DE2804837A1

DE2804837A1 - Arzneimittel auf der basis von cysteinol- und homocysteinol-derivaten

Info

Publication number: DE2804837A1
Application number: DE19782804837
Authority: DE
Inventors: Pierre Muller; Christian Jean Marie Warolin; Roger Zaoui
Original assignee: Recherches Pharmaceutiques et Scientifiques
Current assignee: Recherches Pharmaceutiques et Scientifiques
Priority date: 1977-02-07
Filing date: 1978-02-04
Publication date: 1978-08-10
Also published as: JPS5399329A; FI780353A; US4153729A; FR2379516B1; ZA78455B; FR2379516A1; GB1576560A; JPS6030288B2; ES466677A1; NZ186350A; AU518324B2; AU3288578A; BE868135A; DE2804837C2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Alkylen-bis-cysteinole und Alkylen-bis-homocysteinole, ein Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen, sowie die Verwendung dieser Verbindungen als Arzneimittel, insbesondere als solche mit hypolipämischer Wirkung, Die Verbindungen können dabei in Form der Base oder in Form pharmakologisch akzeptabler Salze vorliegen.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen entsprechen der allgemeinen Formel I

HOH₀C-CH-(CH₀) -S-(CH,) -S-(CH₀) -CH-CH₉OH (I)

NH₂ NH₂

809832/0878

28Ü4837

in welcher η null oder eine ganze Zahl zwischen 1 und 10 und m die Zahl 1 oder 2 ist.

Die Verbindungen mit der Formel I können hergestellt werden durch Umsetzung eines Älkandihalogenids mit der Formel II

X - (CH₂)_n - X (II)

in welcher X ein Halogenatom und η eine ganze Zahl zwischen 1 und 10 darstellt,

mit dem S-Benzylcysteinol oder dem S-Benzylhomocysteinol entsprechend den Formeln IHa, bzw. IHb

-CH₂-S-CH₂-CH-CH₂OH und

NH₂
(Ilia) (HIb)

in flüssigem Ammoniak in Gegenwart eines Alkaliamids, wie z.B. Natriumamid. Das Dihalogenid mit der Formel II kann als solches oder als Lösung in einem Lösungsmittel, wie Diäthylather verwendet werden; es kann in stochiometrischer Menge oder im Überschuß von z.B. bis zu 100% eingesetzt werden.

Die Abtrennung der Produkte aus dem Reaktionsgemisch erfolgt in bekannter Weise: Verdampfen des Ammoniaks, Extraktion der organischen Phase, Reinigungen.

Im Falle solcher Verbindungen, bei denen η = O, werden die S-benzylierten Derivate in Thiole umgewandelt; dann liefert eine Oxidation mit Luft das entsprechende Disulfid .

Das als Ausgangsmaterial verwendete S-Benzylcysteinol mit der Formel IHa kann auf die folgende Weise in drei Stufen erhalten

^werdeni 809832/0878

26Ü4837

1) Herstellung von s-Benzylcystein nach der von M.D.Armstrong beschriebenen Methode (J.Org.Chem. J_6, 749-53, 1951);

2) Herstellung des Chlorhydrats und der Base des Äthylesters des S-Benzylcysteins gemäß J.C. Crawall, D.F. Elliott und K.C. Hooper (J.Chem.Soc. 4066-68, 1956);

3) Herstellung des S-Benzylcysteinols durch reduzierende Verseifung in Gegenwart von Aluminium- und Lithiumhydrid oder Triäthyllithiumborhydrid; diese Verbindung ist in unreiner Form als Oxalat erhalten worden von J.C.Crawall (loc.cit.).

Das S-Benzylhomocysteinol der Formel IHb kann in analogen Schritten wie den vorstehend beschriebenen hergestellt werden. Die erste Stufe, das ist die Herstellung des S-Benzylcysteins, ist beschrieben in Biochem.prep.5_, 87.

Die nachstehenden Beispiele erläutern die Herstellung von bestimmten Verbindungen gemäß der Erfindung.

Beispiel A S-Benzylcysteinol

-CH₂-S- CH₂ - CH-CH₂OH

In einen 2000 ml-Dreihalskolben, der mit einem dichten mechanischen Rührer, einem Kühler mit Chlorcalziumrohr und einem gegen atmosphärische Feuchtigkeit geschützten Bromkolben ausgerüstet ist, gibt man:

350 ml wasserfreien, über LiAlH₄ destillierten Äther und

15,8 g LiAlH₄ (das ist das Vierfache der theoretischen Menge, die

1/2 Mol LiAlH₄ pro Mol Ester betragen würde).

809832/0S78

Die Suspension wird unter Rühren zum Rückfluß erwärmt. Die Lösung der Esterbase (50,3 g) in wasserfreiem Äther wird mit solcher Geschwindigkeit zugegeben, daß der Rückfluß aufrechterhalten bleibt.

Das Sieden des Reaktionsgemisches wird noch 10 Min. nach Ende der Zugabe der Esterbaselösung fortgesetzt.

Nach dem Abkühlen wird das überschüssige Lithiumaluminiumhydrid mit einer minimalen Menge Wasser zerstört, die Tropfen für Tropfen zugesetzt wird.

Das Aluminium wird abzentrifugiert und mit Äther gewaschen. Die ätherischen Lösungen werden destilliert. Der Rückstand kristallisiert.

Man erhält 29,5 g weiße Kristalle.
Ausbeute: 71,2 %; Schmp.: 38-40° (Tottoli). Analyse für C_1nH₁₁-ONS =197,29;

C % berechnet

60,87 7,66 7,09

16,25

gefunden

61,19 - 61,27

7,81 - 7,80

7,01 - 7,01

16,16

Das S-Benzylcysteinol kann durch Destillation gereinigt werden. Siedep.i 142-144°C unter 0,25 mm; Schmp.: 44°(Tottoili).

Analyse für C.	\|O^H15^{ONS =}	197,29:	60	,78
C % berechnet	60,87	gefunden	7	,98
H	7,66	Il	7	,10
N	7,09	Il	16	,51
S	16,25	ti

809832/0878

IR-Spektrum; NH_O-Bande bei 1600 cm

-1 CH₂OH-Bande bei 1050 cm .

Kernmagnet.Resonanz-Spektrum; Bezug TMS (Tetramethylsilan)

- CH₂ - S 2,5 p.p. m (m)

- CH~~ - 2,5 p.p. m (m)

HO - CH₂ - 3,48 p.p.m (m)

S - CH₂ - Cl 3,67 p.p.m (s)

7,3 p.p.m (s)

Dünnschichtchromatographie; (Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, Merck; H = 8 cm)

Lösungsmittel: PrOH (Propanol) 60

NH₄OH 30

Äthylendiamin 10

Entwickler: Ninhydrin-J₂.

Beispiel B S-Benzylhomocysteinol

a) Amino-benzylthio-4-äthyl-butanoat

-CH₀-S-(CH₀)_o-CH-COO-C₀H.

Z /Zi ZD

NH₂

300 g S-Benzylhomocystein werden unter Rühren in 3,900 1 absolutem Äther suspendiert. Das Reaktionsgemisch wird in Gegenwart eines starken Stroms von trockenem HCl 5 Std. zum Rückfluß erhitzt. Die Lösung wird mittels Aktivkohle entfärbt und das Filtrat zur Trockne eingeengt. Die mit 1200 ml Äther und 135 cj

809832/0878

Triäthylamin aufgenommenene Masse wird 1 Std. bei Umgebungstemperatur gerührt. Das Unlösliche wird unter Rühren mit Äthyläther gewaschen. Die ätherischen Filtrate werden vereinigt und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand von 315,4 g ist ein gelbes öl, das unter 0,8 mm Hg destilliert wird. Sdp.: 170-178⁰C; Ausbeute: 71,5 % (226,2 g).
Analyse für C₁₃H₁₉O₃NS = 253,36;

C % berechnet	61,63	gefunden	61,66	- 61	,72
H %	7,56	Il	7,83
N %	5,53	Il	5,72	5	,81
S %	12,66	Il	12,59
IR-Spektrum: NH₉	-Bande :	1 580 cm"¹

COOR-Bande: 1 748 cm

-1

Dünnschichtchromatographie (Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254; H = 8 cm).

BuOH (Butanol) 40

AcOH (Essigsäure) 10

AD (Äthylendiamin) 50

Entwickler: Ninhydrin-J„.

Chlorhydrat (gereinigt in Äthylalkohol/Äthläther): Schmp.: 62,5 63,5 ° (Tottoli).

Analyse für C₁₃H₂₀O₂NSCl =289,82:

berechnet

53,87	gefunden	53,79	- 53	,78
6,95	Il	7,09
4,83	Il	4,84	4	,88
11,06	Il	11,02

84)9832/0*78

Kernmag.	Resonanz-Spektrum	- Bezug	TMS
-CH₂ - CH	3 ^{: 4}'³	p.p.m.	(m)
-CH₃	: 1,3	p.p.m.	(t)
	\O\- ^{: 7}'⁴	p.p.m.	(S)
foS-		p.p.m.	(S)

-S-CH₂- : 2,6 p.p.m.(m)

-S-CH₂-CH₂ : 2,3 p.p.m.(m)

Diese beiden letzteren
Signale bilden ein System A₀B₀, dem sich das Signal des

-C-H- zugesellt

b) S-Benzylhomocysteinol

- CH₂-S-(CH₂)₂-CH-CH₂OH

NH„

Zu einer Suspension von 43 g LiAlH₄ (4-fache Menge des theoretischen Wertes) in 1000 ml wasserfreiem Äther, die unter mechanischem Rühren zum Rückfluß erhitzt wird, gibt man eine Lösung von 144 g des Äthylesters von S-Benzylhomocystein in 600 ml wasserfreiem Äther mit einer solchen Geschwindigkeit, daß das Reaktionsgemisch am Kochen bleibt. Nach beendeter Zugabe wird für eine weitere Stunde zum Rückfluß erhitzt.

Das überschüssige LiAIn. wird mit Wasser zerstört.

Nach Abzentrifugieren und Waschen mit Äthyläther werden die ätherischen Lösungen zur Trockne eingeengt.

Der Rückstand wird unter vermindertem Druck bei 170 - 180⁰C unter 0,6 mm Hg destilliert.

Man erhält ein farbloses öl, das im Kühlschrank kristallisiert. Ausbeute: 73 % (88 g); Schmp.: 31 - 32° C (Tottoli)

009832/0878

Analyse für C₁₁H₁₇ONS = 211,32 :

C % berechnet 62,52 gefunden 62,34

H " 8,11 " 8,37

N " 6,63 " 6,74

S " 15,17 " 15,00

_ 1

IR-Spektrum: NH₀-Bande : 1585 cm ;

-1 OH-Bande : 1053 cm

Kernmagn. Resonanzspektrum - Bezug TMS

Aromaten . 7,4 p.p.m (s)

( O ) -CH₂ - S- 3,7 p.p.m (s)

^=""B -CH₂" - CH₂ - 2,5 p.p.m (m)

I ~~

-C-H 3 p.p.m (massiv)

- CH₃OH 3,4 p.p.m (massiv)

Dünnsch.Chromatogr.: Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, H =8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin - J₃

Beispiel 1

Diamino-2,8-dithia-4,6-nonandiol-1,9 (Djenkolol).

HOH₀C - CH - CH₀ - S - CH₀ - S - CH₀ - CH - CH₀OH 2 ι 2 2 2 ι 2

NH₂ NH₂

500 ml flüssiger Ammoniak werden in einen 1000ml-Dreihalskolben gegeben, der mit einem dichten mechanischen Rührer, einem Kalium-

809832/0878

carbonatrohr und einem Bromkölbchen ausgerüstet ist. Man gibt 12g S-Benzylcysteinol und nach und nach 2,8 g (theoretischer Wert) Natrium in feinen Blättchen hinzu. Dann führt man Tropfen für Tropfen 6,2 g Dibromäthan (20 % Überschuß über die theoretische Menge von 5,2 g) ein. Die Blockierung der -SH-Gruppen erfolgt praktisch augenblicklich (Test mit Natrium-Nitroprussiat).

Das überschüssige Amid wird mit der theoretischen Menge Ammoniumchlorid zerstört. Das Ammoniak wird bei Raumtemperatur unter einem schwachen Stickstoffstrom verdampft. Der Rückstand wird unter Vakuum getrocknet und mit dreimal 200 ml THF extrahiert. Die Extrakte werden mit Kohle entfärbt und zur Trockne eingedampft.

Der Rückstand wird aus Äthylacetat umkristallisiert. Praktische Ausbeute: 58,8 % (4,0 g); Schmp.: 82 - 84° (Tottoli). Die Verbindung ist in der Kälte in Wasser, Alkohol, Äther löslich.

C % berechnet 37,14	Il	8,01	gefunden	37,25 -	37,	26
H	Il	12,37	Il	8,10
N	Il	28,33	If	12,53 -	12,	56
S	IR-Spektrum:	NH₉-Bande 1600 cm"¹	H	28,35

OH-Bande 1050 cm

-1

Kernm. Res. Spektrum; Bezug TMS

S - CH₂ -S-

CH₂OH

CH₂ - S-

3,9 p.p.m (s) 3,6 p.p.m (m)

massiv von 2,5 bis 3,3 p.p.m.

809832/0878

280483?

Dünnschicht Chromatographie; Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254; H = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin - J₂

Beispiel 2 Diamino-2_y11-dithia-4,9-dodecandiol-i,12

HOH₀C - CH - CH₀ - S - (CH₀). - S - CH₀ - CH - CH₀OH ζ I & 2. 4 2 ι λ

NH₂ NH₂

Man wendet die in Beispiel 1 beschriebene Verfahrensweise an, wobei man Dibrom-1,4-butan anstelle von Dibromäthan verwendet. Das erhaltene Produkt wird mit Äther extrahiert und aus Äthylacetat umkristallisiert.

Ausbeute: 25 %. Schmp.: 78 - 80° (Tottoli); weiße Kristalle, löslich in Wasser, Alkoholen, Äther.

Analyse für ^c-jo^H24°2^N2^S2 " ^{= 268}'^44:

C % berechnet 44,74 gefunden 44,89

H " 9,01 " 9,27

N " 10,43 " 10,18

S " 23,88 " 23,97

IR-Spektrum: NH_O-Bande bei 1600 cm"¹

OH-Banden bei 1050 cm und 1350 cm

Kernmagn. Resonanz-Spektrum: Bezug TMS

- CH₂- OH 3,6 p.p.m (m)

- c -JH 3 p.p.m (m) -S- <CH₂)₄ -S- 2,6 p.p.m (m)

809832/0878

28Ü4837

- CH₂ - CH₂ - 1,7 p.p.m (m)

Dünnschichtchromatographie; Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, H = 8 cm

PrOH 60
NH₄OH 30
ÄD 10
Entwickler: Ninhydrin-J_o

Beispiel 3 Diamino-2,13-dithia-4,11-tetradecandiol-i,14

HOH₀C - CH - CH₀ - S - (CH₀) _c -S- CH₀ - CH - CH₀OH

Man wendet das in Beispiel 1 beschriebene Verfahren an, wobei man Dibrom-1,6-hexan anstelle von Dibromäthan einsetzt. Das erhaltene Produkt wird mit Benzol extrahiert und aus Äthylacetat umkristallisiert.

Ausbeute: 63 %; Schmp.: 83 - 84° (Tottoli); weiße Kristalle, löslich in Wasser, Alkoholen, Äther.

Analyse für ^c-j2^H28°2^N2^S2·

C % berechnet 48,61 gefunden 48,91

H % ⁿ 9 ",52 " 9,71

N % " . 9,44 " 10,67

S % " 21,63 " 21,78

IR-Spektrum: NH_O-Bande bei 1 600 cm

CH₂OH-Banden bei 1050 cm und 1350 cm

Kernmag. Resonanz-Spektrum: Bezug TMS

- CH₂OH 3,5 p.p.m (m)

- C - H 2,9 p.p.m (m)

~ 803832/0878

2,6 p.p.m (m) 1,5 p.p.m (m)

Dünnschicht-Chromatographie: Fertigplatten-Kieselgel 60F 254, H = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

ÄD 10

Entwickler: Ninyhdrin-J₂

Beispiel 4 Diamino-2,15-dithia-4,13-hexadecandiol-i,16

HOH₀C - CH - CH₀ - S - (CH₀)Q-S-CH₀- CH-CH₀OH NH₂ NH₂

Man wendet das in Beispiel 1 beschriebene Arbeitsverfahren an, wobei man Dibrom -1,8 -oktan anstelle von Dibromäthan einsetzt. Das erhaltene Pordukt wird mit Benzol extrahiert, danach zunächst aus Äthylacetat und dann aus Dichlormethan umkristallisiert. Ausbeute: 50 %; Schmp.: 92 - 94° (Tottoli); weiße Kristalle, löslich in Wasser, Alkoholen, Äther.

Analyse für ^C ₁4^H32°2^N2^S2 ^{= 324}'^54:

C % berechnet 51,81 gefunden 51,97

H % " 9,93 " 10,23

N % " 8,63 " 8,77

S % " 19,75 " 19,67

IR-Spektrum: NH_O-Bande 1580 cm"¹

-1 -1

OH-Banden 1037 cm und 1 350 cm

Kernmagn. Res.Spektr. - Bezug TMS

809832/0878

- CH₂OH 3,55 p.p.m (m)

28Ö4837

- C -__H 2,9 p.p.m (m)

- CH₂ - S - 2,55 p.p.m (m)

- (CH₀),- 1,4 p.p.m (m) Dünnsch.Chrom.: Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, H = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin-J₂

Beispiel 5 Diamino-2,17-dithia-4,15-octadecandiol-i,18

HOH₀C - CH - CH₀ - S - (CH₀)_in - S - CH₀ - CH - CH₀OH ²I ^{2 2 10} ²I NH₀ NH₀

Man wendet das Arbeitsverfahren von Beispiel 4 an. Schmp.: 102 - 104° (Tottoli); Ausbeute: 52 %.

Analyse für C₁₆H₃₆O₃N₃S₃ ^{= 352}'^60:

C % berechnet 54,50 gefunden 54,57

H % " 10,29 " 10,65

N % " 7,94 " 8,20

S % " 18,18 " 18,21

IR-Spektrum: NH₂~Bande 1577 cm"

OH-Banden 1040 cm"¹, 1550 cm"¹

Kernm.Res.Spektr.: Bezug TmS

-CH₂OH 3,55 p.p.m (m)

- C - H 2,9 p.p.m (m)-

¹ ~~ 809832/0878

- CH₂ -S-CH₂ - bis. 2,55 p.p.m. (m)

- (CH₂)g - 1,35 p.p.m. (m)

Dünnsch.Chrom.: Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, Η = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin - J₂

Beispiel 6 Diamino-2,7-dithia-4,5-octandiol-1,8 (Cystinol)

HOH₂C - CH-CH₂-S-S-CH₂-CH-CH₂Oh

CH-CH₀-S-S-CH₀-CI

I ^{2 2}I

NH₂ NH₂

a) Cysteinol

500 ml flüssiger Ammoniak werden in einen 1000 ml-Dreihalskolben eingeführt, der mit einem dichten mechanischen Rührer und einem KOH-Aufsatz ausgerüstet ist.

Man setzt 15 g S-Benzylcysteinol und nach und nach 3,51 g Na in Form feiner Blättchen zu (0,13 g Überschuß, damit die blaue Farbe bestehen bleibt).

Das überschüssige Natrium und das Natriummerkaptid des Cysteinols werden mit 7,4 g NH.C1 zerstört.

Das Ammoniak wird unter einem Stickstoffstrom und danach unter starkem Vakuum ausgetrieben. Der weiße, feste Rückstand wird nicht isoliert.

b) Cystinol (beschrieben in Form seines Dichlorhydrats durch

J.C. Crawall et al. in J.Chem.Soc.4066-68,1956).

809832/0878

Der vorstehend erwähnte weiße Rückstand wird mit 400 ml destilliertem Wasser und 1,5g FeCl, aufgenommen. Durch die erhaltene Lösung läßt man einen Luftstrom perlen, bis das Thiol verschwunden ist (Nachweis mit Natriumnitroprussiat), was mehrere Stunden in Anspruch nimmt. Die Lösung wird filtriert. Das farblose FiItrat wird unter Vakuum auf 75 ml eingeengt und danach auf eine aktivierte 50 χ 8 Dowex-Kolonne gegeben. Das Produkt wird mit 1 N NH₄ OH eluiert.

Die anunoniakalischen Eluate werden unter Vakuum eingedampft, und der Rückstand wird mit 100 ml Äther unter Rückfluß aufge — nommen. Das Unlösliche wird zur Trockne eingedampft. Ausbeute: 83 %; Schmp.: 71 - 73° (Tottoli); weiße Kristalle, löslich in Wasser, Methanol, Äthanol.

Analyse für C_CH., ,O₀N₀S₀ = 212,33:

C % berechnet 33,94 gefunden

H " 7,59

N " 13,19

S " 30,20

IR-Spektrum; NH₂~Bande : 1605 cm

-1

OH-Bande : 1074 - 1053 cm

34,02	34	,29
7,78
13,05	13	,05
30,10

Dünnsch.Chrom.; Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, H = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin - J₂

Kernmagn.Res.Spektr.; Bezug TMS

- CH₂OH

809832/0878

3,55 p.p.m (m)

3,15 p.p.m (m) 2,8 p.p.m (m)

Beispiel 7 Neutrales Oxalat von Diamino-2_/9-dithia-5_f6-decandiol-1_y10

(Homocystinol)

HOH₂C - CH - (CH₂)₂ - S - S - (CH₂J₂ - CH - CH₂OH

NH₂ NH₂

HOOC-COOH

Zu einer Lösung von 5,3 g S-Benzylhomocysteinol in 250 ml flüssigem Ammoniak gibt man unter mechanischem Rühren 1 g (theoretische Menge) Natrium in feinen Blättchen. Das Ammoniak wird bei Raumtemperatur bis auf 2/3 verdampft und das Reaktionsgemisch mit 2,67 g NH.CL behandelt, das in kleinen Portionen zugesetzt wird; danach wird eingedampft.

Der Rückstand wird mit 130 ml Wasser und 0,5 g FeCl₃ aufgenommen. Man läßt 5 Std. lang Luft rasch durch die Lösung perlen. Der Nachweis auf Thiol ist sodann negativ (Test mit Nitroprussiat).

Die Lösung wird auf eine 100 ml-Kolonne aus aktiviertem Dowex 50x8 (H = 70 cm, 0 = 2 cm)f gegeben. Das Produkt wird mit 2 N Ammoniak eluiert und das Eluat zur Trockne eingedampft.

Das zurückbleibende öl erstarrt in Ä'thylacetat, und das gebildete Pulver wird 15 min. in Äther zum Rückfluß erwärmt; danach wird zentrifugiert. Rohausbeute = 98 %. °

Die Verbindung wird durch die theoretische Menge Oxalsäure in alkoholischem Medium in das Salz umgewandelt. Das Salz wird gereinigt in der minimalen Menge Wasser; wobei bis zum Beginn der Ausfällung Äthanol zugegeben wird.
Ausbeute: 35 %; Schmp.: 205 207° (Tottoli).

Analyse	für C.	Il	IO^H22°6^N	2^S2 ^?	• 330,42:	36,18
C % berechnet	Il	36,35		gefunden	6,85
H	η	6,71		■1	8,47
N		8,48		Il	19,72
S	19,41		Il
		809	832/0878

IR-Spektrum; -COO-Bande: 1575 cm OH-Bande : 1060 cm"

Kernmagn.Res.Spektr.: Bezug TMS

CH₂ - CH₂ - CH 2,1 p.p.m (massiv)

S - CH₂- CH₂ · 2,8 p.p.m (massiv)

- C - H 3,3 bis 3,9 p.p.m. (massiv)

CH₂OH"

Dünnsch.Chrom. Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, H = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

XD 10

Entwickler: Ninhydrin-J₂

Beispiel 8 Neutrales Oxalat von Diamine—2,10-dithia-5,7-undecandiol-1,11

(Homodjenkolol)

HOH₂C - CH - (CH₂) ₂ - S. - CH₃ - S" - (CH₂) ₂ - CH - CH₂OH NH₂ HOOC - COOH NH₂

Zu einer Lösung von 10,5 g S-Benzylhomocysteinol in 500 ml flüssigem Ammoniak gibt man unter Rühren 2,3 g Natrium in Form feiner Blättchen (theoretische Menge) und danach die theoretische Menge Dibrommethan. (4,35 g). Die Blockierung des Thiols geschieht augenblicklich. Das überschüssige Natriumamid wird durch 2,67 g Cl zerstört und der Ammoniak ausgetrieben.

Der Rückstand wird in 200 ml Äther aufgenommen. Das Unlösliche wird mit 3 χ 100 ml Äthylacetat im Rückfluß unter Rühren extrahiert. Die Äthylacetatlösungen liefern 3,8 g (Ausbeute = 60 %) Kristalle.

8Ü9832/0878

Das Produkt wird in absolutem Äthanol in das Oxalat umgewandelt. Dieses wird durch Auflösen in der kleinstmöglichen Menge Wasser und ümkristallisation aus Äthanol gereinigt. Nach 12 Stunden Stehenlassen im Kühlschrank werden 4,8 g weiße Kristalle gewonnen .

Ausbeute: 56,8 g; Schmp.: 189 - 190° (Tottoli). Produkt löslich in Wasser und Alkoholen.

Analyse für C₁₁H₂₄OgN₃S₂ = 344,45:

C % berechnet 38,36 gefunden 38,08

H " 7,02 " 7,10

N " 8,13 " 8,23

S " 18,62 " 18,28

-1 IR-Spektrum: COOH-Bande: 1580 cm

OH-Bande : 1073 cm"¹, 1300 cm"¹

Kernmagn. Res.Spektr. - Bezug TMS

- S - CH₀ - S - 3,82 p.p.m (s)

- CH₉OH )

— )
ι > 3,2 bis 3,8 p.p.m (massiv)

-C-H)
I )

- S - CH₂ - CH₂ - 2.8 p.p.m (m)

- CH - CH₂ - 2 p.p.m (massiv) I

Dünnsch.Chrom. Fertigplatten-Kieselgel 60 F 354, H = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin-J₂

Beispiel 9 Neutrales Oxalat von Diamino-2,11-dithia-5,8-dodecandiol-1,12

809832/0878

HOH₂C - CH - (CH₂)₂ - S - (CH₂)₂ - S - (CH₂)₂ - CH-CH₂OH NH₉ , HOOC - COOH, NH₀

Man arbeitet nach der Methode von Beispiel 8, wobei man das doppelte der theoretischen Menge an Dibrommethan verwendet. Die Zeit für die Blockierung des Thiols beträgt 7 Std.. Nach Durchlaufen einer Dowex-Kolonne 50 χ 8 beträgt die Rohausbeute 86 %. Ausbeute an reinem neutralem Oxalat: 40 %. Die erhaltenen weißen Kristalle sind löslich in Wasser und Alkoholen. Schmp.: 194 - 195,5° (Zers.) (Tottoli).

Analyse für C₁₂H₂₆OgN₂S₂ = 358:

C % berechnet 40,20 gefunden 39,94

H " 7,31 " 7,52

N " 7,81 " 8,15

S " 17,89 " 17,71

IR-Spektrum; COOH-Bande: 1626 cm"

OH-Bande : 1060 cm und 1300 cm"

Kernmagn.Res.Spektr. - Bezug TMS

HOH₉C - )
)

{ 3,4 bis 3,9 p.p.m (massiv)

- C - H )
f — )

S - (CH₂)₂ - S - 2,83 p.p.m (s)

S - CH₂ - CH₂ 2,7 p.p.m (m)

CH₂ - CH - 2 p.p.m (massiv)

809832/0878

Dünnschn.Chromatogr. Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, H= 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin - J₂

Beispiel 10 Mandelat von Diamino-2,13-dithia-5,10-tetradecandiol-1,14

HOH₂C - CH - (CH₂)₂ - S - (CH₂)₄ - S - (CH₂)₂ - CH - CH₃OH NH₂ , (HOOC - CHOH - (()) )₂ ^NH2

Unter Anwendung der stets gleichen Arbeitsmethode und bei Verwendung der theoretischen Menge an Dibrom-1,4-butan erreicht man die Blockierung von SH-Gruppen in 15 min.. Nach Extraktion mit Dichlormethan und ümkristallisation aus Äthylacetat beträgt die Ausbeute an unreiner Base 45 %.

Man bildet das Salz in Äthanol und wäscht das erhaltene neutrale Mandelat mit Äther. Die gebildeten weißen Kristalle sind löslich in Wasser, Alkoholen, Dimethylformamid. Schmp.: 153° (Tottoli); Ausbeute: 29 %.

Analyse für ^C28^H44°8^N2^S2 ^{= 600}'^79:

C % berechnet 55,97 gefunden 56,26

H " 7,38 " 7,66

N " 4,66 " 4,58

S " 10,67 " 10,93

IR-Spektrum: COOH-Bande: 1577 cm

OH-Bande : 1064 cm"¹, 1355 cm"¹

Kernmagn.Res.Spektr. - Bezug TMS

809832/0878

-CH₂OH

■CH
I —

- S - CH

7.4 p.p.m (s) 4,95 p.p.m (s) 3,6 p.p.m (m)

3,3 p.p.m (massiv)

2.5 p.p.m (massiv)

(CH₂ - C - H

1,5 bis 2 p.p.m (massiv)

Dünnsch.Chrom. Fertigplatten-Kieselgel 60 F 254, H = 8 cm

PrOH '. 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin-J₂

Beispiel 11 Mandelat von Diamine—2,14-dithia-5,11-pentadecandiol-1,15

HOH₂C - C - (CH₂)₂ -S- (CH₂)₅ - S - (CH₂)₂ - CH - CH₃OH

NH

(HOOC - CHOH "

Man verfährt nach der Methode von Beispiel 8; man verwendet einen Überschuß von 5 % mit Bezug auf die theoretische Menge von Dibrom-1,5-pentan. Die Zeit bis zur Blockierung der SH-Funktion beträgt 5 Std.. Man extrahiert mit Dichlormethan und kristallisiert aus Äthylacetat um. Die Ausbeute an unreiner Base beträgt 63 %. Man bildet das Mandelat in Äthanol und wäscht es mit Äther.

809832/087 8

Ausbeute: 49,5 %; Schmp.: 131 - 132°C (Tottoli); Produkt löslich in Wasser, Alkoholen, DMP.

Analyse für

= 614,82*.

berechnet 56,65

" 7,54

" 4,55

" 10,43

gefunden

IR-Spektrum: COOH-Bande: 1587 cm

56,81 7,75 4,64

10,38

-1 -1

OH-Banden : 1064 cm , 1351 em

Kernitiagn.Res. Spektr. - Bezug TMS

O)-

7,4 p.p.m (s)

CH₂OH
C-H

- CH

4,95 p.p.m (s)

3,6 p.p.m (massiv) 3,3 p.p.m (massiv)

CH₂ - S - CH₂ -

2,5 p.p.m (massiv)

(CH₉), -

I
CH₉ -C-H)

1,3 bis 2 p.p.m (massiv)

Dünnsch.Chrom. Fertigplatten - 60 F 254, H = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin-J₂

809832/0878

280483?

Beispiel 12 Diamino-2,15-dithia-5,12-hexadecandiol-1,16

HOH₂C - CH - (CH₂)₂ - S - (CH₂)_g - S - (CH₂)₂ - CH - CH₂OH NH₂ . NH₂

Man verfährt nach der in Beispiel 8 beschriebenen Arbeitsweise und erreicht mit der theoretischen Menge Dibrom-1,6-hexan eine Blockierungszeit für das Thiol von 15 min.. Nach Extraktion mit Dichlormethan und ümkristallisation aus Äthylacetat gewinnt man weiße Kristalle.

Schmp.: 79 - 81° (Kofier); Ausbeute: 61 %. Weiße Kristalle, löslich in Wasser, Alkoholen.

Analyse für C₁₄H₃₂O₂N

C % berechnet 51,81

H " 9,44

N " 8,63

S " 19,76

-1
IR-Spektrum; NH«-Bande: 1550 cm

-1 -1 OH-Banden: 1060 cm , 1350 cm

Kernmagn.Res.Spektr. - Bezug TMS
-(CH₂) ₄ -

- CH₂ - C - H P¹ 1,6 p.p.m (massiv)

2 - CH₂OH 3,5 p.p.m (m)

4 - CH₂ - S - 2,6 p.p.m (m)

- C - H 3 p.p.m (massiv)

809832/0878

= 324,55:	51,80	51	,52
gefunden	10,23	10	,30
Il	8,67
■I	19,52
Il

Dünnsch.Chrom. Fertigpiatten 60 F 254, H = 8 cm

BuOH 40

AD 50

ACOH 10

Entwickler: Ninhydrin-J₂

Beispiel 13 Diamine—2,17-dithia-5,14-octadecandiol-1,18

HOH₀C - CH - (CH^)₀ - S - (CH₀) _Q - S - (CH₁J₀ - CH - CH₀OH

Man arbeitet nach der Methode des Beispiels 8 und erreicht mit der theoretischen Menge an Dibrom-1,8-octan die Blockierung der Thiolgruppen in 1 Std.. Man extrahiert mit Dichlormethan und kristallisiert aus Äthylacetat um.

Schmp.: 84° (Kofier); Ausbeute: 28 %; weiße Kristalle,, löslich in Wasser, Alkoholen.

Analyse für ^C.-|6^H36°2^N2^S2 ^{= 352}'^6:

C % berechnet 54,50

H " 10,29

N " 7,94

S " 18,18

_i IR-Spektrum: NH_O-Bande 1560 cm

* _1

OH-Banden 1064 cm , 1345 cm

Kernmagn. Res.Spektr.

gefunden	54,42
Il	10,42
Il	7,87
Il	17,95

CH₂ - CH - )

{ 1,6 p.p.m (massiv)

(CH₂)₆ - )

809832/0878

280483?

2 - CH₂ - OH 3,5 p.p.m (m)

4 - CH₂ - S - 2,6 p.p.m (m)

I
2 - CH 3 p.p.m (massiv)

1-

Rünnsch.Chrom. Fertigplatten 60 F 254, H = 8 cm

PrOH 60

• NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydr in-J₂

Beispiel 14 Diamino-2,19-dithia-5,16-eicosandiol-i,20

HOHC - CH - (CH₀)- - S - (CH₀) _in -S- (CH₀)_o - CH - CH₀OH

2, ι Δ Δ £. \\j Δ Δ . Δ

NH_{2 %} NH₂

Man folgt der Arbeitsmethode von Beispiel 8 und realisiert die Blockierung von Thiolgruppen bei Verwendung eines 20 %-igen Überschusses an Dibrom-1,10-decan in 2 Std. 30 min.. Man extrahiert mit Dichlormethan und kristallisiert aus Äthylacetat um. Ausbeute: 27 %; weiße Kristalle, löslich in Wasser, Alkoholen.

Analyse für ^ci8^H40°2^N2^S2 ^{= 380}'^59;

C % berechnet 56,79 gefunden 56,87

H " 10,59 " 10,71

N " 7,36 " 7,01

5 " 16,85 " 16,76

IR-Spektrum NH₂~Bande: 1550 cm

OH-Bande : 1060 cm"¹, - 1350 cm~¹

809832/0878

Kernmagn.Res.Spektr.

Cxi^ -^—^ C* *■■ H
£ ι

1,5 p.p.m (massiv)

4 - CH₂ - S - 2,6 p.p.m (m)

2 - CH₂OH 3,4 p.p.m (m)

I
2 - C - H 2,9 p.p.m (massiv)

J ~

Dünnsch.Chrom. Fertigplatten 60 F 254, H = 8 cm

PrOH 60

NH₄OH 30

AD 10

Entwickler: Ninhydrin-J₂

Die vorliegende Erfindung umfaßt auch pharmazeutische Präparate, die als wirksame Komponente mindestens eine Verbindung mit der Formel I enthalten, in welcher η null oder eine ganze Zahl zwischen 1 und 10 und m 1 oder 2 ist, wobei diese Verbindung in Form der Base oder eines pharmakologisch akzeptablen Salzes vorliegen kann.

Pharmakologische Untersuchungen

Die erfindungsgemäßen Verbindungen wurden verschiedenen Tests unterworfen, um ihre therapeutische Wirksamkeit bestimmen zu können.

Toxizität

Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind wenig toxisch.

Die letale Dosis 50 (DL 50) bei oraler Verabreichung (s. Tabelle) wurde bestimmt nach der Methode von Karber u. Behrens (Arch.Exp.

Pathol.Pharm.177, 1935,S.379) an weiblichen Mäusen EVIC CEBA Swiss EOPS NMRI Han von 24 bis 26 g.

8U9832-/0878

Die Ergebnisse sind in der Tabelle zusammengefaßt.

Hypolypämische Wirksamkeit; Experimentelle Hyperlipidämie mittels

Triton

Die erfindungsgemäßen Verbindungen besitzen interessante hyper-

lipämiante Eigenschaften.

Die hier angewandte Technik zum Nachweis dieser Eigenschaften ist beschrieben von M. Friedman u. S.O. Byers in J.Exptl.Med. 117,1953 und gleichermaßen von S. Garattini et al. in Arzneim. Forsch.ji. 206,1959 .

Die Ratten erhalten auf intravenösem Wege 0,3 ml pro 100 g Körpergewicht einer 10%-igen Lösung von Triton 13 39. Die zu untersuchenden Verbindungen werden simultan auf oralem Wege in einer Dosis verabreicht, die dem zehnfachen ihrer DL 50 (bestimmt auf oralem Wege bei der Maus) entspricht, wobei die angewandte Dosis jedoch 500 mg/kg nicht übersteigt.

10 Std. nach der Injektion von Triton werden die Tiere durch Durchschneiden der Karotis getötet, und das Blut wird aufgefangen, um die folgenden Lipid-Parameter bestimmen zu können: Cholesterin, (Autoanalysator Technicon AA II Lieberman Burchard), beta-Lipoproteine (Burnstein), Gesamtlipide (Chabrol u.Charonnat), Triglyceride (Boehringer, enzymatisch).

Die optische Dichte des Serums bei 691 nm wurde in jedem Falle gemessen. Jedes Produkt wurde an 10 Tieren getestet. Die statistischen Berechnungen erfolgten mit den Durchschnittswerten, die mit ihrer Abweichung vom Mittelwert im Test von Student berücksichtigt wurden.

Als Vergleichsverbindung wurde das Clofibrat verwendet.

In der Tabelle sind die erhaltenen Ergebnisse zusammengefaßt.

8uyö32/0878

OC CaJ NJ

Verbindung	DL 50,	TABELLE	Dosis vcg/kg Ρ·ο.	Prozentuale Minderung	Choles terin	P~· Lipopro te in	' Lipide insgesamt	Tri- qlyceride	opt. Dichte Serum
Clofibrat	per os		225	28 P Δ 0,001	36 ρ £· 0,01	26 ρ ζ. 0,001	25 ρ C 0,001	-
Beisp. 1	2,3		500	10 p L o_fo5	NS	NS	NS	NS
Beisp. 2		Hypolipämiante Wirksamkeit	500	NS	NS	NS	14 ρ -c 0,05	NS
Beisp. 3	5	270	4 NS	39 ρ L 0,01	27 ρ C 0,001	28 P /; 0,001	53 ρ 4 0,01
Beisp. 4	2,7	127	10 D £ 0.01 XT ^a, '	24 ρ Δ. 0,01	NS	34 ρ 4 0,001	57 ρ < 0,001
Beisp. 5	1,275	175	8 ρ £ 0,02	NS .	NS	30 ρ ^ 0,01	56 ρ ^. 0,01
Beisp. . 6	1,75	310	4O ρ ^. 0,0001	46 ρ C 0,0001	38 P C 0,001	42 ρ c. 0,0001	78 ρ <C 0,0001
Beisp. 12	3,1	250	NS	11 p< 0,01	NS	NS	NS
Beisp. 13	2,5	140	13 P ^. 0,02	23 ρ £ 0,001	27 ρ Δ. 0,01	33 ρ C 0,01	48 P ^ 0,05
Beisp. 14	1,4	95	NS	15 p/, 0,001	NS	NS	NS
0,95

NS : Ergebnis nicht signifikant

Die Verwendung dieser auf oralem Wege verabreichbaren Produkte ist angezeigt bei der Behandlung von isolierten oder assoziierten lipidischen Störungen, wie Hypercholesterinämien, Hypertriglyceridämien, gemischten Hyperlipidämien. Die therapeutischen Indikationen erstrecken sich auf Infarkt des Herzkranzmuskels, vaskulare zerebrale Insuffizienz, Arteriites der unteren Gliedmaßen, arterielle Hypertension etc..

Die tägliche Dosis der erfindungsgemäßen Verbindungen liegt bei 0,3 bis 2 g wirksame Substanz, das sind etwa 5 bis 30 mg/kg.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in verschiedenen pharmazeutischen Anwendungsformen verabreicht werden, wie z.B. Tabletten, Dragees, Kapseln, Granulat etc..'

Nachstehend werden zwei Beispiele für pharmazeutische Präparate wiedergegeben:

Kapseln;

Verbindung von Beispiel 6 250 mg

kolloidale Kieselsäure ' 20 mg

Talkum 15 mg

Tabletten:

Verbindung von Beispiel 6 500 mg

kolloidale Kieselsäure 30 mg

mikrokristalline Zellulose 50 mg

Lactose 50 mg

Magnesium-Stearat · - 10 mg_%

8U9832/0878

Claims

r, Joachim Kasper WiesbaJe» REC 4 älorstoQ'fer Höhe 72 Τ«!. 5*ϊ84ί! RECHERCHES PHARMACEUTIQUES ET SCIENTIFIQUES Arzneimittel auf der Basis von Cysteinol- und Homocysteinol-Derivaten Patentansprüche;

1. Pharmazeutisches Präparat, dadurch gekennzeichnet, daß es als wirksame Substanz eine Verbindung entsprechend der folgenden allgemeinen Formel I

HOH₉C - CH - (CH„) - S - (CH,,) - S - (CH₀) - CH - CH₀OH (I;

in welcher η = 0 oder eine ganze Zahl von 1 bis 10 und m = 1 oder 2 ist,

oder ein pharmakologisch akzeptables Salz einer solchen Vor enthält.

8uya32/0878

QRSQSMAL INSPECTED

2. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß diese wirksame Substanz eine der folgenden Verbindungen ist:

Diamino-2,8-dithia-4,6-nonandiol-1,9; Diamino-2,11 -dithia-4,9-dodecandiol-i ,12; Diamino-2,13-dithia-4,11-tetradecandiol-i,14; Diamino-2,15-dithia-4,13-hexadecandiol-i,16; Diamino-2,17-dithia-4,15-octadecandiol-1,18; Diamino-2,7-dithia-4,5-octandiol-1,8; Diamino-2,15-dithia-5,12-hexadecandiol-1,16; Diamino-2,17-dithia-5,14-octadecandiol-1,18; Diamino-2,19-dithia-5,16-eicosandiol-1,20.

3. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen mit der Formel I, in welcher η eine ganze Zahl von 1 bis 10 und m = 1 oder 2 ist, dadurch gekennzeichnet, daß man ein Dihalogenid mit der Formel II

X - (CH₂)_n - X (II)

mit einem S-benzylierten Derivat mit der Formel III

- CH₀ - S - (CH,,) -CH-CH₀OH (III)

2 2 m j 2

NH₂

in welchen X ein Halogenatom darstellt und η und m die oben angegebene Bedeutung haben, in flüssigem Ammoniak in Gegenwart eines Alkaliamids miteinander umsetzt, worauf man das erhaltene Produkt in bekannter Weise abtrennt.

4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß X ein Bromatom ist.

5. Verfahren nach Anspruch 3 oder 4, dadurch gekennzeichnet, daß man das Dihalogenid mit der Formel II in stöchiometrischer Menge anwendet.

809832/0 878

6. Verfahren nach Anspruch 3 oder 4, dadurch gekennzeichnet, daß man das Dihalogenid mit der Formel II in einem bis zu 100%-igen Überschuß über die stochiometrische Menge anwendet.

7. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen mit der Formel I, in welcher η = 0 und m = 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man ein S-benzyliertes Derivat mit der Formel III

- CH₂-S-(CH₂)_m-CH-CH₂OH . (Ill)

NH₂

in welcher η und m die vorstehend angegebene Bedeutung haben, in das Thiol umwandelt und danach eine Oxidation mit Luft durchführt, um das Disulfid mit der Formel I zu erhalten.

8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung mit der Formel III in flüssigem Ammoniak in Gegenwart von Natriumamid in das Thiol umwandelt.

9. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß man das aus dem S-benzylierten Derivat mit der Formel III erhaltene Thiol oxidiert, indem man Luft durch eine wässrige Lösung dieses Thiols in Gegenwart von Ferrichlorid streichen läßt.

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