
Also published as: HU195667B; FI864566A; NZ218256A; AU590639B2; ZA868700B; AU6510086A; ATA298586A; SE8604870L; DK548086A; SU1553015A3; GB2182926A; PT83757B; FI864566A0; HUT42100A; US4749693A; BE905751A; JPH0778073B2; AT390618B; ES2002909A6; NL8602914A

Description

Die Erfindung betrifft neue Anthracyclinglycoside mit Antitumoraktivität, Verfahren zu deren Herstellung und Arzneimittel, welche diese enthalten.

Die Erfindung stellt Anthracyclinglycoside der allgemeinen Formel (A′) zur Verfügung, worin bedeuten: R¹ ein Wasserstoffatom, eine Hydroxygruppe oder eine Methoxygruppe; einer der Reste R² und R³ eine Hydroxygruppe und der andere der Reste R² und R³ eine Nitrogruppe; und R⁴ ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxygruppe, sowie pharmazeutisch annehmbare Salze davon. Die Erfindung stellt auch Verbindungen, die für die Herstellung der Verbindungen der Formel (A′) geeignet sind, zur Verfügung, nämlich Verbindungen der allgemeinen Formel (A‴) worin R¹, R² R³ und R⁴ die vorher angegebenen Bedeutungen haben.

Genauer gesagt betrifft die Erfindung Verbindungen der nachfolgenden Formel mit den dort angegebenen Substituenten. StrukturSubstitution I: R¹ = R⁴ = H; R² = NO₂; R³ = OH; X = COCF₃ II: R¹ = R⁴ = H; R² = NO₂; R³ = OH; X = H III: R¹ = H; R² = NO₂; R³ = R⁴ = OH; X = H IV: R¹ = R³ = OH; R² = NO₂; R⁴ = H; C = COCF₃ V: R¹ = R³ = OH; R² = NO₂; R⁴ = H; X = H VI: R¹ = R³ = R⁴ = OH; R² = NO₂; X = H VII: R¹ = OCH₃; R² = NO₂; R³ = OH; R⁴ = H; X = COCF₃ VIII: R¹ = OCH₃; R² = NO₂; R³ = OH; R⁴ = H; X = H IX: R¹ = OCH₃; R² = NO₂; R³ = R⁴ = OH; X = H X: R¹ = R⁴ = H; R² = OH; R³ = NO₂ X = COCF₃ XI: R¹ = R⁴ = ₂H; R₄ ² = OH; R³ = NO₂ X = H XII: R¹ = H; R² = R⁴ = OH; R³ = NO₂; X = H XIII: R¹ = R² = OH; R³ = NO₂; R⁴ = H X = COCF₃ XIV: R¹ = R² = OH; R³ = NO₂; R⁴ = H; X = H XV: R¹ = R² = R⁴ = OH; R³ = NO₂; X = H XVI: R¹ = OCH₃; R² = OH, R³ = NO₂; R⁴ = H; X = COCF₃ XVII: R¹ = OCH₃; R² = OH; R³ = NO₂; R⁴ =H; X = H XVIII: R¹ = OCH₃; R² = R⁴ = OH; R³ = NO₂; X = H

Bevorzugte Verbindungen sind die Hydrochloridsalze der Verbindungen der Formel (A′).

Die Anthracyclinglycoside der Formel (A′) und deren pharmazeutisch annehmbaren Salze werden erfindungsgemäss hergestellt, indem man ein Aglycon der allgemeinen Formel (B) worin R¹, R² und R³ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben, mit 1-Chlor-N,O-di(trifluoroacetyl)- daunosamin der Formel (C) unter Ausbildung einer Diastereomeren-Mischung von 7(S), 9(S) und 7(R), 9(R) Anthracyclinglycosiden der Formel (A″) worin R¹, R² und R³ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben, kondensiert;
die O-Trifluoroacetalgruppe entfernt;
das 7(S), 9(S) Anthracyclinglycosid von dem 7(R), 9(R) Anthracyclinglycosid abtrennt;
die N-Trifluoroacetyl-Schutzgruppe von dem 7(S), 9(S) Antracyclinglycosid unter Erhalt einer Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Wasserstoff bedeutet, entfernt;
gewünschtenfalls die Verbindung der Formel (A′) in ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon überführt;
gewünschtenfalls die Verbindung der Formel (A′) oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon bromiert und das so erhaltene 14-Bromderivat unter Erhalt einer Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Hydroxy bedeutet, hydrolysiert; und
gewünschtenfalls die Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Hydroxy bedeutet, in ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon überführt.

Nach der Entfernung, typischerweise durch Hydrolyse, der Trifluoroacetyl-Schutzgruppen von dem Zuckerrest werden die Daunorubicinanalogen-glycoside erhalten. Die Doxorubicinanalogen erhält man von den entsprechenden Daunorubicinanalogen über 14-Brom-derivate gemäss dem Verfahren, das in US-PS 38 03 124 beschrieben wird.

Das Verfahren zur Herstellung der neuen Anthracycline basiert auf der direkten Nitrierung des Ringes B eines Anthracyclin-Zwischenproduktes, welches eine Hydroxygruppe hat in p-Stellung zu dem Reaktionszentrum. Das Einführen der Nitrogruppe wird im allgemeinen unter Verwendung von Trifluoressigsäureanhydrid/Ammoniumnitrat durchgeführt. Die Umsetzung muss in Abwesenheit von Sauerstoff oder Feuchtigkeit durchgeführt werden, weil anderenfalls die Reagenzien als Oxidationsmittel wirken und dann eine aromatische Hydroxylgruppe anstelle der Nitrogruppe eingeführt wird und dann die entsprechenden Oxidationsprodukte erhalten werden (siehe J. V. Crivello, J. Org. Chem. 46, 3056, 1981). Die erhaltene Verbindung ist ein Aglycon der Formel (B). Das Aglycon ist ein Teil der vorliegenden Erfindung.

Die allgemeine Synthesroute zur Herstellung der 6-Nitro- und 11-Nitroanthracycline der Formel (B) werden in den nachfolgenden Schemata I und II gezeigt.

Die vorliegende Erfindung basiert auf der Verwendung von Ausgangsmaterialien für die 6-Nitroanthracyclone von (±)4-Desmethoxy-6-desoxydaunomycinon(1) (R = H) (DE-OS 32 19 380) und (±)6-Desoxydaunomycinon(1) (R = OCH₃) (GB-OS 21 42 022A) und für die 11-Nitroanthracyclinone von (±)4-Desmethoxy-11-desoxydaunomycinon(7) (R = H) (DE-OS 32 19 380) und 11-Desoxydaunomycinon(7) (R = OCH₃), das man durch saure Hydrolyse des natürlichen Antibiotikums erhält (Arcamone et al, JACS 102, 1462, 1980).

SCHEMA I

SCHEMA II

Um eine Nitratbildung an den C-7-OH und C-9-OH-Gruppen zu vermeiden, werden diese Hydroxylgruppen geschützt, z. B. als Acetate. Dies kann man erreichen durch Behandlung von (1) und (7) mit Essigsäureanhydrid in Gegenwart von Pyridin bei 85 bis 90°C, um alle freien Hydroxylgruppen zu acylieren, wobei man (2) bzw. (8) erhält, und anschließend eine selektive Hydrolyse dieser aromatischen Triacetate durchführt unter Verwendung von Morpholin als Base, unter Erhalt von (3) und (9) in nahezu quantitativen Ausbeuten. Vorzugsweise wird 1-N-Morpholin in Methanol bei 40°C während 5 Stunden verwendet.

Die Nitrierung wird typischerweise mit einem Überschuß von Trifluoressigsäureanhydrid/Ammoniumnitrat in Methylenchlorid durchgeführt. Die Nitrierung kann bei Raumtemperatur unter Stickstoffatmosphäre und unter kräfigem Rühren durchgeführt werden. Dabei erhält man die entsprechenden Nitroderivate (4) und (10) in Ausbeuten von beispielsweise 70%.

Eine anschließende milde, alkalische Hydrolyse mit 0,1 N NaOH in Tetrahydrofuran bei Raumtemperatur und unter einer Stickstoffatmosphäre ergibt dann die Aglycone:
(±)4-Desmethoxy-6-desoxy-6-nitrodaunomycinon (5) (R = H)
(±)6-Desoxy-6-nitrodaunomycinon (5) (R = OCH₃)
(-)4-Desmethoxy-11-desoxy-11-nitrodaunomycinon (11) (R = H)
11-Desoxy-11-nitrodaunomycinon (11) (R = OCH₃)

Das Aglycon kann gewünschtenfalls durch Chromatografie über Kieselgel gereinigt werden. Eine milde Dealkylierung mit AlCl₃/Ph-NO₂ von (5) und (11) für R = OCH₃ ergibt dann entsprechend:
(±)6-Desoxy-6-nitrocarminomycinon (6)
11-Desoxy-11-nitrocarminomycinon (12)

Die Aglycone der Formel (B) kann man somit erfindungsgemäss herstellen, indem man selektiv die C-7- und C-9-Hydroxygruppen von (±)4-Desmethoxy-6-desoxydaunomycinons, (±)6-Desoxydaunomycinons, (±)4-Desmethoxy-11- desoxydaunomycinons oder 11-Desoxydaunomycinons schützt; den Ring (B) der so gebildeten Verbindung in p-Stellung zu dem Hydroxysubstituenten am Ring (B) nitriert; die C-7- und C-9-Hydroxy-Schutzgruppen entfernt, unter Erhalt eines Aglycons der Formel (B), in welcher R¹ Wasserstoff oder Methoxy bedeutet, und gewünschtenfalls Aglycon der Formel (B), in welcher R¹ Methoxy bedeutet, dann in ein Aglycon der Formel (B), in welcher R¹ Hydroxy bedeutet, überführt.

Die entsprechenden Glycoside werden hergestellt, indem man (5) (R = H, OCH₃), (6), (11) (R = H, OCH₃) und (12) mit dem 1-Chlor-N,O-di(trifluoroacetyl)daunosamin kuppelt, vorzugsweise in Gegenwart von Silbertrifluormethansulfonat in wasserfreiem Methylenchlorid unter einer Stickstoffatmosphäre. Dabei erhält man nach der Hydrolyse der O-Trifluoracetylgruppe durch Behandeln mit Methanol die alpha-Glycoside (I), (IV), (VII), (X), (XIII), (XVI) als Mischung der Diastereoisomeren (7(S) : 9(S) und 7(R) : 9(R). Nach der Abtrennung, z. B. durch Chromatografie über Kieselgel, werden die 7(S) : 9(S)-Glycoside einer milden alkalischen Hydrolyse unterworfen, um die N-Trifluoracetylgruppe zu entfernen, wobei man die entsprechenden Daunorubicinanaloge (II), (V), (VIII), (XI), (XIV) und (XVII) erhält. Diese können dann durch Behandeln mit Chlorwasserstoff in Methanol als Hydrochloride isoliert werden und gewünschtenfalls in die entsprechenden Doxorubicinanaloge (III), (VI), (IX), (XII), (XV), (XVIII) durch 14-Brominierung und Behandeln mit wässrigem Natriumformiat gemäß dem Verfahren, das in US-PS 38 03 124 beschrieben wird, überführt werden. Die Doxorubicinanaloge cönnen als Hydrochloride, wie oben angegeben, isoliert werden.

Die Erfindung wird in den folgenden Beispielen beschrieben.

Beispiel 1 (±)4-Desmethoxy-6-desoxy-6-nitrodaunomycin (5) (R = H)

(a) Herstellung des Zwischenproduktes (2) (R = H)

Produkt (1), (1,7 g, 4,8 mM) wurde auf 90°C unter Rühren mit Essigsäureanhydrid (25 ml) und Pyridin (25 ml) erwärmt. Nach 2 Stunden wurde das Reaktionsgemisch in Eis/Wasser gegossen und 30 Minuten unter Rühren stehen gelassen. Das feste Material wurde abfiltriert, mit H₂O gewaschen und aus MeOH kristallisiert, wobei man (2) (2,19 g, Ausbeute 94%) mit dem F: 225-226°C erhielt.
IR(KBr):1770 (aromatischer Ester),
1740 (aliphatischer Ester),
1720 (aliphatisches Keton),
1675 (aromatisches Keton),
1590 (Ar) cm^-1 UV (MeOH) lambda max: 210, 258, 334 nm
FD-MS: m/z 478 (100, M⁺)
PMR (200 MHz, CDCl₃) unter anderem: delta
2,11, 2,01 (s, 6H, OCOCH₃),
2,22 (s, 3H, COCH₃),
2,52 (s, 3H, Ar-OCOCH₃),
2,4-3,3 (m, 4H),
6,17 (breit, 1H, 7-H),
7,7-8,25 (m, 5H).

(b) Herstellung des Zwischenproduktes (3) (R = H)

Produkt (2) (2,1 g, 4,5 mM) wurde in MeOH (220 ml) und CH₂Cl₂ (110 ml) gelöst. Eine Lösung von 1 N Morpholin in MeOH (18 ml, 4 Äquivalente) wurde zugegeben und die Lösung wurde bei 40°C während 5 Stunden stehen gelassen. Nach dem Neutralisieren mit wässriger 1 N HCl wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde MeOH auskristallisiert, wobei man (3) (1,7 g, Ausbeute 90%) mit dem F: 265°C (Zersetzung) erhielt.
IR (KBr):3440 (phenolisches OH),
1745, 1720, 1670 (nicht-chelatisiertes Chinon),
1630 (chelatisiertes Chinon),
1590 cm^-1 FD-MS: m/z 436 (M⁺)
UV und sichtbare Spektren (MeOH) lambda max: 204, 226, 258, 336, 386, 404 nm
PMR (200 MHz, CDCl₃), unter anderen: delta
2,09, 2,04 (s, 6H, OCOCH₃),
2,25 (s, 3H, COCH₃),
2,54-3,40 (m, 4H)m
6,19 (dd, J=3,1, 5,6 Hz, 1H, 7-H),
7,77-8,35 (m,5H),
13,11 (s, 1H, 11-OH).

(c) Herstellung des Zwischenproduktes (4) (R = H)

Zu einer Mischung von (3) (1,6 g, 3,66 mM) und NH₄NO₃ (1,6 g, 20 mM) und (CF₃CO)₂O (18 ml) wurde wasserfreies CH₂Cl₂ (300 ml) unter einer Stickstoffatmosphäre und kräftigem Rühren bei Raumtemperatur zugegeben. Nach 90 Minuten wurde Methanol (3 l) zugegeben. Der erhaltene gelbe Niederschlag wurde abfiltriert und mit frischem Methanol und Ethylether gewaschen. Nach dem Trocknen wurde Produkt (4) (1,23 g, Ausbeute 70%) mit dem F: 263-264°C erhalten.
IR (KBr): 3470, 1745, 1720, 1675, 1635, 1585, 1540 (Ar-NO₂) cm^-1
FD-MS: m/z 481 (M^+.)
UV und sichtbare Spektren (MeOH) lambda max: 216, 260, 338, 400 nm
PMR (200 MHz, CDCl₃) unter anderem: delta
2,04, 2,00 (s, 6H, OCOCH₃),
2,24 (s, 3H, COCH₃),
2,43-3,51 (m, 4H),
6,22 (dd, J=2,3, 5,4 Hz, 1H, 7-H),
7,8-8,4 (m, 4H),
13,59 (s, 1H, 11-OH).

(d) Produkt (4) (1,1 g, 2,3 mM) wurde in THF (220 ml) gelöst. Dazu wurden bei Raumtemperatur unter Stickstoffatmosphäre und Rühren 0,1 NaOH (220 ml) gegeben. Nach 1 Stunde wurde die Lösung auf einen pH-Wert von ca. 7 mit 1 N HCl eingestellt und das Lösungsmittel wurde im Vakuum abgedampft. Der Rückstand wurde in CH₂Cl₂ gelöst und die Lösung mit H₂O gewaschen bis sie neutral war und dann über Na₂SO₄ getrocknet und das Lösungsmittel wurde abgedampft.

Nach der Kieselgelchromatografie wurde Produkt (5) (0,77 g, Ausbeute 90%) erhalten. F: 233-234°C (Zersetzung)
IR (KBr): 3570, 3470, 1710, 1680, 1630, 1585, 1535 cm^-1
FD-MS: m/z 398 /MH⁺), 397 (M⁺)
UV und sichtbare Spektren (MeOH) lambda max: 216, 260, 341, 384, 401 nm
PMR (200 MHz, CDCl₃) unter anderem: delta
2,23-3,22 (m, 4H),
2,41 (s, 3H, COCH₃),
4,02 (d, J=8,4 Hz, 1H, 7-OH),
4,67 (s, 1H, 9-OH),
5,02 (ddd, J=2,3, 4,3, 8,4 Hz, 1H, 7-H),
7,8-8,4 (m, 4H),
13,51 (s, 1H-11-OH).

Beispiel 2 4-Desmethoxy-11-desoxy-11-nitrodaunomycinon (-1) (R = H)

(a) Herstellung des Zwischenproduktes (8) (R = H)

Produkt (7) (0,7 g, 2 mM) wurde mit Essigsäureanhydrid (10 ml) und Pyridin (10 ml) bei Raumtemperatur gerührt. Nach 24 Stunden wurde das Reaktionsgemisch wie in Beispiel 1(a) beschrieben aufgearbeitet, wobei man (8) (0,88 g, Ausbeute 93%) erhielt. F: 220-222°C.
IR (KBr): 1780, 1730, 1720, 1675, 1590 cm^-1
UV (MeOH) lambda max: 210, 258, 334 nm
FD-MS: m/z 479 (MH⁺), 478 (M⁺)
PMR (200 MHz, CDCl₃, T = 40°C) unter anderem: delta
2,03 (s, 6H, OCOCH₃),
2,23 (s, 3H, COCH₃),
2,44 (s, 3H, Ar-OCOCH₃ ),
2,44-3,39 (m, 4H),
6,46 (breit, 1H, 7-H),
7,75-8,3 (m, 5H).

(b) Herstellung des Zwischenproduktes (9) (R = H)

Produkt (8) (0,83 g, 1,74 mM) wurde in gleicher Weise wie in Beispiel 1(b) beschrieben hergestellt, wobei man (9) (0,67 g, Ausbeute 88%) erhielt. F: 244°C.
IR (KBr): 3430, 1730, 1665, 1640, 1590 cm^-1
UV und sichtbare Spektren (MeOH) lambda max: 208, 226, 254, 334, 384, 402 nm
FD-MS: m/z 436 (M^+.)
PMR (200 MHz, CDCl₃) unter anderem: delta
2,04 (s, 6H, OCOCH₃),
2,24 (s, 3H, COCH₃),
2,40-3,30 (m, 4H),
6,47 (dd, J=2,0, 5,5 Hz, 1H, 7-H),
7,8-8,3 (m, 5H),
13,06 (s, 1H, 6-OH).

(c) Herstellung des Zwischenproduktes (10) (R = H)

Produkt (9) (0,62 g, 1,42 mM) wurde mit NH₄NO₃ (0,57 g, 7,1 mM), CF₃CO)₂O (4 ml) in wasserfreien CH₂Cl₂ (90 ml) behandelt. Nach dem gleichen Verfahren wie in Beispiel 1(c) beschrieben, wurde das Produkt (10) (0,5 g, Ausbeute 73%) erhalten. F: 272-274°C (Zersetzung).
IR (KBr): 3450, 1740, 1710, 1680, 1635, 1545 (Ar-NO₂) cm^-1
UV und sichtbare Spektren (MeOH) lambda max: 208, 254, 334, 400 nm
FD-MS: m/z 481 (M^+.)
PMR (200 MHz, CDCl₃) unter anderem: delta
2,06, 2,04 (s, 6H, OCOCH₃),
2,2 (s, 3H, COCH₃),
2,42-3,03 (m, 4H),
6,50 (dd, J=1,7, 5,5 Hz, 1H, 7-H),
7,8-8,4 (m, 4H),
13,50 (s, 1H, 6-OH).

(d)Produkt (10) (0,45 g, 0,94 mM) wurde mit 0,1 N NaOH wie in Beispiel 1(d) beschrieben behandelt, wobei man Produkt (11) (0,34 g, 91% Ausbeute) mit dem F: 231-233°C erhielt.
IR (KBr): 3550, 1710, 1675, 1630, 1540 cm^-1
UV und sichtbare Spektren (MePH) lambda: man
210, 214, 218, 250, 326, 336, 400 nm
FD-MS: m/z 397 (M^+.)
HRMS berechnet [C₂₀H₁₅NO₈]: 397,0798 (gefunden: 397,0808)
PMR (200 MHz, CDCl₃) unter anderem: delta
2,18-3,1 (m, 4H),
2,38 (s, 3H, COCH₃),
3,85 (d, J=6,2 Hz, 1H, 7-OH),
4,55 (s, 1H, 9-OH),
5,36 (ddd, J=1,8, 4,8, 6,2 Hz, 1H, 7-H),
7,8-8,4 (m, 4H),
13,7 (s, 1H, 6-OH).

Beispiel 3 Herstellung von 4-Desmethoxy-6-desoxy-6-nitro-N-trifluor- acetyl-daunorubicin (I)

Zu einer gekühlten Lösung (15°C) des racemischen 4-Desmethoxy-6-desoxy-6-nitrodaunomycinons (5) (R = H), (0,7 g, 1,76 mM) in wasserfreiem Methylenchlorid (140 ml) wurde 1-Chlor-N,O-di(trifluoracetyl)daunosamin (1,88 g, 5,28 mM) (hergestellt nach dem Verfahren in "Cancer Chemotherapy Reports", Teil 3, Band 6, Nr. 2, Seite 123) in wasserfreiem CH₂Cl₂ (40 ml) und Silbertrifluormethansulfonat (1,4 g, 5,28 mM) in wasserfreiem Diethylether (40 ml) gleichzeitig zugegeben und dabei schnell und kräftig unter Einleiten von Stickstoff gerührt. Nach 20 Minuten wurde eine gesättigte, wässrige NaHCO₃-Lösung (100 ml) zugegeben und die Mischung wurde unter Rühren 10 Minuten stehen gelassen. Die Mischung wurde über Zelit abfiltriert, die organische Schicht abgetrennt, mit Wasser gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und das Lösungsmittel wurde im Vakuum abgedampft.

Das erhaltene gelbe Material wurde in 300 ml Methanol aufgelöst und über Nacht bei Raumtemperatur zur Entfernung der O-Trifluoroacetylgruppen stehen gelassen.

Der Rückstand, der nach dem Abdampfen des Lösungsmittels zurückblieb, wurde über Kieselgel chromatografiert, wobei man die alpha-Glycoside 7(S) : 9(S) (0,43 g, Ausbeute 39%) und 7(R) : 9(R) (0,43 g, Ausbeute 39%) erhielt.

7(S) : 9(S);
F: 245-246°C
IR (KBr): 3470, 3450, 1720, 1700 (N-Trifluoracetyl), 1680, 1635, 1590, 1535 cm^-1
FD-MS: m/z 623 (MH⁺)
UV und sichtbare Spektren (MeOH) lambda max: 208, 260, 341, 384, 401 nm[alpha]° = +337 (c = 0,05541 in MeOH)
CD (MeOH): Delta-epsilon226 nm = +19,31, Delta-epsilon
270 nm = -9,94, Delta-epsilon
292 nm = +5,67, Delta-epsilon
340 nm = +7,68 PMR (200 MHz, CDCl₃): delta
1,24 (d, J=6,8 Hz, 3H, 5′-CH₃),
1,82 (td, J=4,1, 12,4, 12,4 Hz,1H, 2′_ax-H),
1,94 (d, J=8,2 Hz, 1H, 4′-OH),
1,95 (dd, J=5,0, 12,4 Hz, 1H, 2′_äq-H),
2,15 (dd, J=4,3, 15,1 Hz, 1H, 8_ax-H),
2,34 (s, 3H, COCH₃),
2,48 (ddd, J=1,8, 2,3, 15,1 Hz,1H, 8_äq-H),
3,10 (d, J=18,7 Hz, 1H, 10_ax-H),
3,27 (dd, J=1,8, 18,7 Hz, 1H, 10_äq-H),
3,65 (dd, J=2,7, 8,2 Hz, 1H, 4′-H),
4,1-4,3 (m, 1H, 3′-H),
4,30 (q, J=6,8 Hz, 1H, 5′-H),
5,00 (d, J=4,1 Hz, 1H, 1′-H),
5,11 (dd, J=2,3, 4,3 Hz, 1H, 7-H),
6,61 (d, J=8,0 Hz, 1H, NHCOCF₃),
7,8-7,9 (m, 2H, 2-H, 3-H),
8,2-8,4 (m, 2H, 1-H, 4-H),
13,55 (s, 1H, 11-OH).

7(R) : 9(R)
F: 145-146°C
FD-MS: m/z 623 (10, NH⁺); 579 (100)
CD (MeOH): Delta-epsilon226 nm = -10,9, Delta-epsilon
271 nm = +7,26, Delta-epsilon
291 nm = -0,27, Delta-epsilon
300 nm = +0,56, Delta-epsilon
340 nm = -5,1[alpha]° = -293 (c = 0,0635 in MeOH)
PMR (200 MHz, CDCl₃), unter anderem: delta
5,14 (t, J=3,0 Hz, 1H, 7-H), 5,27 (m, 1H, 1′-H). Beispiel 4 Herstellung von 4-Desmethoxy-6-desoxy-6-nitrodaunorubicin- hydrochlorid (II) 4-Desmethoxy-6-desoxy-6-nitro-N-trifluoracetyldaunorubicin (I) (0,130 g, 0,2 mM) wurde in Aceton (6 ml) gelöst. Bei 0°C und unter einer Stickstoffatmosphäre und unter Rühren wurden 0,1 N NaOH (60 ml) zugegeben. Nach 2 Stunden wurde das Aceton im Vakuum entfernt und der pH mit 0,1 N HCl auf 4,5 eingestellt. Die wässrige Lösung wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert und mit 0,1 N NaOH auf einem pH-Wert von ca. 6,5 bis 7,0 eingestellt und dann mit CH₂Cl₂ extrahiert. Die organische Schicht wurde mit H₂O gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und das Lösungsmittel abgedampft. Der Rückstand wurde in Methanol (5 ml) gelöst, mit einigen Tropfen Methanol/HCl-Lösung angesäuert, wobei nach Zugabe von Diethylether und n-Hexan das Hydrochlorid ausfiel. Das feste Material wurde filtriert, mit Diethylether bis zur Neutralität gewaschen und getrocknet, wobei man (II) (0,080 g, Ausbeute 68%) mit dem F: 173°C (Zersetzung) erhielt.
IR (KBr): 3400, 1710, 1675, 1630, 1590, 1540 cm^-1
FD-MS: m/z 527 (MH⁺) Beispiel 5 Herstellung von 4-Desmethoxy-11-desoxy-11-nitro-N- trifluoroacetyl-daunorubicin (X) Das racemische Aglycon (11) (R = H) (0,290 g, 0,73 mM) wurde in das entsprechende Glycosid, wie in Beispiel 3 beschrieben, überführt. Produkt X [7(S) : 9(S)] (0,1 g, Ausbeute: 24%) und dessen Diastereoisomer [7(R) : 9(R)] (0,1, Ausbeute: 24%) wurden nach der chromatografischen Trennung erhalten. 7(S) : 9(S)
F: 237-240@gC (Zersetzung)
IR (KBr): 3500, 3400, 1720, 1675, 1640, 1540 cm^-1
FD-MS: m/z 579 (M^+. - COCH₃)
UV und sichtbare Spektren (MeOH) lambda max: 207, 259, 335, 400 nm
CD (MeOH): Delta-epsilon221 nm = +11,1, Delta-epsilon
250 nm = +4,0, Delta-epsilon
289 nm = -5,1, Delta-epsilon
330 nm = +3,1, Delta-epsilon
400 nm = +1,0 [alpha]° = +22 (c = 0,0623 in MeOH)
PMR (200 MHz, CDCl₃): delta
1,30 (d, J=6,5 Hz, 3H, 5′-CH₃),
1,86 (td, J=4,0, 13,0, 13,0 Hz), 1H, 2′_ax-H),
2,03 (dd, J=4,4, 13,0 Hz, 1H, 2′_äq-H),
2,13 (dd, J=4,3, 14,9 Hz, 1H, 8_ax-H),
2,36 (ddd, J=1,6, 2,2, 14,9 Hz, 1H, 8_äq-H),
2,37 (s, 3H, COCH₃),
2,89 (dd, J=1,6, 18,2 Hz, 1H, 10_äq-H),
3,12 (d, J=18,2 Hz, 1H, 10_ax-H),
3,68 (dd, J=3,0, 8,0 Hz, 1H, 4′-H),
4,15.430 (m, 1H, 3′-H),
4,25 (q, J=6,5 Hz, 1H, 5′-H),
4,30 (s, 1H, 9-OH),
5,30 (dd, J=2,2, 4,3 Hz, 1H, 7-H),
5,47 (d, J=4,5 Hz, 1H, 1′-H),
6,70 (d, J=8,0 Hz, 1H, NHCOCF₃),
7,8-7,9 (m, 2H, 2-H, 3-H),
8,2-8,4 (m, 2H, 1-H, 4-H),
13,72 (s, 1H, 6-OH) 7(R) : 9(R)
FD-MS: m/z 579 (100, M^+. - COCH₃)
PMR (200 MHz, CDCl₃) unter anderem: delta
5,35 (m, 1H, 1′-H), 5,59 (dd, J=2,0, 3,5 Hz, 1H, 7-H). Beispiel 6 Herstellung von 4-Desmethoxy-11-desoxy-11-nitrodaunorubicin- hydrochlorid (XI) Produkt X (0,090 g, 0,145 mM) wurde wie in Beispiel 4 behandelt, wobei man (XI) (0,061 g, Ausbeute: 75%) erhielt. F: 212°C (Zersetzung)
IR (KBr): 3400, 2900, 1710, 1670, 1635, 1590, 1540 cm^-1
FD-MS: m/z 527 (MH⁺)
UV und sichtbare Spektren (MeOH) lambda max: 208, 222, 256, 402 nm Beispiel 7 4-Desmethoxy-6-desoxy-6-nitrodoxorubicin (III) Nach dem in US-PS 38 03 124 beschriebenen Verfahren wurde die Behandlung von 4-Desmethoxy-6-desoxy-6- nitrodaunorubicin-hydrochlorids (II), erhalten in Beispiel 4, mit Brom und dann mit Natriumformiat durchgeführt, wobei man 4-Desmethoxy-6-desoxy-6- nitrodoxorubicin (III), das als Hydrochlorid isoliert wurde, erhielt. Beispiel 8 4-Desmethoxy-11-desoxy-11-nitrodoxorubicin (XII) Nach dem in US-PS 38 03 124 beschriebenen Verfahren erfolgte die Behandlung von 4-Desmethoxy-11-desoxy-11- nitrodoxorubicin-hydrochlorid (XI), erhalten gemäß Beispiel 6, mit Brom und dann mit Natriumformiat, wobei man 4-Desmethoxy-11-desoxy-11-nitrodoxorubicin (XII), das als Hydrochlorid isoliert wurde, erhielt. Die Erfindung betrifft auch pharmazeutische Zusammensetzungen, die ein Anthracyclinglycosid der Formel (A′) oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon in Mischung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger oder Verdünnungsmittel enthalten. Eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel (A′) oder ein Salz davon können mit einem inerten Träger oder Verdünnungsmittel kombiniert werden. Die Verbindungen der Formel (A′) und deren Salze sind wirksam bei der Behandlung von menschlichen oder tierischen Körpern. Sie sind wirksame Antitumormittel, die in therapeutisch wirksamen Mengen einem Patienten zugeführt werden. Biologische Aktivitäten der Verbindungen XI und II Diese Verbindungen wurden im Vergleich zu Daunorubicin (DNR) gegen HeLa- und P388-Zellen in vitro getestet. Die Verbindungen wurden getestet, indem man die Hydrochloride in Wasser auflöste. Die in vivo-Wirkung der Verbindung (XI) gegen P388 ascitische Leukämie wird in Tabelle 1 gezeigt, Die Aktivität der Verbindungen (XI) und (II) wurde gegen desseminierte Cross-Leukämie geprüft. Die Ergebnisse werden in Tabelle 2 gezeigt. In diesem System waren die beiden neuen Verbindungen bei einer maximal getesteten Dosis (22,5 mg/kg von (XI), 50 mg/kg von (II)) aktiver als DNR bei der maximal tolerierten Dosis von 10 mg/kg. Wirkung gegen P388 ascitische Leukämiea a Die Versuche wurden mit CDF₁-Mäusen, die mit 10⁶ Leukämie-Zellen i. p. inokuliert wurden, durchgeführt.
b Behandlung i. p. am Tage 1 nach der Tumorinokulierung.
c Mittlere Überlebenszeit der behandelten Mäuse/mittlere Überlebenszeit der Kontrolle × 100.
d Bewertet aufgrund der Autopsiebefunde. Wirkung gegen Cross-Leukämiea a Die Versuche wurden mit CDF₁-Mäusen, die mit 10⁶ Leukämie-Zellen i. p. inokuliert wurden, durchgeführt.
b Behandlung i. p. am Tage 1 nach der Tumorinokulierung.
c Mittlere Überlebenszeit der behandelten Mäuse/mittlere Überlebenszeit der Kontrolle × 100
d Bewertet aufgrund der Autopsiebefunde.

Claims

1. Anthracyclinglycosid der allgemeinen Formel (A′) worin bedeuten: R¹ ein Wasserstoffatom, eine Hydroxygruppe oder eine Methoxygruppe; einer der Reste R² und R³ eine Hydroxygruppe und der andere der Reste R² und R³ eine Nitrogruppe; und R⁴ ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxygruppe; und pharmazeutisch annehmbare Salze davon.

2. Verbindung gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie als Hydrochloridsalz vorliegt.

3. Verbindung gemäss Anspruch 1, nämlich 4-Desmethoxy- 6-desoxy-6-nitrodaunorubicin-hydrochlorid.

4. Verbindung gemäss Anspruch 1, nämlich 4-Desmethoxy- 11-desoxy-11-nitrodaunorubicin-hydrochlorid.

5. Verbindung gemäss Anspruch 1, nämlich 4-Desmethoxy- 6-desoxy-6-nitrodoxorubicin-hydrochlorid.

6. Verbindung gemäss Anspruch 1, nämlich 4-Desmethoxy- 11-desoxy-11-nitrodoxorubicin-hydrochlorid.

7. Verfahren zur Herstellung eines Anthracyclinglycosids gemäss Ansprhch 1 oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon, dadurch gekennzeichnet, dass man ein Aglycon der allgemeinen Formel (B) worin R¹, R² und R³ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben, mit 1-Chlor-N,O-di(trifluoroacetyl)- daunosamin der Formel (C) unter Ausbildung einer Diastereomeren-Mischung von 7(S), 9(S) und 7(R), 9(R) Anthracyclinglycosiden der Formel (A″) worin R¹, R² und R³ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben, kondensiert;
die O-Trifluoroacetalgruppe entfernt;
das 7(S), 9(S) Anthracyclinglycosid von dem 7(R), 9(R) Anthracyclinglycosid abtrennt;
die N-Trifluoroacetyl-Schutzgruppe von dem 7(S), 9(S) Anthracyclinglycosid unter Erhalt einer Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Wasserstoff bedeutet, entfernt;
gewünschtenfalls die Verbindung der Formel (A′) in ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon überführt;
gewünschtenfalls die Verbindung der Formel (A′) oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon bromiert und das so erhaltene 14-Bromderivat unter Erhalt einer Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Hydroxy bedeutet, hydrolysiert; und
gewünschtenfalls die Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Hydroxy bedeutet, in ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon überführt.

8. Verfahren gemäss Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass die Kondensation des Aglycons der Formel (B) und des 1-Chlor-N,O-di (trifluoroacetyl)daunosamins in wasserfreiem Methylendichlorid unter einer Stickstoffatmosphäre und in Gegenwart von Silbertrifluoromethansulfonat durchgeführt wird; die o-Trifluoroacetylgruppen von der erhaltenen Diastereomeren-Mischung durch Behandeln mit Methanol entfernt wird; das 7(S), 9(S) Anthracyclinglycosid von dem 7(R), 9(R) Anthracyclinglycosid durch Chromatografie über Kieselgel abgetrennt wird; die N-Trifluoroacetalgruppe von dem 7(S), 9(S) Anthracyclinglycosid durch schwache alkalische Hydrolyse entfernt wird; die erhaltene Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Wasserstoff ist, als Hydrochlorid durch Behandeln mit Chlorwasserstoff in Methanol isoliert wird, und gewünschtenfalls das Hydrochlorid in eine Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Hydroxy bedeutet, durch Bromieren und Behandeln mit wässrigem Natriumformiat umwandelt und die Verbindung der Formel (A′), in welcher R⁴ Hydroxy ist, als Hydrochlorid durch Behandeln mit Chlorwasserstoff in Methanol isoliert.

9. Verfahren zur Herstellung eines Anthracyclinglycosids gemäss Anspruch 1 oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon, dadurch gekennzeichnet, dass man das Verfahren im wesentlichen gemäss den Beispielen 3 und 4 zusammen mit den Beispielen 5 und 6 bzw. Beispiele 3, 4, und 7 zusammen mit den Beispielen 5, 6 und 8 durchführt.

10. Pharmazeutische Zusammensetzung, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einem Anthracyclinglycosid gemäss Anspruch 1 oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon in Mischung mit einem pharmazeutisch annehmbaren Verdünnungsmittel oder Träger.

11. Verwendung eines Anthracyclinglycosids gemäss Anspruch 1 oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon für die therapeutische oder diagnostische Behandlung des menschlichen oder tierischen Körpers.

12. Verwendung gemäss Anspruch 11 zur Herstellung eines Antitumormittels.

13. Aglycon der Formel (B) gemäss Anspruch 7.

14. Verbindung gemäss Anspruch 13, nämlich (±) 4-Desmethoxy-6-desoxy-6-nitrodaunomycinon.

15. Verbindung gemäss Anspruch 13, nämlich (±) 4-Desmethoxy-11-desoxy-11-nitrodaunomycinon.

16. Verfahren zur Herstellung eines Aglycons gemäss Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, dass man selektiv die C-7- und C-9-Hydroxygruppen von (±) 4-Desmethoxy-6-desoxy-daunomycinon, (±) 6-Desoxydaunomycinon, (±) 4-Desmethoxy-11-desoxy- daunomycinon oder 11-Desoxydaunomycinon schützt, dass man den Ring (B) der so gebildeten Verbindung in p-Stellung zu dem Hydroxysubstituenten im Ring (B) nitriert, dass man die C-7- und C-9-Hydroxy-Schutzgruppen entfernt unter Erhalt eines Aglycons der Formel (B), in welcher R¹ Wasserstoff oder Methoxy bedeutet und gewünschtenfalls das Aglycon der Formel (B), in welcher R¹ Methoxy bedeutet, in ein Aglycon der Formel (B), in welcher R¹ Hydroxy bedeutet, überführt.

17. Verfahren gemäss Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass (±) 4-Desmethoxy-4-desoxydaunomycinon, (±) 6-Desoxydaunomycinon, (±) 4-Desmethoxy-11-desoxy- daunomycinon oder 11-Desoxydaunomycinon mit Essigsäureanhydrid und Pyridin bei 85 bis 90°C unter Acylierung aller freien Hydroxylgruppen umgesetzt wird, das so gebildete Triacetat selektiv mit 1 N Morpholin in Methanol bei 40°C während 5 Stunden hydrolysiert wird unter Erhalt des C-7-OH- und C-9-OH- Diacetats, dass man das Diacetat bei Raumtemperatur unter einer Stickstoffatmosphäre und kräftigem Rühren mit einem Überschuss von Trifluoressigsäureanhydrid/ Ammoniumnitrat in Methylenchlorid behandelt unter Erhalt des entsprechenden 6- oder 11-Nitroderivates; dass man die 7- und 9-Acetyl-Schutzgruppen von dem Derivat durch Hydrolyse in Tetrahydrofuran mit 0,1 N Natriumhydroxid bei Raumtemperatur unter einer Stickstoffatmosphäre entfernt unter Erhalt des gewünschten 6- oder 11-Nitroaglycons der Formel (B), in welcher R¹ Wasserstoff oder eine Methoxygruppe bedeutet; und dass man gewünschtenfalls das Aglycon chromatisch über Kieselgel reinigt.

18. Verfahren gemäss Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, dass das 6- oder 11-Nitroaglycon der Formel (B), worin R¹ eine Methoxygruppe bedeutet, einer milden 4-Dealkylierung mittels AlCl₃ in Nitrobenzol unterworfen wird, unter Erhalt des 6- oder 11-Nitroaglycons der Formel (B), in welcher R¹ eine Hydroxygruppe bedeutet.

19. Verfahren zur Herstellung eines Aglycons gemäss Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, dass man im wesentlichen das in den Beispielen 1 oder 2 beschriebene Verfahren durchführt.

20. Verbindung der Formel (A‴) worin R¹, R² R³ und R⁴ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben.