DE1620621C3 - Verfahren zur selektiven Chlorierung und Bromierung von Methyl-6,8-dideoxy-1-thio-D-erythro-(und L-threo)alpha-D-galacto-octopyranosid-Derivaten und deren Homologen zu den entsprechenden 7-Chlor- und -Brom-Derivaten - Google Patents

Description

oder

C-OH

HR₁

(E)

bedeutet, in denen R₁ und R₂ Alkylidenreste mit nicht mehr als 20 Kohlenstoffatomen, C₃- bis Cg-Cycloalkylidenreste oder Aralkylidenreste mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen, HR₁ und HR₂ aus den Resten R₁ und R₂ durch Hydrierung der endständigen Doppelbindung hervorgegangene Alkyl-, Cycloalkyl- oder Aralkylreste, R₃ ein Wasserstoffatom oder den Rest HR₂, und Z eine durch Hydrogenolyse entfernbare Hydrocarbyloxycarbonyl-Schutzgruppe bedeuten, dadurch gekennzeichnet, daß man das entsprechende Methyl - 6,8 - dideoxy -1 - thio - d - erythro (oder L-threoJ-a-D-galacto-octopyranosid der allgemeinen Formel II

CH₃

Y-NH-HO

-OH

OH

(Π)

SR

OH

in der die Reste Y und R wie oben definiert sind, in einem inerten Lösungsmittel bei Raumtemperatur oder unter Erwärmen auf höchstens 55°C mit einem aas Triphenylphosphin oder -phosphit und Chlor oder Brom hergestellten Rydon-Reagens in mindestens äquimolarer Menge umsetzt und in an sich bekannter Weise etwa noch vorhandenes Rydon-Reagens zerstört und das gebildete Triphenylphosphinoxid bzw. -phosphat entfernt.

Gegenstand vorliegender Erfindung ist ein Verfahren zur selektiven Chlor- und Bromierung von Methyl-6,8-dideoxy-l-thio-D-erythro (und i.-threo)-«-D-galacto-oclopyranosid-Derivaten und deren Homologen zu entsprechenden 7-Clilor- und Brom-Derivaten der

allgemeinen Formel I

oder

CH,

Y-NH-HO

OH

(D

SR

OH

in der X ein Chlor- oder Bromatom, R eine Alkylgruppe mit nicht mehr als 20 Kohlenstoffatomen, eine C₃- bis C₈-Cycloalkylgruppe oder eine Aralkylgruppe mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen und Y ein Wasserstoffatom oder den Acylrest einer 4substituierten L-2-Pyrrolidincarbonsäure einer der allgemeinen Formeln A bis E

35

C-OH

HR₁

(B)

C-OH

bedeutet, in denen R₁ und R₂ Alkylidenreste mit nicht mehr als 20 Kohlenstoffatomen, C₃- bis C₈-CyCIoalkylidenreste oder Aralkylidenreste mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen, HR₁ und HR₂ aus den Resten R₁ und R₂ durch Hydrierung der endständigen Doppelbindung hervorgegangene Alkyl-, Cycloalkyl- oder Aralkylreste, R₃ ein Wasserstoffatom oder den Rest HR₂ und Z eine durch Hydrogenolyse entfernbare Hydrocarbyloxycarbonyl-Schutzgruppe bedeuten, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man das entsprechende Methyl-6,8-dideoxy- l-thio-n-erythro(oder L-threo)-u-n-galacto-octopyranosid der allgemeinen Formel II

CH₃

Y-NH-HO

OH

(H)

SR

OH

in der die Reste Y und R wie oben definiert sind, in einem inerten Lösungsmittel bei Raumtemperatur oder unter Erwärmen auf höchstens 55° C mit einem aus Triphenylphosphin oder -phosphit und Chlor oder Brom hergestellten Rydon-Reagens in mindestens äquimolarer Menge umsetzt und in an sich bekannter Weise etwa noch vorhandenes Rydon-Reagens zerstört und das gebildete Triphenylphosphinoxid bzw. -phosphat entfernt.

Beispiele für geeignete Alkylreste mit nicht mehr als 20 Kohlenstoffatomen (R, HR₁ und HR₂) sind Methyl, Äthyl, Propyl, Butyl, Pentyl, Hexyl, Heptyl usw. bis Eicosyl einschließlich der isomeren Formen der Reste. Beispiele für geeignete Cycloalkylreste sind Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopcntyl bis Cyclooctyl, 2-Methylcyclopentyl, 2,3-Dimethylcyclobutyl, 4-Methylcyclobutyl und 3-Cyclopentylpropyl. Beispiele für geeignete Aralkylreste sind Benzyl, Phenäthyl, a-Phenylpropyl und a-Naphthylmethyl. Zu den geeigneten Alkyliden-, Cycloalkyliden- und Aralkylidenresten (R₁ und R₂) gehören Methylen, Äthyliden, Propyliden, Butyliden und Pentyliden bis Eicosyliden einschließlich der isomeren Formen dieser Reste, Cyclopropyliden, Cyclobutyliden, Cyclopentyliden bis Cyclooctyliden, 2-Cyclopropyläthyliden, 3-Cyclopentylpropyliden, Benzyliden, 2-Phenyläthyliden, 3-Phenylpropyliden und u-Naphthylmethylen.

Der Reaktionsablauf, nach welchem das Rydon-

■ Reagens den Ersatz der 7ständigcn Hydroxygruppe durch Chlor oder Brom bewirkt, ist noch nicht in allen

Einzelheiten geklärt. Der Reaktionsablauf führt zu einer Änderung der Konfiguration, d. h., daß eine 7-Hydroxyverbindung mit D-Erythro-Konfiguration eine 7-Chlor- bzw. Bromverbindung mit L-Threo-Konriguration ergibt.

Das Rydon-Reagens besitzt die Formel

IO

(III)

in der X Chlor oder Brom bedeutet (vgl. hierzu: R y d ο η et al, J. Chem. Soc. 1954, S. 2281; ibid. 1956, S. 3043).

Das Rydon-Reagens kann in situ durch Zugabe von Halogen zu einer Lösung von Triphenylphosphin oder Triphenylphosphit in einem inerten Lösungsmittel wie Acetonitril oder Dimethylformamid oder getrennt hergestellt werden. In beiden Fällen wird die Umsetzung der Ausgangsverbindungen der Formein HA bis E oder V mit dem Rydon-Reagens in einem inerten Lösungsmittel, z. B. Acetonitril oder Dimethylformamid, vorgenommen, bis die gewünschte Substitution der 7-Hydroxygruppe durch Chlor oder Brom stattgefunden hat. Die Umsetzung läuft an sich bei Umgebungstemperatur ab; zur Erhöhung der Reaktionsgeschwindigkeit kann Erwärmen bis auf 55°C förderlich sein.

Vorzugsweise nimmt man die Umsetzung bei einer Temperatur zwischen etwa 20 und 55° C vor. Das gewünschte Endprodukt wird aus der Reaktionsmischung in an sich bekannter Weise, z. B. durch Filtration. Lösungsmittelextraktion usw. abgetrennt. Vorzugsweise wird die Reaktionsmischung zunächst mit Methanol behandelt, um überschüssiges Rydon-Reagens zu zerstören, danach filtriert, um festes Triphenylphosphinoxyd, das sich während der Reaktion gebildet haben kann, zu entfernen und dann erst zur Gewinnung des Endproduktes aufgearbeitet. Das Methanol kann vor oder nach der Filtration der Reaktionsmischung zugesetzt werden. Die Aufarbeitung der so behandelten und filtrierten Reaktionsmischung wird vorzugsweise so vorgenommen, daß man die vorliegende Lösung zur Trockne eindampft und dann durch Lösungsmittelextraktion und/oder Chromatographie reinigt.

Die als Ausgangsmaterial verwendeten Verbindungen der allgemeinen Formeln MA, IiB, HC, HD und HE können durch Acylierung einer Verbindung der allgemeinen Formel V

CH

(V)

60

65

OH

(entsprechend der Formel Il mit Y = H) hergestellt werden (vgl. Präparat 2). Die Acylierung kann in der für die Acylierung von Aminozuckern an sich bekannten Weise durchgeführt werden. Die Säure der allgemeinen Formel A kann in an sich bekannter Weise durch Umsetzung einer 4-Oxoverbindung der allgemeinen Formel C, in welcher Z eine schützende Hydrocarbyloxycarbonylgruppe, die durch Hydrierung entfernbar ist, z. B. die Benzyloxycarbonylgruppe, bedeutet, mit einem Wittig-Reagens, z. B. Alkylidentriphenylphosphoran, hergestellt werden (vgl. W i 11 i g et al, Ber. 87, 1348 [1954]; T r i ρ ρ e t, Quarterly Reviews, XVII, Nr. 4, S. 406 [1963]).

Die Umsetzung wird im allgemeinen in einem organischen Lösungsmittel, z. B. Benzol, Toluol, Äther, Dimethylsulfoxyd, Tetrahydrofuran u. ä. bei einer Temperatur zwischen 10° C und der Siedetemperatur der Reaktionsmischung unter Rückfluß durchgeführt. Das Reaktionsprodukt, ein 4-Alkyliden-, 4-Cycloalkyliden- oder in 1-Stellung geschütztes 4-Aralkyliden-L-prolin, entsprechend der allgemeinen Formel D wird aus der Reaktionsmischung in an sich bekannter Weise, im allgemeinen durch Extraktion aus einer wäßrigen Lösung der Reaktionsmischung, abgetrennt.

Durch Hydrieren einer Säure der allgemeinen Formel D in Anwesenheit eines Katalysators wie Platin, das zur Sättigung einer Doppelbindung geeignet ist, aber keine hydrierende Spaltung bewirkt, erhält man dann eine Verbindung der allgemeinen Formel E.

Ebenso können die Verbindungen der allgemeinen Formel HC durch Behandlung mit einem Wittig-Reagens in die Verbindungen der allgemeinen Formel HD umgewandelt werden; diese Verbindungen können in der vorstehend beschriebenen Weise zu den Verbindungen der allgemeinen Formel IIE hydriert werden. Die Hydrierung sowohl der Säure der allgemeinen Formel D als auch des Acylierungsproduktes der allgemeinen Formel HD führt zu einer Mischung von eis- und trans-Epimeren, die gegebenenfalls durch Gegenstromverteilung oder Chromatographie getrennt werden können. Die Säuren der allgemeinen Formel B, in welcher R₃ Wasserstoff ist, werden erhalten, wenn eine Säure der allgemeinen Formeln D oder E über einem Palladiumkatalysator, z. B. Palladium-auf-Kohle, hydriert wird. In entsprechender Weise werden Verbindungen der allgemeinen Formeln HD und HE in Verbindungen der allgemeinen Formel HB umgewandelt, in welchen R₃ Wasserstoff bedeutet. Säuren der allgemeinen Formel B, in welchen R₃ Wasserstoff ist, sowie Verbindungen der Formel HB, in welchen R₃ Wasserstoff ist, können in an sich bekannter Weise mit einer Oxoverbindung (Aldehyd oder Keton) unter Hydrierung des entstehenden Adduktes mit einem Katalysator, wie Platin oder Palladium, in Verbindungen der Formel B bzw. HB umgewandelt werden, in welchen R₃ HR₂ bedeutet (vgl. Präparat 4 und 5). Die Säuren der allgemeinen Formeln A und B erhält man, wenn man eine Säure der allgemeinen Formeln D oder E mit Bromwasserstoff in Essigsäure behandelt, um die Z-Gruppe zu entfernen. Die Verbindungen der allgemeinen Formeln HD und IIE lassen sich in der angegebenen Weise in Verbindungen der allgemeinen Formel IIB umwandeln.

Einige der beim erfindungsgemäßen Verfahren als Ausgangsmaterial verwendeten Verbindungen der allgemeinen Formel II können auf biosynthetischem

Wege erhalten werden. So erhält man Lincomycin, d. h. Methyl-6,8-dideoxy-6-(trans-l'-methyl-4'-propy 1 - L - 2 - pyrrolidincarboxamido) -1 - thio - D - ery thro- «-D-galacto-octopyranosid, als Produkt eines lincomycinbildenden Actinomycets nach dem Verfahren der USA.-Patentschrift 3 086 912.

Lincomycin entspricht der allgemeinen Formel VI

CH₁

(VI)

OH

in welcher R und R₃ Methyl bedeuten und R₁H Propyl ist. Lincomycin B, d. h. Methyl-6,8-dideoxy-6-(trans-1 '-methyW-äthyl-L^-pyrrolidincarboxamido) -1 - thio - D - erythro - a - D - galacto - octopyranosid (allgemeine Formel VI, wobei R und R₃ Methyl und —R₁H Äthyl bedeuten) ist ebenfalls ein Produkt desselben Mikroorganismus unter den Kulturbedingungen der USA.-Patentschrift 3 086 912. Lincomycin C, d. h. Äthyl-6,8-dideoxy-6-(trans-l'-methyl-4'-propyl-L - 2 - pyrrolidincarboxamido) - 1 - thio - d - erythro- a - D - galacto - octopyranosid (allgemeine Formel VI, wobei R Äthyl, —R₁H Propyl und R₃ Methyl bedeuten) wird erhalten, wenn das Verfahren gemäß USA.-Patentschrift 3 086 912 in Gegenwart von Äthionin durchgeführt wird. Zur Gewinnung von Lincomycin D (S-Äthyl-S-demethyl-lincomycin), d. h. Methyl-6,8-dideoxy-6-(trans-4-propyl-L-2-pyrrolidincarboxamido)- 1 - thio - D - erythro - a- D - galacto - octopyranosid (allgemeine Formel VI, wobei R Methyl, —R₁H Propyl und R₃ Wasserstoff bedeuten), führt man die Fermentierung gemäß USA.-Patentschrift 3 086 912 in Gegenwart von a-MTL durch; «-MTL ist Methyl-6-aminoo^-dideoxy-D-erythro-l-thio-a-D-galacto-octopyranosid, eine Verbindung, die durch Hydrazinolyse von Lincomycin gemäß USA.-Patent 3 179 595 erhalten wird. N-Demethyllincomycin B, d. i. Methyl-6,8-didedeoxy-6-(trans-4'-äthyl-L-2-pyrrolidincarboxamido)-1-thio-D-erythro-a-D-galacto-octopyranosid (allgemeine Formel VI, in welcher R Methyl, —R₁H Äthyl und R₃ Wasserstoff bedeuten) wird ebenfalls durch Fermentierung gemäß USA.-Patentschrift 3 086 912 ■ in Gegenwart von a-MTL gewonnen. Lincomycin K, d. h. Äthyl-6,8-dideoxy-6-(trans-4'-propyl-L-2-pyrrolidincarboxamido) -1 - thio - d - erythro -«- D - galactooctopyranosid (allgemeine Formel VI, wobei R Äthyl, —R₁H Propyl und R₃ Wasserstoff bedeuten) gewinnt man durch Fermentierung gemäß USA.-Patentschrift 3 086 912 in Gegenwart von a-ÄTL, d.h. Äthyl-6-amino-6,8-dideo.\\ - n-erythro-a-thio-n-galactooctopyranosid, eine Verbindung, die man durch Hydrazinolyse von Lincomycin C (S-Äthyl-S,N-didemethyllincomycin B) erhält. Äthyl - 6,8 - dideoxy-6-(trans-4'-äthyl-i.-2-pyrrolidincarboxamido)-l-thio-D - erythro - a - D - galacto - octopyranosid (allgemeine Formel VI, in welcher R Äthyl, -R₁H Äthyl und R₃ Wasserstoff bedeuten) wird ebenfalls gewonnen, wenn man bei der Fermentierung gemäß USA.-Patentschrift 3 086 912 a-ÄTL mitverwendet. Die vorstehend beschriebenen N-Desmethylprodukte, die gewonnen werden, wenn bei der Fermentierung gemäß USA.-Patentschrift 3 086 912 a-MTL oder a-ÄTL mitverwendet werden, sind Beispiele Tür Ausgangsverbindungen der allgemeinen Formel IIB, in welchen R₃ Wasserstoff bedeutet und in welchen in der weiter oben angegebenen Weise die N-Wasserstoffatome ersetzt werden können, wenn R₃ = HR₂ sein soll, d. h. wenn z. B. Methyl-6,8-dideoxy-6-(trans-l'-äthyl-4'-propyl-L-2-pyrrolidincarboxamido)- oder Äthyl - 6,8 - dideoxy - 6 - (trans -Γ - methyl - 4' - L - 2 - pyrrolidincarboxamido)- oder Äthyl-6,8-dideoxy-6-(trans-l'-äthyl-4'-äthyl-L-2-pyrrolidincarboxamido)- oder Methyl-6,8-dideoxy-6-(trans-1 '-äthyM'-äthyl-L^-pyrrolidincarboxamido) -1-thio-D- erythro - α - ο - galacto - octopyranosid hergestellt werden sollen. Lincomycin sowie die übrigen Ausgangsverbindungen der allgemeinen Formel II, die eine D-Erythro-Konfiguration aufweisen, können in die L-Threo-Konfiguration umgewandelt werden, indem man nach Schützen der 3,4ständigen Hydroxylgruppen, z. B. durch Umsetzung mit Aceton unter Bildung des 3,4-Isopropylidenderivates die 7-Hydroxygruppe zur 7-Oxo-Gruppe oxydiert und diese dann z. B. mit Natriumborhydrid wieder zur 7-Hydroxy-Gruppe reduziert.

Durch Behandlung mit Aceton in Gegenwart von p-Toluolsulfonsäure wird beispielsweise Lincomycin in 3,4-O-Isopropylidenlincomycin umgewandelt, welches bei der Oxydation mit Chromoxyd in 7-Dihydro-3,4 - isopropylidenlincomycin, d. i. Methyl - 6,8 - dideoxy-3,4-O-isopropyliden-6-(trans-l'-methyl-4'-pro- pyl - L - 2 - pyrrolidincarboxamido) -1-thio-D - glyceroa-D-galacto-octanopyranos-7-ulosid übergeht; diese letztgenannte Verbindung wandelt sich bei Behandlung mit Natriumborhydrid in 7-Epilincomycin, d. i.

Methyl - 6,8 - dideoxy - 6 - (trans - Γ - methyl - 4' - propyl-L-2-pyrrolidincarboxamido)-1 -thio-L-threo-α- n-galacto-octopyranosid, um.

Die beim erfindungsgemäßen Verfahren als Ausgangsstoffe einsetzbaren biosynthetisch hergestellten Lincomycine sowie die daraus herstellbaren Aminozucker sind entweder Methyl- oderÄthylthioglycoside; sie können gewünschtenfalls —- ebenso wie die Ausgangsprodukte der allgemeinen Formeln IIA, HB, 11C, 11E und V in höhere oder niedere Glycoside übergeführt werden, indem man sie mit einem Mercaptan der Formel R₆SH, in welcher R₆ eine Alkylgruppe mit nicht mehr als 20 Kohlenstoffatomen bedeutet, die jedoch von R verschieden ist, umsetzt und die gebildedeten Dithioacetale sodann durch Behandlung mit Säure und/oder durch Erhitzen wieder cyclisiert, wobei Verbindungen der allgemeinen Formeln 11A, IIB, IIC, II E oder V erhalten werden, bei denen jedoch der Substituent R durch R₆ ersetzt ist. Die dabei entstehenden Produkte können zur Desacylierung der Hydrazinolyse unterworfen werden, wobei Verbindungen der allgemeinen Formel V, in der jedoch R durch R₆ ersetzt ist, erhalten werden, die ihrerseits in zuvor genannter Weise mit Säuren der allgemeinen Formeln A, B, C, D oder E am Stickstoffatom acyliert werden können. Beispielsweise läßt sich so a-MTL durch Behandlung mit Äthylmercaptan und anschließende Recyclisierung in a-ÄTL umwandeln.
Eine weitere Möglichkeit für die Herstellung von

409 535/443

Verbindungen der allgemeinen Formeln II und V, in denen der Alkylsubstituent R gegen einen anderen Alkylsubstituenten R₆ ausgetauscht ist, ist die Bromierung des Ausgangsmaterials mit nachfolgender Umsetzung mit einem Mercaptan R₆SH:

Die jeweilige Ausgangsverbindung bildet in Wasser ein lösliches Salz, z. B. mit Chlorwasserstoff; zu der wäßrigen Lösung dieses Salzes wird Brom unter Kühlung, z. B. auf etwa -10 bis -20⁰C, zugefügt. Es reicht aus, die wäßrige Lösung auf etwa 0° C zu kühlen, wenn das Brom tropfenweise zugegeben wird. Die stöchiometrische Menge Brom auf 1 Mol Ausgangsverbindung beträgt 1 Mol; diese Menge kann jedoch vergrößert oder verringert werden. Im allgemeinen verwendet man einen geringen Überschuß, z. B. etwa 5 bis 20%, an Brom. Das Brom ersetzt zunächst die RS-Gruppe; das intermediär entstehende Produkt hydrolysiert zu einem Zucker, in welchem die Pyranoseform sich im Gleichgewicht mit der Aldoseform befindet. In Gegenwart von Säure, z. B. Chlorwasserstoffsäure oder einer anderen starken nicht oxydierend wirkenden Säure wie p-Toluolsulfonsäure, oder in Gegenwart von Anionenaustauscherharzen vom Sulfonsäuretyp, reagiert das Mercaptan R₆SH mit dem Zucker unter Bildung des gewünschten Thioglycosides. Gleichzeitig kann eine gewisse Menge Diacetal gebildet werden, welches nach der Abtrennung in der bereits beschriebenen Weise zu dem gewünschten Thioglycosid cyclisiert werden kann.

Die Verbindungen der Formeln I A, IB, II A, IIB und V existieren sowohl in Form der freien Basen als auch in Form der Säureanlagerungssalze je nach dem pH-Wert ihrer Umgebung. Die freien Basen können durch Neutralisation mit entsprechenden Säuren auf einen pH-Wert von weniger als 7,0, vorzugsweise auf etwa 2 bis 6, in beständigen Säureanlagerungssalzen umgewandelt werden. Geeignete Säuren für die Neutralisation sind beispielsweise: Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Thiocyansäure, Kieselfluorwasserstoffsäure, Hexafiuorarsensäure, Hexafluorphosphorsäure, Essigsäure, Bernsteinsäure, Zitronensäure, Milchsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Pamoasäure, Cholsäure, Palmitinsäure, Schleimsäure, Camphersäure, Glutarsäure Glycolsäure, Phthalsäure, Weinsäure, Laurinsäure, Stearinsäure, Salicylsäure, 3-Phenylsalicylsäure, 5-Phenylsalicylsäure, 3-Methylglutarsäüre, ortho-Sulfobenzoesäure, Cyclohexansulfaminsäure, Cyclopentanpropionsäure, 1,2-Cyclohexandicarbonsäure, 4 - Cyclohexancarbonsäure, Octadecenylbernsteinsäure, Methansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Helianthsäure, Reineckes Säuren, Dimethyldithiocarbaminsäure, Cyclohexylsulfaminsäure, Hexadecylsulfaminsäure, Octadecylsulfaminsäure, Sorbinsäure, Monochloressigsäure, Undecylensäure, 4'-Hydroxyazobenzol-4-sulfonsäure, Octadecylschwefelsäure, Picrinsäure, Benzoesäure oder Zimtsäure.

Die Säureanlagerungssalze können in derselben Weise verwendet werden wie die freien Basen; in erster Linie dienen sie zur Reinigung und Aufarbeitung der letzteren. So kann z. B. die freie Base in ein unlösliches Salz, z. B. das Picrat, umgewandelt werden, welches dann leicht durch Lösungsmittelextraktion, Waschen, Chromatographie, fraktionierte Flüssig-Flüssig-Extraktion und Umkristallisieren gereinigt werden kann; aus einem Säureanlagerungssalz kann die freie Base durch Behandlung mit Alkali oder ein anderes Salz durch Metathese erhalten werden. Man kann die freie Base auch in ein wasserlösliches Salz, z. B. das Hydrochlorid oder Sulfat, umwandeln und die wäßrige Lösung des Salzes mit verschiedenen mit Wasser nicht mischbaren Lösungsmitteln extrahieren. Anschließend wird die freie Base durch Behandlung der Lösung mit Alkali zurückgebildet.

Die nahen Analoga des 7-Halogen-7-deoxylincomycins, d. h. insbesondere die Verbindungen der allgemeinen Formell, in denen —RiH ein eis- oder trans-Alkyl mit nicht mehr als 8 Kohlenstoffatomen, R₃ Wasserstoff, Methyl oder Äthyl und R Alkyl mit nicht mehr als 8 Kohlenstoffatomen bedeuten, weisen antibakterielle Eigenschaften auf, die denjenigen von Lincomycin vergleichbar oder überlegen sind; sie können für dieselben Zwecke wie Lincomycin selbst eingesetzt werden.

Experimenteller Teil

Im nachfolgenden wird für -1-thio-n-erythroa-D-galacto-octopyranosid zur Erhöhung der Übersichtlichkeit die Abkürzung TEGP und für -pyrrolidincarboxamidodie Abkürzung PCA verwendet.

Alle Mengenangaben stellen Gewichtsteile und Gewichtsprozent dar, nur die Lösungsmittelmengen sind in Volumteilen angegeben, soweit nicht ausdrücklich anderweitig angegeben.

I. Herstellung der Ausgangsverbindungen

Präparat 1

Methyl-ö-amino-o^-dideoxy-l-thio-D-erythro-(i-D-galacto-octopyranosid (a-MTL)

Diese Verbindung, entsprechend der allgemeinen Formel V mit R=CH₃ kann wie folgt erhalten werden:

Eine Lösung von 40 g Lincomycin in Form der

45. freien Base (USA.-Patentschrift 3 086 912) in 20 ml Hydrazin-Hydrat (98 bis 100%) wird 21 Stunden unter Rückfluß erhitzt; anschließend wird überschüssiges Hydrazin-Hydrat im Vakuum unter Stickstoff bei Dampfbadtemperatur entfernt. Der verbleibende Rückstand, eine pasteuse Kristallmasse, wird abgekühlt, mit Acetonitril versetzt und so lange gerührt, bis die Kristalle in der Mischung suspendiert sind. Die Kristalle werden abfiltriert und mit Acetonitril und Äther gewaschen. Die Ausbeute an weißem kristallinem «-MTL in Form der freien Base beträgt nach dem Trocknen im Vakuum bei Raumtemperatur 21 g (84%). Zum Umkristallisieren wird «-MTL in heißem Dimethylformamid gelöst und mit der gleichen Menge Äthylenglycol-dimethyläther versetzt.

«-MTL in Form der freien Base weist einen Schmelzpunkt von 225 bis 228° C, eine optische Drehung von [«]? + 276° (c = 0,768 Wasser) und einen pKa'-Wert von 7,45 auf.

Analyse für C₉H₁₉NO₅S:

Berechnet ... C 42,7, 1! 7.v> N 5,53, S 12,66;
gefunden .... C 42,6, 11 7.4^ιλ Ν 5,75, S 12,38.

Präparat 2

Methyl-6,8-dideoxy-6-( 1 '-carbobenzoxy-^-butyll-2-PCA)-TEGP in Form der freien Base

Diese Verbindung, entsprechend der allgemeinen Formel HE mit R=CH₃, HR₁=C₄H₉ und Z=Carbobenzoxy, kann nach folgendem Reaktionsschema erhalten werden:

+ a-MTL

COOH

COMTL

bobenzoxy-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP in Form der freien Base (gemäß Präparat 2) in 200 ml Methanol wird über 2 g 10%igem Palladium-auf-Kohle-Katalysator unter einem Wasserstoffdruck von 2,8 kg/cm² 17 Stunden geschüttelt. Der Katalysator wird anschließend abfiltriert und die Lösung unter Vakuum eingeengt. Der verbleibende Rückstand wird in einer Mischung aus 20 ml Aceton und 20 ml Wasser, die mit 6 n-Chlorwasserstoffsäure angesäuert ist, gelöst.

Bei Zugabe von 4 Volumteilen Aceton fällt Methyl-6,8-desoxy-6-(4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP als Hydrochlorid aus, welches abfiltriert und getrocknet wird. Die Ausbeute an Kristallen beträgt nach dem Trocknen bei 55° C unter Vakuum 4,7 g; F. 188 bis 194°C.

Zur Analyse wird eine Probe nochmals aus Aceton umkristallisiert; F. 197 bis 199°C; optische Drehung: M ² _O ⁵ + 150° (Wasser, c = 0,89).

Zu einer Lösung aus 6,3 g 4-Butyl-l-carbobenzoxy-L-prolin, (hergestellt aus 4-Butyliden-l-carbobenzoxy-L-prolin durch katalytische Hydrierung gemäß der deutschen Offenlegungsschrift 1620 621, Beispiel 1, Teil F und G) in 175 ml destilliertem und auf 0⁰C gekühltem Acetonitril werden 3,46 ml Triäthylamin und danach 3,34 ml Isobutylchlorformiat gegeben. Die Mischung wurde bei 0⁰C (±3°) 15 Minuten gerührt. Danch wird eine Lösung aus 6,2 g «-MTL (freie Base) in 85 ml Wasser zugesetzt; das Reaktionsgemisch wird 0,5 Stunden bei 0° C und dann 1 Stunde bei 25° C gerührt. Das Reaktionsprodukt wird abfiltriert und getrocknet; Ausbeute 4,57 g(37,7%)Methyl-6,8-deoxy-6-(l'-carbobenzoxy-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP in Form der freien Base. Die Mutterlauge wird im Vakuum eingeengt, wobei weitere 4,25 g (35,2%) Endprodukt gewonnen werden können. Nach dem Umkristallisieren aus Acetonitril liegt Methyl-6,8-deoxy-6-(l'-carbobenzoxy-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP als freie Base in kristalliner Form vor; F. 194 bis 196° C. Eine Analysenprobe zeigt nach nochmaligem Umkristallisieren aus Acetonitril folgende Daten:

Analyse für C₁₈H₃₄N₂O₆S · HCL:

Berechnet ... C 48,80, H 7.96. N 6,32, S 7,24;
gefunden .... C 48,58, H 8,19. N 6,04, S 7,36.
korrigiert auf 5.54% Wasser.

Präparat 4

Methyl-6.8-deoxy-6-( 1 '-methyl-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid

Diese Verbindung, entsprechend der allgemeinen Formel U B mit R = CH₃. HR₁ = C₄H₉ und R₃ =CH₃, kann wie folgt erhalten werden:

45

F. 195,5 bis 200⁰C, [α]!,⁵ + 11Γ (c = 0,98, MeOH).

Analyse für C₂₆H₄₀N₂O₈S:

Berechnet ... C 57,75, H 7,46, N 5,13, S 5,93;
gefunden .... C 57,58, H 7,16, N 5,50, S 6,07.

Präparat 3
Methyl-6,8-deoxy-6-(4'-butyl-L-2- PCA)-TEG P

Diese Verbindung, entsprechend der allgemeinen Formel IlB mit R=CH₃, HR₁=C₄H₉ und R₃=H, kann nach folgendem Reaktionsschema erhalten werden:

COMTL

U.

HCl

( ' COMTL
C₄H₉

CKXI)

60

65

COMTL

HCl
COMTL

Eine Lösung aus 7,8 g Mcthyl-6,8-dcoxy-6-(l'-car-Eine Lösung aus 2.0 g Mcthyl-6.8-deoxy-(4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid (vgl. Präparat 3) und 2,0 ml 37%igem Formalin in 150 ml Methanol wird mit 500 mg 10%igem Palladium-auf-Kohle-Katalysator unter einem Wasserstoffdruck von 2.8 kg/cm³ 3,5 Stunden geschüttelt. Der Katalysator wird danach abfiltriert und das Lösungsmittel im Vakuum abdestilliert. Auf diese Weise läßt sich Mcthyl-o.S-deoxy-6-(r-methyl-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid in kristalliner Form gewinnen. Mit Hilfe der Dünnschicht-Chromatographie über Kieselgel — wobei eine Mischung aus Äthylacetat. Aceton und Wasser (8:4:1) zur Eluierung und KMnO₄-Lösung zur Entwicklung verwendet werden kann — kann gezeigt werden, daß das Produkt im wesentlichen aus zwei Materialien besteht, nämlich den eis- und trans-Epimeren des Methyl-6,8-deoxy-6-(l-mcthyl-4-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorids im Verhältnis von etwa 3 : 2, die wie folgt aufgetrennt werden:

Das Epimerengemisch wird in einer Mischung aus Methanol und Mcthylenchlorid (1 : 1) gelöst und mit 1,5 ml Triäthylamin versetzt. Zu dieser Lösung werden dann 7 g Kieselgel gegeben, worauf· das Lösungsmittel unter Vakuum abgedampft wird, so daß

das Gemisch auf dem Kieselgcl abgelagert zurückbleibt. Letzteres wird auf eine Chromatographierkolonne gegeben, die mit 200 g Kieselgel unter Verwendung einer Lösungsmittclmischung aus Äthylacetat, Aceton und Wasser im Verhältnis 8 : 4: 1 gepackt worden ist. Die Kolonne wird durch Eluiercn mit demselben Lösungsmittel entwickelt, wobei 20-ml-Fraktionen aufgefangen werden. Die Dünnschicht-Chromatographie der einzelnen Fraktionen ergibt. daß die Fraktionen 31 bis 38. insgesamt 310 mg, praktisch reines trans-Epimer darstellten, während die Fraktionen 49 bis 74. insgesamt 32 mg, praktisch reines cis-Epimer darstellen. Die Fraktionen 39 bis 48 bestehen aus einer Mischung der Epimeren, die durch wiederholte Chromatographie getrennt werden kann. Jedes Epimer wird in wenigen Tropfen verdünnter Chlorwasserstoffsäure gelöst und das Hydrochlorid durch Zugabe von Aceton ausgefällt. Auf diese Weise können 50 mg Methyl - 6,8-deoxy-6-(trans-Γ-methyl-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid mit F. 135 bis 137° C und etwa 150 mg Methyl-6,8-deoxy-6-(cis-r-methyl-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid mit Erweichungspunkt bei 105⁰C und F. 175 bis 185° C gewonnen werden.

Das aus demselben Lösungsmittel umkristallisierte trans-Epimer zeigt den F. 139 bis 141⁰C.

Analyse für C₁₉H₃₆N₂O₆S · HCl:

Berechnet ... C 49,93, H 8,16, N 6,13, S 7,02; gefunden .... (korrigiert auf 4,07% H-,0):

C 48,81, H 8,54, N 6,49~ S 6,67.

Bei entsprechender Umkristallisation des cis-Epimercn erhält man ein Produkt mit einem Erweichungspunkt bei 108⁰C; F. etwa 189°C(solvatiert).

Analyse:

Gefunden

(korrigiert auf 4,95% H₁O)
C 50,27, H 9,00, N 6,05" S 6,65.

40

45

Präparat 5

Methyl-6,8-deoxy-6-(l'-äthyl-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid

Dieses 1'-Äthylhomologe der Verbindung gemäß Präparat 4 wurde in analoger Weise erhalten:

Eine Mischung aus 2,0 g Mcthyl-6,8-dcoxy-6-(4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid, 1,5 ml Acetaldehyd und 150 mg 10%igem Palladium-auf-Kohle-Katalysator in 150 ml Methanol wurde 5,5 Stunden unter einem Wasserstoffdruck von 2,5 kg/cm² geschüttelt. Nach dem Entfernen des Katalysators (durch Abfillricrcn) verblieb ein Rückstand, der im wesentlichen aus den eis- und trans-Epimeren des Methyl-6,8-deoxy-6-(l'-äthyl-4'-butyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid bestand.

Nach Auftrennung des Epimcrengemisches, wie in Präparat 4 beschrieben, konnten aus der rohen trans-Epimcr-Fraktion (415mg) 340mg d.s. 15,4%, kristallines Methyl - 6,8 - deoxy - 6 - (trans -Γ - athyl-4'-bulyl-L-2-PCA)-TEGP-Hydrochlorid mit F. 144 bis 151°C gewonnen werden. Durch Umkristallisieren aus verdünntem Aceton konnte der Schmelzpunkt auf 148 bis 151°C erhöht werden.

Die cis-Epimer-Fraktion (645 mg) ergab 300 mg, d.s. 14,1%, kristallines Methyl - 6,8 - deoxy - 6 - (cis-1' - äthyl - 4' - butyl - L - 2 - PCA) - TEG P - Hydrochlorid mit F. 135 bis 139°C. Nach dem Umkristallisieren aus verdünntem Aceton lag der Schmelzpunkt der Kristalle bei 134 bis 138° C.

Bei der Durchführung des Verfahrens in der vorstehend beschriebenen Weise erhält man Epimerengemische, in denen das Verhältnis von trans- zu cis-Epimeren zwischen 3 : 1 und 1 : 5 liegt.

II. Beispiele zur Erläuterung des erlindungsuemäßcn Verfahrens

Beispiel 1

A. 7-Brom-7-deoxylincomycin und dessen
Hydrochlorid und -bromid

Eine Rydon-Reagenslösung wurde hergestellt, indem man unter Rühren in eine trockene Lösung aus 52,6 g (0,2 Mol) Triphenylphosphin in 800 ml Acetonitril bei 30° C unter Stickstoff 10 ml (0.19 Mol) Brom während eines Zeitraumes von 20 Minuten eintropfen ließ. Nachdem man weitere 10 Minuten gerührt hatte, wurden 8,2 g Lincomycin zugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde dann 18 Stunden bei 30⁰C gerührt. Der nach dieser Zeit entstandene weiße Niederschlag wurde abfiltriert und verworfen. Das Filtrat wurde mit 100 ml Methanol versetzt und anschließend im Vakuum eingedampft. Der viskose Rückstand wurde in 100 ml Methanol gelöst, mit 1800 ml Wasser verdünnt und sechsmal mit je 200 ml Äther extrahiert. Die Ätherextrakte wurden verworfen; die wäßrige Phase wurde mit wäßriger KOH auf einen pH-Wert von 11 eingestellt und viermal mit je 200 ml Mcthylenchlorid extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt, getrocknet und eingedampft, wobei 11 g eines gelben Feststoffes als Rückstand verblieben, der über 1 kg Kieselgel Chromatographien wurde, und zwar unter Verwendung von Methanol/Chloroform (1:9) als Lösungsmittelsystem. Nach einem Vorlauf von 1200 ml wurden 22 Fraktionen zu je 56 ml aufgefangen. Die letzten sechs Fraktionen (17 bis 22) wurden gesammelt und zur Trockne eingedampft: Man erhielt so 2.8 g 7-Brom-7-dcoxylincomycin. Dieses wurde in das Hydrobromid umgewandelt, indem man die Substanz in Wasser löste, die Lösung mil HBr auf einen pH-Wert von 1 einstellte, filtrierte und das Filtrat lyophilisiertc.

Analyse des Hydrobromids:
[α]?,⁵ +114° (c. 0,9314. H₂O)

Analyse für C₁₈H₃₄Br₂N₂O₅S:

Berechnet .. C 39,28, H 6,23, N 5,09, S 5,83, Br 29,04; gefunden ... C 39,64. H 6,19, N 5,07, S 6,04, Br 28,59.

Das Hydrichlorid zciul einen Schmelzpunkt von 137 bis 139°C; [«]? + 130" (H₂O). ■· ■'■■'■

Beispiel 2

7-Chlor-7-deoxylincomycin-D-[methyl-7(S)-chlor-

6,7,8-trideoxy-6-(trans-4'-propyl-L-2-pyrrolidin-

carboxamidoH-thio-L-threo-i.i-p-glacto-octopyranosid; 1 '-DemethyM'-trans-clindamycin]

IO

C-NH

HO

(XIX)

SCH,

20

In eine Suspension von 11 g Triphenylphosphin in 200 ecm Acetonitril wurde Chlor bis zu einer Aufnähme von 2,84 g eingeleitet. Das Reaktionsgemisch wurde auf 26° C gekühlt, und 1,72 g N-Demethyllincomycinhydrochlorid (gleichbedeutend mit Lincomycin-n-hydrochlorid) wurden zugegeben. Die Lösung wurde bei Raumtemperatur 18 Stunden gerührt. Nach Zugabe von 10 ecm Methanol wurde das Lösungsmittel im Vakuum destilliert. Der Rückstand wurde mit 100 ecm eines Äthylacetat-Äther-Gemisches im Verhältnis von 1:1 gerührt. Das Gemisch wurde filtriert, und der Rückstand wurde zwischen 15 ecm Äthylacetat und 15 ecm Wasser verteilt. Das Äthylacetat wurde einmal mit 10 ecm Wasser gewaschen, und die vereinigten wäßrigen Extrakte wurden erneut mit Äthylacetat gewaschen. Aus der wäßrigen Lösung erhielt man nach Lyophilisation einen Rückstand von 3,05 g. Dieser Feststoff wurde in Methanol gelöst, 10 g Kieselgel wurden zugegeben, das Lösungsmittel wurde abgedampft, und man erhielt ein frei fließendes Pulver. Dieses wurde auf das obere Ende einer chromatographischen Kolonne von 100 g Kieselsäuregel gegeben, und die Kolonne wurde mit einem Chloroform-Methanol-Gemisch im Verhältnis von 4: 1 eluiert. Die gesammelten Fraktionen (je 20 ml) wurden dünnschichtchromatographisch untersucht und die das Produkt enthaltenden Fraktionen vereinigt. Nach dem Eindampfen derselben erhielt man ein Rohmaterial mit einem Gewicht von 1,27 g. Dieser Feststoff wurde in Aceton gelöst und mit verdünnter Salzsäure angesäuert. Nach Abkühlen schieden sich 0,73 g 7-chlor-7-deoxy-N-demethyllincomycinhydrochlorid mit einem Schmelzpunkt von 212 bis 216° C ab. Nach Umkristallisieren aus einem Aceton-Wasser-Gemisch erhielt man 550 mg Hydrochlorid mit einem Schmelzpunkt von 217 bis 221°C (unter Zersetzung).

60 Analyse für C₁₇H₃₂Cl₂N₂O₅S · HCl:

Berechnet ... C 45.62, H 7,2, N 6,26;
gefunden ....( 1;\89, H 7,66, N 6,55.

65

7 - Chlor - 7 - deoxy - N - dcmethyllincomycinhydrochlorid ist gegenüber gramposiliven Bakterien etwa achtmal aktiver als Lincomycin und gegenüber gram-

negativen Bakterien mindestens achtmal wirksamer. Es ist etwa doppelt so aktiv wie 7-Chlor-7-deoxylincomycin.

Tabelle I

Physikalische Kenndaten für Hydrochloride

ernndungsgemäß hergestellter Verbindungen der allgemeinen Formel 1B mit X=Chlor

Anmerkung zur Nomenklatur:

Clindamycin ist 7(S) - Chlor - 7 - deoxy - lincomycin oder Methyl - 7 - chlor - 6,7,8 - trideoxy - 6 - (1' - methyl-4'-trans-propyl-L-2-pyrrolidincarboxamido-1 -thio-L-threo-a-D-galacto-octopyranosid.

A l'-Demethylderivate des Clindamycins [R₃ = H]

1. l'-DemethyW-trans-clindamycin-hydrochlorid [R = CH₃, HR₁ = trans-C₃H₇, R₃ = H], Kristalle Fp. = 229 bis 231°C; r-Demethyl-4'-cis-clindamycin-hydrochlorid [R = CH₃, HR₁ = CiS-C₃H₇, R₃ = H], Fp. = 229 bis 232°C (Zers.), [«]? + 151° (H₂O); 1' - Demethyl - 4' - cis/trans - clindamycin - hydrochlorid

[R = CH₃, HR = cis/trans-C₃H₇, R₃ = H], Fp. = 228 bis 234° C, [«]^J _D ⁵ + 159° (H₂O); l'-DemethyW-depropyW-cis-trans-n-butylclindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ = cis-trans-n-C₄H₉, R₃ = H],. Fp. = 207 bis 209° C (Zers.), [«]? + 134° (Methanol);

l'-Demethyl-4'-depropyl-4'-trans-n-pentylclindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ = trans-n-CjHu, R₃ = H], Fp. = 211 bis 212° C (Zers.)
l'-DemethyW-depropyW-cis-n-pentylclindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ .= cis-n-C₅H_u, R₃ = H], Fp. = 217 bis 219°C (Zers.); l'-DemethyM'-depropyM'-cis/trans^'-pcntylclindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ = cis/trans-C₅H_n, R₃ = H], Fp. = 222 bis 223°C (Zers.); [«]J⁵ + 139° ' (CH₂O);

1 '-DemethyW-depropyl^'-cis-trans-isopentyl- · clindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ ■= trans-iso-C₅H_n, R₃ = H], Fp. = 125 bis 145°C (Zers.); 1 '-DemethyW-depropyl^'-cis/trans-hexylclindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ = cis/trans-C₆H₁₃, R₃ = H], Fp. = 219bis221°C;

l'-DemethyW-depropyW-cis-trans-n-octylclindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ = cis-trans-n-C₈H₁₇, R₃ = Fp. = 201 bis 203°C (Zers.); l'-DemethyW-depropyW-cis/trans-äthylclindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ = eis irans-CMlj. R, = HJ Fp. = 240 bis 242° C;

B. Clindamycin und weitere Derivate [R₃ = CH₃ oder C₂H₅]

12. Clindamycin-hydrochlorid [7(S)-Chlor-7-dcoxylincomycin-hydrochlorid; vgl. Beispiel 1]

409 535/443

[R = CH₃, HR₁ = trans-C₃H₇. R₃ = CH₃],
Kristalle, [«]? + 130° (c = 0,9858 g/100 ml H_?O)

13. 1 '-Demethyl-1 '-äthyl-clindamycin-hydrochlorid
^(SVChlor^-deoxy-N-äthyl-lincomycinn-hydrochlorid]

[R = CH₃, HR₁ = trans-C₃H₅. R₃ = CH₅].
[«]? + 133° (H₂O);

14. 1 '-Demethyl-1 '-isopropyW-depropyl-4'-cis/transpentyI-clindamycin-hydrochlorid
[R = CH₃, HR₁ = cistrans-C₅H_n.

R₃ = ISO-C₃H₅],
Fp. = 77 bis 8O⁰C.

Die gefundenen Werte bei der Elementaranalyse stimmten bei allen vorgenannten Verbindungen mit den berechneten Werten gut überein.

Beispiel 3

MethyI-7-chlor-6,7,8-trideoxy-6-(trans- und cis-

4'-pentyI-L-2-pyrrolidincarboxamido)-l-thio-L-threo-

(/-n-galacto-octopyranosid

C-NH

C₃H₁₁ Il

O HO

SCH,

OH

Zu einer farblosen Lösung von Triphenylphosphindichlorid, die durch Behandlung von 22 g Triphenylphosphin in 400 ecm Acetonitril mit 5,68 g Chlor hergestellt worden war, wurden 4 g Methyl-6,8-dideoxy-6-(trans- und cis-4'-pentyl-L-2-pyrrolidincarboxamido)-1 -thio- n-erythro-u- n-galacto-octopyranosid-hydrochlorid gegeben (und zwar ein Gemisch von eis- und trans-lsomeren mit einem Schmelzpunkt von 212 bis 214° C und einer optischen Drehung von [a]_o + 141° [c = 0,968; H₂O], hergestellt nach dem Verfahren der deutschen Offenlegungsschrift 1 620 621, Beispiel 3, Teile B—E). Nach Rühren bei 26° C während 18 Stunden wurden 15 ecm Methanol zugegeben, und die Lösung wurde im Vakuum destilliert. Der Rückstand wurde mit 250 ecm eines Äthylacetat-Äther-Gemisches (1:1) geschüttelt und filtriert. Man erhielt 13,7 g Rückstand, der zwischen Wasser und Äthylacetat verteilt wurde. Das Produkt wurde aus der wäßrigen Lösung durch Lyophilisierung gewonnen. Dieses Lyophilat (8,5 g) wurde weiter durch Chromatographie über Kieselgel unter Verwendung eines Chloroform-Methanol-Gemischcs (4:1) als EIutionsmittel gereinigt. Eine Hauptfraktion von 2,09 g wurde in Aceton gelöst, mit Salzsäure angesäuert, liltriert und getrocknet. Die Ausbeute betrug 1,15 g (27,6%) Methyl - 7 - chlor - 6,7,8 - trideoxy - 6 - (trans- und eis - 4' - pentyl - l - 2 - pyrrolidincarboxamido)-l-thio-L-thrco-rz-n-galacto-octopyranosid.

Schmelzpunkt: 222 bis 223°C (Zcrs.); [«]?' + 139° (H₂O).

Analyse für C₁₉H₃₆Cl₂N₂O₅S:

Berechnet ... C 47,99, H 7,63. N 5.89. S 6,74;
befunden ... (korrigiert auf 0.58% Wasser)

C 47,85. H 7.84. N 6.01. S 6.01.
5

Beispiel 4

7-Chlor-7-deoxy-N-demethyl-lincomycin-hydrochlorid

ίο 1 g N-Demethyl-N-carbobenzoxylincomycin wurde zu einer Lösung von Triphenylphosphindichlorid gegeben, das durch Zugabe von 710 mg Chlor zu 2.88 g Triphenylphosphin in 25 ecm Acetonitril hergestellt worden war. Nach 2 Stunden wurden 10 ecm Methanol zugegeben, und das Lösungsmittel wurde verdampft. Der Rückstand wurde über 100 g Kieselgel unter Verwendung eines Chloroform-Methanol-Gemisches (4:1) als Elutionsmittel Chromatographien. Man erhielt eine Fraktion von 717 mg, die ein Gemisch von 7-Chlor-7-deoxy-N-demethyl-N-carbobenzoxylincomycin und Triphenylphosphinoxid war.

Durch Hydrogenolyse (Behandlung des Gemisches,

gelöst in 25 ecm Methanol, in Gegenwart von 250 mg 20%igem Palladium auf Holzkohle und bei einem

Wasserstoffdruck von 3,8 kg/cm² und anschließende chromatographische Reinigung) konnten 95 mg kristallines 7 - Chlor - 7 - deoxy - N - demethyllincomycinhydrochlorid mit einem Schmelzpunkt von 227 bis 229° C erhalten werden.

Die Ausgangsverbindung N-Demethyl-N-carbobenzoxylincomycin wurde analog dem Verfahren des Präparates 2, ausgehend von 4-Propyliden-l-carbobenzoxy-L-prolin an Stelle der 4-Butylidenverbindung (vgl. deutsche Offenlegungsschrift 1 620 621, Beispiel 5, D und E) als Gemisch von eis- und trans-lsomeren erhalten; nach dem Trennungsverfahren des Präparats 4 erhielt man das trans-Isomere N-Demethyl-N-carbobenzoxylincomycin mit einem Schmelzpunkt von 176 bis 178°C, eine optischen Drehung von [a]o⁵ + 109° und der folgenden Analyse:

C₂₅H₃₈N₂O₈S:

Berechnet ... C 57,07, H 7,27, N 5,32;

gefunden .... C 56,84, H 7,28, N 5,37.
45

Wenn man, anstatt die eis- und trans-lsomeren zu trennen, das Isomerengemisch in vorgenannter Weise chloriert, erhält man Methyl-N-(l'-carbobenzoxy-4'-trans- und cis-propyl-L-prolyl)-7-chlor-7-deoxya-thiolincosaminid, das nach mehrmaligem Umkristallisieren aus Äthanol einen Schmelzpunkt von 189 bis 192° C aufweist.

Beispiel 5

Methyl-7-chlor-7-deoxy-«-thiolincosaminid
CH₃ CH₃

Cl

H₂N

SMe

SMe

OH OH

Zu einer Suspension von 197.2 g Triphenylphosphin

η 1,5 1 wasserfreiem Acetonitril wurden 52,5 g Chlor gegeben. Unter Rühren wurden 18,75 g Methyl-■/-thiolincosaminid (USA.-Patent 3 179 565) zugefügt. Nach 2,5 Stunden bei Raumtemperatur wurden 50 ecm Methanol zugesetzt. Das Gemisch wurde zu einem •dicken Sirup konzentriert. Das Konzentrat wurde mit Methylenchlorid verdünnt und dreimal mit Wasser extrahiert. Die wäßrigen Extrakte wurden zweimal ■nit Methylenchlorid gewaschen, mit Natriumhydroxid alkalisch gemacht und mehrere Male mit Methylen- ;hlorid extrahiert. Der organische Extrakt wurde getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde über 1,1 kg Kieselgel unter Verwendung jines Chloroform-Methanol-Gemisches (4:1) zur EIu-•ion chromatographiert. Die Hauptfraktion, die auf Grund ihres Dünnschichtchromatogramms ausgewählt wurde, wog 4,4 g. Nach Umkristallisieren aus dnem Methanol-Wasser-Gemisch erhielt man 2,73 g vIethyl-7-chlor-7-deoxy-a-thiolincosaminid mit einem schmelzpunkt von 178 bis 181⁰C. Analyse für C₉H₁₈ClNO₄S:

Berechnet:

C 39,77, H 6,67, N 5,16, S 11,80, Cl 13,05%; gefunden:

C 39,91, H 7,02, N 5,57, S 11,99, Cl 13,35%.

Beispiel 6

Methyl-7-chlor-6,7,8-trideoxy-6-( 1 '-carbobenzoxycis- und trans-4'-hexyl-L-2-pyrrolidincarboxamido) 1 -thio-L-threo-u- D-galacto-octopyranosid

Diese Verbindung mit einem Schmelzpunkt von bis 187° C wurde nach dem Verfahren des Beispiels 4 aus der entsprechenden Methyl-6,8-dideoxyverbindung hergestellt, die nach dem Verfahren des Beispiels 5 und 6 der deutschen Offenlegungsschrift 620 621 erhalten werden kann.

Claims (1)

1. Patentanspruch:

   Verfahren zur selektiven Chlor- und Bromierung von Methyl-6,8-dideoxy-1 -thio- n-erythro(und L- threo)- a- D-galacto- octo- pyranosid- Derivaten und deren Homologen zu entsprechenden 7-Chlor- und Bromderivaten der allgemeinen Formel 1

   CH₃

   Y-NH-HO

   OH

   (D

   SR

   OH

   in der X ein Chlor- oder Bromatom, R eine Alkylgruppe mit nicht mehr als 20 Kohlenstoffatomen, eine C₃-bis Cjj-Cycloalkylgruppe oder eine Aralkylgruppe mit nicht mehr als 12 Kohlenstoffatomen und Y ein Wasserstoffatom oder den Acylrest einer in 4-Stellung substituierten L-2-Pyrrolidincarbonsäure einer der allgemeinen Formeln

   35

   C-OH

   40

   45

   60

   C-OH