DE3032481A1

DE3032481A1 - Praeparat zur therapeutischen und/oder kosmetischen anwendung an lebewesen

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Publication number: DE3032481A1
Application number: DE19803032481
Authority: DE
Inventors: Robert J. Camas Wash. Herschler
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1979-08-30
Filing date: 1980-08-28
Publication date: 1981-03-19
Also published as: IT1193966B; GB2057875A; GB2057875B; IT8024370A1; DE3032481C2; JPS5634621A; CH654482A5; US4296104A; FR2464068A1; AU538496B2; CA1166575A; IT8024370A0; FR2464068B1; AU6183480A

Description

PATENTANWÄLTE ZENZ & HELBER ■ D 43OO ESSEN 1 · A'VI RUHRSTcIN.i · TEL.: (O2 01) 4126 Seite - ^- Ο H 166

ROBERT J. HERSCHLER 3080 N.W. 8th Street,Camas, Washington 98607, V.St.A-

Präparat zur therapeutischen und/oder kosmetischen Anwendung an Lebewesen

Die Erfindung bezieht sich auf pharmazeutische oder kosmetische Mittel bzw. Präparate, die Dimethylsulfoxid (DMSO) enthalten.

Dimethylsulfoxid (DMSO) ist eine flüchtige Substanz, welche zahlreiche pharmazeutische und nicht-pharmazeutische Anwendungsmöglichkeiten bietet. Diese Substanz wird vielfach zur Behandlung von Menschen und Tieren verwendet.

Wie in den US-PS'η 3 549 770, 3 740 420 und 3 790 682 beschrieben worden ist, ist DMSO ein aktives Mittel zur Erleichterung von Zeichen und Symptome verschiedener körperlicher Beschwerden, insbesondere zur Beschleunigung der Heilung bestimmter verletzter Körpergewebe und zur Erleichterung der Zeichen und Symptome von Unruhe- und Angstzustanden.

In den. US-PS'η 3 551 554, 3 711 606 und 3 743 727 ist beschrieben, wie DMSO das Eindringen anderer Substanzen, insbesondere anderer physiologisch aktiver Agentien in das

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Gewebe fördert und beschleunigt. DMSO kann daher einer Vielzahl von pharmazeutischen Zusammensetzungen zur Beschleunigur der Penetration in das Körpergewebe beigegeben werden. In einigen Fallen hat dies zur Folge, daß geringere Dosen verabreicht werden können, wenn DMSO verwendet wird.

Trotz der großen Vorzüge von DMSO Zusammensetzungen wird manchmal anderen pharmazeutischen Zusammensetzungen bzw. Präparaten gegenüber DMSO der Vorzug gegeben, selbst in solchen Fällen, wo DMSO. das effektivste pharmazeutische Mittel wäre. Dies liegt daran, daß viele Personen unter einem oder mehreren Nebeneffekten leiden, wenn sie mit DMSO behandelt werden. In einigen Fällen sind die Nebeneffekte so stark, daß die Person oder der Arzt die .Verwendung von DMSO zu Gunsten eines weniger wirksamen therapeutischen Mittels vermeidet.

Verschiedene unerwünschte Nebeneffekte wurden als Folqe der Behandlung mit DMSO beobachtet. Am häufigsten treten ungünstige Hautreaktionen, übelriechender Atem und fäulnisartiger Geschmack auf.

Diese ungünstigen Reaktionen, die durch DMSO hervorgerufen werden, sind genau dokumentiert. Auf Seite 356 des Standardwerks "Contact Dermatitis" von Alexander A. Fisher, M.D. (2. Auflage, 1973) ist Dimethylsulfoxid (DMSO) als primäres Urticariogen aufgeführt. Band 141 von "Annals New York Academy of Sciences" enthält einige Artikel, welche die auf DMSO zurückgeführten unerwünschten Nebeneffekte beschreiben. Hierzu gehören die Artikel von Goldman, et al.; Sulzberger, et al. auf den Seiten 439, 40;-Brown auf den Seiten 500, 501 und einige andere.

Die Probleme mit dem übelriechenden Atem sind in einigen Fällen so groß, daß Hospitäler Isolierstationen einzurichten

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hatten, wo sie DMSO aus der zentralen Klimaanlage abführten. Hautreizungen aufgrund Örtlich appllzierter DMSO-PrSparate waren so groß, daß eine beträchtliche Anzahl von Patienten eine Behandlung dieser Art ablehnen.

Ein anderer, möglicherweise noch ernsterer Nebeneffekt wird manchmal beobachtet, wenn DMSO intravenös "eingegeben wird. Dabei handelt es sich um Lysis der roten Blutkörperchen. Intravenöse Verabreichung von DMSO ist problematisch, wenn die Substanz zur Behandlung des Gehirns und des Rückenmarks, von Krebs» von Organhypoxien, Herzanfällen oder anderen inneren Erkrankungen verwendet wird. Große intravenöse Dosen von DMSO können einen therapeutischen Effekt für diese Zwecke haben, jedoch kann die sich aus der intravenösen Zufuhr von DMSO ergebende .Lysis der roten Blutkörperchen schädlich oder sogar tödlich für die behandelte Person sein.

Es ist außerdem allgemein ratsam, die Dosis einer pharmazeutischen Substanz, die einem Menschen oder einem anderen Lebewesen zugeführt wird, auf die kleinste wirksame Menge zu beschränken. Obwohl DMSO eine der am stärksten penetrierenden pharmazeutischen Substanzen ist und selbst in extrem kleinen Dosen wirksam ist, sollte auch die Mindestdosis dieser Substanz zur Erzielung eines bestimmten physiologischen Effekts noch weiter reduziert werden.

Hiermit in Verbindung steht ein Problem, das beobachtet wurde, wenn Fische.mit hyperosmotischen Konzentrationen eines die Membranpermeabilität ändernden Mittels behandelt werden, wie in der US-PS 4 112 946 beschrieben ist. Derartige Mittel umfassen Harnstoff (Urea), NaCl und Azetamid.

Diese Substanzen sind, eventuell mit Ausnahme von Azetamid, im wesentlichen nicht-toxisch bei externer Anwendung auf Menschen und Säugetiere. Bei Zugabe zu einer Lösung, die mit einer Epithelmembran von Fischen in Kontakt kommt,

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können solche Substanzen bei mittleren Konzentrationen (beispielsweise bei etwa 3 Gew.%) to dLich sein.

Um die Verabreichung therapeutischer Mittel für Fische zu optimieren, sind Lösungen mit einem Anteil von mehr als Gew.% der obengenannten gelösten Stoffe erforderlich. Die Fischsterblichkeit ist daher eine wesentliche Schranke für die wirksame Verwendung von hyperosmotischen Behandlungen.

Es ist Aufgabe der Erfindung, besondere DMSO-haltige Zusammensetzungen oder Präparate zur Verfugung zu stellen, deren Anwendung im therapeutischen und kosmetischen Bereich dadurch wesentlich erweitert ist, daß die unerwünschten Nebeneffekte beseitigt oder wesentlich reduziert sind. Insbesondere sollen die Zusammensetzungen und Präparate die Applikation von DMSO am Menschen oder Tier zu therapeutischen oder kosmetischen Zwecken ohne Schaffung ungünstiger Hautreaktionen, übelriechenden Atems oder faulen Geschmacks ermöglichen. Bei intravenöser Zuführung von DMSO soll die Lysis der roten Blutkörperchen wesentlich verringert werden. Das DMSO-hal tige Präparat soll außerdem ohne Nebeneffekte zur Behandlung von Erkrankungen der Finger und/oder Fußnägel geeignet gemacht werden. Darüberhinaus sollen durch die Erfindung wirksame Hauterweichungsmittel zur Verfügung gestellt werden, welche zum Weichmachen der Außenhaut an Finger- und/oder Fußnägeln und zum Erweichen von epidermen Verdickungen verwendet werden können. Schließlich sollen Fische vor der Giftigkeit von Lösungen, wie sie zur hyperosmotischen Behandlung von Fischen verwendet werden, geschützt werden.

Die Erfindung beruht auf der Erkenntnis, daß bei gemeinsamer* Zuführung von DMSO und Harnstoff zu Epithelzonen eines Menschen oder Tiers die zu erwartenden ungünstigen Hautreaktionen, der übelriechende Atem und der faule Mundgeschmack wesentlich reduziert werden. In den meisten Fällen können diese nachteiligen Folgewirkungen vollständig eliminiert werden.

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Es hat sich außerdem aufgrund genauer Untersuchungen gezeigt, daß Harnstoff die Wirkung von DMSO in einigen Fällen verstärkt. Es scheint, daß eine DMSO-Zusammensetzung, die Harnstoff und/ oder Äthanol enthält, rascher als ähnliche Zusammensetzungen ohne Harnstoff oder Äthanol im Gewebe absorbiert werden. Wenn die DMSO-Zusammensetzung eine andere pharmazeutische Substanz enthält, so wird diese andere Substanz ebenfalls aufgrund des Vorhandenseins von Harnstoff und/oder Äthanol rascher absorbiert. Das Vorhandensein von NaCl, KCl und/oder Azetamid verringert das unangenehme Gefühl aufgrund der örtlichen Applikation von DMSO-Präparaten und scheint das Eindringen noch weiter zu beschleunigen und zu verstärken. ·

Es wurde ferner festgestellt, daß gewissen DMSO-Zusammensetzungen, die Harnstoff enthalten, ein wirksames Mittel zur Behandlung erkrankter Finger- und Fußnägel, zur Erweichung der von Finger- und Fußnägeln zu entfernenden Außenhaut und zum Weichmachen epidermer Verdickungen für deren leichte Entfernung darstellen..

Wenn DMSO intravenös mit Äthanol zugeführt wird, so wird die Lysis der roten Blutkörperchen verringert und nimmt mit wiederholten Zugaben weiter ab.

Wenn DMSO Harnstoff, NaCl und/oder Azetamid enthaltenden Lösungen zugegeben wird, so werden solche Lösungen weniger toxisch für Fische als ähnliche Lösungen -ohne DMSO.

Die bisher die Verwendung von DMSO als Therapeutikum verhindernden Nebeneffekte .werden überraschender Weise dann eliminiert, wenn Harnstoff den DMSO-enthaltenden Stoffen beigegeben wird. Selbst geringe Mengen von Harnstoff sind vorteilhaft bei der Reduzierung der Histaminfreisetzung von Brenn- und Juckreiz, von lokaler Dermatitis, Austrocknung, Rißbildung und Blasenbildung der Haut, unange-

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nehmern Atemgeruch, Nachgeschmack, Kopfschmerz und Übelkeit bei Personen, auf deren Haut DMSO-Zusammensetzungen appliziert werden.

Harnstoff ist insbesondere ein ausgezeichneter Schutz vor Nebeneffekten, da es eine natürlich im menschlichen oder tierischen Körper auftretende Substanz ist. Harnstoff ist insbesondere nicht-toxisch und daher bei allen Menschen und Tieren verträglich. Es kann aus diesem Grunde bei beinahe allen pharmazeutischen Zusammensetzungen, die DMSO enthalten, ohne die Gefahr toxischer Effekte verwendet werden.

e Gründe für die Wirksamkeit von Harnstoff im Sinne einer Reduzierung oder Beseitigung der oben angegebenen unerwünschter Nebeneffekte sind noch nicht vollständig aufgeklärt. Es scheint jedoch so zu sein, daß der Harnstoff die Erzeugung unerwünschter DMSO-Stoffwechselprodukte verhindert.

Im Falle der Atemgeruchsprobleme ist es bekannt, daß Dimethylsulfid ein kleineres Methabolit (Stoffwechselprodukt) von DMSO ist, das über die Lungen ausgeschieden wird, wodurch der schlechte Atem und der faule Geschmack entstehen. Harnstoff verhindert wahrscheinlich die Metabolisierung von DMSO zu Dimethylsulf id. Laborexperimente zeigen, daß sich DMSO bei Erhitzung in einem Teströhrchen in Dimethylsulfid zersetzt. Wenn jedoch Harnstoff zugegeben und das Experiment wiederholt wird, so ist kein Dimethylsulfid feststellbar.

In ähnlicher Weise kann eine ungünstige Hautreaktion das Ergebnis eines Angriffs des Dimehtylsulfidmoleküls auf Mastzellen in der subkutanen Schicht derjenigen Hautstelle sein, auf die DMSO örtlich aufgetragen worden ist. Die Inhibierung der Metabolisierung von DMSO zu Dimethylsulfid. durc Harnstoff bestätigt die beobachtete antiurticariogene Wirksamkeit bei der Verringerung von durch DMSO hervorge-

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rufenen ungünstigen Hautreaktionen.

Die beschleunigte Eindringung von DMSO-Lösungen, die Harnstoff enthalten, geht möglicher Weise auf die Tatsache zurück, daß isotone Harnstofflösungen eine Konzentration (Gewicht pro Volumen-Einheit) haben, die kleiner ist als diejenige von DMSO und von den meisten,anderen pharmazeutischen Mitteln. Bei gegebener Konzentration haben somit harnstoffhaitige Zusammensetzungen in Kombination mit DMSO eine verstärkte Penetrationsfähigkeit. Dieser Effekt wird sogar noch größer, wenn die Menge des gelösten Stoffes durch Beigabe von Harnstoff zur DMSO-Zusammensetzung vergrößert wird.

Es scheint so zu sein, daß nur solche Substanzen das Eindringen von DMSO-haltigen Zusammensetzungen fördern, deren Lösungen bei Isotonie weniger konzentriert sind als isotone DMSO-Lösungen. Nur wenige derartige Substanzen bewirken jedoch die gewünschte Erhöhung des Eindringvermögens .

Weitere Kriterien für Substanzen, die das Eindringvermögen von UMSO verstärken, sind Wasserlöslichkeit bei Zimmertemperatur und ein Molekulargewicht, das nicht größer als 78 ist. Substanzen,die zur Polymerisation neigen, sind ungeeignet. Wenn die Substanz mit DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungen zur Applikation an lebenden Wesen verwendet werden soll, muß sie auch für das Empfängerwesen relativ atoxisch sein.

Spezielle Substanzen, die das Eindringen von DMSO-Zusammensetzungen fördern, sind, wie gefunden wurde, Harnstoff NaCl, KCl, Äthanol und Azetamid. Von diesen Substanzen ist Harnstoff am wirksamsten. Er scheint im Sinne eines "Öffnens" der Membranen zur Ermöglichung eines verstärkten

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Kindringens zu wirken.

Die Tatsache, daß Harnstoff, NaCl, KCl, Azetamid und/oder Äthanol zur Verstärkung des DMSO-Eindringens kombiniert werden können, ist in verschiedener Hinsicht von Bedeutung. Obwohl Harnstoff und Äthanol die durch Applikation bzw. Eingeben von DMSO hervorgerufenen Nebeneffekte reduzieren oder beseitigen, haben manche Lebewesen zumindest milde Reaktionen auf die Eingabe von DMSO. Durch Eingeben bzw. Applizieren von Harnstoff, NaCl, KCl, Azetamid und/oder Äthanol sollte es möglich sein, die Menge des DMSO als aktives therapeutisches Mittel zu verringern, da eine stärkere Gewebeeindringung des aufgebrachten DMSO erzielt werden kann. Die Fähigkeit zur Verringerung der Menge des verwendeten DMSO ohne gleichzeitige Verringerung der absorbierten Menge sollte weiterhin die ungünstigen Nebeneffekte von DMSO verringern.

Ähnliche vorteilhafte Ergebnisse stellen sich dann ein, wenn Harnstoff, NaCl, KCl, Azetamid und/oder Äthanol solchen Zusammensetzungen beigegeben wird, die DMSO als Träger und Eindringbeschleuniger für andere pharmazeutische Substanzen enthalten, beispielsweise antineoplastischen Mitteln, Analgetika, Antientzündungsmitteln, Antigerinnungsmitteln, Vasodilatoren, Antimikrobenmitteln, diagnostischen Farbstoffen, diagnostischen strahlenundurchlässigen Mitteln, Diätbeigaben, Nährmitteln, physiologisch wirksamen Steroiden und Proteinmodifikatoren.

Proteinmodifizierende Mittel umfassen diejenigen Substanzen, welche Kollagen und möglicher Weise andere im Bindegewebe gefundene Substanzen, z.B. Hyaluronsäure, Elastin und Fibrinogen, modifizieren. Ein derartiges Protein-modifizierendes Mittel ist Methylsulfonylmethan (MSM).

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DMSO ist ein bekannter Eindringbeschleuniger für chemische Stoffe, deren Molekulargewicht kleiner als etwa 8000 ist und die auf intakte Körpermembranen bzw. Körperhäute aufgebracht werden. Es wurde jedoch auch gefunden, daß DMSO das Eindringen von Substanzen höheren Modekulargewichts, z.B. Enzymen beschleunigt, die auf gespannte Zellenwände bzw. Hautbereiche, einschließlich Zellenwänden bzw. Membranen, die entzündet, verletzt oder starken osmotischen Spannungen ausgesetzt sind, appliziert werden. In beiden Fällen trägt die Beigabe von Harnstoff NaCl, KCl,' Äthanol und/oder Azetamid weiter fördernd zum Eindringen von DMSO und sonstigen pharmazeutischen Mitteln bei. Eine verstärkte Eindringneigung kann die pharmazeutische Wirksamkeit verbessern und in einigen Fällen eine Reduzierung der verwendeten Dosis möglich machen.

Das Eindringen fördernde Substanzen, z.B. Harnstoff, sind besonders zweckmäßig in DMSO-Lösungen enthaltenden Diagnosefarbstoffen. Beim Einfärben von Zellen zu diagnostischen Untersuchungen ist es erwünscht, mit so wenig Farbstoffen und anderen Chemikalien wie möglich auszukommen, um Änderungen in den eingefärbten Zellen zu minimieren. Das verstärkte Eindringen in die Zellen, das sich aus der Zugabe von Harnstoff ergibt, macht es möglich, die Farbstoff- und DMSO-Menge in Färbepräparaten zu verringern. Der zugesetzte Harnstoff hat keinen ungünstigen Einfluß auf die Struktur der zu färbenden Zellen.

Es wurde festgestellt, daß mit den zuvor beschriebenen Zusammensetzungen behandelte Menschen den salzenthaltenden Zusammensetzungen, insbesondere den Zusammensetzungen mit NaCl gegenüber ähnlichen Zusammensetzungen ohne Salz den Vorzug gaben. Befragte Personen gaben an, daß örtlich applizierte DMSO-Zusammensetzungen mit Salz angenehmer sind.

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- jo— ..

Bei der Zugabe von Harnstoff zu DMSO können dieselben physiologischen Effekte erzielt werden wie bei DMSO-Zusammensetzungen ohne Harnstoff. So kann beispielsweise Harnstof mit OMSO einer Zone von entzündetem Gewebe in einer solche Menge zugeführt werden, daß die Zeichen und Symptome der Entzündung verringert werden; ferner kann die genannte Stoffkombination zur Linderung von Schmerz,zur Förderung der Muskelentspannung bei unter abnormalen Muskelkontraktionen leidenden Personen, bei unter Symptomen der Vaskularinsuffizienz im Blut- und Lymphkreislaufsystem leidenden Personen zur Erleichterung der Symptome der Vaskularinsuffizienz verwendet werden.

Die Behandlung mit wirksamen Mengen von DMSO und Harnstoff kann auch zur Erleichterung und Linderung der Zeichen und Symptome einer Verbrennung, zur Förderung . der Heilung einer Hauttransplantation und zur Linderung von Zeichen und Symptomen von Atemnot verwendet werden. Bei Verabreichung von DMSO mit Harnstoff können Zeichen und Symptome der Arthritis bei unter Arthritis leidenden Menschen gelindert, ferner die Heilung von Gewebebeschädigungen beschleunigt oder bei Säugetieren und Menschen Angstzustände gemildert und der Allgemeinzustand verbessert werden.

Es wurde außerdem gefunden, daß gewissen Zusammensetzungen, die sowohl DMSO als auch Harnstoff enthalten, medizinische Vorteile ergeben, die bei Zusammensetzungen mit DMSO oder Harnstoff allein nicht erreicht werden können. So wurde beispielsweise festgestellt, daß mit Harnstoff zusammen verabreichtes DMSO abnormes, totes oder erkranktes Gewebe wiederherstellt oder entfernt. DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungei können daher zur Behandlung von interstitieller Cystitis oder Bindegewebserkrankungen, wie progressiver Organsklerose verwendet werden.

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DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungen können außerdem zur Heilung oder Linderung der Symptome erkrankter Finger- und/oder Fußnägel von menschlichen oder tierischen Wesen verabreicht werden. Die Applikation von DMSO und Harnstoff auf die erkrankten Stellen von Nägeln macht diese Bereiche weich. Nach einigen Behandlungstagen können die erkrankten Zonen der Nägel schmerzlos durch leichtes Drücken mit einer Pinzette entfernt werden. In den meisten Fallen wird der nicht-erkrankte Teil des Nagels durch die Behandlung mit einer DMSO-Harnstoff-Zusammensetzung nicht ungünstig beieinflußt.

Bei Verwendung zur Behandlung erkrankter oder beschädigter Gewebe sind DMSO-Harnstoff-Kombinationen am wirksamsten, wenn sie bei einer Temperatur von mehr als 37 C, vorzugsweise so warm, wie die behandelte Person ertragen kann, appliziert werden. Warme Applikationen sind besonders vorteilhaft bei der Behandlung von Muskel-Skeletalschäden,z.B. Arthritis, Verstauchungen, Verspannungen, Verletzungen weicher Gewebe o.dgl.

DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungen sind außerdem gut geeignet zur Verwendung bei physiotherapeutischen Methoden, insbesondere bei der Verwendung von energetischen Behandlungen, z.B. Ultraschall und bei der Behandlung von Muskelskeletalschäden.

Wie sich aus den nachfolgenden Beispielen ergibt, sind DMSO-Harnstof f-Zusammensetzungen bei Hautapplikationen derart wirksam, daß sie die Haut erweichen und feucht machen. Daher ergeben gewisse DMSO-Harnstoff-Kombinationen ausgezeichnet liosmetische Haut-Erweichungslotionen oder -gels. Ferner sind DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungen ausgezeichnete Träger für andere Hautbehandlungskosmetika. Der Ausdruck "pharmazeutische Zusammensetzungen" umfaßt im Rahmen der

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vorliegenden Erfindung daher kosmetische Präparate.

Von Harnstoff ist bekannt, daß er einen günstigen Effekt auf die Haut entfaltet, jedoch wird er in den meisten Standardkosmetika "weggewaschen". Bei gemeinsamer Verwendung von DMSO und Harnstoff wird die Penetration in die Haut für jeden dieser Bestandteile verstärkt, so daß die Hauterweichungsvorteile von Harnstoff verstärkt und selbst nach mehreren Waschvorgängen erhalten werden.

Wie weiter unten beschrieben werden wird, hat sich gezeigt, daß die Verwendung von Äthanol mit DMSO bei der intravenösen Verabreichung im Sinne einer Reduktion schlechten Atemgeruchs und der Lysis roter Blutkörperchen wirksam ist.

Rezepturen

Wie bei jeder pharmazeutischen Vielzweckzusammensetzung ist eine experimentelle Bestimmung der optimalen Dosierung von DMSO und Harnstoff für die Applikation bei besonderen Zweckbestimmungen erforderlich. Wenn beispielsweise die durch die Applikation von DMSO hervorgerufenen Nebeneffekte verringert werden sollen, so sollte der Anteil von Harnstoff so bemessen sein, daß die gewünschte Verringerung erreicht wird. Wenn das Ziel darin liegt, das Eindringvermögen zu verbessern, so wird in ähnlicher Weise die Menge an Harnstoff oder einer anderen, das Eindringen fördernden Substanz derart vorgesehen, daß das Eindringvermögen verbessert wird.

Wie in den oben angegebenen Patentschriften beschrieben ist, sollten DMSO-'Zusammensetzungen für örtliche Applikation wenigstens 10 Gewichtsprozent DMSO enthalten, um einen vorteilhaften Effekt zu erzielen. Zusammensetzungen für klinische Verwendungen sollten wenigstens etwa 40 Gewichtsprozent DMSO enthalten; für den stärksten Effekt sollte

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eine Zusammensetzung wenigstens etwa 50 Gewichtsprozent DMSO enthalten. Um im Sinne einer Verringerung der DMSO-induzierten Nebeneffekte und/oder einer Beschleunigung des Eindringens der DMSO-Zusammensetzungen wirksam zu sein, sollte Harnstoff !in einem Gewichtsverhältnis zu DMSO von mehr als 1 : 99 stehen. Besonders deutliche Ergebnisse werden erzielt, wenn das Gewichtsverhältnis von Harnstoff zu DMSO größer als 1: 9 ist. Normalerweise sollten DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungen nicht mehr als etwa 60 Gewichtsprozent Harnstoff enthalten, da größere Konzentrationen nur zulasten der Wirksamkeit der entsprechend verringerten DMSO-Anteile erzielt werden könnten.

Unter besonderen Umständen kann die gewünschte DMSO-Kon-.zentration für eine pharmazeutische Zusammensetzung bzw. ein pharmazeutisches Präparat wesentlich unter 10 Gewichtsprozent oder über 50 Gewichtsprozent sein. Die oben genannten Harnstoffverhältnisse gelten auch unter solchen Umständen. Wenn beispielsweise eine DMSO-Zusammensetzung niedriger Konzentration (3 bis 4 Gewichtsprozent) für die Applikation auf dem Auge hergestellt wird, so wäre eine geeignete Harnstoffmenge 1 Gewichtsprozent.

Zusammensetzungen mit einem Gewichtsprozent oder weniger DMSO sind wirksam zur Behandlung von (Membran-) Hauten, die gespannt, z.B. entzündet, geritzt sind oder starken osmotischen Spannungen unterworfen sind. In solchen Fällen gelten ebenfalls die oben genannten DMSO-Harnstoff-Verhäl tnisse.

Pharmazeutische Zusammensetzungen zur Behandlung der Haut, der Mundhöhle und des Rectalepithels können DMSO und Harnstoff als einzige Komponenten enthalten. In jeder solchen Zusammensetzung sollte das Gewichtsverhältnis von DMSO zu

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Harnstoff nicht kleiner als etwa 100 : 35 sein. Selbst bei diesem Verhältnis wird die Lösung am besten warm appliziert, um ein Abscheiden des Harnstoffs zu vermeiden.

Wenn NaCl, KCl, Äthanol und/oder Azetamid in DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungen vorhanden sind, um das Eindringvermögen oder die Annehmlichkeit wirksam zu erhöhen, sollten sie in einer bestimmten Mindestmenge vorhanden sein. Das gemeinsame Gewicht dieser Stoffe sollte im Verhältnis zum Gewicht des Harnstoffs in der Zusammensetzung größer als 1 : 99 sein. Beträchtliche Vorteile wurden beobachtet, wenn das Verhältnis größer als 1 : 9 ist.

Besonders wirksame Zusammensetzungen enthalten zumindest für örtliche Anwendung etwa 6 Gramm Harnstoff, 1 Gramm NaCl und wenigstens 6 Gramm Wasser auf jeweils 19 Gramm DMSO. Ein wässriges Medium ist gewöhnlich für alle DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungen erforderlich, die NaCl oder KCl enthalten.

Bei Einbeziehung in DMSO-Zusammensetzungen bzw. Präparate kann Harnstoff, NaCl und KCl mit DMSO-MoIekülen Komplexe eingehen. Infolgedessen können DMSO-Zusammensetzungen DMSO-Harnstoff-Komplexe, DMSO-SaIz-Komplexe und/oder DMSO-Harnstoff-Salz-Komplexe verschiedener Arten enthalten. Die genaue Wirkung, die eine solche Komplex-Bildung auf die Aktivität der DMSO und Harnstoff enthaltenden Zusammensetzungen hat, ist nicht bekannt. Es wird jedoch angenommen, daß die oben genannten Komplexe enthaltende Zusammensetzungen im Sinne der erwünschten Reduktionen der Nebeneffekte und der Erhöhung des Eindringvermögens wirksam sind.

Wenn DMSO in der gleichen Zusammensetzung mit Harnstoff zur Entfernung von Nagellack, zur Behandlung erkrankter

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Finger- und Fußnägel oder zum Entfernen von epider^-malen Verdickungen verwendet wird, sollte die Zusammensetzung eine hydrophobe . Salbenbasis und wenigstens 10 Gewichtsprozent sowohl von DMSO als auch von Harnstoff enthalten, um wirksam zu sein. Es ist vorteilhaft, ein Salz, wie NaCl oder Na„S anzuwenden. Die Verwendung eines solchen Salzes erhöht die Geschwindigkeit, mit der die Nagelhaut oder die verdickte Haut für die Entfernung weichgemacht werden. Es scheint insbesondere, daß DMSO-Harnstoff-Zusammensetzungen, die NaCl und/oder Na-S enthalten, tiefer in die Zone zwischen dem Nagel und der Platte bzw. dem Bett eindringen als Zusammensetzungen ohne eine solche Salzkomponente.

Derartige Lösungen zur Behandlung erkrankter Nägel sollten zwischen 0,25 und 10 Gewichtsprozent eines aus NaCl, Na₂S und deren Mischungen ausgewählten Salzes zusammen mit wirksamen Mengen von Harnstoff und DMSO enthalten. Weniger als 5 Prozent Salz hat sich als vollständig ausreichend in den meisten Fällen erwiesen.

Um die örtlichen Applikationen zu erleichtern kann eine der oben genannten Zusammensetzungen ein pharmazeutisch annehmbares Verdickungsmittel enthalten, um die Viskosität der Zusammensetzung zu erhöhen. Derartige Verdickungsmittel können zur Bildung von Cremes, Lotionen, Gels, Pasten, Salben und Suppositorien verwendet werden.

Methoden der Anwendung

Harnstoff kann mit DMSO-Zusammensetzungen auf irgendeine fpr die DMSO-Verabreichung bisher bekannte Weise verabreicht bzw. angewendet werden. Die stärksten Verringerungen der Nebeneffekte wurden beobachtet, wenn Harnstoff-DMSO-Zusammensetzüngen für die örtliche Applikation beigegeben wurde.

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Personen, die örtlich appliziertes DMSO verwenden, leiden wesentlich weniger unter schlechtem Atem, faulem Mundgeschmack und ungünstigen Hautreaktionen, wenn Harnstoff zusammen mit DMSO verwendet wird.

Örtliche Applikationen von DMSO und Harnstoff können auf herkömmliche Weise erfolgen. Sie können aufgetragen oder aufgesprüht und trocknen gelassen werden oder mit getränkten Lappen aufgebracht werden.

Eine vorteilhafte Methode zur Behandlung von Gliedern, Fingern oder Zehen besteht darin, daß ein geeignetes flüssiges DMSO-Harnstoff-Präparat in einen Kunststoffbeutel gefüllt und das Körperglied so in den Beutel eingesetzt wird, daß der Beutel eine Art von Umschlag bildet. Der Außenseite des Beutels kann Wärme zugeführt werden, um die Behandlung zu beschleunigen.

In ähnlicher Weise können Rückenmarkverletzungen dadurch behandelt werden, daß ein Tuch mit einer DMSO-Harnstoff-Lösung gesättigt und entlang der Wirbelsäule aufgelegt wird. Das Tuch kann mit einem undurchlässigen Kunststoffüberzug bedeckt werden, und es können warme Wasserflaschen aufgelegt werden, um das Eindringen der DMSO-Harnstoff-Lösung zu beschleunigen.

In den meisten Fällen werden DMSO und Harnstoff am besten gemeinsam, d.h. in Form eines Präparates oder unmittelbar aufeinanderfolgend verabreicht. In dem besonderen Falle der örtlichen Applikation der DMSO-Zusammensetzung wird auch eine gewisse Verringerung der Nebeneffekte beobachtet, wenn Patienten mit DMSO ohne Harnstoff behandelt werden, sofern dieser Behandlung eine Behandlung an der gleichen Stelle sowohl mit DMSO als auch mit Harnstoff vorausgegangen ist. Zumindest bei örtlichen Anwendungen ist es dadurch möglich, Behandlungen

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wie abwechselnde Anwendung von DMSO-Zusammensetzungen mit und ohne Harnstoff zu verwenden.

Wenn eine DMSO-Zusammensetzung für örtliche Anwendung Substanzen enthält, die ungünstig reagieren oder entaktiviert werden, wenn sie mit Harnstoff kombiniert werden, oder die mit Harnstoff unter Bildung von Makromolekülen, welche das Eindringen in das Gewebe verlangsamen, reagieren, so kann eine Harnstoff-Zusammensetzung zuerst an der Behandlungsstelle appliziert und trocknen gelassen werden. Die DMSO-Zusammensetzung könnte danach auf der gleichen Stelle appliziert werden, wobei die Gefahr herabgesetzt ist, daß Harnstoff-empfindliche Substanzen ungünstig beeinflußt werden. Gegebenenfalls können NaCl, KCl, Äthanol und/oder Azetamid in die Harnstoff-Zusammensetzung oder, wenn verträglich, in die DMSO-Zusammensetzung integriert werden.

Als Mittel zur Förderung der Penetration kann Harnstoff mit DMSO durch örtliche Applikation, intravenöse Zuführung, subepidermoidale oder durch orale Verabreichung angewendet werden. Es kann ferner intrathekal, intravasal, rektal oder durch Instillation in Auge, Ohr, Nase oder in abnorme Eitersäcke des Körpers angewendet werden.

Die folgenden Beispiele beschreiben einige von vielen klinischen Tests, welche zeigen, daß das Vorhandensein von Harnstoff DMSO-haltige pharmazeutische Zusammensetzungen günstig beeinflussen kann. Bei jedem der angegebenen Beispiele wurden DMSO und Harnstoff in einer gemeinsamen Zusammensetzung angewendet.

Wie oben erwähnt können abwechselnde Applikationen eines DMSO- und Harnstoff-haltigen Präparats unter gewissen Umständen zweckmäßig sein. Für der], ungewöhn-

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lichen Fall, daß eine bevorzugte DMSO-Zusammensetzung ein chemisches Mittel enthält, das bei Vorhandensein von Harnstoff instabil ist, wäre es beispielsweise zweckmäßig, die Methode der abwechselnden Applikation der DMSO-Zusammensetzung und einer Harnstoff-Zusammensetzung anzuwenden oder die beiden Zusammensetzungen unmittelbar vor der Verwendung zu mischen. Aufeinanderfolgende Applikationen von DMSO- und Harnstoff-Zusammensetzungen oder das Mischen unmittelbar vor der Anwendung könnte auch dann zweckmäßig sein, wenn die getrennten DMSO- und Harnstoff-Zusammensetzungen eine wesentlich längere Haltbarkeit als das kombinierte Präparat haben. Ob Harnstoff mit einer besonderen DMSO-Zusammensetzung kombiniert werden soll, läßt sich am besten experimentell bestimmen.

1. Kutane Anwendunqen	Gewichtsprozent
a. Hautanwendunqen	61,7
Beispiel 1	26,5
	8,8
DMSO	3,0
Wasser
Harnstoff
NaCl

Eine Kontrollösung mit 62 Gewichtsprozent DMSO in Wasser wurde ebenfalls hergestellt. Beide Präparate wurden auf die Haut jeweils von fünf Menschen appliziert, von denen bekannt war, daß sie auf DMSO-haltige Präparate bei einer Konzentration von 50 Gewichtsprozent empfindlich reagieren.

Bei einem ersten Test wurden die beiden Lösungen gleichzeitig, jedoch an verschiedenen Stellen der Haut der behandelten Personen appliziert. Jede Person klagte über

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Jucken und Brennen an den Stellen, wo die Kontrolllösung appliziert worden war. Jede Person hatte
schlechten Atemgeruch. An den Stellen, wo die harnstoff haltige Lösung appliziert wurde, ergab sich keine \ unangenehme oder ungünstige Hautreaktion, selbst wenn , die Lösung an besonders empfindlichen Zonen des Halses
unterhalb des Kinns appliziert wurde.

Einige Tage später wurden dieselben Personen nur mit

der Harnstoff enthaltenden Lösung behandelt. Es konnte

keine unangenehme oder ungünstige Hautreaktion festge- ι

stellt werden. Weder schlechter Atem noch fauler Geschmack !

konnten festgestellt werden. Jede der Personen stellte

fest, daß ihre Haut weicher geworden war, wenn harnstoff- j

haltige Zusammensetzungen bzw. Präparate appliziert worden I

waren. j

Nach einigen weiteren Tagen wurden die Personen wiederum j

mit der Kontroilösung behandelt. Die Personen litten j

wiederum unter übelriechendem Atem, faulem Mundgeschmack j und ungünstigen Hautreaktionen.

Beispiel 2

Ein Test wurde durchgeführt, um zu bestimmen, ob es zweckmäßig ist, DMSO-Zusammensetzungen zu verwenden, die relativ große Mengen an pharmazeutisch verwendbaren Agentien
enthalten, deren Lösungen bei Isotonie weniger konzentriert sind als isotone DMSO-Lösungen. Harnstoff ist ein solches Agens. So wurde zu Vergleichszwecken
die Zusammensetzung gemäß Beispiel 1 gegenüber der folgenden Zusammensetzung getestet, welche mehr Harnstoff und
weniger Wasser enthält:

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Gewichtsprozent DMSO 61,7

Wasser 17,6

Harnstoff 17,6

NaCl 3,0

Menschen, die unter verschiedenen, mit DMSO-Zusammensetzungen behandelbaren Beschwerden bzw. Krankheiten litten, erhielten jeweils im Verlauf der Behandlung zu getrennten Zeiten zwei Zusammensetzungen. In jedem Falle brachten die Personen zum Ausdruck, daß sie der neuformulierten Zusammensetzung mit einem größeren Anteil an Harnstoff den Vorzug geben.

Zu den beobachteten besonderen Vorzügen gehören rascheres medizinisches Ansprechen und erhöhter Komfort (geringere Gewebereizung). Die betroffenen Hautpartien von unter Sklerodermie leidenden Personen wurden weichgemacht, wenn die Harnstoff in hoher Konzentration enthaltende Zusammensetzung örtlich appliziert wurde. Solche Personen hatten jedoch kaum merkliche Linderung, wenn Harnstoff-Zusammensetzungen ohne DMSO appliziert wurden.

Beispiel 3

Die folgende Zusammensetzung wurde zur Behandlung von Personen verwendet, die unter Kontaktdermatitis, Giftsumach, Insektenstichen und anderen Zuständen litten, die durch subdermale Histaminfreisetzung mit entsprechenden unangenehmen Begleitumständen gekennzeichnet sind:

Gewichtsprozent DMSO 47,6

Wasser 33,3

NaCl 4,8

Harnstoff 14,3

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Örtliche Applikationen dieser Zusammensetzung ergaben ausgezeichnete Ergebnisse. Reizungen und Jucken der Haut wurden prompt gestoppt, und in allen Fällen folgte darauf eine rasche Heilung. Kleine Risse oder Schnitte wurden auch mit der oben genannten Lösung behandelt; in jedem Falle ergab sich eine infektionsfreie Heilung.

Beispiel 4

DMSO-Zusammensetzungen wurden erfolgreich zur Behandlung einer Vielzahl von Sportverletzungen, z.B. Verstauchungen, Muskelkrämpfen o.dgl. verwendet. In diesem Beispiel wurde die folgende Zusammensetzung formuliert:

DMSO	200	g
Harnstoff	100	g
Äthanol (absolut)	50	g
Wasser	25	g
Methylsalizylat (als Odorant)	10	g
3% Carbopol 934 (Carbomer-934)	80	g
Triethanolamin	2	g

Eine örtliche Anwendung dieser Zusammensetzung erwies sich ·. als wirksam bei Testbehandlungen von Verstauchungen, Zerrungen, Muskelkrämpfen und anderen Sportverletzungen. Die mit dieser Zusammensetzung behandelten Athleten hatten keine abnormen Reizungen.

Eine Person mit sehr heller Gesichtsfarbe und rotem Haar vertrug eine 50 gewichtsprozentige wässrige DMSO-Zusammensetzung ohne Harnstoff nicht. Wenn ein die oben aufgeführten Bestandteile enthaltendes Gel auf die Haut dieser Person appliziert wurde, konnte eine gute medizinische Verbesserung beobachtet werden. Außerdem ergab sich kein Anzeichen von

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unerwünschten Nebeneffekten, wie sie zuvor bei der Anwendung von DMSO ohne Harnstoff auftraten.

Beispiel 5

Eine Methylsalizylatsalbe wurde zur Behandlung von unter Peitschenverletzungen leidenden Personen hergestellt. Die Salbe enthielt Harnstoff und Äthanol zur Förderung des Eindringvermögens von Methylsalizylat und DMSO. Im einzelnen enthielt die Salbe folgende Bestandteile:

DMSO 200 g

Harnstoff 100 g

Wasser 100 g

Äthanol 50 g

Methylsalicylat 10 g

Carbopol 940

(Carbomer-940) 2,4 g Trieäthanolamin 2 g

Diese Salbe wurde auf die Nackenbereiche der Geschädigten aufgetragen, die zuvor bei Behandlung mit anderen DMSO-Substanzen Unannehmlichkeiten hatten. Methylsalizylat in der Salbe drang extrem rasch in das Gewebe ein, so daß die Personen von sofortiger Befreiung bzw. Linderung des Schmerzes berichteten. Die Salbe wirkte bei örtlicher Applikation auf Hautzonen geringer Empfindlichkeit lindernd, und es ergaben sich weder übelriechender Atem noch schlechter Mundgeschmack.

Beispiel 6

Die Paste gemäß Beispiel 13 wurde zum Imprägnieren von Polyolefinschaumlappen verwendet. Die imprägnierten Lappen

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wurden unbeschnittenen Schwielen und Hühneraugen am Fuß einer Person aufgelegt. Nach täglicher Behandlung über vier bis acht Tage waren die epidermalen Verdickungen genügend aufgeweicht, um leicht entferYit werden zu können.

Beispiel 7

Personen mit starken epidermalen Verdickungen wurden entsprechend dem Verfahren gemäß Beispiel 13 behandelt, wobei entsprechend Beispiel 6 vorgegangen wurde. Erzielt wurde ein guter Erfolg bei der Aufweichung des Gewebes, das ohne Schwierigkeit entfernt werden konnte.

Beispiel 8

Die DMSO-Harnstoff-Zusammensetzung gemäß Beispiel 1 wurde an Patienten angewandt, die unter einer Verhärtung der Haut als Folge unheilbarer, progressiver systemischer Sklerose litten. Zuvor waren diese Patienten mit Lösungen aus DMSO und Wasser ohne Harnstoffzusatz über eine Periode mehrerer Jahre behandelt worden.

Nach der Behandlung mit der DMSO-Harnstoff-Zusammensetzung gemäß Beispiel 1 berichtete jeder dieser Patienten von einer starken Bevorzugung dieser Zusammensetzung. Insbesondere ergaben sich Erleichterungen hinsichtlich des schlechten Atemgeruchs und ein Linderungseffekt bei Applikation. Am deutlichsten war der Effekt der weicheren und elastischeren Haut der Patienten nach einigen Wochen der Anwendung.

Auch wurde die Blutzirkulation der Haut verbessert. Systemische

Sklerose verschlechtert typischerweise die Blutzirkulation zur Haut, wie sich daran zeigt, daß eine minimale

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Farbänderung auftritt, wenn die betreffenden Zonen gedrückt werden. Nach der Behandlung der Patienten mit der DMSO-Harnstoffzusammensetzung gemäß Beispiel 1 einmal täglich über den gesamten Körper über einige Wochen wurde bei Aufbringen eines Fingerdrucks ein Weißwerden der Hautgefäße beobachtet. Nach der Entlastung wurden die entsprechenden Stellen wieder rot, d.h. durchblutet

Beispiel 9

Die Wirkung von Harnstoff-haltigen DMSO-Präparaten auf die Durchblutung wurde bei der dramatischen Erholung bzw. Wiederherstellung eines Menschen mit ischämischer Eiterung eines Fingers beobachtet. Bei Beginn der Behandlung war der Finger zyanotisch, die Eiterung war progressiv und die chirurgische Amputation war empfohlen worden.

In^inem Versuch, diesen Zustand zu verbessern, wurde der Finger durch Eintauchen in eine wässrige DMSO-Lösung behandelt. Die Behandlungen wurden jedoch bald abgesetzt, da der Schmerz bei der Behandlung zu groß wurde.

In einem zweiten Behandlungsversuch wurde der Finger über einen Zeitraum von einigen Wochen

	Gewichtsprozent
DMSO	50
Wasser	35
Harnstoff '	10
NaCl	5

25 bis 50 Milligramm Indomethacin wurden jeweils 500 Gramm dieser Lösung als Analgetikum und entzündungshemmendes Mittel beigegeben.

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ORIGINAL INSPECTED

-μτ-

Nach etwa zwölf Behandlungswochen ergab sich eine volle Wiederherstellung des Fingers mit einer Heilung der Geschwulst und ausgezeichnetem äußerem Erscheinungsbild des gesamten Pingers. Am Ende der Periode war die Amputation gegenindiziert; und eine Behandlung wurde unterbrochen mit Ausnahme gelegentlicher Applikationen zur Linderung von Beschwerden.

Beispiel 10

DMSO-Harnstoff-Kombinationen können selbst in sehr niedrigen Konzentrationen zur Behandlung schwerer Hautreizungen und -Verletzungen verwendet werden.

Bei einem Laborexperiment wurde das Haar von beiden Flanken von Hasen eines Körpergewichts von etwa 3 kg entfernt. Die Flanken wurden sodann rasiert, um die Oberhaut völlig freizulegen. Unter Betäubung wurden die Flanken von fünf Hasen mit einem Skalpell stark verletzt, um die subkutanen Gewebe freizulegen.

Die rechte Flanke jedes Hasen wurde dauernd mit einer 0,75 Gewichtsprozent wässrigen Lösung aus DMSO feucht gehalten, die 1,0 mg Superoxid-Dismutase-Enzym (Molekulargewicht 30000-40000) pro 10 ml Lösung enthielt. Die linken Flanken wurden in der gleichen Weise behandelt, mit der Ausnahme, daß die angewandte Lösung kein DMSO enthielt.

Es wurde beobachtet, daß die Heilung an den jeweils rechten Seiten bzw. Flanken im Vergleich zu den linken Flanken stark beschleunigt wurde. Insbesondere trat eine gegen starken Zug resistente Heilung der rechten Flanken in etwa der Hälfte der Zeit auf.

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Der Zusatz von Harnstoff zu solchen DMSO-Präparaten niedriger Konzentration kann die Heilungsgeschwindigkeit noch weiter verbessern, die Enzymeindringung verstärken und die aus der DMSO-Anwendung resultierenden Nebeneffekte beseitigen. Bei Applikation an gespanntem Gewebe ist nicht mehr als etwa 1,0 Gewichtsprozent Harnstoff erforderlich. Bei der Herstellung der DMSO-Rezeptur gemäß diesem Beispiel würde es ausreichen, daß die wässrige Lösung etwa 0,75 Gewichtsprozent Harnstoff enthält.

Beispiel 11

Methylsulfonylmethan (MSM) und Harnstoff enthaltende Präparate verbessern die Weichheit und Geschmeidigkeit der Haut selbst solcher Personen, die unter ungünstigen Hautbedingungen leiden. Bei einem Test wurden zwei Personen, die unter "hide bound disease" oder progressiver Organsklerose litten, mit einer Lösung behandelt, die 20 Gewichtsprozent MSM, 20 Gewichtsprozent Harnstoff, 30 Gewichtsprozent Dimethylsulfoxyd und 30 Gewichtsprozent Wasser enthielt.

Die Personen wurden dadurch behandelt, daß eine Hand oder ein Fuß zur Behandlung in einen mit 15 Milliliter der Lösung gefüllten Kunststoffbeutel gelegt bzw. gesetzt wurde. Die Hand oder der Fuß wurde zusammen mit dem Überzug in ein erhitztes Wasserbad eingetaucht, das bei einer von der Person noch zu ertragenden Temperatur gehalten wurde, wobei darauf geachtet wurde, daß die Lösung nicht verdünnt wurde.

Die Hände und Füße wurden auf diese Weise über 30 Minuten dreimal täglich während eines Zeitraums von zwei Wochen eingetaucht. Es ergab sich eine Verringerung des unange-

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original' inspected

nehmen Gefühls und eine Erhöhung der Hautweichheit und Geschmeidigkeit.

Dimethylsulfoxid und Harnstoff in der Lösung erhöhten das Eindringvermögen von MSM in das betreffende Gewebe. Keine ungünstigen Nebeneffekte ergaben sich aus der Anwendung von DMSO.

Beispiel 12

DMSO ist eine brauchbare Substanz für viele kosmetische Präparate, die auf die Haut aufgetragen werden. DMSO-haltige Kosmetika können jedoch noch nicht im breiteren Umfang auf dem Markt abgesetzt werden, da viele Testpersonen als Folge der Verabreichung von DMSO unter übelriechendem Atem und Hautreizungen litten. Derartige kosmetische Präparate umfassen langwirkende Antischweißmittel, die in der US-PS 3 499 961 beschrieben sind.

Um zu testen, ob derartige Antischweißmittel durch die Zugabe von Harnstoff verbessert werden können, wurde ein Vergleichstest durchgeführt.

Eine erste Paste mit 10 Gewichtsteilen eines 6 : 1 DMSO-Aluminiumchloridkomplexes, 10 Gewichtsteilen Harnstoff, 10 Gewichtsteilen Äthanol und 2 Gewichtsteilen NaCl wurde bereitet. Zugesetzt wurde genügend kolloidales Silicagel (Cab-0-Sil) zu den anderen Bestandteilen, so daß eine pastenförmige Konsistenz erhalten wurde.

Bei Applikation an der linken Achsel von Testpersonen ergaben sich weder unangenehmer Atemgeruch noch Hautreizungen.

Eine zweite ähnliche Paste wurde ohne Harnstoff bereitet. Diese Paste wurde eine Stunde später unter der rechten

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Achsel derselben Personen appliziert. Die Personen spürten ein Brennen und einen Juckreiz unter der rechten Achsel innerhalb von 15· Minuten nach der Applikation der zweiten Paste. Übelriechender Atem wurde 30 bis 35 Minuten nach der Applikation der zweiten Paste festgestellt. '

Beispiel 13

Eine Anti-Mücken-Lotion wurde durch Kombinieren der folgenden Bestandteile unter Wärmezufuhr zum Herstellen einer Lösung bereitet:

DMSO 30 g

Äthanol 30 g

Harnstoff 15 g

N, N-Diäthyltoluamid 10 g

Dieses Präparat wurde auf die Haut von drei Personen aufgebracht, von denen bekannt war, daß sie auf DMSO-Präparate empfindlich ansprechen. Keine der Personen verspürte unangenehme Hautreaktionen, Urticaria oder hatte einen schlecht riechenden Atem.

b· Anwendung auf Nägeln Beispiel 14

Hergestellt wurde eine Paste aus den folgenden Bestandteilen:

	Gewichtsprozent
DMSO	50
Harnstoff	40
Lanolin	10

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ORIGI&AL...INSEECIED __

Durch Erwärmen der Mischung auf 60 und Vermählen wurde eine weiche, gleichmäßige Paste gebildet.

Diese Paste wurde auf einen verletzten Fußnagel und das darunterliegende Nagelbett aufgetragen. Nach der Applikation wurde der Nagel durch einen Schutzüberzug abgedeckt. Am siebenten Tag nach der Applikation wurde der Nagel ohne Kraftaufwand entfernt.

Beispiel 15
Eine andere Paste wurde nach der folgenden Rezeptur bereitet;

	Gewichtsprozent
DMSO	45
Harnstoff	45
NaCl	• 5
Lanolin	5

Eine Mischung dieser Bestandteile wurde auf 60° C erwärmt und vermählen, bis eine weiche, gleichmäßige Paste entstand.

Diese Paste wurde auf einen chronisch defekten Fingernagel einer Person sowie auch auf einen gesunden Nagel am benachbarten Finger aufgebracht. Beide Finger wurden mit einer Schutzschicht überzogen. Am fünften Tage nach der Applikation konnte der verletzte Nagel, leicht entfernt werden. Der normale Nagel blieb unbeeinträchtigt, wenn auch die Oberhaut beider Fingernägel durch leichtes Reiben entfernbar war.

Beispiel 16
Eine andere Paste wurde nach der folgenden Rezeptur bereitet:

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	Gewichtsprozent
DMSO	45
Harnstoff	• 45
Natriumsulfid	5
Lanolin	5

Diese Paste wurde unter Erwärmung auf 60 C bereitet und zu einer weichen, gleichmäßigen Paste vermählen. Diese Paste wurde ähnlich wie beim Beispiel 15 auf defekte Fingernägel von Personen aufgetragen.

Die Paste dieses Beispiels machte den defekten Nagel rascher weich und befreite das darunterliegende Nagelbett rascher als die Paste gemäß Beispiel 15. Ein leichtes Ätzen der normalen Nageloberfläche trat ebenfalls auf.

Beispiel 17

Die folgenden Substanzen wurden zur Bildung eines Gels gemischt:

DMSO	20 g
Harnstoff	40 g
Äthanol	. 18 g
Wasser	9 g
Isopropylpalmitat	8 g
Carbopol 940 (Carbomer-940) "	2 g
Di (2-Äthylexyl)amin	2 g
Griseofulvin	1 g

Verschiedene Personen, die defekte Fingernägel mit darunter wachsender Pilzinfektion hatten, wurden unter Verwendung dieses gelartigen Präparats behandelt. Gaze oder Polyolefin-

schaumlappen wurden mit dem Gel getränkt, auf die defekten

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„ ORIGINAL INSPECTED _„.

Fingernägel aufgebracht und durch einen Überzug geschützt. Nach zehn Tagen wurden der Überzug und die Lappen entfernt. Die erkrankten Nägel wurden danach ohne Schwierigkeit vom Nagelbett abgehoben. Nach der Entfernung des Nagels wurde durch einmaliges Auftragen des Präparats auf das Nagelbett sowohl eine Befreiung von dem erkrankten und toten Gewebe als auch eine Steuerung der Infektion erreicht.

Beispiel 18

In einem Bezugstest wurde das Präparat gemäß Beispiel 16 erwärmt und danach auf die erkrankten Nägel von Menschen aufgetragen. 20 oder 30 Minuten nach der Applikation wurden die Nägel-mit einem geeigneten pharmazeutischen Präparat, z.B. einem Präparat mit einem Antimikrobenmittel, behandelt.

Nach einigen Tagen der Behandlung wurden die erkrankten Nagelbereiche abgehoben, und die Infektionen waren unter Kontrolle.

Beispiel 19

Zwei flüssige Präparate wurden zu Vergleichszwecken hergestellt. Die Rezepturen waren wie folgti

Präparat 1:	Gewichtsprozent
	50
Harnstoff	25
Wasser	25
DMSO

Die Bestandteile wurden gemischt, auf 50° C erwärmt und danach zu einer einheitlichen Dispersion vermählen.

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Präparat 2:

Gewichtsprozent Harnstoff 50

Wasser 50

Die Bestandteile wurden gemischt, auf 50 C erwärmt und danach unter Kühlung zu einer einheitlichen Lösung/ Dispersion verrührt.

Mit jedem der Präparate wurden Schaumstofflappen auf Zellulose-Basis getränkt. Die Lappen wurden ihrerseits zur Behandlung von Personen verwendet, bei denen an nebeneinanderliegenden Fingern oder Zehen defekte Nägel waren. Ein Finger bzw. Zeh jeder Person wurde mit einem das Präparat 1 enthaltenden Schaumstofflappen und der benachbarte Finger oder Zeh mit einem das Präparat 2 enthaltenden Schaumstofflappen umwickelt. Es wurde beobachtet, daß das Präparat 1 um etwa ein Drittel wirksamer beim Aufweichen der verletzten Nägel zu deren Entfernung war.

Beispiel 20

Ein Nagelkonditionierer wurde aus den folgenden Bestandteilen hergestellt:

Gewichtsprozent	Wasser	50
Dimethylsulfoxid	20
Methylsulfonylmethan
(MSM)	10
Harnstoff	10
Glycerin	5
Glyoxal (30% wässrig)	5

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ORiGiNAL INSPECTED

- a

-³⁵- 3032A81

Das Präparat wurde mit Baumwollappen auf gesunde Nägel von Personen aufgebracht und über wenigstens 15 Minuten belassen. Am Ende dieser Zeit waren die Nägel fester, d.h. weniger brüchig, und die Oberhaut war soweit erweicht, daß sie durch schwaches Reiben entfernt werden konnte.

Es ist noch nicht vollständig geklärt, warum die Brüchigkeit des Nagels durch Anwendung des Präparats verringert wird. Es scheint jedoch so zu sein, daß dabei MSM das wesentliche aktive Mittel ist. DMSO und Harnstoff scheinen das Eindringen des MSM in das feste Nagelmaterial zu beschleunigen.

Die dieses Präparat benutzenden Personen erfuhren keine Rötung oder Reizung der den Nagel umgebenden Haut und litten nicht unter schlechtem Atemgeruch.

2. Anwendung auf Schleimhaut- und Uroqenitalbereiche Beispiel 21

Die Rezeptur gemäß Beispiel 9 wurde leicht umformuliert und enthielt:

	Gewichtsprozent
DMSO	50
Wasser	35
Harnstoff .	12
NaCl	3

Dieses Präparat wurde über einen bis zum Blasenansatz reichenden Catheter an Patienten angewandt, die unter Erkrankungen des Urogenitalbereichs, z.B. Prostatitis, litten. Klinische

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Tests zeigten, daß Patienten, denen dieses DMSO-Harnstoff-Präparat gegeben wurde, wesentlich geringere Beschwerden und weniger schlechten Atemgeruch hatten als diejenigen Patienten, denen eine 50 Gewichts-%ige Lösung von DMSÖ in.Wasser ohne Harnstoff verabreicht wurde. Das DMSO-Harnstof f-Präparat war in gleicher Weise zur Verringerung der Zeichen und Symptome der Prostatitis wirksam.

Beispiel· 22

Das Präparat gemäß Beispiel 21 wurde an Personen angewandt, die unter interstitieller Zystitis litten und zuvor auf die Behandlung mit einer 50 Gewichts-%igen Lösung aus DMSO in Wasser wenig ansprachen. In jedem Falle wurde 30 : 100 Milliliter des Präparats täglich durch einen in die Blase eingeführten Catheter verabreicht.

Im Vergleich zur Behandlung mit der 50 Gewichts-%igen DMSO Lösung rief das DMSO-Harnstoff-Präparat geringere Beschwerden beim Patienten hervor. Auch wurden verbesserte therapeutische Ergebnisse beobachtet. Insbesondere wurde die Häufigkeit des Urinlassens, der Schmerz und die Beschwerden mit Blasenklopfen verringert. Eine visuelle Beobachtung mit einem Zystoskop und eine Untersuchung des Blasengewebes bestätigten, daß eine Verringerung der Entzündungsveränderungen stattgefunden hat. Nach der Umstellung der Behandlung von wässrigem DMSO auf das DMSO-Harnstoff-Präparat war der schlechte Atemgeruch der Patienten merklich verringert.

Beispiel 23

Über eine gewisse Zeit wurde DMSO in Konzentrationen bis zu 100 % zur Behandlung von hyperempfindlichen Zähnen bei deren Genesung nach umfangreichen Mundoperationen .ver-

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3032A81

wendet. Aufgrund derartiger chirurgischer Eingriffe er~ geben sich häufig große Schmerzen und Beschwerden sowie Verletzungen und örtliche Gewebebeschädigungen an den Zähnen und am Zahnfleisch. Es ist bekannt, daß DMSO die allgemeine Gewebeheilung fördert und den Schmerz lindert, so daß ein Patient nach etwa zwei Wochen ohne Beschwerden wieder feste Nahrung zu kauen vermag.

Eine junge Frau, die sich von einer Mundoperation erholte, wurde mit dem folgenden Präparat behandelt:

Gewichtsprozent DMSO 71,4

Harnstoff 23,8

Wasser 4,8

Baumwolltupfer wurden mit der Lösung getränkt und auf das Zahnfleisch aufgelegt. Nach zwei Tagen der Behandlung ergaben sich bereits bessere Ergebnisse hinsichtlich der Linderung des Schmerzes und des Ausmaßes der Heilung als bei anderen Personen, die zwei Wochen lang mit höheren Konzentrationen von DMSO-Lösungen ohne Harnstoff behandelt worden waren.

Mundoperierte Patienten, die mit DMSO behandelt wurden, hatten typischerweise einen schweflig riechenden Atem und schlechten Mundgeschmack, der noch über einen vollen Tag nach der Behandlung andauern kann. Diese ungünstigen Nebeneffekte wurden bei der mit dem oben genannten, harnstoffhaltigen Präparat behandelten Person stark verringert.

Beispiel 24

Eine andere, zur Behandlung von Zahnpatienten geeignete Rezeptur enthält:

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	Gewichtsprozent	3032481
	70
DMSO	20
Harnstoff	8
Wasser	2
NaCl

Bei Anwendung in der im Beispiel 23 beschriebenen Weise ergibt dieses Präparat überlegene Ergebnisse in bezug auf die Verringerung des Zahnschmerzes und der mit Verletzungen verbundenen Anschwellung.

Beispiel 25

Ältere Personen und Personen mit Bindegewebserkrankungen haben häufig Probleme mit trockenem, schmerzhaftem Zahnfleisch. Um diesen Zustand zu behandeln, wurde das folgende Präparat hergestellt:

DMSO

Harnstoff Wasser

3% Carbopol 934 (Carbomer-934)

Triethanolamin

Das Carbopol 934, ein Acrylsaurepolymer, das von B.F. Goodrich Chemical Co., Cleveland, Ohio, U.S.A. hergestellt wird und in Kombination mit .Triethanolamin als Neutralisator wirkt, machte das Präparat zu einem weichen Gel. Dieses Präparat wurde mit geringen Mengen eines Pfefferminzextrakts zum Abdecken des etwas bitteren Geschmacks von DMSO versehen.

Bei örtlicher Applikation auf das Zahnfleisch der Person konnte der Schmerz verringert und das Zahnfleisch weich gemacht werden.

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200	g
50	g
50	g
10	g
o,	4 g

3. Intravenöse Anwendungen ,

Nach derzeitiger Praxis wird DMSO zu verschiedenen therapeutischen Zwecken intravenös verabreicht, und zwar in einer Dosis von 0,1 bis 2,0 g pro kg Körpergewicht. In typischer intravenöser Anwendung befindet sich DMSO in einer wässrigen Lösung.

Personen, denen DMSO intravenös verabreicht wurde, litten nicht nur unter schlecht riechendem Atem sondern auch unter Lysis der roten Blutkörperchen, die zu Nierenbeschwerden oder -versagen führen kann. Es wurde jetzt gefunden, daß gleichzeitig mit DMSO intravenös verabreichtes Äthanol sowohl die Lysis der roten Blutkörperchen als auch den übelriechenden Atem beträchtlich verringert.

Um die hämolytische Aktivität von DMSO wirksam zu neutralisieren und gleichzeitig das ausgeatmete Dimethylsulfid auf ein erträgliches Maß zu verringern sollte der Anteil an verabreichtem Äthanol wenigstens etwa 0,05 g pro kg Körpergewicht bis zu etwa 0,5 g Äthanol pro kg Körpergewicht betragen. Das Äthanol sollte in einem Gewichtsverhältnis zu DMSO zwischen etwa 1 : 40 und 5 : 1 verabreicht werden.

Überlegene Ergebnisse werden dann erzielt, wenn das DMSO und das Äthanol gemeinsam in einem Präparat verabreicht werden, wobei der Anteil von Äthanol so'gewählt werden sollte, daß er im Sinne einer Reduzierung der unerwünschten Nebeneffekte in bezug auf schlechten Atem und/oder Hämolyse infolge der Verabreichung von DMSO wirksam ist.

Um die Eindringaktivität von intravenös verabreichtem DMSO zu verstärken, sollten deratige Lösungen in diesem Sinne wirksame Substanzen, wie Harnstoff, NaCl, KCl und/oder Azetamid enthalten. In den meisten Fällen enthalten solche Lösungen Wasser als Verdünnungsmittel.

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-W-

Die folgenden Beispiele veranschaulichen die Wirksamkeit dieser Behandlung:

Beispiel 26

In einem ersten Test wurden neun Volumeneinheiten heparinisierten menschlichen Bluts mit einer Volumeneinheit einer 50 VoI % wässrigen Lösung von DMSO kombiniert. Das Ausmaß der Lysis roter Blutkörperchen war groß,und es ergab sich eine verstärkte Entwicklung von Dimethylsulfid.

Der Test wurde wiederholt, wobei die DMSO-Lösung durch eine 50 VoI % wässrige Losung aus Äthanol ersetzt wurde. Nach der Kombination dieser Lösung mit dem Blut ergab sich keine Geruchsentwicklung, jedoch eine gewisse Lysis der roten Blutkörperchen.

In einem dritten Test wurde der Vorgang wiederholt, wobei die zugegebene Lösung 66,6 VoI % DMSO und 33,3 VoI % Äthanol enthielt. Nachdem eine Volumeneinheit der Lösung neun Volumeneinheiten von Blut zugegebenen wurde, konnten weder eine Lysis der roten Blutkörperchen noch ein Dimethylsulfidgeruch "festgestellt werden. Eine Probe der Atmosphäre über dem Blut wurde aufgefangen und mit einem Gaschromatographen analysiert. Es gab keine feststellbare DimethyIsulfidspitze.

Beispiel 27

.Hundeblut wurde abgenommen und zur Verhinderung der Gerinnung heparinisiert. Nach einer Tubierung wurden Blutproben mit einer 20 Gewichts-%igen wässrigen Dimethylsulfoxidlösung in einem solchen Verhältnis gemischt, daß die DMSO-Blut-Mischung 12 g DMSO auf jeweils 100 g Blut enthielt.

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Nach dem Mischen ergab sich beinahe sofort eine Lysis der roten Blutkörperchen mit einem dominierenden Dimethylsulf idgeruchL Das Vorhandenseit von Dimethylsulfid wurde mit dem Gaschromatographen bestätigt.

In einem getrennten Test- wurde eine Probe heparinisiert Bluts von demselben Hund mit einer wässrigen Lösung, die 20 Gewichtsprozent DMSO und 10 Gewichtsprozent Äthanol enthielt, gemischt. Die Lösung und das Blut wurden wiederum in einem solchen Verhältnis gemischt, daß 12 g DMSO jeweils auf 100 g Blut in der Mischung kamen. Nach dem Mischen trat nur eine geringe Lysis der roten Blutkörperchen auf. Es fehlte ein Geruch von Dimethylsufid, jedoch zeigte die Analyse der Gaschromatographie eine kleine Spitze für Dimethylsufid.

Beispiel 28

Bereitet wurden zwei Flaschen für die intravenöse Injektion. Die erste enthielt eine 20 Gewichts-%ige wässrige DMSO-Lösung. Die zweite enthielt eine wässrige Lösung mit 20 Gewichts-% DMSO und 10 Gewichts-% Äthanol. Zwei Bastardhunde von etwa 15 kg Körpergewicht wurden catheterisiert. Danach wurden die beiden Lösungen den entsprechenden Hunden intravenös zugeführt, derart, daß jeder Hund 15 g DMSO (Ig pro kg Körpergewicht) erhielt.

Nach der Verabreichung der ersten Lösung (DMSO-Wasser) an einen Hund erfüllte das Labor rasch ein Dimethylsulfidgeruch, Dieser Geruch wurde innerhalb von 30 bis 45 Sekunden nach der Verabreichung festgestellt. Der Urin des Hundes hatte während der ersten Stunden nach der Verabreichung eine tiefrote Farbe, was auf eine starke Lysis der roten Blutkörperchen hindeutete.

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Nachdem die zweite Lösung dem anderen Hund verabreicht wurde, konnte mit der Nase kein Dimethylsulfidgeruch festgestellt werden. Die von dem Tier ausgeatmete Luft wurde in einer Toluolflüssigkeit über eine zeitlang aufgefangen. Die Abzugsvorrichtung wurde über 0,25 Stunden betätigt, und danach wurde das Toluol mit einem Gaschromatographen analysiert. Es ergab sich eine kleine Spitze,die zeigte, daß Spuren von Dimethylsufid aufgefangen worden waren.

Von dem zweiten Hund aufgefangenes Urin war rein und bei näherer Betrachtung frei von einer Lysis roter Blutkörperchen. Ein Aliquot des Urins des zweiten Hundes wurde zentrifugiert und der Rückstand aufgefangen und betrachtet. Es ergaben sich Spuren eines roten Niederschlags, wahrscheinlich Hämoglobin. Dies kann zum Teil auf eine Verletzung während der Catheterisierung zurückgehen oder könnte eine sehr geringe Lysis der roten Blutkörperchen darstellen.

j 4. Hyperosmotische Anwendungen auf Fische

J Wie oben erwähnt, können Harnstoff, NaCl und Azetamid

! in Präparaten zur Behandlung von Säugetieren von Vorteil

sein. Jedoch können dieselben Substanzen für Fische bei so niedrigen Konzentrationen wie 3 Gewichtsprozent in einer wässrigen Lösung bei Anwendung auf eine Epithelmembran des Fisches toxisch wirken.

ι Da diese Substanzen die treibende Kraft bei der hyper-

osmotischen Behandlung von Fischen sind, setzt die Toxizität der erfolgreichen Anwendung von hyperosmotischen Behandlungen eine obere Grenze.

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Es wurde jetzt gefunden, daß die Letalität bei der Verwendung gewisser Lösungen, die ein die Membranpermeabilität änderndes Mittel in hyperosmotischen Konzentrationen enthalten, durch den Zusatz von DMSO zu dem Präparat verringert werden kann. Derartige geänderte Rezepturen können dann in Verbindung mit gesundheits- und/oder das Wohlbefinden ändernden Mitteln einer Epithelmembran, z.B. einer Kiemenmembran eines in Wasser lebenden Tiers zugeführt werden. Das Sterblichkeitsrisiko aufgrund osmotischer Spannungen ist bei Verwendung von DMSO stark verringert.

Geeignete Methoden zur Verabreichung sind in der US-PS 4 112 946 beschrieben. Andere Methoden zur Anwendung an Epithelmembranen, insbesondere an Kiemenmembranen können ebenfalls verwendet werden. Eine Verringerung in der Mortalitätsrate ergibt sich in jedem Falle dann, wenn die Membranen einem Präparat mit einer mittelhohen hyperosmotischen Konzentration von Harnstoff, NaCl und/ oder Azetamid ausgesetzt werden.

Daß DMSO diesen vorteilhaften Effekt besitzt, ist im Hinblick auf die Tatsache überraschend, daß DMSO an sich nicht stark wirksam ist als die Membranpermeabilität änderndes Mittel zur Behandlung der Membranen von Wasserlebewesen, insbesondere Kiementieren.

Andere dipolare,. aprotische gelöste Stoffe, wie Dimethylazetamid (DMAC) und Dimethyl.formamid (DMF) sind ebenfalls günstig für die Verringerung der Mortalitätsrate. Diese sind jedoch weniger wirksam als DMSO.

Die Menge an dipolarer, aprotischer gelöster Substanz, die in einer Lösung mit hyperosmotischer Harnstoff-, NaCl- und/oder Azetamidkonzentration verwendet werden muß, kann am besten experimentell bestimmt werden. Die Dosis bzw. der Anteil sollte ausreichen, um die ge-

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wünschte Verringerung der Mortalitätsrate oder der Zellenbeschädigung herbeizuführen, sollte jedoch nicht so hoch sein, daß das im Wasser lebende Tier toxischen Mengen des gelösten Stoffes ausgesetzt ist. Wenn die Lösung ein die Gesundheit und/oder das Wohlergehen modifizierendes Mittel zusammen mit einem die Permeabilität ändernden Mittel enthält, so sollte der Anteil der verabreichten dipolaren, aprotischen Substanz nicht so groß sein, daß der Transport des Gesundheits- und/oder Wohlergehen modifizierenden Mittels in die Tiere gesperrt wird.

Die folgenden Beispiele zeigen, wie DMSO bei der Verringerung der Mortalität aufgrund osmotischen Drucks oder osmotischer Spannungen wirksam ist.

Beispiel 29

Eine Reihe von Tests wurden unter Verwendung von zwölf kleinen Goldfischen (Carassius auratus) durchgeführt. Bei jedem Test wurden zwei Fische durch Eintauchen einer wässrigen Testlösung mit einer hyperosmotischen Konzentration von NaCl ausgesetzt. Die Fische wurden über fünf Minuten jeweils der Testlösung ausgesetzt und danach in frisches Wasser umgesetzt und beobachtet. Die Ergebnisse sind in Tabelle I zusammengefaßt:

Tabelle I

Test gelöster Stoff Konzentration Letalität

(Gewichtsprozent)

1 NaCl ' 3 1 von 2 tot

2 NaCl 4 2 von 2 tot

3 NaCl 5 2 von 2 tot

keine

1 von 2 tot

NaCl	3
NaCl	4
NaCl	5
TNaCl	3
(.DMSO	3
TNaCl	4
LDMSO	3
/NaCl	5
^DMSO	3
	130012/0778

3032Λ81

Es ist deutlich zu sehen, daß bei Verwendung von DMSO in Kombination mit NaCl die Letalitä't verringert wurde.

Es wurde beobachtet, daß die Kiemen aller getesteten Fische, wenn sie.der hyperosmotischen Lösung ausgesetzt wurden, weißliche:Farbe annahmen. Der Weißheitsgrad, der ein möglicher Indikator für osmotische Spannungen oder osmotischen Druck ist, entsprach der Konzentration von NaCl. Eine geringere Weißfärbung wurde bei einer vorgegebenen NaCl-rKonzentration bei Fischen beobachtet, welche mit den DMSO-enthaltenden Lösungen behandelt wurden.

Beispiel 30

Der Vorgang gemäß Beispiel 28 wurde wiederholt, mit der Ausnahme, daß die Goldfische, nachdem sie den hyperosmotischen Lösungen ausgesetzt waren, in frisches Wasser gesetzt wurden, das 0,5 Gewichtsprozent Trypanblau-Farbstoff enthielt. Die Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengefaßt:

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Tabelle II

Test	gelöster Stoff	Konzentration (Gewichtsprozent)	Letalität
7	NaCl	3	keine
8	NaCl	4	2 von 2 tot
9	NaCl	5	2 von 2 tot
10	f NaCl Idmso	3 3	keine
11	f NaCl Idmso	4 3	keine
12	c NaCl LDMSO	5 3	keine
13	Harnstoff	8	keine
14	Harnstoff	12	keine
15	fHarnstoff [dmso	cn oo	keine
16	f Harnstoff Idmso	12 5	keine

Wiederum wurde eine verringerte Letalität bei Fischen festgestellt, die einer NaCl-Lösunq mit DMSO-Zusatz ausgesetzt waren.

Die Fische wurden bezüglich ihrer Farbstoffaufnähme beobachtet. Trypanblau, das ein Farbstoff des Vital-Ausschlußtyps ist, färbt nur nicht-lebende Zellen. Salzhaltigen Lösungen ohne DMSO ausgesetzte Fische zeigten eine erhöhte Farbstoff auf nähme, die noch verstärkt war, wenn die NaCl-r Konzentration 5 Gewichtsprozent betrug . Aus den beobachteten Farbaufnahmemustern scheint hervorzugehen, daß NaCl ohne DMSO für Epithalzellen, insbesondere die Kiemen und Flossen stark letal wirkt.

Ähnliche Ergebnisse wurden in Tests 13 bis 16 beobachtet, ' bei denen Fische hyperosmotischen Konzentrationen von Harnstoff ausgesetzt wurden. Wenn auch keines der Versuchstiere starb, so war doch die Farbstoffaufnähme höher, wenn DMSO fehlte.

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Diese Ergebnisse laufen den Erwartungen zuwider, da DMSO als Stoff bekannt ist, der in den meisten Fällen das Eindringvermögen in das Gewebe erleichtert. Wenn sich DMSO in der erwarteten Weise auswirken würde, so würde es das Eindringvermögen von NaCl und Harnstoff verstärken. Ein solches verstärktes Eindringen sollte logischerweise die Zellenschädigung und demzufolge die Aufnahme von Trypanblau verstärken. Die Ergebnisse der Test 7-16 zeigen jedoch, daß das Gegenteil der Fall ist. DMSO schützt die Zellen vor Angriffen durch hyperosmotische NaCl- und Harnstofflösungen und trägt nicht zu deren Angriff bei. Außerdem zeigen die Ergebnisse der Tests 7-16, daß DMSO nicht nur die Letalität bei Verwendung hyperosmotischer Lösungen verringert, sondern auch die Zellenverletzungen bei extremen osmotischen Druckveränderungen.

Beispiel 31

Sieben kleine Lachse von 4-5 Zoll Länge wurden im Washougal River (Staat Washington) gefangen. Die Species waren nicht identifiziert; jedoch höchstwahrscheinlich waren die kleinen Fische wilde Coho-Lachse (Oncorhynchus kisutch).

Vier der Fische wurden in eine wässrige Lösung mit 4 Gewichts % NaCl und 3 Gewichts % DMSO eingetaucht. Nach fünf Minuten wurden die kleinen Fische zur Beobachtung herausgenommen und in einen Flußwasser enthaltenden Zuchtteich eingesetzt. Dieser Vorgang wurde mit den restlichen drei kleinen Fischen wiederholt, die in eine wässrige·Lösung mit nur 5 Gewichtsprozent NaCl eingetaucht wurden.

Alle Fische verloren ihre Munterkeit, wenn sie einer hyperosmotischen Lösung ausgesetzt wurden, jedoch waren

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alle Fische beim Umsetzen in den Zuchtteich am leben. Nach drei Stunden waren die drei der NaCl-Lösung ohne DMSO ausgesetzten Fische tot. Die anderen vier Fische waren am leben und wurden in den Fluß freigelassen.

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Claims

PATENTANWÄLTE ZENZ & HELBER · D 4300 ESSEN 1 · AM AUHRSfKIN: 1 : TEL.; (02.01) ;412β Seite - ;*<- H 166 ROBERT J. HERSCHLER Patentansprüche

1. Dimethylsulfoxid enthaltendes Präparat zur therapeutischen Anwendung, dadurch gekennzeichnet , daß es wenigstens einen Bestandteil der aus Harnstoff, Äthanol, Acetamid, Natriumchlorid und Kaliumchlorid bestehenden Gruppe in zumindest einer therapeutisch förderlichen Menge enthält·

2. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß in dem Präparat Harnstoff und wenigstens ein weiteres Bestandteil der Gruppe enthalten sind.

3. Präparat nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß in dem Präparat Wasser als Trägermittel vorhanden ist»

4. Präparat nach einem der Ansprüche l:b±s 3,_;dadurch gekennzeichnet, daß in dem Präparat Harnstoff in einem Gewichtsverhältnis zum Dimethylsulfoxid von mehr als 1 : 99 enthalten ist.

5. Präparat nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß das Gewichtsverhältnis größer als 1 : 9 ist.

Z/bu

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6. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß in dem Präparat Dimethylsulfoxid und Harnstoff die •einzigen pharmazeutischen Substanzen sind und nicht mehr als etwa 60 Gewichtsprozent Harnstoff, basierend auf Harnstoff-Dimethylsulfoxid, vorhanden sind.

7. Präparat nach einem der Ansprüche 1 bis 6, gekennzeichnet durch die folgende Rezeptur: Dimethylsulfoxid, etwa 19 g; Harnstoff, etwa 6 g; Natriumchlorid, etwa 1 g; und Wasser, wenigstens etwa 6 g.

8. Präparat zur kosmetischen Anwendung, dadurch gekennzeichnet, daß es eine kosmetische Hauterweichungslotion, eine Creme oder ein Gel mit einer die Haut weichmachenden Menge von Dimethylsulfoxid und' Harnstoff enthält.

9. Präparat nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß in dem Präparat wenigstens ein Bestandteil der aus Äthanol, Natriumchlorid, Kaliumchlorid und Acetamid bestehenden Gruppe enthalten ist.

10. Wässrige Lösung zur hyperosmotischen Behandlung von Fischen, dadurch gekennzeichnet, daß sie Dimethylsulfoxid und wenigstens ein Bestandteil der aus Harnstoff, Acetamid, Natriumchlorid und Kaliumchlorid bestehenden Gruppe enthält.

11. Lösung nach Anspruch 10., dadurch gekennzeichnet, daß sie 3 Gewichtsprozent Dimethylsulfoxid und 5 Gewichtsprozent Natriumchlorid enthält.

fMAL INSPECTED

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