DE2645610A1

DE2645610A1 - Immumsuppressoren, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende arzneimittel

Info

Publication number: DE2645610A1
Application number: DE19762645610
Authority: DE
Inventors: Geb Chosson Arlette Adam; Edgar Prof Lederer; Pierre Lefrancier
Original assignee: Agence National de Valorisation de la Recherche ANVAR
Current assignee: Bpifrance Financement SA
Priority date: 1975-10-09
Filing date: 1976-10-08
Publication date: 1977-04-21
Also published as: GB1562734A; DE2645610C2; FR2326930A1; AU522089B2; JPS5257120A; CH616943A5; US4101649A; BE847103A; FR2326930B1; CA1091651A; NL7611088A; AU1867676A; JPS618079B2

Description

Patentanwälte Dipl.-Ing. H.Wi-ickmann, Dipl.-Phys. Dr. K. Fincke

Dipl.-Ing. F. AAYeickmann, Dipl.-Chem. B. Huber

8 MÜNCHEN 86, DEN

POSTFACH 860 820

MÖHLSTRASSE 22, RUFNUMMER 98 39 21/22

Case 75 30948 HtM/Sra

AGENCE NATIONALE DE VALORISATION DE LA RECHERCHE

(ANVAR)

13, rue Madeleine Michelis
F - 92522 Neuilly-sur-Seine

Immumsuppressoren, Verfahren zu ihrer Herstellung und sie enthaltende Arzneimittel

Die Erfindung betrifft als nichtspezifische Immumsuppressoren geeignete lösliche Wirkstoffe bzw. Mittel, die bei einem damit behandelten Organismus Immumreaktionen gegen Antigene unterschiedlicher Art inhibieren.

Es ist bekannt, daß es bei einer Reihe von therapeutischen Behandlungen erwünscht ist, die Immumreaktionen des Organismus
zu unterdrücken. Dies trifft beispielsweise auf Patienten zu,

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denen Organe übertragen worden sind, die von anderen Individuen abstammen. Die als Immumsuppressiva eingesetzten Produkte sind im allgemeinen toxisch und beeinträchtigen den Stoffwechsel sämtlicher Zellen, so daß sie auf diese Art und Weise eine systemische Wirkung ausüben.

Erfindungsgemäß werden nun neue Produkte bereitgestellt, die immumsuppressive Eigenschaften ausüben und dennoch frei sind von den toxischen Wirkungen, die der Mehrzahl der bislang bekannten Immumsuppressiva eigen ist.

Gegenstand der Erfindung ist insbesondere N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin, das chemisch genauer auch als 2-(2-Acetamido-2-desoxy-3-O-D-glucopyranose)-D-propionyl-D-alanyl-D-isoglutamin bezeichnet werden kann.

Dieses neue Produkt besitzt bemerkenswerte immunsuppressive Eigenschaften mit nichtspezifischem Charakter.

Das Vorhandensein dieser immumsuppressiven Eigenschaften wurde auch bei einem Diastereoisomeren des erfindungsgemäßen Produktes festgestellt, nämlich bei N-Acetylmuramyl-L-alanyl-L-isoglutamin.

Gegenstand der Erfindung ist daher ein immunsuppressives Arzneimittel, das dadurch gekennzeichnet ist, daß es als Wirkstoff entweder N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin oder N-Acetylmuramyl-L-alanyl-L-isoglutamin enthält.

Vorzugsweise enthält das erfindungsgemäße Arzneimittel als Wirkstoff N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin, da dessen immunsuppressive Wirkung stärker ist als diejenige von N-Acetylmuramyl-L-alanly-L-isoglutamin.

Die beiden oben beschriebenen Substanzen können auch durch die folgenden Abkürzungen bezeichnet werden:

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264561O

Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu-CX -NH, Mur-N-Ac-L-Ala-L-Glu -(X -NH,

Ihre chemischen Strukturformeln sind die folgenden

OH

H-O

OH, H

HHAc

GH - CO -MH - CH - COJMH,,

COOH

OH

OH, H

H₃C

KHAc CH-C- HH - CH - CO - MI - CH - CONIL

COOH

"L

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Diese Produkte sind frei von toxischen Wirkungen und stellen kompetitierende Analoga der Adjuvantien dar, die von Bakterienpeptidoglykanen abgeleitet sind, insbesondere von N-Acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin, dessen Adjuvanswirkung nach der Verabreichung einer Wasser-Öl-Emulsion in der deutschen Patentanmeldung P (französische Patentanmeldung Nr. 74 22909 vom 1.7.1974)

beschrieben ist.

Wie bei pharmakologischen Untersuchungen gezeigt werden konnte, die weiter unten näher erläutert sind, entfalten die genannten Arzneimittelwirkstoffe und insbesondere das erfindungsgemäße Produkt, d. h. N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin,eine der Adjuvanswirkung der N-Acetylmuramyl-peptide entgegengerichtete Wirkung, beispielsweise eine antagonistische Wirkung in Bezug auf die Wirkung von N-Acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin.

Die Erfindung ist insbesondere auf Arzneimittelzubereitungen gerichtet, die die genannten Immunsuppressoren in einer Wasser-Öl-Emulsion enthalten.

Die genannten Immunsuppressoren können mit Hilfe eines Verfahrens hergestellt werden, das darin besteht, daß man N-Acetylmuraminsäure, deren freie Hydroxygruppen, mit Ausnahme derjenigen der Propionylgruppe der Muraminsäure, zuvor geschützt worden sind, mit dem entsprechenden Peptid, dessen freie Hydroxygruppei ebenfalls zuvor geschützt worden sind, umsetzt, und dann die geschützten funktioneilen Gruppen wieder freilegt, insbesondere durch Hydrolyse in saurem Medium.

Die Erfindung betrifft ebenfalls N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin, dessen funktionelle Gruppen,die bei der Synthese nicht reagieren sollen, entweder durch Benzylgruppen oder durch Benzylidengruppen geschützt sind.

Im folgenden sei ein Beispiel zur Herstellung von N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin erläutert.

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Die Verbindung Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu - CV-NH«, die chemisch auch als 2-(2-Acetamido-2-desoxy-3-0-D-glucopyranose)-D-propionyl-D-alanyl-D-isoglutamin bezeichnet werden kann, erhält man nach einem mehrstufigen Verfahren. In einer ersten Stufe synthetisiert man die Peptidkette, die dann in einer zweiten Stufe an ein Muramylderivat gebunden wird, dessen freie Hydroxygruppen zuvor geschützt worden sind, insbesondere durch Benzylgruppen
oder durch Benzylidengruppen. Schließlich werden die während der
Synthese geschützten Gruppen wieder freigesetzt.

Herstellungsbeispiel

A - Hydrochlorid des Benzylesters von 1-Alanyl-D-isoglu-

glutamin (I)

Die im folgenden angewandte Abkürzung BOC steht für die t-Butyloxycarbonylgruppe.

Man versetzt eine Lösung von 1,09 g (4 mMol) des Hydrochlorids des Benzylesters von D-Isoglutamin und 0,45 ml (4 mMol) N-Methylmorpholin in Dimethylformamid unter Rühren mit 680 mg (3,4 mMol) tert.-Butyloxycarbonyl-D-alanin (BOC-AIa-OH). Dann gibt man
700 mg (3,4 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid zu, läßt die Reaktionsmischung während 12 Stunden bei Raumtemperatur stehen, engt sie dann zur Trockne ein, nimmt den trockenen Rückstand mit 50 ml Äthylacetat auf und wäscht anschließend mit einer 10 %igen
wäßrigen Zitronensäurelösung, mit 1 η Natriumbicarbonatlösung und schließlich mit Wasser. Die Äthylacetatphase trocknet man über Magnesiumsulfat und engt sie ein, worauf man durch Kristallisieren mit Hilfe einer Äthylacetat/Petroläther-Mischung 780 mg (Ausbeute =51 %) des kristallinen Produkts erhält, (Schmelzpunkt = 128 bis 13O⁰C, C⁰O^ = +25,3°, Methanol). Man löst das Produkt in 5 ml einer 1n ChlorwasserstoffSäurelösung in
Essigsäure. Nach 30 Minuten engt man die Lösung zur Trockne ein, nimmt den Rückstand mit einem Minimum Methanol auf und fällt
das Produkt mit Äther aus, wobei man 370 mg (Ausbeute = 56 %) der Titelverbindung erhält, die bei 128 bis 130⁰C schmilzt.

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^{= +26}° (Methanol)

Analyse: C.	15 ^H22	°4	^N3	Cl	6	(343	,82	)	1	2	N
		C			6	H			1	2	,2 %
ber. :	52	,4	%	/45	%				,25%
gef. :	52	,53	%	,60	%

B - 2-(Benzyl-2-acetamido-4,6-0-benzyliden-2-desoxy-3-0-ß-D-glucopyranosyl)-D-propionyl-D-Ala-( X-O-Benzyl)-D-GIu-OC-NH₂ (II)

Man gießt eine Lösung von 157 mg (0,33 mMol) Benzyl-2-acetamido-4,6-O-benzyliden-3-O-(D-1-carboxyäthyl)-2-desoxy-ß-D-glucopyranosid (I) in einer Acetonitril/NiN-Dimethylformamid-Mischung (2/1, V/V, 5 ml) die 1 Äquivalent (0,33 mMol) Triäthylamin enthält, in eine bei O⁰C gehaltene Suspension von 84,3 mg N-Äthyl-5-phenylisoxazolium-3'-sulfonat (Reagens K nach Woodward) in 5 ml Acetonitril. Man rührt die Mischung bei O⁰C, bis man eine klare Lösung erhält (was etwa 1 1/2 Stunden erfordert). Dann gibt man eine Lösung von 114,4 mg (0,33 mMol) D-AIa-( y-O-benzyl)-D-GIu-Of-' NH₂-hydrochlorid (II) in eine Acetonitril/NfN-Dimethylformamid-Mischung (2/1, V/V, 5 ml), die ein Äquivalent (0,33 mMol) Triäthylamin enthält, zu. Nach dem Rühren über Nacht bei Raumtemperatur verdampft man die Lösungsmittel im Vakuum. Der erhaltene feste Rückstand wird sorgialtig mit Wasser extrahiert, um die Nebenprodukte zu entfernen. Dann wird der Feststoff abgesaugt, getrocknet und aus Äthanol umkristallisiert, wobei man 550 mg der Verbindung (II) erhält (Ausbeute = 73 %). Schmelzpunkt = 255 bis 257°C, = -30° (Dimethylformamid) .

C - 2-(2-Acetamido-2-desoxy-3-0-D-glucopyranosyl)-D-propionyl-D-AIa-D-GIu-^f-NH₂ (III)

Man suspendiert 200 mg der Verbindung (II) in 15 ml 60 %iger Essigsäure und erhitzt während 1 Stunde auf 100⁰C. Nach dem Abkühlen der Lösung verdampft man die Essigsäure im Vakuum, wobei man die letzten Spuren der Säure durch Zugabe von Wasser beseitigt, das man anschließend wieder verdampft, wobei die letzten

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Wasserspuren schließlich durch gemeinsame Destillation mit Toluol beseitigt werden. Den erhaltenen Rückstand chromatographiert man über eine mit 15 g Kieselgel gefüllte Säule (Chloroform/Methanol-Mischung, 6/1, V/V). Man vereinigt die reinen Fraktionen, verdampft sie im Vakuum und erhält einen chromatographisch reinen Rückstand (120 mg, Ausbeute =73 %).

Man hydriert 69 mg dieser Verbindung katalytisch in 10 ml Eisessig und in Gegenwart von 25 ml Palladium-auf-Kohlenstoff. Nach Ablauf von 3 Stunden saugt man den Katalysator ab und verdampft das Filtrat im Vakuum zur Trockne. Man erhält die Verbindung (V) mit einer Ausbeute von 73,4 %, die folgende Analysenwerte aufweist:

LOCJ = +58° D	(Essigsäure)	DH (515	,534)	N	,8	6	.%
Analyse: C₁₉H	_32Oi1N₄-O,5C₂H₅(	H		10	,8	6	%
	C	6,84	%	10
berechnet:	46,59 %	6,82	%
gefunden:	46,52 %

Das Diastereoxsomere, d.h. Mur-N-Ac-L-Ala-L-Glu-uV-NH₂ kann man natürlich in gleicher Weise erhalten, wenn man anfänglich von dem Benzylester des BOC-L-alanyl-L-isoglutamins ausgeht.

Durch Kuppeln erhält man mit einer Ausbeute von 22,5 % 2-(2-Acetamido-2-desoxy-3-0-D-glucopyranosyl)-D-propionyl-L-Ala-L-Glu-CV -NH₂. Die Analysenwerte dieser Verbindung sind die folgenden:

Schmelzpunkt =	155 - 160°	C	H₂O	(542)	1	N	33 %
fcfj²⁵ = +29°	(Eisessig)			H	1	0,	37 %
Analyse: C₁₉H^	,O₁₁N₄- 2,75	1 %	6,8 %		0,
	C	0 %	6,4 %
berechnet:	42,
gefunden:	42,

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Pharmakologische Eigenschaften

1) Bestimmung der Unschädlichkeit der erfindungsgemäßen Arzneimittelwirkstoffe

Die Untersuchung erfolgt mit der Methode von L. Chedid und KoIl. (Ann. N.Y. Acad. Sei. 133 (1966) 712). Die zu untersuchenden Produkte werden durch intravenöse Injektion an Mäuse verabreicht, denen zuvor die Nebennieren entfernt worden sind, um sie besonders empfindlich zu machen.

Es konnte jedoch beobachtet werden, daß sämtliche Mäuse die Injektion der zu untersuchenden Produkte in den Dosierungen überleben, bei denen diese Verbindungen eine gute Wirkung als Immumsuppressiva ausüben (welche Dosierungen bei den folgenden Untersuchungen ermittelt werden). Die erfxndungsgemäßen Arzneimittelwirkstoffe sind somit unschädlich.

2) Immunsuppressive Eigenschaften der erfindungsgemäßen Wirkstoffe'

In den folgenden beiden Untersuchungsreihen, deren Ergebnisse im folgenden angegeben sind, werden der Einfluß der erfindungsgemäßen Arzneimittelwirkstoffe auf den Gehalt der Antiovalbumin-Antikörper unter den folgenden Bedingungen untersucht.

Man verabreicht weiblichen Hartley-Meerschweinchen mit einem Gewicht von 300 bis 350 g in das Pfotenkissen beider Hinterpfoten eine Emulsion, die aus gleichen Teilen des unvollständigen Freund'-sehen Adjuvans und einer physiologischen Lösung, die Ovalbumin (5 mg pro Meerschweinchen) und die zu untersuchenden Präparate enthält. Als Kontrollprodukte verwendet man das von der Firma DIFCO vertriebene unvollständige Freund'sehe Adjuvans (AIF) und das vollständige Freund'sehe Adjuvans (ACF) sowie N-Acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin.

Der Anitovalbumin-Antikörpergehalt wird 3 Wochen nach der Injektion unter Anwendung der Bedingungen ermittelt, die in der französischen Patentanmeldung Nr. 71 41610 vom 19. November 1971 beschrie-

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ben sind. Der Gehalt ist in μg des am Äquivalenzpunkt gebildeten Antigen-Antikörper-Niederschlags pro ml des Serpms angegeben.

Bei einer zweiten Untersuchungsreihe wurde die verzögerte Hypersensibilität gegenüber Albumin durch eine Hautreaktion 4 Wochen
nach der Injektion bestimmt. Sie ist als der Durchmesser des
Erythems (E), der Verhärtung (I) oder der Nekrose (N) in mm
48 Stunden nach der subkutanen Injektion von 50 μg Ovalbumin angegeben .

Die Ergebnisse der ersten Untersuchungsreihe sind in der folgenden Tabelle I zusammengestellt. Sie lassen die immunsuppressiven Wirkungen der beiden erfindungsgemäßen Verbindungen erkennen, die als bemerkenswert einzuschätzen ist, insbesondere die Wirkung von N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin.

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Tabelle I

Substanzen

Dosis pro Tier)

Antiovalbumin/Antikörpergehalt (μg Proteine pro Mittel Milliliter des Serums) wert

1) unvollständiges Freund'sches Mjuvans (FIA)

2) vollständiges Freund'sches Aäjuvans (FCA.)

3) Mur-N-Ac-L-Ala-D-Glu-^·-NH.

4) MUr-N-Ac-L-Ma-D-GIu-Ct-NH₂ +

5) Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu-r-NH.

6) Mur-N-Ac-L-Ala-L-Glu-i^-NH.

+ FIA FIA + FIA + FIA

4200 3800 1720 5200 3100 2940 4200 3592

50 11200 8400 6960 11040 10400 9200 4800 8856

25 9280 11200 12000 11600 12000 11600 9280 10992

10 15500 11000 9520 14000 4480 15000 10600 11440

25 200 800 900 1300 1900 900 1500 1068

25 2800 1140 3400 4200 1700 800 700 2104

Es ist aus dieser Tabelle zu erkennen, daß die erfindungsgemäßen Substanzen eine der Wirkung von N-Acetylmuramyl-L-analyl-D-isoglutamin entgegengesetzte Wirkung entfalten, die eine deutliche Adjuvanswirkung besitzt. . .

Die Ergebnisse der zweiten Untersuchungsreihe sind in der folgenden Tabelle II zusammengestellt. Diese, zweite Untersuchungsreihe umfaßt sieben Versuche, wobei der oder die zu untersuchenden Wirkstoffe in der linken Spalte der Tabelle angegeben sind.

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Substanzen

1 FIA

O (JD OO

2 FCA

3 Mur-N-Ac-L-Ala-D-Glu-Ä -NH,

4 Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu-%-NH,

Tabelle	II	Mittel- verzögerte Hypersensi-	O	Ovalbumin/	CD
Dosis (^Lg,	' Antiovalbumin-Anti-	wert bilität (50 μg	1553 O
Tier)	körpergehalt (μg Pro	Tier)		5 I	cn
	tein/ml Serum)	5 N /	5 N /		OD
0	2200	O
	780	5 N /
	2500		5 I
	1440	4950 5 N /
	1600	5 N /	15 I
	800	5 N /	12 I
50	7200	10N/	12 I
	4800	5 N /	15 I
	3300	5 N /	15 I ι
	4800	7717 7 N /	15 I
	4800	7 N /	15 I ± ,
	4800	6 N /	15 I
10	8000	8 N /	16 I
	9500	O	17 I
	6500	O	20 I
	7500	!890 \l*	20 I
	6800	O
	8000	O
25	1720		12 I
	660
	3600 1800
	1800
	1760

Tabelle II (Fortsetzung)

Substanzen Dosis (μg/ Antiovalbumin-Anti- Mi t-

Tier) körpergehalt ^g Pro- tel-

tein/ml Serum) wert

verzögerte Hypersensibilität (50 μg Ovalbumin/ Tier)

5 Mur-N-Ac-L-Ala-D-Glu-^t-NH₂

+
Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu- Or' -NH₂

6 Mur-N-Ac-L-Ala-D-Glu-.^-NH₂ Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu~%-NH₂

7 Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu-iY'-NH^

10	1600
	4200
25	5600
	2400
	4500
	2100
10	1900
	3700
⁺	6400
10	6000
	5900
	5600
00	950
	1000
	1200

3400

4917

1050

12 I 5 N / 10 I

4	N	/	1	8	I
4	N	/	1	2	I
5	N	/	1	2	I
5	N	/	1	2	I
4	N	/	1	2	I
4	N	/	1	2	I
5	N	/	1	5	I
12	I
3	N	/	1	2	I
5	E
O

Die signifikantesten Ergebnisse dieser Tabelle sind die der Versuche 3, 5 und 6, die in deutlicher Weise die kompetitiven entgegengesetzten Wirkungen des ausgezeichneten Adjuvans' Mur-N-Ac-L-AIa-D-GIu-^-NH₂ (Versuch Nr. 3) und des erfindungsgemäßen Produkts, insbesondere MUr-N-Ac-D-AIa-D-GIu-Of-NH₂ (Versuche Nr. and 6), zeigen. Wenn das er-f indungsgemäße Produkte gleichzeitig mit dem Mittel mit Adjuvanswirkung verabreicht wird, stellt man fest, daß diese Verbindung die Adjuvanswirkung des letzteren Mittels stark inhibiert.

Hinsichtlich der Wirkungen der einzeln verabreichten Immunosuppressiva läßt die Tabelle II bei einem Vergleich mit der Wirkung des unvollständigen Freund'sehen Adjuvans FIA) a priori erkennen, daß die erfindungsgemäße Wirkung keine Adjuvanswirkung ausübt. Dies steht im Gegensatz zu der Tabelle I, aus der zu erkennen ist, daß MUr-N-Ac-L-AIa-L-GIu-(^-NH₂ und in stärkerer Weise Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu-CV "NH₂ wesentlich geringere Antiovalbumin-Antikörper-Gehalte induzieren als man sie bei jenen Tieren feststellt, die nur mit dem unvollständigen Freund'.sehen Adjuvans behandelt worden sind. Man kann die Hyopthese aufstellen, daß die in der ersten Untersuchungsreihe eingesetzten Tiere Träger einer schwachen Infektion waren, die auch der Ausgangspunkt des Auffindens der immunsuppressiven Eigenschaften der erfindungsgemäßen Wirkstoffe war. Wie weiter oben bereits angegeben ist, wurde diese immunsuppressive Wirkung in sehr deutlicher Weise durch die antagonistischen Wirkungen von Mur-N-Ac-D-Ala-D-Glu- #-NH₂ und MUr-N-Ac-L-AIa-D-GIu-OV-NH₂ nachgewiesen.

Die immunsuppressiven Eigenschaften der erfindungsgemäßen Verbindungen machen diese Verbindungen zu hervorragend geeigneten Wirkstoffen für die Herstellung von immunsuppressiven Arzneimitteln, deren Einsatz bei der Behandlung sämtlicher pathologischer Zustände erwünscht ist, bei denen übermäßige Immunreaktionen gegen besondere Antigene oder von außen in den Organismus eingeführte Fremdkörper auftreten, gleichgültig, ob es sich nun Menschen oder Tiere handelt. Insbesondere kann man die erfindungsgemäßen Arzneimittel zur Behandlung von Patienten verwenden, denen Organe übertragen worden sind, um in dieser Weise die Immun-

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reaktionen des Organismus' gegen das übertragene Organ zu vermindern. . ·

Gegenstand der Erfindung sind daher auch injizierbare Zubereitungen, die wirksame Dosierungen der fraglichen Wirkstoffe enthalten, insbesondere in Form einer stabilisierten Wasser-öl-Emulsion, die vorzugsweise ein pflanzliches öl enthält, insbesondere wenn die Arzneimittel an den Menschen verabreicht werden sollen.

Die eingesetzte Emulsion des pflanzlichen Öles bereitet man vorteilhafterweise aus einer isotonischen wäßrigen Lösung und einem pflanzlichen, durch den Stoffwechsel abbaufähigen öl, wobei diese Emulsion etwa 2 bis etwa 6 Volumen der wäßrigen Lösung pro 10 Volumen des pflanzlichen Öles enthält und zusätzlich nicht immunogene Proteine, beispielsweise Serumalbumine oder Globuline in solchen Mengen enthält, daß die Stabilität der gebildeten Emulsion' sichergestellt ist. Beispielsweise enthält diese Emulsion zwischen etwa 30 und etwa 150 mg, vorzugsweise· zwischen etwa 40 und etwa 120 mg und insbesondere etwa 60 mg Proteine pro ml der wäßrigen Phase.

Diese in der wäßrigen Phase gelösten Proteine können natürlich zu dem isotonischen Verhalten dieser Phase beitragen. Die wäßrige Phase kann natürlich auch erforderlichenfalls entsprechende Mengen solcher Mittel enthalten, die ihr das erforderliche isotonische Verhalten verleihen, beispielsweise Natriumchlorid, Glukose, Dextran, etc.

Die erfindungsgemäßen Arzneimittel können durch intramuskuläre oder subkutane Injektion oder auch mit Hilfe der Impflanzette zugeführt werden.

Die erfindungsgemäßen Wirkstoffe stellen ferner wertvolle Laboratoriumswirkstoffe dar, da sie eine antagonistische Wirung ge-*- gen diejenige von Mitteln ausüben, die wirksame immunologische Adjuvantien darstellen, um die Immunreaktion eines Organismus gegen Antigene verschiedener Art, wie beispielsweise N-Acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin, zu stimulieren. Hierzu können

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yf-

sie als Mittel eingesetzt werden, die dazu dienen, die Art der Adjuvanswxrkung der untersuchten Substanzen in Bezug auf diese Eigenschaft nachzuweisen oder zu bestätigen.

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Claims

Patentansprüche

\ 1./N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin mit immunsuppressiven Eigenschaften, ■ . .
2. N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin, dessen freie Hydroxygruppen geschützt sind, insbesondere durch Benzylgruppen oder durch Benzylidengruppen, im Fall von gewissen Hydroxylgruppen, die der Pyranosylgruppe, der Muramylgruppe des N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamins benachbart sind.
3. Verfahren zur Herstellung der Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man N-Acetylmuraminsäure, dessen freie Hydroxygruppen mit Ausnahme der Propionylgruppe der Müraminsäure zuvor geschützt worden sind, mit dem entsprechenden Peptid, dessen freie Hydroxylgruppen ebenfalls zuvor geschützt worden sind, umsetzt und dann die anfänglich geschützten Gruppen wieder freisetzt, insbesondere durch Hydrolyse in saurem Medium.
4. Arzneimittel mit immunsuppressiven Eigenschaften, dadurch gekennzeichnet, daß es als Wirkstoff entweder N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin oder N-Acetylmuramyl-L-alanyl-L-isoglutamin enthält.
5. Arzneimittel mit immunsuppressiven Eigenschaften, dadurch gekennzeichnet, daß es als Wirkstoff N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin enthält.
6. Zubereitung mit immunsuppressiven Eigenschaften, dadurch gekennzeichnet, daß sie N-Acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamin oder N-Acetylmuramyl-L-alanyl-L-isoglutamin in Kombination

. mit einem flüssigen, injizierbaren Trägermaterial enthält.

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7. Zubereitung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß sie als flüssiges, injizierbares Trägermaterial eine stabilisierte Emulsion aus einer isotonischen wäßrigen Lösung und öl enthält.
8. Zubereitung nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Emulsion als öl ein pflanzliches öl enthält.

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