DE2605910A1

DE2605910A1 - 6- eckige klammer auf d-2-(3-hydroxypyridazin-4-carbonamido)-2-(p-hydroxyphenyl)-acetamido eckige klammer zu -penicillansaeure, verfahren zu ihrer herstellung und arzneimittel

Info

Publication number: DE2605910A1
Application number: DE19762605910
Authority: DE
Inventors: Yasuko Eda; Kenji Irie; Akio Izawa; Toshiaki Komatsu; Takenari Nakagome; Hiroshi Noguchi; Kosaku Okamura; Kozo Shimago; Norihiko Tanno; Hisao Tobiki; Hirotada Yamada
Original assignee: Sumitomo Chemical Co Ltd
Current assignee: Sumitomo Chemical Co Ltd
Priority date: 1975-02-14
Filing date: 1976-02-13
Publication date: 1976-08-26
Also published as: DK144973B; BE838545R; CA1067893A; PL99090B1; DK60976A; CS191999B2; ZA76850B; MX3890E; FR2300565A2; CH611625A5; ES445176A1; US4046904A; AU1114676A; AR211922A1; ES458790A1; DK144973C; AR211935A1; AT343805B; SE7601640L; DD123607A5

Description

" 6-/D-2- (3-Hydroxypyridazin-4-carlDonamido )-2- (p-hydroxyphenyl) acetamidoZ-penicillansäure, Verfahren zu ihrer Herstellung und Arzneimittel "

Priorität: 14. Februar 1975, Japan, Nr. 19 O4o/1975

Bekanntlich ist Ampicillin ein wirksames Antibiotikum zur Behandlung von Infektionskrankheiten, die durch gram-positive oder gram-negative Bakterien verursacht werden. Seine Wirksamkeit gegen Pseudomonas ist jedoch nicht sehr hoch. Zur Behandlung von durch Mikroorganismen der Gattung Pseudomonas verursachten Infektionen werden seit kurzem einige halbsynthetische Penicilline, wie Carbenicillin und Sulfocillin, verwendet. Ihre Wirkung gegen Pseudomonas ist jedoch ebenfalls nicht ausreichend stark. In der US-PS 3 864 329, JA-OS 92 391/1973 und DT-OS 2 362 279 sind einige Penicilline mit guten antibakteriellen Eigenschaften gegen gram-positive und gram-negative Bakterien einschließlich Pseudomonas beschrieben.

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Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein halbsynthetisches Penicillin mit "breitem antibio ti schein ¥irkungssp ektrum und hoher Wirksamkeit gegen gram-positive und gram-negative Bakterien, insbesondere gegen Bakterien der Gattung Pseudomonas, zu schaffen. Diese Aufgabe wird durch die Erfindung gelöst.

Die Erfindung betrifft somit den in den Ansprüchen gekennzeichneten Gegenstand.

Nach eingehenden Untersuchungen wurde festgestellt, daß die 6-/D-2- (3-Hydroxypyridazin«4-=car bonamido)-2- (p-hydroxyphenyl)-acetamido/-penicillansäure der allgemeinen Formel I

OH

eine starke antibakterielle Wirkung mit wertvollen pharmakologischen Eigenschaften zeigt. Diese Penicillansäure ist ein wertvoller Arzneistoff mit antibakterieller Aktivität.

Obwohl die Verbindung der Erfindung in ihrer Struktur den Penicillinen ähnelt, die in den vorstehenden Patentschriften beschrieben sind, ist ihre antibakterielle Aktivität bei in vitro- und in vivo-Untersuchungen viel stärker und ihre pharmakokinetischen Eigenschaften wertvoller als die der vorstehend erwähnten Penicilline. Beispielsweise weist die Verbindung der Erfindung eine viel stärkere antibakterielle Aktivität bei in

^L 609835/1037

~³~ 26059 1 Ü

vitro- und in vivo-Untersuchungen gegen verschiedene pathogene Mikroorganismen auf als die 6-/D-2-(4-Hydroxypyridin-3-carbon~ amido)-2-(p-hydroxyphenyl)-acetamidq7-penicillansäure und die 6-/D-2- ( 3-Hydroxypyridazin-4-carbonamido ) -2-phenylacetamidq/-penicillansäure, die in der JA-OS 92 391/1973 beschrieben sind. Die Verbindung der Erfindung zeigt eine niedrigere Toxizität, ein breites antibakterielles WirkungsSpektrum_? höhere Konzentrationen im Serum, eine höhere Ausscheidungsrate im Urin, ein niedrigeres Proteinbindungsverhältnis, schwächere Schmerzverursachung bei parenteraler Verabreichung und höhere Löslichkeit in Verdünnungsmitteln, wie Wasser.

Erfindungsgemäß sind die 6-/D-2-(3-Hydroxypyridazin-4-carbonaraido)-2-(p-hydroxyphenyl)-acetamidq7-penicillansäure und ihre Salze mit Säuren wertvolle antibakterielle Arzneistoffe, Zusatznährstoffe in Tierfutter und Chemotherapeutika für Geflügel und Warmblüter, insbesondere zur Behandlung von Infektionskrankheiten, die durch gram-positive und gram-negative Bakterien verursacht wurden.

Als Salze der Verbindung der Formel I kommen anorganische Salze, wie das Natrium-, Kalium-, Ammonium-, Calcium- und Magnesiumsalz, oder organische Salze, beispielsweise von Diäthylamin, Triäthylamin, Ν,Ν'-Dibenzyläthylendiamin, Diäthanolamin, Pyrrolidin, Morpholin, Procain, L-Arginin und L-Lysin, in Frage.

Die Verbindung der·Erfindung kann in an sich bekannter-Weise, beispielsweise durch Umsetzung der im folgenden Reaktionsschema

_Laufgeführten Verbindungen oder ihrer Derivate hergestellt werdenj.

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260591Ü

COOH

H₂N-CH-CONH-

/ VCH-

-N-

(II)

(III)

CONH-CH-CONH-

cOOH

-CH-COOH

,N-

(IV)

(V)

^CH3 -COOH

(I)

CH

^CH3

COOH

Die Umsetzung der Carbonsäure der Formel II oder ihrer Derivate mit dem Amin der Formel III oder seinen Derivaten v/ird gewöhnlich in einem inerten Lösungsmittel, wie einem polaren Lösungsmittel, beispielsweise Methylenchlorid, Chloroform, Aceton, Tetrahydrofuran, Dioxan, Acetonitril, Methylisobutylketon, Äthanol, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Dimethylsulfoxid,

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^Γ _ 5 - 2 6 ο 5 y ί υ ^π

Sulfolan oder Hexamethylphosphorsäuretriamid, einem nichtpolaren Lösungsmittel, beispielsweise Benzol, Toluol, Petroläther oder η-Hexan, oder ihren Gemischen durchgeführt. In einigen Fällen kann auch ein wäßriges Medium verwendet werden. Die Reaktionstemperatur ist nicht kritisch. Sie kann gewöhnlich unter 50⁰C liegen.

Spezielle Beispiele für reaktionsfähige Derivate der Carbonsäure der Formel II sind Säurehalogenide, Säureanhydride, gemischte Säureanhydride, Säureazolide, Säureazide und aktive Ester. Spezielle Beispiele für Säureazolide sind solche, die aus Imidazol, substituierten Imidazolen, Dimethylpyrazol, Triazol und Tetrazol hergestellt werden. Spezielle Beispiele für aktive Ester sind Cyanomethylester, p-Nitrophenylester, 2,4-Dinitrophenyles ter, Trichlorphenylester, Pentachlorphenylester, Methan« sulfonylester, 1-Hydroxy-2(1H)-pyridon, N-HydroxysucciniiPid und N-Hydroxydiphthalimi d.

Wenn die Carbonsäure der Formel II in Form der freien Säure eingesetzt wird, wird die Amidierung mit dem Ämin der Formel III oder seinen Derivaten vorzugsweise in Gegenwart eines Kupplers, wie NjN'-Dicyclohexylcarbodiimid, N-Cyclohexyl-N'-morpho« linoäthylcarbodiimid, Triphenylphosphin, 2-Äthyl-5- (m-sulfonyl)-isoxazoliumhydroxid (inneres Salz) oder Carbonyldiimidazol, durchgeführt.

Die Herstellung des gemischten Säureanhydrids für die Aktivierung der Carbonsäure der Formel II erfolgt vorzugsweise nach

L . -I

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folgendem Verfahren:

Ein Mol der Carbonsäure der Formel II wird mit etwa 2 Mol eines nieder-Alkoxycarbonylhalogenids, beispielsweise Chlorameisensäureäthylester oder Chlorameisensäureisobutylester, oder eines nieder-Alkanoylhalogenids,wie Pivaloylchlorid, in Gegenwart von etwa 2 Mol einer Base zu dem gemischten Säureanhydrid der allgemeinen Formel II¹

OE

COOZ

in der Z einen Acylrest oder eine nieder-Alkoxycarbonylgruppe darstellt, umgesetzt»

Die Amidierung des gemischten Säureanhydrid der allgemeinen Formel II¹ mit der Verbindung der allgemeinen Formel III liefert eine Verbindung der allgemeinen Formel I¹

OH

in der Z die vorstehende Bedeutung hat. Die Verbindung der allgemeinen Formel I^f kann durch Umsetzung mit einer organischen oder anorganischen Base, wie Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat, Natriumhydroxid, wäßriger Ammoniaklösung, Triäthylamin, Dirnethylamin oder Kalium-2-äthylhexarioat, in die Penicillansäure

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der Formel I überführt werden. Die Umsetzung kann auch unter sauren Bedingungen durchgeführt werden; jedoch sind alkalische Bedingungen gewöhnlich bevorzugt.

Als Derivate des Amins der Formel III kommen die Salze, Ester oder deren N-substituierte Verbindungen in Frage. Spezielle Beispiele für die Salze sind die Alkalimetallsalze, wie die Natrium- und Kaliumsalze, die Erdalkalimetallsalze, wie die Calcium- und Bariumsalze, oder Salze, die sich von organischen Basen, wie Trimethylamin und Triethylamin, oder organischen SuIfon« säuren, wie Toluolsulfonsäure, Naphthalinsulfonsäure oder Tetrahydronaphthalinsulfonsäure, ableiten. Beispiele für die Ester und N-substituierten Verbindungen sind nachstehend wiedergegeben:

.S,

H₂N-QH-CONH-

R₆ —SiNH-CH-CONH /

H₂N-CH-CONH

609835M037

26059 1 Ο

HO-

CH-CO

NH Ν

h ^R5

H₂N-CH-CONH-

At

^R4 ^R5

^H0 \ V^CH"9°

NH N '

¹CH-

^CH3 -COOH

ch:

•R,

¹³ /

-COOS i—R

ch:

i__: L-COON=CHR₆, etc,

R₁, R₂ und Κ-* bedeuten jeweils niedere Alkyl- oder niedere AIkoxyreste, R^ und Rc bedeuten jeweils niedere Alkyl- und Rg bedeutet einen niederen Alkyl- oder Arylrest oder einen heterocyclischen Ring. ^r ·

Weitere Beispiele für den Esterteil in den Estern des Amins der Formel III sind Toluolsulfonyläthylester, p-Nitrobenzylester, Benzylester, Phenacylestej¹, Diphenylmethylester, substituierte Diphenylmethylester, Trib/1ester, Benzoyloxymethyl» ester, nieder-Alkanoyloxymethylester, Dimethylmethylenaminoester, p-Nitrophenylester, Methyj.sulfonylphenylester, Methyl-

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r 26059 Ί 0 π

thiophenylester, tert.-Butylester, 3,5-Di-tert.-butyl-4-hydroxybenzylester und Trichloräthylester. Diese Ester werden üblicherweise als Schutzgruppe für den Carbonsäurerest eingesetzt. Diese Ester, die sich beispielsweise von organischen Sulfonsäuren, wie Toluolsulfonsäure und Tetrahydronaphthalinsulfonsäure, ableiten, können auch in Form ihrer Salze eingesetzt werden.

Nach dem Amidieren mit der Carbonsäure der Formel II oder ihren Derivaten kann der Esterteil in an sich bekannter Weise abgespalten werden, beispielsweise durch Reduktion oder Hydrolyse unter so milden Bedingungen, daß der ß-Laetamring des Penicil» lingerüsts nicht angegriffen wird.

Die Umsetzung der Carbonsäure der Formel IV oder ihrer Derivate mit dem Ämin der Formel V oder seinen Derivaten kann in ähnlicher Weise wie die Umsetzung der Carbonsäure der Formel II oder ihrer Derivate mit dem Amin der Formel III oder seinen Derivaten durchgeführt werden.

Zur Behandlung von Infektionskrankheiten in Warmblütern kann die Verbindung der Erfindung durch intramuskuläre oder intravenöse Injektion oder orale Verabreichung mit einer Tagesdosis von 300 mg bis 20 g in unterteilter Dosierung, beispielsweise 3 bis 4mal täglich, verabreicht werden.

Die Verbindung der Erfindung kann in üblichen Dosierungseinheiten beispielsweise' in Lösungen, Dispersionen, Emulsionen, Pudern, Tabletten oder Kapseln, in an sich bekannter Weise zu Arz-, neimitteln verarbeitet werden. _l

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- 10 -

Die Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1

Eine Lösung von 8,0 g 6-(D-a-Amino-a-p-hydroxyphenylacetainido)-penicillansäure-trihydrat und 2,02 g Triäthylamin in 40 ml Dimethylformamid wird unter Rühren bei Raumtemperatur mit 5,48 g 3-Hydroxypyridazin-4-carbonsäure~p»nitrophenylester versetzt. Das Gemisch wird bei der gleichen Temperatur 40 Minuten weiter gerührt. Danach wird das Reaktionsgemisch mit 3,16 g Natrium-2-äthylhexanoat versetzt und weitere 15 Minuten gerührt. Eine geringe Menge von nichtgelösten Bestandteilen wird abfiltriert. Das Filtrat wird mit 200 ml Methylenchlorid und 200 ml Aceton versetzt. Die ausgefällten Kristalle werden abfiltriert, nacheinander mit Methylenchlorid, Aceton und Diäthyläther gewaschen und anschließend über Phosphorp ent oxid unter vermindertem Druck getrocknet. Ausbeute 9,0 g des Natriumsalzes der 6-/D-2-(3-Hydroxypyridazin-4-carbonamido) -2- (p-hydroxyphenyl) -acetamido/-penicillansäure vom F. 218 bis 220°C (Zers.).

Beispiel 2

100 bis 200 mg des Natriumsalzes der 6-/T)-2-(3-Hydroxypyridazin-4-carbonamido )-2- (p-hydroxyphenyl )-acetamidq/-penicillansäure werden in Pulverform aseptisch in eine Glasampulle eingefüllt, die anschließend zugeschmolzen wird. Zur Verwendung wird das Penicillin in einer bestimmten Menge an sterilem Wasser gelöst, das keine Pyrogensubstanzen enthält. Die erhaltene Lösung wird als Injektionspräparat verabreicht.

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2605-31 Ü

Die antibakterielle Aktivität von 6-/D-2-(3-Hydroxypyridazin-4-carbonamido)-Z-(p-hydroxyphenyl)-acetamidoZ-penicillansäure (nachstehend als Verbindung I bezeichnet) bei in vitro- und in vivo-Untersuchungen gegen mehrere Mikroorganismen wird mit der von 6-/5-2-(4-Hydroxypyridin-3-carbonamido)-2-(p-hydroxyphenyl)· acetamido7-penicillansäure (nachstehend als Verbindung A bezeichnet) der Formel

N'

CONH-CH-CONH

(Λ)

COOH

die in JA-OS 92 391/1973 beschrieben ist, und mit der von 6-/b-2-(3 -Hydroxypyridin-4-carbonamido)-2-phenylacetamido/-penicillansäure (nachstehend als Verbindung B bezeichnet) der Formel

ONH-CH-CONH-

.N.

\^CH3 ^CH3 -COOH

verglichen.

Die Mittelwerte der minimalen Hemmkonzentration (MHK), die mit den Verbindungen I und A gegen 170 von stationär behandelten Patienten erhaltene Bakterien!solate von 8 Bakteriengattungen bestimmt wurden, sind in Tabelle I zusammengefaßt. Hinsichtlich der antibakteriellen Aktivität ist die Verbindung I der Verbindung A überlegen, insbesondere gegen Mikroorganismen, wie Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Proteus morganii, Enterobacter aerogenes und Serratia.

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2605-91Ü -,

- 12 Tabelle I

Mikroorganismus

Zahl der Isolate

Mittlere minimale Hemmkonzentration (MHK) , fug/m])

Verbindung
I

Verbindung A

Staphylococcus aureus Escherichia coli
Klebsielle pneumoniae Proteus vulgaris
Proteus morganii
Enterobacter aerogenes Scrratia
Pseudomonas aeruginosa

37

23

26

14

49

13

12

21
8,8
4,4

25

31

10

21

14

73

115

50

100

>200

Anmerkung:

Die Verbindungen I und A wurden in Form der Natriumsalze verwendet. Die minimale Hemmkonzentration wurde nach der Agarplatten-Verdünnungsmethode bestimmt, die von der Japan Society of Chemotherapy empfohlen wird;

Die relativen Aktivitäten der Verbindungen I, A und B gegen verschiedene intraperitoneale Infektionen an Mäusen, die an Hand der minimalen Hemmkonzentrationen (MHIi) und der mittleren Schutzdosen (EDc₀) bei subkutaner Verabreichung ausgewertet wurden, sind in Tabelle II zusammengefaßt. Aus Tabelle II ist ersichtlich, daß die Verbindung I hinsichtlich ihrer ED(-Q-Werte den Verbindungen A und B, insbesondere gegen Mikroorganismen der Gattung Klebsiella pneumoniae und Pseudomonas aeruginosa deutlich überlegen ist.

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- 13
Tabelle II

260591Ü

Mikroorganismus	Stamm	]	Ver	^HK (pg/ml^	Ver	ED	₅₀ (mg/ml)	Ver
	IiL .	bin	Ver	bin	Ver	Ver	bin
		dung	bin	dung	bin	bin	dung
		I	dung	B	dung	dung	B
		12,5	A	12,5	I	Λ	57
Eschorichia coli	37	6,25	12,5	12,5	31	_	-
Escherichia coli	NIHJ	12,5	12,5	12,5	3,2	3,0	71
KIebsiella	20		100		31	>150
pneumoniae		25		25			50
Klebsiella	6		100		36	120
pneumoniae		6,25		12,5			-
Klebsieila	1		3,13		25	100
pneumoniae		25		12,5			160
Pseudoiaonas	T		12,5		35	51
aeruginosa		12,5		12,5			180
Pseudomonas	NC-5		6,25		22	60
aeruginosa .

Anmerkung^.

Die Verbindungen 1, A und B wurden in Form der Natriumsalze verwendet. Für jeden Test wurden 8 männliche Mäuse vom Stamm ICR-SLC für jeden Dosisspiegel verwendet. Die minimale Hemmkonzentration wurde nach der Nährbrüheverdünnungsmethode bestimmt. Zur Bestimmung der ED^Q-Werte wurde eine subkutane Behandlung zweimal, d.h. 1 und 4 Stunden nach der Infizierung durchgeführt.

Die antibakteriellen Eigenschaften bei in vitro- und in vivo-Untersuchungen ein einigen Mikroorganismen und pharmakokinetischen Profile der Verbindung I werden mit denen der 6-/Ö-2-(4-Hydroxy-1,5-naphthylidin-3-carbonamido)-Z-(p-hydroxyphenyl)-acetamidoZ-penicillansäure, die in der DT-OS 2 362 279 be-

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schrieben ist (Verbindung C), der Formel

CONH-CH-CONH-

₃
CH3 (C) !

COOH !

verglichen.

Es werden die in Tabelle III zusammengefaßten minimalen Hemmkonzentrationen mit den Verbindungen I und C gegen folgende Mikroorganismen von 6 Gattungen erhalten;

Tabelle III

Mikroorganismus	Stamm Nr.	MHK (pg/ml)	Verbindung C
Staphylococcus aureus Escherichia coli Proteus mirabilis Proteus vulgaris Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa	209P NIHJ GN2425 HXI9 PCI602 104	Verbindung I	0,78 1,56 1,56 0,025 12,5 1,56
0,39 6,25 6,25 0,025 12,5 1,56

Anmerkung:

Die Verbindungen I und C wurden in Form der Natriumsalze verwendet.

Aus der Tabelle III ist ersichtlich, daß die Verbindung I der Verbindung C hinsichtlich ihrer bakteriellen Aktivität gegenüber Mikroorganismen, wie Staphylococcus aureus, überlegen, aber gegen Mikroorganismen, wie Escherichia coli und

609835/10 3 7

260591Ü

Proteus mirabilis, unterlegen ist.

Die mittleren Hemmkonzentrationen, die mit den Verbindungen I und C gegenüber 60 von stationär behandelten Patienten erhaltenen Bakterienisolaten von zwei Stämmen bestimmt wurden, sind in Tabelle IV zusammengefaßt. Danach ist die Verbindung I der Verbindung C hinsichtlich ihrer antibakteriellen Aktivität gegenüber Mikroorganismen, wie Staphylococcus aureus und Streptococcus faecalis, überlegen.

Tabelle IV

Mikro organi smus	Zahl der Isolate	MHJC (μκ/ml)	Verbindung C
Staphylococcus aureus Streptococcus faecalis	• 37 23	Verbindung I	60 3,8
15 2,0

Anmerkung;:

Die Verbindungen I und C vmrden in Form der Natriumsalze ver wendet. Die mittlere Hemmkonzentration wurde nach der Agar-Plattenverdünnungsmethode bestimmt.

Die relativen Aktivitäten der Verbindungen I und C gegen verschiedene intraperitoneale Infektionen an Mäusen, die anhand der minimalen Hemmkonzentration (MHIi) und der mittleren Schutzdosen (ED^₀) bei subkutaner Verabreichung ausgewertet wurden, sind in Tabelle V zusammengefaßt. ·

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- 16 Tabelle V

260591Ü · π

Mikroorganismus	Stamm Nr.	MHK (jug/ml)	Verbin dung C	ED₅₀ (mg/kg)	Verbin dung C
Staphylococcus aureus Streptococcus faecalis Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa	A24 F10 1 TS	Verbin dung I	1,56 1,56 6,25 3,13	Verbin dung I	32 6 18 15
0,39 1,56 6,25 6,25	2,0 1,1 16 22

Anmerkung:

Die Verbindungen I und C wurden in Form der Natriumsalze verwendet. Für jeden Test wurden 5 männliche Mäuse vom Stamm ICR-SLC für jeden Dosisspiegel verwendet. Die minimale Hemmkonzentration wurde nach der Nährbrüheiiverdünnungsmethode be-' stimmt. Zur Bestimmung der ED^Q-Werte wurde eine subkutane Behandlung dreimal, das heißt 1,3 und 5 Stunden nach der Infizierung durchgeführt.

Nach den in Tabelle V gezeigten ED^-Werten ist die Verbindung I der Verbindung C gegenüber Mikroorganismen, wie Staphylococcus aureus und Streptococcus faecalis erheblich überlegen, ungefähr gleich gegen Klebsielle pneumoniae, gegenüber Pseudomonas aeruginosa aber unterlegen.

Die folgenden Ergebnisse beziehen sich auf die pharmakokinetischen Profile der Verbindung I gegenüber der Verbindung C.

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260 59IU π

- 17 -

Die Proteinbindungsverhältnisse an Serum von Menschen der Verbindungen I und C sind in Tabelle VI zusammengefaßt. Danach hat die Verbindung I ein niedrigeres Proteinbindungsverhältnis als die Verbindung C. Die Verbindung I v/ird außerdem weniger im Serum inaktiviert.

Tabelle VI

Verbin dung	Bindingsverhältnis an Serum vom Mensch, %	Ultrazentrifugations- raethode
(D (C). . .	Ultrafiltrations methode	60 92
58 90 ........

Anmerkung^

Die Verbindungen I und C wurden in Form der Natriumsalze verwendet.

Die Höchstkonzentrationen der Verbindungen I und c im Serum von Mäusen des Stammes ICR bei subkutaner Verabfolgung von 50 mg/kg sind in Tabelle VII zusammengefaßt.

Tabelle VII

Verbindung	Serumspie_f~el (μ^/rnl)	1/4 Std.	1/2 Std.	1 Std.	2 Std.
(D (C)	69 44	35 32	14 8	3 5

Anmerkung:

Die Verbindungen I und C wurden in Form der Natriumsalze verwendet. Für den Test wurden 3 männliche Mäuse vom Stamm

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ICR-SLC verwendet. Die "biologische Bestimmung wurde nach der Disc-Methode mit Bacillus subtilis durchgeführt.

Die Ausscheidungsraten der Verbindungen I und C nach intramuskulärer Verabreichung von 20 mg/kg an männlichen Ratten vom Stamm Wistar-HLA sind in Tabelle VIII zusammengefaßt.

Tabelle VIII

Verbindung	Ausscheidungsrate aus Urin (^)	0-6 Std.	6-24 Std.	0 - 24 Std,
(D (C)	54 19,5	1,0 0,5	55 20

Anmerkung:

Die Verbindungen I und C wurden in Form der Natriumsalze verwendet.

Die akute Toxizität der Verbindungen I und C an Mäusen vom Stamm ICR bei intraperitonealer Verabreichung sind in Tabelle ^IX zusammengefaßt.

Tabelle

. Verbindung.. //.	LD₅₀ (mg/kg)
(D (C) ........	7100 3100

Anmerkung;

Die Verbindungen I und C wurden in Form der Natriumsalze verwendet.

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■ - iy - . 2605U 1 Ü

Nach den gezeigten Ergebnissen v/eist die Verbindung I hervorragende Eigenschaften als Chemotherapeutikum auf. Der höhere Serumspiegel und die höhere Wiedergewinnungsrate der Verbindung I aus Urin gestatten einen höheren Schutz bei der Behandlung verschiedener Infektionskrankheiten, einschließlich Infektionen der Harnwege, die durch gram-positive und gram-negative Bakterien verursacht werden.

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Claims

260591Ü

Patentansprüche

t/ 6-/D-2-(3-Hydroxypyridazin~4-carbonamido)-2-(p-hydroxyphenyl)-acetamido7-penicillansäure der Formel I

.CONH-CH-CONH-

-N-

COOH

OH

und ihre Salze mit Basen.
2. Verfahren zur Herstellung der Verbindung der Formel I und ihrer Salze, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise
(a) eine Verbindung der Formel II

OH

.COOH (II)

oder ihr reaktionsfähiges Derivat mit einer Verbindung der Formel III

H₂N-CH-CONH-

^CH

(in)

-N-

-COOH j

OH

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--21 -

oder ihrem reaktionsfähigen Derivat oder (b) eine Verbindung der Formel IV

ONH-CH-COOH

(IV)

OH

oder ihr reaktionsfähiges Derivat mit einer Verbindung der Formel V

(V)

N-

COOH

oder ihrem reaktionsfähigen Derivat umsetzt.
3. Arzneimittel mit antibiotischer Aktivität, gekennzeichnet durch einen Gehalt an der Verbindung gemäß Anspruch

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ORIGINAL