DE3630866C2 - Verfahren und Vorrichtung zur Aufbringung von Flüssigkeit auf einer dünnen Probe - Google Patents
Verfahren und Vorrichtung zur Aufbringung von Flüssigkeit auf einer dünnen ProbeInfo
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Description
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Vorrichtung
zur Behandlung von Proben, wie Histologie-, Zytologie-
oder Hämatologieproben, die auf einer geeigneten ebenen
Oberfläche, wie einem Objektträger, immobilisiert sind,
mit Flüssigkeiten, wie 1. chemischen Färbelösungen oder
2. gelösten Reagenzien, wie a) Antikörpern oder b) markierten
DNA- oder RNA-Sonden, wobei solche Reagenzien jeweils
für das Feststellen von Antigenen oder Nucleinsäuresequenzen,
die in der immobilisierten Probe vorhanden sind,
verwendet werden.
In der heutigen Histologie, Zytologie und Hämatologie verwenden
die meisten klinischen Laboratorien oder Forschungslaboratorien
manuelle Färbemethoden, die viele Stunden Technikerzeit
zur Durchführung erfordern. Diese Verfahren sind
gewöhnlich kostenwirksam, da große Ansätze von Objektträgern
gleichzeitig in einer einzigen Folge von Anfärbungen von
einem einzelnen Techniker gefärbt werden können. Sowohl manuelle
als auch automatisierte Systeme, die derzeit verwendet
werden, tauchen einen Halter, der parallele Objektträger
mit Gewebe oder Zellabstrichen, die auf einer ebenen Fläche
eines jeden Objektträgers immobilisiert sind, nacheinander
in eine identische Reihe von flüssigen Reagenzien, wie von
wäßrigen Reagenzien oder organischen Lösungen von Farbstoffen
oder Färbemitteln routinemäßig oder programmiert ein.
Beispiele manueller Färbesysteme für Histologie-, Zytologie-
und Hämatologieproben sind dem Histologen und Zytopathologen
bekannt, und Protokolle über ihre Leistung findet man in
jedem Laboratorium, das immobilisierte Proben anfärbt. Beispiele
automatisierter Systeme sind etwa jene, die von den
Firmen Technicon Instruments, Shandon Southern und Fisher
Scientific verkauft werden (siehe Seiten 426 und 427 des
Fisher-Kataloges 86 für eine Beschreibung des Fisher Histomatic®
Slide Stainer Model 172).
Kapillarwirkung wurde in dem folgenden Patent in einem Versuch
verwendet, in Masse automatisierte Objektträgeranfärbeverfahren
zu entwickeln. Die US-PS 41 99 613 (1980) beschreibt
ein System, bei dem ein Stapel paralleler Objektträger
nahe ihren beiden Enden von einer Reihe allgemein
paralleler Abstandshalter gehalten werden. Die Abstandshalter
liegen zwischen entsprechenden Enden benachbarter parallel
gestapelter Objektträger, so daß die ebenen Oberflächen
benachbarter Objektträger um die Dicke der Abstandshalter
voneinander beabstandet sind. Eine solche Dicke (z. B. 0,2 mm)
ergibt einen Abstand zwischen solchen einander gegenüberliegenden
ebenen Flächen benachbarter Objektträger, der
für Kapillarfluß ausreichend ist. Bei der Verwendung wird
ein Satz von Objektträgern (z. B. 50) in einem vertikalen
Stapel gehalten, und ein kontinuierlicher Flüssigkeitsstrom
(z. B. Anfärbelösung) fließt über benachbarte Kantenabschnitte
der Objektträger (beginnend mit dem obersten
Objektträger in dem vertikalen Stapel) und füllt nach und nach
die dünnen Spalte zwischen benachbarten Objektträgern. Das
Füllen erfolgt durch Kapillarfluß in horizontaler Richtung.
Überschüssige Flüssigkeit gegenüber jener, die erforderlich
ist, um die dünnen Spalte zu füllen, fließt von dem untersten
Objektträger ab. Dieses System ist dazu bestimmt, eine
Vielzahl von Objektträgern mit einer identischen Reihe von
Reagenzien anzufärben, was das gleiche Vorgehen ist, wie
es in den oben erwähnten manuellen und automatisierten
Anfärbeverfahren verwendet wird.
Auf dem Gebiet des Einschließens von Flüssigkeitsproben in
einem mikroskopischen Betrachtungsraum, welches nicht als
analog mit der Behandlung immobilisierter Proben mit flüssigen
Färbemitteln und Reagenzien angesehen werden kann, wird
auch oft Kapillarfluß angewendet. Wie in den US-Patentschriften
45 01 496 (1985) und 39 61 346 (1975) beschrieben
ist, wird allgemein eine flüssige Probe auf einer Bodenplatte
eingeführt und wandert durch Kapillarfluß in einen dünnen
Spalt, der von einer Betrachtungsfläche der Bodenplatte und
einer darüberliegenden klaren Platte gebildet wird. In der
US-Patentschrift 43 08 028 (1981) dagegen wird eine als
Streifen bezeichnete Einrichtung in vertikaler Erstreckung
in eine Probe, wie eine zentrifugierte Urinprobe, in einer
Röhre eingetaucht. Wie in Spalte 4, Zeile 53 bis Spalte 5,
Zeile 14 (siehe Fig. 6 und 7 der US-PS 43 08 028) beschrieben
ist, fließt ein an feinteiligen Stoffen reicher Anteil
von der Bodenfraktion der Probe durch Kapillarwirkung in
eine Kammer (als 14 in den Figuren der US-Patentschrift
identifiziert). An einer anderen Stelle dieser US-Patentschrift
ist die Konstruktion des Streifens durch Laminierung
mehrerer Schichten beschrieben (eine Mittelschicht ist kurz
und von definierter Dicke, wenigstens eine andere Schicht
ist lang und transparent) (Spalte 7, Zeilen 3 bis 45). Bei
der Betrachtung des Verfahrens wird die Probe in der Kammer
14 mit etwa der definierten Dicke ungefärbt und unbehandelt,
wie durch Fig. 22 der US-PS 43 08 028 gezeigt ist, durch
einen Teil einer langen transparenten Schicht betrachtet,
die sich über das Ende der kurzen Mittelschicht hinaus
erstreckt.
Aus der GB 2008270 A ist ein Verfahren zur Aufbringung von
Flüssigkeit auf einer dünnen Probe auf einer ersten Oberfläche
bekannt. Insbesondere wird ein Verfahren zum Einfärben von
Objektträgern beschrieben, bei dem die Oberflächen des Objektträgers
so zueinander angeordnet sind, daß sie einen Spalt bilden,
der sich mit Flüssigkeit aufgrund der Kapillarwirkung auffüllt,
wenn auf die Kante des Spaltes ein Flüssigkeitstropfen aufgebracht
wird. Die genannten Objektträger werden nach dem Stand der
Technik parallel angeordnet und übereinander gestapelt, wobei eine
Flüssigkeitsprobe von oben über den Stapel der Objektträger
vergossen wird.
Solche Objektträgeranordnungen haben insbesondere den Nachteil,
daß ihnen die zur Durchführung von komplizierteren Analysen
erforderliche Flexibilität fehlt. Die Aufgabe der vorliegenden
Erfindung liegt folglich insbesondere darin, hierzu Abhilfe zu
schaffen.
Die Lösung dieser Aufgabe mittels des erfindungsgemäßen Verfahrens
wird in den Ansprüchen näher definiert.
Nach einer weiteren Ausführungsform betrifft die Erfindung eine
Vorrichtung zur Durchführung des vorstehend genannten Verfahrens.
Die verschiedenen Methoden und Vorrichtungen nach der Erfindung
ermöglichen eine mehrstufige Behandlung einer dünnen
Probe oder von Material, die auf einer flachen Oberfläche
immobilisiert sind, mit dem Vorteil einer Einsparung teurer
Flüssigkeiten, einer Flexibilität im Variieren der Behandlungsflüssigkeiten
für gleichzeitig behandelte Proben oder
Materialien, einer Minimierung gegenseitiger Verschmutzung
von Proben, einer sicheren Verhinderung, daß toxische Reagenzien
mit Laborpersonal in Berührung kommen, oder einiger
Kombinationen dieser Faktoren. Bei dem vorliegenden Verfahren
erreicht man einen solchen Vorteil oder solche Vorteile
durch die Verwendung eines dünnen Kapillarspaltes vor der
die immobilisierte Probe enthaltenden Oberfläche, besonders
wenn der Spalt sich vertikal erstreckt, durch Berührung einer
Kante des Spaltes mit einem vereinzelten oder gesonderten
Anteil der Behandlungsflüssigkeit, besonders an der Basis
des sich vertikal erstreckenden Spaltes, oder durch die
anschließende Entfernung der Flüssigkeit durch Berührung
einer Kante des Spaltes mit einem Absorbensmaterial, besonders
der Bodenkante eines sich vertikal erstreckenden Spaltes,
oder besonders durch Kombinationen dieser Merkmale.
Solche Merkmale bieten besondere Vorteile gegenüber dem
Verfahren der US-PS 41 99 613, die nicht im Verbund einzelne
Objektträger mit einzelnen Reagenzien behandeln kann und
die im Gegenteil einen horizontal sich erstreckenden Spalt
verwendet, Flüssigkeit als kontinuierlichen Strom einführt
und Flüssigkeit durch Drehen der gesamten Objektträgeranordnung
entfernt.
Obwohl die vorliegende Erfindung für Massenanfärbung verwendet
werden kann, bei der eine Vielzahl von Objektträgern
in Reihe einer einzelnen Sequenz flüssiger Reagenzien ausgesetzt
wird, ist es gegenüber dem Stand der Technik besonders
vorteilhaft, wenn man die Erfindung für einen separaten Analysator
verwendet, in welchem einzelne Objektträger ihre
eigene Reihe von Reagenzien haben, die im Verbund auf sie
aufgebracht werden.
In jeder der ersten vier Formen der vorliegenden Erfindung
kann die zweite Oberfläche (oder Oberfläche des gegenüberliegenden
Elementes) auch eine dünne Probe oder Material
tragen, die bzw. das durch die gleiche Behandlungsflüssigkeit
wie die dünne Probe oder das Material auf der ersten
Oberfläche (oder Material tragenden ebenen Oberfläche) behandelt
wird. Außerdem oder alternativ kann ein Satz von
Objektträgeranordnungen
- a) mehrere vertikal sich erstreckende Objektträger, von denen jeder eine vertikal sich erstreckende Oberfläche hat,
- b) mehrere sich vertikal erstreckende Deckteile, von denen jedes eine sich vertikal erstreckende Oberfläche hat und jede Oberfläche eines vertikal sich erstreckenden Objektträgers in einem ersten Abstand von weniger als 0,5 mm von einer Oberfläche eines sich vertikal erstreckenden Deckteils beabstandet ist, und
- c) Eingriffeinrichtungen zum Halten der vertikal sich erstreckenden Objektträger und der vertikal sich erstreckenden Deckteile nahe ihren oberen Enden in einem ortsfesten Satz, wobei die Probenoberfläche eines jeden Objektträgers einen ersten Abstand von einer im wesentlichen parallelen Fläche eines vertikal sich erstreckenden Deckteils hat und die Unterkante eines jeden Objektträgers sich horizontal erstreckt und von einer im wesentlichen parallelen, horizontal sich erstreckenden Unterkante eines Deckteils um den ersten Abstand entfernt ist und wobei der Raum zwischen den horizontal sich erstreckenden Unterkanten offen ist, haben.
Die Erfindung liefert weiterhin in einer weiteren Ausführungsform eine
Einrichtung zum Halten eines horizontalen Satzes einzelner
Anteile von Behandlungsflüssigkeit mit
- a) einer horizontal sich erstreckenden starren Unterlage,
- b) einem horizontal sich erstreckenden elastomeren Teil mit einer im wesentlichen ebenen horizontal sich erstreckenden oberen Fläche und
- c) einer Vielzahl von Ausnehmungen in dem elastomeren Teil, wobei jede Ausnehmung sich zu der horizontal sich erstreckenden oberen Fläche hin öffnet
und wobei das elastomere Teil auf seiner oberen Oberfläche
ein mit der Behandlungsflüssigkeit ausreichend unverträgliches
Material hat, damit ein separater Anteil Behandlungsflüssigkeit
in einer Ausnehmung eine konvexe Form einnimmt,
die sich über die Ebene der benachbarten oberen Oberfläche
des elastomeren Teils erstreckt.
Wo die oben beschriebenen Systeme, wie beispielsweise GB 2008270,
in der Lage sind, eine spezielle Sequenz identischer Reagenzien
auf einen Satz ebener Oberflächen, wie von Objektträgern,
aufzubringen, haben solche bekannten Systeme nicht
die Flexiblität, im Verbund einzelne Objektträger mit eigenen
Reagenzien zu behandeln. Außerdem sind die Volumina,
die erforderlich sind, um die Objektträger in einen Behälter
wäßriger oder organischer Anfärbemittel einzutauchen, zu
groß, um spezielle Stufen komplizierterer Analysen von gewebe-
oder zellgebundenen Antigenen oder genetischen Sequenzen
durch auf Antikörper gerichtete Ermittlungstechnologie bzw.
Nucleinsäure-Hybridisierungs-Methodologien durchzuführen.
Jedes mehrstufige Verfahren, das solche speziellen Stufen
einschließt, kann nur durch die bekannten Systeme automatisiert
werden, indem man die anderen Stufen durchführt, den
Objektträgerzusammenbau auseinandernimmt, um die speziellen
Stufen manuell durchzuführen, und dann den Objektträgerzusammenbau
wieder zusammenfügt, um die anschließenden Stufen
automatisch durchzuführen. Solches Auseinandernehmen und
Zusammensetzen macht die Vorteile einer Automation für solche
komplizierten Analysen nichtig. Daher besteht ein
Bedarf, der durch die vorliegende Erfindung gedeckt wird, entweder
für manuelle oder für automatisierte Methoden, gleichzeitig
mehrere und separate Analysen mit Geweben oder Zellabstrichen,
die auf einzelnen Objektträgern immobilisiert
sind, unter Verwendung nur von Mikroliter Mengen teurer
Antikörper oder Nucleinsäuresonden durchzuführen.
Solche Methoden hätten ein weites Spektrum von Anwendungen
sowohl in klinischen Laboratorien als auch in Forschungslaboratorien,
die derzeit die Analyse getrennter oder separater
Antigeninformation oder genetischer Information durch
einzelne manuelle Verfahren durchführen.
In der Zeichnung haben die Figuren folgende Bedeutung:
Fig. 1A ist eine Seitenansicht einer Objektträgeranordnung
nach einer ersten Ausführungsform der Erfindung.
Fig. 1B ist eine Vorderansicht entlang der Linie 1B-1B in
Fig. 1A.
Fig. 1C ist eine Vorderansicht, entlang der Linie 1C-1C in
Fig. 1A geschnitten.
Fig. 2A ist eine Seitenansicht des auseinandergenommenen
Objektträgerpaares nach einer zweiten Ausführungsform
der vorliegenden Erfindung.
Fig. 2B ist eine Ansicht ähnlich Fig. 2A des gleichen
zusammengefügten Objektträgerpaares in einem Halterabschnitt
unter Bildung eines Objektträgerzusammenbaus.
Fig. 2C ist eine Draufsicht auf den Objektträgerzusammenbau
in einem Halter, geschnitten entlang der Linie 2C-2C
in Fig. 2B.
Fig. 2D ist eine Darstellung ähnlich Fig. 2B einer auseinandergenommenen
Objektträgeranordnung nach einer dritten
Ausführungsform der Erfindung.
Fig. 2E ist eine Darstellung ähnlich Fig. 2B der Objektträgeranordnung
von Fig. 2D in einem Halter.
Fig. 3A ist eine Seitenansicht, geschnitten entlang der Linie
3A-3A in Fig. 3B, eines Satzes von Objektträgeranordnungen
oberhalb einer Tröpfchenhaltereinrichtung
jeweils nach der zweiten Ausführungsform der
Erfindung.
Fig. 3B ist eine Draufsicht auf die Tröpfchenhaltereinrichtung,
die im Schnitt in Fig. 3A gezeigt ist, entlang
der Linie 3B-3B in Fig. 3A.
Fig. 3C ist eine vergrößerte Darstellung einer Objektträgeranordnung
in Berührung mit einem Tröpfchen aus einem
Winkel ähnlich dem von Fig. 3A und zeigt, wie Flüssigkeit
vertikal in den dünnen Spalt durch Kapillarfluß
nach den Methoden der vorliegenden Erfindung
gezogen wird.
Fig. 3D ist eine Ansicht ähnlich der von Fig. 3C, wobei
Flüssigkeit vertikal aus dem dünnen Spalt durch
Kapillarfluß in ein Absorbensmaterial gezogen wird.
Fig. 4 ist eine Vorderansicht im Schnitt ähnlich jener von
Fig. 1C und zeigt eine Objektträgeranordnung gemäß
einer vierten Ausführungsform der Erfindung.
Fig. 5 ist eine perspektivische Darstellung eines umgekehrten
Objektträgerhalters, teilweise gefüllt mit
Objektträgerpaaren, nach einer fünften Ausführungsform
der Erfindung. Diese unterscheidet sich von der in
Fig. 2A, 2B, 3A, 3B, 3C und 3D gezeigten Ausführungsform
nur dadurch, daß der Satz drei Reihen von
jeweils 10 Objektträgerpaaren statt fünf Reihen von
jeweils 5 Objektträgerpaaren aufweist.
Fig. 6 ist eine Draufsicht auf eine Anordnung von Stationen
entweder für ein manuelles oder für ein automatisiertes
mehrstufiges Verfahren unter Verwendung der
Objektträgerpaaranordnung von Fig. 5.
Fig. 7 ist eine perspektivische Darstellung eines teilweise
gefüllten Tröpfchenhalters nach der Ausführungsform
der Fig. 5 und 6.
Eine erste Ausführungsform einer Objektträgerpaaranordnung
ist in den Fig. 1A, 1B und 1C gezeigt. In Fig. 1A hat der
die Probe tragende Objektträger 10 eine probetragende Vorderfläche
12, eine erste Unterkante 14, eine Rückfläche 16
und eine Oberkante 18. Eine dünne Probe 20, wie eine 5 bis
10 µm dicke histologische Probe, wird auf einem unteren Teil
der Vorderfläche 12 aufgebracht. Angenommen, daß der Objektträger
75 mm hoch, 25 mm breit und 1 mm dick ist (Standardabmessungen
für Objektträger), kann die Probe ein 20 mm × 20 mm
großes Quadrat sein, das wenigstens 1,0 mm (z. B. 10 mm)
oberhalb der ersten Unterkante 14 angeordnet ist.
Angefügt an den oberen Teil der Vorderfläche 12 des ersten
Objektträgers 10 ist ein Abstandshalter 22, der in dieser
ersten Ausführungsform als beidseitig haftender Klebstreifen
einer Dicke von 0,2 mm (200 µm) gezeigt ist. Eine klebrige
Seite 24 des Abstandshalters 22 haftet an dem oberen Teil
der Vorderfläche 12 des ersten Objektträgers 10. Die gegenüberliegende
klebrige Seite 26 des Abstandshalters 22 haftet
an der Oberfläche 32 des gegenüberliegenden Elementes oder
Objektträgers 30. Bei dieser Ausführungsform ist der gegenüberliegende
Objektträger 30 auch ein mikroskopischer
Objektträger von 75 mm × 25 mm × 1 mm. Der Abstandshalter 22
hält den gegenüberliegenden Objektträger 30 in Ausrichtung
mit dem ersten Objektträger 10, so daß die gegenüberliegende
ebene Fläche 32 des gegenüberliegenden Objektträgers parallel
zu der Vorderfläche 12 und von dieser um die Dicke des
Abstandshalters 22 (200 µm) beabstandet ist, die zweite Unterkante
34 des gegenüberliegenden Objektträgers 30 koplanar
mit der ersten Unterkante 14 des ersten Objektträgers 10
ist, die Hinterfläche 36 des gegenüberliegenden Objektträgers
30 parallel zu den Flächen 32, 12 und 16 ist und die
Oberkante 38 des gegenüberliegenden Objektträgers 30 koplanar
mit der Oberkante 18 des ersten Objektträgers 10 ist.
Der Abstand von 200 µm ist im wesentlichen konstant zwischen
den inneren Kanten der Oberkanten 18 und 38 entlang den
vertikalen Längen der Vorderfläche 12 und der gegenüberliegenden
Fläche 32 und bis zu den inneren Kanten der ersten und
zweiten Unterkanten 14 und 34. Angenommen, daß der Klebstreifen
25 mm hoch ist (seine Breite kann die vollen 25 mm
Breite der Objektträger 10 oder 30 oder weniger sein, wie
beispielsweise 22 mm, wie gezeigt), dann wird ein Spalt 40
zwischen der Vorderfläche 12 und der gegenüberliegenden Fläche
32 gebildet. Dieser Spalt 40, der 50 mm hoch, 25 mm
breit und 0,2 mm (200 µm) dick ist, ist der Kapillarspalt,
der in dem Unterende 42 endet. Die Probe 20, die nur 5 bis
10 µm dick ist, hat keinen wesentlichen Einfluß auf die Dicke
des Spaltes 40, selbst in der Höhe der Probe 20. Ähnlich
haben andere Unvollkommenheiten, eingeschlossene Teilchen,
eine Winkelstellung der beiden Objektträger gegenüber der
parallelen oder andere Faktoren, die die Spalte 40 um weniger
als 20% beeinflussen (d. h. bewirken, daß der 200 µm
dicke Spalt bei einer Dicke zwischen 160 und 240 µm bleibt),
keinen nachteiligen Einfluß, und selbst größere Variationen
würden ihn nicht wesentlich nachteilig beeinflussen.
Obwohl die Grund- oder Durchschnittsdicke des Spaltes in
dieser ersten Ausführungsform 0,2 mm (200 µm) ist, sind weiterhin
Spalte so klein wie 0,05 mm (50 µm) oder so groß wie
0,5 mm (500 µm) zulässig, wobei die übrigen Abmessungen (wie
die Höhe) entsprechend der nachfolgenden Beschreibung im
Zusammenhang mit Fig. 4 eingestellt werden. Unter geeigneten
Umständen kann die Dicke des Spaltes von weniger als 50 µm
oder mehr als 500 µm auch geeignet sein.
Fig. 1B zeigt die gleiche Objektträgerpaaranordnung von
vorn. Der gegenüberliegende Objektträger 30 mit seiner Rückfläche
36 vorn bedeckt den ersten Objektträger 10 vollständig
von der Oberkante 38 bis zur Unterkante 34 der Fläche
30. Die klebrige Seite 26 des Abstandshalters 22 kann unter
dem oberen Teil des gegenüberliegenden Objektträgers 30 gesehen
werden; und die Probe 20, die auf dem Probenobjektträger
10 immobilisiert ist, kann unter dem unteren Teil des
gegenüberliegenden Objektträgers 30 zentriert gesehen werden.
Die genaue vertikale Ausrichtung, die in Fig. 1B gezeigt
ist, bei der keine Seite des ersten Objektträgers 10
über die entsprechende Seite des gegenüberliegenden Objektträgers
30 hinausragt, ist nicht kritisch. Fehlausrichtung
in einer solchen Richtung von 2 mm oder selbst 5 mm ist ohne
wesentlichen nachteiligen Einfluß. Außerdem brauchen, wie
oben ausgeführt, die Breiten nicht alle gleich zu sein (z. B.
25 mm).
Fig. 1C zeigt die gleiche Vorderansicht wie Fig. 1B, aber
nun im Schnitt, so daß man hinter den gegenüberliegenden
Objektträger 30 sieht. Die Vorderfläche 26 des Abstandshalters
22 nimmt 25 mm im oberen Teil der sichtbaren Oberfläche
ein. Der untere Teil, 50 mm × 25 mm, der Vorderfläche 12
des ersten Objektträgers 10 (unter dem Unterende 44 des
Abstandshalters 22) ist nun sichtbar. Es sind diese 50 mm ×
25 mm, die den Kapillarschlitz 40 ergeben. Die Probe 20
nimmt einen mittigen Teil von 10 × 10 mm innerhalb dieses
Abschnittes von 50 mm × 25 mm der eine Probe tragenden
Oberfläche 12 ein. Die Höhe des Schlitzes kann durch Verwendung
kürzerer oder längerer Stücke von Klebestreifen als
Abstandshalter eingestellt werden: z. B. 25 mm langer und
20, 30, 40 oder 50 mm langer (hoher) Klebestreifen.
Die Fig. 2A, 2B und 2C erläutern eine zweite Ausführungsform
einer Objektträgerpaaranordnung. Der erste Objektträger 10
mit einer ersten Unterkante 14, Vorderseite 12 und Probe
20 darauf ist identisch mit entsprechenden Elementen in Fig. 1A.
Der gegenüberliegende Objektträger 130 ist auch ein
mikroskopischer Objektträger von 75 mm × 25 mm × 1 mm mit der
gegenüberliegenden Oberfläche 132 und der zweiten Unterkante
134, doch ist nun der Abstandshalter 122 ein Deckglas von
40 mm × 25 mm (oder 22 mm) × 0,15 mm mit einem unteren Ende
144. Die erste Oberfläche 124 von 40 mm × 25 mm des
Abstandshalters 122 liegt zu dem oberen Abschnitt der Vorderfläche
12 des ersten Objektträgers 10 (und liegt beim Zusammenbau
gemäß Fig. 2B an diesem an). Die zweite Oberfläche
126 von 40 mm × 25 mm des Abstandshalters 122 ist auf den
oberen Abschnitt der gegenüberliegenden Fläche 132 des
gegenüberliegenden Objektträgers 130 geklebt.
Entlang der Hinterfläche 136 des gegenüberliegenden Objektträgers
130 sind obere und untere elastomere Vorsprünge 146
und 148 in der Form eines O-Ringes, zusammenpreßbarer flacher
Federn oder Rollen oder fester Schrauben vorgesehen,
die (nicht gezeigte) abgeschrägte obere Abschnitte haben
können.
In Fig. 2B ist das Objektträgerpaar von Fig. 2A zusammengebaut,
indem die Objektträger 10 und 130 parallel zusammengelegt
sind und ihre oberen Enden in eine Ausnehmung mit Abmessungen
von 30 mm Höhe, 26 mm Breite und 2,4 mm Dicke,
die in einem Halter 150 ausgebildet ist, eingeführt sind.
Die Ausnehmung öffnet sich nach unten und hat an ihrer Spitze
eine sich vertikal erstreckende Ausrichtfläche 156. Die
Oberkanten 18 und 138 des ersten Objektträgers 10 und das
gegenüberliegende Element 130 stoßen an die Ausrichtfläche
156 an. Vorsprünge 146 und 148 greifen in einen vertikal
sich erstreckenden, nach abwärts sich öffnenden Schlitz 152
in der Rückwand der im Halter 150 gebildeten Ausnehmung ein,
um so den oberen Abschnitt des gegenüberliegenden Elementes
130 und den gesamten Abstandshalter 122 gegen den oberen
Abschnitt des ersten Objektträgers 10 zu pressen. Diese Kombination
von Eingriffeinrichtungen bewirkt, daß der erste
Objektträger 10 und der gegenüberliegende Objektträger 130
parallel ausgerichtet werden mit einem Schlitz mit der Dicke
des Abstandshalters 122 (0,15 mm), der Breite der Objektträger
10 und 130 (25 mm) und der Höhe (35 mm), die nicht von
dem Abstandshalter 122 bedeckt ist. Die Unterkanten 14 und
134 liegen in der gleichen Höhe und sind voneinander von
im wesentlichen den gleichen Abstand wie die Dicke des
Abstandshalters 122, d. h. 0,15 mm, beabstandet.
Fig. 2C ist eine Draufsicht entsprechend Fig. 2B entlang
der Linie 2C-2C in Fig. 2B. In dieser Schnittdarstellung
sieht man den Vorsprung 148 im Inneren des Schlitzes 152,
der in den Objektträgerhalter 150 als ein nach unten offener
Schlitz in der Vertiefung geschnitten ist. Der Vorsprung 148
preßt gegen den Schlitz 152 und preßt den Abstandshalter
122 zusammen, der auf die Gegenseite des gegenüberliegenden
Elementes 130 geklebt ist. Dies seinerseits übt Druck auf
den oberen Bereich des ersten Objektträgers 10 aus, der an
seiner Stelle durch den Halter 150 gehalten wird. Auf diese
Weise werden der obere Abschnitt des gegenüberliegenden
Objektträgers 130 und des ersten Objektträgers 10 in Berührung
miteinander gehalten und vertikal nach unten aufgehängt.
Da der Schlitz 152 nach unten offen ist, kann der gegenüberliegende
Objektträger 130 und der erste Objektträger 10
leicht in die Ausnehmung in dem Halter 150 durch die
Führungswirkung des Schlitzes 152 auf die Vorsprünge 146 und
148 leicht eingeführt und aus diesem entfernt werden.
Fig. 2D und 2E erläutert eine dritte Ausführungsform, die
sich von derjenigen der Fig. 2A dadurch unterscheidet, daß
die Vorsprünge 146′ und 148′ nun im Inneren der Vertiefung
in dem Halter 150′ statt auf der Hinterfläche 136 des
gegenüberliegenden Elementes 130 liegen.
In der Fig. 2D blickt die probentragende Vorderfläche 12 des
eine Probe tragenden mikroskopischen Objektträgers 10 zu
einem zweiten eine Probe tragenden mikroskopischen Objektträger
130′ und dessen probetragender Oberfläche 132′. Eine
dünne Probe 20 auf dem eine Probe tragenden mikroskopischen
Objektträger 10 ist gegenüber der Probe 120′ auf dem
gegenüberliegenden probetragenden Objektträger 130′ vorhanden.
Gemäß Fig. 2E werden die probetragenden Objektträger 10 und
130′ an ihrer Stelle in der Ausnehmung im Halter 150′ durch
den Druck der elastomeren Vorsprünge 146′ und 148′ gehalten,
die gegen ihre oberen Abschnitte drücken. Der Abstandshalter
122′ liegt sandwichartig zwischen ihren oberen Abschnitten.
Die Probe 120′, die auf der probetragenden Oberfläche 132′
des zweiten probetragenden Objektträgers 130′ immobilisiert
ist, wird in dem Schlitz 40, der durch das enge Beieinanderliegen
der probetragenden Oberflächen gebildet ist, an ihrer
Stelle auf der von der Probe 20 gegenüberliegenden Seite
des Schlitzes 40 durch den Druck von Vorsprüngen 146′ und
148′ und den Halter an den oberen Abschnitten der beiden
probetragenden Objektträger 10 und 130′ gegen den Abstandshalter
122′ gehalten.
Die Fig. 3A und 3B zeigen, wie ein Satz von 25 Objektträgerpaaren
gemäß der vorliegenden Erfindung ausgerichtet und verwendet
werden kann. In Fig. 3A ist eine Reihe von fünf
Objektträgerpaaren gezeigt. In jedem Paar ist ein erster
Objektträger (10a, 10b, 10c, 10d, 10e) von einem zweiten oder
gegenüberliegenden Objektträger (230a, 230b, 230c, 230d und
230e) durch einen Abstandshalter beabstandet. Vertikale Ausrichtung
erhält man durch die Oberkanten (256a, 256b, 256c,
256d und 256e) von fünf Vertiefungen, die in der
Hinterfläche des Halters 250 ausgebildet sind.
So sind vertikal sich erstreckende Schlitze mit der Dicke
des Abstandshalters in jedem Objektträgerpaar ausgebildet,
wie oben in Bezug auf die Fig. 2A und 2B beschrieben ist,
und diese enden in unteren Räumen 42a, 42b, 42c, 42d und
42e jeweils zwischen fluchtenden ersten und zweiten Unterkanten
der ersten und gegenüberliegenden Objektträger 10a/
230a, 10b/230b, 10c/230c, 10d/230d und 10e/230e. Alle Sätze
von Unterkanten sind in einer gemeinsamen horizontalen Ebene
in einem festliegenden Abstand unterhalb der Unterfläche
des Halters 250.
Ein Tröpfchenhalter ist unterhalb dieser horizontalen Ebene
angeordnet und besteht aus einem starren Unterteil 62 und
einem horizontal sich erstreckenden elastomeren Teil 64.
Wie in Fig. 3A gezeigt ist, sind in dem elastomeren Teil 64
und durch dieses hindurchgehend fünf Löcher 66a bis 66e ausgebildet,
und diese Löcher sind mit getrennten Anteilen oder
Tröpfchen 68a bis 68e jeweils von definiertem Volumen, wie
150 µl, gefüllt. Wie nachfolgend eingehender beschrieben,
ragt jedes Tröpfchen 68a bis 68e über die obere Fläche des
elastomeren Teils 64 hinaus. Die Ausrichtung ist so, daß,
wenn der Objektträgerhalter 250 gesenkt wird, die unteren
Räume 42a bis 42e in Berührung mit den oberen Bereichen der
Tröpfchen 66a bis 66e treten. Die Tröpfchen werden normalerweise
von oben (z. B. mit einer Mikropipette) eingeführt,
können aber auch von unten mit Hilfe eines engen Durchgangs,
der in dem starren Unterteil 62 ausgebildet ist, eingeführt
werden. Eine perspektivische Darstellung eines analogen
Tröpfchenhalters ist in Fig. 7 gezeigt. Gemäß Fig. 3B kann
die Oberseite des elastomeren Teils 64 mit fünf Doppelreihen
von Tröpfchen 68a bis 68y und 69a bis 69y ausgebildet sein.
Blickt man auf die Profile von Objektträgern 10a bis 10e mit
gegenüberliegenden Objektträgern 230a bis 230e, so kann man
sehen, daß sie in Berührung mit den Tröpfchen 68a bis 68e
und 69a bis 69e stehen, wobei beispielsweise der untere Raum
42a die Tröpfchen 68a und 69a nahe den beiden Enden des
unteren Raumes 42a berührt.
Gerade wenn die eine Reihe von Objektträgerpaaren 10a/230a
bis 10e/230e die Tröpfchen 68a bis 68e und 69a bis 69e berühren,
können vier weitere Reihen von fünf Objektträgerpaaren
jeweils in dem Halter 250 ausgerichtet werden, um:
2. Tröpfchen 68f bis 68j und 69f bis 69j, 3. Tröpfchen 68k bis 68o und 69k bis 69o, 4. 68p bis 68t und 69p bis 69t bzw. 5. 68z bis 68y und 69u bis 69y zu berühren. Da die Unterkanten aller ersten Objektträger, gegenüberliegenden Objektträger und somit die unteren Räume in genauer Ausrichtung in einer gemeinsamen horizontalen Ebene gehalten werden können und das elastomere Teil 64 den gesamten Satz von Tröpfchen in genauer Ausrichtung in einer gemeinsamen horizontalen Ebene hält, kann man reproduzierbar jeden unteren Raum zwischen einer ersten und einer zweiten Unterkante eines ersten bzw. gegenüberliegenden Objektträgers mit zwei Tröpfchen in Berührung bringen. Außerdem ermöglicht, wie nachfolgend diskutiert, die Vereinzelung oder Trennung der Tröpfchen 68a bis 68y und 69a bis 69y eine Flexibilität bei den Behandlungsproben auf jedem ersten Objektträger entweder ähnlich oder verschieden gegenüber jedem anderen ersten Objektträger bezüglich der aufgebrachten Behandlungsflüssigkeit.
2. Tröpfchen 68f bis 68j und 69f bis 69j, 3. Tröpfchen 68k bis 68o und 69k bis 69o, 4. 68p bis 68t und 69p bis 69t bzw. 5. 68z bis 68y und 69u bis 69y zu berühren. Da die Unterkanten aller ersten Objektträger, gegenüberliegenden Objektträger und somit die unteren Räume in genauer Ausrichtung in einer gemeinsamen horizontalen Ebene gehalten werden können und das elastomere Teil 64 den gesamten Satz von Tröpfchen in genauer Ausrichtung in einer gemeinsamen horizontalen Ebene hält, kann man reproduzierbar jeden unteren Raum zwischen einer ersten und einer zweiten Unterkante eines ersten bzw. gegenüberliegenden Objektträgers mit zwei Tröpfchen in Berührung bringen. Außerdem ermöglicht, wie nachfolgend diskutiert, die Vereinzelung oder Trennung der Tröpfchen 68a bis 68y und 69a bis 69y eine Flexibilität bei den Behandlungsproben auf jedem ersten Objektträger entweder ähnlich oder verschieden gegenüber jedem anderen ersten Objektträger bezüglich der aufgebrachten Behandlungsflüssigkeit.
In Fig. 3C kann die Wirkung des Raumes 42a (zwischen der
ersten Unterkante 14a und der zweiten Unterkante 234a der
Objektträger 10a und 230a), der in Berührung mit einem Tröpfchen
in dem Loch 66a gebracht wird, gesehen werden. Eine
Kapillarsäule von Flüssigkeit 70a steigt in dem Kapillarschlitz
240 (ähnlich dem Schlitz 40 in Fig. 1A) durch Kapillarwirkung
hoch. Diese Wirkung wird durch die relative
Unverträglichkeit der Flüssigkeit mit der Oberfläche des elastomeren
Teils 64 verstärkt, d. h. daß das wäßrige Tröpfchen
von der hydrophoben Oberfläche des elastomeren Teils 64 abgewiesen
wird. Solche Unverträglichkeit (ersichtlich durch
die Tröpfchenbildung der Behandlungsflüssigkeit, wenn man
sie auf eine flache Oberfläche des für das Teil 64 verwendeten
Elastomermaterials gibt) bewirkt auch, daß die Tröpfchen
über der oberen Fläche des Teils 64 stehen.
Nachdem die Kapillarsäule 70a so weit gestiegen ist, wie
die Kapillarwirkung dies zuläßt (typischerweise etwa 30 bis
40 mm in dem gezeigten Schlitz von 0,15 mm), kann die
Objektträgeranordnung mit dem Halter 250 von dem Elastomerteil
64 weg angehoben werden. Jedes Objektträgerpaar (z. B. 10a/
230a) erhält durch Kapillarwirkung die von den Tröpfchen (z. B.
68a und 69a), mit denen ihr unterer Raum (z. B. 42a) in
Berührung gebracht wurde, aufgenommene Behandlungsflüssigkeit.
Nachdem die Flüssigkeit in dem Spalt während einer
erwünschten Zeitdauer geblieben ist, wird nun die Objektträgeranordnung
auf ein Absorbensmaterial 72 gesenkt, wie in
Fig. 3D gezeigt ist. Da die Flüssigkeit mit dem Absorbensmaterial
72 verträglicher als mit den Oberflächen der Objektträger
10a und 230a ist, fällt nun die Kapillarsäule 70a,
wobei sich die Behandlungsflüssigkeit nach unten und außen
als eine Flüssigkeitsfront 74a in dem Absorbensmaterial 72
ausbreitet. Innerhalb von Sekunden ist das Objektträgerpaar
im wesentlichen vollständig von Flüssigkeit durch solche
Kapillarwirkung befreit, vielleicht mit Ausnahme von kleinsten
Mengen, die an der Probe oder anderen hygroskopischen
Oberflächen entlang dem Objektträgerspalt 42 oder an Unterkanten
14a und 234a anhaften können. Wenn die Flüssigkeit
aus dem Objektträgerspalt 240 entfernt ist, kann nun das
Objektträgerpaar zu einem anderen Tröpfchenhalter oder zu
einem Bogen oder Bad von Behandlungsflüssigkeit für die
nächste Stufe bewegt werden.
Fig. 4 erläutert in ähnlicher Darstellung wie in Fig. 1C
eine Ausführungsform der Erfindung, bei der drei vertikal
sich erstreckende Proben tragende Oberflächen auf einem
Objektträger von 75 mm × 25 mm ausgebildet sind. Der Objektträger
erstreckt sich horizontal mit seiner Unterkante 314
von 75 mm. Zwei äußere Abstandshalter 322 von 25 mm Höhe,
2 mm Breite und 0,25 mm Dicke erstrecken sich vertikal auf
der Vorderfläche (75 mm × 25 mm). Zwei innere Abstandshalter
322′ haben ähnliche Messungen von 25 mm × 2 mm × 0,25 mm
und sind gleichermaßen von den Endabstandshaltern 322 beabstandet
und parallel zu diesen. Solche Abstandshalter 322
und 322′ können durch Aufbringung eines hitzehärtbaren Materials
(wie Epoxy- oder Siliconharz) auf der Fläche eines
Glasobjektträgers ausgebildet werden. Die unbedeckten und
isolierten Flächen sind daher 312a, 312b und 312c, von denen
sich jede von einer Unterkante 314 aus 25 mm aufwärts erstreckt
und etwa 22,33 mm breit ist. Ein Gegenobjektträger
kann über diesen ersten Objektträger gelegt werden, so daß
Spalte von 0,25 mm Dicke, 25 mm Höhe und 22,33 mm Breite
über Flächen 312a, 312b und 312c gebildet werden. Durch
Inberührungbringen des unteren Raumes einer jeden solchen
Fläche, die nahe der Unterkante 314 ist, durch eine
Behandlungsflüssigkeit und dann durch ein Absorbensmaterial kann
flüssiges Reagenz, wie oben beschrieben, in jeden Spalt und
aus jedem Spalt gezogen werden. Ein solches Objektträgerpaar
kann auf Tröpfchen oder einem Bad oder einer Fläche von
Behandlungsflüssigkeit manuell aufgebracht werden.
Statt dessen kann eine Reihe solcher horizontal sich erstreckender
Objektträgerpaare, jedes mit drei vertikal sich erstreckenden
Kapillarspalten, in einem Halter beispielsweise
unter Verwendung des in Fig. 1 der US-PS 41 99 613 gezeigten
Objektträgerrahmens mit einer solchen Abwandlung gehalten werden,
wie sie erforderlich ist, um die Unterkanten 314 eines jeden
für eine Berührung durch Tröpfchen oder Flächen von Behandlungsflüssigkeit
verfügbaren probetragenden Objektträgers
zu entlassen. Die "Abstandshalter" nach dieser US-Patentschrift
in dieser Ausführungsform wären nicht zwischen einem
Probenobjektträger und seinem Gegenobjektträger angeordnet,
um die Bildung des Kapillarspaltes zwischen ihnen zu unterstützen,
sondern sie wären eher an beiden seitlichen Enden
und auf der Außenfläche der probentragenden Objektträger
angeordnet, indem man sie durch Zusammenpressen des Gegenobjektträgers
und des probentragenden Objektträgers gegen oben
beschriebene Abstandshalter 322 preßt. Bei dieser Ausführungsform
wären die Abstandshalter 322 und 322′ in Fig. 4
die einzigen Teile, die den ersten Abstand des Kapillarspaltes
zwischen dem Gegenobjektträger und dem probetragenden
Objektträger definieren.
Die Dicke der Seitenwände der Vertiefung in dem Halter würde
dann einen zweiten Abstand definieren, der parallele Paare
von Gegenobjektträgern und probetragenden Objektträgern
trennt. Dieser zweite Abstand ist nicht für Kapillarwirkung
bestimmt und trennt Sätze von Objektträgerpaaren so, daß
flüssige Reagenzien in sie über den Kapillarspalt von separaten
Tröpfchen wie in den Fig. 3A und 3B aufwärts gezogen
werden können. Dieser zweite Abstand kann von irgendeiner
Dicke größer als 2 mm sein, was wesentlich dicker als die
200 µ der Abstandshalter gemäß der obigen US-Patentschrift
oder der in diesem Patent beschriebenen Abstandshalter ist.
Die bevorzugte Länge dieses zweiten Abstandes und daher die
bevorzugte Dicke der die Grenzen einer nach unten offenen
Objektträgervertiefung in dem Objektträgerhalter bildenden
Seitenwände liegt im Bereich von 5 bis 7 mm. Bei Verwendung
dieses Bereiches kann die größte Zahl von Objektträgern in
einen Objektträgerhalter zum Zweck des Hochziehens, Inkubierens
und Entfernens flüssiger Reagenzien aus den Kapillarspalten
zwischen benachbarten Objektträgerpaaren eingefügt
werden.
Dieser Bereich des zweiten Abstandes erlaubt es, daß benachbarte
Kapillarspalte, wie 42a und 42b in Fig. 3A, 7 bis
9 mm voneinander entfernt gehalten werden. In diesem Abstand
können einzelne Tröpfchen in dem Tröpfchenhalter, wie 68a
und 68b sowie 69a und 69b, die in Fig. 3B abgebildet sind,
ohne gegenseitige Verunreinigung durch unbeabsichtigtes
Überwinden der Unverträglichkeit der Oberfläche des Elastomerteils
64 und der einzelnen Tröpfchen in dem Tröpfchenhalter
voneinander beabstandet gehalten werden. Ein solcher
Vorteil wäre nicht möglich mit dem Objektträgergestell gemäß
der US-PS 41 99 613, wo 200 µ zu nahe sind, um einander
benachbarte Reagenztröpfchen auf dem Tröpfchenhalter beständig
getrennt zu halten. Daher müßte dieser Objektträgerhalter
gegenüber seiner ursprünglichen Beschreibung vollständig
und wesentlich verändert werden, um die Vorteile der Erfindung
zu erreichen.
Um zu bewirken, daß die Flüssigkeit 15 bis 20 mm über die
Unterkante 314 steigt, kann der Spalt (Dicke der Abstandshalter
322 und 322′) dicker als die Dicke von 0,15 bis 0,20 mm
sein, die in den vorherigen Ausführungsformen am meisten
bevorzugt ist, wo Flüssigkeit 25 bis 45 mm über die Unterkante
14 steigen soll. Durch Routineexperimente kann der
Spalt so eingestellt werden (durch Verändern der Abstandshalterdicke),
daß man das erwünschte vertikale Ansteigen
von Flüssigkeit für irgendeine probetragende Objektträgeroberfläche
bekommt.
Fig. 5 zeigt einen teilweise mit Objektträgerpaaren gefüllten
Halter nach einer fünften Ausführungsform der vorliegenden
Erfindung. Diese unterscheidet sich von der zweiten Ausführungsform,
die besonders in den Fig. 3A und 3B gezeigt
ist, dadurch, daß drei Reihen von 10 Objektträgerpaaren
statt fünf Reihen von fünf Objektträgerpaaren vorgesehen
sind.
Der Hauptkörper 450 des in Fig. 5 gezeigten Objektträgerhalters
ist wie ein rechteckiger Körper mit, wie nachfolgend
beschrieben, einer Reihe von Schlitzen geformt, die in seiner
unteren Fläche zur Aufnahme von Objektträgerpaaranordnungen
ausgebildet sind.
Alternativ können die Objektträgerpaare in einem Halter gehalten
werden, wo die Reihe von an seiner unteren Fläche
gebildeten Schlitzen zusammenfallbar ist und auf den oberen
Bereichen der Objektträgerpaaranordnungen abgedichtet werden
kann, indem man beispielsweise eine wesentliche Abwandlung
des Objektträgergestelles nach Fig. 1 der US-PS 41 99 613
verwendet, in welcher die "Abstandshalter" wesentlich dicker
sind und verwendet werden, um Objektträgerpaaranordnungen
zu trennen und nicht Kapillarwirkung zu erzeugen.
Da der Objektträgerhalter in Fig. 5 gegenüber seiner Verwendung
umgedreht ist, um die Objektträgerpaare einzusetzen,
erscheint die Bodenfläche oben. In der folgenden Beschreibung
werden die relativen Positionen bei der Verwendung (z. B.
Schlitze in der Bodenfläche) beschrieben.
Eine Platte 451 ist oberhalb des Hauptkörpers 450 (als ein
Flansch) in beiden horizontalen Richtungen so, daß sie einen
größeren rechteckigen Querschnittsbereich als der rechteckige
Querschnittsbereich des Hauptkörpers 450 bedeckt. Ein
Arm 476 erstreckt sich vertikal aufwärts von einer Seite
der Platte 451 mit zwei angewinkelten Abschnitten 478 und
480. Ein ähnlicher Arm 476 mit angewinkelten Abschnitten
478 und 480 erstreckt sich vertikal aufwärts von der entgegengesetzten
Seite der Platte 451, ist aber den Blicken verborgen.
Eine horizontale Stange 482 verbindet die beiden
Arme 476.
In die Bodenfläche des Hauptkörpers 450 eingeformt sind zehn
lange Schlitze, von denen sich jeder vertikal und in einer
horizontalen Richtung 90° bezüglich des horizontalen Stabes
482 erstreckt. Diese zehn langen Schlitze sind jeweils durch
Trennwände in drei Schlitze, insgesamt also 30 Schlitze,
unterteilt. Die nächsten drei Schlitze sind mit 455j, 455t
und 455dd in Fig. 5 bezeichnet, wobei ein jeder solcher
Schlitz an den nahen Ende einer Reihe von zehn Schlitzen
liegt. Eine Probe tragende Objektträger 10a, 10k und 10u
erstrecken sich aus den Schlitzen an dem abgelegenen Ende
jeder der drei Reihen heraus. Wie durch den Gegenobjektträger
430u erläutert ist, ist ein Gegenobjektträger mit jedem
eine Probe tragenden Objektträger in einem gemeinsamen
Schlitz eingesetzt. Die Bodenkanten eines jeden probentragenden
Objektträgers und die benachbarten Gegenobjektträger
definieren ein unteres Ende eines Spaltes, das als unteres
Ende 442a, 442k und 442u für die Objektträger 10a, 10k bzw.
10u gezeigt ist. Jedes einzelne Objektträgerpaar erscheint
im Querschnitt im wesentlichen, wie in Fig. 2B gezeigt ist.
Wenn 30 probetragende Objektträger zu behandeln sind, dann
werden die in Fig. 5 gezeigte Schlitze (bis zu den Schlitzen
455j, 455t und 455dd) gefüllt, und der gesamte
Objektträgerhalter wird umgedreht. Um die Bedeutung der verschiedenen
Objektträger zu behalten, können visuell oder maschinell
lesbare Indices vorhanden sein oder aufgebracht werden
(z. B. auf einem vereisten Abschnitt eines jeden Objektträgers
an einer von der Probe entfernten Stelle), um so vor
und nach der Behandlung gelesen zu werden, oder (wenn die
Indices geeignet angebracht sind, wie gerade oberhalb der
Probenstelle) auch während die Objektträger sich in dem Halter
befinden. Außerdem kann der Halter mit Indexnummern versehen
werden, um die Lokalisierung der einzelnen Objektträger
zu erleichtern, ohne sie aus dem Halter zu nehmen, und
um die Reagenzhandhabung zu erleichtern, indem man entsprechende
Nummern hat, die die speziellen Löcher in dem Tröpfchenhalter,
der in den Fig. 3B und 7 abgebildet ist, bezeichnen,
womit jeweils eine Objektträgerpaaranordnung
zusammenwirkt.
Der Halter wird dann in einer Klammer mit der Breite des
horizontalen Stabes 482 entlang abgewinkelter Abschnitte 478
von Armen 476 gesenkt, bis die Objektträgeranordnung von
dem Eingriff der Klammer mit dem horizontalen Stab 482 und
den Armen 476 gehalten und ausgerichtet (vertikal und horizontal)
ist. Die Maschine kann nun die Anordnung durch eine
Reihe von Stationen führen, wie nachfolgend beschrieben ist.
Alternativ kann der horizontale Stab 482 des Halters manuell
in Eingriff gebracht und dabei vorgerückt werden.
Fig. 6 zeigt eine Draufsicht auf das Innere eines automatisierten
Systems für die Durchführung der vorliegenden Erfindung.
Sie ähnelt dem Inneren eines Histomatik® Slide Stainer
(Modell 172), wie er auf Seite 426 des Fisher 86-Kataloges
(Fisher Scientific 1985) erläutert ist.
Fig. 6 erläutert eine Gruppe von Stationen, in die der
Objektträgersatz von Fig. 5, wenn er einmal vollständig zusammengebaut
ist, nacheinander, wie nachfolgend beschrieben
ist, eingetaucht werden kann. Die Stationen 1 bis 6 (Bezugszeichen
501 bis 506) enthalten in dieser Anordnung Anfärbebehälter
der allgemeinen Art, wie sie bisher mit dem Histomatic®
Slide Stainer, Modell 172 (115 V, 60 Hz) verwendet
wurde. Siehe Fisher 86-Katalog, Seite 426 und 427 (Fisher
Scientific 1985). Jeder Behälter enthält einen Flüssigkeitsvorrat
(Xylol, Ethanol, Ethanol/Wasser-Gemische oder destilliertes
Wasser, wie angegeben), wobei der obere Querschnitt
größer als die Gruppe der Unterkanten von Objektträgerpaaren
in Fig. 5 ist. Eine solche Geometrie gestattet, daß die
Gruppe mit jedem Flüssigkeitsvorrat in Berührung kommt, ohne
eine Behälterkante zu berühren. Ähnlich enthalten die Stationen
8 (Bezugszeichen 508), 10 (Bezugszeichen 510), 12
(Bezugszeichen 512) und 17 (Bezugszeichen 517) Anfärbebehälter
mit der nachfolgend angegebenen Zusammensetzung.
Die Station 7 (Bezugszeichen 507) ist eine Naßkammer, die
mit einem elektrischen Standarderhitzer auf 37°C ± 5°C
(einmal eingeschlossen, wie nachfolgend beschrieben) und
mit Wasserdampf gesättigt gehalten wird, da ein Wasservorrat
in der Kammer unter der Höhe angeordnet ist, die durch die
unterste horizontale Fläche der Objektträgergruppe erreicht
wird. Das obere Ende der Naßkammer hat horizontale Abmessungen
(rechteckig oder quadratisch) größer als die Objektträgergruppe
in Fig. 5, aber kleiner als der Flansch 451 in
Fig. 5. Wenn demnach die Objektträgergruppe 450 in Fig. 5
in die Naßkammer in der Station 7 (Bezugszeichen 507) gesenkt
wird, vervollständigt der Flansch 451 (in Fig. 5 gezeigt)
die Einfassung der Naßkammer.
Die Stationen 9 und 11 enthalten trockene Löschblätter, wie
aus Papier, Baumwolle oder einem Superabsorbens-Gazekissen
mit genügend hohen Oberflächen und Anordnungshöhen, um
gleichzeitig in Berührung mit den unteren Räumen (siehe 42a
in Fig. 2D) der Objektträgergruppe zu stehen, wenn die Gruppe
in die geeignete Station gesenkt wird. Die Objektträgergruppe
kann in einem solchen Fall das saugfähige Material
oder Löschblattmaterial über einen kurzen Abstand
zusammenpressen.
Die Stationen 13, 14, 15 und 16 (Bezugszeichen 513, 514,
515 und 516) enthalten Tröpfchenhalter ähnlich den Elementen
62 und 64 in den Fig. 3A und 3B mit der Ausnahme, daß die
Löcher und Tröpfchen in drei Doppelreihen von jeweils 10
angeordnet sind. So berührt in der Station 13 (Bezugszeichen
513) die obere Reihe von zehn Objektträgern gleichzeitig
Tröpfchen 468a bis 468j und 469a bis 469j in der oben für
die Tröpfchen 68a bis 68e und 69a bis 69e beschriebenen Weise,
wie in den Fig. 3A und 3B. Die zweite Doppelreihe, die
mit den Tröpfchen 468k und 469k beginnt, wird gleichzeitig
von den unteren Räumen der zweiten Reihe von zehn Objektträgerpaaren
berührt. Die dritte Doppelreihe, die mit den
Tröpfchen 468u und 469u beginnt und mit den Tröpfchen 468dd
und 469dd endet, wird gleichzeitig von der dritten Reihe
der zehn Objektträgerpaare berührt, wenn die Objektträgerpaargruppe
in die Station 13 (Bezugszeichen 513) gesenkt
wird.
In ähnlicher Weise enthalten die Stationen 14 (Bezugszeichen
514), 15 (Bezugszeichen 515) und 16 (Bezugszeichen 516) jeweils
einen Tröpfchenhalter, von denen jeder in genauer Ausrichtung
drei Doppelreihen von zehn Tröpfchen (60 Tröpfchen
in jeder Station) hält. Die untere Reihe in Fig. 6 ist als
Tröpfchen 569u bis 569dd in Station 14, 669u bis 669dd in
Station 15 und 769u bis 769dd in Station 16 identifiziert.
Die Station 18 (Bezugszeichen 518) ist in der in Fig. 6 gezeigten
Gruppe leer. Wenn zusätzlich Behandlungsstufen erwünscht
sind, können sie einen Anfärbebehälter, einen Tröpfchenhalter
oder ein Temperaturbad, wenn zweckmäßig, ähnlich
der oben beschriebenen anderen Station enthalten.
Der Wäscher 519 ist eine Standardeinrichtung zum Waschen
von Objektträgergruppen, der bei dem Histomatik® Slide
Stainer Modell 172 vorgesehen ist. Er ist entweder für einmaligen
Durchgang von Spülflüssigkeit oder Rückführung von
Behandlungsflüssigkeit ausgestattet. Die letztere Weise wird
allgemein bei der vorliegenden Erfindung verwendet. Beim
tatsächlichen Arbeiten wird diese Einrichtung durch ein
Solenoid modifiziert, um einen Rückführfluß von Spülflüssigkeit
nur dann zu bekommen, wenn die Objektträgergruppe in
dem Wäscher sich befindet, und um statt eines kontinuierlichen
Ablaufs keinen Ablauf zu bekommen, wenn die Maschine
im Durchfluß arbeitet. Der Trockner 520 ist eine Station,
die bei der vorliegenden Erfindung allgemein nicht verwendet
wird (wegen der Verwendung der Aufsaugstationen 509 und
511), doch ist er vorzugsweise vorhanden, so daß das Instrument
auch für herkömmliches Anfärben von Objektträgern verwendet
werden kann, die vertikal sich erstreckend und durch
einen Abstand größer als 0,5 mm (z. B. 2,0 mm) voneinander
getrennt angeordnet sind, wenn man einen Standardobjektträgerhalter
mit 40 Stellen benutzt, wie er mit dem obigen
Modell 172 Slide Stainer im Handel angeboten wird.
Die Flexibilität der Erfindung wird durch die Tatsache erläutert,
daß alle Anfärbebehälter, Tröpfchenhalter und Naßkammern
nach Wunsch des Verwenders vollständig entfernbar
und austauschbar sind. Daher können beispielsweise die
Tröpfchenhalter der Station 13, 14, 15 und 16 (Bezugszeichen
513, 514, 515 und 516 von Fig. 6) leicht ersetzt werden,
selbst wenn das Instrument läuft, und zwar durch eine flache
übliche Reagenzwanne, um alle Objektträgerpaaranordnungen
mit einem identischen Reagenz zu behandeln, oder durch ein
zusätzliches Aufsaugmaterial, um sie zu entleeren, oder
durch eine Naßkammer, um sie zu inkubieren. Die Flexibilität
des vorliegenden Verfahrens wird weiter durch die folgende
erläuternde Methode zum Anfärben von Gewebeabschnitten bezüglich
antigener Stellen für Antikörper erläutert. Die folgende
Versuchsaufzeichnung des Anfärbeverfahrens bezieht
sich auf die Bezugszeichen in Fig. 6, wie sie oben beschrieben
sind. Auf die Versuchsaufzeichnung folgt eine Diskussion
der verschiedenen Einzelstufen und eine Diskussion, wie das
Verfahren modifiziert würde, um drei unterschiedliche
Markierungstypen zu verwenden. Avidin-biotinbehandelter
Meerrettichperoxidasekomplex, alkalische Phosphatase, vernetzt,
um Antimausantikörper anzuzeigen, und als Anfangssonde, entweder
ein primär biotinbehandelter heterologer pimärer Antikörper,
ein unmarkierter monoclonaler Antikörper oder ein DNA-
oder RNA-Strang, vernetzt mit Biotin in der Weise gemäß EP
0063879 A2 oder WO 84/04970 A1. Siehe auch Proc. Nat. Acad. Sci.,
Band 80, Seiten 4045 bis 4049 (1983); Virology, Band 126,
Seite 32 bis 36 (1983).
Das Anfärbeverfahren beginnt mit dünnen (z. B. 5 µm dick)
Gewebescheiben, die von Gewebeblöcken geschnitten werden,
die mit Formalin fixiert und dann in Wachs eingebettet wurden,
wie mit dem Histomatik® Modell 266 MP Tissue Processor
(Fisher Scientific) (siehe US-PS 41 41 312). Für jeden
Fall ist nachfolgend die Zahl, die Station (und das entsprechende
Bezugszeichen in Fig. 6), die Zeit und Lösung oder
andere Behandlung angegeben.
Bei Betrachtung des obigen Gesamtverfahrens schließen die
Fälle 1 bis 7 und 9 bis 12 eine Entfernung des Wachses und
eine Umwandlung in ein wäßriges gepuffertes Medium ein. In
jenen Fällen, bei denen gefrorene Proben in Scheiben zu dünnen
Proben geschnitten wurden, sind die Stufen 1 bis 7 und
9 unnötig (da kein Wachs vorhanden ist). Das oberflächenaktive
Mittel wurde in den Stufen 10, 11 und 12 eingeschlossen,
um den Kapillarfluß der viskoseren Flüssigkeiten, die
folgen, zu erleichtern. Die Stufe 8 ist die Stufe, die verwendet
wurde, um die Aktivität von endogener alkalischer
Phosphatase in dem Gewebe zu blockieren. Wenn ein anderes
Enzym verwendet wurde (d. h. in Stufe 20), würde eine andere
Behandlung zum Blockieren von endogenem Enzym verwendet.
Für Peroxidase als das Enzym in der Stufe 20 könnte absolutes
Methanol mit 0,9% Wassertoffperoxid als die Lösung in
der Station 18 für Stufe 8 benutzt werden. Saurer Alkohol
in der Station 12 würde auch in der Stufe 29 benutzt werden.
Zur Verarbeitung gefrorener Abschnitte werden die Scheiben
zunächst 10 min in kaltem Aceton fixiert und dann 0,01%igem
Triton X-100 in destilliertem Wasser 0,6 min (Station 10)
ausgesetzt, 0,6 min (Station 11) wird aufgesaugt, sodann
wird mit saurem Alkohol behandelt, um die Aktivität von endogenem
alkalischem Phosphataseenzym zu blockieren (Station
12), und dann wird das restliche Anfärbeprogramm durchgeführt,
das oben aufgezeichnet ist, beginnend mit Stufe 13.
Wie bereits gesagt, werden die Stufen 13 und 14 allgemein
für die meisten Antigene von Interesse im Gewebe nicht benötigt,
würden aber für schwer zugängliche Antigenmarkierungen,
wie gewebegebundene Immunoglobuline, Keratin, Viralantigene,
wie Cytomegalovirus-, Adenovirus- und Hepatitis-B-
Virus-Oberflächen- und Kernantigene und für Verfahren unter
Verwendung von Nucleinsäuresonden benutzt werden.
Die Stufe 15 umfaßt die Aufbringung eines allgemeinen Proteins,
um an den nichtspezifischen proteinbindenden Stellen
zu haften, die sich in den meisten Gewebeproben finden. Wenn
es nicht möglich ist, diese Stellen zu blockieren, so gibt
dies einen unerwünschten Hintergrund infolge des nichtspezifischen
Anhaftens des primären Antikörpers oder von Avidin-
oder Biotin-Enzymkonjugat in den Stufen 17 und 20. Wenn
ein sekundärer Antikörper in der Stufe 20 verwendet wird
(z. B. mit alkalischer Phosphatase konjugierter Ziegen-Anti-
Maus-Immunoglobulin-Antikörper in Fällen, wo der primäre
Antikörper unmarkierter monoclonaler Maus-Antikörper ist)
anstelle eines Komplexes von Avidin-Biotin-alkalischer Phosphatase,
kann die Blockierwirkung nichtspezifischer Proteine,
wie von Gelatine, in der Stufe 15 unzureichend sein,
um nichtspezifische Bindung des sekundären Antikörpers auszuschließen.
Demnach kann man normales (unsensibilisiertes)
Serum der gleichen Art wie der sekundäre Antikörper, der
in Stufe 20 verwendet wird, benutzen (d. h. unsensibilisiertes
Ziegenserum in dem erläuterten Fall). Für DNA-Sondenarbeit
kann es erwünscht sein, nichtspezifischen DNA sowie
Protein in Stufe 15 aufzubringen.
Die Stufe 17 liefert den primären Antikörper, der verwendet
wird, um die antigenen Stellen von Interesse zu treffen.
Allgemein ist er biotinmarkiert, doch wenn ein zweiter Antikörper
in der Stufe 20 verwendet wird, dann kann unmarkierter
Antikörper in der Stufe 17 benutzt werden. Alternativ
kann der primäre Antikörper radioaktiv oder fluoreszierend
markiert werden. DNA- oder RNA-Sonden (z. B. biotinmarkierte)
können auch in der Stufe 17 benutzt werden, vorausgesetzt
daß geeignete Vorbehandlungsstufen durchgeführt wurden.
In einem solchen Fall sollte nach der Aufbringung (Stufe
17A) die Objektträgeranordnung in einer Kammer bei genügend
hohen Temperaturen für eine Denaturierung (z. B. 100°C)
einige Minuten vor der Überführung in die Naßkammer von
37°C (Stufe 17B) für Rehybridisierung gegeben werden. Die
Waschstufen, die durch die Stufen 18 und 19 in dem obigen
Verfahren repräsentiert sind, können hinsichtlich der Anzahl
und Dauer und der Verschiedenheit der Flüssigkeiten für DNA-
Sonden ausgedehnt werden. Siehe z. B. die US-PS 45 33 628
und die darin diskutierten Druckschriften.
Die Stufe 20 umfaßt, wie gezeigt, das Vernetzen des chemisch
an den primären Antikörper gebundenen Biotins mit einem
zweiten chemisch an das Detektormittel, wie ein Enzym, gebundenen
Biotinrest durch das vierwertige eiweißbindende
Protein, Avidin. Wegen seiner verbesserten Stabilität wurde
Avidin (Eiweißavidin von Vector Labs) statt Streptavdin benutzt.
Vorausgesetzt, daß die geeigneten Vorbehandlungen
angewendet wurden, könnten auch andere biotinmarkierte Detektorsysteme
benutzt werden: z. B. Meerrettichperoxidase
(HRP) oder beta-Galactosidasekonjugat mit Biotin. HRP hat
den Vorteil, chromophore enzymatische Reaktionsprodukte
(z. B. Polymerisationsprodukte von Diaminobenzidintetrahydrochlorid)
zu erzeugen, die sicherer in dem Gewebe verankert
werden als die chromophoren enzymatischen Reaktionsprodukte,
die mit alkalischer Phosphatase erzeugt werden (z. B.
3-Brom-, 4-Chlor-, 5-Indolylphosphat (BCIP) und entweder
Jodnitrotetrazolium (INT) oder Nitroblautetrazolium (NB)).
Das Anhaften der alkalischen Phosphatasechromophore kann
durch Weglassen des Triton X-100 in den Stationen 6 und 10
und durch Programmierung des Instrumentes, um direkt in zwei
zusätzliche Spülzyklen in destilliertem Wasser zu gehen,
verbessert werden (Station 10 gefolgt von der Aufsaugstation
11). Die Objektträger werden dann zu der Station 18 überführt,
wo eine flache Wanne mit Ammoniakwasser vorgesehen
ist. Die Objektträger werden dann direkt in Polyvinylpyrrolidon
(PVP-40) mit 400 mg je Milliliter in 0,1 M Tris-HCl,
pH 7,5, mit 0,1 M NaCl befestigt. HRP hat jedoch den Nachteil,
daß die enzymatischen Reagenzien, die in den Stufen
23 bis 25 erforderlich sind, instabil gegen Licht sind und
möglicherweise carcinogen sind. Wenn daher HRP verwendet
wird, dann wird vorzugsweise das Programm in der Stufe 21
oder 22 angehalten, bis frisches Reagenz ergänzt und in der
Station 17 angeordnet wurde. Das Programm wird dann manuell
wieder begonnen. Die dadurch verlorene Zeit wird durch eine
kürzere Inkubationszeit in den Stufen 24B und 25B kompensiert.
Außerdem ist das enzymatische Produkt genügend unlöslich
für die Objektträger nach der Stufe 31, um durch die
Stationen 6, 5, 4, 3 und 2 zurückgenommen zu werden (die
umgekehrte Reihenfolge der Stufen 1 bis 7 und 9), mit mehrfachen
Berührungen in irgendeiner Station und einem Aufsaugen
nach jeder Berührung. Die resultierenden angefärbten
Proben werden nun mit Xylol überzogen und sind fertig für
Trockenbefestigung, z. B. mit Permount®-Befestigungsmedium.
Man kann alternativ eine fluoreszierende Markierung in der
Stufe 20 verwenden, wie beispielsweise Avidin-Fluorescein-
Konjugat. In einem solchen Fall werden die Stufen 23 bis
26 nicht benötigt.
Die Stufen 23 bis 25 liefern enzymatische Reagenzien (BCIP
plus INT), die geeignet sind, um unlösliche Chromagene mit
der Enzymmarkierung (alkalische Phosphatase), die in der
Stufe 20 eingeführt wird, zu ergeben. Die Stufen 27, 29 und
30 repräsentieren die Aufbringung und Entwicklung von Hämatoxylin
als eine Gegenfärbung für die Kernsichtbarmachung
des Gewebes, worin sich die markierten Antigenstellen finden.
In dem obigen Verfahren verwenden die Stufen 17 und 20 besonders
kostspielige Reagenzien und werden daher mit dem
Tröpfchenhalter in den Stationen 15 bzw. 16 durchgeführt.
Solche Tröpfchenhalter würden normalerweise verwendet, um
diese Reagenzien zu schützen, selbst wenn alle Tröpfchen
die gleichen wären, um so alle Proben in dieser Stufe identisch
zu behandeln. In vielen Fällen jedoch ist eine Individualisierung
in diesen Tröpfchenhaltern erforderlich, besonders
bezüglich des primären Antikörpers in der Stufe 15.
Der teilweise gefüllte Tröpfchenhalter, der in Fig. 7 gezeigt
ist, erläutert, wie unterschiedliche Flüssigkeiten
als Tröpfchen in irgendeinem erwünschten Muster zugeführt
werden können.
Eine starre, sich horizontal erstreckende Grundplatte 462
trägt ein horizontal sich erstreckendes Elastomerteil 464.
60 Löcher sind in dem Teil 464 in drei Doppelreihen von jeweils
zehn vorgesehen. Die erste Doppelreihe ist mit 20
Tröpfchen einer ersten Behandlungsflüssigkeit gefüllt, einschließlich
468a, 468j, 469a und 469j. Die zweiten und dritten
Doppelreihen von Löchern einschließlich Löchern 466k,
466t, 466u und 466dd sind leer. Sie können, wenn erwünscht,
mit einer zweiten und dritten Behandlungsflüssigkeit gefüllt
werden, um auf verschiedenen Objektträgerpaaren aufgebracht
zu werden, während die erste Tröpfchenreihe auf einer ersten
Reihe von Objektträgerpaaren aufgebracht wird.
Wenn in der Stufe 13 Enzymaufschluß verwendet wird, würde
ein Tröpfchenhalter auch in der Station 13 (513 in Fig. 6)
verwendet werden. Individualisierung in dieser Stufe kann
verwendet werden, wo es erwünscht ist, die Aufschlußtype
oder den Aufschlußgrad an diesem Punkt zu variieren (z. B.
werden einige Tröpfchen ohne Pepsin, einige mit Pepsin gepuffert).
Wenn teurere Blockiermittel als Gelatine in der
Station 14 in Stufe 15 verwendet werden oder wenn der Grad
oder die Type der Blockierung variabel erwünscht ist, dann
würde ähnlich ein Tröpfchenhalter in der Station 14 verwendet
werden.
Obwohl die Stationen 8 und 17 als Tröge gezeigt sind, können
Tröpfchenhalter benutzt werden, um eine Individualisierung
in den Stufen 23 bis 25 sowie 27 zu bekommen. Wo geeignete
Objektträger und Proben verfügbar sind, kann es erwünscht
sein, einen unterschiedlichen Färbegrad der durch Enzym hervorgerufenen
Anfärbung und der Gegenfärbung für ein Reproduzieren
äquivalenter Proben zu erreichen, um so einen Bereich
von Kontrastärken zum Auswählen zu erzeugen.
Selbst in jenen Stufen, wo Tröge verwendet werden, um mäßig
teure Behandlungsflüssigkeit aufzubringen (z. B. die Hämatoxylinanfärbung),
benutzt die vorliegende Erfindung weniger
Flüssigkeit (die den Hauptteil des Kapillarraumes von 75 mm
× 25 mm füllt), da nur ein Teil (etwa 30 bis 40 mm × 25 mm)
in dem vorliegenden Verfahren gefüllt wird. Das Ablaufen wird
außerdem durch Aufsaugen statt Rotierenlassen stark erleichtert.
Es ist bevorzugt, Absorbensmaterialien von ausreichenden
Absorbenskapazitäten und eine ausreichende Anzahl von
Absorbensmaterialstationen (Stationen 9 (509) und 11 (511) in
Fig. 6) zu benutzen, um alle der verschiedenen Flüssigkeiten
zu absorbieren, die während des Gesamtverfahrens aus
den Objektträgerspalten ablaufen sollen. Alternativ kann
an einem bequemen Punkt in dem Verfahren (z. B. während des
Falles 17B) jedes Absorbensmaterial durch ein frisches
Absorbensmaterial (in den Stufen 9 und 11) ersetzt werden,
oder während eine Absorbensstation in Benutzung ist (wie
z. B. die Station 11 während der Stufen 9B bis 14B), kann
das Absorbensmaterial in der anderen Station (Station 9)
verändert werden.
Bei bevorzugten Formen der Erfindung wird der Spalt zwischen
den beiden Oberflächen in der vertikalen Position gehalten,
und ein einzelner Anteil von flüssigem Reagenz berührt den
Raum, der zwischen den parallelen Unterkanten zweier gegenüberliegender
Flächen, wie zweier mikroskopischer Glasobjektträger,
gebildet wird, und fließt aufwärts durch Kapillarwirkung,
um die Innenfläche des Spaltes ganz oder teilweise
zu bedecken. Nach der Behandlung kann das flüssige
Reagenz aus dem Raum zwischen den ebenen Flächen entfernt
werden, indem man den Raum an irgendeinem Punkt mit einem
absorbierenden Material in Berührung bringt. In weniger bevorzugten
Formen können eine Saugapparatur oder ähnliche
Flüssigkeitsextraktionssysteme verwendet werden. Eine solche
Methode ist besonders brauchbar bei fortgesetzter komplexerer
Behandlungsweise, die eine Behandlung einer großen Zahl
von immobilisierten Proben mit einer Reihe flüssiger Reagenzien
einschließt und die Aufeinanderfolge einer Aufbringung
und Entfernung eines flüssigen Reagenz bei den zu analysierenden
Proben erfordert, bevor die gleiche zu analysierende
Probe in dem Verfahren dem nächsten flüssigen Reagenz ausgesetzt
wird. Dies ist auch äußerst brauchbar, wenn es erwünscht
ist, kleinste Volumina wertvoller, gefährlicher oder
teurer flüssiger Reagenzien zu benutzen, wie von gelösten
markierten oder unmarkierten Antikörpern, Nucleinsäuresonden,
radioaktiven Materialien, biologisch gefährlichen Materialien,
wo es erwünscht ist, den menschlichen Kontakt auf
ein Minimum herabzusetzen.
Claims (9)
1. Verfahren zur Aufbringung von Flüssigkeit auf einer dünnen
Probe auf einer ersten Oberfläche, wobei man eine zweite
Oberfläche parallel zu der ersten und in einem festen
Abstand von dieser hält, so einen Kapillarspalt zwischen der
ersten und zweiten Oberfläche bildet und Flüssigkeit durch
Kapillarkraft in diesem Spalt bis zur Berührung mit der
dünnen Probe einzieht, dadurch gekennzeichnet, daß man die
erste und zweite Oberfläche sich vertikal aufwärts
erstreckend mit parallelen geradlinigen horizontalen unteren
Kanten anordnet und den Kapillarspalt zwischen den unteren
Kanten der ersten und zweiten Oberfläche mit einem einzelnen
Flüssigkeitsanteil in Berührung bringt und diesen durch
Kapillarkraft aufwärts zwischen die beiden Oberflächen
einzieht.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß
Flüssigkeit aus dem Spalt entfernt wird, indem die Kante des
Spaltes mit einem Absorbensmaterial in Berührung gebracht
wird.
3. Verfahren nach einem der vorausgehenden Ansprüche, dadurch
gekennzeichnet, daß die Kante des Spaltes mit mehreren
isolierten Anteilen von Flüssigkeit in Berührung gebracht
wird.
4. Verfahren nach einem der vorausgehenden Ansprüche, dadurch
gekennzeichnet, daß das Einziehen von Flüssigkeit bei
mehreren ersten Oberflächen erfolgt, von denen jede eine
dünne Probe trägt.
5. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 bis 4, dadurch
gekennzeichnet, daß man nach dem Entfernen der Flüssigkeit
aus dem Spalt die Kante des Spaltes mit einer zweiten
Flüssigkeit in Berührung bringt, und diese in den Spalt
einzieht.
6. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 bis 4, dadurch
gekennzeichnet, daß die erste Oberfläche und zweite
Oberfläche in einer sich vertikal erstreckenden Richtung
während des Entfernens der Flüssigkeit gehalten werden.
7. Vorrichtung zur Durchführung des Verfahrens nach einem der Ansprüche 1 bis 6,
mit Einrichtungen zum Halten eines ersten Teils
mit einer eine dünne Probe tragenden ersten Oberfläche in
festem Abstand von einer zweiten Oberfläche eines zweiten
Teils, wobei die beiden Oberflächen parallel zueinander
liegen und zueinander parallele Kanten mit derart kleinem
Abstand voneinander haben, so daß Flüssigkeit von außen
durch Kapillarkraft zwischen die erste und zweite Oberfläche
bis zur Berührung mit der dünnen Probe eingezogen wird,
dadurch gekennzeichnet, daß die erste und zweite
Oberfläche sich vertikal nach oben erstrecken und die
zueinander parallelen Kanten deren horizontale Unterkanten
sind und daß Einrichtungen vorgesehen sind, die den Spalt
zwischen den beiden Unterkanten der beiden Oberflächen mit
einem einzelnen Flüssigkeitsanteil in Berührung bringen.
8. Vorrichtung nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß sie
zusätzlich Aufsaugeinrichtungen besitzt, die die parallelen
Kanten der beiden Oberflächen mit einem Absorbermaterial
derart in Berührung bringen, daß Flüssigkeit aus dem Spalt
zwischen den beiden Oberflächen abgezogen wird.
9. Vorrichtung nach Anspruch 7 oder 8, bestehend aus einem
Objektträgersatz mit mehreren sich vertikal erstreckenden
Objektträgern, mehreren sich vertikal erstreckenden
Abdeckteilen und mit Einrichtungen für das Halten der
Objektträger und Abdeckteile nahe ihren oberen Enden in
einer ortsfesten Gruppe, wobei jede Oberfläche eines
Objektträgers in einem Abstand kleiner als 0,5 mm von einer
Oberfläche eines Abdeckteils entfernt ist und wobei der
Raum zwischen sich horizontal erstreckenden Unterkanten
offen ist.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US06/775,864 US4731335A (en) | 1985-09-13 | 1985-09-13 | Method for treating thin samples on a surface employing capillary flow |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE3630866A1 DE3630866A1 (de) | 1987-03-26 |
DE3630866C2 true DE3630866C2 (de) | 1996-12-12 |
Family
ID=25105771
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE3630866A Expired - Lifetime DE3630866C2 (de) | 1985-09-13 | 1986-09-11 | Verfahren und Vorrichtung zur Aufbringung von Flüssigkeit auf einer dünnen Probe |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US4731335A (de) |
JP (2) | JPS6298231A (de) |
DE (1) | DE3630866C2 (de) |
GB (1) | GB2180647A (de) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE19933838A1 (de) * | 1999-07-20 | 2001-02-01 | Max Planck Gesellschaft | Nadel und Verfahren zum Transfer von Liquiden sowie Verfahren zum Herstellen der Nadel |
DE10239739A1 (de) * | 2002-08-29 | 2004-12-23 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur Durchführung von immunolosichen Markierungstechniken für Gewebedünnschnitte |
US7303729B2 (en) | 2003-02-28 | 2007-12-04 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Apparatus and method for immunological labeling for thin tissue sections |
Families Citing this family (137)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5023187A (en) * | 1985-09-13 | 1991-06-11 | Fisher Scientific Company | Method and device for accelerated treatment of thin sample on surface |
US5002736A (en) * | 1987-03-31 | 1991-03-26 | Fisher Scientific Co. | Microscope slide and slide assembly |
GB8722902D0 (en) * | 1987-09-30 | 1987-11-04 | Shandon Southern Prod | Tissue &c processing |
US4832914A (en) * | 1988-02-08 | 1989-05-23 | Board Of Regents/The University Of Texas System | Two-dimensional uniformly fed unstirred chemical reactor |
GB8809611D0 (en) * | 1988-04-22 | 1988-05-25 | Darougar S | Deposition apparatus |
EP0366241A3 (de) * | 1988-10-04 | 1990-05-23 | Fisher Scientific Company | Vorrichtung mit adsorbierender Oberfläche und Herstellungsverfahren |
US5237016A (en) * | 1989-01-05 | 1993-08-17 | Siska Diagnostics, Inc. | End-attachment of oligonucleotides to polyacrylamide solid supports for capture and detection of nucleic acids |
AU636875B2 (en) * | 1989-03-17 | 1993-05-13 | Abbott Laboratories | Method and device for improved reaction kinetics in nucleic acid hybridizations |
DK0420960T3 (da) * | 1989-04-11 | 1994-11-21 | Applied Research Systems | Multianalyseprøveindretning |
US4935374A (en) * | 1989-05-02 | 1990-06-19 | Eastman Kodak Company | Polyethylene evaporation covers |
US5143854A (en) * | 1989-06-07 | 1992-09-01 | Affymax Technologies N.V. | Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof |
US5547839A (en) * | 1989-06-07 | 1996-08-20 | Affymax Technologies N.V. | Sequencing of surface immobilized polymers utilizing microflourescence detection |
US4975250A (en) * | 1989-08-21 | 1990-12-04 | Fisher Scientific Co. | Aligned slideholder and assembly |
US5116727A (en) * | 1989-08-31 | 1992-05-26 | Iniziative Marittime 1991, S.R.L. | Hybridization method and composition with alternating polysaccharide of sulfated N-acetylgalactosamine |
US5270012A (en) * | 1989-09-06 | 1993-12-14 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Synethic apparatus for inspection of blood |
US5116732A (en) * | 1989-09-11 | 1992-05-26 | Fisher Scientific Co. | Tetrazolium halide compounds and methods |
US5346672A (en) * | 1989-11-17 | 1994-09-13 | Gene Tec Corporation | Devices for containing biological specimens for thermal processing |
US5021218A (en) * | 1990-01-19 | 1991-06-04 | Dlp, Inc. | Apparatus for transporting specimen slides |
US5225325A (en) * | 1990-03-02 | 1993-07-06 | Ventana Medical Systems, Inc. | Immunohistochemical staining method and reagents therefor |
US5192503A (en) * | 1990-05-23 | 1993-03-09 | Mcgrath Charles M | Probe clip in situ assay apparatus |
DE69132843T2 (de) * | 1990-12-06 | 2002-09-12 | Affymetrix, Inc. (N.D.Ges.D.Staates Delaware) | Identifizierung von Nukleinsäuren in Proben |
US5273905A (en) * | 1991-02-22 | 1993-12-28 | Amoco Corporation | Processing of slide mounted material |
JP2554115Y2 (ja) * | 1991-03-22 | 1997-11-12 | 澄晴 野地 | スライドグラス用ホルダ |
US5213766A (en) * | 1991-04-30 | 1993-05-25 | Apogee Designs, Ltd. | Liquid collecting apparatus for sample testing |
US5696887A (en) | 1991-08-05 | 1997-12-09 | Biotek Solutions, Incorporated | Automated tissue assay using standardized chemicals and packages |
US6943034B1 (en) * | 1991-11-22 | 2005-09-13 | Affymetrix, Inc. | Combinatorial strategies for polymer synthesis |
US6849462B1 (en) | 1991-11-22 | 2005-02-01 | Affymetrix, Inc. | Combinatorial strategies for polymer synthesis |
US5354370A (en) * | 1992-04-15 | 1994-10-11 | Hacker Industries, Inc. | Tissue processor |
US5947167A (en) * | 1992-05-11 | 1999-09-07 | Cytologix Corporation | Dispensing assembly with interchangeable cartridge pumps |
US20040191128A1 (en) * | 1992-05-11 | 2004-09-30 | Cytologix Corporation | Slide stainer with heating |
US6180061B1 (en) | 1992-05-11 | 2001-01-30 | Cytologix Corporation | Moving platform slide stainer with heating elements |
US5605798A (en) | 1993-01-07 | 1997-02-25 | Sequenom, Inc. | DNA diagnostic based on mass spectrometry |
ES2176588T3 (es) * | 1993-02-03 | 2002-12-01 | Histaggen Inc | Procedimiento para almacenar un ligando dentro de un medio contencion liberable y procedimiento para liberar un ligando del mismo. |
US5965454A (en) * | 1993-02-03 | 1999-10-12 | Histaggen Incorporated | Automated histo-cytochemistry apparatus and encapsulation system for processing biological materials |
US5492837A (en) * | 1993-08-27 | 1996-02-20 | Biogenex Laboratories | Mounting medium for microscope slide preparations |
US7625697B2 (en) | 1994-06-17 | 2009-12-01 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods for constructing subarrays and subarrays made thereby |
US7323298B1 (en) | 1994-06-17 | 2008-01-29 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Microarray for determining the relative abundances of polynuceotide sequences |
US6428955B1 (en) | 1995-03-17 | 2002-08-06 | Sequenom, Inc. | DNA diagnostics based on mass spectrometry |
US20020022261A1 (en) * | 1995-06-29 | 2002-02-21 | Anderson Rolfe C. | Miniaturized genetic analysis systems and methods |
JP3643863B2 (ja) * | 1995-08-09 | 2005-04-27 | アークレイ株式会社 | 液体保持具とその製造方法 |
US5632959A (en) * | 1995-08-14 | 1997-05-27 | Mohajer; Reza S. | Combination holder for specimen slide |
US5804141A (en) * | 1996-10-15 | 1998-09-08 | Chianese; David | Reagent strip slide treating apparatus |
EP1457496B1 (de) | 1996-11-06 | 2014-01-15 | Sequenom, Inc. | Immobilisierung mit hoher Dichte von Nukleinsäuren |
US7285422B1 (en) * | 1997-01-23 | 2007-10-23 | Sequenom, Inc. | Systems and methods for preparing and analyzing low volume analyte array elements |
US20030129589A1 (en) * | 1996-11-06 | 2003-07-10 | Hubert Koster | Dna diagnostics based on mass spectrometry |
US6024925A (en) | 1997-01-23 | 2000-02-15 | Sequenom, Inc. | Systems and methods for preparing low volume analyte array elements |
US6703247B1 (en) * | 1996-12-23 | 2004-03-09 | American Registry Of Pathology | Apparatus and methods for efficient processing of biological samples on slides |
US5958341A (en) * | 1996-12-23 | 1999-09-28 | American Registry Of Pathology | Apparatus for efficient processing of tissue samples on slides |
US6489171B1 (en) * | 1997-04-18 | 2002-12-03 | Cell Marque Corporation | Chemical dispensing system and method |
US5989692A (en) * | 1997-09-02 | 1999-11-23 | Cytonix Corporation | Porous surface for laboratory apparatus and laboratory apparatus having said surface |
US6228659B1 (en) * | 1997-10-31 | 2001-05-08 | PE Corporation (“NY”) | Method and apparatus for making arrays |
US5882930A (en) * | 1997-11-10 | 1999-03-16 | Hyseq, Inc. | Reagent transfer device |
US6268131B1 (en) | 1997-12-15 | 2001-07-31 | Sequenom, Inc. | Mass spectrometric methods for sequencing nucleic acids |
US5957167A (en) * | 1997-12-18 | 1999-09-28 | Pharmacopeia, Inc. | Article for dispensing small volumes of liquid |
US6050719A (en) * | 1998-01-30 | 2000-04-18 | Affymetrix, Inc. | Rotational mixing method using a cartridge having a narrow interior |
US6565813B1 (en) * | 1998-02-04 | 2003-05-20 | Merck & Co., Inc. | Virtual wells for use in high throughput screening assays |
US6183693B1 (en) | 1998-02-27 | 2001-02-06 | Cytologix Corporation | Random access slide stainer with independent slide heating regulation |
US6296809B1 (en) | 1998-02-27 | 2001-10-02 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated molecular pathology apparatus having independent slide heaters |
US6582962B1 (en) * | 1998-02-27 | 2003-06-24 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated molecular pathology apparatus having independent slide heaters |
US6096271A (en) * | 1998-02-27 | 2000-08-01 | Cytologix Corporation | Random access slide stainer with liquid waste segregation |
US6350618B1 (en) | 1998-04-27 | 2002-02-26 | Corning Incorporated | Redrawn capillary imaging reservoir |
EP0955084B1 (de) | 1998-04-27 | 2006-07-26 | Corning Incorporated | Verfahren zur Ablage von biologischen Proben mit hilfe eines nachgezogenen Kapillar-speichers |
US6884626B1 (en) | 1998-04-27 | 2005-04-26 | Corning Incorporated | Redrawn capillary imaging reservoir |
US6723564B2 (en) | 1998-05-07 | 2004-04-20 | Sequenom, Inc. | IR MALDI mass spectrometry of nucleic acids using liquid matrices |
US6094301A (en) * | 1998-05-15 | 2000-07-25 | Systec Inc. | Folding rack for vertical presentation of microscope slides |
US6020995A (en) * | 1998-05-15 | 2000-02-01 | Systec Inc. | Folding rack for microscope slides |
US6762061B1 (en) | 1998-07-03 | 2004-07-13 | Corning Incorporated | Redrawn capillary imaging reservoir |
US6309891B1 (en) * | 1998-09-09 | 2001-10-30 | Incyte Genomics, Inc. | Capillary printing systems |
AU2483700A (en) * | 1998-12-23 | 2000-07-31 | American Registry Of Pathology | Apparatus and methods for efficient processing of biological samples on slides |
US6416642B1 (en) * | 1999-01-21 | 2002-07-09 | Caliper Technologies Corp. | Method and apparatus for continuous liquid flow in microscale channels using pressure injection, wicking, and electrokinetic injection |
US6673620B1 (en) * | 1999-04-20 | 2004-01-06 | Cytologix Corporation | Fluid exchange in a chamber on a microscope slide |
US6399394B1 (en) | 1999-06-30 | 2002-06-04 | Agilent Technologies, Inc. | Testing multiple fluid samples with multiple biopolymer arrays |
US6258593B1 (en) | 1999-06-30 | 2001-07-10 | Agilent Technologies Inc. | Apparatus for conducting chemical or biochemical reactions on a solid surface within an enclosed chamber |
CA2376969A1 (en) | 1999-07-21 | 2001-02-01 | Dako A/S | A method of controlling the temperature of a specimen in or on a solid support member |
WO2001007161A1 (en) * | 1999-07-23 | 2001-02-01 | Merck & Co., Inc. | Method and apparatus for transferring small volume liquid samples |
DE19948087B4 (de) * | 1999-10-06 | 2008-04-17 | Evotec Ag | Verfahren zur Herstellung eines Reaktionssubstrats |
US6386749B1 (en) * | 2000-06-26 | 2002-05-14 | Affymetrix, Inc. | Systems and methods for heating and mixing fluids |
US20040018615A1 (en) * | 2000-08-02 | 2004-01-29 | Garyantes Tina K. | Virtual wells for use in high throughput screening assays |
US20020142483A1 (en) | 2000-10-30 | 2002-10-03 | Sequenom, Inc. | Method and apparatus for delivery of submicroliter volumes onto a substrate |
US20020068022A1 (en) * | 2000-12-04 | 2002-06-06 | Jinghua Schneider | Mini-tube rack |
JP4766789B2 (ja) * | 2001-07-10 | 2011-09-07 | トミー工業株式会社 | スライドガラスの遠心機用ラック |
AU2002326663A1 (en) * | 2001-08-16 | 2003-03-03 | Amersham Biosciences Corporation | Fixtures for use in parallel processing bio-chips |
US7425306B1 (en) | 2001-09-11 | 2008-09-16 | Ventana Medical Systems, Inc. | Slide heater |
SE0103072D0 (sv) * | 2001-09-17 | 2001-09-17 | Pharmacia Diagnostics Ab | Multi-analyte assay device with multi-spot detection zone |
US6939032B2 (en) * | 2001-10-25 | 2005-09-06 | Erie Scientific Company | Cover slip mixing apparatus |
US7270785B1 (en) * | 2001-11-02 | 2007-09-18 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated molecular pathology apparatus having fixed slide platforms |
US7943093B2 (en) * | 2001-12-12 | 2011-05-17 | Erie Scientific Company | Cover slip |
EP1331473B1 (de) * | 2002-01-22 | 2005-04-06 | MPB MelTec Patent- und Beteiligungsgesellschaft mbH | Verfahren und Vorrichtung für die Probenvorbereitung zur Analyse von biologischen Proben |
US11249095B2 (en) | 2002-04-15 | 2022-02-15 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated high volume slide processing system |
US7468161B2 (en) | 2002-04-15 | 2008-12-23 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated high volume slide processing system |
EP1890127B1 (de) * | 2002-04-15 | 2013-07-03 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automatisiertes Objektträgeranfärbesystem mit hohem Durchsatz |
US7378055B2 (en) * | 2002-04-26 | 2008-05-27 | Ventana Medical Systems, Inc. | Automated molecular pathology apparatus having fixed slide platforms |
US7537936B2 (en) * | 2002-05-31 | 2009-05-26 | Agilent Technologies, Inc. | Method of testing multiple fluid samples with multiple biopolymer arrays |
US7919308B2 (en) * | 2002-06-14 | 2011-04-05 | Agilent Technologies, Inc. | Form in place gaskets for assays |
JP2005530165A (ja) | 2002-06-20 | 2005-10-06 | ビジョン・バイオシステムズ・リミテッド | 流体排出機構を備えた生物反応装置 |
AU2003901871A0 (en) * | 2003-03-31 | 2003-05-08 | Vision Biosystems Limited | A method and apparatus for fluid dispensation, preparation and dilation |
AUPS309002A0 (en) | 2002-06-20 | 2002-07-11 | Vision Biosystems Limited | A covertile for a substrate |
DE10251338B4 (de) * | 2002-11-05 | 2008-05-21 | Intavis Bioanalytical Instruments Ag | Vorrichtung zur Durchführung von Färbe- und Hybridisierungsreaktionen |
WO2005000469A1 (en) * | 2003-06-16 | 2005-01-06 | Schering Corporation | Virtual well plate system |
HUP0301911A2 (hu) * | 2003-06-24 | 2005-03-29 | 3Dhistech Kft. | Tárgylemezadagoló-egység automatikus szkennelő mikroszkóphoz |
GB2418250A (en) * | 2003-06-25 | 2006-03-22 | Waters Investments Ltd | An apparatus used to prevent cross-contamination along a platform and methods of manufacturing the same |
DE10336849A1 (de) * | 2003-08-11 | 2005-03-10 | Thinxxs Gmbh | Flusszelle |
US7744817B2 (en) * | 2003-08-11 | 2010-06-29 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Manifold assembly |
US7501283B2 (en) * | 2003-08-11 | 2009-03-10 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Fluid dispensing apparatus |
US7767152B2 (en) * | 2003-08-11 | 2010-08-03 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Reagent container and slide reaction retaining tray, and method of operation |
US9518899B2 (en) * | 2003-08-11 | 2016-12-13 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Automated reagent dispensing system and method of operation |
US7517498B2 (en) * | 2003-08-19 | 2009-04-14 | Agilent Technologies, Inc. | Apparatus for substrate handling |
JP3879001B2 (ja) * | 2003-11-06 | 2007-02-07 | 独立行政法人情報通信研究機構 | 生物試料を高精度に測定する方法 |
DE102004062280A1 (de) * | 2003-12-29 | 2005-07-28 | Siemens Ag | Verfahren und Vorrichtung zum Dispensieren von Flüssigkeiten im Mikroraster |
US7238535B2 (en) * | 2004-09-01 | 2007-07-03 | World Properties, Inc. | Test cell for evaluating phosphor |
EP1658897A1 (de) | 2004-11-22 | 2006-05-24 | Roche Diagnostics GmbH | Gebogene Mikrofluidische Einrichtung |
US7514044B2 (en) * | 2004-11-24 | 2009-04-07 | Cytyc Corporation | Vial presentation module, slide dispenser and slide presentation module |
NO321927B1 (no) | 2004-12-23 | 2006-07-24 | Oystein Ljungmann | Apparat for utforelse av behandlingsoperasjoner pa objektglass med vevsprover |
US20060218994A1 (en) * | 2005-03-31 | 2006-10-05 | Szu-Min Lin | Monitoring of cleaning process |
US20060246576A1 (en) * | 2005-04-06 | 2006-11-02 | Affymetrix, Inc. | Fluidic system and method for processing biological microarrays in personal instrumentation |
US8178350B2 (en) * | 2005-04-21 | 2012-05-15 | Celerus Diagnostics, Inc. | Method and apparatus for automated rapid immunohistochemistry |
US20070175897A1 (en) | 2006-01-24 | 2007-08-02 | Labcyte Inc. | Multimember closures whose members change relative position |
US8459509B2 (en) * | 2006-05-25 | 2013-06-11 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Fluid dispensing apparatus |
US20080081368A1 (en) * | 2006-10-03 | 2008-04-03 | Anne Marie Bailey | Method and apparatus that increases efficiency and reproducibility in immunohistochemistry and immunocytochemistry |
US20090170152A1 (en) * | 2007-06-01 | 2009-07-02 | Ventana Medical Systems, Inc. | Tissue Conditioning Protocols |
WO2009039122A2 (en) | 2007-09-17 | 2009-03-26 | Sequenom, Inc. | Integrated robotic sample transfer device |
US10184862B2 (en) | 2008-11-12 | 2019-01-22 | Ventana Medical Systems, Inc. | Methods and apparatuses for heating slides carrying specimens |
CN101403667B (zh) * | 2008-11-18 | 2011-10-05 | 中国科学院上海硅酸盐研究所 | 一种用于制备连接件标准抗弯强度测试样品的夹具 |
US9498791B2 (en) | 2009-11-13 | 2016-11-22 | Ventana Medical Systems, Inc. | Opposables and automated specimen processing systems with opposables |
AU2010320039B2 (en) | 2009-11-13 | 2013-08-15 | Ventana Medical Systems, Inc. | Thin film processing apparatuses for adjustable volume accommodation |
US10746752B2 (en) | 2009-11-13 | 2020-08-18 | Ventana Medical Systems, Inc. | Opposables and automated specimen processing systems with opposables |
US8752732B2 (en) | 2011-02-01 | 2014-06-17 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Fluid dispensing system |
US8932543B2 (en) | 2011-09-21 | 2015-01-13 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Automated staining system and reaction chamber |
US8580568B2 (en) | 2011-09-21 | 2013-11-12 | Sakura Finetek U.S.A., Inc. | Traceability for automated staining system |
US9267170B2 (en) * | 2011-09-30 | 2016-02-23 | Life Technologies Corporation | Systems and methods for biological analysis |
USD728120S1 (en) | 2013-03-15 | 2015-04-28 | Ventana Medical Systems, Inc. | Arcuate member for moving liquids along a microscope slide |
JP6535657B2 (ja) * | 2013-05-15 | 2019-06-26 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェKoninklijke Philips N.V. | 試料からの組織分離 |
CN111089980B (zh) | 2013-12-13 | 2023-08-15 | 文塔纳医疗系统公司 | 生物样本的自动化组织学处理及相关的技术 |
US10209166B2 (en) | 2014-11-18 | 2019-02-19 | Alfonso Heras | System and method for processing biological specimens |
DE202015004524U1 (de) * | 2015-06-24 | 2016-09-29 | C. Gerhardt GmbH & Co. KG | Analyseeinrichtung für die Elementaranalyse |
EP4164796A4 (de) * | 2020-06-10 | 2024-03-06 | 10x Genomics, Inc. | Flüssigkeitsabgabeverfahren |
CN115773920B (zh) * | 2021-09-06 | 2024-04-19 | 南京泰立瑞信息科技有限公司 | 一种低损耗、自动化的切片样本染色方法和系统 |
Family Cites Families (36)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2119773A (en) * | 1933-10-20 | 1938-06-07 | Ernest G Buckner | Coin container and assorter |
US2119407A (en) * | 1937-08-14 | 1938-05-31 | Edwin C Weiskopf | Means for filing micro-slides |
US2302830A (en) * | 1940-10-30 | 1942-11-24 | Sol A Axelrad | Microscope test slide |
US2415480A (en) * | 1945-04-02 | 1947-02-11 | Ethel M Gassert | Blood count equipment |
US2488535A (en) * | 1945-08-04 | 1949-11-22 | Joseph H Meyer Brothers | Bead dipping apparatus |
US2511730A (en) * | 1948-04-09 | 1950-06-13 | Harry A Mcclain | Holder and file for photographic slides |
US2863319A (en) * | 1958-02-04 | 1958-12-09 | Mclin Marvin Hampton | Capillary pipette |
US3005375A (en) * | 1959-05-06 | 1961-10-24 | Sherman Leonard | Blood typing slides |
DE1180166B (de) * | 1961-12-06 | 1964-10-22 | Dr Egon Stahl | Breitband-Pipette, insbesondere fuer Papier- und Duennschichtchromatographie sowie fuer Elektrophorese, zum Auftragen von Fluessigkeiten auf Sorptionsschichten |
US3358496A (en) * | 1965-08-03 | 1967-12-19 | Larry B Farmer | Chromatographic applicator |
GB1244844A (en) * | 1967-07-27 | 1971-09-02 | Jack Fielding | Specimen holder for use with an optical measuring instrument |
US3656833A (en) * | 1970-06-29 | 1972-04-18 | Medical Plastics Inc | Combined plastic-glass microscope slides |
US3736042A (en) * | 1971-05-05 | 1973-05-29 | Clinical Sciences Inc | Microscope slide assembly |
US3837795A (en) * | 1971-11-05 | 1974-09-24 | Biomatics Instr Corp | Method and apparatus for staining slides |
US3904781A (en) * | 1973-10-15 | 1975-09-09 | Donald E Henry | Method of preparing cells for inspection |
US3961346A (en) * | 1975-01-30 | 1976-06-01 | Miles Laboratories, Inc. | Liquid inspection slide |
JPS5295491U (de) * | 1976-01-16 | 1977-07-16 | ||
US4199613A (en) * | 1977-10-11 | 1980-04-22 | Miles Laboratories, Inc. | Staining method by capillary action |
US4129093A (en) * | 1977-10-11 | 1978-12-12 | Miles Laboratories, Inc. | Staining apparatus |
CA1129498A (en) * | 1978-10-25 | 1982-08-10 | Richard L. Columbus | Structural configuration and method for transport of a liquid drop through an ingress aperture |
US4233029A (en) * | 1978-10-25 | 1980-11-11 | Eastman Kodak Company | Liquid transport device and method |
US4323536A (en) * | 1980-02-06 | 1982-04-06 | Eastman Kodak Company | Multi-analyte test device |
US4308028A (en) * | 1980-04-14 | 1981-12-29 | Elkins Carlos D | Device and method for the chemical testing and microscopic examination of liquid specimens |
US4320157A (en) * | 1980-08-08 | 1982-03-16 | Hagens Gunther Von | Method for preserving large sections of biological tissue with polymers |
IT1137192B (it) * | 1981-07-03 | 1986-09-03 | Montedison Spa | Composizioni poliolefiniche rinforzate con mica |
US4377641A (en) * | 1981-10-22 | 1983-03-22 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Air Force | Method and apparatus for the continuous extraction of ingredients from samples |
DE3313127A1 (de) * | 1982-04-28 | 1983-11-03 | Bio-Innovations, Camp Hill, Pa. | Vorrichtung zum faerben von biologischen proben |
US4501496A (en) * | 1982-05-07 | 1985-02-26 | Griffin Gladys B | Specimen slide for analysis of liquid specimens |
US4607921A (en) * | 1982-09-20 | 1986-08-26 | V-Tech, Inc. | Wet mount microscopic examination slide II |
US4447140A (en) * | 1982-09-29 | 1984-05-08 | Campbell Jeptha E | Microscope slides |
US4481246A (en) * | 1982-11-15 | 1984-11-06 | Sybron Corporation | Microscope slide with raised marking surface |
US4624882A (en) * | 1982-11-15 | 1986-11-25 | Sybron Corporation | Microscope slide with raised marking surface |
US4549952A (en) * | 1982-11-22 | 1985-10-29 | Eastman Kodak Company | Capillary transport device having means for increasing the viscosity of the transported liquid |
US4441793A (en) * | 1983-01-10 | 1984-04-10 | Elkins Carlos D | Microscopic evaluation slide |
US4518565A (en) * | 1983-06-06 | 1985-05-21 | Miles Laboratories, Inc. | Reagent test device holder |
US4679914A (en) * | 1985-09-13 | 1987-07-14 | Erie Scientific Company | Microscope slide with top and bottom marking surfaces |
-
1985
- 1985-09-13 US US06/775,864 patent/US4731335A/en not_active Expired - Lifetime
-
1986
- 1986-09-11 DE DE3630866A patent/DE3630866C2/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-09-12 JP JP61215578A patent/JPS6298231A/ja active Granted
- 1986-09-15 GB GB08622191A patent/GB2180647A/en active Granted
-
1987
- 1987-03-31 US US07/032,875 patent/US4798706A/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-03-31 US US07/032,874 patent/US4801431A/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-03-31 US US07/033,073 patent/US4777020A/en not_active Expired - Fee Related
-
1992
- 1992-09-03 JP JP4236067A patent/JPH0670603B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE19933838A1 (de) * | 1999-07-20 | 2001-02-01 | Max Planck Gesellschaft | Nadel und Verfahren zum Transfer von Liquiden sowie Verfahren zum Herstellen der Nadel |
DE10239739A1 (de) * | 2002-08-29 | 2004-12-23 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur Durchführung von immunolosichen Markierungstechniken für Gewebedünnschnitte |
DE10239739B4 (de) * | 2002-08-29 | 2006-05-11 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur Durchführung von immunologischen Markierungstechniken für Gewebedünnschnitte |
US7303729B2 (en) | 2003-02-28 | 2007-12-04 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Apparatus and method for immunological labeling for thin tissue sections |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3630866A1 (de) | 1987-03-26 |
US4731335B1 (de) | 1991-07-09 |
JPS6298231A (ja) | 1987-05-07 |
GB2180647B (de) | 1989-11-22 |
JPH0511857B2 (de) | 1993-02-16 |
GB8622191D0 (en) | 1986-10-22 |
JPH0670603B2 (ja) | 1994-09-07 |
US4777020A (en) | 1988-10-11 |
US4731335A (en) | 1988-03-15 |
GB2180647A (en) | 1987-04-01 |
US4801431A (en) | 1989-01-31 |
US4798706A (en) | 1989-01-17 |
JPH05240748A (ja) | 1993-09-17 |
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