DE2604196C3

DE2604196C3 - Neue Amidine und diese enthaltende Arzneimittel

Info

Publication number: DE2604196C3
Application number: DE19762604196
Authority: DE
Inventors: Klaus Dipl.- Chem. Dr. 6000 Frankfurt Hummel; Deszoe Dipl.-Chem. Dr. 6451 Hammersbach Peteri; Arthur Dr. 6380 Bad Homburg Scherm
Original assignee: Merz and Co GmbH and Co KG
Current assignee: Merz and Co GmbH and Co KG
Priority date: 1976-02-04
Filing date: 1976-02-04
Publication date: 1980-01-31
Also published as: DE2604196B2; DE2604196A1

Description

N—R₃

In der

R₁ = a) b) c) d) e)	1-A 2-N No 2-B f	CH₃ OCH, OC₂H₅ CI ,

	daman tyl, orbornyl, -born-2-en-5-yl, icycIo-(2,2,2)-octyl, :h
R₂ = H
R₃ = a)	CH₂
b)	wobei η = 3, 4, 5, 6
	H, wobei R, = die Tür b) bis e) angegebene Bedeutung besitzt oder
X =	X C
wobei
H

¹ OH NH₂ -F- CF₃

c) Adamantyl

d) Naphthalin

sowie ihre pharmazeutisch vertretbaren Salze mit organischen oder anorganischen Säuren.

2. Ar/ncimitiel mit virostatischen Eigenschaften, dadurch gckcnn/eichnet. daß sie als Wirkstoff Amidine gemäß Anspruch I oder deren pharmazcu- ;isch akzeptable Säureadditionssalze enthalten.

Die vorliegende Erfindung bcirifft neue virostatisch wirksame Amidine gemäß Anspruch I sowie Arzneimittel, die diese Verbindungen enthalten.

Die erfindiingsgemäßen Verbindungen sind neu. Die bcäiispfUchfert Vcrbifiduflgeii def öbigdti allgemeinen Formel Weisen eine höhe virostatisdhe Wirkung bei sehr geringer Toxizität auf und sind deshalb bei Menschen und Tiefen vorteilhaft anwendbar.

Aus der Literatur is( die Wirksamkeit vofl l'entaifii· din, I fexainidiri und llcplalnidm gegcts Influenza und von Stilbamidin gegen Mumpsvirefi bekannt (vgl, M, D.

R₁-C

NH

NR₃
R,

in der R], R₂ und R₃ die im Anspruch „-^gegebene Bedeutung besitzen, ein breites antivirales Wirkungsspektrum vor allem gegen Influenza, Herpes, Vaccine, Rhino usw. aufweisen. Außerdem sind die erfindungsgemaßen Verbindungen im Vergleich zu den Verbindungen der obengenannten DE-OS weit weniger toxisch, was ebenfalls als Vorteil angesehen werden kann.

Wie durch in vitro Untersuchungen in Plaque-Reduk-

2ΐ tionstests unter Verwendung verschiedener Viren festgestellt wurde, triit eine Wachstumshemmung bei Ι-ΙΟΟμ/mi ein. Aufgrund der niedrigen Toxizität können die erfindungsgemäßen Substanzen vor allem als wirksame Prophylaktika gegen Grippe verwendet

JO werden. Die Tagesdosis für Erwachsene beträgt während der Zeit der Erkrankung 50 -200 mg Wirkstoff täglich.

Die Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen, bzw. ihrer ph.i inazeutisch vertretbaren Salze.

is kann parenteral, z. B. subkutan, intravenös, intramuskulär und intraperiioneal erfolgen. In diesem Falle stellen die Trägersubstanzen sterile F'lüssigkeilen dar, wie Wasser oder Öl. wobei pflanzliche, tierische oder synthetische Öle eingeset/i werden können. Für Injektionslösungen dienen gewöhnlich Glucoselösun gen. Die flüssigen Trager der injizierbaren Lösungen enthalten im allgemeinen 0.5 -25 Gew -% ;in Wirksub stanz.

Mit gleichem Erfolg können die erfindiingsgemäßen

4'> Verbindungen oral verabreicht werden. Ebenso eignen sich die Verbindungen besonders gegen virale Pneumo men in Form von Dampf oder Spray zur Behandlung der Mund- und Nasengänge

Für die orale Verabreichung komrr : π in erster linie Zusammensetzungen m '!ableiten-. Kapsel oder PuI vorform, als Losungen. Suspensionen oder Elixier in Betrachi Der aktive Bestandteil beträgt in diesen Verabreichungen wenigstens 7 Gew .-%. bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung

« Als Träger fur die erhndungsgemaßcn. aktiven Bestandteile dienen feste oder flüssige Träger, wie sie üblicherweise bei Ar/ncifoimen eingesetzt werden.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung:

6Q Methode A

I, Darstellung. Von CycIohexyl'N^p-Chlor-phcnyl)-' amidin

i,0 g Cyclohcxaneafbohtlril, 3,8 g p-Chloranilin und 6ί 43 g wasserfreies AICI) werden gemischt und unter Feuchligkcilsausschlilß 2 Stunden auf 2lO"C erhitzt, Die etwas abgekühlte Schmelze wird in 5Ö ifif angesäuertes Methanol gegossen. Die klare

Lösung wird mit dem 5fachen Volumen Wasser versetzt und dreimal ausgeäthert. Die wäßrige Phase wird mit Natronlauge auf pH = 11 eingestellt und ausgeäthert Der Ätherextrakt wird mit Kochsalzlösung gewaschen und getrockent. Dann wird mit trockenem HCI-G as das Amidinhydrochlorid gefällt, abgenutscht und getrocknet Ausbeute: 80%d.Th„Fp:231°C

Elementaranalyse:	Ber.	Gef.
	57,14 6,64 12,99	56,67 6,78 12,95
C H Cl

10

15

2. Darstellung von l-Adamantyl-N-phenylamidin

5,36 g 1-Cyanadamantan, 3,1g frisch destilliertes Anilin und 4,4 g wasserfreies Aluminiumchlorid werden gemischt und unter Feuchtigkeitsausschluß 2 Stunden auf 21O°C erhitzt. Die Aufarbeitung erfolgt wie oben angegeben.
Ausbeute: 50%d.Th„
Fp:231°C

30

Elementaranalyse.·	Ber.	Gef.
	70,23 7,91 12,20	/0.10 7,87 12,45
C H Cl

Nach der gleichen Methode werden auch folgende Verbindungen dargestellt:
a) 1 -Adamantyl-N-(p-Chlorphenyl)- Amidin Ausbeute: 60%d.Th„

Fp:295°_sub, C

Elementaranalyse:	Gef.	Gef.
Ber.	62,63 6,79	67,01 7,66
C 62,80 H 6,85	b) I · Adamantyl-N-(p-Hydroxyphenyl)-Amidin Ausbeute: 65% d. Th.. Fp:290"₂C
	Klcmcriiaranaiyse:
Bef.
C 67,58 M 7,31

■)■> 3, Darstellung
nyl)-Amidin

Methode B
von l-Adamanty!-N-(p-Äthoxyphe-

24 g 1-Cyanadamantan und 45 g Phenetidiniumtosylat werden 2'/j Stunde auf 210⁰C erhitzt. Die Schmelze wird in 250 ml Methanol gegossen und mit dem zehnfachen Volumen Wasser versetz* und dreimal ausgeäthert. Die wäßrige Phase wird mit Natronlauge auf pH = 11 eingestellt und ausgeäthert. Der Ätherextrakt wird mit Kochsalzlösung gewaschen und getrocknet. Dann wird mit trockenem HCI-Gas das Amidinhydrochlorid gefällt, abgenutscht und getrocknet
Ausbeute: 40%d.Th„
Fp:216°C

Elementaranalyse:

Ber.

Gef.

C
H

68,19
8,06

67,49
8,14

Nach der gleichen Methode werden ajch folgende Verbindungen dargestellt:
a) I ■ AdamantyI-N-(p-Methoxyphenyl)-Amidin
Ausbeute: 40% d. Th,
Fp.: 262° C

Elementaranalyse:

Ber.	Ger.	Gef.
C 67,40	65,25
H 7,80	7,75
b) 2-Norbornyl-N-(p-C'hlorphenylVAmidin
Ausbeule: 30%d.Th.,
Fp: 130" C
Elementaranalyse:
Ber.

58,96
6,31

Methode C

58,72
6.28

5. Darstellung von 2-Norbornylcarboxamidin

3,6 g 2-Norbornancarbosäurenitril wurden in 30 ml Chloroform gelöst, 1,2 ml Methanol zugegeben und unter Feuchligkei'sausschluß bei 0⁰C HCI-Gas bis zur Sättigung eingeleiiet. Nach eintägigem Stehen im Kühlschrank wurden 400 ml Älher zugegeben und das ausgefallene Produkt abgesaugt, mit Äther nachgewaschen und anschließend getrocknet. Das entstandene Produkt wurde in Iffrnl Methanol gelöst und 10 rhi lö%igi rhelhanölischc Ammöril· akiösting zugegeben. Nach dem Stehen über Nacht wurde das entsprechende Amidinhydrochlorid mit 200 nil Äther ausgefällt, abgesaugt und getrocknet.

Ausbeute:

TWod/fh.,
Fd.;24I°C

5 Elementaraiialyse:	Ger.	26 04 196	6 Elementaranalyse:	Ber.	Gef.
Ber.	54,76 8,71			55,66 7,53	55,21 7,50
C 55,03 H 8,59		C H

6. Darstellung von Cyclohexylcarboxamidin

8,2 g Cyclohexancarbonitril wurden in 50 ml abs. Methanol gelöst und unter Feuchtigkeitsausschluß bei 0°C HCI-Gas bis zur Sättigung eingeleitet. Nach eintätige.ii Stehen im Kühlschrank wurde mit 800 ml Äther gefällt, das Produkt mit Äther nachgewaschen und getrocknet. Das Iminoätherhydrochlorid wurde in 140 ml 10%iger methanolischcr Ammoniaklösung gelöst und nach dem Stehen über Nachl das Amidinhydrochlorid mit 1 ! Äther gefällt, abgesaugt und getrocknet

Ausbeute: 80%d.Th..
Fp.: 185° C

Die erfindungsgemäßen Verbindungen bes.it/en wert volle pharmakodynamische Migenschafien und können deshalb in der Human- und Tiermedizin vorteilhaft angewandt werden.

Die überlegenen virostatischen Eigenschaften von Cyclohexylcarboxamidin

Ii

(R₁ = -CM

)(CHJ.

Elementaranalyse:

Ber.

Gef.

51,69	50,32
9,23	9,16
22,6	21,8

C
II
Cl

Nach der gleichen Methode wurde auch folgende Verbindung dargestellt:

Bicyclo-[2.2.1]-hept-2-en-5-carboxamidin

Ausbeute: 20%d.Th..
Fp.: 203¹C

CH,
η = 4. R, = R, = Wasserstoff)

gegenüber 1-Aminoadamantan und 1-Adamantylcarboxamidin gehen aus in vitro Untersuchunge nach dem j Hemmhoftest und nach der Plaque-Redukiionsmethode hv.rvor.

Folgende Virusstämme wurden eingesetzt:

Influenza A2.
Vaccine-Virus,
Herpes-Virus,
Rhino-VirusTyp 14.

Bei dem Hemmhoftest werden Gewebekulturen mn den Virusstämmen Influenza und Vaccine (Küken-Vi-

i> broplasten), Parainfluenza (Affennierenzellen) und Herpes (menschliche Amnion-Zellen) in der Form infiziert, daß dichtstehende, jedoch einzelne, getrennte Plaques entstehen. Daraufhin wird die zu prüfende Substanz als l%ige Lösung (in (Wasser oder Äthanol) aufgebracht und nach dem Bebrüten der Hemmhofduchmesser bestimmt. Die erhaltenen Ergebnisse sind in der nachfolgenden Tabelle aufgeführt.

Tabelle I

Physikalische und virostatische Eigenschaften anhand des Hemmhoftests der erfindungsgemäßen Verbindungen

R₁ C

NH

N R₂

LDSO Physikalische Eigenschaften

Maus R| R? R₃

mg/kg

Formel

ber./gef.

Virosiatische Eigenschaften

Influ- Vacci- Herpes enza nia

12,-3 I-Adamantyl II p-Äthöxyphenyl 267° Ci₉H₂₇ClN₂O 68,19/67,49 8,06/8,14 +++ +++ +++

14,7 I-Adamantyl H p-Chlofpheriyi 295° Cj₇H₂₂CI₂N₂ 62,80/62,63 6,85/6,79 ++ ++ ++

subl.

35,0 NAclamantyl H p-Hydroxyphenyl 290° Ci₇H₂JCIN₂O 67,58/6', ,?i 7,31/7,66 +++ ++ +++

•Adamantyl (I p'Methoxyphenyl

Ci₈Hi₅ClN₂O 67,40/65,25 7,80/7,75 +++ ++ ++

	7	26 04 196	C ber./gef.	8	Virostatische Eigen schaften infiü- Vacci- Herpes enzu nia
LD 50 i.V. Maus mg/kg	Physikalische Eigenschaften Ri R₂ Rj	Fp Formel	55,03/54,76 57,14/56,67 51,69/50,32	H ber./gef.	+++ 0 0
58,7 88,0	2-Norbornyl H H 241° CgHisClNj Cyclohexyl H p-Chlorptienyl 231° Ci₃Hi₈CIN₂ Cyclohexyl H H C₇H₁₅ClNj Zum Vergleich l-Aminoadamanlanhydrochlorid		8,59/8,71 6,59/6,78 9,23/9,16
0	= kein llemmhof = mäßig (HH 10-20 mm) = gut (HU 20-30 mm) = sehr EUt(HII > 30 mm)

Bei der Plaque-Reduktionsmcthode wird ebenfalls in bestimmt, die von den Viren νύπίΓίΰε-πί werde

vitro die Wirkung der zu prüfenden Substanz auf 20 kleiner die Plaque-Anzahl gegenüber der Kontrollgrup

verschiedene Viren untersucht. Nach Aufbringen der zu pe ist, desto wirksamer ist die getestete Substanz,

prüfenden Substanz, Infektion mit den entsprechenden Entsprechende Versuchsergebnisse gibt die folgende

Viren und Bebrütung wird die Anzahl der Plaques Tabelle Il wieder.

Tabelle II

Virostatische Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen nach der PIaque-Reduktions-Melhode

Substanz

Koni

Anzahl der Plaques Herpes Influenza

Kontrolle

l-Adamantyl-N-(p-Äthoxyphenyl)-amidin l-Adamantyl-N-(p-Chlorphenyl)-amidin l-Adamanty!-N-(p-Hydroxyphenyl)-amidin Vergleich Amantadin (Symmetrel) Vergleich Tromantadin

Kontrolle

Cvclohexvlcarboxamidin

Vergleich 1-Adamantyicarboxamidin

50 y/ml
50 y/ml
50 y/ml
50 y/ml
50 y/ml

5 y/ml
20 y/ml

98 1

14 9

73

39 19 28

65 12 17 16 51

104 63 52

Ein Bück auf die Tabellen I und 11 belegt die 45 Hemmwirkung bei Herpes und Influenza schwächer als Überlegene virostatische Wirksamkeit der erfindungs- bei Cyclohexylcarboxamidin.)

Tabelle III zeigt die im Vergleich zu 1-AdamantyI-carboxamidin wesentlich abgesenkten akuten Toxizitä-

gemäßcn Verbindungen. (So ist z. B. bei einer vierfachen
Konzentration von 1-Adamantylcarboxamidin die

Tabelle III

Substanz

LD 50

l-Adamantyl-N-(p-Hydroxyphenyl)- 35,0 mg/kg amidin

2-NorbornyIcarboxamidin 58,7 mg/kg

Cyclohexylcarboxamidin 88,0 mg/kg

Vergleich l-Adamantylcarboxamidin 19,1 mg/kg

Claims

Patentansprüche:
1. Amide der allgemeinen Formel
NH

R₁-C

Eaton et q|„ J. Immunology 68, 1 [1952] sowie M. D. E a t ο η et al, J. Immunology 68,321 [19521p.

In der DE-OS 23 06 784 wird ferner für Adamantylcarboxyamidin eine Wirksamkeit gegen Influenza angegeben.

Demgegenüber wurden nun gefunden, daß auch Amidine der allgemeinen Formel