DE2811690C3

DE2811690C3 - Verfahren zum Veredeln von Tabak

Info

Publication number: DE2811690C3
Application number: DE19782811690
Authority: DE
Inventors: Des Erfinders Auf Nennung Verzicht
Original assignee: Fabriques De Tabac Reunies Sa 2003 Neuchatel Ch
Current assignee: Fabriques De Tabac Reunies Sa 2003 Neuchatel Ch
Priority date: 1977-05-06
Filing date: 1978-03-17
Publication date: 1982-05-06
Also published as: FR2389341A1; NL188782B; NL7804047A; NL188782C; GB1585023A; CH633169A5; DE2811690B2; FR2389341B1; AU3492178A; CA1081076A; DE2811690A1; AU520607B2

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Veredeln von Tabak durch Abbau von im Tabak enthaltenen Nitraten und Nitriten anaerob unter Mitwirkung von Mikroorganismen.

Viele Tabake, zum Beispiel Burley, enthalten Nitrate und/oder Nitrite, die beim Abrauchen giftige Stickoxyde erzeugen können. Es sind Fermentationsverfahren bekannt, bei denen auf enzymatischem Wege diese Stickstoffsalze, allerdings nur in sehr geringem Umfang und auch nur als Nebenwirkung zu anderen enzymatischen Umsetzungen, abgebaut werden.

Aufgabe der Erfindung ist es, Nitrate und Nitrite bis auf einen zuträglichen Restgehalt abzubauen, um den Anteil an Stickoxyden im Rauch möglichst zu reduzieren. Der Abbau der Nitrate und Nitrite soll möglichst selektiv erfolgen, also unter möglichst weitgehender Vermeidung von Umsetzungen der die Nitrate und Nitrite begleitenden Tabakbestandteile.

Die Erfindung ist dadurch gekennzeichnet, daß eine Kultur von Mikroorganismen, die Sauerstoff benötigen aber anaerob denitrierend lebensfähig sind, und die unter anaeroben Lebensbedingungen in ihre exponentiell Wachstdmsphase versetzt sind, mit einer Nährlösung für diese Kultur, die keine für die Mikroorganismen dieser Kultur zugängliche, wesentliche Salierstoffquelle aufweist, unter günstigen anaeroben Lebensbedingungen für die Mikroorganismen dieser Kultur auf die Nilrate, Nitrite und diese begleitende weiteren Tabakbestandteile zur Einwirkung gebracht wird, daß die Nitrate und Nitrite längstens innerhalb von 24 Stunden iiif den angestrebten Restgehalt abgebaut sind und daß inch erzieltem Abbau sofort die hervorgerufene F.inwirkung der Mikroorganismen abgebrochen wird. Die Mikroorganismen bleiben unter diesen Bedingun gen in ihrer exponcnticllcn Wachsiumsphase, so lange der dafür erforderliche .Sauerstoffbedarf aus den Nitraten und Nitriten gedeckt werden kann

Die angewendeten Mikroorganismen werden bei der

Einwirkung gezwungen, ihren Sauerstoffbedarf aus den abzubauenden Nitraten und Nitriten zu decken, wodurch diese bis zur Stufe des Stickstoffs beziehungsweise des Ammoniaks reduziert werden. Stickstoff kann schadlos entweichen und der in Form von Ammonium- ί salzen, Aminosäuren und Aminen vorliegende Stickstoff bildet beim Abrauchen keine Stickoxyde.

Da die zugesetzte Kultur sich bereits in ihrer exponentiellen Wachstumsphase befindet, haben deren Mikroorganismen einen Vorsprung von etwa 8 Stunden iu gegenüber anderen unerwünschten Mikroorganismen, die sich noch in ihrer latenten Phase befinden. Diesen Vorsprung können solche unerwünschten Mikroorganismen innerhalb der auf maximal 24 Stunden begrenzten Einwirkungszeit nicht so weit einholen, daß π sie eine nennenswerte Wirkung entfalten können. Auf diese Weise kann sichergestellt werden, daß die mit der Erfindung angestrebte Wirkung selektiv ist

Ünfermentierte, luftgetrocknete Tabake haben häufig einen Gehalt an Nitraten von etwa 50 g pro kg Trockengewicht In extremen Fällen wurden Nitratmengen bis zu 80 g pro kg Trockengewicht gemessen. Der angestrebte Restgehalt ist abhängig von der Weiterverwendung des Tabaks. Bei Tabaksorten, die einen wesentlichen Teil der rauchfertigen Tabakmischung ausmachen, liegt der angestrebte Restgehalt bei höchstens 5 g der Anionen Nitrac und Nitrit pro kg Trockengewicht; bei Tabaksorten, die nur in kleineren Anteilen der rauchfertigen Mischungen ausmachen, kann der angestrebte Restgehalt etwas höher sein. Im Allgemeinen liegt der angestrebte Restgehalt im Bereich von 3 l\s 20%, vorzugsweise bei 5%, des ursprünglichen Gehaltes des zu eredelnden Tabaks, bezogen auf das Gesamtgewicht der Anionen Nitrat und Nitrit. r,

Man kann die selektive Wirkung der Erfindung noch begünstigen, indem man die Kultur der Mikroorganismen so intensiv zur Einwirkung bringt, daß die Nitrate und Nitrite innerhalb von 12 bis 24 Stunden, vorzugsweise innerhalb von 20 Stunden, bis auf einen minimalen Restgehalt abgebaut sind und daß die hervorgerufene Einwirkung der Mikroorganismen sofort abgebrochen wird, sobald der angestrebte Restgehalt erreicht ist.

Der minimale Restgehalt, das ist der Restgehalt, den man ohne außergewöhnliche Maßnahmen mit der Erfindung erzielen kann, ist abhängig von der Qualität des zu veredelnden Tabaks und er beträgt 0,01 bis 0,1 % des ursprünglichen Gehaltes des zu veredelnden Tabaks, jeweils bezogen auf das Gesamtgewicht der ίο Anionen Nitrat und Nitrit. Bei einer so intensiven Anwendung ist der angestrebte Restgehalt schon nach wenigen Stunden erreicht, so daß die Einwirkung abgebrochen werden kann, ehe die Mikroorganismen der Kultur ihren etwa 8stündigen Vorsprung verbraucht v, haben oder kurz danach.

Man kann die Einwirkung der Mikroorganismenkultur intensivieren, indem man die anaeroben Lebensbedingungen für diese Mikroorganismen hinsichtlich Temperatur, Feuchtigkeit. pH-Milieu und Nährstoffen- mi gebot optimiert und indem man die Kultur von vornherein in hoher Konzentration auf die Nitrate und Nitrite zur Einwirkung bringt. Die optimalen Bedingungen kann man durch Probieren finden. Von dem erfolgten Abbau der Nitrate und Nitrite auf den ^ iingi'strebien, beziehungsweise den minimalen Restgehalt kann man sich analytisch überzeugen.

Die Finwirkung kann abgebrochen werden, indem man die Lebensbedingungen der Mikroorganismen nicht aufrechterhält, zum Beispiel durch starkes Absenken der Temperatur, Eintrocknen, oder aber durch Entfernen der Mikroorganismen, beispielsweise durch Abfiltrieren als Aktivschlamm, wenn die Einwirkung in flüssigem Milieu stattfindet.

Die angewendeten Mikroorganismen können Bakterien, zum Beispiel solche vom Genus Aerobacter, Pseudomonas, Micrococcus oder Echerichia sein, es können aber auch Pilze, beispielsweise solche vom Genus Rhodutorula sein.

Bevorzugt werden Bakterien, die zur normalen Mikroflora von Tabakblättern gehören, weil diese besonders schnell denitrifizierend wirken und den Tabak nicht in unerwünschter Weise verändern.

Eine entsprechende Weiterbildung der Erfindung ist dadurch gekennzeichnet, daß eine Reinkultur aus Bakterien angewendet wird, die so gewonnen wird, indem ein wäßriger Abstrich von nitrathaltigen Blättern oder vermoderten Blättern einer Nährlösung angeimpft wird, die den für die Inkubation erforderlichen Sauerstoffgehalt vorwiegend in Form von Nitraten enthält, auf pH 6,6 bis pH 7,5, vorzugsweise pH 7,4, gepuffert ist und 25 bis 35° C, vorzugsweise 30" C, während 15 bis 25 Stunden, vorzugsweise 20 Stunden, durch Schütteln unter weitgehendem Sauerstoffabschluß inkubiert wird und dann als aktivas Impfgut zum Animpfen einer frischen solchen Nährlösung verwendet wird, mit der dann die Inkubation wiederholt wird und so fort bis die Reinkultur gebildet ist.

Vorzugsweise u'ird der Abstrich von Tabakblättern gemacht. Man erhält aber auch einen verwendbaren Abstrich, wenn man aus vermoderten Blättern entstandene oder vermoderte Blätter enthaltende Walderde verwendet.

Man gewinnt nach diesem Verfahren eine Reinklultur, deren Mikroorganismen sich in aktiver, also exponentieller, Wachstumsphase befinden. Diese wird entweder sofort weiterverwendet oder aufbewahrt und zu diesem Zweck inaktiviert und dann vor Weiterverarbeitung reaktiviert.

Die Erfindung ist auch vorteilhaft anwendbar in Verbindung mit einer Reinkultur des Bakteriums Enterobacter aerogenes, vorzugsweise vom Standardstamm ATCC 13048. Reinkulturen dieses Standardstammes sind bei der Deutschen Sammlung von Mikroorganismen. Göttingen. Grisebachstraße 8, unter der DSM-Aufnahme-Nr. DSM 30053 erhältlich.

Bei Tabakteilen, bei denen, wie zum Beispiel bei Rippen, die Nitrate und Nitrite für von außen einwirkende Mikroorganismen nur schwer zugänglich sind, empfiehlt sich eine Weiterbildung der Erfindung, die dadurch gekennzeichnet ist, daß Nitrate und Nitrite und andere wasserlösliche Bestandteile mit Wasser aus dem zu veredelnden Tabak herausgelöst werden, daß die so gewonnene Tabakextraktlösung isoliert mit der Mikroorganismenkultur angeimpft und mit der Nährlösung versetzt unter stark gedrosseltem Luftzutritt 12 bis 24 Stunden, vorzugsweise 16 Stunden, unter günstigen anaeroben Lebensbedingungen für diese Mikroorganismen gehalten wird und daß dann anschließend sofort die Einwirkung der Mikroorganismen durch Abziehen des Aktivschlamms von der gewonnenen nitratarmen Tabakextraktlösung abgebrochen wird und daß die in der nitratarmen Tabakextraktlösung enthaltenen Lösungsbestandteile mit Wasser, das beim Auswaschen von Tabak angefallen ist. zugesetzt werden.

Wenn dagegen zum Beispiel die zwischen den Rippen

gelegenen Blatteile, die sogenannten Strips, oder Blätter mit nicht so starken Rippen veredelt werden sollen, oder wenn es nicht darauf ankommt, den Nitratgehalt auch in den Tiefen der Rippen abzubauen, dann kann man einfacher verfahren, indem aus der Mikroorganismenkultur und Nährlösung eine Aktivsuspension gebildet wird, der zu veredelnde Tabak auf 10 bis 30%, vorzugsweise 20%, Feuchtigkeitsgehalt gebracht und dann mit der Aktivsuspension besprüht wird, bis er einen Feuchtigkeitsgehalt von 40 bis 60%, vorzugsweise 50%, erreicht hat, und dann unter stark gedrosseltem Luftzutritt 12 bis 24 Stunden, vorzugsweise 24 Stunden, unter günstigen anaeroben Lebensbedingungen für die Mikroorganismen aufbewahrt wird und daß dann die Einwirkung der Mikroorganismen sofort abgebrochen wird und durch Eintrocknen des Tabaks auf 10 bis 30%, vorzugsweise 20%, Feuchtigkeitsgehalt

In vielen Fällen, zum Beispiel bei der Wiederaufbereitung von Tabakabfällen, wird der Tabak pulverisiert, aufgeschlämmt und mit Bindemitteln zu Folie ausgeformt, die dann durch Eintrocknen verfestigt wird. In einem solchen Fall kann man vorteilhaft die Mikroorganismen einwirken lassen, während dtr Tabak zur Suspension aufgeschlämmt ist, und das geschieht vorzugsweise, indem der zu veredelnde Tabak gemahlen und mit Wasser aufgeschlämmt wird und mit der Mikroorganismenkultur und Nährlösung versetzt unter stark gedrosseltem Luftzutritt während 12 bis 24 Stunden, vorzugsweise 24 Stunden, unter günstigen anaeroben Lebensbedingungen für die Mikroorganismen gehalten wird und daran anschließend sofort die Wirkung der Mikroorganismen abgebrochen wird, indem die Suspension zu oder auf Folien ausgeformt und auf einen Feuchtigkeitsgehalt von 10 bis 30%, vorzugsweise 15%, eingetrocknet wird.

Die Mikroorganismenkultur wird vorzugsweise als Reinkultur angewendet, wobei der Reinheitsgrad hinreichen muß, um wesentliche Nebenwirkungen zu vermeiden. Vorzugsweise wird die Reinkultur von Tabakblättern gewonnen.

Die Mikroorganismenkultur kann, eingefroren in flüssigem Stickstoff, aufbewahrt werden und wird dann zur Wiederverwendung aufgetaut und reaktiviert. Für laufenden Bedarf kann sie in einem Biostaten, aus dem ständig benötigte Portionen entnommen werden, in aktivem Zustand aufbewahrt werden.

Eigenschaften von Enterobacter aerogenes:

Motile Stäbchen 03 - 1,5 μιτί;

Gram —
Gasentwicklung bei 37°C

Glycerin +

Inositol +

Andonitol +

Voges-Proskauer +

Methylrai -

Phenylamindesaminase —

Urease —

Catalase +

Ornithindecarboxylase +

Lysindecarboxylase +

Hydrolyse von Aesculin +
Wachstum

in Gegenwart von KCN +

auf Malonat als

einzige Kohlenstoffquelle +

Die Erfindung wird nun anhand einiger Ausführun^sbeisoiele näher erlä j ,en.

Beispiel 1
Gewinnung der Reinkultur:

20 g (Gramm) D-Glucose; 8,6 g Pepton; 6,4 g NaCI; 3,5 g KNO₃;4,5 g KH₂PO₄ und 23,5 g Na₂HPO₄ · 2 H₂O werden in 1 I (Liter) Wasser aufgelöst Die so gewonnene Nährlösung wird in 5 gleiche Portionen I bis V zu je 200 ml (Milliliter) aufgeteilt, jede Portion wird in einem 500 ml fassenden Erlenmeyer-Kolben gegeben, der mit einem porösen Stopfen verschlossen wird. Dann wird das ganze sterilisiert und bei 20⁰C aufbewahrt

100 g trockene Burley-Tabak-Blätter werden mit 300 ml Wasser unter Sterilbedingungen gewaschen. 1 ml der entstehenden Waschsuspension wird steril abgezogen und der Portion I der Nährlösung zugesetzt Diese Portion I wird auf einem Schüttler 16 Stunden bei 30⁰C inkubiert Dann wird 1 ml dieser Portion unter Sterilbedingungen entnommen und in die Portion II der Nährlösung überimpft, die dann wie die Portion I behandelt wird und von der na'u erfolgter Inkubation 1 ml in die Portion III überimpfl w^;rd, und so fort bis einschließlich zur Portion V.

Nachdem die Portion V 16 Stunden inkubiert wurde, enthält sie die Reinkultur der Mikroorganismen eines Pse;idomonas-Stammes, der seinen Sauerstoffbedarf durch Abbau von Nitraten und Nitriten deckt Ist das nicht der Fall, dann wird alles verworfen und die Gewinnung von Anfang an wiederholt mit anderen Burley-Tabak-Blättern. Die Mikroorganismen dieser Reinkultur befinden sich zu diesem Zeitpunkt und bis 2 Stunden danach in ihrer exponentiellen Wachstumspha

Veredelung von Tabakrippen:

1 kg Maryland-Tabak, in dem die Nitrate und Nitrite vermindert werden sollen, wird entrippt Das ergibt 250 g Rippen und 750 g Strips.

Die 250 g Rippen werden mit 1250 ml 70⁰C warmem Wasser gewaschen. Dabei wird in den Rippen vorhandenes Nitrat und Nitrit zusammen mit anderen wasserlöslichen Bestandteilen herausgelöst. Die so gewonnene Rippenextraktlösung wird von den Rippen abgezogen, in einen 2-i-ErIenmeyer-Kolben, der mit einem porösen Stopfen verschlossen wird, gegeben, auf 30° C abgekühlt, mit 12,5 g D-Glucose versetzt sowie mit 10 ml der oben erwähnten Reinkultur angeimpft, und zwar innerhalb der Zeitspanne, in der sich die Mikroorganismen dieser Reinkultur noch in ihrer exponentiellen Wachstumsphase befinden.

Die beimpfte Rippenextraktlösung wird bei 30⁰C auf einem Schüttler so lange inkubiert, nämlich 16 Stunden, bis die Anionen Nitrat und Nitrit auf einen Gehalt von 0¹ g pro I abgebaut sind.

Die dadurch gewonnene, nitratarme Rippenextraktlösung wird denn sofort zentrifugiert, wobei sich die Mikroorganismen absetzen, die dann als Aktivschlamm abgezogen werden.

Das Zentrifugat aus der nitratarmen Rippenextraktlösung, das noch die übrigen aus den Rippen herausgelösten Tabakbestandteile enthält, wird den vorgetrockneten, ausgewaschenen Rippen wieder zugesetzt, die dann bis auf 20% Feuchtigkeitsgehalt eingetrocknet werden. Dabei gelangen die zuvor mit den Nitraten und Nitriten aus den Rippen herausgelösten Tabakbestundteile wieder in die Rippen, so daß die Rippen dann wieder im wesentlichen ihre ursprünglichen Bestandteile enthalten, ausgenommen die Nitrate

und Nitrite, die auf 1/6 des ursprünglichen Gehaltes reduziert sind.

Beispiel 2

Wie Beispiel I, mit dem einzigen Unterschied, daß das s Zentrifugat der nitratarmen Rippenextraktlösung nicht denjenigen Rippen wieder zugesetzt wird, aus denen das Extrakt gewonnen wurde, sondern anderen Rippen, die genauso behandelt wurden.

IO

Beispiel 3 Veredelung von Tabakblättern:

1 kg Maryland-Tabak, in dem die Nitrate und Nitrite vermindert werden sollen, wird entrippt. Das ergibt ΐί 250 g Rippen und 750 g Strips. Die 250 g Rippen werden behandelt wie im Beispiel 1 angegeben. Die Mikroorganismen des dabei gewonnenen 150 ml Aktivschlammes befinden sich, wenn der Aktivschlamm abgezogen wird, noch in ihrer exponentiellen Wachstumsphase und werden in dieser gehalten, indem dieser Aktivschlamm sofort zusammen mit 30 g D-Glucose, 12,9 g Pepton, 9,6 g NaCI, 6.75 g KH₂PO₄ und 35,25 g Na₂PO₄ · 2 H₂O in 1500 ml Wasser gegeben wird. Dadurch erhält man eine Suspension aktiver Mikroorganismen, die dann sofort in gleichmäßiger Verteilung auf die 750 g Strips von 20% Feuchtigkeitsgehalt gesprüht wird. Die besprühten Strips haben dann einen Feuchtigkeitsgehalt von 50% und werden 24 Stunden bei 30°C unter Luftabschluß gelagert. Dabei bauen die Mikroorganis- so men in den Strips enthaltene Nitrate und Nitrite bis auf 1/20 des ursprünglichen Gehaltes ab. Die so in ihrem Nitrat- und Nitritgehalt reduzierten Strips werden dann zur Weiterverarbeitung bis auf 20% Feuchtigkeitsgehalt getrocknet. Dadurch werden die auf den Strips S5 verbliebenen Mikroorganismen inaktiviert. Die Strips können nun weiterverarbeitet werden.

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Beispiel 4 Gewinnung der Reinkultur wie nach Beispiel 1 Veredelung von Tabakblättern:

250 g Burley-Tabak-Blätter werden mit 1250 ml 70°C warmem Wasser gewaschen. Die entstehende Tabakextraktlösung wird weiterbehandelt wie die Rippenextraktlösung nach Beispiel 1 und die dadurch schließlich gewonnene nitratarme Tabakextraktlösung wird von dem Aktivschlamm abzentrifugiert und den Tabakblättern wieder zugesetzt.

Beispiel 5

1 kg Tabakabfälle, in dem die Nitrate und Nitrite vermindert werden sollen, wird auf eine Korngröße von maximal 150μιη fein gemahlen. 15OmI Aktivschlamm, die gewonnen sind nach Beispiel 1 und sich noch in ihrer exponentiellen Wachstumsphase befinden, werden in dieser gehalten, indem der Aktivschlamm sofort zusammen mit 30 g D-Glucose, 12,9 g Pepton, 9,6 g NaCl. 675 g KH₂PO₄ und 35,25 g Na₂PO₄ - 2 H₂O in eo 1500 ml Wasser gegeben wird. Dadurch erhält man eine Suspension aktiver Mikroorganismen, in die dann das Tabakpulver eingerührt wird. Der entstehende Brei wird 24 Stunden bei 3O⁰C in einem 3-1-Erlenmeyer-Kolben, der mit einem porösen Stopfen verschlossen wird, aufbewahrt. Dabei bauen die Mikroorganismen in dem Tabakpulver enthaltene Nitrate und Nitrite bis auf 1/10 des ursprünglichen Gehaltes ab. Sofort danach werden in den Brei 150 g Carboxymethylcellulose eingerührt und der Brei wird zu einer 3 mm starken Schicht ausgebreitet und auf 15% Feuchtigkeitsgehalt eingetrocknet. Dadurch wird die Einwirkung der Mikroorganismen beendet und der Brei zu Folien von regeneriertem Tabak verfestigt, die weiterverarbeitet werden können.

Beispiel 6

Wie Beispiel 1 mit dem einzigen Unterschied, daß die beimpfte Rippenextraktlösung bei 3O⁰C auf einem Schüttler statt 16 Stunden nur 8 Stunden inkubiert wird, so daß die Anionen Nitrat und Nitrit in geringerem Ausmaß abgebaut werden als nach Beispiel 1.

Die gewonnene nitratarme Rippenextraktlösung wird dann weiterbehandelt wie nach Beispiel 1 und den wie nach Beispiel 1 vorgetrockneten und ausgewaschenen Rippen wieder zugesetzt, die dann bis auf 20% Feuchtigkeitsgehalt eingetrocknet werden. Die so behandelten Rippen enthalten ein Drittel des ursprünglichen Gehaltes an Nitrat und Nitrit.

Beispiel 7

Wie Beispiel 3 mit dem einzigen Unterschied, daß die besprühten Strips, deren Feuchtigkeitsgehalt 50% beträgt, statt 24 Stunden nur 8 Stunden bei 30⁰C unter Luftabschluß gelagert werden. Dabei bauen die Mikroorganismen die in den Strips enthaltenen Nitrate und Nitrite bis auf ein Viertel des ursprünglichen Gehaltes ab. Die Strips werden dann wie im Beispiel 3 weiterbehandelt.

Beispiel 8

Veredelung von Tabakrippen wie im Beispiel 1 mit dem einzigen Unterschied, daß die Animpfung mit einer Reinkultur des Bakteriums Enterobacter aerogenes ATCC 13048 erfolgt.

Beispiel 9

Wie Beispiel 8 mit dem einzigen Unterschied, daß das Zentrifugat der nitratarmen Rippenextraktlösung nicht denjenigen Rippen wieder zugesetzt wird, aus denen der Extrakt gewonnen wurde, sondern anderen Rippen, die genauso behandelt wurden.

Beispiel 10 Veredelung von Tabakblättern:

1 kg Maryland-Tabak, in dem die Nitrate und Nitrite vermindert werden sollen, wird entrippt. Das ergibt 250 g Rippen und 750 g Strips. Die 250 g Rippe", werden behandelt wie im Beispiel 8 angegeben. Die Strips werden unter Verwendung des bei Behandlung der Rippen gewonnenen Aktivschlamms behandelt entsprechend wie im Beispiel 3 angegeben.

Beispiel 11

Gewinnung der Reinkultur wie nach Beispiel 8 Veredelung von Tabakblättern:

250 g Burley-Tabak-Blätter werden mit 1250 ml 70⁰C warmem Wasser gewaschen. Die entstehende Tabakextraktlösung wird weiterbehandelt wie die Rippenextraktlösung nach Beispiel 8 und die dadurch schließlich gewonnene nitratarme Tabakestraktlösung wird von dem Aktrvschlamm abzentrifugiert und den Tabakblättern wieder zugesetzt.

Beispiel 12

Wie Beispiel 5 mit dem einzigen Unterschied, daß Aktivschlamm, *ler nach Beispiel 8 gewonnen wurde, eingesetzt wird.

Beispiel 13

V-/ie Beispiel 8 mit dem einzigen Unterschied, daß die beimpfte Rippenextraktlösung bei 30°C auf einem Schüttler statt 16 Stunden nur 8 Stunden inkubiert wird, so daß die Anionen Nitrat und Nitrit :>'i geringerem Ausmaß abgebaut werden als nach Beispiel 8.

Die gewonnene nitratarme Rippenextraktlösung wird dann weiterbehandelt wie nach Beispiel 8 und den wie nach Beispiel 8 vorgetrockneten und ausgewaschenen

Rippen wieder zugesetzt, die dann bis auf 20% Feuchtigkeitsgehalt eingetrocknet werden. Die so behandelten Rippen enthalten ein Drittel des ursprünglichen Gehalts an Nitrat und Nitrit.

Beispiel 14

Wie Beispiel 10 mit dem einzigen Unterschied, daß die besprühten Strips, deren Feuchtigkeitsgehalt 50% beträgt, statt 24 Stunden nur 8 Stunden bei 30° C unter Luftabschluß gelagert werden. Dabei bauen die Mikroorganismen die in den Strips enthaltenen Nitrate und Nitrite bis auf ein Viertel des ursprünglichen Gehaltes ab. Die Strips werden dann wie im Beispiel 10 weiterbehandelt.

Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren zum Veredeln von Tabak durch Abbau von im Tabak enthaltenen Nitraten und Nitriten anaerob unter Witwirkung von Mikroorganismen, dadurch gekennzeichnet, daß eine Kultur von Mikroorganismen, die Sauerstoff benötigen aber anaerob denitrierend lebensfähig sind und die unter anaeroben Lebensbedingungen in ihre exponentiell Wachstumsphase versetzt sind, mit einer Nährlösung für diese Kultur, die keine für die Mikroorganismen dieser Kultur zugängliche, wesentliche Sauerstoffquelle aufweist, unter günstigen anaeroben Lebensbedingungen für die Mikroorganismen dieser Kultur auf die Nitrate, Nitrite und diese begleitende weiteren Tabakbestandteile so intensiv zur Einwirkung gebracht wird, daß die Nitrate und Nitrite längstens innerhalb von 24 Stunden auf den angestrebten Restgehalt abgebaut sind und daß nach erzieltem Abbau sofort die hervorgerufene Einwirkung der Mikroorganismen abgebrochen wird.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß eine Reinkultur von Bakterien angewendet wird, die gewonnen wird, indem ein wäßriger Abstrich von nitrathaltigen Blättern oder vermoderten Blättern einer Nährlösung angeimpft wird, die den für die Inkubation erforderlichen Sauerstoffgehalt vorwiegend in Form von Nitraten enthält, auf pH 6,6 bis pH 7,5 gepuffert ist und bei 25 bis 35°C (Grad Celsius) während 15 bis 25 Stunden durch Schütteln unter weitgehendem Sauerstoffabschluß inkubiert wird und dann als aktives Impfgut zum Animpfen einer frischen solchen Nährlösung verwendet wird, mit der dann die Inkubation wiederholt wird und so fort bis die Reinkultur gebildet ist.

3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß eine Reinkultur des Bakteriums Enterobacter aerogenes vom Stamm ATCC 13 048 eingesetzt wird.

4. Verfahren nach Anspruch 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, daß Nitrate und Nitrite und andere wasserlösliche Bestandteile mit Wasser aus dem zu veredelnden Tabak herausgelöst werden, daß die so gewonnene Tabakextraktlösung isoliert mit der Mikroorganismenkultur angeimpft und mit der Nährlösung versetzt unter stark gedrosseltem Luftzutritt 12 bis 24 Stunden unter günstigen anaeroben Lebensbedingungen für diese Mikroorganismen gehalten wird und daß dann anschließend sofort die Einwirkung der Mikroorganismen durch Abziehen des Aktivschlammes von der gewonnenen nitratarmen Tabakextraktlösung abgebrochen wird und daß die in der nitratarmen Tabakextraktlösung enthaltenen Lösungsbestandteile mit Wasser, das beim Auswaschen von Tabak angefallen ist. zugesetzt werden.

5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß aus der Mikroorganismenkultur und Nährlösung eine Aktivsuspension gebildet wird, daß der zu veredelnde Tabak auf 10 bis 30% Feuchtigkeitsgehalt gebracht wird und dann mit der Aktivsuspension besprüht wird, bis er einen Feuchtigkeitsgehalt von 40 bis 60% erreicht hat und dann unter stark gedrosseltem Luftzutritt 12 bis 24 Stunden unter günstigen anaoroben I.ebensbedin gungen für die Mikroorganismen aufbewahrt wird und daß dann die Einwirkung der Mikroorganismen sofort abgebrochen wird durch Eintrocknen des Tabaks auf 10 bis 30% Feuchtigkeitsgehalt

6. Verfahren nach Anspruch 4 und 5, dadurch gekennzeichnet, daß die zu veredelnden Tabakblätter entrippt werden und die Rippen von den Strips getrennt werden und daß Nitrate und Nitrite der Rippen herausgelöst und in der gewonnen Tabakextraktlösung durch die Mikroorganismen abgebaut werden und daß der dabei gewonnene Aktivschlamm mit Nährlösung zu einer Aktivsuspension aufbereitet wird, die zum Abbau der Nitrate und Nitrite der Strips auf diese gesprüht wird.

7. Verfahren nach Anspruch 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, daß der zu veredelnde Tabak gemahlen und mit Wasser aufgeschlämmt wird und mit der Mikroorganismenkultur und Nährlösung versetzt unter stark gedrosseltem Luftzutritt während 12 bis 24 Stunden unter günstigen anaeroben Lebensbedingungen für die Mikroorganismen gehalten wird und daß daran anschließend sofort die Einwirkung der Mikroorganismen abgebrochen wird, indem die Suspension zu oder auf Folien ausgeformt und auf einen Feuchtigkeitsgehalt von 10 bis 30% eingetrocknet wird.