DE2231006B2

DE2231006B2 - Benzodithiapyrone, Verfahren zu deren Herstellung und diese enthaltende pharmazeutische Präparate

Info

Publication number: DE2231006B2
Application number: DE2231006A
Authority: DE
Inventors: Hugh Loughborough Cairns; Richard Cropston Hazard
Original assignee: Fisons Ltd
Current assignee: Fisons Ltd
Priority date: 1971-06-24
Filing date: 1972-06-24
Publication date: 1980-07-24
Also published as: GB1388268A; CH551439A; US3804857A; SE385897B; FR2143261B1; CA978194A; DE2231006C3; IL39584A; IL39584A0; NL7208627A; FR2143261A1; JPS5549584B1; DE2231006A1

Description

COOH

in der ein angrenzendes Paar von P, Q, R und T die Kette

-CO-CH=(COOH)-S-

bildet und in der die übrigen Reste P, Q, R und T, jeweils Wasserstoff bzw. einen Ci _₆-Alkyl- oder Ci _₆-Alkoxyrest bedeuten sowie deren pharmazeutisch verwendbare Salze, Ester oder Amide.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung von Benzodithiapyronen der allgemeinen Formel I, das dadurch gekennzeichnet ist,

2^r> daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel 11

(H)

— COOM

in der ein angrenzendes Paar von P¹, Q¹, R¹ und T¹ zusammen eine Kette

-CO-CH=(COOM)-S-
oder die Gruppen

-Hund -S-C(COOM) = CH-COOM

bedeutet und die übrigen Reste P¹, Q¹, R¹ und T¹, die denen der Reste P, Q, R und T im Anspruch 1 entsprechen und M Wasserstoff oder ein Alkalimetall bedeutet, in an sich bekannter Weise cyclisiert und gegebenenfalls in pharmazeutisch verwendbare Salze, Ester oder Amide umwandelt.

Die Cyclisierung kann durch die Behandlung der Verbindung der allgemeinen Formel Il bei Zimmertemperatur oder höherer Temperatur durchgeführt werden. Geeignete Cyclisuningsmittel sind beispielsweise konzentrierte Säuren, z. B. Polyphosphorsäure, Schwefelsäure, Chlorsulfonsäure und andere Lewis-Säuren. Wenn ein Dehydratisierungsmittel verwendet wird, wird die Reaktion vorzugsweise unter wasserfreien Bedingungen durchgeführt, wobei die Verbindung der allgemeinen Formel II vorzugsweise vor ihrer Verwendung einer Trocknungsstufe unterworfen wird.

Das Verfahren kann auch durch die Umwandlung der — COOM-Cruppen der Verbindung der allgemeinen Formel Il in Acylhalogenidgruppeii, z. B. durch Behandlung mit PCI₃, PCI, oder SOCl₂, und anschließende Durchführung einer intramolekularen Friedel-Crafts-Reaktion des erhaltenen Acylhalogenids durchgeführt werden.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel II können durch Reaktion einer Verbindung der allgemeinen Formel V

(V)

SM

in der M wie angegeben definiert ist und P², Q², R² und T² dieselbe Bedeutung wie P¹, Q¹, R¹ und T¹ haben, mit der Ausnahme, daß ein angrenzendes Paar P², Q², R² und T² die Gruppen -H und -SM darstellen kann, mit Acetylendicarbonsäure oder einem Ester oder Salz von dieser unter alkalischen Bedingungen hergestellt werden, wobei ein Produkt erhalten wird, das entweder das erwünschte Produkt ist oder aus diesem durch Hydrolyse gewonnen werden kann. Wenn ein Ester verwendet wird, so wird vorzugsweise ein Ci_io-Alkohol, vorzugsweise ein Ci-4-Alkohol, verwendet. Die alkalischen Bedingungen können durch eine organische Base, z. B. Benzyltrimethylammoniumhydroxid, durch ein Alkalimetallhydroxid oder zweckmäßig durch Verwendung eines Alkalimetallsalzes, z. B. eines Natriumsalzes, der allgemeinen Formel V geschaffen werden. Die Acetylendicarbonsäure oder das Salz von dieser und die Verbindung der allgemeinen Formel V werden vorzugsweise in ungefähr stöchiometrischen Mengen umgesetzt, wobei überschüssiges Alkali in wäßriger Lösung verwendet wird. Die Reaktion wird vorzugsweise bei Temperaturen zwischen etwa 50 und 150⁰C durchgeführt.

In der obengenannten Reaktion kann der Acetylendicarbonsäureester oder die Säure durch eine Mono-halogenfumarsäure bzw. -ester oder einen Vorläufer von diesen ersetzt werden. In diesem Fall findet eine Kondensationsreaktion mit dem Halogenfumarsäureester und der Verbindung der allgemeinen Formel V unter Abspaltung von Halogensäure oder Alkalimetallhalogenid statt. Die Reaktion wird deshalb vorzugsweise in Anwesenheit eines Säureabfangmittels durchgeführt, wenn M Wasserstoff bedeutet, obwohl gegebenenfalls auch andere Methoden zur Abspaltung der Halogensäure benutzt verden können. Es ist auch möglich, einen Vorläufer des Halogenfumarsäureester, ζ. B. ein Halogenmaleat oder einen Dihalogenbernsteinsäureester, zu verwenden. Bei Verwendung von Vorläufern kann es notwendig sein, zusätzliches Alkali zuzugeben, um die Umwandlung des Vorläufers in den Halogenfumarsäureester sicherzustellen.

Verbindungen der allgemeinen Formel V können durch Sulfochlorierung (oder durch Sulfonierung, gefolgt von der Umwandlung der Sulfonsäuregruppe in eine Sulfonylchloridgruppe, z. B. durch Reaktion mit POCI3) des Benzolrings hergestellt werden, wobei eine Verbindung erhalten wird, die eine Gruppe der Teilformel X

eineThiophenolgruppe der Teilformel XI

-SH

(XD

-SO₂CI

(X)

enthält: diese driinnp kann Hnnn rpHu7iprt ιιιργΗρπ um

herzustellen, die dann gegebenenfalls durch herkömmliche Methoden in die entsprechende Alkalimetallverbindung umgewandelt werden kann.
Die Sulfochlorierung kann durch bekannte Verfahren,

ίο z. B. durch Verwendung von Chlorsulfonsäure in einem inerten Lösungsmittel, wie Chloroform, bei Temperaturen unter etwa 0°C, durchgeführt werden. Die Reduktion des Chlorsulfonats in ein Thiophenol kann z. B. unter Verwendung von Zinn(II)-chlorid unter sauren Bedingungen, die durch Chlorwasserstoff und Eisessig geschaffen werden können, durchgeführt werden.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I und die dafür benötigten Zwischenprodukte können durch herkömmliche Methoden zur Gewinnung und Reinigung ähnlicher bekannter Verbindungen gewonnen und gereinigt werden.

In dem oben beschriebenen Verfahren können die freien Säuren der allgemeinen Formel I oder Salze,

2) Ester oder Amide von diesen erhalten werden. Es liegt ebenfalls im Rahmen der vorliegenden Ei findung, das Produkt ö?s oben beschriebenen Verfahrens nach gegebenenfalls durchgeführten Abtrennungs- und Reinigungsstufen zu behandeln, um die freie Säure

jo freizusetzen oder eine Form von Derivaten in eine andere umzuwandeln. Die zur Abtrennung und Reinigung des Produkts angewandten Verfahren können herkömmlicher Art sein. So können Salze z. B. unter Anwendung von alkalischen Bedingungen während der

r> Gewinnung und Reinigung der Verbindung hergestellt werden. Wahlweise kann aus der freien Säure durch Neutralisieren mit einer Base, z. B. einem organischen Amin oder einem Alkali, wie einem Alkalimetall- oder Erdalkalimetallhydroxid, -carbonat oder -bicarbonat, vorzugsweise einer milden Base oder einem milden Alkali, wie Natriumcarbonat oder -bicarbonat, das gewünschte Salz erhalten werden. Es können auch Salze hergestellt werden, indem man einen Ester oder ein Amid mit einer Base behandelt. Wenn die Verbindung

<n bereits in Form eines Salzes gewonnen wird, kann dieses Salz — ζ. B. durch doppelte Umsetzung — in ein anderes, bevorzugtes Salz umgewandelt werden. Die Ester und Amide können durch bekannte Methoden hergestellt werden.

w Pharmazeutisch verwendbare Derivate der Verbindungen der allg. Formel I umfassen pharmazeutisch verwendbare Salze (insbesondere wasserlösliche Salze), Ester und Amide einer oder beider Carbonsäuregruppen. Zu geeigneten Salzen zählen z. B. Ammoniumsalze,

>") Alkalimetallsalze (z. B. Natrium-, Kalium- und Lithiumsalze), Erdalkalimetallsalze (ζ. Β. Magnesium- und Calciumsalze) und Salze mit organischen Basen, z. B. Aminsalze, die sich von niederen Mono-, Di- oder Trialkylaminen oder niederen Alkanolaminen (wie

w) Triäthanolamin oder Triäthylamin) ableiten und Salze mit heterozyklischen Aminen, wie Piperidin oder Pyridin.

Bevorzugte pharmazeutisch verwendbare Derivate der Verbindungen der allgemeinen Formel I sind die

b"> Alkalimetallsalze (z. B. Natriumsalze).

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I und pharmazeutisch verwendbare Derivate von diesen

....„w. ..w.i.u·.^ 1.11.,VIiUUlI₅₁ UO JIW III ItLIVII L/L Λ .

Menschen eine pharmakologische Wirksamkeit besitzen. Sie sind insbesondere nützlich, da sie die Freisetzung und/oder Wirkung von pha^makologischen Vermittlern (»mediators«) hemmen, die von der Kombination in vivo bestimmter Arten von Antikörpern mit bestimmten Antigenen, z. B. der Kombination reaginischer (»reaginic«) Antikörper mit bestimmten Antigenen (siehe Beispiel A) herrühren. Sowohl subjektive als auch objektive Veränderungen, die durch das Einatmen bestimmter Antigene durch sensibilisierte Individuen verursacht werden, werden durch die vorherige Verabreichung der neuen Verbindungen gehemmt. Die neuen Verbindungen sind daher für die Anwendung bei der Behandlung von Asthma, z. B. allergischem Asthma, geeignet Die neuen Verbindungen werden auch zur Behandlung von sogenanntem innerem Asthma (bei dem keine Empfindlichkeit gegenüber äußeren Antigenen nachgewiesen werden kann) verwendet. Die neuen Verbindungen sind auch bei der Behandlung anderer Zustände, bei denen Antigen-Antikörper-Reaktionen die Ursache der Krankheit sind, sehr wertvoll, zum Beispiel bei Heufieber und Nesselfieber.

Bei den vorstehend genannten Anwendungen wird die verabreichte Dosierung natürlich je nach angewandter Verbindung, Verabreichungsform und gewünschter Behandlung variieren. Im allgemeinen werden jedoch zufriedenstellende Ergebnisse erzielt, wenn die Verbindungen in einer Dosierung von etwa 0,1 bis 50 mg pro kg des Körpergewichts in dem in Beispiel A beschriebenen Versuch verabreicht werden. Beim Menschen beträgt die tägliche Dosierung zwischen etwa 1 und 3500 mg, die in Einzeldosen 1 bis 6 mal täglich oder in 1 Dosis mit verzögerter Freisetzung verabreicht werden kann. So enthalten zur Verabreichung geeignete Dosierungsformen (zur Inhalation oder zur Verabreichung durch die Speiseröhre) zwischen etwa 0,17 und 600 mg der mit einem festen oder flüssigen pharmazeutisch verwendbaren Verdünnungsmittel oder Träger vermischten Verbindung.

Erfindungsgemäß werden außerdem pharmazeutische Präparate geschaffen, die eine Verbindung der allgemeinen Formel I oder ein pharmazeutisch verwendbares Salz, Ester oder Amid in Verbindung mit einem pharmazeutisch verwendbaren Adjuvanten, Verdünnungsmittel oder Träger umfassen. Geeignete Adjuvanten, Verdünnungsmittel oder Träger sind: für Tabletten und Dragees: Laktose, Stärke, Talkum oder Stearinsäure; für Kapseln: Weinsäure oder Laktose; für Suppositorien: natürliche oder gehärtete öle oder Wachse; für Inhalationspräparate: grobe Laktose. Für die Verwendung als Inhalationspräparate haben die Verbindungen der allgemeinen Formel I oder die pharmazeutisch verwendbaren Salze, Ester oder Amide vorzugsweise eine Teilchengröße von etwa 0,01 bis 10 Mikron. Die Zusammensetzungen können auch Konservierungs-, Stabilisierungs- und Netzmittel, löslichmachende Mittel, Süßungs-, Färbungs- und geschmacksverbessernde Mittel enthalten. Gegebenenfalls können die Zusammensetzungen in Form von Medikamenten mit verzögerter Freisetzung hergestellt werden.

Es wird bevorzugt, daß diejenigen Gruppen P, Q, R und T, die keine Kette

-CO-CH^C(COOH)-S-

Es ist selbstverständlich, daß in den Verbindungen der allgemeinen Formel I die Kette

-CO-CH = C(COOH)-S-

entsprechend den beiden Möglichkeiten mit dem Benzolring verbunden sein kann.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1

4,10-Dioxo-4 H,10 H-benzo(l,2-b :3,
dithiapyran-2,8-dicarbonsäure

Einer Lösung von 4,5 Teilen Kaliumhydroxid in 25 Teilen Wasser wurden 2,8 Teile Dithioresorcin zugegeben. Das Gemisch wurde geschüttelt, um eine klare Lösung zu erhalten, welcher dann 6,5 Teile Acetylendicarbonsäuremonokaliumsalz zugegeben wurden. Die so erhaltene Lösung wurde 40 Minuten auf dem Dampfbad erhitzt und ließ sie dann abkühlen. Anschließend wurde sie filtriert und dann mit 5 η Schwefelsäure angesäuert. Es bildete sich ein Niederschlag, der abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet wurde. Man erhielt 7,9 Teile eines cremefarbenen Pulvers, das mit einem Gemisch aus 45 Teilen Diäthyläther und 16 Teilen Methanol extrahiert wurde. Die Lösung wurde abfiltriert und abgedampft, wodurch man 6,3 Teile Benzol- l,3-bis-(thiofumarsäure)-hemihydrat erhielt. Schmelzpunkt bei 231 °C (Zersetzung).

_Jo Analyse:

Gefunden: C = 44,5%, H = 2,64%, S = 17,0%;
berechnet: C = 44.4%, H =2,90%, S= 16,9%.
für CmHI₀O₈S₂ · 1/2 H₂O

r- Einer gerührten Lösung von 27 Teilen Chlorsulfonsäure wurden in kleinen Anteilen 3,0 Teile Benzol-1,3-bis-(thiofumarsäure)-hemihydrat zugegeben. Die Lösung wurde 20 Minuten gerührt, dann sorgfältig mit 30 Teilen konzentrierter Schwefelsäure verdünnt und schließlich kurz auf 50°C erhitzt. Nachdem sich die Lösung abgekühlt hatte, wurde sie sorgfältig in 200 Teile Eiswasser gegossen. Es entstand ein Niederschlag, der zuerst unter dem Eigengewicht, dann unter vermindertem Druck abfiltriert wurde, wobei ein organgefarbener Schlamm zurückblieb, der aus einem Dioxan/Essigsäure/Wassergemisch umkristallisiert wurde. Man erhielt 1,6 Teile 4,10-Dioxo-4 H,10 H-benzo(l,2-b : 3.4-b')-dithiapyran-2,8-dicarbonsäure-hemihydrat.

-₍₎ Analyse:

Gefunden: C = 49,1%, H = 1,99%, S= 13,43%;
berechnet: C = 49,0%, H =2,04%, S= 18,65%.
TUrC₁₄H₆O₆S₂ · 1/2H₂O

·"» Es wurde eine Lösung von 0,8 Teilen 4,10-Dioxo-4 H₁IO H-benzo(l,2-b :3,4-b')-dithiapyran-2,8-dicarbonsäure-hemihydrat und 0,196 Teilen Natriumbikarbonat in 25 Teilen Wasser zubereitet, filtriert und gefriergetrocknet, man erhielt 0,9 Teile 4,1 O-Dioxo-4 H₁IO H-ben-

bo zo(l,2-b : S^-b'J-dithiapyran^.e-dicarbonsäure-dinatriumsalz.

Beispiel 2

6-Methoxy-4,10-dioxo-4 H,10 H-benzo(l,2-b : 3,4-b')-dithiapyran-2,8-dicarbonsäure

bilden, = Wasserstoff oder Ci_₆-Alkyl und Ci-b-Alkoxy Einer Lösung von 4,5 Teilen Kaliumhydroxid in 25

Ci'iCn WaSScT Wiii den 3.44 Teile 4-mcinOxvuiinii'ii rsOi-

ein zugegeben. Das Gemisch wurde geschüttelt, um eine klare Lösung zu erhalten, die mit 6,5 Teilen Acetylendicarbonsäure-monokaliumsalz behandelt wurde. Die Lösung wurde 45 Minuten auf dem Dampfbad erhitzt, dann gekühlt, filtriert und mit 5 η Schwefelsäure angesäuert. Das Gemisch wurde mit Äther extrahiert und die ätherische Lösung über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, dann filtriert und abgedampft, wobei sie einen festen Rückstand hinterließ, der zerstoßen und getrocknet wurde. Man erhielt 7,3 Teile 4-Methoxybenzol-1,3-bis(thiofumarsäure)-hemihydrat. Schmelzpunkt 190°C(Zers.).

Analyse:

Gefunden: C = 44,6%. H =3,12%, S= 15,23%;
berechnet: C = 44,1%, H = 3,18%, S= 15,65%.
₂- V₂H₂O

Einer gerührten Lösung von 27 Teilen Chlorsulfonsäure wurden in kleinen Anteilen 3,0 Teile 4-Methoxybenzol-1,3-bis(thiofumarsäure)-hemihydrat zugegeben. Die Lösung wurde 20 Minuten gerührt, dann sorgfältig mit 30 Teilen konzentrierter Schwefelsäure verdünnt, kurz auf 50⁰C erhitzt, gekühlt und in 200Teile Eiswasser gegossen. Man erhielt einen Niederschlag, der zuerst unter Eigengewicht und dann unter vermindertem Druck abfiltriert und dann mit 100 Teilen einem Dioxan-Wasser-Gemisch (4:1) gekocht wurde. Das Gemisch wurde gekühlt und unter Eigengewicht abfiltriert. Dann wurde der Niederschlag in wäßriger Natriumbicarbonatlösung gelöst und durch Ansäuern mit 2n Salzsäure nochmals ausgefällt. Der Niederschlag wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen, getrocknet und zerstoßen. Man erhielt 1,7 Teile 6-Methoxy-4,i0-dioxo-4 H,10 H-benzo(1.2-b : 3,4-b')dithiapyran-2,8-dicarbonsäure-monohydrat. Schmelzpunkt 270° C (Zers.).

Analyse:

Gefunden: C = 46,8%, H=2,12%, S = 17,7%;
berechnet: C=47,l%, H=2,62%. S = 16.76%.
für C₁₅H₈O₇S₂ · H₂O

Es wurde eine Lösung von 1,0 Teilen 6-Methoxy-4,10-dioxo-4 H₁IO H-benzo-(1,2-b : 3,4-b')dithiapyran-2,8-dicarbonsäure-monohydrat, und 0,22 Teilen Natriumbicarbonat in 25 Teilen Wasser zubereitet, filtriert und gefriergetrocknet. Man erhielt 1,1 Teile 6-Methoxy-

4,10-dioxo-4 H, 10 H-benzo(l,2-b : 3,4-b')dithiapyran-2,8-dicarbonsäure-dinatriumsalz.

Beispiel 3

5,10-DimethyI-4,6-dioxo-4 H,6 H-benzo-(1,2-b : 5,4-b')dithiapyran-2,8-dicarbonsäure

Einer Lösung von 9,0 Teilen Kaliumhydroxid in 50 Teilen Wasser wurden 6.8 Teile 2,5-Dimethyldithioresorcin zugegeben. Das Gemisch wurde geschüttelt. Die so erhaltene klare Lösung wurde mit 13 Teilen Acetylendicarbonsäure-monokaliumsalz behandelt, das so entstandene Gemisch wurde 45 Minuten auf dem Dampfbad erhitzt, dann gekühlt, abfiltriert und mit 20% (VoiyVol.) Schwefelsäurelösung angesäuert. Es wurde ein Öl ausgefällt, das erstarrte, wenn es mit einem Glasstab gekratzt wurde. Der Niederschlag wurde abfiltriert und getrocknet und ergab einen orangefarbenen Rückstand, der mit einem Äther-Methanol-Gemisch extrahiert wurde. Die Lösung wurde filtriert und abgedampft und hinterließ einen orangefarbenen Rückstand, der zerstoßen und getrocknet wurde. Man erhielt 13,7 Teile l,4-Dimethylbenzol-2,6-bis-(thiofumarsäure)-hemihydrai, Schmelzpunkt 235°C (Zers.).

. Analyse:

Gefunden: C = 47,0%, H =3,52%, S= 15,95%;
berechnet: C = 47,2%, H =3,68%, S= 15,72%.
rürCIbHuO₈S₂ · V₂H₂O

in Einer gerührten Lösung von 27 Teilen Chlorsulfonsäure wurden in kleinen Anteilen 3,0 Teile 1,4-Dimethylbenzol-2,6-bis(thiofumarsäure)-hemihydrat zugegeben. Die Lösung wurde 20 Minuten gerührt, dann vorsichtig mit 30 Teilen konzentrierter Schwefelsäure verdünnt,

ii kurz auf 5O⁰C erhitzt, gekühlt und auf 200 Teile Eis gegossen. Man erhielt einen feinen Niederschlag, der zuerst unter Eigengewicht und dann unter vermindertem Druck abfiltriert wurde. Das feuchte Produkt wurde mit 80 Teilen Dioxan gekocht, dann gekühlt und das lösliche Material abfiltriert und aus 450 Teilen eines Dioxan-Wasser-Gemisches (3:1) umkristallisiert. Man erhielt 1,3 Teile 5,10-Dimethyl-4,6-dioxo-4H,6H-benzo(l,2-b : 5,4-b')dithiapyran-2,8-dicarbonsäure-monöhydrat, Schmelzpunkt 269°C (Zers.).

Analyse:

Gefunden: C = 50,3%, H
berechnet: C = 50,6%, H
für C₁₆H₁₀O₆S₂ · H₂O.

3,04%, S= 16,33%;
3,16%, S= 16,85%.

Es wurde eine Lösung von 0,8 Teilen 5,10-Dimethyl-4,6-dioxo-4H,6H-benzo(l,2-b : 5,4-b')-dithiapyran-2,8-dicarbonsäure-monohydrat und 1,77 Teilen Natriumcarbonat in 25 Teilen Wasser zubereitet, filtriert und j) gefriergetrocknet und ergab 0,9 Teile 5,10-Dimethyl-4,6-dioxo-4H,6H-benzo(1,2-b : 5,4-b')-dithiapyran-2,8-dicarbonsäure-dinatriumsalz.

Beispiel A

4Ii Das nachstehend beschriebene Verfahren kann angewandt werden, um festzustellen, mit welchem Erfolg eine Verbindung das Wirksamwerden der pharmakologischen Vermittler von Anaphylaxie hemmt.

In diesem Versuch wird die Wirksamkeit der Verbindungen bei der Hemmung der passiven anaphylaktischen Hautreaktion bei Ratten ermittelt. Es wurde gefunden, daß diese Versuche verläßliche qualitative Hinweise auf die Fähigkeit der getesteten Verbindungen in bezug auf ihre Hemmwirkung gegen Antikörper-Antigenreaktionen beim Menschen gibt.

In diesem Versuch werden von Charles River Frankreich/Fisons gezüchtete Ratten (männlich oder weiblich) mit einem Körpergewicht von etwa 100 bis 150 g in wöchentlichen Abständen subkutan mit 'N. brasiliensis'-Larven infiziert, und zwar in von etwa 2000 Larven bis etwa 12 000 Larven pro Tier zunehmenden Dosen, um eine Infektion zu erreichen. Nach 8 Wochen wird den Ratten durch Herzpunktur

bo Blut entnommen und pro Tier etwa 15—20 ml Blut gesammelt. Die Blutproben werden dann bei 3500 UpM 30 Minuten lang zentrifugiert, um die Blutzellen vom Blutplasma zu trennen. Das Serum wird gesammelt und benutzt, um ein 'N. brasiliensis'-Antikörper enthaltendes

b5 Serum herzustellen. Ein Sensibilisierungsversuch wird durchgeführt, um die Mindestserummenge festzustellen, die benötigt wird, um bei Versuchstieren in dem unten beschriebenen Versuch Hautflecken von 2 cm Durch-

ίο

messer hervorzurufen. Es wurde gefunden, daß bei Ratten mit einem Körpergewicht von etwa 100-130g eine optimale Sensibilisierung erreicht wurde, wenn ein mit acht Teilen an physiologischer Salzlösung verdünntes Serum verwendet wurde. Diese verdünnte Lösung wird Antikörperserum A genannt.

Das auf die Antikörper des Serums A reagierende Antigen wird hergestellt, indem N. brasiliensis-Würmer aus den Eingeweiden der befallenen Ratten entfernt, das Homogenat zentrifugiert und die darüberstehende Flüssigkeit gesammelt wird. Diese Flüssigkeit wird mit einer Salzlösung verdünnt, wobei man einen Proteingehalt von 1 mg/ml erhielt. Diese Lösung wird Lösung B genannt.

Von Charles River Frankreich/Fisons gezüchtete Ratten mit einem Körpergewicht zwischen etwa 100 und 130 g werden durch intradermale Injektionen von 0,1 ml des Serums A in die rechte Flanke sensibilisiert. Man läßt die Sensibilisierung sich 24 Stunden lang entwickeln, dann wird den Ratten ImI pro 100 g Körpergewicht einer Mischung von Lösung B (0,25 ml), Evans Blaufarbstofflösung (0,25 ml) und der Lösung der zu untersuchenden Verbindung (0,5 ml mit unterschied-

liehen Prozentsätzen an Wirkstoffen) intravenös injiziert. Unlösliche Verbindungen werden als einzelne intraperitoneale Injektionen 5 Minuten vor der intravenösen Verabreichung der Lösung B unc⁴ dem Evans Blaufarbstoff verabreicht. Je fünf Ratten wird jeweils die gleiche Menge an aktivem Wirkstoff mit der zu untersuchenden Lösung injiziert. Fünf Ratten werden in jedem Versuch als Vergleichstiere verwendet. Die Dosierungen der Versuchsverbindungen sind so gewählt, daß man eine Reihe von Hemmwerten erhält.

Dreißig Minuten nach der Injektion der Lösung B werden die Ratten getötet und die Haut entfernt und umgedreht. Die Intensität der anaphylaklischen Reaktion wird durch einen Vergleich der Größe der charakteristischen biauen Steilen (»weai«), die durch den sich von der Sensibilisierungsstelle ausbreitenden Evans Blaufarbstoff hervorgerufen werden,' mit der Größe der Stellen bei den Vergleichstieren bestimmt. Die Größe der Stellen wird in Gruppen von 0 (keine entdeckten Steilen, d.h. 100% Hemmung) bis 4 (kein Unterschied in der Größe der Stellen, d. h. keine Hemmung) eingeteilt, und der Prozentsatz der Hemmung bei jeder Dosierung wie folgt berechnet:

Hemmung (%) - (Ergebnis Vergleichsgruppe - Ergebnis behandelte Gruppe) ■ 100

Ergebnis Vergleichsgruppe

Die Hemmung in % der verschiedenen Dosierungen wird für jede Verbindung graphisch dargestellt. Anhand dieser graphischen Darstellungen kann die jeweils für eine 50%ige Hemmung der allergischen Reaktion (ID₅₀) benötigte Dosis ermittelt werden.

In der oben beschriebenen Weise werden die Werte für die Verbindungen auch bei intestinaler Verabreichung und Verabreichung über den Magen ermittelt.

Ergebnisse der Vergleichsversuche des Verfahrens nach Beispiel A. Es wurden folgende Werte der Wirksamkeit gefunden:

Verbindung

ID₅₀-WeH
(mg/kg)

4,10-Dioxo4H, 10H-Benzol-(l,2-b : 3,4-b')- 0,7 dithiapyran-2,8-dicarbonsäure

6-Methoxy-4,l 0-dioxo-4H, 1OH-benzo- 0,25

(1,2-b: 3,4-b')dithiapyran-2,8-

dicarbonsäure

5,10-Dimethyl-4,6-dioxo-4H,6H-benzo- 0,2 (1,2-b: 5,5-b')dithiapyran-2,8-dicarbonsäure

Mepyraminmaleat 25,0

Claims

Patentansprüche:

1. Benzodithiapyroncarbonsäuren der allgemeinen Formel I

COOH

in der ein angrenzendes Paar von P, Q, R und T die Kette

-CO-CH=(COOH)-S-

bildet und in der die übrigen Reste P, Q, R und T jeweils Wasserstoff bzw. einen Ci _₆-Alkyl- oder Ct-6-Alkoxyrest bedeuten, sowie deren pharmazeutisch verwendbare Salze, Ester oder Amide.

2. Verfahren zur Herstellung von Benzodithiapyroncarbonsäuren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel H

H COOM

CH

(ID

C-COOM

in der ein angrenzendes Paar von P¹, Q¹, R¹ und T¹ zusammen eine Kette

-CO-CH=(COOM)-S-
oder die Gruppen

- H und - S - C(COOM) = CH - COOM

Dedeutet und die übrigen Reste P¹, Q¹, R¹ und T¹ die angegebene Bedeutung haben können, die jeweils den Definitionen der Reste P, Q, R und T in Anspruch 1 entsprechen und M Wasserstoff oder ein Alkalimetall bedeutet, in an sich bekannter Weise cyclisiert, und gegebenenfalls in pharmazeutisch verwendbare Salze, Ester bzw. Amide umwandelt.

3. Pharmazeutische Präparate enthaltend eine Benzodithiapyroncarbonsäure, deren Salze, Ester bzw. Amide nach Anspruch 1 als aktiven Wirkstoff, vorzugsweise in Kombination mit einem pharmazeutisch verwendbaren Adjuvans, Verdünnungsmittel oder Träger umfassen und vorzugsweise in Form einer Dosierungseinheit mit 0,17 bis 600 mg des aktiven Wirkstoffs.

Gegenstand der Erfindung sind Benzodithiapyrone der allgemeinen Formel I