DE2265122C2 - Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin - Google Patents

Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin

Info

Publication number
DE2265122C2
DE2265122C2 DE2265122A DE2265122A DE2265122C2 DE 2265122 C2 DE2265122 C2 DE 2265122C2 DE 2265122 A DE2265122 A DE 2265122A DE 2265122 A DE2265122 A DE 2265122A DE 2265122 C2 DE2265122 C2 DE 2265122C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
cholesterol
determination
hydrogen peroxide
oxidase
clin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
DE2265122A
Other languages
English (en)
Other versions
DE2265122A1 (de
Inventor
William Harrow Middl. Richmond
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Roche Diagnostics GmbH
Original Assignee
Boehringer Mannheim GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Mannheim GmbH filed Critical Boehringer Mannheim GmbH
Publication of DE2265122A1 publication Critical patent/DE2265122A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE2265122C2 publication Critical patent/DE2265122C2/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/60—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving cholesterol
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S210/00—Liquid purification or separation
    • Y10S210/918—Miscellaneous specific techniques
    • Y10S210/922—Oil spill cleanup, e.g. bacterial
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/814—Enzyme separation or purification
    • Y10S435/815—Enzyme separation or purification by sorption
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/863—Mycobacterium
    • Y10S435/866—Mycobacterium smegmatis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/872—Nocardia
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/913—Aspergillus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/921—Candida
    • Y10S435/923—Candida lipolytica
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/921—Candida
    • Y10S435/924—Candida tropicalis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/94—Saccharomyces
    • Y10S435/942—Saccharomyces cerevisiae

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin.
Das Hauptpatent 22 24 132 betrifft ein Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß Cholesterin in wäßrigem Medium mit Cholesterinoxidase inkubiert und entweder der Sauerstoffverbrauch oder gebildetes H2Ch bzw. Cholestenon bestimmt wird.
Gemäß einer Weiterbildung dieses Verfahrens erwiesen sich die Stämme Nocardia NCIB 10 554 und 10 555 als günstige Quellen für Cholesterinoxidase. Die Erfindung betrifft daher den in den Patentansprüchen definierten Gegenstand.
Das erfindungsgemäß verwendete Enzympräparat kann in flüssiger oder fester Form, z. B. als lösliches gefriergetrocknetes Pulver, zubereitet werden. Wenn das Präparat in fester Form vorliegt, wird es mit einer Pufferlösung in flüssige Form überführt, bevor es bei der Untersuchung verwendet wird.
Die Mindestaktivität der Cholesterinoxidase hängt von der Untersuchungsmethode ab, bei welcher sie eingesetzt werden soll. Wenn die Cholesterinanalyse durch fluorimetrische Bestimmung des erzeugten Wasserstoffperoxids erfolgen soll, genügt eine Aktivität von 10-2 Einheiten/ml, was der Oxidation von 4 μg Cholesterin pro ml pro Minute entspricht. Diese Aktivität genügt grundsätzlich für die automatische Analyse, wenn auch ein Präparat, das 8 ug Cholesterin pro ml pro Minute oxidiert, vorzuziehen ist. Es ist leicht möglich, Präparate zu erhalten, die 40 μg oder mehr Cholesterin pro ml pro Minute oxidieren.
Da für die Bestimmung von Wasserstoffperoxid, aber auch des Sauerstoffverbrauchs und des gebildeten Cholestenons bekannte Methoden zur Verfügung stehen, macht es keine Schwierigkeiten, ein für die gewünschte Bestimmungsmethode, beispielsweise die colorimetrische Wasserstoffperoxidbestimmung, geeignetes Cholesterinoxydase-Präparat zu wählen. So hat die Praxis gezeigt, daß für colorimetrische Methoden oder für die Bestimmung des Sauerstoffverbrauches oder des gebildeten Cholestenos die Aktivität eines flüssigen Präparats wenigstens 10-' Einheiten/ml (40 μg oder mehr Cholesterin pro ml pro Minute werden oxidiert) betragen soll.
Wenn die Bestimmung von Cholesterin an Hand des gebildeten Wasserstoffperoxids erfolgt, muß berücksichtigt werden, daß mit der Cholesterinoxydase auch eine Katalaseaktivität extrahiert werden kann. Das Ausmaß an Katalaseaktivität, die im Enzympräparat zugelassen werden kann, hängt natürlich von der anzuwendenden Untersuchungsmethode ab. Die Kata laseaktivität ist wichtig, wenn die Cholesterinbestim- mung durch Messung des gebildeten Wasserstoffperoxids erfolgen soll, da dieses durch Katalase zerstört wird. Es ist jedoch bekannt, wie man entweder durch Reinigung oder durch Inhibierung die Katalaseaktivität
ίο berücksichtigt
Das Verfahren zur Cholesterinbestimmung in einer Flüssigkeit ist von besonderem Wert zur Untersuchung von biologischen Flüssigkeiten, wie einem Serum oder einem Plasma. Das Verfahren ist jedoch nicht auf biologische Flüssigkeiten beschränkt sondern kann ganz allgemein zur Bestimmung der Cholesterinmenge verwendet werden, die in einem beliebigen technischen Produkt oder Lebensmittelprodukt oder einem beliebigen technischen Verfahren vorliegt bei welchem die
Cholesterinuntersuchung erforderlich oder wünschenswert ist
Wenn eine Körperflüssigkeit insbesondere Serum oder Plasma, untersucht werden soll, ist mit zu berücksichtigen, daß Cholesterin bekanntlich nicht in
freier Form vorliegt sondern üblicherweise verestert oder mit Phospholipiden, Proteinen und Triglycerliden in löslichen Liporoteinkomplexen gebunden ist Solche Komplexe können schon durch Einbringen eines grenzflächenaktiven Mittels in das Untersuchungsge-
misch unter sanften Bedingungen gelöst werden, so daß
das gesamte freie Cholesterin enzymatisch oxidiert
werden kann. Dies ist eine bekannte Tatsache und braucht nicht näher erläutert zu werden.
Wie erwähnt, tritt Cholesterin im Serum üblicherwei-
se in Form von Estern auf, und falls das Gesamtcholesterin untersucht werden soll, muß der Ester verseift werden, was ebenfalls nach bekannten Maßnahmen erfolgen kann, beispielsweise durch Umsetzung mit alkoholischer Kalilauge. So bewirkt die Umsetzung mit
I1On KOH bei 75° C eine rasche Verseifung ohne Koagulierung von Protein. Nach der Verseifung wird
die verseifte Flüssigkeit in das erfindungsgemäße
Verfahren eingesetzt. Zweckmäßig wird das Cholesterin durch Messung des
Wasserstoffperoxids mittels der Reaktion mit 4-Aminophenazon in Gegenwart von überschüssigem Phenol und Peroxidase gemessen. Daher wird der vorzugsweise verseifte Extrakt mit Cholesterinoxidase in Anwesenheit von Peroxidase, 4-Aminophenazon und Phenol
so umgesetzt, und die optische Dichte wird bei 510 nm gemessen. Cholesterinoxidase, Peroxidase, 4-Aminophenazon und Phenol können zu einem einzigen Reagens zusammengegeben und in dieser Form angewandt werden.
Bei diesem Test kann eine 0,1 %ige Cholesterinlösung bei der Zugabe zu dem Enzymreagens eine Trübung erzeugen, die eine optische Dichte von 0,05 ergibt. Eine O,l°/oige Lösung von Cholestenon, die in derselben Weise behandelt wurde, kann ebenfalls eine Trübung erzeugen, die eine optische Dichte von etwa 0,08 ergibt. Diese Bedingungen würden jedoch nur in einem extrem anormalen Serum auftreten, welches 1000 mg% Cholesterin enthält, jedoch verhindert die Anwesenheit eines grenzflächenaktiven Mittels, wie bsispielsweise von
0,1% 1OP (Triton X-100) in dem Enzymreagens diese Trübung, d. h. weder das Substrat noch das Produkt bilden während der Reaktion eine kolloidale Suspension, welche die spektrophotometrische Messung stören
würde.
Eine beliebige andere, geeignete Reaktion von Wasserstoffperoxid kann zur Messung der erzeugten Menge und damit zur Cholesterinmenge in dem Serum herangezogen werden. Beispiele solcher Reaktionen sind unter Angabe der sie näher beschreibenden Literaturstellen im folgenden aufgeführt:
1. 2,6-Dichlorphenolindophenol kann als Sauerstoffakzeptor anstelle von 4-Aminophenazon in einer gekoppelten Peroxidasereaktion verwendet werden, siehe Clark und Timms, Proc. Assoc. Clin. Biochem. 5,(1968), S.61;
2. Wasserstoffperoxid kann mit Gujakharz in Anwesenheit von Peroxidase unter Bildung eines blauen Produktes umgesetzt werden, siehe Morley, Dawson und Marks, Proc Assoc. Clin. Biochem. 5, (1968), S. 42;
3. Aus Kaliumiodid wird Jod bei der Reaktion mit Wasserstoffperoxid freigesetzt, und das freigesetzte Jod kann dann unter Bildung einer rosa Färbung mit Diäthyl-p-phenylendiamin umgesetzt werden, siehe Thompson, Clin. Chim. Acta. 25, (1969), S. 415;
4. Aus Jodid wird Jod bei der Reaktion mit Wasserstoffperoxid freigesetzt, und Polyvinylpyrrolidin wird zur Verschiebung der Absorption von Jod aus dem nahen UV in das Sichtbare verwendet, wobei die Absorption bei 470 nm abgelesen werden kann, siehe Wate und Marbach, Clin. Chem. 14, (1968), S. 548;
5. Unter der Einwirkung von Peroxidase oxidiert Wasserstoffperoxid Homovanillinsäure zu einem stark fluoreszierenden Produkt in alkalischer Lösung, wobei Protein diese Reaktion bei einer 40fachen Verdünnung des Plasmas nicht stört. Das Produkt kann fluorimetrisch ausgemessen werden.
siehe Phillip und Elevitch, Amer. J. Clin. Path. 49, (1968), S. 622;
6. Wasserstoffperoxid reagiert mit Jod in Anwesenheit eines Molybdän(IV)-kaialysators. Falls ein bekannter Oberschuß von Thiosulfat zur Reduktion des Jods bei seiner Entstehung verwendet wird, kann das restliche Thiosulfat mit Jod colorimetrisch titriert werden, siehe Simon, Christian und Purdy, Clin. Chem. 14(1968), S. 463.
Obwohl die Messung des erzeugten Wasserstoffperoxids die zweckmäßige Methode zur Bestimmung der in der zu untersuchenden, biologischen Flüssigkeit vorhandenen Cholesterinmenge ist, ist es auch möglich, andere Arbeitsweisen zur Erhaltung des gewünschten Untersuchungsergebnisses anzuwenden. Beispielsweise kann die Sauerstoffaufnahme bei der Cholesterinoxidasereaktion gemessen werden, wobei eine Sauerstoffelektrode entsprechend der von Updike und Hicks in Nature, Lond. 214. (1967), S. 986, und Makin und Warren in Clin. Chem. Acia.29, (1970), S. 493, beschriebenen Arbeitsweise verwendet wird. Alternativ kann das Oxidationsprodukt, Δ 4-Cholestenon, gemessen werden, beispielsweise in Form des 2,4-Diphenylhydrazons oder Isonicotinsäurehydrazons, oder, falls ein ausreichend reines Enzym verwendet wird, das eine niedrige Absorption bei 240 nm aufweist, oder falls das Enzym unschädlich gemacht wird, kann das Cholesterin durch die Zunahme der Absorption bei 240 nm aufgrund des bei der enzymatischen Oxidation gebildeten Δ 4-Cholestenons bestimmt werden.
Die Cholesterinbestimmung kann automatisch durchgeführt werden, falls eine große Anzahl von Untersuchungen aufeinanderfolgend durchgeführt werden muß, oder es kann eine kleine Anzahl von Proben einzeln analysiert werden.

Claims (3)

Patentansprüche:
1. Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin, wobei Cholesterin in wäßrigem Medium mit Cholesterinoxidase inkubiert und entweder der Sauerstoffverbrauch oder gebildetes H2O2 bzw. Cholestenon bestimmt wird gemäß Patent 22 24 132, dadurch gekennzeichnet, daß die Cholesterinoxidase aus Nocardia NCIB 10 554 oder NCIB 10 555 stammt und der Sauerstoffverbrauch mit einer Sauerstoffelektrode bestimmt wird.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß vor der Inkubation zur Messung des Gesamtcholesterins im Serum verseift wird.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet daß die Bestimmung automatisch durchgeführt wird.
DE2265122A 1971-09-22 1972-09-22 Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin Expired DE2265122C2 (de)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB4409571 1971-09-22
GB2865072*[A GB1385319A (en) 1971-09-22 1972-06-19 Enzyme preparations
US289581A US3907642A (en) 1971-09-22 1972-09-15 Cholesterol oxidase and method of extracting from nocardia
US435892A US3907645A (en) 1971-09-22 1974-01-23 Cholesterol assay

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE2265122A1 DE2265122A1 (de) 1976-05-06
DE2265122C2 true DE2265122C2 (de) 1982-08-19

Family

ID=27448749

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2265121A Expired DE2265121C3 (de) 1971-09-22 1972-09-22 Enzympräparat zur Bestimmung von Cholesterin und Verfahren zu seiner Herstellung
DE2265122A Expired DE2265122C2 (de) 1971-09-22 1972-09-22 Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin
DE2246695A Expired DE2246695C3 (de) 1971-09-22 1972-09-22 Verfahren zur Herstellung von Cholesterinoxidase und Verwendung derselben zur Bestimmung von Cholesterin

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2265121A Expired DE2265121C3 (de) 1971-09-22 1972-09-22 Enzympräparat zur Bestimmung von Cholesterin und Verfahren zu seiner Herstellung

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2246695A Expired DE2246695C3 (de) 1971-09-22 1972-09-22 Verfahren zur Herstellung von Cholesterinoxidase und Verwendung derselben zur Bestimmung von Cholesterin

Country Status (6)

Country Link
US (3) US3907642A (de)
CH (2) CH588077A5 (de)
DE (3) DE2265121C3 (de)
FR (1) FR2187125A5 (de)
GB (1) GB1385319A (de)
NL (1) NL168268C (de)

Families Citing this family (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1385319A (en) * 1971-09-22 1975-02-26 Nat Res Dev Enzyme preparations
DE2224131B2 (de) * 1972-05-17 1974-06-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur Gewinnung des Enzyms Cholesterinoxydase, welches Cholesterin mit O tief 2 zu Cholestenon und H tief 2 O tief 2 oxydiert
DE2224132C2 (de) * 1972-05-17 1980-04-03 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin
US4045296A (en) * 1972-08-09 1977-08-30 Beckman Instruments, Inc. Rate sensing batch analysis method and enzyme used therein
US4164448A (en) * 1973-12-07 1979-08-14 Boehringer Mannheim Gmbh Activation of cholesterol oxidase for cholesterol assay
US3884764A (en) * 1974-03-25 1975-05-20 Eastman Kodak Co Method and composition for blood serum cholesterol analysis
CA1056282A (en) * 1974-03-25 1979-06-12 Charles T. Goodhue Multilayer analytical elements for use in the assay of cholesterol
US3979283A (en) * 1974-09-25 1976-09-07 Bioteknika International, Inc. Microbial degradation of DDT
DE2456586C3 (de) * 1974-11-29 1979-09-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verwendung von bestimmten Mikroorganismenstämmen zur Gewinnung von Cholesterinoxidase, welche Cholesterin mit O2 zu Cholestenon + H2 O2 oxidiert
JPS552277B2 (de) * 1974-12-27 1980-01-19
JPS527484A (en) * 1975-07-04 1977-01-20 Kikkoman Corp Process for preparing cholesterol oxidase
US4035237A (en) * 1975-11-07 1977-07-12 Eastman Kodak Company Method for the preparation of cholesterol oxidase
CA1067844A (en) * 1975-12-11 1979-12-11 Eastman Kodak Company Method and medium for producing cholesterol oxidase
US4052263A (en) * 1975-12-11 1977-10-04 Eastman Kodak Company Production of cholesterol esterase using Nocardia cholesterolicum
US4040908A (en) * 1976-03-12 1977-08-09 Children's Hospital Medical Center Polarographic analysis of cholesterol and other macromolecular substances
US4184921A (en) * 1976-03-25 1980-01-22 Boehringer Mannheim Gmbh Process and reagent for determining cholesterol
US4043870A (en) * 1976-05-11 1977-08-23 The Upjohn Company Process of purifying cholesterol oxidase
US4066083A (en) * 1976-06-03 1978-01-03 Pentapharm A.G. Sterile surgical collagen product
US4161425A (en) * 1976-07-01 1979-07-17 Beckman Instruments, Inc. Enzymatic reagent system for total cholesterol assay using oxygen-rate method
DE2649749A1 (de) * 1976-10-29 1978-05-11 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren und reagens zur bestimmung von gesamtcholesterin oder gebundenem cholesterin
US4166763A (en) * 1976-12-10 1979-09-04 Eastman Kodak Company Analysis of lactic acid or lactate using lactate oxidase
USRE32016E (en) * 1976-12-10 1985-10-29 Eastman Kodak Company Analysis of lactic acid or lactate using lactate oxidase
US4275151A (en) * 1977-02-03 1981-06-23 Eastman Kodak Company Hydrolysis of protein-bound cholesterol esters
US4250255A (en) * 1977-07-11 1981-02-10 Eastman Kodak Company Assay method for isoenzyme activity
US4414326A (en) * 1978-04-24 1983-11-08 Goldberg Jack M Diagnostic agents
DE2962521D1 (en) * 1978-09-29 1982-05-27 Mitsubishi Chem Ind Process for the purification of long-chain acyl-coenzyme-a synthetase and the enzyme, acyl-coa synthetase, purified thereby
US4215993A (en) * 1978-12-04 1980-08-05 Data Medical Associates, Inc. Precipitating reagent and method for isolation and determination of high density lipoproteins in human serum
US4247631A (en) * 1979-01-31 1981-01-27 Millipore Corporation Reagent and method for the analytic determination of hydrogen peroxide
US4378429A (en) * 1979-08-23 1983-03-29 Modrovich Ivan Endre Enzymatic method and stabilized solutions for determining total cholesterol in human serum
DE3165392D1 (en) * 1980-07-10 1984-09-13 Ivan Endre Modrovich Stabilized enzymatic solutions and method for determining total cholesterol in human serum
US4374930A (en) * 1981-10-19 1983-02-22 Eastman Kodak Company Method for the purification of cholesterol oxidase
US5047327A (en) * 1982-04-02 1991-09-10 Ivan E. Modrovich Time-stable liquid cholesterol assay compositions
US5062958A (en) * 1988-05-12 1991-11-05 Biotrol, Inc. Method for water purification
US5171688A (en) * 1988-08-30 1992-12-15 Cholestech Corporation Self-corrected assay device
US5156954A (en) * 1989-03-08 1992-10-20 Cholestech Corporation Assay device and method using a signal-modulating compound
US5487978A (en) * 1988-11-03 1996-01-30 Gds Technology, Inc. Method, composition and device for the determination of cholesterol using cholesterol oxidase obtained from bacterial strain NRRL B-18713
CA2002890C (en) * 1988-11-14 1999-12-14 Susan Long Expression of dna sequences derived from nocardioform microorganisms
CA1340449C (en) * 1988-11-14 1999-03-16 Susan Long Expression of dna sequences derived from nocardioform microorganisms
US5114350A (en) * 1989-03-08 1992-05-19 Cholestech Corporation Controlled-volume assay apparatus
US5340539A (en) * 1989-03-16 1994-08-23 Chemtrak, Inc. Non-instrumented cholesterol assay
JP2786679B2 (ja) * 1989-07-24 1998-08-13 旭化成工業株式会社 新規なω位カルボキシアルコール酸化酵素
US4948297A (en) * 1989-07-24 1990-08-14 Fleming Joseph W Correction method for contaminated sites
US5206148A (en) * 1989-07-24 1993-04-27 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha Method for assaying aliphatic alcohol, aliphatic aldehyde or ω-carboxylic acid derivatives thereof
US5238816A (en) * 1989-07-24 1993-08-24 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha Omega carboxyalcohol oxidase enzyme
US5110724A (en) * 1990-04-02 1992-05-05 Cholestech Corporation Multi-analyte assay device
CA2129117C (en) * 1992-01-31 1999-01-05 Mark D. White Inhibition of catalase activity in biological fluids
US5614410A (en) * 1992-07-14 1997-03-25 Sbp Technologies, Inc. Bioremediation of soil or groundwater contaminated with compounds in creosote by two-stage biodegradation
US5876671A (en) * 1993-03-24 1999-03-02 The Regents Of The University Of California Office Of Technology Transfer Sonication standard laboratory module
ATE161757T1 (de) * 1993-03-26 1998-01-15 Sbp Technologies Inc Verfahren zur biologischen sanierung von kontaminiertem boden oder grundwasser
FR2730584B1 (fr) * 1995-02-10 1997-04-25 Joanes Pierre Deguitre Procede et dispositif pour traiter des huiles et solvants contamines par des substances radioactives
US6057147A (en) * 1997-01-21 2000-05-02 Overland; Bert A. Apparatus and method for bioremediation of hydrocarbon-contaminated objects
EP0981638A1 (de) * 1997-05-16 2000-03-01 E.I. Du Pont De Nemours And Company Methode und verfahren zur bebilderung von flachdruckplatten durch wärme ohne ablation
BR0007101E2 (pt) * 2000-10-16 2018-10-30 Gct Global Ciencia E Tecnologia Bio S/A "composição, uso de uma composição, processos de tratamento de efluentes, de recuperação de um reator anaeróbio, de recuperação de um reator aeróbio, de remoção de gorduras de um equipamento de separação, de limpeza de fossas sépticas e de produção de uma composição"
EP1357383B1 (de) 2002-04-09 2005-11-09 Cholestech Corporation Verfahren und Vorrichtung zur Quantifizierung von Lipoprotein-Cholesterol hoher Dichte
US9079786B2 (en) * 2006-06-20 2015-07-14 Johannes van Leeuwen Purification of thin stillage from dry-grind corn milling with fungi
US7824879B2 (en) 2007-01-09 2010-11-02 Cholestech Corporation Device and method for measuring LDL-associated cholesterol
CN101687673B (zh) * 2007-04-12 2012-11-14 诺维信生物股份有限公司 废水处理
WO2009077876A2 (en) * 2007-05-31 2009-06-25 Uti Limited Partnership Method for assessing trace element related disorders in blood plasma
US8481295B2 (en) * 2007-06-20 2013-07-09 Johannes van Leeuwen Fungi cultivation on alcohol fermentation stillage for useful products and energy savings
US20150260631A1 (en) * 2014-03-17 2015-09-17 Health Diagnostic Laboratory, Inc. System and method for assessing quanitites or sizes of lipoprotein particles from lipoprotein particle compositions
CN103184154B (zh) * 2013-04-02 2014-06-25 南开大学 一种生产380号船舶燃料油的生物技术及应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2265121C3 (de) * 1971-09-22 1979-07-26 National Research Development Corp., London Enzympräparat zur Bestimmung von Cholesterin und Verfahren zu seiner Herstellung

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE173761C1 (de) * 1956-11-07 1960-12-20
US3152983A (en) * 1961-12-12 1964-10-13 Socony Mobil Oil Co Inc Microbial disposal of oily wastes
US3183173A (en) * 1963-06-10 1965-05-11 Miles Lab Test composition for detecting hydrogen peroxide
US3371019A (en) * 1965-01-08 1968-02-27 Searle & Co Diagnostic indicator
US3607093A (en) * 1968-02-15 1971-09-21 Schering Corp Devices for testing biological liquids
US3580840A (en) * 1969-03-18 1971-05-25 Litton Systems Inc Process for treating sewage and other contaminated waters
FR2047147A5 (de) * 1969-05-06 1971-03-12 Kyowa Hakko Kogyo Kk
US3547813A (en) * 1969-07-02 1970-12-15 Union Carbide Corp Biochemical oxidation with low sludge recycle
US3725258A (en) * 1972-02-14 1973-04-03 Air Prod & Chem Activated sludge sewage treatment process and system

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2265121C3 (de) * 1971-09-22 1979-07-26 National Research Development Corp., London Enzympräparat zur Bestimmung von Cholesterin und Verfahren zu seiner Herstellung

Also Published As

Publication number Publication date
DE2246695C3 (de) 1981-08-20
CH596553A5 (de) 1978-03-15
DE2246695A1 (de) 1973-03-29
DE2246695B2 (de) 1980-11-06
GB1385319A (en) 1975-02-26
FR2187125A5 (de) 1974-01-11
NL168268B (nl) 1981-10-16
US3907645A (en) 1975-09-23
DE2265121A1 (de) 1976-05-06
US3907642A (en) 1975-09-23
NL7212811A (de) 1973-03-26
US3899376A (en) 1975-08-12
DE2265121B2 (de) 1978-11-02
DE2265121C3 (de) 1979-07-26
DE2265122A1 (de) 1976-05-06
NL168268C (nl) 1985-01-16
CH588077A5 (de) 1977-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2265122C2 (de) Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin
DE2409696C2 (de) Prüfvorrichtung zur Bestimmung von Cholesterin
EP0016947B1 (de) Verfahren und Reagenz zur enzymatischen Bestimmung von Enzymsubstraten
EP0037056B1 (de) Verfahren und diagnostische Mittel zum Nachweis von Redox-Reaktionen
DE2512585C3 (de) Verfahren, Testlösung und analytisches Element für die Bestimmung des Gesamt-Cholesteringehaltes von Cholesterin und Cholesterinester enthaltenden Mischungen
DE2847202A1 (de) Verfahren zur bestimmung von triglyceriden
EP0250991B1 (de) Verfahren zur spezifischen Bestimmung des Serumfructosamingehalts sowie hierfür geeignetes Reagenzgemisch
DE1598809B2 (de) Diagnostiziermittel fuer glukose in fluessigkeiten
DE3239236A1 (de) Verfahren zur quantitativen bestimmung von physiologischen komponenten in biologischen fluessigkeiten oder gasen
DE3125667C2 (de) Verfahren und Mittel zum Nachweis von Wasserstoffperoxid
DE69026611T2 (de) Verfahren zur Bestimmung von Fruktosaminen
DE2224132B1 (de) Verfahren und reagenz zur bestimmung von cholesterin
EP0105443B1 (de) Verfahren zur selektiven Herstellung reduzierter Sauerstoffspezies und hierfür geeignete Reagentien
EP0048347B1 (de) Verfahren und Reagens zur Bestimmung von Glycerin
DE4321807C2 (de) Verfahren zur quantitativen Bestimmung von 1,5-Anhydroglucitol und Testpack
DE2906732C2 (de) Verfahren und Reagenz zur Bestimmung der Peroxidase
DE69128873T2 (de) Verfahren zur enzymatischen Messung von Wasserstoffperoxid und Reagenz dafür
DE3882770T2 (de) Verfahren und Reagens zur Bestimmung von Dehydrogenase oder ihrem Substrat.
DE3138602C2 (de)
DE2804356C2 (de) Verfahren zur Hydrolyse von proteingebundenen Cholesterinestern
EP0089606B1 (de) Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Glycerin
DE1075869B (de)
EP0848066A1 (de) Mittel und Verfahren zur Bestimmung von hydrolytischen Enzymen
DD228566A5 (de) Verfahren zur bestimmung von glycerin
DE3221730A1 (de) Verfahren und analytische mittel zur aktivitaetsbestimmung von glutamat-oxalacetat-transaminase

Legal Events

Date Code Title Description
OD Request for examination
OI Miscellaneous see part 1
AF Is addition to no.

Ref country code: DE

Ref document number: 2224132

Format of ref document f/p: P

D2 Grant after examination