DE1620590A1 - Lincomycinester und Verfahren zu ihrer Herstellung - Google Patents

Description

DR. JUR. DlPL-CHEM. WALTER BEib

ALFRED HOEPPENER

RECHTSANWÄLTE VKO ΙΏΤΑ!?=

DR. JUR. DSPL-CKEM H.-J. WOLFF
DR. JUR. HANS CHR. SEIL

RECHTSANWÄLTE

623 FRANKFORTAM MAIM-HOCHST ADELONSTRASSE SB

Nr. 11 478 Jl₁ Ott «Β

The Upjohn Company
Kalamazoo, Michigan, V.St.A.

Lincomycinester und Verfahren zu ihrer Herstellung

Die Erfindung betrifft neue Ester des Antibiotikums Lincomycin sowie ein Verfahren zu ihrer Herstellung.

Lincomycin ist ein Antibiotikum, das man als Produkt bei der Bearbeitung eines Lincomycin bildenden Actinomyceten erhält. Verfahren zur Herstellung,' Gewinnung und Reinigung von Lincomycin sind in der U.S.A.-Patentschrift 3.086.912 beschrieben.

Das Verfahren gemäß der Erfindung zeichnet sich dadurch aus, daß die neuen Verbindungen durch direkte Acylierung von Lincomycin hergestellt werden. Es erwies sich, daß Lincomycin 4 acylierbare Hydroxylgruppen enthält und daß man entsprechend dem Ausmaß der Acylierung Mono-, Di-, Tri- und Tetraaeylate erhalten kannj aufgrund dessen

Neue Unterlagen (Art 7 § l Abs. 2 Nr. l Satz 3 des Xnderuneafl03. v. 4,$.Utß.

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konnte die Struktur von Lincomycin geklärt werden.

Die neuen erfindungsgemäßen Verbindungen haben die allgemeine Formel

CH-

SCH-

in der R einen Kohlenwasserstoffcarbonsäureacylrest mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Nitro-, Hydroxy-, Amino-, Cyan-, Thiocyan- oder niedrig-Alkoxykohlenwasserstoffcarbonsäureacylrest mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen oder ein Wasserstoffatom bedeutet, wobei mindestens ein R einer dieser Acylreste ist, und worin R¹ einen trans-4-Propyl-L-hygroylrest darstellt.

Geeignete Kohlenwasserstoffcarbonsäuren, von denen sich die Acylreate ableiten, sind beispielsweise (a) gesättigte oder ungesättigte, grad- oder verzweigtkettige aliphatische Carbonsäuren, 25*B. Essigsäure, Propionsäure, Buttersäure, Isobuttersäure, tert.-Butylessigsäure, Valeriansäure, Isovalerianaäure, Capronsäure, Caprylsäure, Decansäure, Dodecansäure_? Acrylsäure, Crotonsäure, Undecylensäure, Hexynsäure, Heptynsäure, Octynsäure und dgl., (b) gesättigte oder ungesättigte substituierte al-i cyclische Carbonsäuren, z.B. Cyclobutancarbonsfei-a-_T Cyclo-

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pentancarbonsaure, Cyclopentencarbonsäure, Methylcyclopen·-· tencarbonsäure, Cyclohexancarbonsäure, Dimethylcyclohexencarbonsäure, Dipropylcyclohexancarbonsäure und dgl., (c) gesättigte oder ungesättigte, substituierte, alicyclische ali-phatische Carbonsäuren, z.B. Cyclopentanessigsäure, Cyclopentanpropionsäure, Cyclopentenessigsäure, Cyclohexanbuttersäure, Methylcyclohexanessigsäure, und dgl., (d) aromatische Carbonsäuren, z.B. Benzoesäure, Toluolsäure, Naphthoesäure, Äthylbenzoesäure, Isobutylbenzoesäure, Methylbutylbenzoesäure und dgl., und (e) aromatisch-aliphatische Carbonsäure, z.B. Phenylessigsäure, Pheny!propionsäure, Phenylvaleriansäure, Zimtsäure, Phenjtpropiolsäure und Naphthylessigsäure und dgl. Geeignebe Halogen-, Nitro-, Hydroxy-, Amino-, Cyano-, Thiocyano und niedere Alkoxykohlenwasserstoffcarbonsäuren mit. nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen umfassen, die vorgenannten Kohlenwasserstoffcarbonsäuren, die durch ein oder mehrere Halogenatome, oder Nitro-, Hydroxy-, Amino-, Cyan- oder Thiocyan- oder niedere Alkoxygruppen substituiert sind, vorzugsweise durch niedere Alkoxygruppen mit nicht mehr als 6 Kohlenstoffatomen, z.B. Kethoxy—, Äthoxy-, Propoxy-, Butoxy-, Amyloxy-., Hexyloxygruppen oder deren isomere Formen. Beispiele derartiger substituierter Kohlenwasserstoff carbonsäuren sind Mono-, Di- und Trichloressigsäure, α- und ß-Chlorpropionsäure, ot- und ^-Brombuttersäure, Ot- und ο -Jodvaleriansäure, Mevälonsäure, 2- und 4-ChTorcyclohexanca^rbonsäure, Shikimisäure, 2-Nitro-1-methylcyclobutancarbonsäure, 1,2,3,4,5,6-Hexachlorcyclohexancarbonsäure, 3-Brom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 4- und 5-Brom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 5- und 6-Brom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 2,3-Dibrom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 2,5-Dibrom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 4,5-Dibrom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 5,6-Dibrom-2-Hiethylcyclohexancarbonsäure, 3-Brom-3-niethylcyclohexancarbonsäure, 6-BΓom-3-πlethylcyclohexancarbonsäure, 1, o-Dibrom-3-methjLcyclohexancarbonsäure, 2-Brom-4-00982 2/1923

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methylcyclohexancarbonsäure, 1,2-Dibrom-4-methylcyclohexancarbonsäure, 3-Brom-2,2,3-trimethylcyclopentancarbonsäure, 1-Brom-3,5-dimethylcyclohexancarbonsäure, Homogen t is insäure, o-, m- und p-Chlorbenzoesäure, Anissäure, Salicylsäure, p-Hydroxybenzoesäure, ß-Resorcylsäure, Gallsäure, Veratrinsäure, Trimethoxybenzoesäure, Trimethoxyzimtsäure, 4,4-Dichlorbenzolsäure, o-, m- und p-Nitrobenzoesäure, Cyanessigsäure, 3»4- und 3»5-Dinitrobenzoesäure, 2,4,6-Trinitrobenzoesäure, Thiocyanessigsäure, Cyanpropionsäure, Milchsäure, Äthoxyameisensäure (Äthylwasserst off carbonat) und dgl.

Die neuen Lincomycinacylate können zur Verbesserung von Lincomycin verwendet werden, so z.B., indem man rohes Lincomycin acyliert, das Acylat reinigt und es dabei von nicht acylierbaren und anderen Verunreinigungen abtrennt und zu Lincomycin desacyliert. Die Desacylierung erfolgt leicht, indem man die Acylate mit einer verdünnten wässrigen Base bei 15 bis 8O⁰C oder mit Ammoniak in Methanol bei 15 bis 4O⁰C umsetzt.

Die neuen Lincomycinacylate können äfch als antibakterielle Mittel verwendet werden. Beispielsweise hemmt Lincomyeintetraacetat das Wachstum von Staphylococcus albus und ist daher als Desinfektionsmittel für verschiedene zahnärztliche und medizinische Geräte, die mit diesem Organismus verunreinigt sind, geeignet. Die Monoacylate von Lincomycin sind wertvolle antibakterielle Mittel. Lincomycinmonoacetate hemmen beispielsweise das Wachstum von Staphylococcus aureus und sind daher als Desinfektionsmittel für gewaschene und gestapelte Speisegeräte nützlich, die mit diesem Organismus verunreinigt sind. Das neue Lincomycintetraacetat kann als Zwischenprodukt für die nachstehend beschriebene Herstellung von Lincornycin-mono-, -di- und triacylaten verwendet werden. Weiterhin sind Lincomycin-

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SAD ORiQiNAL

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diacylate und -tetraacylate wertvolle Mittel zur Förderung .des Kükenwachstums. Die Verwendung von 4 mg Lincomycintetraaeetat-hydrochlorid enthaltendem Kükenfutter für die Dauer von 14 Tagen ergab eine 14-prozentige Steigerung des Wachstums bei den auf diese Weise gefütterten Küken gegenüber einer Kontrollprobe von Küken.

Bei dem gleichen Versuehsprogramm ergab Lincomycin-dibenzoat-hydroehlorid eine 17-prozentige Steigerung des Wachstums.

Die neuen Lincomycinacylate ergeben bei Hydrolyse, z.B. bei Rückflußbehandlung, in 6 η-Salzsäure für die Dauer von 5 Stunden oder in Hydrazin für die Dauer von 20 Stunden trans-4-Propyl-L-hygrinsäure bzw. das Hydrazid von trans-4-Propyl-L-hygrinsäure. Das erstere ist als Puffermittel oder Mittel gegen Übersäuerung oder in Form seines Fluorkieselsäureadditionssalzes als Mottenschutzmittel geeignet.

Die neuen Verbindungen gemäß der Erfindung können aus Lincomycin hergestellt werden, indem man Lincomycin mit dem Halogenid oder Anhydrid der ausgewählten Carbonsäure in Gegenwart eines säurebildenden Mittels, z.B. eines tertiären Amins, umsetzt. Geeignete säurebildende Mittel sind z.B. heterocyclische Amine wie Pyridin, Chinolin und Isochinoline Trialkylamine wie z.B. Trimethylamin, TriäthjL-amin, Triisopropylamin und dgl., N,N-Dialkylaniline wie Dirnethylanilin, Diäthylanilin und dgl, und N-Alky!-piperidine wie N-Athylpiperidin, N-Methylpiperidin und dgl. Die bevorzugte Base ist Pyridin. Die Umsetzung wird vorteilhafterweise so durchgeführt, daß man eine Suspension von Lincomycin in dem tertiären Amin mit dem Säurehalogenid oder -anhydrid behandelt und die erhaltene Mischung gewünschtenfalls kurzzeitig auf eine Temperatur von nicht

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BAD

mehr als etwa 10O⁰C erhitzt, um eine vollständige Umsetzung zu erreichen. Der erhaltene Ester kann nach üblichen Verfahren abgetrennt werden. Beim Umsetzen von Lincomycin in lyridin mit mindestens 4 Mol Acylierungsmittel erhält man Lincomycintetraacylat. Wenn das Molverhältnis von Säurehalogenid oder -anhydrid zu Lincomycin weniger als 4:1 beträgt, erhält man als Reaktio—nsprodukt normalerweise eine Mischung von teilweise acylierten Verbindungen (d.h. Mono-, Di- und Triacylate). Solche Mischungen können nach üblichen Verfahren, z.B. durch Anwendung von Gegenstromzerlegungsverfahren oder durch Teilungschromatographie in ihre Bestandteile zerlegt werden.

Lincomycin -mono-, -di- und -triacylate können auch hergestellt werden, indem man zuerst das Tetraacylat bildet und es dann durch Säurehydrolyse desacyliert. Die Trennung einer Mischung von Acylaten kann wiederum durch die vorgenannten Verfahren erfolgen. Dieses Verfahren ist das beste bekannte Verfahren zur Herstellung von Triacylate. Indem man Lincomycintetraacylat einer Säurehydrolyse unterwirft, bis eine wesentliche Umwandlung in Lincomycin-triacylat erreicht dsb, erhält man eine hohe Ausbeute an Triacylat im Vergleich zu der an Mono- und Diacylat. Gewünsch- tenfaÜB kann das Lincomycintetraacylat direkt zu dem Mono- oder Diacylat deacyliert werden, indem man die Dauer der Hydrolyse verlängert.

Salze von Lincomycinacylaten können hergestellt werden, indem man die freie Base mit der ausgewählten Säure auf einen pH-Wert von unterhalb etwa 7_fO, vorzugsweise zwi- i sehen etwa 2 und 6, neutralieaiert. Geeignete Säuren für diesen Zweck sind u.a. S^azsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Thiocyansäure, Fluorkieselsäure, Essigsäure, Bernsteinsäure, Zitronensäure, Milchsäure, Maleinsäure, Pamoin-

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BAD ORiGiNAL

—* Ύ —

säure, Fumarsäure, Cholinsäure, Palmitinsäure, Schleimsäure, Kampfersäure, Glutarsäure, Glycolsäure, Phthalsäure, Weinsäure, Laurinsäure, Stearinsäure, Salicylsäure, 3-Pheny !salicylsäure, 5-Phenylsalicylsäure, 3-M.e thy Iglutarsäure, ortho-Sulfobenzoesäure,· Cyclohexansulfaminsäure, Cyclopentanpropionsäure, 1,2-Cyclohexandicarbonsäure, 4-Cyclohexencarbonsäure, Octadecenylbemsteinsäure, Liethansulfonsäure, Benzolsulfonsäuren Helianthsäure, Reinedes Säure, Azobenzolsulfonsäure, Octadecylschwefelsäure, Picrinsäure und ähnliche Säuren.

Salze der erfindungsgemäßen Lincomycinacylate können für die gleichen Zwecke verwendet werden wie die freie Base. Sie können auch verwendet werden, um die freie Base zu verbessern; so wird die freie Base gereinigt, indem man ein Säureadditionssalz der freien Bass hergeellt, es Reinigungsverfahren unterwirft und das Salz dann zurück in die freie Base umwandelt, indem man es mit Alkali neutralisiert ode» mit einem anionischen Harz zusammenbringt, vorzugsweise bis ein pH von 7»5 bis 8,5 erhalten wird.

Die Erfindung wird anhand folgender Beispiele erläutert:

Beisj3iel_.li
Lincomycin-tetraacetat-hydrochlorid

Einer Lösung von 2 g Lincomycin in 10 ecm Pyridin wurden 3 ecm Essigsäureanhydrid zugegeben. Die Mischung wurde 6 Stunden auf dem Wasserdampfbad erhitzt, auf Raumtemperatur gekühlt, eine Stunde mit 1 ecm Wasser gerührt und zu einem dicken Sirup eingedampft. Der Sirup wurde in 10 ecm Äthylacetat gelöst und die Lösung mit 10 ecm eiskalter 5 5»—iger Natriumbicarbonatlösung und dann dreimal mit jeweils 1 Volumenteil Wasser gewaschen, über wasser-

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freiem Natriumsulfat getrocknet und auf einem rotierenden Verdampfer zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde über Nacht in einem Vakuumtrockner getrocknet, in 75 ecm wasserfreiem Äther gelöst und mit trockenem Chlor/wasserstoff .unter gleichzeitigem Kühlen in Eis behandelt, bis sich kein weiterer körniger Niederschlag mehr bildete. Der Niederschlag wurde sofort abfiltriert, dreimal mit jeweils 50 ecm trockenem Äther gewaschen und im Vakuum getrocknet. Er wurde in 30 ecm Chloroform gelöst und die Lösung auf dem Dampfbad auf 8 ecm eingedampft. Die Zugabe von etwa 50 ecm Äther zu der warmen Lösung führte zur Kristallisation von Lincomycin-tetraaeetat-hydro-

izpi
25

Chlorid mit einem Schmelzpunkt von 226 - 233°C, einer optischen Drehung £Oc 7 ί; = +149 (o, 1 in HpO); und der folgenden Elementaranalyse:

Berechnet für ^c ₂6^H42^N2°10^S·^HC1*!/2H₂O:

C =50,35; H=7,15; N=4,52; C=27,O9; S=5,17; Cl= 5,72; Äquivalentgewicht 620; HgO=I,45, Acetyl=27,8;

gefunden:

C =49,83; H=7,57; N=4,52; C=27,1O; S=4,99; Cl= 5,81; Äquivalentgewicht 605; HgO=I,72; Acetyl-25,53-

Lincomycintetraacetat-hydrochlorid kann durch Behandlung mit einem stark basischen Anionenaustauseherharζ in Lin— comycintetraacetat umgewandelt werden. ^/"Geeignete Anionenaustauscherharze für diesen Zweck werden erhalten, indem man nach dem von Kunin auf Seite 88 und 97, Ion Exchange Resins, 2. Auflage (1958), John Wiley and Sons, angegebenen Verfahren gewünschtenfalls mit Divinylbenzol vernetztes Polystyrol chlormethyliert, das nach dem auf Seite 84 der obengenannten Veröffentlichung von Kunin be-

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8AD ORIG-¹WAL

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schriebenen Verfahren hergestellt wurde und mit Trimethyl .amin oder Dimethyläthanolamin nach dem auf Seite 97 der obigen Veröffentlichung von Kunin beschriebenen Verfahren quaternisiert. Anionenaustauscherharze dieses Typs werden unter dem Handelsnamen Dowex 2, Dowex 20, Amberlite IRA 400, Duolite A-102 und Permutit S-1 vertrieben._7 Das Lincomycintetraacetat kann dann in andere Salze umgewandelt werden, indem man es auf die vorstehend angegebene Weise mit anderen Säuren zusammenbringt.

Lincomycin-tetrabenzoat-hydrochlorid

Einer Lösung von 203»3 g Lincomycin in 2,5 Litern Pyridin in einem 5 Liter-Kolben wurden 344 ecm Benzoylchlorid innerhalb von 15 Minuten unter gutem Rühren zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde noch «ine halbe Stunde gerührt und gekühlt und dann bei Raumtemperatur über Nacht abgestellt. Die Reaktionsmischung wurde gerührt und auf einem Dampfbad 15 Minuten erhitzt, auf 25°C gekühlt und langsam unter gutem Rühren in 18 Liter entionisiertes Wasser gegossen. Die wässrige Phase wurde dekantiert und verworfen. Der rohe gummiartige Rückstand aus Lincomycintetrabenzoat wurde mit 18 Litern Wasser gewaschen, in 10 Litern Benzol gelöst und die Lösung zweimal mit jeweils 6 Litern Wasser gewaschen. Der Benzollösung von Lincomycintetrabenzoat wurden 500 ecm konzentrierte Salzsäure, verdünnt mit 2,5 Litern Wasser, zugesetzt. Die zweiphasige Mischung wurde gründlich gerührt und 40 Liter Skellysolve B (isomere Hexane) wurden langsam zugesetzt, um Lincomycintetrabenzoathydrochlorid auszufällen. Nach einstündigera Rühren wurde die Mischung im Vakuum filtriert und das Produkt mit Wasser und Benzol-Skellysolve B (1:4-Mischung) gewaschen und über Nacht bei 50⁰C unter

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- ίο -

Vakuum getrocknet; die Ausbeute beträgt 429,7 g Lincomycintetrabenzoat-hydrochlorid. Das Produkt wurde umkristallisiert, indem man es in 15,2 Litern am Rückflußkühler erhitztem Benzol löste, 50 g Entfärberkohle zugab, durch Diatomeenerde im Vakuum filtrierte und das Filtrat durch langsame Zugabe von 17 Litern^kellysolve B (isomeren Hexanen) unter gutem Rühren verdünnte. Die Feststoffe wurden gewonnen und wie oben unter Vakuum getrocknet. Die Ausbeute betrug 410 g Lincomycin-tetrabenzoat-hydrochlorid. Eine weitere Umkristallisierung unter Verwendung von 12,3 Litern Benzol, 50 g Entfärberkohle und 16 Litern Skellysolve B ergab 398 g Lincomycin-tetrabenzoat-hydrochlorid, das folgende Elementaranalyse hatte:

Analyse:

Berechnet für C₄₆H₅₀N₂O₁₀SJJ[Cl:
C = 64,28; H = 5,98; N = 3,26; S = 3,73; Cl = 4,12

gefunden 1

C = 64,04; H = 6,11; N = 3,25; S = 4,14; Cl = 4,08 -

4,25.

Die Behandlung des Hydrochlorids mit einem stark basischen Ionenaustauscherharz (das auf die vorstehende Weise hergestellt wird) ergibt die freie Base, die auf die zuvor beschriebene Weise durch Zusammenbringen mit anderen Säuren in "andere Salzformen umgewandelt werden kann.

Durch Verwendung von Propionsäure-, Bernsteinsäure-, Maleinsäure- und Phthalsäureanhydrid anstelle des Esdgsäureanhydrids in Beispiel 1 erhält man Lincomycin-tetra propionat, -hydrogensuccinat, -hydrogenmaleat und -hydro genphthalat _β

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BAD ORKÜNAk

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Durch Verwendung von Acetylchlorid, Propionylbromidy Butyrylehlorid, Valerylcltorid, Caproylchlorid_f Heptanoyldhlorid und Cap allylchlorid anstelle des Essigsäureanhydrids in Beispiel 1 und mindestens einer stöchiometrischen Menge Triäthylamin anstelle des Pyridins erhält man Lincomycintetraaeetat, -propionate -butyr&t, -väleriat, -eaproat, -heptanoat und -eaprylat.

Durch Verwendung von Propionylchlorid^ Isobutyxylchlorid, Valerylchlorid, Isovalerylchlorid_ff Neopentylacetylchlorid, Hexanoylchlorid, Heptanoylchlorid, Phenylacetylchlorid, Toluoylclilorid, Cyclopentänpropionylchlorid, 1-Cyclopentan~1-propiony!chlorid, CyclohexanacelyLchlorid, Acrylylchlorid, Crotonylchlorid, 2-Hexanoylchlorid, 2-Octy- " noylchlorid, Chloracetylbromid, p-Chlorobenzoylchlorid^ Anisoylchlorid, Salicyloylbromid, p-Nitrobenzoylchlorid und Cyanoacetylchlorid anstelle des Benzoylchlorids in Beispiel 2 erhält man Lincomycin-tetrapropionat, -isobutyrat, -valerat, -isovalerat, -neopentylacetat, -hexanoat, -heptanoat, -p"heny lace tat, -toluat, -^yrclopentanpropionat, -T-cyclo-i-propionat, -cyclohexanacetat, -acrylat, -crotonat, -2-hexynoat, -2-octynoat, -chloroacetat, -p-chlorobenzoat, -anisat, -salicylat, -p-nitrobenzoat bzw. -cyanacetat als Hydrochloridsalz.

Lincoraycin-acetat I und -acetat II

Zu 9,26 g (0,022 Mol) Lincomycinbase-heiaihydrat in 100 ecm Pyridin bei 5⁰C wurden langsam 3 ecm (0,032 Mol) Essigsäureanhydrid zugesetzt. Man ließ die Mischung langsam wieder Raumtemperatur annehmen, und nach dem Abstellen über Nacht wurde die Mischung unter verringertem Druck

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zur Trockne eingedampft und der Rückstand in 100 ecm Äthylacetat gelöst. Die Lösung wurde nacheinander mit 100 ecm kalter Natriumbicarbonatlösung und dreimal mit je 50 ecm Wasser gewaschen, getrocknet und zur Trockne eingedampft. Das Produkt (7g) wurde in einer Gegenströmverteileranlage verteilt, in der ein System aus Äthylacetat : Cyclohexan : 95 # Äthanol : Wasser (27:23:30:20) verwendet wurde. Nach 500 Übertragungen wurden kleine Mengen Lincomycintriacetat und Lincomycin entfernt und die Verteilung bis zu insgesamt 1000 Übertragungen fortgesetzt. Es lagen alle 4 Monoacetate vor, jedoch wurden nur zwei als reine Materialien abgetrennt.

Ein Monoacetat, das als Lineoraycin-acetat I bezeichnet wird, hat den K-Wert 0,27 und eine optische Drehung von J £⁵ = +161° (c, 1, in Chloroform).

Analyse

Berechnet für C₂₀H^₆N₂O₇S:

C = 53,55; H =8,09; N = 6,25; S =7,15; gefunden:

C =52,64; H = 7,89; N =6,12; S = 8,63.

Das andere, das als Lineomycinacetat II bezeichnet wurde, hatte den K-Wert 0,43 und eine optische Drehung £<ocj £ = + 167° (c, 1 in CKLoroform).

Analyse

Berechnet für C₂₀H₃₆NgO₇S:
C = 53,55; H = 8,09; N = 6,25; S = 7,15;

gefunden:
C = 53,43; H = 8,25; N = 6,55; S = 7,30.

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.Es wird angenommen, dass Lineomycin-acetat I das 2-0-Acetat toad Lincomycin II das 7-0-Acetat ist. Jedenfalls handelt es sich bei dem einen um das 2-0-Acetat und bei dem anderen um das 7-0-Acetat.

Durch Verwendung von Propion-, Bernsteinsäure-» Malein- und Phthalsäureanhydrid anstelle des EssLgsäureanhydrids in Beispiel 6 erhält man die entsprechenden Lincomycinpropionate, -hydrogensuceinate, -hydrogenmaleate und -hydrogenphthalage. .

Durch Verwendung von Acetylchlorid, Propionylbromid, Butyrylchlorid, Valerylchlorid, Hexanoylchlorid, Heptanoylchlorid und Octanoylchlorid anstelle des Essigsäureanhydrids in Beispiel 6 und durch Verwendung mindestens einer stöchiometrischen Menge !triethylamin anstelle von Pyridin erhält man die entsprechenden Lincomycinacetate, -propionate, -butyrate, -valerate, -hexanoate, -heptanoate und -octanoate.

A. Lincomycintriacetat

Eine Lösung von 5 g Lincomycintetraacetat—hydrochlorid, das nach dem Verfahren des Beispiels 1 hergestellt worden war_f in 50 ecm 1 η Salzsäure und 2 ecm Äthanol wurde 4 Stunden bei Raumtemperatur abgestellt. Die Lösung wurde mit β η Natronlauge auf einen pH-Wert 8 eingestellt unö dreimal mit je 50 ecm Chloroform extrahiert. Der EX-trakt wurde mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet.und zur Troekn® eingedampft, wobei, 3_?4 g si-

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rupartiges Material erhalten wurden. Dieses Material wurde in einer Gegenstromverteileranlage zerlegt, die ein Äthylacetat : Cyclohexan : 95 ^a/^a Äthanol : Wasser-System (27:23:30;20) enthielt, wobei insgesamt 500 Übertragungen vorgenommen wurden. Eine Hauptfraktion, K=1,67, wurde aus den Rohren 300 - 345 durch Verdampfen des Lösungsmittels und Gefriertrocknung abgetrennt; die Ausbeute beträgt 480 mg Lincomycintriacetat.

Analy^sej

Berechnet für C₂₄H₄₀N₂O₉S:

C = 54,12; H = 7,57; N = 5,26; S = 6,02; gefunden:
C = 53,90; H = 7,90; N = 4,99;' S = 5,94.

B. Lincomycin-tribenzoat

Wenn man Lincomycintetraacetat-hydrochlorid in Teil A durch das in Beispiel 2 erhaltene Lincomycintetrabenzoathydrochlorid ersetzt, erhält man Lincomycintribenzoat.

Die entsprechenden Lineomycintetraacylate werden erhalten, indem man das Benzoylchlorid in Beispiel 2 durch Säurehalogenide oder -anhydride der folgenden Säuren ersetzt: Cyclobutancarbonsäure, Cyclopentancarbonsäuren Δ^-Cyclopentencarbonsäure, 2-Methyl-3-cyclopenten-1 carbonsäure, Cyclohexancarbonsäure, 2,6-Dimethyl-3-cyclo hexan-1-carbonsäure, 3,4-Bipropylcyclohexancarbonsäure, Cyclopentanessigsäure, 3-Cyclopenty!propionsäure, 4-Cyclohexylbuttersäure, (2-Methylcyclohexyl)-essigsaure, p~Äthylbenzoesäure, p-Isobutylbenzoesäure, 3-Methyl-4-

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BAD ORSGiNAL

butylbenzoesäure, 3-Phenylpropionsäure, 5-Phenylvaleriansäure, Zimtsäure, 3-Phenylp^bpiolsäure, (1-Naphthyl)-essigsäure, Mono-, Di- und Trichloressigsäure, öC- und ß-Chlorpropionsäure, OC- und <f-Brombuttersäure, öC - und cf-Jodvaleriansäure, Mevalonsaure, 2- und 4-Chlorcyclohexancarbonsäure, Shikimisäure, 2-Nitro-i-methyl-eyclobutancarbonsäure, 1₁2,3»4,5,6-Hexachlorcyclohexancarbonsäure, 3-Brom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 4- und 5-Brom-2-methyIcyclohexancarbonsäure, 5- und 6-Brom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 2,3-Dibrom-2-methylcyclohexan-carbonsäure, 2,5-DibΓom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 4,5-Dibrom-2-methylcyclohexancarbonsäure, 5»6-Dibrom-2-methylcyclohexancarbonsäura, 3-Brom*3~^methylcyclohexancarbonsäure, ö-Brom^-methylcyclohexanearbonsäure, 1,6-Dibrom-3-methylcyclohexancarbonsäure, 2-Brom-4-methylcyclohexancarbonsäure, 1,2-Dibrom-4-methylcyclohexancarbonsäure, 3-Brom-2-2-3-trimethylcyclopentancarbonsäure, 1-Brom-3,5-dimethyl-cyclohexancarbonsäure, Homogentisinsäure, o-, m- und p-Chlorbenzoesäure, Anissäure, Salicylsäure, p-Hydroxybenzoesäure, ß-Resorcylsäure, Gallussäure, Veratrinsäure, Triraethoxybenzoesäure, Trimethoxyzimtsäure, 4,4-Dichlorbenzylsäure, o-, m- und p-Nitrobenzoesäure, Cyanessigsäure, 3»4- und 3t5-Dinitrobenzoesäure, 2,4,6-Trinitrobenzoesäure, Thiocyanessigsäure, Cyanpropionsäure, Milchsäure, Äthoxyameisensäure (Äthyl-hydrogencarbonat) und dgl.

Die entsprechenden Lincomycintriacylate werden erhalten, indem man anstelle des Lincomycintetraacetats in Beispiel 9 die in Beispiel 10 erhaltenen Lincomycintetraacylate verwendet.

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Die entsprechenden Lincomycinacylate werden erhalten, indem man anstelle des Essigsäureanhydrids und Pyridine in Beispiel 6 eine stöchiometrische Menge Triäthylamin und Säurehalogenide oder -anhydride der in Beispiel 10 angegebenen Säuren verwendet.

Lincomycindibenzoat-hydrochlorid

In einen trockenen 1 Liter-Kolben wurden 60 ecm trockenes Tetrahydrofuran, 4,7 g (0,0385 Mol) Benzoesäure und 6,2 g (0,385 Hol) 1,1^l-Carbonyldiimidazol gegeben. Als die Kohlendioxydentwicklung aufhörte (nach etwa einer Stunde), wurden 2,0 g (0,0049 Mol) Lincomycin und 0,6 ecm einer Lööung von 25 i° Natriummethoxyd in Methanol zugesetzt. Nach 18-stündigem Stehen bei 25°C unter einer Stickstoffatmosphäre wurde das Lösungsmittel unter Vakuum verdampft. Das zurückbleibende Öl (5>7 g) wurde in etwa 20 ecm Methylenchlorid gelöst und dann zu 600 g Florisil (ein synthetisches Silikat des in der U.S.-Patentschrift 2.393.625 beschriebenen und von der Ploridin Company vertriebenen Typ) in Skellysolve B (isomere Hexane) zugegebn]e. Die Ko- ' lonne wurde durch stufenweises Mischen und Auswaschen mit den folgenden Lösungsmittelkombinationen entwickelt (600 ecm Fraktionen wurden aufgefangen):

Behälter A Behälter B

Skellysolve B : ÄtOAc Skellysolve B : ÄtOAc ι MeOH Fraktionen 1-20 90:10 72 : 8 : 20

Nach dem Verdampfen des Lösungsmittels wurden alle Fraktionen durch Dünnschichtchromatographie (auf Silikagel

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in einem Methyläthylketon, Aceton und Wasser enthaltenden System 75 : 25 : 10) analysiert. Die Fraktionen 6 Ms einschließlich 9, die 1,1 g" einer von Ausgangsmaterialien freien Produktmischung enthielten, wurden vereinigt, in 10 ecm Methylchlorid gelöst und auf eine Kolonne von 100 g synthetisches Silikat (Florisil) in Skellysolve B gegossen. Die Kolonne wurde durch stufenweises Mischen und Auswaschen mit den folgenden Lösungsmittelkombinationen entwickelt (es wurden Fraktionenwn 100 ecm aufgefangen):

Behälter A ' Behälter B

Skellysolve B: ÄtOAc Skellysolve B; ÄtOAc: MeOH Fraktionen 1-20 90:10 87 : 8 : 5 , 21-27 87 : 8 : 5

Die Fraktionen 18 und 19 ergaben.280 g Lincomyeindibenzoat, das in das Hydrochlorid umgewandelt und aus Isopropynol-äthylacetat umkristallisiert wurde; Schmelzpunkt 231-233°C; /c*/^^{5 in} ÄtOH = +155° (c = 0,870).

Berechnet für C₃₂H₄₂N₂OgS.HCl;

C = 59,02; H = 6,66; N = 4,30; Cl = 5,45; S = 4,92_{

gefunden:

C = 58,90; H = 6,79; N = 4_r49; Cl = 5,42; S = 5,11.

Mit S. aureus infizierte Mäuse wurden durch subkutane Verabreichung mit einerCD₅₀ von 122 (61 - 183) mg/kg Lincomyeindibenzoathydrochlorid geschützt.

/ 1 © 9 3

BAD

Claims (1)

1. Patentansprüche

   1. In Form der freien Basen oder Säureanlagerungssalze vorliegende Lineomycinester der allgemeinen Formel

   I ³

   RO -CH

   H» — HH — CH

   H OR

   in der R einen Kohlenwasserstoffcarbonsäureacylrest mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Nitro-, Hydroxy-, Amino-, Cyan-, Thiocyan- oder niedrig-Alkoxykohlenwasserstoffcarbonsäureacylrest mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen oder ein Wasserstoffatom bedeutet, wobei mindestens ein R einer dieser Acylreste ist, und worin R¹ einen trans-4-Propyl-L-hygroylrest darstellt.

   2. Lincomycintetraester gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R einen Kohlenwasserstoffcarbonsäureacylrest mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen oder einen Halogen-, Nitro-, Hydroxy-, Amino-, Cyan-, Thiocyanodernniederen Alkoxykohlenwasserstoffcarbonsäureacylrest mit bis zu 12 Kohlenstoffatomen bedeutet und R¹ die vorgenannte Bedeutung besitzt.

   3. Lincomycintetraester gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß R ein Acylrest einer Kohlenwasserstoffcarbonsäure mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen ist.

   Unterlagen (Art. 7 % 1 Abs, 2 Nr. 1 Satz a des Änderui*s063.:. 4.

   9822/1923

   4* Lincomycintetraacetat-hydrochlorid.

   5. Lincomycintetrabenzoat-hydrochlorid.

   6. Lineomycinmonoester gemäß Anspruch 1 der allgemeinen Formel _mi

   RO — CH

   R· NH-CH

   HO

   H OR

   in der ein R ein Y/asserstoffatom und das andere R ein Acylrest mit der in Anspruch 1 genannten Bedeutung ist, und R* vorgenannte Bedeutung besitzt.

   7. Lincomycinmonoester gemäß Anspruch 6 der allgemeinen Formel

   in der R ein Acylrest mit der in Anspruch 1 genannten Bedeutung ist und R¹ die vorgenannte Bedeutung besitzt.

   ö. Lincoraycinmonoester gemäß Anspruch 6 der allgemeinen Formel

   009822/1923

   BAD

   R¹

   CH₃
   RO — CH

   NH CH

   HO

   ^rH

   „\ f SCH,

   H OH

   In der R und R¹ die in Anspruch 7 genannte Bedeutung besitzen.

   9. Lincoinycinmonoester gemäß Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß R ein Acetylrest ist.

   10. Lincomycinmonoester gemäß Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß R ein Aceijirest ist.

   11. Lincomycinmonoester gemäß Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß R ein Benzoylrest ist.

   12. Lincomycinmonoester gemäß Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß R ein Benzoylrest ist.

   13. Lincomycintriester gemäß Anspruch 1,der allgemeinen Formel

   I ³
   RO-CH

   R¹ NH CH

   R°/H OH

   KOR H/
   H\| |/£

   SCH-

   DR

   009822/1923

   ,in der ein R ein Wasserstoffatom und die anderen drei R Kohlenwasserstoffcarbonsäureacylreste mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Nitro-, Hydroxy-, Amino-, Cyan-, Thiocyan-jOder niedrig-Alkoxykohlenwasserstoffcarbonsäureaeylreste mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen bedeuten und R¹ die vorgenannte Bedeutung besitzt.

   14. Lineomyeintriester gemäß Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß R ein Acylrest einer wasserstoffcarbonsäure ist.

   - bis C. p-Kohlen-

   15. Lineomycintriaeetat mit einem K-Wert von 1,67.

   16. Lincomycindiester gemäß Anspruch 1 der allgemeinen Formel „„

   ! ³
   RO—CH .

   R« NH—CH

   ι
   RO

   H OR

   in der zwei R Wasserstoffatome und die anderen zwei R Kohlenwasserstoffcarbonsäureacylreste mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Nitro-, Hydroxy-, Amino-, Cyan-g Thiocyan- oder niedere Alkoxykohlenwasserstoffcarbonsäureacylrsgte mit 2 bis 12 Kohlenstoff atomen bedeuten und R* Sie vorgenannte Bedeutung besitzt.

   17. Lineomycinditoenzoat-hydrochlorid,

   00S822/1923

   ORIGINAL

   18. Verfahren zur Herstellung der Lineomyeinester gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man Lincomycin mit niedrig-Alkoxycarbonylhalogeniden, Säureanhydriden oder Säurehalogeniden von Kohlenwasserstoffcarbonsäuren mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen oder Halogen-, Nitro-, Hydroxy-, Amino-, Cyan-, Thiocyan-oder niedrig-Alkoxykohlenwasserstoffcarbonsäuren mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen umsetzt, und die erhaltenen Ester gegebenenfalls einer partiellen SäurehydroIyse unterwirft.

   19. Verfahren nach Anspruch 18 zur Herstellung von Lincomycintetraacetat, dadurch gekennzeichnet, daß man Lincomycin mit mindestens 4 Mol Essigsäureanhydrid als Acylierungsmittel verwendet.

   20. Verfahren nach Anspruch 18 zur Herstellung von Lincomycintetrabenzoat, dadurch gekennzeichnet, daß man Lincomycin mit mindestens 4 Mol Benzoylchlorid umsetzt.

   Pur

   The Upjohn Company Kalamazoo, Mich. / V.St,A.

   (Dr. H. J. Wolff) Rechtsanwalt

   0 0 9 8 2 2 / 1 9 2 3 bad orig/nal