DE2145477C3 - Impfstoff für die intracutane Pockenschutzimpfung - Google Patents
Impfstoff für die intracutane PockenschutzimpfungInfo
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Description
Bei der bisher üblichen Impfung gegen Pocken unter Verwendung eines stark reaktogenen Impfstammes
und unter Anwendung der epicutanen Skarifikation bei Insertion des Virus kommt es in bestimmtem zeitlichen
Ablauf zur Ausbildung einer Impfpustel. Letztere ist
Ausdruck eines infektiös-allergischen Geschehens, wobei zellulär-allergische Reaktionen im Vordergrund
stehen.
Es ist eine schon seit längerer Zeit bekannte Tatsaehe,
daß die Reaktogenität einer Impfung nicht identisch ist mit deren Immunogenität: Dies bedeutet, daß
starke Impfreaktionen nicht auch zu einem starken Infektionsschutz gegenüber dem krankmachenden Variola-Virus
führen müssen. Diese Erkenntnis war in den letzten Jahren Grund für die Einführung des weniger
reaktogenen Impfstammes Elstree, allerdings auch unter Anwendung der epicutanen Skarifikation.
Der Nachteil dieser Art der Pockenschutzimpung besteht
darin, daß sie in nicht seltenen Fällen, besonders wenn es zu einer zusätzlichen Sensibilisierung gekommen
ist, zu EEG-Veränderungen führt. Ursache hierfür sind phylogenetisch angelegte funktioneile Brücken
zwischen Zentralnervensystem und Haut.
Aus diesem Grunde erscheinen die Forderungen, bei der Pockenimpfung eine cutane Pustelreaktion herbeizuführen
und gleichzeitig eine risikofreie Impfung durchführen zu wollen, miteinander nicht vereinbar;
denn so lange eine so ausgeprägte immun-allergische Reaktion an der Haut erzwungen wird, kann nicht verhindert
werden, daß nicht auch neuroailergische Begleitreaktionen am Zentralnervensystem auftreten.
Man hat daher versucht, mit sogenannten attentuierten Impfstoffen zu arbeiten. Alle diese Versuche gingen
davon aus, daß normales Vaccinia-Virus über 20 bis 50 Passagen auf der Chorionallantoismembran gezüchtet
wurde und dann in einer relativ hohen Konzentration bei der Impfung zur Anwendung kam. Die Passage des
Impfvirus über den Hühner-Embryo führte in der Tat zu einer Selektion nicht einheitlicher Impfstämme, so
daß nach mehreren Kulturen ein genetisch im wesentlichen einheitlicher Impfstamm gewonnen werden konnte.
Ferner kam es bei diesen Impfstoffen zu einem Rückgang der Reaktogenität, d. h., daß die lokale Impfreaktion
milder war und weniger Impffieber auftrat; auch die Virämierate bei Impfung mit solchen Impfstoffen
ist deutlich reduziert. Aber auch bei dieser Methode wurde nicht auf die pustulöse Impfreaktion verzichtet.
Dementsprechend waren bei Impfungen mit diesen Impfstämmen ebenfalls zentral-nervöse Komplikationen
mit fast der gleichen Erwartungsfrequenz wie nach Impfung mit konventionellen Impfstoffen eingetreten.
Schließlich hat man auch schon versucht, mit normalem Impfstoff entweder subcutan zu impfen — das ergab
bis zu 60% Schwellungen im Unterhautgewebe —, <>5
oder aber intracutan — das ergab ebenfalls wieder Pusteln und zwar mit Gewebenekrosen.
Demgegenüber geht die Erfindung von der Erkenntnis aus, daß es — um dis Nachteile aller bisher bekannten
Pockenschutzimpfverfahren zu vermeiden — darauf
ankommt, einen Impfstoff zu verwenden, bei dem keine cutane Impfreaktion wie Bildung einer Impfpustel
auftritt
Gemäß der Erfindung wird dies mit einem Impfstoff für die intracutane Pockenschutzimpfung erreicht ; er
enthält das Vaccinia-Virus Ankara, das in über 500 Passagen in Hühner-Fibroblasten-Zellen gezüchtet worden
ist, so daß ein modifiziertes, genetisch einheitliches, in seiner Reaktogenität und Virulenz durch die Zellpassagen
abgeschwächtes Vaccinia-Virus vorliegt. Dabei enthalten 1 ecm des Fertigimpfstoffes, in gereinigter
lyophilisierter Form, etwa 107 Viruspartikel; 0,1 bis maximal 0,2 ecm werden intracutan injiziert. Damit ist eine
genauere Dosierung als bei den bisher bekannten Impfverfahren möglich. Außerdem ist aber eine Kontrolle
des Impfverlaufes dadurch gegeben, daß sich an Ort und Stelle der Injektion Rötung, leichte Schweifung mit
Durchmesser von 4x8 mm und manchmal auch Juckreiz
zeigen; es kommt aber auf keinen Fall zu einer pustulösen Impfreaktion. Eine humorale (serumgebundene)
und gewebliche Sensibilisierung (Allergie) in klinisch nennenswerter Form tritt also nicht ein, jedoch ist
eine zelluläre Immunität, die eine Ausbreitung und Vermehrung im Gewebe verhindert, nachweisbar.
Bei Anwendung des erfindungsgemäßen Impfstoffes läuft die Impfreaktion ohne Fieber und beeinträchtigende
andere Allgemeinerscheinungen ab, im Gegensatz zu den bisher bekannten Impfverfahren, bei denen
zuweilen Krankheitserscheinungen wie Impffieber, Impf-Ulcus (Geschwür), Impf-Exanthem (Ausschlag)
auftreten und sogar Gehirnzellen-Entzündung, die stets zu bleibenden Schäden, wenn nicht zum Tode führt.
Nach Ablauf von 8 Tagen nach der Injektion bilden sich Rötung und Schwellung zurück, es bleibt dann aber
zunächst am Ort der Injektion noch ein kleines gelblich-bräunliches Knötchen zu sehen und zu tasten, das
jedoch spätestens nach 21 Tagen vollständig verschwindet.
Ein weiterer wesentlicher Vorteil des erfindungsgemäßen Impfstoffes ist darin zu sehen, daß durch seine
Anwendung eine vaccinale Basisimmunität geschaffen werden kann, die verhindert, an den vorgenannten
Komplikationen der bekannten Impfverfahren zu erkranken. Wenn diese Basisimmunität vorhanden ist,
dann können alle weitere Pockenschutzimpfungen nach den üblichen Verfahren nicht mehr zur Gehirnzellenentzündung
führen. Der erfindungsgemäße Impfstoff ist daher geeignet, die Impfung bei bisher durch Alter oder
Krankheit bedingten unumgänglichen Impfhindernissen gefahrlos durchzuführen.
Der Vaccinia-Virus Ankara Impfstoff ist ein Gewebekulturimpfstoff,
wobei es sich bei dem Saat-Virus um die 519. bis 523. Zellkulturpassage des Vaccinia-Vjrusi
»Ankara« auf leukosefreien Hühnerfibroblastenkuhuren handelt. Die Viren der 513. bis 530. Zeükulturpassage
sind konstant, genetisch einheitlich, attenuiert, frei von Hühnerleukose-Virus und frei von cancerogenen
Eigenschaften. Das Vaccinia-Virus Ankara wird von spezifischen Antiseren gegen den Vaccinia-Virusstamm
»Elstree« neutralisiert· es besteht eine partielle Antigenkorrespondenz.
Saatvirus, das diese Voraussetzung erfüllt, wird in Zeilkulturllaschen in einer Menge von 104 VE (Viruseinheiten
= Plaques forming units) ausgesät. Die 500 ml
fassenden Zellkulturflaschen sind mit 20OmI Medium gefüllt (Hanks Tissue Culture Medium + 20% Kälber-Serum).
Die Zellrasen aus primären HühnerfibroblastenzeHen decken den Boden des Gefäßes. Auf diesen
wird das Saatvirus aufgegeben und mit den Zellen über s zwei Stunden lang inkubiert. Danach Dekantieren des
Oberstandes, erneute Inkubation mit frischem Zellmedium, jedoch jetzt ohne Kälber-Serum.
Nach etwa 4 Tagen stellen sich zahlreiche proliferative Plaques ein. Ist die Zahl der Plaques so groß, daß sie
den überwiegenden Teil des Zellrasens ausmachen, erfolgt die Ernte des Virus wie folgt: Sprengen der Zellen
durch Einfrieren und Auftauen, niedertouriges Abzentrifugieren des groben Zelldetritus bei 600 g (10 Min.);
hochtouriges Abzentrifugieren (50 000 g/20 Min.) unter Kühlung (+40C) des Virus; Aufnehmen des Sedimentes
in gepufferter (pH 7,2) Kochsalzlösung (PBS); Reinigung durch Ausschütteln mit einem aliphatischen
Chlorfluorkohlenwasserstoff, Zentrifugation; Aufnahme des Sediments in V20 des Ausgangsvolumens von
PBS in Kälte; Zusatz von Pepton (2%) und von Human-Albumin (1%). Lyophilisation. Prüfung auf Virusgehalt,
Wirksamkeit, Stabilität und auf eventuelle Verunreinigung mit Fremderregern. Einstellen des Impfstoffes
auf mehr als 107 VE pro ml in resuspendiertem
Zustand. Nachweis der Identität des Erntevirus mit dem Saatvirus.
Konfektionierung.
Konfektionierung.
Claims (1)
- Patentanspruch:Impfstoff für die intracutane Pockenschutzimpfung, gekennzeichnet durch den Gehalt an Vaccinia-Virus Ankara, das in Ober 500 Passagen in Hühner-Fibroblasten-Zellen gezüchtet worden ist.IO
Priority Applications (6)
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| DE19712145477 DE2145477C3 (de) | 1971-09-11 | Impfstoff für die intracutane Pockenschutzimpfung | |
| BE787901A BE787901A (fr) | 1971-09-11 | 1972-08-23 | Vaccin antivariolique |
| AT771172A AT320149B (de) | 1971-09-11 | 1972-09-08 | Verfahren zur Herstellung eines attenuierten, modifizierten Pockenschutzimpfstoffes |
| CH1297272A CH568392A5 (de) | 1971-09-11 | 1972-09-08 | |
| DK447972A DK137392C (da) | 1971-09-11 | 1972-09-11 | Fremgangsmaade til fremstilling af en koppebeskyttelsesvaccinei form af svaekket vaccinia-vira,til brug ved forvaccination inden den egentlige koppevaccination |
| ES406590A ES406590A1 (es) | 1971-09-11 | 1972-09-11 | Procedimiento para la vacunacion preventiva contra viruela. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19712145477 DE2145477C3 (de) | 1971-09-11 | Impfstoff für die intracutane Pockenschutzimpfung |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2145477A1 DE2145477A1 (de) | 1973-03-15 |
| DE2145477B2 DE2145477B2 (de) | 1976-04-01 |
| DE2145477C3 true DE2145477C3 (de) | 1976-11-18 |
Family
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