DE2626109C2

DE2626109C2 -

Info

Publication number: DE2626109C2
Application number: DE2626109A
Authority: DE
Inventors: Tibor Jackson N.J. Us Sipos
Original assignee: Johnson and Johnson
Current assignee: Johnson and Johnson
Priority date: 1975-06-10
Filing date: 1976-06-10
Publication date: 1988-01-07
Also published as: FI761645A; JPS523819A; DK154610B; FR2313916A1; FR2313916B1; NO761981L; US4079125A; NL7606288A; AU504584B2; DE2626109A1; IE43601L; SE7606470L; IE43601B1; BE842822A; GB1509866A; IN144157B; AU1475576A; DK154610C; DK256776A

Description

Die Erfindung betrifft ein oral applizierbares Enzympräparat mit magensaftresistentem Überzug zur Behandlung von Verdauungsstörungen, die durch Enzymmangel hervorgerufen sind oder zumindest durch Enzymzufuhr gelindert werden können, sowie ein Verfahren zu seiner Herstellung.

Es ist bekannt, daß aus tierischen Quellen stammende, exogen verabfolgte pankreatische Enzyme zur Behebung von Enzymmängeln, die bei verschiedenen Krankheiten der Bauchspeicheldrüse, wie Pankreatitis und zystische Fibrose, und nach einer Pankreasresektion auftreten können, verwendet werden können. Über die Verwendung von Enzymen pflanzlichen oder mikrobiellen Ursprungs gibt es nur wenige Angaben.

Pankreatische Enzyme sind unter fast neutralen oder leicht alkalischen Bedingungen aktiv. Unter den Bedingungen des Magens, d. h. in Gegenwart von Säure und von Pepsin, werden die meisten Enzyme irreversibel unter Verlust ihrer biologischen Aktivität inaktiviert. Deshalb müssen exogen verabfolgte Enzyme gegen die Inaktivierung im Magen geschützt werden, d. h. es muß dafür gesorgt werden, daß sie auf ihrem Weg durch den Magen in den Zwölffingerdarm intakt bleiben.

Ferner ist es zur Gewährleistung einer maximalen Wirkung notwendig, daß die Enzyme im Zwölffingerdarm innerhalb von 5 bis 30 Minuten freigesetzt werden, da die Verdauung und Absorption von Stoffwechselprodukten nur im oberen Abschnitt des Darms, d. h. im Zwölffingerdarm und im oberen Teil des Leerdarms, stattfindet.

Aus der normal arbeitenden Bauchspeicheldrüse werden aufgrund der Stimulierung durch die Nahrung allmählich Verdauungsenzyme in den Zwölffingerdarm freigesetzt und zwar hauptsächlich in Form ihrer inaktiven Vorläufer. Einige der freigesetzten Zymogene (inaktive Vorläufer) werden als erste durch die Enterokinase unter Bildung der entsprechenden aktiven Enzyme, wie Trypsin aus Trypsinogen, aktiviert. Das aktivierte Trypsin setzt im Zwölffingerdarm durch einen autokatalytischen Mechanismus wiederum weitere aktive Enzyme frei. Gleichzeitig werden die aktivierten Enzyme mit der aus dem Magen kommenden Nahrung gründlich vermischt, worauf der Verdauungsvorgang folgt. Dieser Prozeß findet solange statt, als Nahrung aus dem Magen in den Zwölffingerdarm transportiert wird.

Seit 70 Jahren werden pankreatische Enzyme zur Behandlung von verschiedenen Verdauungsstörungen verwendet. Zunächst waren die klinischen Ergebnisse sehr unterschiedlich. Mit der Zeit stellte man fest, daß einige der unzureichenden klinischen Reaktionen auf die Inaktivierung der exogen verabfolgten Enzyme im Magen zurückzuführen waren. Das Interesse an enzymhaltigen Verdauungshilfen lebte in den späten Fünfziger und frühen Sechziger Jahren mit der Entwicklung von säurenstabilen, darmlöslichen Überzügen wieder auf. Es wurde angenommen, daß die nachteiligen Wirkungen der Magensäure auf die Enzyme durch die Verwendung von derartigen darmlöslichen Überzügen vermieden werden könnten und somit eine wirksamere Enzymtherapie möglich würde. In dieser Zeit wurden eine Reihe von enzymhaltigen Verdauungshilfen mit darmlöslichen Überzügen auf den Markt gebracht. Jedoch enthielten die meisten dieser Produkte nur geringe Konzentrationen an aktiven Enzymen. Die Enzymkonzentration war häufig zu gering, um eine wirksame Behandlung von mit Enzymmängeln zusammenhängenden Zuständen zu gewährleisten. Viele dieser Produkte wiesen insbesondere einen Mangel an Lipase auf.

Außerdem schützten diese Überzüge die Enzyme im allgemeinen nicht durch eine Inaktivierung im Magen oder sie ermöglichten keine Freisetzung der Enzyme im Zwölffingerdarm in einen aktivierbaren Zustand. Die meisten dieser Überzüge waren nämlich für Magensäure durchlässig und viele davon zerfielen im Zwölffingerdarm unter neutralen Bedingungen nicht innerhalb einer angemessenen Zeit. Es ist wichtig, daß das Enzym in aktiver Form zu der Zeit, wenn die Nahrung aus dem Magen in den Zwölffingerdarm und den oberen Leerdarm gelangt, in einer entsprechenden Konzentration vorhanden ist.

Aufgrund der bekannten Mängel von herkömmlichen enzymhaltigen Verdauungspräparaten in bezug auf ihre Überzüge und auf die niedrigen Konzentrationen an aktiven Enzymen besteht seit langem ein Bedarf daran, hochaktive enzymhaltige Verdauungspräparate zu entwickeln, bei denen die Enzyme auf ihrem Weg durch den Magen nicht durch die Magensäure und durch Pepsin inaktiviert werden und die nach dem Eintritt in den Zwölffingerdarm die Enzyme in einer reproduzierbaren Weise, d. h. mit vorhersagbarem Ergebnis, innerhalb von Minuten in ihren biologisch aktiven Zustand freisetzen.

Bei pankreatischen Mangelzuständen sind keine normalen physiologischen Verdauungsbedingungen (d. h. allmähliche Freisetzung der pankreatischen Zymogene in den Zwölffingerdarm, deren Aktivierung durch Enterokinase und deren Vermischen mit der aus dem Magen kommenden Nahrung) im Zwölffingerdarm gegeben, oder es liegt zumindest eine starke Behinderung vor. Durch eine exogene Verabfolgung von Enzymen in großen Tabletten kann der bereits bestehende unnormale physiologische Zustand verschlimmert werden, da große Enzymmengen in kleinen Bereichen freigesetzt werden. Dies führt zu einer Reizung und Schädigung der Darmauskleidung. Außerdem bewirkt eine mangelnde zeitliche Abstimmung zwischen dem Eintreffen von Nahrung und Tabletten aus dem Magen in den Zwölffingerdarm eine Verringerung der Möglichkeit, daß unter diesen Bedingungen eine normale Verdauung stattfinden kann. Tabletten können im Zwölffingerdarm im Vergleich zum Eintreffen der Nahrung zu früh oder zu spät ankommen. Dies führt zu nicht vorhersagbaren Ergebnissen und zu einer schlechten Verdauung.

Aufgabe der Erfindung ist es, ein oral applizierbares Enzympräparat mit magensaftresistentem Überzug zur Verfügung zu stellen, das die vorgenannten Nachteile nicht aufweist und folgende Bedingungen erfüllt:

(1) Es soll einen magensaftresistenten, aber darmlöslichen Überzug aufweisen, der es ermöglicht, daß die exogen verabfolgten Enzyme unversehrt durch den Magen in den Zwölffingerdarm gelangen.
(2) Die Freisetzung der geschützten Enzyme in einem biologisch aktiven Zustand im Zwölffingerdarm soll innerhalb von Minuten nach dem Eintreffen des Präparats aus dem Magen im Zwölffingerdarm ablaufen. Dies soll durch den darmlöslichen Überzug erreicht werden, der sich in den Darmsäften rasch löst. Dabei soll die chemische Zusammensetzung, die physikalische Form und die Größe des Enzympräparats so beschaffen sein, daß nach dem Auflösen des darmlöslichen Überzugs ein rascher Zerfall erfolgt.
(3) Der physiologische Verdauungszustand, der im Zwölffingerdarm bei einer normal arbeitenden Bauchspeicheldrüse herrscht, soll wieder hergestellt werden, indem (a) das Enzympräparat in kleinen Größen zur Verfügung gestellt wird, um seine Mischung mit dem Nahrungsmittel im Magen zu fördern, so daß die Enzyme im Zwölffingerdarm allmählich freigesetzt und in der aus dem Magen kommenden Nahrung gleichmäßig dispergiert werden, und (b) gewährleistet wird, daß Aktivatoren, wie Colipase, in ausreichendem Umfang vorhanden sind, daß im Organismus des Patienten sowohl die natürlichen, vom Körper gebildeten Enzyme als auch die exogen verabfolgten Enzyme maximal ausgenutzt werden.

Diese Aufgabe wird durch die Erfindung gelöst. Die Erfindung betrifft somit den im Patentanspruch 1 gekennzeichneten Gegenstand. Die Unteransprüche 2 und 3 betreffen bevorzugte Ausgestaltungen. Die Patentansprüche 4 bis 8 betreffen das Verfahren zur Herstellung des Enzympräparats.

Aus der DE-OS 16 17 417 ist ein oral verabreichbares pharmazeutisches Präparat bekannt, das unter anderem Pankreatin enthält und aus drei Schichten aufgebaut ist (Dreistufendrag´e).

Die äußere dieser Schichten, die magensaftlösliche Drag´eschicht, enthält einen Wirkstoff. Das in diesem Präparat enthaltene Enzymgemisch, das als "Pankreatin" bezeichnet wird, besteht aus tierischer Amylase, Trypsin, Chymotrypsin und Lipase. Es befindet sich in der mittleren Schicht, dem sogenannten Mantelgranulat. Die innerste Schicht des Dreistufendrag´es wird als Kerngranulat bezeichnet. Das Mantelgranulat (als "Pankreatingranulat" bezeichnet) ebenso wie das Kerngranulat wird auf übliche Weise mit Wasser granuliert.

Aus der US-PS 38 59 228 ist ein Koazervations-Verfahren zur Herstellung von Mikrokapseln bekannt, deren Oberfläche aus verschiedenen darmlöslichen Polymeren besteht. Bei diesem Verfahren muß zunächst ein Kern-Partikel hergestellt werden, das z. B. ein Enzym enthält. Dabei muß das Kern-Partikel löslich in einem Polymer-Lösungsmittel und unlöslich in Paraffin oder Silikonöl sein. Gemäß Beispiel 1 wird das enzymhaltige Kern-Partikel aus einer Lösung des Enzyms (hier Retikinonase) in 5% des Polymers HPMCP (Hydroxypropylmethylcellulosephthalat) in Aceton hergestellt. Das so erhaltene Enzym-Partikel wird in einem Lösungsmittelsystem aus zwei Phasen, enthaltend ein Polymer, dispergiert. Anschließend werden die Lösungsmittel abgedampft. Es verbleiben mit dem Polymer beschichtete Enzym-Partikel in Form von Mikrokapseln.

Aus der US-PS 37 89 117 ist ein Verfahren zur Herstellung darmlöslicher Arzneimittel, die mit einem Polymer ummantelt sind, beschrieben, das magensäurebeständig ist. Bei dem Verfahren wird von vorgefertigten Tabletten ausgegangen. Diese werden mit einer Lösung eines in organischen Lösungsmitteln löslichen Cellulosederivats behandelt. Nachfolgend wird luftgetrocknet. Es verbleiben mit dem Polymer beschichtete Tabletten.

In der US-PS 36 19 090 ist ein Koazervations-Verfahren zur Herstellung von ein Kernmaterial enthaltenden Kapseln beschrieben. Ähnlich wie in der US-PS 38 59 228 werden hier Kern-Partikel in einer Lösungsmittel/Polymer-Emulsion dispergiert. Sodann wird das Lösungsmittel abgedampft. Es verbleiben Polymerummantelte Kapseln.

Aus Hellwig, Moderne Arzneimittel, Wiss. Verlag Stuttgart, 1972, Seiten 711 bis 713 sind Fermentpräparate zur Verdauung bekannt. Keines dieser Präparate entspricht dem erfindungsgemäßen Enzympräparat in Kügelchenform mit magensaftresistentem, jedoch darmlöslichem Überzug, das ein Konzentrat eines Enzyms, ein Bindemittelsystem, ein Sprengmittel und gegebenenfalls einen Stabilisator enthält.

Schließlich ist in Hager's Handbuch der pharmazeutischen Praxis, Springer-Verlag 1971, Band VII, Teil A, Seiten 700 bis 707, in allgemeiner Form die Verwendung von Bindemitteln, wie Polyvinylpyrrolidon und von Sprengmitteln, beschrieben.

Das Enzympräparat der Erfindung enthält ein Enzymkonzentrat in einem Bindemittel aus der Reihe Polyvinylpyrrolidon, mikrokristalline Cellulose, Celluloseacetophthalat, Methylcellulose und Alginsäure, 0 bis etwa 10 Gewichtsprozent eines Stabilisators aus der Reihe Calciumcarbonat, Polyvinylpyrrolidon, Celluloseacetophthalat, Methylcellulose, Stärke und modifizierte Stärken und etwa 0,1 bis etwa 30 Gewichtsprozent, bezogen auf das Gesamtgewicht der Masse, eines Sprengmittels aus Enzym, Bindemittel, Sprengmittel und gegebenenfalls Stabilisator mit mindestens 3 Gewichtsprozent, bezogen auf das Gesamtgewicht aus Enzym, Bindemittel, Sprengmittel und gegebenenfalls Stabilisator, eines nicht-porösen, pharmakologisch verträglichen, darmlöslichen Überzugs versehen ist, der im normalen pH-Bereich im Magensaft von Säugetieren von etwa 1,5 bis etwa 5 unlöslich und im normalen pH-Bereich der Darmflüssigkeit von Säugetieren von 6,5 bis 9 löslich ist, wobei der fertige Überzug mindestens 2 Stunden den Bedingungen im Säugetiermagen widerstehen kann, sich in der Darmflüssigkeit von Säugetieren aber innerhalb von 5 bis 30 Minuten löst.

Eine bevorzugte Ausführungsform der Erfindung betrifft Präparate mit einem pankreatischen Enzymgemisch, das pro 1 mg etwa 75 NF-Proteaseeinheiten, mindestens etwa 75 NF-Amylaseeinheiten, mindestens etwa 10 NF-Lipaseeinheiten, vorzugsweise mindestens etwa 5 internationale Einheiten von Ribonuclease und eine wirksame Menge an Colipase enthält, wobei ein vorstehend beschriebener darmlöslicher Überzug vorgesehen ist. Bezüglich den NF-Einheiten wird auf National Formulary, Bd. XIII, Seite 514 ff. und die Ergänzungsbände, insbesondere zweiter Ergänzungsband, Seiten 1076 bis 1077 und vierter Ergänzungsband Seite 1134 ff. verwiesen.

Das Enzympräparat der Erfindung liegt in Form von Kügelchen mit einer durchschnittlichen Größe im Bereich von 8 bis 14 mesh (entspricht einer lichten Maschenweite von 2,38 bis 1,41 mm nach US-Standardsieb Nr. 8-14) vor. Theoretisch ergeben die kleinsten Kügelchen die beste Verteilung der Enzyme in der Nahrung. Jedoch sind extrem kleine Kügelchen schwieriger herzustellen, da extrem feine Enzympulver zur Bildung von echten Kugelformen erforderlich sind und ein übermäßiges Mahlen des Enzympulvers eine irreversible Inaktivierung von einigen Enzymen bewirkt. Außerdem erfordern äußerst kleine Enzymkügelchen einen größeren Anteil an darmlöslichem Überzug, was auf die größere Oberfläche zurückzuführen ist. Besonders bevorzugt sind Kügelchen im Bereich von 10 bis 12 mesh (enspricht einer lichten Maschenweite von 2,00 bis 1,68 mm). Der Ausdruck 8 mesh bedeutet, daß das Kügelchen an einem US- Standardsieb Nr. 8, das eine lichte Maschenweite von 2,38 mm aufweist, festgehalten wird, während es durch ein Sieb mit größeren Sieböffnungen hindurchgeht. Dementsprechend werden Kügelchen mit 14 mesh an einem US-Standardsieb Nr. 14 (lichte Maschenweite 1,41 mm) festgehalten, gehen aber durch ein Sieb mit einer größeren Sieböffnung. Zweckmäßigerweise werden diese Kügelchen dem Patienten in Kapseln verabfolgt, die im Magen saft löslich sind. Jede Kapsel enthält zweckmäßigerweise etwa 100 bis 600 mg, vorzugsweise etwa 425 bis etwa 475 mg Kügelchen.

Die Enzympräparate in Form von Kügelchen haben gegenüber Tabletten den Vorteil einer gleichmäßigeren Verteilung des mit einem darmlöslichen Überzug versehenen Enzympräparats innerhalb der Nahrung im Magen, was auf die geringere Größe der Kügelchen zurückzuführen ist. Ferner lassen sich Kügelchen leichter mit einem gleichmäßigeren darmlöslichen Überzug versehen, was auf ihre kugelförmige Gestalt zurückzuführen ist. Schließlich zerfallen Kügelchen im Darm leichter, da die schlechteren Zerfallseigenschaften und der Verlust an enzymatischer Aktivität, der durch den zur Herstellung von festen Tabletten erforderlichen Druck verursacht wird, bei der Herstellung von kugelförmigen Präparaten vermieden werden können.

Das Enzympräparat wird hergestellt, indem man das Enzymkonzentrat zusammen mit dem Bindemittel, dem Sprengmittel sowie gegebenenfalls dem Stabilisator vermischt, in etwa 600 bis 700 ml/kg (Feststoffe) eines Lösungsmittels aus der Reihe Isopropanol, Methylenchlorid, Dioxan, Tetrahydrofuran und Aceton zu Kügelchen granuliert und den darmlöslichen Überzug auf die Kügelchen durch Aufsprühen von Lösungen mit fortschreitend geringeren Konzentrationen an der darmlöslichen Überzugsmasse aufbringt. Vorzugsweise werden das Enzymkonzentrat und das Sprengmittel in trockenem Zustand vermischt. Das Bindemittel wird mit dem gegebenenfalls verwendeten Stabilisator in einem der nachstehend angegebenen Lösungsmittel gelöst. Die Masse wird zu Kügelchen mit einem Durchmesser im Bereich von etwa 8 bis etwa 14 mesh verformt, indem man das trockene Gemisch über in einer Pilzmühle sich wälzenden und fließenden, ungleichen Keimen stäubt, wobei die Keime mit der vorgenannten Lösung benetzt sind. Dabei wird von Zeit zu Zeit Lösungsmittel zugegeben, um die Teilchen in einem benetzten, aber frei fließenden Zustand zu halten. Dies wird solange fortgesetzt, bis aus den Keimen gleichmäßige kugelförmige Teilchen mit vorwiegend im Bereich von etwa 8 bis etwa 14 mesh liegenden Durchmessern entstanden sind.

Das im Enzympräparat der Erfindung enthaltene Konzentrat an Verdauungsenzymen umfaßt vorzugsweise Amylasen, Proteasen und Lipasen zusammen mit Colipase und insbesondere auch Ribonuclease.

Beispiele für die im Enzympräparat als Hauptwirkstoffe enthaltenen Enzyme sind:

Pankreatische Enzyme, wie Proteasen, beispielsweise Trypsin, E.C. ("Enzyme Commission" Nummer) 3.4.4.4; Chymotrypsin, E.C. 3.4.4.5; Chymotrypsin B, E.C. 3.4.4.6; Pancreatopeptidase E, E.C. 3.4.4.7; Carboxypeptidase A, E.C. 3.4.2.1; und Carboxypeptidase B, E.C. 3.4.2.2; Lipasen, beispielsweise Glycerinester-hydrolase (Lipase), E.C. 3.1.1.3; Phospholipase A₂, E.C. 3.1.1.4; und Sterinester-Hydrolase, E.C. 3.1.1.13; Nucleasen, beispielsweise Ribonuclease, E.C. 2.7.7.16 und Desoxyribonuclease, E.C. 3.1.4.5; und die Amylase α-Amylase, E.C. 3.2.1.1. Beispiele für Enzyme pflanzlichen Ursprungs sind Papain, E.C. 3.4.4.10; Chymopapain, E.C. 3.4.4.11; Bromelain, E.C. 3.4.4.c; Ficin, E.C. 3.4.4.12; und β-Amylase, E.C. 3.2.1.2. Beispiele für Enzyme mikrobiellen Ursprungs sind β-Galactosidase (Lactase), E.C. 3.2.1.23; Cellulase, E.C. 3.2.1.4; Subtilopeptidase A., E.C. 3.4.4.16; und Aspergillopeptidase A, E.C. 3.4.4.17.

Im allgemeinen sind die Enzyme in Pulverform oder in kristalliner Form erhältlich. Bevorzugt werden Konzentrate aus pankreatischen Enzymen (Proteasen, Amylasen, Lipasen und vorzugsweise Ribonuclease) tierischen Ursprungs, beispielsweise von Schweinen, Schafen und Rindern. Es können jedoch auch Enzymsysteme pflanzlichen und mikrobiellen Ursprungs verwendet werden. Vorzugsweise ist auch Colipase enthalten. Um eine entsprechende therapeutische Wirksamkeit bei Patienten mit Mangel an pankreatischen Enzymen zu gewährleisten, soll die ursprüngliche Enzymaktivität pro mg mindestens die vorstehend angegebenen Werte erreichen. Jedenfalls ist es für eine entsprechend kontrollierte Therapie wichtig, die ursprünglichen Enzymaktivitäten zu kennen und daraus eine Vorhersage auf die entsprechende Aktivität nach der Freisetzung im Darmtrakt machen zu können. Unter dem hier verwendeten Ausdruck "Enzym" sind nicht nur bereits aktivierte Formen, sondern auch die Zymogen-Vorläufer zu verstehen, die in der Darmflüssigkeit von Säugetieren in die aktive Form verwandelt werden können.

Entsprechende Bindemittel zur Granulierung sind Polyvinylpyrrolidon, mikrokristalline Cellulose, Celluloseacetophthalat, Methylcellulose und Alginsäure. Diese Bindemittel liegen im allgemeinen in Mengen von etwa 0,5 bis etwa 10 Gewichtsprozent und vorzugsweise etwa 1 bis etwa 5 Gewichtsprozent vor. Es können zwar auch größere Mengen an Bindemitteln verwendet werden, jedoch ist bei Mengen über 10 Gewichtsprozent kein Vorteil ersichtlich.

Das bevorzugte Gewichtsverhältnis von Sprengmitteln zu Enzymen beträgt etwa 2 bis 15 Gewichtsprozent. Es sind aber auch Gewichtsverhältnisse von etwa 0,5 bis 30 Gewichtsprozent geeignet.

Das Enzympräparat der Erfindung kann gemäß den nachstehend angegebenen Verfahren in Form von Kügelchen hergestellt werden. Diese Verfahren sind zwar bisher zur Herstellung von anderen Präparaten in analoger Weise verwendet worden, werden hier aber erstmalig zur Herstellung von Enzympräparaten eingesetzt. Wesentliche Merkmale des erfindungsgemäßen Verfahrens bestehen in der Feststellung, daß, wie nachstehend erläutert, bestimmte inerte Lösungsmittel mit den Enzymen verwendet werden können. Ferner werden erfindungsgemäß im Zusammenhang mit der Verwendung dieser Lösungsmittel besondere Parameter angegeben.

a) Granulierung

Erfindungsgemäß werden zur Herstellung von Kügelchen durch Segmentation oder "marumerization" in einer Vorstufe das Enzympulver und das Bindemittel vermischt und gegebenenfalls zusammen mit Sprengmitteln und Stabilisatoren in einem inerten Lösungsmittel granuliert (vgl. Remington's Practice of Pharmacy (RPP), Bd. XII (1961), Seiten 445 bis 449) und anschließend durch Öffnungen im Bereich von etwa 0,5 bis etwa 2 mm Durchmesser, vorzugsweise etwa 0,8 bis 1,2 mm Durchmesser, zu Segmenten stranggepreßt. Diese Segmente werden auf die nachstehend beschriebene Weise zu ihrer endgültigen Form verarbeitet.

Gemäß einem weiteren Granulierungsverfahren, das beispielsweise auf das Enzymgemisch von Beispiel 6 angewendet wird, wird das Bindemittel, wie Polyvinylpyrrolidon, und das Sprengmittel, wie Citronensäure, zunächst im inerten Lösungsmittel, wie Isopropanol, gelöst und anschließend langsam zu dem Enzymgemisch gegeben. Ähnlich wie im vorstehend beschriebenen Verfahren, und wie nachstehend erläutert, beträgt die entsprechende Menge des Lösungsmittels für die Granulierung etwa 600 bis 700 mg/kg Enzymgemisch. Der Vorteil dieses modifizierten Verfahrens gegenüber dem vorstehend angegebenen Verfahren besteht in einer gleichmäßigeren Verteilung des Bindemittels und des Sprengmittels. Dies bewirkt wiederum ein einheitlicheres Produkt mit einer schnelleren Zerfallsgeschwindigkeit und einer längeren Lebensdauer (Stabilität).

b) Herstellung von Perlen oder Kügelchen

Die gebildeten Segmente werden zu Kügelchen mit einer durchschnittlichen Größe von etwa 8 bis etwa 14 mesh und vorzugsweise etwa 10 bis etwa 12 mesh verformt.

Ein Verfahren zur Bildung von Kügelchen besteht in der direkten Bearbeitung der Segmente in einem "Marumerizer" (vgl. "A New Technique for the Production of Spherical Particles", A.D. Reynolds, Manufacturing Chemist & Aerosol News, Juni 1970, S. 40) für etwa 30 bis etwa 75 Sekunden bei einer Temperatur von etwa 20°C. Dieses Verfahren arbeitet zwar zufriedenstellend, liefert aber weit gestreute Teilchengrößen mit einer relativ geringen Ausbeute an den gewünschten Kügelchen. Im allgemeinen erhält man bei einer längeren "Marumerization" kompaktere Teilchen, die aufgrund ihrer größeren Kompaktheit eine längere Zerfallzeit erforderlich machen.

c) Herstellung von Kügelchen nach einem "Nonpareill"-Verfahren

Nachstehend wird eine weitere, bevorzugte Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens zur Herstellung von kleinen Kügelchen oder Perlen erläutert. Dieses Verfahren beruht auf der Feststellung, daß unter sorgfältig kontrollierten Bedingungen, wie nachstehend angegeben, größere kugelförmige Teilchen von Verdauungsenzympräparaten aus kleinen kugelförmigen Teilchen (ungleichartige Keime, "Nonpareille-Keime"), vorzugsweise Zucker, mit einer Größe im Bereich von etwa 20 bis etwa 32 mesh (lichte Maschenweite etwa 0,84 bis etwa 0,5 mm) erhalten werden können, indem man die mit dem Lösungsmittel granulierte Masse aus Enzym, Bindemittel und Sprengmittel über den in einer herkömmlichen Pilzmühle sich wälzenden und fließenden ungleichartigen Keimen zerstäubt, bis die Keime die Form von kugelförmigen Teilchen mit Durchmessern im Bereich von etwa 8 bis etwa 14 mesh (2,38 bis 1,19 mm) erreicht haben. Bei der Durchführung dieses Verfahrens werden die Enzyme (vgl. Beispiel 9, Phase 1) mit einem Sprengmittel, vorzugsweise Primojel®, in einem Hobart-Mischer 10 bis 15 Minuten vorgemischt. In einem eigenen Behälter wird das Bindemittel bzw. der Stabilisator, wie Polyvinylpyrrolidon (PVP), in 725 ml eines Lösungsmittels, vorzugsweise Isopropanol, gelöst. Die ungleichartigen Zuckerkeime werden mit dem Gemisch aus Isopropanol und PVP vorbenetzt. Der Feuchtigkeitsgrad soll dabei ausreichen, um eine Haftung des Gemisches aus Enzym und Sprengmittel an die benetzten Zuckerteilchen zu fördern, darf aber nicht so groß sein, daß eine Zusammenballung der Kügelchen erfolgt. Anschließend wird das Vorgemisch aus pankreatischen Enzymen und Primojel® langsam in einer herkömmlichen Pilzmühle, über die wirbelnden ungleichartigen Zuckerkeime gesprenkelt. Die Reaktionsfolge der vorgenannten Stufen wird solange wiederholt, bis aus den Keimen Kügelchen der gewünschten Größenordnung entstanden sind.

Gemäß dem vorstehenden Verfahren erhält man Kügelchen von einheitlicher Teilchengröße in hohen Ausbeuten. Etwa 90% der Kügelchen liegen im Bereich von 10 bis 12 mesh (lichte Maschenweite 2,00 bis 1,68 mm). Die biologische Aktivität bleibt zu 90 bis 95% erhalten. Vergleichsweise bleiben bei einer herkömmlichen Tablettenherstellung im allgemeinen nur etwa 70 bis 90% der biologischen Aktivität erhalten.

d) Lösungsmittel

Das Lösungsmittel dient als Mittel zum Benetzen. Das Lösungsmittel darf keine nachteilige Wirkung auf die biologische Aktivität der Enzyme aufweisen und mit anderen Bestandteilen des erfindungsgemäßen Enzympräparats nicht in nachteiliger Weise reagieren.

Als Lösungsmittel werden zum Benetzen beim Vermischen und Granulieren Isopropanol, Methylenchlorid, Dioxan, Tetrahydrofuran und Aceton verwendet. Es wurde festgestellt, daß Methanol und Äthanol die biologische Aktivität der Präparate unter den vorerwähnten Bedingungen zur Granulierung beeinträchtigen, das heißt, diese Lösungsmittel neigen dazu, die biologische Aktivität der Enzyme zu zerstören. Bevorzugte Lösungsmittel zur Granulierung sind Isopropanol, Methylenchlorid und Dioxan. Besonders bevorzugt ist Isopropanol; vgl. Tabelle III.

Eine entsprechende Benetzung des Enzympulvers mit dem Lösungsmittel, beispielsweise mit Isopropanol, ist für die Granulierung und die nachfolgende Verarbeitung wichtig. Die Benetzung ist von der Lösungsmittelkonzentration abhängig. Durch eine zu starke Benetzung ergibt sich eine schwache Segmentation in der Strangpresse und eine Klebrigkeit bei der "Marumerisierung".

Ein übermäßiges Benetzen ergibt bei der Verwendung von ungleichartigen Keimen ähnliche Ergebnisse, das heißt, die Kügelchen kleben an der Pilzmühle und bilden Multiplets oder Agglomerate. Es wurde festgestellt, daß eine entsprechende Isopropanolmenge für die Lösungsmittelgranulierung bei etwa 600 bis etwa 700 ml/kg Enzymgemisch liegt. Die besten Ergebnisse werden mit 625 bis 675 ml Isopropanol/1 kg Enzymgemisch erhalten. Bei dem Verfahren mit ungleichartigen Keimen läuft die Verdampfung aufgrund der hohen Oberfläche relativ rasch ab, so daß zu einer entsprechenden Benetzung eine ständige Überwachung und eine periodische Zugabe von nötigem Lösungsmittel erforderlich sind. Die Ausgangsmenge an Lösungsmittel liegt im allgemeinen Bereich von 600 bis 700 ml/kg Ausgangsenzymgemisch.

Es wurde ferner festgestellt, daß bei allen Verarbeitungsstufen sorgfältig auf Wasserausschluß zu achten ist, da die Gegenwart von Wasser auch in geringen Mengen die biologische Aktivität der Enzyme beeinträchtigt. Deshalb ist es auch wichtig, daß die Luftfeuchtigkeit in dem Bereich, wo die Herstellung des Enzympräparats vorgenommen wird, möglichst niedrig gehalten wird.

e) Darmlöslicher Überzug

Es wurde festgestellt, daß zum Erzielen eines darmlöslichen Überzugs mit den erforderlichen Eigenschaften, den Bedingungen im Magen mindestens 2 Stunden stand zu halten und im Zwölffingerdarm unter neutralen bis alkalischen pH-Bedingungen leicht zu zerfallen, der darmlösliche Überzug mindestens etwa 3 Gewichtsprozent der überzogenen Kügelchen ausmachen soll. Um einen angemessenen Schutz gegen die Bedingungen im Magen zu gewährleisten, insbesondere im Fall von Tabletten, bei denen es schwieriger ist, einen gleichmäßigen Überzug zu erzielen, da der Überzug an den Ecken im allgemeinen eine andere Stärke als im Mittelbereich aufweist, wird ein Anteil des darmlöslichen Überzugs von etwa 3 bis etwa 8 Gewichtsprozent bevorzugt. Der darmlösliche Überzug kann auch in größeren Mengen verwendet werden, jedoch bringen Mengen über etwa 10 Gewichtsprozent keinen Vorteil mit sich, da die Lösungs geschwindigkeit in der normalen Darmumgebung um so langsamer wird, je dicker der Überzug ist. Besonders bevorzugt wird ein Anteil des darmlöslichen Überzugs von etwa 4,5 bis 6,5 Gewichtsprozent für Kügelchen.

Bei der Herstellung des Überzugs werden separate Anteile der darmlöslichen Überzugsmasse zuerst mit einem entsprechenden Lösungsmittel, vorzugsweise einem Gemisch aus zwei Lösungsmitteln, wie Chloroform und Methanol oder Isopropanol und Essigsäureäthylester im Volumenverhältnis von 1 : 1, auf einen Feststoffgehalt von 1,2 bzw. 4% verdünnt. Anschließend werden beginnend mit der am stärksten konzentrierten Lösung die Kügelchen unter sorgfältig kontrollierten Bedingungen, festgelegt durch visuelle Beobachtung, in einer Pilzmühle bis zum Erreichen der gewünschten Filmstärke, je nach dem gewünschten Überzugsgewicht, besprüht. Es wurde fest gestellt, daß ein rasches Aufbringen der Überzugslösung während des Beschichtungsvorgangs zur Bildung von Klumpen und Aggregaten der Tabletten oder Kügelchen zu Multiplets führt. Dies läßt sich jedoch verhindern, indem man die zu stark benetzten Tabletten oder Kügelchen leicht mit Talcum (U.S.P.) bestäubt. Es sind eine Reihe von entsprechenden, darmlöslichen Überzugsmassen, die die Erfordernisse der Erfindung erfüllen, bekannt. Weitere Lösungsmittel für die darmlöslichen Überzugsmassen sind Aceton, Methyläthylketon, Diacetonalkohol, Dioxan, Essigsäuremethylester, Essigsäureäthoxyäthylester, Milchsäureäthylester, Essigsäuremethoxyäthylester, β-Methoxyäthylalkohol, Äthylenglykolmonoacetat, 1 : 1Gemische aus Aceton und Äthanol, 1 : 1Gemische aus Aceton und Methanol, 1 : 3Gemische aus Aceton und Methanol, 1 : 3Gemische aus Aceton und Methylenchlorid und 1 : 1Gemische aus Benzol und Methanol.

f) Dosierung

Die Gesamtmenge an Enzympräparat, die einem Patienten mit einem Enzymmangel zu verabfolgen ist, hängt vom Zustand des Patienten und der aufgenommenen Nahrungsmenge ab. Im allgemeinen werden Patienten mit einem Mangel an pankreatischen Enzymen etwa 0,8 bis 1,5 g der fertigen pankreatischen Enzymmenge pro Mahlzeit verabfolgt. Dies ergibt etwa 2 bis 3 Kapseln mit kleinen Kügelchen. Vorzugsweise enthält jede Kapsel etwa 0,425 bis etwa 0,475 g der verdauungsfördernden Enzymmasse in Form von Kügelchen.

g) Erläuterung der Tabellen

Tabelle I zeigt die Nachteile von handelsüblichen Enzympräparaten, die bei den meisten Patienten mit einem Mangel an pankreatischen Enzymen, die fehlenden Enzyme nicht oder nur teilweise wirksam ersetzen können. Wie sich aus den Vergleichsdaten in dieser Tabelle ergibt, enthalten die meisten handelsüblichen Präparate geringe Enzymkonzentrationen. Insbesondere weisen diese Präparate einen Mangel an Lipase auf. Ferner gewährleisten die darmlöslichen Überzüge dieser Präparate keinen angemessenen Schutz gegen eine Inaktivierung der Enzyme im Magen. Im Gegensatz dazu weisen die in Tabelle I aufgeführten Enzympräparate der Erfindung hochwirksame Enzyme in einem wirksamen Bindemittelsystem auf. Außerdem weisen die erfindungs gemäßen Enzympräparate genau ausgewogene darmlösliche Überzüge auf, wobei eine Inaktivierung durch Magensäure und Pepsin vermieden wird. Somit nimmt die Beständigkeit der Enzyme in ihrer aktiven Form deutlich zu, so daß die Menge der im Zwölffingerdarm zugänglichen Enzyme ein Maximum erreicht.

In Tabelle I ist das Verhalten von gemäß Beispiel 9 hergestellten Kügelchen nach einer einstündigen Einwirkung von Magensaft und einer anschließenden Einwirkung von Darmsaft erläutert. Es ist festzustellen, daß innerhalb von 20 Minuten ein vollständiger Zerfall unter Freisetzung von mindestens 95% der ursprünglichen Enzymaktivität der einzelnen Enzyme auftritt. Nach einer nur 10minütigen Einwirkungszeit des Darmsafts ergibt sich bereits eine angemessene Freisetzung an aktivem Enzym (75,1% Protease, 85,5% Amylase und 100% Lipase).

Die Tabelle II, die an sich keiner weiteren Erläuterung bedarf, zeigt, daß Isopropanol ein sicheres, voll verträgliches Lösungsmittel zur Verwendung mit den Enzymen gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren ist. Demgegenüber ist Methanol so wenig verträglich, daß es sich für die erfindungsgemäßen Zwecke nicht eignet. Aceton, Chloroform und Dioxan haben zwar einen gewissen nachteiligen Effekt auf die Enzymaktivität, sind aber trotzdem noch geeignet, wenn auch nicht so bevorzugt, wie Isopropanol.

In Tabelle III sind Disk-Gelelektrophorese-Untersuchungen von nach der Verabfolgung von Enzympräparaten der Erfindung abgesaugten Zwölffingerdarmsäften wiedergegeben. Die Ergebnisse zeigen, daß die Enzyme aus den Kügelchen im Zwölffingerdarm freigesetzt werden und daß die freigesetzten Enzyme biologisch aktiv sind. Somit ergibt sich, daß bei einer Verwendung der Enzympräparate der Erfindung die biologischen Aktivitäten der Enzyme gegen eine Inaktivierung im Magen geschützt sind. Außerdem werden die Enzyme im Zwölffingerdarm innerhalb von 5 bis 30 Minuten in ihrem aktiven Zustand freigesetzt.

Die enzymatische Aktivität von Lipase ist von Colipase abhängig. Wie aus den Tabellen IV und V hervorgeht, wurde festgestellt, daß die Anwesenheit von Colipase in den Enzympräparaten der Erfindung die Lipase von Patienten mit Störungen der Bauchspeicheldrüse aktiviert und stabilisiert (vgl. Tabelle V). Klinische Untersuchungen zeigen, daß bei vielen Patienten mit Störungen der Bauchspeicheldrüse bis zu einem gewissen Umfang ein Mangel an Colipase besteht und daß die Colipase die Lipase gegen eine Inaktivierung durch Gallensalze (Natriumtaurocholat) schützt (vgl. Tabellen IV und V). In Abwesenheit von Colipase wird die Fettverdauung gestört. Deshalb besteht ein weiterer Vorteil der Enzympräparate der Erfindung gegenüber herkömmlichen Präparaten darin, daß ein wesentlicher Cofaktor (Colipase), der für die Fettverdauung notwendig ist, zur Verfügung gestellt und freigesetzt wird. Durch das vorstehend erläuterte Herstellungsverfahren bleibt die biologische Aktivität von Colipase erhalten. Der gleichmäßige, darmlösliche Überzug gewährleistet, daß die Colipase im Zwölffingerdarm in intakter und biologisch aktiver Form freigesetzt wird.

Die Beispiele erläutern die Erfindung. Sofern nichts anderes angegeben ist, beziehen sich alle Prozentangaben auf das Gewicht.

Beispiel 1

Phase 1
Pankreatisches Enzympulver (5 × N.F. Pancreatin) 67,0% Polyvinylpyrrolidon 1,3% Stärke (Sta-Rx 1500) 5,0% Natriumhydrogencarbonat (wasserfrei) 20,0% Citronensäure 6,7% 100,0%

Lösungsmittel:
Isopropanol (wasserfrei) 700 ml/kg Gemisch

Phase 2 (darmlösliche Überzugsmasse)
Chloroform 66,0% Methanol (wasserfrei) 15,4% Celluloseacetophthalat 7,2% Talcum Nr. 127 U.S.P. 7,3% FD & C Nr. 5 Yellow 1,0% Diäthylphthalat 2,7% 100,0%

Die Masse von Phase 1 wird granuliert, stranggepreßt und unter folgenden Bedingungen zu Kügelchen verarbeitet. Das Enzympulver wird mit Polyvinylpyrrolidon, Stärke (Sta-Rx 1500), Natriumhydrogencarbonat und Citronensäure in einer 7,6 Liter fassenden Pilzmühle (Pony Mixer pan) vermischt, wobei 700 ml/kg Isopropanol (wasserfrei) in 9 bis 15 Minuten langsam zugesetzt werden. Das erhaltene Gemisch wird anschließend mit einem Stokes-Extruder, Modell EXKS-1, durch Öffnungen von etwa 1 mm Durchmesser segmentiert.

Zur Herstellung von Kügelchen werden die segmentierten Teilchen mit einem "Marumerizer" zu kugelförmigen Teilchen gerundet. Die Geschwindigkeit des Geräts beträgt 430 U/min. Die Dauer des Vorgangs variiert zwischen 45 und 75 Sekunden. Längere Behandlungszeiten werden vermieden, da man dadurch zu kompakteren, dichteren Teilchen gelangt, was wiederum längere Zerfallzeiten ergibt. Die erhaltenen Kügelchen weisen eine Teilchengröße von etwa 10 bis 12 mesh (2,00 bis 1,68 mm) auf. Nach der Bildung der Kugelform wird das Lösungsmittel vom Granulat unter kontrollierten Feuchtigkeitsbedingungen, d. h. einer gewissen relativen Feuchtigkeit von 5 bis 10%, und unter kontrollierten Temperaturbedingungen, das heißt etwa 35°C, verdampft.

Das getrocknete, kugelförmige Granulat wird anschließend mit einem Überzug aus einer pH-empfindlichen, darmlöslichen Überzugsmasse mit der vorstehend angegebenen Zusammensetzung (Phase 2) in einer entsprechenden Pilzmühle, beispielsweise mit einer Vorrichtung der Firma Manesty Co., unter Verwendung von etwa 0,45 Liter Überzugslösung/kg Tabletten und etwa 0,8 Liter Überzugslösung/kg Kügelchen versehen, bis die entsprechende Filmstärke erreicht ist.

Weitere Beispiele für entsprechende Zusammensetzungen der Phase 1 sind in den nachstehenden Beispielen 2 bis 9 aufgeführt. In Beispiel 9 ist auch ein weiteres Beispiel für eine Zusammensetzung der Phase 2, das heißt der darmlöslichen Überzugsmasse angegeben, die insbesondere für eine gleichmäßige Beschichtung von Kügelchen geeignet ist.

Die in den Beispielen 2 bis 8 angegebenen Bestandteile für die Phase 1 werden in einer Mischvorrichtung mit dem angegebenen Lösungsmittel vermischt und anschließend gemäß Beispiel 1 mit einem Extruder zu Segmenten extrudiert. Anschließend werden gemäß Beispiel 1 Kügelchen mit einem darmlöslichen Überzug hergestellt.

Beispiel 2

Phase 1
Pankreatische Enzyme (5 × N.F. Pankreatin) 90,0% Polyvinylpyrrolidon K30 3,0% Avicel® (mikrokristalline Cellulose mit einem
Molekulargewicht im Bereich von 30 000 bis 50 000) 7,0% 100,0%

Lösungsmittel:
Isopropanol 675 ml/kg Gemisch.

Beispiel 3

Phase 1
Pankreatische Enzyme (5 × N.F. Pankreatin) 89,0% Polyvinylpyrrolidon K30 4,5% Sta-Rx® (Maisstärke) 6,5% 100,0%

Lösungsmittel:
Isopropanol 625 ml/kg Gemisch.

Beispiel 4

Phase 1
Pankreatische Enzyme (5 × N.F. Pankreatin) 89,0% Celluloseacetophthalat 4,5% Sta-Rx® (Maisstärke) 6,5% 100,0%

Lösungsmittel:
1 : 3-Gemisch aus Aceton und Isopropanol 700 ml/kg Gemisch.

Beispiel 5

Phase 1
Pankreatische Enzyme (5 × N.F. Pankreatin) 90,0% Polyvinylpyrrolidon K30 2,0% Methocel® 65 HG 1,0% Natriumcarbonat (wasserfrei) 4,0% Citronensäure (wasserfrei) 3,0% 100,0%

Lösungsmittel:
Isopropanol 650 bis 657 ml/kg Gemisch.

Beispiel 6

Phase 1
Pankreatische Enzyme (5 × N.F. Pankreatin) 90,0% Methocel® 65 HG 1,0% Natriumcarbonat (wasserfrei) 4,0% Citronensäure (wasserfrei) 3,0% Polyvinylpyrrolidon K30 2,0% 100,0%

Lösungsmittel:
Isopropanol 650 bis 700 ml/kg Gemisch.

Die Citronensäure und das Polyvinylpyrrolidon werden vor der Zugabe zum vorstehenden Gemisch separat in 500 ml Isopropanol gelöst.

Beispiel 7

Phase 1
Lactase aus Hefe 83,0% Methocel® 65 HG 2,0% Sta-Rx® (modifizierte Maisstärke) 15,0% 100,0%

Lösungsmittel:
Isopropanol 675 bis 725 ml/kg Gemisch.

Beispiel 8

Phase 1
Enzymgemisch*) 87,0% Methocel® 65 HG 2,0% Polyvinylpyrrolidon K30 4,0% Natriumcarbonat oder -hydrogencarbonat 4,0% Citronensäure (wasserfrei) 3,0% 100,0%

Lösungsmittel:
Isopropanol 650 bis 750 ml/kg Gemisch

*)Zusammensetzung des Enzymgemisches: Papain, Ficin, Bromelain (pflanzliche Enzyme); Lipase, Cellulase, Protease, Amylase und Lactase (Mikroorganismenenzyme).

Beispiel 9 Kügelchen nach dem Verfahren mit ungleichartigen Keimen

Phase 1
Pankreatische Enzyme (5 × N.F. Pankreatin) 85,5% Polyvinylpyrrolidon K30 1,0% Primojel (modifizierte Kartoffelstärke) 3,5% ungleichartige Keime
(Zuckerkeime mit 20 bis 30 mesh,
lichte Maschenweite 0,841 bis 0,595 mm) 10,0% 100,0%

Lösungsmittel:
Isopropanol 675 bis 725 ml/kg Gemisch.

Die Phase 1 wird gemäß dem vorstehend beschriebenen Verfahren mit ungleichartigen Keimen verarbeitet. Der darmlösliche Überzug wird auf die vorstehend beschriebene Weise unter Verwendung der Phase 2, deren Zusammensetzung nachstehend angegeben ist, hergestellt. Es wird ein gleichmäßiger Überzug mit einem Gewicht von etwa 5,5 Gewichtsprozent, bezogen auf die fertigen Kügelchen, gebildet.

Phase 2 (Zusammensetzung des darmlöslichen Überzugs)
Celluloseacetophthalat 8,0% Diäthylphthalat 2,0 Essigsäureäthylester 45,0 Isopropanol 45,0% 100,0%

Die erhaltenen Kügelchen werden gesiebt. Man erhält etwa 90 Gewichtsprozent Kügelchen im Bereich von 10 bis 12 mesh (lichte Maschenweite 2,00 bis 1,68 mm).

Tabelle I

Geschwindigkeit der Enzymfreisetzung aus Kügelchen*) in den Zwölffingerdarmsaft nach Einwirkung von Magensaft

Tabelle II

Verträglichkeit von 5 × N.F. Pankreatin-Enzymen mit Lösungsmitteln*)

Tabelle III

Zerfall von exogen verabfolgten Kügelchen von Beispiel 1 im menschlichen Zwölffingerdarm

Tabelle IV

Mangel an Colipase im menschlichen Zwölffingerdarmsaft

Tabelle V

Aktivierung von menschlicher Lipase bei einem Mangel an Colipase durch Zusatz der Kügelchen von Beispiel 1

Die vorstehenden Erläuterungen beziehen sich hauptsächlich auf eine bevorzugte Enzymkonzentration für Patienten mit einem Mangel an pankreatischen Enzymen. Die erfindungsgemäßen Enzympräparate können jedoch zur Ergänzung und zur Substitution von beliebigen Enzymen verwendet werden.

Claims

1. Oral applizierbares Enzympräparat mit magensaftresistentem Überzug, enthaltend

(a) ein Konzentrat eines Enzyms aus der Reihe pankreatische Proteasen, Lipasen, Nucleasen und Amylasen und Enzyme pflanzlichen und mikrobiellen Ursprungs in einem
(b) Bindemittelsystem, das etwa 0,5 bis etwa 10 Gewichtsprozent (bezogen auf das Gesamtgewicht aus Bindemittelsystem und Enzymen) eines Bindemittels aus der Reihe Polyvinylpyrrolidon, mikrokristalline Cellulose, Celluloseacetophthalat, Methylcellulose und Alginsäure enthält,
(c) etwa 0,1 bis etwa 30 Gewichtsprozent, bezogen auf das Gesamtgewicht aus Enzymen, Bindemittelsystem und Sprengmittel, eines Sprengmittels aus der Reihe Citronensäure, Natriumcarbonat, Natriumhydrogencarbonat, Stärke und modifizierte Stärken, und gegebenenfalls
(d) 0 bis 10 Gewichtsprozent eines Stabilisators aus der Reihe Calciumcarbonat, Polyvinylpyrrolidon, Celluloseacetophthalat, Methylcellulose, Stärke und modifizierte Stärken,

dadurch gekennzeichnet, daß es in Form von Kügelchen mit einer durchschnittlichen Größe im Bereich von 8 bis 14 mesh (entspricht einer lichten Maschenweite von 2,38 bis 1,41 mm nach US-Standardsieb Nr. 8-14) vorliegt, wobei die Masse aus Enzym, Bindemittel, Sprengmittel und gegebenenfalls Stabilisator mit mindestens 3 Gewichtsprozent, bezogen auf das Gesamtgewicht aus Enzym, Bindemittel, Sprengmittel und gegebenenfalls Stabilisator, eines nicht-porösen, pharmakologisch verträglichen, darmlöslichen Überzugs versehen ist, der im pH-Bereich von 1,5 bis etwa 5 unlöslich und im pH-Bereich von 6,5 bis etwa 9 löslich ist, wobei der fertige Überzug mindestens 2 Stunden den Bedingungen im Säugetiermagen widerstehen kann, sich im Darmsaft von Säugetieren aber innerhalb von etwa 5 bis etwa 30 Minuten löst.

2. Enzympräparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Menge des darmlöslichen Überzugs 4,5 bis 6,5 Gewichtsprozent des Präparats beträgt.

3. Enzympräparat nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß es in einer im Magensaft löslichen Kapsel mit einem Gehalt an etwa 100 bis etwa 600 mg der Kügelchen vorliegt.

4. Verfahren zur Herstellung des Enzympräparates nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man das Enzymkonzentrat mit dem Bindemittel, dem Sprengmittel und gegebenenfalls dem Stabilisator vermischt, anschließend in einem Lösungsmittel aus der Reihe Isopropanol, Methylenchlorid, Dioxan, Tetrahydrofuran und Aceton zu Kügelchen granuliert und den darmlöslichen Überzug auf die Kügelchen durch Aufsprühen von Lösungen mit fortschreitend geringeren Konzentrationen an der darmlöslichen Überzugsmasse aufbringt.

5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man das Bindemittel, das Sprengmittel und gegebenenfalls den Stabilisator zunächst in dem Lösungsmittel löst und die erhaltene Lösung anschließend langsam dem Enzymkonzentrat zusetzt.

6. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man als Lösungsmittel Isopropanol verwendet.

7. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Lösung der darmlöslichen Überzugsmasse verwendet, die Celluloseacetophthalat und Diäthylphthalat in mindestens einem Lösungsmittel aus der Reihe Aceton, Methyläthylketon, Diacetonalkohol, Äthylenglykolmonoacetat, Äthanol, Chloroform, Methanol, Isopropanol, Essigsäureäthylester Methylenchlorid und Benzol enthält.

8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß man als Lösungsmittel ein Gemisch aus gleichen Volumenteilen Chloroform und Methanol oder Isopropanol und Essigsäureäthylester verwendet.