DE04816892T1 - Spektraldarstellung von biologischen proben - Google Patents

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Kirk William Manchester GOSSAGE
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Abstract

Verfahren, welches folgendes umfasst:
Bereitstellen von spektral aufgelöster Information über Licht, das aus unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen in einer tiefes Gewebe umfassenden Probe in Antwort auf eine Beleuchtung der Probe kommt, wobei das Licht Beiträge aus unterschiedlichen Komponenten in der Probe einschließt;
Zerlegung der spektral aufgelösten Information für jede von mindestens einigen der unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen in Beiträge aus spektralen Schätzungen, assoziiert mit mindestens einigen der Komponenten in der Probe; und
Konstruieren eines Tiefgewebe-Bilds der Probe, basierend auf der Zerlegung, um vorzugsweise eine ausgewählte der Komponenten zu zeigen.

Claims (96)

  1. Verfahren, welches folgendes umfasst: Bereitstellen von spektral aufgelöster Information über Licht, das aus unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen in einer tiefes Gewebe umfassenden Probe in Antwort auf eine Beleuchtung der Probe kommt, wobei das Licht Beiträge aus unterschiedlichen Komponenten in der Probe einschließt; Zerlegung der spektral aufgelösten Information für jede von mindestens einigen der unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen in Beiträge aus spektralen Schätzungen, assoziiert mit mindestens einigen der Komponenten in der Probe; und Konstruieren eines Tiefgewebe-Bilds der Probe, basierend auf der Zerlegung, um vorzugsweise eine ausgewählte der Komponenten zu zeigen.
  2. Verfahren von Anspruch 1, wobei die spektral aufgelöste Information Information über eine Gruppe von Bildern umfasst, in welchen das Licht, das aus der Probe kommt, spektral gefiltert ist, wobei das spektrale Filtern für jedes Bild einer unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktion entspricht.
  3. Verfahren von Anspruch 1, wobei die spektral aufgelöste Information Information über eine Gruppe von Bildern umfasst, in welchen Licht, verwendet zum Beleuchten der Probe, spektral gefiltert ist, wobei das spektrale Filtern für jedes Bild einer unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktion entspricht.
  4. Verfahren der Ansprüche 2 oder 3, wobei die unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen gemeinsamen Pixeln in der Gruppe von Bildern entsprechen.
  5. Verfahren der Ansprüche 2 oder 3, wobei die unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen unterschiedlichen Spektralbanden entsprechen.
  6. Verfahren der Ansprüche 2 oder 3, wobei die Gruppe von Bildern drei oder mehr Bilder umfasst.
  7. Verfahren der Ansprüche 2 oder 3, wobei die Gruppe von Bildern vier oder mehr Bilder umfasst.
  8. Verfahren von Anspruch 4, wobei die Information über die Gruppe von Bildern eine Serie von Werten an jedem der Pixel umfasst, wobei jeder Wert mit einer Intensität des Lichts, das aus der Probe kommt, in Bezug auf eine entsprechende der spektralen Gewichtungsfunktionen zusammenhängt.
  9. Verfahren von Anspruch 1, wobei die spektral aufgelöste Information für jede räumliche Lokalisierung Information umfasst, entsprechend mindestens drei unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen.
  10. Verfahren von Anspruch 1, wobei die spektral aufgelöste Information für jede räumliche Lokalisierung Information umfasst, entsprechend mindestens vier unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen.
  11. Verfahren von Anspruch 1, wobei die spektral aufgelöste Information einen spektralen Bildkubus umfasst.
  12. Verfahren von Anspruch 1, wobei das aus der Probe kommende Licht Fluoreszenz aus der Probe umfasst.
  13. Verfahren von Anspruch 1, wobei das aus der Probe kommende Licht Reflexion, Phosphoreszenz, Streuung oder Raman-Streuung aus der Probe umfasst.
  14. Verfahren von Anspruch 1, wobei das aus der Probe kommende Licht Transmission durch die Probe umfasst.
  15. Verfahren von Anspruch 1, wobei mindestens eine der Komponenten Autofluoreszenz betrifft.
  16. Verfahren von Anspruch 1, wobei mindestens eine der Komponenten eine Zielverbindung umfasst.
  17. Verfahren von Anspruch 16, wobei die ausgewählte Komponente die Komponente ist, welche die Zielverbindung umfasst.
  18. Verfahren von Anspruch 16, wobei die Zielverbindung ein fluoreszierendes Protein oder einen Quantenpunkt umfasst.
  19. Verfahren von Anspruch 1, ferner umfassend das Beleuchten der Probe und das Erfassen der spektral aufgelösten Information.
  20. Verfahren von Anspruch 1, wobei das Erfassen der spektral aufgelösten Information das Anwenden eines abstimmbaren Flüssigkristall-Spektralfilters, eines abstimmbaren akusto-optischen Spektralfilters, eines Satzes von Spektralfiltern, eines Spektralfilter-Rades, eines dispersiven Prismas, eines Gitters, eines Spektrometers oder eines Monochromators umfasst.
  21. Verfahren von Anspruch 1, wobei das Tiefgewebe-Bild der ausgewählten Komponente ein Bild umfasst, in welchem Signal von den anderen Komponenten relativ zu Signal von der ausgewählten Komponente reduziert ist.
  22. Verfahren von Anspruch 1, ferner umfassend das Konstruieren eines zweiten Tiefgewebe-Bildes der Probe, basierend auf der Zerlegung, um vorzugsweise eine zweite der Komponenten zu zeigen.
  23. Verfahren von Anspruch 1, ferner umfassend das Konstruieren eines dritten Tiefgewebe-Bildes der Probe, basierend auf der Zerlegung, um vorzugsweise eine dritte der Komponenten zu zeigen.
  24. Verfahren von Anspruch 1, wobei die Probe ein lebender Organismus ist.
  25. Verfahren von Anspruch 1, wobei die Probe ein Säuger ist.
  26. Verfahren von Anspruch 1, wobei mindestens eine der spektralen Schätzungen eine Schätzung des reinen Spektrums von einer ersten der Komponenten ist.
  27. Verfahren von Anspruch 26, wobei mindestens einige der spektralen Schätzungen Schätzungen der reinen Spektren für einige der Komponenten sind.
  28. Verfahren von Anspruch 26, wobei die erste Komponente Autofluoreszenz entspricht.
  29. Verfahren von Anspruch 26, wobei die erste Komponente der gewählten Komponente entspricht.
  30. Verfahren von Anspruch 26, wobei das reine Spektrum für die erste Komponente der spektral aufgelösten Information entspricht, welche resultieren würde, wenn nur die erste Komponente zu dem Licht beiträgt.
  31. Verfahren von Anspruch 1, wobei das Konstruieren des Tiefgewebe-Bildes, basierend auf der Zerlegung, das Konstruieren des Tiefgewebe-Bildes, basierend auf den Beiträgen an unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen der spektralen Schätzung, assoziiert mit der ausgewählten Komponente, umfasst.
  32. Verfahren von Anspruch 1, wobei die Zerlegung eine lineare Zerlegung ist.
  33. Verfahren von Anspruch 32, wobei die Zerlegung das Lösen mindestens einer Komponente einer Matrixgleichung umfasst, wobei eine Matrix in der Gleichung auf der spektral aufgelösten Information basiert und eine andere Matrix in der Gleichung auf den spektralen Schätzungen basiert.
  34. Verfahren von Anspruch 1, wobei mindestens eine der spektralen Schätzungen unabhängig von der spektral aufgelösten Information bereitgestellt wird.
  35. Verfahren von Anspruch 1, wobei mindestens eine erste der spektralen Schätzungen für eine erste der Komponenten aus der spektral aufgelösten Information bestimmt wird.
  36. Verfahren von Anspruch 35, wobei alle der spektralen Schätzungen aus der spektral aufgelösten Information bestimmt werden.
  37. Verfahren von Anspruch 36, wobei die spektralen Schätzungen aus der spektral aufgelösten Information durch Verwenden einer unüberwachten Klassifizierungs-Technik bestimmt werden.
  38. Verfahren von Anspruch 37, wobei die spektralen Schätzungen aus der spektral aufgelösten Information durch Verwenden einer überwachten Klassifizierungs-Technik bestimmt werden.
  39. Verfahren von Anspruch 37, wobei die unüberwachte Klassifizierungs-Technik das Mitteln der spektral aufgelösten Information für mehrere einzelne der räumlichen Lokalisierungen umfasst.
  40. Verfahren von Anspruch 35, wobei die erste spektrale Schätzung aus einer Region bestimmt wird, umfassend eine oder mehrere der räumlichen Lokalisierungen, wobei die Region mit der ersten Komponente assoziiert ist.
  41. Verfahren von Anspruch 35, wobei die erste spektrale Schätzung aus der spektral aufgelösten Information von einem ersten Satz von einer oder mehreren räumlichen Lokalisierungen hergeleitet wird, wobei das Licht Beiträge aus mehreren einzelnen der Komponenten einschließt.
  42. Verfahren von Anspruch 41, wobei die erste spektrale Schätzung aus der spektral aufgelösten Information von dem ersten Satz von räumlichen Lokalisierungen und einer zweiten der spektralen Schätzungen für eine zweite der Komponenten hergeleitet wird.
  43. Verfahren von Anspruch 42, wobei das Herleiten der ersten spektralen Schätzung das Berechnen eines Rest-Spektrums, basierend auf der spektral aufgelösten Information aus dem ersten Satz und der spektralen Schätzung für die zweite Komponente, umfasst.
  44. Verfahren von Anspruch 43, wobei das Rest-Spektrum an jeder von einer oder mehreren der räumlichen Lokalisierungen in dem ersten Satz von räumlichen Lokalisierungen berechnet wird.
  45. Verfahren von Anspruch 43, wobei das Rest-Spektrum basierend auf einem Mittelwert der spektral aufgelösten Information in dem ersten Satz von räumlichen Lokalisierungen und der spektralen Schätzung für die zweite Komponente berechnet wird.
  46. Verfahren von Anspruch 42, wobei die spektrale Schätzung für die zweite Komponente aus der spektral aufgelösten Information hergeleitet wird.
  47. Verfahren von Anspruch 46, wobei die spektrale Schätzung für die zweite Komponente aus der spektral aufgelösten Information durch Verwenden einer unüberwachten Klassifizierungs-Technik hergeleitet wird.
  48. Verfahren von Anspruch 46, wobei die spektrale Schätzung für die zweite Komponente aus einer Region hergeleitet wird, umfassend eine oder mehrere der räumlichen Lokalisierungen, wobei die Region mit der zweiten Komponente assoziiert ist.
  49. Verfahren von Anspruch 42, wobei das Herleiten der ersten spektralen Schätzung das Anpassen von Werten, entsprechend der spektral aufgelösten Information für den ersten Satz von räumlichen Lokalisierungen, zum Entfernen eines Beitrags aus der zweiten Komponente, basierend auf der spektralen Schätzung für die zweite Komponente, umfasst.
  50. Verfahren von Anspruch 49, wobei der entfernte Beitrag ein maximaler Beitrag ist.
  51. verfahren von Anspruch 50, wobei der maximale Beitrag auf einer Fehlerfunktions-Analyse von Signal in jedem spektralen Kanal der angepassten Werte basiert.
  52. Verfahren von Anspruch 51, wobei die Fehlerfunktions-Analyse dazu neigt, nicht-negatives Signal in jedem spektralen Kanal der angepassten Werte beizubehalten.
  53. Verfahren von Anspruch 49, wobei die Werte eine Serie von wenigstens einigen der Werten für jede der räumlichen Lokalisierungen in dem ersten Satz umfassen, und wobei das Entfernen des Beitrags aus der zweiten Komponente, basierend auf der spektralen Schätzung für die zweite Komponente, das Subtrahieren einer optimierten Quantität der spektralen Schätzung für die zweite Komponente von jedem von der Serie von Werten umfasst.
  54. Verfahren von Anspruch 53, wobei das Bestimmen der optimierten Quantität für mindestens einen ersten Wert der Serie von Werten auf dem Minimieren einer Fehlerfunktion eines Differenzspektrums basiert, das eine Differenz zwischen den ersten Serien-Werten und der zu optimierenden Quantität, multipliziert mit der spektralen Schätzung für die zweite Komponente, einschließt, wobei die Fehlerfunktion über die erste Serie von Werten minimiert wird.
  55. Verfahren von Anspruch 54, wobei das Differenzspektrum ferner eine Konstante einschließt, welche ebenfalls über die erste Serie von Werten optimiert ist.
  56. Verfahren von Anspruch 54, wobei die Fehlerfunktion positive Werte des Differenzspektrums über negative Werte des Differenzspektrums begünstigt.
  57. Verfahren von Anspruch 56, wobei die Fehlerfunktion (e–Δ + 1)Δ2 umfasst, wobei Δ das Differenzspektrum ist.
  58. Verfahren von Anspruch 54, wobei die Fehlerfunktion durch die Größen der ersten Serie von Werten und die spektrale Schätzung für die zweite Komponente normiert wird.
  59. Verfahren von Anspruch 35, wobei die Zerlegung eine erste Zerlegung der spektral aufgelösten Information an mehreren räumlichen Lokalisierungen in Beiträge aus anfänglichen spektralen Schätzungen, assoziiert mit mindestens einigen der Komponenten in der Probe, was eine Genauigkeit von mindestens einigen der anfänglichen spektralen Schätzungen, basierend auf der ersten Zerlegung, verbessert, und mindestens eine zweite Zerlegung der spektral aufgelösten Information an mehreren räumlichen Lokalisierungen in Beiträge aus den verbesserten spektralen Schätzungen umfasst.
  60. Verfahren, welches folgendes umfasst: Bereitstellen von spektral aufgelöster Information über Licht, das aus unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen einer Probe kommt, welche tiefes Gewebe umfasst, in Antwort auf eine Beleuchtung der Probe, wobei das Licht Beiträge aus unterschiedlichen Komponenten in der Probe einschließt und die spektral aufgelöste Information für jede räumliche Lokalisierung Information umfasst, entsprechend mindestens drei unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen; und Konstruieren eines Tiefgewebe-Bildes der Probe, basierend auf der spektral aufgelösten Information, um vorzugsweise eine ausgewählte der Komponenten zu zeigen.
  61. Verfahren von Anspruch 60, wobei jede spektrale Gewichtungsfunktion einer unterschiedlichen Spektralbande entspricht.
  62. Verfahren von Anspruch 60, wobei die spektral aufgelöste Information für jede räumliche Lokalisierung Information entsprechend zu mindestens vier unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen umfasst.
  63. Verfahren von Anspruch 60, ferner umfassend das Zerlegen der spektral aufgelösten Information für jede von mindestens einigen der unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen in einen Beitrag aus einer spektralen Schätzung, assoziiert mit mindestens einer der Komponenten in der Probe.
  64. Verfahren von Anspruch 63, wobei die spektrale Schätzung eine Schätzung des reinen Spektrums einer ersten der Komponenten ist.
  65. Verfahren von Anspruch 64, wobei das reine Spektrum für die erste Komponente der spektral aufgelösten Information entspricht, welche resultieren würde, wenn nur die erste Komponente zu dem Licht beiträgt.
  66. Verfahren von Anspruch 63, wobei das Zerlegen die Zerlegung der spektral aufgelösten Information für jede von mindestens einigen der unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen in Beiträge aus spektralen Schätzungen, assoziiert mit mindestens einigen der Komponenten in der Probe, umfasst.
  67. Verfahren von Anspruch 66, ferner umfassend das Konstruieren eines zweiten Tiefgewebe-Bildes der Probe, basierend auf der Zerlegung, um vorzugsweise eine zweite der Komponenten zu zeigen.
  68. Vorrichtung, umfassend: einen Probenhalter, konfiguriert, um eine Tiefgewebe-Probe zu halten; eine Beleuchtungsquelle zum Beleuchten der Probe; einen Detektor, positioniert zum Detektieren von Licht aus der Probe; und einen elektronischen Prozessor, der an den Detektor gekoppelt ist, wobei der elektronische Prozessor konfiguriert ist, um: (i) spektral aufgelöste Information über Licht, das von unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen einer Probe kommt, bereitzustellen, wobei das Licht Beiträge aus unterschiedlichen Komponenten in der Probe einschließt; (ii) die spektral aufgelöste Information für jede von mindestens einigen der unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen in Beiträge aus spektralen Schätzungen, assoziiert mit mindestens einigen der Komponenten in der Probe, zu zerlegen; und (iii) ein Tiefgewebe-Bild der Probe, basierend auf der Zerlegung, zu konstruieren um vorzugsweise eine ausgewählte der Komponenten zu zeigen.
  69. Vorrichtung, umfassend: einen Probenhalter, konfiguriert, um eine Tiefgewebe-Probe zu halten; eine Beleuchtungsquelle zum Beleuchten der Probe; einen Detektor, positioniert zum Detektieren von Licht aus der Probe; und einen elektronischen Prozessor, der an den Detektor gekoppelt ist, wobei der elektronische Prozessor konfiguriert ist, um: (i) spektral aufgelöste Information über Licht, das von unterschiedlichen räumlichen Lokalisierungen einer Probe kommt, bereitzustellen, wobei das Licht Beiträge aus unterschiedlichen Komponenten in der Probe einschließt, und die spektral aufgelöste Information für jede räumliche Lokalisierung Information umfasst, entsprechend mindestens drei unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen; und (ii) ein Tiefgewebe-Bild der Probe, basierend auf der spektral aufgelösten Information, zu konstruieren, um vorzugsweise eine ausgewählte der Komponenten zu zeigen.
  70. Vorrichtung von Anspruch 68 oder 69, ferner umfassend eine spektrale Filterungs-Einrichtung, welche zwischen der Probe und dem Detektor positioniert ist.
  71. Vorrichtung von Anspruch 70, wobei die spektrale Filterungs-Einrichtung einen abstimmbaren Flüssigkristall-Spektralfilter, einen abstimmbaren akusto-optischen Spektralfilter, einen Satz von Spektralfiltern, ein Spektralfilter-Rad, ein dispersives Prisma, ein Gitter, ein Spektrometer oder einen Monochromator umfasst.
  72. Vorrichtung von Anspruch 68 oder 69, ferner umfassend eine spektrale Filterungs-Einrichtung, welche zwischen der Beleuchtungsquelle und der Probe positioniert ist.
  73. Vorrichtung von Anspruch 68 oder 69, wobei die Beleuchtungsquelle abstimmbares Anregungslicht bereitstellt.
  74. Vorrichtung, umfassend ein Computer-lesbares Medium, das ein Programm speichert, welches einen Prozessor dazu bringt, die Schritte von einem der Ansprüche 1 und 60 auszuführen.
  75. Verfahren, welches folgendes umfasst: Beleuchten einer Probe, um die Probe dazu zu veranlassen, Strahlung zu emittieren, wobei die Probe tiefes Gewebe umfasst, das eine Komponente trägt, umfassend eine Zielverbindung, und wobei die emittierte Strahlung Emission von der Zielverbindung und Emission von einer oder mehreren anderen Komponenten in der Probe umfasst, spektrales Filtern der emittierten Strahlung mit jeder von einer Vielzahl von unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen; Speichern eines Bilds der spektral gefilterten Strahlung für jede der spektralen Gewichtungsfunktionen; und Verarbeiten der gespeicherten Bilder zum Konstruieren eines Tiefgewebe-Bilds der Probe, wobei Signal von den zusätzlichen Komponenten relativ zu Signal von der Zielverbindung reduziert ist.
  76. Verfahren, welches folgendes umfasst: Beleuchten einer Probe, um die Probe dazu zu veranlassen, Strahlung zu emittieren, wobei die Probe tiefes Gewebe umfasst, das eine Komponente trägt, umfassend eine Zielverbindung, und wobei die emittierte Strahlung Emission von der Zielverbindung und Emission von einer oder mehreren anderen Komponenten in der Probe umfasst, spektrales Filtern der emittierten Strahlung mit jeder von einer Mehrzahl von unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen; Speichern eines Bilds der spektral gefilterten Strahlung für jede der spektralen Gewichtungsfunktionen; und Verarbeiten der gespeicherten Bilder zum Konstruieren eines Tiefgewebe-Bilds der Probe, wobei Signal von den zusätzlichen Komponenten relativ zu Signal von der Zielverbindung reduziert ist.
  77. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Probe, welche das tiefe Gewebe umfasst, ein lebender Organismus ist.
  78. Verfahren von Anspruch 77, wobei der lebende Organismus ein Säuger ist.
  79. Verfahren von Anspruch 78, wobei der Säuger eine Maus oder einen Menschen umfasst.
  80. Verfahren von Anspruch 77, wobei der lebende Organismus ein Zebrabärbling (Zebrafish) ist.
  81. Verfahren von Anspruch 77, wobei das tiefe Gewebe ein inneres Organ des lebenden Organismus ist.
  82. Verfahren von Anspruch 77, wobei das tiefe Gewebe innerhalb von etwa 2 mm oder mehr des lebenden Organismus liegt.
  83. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei das tiefe Gewebe ein subdermales Gewebe ist.
  84. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Emission aus den anderen Komponenten der Probe Autofluoreszenz aus Gewebe umfasst, welches dem tiefen Gewebe überlagert ist.
  85. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Emission aus den anderen Komponenten der Probe Autofluoreszenz aus einer oder mehreren Schichten von Gewebe in der Probe, welche von einer Schicht von Gewebe, umfassend das tiefe Gewebe, verschieden sind, umfasst.
  86. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Zielverbindung eine fluoreszierende Sonde ist, gebunden an mindestens einen Bereich des tiefen Gewebes.
  87. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Zielverbindung eine lichtgebende Sonde ist, gebunden an mindestens einen Bereich des tiefen Gewebes.
  88. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Zielverbindung ein Quantenpunkt ist, gebunden an mindestens einen Bereich des tiefen Gewebes.
  89. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Zielverbindung Tiefgewebe-Bereiche umfasst, dargestellt durch Grün-fluoreszierendes Protein (GFP).
  90. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Zielverbindung Tiefgewebe-Bereiche umfasst, dargestellt durch Gelb-fluoreszierendes Protein (YFP).
  91. Verfahren von Anspruch 19 oder 76, wobei die Zielverbindung Tiefgewebe-Bereiche umfasst, dargestellt durch Rot-fluoreszierendes Protein (RFP).
  92. Vorrichtung, umfassend ein Computer-lesbares Medium, das ein Programm speichert, welches einen Prozessor dazu veranlasst: eine Vielzahl von Bildern von spektral gefilterter Strahlung zu empfangen, emittiert aus einer Probe in Antwort auf eine Beleuchtung, wobei die Probe tiefes Gewebe umfasst, das eine Zielverbindung trägt, wobei die emittierte Strahlung Emission von der Zielverbindung und Emission von einer oder mehreren anderen Komponenten in der Probe umfasst, und wobei jedes Bild einer unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktion entspricht; und die gespeicherten Bilder der spektral gefilterten Strahlung zu verarbeiten zum Konstruieren eines Tiefgewebe-Bilds der Probe, wobei Signal von den anderen Komponenten relativ zu Signal von der Zielverbindung reduziert ist.
  93. Vorrichtung, umfassend: einen Probenhalter, konfiguriert, um eine Probe zu halten, welche tiefes Gewebe umfasst, wobei das tiefe Gewebe eine Zielverbindung trägt; eine Beleuchtungsquelle, konfiguriert zum Beleuchten der Probe, um diese dazu zu veranlassen, Strahlung zu emittieren, wobei die emittierte Strahlung Emission von der Zielverbindung und Emission von einer oder mehreren anderen Komponenten in der Probe umfasst; ein Bildgebungs-System, konfiguriert, um die zu einem Detektor emittierte Strahlung abzubilden; einen abstimmbaren spektralen Filter, konfiguriert zum spektralen Filtern der emittierten Strahlung mit jeder einer Vielzahl von unterschiedlichen spektralen Gewichtungsfunktionen; einen Detektor, konfiguriert zum Speichern eines Bildes der spektralen gefilterten Strahlung für jede der spektralen Gewichtungsfunktionen; und einen elektronischen Prozessor, konfiguriert zum Verarbeiten der gespeicherten Bilder zum Konstruieren eines Tiefgewebe-Bildes der Probe, wobei Signal von den anderen Komponenten relativ zu Signal von der Zielverbindung reduziert ist.
  94. Vorrichtung von Anspruch 93, wobei der Probenhalter konfiguriert ist, um ein Tier zu halten.
  95. Vorrichtung von Anspruch 93, wobei das Bildgebungs-System eine Demagnifikation größer oder gleich 1 aufweist.
  96. Vorrichtung von Anspruch 93, wobei das Bildgebungs-System konfiguriert ist, um ein Sichtfeld, welches eine größere Diagonalabmessung als etwa 2 cm aufweist, auf den Detektor abzubilden.
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