DE1933846A1 - Vorrichtung zur Synthese von Peptiden oder aehnlichen organischen Verbindungen - Google Patents

Vorrichtung zur Synthese von Peptiden oder aehnlichen organischen Verbindungen

Info

Publication number
DE1933846A1
DE1933846A1 DE19691933846 DE1933846A DE1933846A1 DE 1933846 A1 DE1933846 A1 DE 1933846A1 DE 19691933846 DE19691933846 DE 19691933846 DE 1933846 A DE1933846 A DE 1933846A DE 1933846 A1 DE1933846 A1 DE 1933846A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
vessel
reaction vessel
reduced pressure
reagent
sample vessel
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
DE19691933846
Other languages
English (en)
Other versions
DE1933846C3 (de
DE1933846B2 (de
Inventor
Tasuku Hara
Toshiya Kubodera
Hideki Makabe
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shimadzu Corp
Original Assignee
Shimadzu Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shimadzu Corp filed Critical Shimadzu Corp
Publication of DE1933846A1 publication Critical patent/DE1933846A1/de
Publication of DE1933846B2 publication Critical patent/DE1933846B2/de
Application granted granted Critical
Publication of DE1933846C3 publication Critical patent/DE1933846C3/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
    • C07K1/045—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers using devices to improve synthesis, e.g. reactors, special vessels
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J19/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J19/0046—Sequential or parallel reactions, e.g. for the synthesis of polypeptides or polynucleotides; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making molecular arrays
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/00277—Apparatus
    • B01J2219/00279—Features relating to reactor vessels
    • B01J2219/00281—Individual reactor vessels
    • B01J2219/00286—Reactor vessels with top and bottom openings
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/00277—Apparatus
    • B01J2219/00351—Means for dispensing and evacuation of reagents
    • B01J2219/00414—Means for dispensing and evacuation of reagents using suction
    • B01J2219/00416—Vacuum
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/00277—Apparatus
    • B01J2219/00351—Means for dispensing and evacuation of reagents
    • B01J2219/00418—Means for dispensing and evacuation of reagents using pressure
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/00277—Apparatus
    • B01J2219/00351—Means for dispensing and evacuation of reagents
    • B01J2219/00423—Means for dispensing and evacuation of reagents using filtration, e.g. through porous frits
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/00277—Apparatus
    • B01J2219/00497—Features relating to the solid phase supports
    • B01J2219/005—Beads
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/00583—Features relative to the processes being carried out
    • B01J2219/0059—Sequential processes
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/00583—Features relative to the processes being carried out
    • B01J2219/00596—Solid-phase processes
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/0068—Means for controlling the apparatus of the process
    • B01J2219/00686—Automatic
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/0068—Means for controlling the apparatus of the process
    • B01J2219/00695—Synthesis control routines, e.g. using computer programs
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
    • B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
    • B01J2219/00718—Type of compounds synthesised
    • B01J2219/0072—Organic compounds
    • B01J2219/00725—Peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
    • C40B40/04—Libraries containing only organic compounds
    • C40B40/10—Libraries containing peptides or polypeptides, or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B60/00—Apparatus specially adapted for use in combinatorial chemistry or with libraries
    • C40B60/14—Apparatus specially adapted for use in combinatorial chemistry or with libraries for creating libraries

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Physical Or Chemical Processes And Apparatus (AREA)

Description

PATENTANWÄLTE ,
.j 1933B4B
Dr. D. Thomsen H. Tiedtke G. Bühling
Dipl.-Chem. Dipl.-lng. > Ö^i
8000 MÖNCHEN 2
TAL 33
TELEFON 0811/226894
TELEGRAMMADRESSE: THOPATENT MÖNCHEN 3. Juli 1969
case Shimadzu-16 / T 3182
Shimadzu Seisakusho Ltd. Kyoto / Japan
Vorrichtung zur Synthese von Peptiden oder ähnlichen
organischen Verbindungen
Die Erfindung bezieht sich auf eine Vorrichtung zur Synthese von komplizierten organischen Verbindungen, z.B. Peptiden, Proteinen u.dgl. Die Vorrichtung gemäß der Erfindung ist insbesondere auf dem in der Technik allgemein als "Festphasen-Peptidsynthese" bezeichneten Gebiet anwendbar und wird insbesondere mit Bezug auf diese Synthesemethode beschrieben. Aus der Beschreibung geht jedoch hervor, daß sie auch bei der Synthese einer Anzahl von Proteinen und ähnlichen Verbindungen anwendbar ist.
Bekanntermaßen v/erden gemäß der Festphasen-Synthesemethode t-BOC-Arainosäuren der Reihe nach auf das Grundmate-
309883/1703
Mündliche Abreden, Insbesondere durch Telefon, bedürfen schriftlicher BetHtlgung Dresdner Bank München Kto. 108103 · Postscheckkonto München 1188 74
rial aus Divinylbenzol-Harz aufgebracht, um darauf als lange Peptidkette zu wachsen. Diese Methode hat tatsächlich sehr viel zur TheorieT und Technik der Peptidsynthese^ beige-tragen. ' Jedööh*erfordert dieses Verfahren eine große Anzahl von Stuf eil und demgemäß Zeit. Um z.B. eine Aminosäure zur wachsenden Peptidkette zuzugeben, müssen elf Reagenzien der Reihe riacH in das Reaktionsgefäß in soviel wie 28 Stufen gegeben werden; die Arbeitsweise erfordert mehrere Stun den. Die Reagenzmenge, die für eine Stufe des Verfahrens erforderlich ist, ist der Menge des Harzes proportional, das als unlöslicher fester Träger bei der Reaktion dient, und dem Molverhältnis der zuerst mit dem Harz Verbundenen Aminosäure. Zur Synthese eines gewöhnlichen Peptids (wenn die Umsetzung bis zu 100% gehen soll) beträgt die Menge an Aminosäure, die in das Reaktionsgefäß zu geben ist, das 3-bis 4-fache der Menge der für die Reaktion erdörderlichen Aminosäure. Z.B. beträgt die Menge des in einer Stufe des Verfahrens verwendeten Reagenzes nicht weniger als 20 bis 40 ml. Da die meisten der für die Synthesereaktion erforderlichen Reagenzien teuer sind, muß ihr Verlust in den Transportleitungen der Vorrichtung auf ein Minimum herabgesetzt werden.. Dabei muß ferner eine Vermischung verschiedener Reagenzien, die in den Transportleitungen zurückbleiben, vermieden werden. Um die Gesamtzeit abzukürzen, die
909883/1703
zur^Vervollständigung allerStufen,des Verfahrens erforderlich^cijifefepuß; eine Auswahl, von Reagenzien und deren, Transport !inidas_Reaktion6ge faß und aus diesem heraus so schnell wie möglich durchgeführt werden; im Reaktionsgefäß ist es Orforderlich,daß das gewählte und in das Gefäß geleitete Reagenz im Zwischenraum zwischen dem oberen und dem unteren Glasfilter während des Verlaufs der Reaktion verbleibt, so daß es inguter Berührung mit dem im Zwischenraum angeordneten Divinylbenzol-Harz steht., ·
Aufgabe der Erfindung ist es daher, eine neue und verbesserte Vorrichtung zur Synthese von Peptiden, Proteinen oder ähnlichen organischen Verbindungen vorzusehen, die vollständig die vorstehend angeführten Anforderungen erfüllt.
Zur Vorrichtung gemäß der Erfindung gehören ein Reaktionsgefäß, mehrere Reagenzien enthaltende Flaschen, ein Probengefäß, das mit dem Reaktionsgefäß und einer der Flaschen nachWghl verbindbar ist, eine Einrichtung zur Erzeugung von Vakuum und.eine Quelle für unter Druck stehendes inertes Gas. Man läßt das Vakuum oder verminderten Druck auf das Probengefäß einwirken, um eine vorbestimmte Menge des ausgewählten Reagenzes in das Probengefäß abzuziehen, um es darin vorübergehend aufzubewahren, und danach wird das unter Druck
909883/1703
stehende Gas in das Probengefäß geleitet, um das Reagens . aus dem Probengefäß in das Reaktionsgefäß zu drücken. Die Wahl und der Transport der Reagenzien werden durch Betätigung verschiedener ν in der Vorrichtung vorgesehener Ventile in vorbestimmter Folge durchgeführt; der aufeinanderfolgende Betrieb der Ventile kann automatisch durch eine geeignete Programmiereinrichtung geregelt werden. DIy Vakuum und der Druck eines inerten Gases zum Transport der Reagenzien angewendet werden, wird die für den Transport erforderliche Zeit im Vergleich mit den bekannten Vorrichtungen stark herabgesetzt, bei denen Flüssigkeitspumpe!! für den gleichen Zweck' verwendet werden.
Nachstehend wird die Vorrichtung gemäß der Erfindung anhand einer bevorzugten Ausfuhrungsform.unter Bezugnahme auf die Zeichnung näher erläutert, in der
Fig. 1 eine schematische Darstellung der Vorrichtung
gemäß der Erfindung ist, Fig. 2 eine graphische Darstellung 1st, welche die
Arbeitsweise der Dosierkammer erläutert, die
in der Vorrichtung gemäß Fig. 1 verwendet
wird, und
Fig. 3 ein vergrößerter Querschnitt des in der Vor-
909883/1703
richtung gemäß der Erfindung verwendeten Reaktionsgefäßes ist.
In Fig. 1 werden mehrere Flaschen T1, Tn, ...,T ge-
i. ζ . η
zeigt, von denen jede ein Reagenz R., R2, ..., R enthält, die zur Synthese des gewünschten Peptids erforderlich sind. Ein Wahlventil A weist mehrere Einlaßöffnungen A1, A-, ..., A und eine einzige Auslaßöffnung A auf. Die Flaschen T1 bis Tn sind mit den Einlaßöffnungen A1 bis An durch geeignete Rohre 10-1, 10-2, ..., bzw. 10-n verbunden, während ein Probengefäß 2 mit der Auslaßöffnung AQ durch ein geeignetes Rohr lO-o verbunden ist. Das Gefäß 2 ist vorgesehen, um vorübergehend eine vorbestimmte Menge eines Reagenzes aufzubewahren, das von dem Wahlventil A aus den Flaschen in der nachstehend zu beschreibenden Weise gewählt wurde. Das Ventil B ist vorgesehen, um nacheinander den Transport eines Reagenzes aus einer gewählten Flasche in das .Gefäß 2 und danach in das im folgenden beschriebene Reaktionsgefäß zu bewirken. Das Ventil. B besitzt vier öffnungen B , B,, B- und B3. Die öffnung B1 ist mit dem Probengefaß 2 durch.ein Rohr 11-verbunden; die Öffnung B2 ist mit einer Dosierkammer 4. durch ein Rohr 12 verbunden, in das ein elektromagnetisches Vakuumventil Ξ eingesetzt ist; die öffnung B~ ist mit einer Stahlflasche. 3, die ein inertes Gas, z.B. Argon oder Stickstoff
903 883/1703 '
enthält, durch ein Rohr 13 verbunden, in das eine Steuereinrichtung H eingesetzt ist; die Öffnung B3 ist gegen die Atmosphäre geöffnet. Die Kammer 4 bestimmt die Menge eines Reagenzes, das von der unter den Flaschen T. bis T gewählten Flasche in das Probengefäß 2 abzuziehen ist. Das Innenvolumen der Kammer 4 kann eine bestimmte Größe besitzen, vorausgesetzt, daß es groß genug ist, um die Einführung eines Reagenzes in das Gefäß 2 in einer derartigen Menge zu ermöglichen, wie zur Reaktion im Gefäß erforderlich ist. Die Kammer 4 kann auch ein veränderliches Volumen besitzen oder so ausgebildet sein, daß sie automatisch auf ein optimales Volumen für jedes Reagenz eingestellt werden kann. Die Kammer 4 ist mit einer Vakuumpumpe 5 durch ein geeignetes Rohr 14 verbunden, in das ein Vakuumventil F und ein , elektromagnetisches Dreiwegventil G mit den öffnungen a, b und c eingesetzt ist. Das Ventil G verbindet selektiv die Pumpe 5 mit der Kammer 4 durch das Rohr 14 und mit einem Abfallgefäß 7 durch ein Rohr 15.
Das Probengefäß 2 besitzt eine Auslaßöffnung 2', die durch ein Rohr 16 mit einem Einwegventil D, z.B. einem Kugelventil, verbunden ist, das so ausgebildet ist, daß es den Reagenzienstrom durch das Rohr 16 in der Richtung des Pfeils X durchläßt, jedoch den Durchstrom in der entgegen-
909883/1703
gesetzten Richtung blockiert. Das Ventil C besitzt die drei Einlaßöffnungen C., C2 und C3 und eine Einlaßöffnung C. Die Öffnung C1 ist mit der Auslaßseite des Einwegventils D durch ein Rohr 17 verbunden; die Öffnung C2 ist mit der Stahlflasche 3 durch ein Rohr 18 verbunden, in das eine Strömungsmesser I eingesetzt ist? die Öffnung C. ist mit dem Abfallgefäß 7 durch ein Rohr 19 verbunden; die Auslaßöffnung C ist mit dem Reaktionsgefäß 6 durch ein Rohr 20 verbunden. / -
Wie"im einzelnen aus Figc 3 zu ersehen ist, gehört zu dem Reaktionsgefäß 6 ein unterer Glasfilter 6a, der in der Nähe des Gefäßbodens angeordnet ist, eine Schicht aus Divinylbenzol-Harz 6B, die dicht auf dem unteren Filter angeordnet ist, und ein oberer Filter 6C weit oberhalb der . Schicht 6B. Das Reagenz wird in das Gefäß 6 durch eine Einlaßöffnung 6* eingeführt, die im Boden des Gefäßes ausgeh bildet ist, und passiert den unteren Filter 6A, um im Raum SKwisctien dem unteren und dem oberen Filter zu verbleiben.
Eine Programmiereinrichtung 8 regelt und betreibt die Vakuumventile A bis G der Reihe nach.
Der Betriebsablauf der Vorrichtung wird nachstehend insbesondere unter Bezug auf das Reagenz R. in der Flasche T. beschrieben. 909883/1703
Zuerst wird im Ventil A die Einlaßöffnung A1 mit der Auslaßöffnung A verbunden, so daß das Reagens R, in der Flasche T. abgezogen werden kann. Danach wird das Ven>· til E geschlossen und das Ventil F geöffnet, wobei das Venteil G so eingestellt ist, daß die öffnungen a und b verbunden sind, während die Öffnung c geschlossen ist. Da-
k durch läßt man die Vakuumpumpe5 Luft aus der Dosierkammer 4 absaugen. Das Ventil B wird danach so betätigt, daß die Öffnungen B "-und B,, wie in Fig. 1 dargestellt, verbunden sind; das Ventil F wird geschlossen und das Ventil E geöffnet. Gleichzeitig mit der Schließung des Ventils F kann auch die Öffnung a des Ventils G von der Öffnung b getrennt und mit der Öffnung c verbunden werden. Dia Öffnung des Ventils E bewirkt, daß der Druck im Probengefäß 2 in einem Maß herabgesetzt wird, das dem Volumen der Kammer 4 entspricht, so daß das Reagenz R von der Flasche T, In das
* Gefäß 2 abgezogen wird. Zu diesem Zeitpunkt wird das Ventil D Infolge des Gewichts der ä^rin befindlichen Kugel und der darauf aus der Kammer 4 ausgeübten Saugwirkung geschlossen. Gemäß der Erfindung durchgeführte Versuche zeigen, daß die Menge des Reagenzes, das in das Gefäß 2 eingeleitet wird, im wesentlichen dem Volumen des Gefäßes 2 proportional 1st, vorausgesetzt, daß der Druck In der Kammer 4 kleiner als 0,1 mm Hg ist, wobei dieser Wert durch eine 10 bis 15 Sekunden
909883/1703
lange Evakuierung der Kammer 4 erreicht wird.
Fig. 2 ist eine graphische Darstellung, in der die Menge in ml eines Reagenzes, das in das Probengefäß 2 abgezogen wird, gegen die Zeit in Sekunden einer Evakuierung der Dosierkammer 4 aufgetragen ist. Die Kurve A ergab sich, wenn das Volumen der Kammer 4 60 ml betrug, und die Kurve W ergab sich, wenn^das Volumen 48 ml betrug.
Wenn die erforderliche Menge des Reagenzes in das Gefäß 2 eingeleitet wurde, wird das Ventil E geschlossen ^ und die Öffnung B des Ventils B van der Öffnung B getrennt und mit der Öffnung B2 verbunden, während die Öffnung CQ des Ventils C mit der Öffnung C1, wie in Fig. i gezeigt, verbunden wird. Infolgedessen wird das inerte Gas aus der Stahlflasche 3 durch die Steuereinrichtung H und das Ven-
. til B in das Gefäß 2 zur Entfernung des aufbewahrten Reagenzes aus dem Gefäß 2 eingeleitet. Das Reagenz drücktdas Einwegventil-1D auf, um durch das Ventil C in das Reaktionsgefäß 6 durch die Einlaßöffnung 61 in dessen Boden zu
t gelangen. Die Steuereinrichtung H wird so eingestellt, daß der Druck des inerten Gases ausreicht, um das Reagenz vollständig aufwärts durch den unteren Filter 6A zu drücken, so
daß es im Raum zwischen dem oberen Filter 6C und dem unteren
909883/1703
- ίο -
Filter 6A verbleibt. Selbst wenn ein Aufwallen durch das inerte Gas und ein Schütteln durch eine geeignete nicht dargestellte Einrichtung zur Beschleunigung der Reaktion im Gefäß 6 durchgeführt werden, kann das Reagenz im Raum zwischen dem oberen Filter 6C und dem unteren Filter 6A verbleiben. Dies gewährleistet eine gründliche Berührung zwischen dem Reagenz und dem Harz und verhindert einen Verlust des Reagenzes. Der Druck des inerten Gases hilft auch das im Rohr 10-1 verbleibende Reagenz in die Flasche T. zurückzudrücken. Daher verbleibt kein Reagenz in den Transportleitungen zwischen der Flasche T, und dem Reaktionsgefäß 2. Dies ist ein großer Vorteil der Vorrichtung gemäß der Erfindung, da irgendein im Rohr verbleibendes Reagenz, das in einer Stufe des Verfahrens verwendet wird, mit dem in der nächsten Stufe zu verwendenden Reagenz sich vermischen und reagieren würde, wodurch ein richtiger Ablauf der geforderten Reaktion verhindert würde.
Wenn die Einführung des Reagenzes R, in das Reaktionsgefäß 6 abgeschlossen ist, wird die öffnung B des Ventils B mit der öffnung B- verbunden, die gegen die Atmosphäre geöffnet ist, und wird die Öffnung C des Ventils C mit der öffnung C^ verbunden, worauf das inerte Gas aus der Stahlflasche 3 in das Reaktionsgefäß 6 eingeleitet wird, indem
909883/1703
- ii -
das Gas ein Aufschäumen zur Beschleunigung der Reaktion bewirkt. Nach einer vorbestimmten Zeitspanne wird die Offnung C des Ventils C mit der öffnung C3 und von dort aus mit dem Abfallgefäß 7 verbunden; die öffnungen a und c des Dreiwegventils G werden verbunden, so daß man das von der Pumpe 5 erzeugte Vakuum auf das Reaktionsgefäß 6 durch das Ventil: G, die Rohre 15 und 19, das Ventil C und das Rohr 20 einwirken läßt. Dies bewirkt, daß irgendein im Gefäß 6 zurückbleibender Reagenzüberschuß aus diesem in das Abfallgefäß 7 abgezogen wird. Wenn die Evakuierung des Reaktionsgefäßes 6 abgeschlossen ist, werden die Ven-, tile G und C wieder in die Ausgangsstellungen, wie in Fig. 1 gezeigt, gebracht, wodurch diese eine Stufe des Verfahrens abgeschlossen wird.
Bezüglich der anderen Reagenzien ist der Betrieb
der Vorrichtung der gleiche wie unmittelbar vorstehend beschrieben, so daß keine weitere diesbezügliche Beschreibung erforderlich ist.
Auf diese Weise können gemäß der Erfindung alle Arbeitsweisen bei der Synthese von Peptiden durch Betrieb der verschiedenen Ventile in einer vorbestimmten Reihenfolge . durchgeführt werden und kann der Betrieb der Ventile der
909 883/17 03 _ .
-. 12 -
Reihe nach automatisch durch eine Programmiereinrichtung geregelt werden. Da Vakuum und der Druck eines inerten Gases zum Transport der Reagenzien verwendet werden, wird, die Betriebsdauer der Vorrichtung stark herabgesetzt und kann eine Vermischung von Reagenzien, die in verschiedenen Stufen des Verfahrens verwendet werden, vollständig vermieden werden.
909883/1703

Claims (7)

Patentansprüche
1. Vorrichtung zur Synthese von organischen Verbindungen wie Peptiden, Proteinen oder dgl., gekennzeichnet durch ein Reaktionsgefäß (6), mehrere Flaschen (T-T ), von denen jede ein zur Synthese einer gewünschten organischen Verbindung erforderliches Reagenz (R. - R) enthält, ein Probengefäß (2), erste Verbindungsleitungen (10 - 10 , A), die eine ausgewählte Flasche (T) mit dem Probengefäß (,2) zur vorübergehenden Aufbewahrung einer vorbestimmten Menge des von der gewählten Flasche (T) in das Probengefäß (2) abgezogenen Reagenzes (R) bei Einwirkung von reduziertem Druck auf das Probengefäß (2) verbinden, zweite Verbindungsleitungen (16, 17, 10, 20, C, D, I) zur Verbindung des Probengefäßes (2) mit dem Reaktionsgefäß (6), Mittel (4, 5) zur Erzeugung von reduziertem Druck, eine Quelle (3) für unter Druck stehendes Gas zum Herausdrücken des aufbewahrten Reagenzes (R) aus dem Probengefäß (2) in das Reaktionsgefäß (6) bei Einwirkung des unter Druck stehenden Gases auf das Probengefäß (2) und dritte Verbindungsleitungen (H, 12, 13, 14, B, E, F, G, H) zur Verbindung des Probengefäßes (2) mit den Mitteln (4, 5) zur Erzeugung von reduziertem Druck zur Einwirkung des reduzierten Drucks auf das Probengefäß (2) und alternativ zur Verbindung mit der Quelle (3) für das unter Druck stehende Gas zur Einwirkung des unter Druck stehenden Gases auf das Probengefäß (2).
909883/1703
2. Vorrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die reduzierten Druck erzeugenden Mittel (4, 5) eine Kammer (4) und eine mit dieser verbundene Vakuumpumpe (5), zur Erzeugung von vermindertem Druck in der Kammer (4) aufweisen.
k 3. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die reduzierten Druck erzeugenden Mittel (4, 5) eine Kammer (4) mit einem unveränderlichen Volumen aufweisen.
4.Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die reduzierten Druck erzeugenden Mittel (4, 5) eine Kammer (4) mit variablem Volumen aufweisen.
f
5. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die zweiten Verbindungsleitungen (16, 17, 18, 20,C, D, I) das Reaktionsgefäß (6) mit der Quelle (3) für unter Druck stehendes Gas nach Hineindrücken des Reagenzes (R) in .das Reaktionsgefäß (6) z-ur-Ein-' leitung des Gases in das Reaktionsgefäß (6) unter Aufschäumen im Reaktionsgefäß -■(.€) verbinden.
909883/17 03
6. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die zweiten Verbindungsleitungen die reduzierten Druck erzeugenden Mittel (4,5) mit dem Reaktionsgefäß (6) nach Vervollständigung der Umsetzung einer Syntheseverfahrensstufe im Reaktionsgefäß (6) verbinden und ferner ein zwischen dem Reaktionsgefäß (6) und den reduzierten Druck erzeugenden Mitteln (4, 5) angeordnetes Abfallgefäß (7) zum Abzug irgendeines nach Vervollständigung der Umsetzung einer Verfahrensstufe im Reaktionsgefäß (6) verbleibenden Reagenzes durch den reduzierten Druck in das Abfallgefäß (7) vorgesehen ist.
7. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß sie ferner eine Programmiereinrichtung (8) zur Regelung des Betriebs der ersten (10-10n# A) der zweiten (16, 17, 18, 20, C, D, I) und der dritten Verbindungsleitungen (11, 12, 13, 14, B, E, F, G, H) gemäß einem vorbestimmten Programm enthält.
909883/1703
OföGlHÄL INSPECTED
DE1933846A 1968-07-08 1969-07-03 Vorrichtung zur Synthese von Peptiden und Proteinen Expired DE1933846C3 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP43048048A JPS4820995B1 (de) 1968-07-08 1968-07-08

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DE1933846A1 true DE1933846A1 (de) 1970-01-15
DE1933846B2 DE1933846B2 (de) 1974-05-22
DE1933846C3 DE1933846C3 (de) 1975-01-09

Family

ID=12792428

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE1933846A Expired DE1933846C3 (de) 1968-07-08 1969-07-03 Vorrichtung zur Synthese von Peptiden und Proteinen

Country Status (3)

Country Link
US (1) US3647390A (de)
JP (1) JPS4820995B1 (de)
DE (1) DE1933846C3 (de)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2485003A1 (fr) * 1980-06-23 1981-12-24 Clin Midy Appareillage automatise utilisable pour la synthese des peptides en phase solide
EP0073828A1 (de) * 1981-03-10 1983-03-16 Bioresearch Inc. Peptide synthese hoher ausbeute
GB2118189A (en) * 1982-02-26 1983-10-26 Shimadzu Corp An automatic synthesizer for DNA
US4464340A (en) * 1981-06-15 1984-08-07 Burroughs Wellcome Co. Dissolution flask
US4587219A (en) * 1982-06-15 1986-05-06 Gambro Lundia Ab Device for measuring concentration including valve means
US4816513A (en) * 1984-03-23 1989-03-28 Applied Biosystems, Inc. Automated polypeptide synthesis process
EP1730273A1 (de) * 2004-03-29 2006-12-13 Fuji Photo Film Co., Ltd. Verfahren und vorrichtung zurautomatischen isolierung und reinigung von nukleinsäure

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE789765A (fr) * 1971-10-07 1973-02-01 Wellcome Found Appareil pour l'analyse chimique automatique
US3871826A (en) * 1971-12-23 1975-03-18 Bohdan Bakay Method and apparatus for transporting discretely samples to be analyzed in a gel
JPS5311238B2 (de) * 1972-09-14 1978-04-20
US3951741A (en) * 1973-07-10 1976-04-20 Peter Pfaender Process and apparatus for the synthesis of peptides by use of n-carboxyanhydrides
US3944538A (en) * 1973-10-02 1976-03-16 Miklos Bodanszky Process and apparatus for the synthesis of peptides not linked to polymers
US4211747A (en) * 1976-08-23 1980-07-08 Gross Valery N System for measuring radioactivity of labelled biopolymers
US4153416A (en) * 1977-06-06 1979-05-08 Bonner Alex G Process and apparatus for pulse labelling protein material in the Edman degradation process
US4158694A (en) * 1978-03-30 1979-06-19 The Dow Chemical Company Automated apparatus for testing sustained release drugs
US4155714A (en) * 1978-03-31 1979-05-22 Bonner Alex G Process and apparatus for conversion of atz to pth amino acid derivatives of proteins
US4362699A (en) * 1981-03-10 1982-12-07 Bio Research, Inc. Apparatus for high pressure peptide synthesis
US4629686A (en) * 1982-02-19 1986-12-16 Endotronics, Inc. Apparatus for delivering a controlled dosage of a chemical substance
US4618586A (en) * 1983-04-08 1986-10-21 Endotronics, Inc. Apparatus for administering a controlled dosage of a chemical substance having an improved culture chamber
US4598049A (en) * 1983-08-31 1986-07-01 Systec Inc. General purpose gene synthesizer
US4746490A (en) * 1983-09-22 1988-05-24 Saneii Hossain H Solid phase peptide synthesizer
JPS60105691A (ja) * 1983-11-14 1985-06-11 Nippon Zeon Co Ltd ポリヌクレオチド合成装置
US5273715A (en) * 1984-03-23 1993-12-28 Applied Biosystems, Inc. Automated system for providing a sequence of chemicals to a reaction process
US4701304A (en) * 1985-04-19 1987-10-20 Applied Protein Technologies, Inc. Apparatus for automated synthesis of peptides
IL84939A (en) * 1987-01-06 1991-05-12 Baylor College Medicine Chemically inert wafer for synthesizing biopolymers
US4847208A (en) * 1987-07-29 1989-07-11 Bogen Steven A Apparatus for immunohistochemical staining and method of rinsing a plurality of slides
US5147608A (en) * 1988-04-29 1992-09-15 Millipore Corporation Apparatus and process for performing repetitive chemical processing
US5112575A (en) * 1988-12-16 1992-05-12 Eastman Kodak Company Polynucleotide synthesizer
US5053454A (en) * 1989-02-15 1991-10-01 Sri International Multiple polymer synthesizer
CZ280777B6 (cs) * 1990-02-02 1996-04-17 Ústav Organické Chemie A Biochemie Avčr Mnohonásobná automatizovaná syntéza peptidů na planárních nosičích
US5240680A (en) * 1991-12-19 1993-08-31 Chiron Corporation Automated apparatus for use in peptide synthesis
JPH0734910Y2 (ja) * 1992-01-29 1995-08-09 株式会社島津製作所 固相法ペプチド合成器
WO1994001215A1 (en) * 1992-07-06 1994-01-20 Beckman Instruments, Inc. Fluid delivery system utilizing multiple port valve
US5380495A (en) * 1993-08-27 1995-01-10 Chang; Heng-Wei Solid phase peptide synthesizer
US20050042149A1 (en) * 1994-04-01 2005-02-24 Integrated Chemical Synthesizers, Inc. Nanoscale chemical synthesis
US5580523A (en) * 1994-04-01 1996-12-03 Bard; Allen J. Integrated chemical synthesizers
EP0778841A1 (de) * 1994-08-29 1997-06-18 Akzo Nobel N.V. Vorrichtung zur verwendung in der isolierung eines biologischen materials wie nukleinsäure
US6890491B1 (en) * 1997-06-10 2005-05-10 Pharmacopeia Drug Discovery, Inc. Method and apparatus for universal fluid exchange
JP2003528299A (ja) * 1999-12-24 2003-09-24 アファンティウム・インターナショナル・ベスローテン・フェンノートシャップ 液体分配装置
US7393920B2 (en) 2003-06-23 2008-07-01 Cem Corporation Microwave-assisted peptide synthesis
US7902488B2 (en) * 2003-06-23 2011-03-08 Cem Corporation Microwave-assisted peptide synthesis
US7910695B2 (en) * 2006-06-29 2011-03-22 The Invention Science Fund I, Llc Methods for arbitrary peptide synthesis
US7858342B2 (en) 2006-06-29 2010-12-28 The Invention Science Fund I, Llc Apparatus for arbitrary peptide synthesis
US7923533B2 (en) * 2006-06-29 2011-04-12 The Invention Science Fund I, Llc Methods for arbitrary peptide synthesis
US7879975B2 (en) * 2006-06-29 2011-02-01 The Invention Science Fund I, Llc Methods for arbitrary peptide synthesis
JP6872454B2 (ja) * 2017-08-03 2021-05-19 東レエンジニアリング株式会社 薬液合成装置
JP6618133B1 (ja) * 2019-04-02 2019-12-11 ヤマト科学株式会社 固相合成装置

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3557077A (en) * 1967-09-18 1971-01-19 Kay Brunfeldt Reactions system
US3531258A (en) * 1967-11-16 1970-09-29 Us Health Education & Welfare Apparatus for the automated synthesis of peptides

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2485003A1 (fr) * 1980-06-23 1981-12-24 Clin Midy Appareillage automatise utilisable pour la synthese des peptides en phase solide
EP0042792A1 (de) * 1980-06-23 1981-12-30 Sanofi S.A. Automatische Vorrichtung zur Synthese von Peptiden in fester Phase
EP0073828A1 (de) * 1981-03-10 1983-03-16 Bioresearch Inc. Peptide synthese hoher ausbeute
EP0073828A4 (de) * 1981-03-10 1983-11-09 Biores Inc Peptide synthese hoher ausbeute.
US4464340A (en) * 1981-06-15 1984-08-07 Burroughs Wellcome Co. Dissolution flask
GB2118189A (en) * 1982-02-26 1983-10-26 Shimadzu Corp An automatic synthesizer for DNA
US4587219A (en) * 1982-06-15 1986-05-06 Gambro Lundia Ab Device for measuring concentration including valve means
US4816513A (en) * 1984-03-23 1989-03-28 Applied Biosystems, Inc. Automated polypeptide synthesis process
EP1730273A1 (de) * 2004-03-29 2006-12-13 Fuji Photo Film Co., Ltd. Verfahren und vorrichtung zurautomatischen isolierung und reinigung von nukleinsäure
EP1730273A4 (de) * 2004-03-29 2008-12-10 Fujifilm Corp Verfahren und vorrichtung zurautomatischen isolierung und reinigung von nukleinsäure
US7811758B2 (en) 2004-03-29 2010-10-12 Fujifilm Corporation Method and apparatus of automatically isolating and purifying nucleic acid

Also Published As

Publication number Publication date
DE1933846C3 (de) 1975-01-09
JPS4820995B1 (de) 1973-06-25
DE1933846B2 (de) 1974-05-22
US3647390A (en) 1972-03-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE1933846A1 (de) Vorrichtung zur Synthese von Peptiden oder aehnlichen organischen Verbindungen
DE3441659A1 (de) Einrichtung zum synthetisieren von polynukleotid
DE1915113A1 (de) Probeninjektionssystem
WO2020211972A2 (de) Verfahren und vorrichtung zur industriellen herstellung eines extraktes durch fest-flüssig-extraktion
DE4107478C1 (de)
CH539850A (de) Verfahren und Einrichtung zur beschleunigten chromatographischen Analyse von durch Aufspaltung von Eiweisstoffen entstandenen Gemischen
DE1598212B2 (de) Verfahren und einrichtung zum herstellen von dosierten gemischen
EP0458359B1 (de) Verfahren und Einrichtung zum Entwesen von organischem Gut
DE19935162A1 (de) System zum abwechselnden In-Verbindungbringen von wenigstens vier Fluiden und seine Anwendung bei einem Verfahren zur Trennung im beweglichen simulierten Bett
EP0417430A1 (de) Verfahren und Einrichtung zum Entwesen von organischem Schüttgut
DE102022203817A1 (de) Verfahren und Vorrichtung zum Befüllen eines offenen Behälters
DE2400792C3 (de) Sorptionspumpvorrichtung
DE1414708A1 (de) Verfahren und Vorrichtung zum Austausch einer Fluessigkeitsmenge zwischen zwei Fluessigkeiten enthaltenden Behaeltern
DE68910323T2 (de) Verfahren zum durchführen von organischen chemischen reaktionen und apparat dafür.
DE3625982A1 (de) Garnfaerbeeinrichtung und -verfahren
DE19546848A1 (de) Mischvorrichtung für Flüssigkeiten
DE478246C (de) Verfahren zum Foerdern von Massenguetern mittels Pressluft
EP4381114A1 (de) Verfahren zum beschichten von behältern aus kunststoff
DE147837C (de)
DE2044518A1 (de) Verfahren und Vorrichtung zur Durchfuhrung von chemischen Sequenz reaktionen
DE4337081A1 (de) Vorrichtung und Verfahren zur elektrostatischen und/oder magnetischen Voraufbereitung von Substanzen vor ihrer Verbindung
DE2659690A1 (de) Mehrstufige dialyse-apparatur
DE225421C (de)
EP0190707A2 (de) Verfahren und Vorrichtung zur Hochdruckvermischung von Mehrkomponentenkunststoff, insbesondere Polyurethan
DE102011114852A1 (de) Einschleusvorrichtung für eine Vakuumanlage

Legal Events

Date Code Title Description
C3 Grant after two publication steps (3rd publication)