DE1767817C3 - Verwendung von γ-Globulinen bei der Bekämpfung der Diarrhöe von Ferkeln - Google Patents

Verwendung von γ-Globulinen bei der Bekämpfung der Diarrhöe von Ferkeln

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DE1767817C3
DE1767817C3 DE19681767817 DE1767817A DE1767817C3 DE 1767817 C3 DE1767817 C3 DE 1767817C3 DE 19681767817 DE19681767817 DE 19681767817 DE 1767817 A DE1767817 A DE 1767817A DE 1767817 C3 DE1767817 C3 DE 1767817C3
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Description

tion Reaktion (HA-Test) nach dem Testglasverfahren =
unterworfen werden, wobei die Antikörper-Faktoren Serotyp χ 50 χ 100 χ 200 χ 400 χ
dieser Proben ermittelt werden. Die in den Tabellen
angegebenen Typen-Nummern stellen Laborbezeich- 59 - - - - —
nungendar. 5 60 — — — — —
61 + + +
Tabelle 1 62 + +
+ + +
Serotyp χ 50 χ 100 χ 200 χ 400 χ 800 64 -
ίο 65 + +
10 + + + + - - - 20 75 -
11 ----- 76
19 ----- 84 -
20 + - - - - 30 85 + +
21 ----- 86 +
22 ++- - - - 87
30 + + - - - - 40 95 -
32 ++- - - - 97 33----- 98+ +
36 + + + ++ - - 101
37 ++ - - - - 102
39 ----- 104 +
40 + - - - - 50 105
42 ----- 107 -
43 +++++_ _ _ 108
45 + + + _ _ _ _ 55 110 ±
47 + + +- - - - 112
48 +++++_ _ _ 113
50 - - - - - 60 115
54 + + ++++ - - 119
55 + - - - - b5 120 + +
Fortsetzung
Serotyp χ 50
xlOO
χ 200
χ 400
χ 800
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
4 -
4 -
4+ 4
444 4
44
4 4 4
44
In der Tabelle 1 sind Proben, die als Vorbeugungsmittel brauchbar sind, solche, die bei den 200fach verdünnten Proben die Auswertung 4- + haben. Es ist deshalb erkennbar, daß y-Globulin von nur einem ausgewachsenen Schwein im wesentlichen keine vorbeugende Wirkung hat. Dementsprechend sind die Arten von Antikörpern, die im y-Globulin von nur einem erwachsenen Schwein enthalten sind, verhältnismäßig beschränkt Dessen Antikörper-Werte sind ebenfalls beschränkt. Dementsprechend können solche Antikörper keine brauchbare Vorbeugungsmittel für die zu verhindernden Krankheiten sein. Außerdem sind selbst dann, wenn die y-Globuline von mehreren zu einem Schweinehof gehörenden Schweinen gesammelt werden, die Arten von deren Antikörpern beschränkt.
Es wurde jedoch überraschenderweise durch Versuche gefunden, daß dann, wenn die y-Globuline von 6—20 ausgewachsenen Schweinen, die zu verschiedenen Schweinehöfen gehören, gesammelt und gemischt werden, die Arten an Antikörpern stark vermehrt und die Faktoren der Antikörper synergistisch vermehrt werden. Das bedeutet, daß im Hinblick auf die Vermehrung der Arten von Antikörpern und der Faktoren dann, wenn die y-Globuline von 6 bis 20 ausgewachsenen Schweinen, die hinsichtlich Serotyp und Schweinehof unterschiedlich sind, ehalten und miteinander vermischt werden, Vorbeugungsmittel erhalten werden, die stärkere präventive Faktoren als solche haben, die zur Verhinderung von infektiösen Krankheiten von Ferkeln bekannt sind. Die Anzahl der ausgewachsenen hinsichtlich der Schweinehöfe unterschiedlichen Schweine, die als Quelle für die zu mischenden y-Globuline verwendet werden, beträgt 6 bis 20.
Die erfindungsgemäß verwendeten Mittel können auf die folgende Weise hergestellt werden:
Ausgewachsene Schweine, die zu 6 bis 20 Schweinehöfen gehören, wie dies bereits oben dargelegt wurde, werden von verschiedenen Schweinehöfein ausgewählt, und deren Sera werden gesammelt. Jedes Serum wird der Aüssalzungsmethode, der Ultrazentrifugen-Abtrennungsmethode, der Tieftemperatur-Äthanolfraktionierungsmethode oder einer ähnlichen Methode unterworfen, um y-Globuline zu erhalten. Die so erhaltenen y-Globuüne werden mittels eines Chamberland oder Seitz-Filters von Bakterien befreit, zu Pulvern gefriertrocknet und dann miteinander vermischt In alternativer Weise können die jeweiligen Sera miteinander vermischt und dann dem üblichen Verfahren zur
ίο Isolierung eines gemischten y-Globulins unterworfen werden.
Durch die vorstehend beschriebene Behandlung werden Mikroorganismen inaktiviert, und zwar selbst dann, wenn sie in den Sera enthalten waren. Falls erforderlich, kann das so hergestellte gemischte y-Globulin in einer Ampulle mit einem Antiseptikum, beispielsweise 0,02% oder weniger Thiomersal oder 0,25% oder weniger Carbolsäure vermischt werden, um ein Vorbeugungsmittel gemäß der vorliegenden Erfindung herzustellen. Dieses Mittel kann mit Wasser zu einer wässerigen Lösung mit einer Konzentration von etwa 10% verdünnt werden.
Das Mittel, das auf die obige Art und Weise erhalten worden ist kann erfindungsgemäß intramuskulär oder intraperitoneal den Ferkeln injiziert werden. Wenn das Mittel in Form eines Pulvers in einer Ampulle vorliegt wird es nach Überführung in eine wässerige Lösung mit einer Konzentration von etwa 10% durch Zugabe von Wasser in die Ampulle verabreicht Wenn das Mittel in Form einer wässerigen Lösung vorliegt wird es als solches verabreicht Wenn das Mittel in einer Dosis von etwa 0,1 bis 0,5 g/kg verabreicht wird, kann eine ausreichende vorbeugende Wirkung erzielt werden. Wenn das Mittel verabreicht ist ist die vorbeugende Wirkung für eine Dauer von mehr als zwei Wochen gegeben. Dieses Mittel ist nicht ein antibakterielles Chemotherapeutikum wie ein Sulfonamid oder ein Antibiotikum. Deshalb hat es die chrakleristische Eigenschaft, daß, wenn der Ausbruch der Krankheit für eine Zeitdauer von etwa zwei Wochen durch eine einmalige Verabreichung verhindert worden ist spontan Antikörper in den Körpern der Ferkel gebildet werden und eine im wesentlichen permanente Verhinderung der Krankheiten möglich wird.
Eine Mischung von y-Globulinen, die aus den Sera von sechs ausgewachsenen Schweinen aus verschiedenen Schweinehöfen erhalten wurde und die gemäß dem später angegebenen Beispiel erhalten wurde, wurde gefriertrocknet und auf die gleiche Weise untersucht wie im oben beschriebenen Bestimmungstest für Escherichia-coli-Antikörper. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 2 zusammengestellt.
Tabelle 2 χ 50 4 X 100 x 200 χ 400 χ 800
Serotyp 4- 4 4 4 4- 4 4- 4 4
1 4- 4 4 4 + 4 + 4 4
2 4- 4 4 4 + 4 4- 4 4
3 44 4 4 + 4 4 4 44
4 4- 4 4 4 + 4 4 4 -
5 + 4 4 = = = 4 4 4 -
6 4- 4 4 4 4- 4 4 4 4- 4 4 -
7 4- 4 4 4 4- 4 4 ■+■ 4 -
8 4- 4 4 4 4- 4 4 4 - -
9 4- 4 4 4 4- 4 4 4 4 4 4 4 4
10 4- 4 + + 4 4 4
11
rortsct/ung χ 50 χ 50 χ 200 - 400 χ 800 IO Seroi>p χ 50 -
Serotyp + + +
+ + + + + + + + + + 72 + + +
12 + + + + + + + 73 + + +
13 + + + + + + + + + 74 + + +
14 + + + + + + + + !5 75 + + +
15 + + + + + + + + - 76 + + +
16 + + + + + + + + 77 + + +
17 + + + + + + + + _ 78 + + +
18 + + + + + + + + + + + 79 + + +
19 + + + + + + + + + + 20 80 + + +
20 + + + + + + + + + 81 + + +
21 + + + + + + 4- 4- 82 + + +
22 + + + + + + + + 83 + + +
23 + + + + + + + + + + + + 84 + + +
24 + + + + + + + + 25 85 + + +
25 + + + + + + 86 + + +
26 + + + + + + + + + + + + + + 87 + + +
27 + + + + + + + + + + + + + 88 + + +
28 + + + + + + + + + + + 89 + + +
29 + + + + + + + + 30 90 + + +
30 + + + + + + + + + + + 91 + + +
31 + + + + + + + + + - 92 + + +
32 + + + + + + + + + - 93 + + +
33 + + + + + + + + + + + 94 + + +
34 + + + + + + + + + + + + 35 95 + + +
35 + + + + + + + + + + + + + + 96 + + +
36 + + + + + + + + + + + 97 + + +
37 + + + + + + + + + + + + + 98 + + +
38 + + + + + + + + + + 99 + + +
39 + + + + + + + + + 40 100 + + +
40 + + + + + + + + + + + + 101 + + +
41 + + + + + + + + + 102 + + +
42 + + + + + + + + + + 103 + + +
43 + + + + + + + + + + 104 + + +
44 + + + + + + + + - 45 105 + + +
45 + + + + + + + + + + + + + 106 + + +
46 + + + + + + + + + + 107 + + +
47 + + + + + + 108 + + +
48 + + + + + + + + + + + 109 + + +
49 + + + + + + + + + + 50 110 + + +
50 + + + + + + + + + + + 111 + + +
51 + + + + + + + + + 112 + + +
52 + + + + + + + + + + 113 + + +
53 + + + + + + + + + + 114 + + +
54 + + + + + + + + + 55 115 + + +
55 + + + + + + + + + + 116 + + +
56 + + + + + + + + + 117 + + +
57 + + + + + + + 118 + + +
58 + + + + + + + + + + + 119 + + +
59 + + + + + + + + + + + + + 60 120 + + +
60 + + + + + + + + + + + + + + 121 + + +
61 + + + + + + + + + + + 122 + + +
62 + + + + + + + + + + + 123 + + +
63 + + + + + + + + 124 + + +
64 + + + + + + + + + 65 125 + + +
65 + + + + + + + + + + + 126 + + +
66 + + + + + + + + + 127 + + +
67 + + + + + + + 128 + + +
68 + + + + + + + + + + + + + 129 + + +
69 + + + + + + + + + + + 130 + + +
66 + + + + + + + + + 131 + + +
67 + + + + + + + 132 + + +
68 + + + + + + + + + + + + + 133 + + +
69 + + + + + + + + + + + 134 + + +
70 + + + + + + + + + + 135 + + +
71 136
100
χ 200
χ 400
l-'ortsct/uny
ScTolNp χ 50 xlOO χ 200 χ 400 χ 800
Den obigen Ergebnissen kann entnommen werden, daß diese y-Globulinmischung Antikörper enthält, die in der Lage sind, im wesentlichen alle 146 Arten von Escherichia coli-Stämmen zu inhibieren.
Wenn gemäß der Erfindung die y-Giobulinmischung Ferkeln im Alter von zwei bis fünf Wochen verabreicht wird, in dem die Ferkel im wesentlichen frei von y-Globulinen sind, zeigt es eine außerordentlich hervorragende Wirkung hinsichtlich der Verhinderung von allergischer Diarrhöe durch Escherichia-coli-Bazillen, die normalerweise bei Ferkeln dieses Alters ausbricht.
15
20
25 Das nachfolgende Testbeispiel zeigt die Wirksamkeit der erfinderischen Verwendung der >>-Globulin-Mischung.
Versuch
In diesem Versuchsbeispiel wurden 12 Ferkel verwendet, die als vierter Wurf von einem Mutterschwein der Yorkshire χ Landrasse Fi geworfen wurden. Dieses Mutterschwein hatte vorher drei Würfe, wobei alle geworfenen Ferkel jedes Wurfes unter Diarrhöe gelitten hatten gemäß Untersuchung vom immunologischen Standpunkt aus. Diese Ferkel wurden in zwei Gruppen aufgeteilt, wobei jede Gruppe sechs Ferkel umfaßte. Die Ferkel der einen Gruppe wurden als Kontrolle benutzt. Die Ferkel wurden mit der gleichen Muttermilch aufgezogen. Am zehnten Tag nach der Geburt wurden die Ferkel der einen Gruppe intramuskulär mit 0,3 g/kg des Mittels gemäß der vorliegenden Erfindung (eine Mischung von y-Globulinen von sechs ausgewachsenen Schweinen verschiedener Schweinehöfe) gespritzt. Das Mittel wurde den Kontrollschweinen der anderen Gruppe nicht verabreicht. Der Ausbruch von Diarrhöe, wie er während 18 Tagen bei den Ferkeln der erwähnten zwei Gruppen beobachtet wurde, ist in der nachfolgenden Tabelle 3 zusammengestellt.
Tabelle 3
Nr. Tage alt
1 2 3
12
13
15
16
17
Ferkel, denen y-Globuline verabreicht wurde
Kontroll-Ferkel
(I zeigt den Zeitpunkt der Verabreichung)
Aus der Tabelle ist ersichtlich, daß die Ferkel derjenigen Gruppe, denen erfindungsgemäß die y-Globuline verabreicht worden war, eine bemerkenswerte Diarrhöe-Schutzwirkung im Vergleich mit den Tieren der Kontrollgruppe erhielten.
In letzter Zeit ist der Aufzucht von speziellen pathogenfreien Schweinen (SPF-SchweinenX die für eine Hysterektomie geeignet sind, Beachtung geschenkt wurden. Im Falle der primären SPF-Schweine werden die Ferkel ohne Verabreichung von Kolostrum aufgezogen. Dementsprechend werden die Ferkel in einem Stadium belassen, in dem sie keine Antikörper bis zu einem Alter von drei Wochen besitzen. Aus diesem Grunde sind sie für verschiedene Infektionskrankheiten sehr stark empfänglich. Erfindungsgemäß ist auch für diese Art von Ferkeln die y-Globulin-Mischung bemerkenswert wirksam hinsichtlich der Verhinderung von Krankheiten.
Das nachfolgende Beispiel zeigt die Wirkung des Mittels der vorliegenden Erfindung, wenn es SPF-Schweinen verabreicht wird Bei diesem Versuch wurden 12 Ferkel verwendet, die als erster Wurf von einem Mutterschwein der Yorkshire χ Landrasse Fi geworfen, wurden. Die Ferkel wurden in zwei Grupper aufgeteilt, wobei jede Gruppe 6 Ferkel umfaßte. Eine dieser Gruppen wurde als Kontrolle verwendet Die Ferkel wurden mit der gleichen bakterienfreien künstlichen Milch aufgezogen. In der 24. Stunde nach dem Wurf wurden die Ferkel der einen Gruppe intramuskulär mit 04 g/kg eines gemäß der vorliegen·
den Erfindung hergestellten Mittels (einer Mischung von y-Globulinen aus ausgewachsenen Schweinen verschiedener Schweinehöfe) gespritzt. Das Mittel wurde den Kontrollschweinen der anderen Gruppe nicht verabreicht. In der 48. Stunde nach dem Wurf wurden den Ferkeln beider Gruppen 1000 bis 10 000
Tabelle 4
Organismen vom Escherichia-coli-Stamm O-139 Nagoya oral verabreicht. Dieser Stamm ruft Ödem-Krankheit hervor.
Der Stand der Infektion der Ferkel während der nachfolgenden 18 Tage ist in der Tabelle 4 angegeben
Tage alt
1 2
10
12
13
15
16
17
Ferkel, denen das y-Globuline verabreicht wurde
2 — —
3 — — 4
Kontrollferkel
1
tot
tot
tot
tot
tot
tot
Aus der vorhergehenden Tabelle ist ersichtlich, daß die Kontrollferkel am dritten Tag erkrankten, während die Ferkel, denen die y-Globulin-Mischung erfindungsgemäß verabreicht wurde, selbst nach 18 Tagen nach der Geburt nicht infiziert waren.
Die obigen Versuche sind unter Verwendung von Stämmen von Escherichia coli durchgeführt worden.
Beispiel 1
Blutserum wurde von 6 ausgewachsenen Schweinen (80/kg durchschnittliches Körpergewicht) erhalten, die jeweils aus den Fukushima, Akita, Aomori, Ibaragi, Tokyo und Ehime Prefectures, Japan, ausgesucht worden waren. Diese Seren wurden miteinander vermischt, und die Menge an Serummischung betrug 14 420 ml. Dieses Serumgemisch wurde der Nichul und Deutch-Tieftemperatur-Äthanol-Fraktioniermethode
unterworfen, um das y-Globulin zu isolieren und zu reinigen. Anschließend wurde das y-GIobulin mittels eines Chamberland- Filters von Bakterien befreit. Es wurde dann gefriertrocknet, wobei 31 870 mg pulverförmiges y-Globulin erhalten wurden. Jeweils 70 bis 100 mg dieses Pulvers wurden in verschiedene Ampullenflasehen gegeben, um die gewünschten Produkte zu erhalten. Zu der Anwendung wurde das Pulver in jeder Flasche in 1 ml einer physiologischen Kochsalzlösung gelöst.
Beispiel 2
31 870 mg des gemäß Beispiel 1 erhaltenen y-Globulins wurden in 320 ml einer physiologischen Kochsalzlösung gelöst Nach Zugabe von 0,02% Thiomersal wurde die Lösung filtriert und mittels eines Seitz-Filters von Bakterien befreit. Anschließend wurde jeweils 1 ml der erhaltenen Lösung getrennt in 2-ml-Ampullen gegeben, um die gewünschten Produkte zu erhalten.

Claims (1)

  1. Patentanspruch:
    Verwendung einer Mischung von y-Globulinen ausgewachsener Schweine, die 6—20 verschiedenen Schweinehöfen angehören, bei der Bekämpfung der Diarrhöe von Ferkeln durch intramuskuläre oder infraperitoneale Verabreichung.
    In Japan wird z-Z. die Aufzucht von Schweinen außerordentlich extensiv durchgeführt durch übliche Farmer und durch Unternehmensbetriebe. Die Anzahl von Betrieben, die sich ausschließlich mit der Aufzucht von Schweinen beschäftigen, wird laufend erhöht Die Probleme, die hinsichtlich der Aufzucht von Schweinen gegenwärtig am ernstesten sind, betreffen die Abnahme des Aufzuchtverhältnisses und das Ansteigen der Sterblichkeit von Ferkeln, insbesondere von solchen mit einem Alter von zwei bis fünf Wochen. Ein bemerkenswertes Phänomen, das bei Ferkeln dieses Alters beobachtet wird, ist in erster Linie deren Tod auf Grund einer Anhäufung von Diarrhöe-Symptomen und dem Aufkommen von sogenannten infizierten Ferkeln. Die Sterblichkeit solcher Ferkel steigt bis auf 50—80%, und derartige infizierte Ferkel sollten notwendigerweise verworfen werden. Mit dem Ansteigen der Zahl an aufzuziehenden Schweinen ist deshalb der Schaden auf Grund dieser Symptome das ernsteste Problem für die mit der Schweineaufzucht verbundenen Kreise.
    Es sind zahlreiche Untersuchungen durchgeführt worden mit dem Ziel, die Ursachen für diese Krankheit festzustellen. Es gibt jedoch viele beträchtlich komplexe Faktoren, die die Ursachen für diese Diarrhöe darstellen. Es ist gesagt worden, daß die Diarrhöe von Ferkeln im Säugealter am stärksten zuzuschreiben ist dem verspäteten Ausbruch einer Krankheit, hervorgerufen durch Stämme von Escherichia coli. Die Diarrhöe dieser Art ist als allergische Diarrhöe bezeichnet worden. Sie wurde ursprünglich als eine physiologische Krankheit betrachtet. Als chemotherapeutische Mittel für diese Diarrhöe werden ι. Z. Sulfonamide und Antibiotika verwendet. Diese chemotherapeutischen Mittel können versuchsweise die Diarrhöe-Symptome verhindern. Sie sind jedoch nicht wirksam für einen heilenden Erfolg. Im Hinblick auf die Konzentrationen dieser chemotherapeutischen Mittel im Blut ist deren wirksamt Zeit zur Verhinderung und zur Heilung dieser Krankheit beschränkt -auf nicht mehr als etwa 24 Stunden. Dementsprechend ist die Verabzeichnung dieser Mittel zeitlich beschränkt, und es ist ein großer Aufwand erforderlich, uti die Verhinderung und die Heilung der Diarrhöe zu erzielen, falls eine große Anzahl von Schweinen aufgezogen wird. Weiterhin ist zu berücksichtigen, daß diese Art der Diarrhöe am 20. bis 30. Tag nach der Geburt auftritt, wo Übergangs-Antikörper, die durch die Mutter-Kind-lmmunität verliehen wurden, aus den Körpern der Ferkel verschwinden. In diesem Fall wird das endogene Gift von pathogenen Escherichia coli Bazillen, die sich in dem oberen Darmtraki der Ferkel schnell vermehrt haben, durch die Darmwandungen absorbiert. Dies hai zur Folge, daß die Hormon-autonomen Nerven- und Kreislaufsysteme der Körper der Ferkel beeinträchtigt werden und schließlich große Mengen Mucus von den Darmwänden abffeschieden werden. Wenn die Ferkel einen solchen Zustand erreicht haben, kann keine Wirkung durch die Anwendung der obenerwähnten chemotherapeutischen Mittel erwartet werden. Die Ferkel sterben plötzlich. Selbst wenn sie überleben, leiden sie an Kachexie und können nicht gleich wieder zu guter Gesundheit gebracht werden. Sie sind im Wachstum auch zu weit zurückgefallen.
    Im Hinblick hierauf haben die Erfinder der vorliegenden Erfindung verschiedene Untersuchungen durchgeführt, um Mittel zu finden, die gegen diese Krankheit wirksam sind.
    Es könnte an eine vorbeugende Methode unter Verwendung von Impfstoffen gedacht werden, ohne daß derartige konventionelle chemotherapeutische Mittel wie Sulfonamide und Antibiotika angewandt werden. Es gibt jedoch viele pathogene Bakterien, die Ferkel infizieren. Dazu gehören hundert und noch mehr Arten von Bakterien allein im Falle von Stämmen von Escherichia coli. Wenn diese mit anderen Bakterien, beispielsweise japanischer Encephalitis und Schweine-Cholera-Bakterien vereinigt werden, sind die Arten solcher pathogener Bakterien unzählbar. Es ist deshalb unmöglich, erzwungene Antikörper zu bilden, um daraus Impfstoffe zu erhalten.
    Im Hinblick hierauf haben die Erfinder weitere Untersuchungen durchgeführt und an Antikörper als vorbeugende Mittel gedacht, die hinsichtlich ihres Antikörper-Wertes als geringer betrachtet wurden als solche, die von hochimmunisierten Tieren stammen. Auf Grund dieser Untersuchungen ist überraschenderweise gefunden worden, daß eine Mischung aus y-Globulinen, die von ausgewachsenen Schweinen isoliert wurde, die zu 6 bis 20 Schweinehöfen gehören, einen Antikörper bilden können, der geeignet ist als Faktor zur Verhinderung von im wesentlichen allen Diarrhöe-Symptomen, die durch Stämme von Escherichia coli hervorgerufen werden.
    Gegenstand der Erfindung ist demgemäß bei Verwendung einer Mischung von y-Globulinen ausgewachsender Schweine, die 6—20 verschiedenen Schweinehöfen angehören, bei der Bekämpfung der Diarrhöe von Ferkeln durch intramuskuläre oder intraperitoneale Verabreichung.
    Ausgewachsene zu einem Schweinehof gehörende Schweine, die als Lieferquelle für y-Globuline für das Mittel gemäß der vorliegenden Erfindung ausgesucht werden seilen, haben y-Globuline, die in ihrer Art ähnlich sind. Dies gilt besonders dann, wenn sie zum selben Stamm gehören. Dementsprechend neigen
    so Antikörper, die aus ausgewachsenen Schweinen erhalten werden, welche zu einem Schweinehof gehören, dazu, hinsichtlich ihrer Art beschränkt zu sein. Dies wirkt sich auch auf deren Antikörper-Wert aus.
    Beispielsweise sind die Arten von Escherichia coli-Antikörpern, die in y-Globulinen aus dem Serum eines ausgewachsenen Schweines enthalten sind, in Tabelle 1 angegeben.
    Dieser Test wurde derart durchgeführt, daß von einem ausgewachsenen Schwein ein Serum gewonnen
    bo wurde, dieses Serum einer Tieftemperatur-Äthanol-Fraktionierung unterworfen wurde, um aseptisch ein y-Globulin zu isolieren, das einen Antikörper enthält, dieses y-Globulin gefriertrocknet wird, um eine Testflüssigkeit herzustellen, so daß deren Konzentrabi tion 1,3 g/dl wird, die Testflüssigkeit 50-, 100-, 200-, 400- und 800mal verdünnt wird und die Proben zusammen mit 146 Arten an 0-Gruppe Standard Antisera von Stämmen von Rscherichia coli Neter's Hämagglutina-
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