DE1795524A1

DE1795524A1 - Trihalogenacetylester von N-Carboxy- und N-Thiocarboxyanhydriden von aliphatischen Hydroxy-alpha-aminosaeuren und Verfahren zu ihrer Herstellung

Info

Publication number: DE1795524A1
Application number: DE19661795524
Authority: DE
Inventors: Strachan Robert G
Original assignee: Merck and Co Inc
Current assignee: Merck and Co Inc
Priority date: 1965-07-02
Filing date: 1966-07-01
Publication date: 1972-01-13
Also published as: IL34879A; DE1795521A1; GB1158727A; SE345998B; DE1795523A1; AT289105B; SE347512B; DE1795519A1; GB1158723A; IL25974A; JPS4737921B1; IL34877A; AT297677B; GB1158722A; FI48184B; AT307630B; IL34880A; GB1158726A; DE1795529A1; GB1158721A

Description

MERCK & CO., INC. 126 East LLncoln Avenue, Rahway, New Jeraey 07065, V.St.A,

Trihalogenacetylester von N-Carboxy- und N-Thiocarboxyanhydriden von aliphatischen Hydroxy-a-aminosäuren und Verfahren

zu ihrer Herstellung

DLe vorliegende Erfindung betrifft Trihalogenacetylester von N-Carboxy- und N-Thlocarboxyanhydriden von aliphatischen Hydroxy-a-aminosäuren und ein Verfahren zu ihrer Herstellung, insbesondere die Blockierung von Hydroxylgruppen» die eher alkoholischen als phenollschen Charakter haben, mit Trlhalogenaoefcylgruppen, in denen dao Halogenatom eLn Atomgewioht von weniger als 36 hat, insbesondere Trifluoracetyl- oder Tr ieh'Lomoe by !gruppen.

Polypeptide öind eine groöoe KLasse von chemischen Verbindungen, weLche Bipepfelde, Tripeptide, Tetrapeptide und höhere Peptide umfassen, Ln welchen AmirioBäuren miteinander durch Amidbindungen (Peptidbindungeri) verbunden Bind. Eine sehr grosse Anzahl von ihnen wurdu durch te Uwe Lon Hydrolyse von

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Proteinen Isoliert. !Einige Polypeptide mit hohem Molekulargewicht wurden chemisch hergestellt. Auch viele verhältnlsmMasig niedrig molekulare Peptide, die beispielsweise bis zu 6 oder θ Aminosäuren enthalten, wurden hergestellt. Proteine sind grossenteils Polypeptide, die gewöhnlich 100 oder mehr miteinander verbundene Aminoaäuresegmente enthalten.

Polypeptide eind nicht nur als Bausteine zur Synthese von Proteinen wertvoll, sondern auch deswegen, weil gewisse von ihnen therapeutsich aktiv sind. Sie sind auch wertvoll bei der Untersuchung und Analyse von Proteinen. Einer der fruchtbarsten Ansätze zur Untersuchung der Proteinstruktur war die teilweise Hydrolyse des Proteins und anschliessende Isolierung und Analyse der erzeugten Polypeptidfragraente. Solohe Arbeitsweisen ergeben eine sehr begrenzte Menge an Information bezüglich der strukturellen-funktionellen Verhältnisse und Anforderungen in Polypeptiden und Proteinen. Eine genaue Information dieser Art könnte nur durch die Synthese von Polypeptiden auf gesteuerte bzw. kontrollierte stufenweise Art erhalten werden.

überdies ergeben derartige Untersuchungen, wie sie durchgeführt wurden, keinen Einblick in die Wirkungsweise von Enzymen, Hormonen und anderen Proteinen mit wichtigen Körperfunktionen. Sie liefern weder Information, welche die Herstellung von brauchbaren Varianten der natürlichen Proteine gestatten würde, noch irgendeine Information, die die Herstellung von therapeutischen Mitteln zulassen würde, die spezifisch derart nach Mass hergestellt sind, dass sie mit natürlichen Proteinen in brauchbarer V/eiae in Wechselwirkung treten.

Obwohl eine Anzahl von synthetischen Methoden vorgeschlagen wurde, lot bis jetzt keine Idealmethode zur Synthese von Polypeptiden gefunden worden. Es wurde keine erfolgreiche Methode zur Synthese entwickelt, welohe die Bildung von aufeinanderfol-

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genden Peptidblndungen in einer wachsenden Peptidkette gestattet und die oft ßohwierlge Stufe der selektiven Entfernung der Schutzgruppe ohne Erfordernis der Isolierung der Zwischenprodukte bei jeder aufeinanderfolgenden Stufe vermeidet. Solche Methoden, wie sie verwendet wurden, sind mühsam, kostspielig und zeitraubend. Zur Bildung eines einfachen Dipeptids durch Umsetzung zwischen zwei verschiedenen Aminosäuren erfordern die besten bekannten Methoden die Blockierung der Aminogruppe einer Aminosäure und der Carboxylgruppe dor anderen, so daas eine selektive Reaktion zur Bildung nur dea gewünsohten Dipeptids unter den vier möglichen Produkten erfolgt. Ausserdem erfordert im allgemeinen die Carboxylgruppe, die umgesetzt werden soll, eine Aktivierung durch Überführung in ein SSurohalogenid odor eine andere Modifikation, die reaktiver ist als die Carboy3gruppe. Die zwei Moleküle werden dann kondensiert, um das Pipeptid zu bilden, und ßchliesolich werden die Schutzgruppen entfernt. Die Reaktionen erfordern demnach 1) das Anbringen der Schutzgruppen, 2) die Aktivierung der Carboxylgruppe, 3) die Kondensation, und 4) die !Entfernung der Schutzgruppen. Daa ganze Verfahren muae wiederholt werden, um nur eine weitere Aminosäure an das Dipeptid anzufügen, und immer wieder wiederholt werden, um aufeinanderfolgende Aminosäureeegmente anzufügen, überdies ist es zur Herstellung von Polypeptiden für eine wirklioh sinnvolle Untersuchung gewöhnlich notwendig, die Racemisierung der Aminosäuren und Peptide während dieser Reaktionen zu vermeiden, so dass optisch reine Produkte hergestellt werden. "Wenn man dieses Racemisierungsproblem zusammen mit der Tatsache betrachtet, dass die Gesamtausbeuten in der Peptidsynthese sehr gering sind, sowie die Tatsache, dass es über 10 mögliche Polypeptide gibt, die nur 20 verschiedene Aminosäuresegmonte enthalten, ist es nicht verwunderlich, dass trotz der anerkannten Wichtigkeit solcher Produkte sehr wenig grosse Polypeptide und einfache Proteine tatsüchlioh hergestellt wurden. Solche Produkte, wie sie hergestellt wurden, erforderten eine mehrjährige Arbeitszeit eines

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Hannee eur Fertigstellung. Über Insulin wurde von aehreren Orup· pen von Wissenschaftlern auf der ganzen Welt gearbeitet, und seine erfolgreiche Syntheee war das Ergebnis lO^ähriger Bemühungen seitens einer dieser Gruppen.

Eine Methode, die beträchtliche Aufmerksamkeit zur unkontrollierten Synthese von Homopolymeren, wie Polyalanin und PoIyglutaminsäure von wechselnden Molekulargewichten und 2ur unkontrollierten Synthese von Heteropolymeren ©it regellos angeordneten Aminosäuresegmenten gefunden hat, ist das H-Carboxyanhydrid-Verfahren, das hier als NGA-Methode bezeichnet wird. Diese Polymerisationsreaktionen wurden in organischen Lösungemitteln unter Verwendung katalytischer Mengen an Base durchgeführt. Die hergestellten Produkte haben eine oberflächliche Ähnlichkeit mit natürlichen Proteinen in einigen ihrer physikalischen Eigenschaften, sind Jedoch praktisch ohne Viert bei der Untersuchung der chemischen und physiologischen Eigenschaften von Proteinen. Überdies sind die Arbeitsweisen nicht auf die Herstellung von Heteropeptiden bekannter Struktur und bekannten Molekulargewichtes anwendbar, die spezifisch definierte Aminosäuren in vorbeetimmten Stellungen in der Peptidkette enthalten.

Wegen der Leichtigkeit, mit welcher Homopeptide gebildet werden, wurde von anderen vermutet, dass die HOA-Methode auf die kontrollierte, stufenweise Syntheee von Heteropeptiden anwendbar sein könnte. Tatsächlich wurden frühe Versuche unternommen, um die Methode auf die Synthese von niedrig-molekularen Heteropeptiden in organischen Lösungsmitteln anzupassen. Die Methode wurde niemals in wässrigen Medien bei der kontrollierten, stufenweisen Syntheee von Heteropeptiden angewandt, bei welcher zwei oder mehr Aminosäuren in aufeinanderfolgenden Stufen an eine wachsende Peptidkette angefügt wurden. Tatsächlich wurde von denjenigen, welche diese aufeinanderfolgenden

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Reaktionen vorschlugen, der Schluss gezogen, daes die stufenweise Synthese von Polypeptiden durch die NCA-Methode unmöglich wäre, weil die relativen Geschwindigkeiten der Hauptreaktion und der Nebenreaktionen nicht kontrolliert werden könnten.

Das Grundverfahren zur kontrollierten Synthese von Peptiden und Derivaten derselben mit mindestens zwei Amid lbindungen in der Peptidkette umfasst die Umsetzung einer Aminoverbindung ala Ausgangsmaterial, nämlich von Aminosäuren, Peptiden und Derivaten derselben, die eine freie Aminogruppierung enthält, mit einem N-Carboxyaminos&ureanhydrid oder Derivat desselben durch Zusammenbringen der Reakfcionskomponenten in einem wässrigen Medium unter solchen kontrollierten Bedingungen, dass die einzige, in beträchtlicher Konzentration in reaktiver Form während dea Verlaufe der Reaktion vorliegende Aminogruppe die Aminogruppe der Aminosäure, des Peptide oder Derivates 1st, die bzw. das zur Bildung des gewünschten Produktes reagieren sollte, und dass bei jeder anderen vorhandenen Aminogruppe, einsohliesalich derjenigen in dem Peptidprodukt, wie es gebildet ist, diee nicht der Fall 1st. Unter den sorgfältig kontrollierten Bedingungen verläuft die Reaktion zwischen dem Anhydrid und der Aminosäure, dem Peptid oder Derivat bei jeder Stufe der Synthese mit minimaler Bildung derjenigen Nebenprodukte, welche die nächste Anhydridreaktion oder die Reinigung des gewünschten Produktes stören wurden. Unter den kontrollierten Bedingungen wird die als Zwischenprodukt gebildete N-Oarboxyverblndung vor der Decarboxylierung bewahrt, oder, wenn eine Decarboxylierung erfolgt, wird die erhaltene Aminogruppe durch Protonierung geschützt, "bis praktisch alles Ausgangematerial mit dem Anhydrid reagiert hat. Das Ergebnis dieser sorgfältigen Kontrolle besteht darin, dass die Reaktion mit der grösaten Geschwindigkeit diejenige ißt, welohe das gewünschte Produkt erzeugt, und die Bildung von unerwünschten Nebenprodukten, insbesondere denjenigen, die sich sub Ulber-

reaktion und Polymerisation ergeben, innerhalb Grenzen gehalten wird, welohe die anschliessenden Stufen in der kontrollierten Synthese nicht stören. Naoh der Zersetzung des N-Garboxyzwisohenproduktes und Jeglichen nicht umgesetzten Anhydrids kann da» so gebildete Peptidprodukt weiter mit einem anderen Anhydrid unter ähnliohen Reaktionsbedingungen ohne Isolierung der Zwischenprodukte umgesetzt werden. Das Verfahren ist allgemein auf die Herstellung von Dipeptiden in Ausbeuten, die normalerweise 90 bis 98 # betragen und oft im wesentlichen quantitativ sind, sowie auf die Herstellung von Polypeptiden und Proteinen vorbestimmter Struktur anwendbar.

Gegenstand der Erfindung sind neue Trihalogenacetylester von N-Carboxy- und N-Thiooarboxyanhydriden von aliphatischen Hydroxy-a-aminosäuren, in denen die Hydroxylgruppe alkoholisch ist und die Halogenatome eine Ordnungszahl von weniger als 36 aufweisen, und ein Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man in ein N-Carboxy- oder N-Thiooarboxyanhydrid einer aliphatischen Hydroxy-a-aminosäure duroh Verestern den Trihalogenaoetylrest einführt.

Es wurde gefunden, dass diese Gruppen spontan und gleichzeitig während der Kupplungereaktion freigesetzt werden.

Die Verbindungen werden durch Reaktion dee gewählten Trihalogenaeetylierungemittele und der geigneten hydroxylierten N-Carboxy- oder H-Thiooarboxyaminosäure hergestellt. Sa können Trihalogenaoetyleäuren, -anhydride und -säurehalogenida, insbesondere das Chlorid und Broraid, verwendet werden. Vorzugsweise werden die entsprechenden Anhydride als Trihalogenacetylierungamittel für Trifluoraoetylderivate verwendet, und das Säureohlorid wird für Triohloraoetylderivate verwendet, da beobaohtet wurde, dass diese Arbeitsweisen die besten Ausbeuten geben.

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In einer typischen Reaktion, die gemUns dor Erfindung durchgeführt wird, wird das Aminoßüurecorboxyanhydrid oder -thiocarboxyanhydrid mit einer alkoholischen Hydroxylgruppe in einem waoserfreien, reaktionsinerten Lösungsmittel oder Lösungsmittel gemisch, zweokmössig einem Xtherlösungemlttel, Insbesondere einem cyclischen Ätherlösungsmittel, wie Dioxan oder Tetrahydrofuran, aufgenommen und das Trihalogenacetylierungsmittel zugesetzt. Die Reaktion wird vorzugsweise bei Zimmertemperatur, d. h. bei etwa 20° C biß etwa 30° C, durchgeführt, doch können auoh etwas höhere oder tiefere Temperaturen ohne nachteilige Wirkung angewandt werden. Die Reaktionozeit kann über einen ziemlich weiten Bereich schwanken, vor allem je nach der gewählten Temperatur und der Reaktivität der zu schützenden Hydroxylgruppe und dem gewählten Trihalogenacetylierungsmlttel. Sie kann beispielsweise von etwa 1 bis 16 Stunden schwanken» wobei 1 bis 4 Stunden zur Erzielung guter Ausbeuten innerhalb praktisch brauchbarer Reaktionszeiten bevorzugt werden. Es können zwar Hquimolare Mengen an Reaktionskomponenten verwendet werden, doch wird normalerweise ein Überschuss, beispielsweise ein bis zu 1Obiger molarer Überschuss dee Trihalogenacetylierunßsmittels angewandt, um eine möglichst vollständige Reaktion zu gewährleisten. Eine Inertatmosphftre, wie Stickstoff, kann angewandt werden, um Tfebenreaktionen auf ein Minimum zu bringen, ist jedoch nicht erforderlioh.

Dao Produkt kann auf jede zweckmUssige V'eise isoliert werden. Eine besondere brauchbare Arbeitsweise lsi; die Entfernung des Lösungsmittels unter vermindertem Druck, wobei das gewünschte Produkt als Rückstand zurüokbleibt.

Die Reaktion ist 2war besonders brauchbar zur Herstellung von Derivaten derjenigen Aminosäuren, die normalerweise in Verbindung mit tieriaahem Gewebe zu finden sind, wie Serin und Threonin, ist jedoch nicht darauf beschränkt. Sie kann mit

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ebenso grosser Leichtigkeit zur Herstellung von analogen Derivaten von "nioht natürlichen" Aminosäuren, wie a-Hydroxynorvelin, ^-Hydroxynorvalin und anderen, wie den in der vorliegenden Anmeldung aufgeführten, angewandt werden.

Die erhaltenen Produkte können zur Herateilung verschiedenster Heteropeptide geraäss den in den Beispielen "beschriebenen Arbeitsweisen verwendet werden. Gewünsehtenfalls können sie auch zur Herstellung von hoohmolekularen Homopolymeren, wie Polyeerin und Polythreonin, duroh Polymerisation in einem organischen Lösungsmittel in Gegenwart einer Base verwendet werden. Solche polymere Verbindungen werden in weitem Umfang als Modellverbindungen bei der Untersuchung der physikalischen Eigenschaften von proteinähnliohen Strukturen verwendet.

Beispiel 1

ffrifluoraoetylserin-N-oarboxyanhydrid

Insgesamt 3,93 g Serin-N-oarboxyanhydrid werden eu 200 ml frisch gereinigtem Dioxan gegeben, worauf 5 ml Trifluoressigsäureanhydrid zugeeetet werden. Die Lösung wird bei etwa 25° C 1,75 Stunden gerührt und bei geringem Druok konzentriert. Das Burtiokbleibende öl wird in Dioxan aufgenommen und das Lösungsmittel wieder bei niederem Druok entfernt, wobei das gewünschte Produkt als Rückstand hinterbleibt.

Die Trifluoraoetyl-lf-oarboxyanhydride von Threonin, Hydroxyprolin,. ß-Phenyleerin, ß-Hydroxyleuoin, a-Hydroxynorvalin und Y-Hydroxynorvalin werden in entsprechender Weise hergestellt, indem «an das Serin-H-oarboxyanhydrid durch die äquivalente Menge des V-Carboxyanhydrids des geeigneten Aminosäureanhydride ersetet.

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Beispiel 2

TrlchloraoebyiBerln-H-carboxyanhydrld

Inagooamb 3,^f)3 g nerin-N-onrbojtynnhydrld werden in 200 ml frLooh deobLLLLöfbam Dloxan geittob, woruuf 4 ml Trlohioraeebyiehlorid zugugeben woi'tlon. Dao Gamlaoh wLrd 16 Stunden bei obwa 25° 0 gerllhrb. Dann wird es filtriert und das Piifcrab unter verminderbem Druck konzenbriert. Das zurückbleibende öl wird In frl-Bohein Dloxan aufgenommen und wieder bei verminderbem Druck konzentriert, wobei dae gewUnaohfce Produkt aln Rllokatnnd hinfcerbleibb.

Öle Trlohloraoöbyt-H-carbOKyanhydfide von Thronnln, llydroiyproLin, Ö-Phenylsarln, Q-Hydt*üx:yLouoln, nt-HydroicynorvniLn und γ-IIydroxynorvalin werden in ontupreohonder V/öiae hergenbellb, indem man das Serin-N-carboxyanhydrid durch eine äaulvalente Menge doa geeigneten AminoßäureanhydrldB ereebzb,

Belaplel 3

Trlfiuoraoetylserln-N-thlooarboxyanhydrld

Insgeaaiab 84 g Serin werden in 75 mL Äthanol aufgenommen, das 18 ml V'aeoer und 68 ml 11 »7n Kallumhydroxid enthält· Zum Gemlach werden unter Stickstoff und UUhren 97,5 g Methyläthylxanbhat zugegeben, während die Temperatur mit Hilfe eines KUhI-bada bei etwa 25 bis etwa 30° 0 gehalten wird. Die Ilmaebaung wird bei dieser Temperatur 2 Stunden lang forfcgenebzt, und dann wird auf 45° C erhitzt und weitere 0,5 Stunden unber andauerndem Rühren boi dieser Temperatur gehalten. Der gröesbe Teil dna Alkohole wird bei niederem Druck entfernt, und !80 ml V'aeöor worden zugegeben, Dhb Oemlsoh wird dann zweimal mit je 1DO ml Äther extrahiert, um nicht umgesetztes Xanthnt zu entfernen. Die alkalische, wässrig·* Schicht wird mit 100 ml Kthyl-

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aoetat Ubersohiohtet und 73 ml 12n Salzsäure und anschliessend 70 ml Wasser werden zugegeben. Das Gemisch wird geschüttelt und die organische Schicht abgetrennt. Die wässrige Schicht wird wieder mit 100 ml Äthylaoetat extrahiert, und die vereinigten organischen Sohiohten werden zweimal mit je 50 ml gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen. Die organische fJohioht wird abgetrennt, über Natriumsulfat getrocknet und bei vermindertem Druck konzentriert, um das gewünschte Methylthionourethanserin auszufällen»

Tmigeoamt 0 g MethyLthionourethanBerin werden in 40 ml Tetrahydrofuran aufgenommen und 6,1 ml Phosphortribromid unter Rühren zugefügt, während die Temperatur bei 0 bis 5⁰C gehalten wird. Das Reaktlonsgemisoh wird in 200 ml 1Obigem wässrigem Hatrlumbicarbonat abgoaohreokfc und dreimal mit je 100 al Xfchylaoetat extrahiert. Die vereinigten organischen Sohiohten werden zweimal mit Je 50 ml konzentrierter Hatriumohlorldlö-Dung gewaschen und Über Natriumsulfat getrocknet. Das gewünoohte Produkt, H-Thiooarboxyserinanhydrid, wird erhalten, indem das Lösungsmittel unter vermindertem Druck entfernt wird.

Insgesamt 3,8 g des oben hergestellten Produktes werden »u 200 ml frisch destilliertem Dioxan gegeben, vorauf man 5 al Trifluoreeslgsäureanhydrld zugibt. Die Lösung wird bei etwa 25° C 2 Stunden gerührt und bei geringem Druck konaentriert. Der Rückstand wird in 100 ml frischem Dioxan aufgenommen und wieder unter vermindertem Druok konaentriert, wobei das gewünschte Produkt als Rückstand hinterbleifct.

Die Trifluoraoetyl-fr-thiooarboxyanhydride von Threonin, Hydroxyprolin, ß-Phenylserin, fi-Hydroxyleuoln, oc-Hyäroxynorvalin und γ-Hydroxynorvalin werden in entsprechender Weise hergestellt, Ladern man das SorIti duroh eine äquivalente Menge der geeignetem Aminosäure ersetzt»

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Beispiel 4

Trichloraoetyleerin-N-thiooerboxyanhydrid

Insgesamt 5,8 g Serin-N-thiooarboxyanhydrid werden in 200 ml frisch destilliertem Dioxan aufgenommen und 4 ml Triehloracetyl werden zugefügt. Das Gemisch wird 8 Stunden gerührt und filtriert und das Filtrat unter vermindertem Druck eingedampft, wobei das gewünschte Produkt als Rüokstand hinterbleibt.

Die Trichloraoetyl-N-thiooarboxyanhydride von Threonin,-Hydroxyprolin, ß-Phenylaerin, ß-Hydroxyleucin, a-Hydroxynorvaliu und γ-Hydroxynorvalin werden in entsprechender Weise hergestellt, indem man das Serin-N-Thiocarboxyanhydrid durch eine äquivalente Menge dee geeigneten Aminosäureanhydride ersetzt.

Beispiel 5 Seryl-prolyl-phenylalanyl-arginin

Insgesamt 15,75 g Argininhydroxyohlorid werden in 2,62 1 Natriumtetraboratpuff er-LÖeung bei pH 10 gelöst. Der pH-Wert wird mit konzentrierter Schwefelsäure auf 3 eingestellt und 10 Minuten Stickstoff durohgeleitet. Der pH-Wert wird mit 50#lgem wässrigem Natriumhydroxid auf 10,2 erhöht und die Lösung auf 0° C abgekühlt. Zu diesem Gemisch werden 4-00 g Eis und danaoh 82,5 mMol Phenylalanin-N-carboxyanhydrid, gelöst in 200 ml Aceton, zugefügt. Das Gemisch wird bei dieser Temperatur 1 Minute kräftig gerührt und mit konzentrierter Schwefelsäure auf pH 3 angesäuert, während 10 Minuten lang Stickstoff durchgeleitet wird. Dann wird der pH-Wert mit 50#igem wässrigem Natriumhydroxid auf 9,5 eingestellt und 400 g Eis und ansohlieesend 112,5 mMol Prolin-N-carboxyanhydrid in 150 ml Aceton zugefügt. Die Lösung wird bei 0° C 1 Minute krUftig gerührt und wie oben decarboxyliert. Die Arbeiteweiße wird bei pH 9,3 unter Zugabe von 15,0 mMol Trifluoraoetyleerin-H-carboxyanhydrid in

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150 ml Aceton wiederholt. lach einminütigem Mischen pH-Wert auf 7 eingestellt und das Gemisch gefriergetrocknet. Dae Silioagel Bit adsorbiertes Produkt wird dann bu einer Silioagel θ au Ie gegeben, die vorher in Ieopropanol präpariert wurde. Die Säule wird alt Methanol : Wasser t Ammoniak 80 ι 18 ι 2 entwickelt und das gewünschte Tetrapeptid, das frei von der Trifluoraoetylgruppe ist, wird isoliert.

Sie folgenden Verbindungen werden in entepreohender Weise unter Verwendung von sowohl des Trifluoraoetyl- als auoh des TrichloracetyIderivate des geeigneten !-Carboxy- oder I-Sfhiooarboxyaminosttureanhydrid hergestellt. In jedem Tall 1st das isolierte Produkt frei von der Hydroxysohutegruppe. Bei den H-fhiooarboxyverbindungen beträgt der Kupplungs-pH-Wert 8,8 anstatt 9t3.

Threonyl-prolyl-phenylalanyl-argittiu Hydroxyprolyl-prolyl-phenylalanyl-arginln

ß-Phenylseryl-prolyl-phenylalanyl-arginin ß-Hydroxyleueyl-prolyl-phenylalanyl-arginin ß-Hydroatynorvalyl-prolyl-phenylalanyl-arglnin

Y-Hydroacynorvalyl-prolyl-phenylalanyl-arginin.

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Claims

l· 15 45 767. 9 · Tr.A. 8 I*. JttMt* __, Heroic ft Ca*, XnQ. 43 13 925 / H 70 Patentansprüche

1. Trihalogenaoetylester von H-Carboxy= und H-Thiocarboxyanhydriden von allphatisohen Hydroxy-a-aminoeäuren, in denen die Hydroxylgruppe alkoholiaoh let und die Halogenatome eine Ordnungszahl von weniger als 36 aufweisen» '

2. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen naoh Anspruoh 1, dadurch gekennzeichnet« dass man in ein M-Carboxy- oder N-Thiocarboxyanhydrld einer aliphatisohen Hydroxy-aaniinosäure duroh Verestern den Trihalogenacetylrest einfuhrt.

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