DE2436172A1 - Fixiertes interferon, verfahren zu dessen herstellung und daraus hergestellte arzneipraeparate - Google Patents
Fixiertes interferon, verfahren zu dessen herstellung und daraus hergestellte arzneipraeparateInfo
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75645 Paris Cedex 13, Frankreich
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'Fixiertes Interferon, Verfahren zu dessen Herstellung und daraus hergestellte Arzneipräparate" .
Die Erfindung betrifft neue pharmazeutische Wirkstoffe auf der Basis von Interferon.
Interferon ist als therapeutisch wirksame Verbindung bekannt. Die in der Zelle synthetisierte Substanz besitzt eiweißartigen
Aufbau und inhibiert die Zellteilung, d.h. die intrazelluläre Vermehrung, bei einer großen Anzahl, in der Antigenwirkung
verschiedener Viren. Auf diese Weise blockiert es sämtliche lytischen und cancerogenen Einflüsse dieser Viren. Interferon
muß jedoch in der therapeutischen Praxis in großen Mengen ein-
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gesetzt werden, da es durch die Zellen bzw. durch proteolytische
Enzyme leicht wieder abgebaut werden kann. Die deshalb erforderlichen großen Substanzmengen sind vor allem im Hinblick
auf die hohen Herstellungskosten von Nachteil.
Aufgabe der Erfindung ist es daher, neue pharmazeutische Wirkstoffe
und damit verbunden neue Arzneipräparate auf der Basis
von Interferon zu schaffen, die diesen Nachteil nicht besitzen und gleichzeitig die wertvollen therapeutischen Eigenschaften
von Interferon voll zur Geltung bringen.
Bei den neuen pharmazeutischen Wirkstoffen der Erfindung ist
Interferon durch Fixierung auf einem Trägerstoff unlöslich gemacht. Die Arzneipräparate der Erfindung enthalten derart fixiertes
Interferon zumindest als Teil des Wirkstoffgehalts.
In einer ersten Ausführungsform ist das Interferon durch chemische
Bindungen, insbesondere durch kovalente Bindungen, auf dem Trägerstoff fixiert. In einer zweiten Ausführungsform erfolgt
die Fixierung des Interferons auf dem Trägerstoff durch elektrostatische Kräfte.
Das verwendete Interferon läßt sich z.B. mit Hilfe von L-Zellen
der Maus oder LM-Zellen herstellen, die während 3 Stunden dem
Virus der Newcastle-Krankheit ausgesetzt waren. Nach dem Abtrennen
des Virus versetzt man die Zellen mit einem serumfreien
Nährmedium, z.B. Eagle's-Medium. Nach Ablauf von 24 Stunden
hebt man den Oberstand ab und hält ihn 5 Tage bei pH 2. Das
so erhaltene Medium enthält das Interferon. Weitere Einzelheiten des Herstellungsverfahrens sind in "Proc. Soc Exptl. Biol.
and Med., Dezember 1969, Nr. 3, Bd. 132 beschrieben.
Interferon kann auch mit Hilfe anderer Zellen des selben Typs,
sogenannter sensibler Zellen, hergestellt werden, wobei das Interferon für die jeweils verwendete Zellart spezifisch ist.
In der Humanmedizin wird daher Interferon menschlichen Ursprungs verwendet. Derartiges Interferon kann z.B. aus Leukozyten nach
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E. Falcoff, R. Falcoff, F. Fournier und Ch. Chany, Annales de l'Institut Pasteur, November 1966, Bd. 111, S. 562 bis
584 oder aus menschlichen amniotischen Membranen nach dem Verfahren von F. Fournier, E. Falcoff und Ch. Chany, The
Journal of Immunology, Bd. 99, Nr. 5 (1967) gewonnen werden.
Zur chemischen Fixierung des Interferons verwendet man vorzugsweise
das aus einem Agarosegel bestehenden Handelsprodukt "Sepharose". Zur Ausbildung von kovalenten Bindungen zwischen
dem Interferon und der Sepharose ist deren.vorherige Aktivierung erforderlich, die z.B. mit Hilfe von Bromcyan erfolgen
kann. Die Fixierung von Interferon wird vorzugsweise nach der Methode von Porath durchgeführt, die im folgenden anhand eines
Beispiels erläutert werden soll:
Kügelchen von Sepharose 4 B mit einem Durchmesser von etwa 0,1 mm werden mit Bromcyan aktiviert und dann in einer Konzentration
von 5 g/500 ml 10 m Salzsäure suspendiert. Nach dem Quellen werden die Kügelchen mit der Salzsäure und anschließend
zweimal mit 300 ml 0,1m Natriumbicarbonatρ uffer gewaschen, der
auf pH 8 eingestellt ist und 0,5m NaCl enthält (im folgenden: Puffer A). Man erhält so 17 ml relativ -festes Sepharose-Gel,
das hierauf in 30 ml der vorstehend erhaltenen und 18 Stunden bei 4 C gegen Puffer A dialysierten Interferon-Lösung mit einem
Gehalt an 10 Vergleichseinheiten/ml (Institute of Health) suspendiert
wird. Die Suspension aus Interferon + Kügelchen wird 2 Stunden bei Raumtemperatur leicht gerührt. Nach dem Zentrifugieren
trennt man den Überstand ab und wäscht die Sepharose-Kügelchen mit 50 ml Puffer A. Anschließend werden die Kügelchen
90 Minuten bei Raumtemperatur unter leichtem Rühren bei pH 8 mit 50 ml 1m Äthanolamin inkubiert und schließlich in folgender
Reihenfolge ausgewaschen: zweimal mit 80 ml Puffer A, zweimal mit 80 m] 0,1m Natriumacetai puffer, der 1m NaCl enthält
und einen pll von 4 aufweist (Puffer B), zweimal mit 80 ml Hagle 1S-Medium,
einmal mit 250 ml 0,1m Natriumboratpuffer, der 1m NaCl enthält und einen pH von 8 aufweist (Puffer C), einmal mit
250 ml Puffer 1!, einmal mit 250 ml Puffer C und schließlich
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dreimal mit je 250 ml Eagle's-Medium.
Das schließlich erhaltene Sepharose-Präparat wird im gleichen Volumen Eagle's-Medium suspendiert. Auf den Sepharose-Kügelchen
sind etwa 90 Prozent des in der Lösung enthaltenen Interferons fixiert.
Kontrollpräparate aus inaktiver Sepharose werden dadurch hergestellt,
daß man Sepharose mit Bromcyan behandelt und hierauf
mit Äthanolamin sowie Interferon inkubiert. Das Verfahren entspricht somit genau dem vorstehend beschriebenen, nur die Inkubation
mit Interferon und Äthanolamin erfolgt in umgekehrter Reihenfolge. Die Proteinkonzentration im Überstand beträgt,
nach der Inkubation mit der Interferon-Lösung 5 mg/ml bzw. 10 Interferon-Einheiten/ml, d.h. es findet keine nachweisbare
Fixierung von Proteinen bzw. Interferon auf der Sepharose statt.
Anstelle von Sepharose-Kügelchen kann man zur Fixierung des Interferons
auch Dextran mit einem Molekulargewicht von 150 000 bis 200 000. verwenden, das vorher mit Bromcyan aktiviert wurde.
Die Fixierung erfolgt hierbei nach dem bereits geschilderten Verfahren mit dem selben Mengenverhältnis Interferon/Trägerstoff.
In einer speziellen Ausführungsform wird gereinigtes, aus Mäusen gewonnenes Interferon nach dem Verfahren von Porath
auf Dextran mit einem Molekulargewicht von 60 000 fixiert. Anschließend reinigt man das fixierte Interferon chromatographisch
an Sephadex G 100 und engt durch Druckdialyse ein. Das Konzentrat enthält 3200 bis 6400 antivirale Interferon-Einheiten/ml.
Nach dem geschilderten Verfahren können ferner folgende Polysaccharide
als Trägerstoffe eingesetzt werden:
Homopo Iy s acch a r _i_ dje
- Polymere von D-Glucose
Beispiel: Dextran
Haupteinheit: ot-1 ,o-D-Glucosyl-D-glucose
509807/1 U8
HomopoIysaccharide (Forts.)
- Polymere von D-Fructose
Beispiel: Levan Haupteinheit: 0-2, 6-D-Fructosyl-D-fructose
- Polymere von D-Mannose
Beispiel: Hefe-Mannan Haupteinheit: α-1,2,α-1,3- und a-1,6-D-Mannosyl-
D-mannose
- Polymere von D-Galacturonat
Beispiel: Pektin Haupteinheit: a-1^-D-Galacturonosyl-D-galacturonat
- PoLymere von Pentosen
Beispiel: Xylan Haupteinheit: 3-I ,4-D-Xyl'osyl-D-xylose
- Polymere von D-Galactose
Beispiel: Galact'an
Haupteinheit: 3-1^-D-Galactosyl-D-galactose
Heteropolysaccharide
- mit modifizierten Zuckern
Beispiel: Agarose Haupteinheit: 3-1,4-D-Galactosyl-L-3,6-anhydro-
galactose
- mit substituierten Zuckern
Beispiel: Glyceryl-pektat Haupteinheit: wie bei Pektin
- mit verschiedenen Monosaccharidresten
Beispiel: Heparin Haupteinheit: a-1 ,4-D-2-Desoxy-2-sulfoamino-glucosyl-
6-sulfat-D-glucuronat
Die auf diese Weise hergestellten fixierten Interferon-Präparate eignen sich insbesondere zur parenteralen Verabfolgung.
Zur elektrostatischen Fixierung des Interferons verwendet man als Trägerstoff z.B. Concavallin A, das eine aus Feuerbohnen
extrahierbare pulverförmige Substanz darstellt. Zur Fixierung
vermischt man z.B. eine Suspension von Concavallin A in
509807/1U8
Eagle's-Medium mit der vorstehend beschriebenen Interferon-Lösung
über genügend lange Zeit, üblicherweise 2 bis 6 Stunden.
Die Fixierung durch elektrostatische Bindungen ist weniger stabil als die durch kovalente Bindungen. Dies kann von Vorteil
sein, wenn die Aktivität des Interferons im Organismus zeitlich begrenzt sein soll. Die relativ schwache Fixierung erlaubt
eine zunehmende Freisetzung des Interferons, das daher im Augenblick seiner Freisetzung im Organismus langsam abgebaut wird.
Das so erhaltene fixierte Interferon und insbesondere das durch chemische Bindungen fixierte Interferon weisen folgende bemerkenswerte
Eigenschaften auf:
(1) Sie können mehrmals nacheinander eingesetzt werden, wobei die Aktivität des Interferons erhalten
bleibt.
(2) Das fixierte Interferon ist gegenüber Wärmeeinflüssen und sauren Medien sehr beständig.
(3) Das fixierte Interferon wirkt offenbar, ohne in die Zellen einzudringen.
(4) Selbst wenn das Interferon durch ein spezifisches Anti-Interferon-Serum inaktiviert wird, d.h. seine
antivirale Aktivität inhibiert ist, kann es wieder dadurch reaktiviert werden, daß man den Antigen-Antikörper-Komplex
durch Behandeln des erfindungsgemäßen Wirkstoffs mit einem sauren Puffer spaltet.
Da der pharmazeutische Wirkstoff an den Trägerstoff gebunden ist, können in Bezug auf die Anzahl der zu behandelnden ZelJen
relativ geringe Wirkstoffmengen eingesetzt werden. Durch die
Fortbewegung der Präparatteilchen kommen diese mit einer großen
509807/1148
Anzahl von Zellen in Berührung.
Die therapeutische Wirksamkeit des fixierten Interferons wird durch die folgenden in vitro-Tests erläutert.
Sensible L-Mäusezellen werden mit Interferon behandelt, das
nach dem geschilderten Verfahren auf Sepharose-Kügelchen fixiert wurde. Die Behandlung dauert 18 Stunden, wobei auf ein
Kügelchen von 0,1 mm Durchmesser 4 Zellen kommen. Das Verhältnis kann auch auf 25 Kügelchen/1000 Zellen erhöht werden. Die
Behandlung erfolgt z.B. dadurch, daß man eine monocellulare Schicht von L-Zellen in einer Petri-Schale mit einer Schicht
Kügelchen überdeckt. Nach 18 Stunden werden die Sepharose-Kügelchen durch einfaches Waschen mit Eagle's-Medium entfernt,
da sie nur in sehr losem Kontakt mit den Zellen sind (die Kügelchen rollen auf der monocellularen Zellschicht). Die Zellen
werden dann mit einem Erregervirus infiziert, z.B. dem Stomatitis-vesikularis-Virus
(VSV) oder dem Encephalo-myokarditis-Virus (EMC). Nach dem ersten Vermehrungszyklus mißt man die
Replikationsausbeute nach der Plages-Methode.
Die unter diesen Bedingungen erzielte Schutzwirkung ist mit der in einem Vergleichsversuch mit löslichem Interferon erzielten
vergleichbar. Das Experiment läßt sich mindestens viermal wiederholen, ohne daß die Aktivität des erfindungsgemäßen Präparates
merklich beeinträchtigt würde. Die Ergebnisse in Tabelle I bestätigen di-ese Tatsache.
509807/1 U8
Antivirale Aktivität von auf Sepharose fixiertem Interferon vor und nach 4 Zellübertragungen
| + Sepharose | ("Viruskontrolle") | EMC (I PFU/0, |
iq.) 5 ml |
VSV PFU/0, |
,4 · | 5 ml | |
| Interferon 4°C |
+ Sepharose | 1,5 ■· | 107 | 7 | ,2 · | 105 | |
| Interferon 370C |
Interferon + Sepharose nach der 4. Übertragung |
3,7 · | 107 | 1 | • | 104 | |
| Vergleich | 4 | 107 | 2 | ,2 · | 104 | ||
| 5,6 · | 108 | 1 | 107 |
PFU = Plage-bildende Einheiten
Die folgenden Experimente machen deutlich, daß das Interferon in den erfindungsgemäßen Präparaten offenbar seine Wirkung
entfaltet, ohne in die behandelten Zellen einzudringen.
In einer ersten Petri-Schale wird eine monocellulare Schicht
aus sensiblen Zellen ausgebreitet, auf der z.B. mit Hilfe eines aufgelegten Ringsein mittlerer Bereich abgeteilt wird.
Die Oberfläche der innerhalb des Rings befindlichen ZeIl-
/wird
schicht'mit auf Sepharose-Kügelchen fixiertem Interferon in Berührung gebracht, z.B. dem vorstehend erhaltenen Produkt. Nach 24 Stunden entfernt man die Kügelchen und beimpft die gesamte Zellschicht auf der Petri-Schale mit einem Virus, z.B. VSV-Virus. Schließlich wird das Ganze mit einer Gelose-Schicht fixiert. Nach 48 Stunden macht sich der Angriff des Virus durch das Auftreten von Löchern ("Plaques") bemerkbar, die sich sämtlich außerhalb des Innenbereichs befinden, während letzterer unverändert bleibt.
schicht'mit auf Sepharose-Kügelchen fixiertem Interferon in Berührung gebracht, z.B. dem vorstehend erhaltenen Produkt. Nach 24 Stunden entfernt man die Kügelchen und beimpft die gesamte Zellschicht auf der Petri-Schale mit einem Virus, z.B. VSV-Virus. Schließlich wird das Ganze mit einer Gelose-Schicht fixiert. Nach 48 Stunden macht sich der Angriff des Virus durch das Auftreten von Löchern ("Plaques") bemerkbar, die sich sämtlich außerhalb des Innenbereichs befinden, während letzterer unverändert bleibt.
In einem zweiten Experiment bringt man die Oberfläche inner-
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halb des Rings mit löslichem Interferon in Berührung. Das Interferon diffundiert in die gesamte monocellulare Schicht,
d.h. auch in den Oberflächenbereich außerhalb des Rings. Behandelt
man nun die Zellschicht mit dem Virus, so treten keine Plaques/, die auf einen Angriff des Virus hinweisen. Das
lösliche Interferon ist also gewandert und war mit sämtlichen Zellen in Berührung.
In einem weiteren Experiment wird die Zellschicht innerhalb des Rings mit Sepharose-Kügelchen ohne Interferon in Berührung gebracht.
Nach dem Beimpfen sind aufgrund des Virusangriffs überall
Plaques zu beobachten.
Die folgenden Beispiele zeigen die Thermostabilität des Interferons
in den erfindungsgemäßen Präparaten.
Auf Sepharose-Kügelchen fixiertes Interferon wird 1 Stunde auf 56 C erhitzt. Das unlösliche Interferon behält seine gesamte
biologische Aktivität bei, während lösliches Interferon unter den selben Bedingungen praktisch vollständig abgebaut wird. In
Tabelle II sind die Ergebnisse dieses Versuchs wiedergegeben.
EMC-Hämagglutination*
609807/1148
EMC-Virusausbeute in PFU**
| Interferon + Sepharose 4°C |
64 | 2 | ,6 | - 107 |
| Interferon + Sepharose 56°C |
128 | 4 | • 107 | |
| Interferon (löslich) 4 C |
256 | 6 | ,6 | • 107 |
| Interferon (löslich) 560C |
2048 | 4 | ,4 | • 108 |
| Virusvergleich | 4096 | 7 | - TO8 | |
* = Hämagglutinationsaktivität von EMC-Virus, ausgedrückt
als reziproke Verdünnung;
** = EMC-Virusausbeute der infizierten Zelle nach einmaligem
Zyklus, ausgedrückt als Plage-bildende Einheiten.
In einem zweiten Versuch bringt man auf Sepharose fixiertes Interferon in einen Autoklaven und behandelt unter einem Druck
von 1 bar bei 110 C, wobei der pH der Pufferlösung, in der
sich das auf Sepharose-Kügelchen fixierte Interferon befindet, 2,5 bis 7,4 beträgt. Der Versuch wird 30 Minuten durchgeführt
Man stellt fest, daß die antivirale Aktivität des Interferons bei einem pH von 4,6 oder niedriger praktisch vollständig erhalten
bleibt, während bei einem pH von 7,2 eine Abnahme zu .beobachten
ist.
In Tabelle III sind die Ergebnisse der mit L-Zellen im Autoklaven
durchgeführten Versuche wiedergegeben.
30 min im Autoklaven
pH 2,6 pH 4,6 pH 7,2
o.
30 min bei 4 C
Vergleich: pH 2,6
5MC-Virus + L-Zeilen Vusbeute
2-1O4 2-TO4 5,2·1Ο6
3,6-10*
JZellvergleich : 0
Virusvergleich: 2,4*10'
Bringt man lösliches Interferon als Lösung mit einem pH von 7
in einen Autoklaven, so geht die Aktivität verloren. Die Behandlung
von Interferon im Autoklaven unter den genannten Temperatur-
und Druckbedingungen ist deshalb von Interesse, da die erfindungs·
509807/11A8
gemäßen Produkte auf diese Weise sterilisiert werden können.
In Tabelle IV sind die Ergebnisse von Versuchen zusammengestellt, bei denen die therapeutische Aktivität von erfindungsgemäß
fixiertem Interferon durch Säurebehandlung (pH 2) wiederhergestellt
wird, nachdem sie vorher mit einem speziellen Anti-Interferon-Serum inhibiert worden war.
EMC-Hämagglu- EMC-Virusaustination beute in PFU
| Interferon + Sepharose | 2 | 4,9 · 105 |
| Interferon + Sepharose + Antiserum |
2048 | 2,2 · 108 |
| Interferon + Sepharose + Antiserum, jedoch bei pH 2 behandelt |
4 | 2,1 ' 106 |
| Virusvergleich | 2048/4096 | 2,9 ' 108 |
Die Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Produkte geht auch aus
in vivo-Tests hervor.
Bin Experiment wird mit zwei Gruppen von je 20 Mäusen durchgeführt.
Den behandelten Tieren werden 100 000 Sepharose-Kügelchen ohne Interferon intraperitoneal verabfolgt. 4 Stunden
nach dieser Behandlung werden sämtliche Tiere (geschützte und Kontrolltiere) mit EMC-Virus beimpft. Aus den in Tabelle V
wiedergegebenen Mortalitätsdaten geht hervor, daß das auf Sepharose fixierte Interferon bei den behandelten Tieren gute Schutzwirkung
entfaltet.
509807/1 148
Überlebende Tiere Oberlebende Tiere
Zeitpunkt
nach der Behandlung mit Interferon·*
Sepharose
und dem Beimpfen mit EMC-Virus
nach der Behandlung mit Sepharose
und dem Beimpfen mit EMC-Virus
| 1 . | Tag | 20 | 20 |
| 4. | Il | 19 | 17 |
| 5. | ti | 16 | 8 |
| 6. | Il | 10 | 5 |
| 7. | Il | 5 | 3 |
| 8. | tt | 4 | 2 |
| 9. | tt | 3 | CNI |
| 10. | tt | 3 | 1 |
| 11- | Il | 2 | 0 |
| 12. | tt | 1 | 0 |
| 13. | If | 1 | 0 |
Nach relativ langer Zeit sterben auch die behandelten Tiere, was darauf zurückzuführen ist, daß das auf den Kügelchen fixierte
Interferon an einer bestimmten Stelle im Tier eingeschlossen ist und -diese Stelle nicht verlassen kann. Andererseits
zirkuliert der Virus im Tierkörper und setzt sich an Stellen fest, an denen ihn die Aktivität des Interferons nicht
errei cht.
In einem zweiten in vivo-Test wird ein durch den Blutkreislauf
transportierbares Präparat eingesetzt, nämlich auf Dextran fixiertes
Interferon. Dieser Versuch wird durch die Zeichnung erläutert, in der die Entwicklung der Mortalität bei den be-
toten
handelten Tieren (Prozent der/Tiere in Abhängigkeit von der Zeit [Tage]) dargestellt ist.
handelten Tieren (Prozent der/Tiere in Abhängigkeit von der Zeit [Tage]) dargestellt ist.
Erwachsene IC-Mäuse werden mit 0,2 ml des genannten Präpaiarr
509807/1Uf=-
— I j "
intracerebral beimpft. Jede Gruppe besteht aus 20 Mäusen.
Zum Vergleich wird gereinigtes, nicht fixiertes Interferon in etwa Z- bis 4fach höherer Konzentration verabfolgt. Einer
weiteren Kontrollgruppe wird Gewebekulturmedium injiziert. Jeder Maus wird schließlich an einer anderen Stelle intraperetoneal
ein virulenter Encephalomyokarditis-Virus in der 200-fachen LDVq injiziert. Aus der Zeichnung geht hervor, daß die
50 Prozent-Überlebenszeit der mit Interferon-Dextran behandelten
Tiere (C-.) um etwa 48 Stunden zunimmt, während nicht-fixiertes
Interferon (C^) - obwohl in wesentlich höherer Konzentration
injiziert - unwirksam ist. Die Kurve C, entspricht den Kontroll tieren.
Das erfindungsgemäß fixierte Interferon bietet somit zahlreiche
Mög 1 i chke i ten:
(1) Das Interferon kann im Organismus transportiert werden, ohne dem Einfluß inaktivierender Substanzen
ausgesetzt zu sein.
(2) Blut kann außerhalb des Körpers in Gefäßen über das fixierte Interferon geleitet werden.
(3) Eine große Anzahl von Methoden zur Verbesserung der biologischen Aktivität von Interferon kann
untersucht werden.
Die Anwendungsgebiete der erfindungsgemäßen Arzneipräparate
entsprechen denen von Interferon, sie eignen sich somit insbesondere zur Behandlung von Virus-Erkrankungen, Krebs und
Leukämie beim Menschen und in der Tiermedizin. Die Verabfolgung erfolgt vorzugsweise auf intravenösem Wege, wozu sich
insbesondere auf Dextran fixiertes Interferon eignet.
Wegen der großen Stabilität des Interferons in den erfindungsgemäßen
Produkten eignen sich diese als internationale Eichsubstanzen für Interferon.
509 807/1U 8
Claims (12)
1. Fixiertes Interferon, bei dem Interferon durch Fixierung auf einem Trägerstoff unlöslich gemacht ist.
2. Verbindung nach Anspruch 1,
dadurch gekennzeichnet, daß das Interferon durch chemische Bindungen auf dem Trägerstoff
fixiert ist.
3. Verbindung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die chemische Bindung kovalent ist.
4. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Interferon durch elektrostatische Kräfte auf dem Trägerstoff
fixiert ist.
5. Verbindung nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet,
daß der Trägerstoff aus einem Agarosegel, z.B. Sepharose, besteht.
6. Verbindung nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß
das Agarosegel in Form von Kügelchen vorliegt.
7. Verbindung nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß der Trägerstoff aus Dextran besteht.
8. Verbindung nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet,
daß der Trägerstoff aus einem der folgenden Homo- oder Heteropolysaccharide besteht: Levan, Mannan,
Pektin, Xylan, Galactan, Agarose, Glycerinpektat, Heparin.
9. Verbindung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Trägerstoff aus pulverförmigem Concavallin A besteht.
10. Verfahren zur Herstellung des fixierten Interferons nach
509807/1U8
den Ansprüchen 6 und 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Fixierung des Interferons auf der Sepharose nach der Methode
von Porath erfolgt.
11. Verfahren zur Herstellung des fixierten Interferons nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Suspension
von pulverförmigem Concavallin A mit einer Interferon-Lösung vermischt.
12. Arzneipräparate, gekennzeichnet durch einen Gehalt an mindestens einem fixierten Interferon nach den Ansprüchen
1 bis 9 sowie gegebenenfalls üblichen pharmakologisch
verträglichen Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln.
509807/1Uf
Le
rs e
it
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| FR7327538A FR2244543B1 (de) | 1973-07-27 | 1973-07-27 |
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