DE2935709A1

DE2935709A1 - Aminosaeureloesungen und deren verwendung

Info

Publication number: DE2935709A1
Application number: DE19792935709
Authority: DE
Inventors: Koji Ozeki
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1978-09-04
Filing date: 1979-09-04
Publication date: 1980-03-13
Also published as: SE448679B; DE2935709C2; NL7906620A; GB2029220A; JPS6154007B2; JPS5535049A; AU526207B2; IT1194844B; FR2434622B1; IT7905216A0; FR2434622A1; CH642541A5; SE7907316L; AU5036879A; NL190266C; NL190266B; GB2029220B; CA1134275A

Description

IAiIVlTOi \I I

I)R. HORST-R. KRESSIN s i ;.·-,:,! wruxsst r .sec: MC\rni-\ i¹'

a t ! 1 \>-M \ Γ.Ι IM ! moi'MSi H! \ Ι'ΛΤΙ-.ΝΐΛΜΓ

Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc.

Aminosäurelösungen und deren Verwendung

11/090,

Beschreibung

Die Erfindung betrifft Aminosäurelösungen für die Behandlung von an Krebs erkrankten Patienten.

Wenn es nicht möglich ist, einen Patienten postoperativ oral oder intestinal zu ernähren, dann wird der Patient üblicherweise parenteral oder nicht-intestinal ernährt, um das körperliche Befinden des Patienten zu verbessern. Zu diesem Zweck sind Aminosäurelösungen der verschiedensten Zusammensetzungen vorgeschlagen worden.

Die bekannten Aminosäurelösungen für die parenterale Ernährung weisen alle im allgemeinen eine Aminosäurezusammensetzung auf, die der der menschlichen Milch, des Hühnereis, des menschlichen Serumalbumins usw. gleicht, die die für den menschlichen Körper essentiellen Aminosäure-Nährstoffe enthalten. Daher enthalten die bekannten Lösungen jeweils die 8 essentiellen Aminosäuren als unverzichtbare Bestandteile.

Es wurde nunmehr bei Untersuchungen von Aminosäurelösungen, die insbesondere für die Behandlung von an Krebs erkrankten Patienten einsetzbar sind, überraschenderweise gefunden, daß die bekannten Aminosäurelösungen, wenn sie kein Methionin enthalten, die Krebszellen verringern oder die Krebsbildung unterdrücken, während man den Patienten Nahrung verabreicht, die die Aminosäuren enthalten.

Gegenstand der Erfindung sind daher Aminosäurelösungen, die Krebszellen inhibieren oder verringern und gleichzeitig als Nahrungsmittel dienen.

Gegenstand der Anmeldung sind weiterhin Aminosäurelösungen im Gemisch mit bekannten Antikrebsmitteln, die durch die Zumischung der erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen in

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ihrer Wirkungsweise überraschend verstärkt werden.

Gegenstand der Anmeldung sind Aminosäurelösungen, die essentielle Aminosäuren enthalten für Patienten, die an Krebs erkrankt sind bzw. waren, wobei die Lösung als essentielle Aminosäure kein Methionin enthält. Das Fehlen dieser Aminosäure ist wesentlich.

Die erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen erzielen Wirkungen, die außerordentlich überraschend sind im Vergleich zu üblichen Aminosäurelösungen, insbesondere bei der parenteralen Therapie unter Verwendung der erfindungsgemäßen Lösungen, insbesondere hinsichtlich der Verringerung der Krebszellen bzw. der Antikrebswirkung und hinsichtlich der dabei erreichbaren außerordentlichen Wirkung der Verbesserung der Lebenserwartung durch die Verbesserung des körperlichen Wohlbefindens des Patienten bei der Ernährung mit diesen Lösungen. Die bekannten Antikrebsmittel, z. B. wie Mitomycin-C, 5-Fluoruracil, Neocarzinostatin"oder Bischloräthyl-Nitrosoharnstoff werden durch die Zugabe der erfindungsgemäßen Lösungen in ihrer Wirkung erheblich gesteigert. Die erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen verringern oder inhibieren die Bildung von Krebszellen, ohne daß dabei Nebeneffekte auftreten. Die erfindungsgemäßen Mittel sind auch zur Behandlung von Krebs einsetzbar. Die außergewöhnlichen Wirkungen der erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen sind völlig überraschend gegenüber den bekannten Aminosäurelösungen. Die bekannten Aminosäurelösungen haben die Aufgabe, die körperlichen Kräfte des Patienten mit der Ernährung aufrechtzuerhalten, wobei jedoch gleichzeitig mit der Ernährung auch die Krebszellen im lebenden Körper in ihrem Wachstum unterstützt werden. Daher sind die

03001 1 /0907

BAD

bekannten Aminosäurelösungen bei der paranteralen Ernährung nicht dazu geeignet, die Verringerung des Körpergewichts des Patienten zu verzögern, die Krankheitssymptome zu erleichtern und das Körpergewicht des Patienten im entsprechenden Ausmaß zu erhöhen. Im Gegensatz dazu inhibieren die erfindungsgemäßen Lösungen, die kein Methionin enthalten, selektiv das Wachstum der Krebszellen im lebenden Körper, erhöhen damit das Körpergewicht und erleichtern die KrankheitsSymptome.

Die erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen sind den oben genannten bekannten Aminosäuren in der Zusammensetzung ähnlich, jedoch mit der Ausnahme, daß die erfindungsgemäßen Lösungen kein Methionin enthalten. Die Zusammensetzung der erfindungsgemäßen Lösungen wird bestimmt durch die Art der Verabreichung, der Symptome des Patienten, der Zeitdauer der Verabreichung usw. Grundsätzlich enthalten die erfindungsgemäßen Lösungen 7 essentielle Aminosäuren mit Ausnahme von Methionin, insbesondere Leucin, Valin, Isoleucin, Lysin, Phenylalanin, Threonin und Tryptophan. Die Lösungen gemäß der Erfindung enthalten diese essentiellen Aminosäuren vorzugsweise in den folgenden Anteilen (g/l):

Leucin 1.4 - 14.0

Valin 1.4 - 10.0

Isoleucin 1.6 - 10.0

Lysin 1.5 - i4.9

Phenylalanin 1.0 - 9-4 Threonin 1.0 - 6.7

Tryptophan 0.4- 4.0

Zusätzlich zu diesen 7 essentiellen Aminosäuren können in den erfindungsgemäßen Lösungen auch nicht essentielle Aminosäuren enthalten sein, z. B. Arginin, Histidin, Glycin, Alanin, Asparaginsäure, Glutaminsäure, Prolin, Serin, Tyrosin, Ornithin usw. Die besonders bevorzugten

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nicht essentiellen Aminosäuren sind Arginin, Histidin und Glycin. Obwohl diese Aminosäuren in gewünschten Mengen verwendet werden können, wird es jedoch bevorzugt, diese Aminosäuren in folgenden Anteilen zu verwenden

(g/1): Arginin 0 - 13.2 Histidin 0-6.0
Glycin 0 - 18.0

Alanin 0 - 5.0

Asparaginsäure 0 ~ 6.0

Glutaminsäure 0 - 9·0

Prolin 0 - 9-0

Serin 0 - 6.0

Tyrosin· 0 - 2.0

Ornithin- 0 - 6.0

Die bevorzugten erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen weisen die folgende Aminosäure-Zusammensetzung auf (g/l):

Leucin	1.7	- 14.0
Valin	1.7	- 9-5
Isoleucin	1.8	- 9.6
L^s in	1-5	- 14.7
Phenylalanin-	1.0	- 6.4
Threonin	1.3	- 6.7
Tryptophan	0.4	- 3.5
Arginin	1.0	- 13.2
Histidin-	0.9	- 3.0
Glycin	2.3	- 15.0
Alanin Asparaginsäure Glutami nsäure Prolin Serin Tyrosin Ornithin	O O O O O O O	- 4.8 - 2.5 - 6.0 - 2.3 - 1.8 - 1.7 - 5.0

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Für die oben genannten erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen werden vorzugsweise reine kristalline Aminosäuren in der D- oder L-Form oder in Mischungen verwendet. Bevorzugt wird dabei die L-Form eingesetzt. Die Aminosäuren werden üblicherweise in freier Form eingesetzt. Sie können aber auch in Form pharmakologisch verträglicher Salze mit Säuren, z. B. Salzsäure, Essigsäure usw. verwendet werden.

Die erfindunsgemäßen Aminosäurelösungen können zusätzlich zu den oben genannten Aminosäuren verschiedene Zusätze enthalten, die üblicherweise für Lösungen dieser Art verwendet werden, z. B. Kohlenhydrate, Vitamine, Fette, Elektrolyte, antiseptische Mittel, Stabilisierungsmittel, usw. Beispiele für solche Zusätze sind z. B. Stärke, Saccharose, Glukose, Maltose, Fruktose, Sorbit, Xylit, Ascorbinsäure, Nikotinsäure, Pantothensäure, Thiamin, Riboflavin, Pyridoxin, Menadion, Biotin, Folsäure, Vitamin B₁₂, Inosit, Natriumbiosulfit, Phosphorsäure usw.

Die erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen sind wie die bekannten Aminosäurezubereitungen gewöhnlich sterile wässrige Lösungen, die als Infusionslösungen parenteral oder nicht-intestinal, ζ. B. in Form von intravenösen Injektionen und Tropfen verabreicht werden. Die Lösungen können auch oral und enteral, falls möglich, verabreicht werden. Die geeignete Dosis wird in Abstimmung mit den Symptomen des Patienten bestimmt. Die Lösung kann in einer Dosis gegeben werden, die für die Ernährung des Patienten ausreicht. Gewöhnlich werden die Lösungen in täglichen Dosen von etwa 100 bis 1500 ml, vorzugsweise etwa 500 bis 1500 ml verabreicht.

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Das Antikrebsmittel, das zusammen mit der erfindungsgemäßen Aminosäurelösung verabreicht wird, wird in üblichen Dosen verabreicht, wobei die Dosis jedoch in geeigneter Weise bestimmt werden kann durch die Art des Mittels, die Art des Krebses und die Art der Verabreichung. Es können verschiedene Antikrebsmittel allein oder in Mischung verwendet werden. Wenn z. B. 5-Fluoruracil allein mit der erfindungsgemäßen Lösung verabreicht wird an einen Patienten mit Magenkrebs, dann wird das Mittel z. B. intravenös tropfenweise in einer Dosis von 15 mg/kg/Tag an 5 nacheinanderfolgenden Tagen und danach in einer Dosis von 7,5 mg/kg/Tag für jeden weiteren Tag oder intraarteriell in einer Dosis von 5 bis 10 mg/kg/Tag für 10 bis 20 Tage verabreicht. Wenn Mitomycin-C in Kombination mit der erfindungsgemäßen Lösung an einen Patienten mit Magenkrebs verabreicht wird, wird es intravenös einmal oder zweimal pro Woche in einer Dosis von 8 bis 10 mg/kg jedesmal verabreicht.

Die erfindungsgemäßen Lösungen sind für die Verabreichung an Patienten z. B. mit Magenkrebs, Kolonkrebs, Mastdarmkrebs, ösophaguskrebs, Krebs der Bauchspeicheldrüse, Kolangioma, der Leber und verschiedener anderer Krebsarten geeignet.

Die Erfindung wird anhand der folgenden Beispiele näher erläutert, wobei die in Klammern gesetzten Zahlen die Mengen der Aminosäuren angeben in Form der verwendeten Salze, berechnet als freie Aminosäuren.

Beispiel 1

Es wurde eine Aminosäureinfusionslösung gemäß der Erfindung hergestellt, indem die folgenden Aminosäuren

0 3 0 0 11/0907 ^BAD

in sterilem Wasser in folgenden Konzentrationen gelöst wurden. Die so hergestellten Lösungen wurden bei 110⁰C für etwa 10 Minuten sterilisiert.

Leucin	410
Valin Isoleucin Lysin χ HCl Phenylalanin	200 180 620 (496) 290
Threonin	180
Tryptophan	60
Arginin χ HCl	270 (223.3)
Histidin χ HClx2H₂0	130 (88.7)
Glycin	340
Aminosäuren gesamt	2680 mg/100ml
freie Aminosäuren
gesamt	2480 mg/100ml
Stickstoff gesamt	0.397 g/1 00ml

Beispiele 2 bis 6

In der gleichen Weise wie in Beispiel 1 beschrieben wurden Aminosäure-Infusionslösungen der folgenden Zusammensetzung gemäß der Erfindung hergestellt.

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Zusammensetzg. (mg/100 ml)

Leucin Valin Isoleucin» Lysin HCl

Phenylalanin Threonin Tryptophan Arginin HCl

Histidin HCl. ;

Glycin* Alanin· Asparaginsäure Glutaminsäure , Prolin Serin Tyrosin

Beispiel 2 Beispiel 3 Beispiel 4 Beispiel 5 Beispiel 6

410	410	1090	267	175
200	200	960	198	175
180	180	960	192	189
620 (500)	620 (500)	963 (770)	189 (151)	330 (264)
290	290	640	138	175
180	180	646	138	180
60	60	320	48	45
-	270 (220)	830 (686.4)	147 (121.6)	I65 (136.5)
-	130	370 .(252.3)	-	143 ( 97-5)
-	-	1490	-	236
-	-	-	81	150
	-	-	246	240
-	-	-	600	300
-	-	-	222	143
-	-	-	171	150
			165	5

KJ CD OJ cn

O CO

Im folgenden werden Versuche und klinische Untersuchungen mit den erfindungsgemäßen Aminosäure-Infusionslösungen beschrieben.

Versuchsbeispiel

Als Versuchstiere wurden Donryuratten und Wistarratten mit einem Gewicht von 150 bis 160 g verwendet. Vor Präparierung der krebserkrankten Tiere wurde ein Katheter an jedes der Tiere für die nachfolgende Behandlung der kontinuierlichen Infusion ohne Behinderung angesetzt und dann folgte eine dreitätige Angewöhnungszeit.

Unter Nembutalnarkose wurde die Nackenhaut der Ratte eingeschnitten, um die Jugularvene bis zur Subclavian-Vene freizulegen. Es wurde ein Katheter in die Jugularvene eingeführt, bis das vordere Ende den Vena cava superior erreicht hat und dann wurde der Katheter befestigt. Das andere Ende des Katheters wurde unter die Haut geführt und an einem hinteren Teil des Körpers wieder herausgezogen. Der Katheter wurde dann durch ein Geschirr gezogen und dann nach Herstellung einer Sicherheitswindung über einen Drehverschluß an eine konstant arbeitende Infusionspumpe angeschlossen. Für die kontinuierliche Infusion wurde eine Bio-Cannula-Pumpe verwendet. Während der folgenden dreitägigen Anwendungszeit wurde Pan-Amin (Aminosäureinfusionslösung der Firma Otsuka Pharm. Co., Ltd., Japan, nachfolgend mit der Abkürzung PA bezeichnet) verwendet. Diese Infusionslösung wurde der Ratte kontinuierlich in einer Rate von 1,5 ml/h mit Wasser ad libidum und einer proteinfreien Diät gemäß der folgenden Zusammensetzung verabreicht:

03001 1/0907

Zusammensetzung von PA (in mg/100 ml)

Leucin lO

Valin 200

Isoleucin 180

Lysin HCl 620

Phenylalanin 290

Threonin l80

Tryptophan 60

Arginin«. HCl - 270

Histidin- HCl-2H₂O 130

Methionin 2^0

Glycin 3 i} 0

Zusammensetzung der proteinfreien Diät:

W- Stärke 47.83 g

Saccharose ₁ 23.92 g

Vitaminmischung 1.0 g

Salzmischung^ 5.0 g

Kornöl 5.0 g

Zellulose, 2.0 g

Chocola A 0.05 ml

Cholinchlorid 0.20 ml

1) 2)

Die Vitaminmischungen und die Salzmischung wiesen

die folgenden Zusammensetzungen auf. "Chocola A"

(Warenzeichen der Firma Eisai Co., Ltd., Japan) ist der Palmxtinsaureester des Vitamin A enthaltend 30 000 IU/ml Vitamin A (20 mg/ml Retinolpalmitat): Zusammensetzung der Vitaminmischung(Gew./Vol-%)

Thiamin HCl	03001	1 /0907	0.059
Riboflavin		0.059
Nicotin säure		0.294
Calcium pantothehat		0.235
Pyridoxin - HCl		0.029
Menadion		0.006
Biotin		0.001

Folsäure 0.002

Vitamin B 12 0.0002

Inositol 1.176

Ascorbinsäure 0.588

Milchsäure 97.551

Zusammensetzung der Salzmischung (Gew/Vol-%):

CaCO., 29-29

CaHPO,,. 2H_nO 0.^3 KH₂PO,_}
NaCl

Fe(CgH₅O₇).6H₃O
CuSO₂J-SH₂O

ZnCl₂

34	• 31	623
25	.06	156
9	• 98	121
	0.	02
	0.	0025
	0.	0005
	0.
	0.
	0.

1. Versuch zur Inhibierung von festem Krebsgewebe An Krebs erkrankte Tiere wurden präpariert nach Beendigung der Aklimationszeit durch die Transplation von

7 f\

2,7 χ 10 Zellen/ml Yoshida-Sarkom und 9x10 Zellen/ml AH 130 bei Donryuratten und 1 χ 10 Zellen/ml Walker-Sarkom und Rhodamin-Sarkom in einer Menge von 0,2 ml als Krebsbrei bei Wistarratten. Der Krebs wurde in die linke Inguinalis der Tiere subkutan transplantiert. Wie in Tabelle 1 angegeben, sind die Ratten, die Krebszellen vom gleichen Typ tragen und jene, die keine Krebszellen tragen, in 12 Gruppen eingeteilt worden. Die Gruppen A-I und A-4 erhielten nur die Aminosäure-Infusionslösungen der Erfindung, hergestellt gemäß Beispiel 1 (AO-30), die Gruppen A-2 und A-5 erhielten die Lösung AO-30 und Mitomycin C (hierin bezeichnet als MMC) und die Gruppen

03001 1 /0907

A-3 und A-6 erhielten die Lösung AO-30, MMC und eine Diät und zur Kontrolle erhielten die Gruppen P-1 und P-4 nur PA, die Gruppen P-2 und P-5 erhielten PA und MMC und die Gruppen P-3 und P-6 erhielten PA, MMC und gleichzeitig eine Diät. Jede Gruppe bestand aus 6
Ratten. AO-30 und PA wurden kontinuierlich in einer
Geschwindigkeit von 1,5 ml/h verabreicht. MMC wurde
intraperitonal in einer Dosis von 0,1 mg/kg/Tag, beginnend 24 Stunden nach der Implantation des Krebses verabreicht. Die verabreichte Diät ist eine proteinfreie Diät, wie oben angegeben.

In Tabelle 1 zeigt das Zeichen + an, daß die Ratten
mit Krebsgewebe implantiert waren oder MMC oder eine Diät erhalten haben. Das Zeichen - zeigt an, daß die Ratten nicht implantiert waren oder kein MMC oder eine Diät verabreicht worden war.

	Tabelle 1	MMC
Gruppe	Krebsimplantat	-
P-I	-	+
P-2	-	⁺
P-3	-	+
P-5	+	⁺
P-6	⁺
A-I	_	+
A-2	-	+
A-3	-	-
A-4	+	+
A-5	+	+
A-6	+

Diät

030011/090 7

Das Yoshida-Sarkom und das AH 130 wurde am 12. Tag nach der Transplantation und das Walker-Sakrom und das Rhodamin-Sarkom wurde am 15. Tag aus den Ratten entfernt und das Krebsgewebe gewogen. Die Ergebnisse sind in Tabellen 2 bis 5 zusammengefaßt. Das mittlere Gewicht des Krebses, C, in den an Krebs erkrankten Tieren der Gruppe P-4, die nur PA alleine erhalten haben, wurde berechnet. Das mittlere Gewicht des Krebses, T, in jedem der an Krebs erkrankten Tiere der Gruppe P-5, P-6 und A-4 bis A-6 wurde benfalls berechnet. In den Tabellen 2 bis 5 sind die Ergebnisse für das T/C-Verhältnis zusammengefaßt. Die erhaltenen Ergebnisse wurden mit effektiv bezeichnet, wenn das T/C-Verhältnis geringer ist als 0,50, leicht effektiv, wenn das Verhältnis 0,50 bis 0,70 und als ineffektiv bezeichnet, wenn das Verhältnis größer ist als 0,70.

Das mittlere Gewicht des Krebses in den Tabellen 2 bis 5 ist das Mittel des Maximalgewichts und des Minimalgewichts des Krebses in 6 Ratten der entsprechenden Gruppe. Der Wert, enthaltend das + ist das Maximalgewicht und der Wert mit dem - Zeichen ist das Minimalaewicht.

Tabelle 2 (Yoshida sarcom )

(mg) T/C

Gruppe	Krebsaewicht	588
P-I	-	814
P-2	-	678 1 1/090
P-3	-
P-4	2689 +
P-5	i860 +
P-6	1865 + 03(TO

0.69 0.69

Gxup_pe_ Krehsgpwi rhi- (mg) T/C

A-4 1720 + 9o0 0.64

A-5 1135 + 265 0.42

Λ-6 1126 + 32'i OJI2

Die Tabelle 2 zeigt, daß die Verabreichung der erfindungsgemäßen Aminosäure-Infusionslösung AO-30 für sich allein (Gruppe A-4) zu einer Verringerung des Krebsgewichtes führt, und zwar auf mindestens etwa 1/3 des Krebsgewichtes der Gruppe von Tieren, die das bekannte Mittel PA allein erhalten haben. Somit ist bewiesen, daß das erfindungsgemäße Mittel AO-30 eine krebsinhibierende Wirkung besitzt- Darüber hinaus ist das T/C-Verhältnis der Gruppe A-4 mit einem Wert von 0,64 vergleich bar bzw. besser als das entsprechende Verhältnis, das bei Verabreichung von MMC (Gruppe P-5) und bei Verabreichung von MMC und einer Diät (Gruppe P-6) erreicht wird. Die Gruppe A-5 mit der Verabreichung von AO-30 und MMC und die Gruppe A-6 mit der Verabreichung von AO-30, MMC und einer Diät sind ebenfalls durch sehr wirksame Ergebnisse gekennzeichnet, wie das T/C-Verhältnis von 0,42 zeigt. Diese Ergebnisse zeigen, daß die gemeinsame Verabreichung von AO-30 und MMC die Wirksamkeit des alleinverabreichten MMC erheblich steigert.

BAD ORIGINAL

030011/η 90'⁷

Tabelle 3 (V/alker sarcom )

Gruppe Krebsgewicht (mg) T/C

P—1 — —

P-2

P-3

P-4 5010 + 1311

P-5 2783 + 1001 0.56

P-6 2712 + 873 0.5^

A-I

A-2

A-3

A-4 1816 + 878 . O.36

A-5 1198 + 522 0.24

A-6 1262 + 375 0.25

Die Tabelle 3 zeigt, daß die Verwendung von AO-30 (Gruppe A-4) zu einer Verringerung des Krebsgewichtes führt, die etwa 1/3 des Krebsgewichtes bei der Verwendung von PA (Gruppe P-4) entspricht, somit ist die Lösung AO-30, auch wenn sie allein verwendet wird, inhibierend gegen Krebs wirksam. Die Tabelle zeigt weiterhin, daß die Lösung AO-30, wenn sie zusammen mit MMC oder mit MMC und einer Diät verabreicht wird, zu besonders wirksamen Ergebnissen führt.

3-0011/090'

	Tabelle I₁ (_AH 130)
Gruppe	Krebsgewicht ^^
P-I	-
P-2	-
P-3	-
ρ-ή	8OO5 + 2891
P-5	4883 + Ι46θ
P-6	5046 + 1100
A-I	-
A-2	-
A-3	-
A-4	4642 + 910
A-5	2275 + 1518
A-6	2^00 + 100ς

T/C

0.61 0.63

0.58 0.28 0.29

Die Tabelle 4 zeigt ähnlich wie die Tabellen 2 und 3, daß die erfindungsgemäßen Aminosäurelösungen zu v/irksamen Ergebnissen führen.

Tabelle 5 (Rhodamin sarcom )

Gruppe Krebsgewicht (_mg) T/C

P-I P-2 P-3

F-H 1007 +

P-5 567 + 4l6 Ο.56

P-6 500 + 143 0.50

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BAD ORIGINAL

Krebsgewicht (mg) T/C

513 + 171 0.51

268 + 82 0.27

294 + 46 0.29

Die Tabelle 5 zeigt ähnlich wie die Tabellen 2 bis 4 die Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Aminosäure-Infusionslösungen. Die obigen Tabellen zeigen, daß die erfindungsgemäßen Aminosäure-Infusionslösungen entgegen den üblichen Aminosäure-Infusionslösungen, die Methionin enthalten, eine außerordentlich gute Inhibitorwirksamkeit gegen die verschiedensten Krebszellen aufweisen.

2. Versuch zur Erhöhung der Lebenserwartung Es wurden Krebstragende Tiere hergestellt, indem man Donryuratten 1,7 χ 10 Zellen/ml Yoshide-Sarkom oder 1,1 χ 10⁶ Zellen/ml AH 130 und Wistarratten 1,0 χ 10⁵ Zellen/ml Walker-Sarkom intraperitoneal verabreicht. Bei diesem Versuch wurde den Tieren eine Infusionslösung von AO-30 (oder PA für die Kontrolle), Glukose, Elektrolytlösung und Vitamine gemäß einer sog. Totalparenteral-Ernährung verabreicht (hier bezeichnet als TPN-Methode). Die Zusammensetzung der Infusionslösung ist nachfolgend angegeben.

030011/0907

Zusammensetzung der Infusionslösung:

	Erfindung	Kontrolle
Amino säure	AO-30 16.1 g/l	PA 175 g/l
Glucose	^200 g/l	200 g/l
Na⁺	53 mEq/1	53 mEq/1
K⁺	25 mEq/1	25 mEq/1
Cl"	53 mEq/1	53 mEq/1
HPOJ-	25 mEq/1	25 mEq/1
CH₃CH(OH)COO"	48 mEq/1	48 mEq/1
Vitamin B,	0.1 mg/ßatte/Tag	0.1 mg/Ratte/Tag
Vitamin B₃	0.01 mg/Ratte/Tag	0.01 mg/Ratte/Tag
Vitamin Bg	0.02 mg/Ratte/Tag	0.02 mg/Ratte/Tag
Vitamin C	0.5 mg/ Ratte/Tag	0.5 mg/. Ratte/Tag
Nicotinsäure	0.2 mg/ Ratte/Tag	0.2 mg/. Ratte/Tag
Panthenol	0.02 rng/Ratte/Tag	0.02 mg/Ratte/Tag
Kalorien	206 C^l/kg/Tag	208 Cal/kg/Tag
Dosis	24 0 ml/kit/Tag	240 mg/kg/Tag
NPC/M*	337	317
Rate der infusion	1.5 nTl/l'jO g Körper/Std.	1.5ml/150 g Körper/Std.

NPC/N* = keine Proteinkalorien/Stickstoff

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BAD ORIGfNAi

Wie die Tabelle 6 zeigt, sind die Ratten mit Krebs in 4 Gruppen zu je 10 Ratten eingeteilt worden, und zwar: Gruppe A-T, denen AO-30 und Gruppe A-2¹, denen AO-30 und MMC verabreicht worden ist und als Kontrolle die Gruppe P-T, denen PA und die Gruppe P-2¹, denen PA und MMC verabreicht worden ist. Das MMC wurde xntraperitoneal in einer Dosis von 0,1 mg/kg/Tag verabreicht.

In der Tabelle 6 zeigt das Zeichen + an, daß die Gruppe inoculiert worden ist oder MMC erhalten hat und das Zeichen - zeigt an, daß die Gruppe nicht inoculiert worden ist oder kein MMC erhalten hat.

Tabelle 6

Gruppe

Kontrolle P-T P-2¹

Erfindung A-T A-2¹

Krebsinoculation

MMC-Infusion

Die Versuchstiere wurden beobachtet, um die Lebensdauer nach 30 Tagen nach der Inoculation festzustellen. Die zu mittleren Lebensdauer (hierin bezeichnet als MST) wurde nach der folgenden Gleichung errechnet:

MST=

worin η für die Zahl der beobachteten Tiere, f für die Zahl der am t-ten Tag gestorbenen Tiere und t für die Zahl der Tage des Überlebens nach der Transplation steht.

0 3 0 0 11/0907

Die Wirksamkeit hinsichtlich der Erhöhung der Lebenserwartung steht in Beziehung zum T/C-Verhältnis, d. h. im Verhältnis der mittleren Überlebcnszeit c der Gruppe P-T, die PA als Aminosäure-Infusionslösung erhalten hat zu der mittleren tiberlebenszeit T jeder der anderen krebstragenden Gruppen. Das Ergebnis ist als effektiv zu bezeichnen, wenn das T/C-Verhältnis größer ist als 1,25 und als ineffektiv zu be eichnen, wenn das Verhältnis geringer ist als 1,25. In der Tabelle 7 sind die erhaltenen Ergebnisse zusammengefaßt.

Tabelle 7

Krebs	Gruppe	MST (^Tag)	T/C
	P-I'	11.9	-
Yoshida sarcom	P-2' A-I^r	I5.9 15.0	1.34 1.26
	A-2'	I9.9 ·	I.67
	P-I'	I3.6	-
AH 130	P-2' A-I'	> 21.6 I8.O	1.59 I.32
	A-2¹	> 25.I	I.85
	P-I'	14.7	- -
Walker sarcom	P-2' A-I'	> 22.7 > 22.4	I.52
	A-2'	> 26.9	1.82

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Die Tabelle 7 zeigt, daß die Infusionslösung gemäß der Erfindung bei Verwendung von allen Krebs typen zu einer.. 1,3 bis 1,5-fachen Erhöhung der Lebenserwartung führt, im Vergleich zu der PA-Infusionslösung. Die erfindungsgemäße Lösung verstärkt auch die Erhöhung der Lebenserwartung, die erreicht wird, wenn das MMC in Kombination mit der erfindungsgemäßen Lösung verabreicht wird (vergleiche Gruppe A-2').

Obgleich nicht in der Tabelle 7 aufgelistet, erreichen die Tiere der Gruppen P-2¹ und A-2¹, die mit AH 130 inoculiert wurden, ein Überlebensverhältnis von 40 bzw. 60 % bei 30 Tagen nach der Inoculation, Die Gruppe P-2¹ mit dem Walker-Sarkom zeigt ein Überlebensverhältnis von 20 %," während die Gruppe A-2' mit dem gleichen Krebs ein Überlebensverhältnis von mehr als 50 % zeigt.

Die obigen Ergebnisse zeigen, daß die Aminosäure-Infusionslösung der Erfindung, die frei von Methionin ist, wenn sie kontinuierlich allein für längere Zeit verabreicht wird, sehr wirksam ist gegen Yoshida-Sarkom, Walker-Sarkom, AH 130 und Rhodamin-Sarkom, indem die Lösung das Wachstum der Krebszellen inhibiert und darüber hinaus die Infusionslösung eine verstärkte Wirksamkeit aufweist, wenn sie in Kombination mit einem bekannten Antikrebsmittel, wie MMC, verwendet wird. Weiterhin bewirkt die erfindungsgemäße Infusionslösung, wenn sie kontinuierlich als alleinige Stickstoffquelle gemäß der TPN-Methode verabreicht wird, eine bemerkenswerte Erhöhung der Lebenserwartung bei den untersuchten Tieren, die mit Yoshida-Sarkom, AH 130- bzw. Walker-Sarkom inoculiert waren, wobei die Wirkung des MMC, wenn es zusammen mit der Lösung verabreicht wird, wesentlich verstärkt wird.

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Klinikversuch 1

Der Patient war ein 54 Jahre alter Mann, der zwei Jahre nach der totalen Gastrektomie an Peritonitis-Karcinomatosa litt. Der Patient erhielt erneut eine Kolotomie, was jedoch nur ein chirurgischer Abdominaleingriff ohne Heilung ist. Der Patient litt unter Erbrechen aufgrund karcinomatöser Strikturen im Intestinaltrakt und war stark unterernährt.Der Patient erhielt die erfindungsgemäße Aminosäure-Infusionslösung AO-30, hergestellt nach Beispiel 1, täglich in einer Dosis von 500 ml/Tag für 4 Wochen lang nach der TPN-Methode. Zusätzlich erhielt der Patient MMC, 5-Fluoruracil (hierin bezeichnet als 5-FU) und Neocarzinostatin (hierin bezeichnet als NCS) individuell in der folgenden Art und Weise. Das MMC wurde intravenös in einer Dosis von 10 mg/cm² Krebsfläche einmal am Tag verabreicht, und zwar für die ersten 4 Tage und dann 4 Tage nach einem Zeitraum von 2 Wochen. Das 5FU wurde intravenös in einer Dosis von 10 mg/kg Körpergewicht einmal am Tag für die ersten 5 Tage und dann für %tfeitere 5 Tage nach einem Zeitraum von 2 Wochen gegeben. Das NCS wurde intravenös in einer Dosis von 2000 Einheiten einmal jeden Tag für eine Zeit von 4 Wochen verabreicht. 4 Wochen nach Beginn der Infusionen war der Patient in der Lage, Lebensmittel zu verdauen,, war wieder erholt und wurde entlassen.

Klinikversuch 2

Der Patient, war ein 39 Jahre alter Mann, der erneut eingeliefert wurde aufgrund des sich ausbreitenden Leberkrebs mit Gelbsucht {jaundice]) ein Jahr aaeh der totalen Gastrefctosie„ Der Patient hatte Hepatome„

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Phlebismus in der abdominalen Wand, Aszites und Ödeme in der unteren Hälfte des Körpers und. befand sich in einem kritischen Zustand. Wie im Klinikversuch 1 wurde dieser Patient mit einer Aminosäure-Infusionslösung AO-30, hergestellt nach dem Beispiel 1, nach der TPN-Methode behandelt und außerdem wurde MMC, 5FU und NCS verabreicht. Die Lösung und die Antikrebsmittel wurden in den gleichen Dosen und in der gleichen Weise wie beim Klinikversuch 1 verabreicht mit der Ausnahme, daß die Aminosäurelösung und das NCS täglich für 5 Wochen verabreicht wurde. 5 Wochen nach dem Beginn der Infusion verschwanden das Hepatom und Phlebismus und die anderen Symptome verbesserten sich. Der Patient starb jedoch an einer intestinalen Blutung. Aufgrund einer Biopsie wurde festgestellt, daß der Herd durch die Behandlung .weitgehend feingeweblich beseitigt war.

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Claims

Patentansprüche

1. Aminosäurelösung für die Behandlung von an Krebs erkrankten Personen, dadurch gekennzeichnet, daß die Lösung kein Methionin als essentielle Aminosäure enthält.

2. Aminosäurelösung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie

1,4 - 14,0 g Leucin,

1.4 - 10,0 g Valin,

1 ,6 - 10,0 g Isoleucin,

1.5 - 14,9 g Lysin,

1,0 - 9,4 g Phenylalanin, 1,0 - 6,7 g Threonin und 0,4 - 4,0 g Tryptophan pro Liter Lösung enthält, jedoch kein Methionin.

3. Aminosäurelösung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie weiterhin wenigstens eine nicht essentielle Aminosäure ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Arginin, Histidin, Glycin, Alanin, Asparaginsäure, Glutaminsäure, ProLin, Serin, Tyrosin und Ornithin enthält.

4. Aminosäurelösung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie

1.7 - l'i.O r Leu::in ,

1.7 - 9-b £ Valin ,

1.8 - 9.f- £ Isoleucin , 1.5 - 1".Y ρ Lysin ,

1.0 - C Ji g Phenylalanin ,

1.3 - 6.7 K Threonin ,

0J\ - 3.-5 g Tryptophan,

1.0 - 13.2 g Arginin, 030011/0907

0.9 - 3.0 ζ Histidin ,

BAD ORIGINAL

2.3 - 15-0 g Glycin , 0 - 4.8 g Alanin ,

0 - 2.5 g Asparaginsäure

0 - 6.0 g Glutaminsäure

0 - 2.3 g Prolin ,

0 - 1.8 g Serin ,

0 - 1.7 g Tyrosin ,

0 - 5.0 g ornithin pro Liter Lösung enthält, jedoch kein Methionin.

5. Aminosäurelösung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie

4.1 g Leucin
2.0 g Valin

1.8 g Isoleucin 5.0 g Lysin

2.9 g Phenylalanin 1.8g Threonin

0.6 g Tryptophan

2.2 g Arginin
0.9 g Histidin

3.4 g Glycin

pro Liter Lösung enthält, jedoch kein Methionin.

6. Verwendung der Aminosäurelösungen nach den Ansprüchen 1 bis 5, gegebenenfalls zusammen mit einem an sich bekannten Antikrebsmittel zur Behandlung von Krebserkrankungen .

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