DE1246170B - Mykobakteriostatika - Google Patents

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND

DEUTSCHES

PATENTAMT

AUSLEGESCHRIFT

Int. Cl.:

Deutsche Kl.:

AOIN

Nummer:
Aktenzeichen:
Anmeldetag:
Auslegetag:

.4 5^-e-

1246170
M 55072IV a/30 i
10. Dezember 1962
3. August 1967

Die vorliegende Erfindung betrifft mykobakteriostatische Verbindungen, d. h. Verbindungen, welche sowohl bakteriostatische als auch fungistatische Wirksamkeit besitzen.

Seit einigen Jahren wurden intensive Untersuchungen durchgeführt zur Ermittlung von Verbindungen, welche mykobakteriostatische Wirksamkeit besitzen, insbesondere Verbindungen, welche gegen einen weiten Bereich von Bakterien und Pilzen wirksam sind. Die Wirksamkeit gewisser Biguanide ist bereits bekannt, z. B. sind in »Antibiotics and Chemotherapy«, XI, 1961, S. 572 bis 582, eine Reihe derartiger Verbindungen und ihre Wirkung auf Bakterien und Pilze angeführt. Es wurde nun gefunden, daß gewisse neue aromatische Biguanide und deren Salze diese Breitbandspektrum-Wirksamkeit in einem hohen Maße besitzen.

Vergleicht man nun die Ergebnisse aus »Antibiotics and Chemotherapy«, a. a. Ο., mit denen der vorliegenden Erfindung, so ergibt sich, daß durch die vorliegende Erfindung Zubereitungen geschaffen wurden, die eine neue Gruppe von Verbindungen enthalten, wobei diese Zubereitungen in ihrer Wirksamkeit durchaus vergleichbar sind mit den wirkungsmäßig über dem Durchschnitt liegenden vorstehend erwähnten Verbindungen. Damit wird die Möglichkeit geschaffen, im Fall der Heranbildung einer Chemoresistenz gegenüber den bekannten Verbindungen auf Verbindungen einer anderen Gruppe vergleichbarer Wirksamkeit auszuweichen. Hierin liegt der wesentliche Vorteil des Erfindungsgegenstandes. Wie sich aus der spürbar schlechteren Wirksamkeit der niederen Homologen ergibt, war eine Vorhersage bezüglich der ausgezeichneten Wirksamkeit der beanspruchten Verbindungen nicht möglich.

Die erfindungsgemäßen Mykobakteriostatika enthalten Verbindungen, bei welchen mit dem Stickstoffatom eines Biguanids entweder eine 4-n-Heptyloxyphenylgruppe oder eine 3-Chlor-4-n-heptyloxyphenylgruppe verbunden ist oder ein Salz einer solchen Verbindung; die erfindungsgemäßen mykobakteriostatischen Zubereitungen umfassen demgemäß auch die Verwendung solcher Verbindungen und Salze zur Inhibierung des Wachstums von Bakterien oder Pilzen.

Mykobakteriostatische Zubereitungen der erfindungsgemäßen Art können neben dem Mykobakteriostatikum oder dessen Salz noch ein inertes Verdünnungsmittel enthalten.

Im allgemeinen ist die mykobakteriostatische Zubereitung der vorliegenden Erfindung eine Suspension, Emulsion oder Feststoff, umfassend ein inertes Verdünnungsmittel und ein aromatisches Biguanid (oder dessen Salz), wie es zuvor definiert ist. Vorzugs-Mykobakteriostatika

Anmelder:

Monsanto Chemicals Limited, London

Vertreter: ,

Dr. M. Eule, Dr. W. Berg

und Dipl.-Ing. O. Stapf, Patentanwälte,

München 2, Hilblestr. 20

Als Erfinder benannt:

Joseph Patrick Brown, Llangollen Denbigshire,

Wales (Großbritannien)

Beanspruchte Priorität:

Großbritannien vom 11. Dezember 1961 (44278)

weise ist die Suspension oder Emulsion eine wäßrige.

Salze der erfindungsgemäßen Biguanide umfassen die Säureadditionssalze, welche durch Behandlung des freien Biguanids mit einer anorganischen Säure, wie Salzsäure oder Schwefelsäure, oder mit einer organischen Säure, wie Essigsäure, Oxalsäure oder Pikrinsäure, gebildet werden. Ferner sind auch die quarternären Ammoniumsalze, wie die quarternären Halogenide, welche durch Behandlung der freien Base mit beispielsweise einem Alkylhalogenid erhalten sind, geeignet. .

Mykobakteriostatische Zubereitungen der eÄmdungsgemäßen Art können Suspensionen des aronä-· tischen Biguanids oder dessen Salzes in einem wäßrigen Medium sein; wahlweise kann das aromatische Biguanid oder dessen Salz in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie z. B. einem Kohlenwasserstoff, einem Halogenkohlenwasserstoff oder einem tierischen, pflanzlichen oder mineralischen öl gelöst sein und kann vor Verwendung dieser Lösung in einem wäßrigen Medium, um eine erfindungsgemäße Emulsion zu bilden, emulgiert werden. In jedem Fall kann eine Emulsion, sofern dies notwendig ist, durch ein geeignetes oberflächenaktives Mittel stabilisiert werden.

Mykobakteriostatische Zubereitungen der erfindungsgemäßen Art, welche Feststoffe sind, können z. B. jene sein, in welchen das inerte Lösungsmittel ein feinverteiltes Pulver, wie z. B. Talk, ist.

Die Anteile des angewendeten Mykobakteriostatikums in den jeweiligen Zubereitungen variieren natürlich entsprechend der Art der Zubereitung und der beabsichtigten Verwendung. Im allgemeinen ist es wünschenswert, mindestens 1 Gewichtsprozent ein-

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zuverleiben, aber im allgemeinen können bedeutend größere Mengen, z. B. 10, 25 oder sogar 50% benutzt werden, insbesondere dann, wenn, wie dies im allgemeinen der Fall ist, die Zubereitung ein Konzentrat ist, welches dazu bestimmt ist, vor der Anwendung verdünnt zu werden.

Die mykobakteriostatischen Zubereitungen gemäß der Erfindung können in irgendeiner beliebigen Weise, bei welcher von ihren mykobakteriostatischen Eigenschaften Gebrauch gemacht wird, verwendet werden, z. B. zum Schutz einer Vielfalt von Materialien, einschließlich Textilien, Leder und landwirtschaftlicher Erzeugnisse gegen den Angriff von Bakterien und Pilzen, als auch um im wesentlichen inerten Substanzen, Seifen, Wachsen und synthetischen Kunststoffen eine mykobakteriostatische Wirksamkeit zu verleihen.

Die Verbindungen werden aus dem entsprechenden aromatischen Amin durch Umsatz mit einem Dicyandiamid hergestellt. Die Reaktion zwischen dem aromatischen Amin und dem Dicyandiamid wird üblicherweise in.Gegenwart einer Säure, z. B. Salzsäure oder Schwefelsäure, durchgeführt, so daß das unmittelbare Produkt ein Salz des gewünschten aromatischen Biguanids ist. Gute Ergebnisse wurden bei Durchführung des Verfahrens in einem wäßrigen Medium, welches wahlweise ein mit Wasser mischbares Lösungsmittel, z. B. einen niederen Alkohol, enthalten kann, erzielt. Bei der praktischen Durchführung des Verfahrens ist eine Reaktionstemperatur von nicht weniger als ungefähr 5O⁰C üblicherweise erforderlich, beispielsweise im Bereich von 50 bis 150⁰C. In den Fällen, in denen das Reaktionsmedium wäßrig ist, kann die Reaktion zufriedenstellend unter Sieden am Rückfluß durchgeführt werden. Das freie Biguanid kann aus dem Salz durch Einwirkung eines Alkalis, z. B. Natrium oder Kaliumhydroxyd, erhalten werden.

Beispiel 1

Dieses Beispiel beschreibt die Herstellung der neuen Verbindung N¹-4-n-Heptyloxyphenylbiguanid und dessen Hydrochloride.

Ein Gemisch aus 17,1 g 4-n-Heptyloxyanilin und 8,3 g Dicyandiamid in 75 ecm Wasser, welches 9,2 ecm konzentrierter Salzsäure (spezifisches Gewicht 1,16) enthielt, wurde 2 Stunden unter Rückflußbedingungen gekocht. Während dieser Zeit wurde eine klare Lösung erhalten, aus welcher beim nachfolgenden Abkühlen auf Zimmertemperatur 15,3 g 4-n-Heptyloxyphenylbiguanid-Hydrochlorid auskristallisierten. Die Kristalle wurden abfiltriert, mit Äthanol gewaschen und getrocknet. Der Schmelzpunkt des NM-n-Heptyloxyphenylbiguanid-Hydrochlorids war 198 bis 200⁰C. Das freie Biguanid wurde aus dem Hydrochlorid durch Behandlung mit einer Base in Freiheit gesetzt.

Beispiel 2

N^l-3-Chlor-4-n-hepty)oxyphenylbiguanid wurde in

ίο ähnlicher Weise durch Umsatz von Dicyandiamid mit 3-Chlor-4-n-heptyloxyanilin erhalten; Schmelzpunkt 110 bis 112° C (erweichend bei 103 ° C).

Für das Herstellungsverfahren wird im Rahmen vorliegender Erfindung kein Schutz beansprucht.

Das angewendete Verfahren, um die Wirksamkeit einer Verbindung als Bakteriostat zu zeigen, war folgendes:

0,4 ecm einer lgewichtsprozentigen Lösung Alkoxyphenylbiguanid in Aceton oder 0,4 ecm einer lge-

ao wichtsprozentigen Lösung Alkoxyphenylbiguanid Hydrochlorid wurden 20 ecm einer warmen sterilen Agar-Nährzubereitung in einem Reagenzglas zugemischt unter Bildung einer Konzentration von 0,02% dieser Verbindung in diesem Medium. Die warme Agarzubereitung wurde sofort in eine sterile Petrischale eingegossen und nach Erstarren mit einer Kultur des Testbakteriums geimpft. Die Schale wurde auf einer Temperatur von 37⁰C während 24 Stunden gehalten, wonach sie untersucht wurde auf das Vorhandensein oder NichtVorhandensein des Wachstums der Organismen. Bei NichtVorhandensein des Wachstums wurde der Versuch mit einer niedrigeren Konzentration der Testverbindung wiederholt, bis eine Konzentration erreicht war, bei welcher Wachstum auftrat. Die vorangehende Konzentration wurde als die minimale Konzentration bezeichnet, bei welcher die Verbindung zur Inhibierung des Bakterienwachstums fähig ist. Das Verfahren, welches benutzt wurde, um Wirksamkeit der Verbindung als Fungi stat zu zeigen, war ähnlich mit Ausnahme, daß nach der Impfung des Agars mit dem Testpilz die Schale bei einer Temperatur von 25° C 72 Stunden vor der Prüfung gehalten wurde.

Die beobachteten minimalen Inhibierungskonzentrationen für eine Reihe verschiedener Bakterien und Pilze sind in den beiden nachfolgenden Tabellen zusammengestellt. Die Ergebnisse zeigen eine gute Wirksamkeit gegenüber einer Vielzahl von Organismen.

Tabelle I	N3-4-n-Heptyloxy- phenylbiguanid	Salmonella typhi	Staphylo coccus aureus	Bakterium coli	Bazillus subtilis	Pseudo- monas pyocyanea	Asper gillus niger	Pcnicillium expansum
	0,001	0,001	0,005	0,002	0,02	0,01	0,01

Tabelle!!

Staphylococcus
aureus

grampositives
Bakterium

Pseudo-

monas

pyocyanea

gramnegatives
Bakterium

Salmonella
typhi

Bakterium
coli

Darm gramnegative
Bakteria

Penicillium
expansum

Asper
gillus
niger

Abfallpilze

Bazillus
subtilis

Abfallbakterium

N^-Chlor^n-heptyloxyphenylbiguanid

0,001

0,02

0,005

0,02

0,02

0,001

Claims (1)

1. Patentanspruch: In Betracht gezogene Druckschriften:

   Verwendung von NM-n-Heptyloxyphenylbigua- USA.-Patentschrift Nr. 2107 712;

   nid oder N^S-Chlor-^n-heptyloxyphenylbiguanid Antibiotics and Chemotherapie, XI (1961), S. 572

   als Mykobakteriostatika. 5 bis 582.

   709 619/597 7.67 0 Bundeednickerel Berlin