CZ305350B6

CZ305350B6 - Multicyklická karbazolová a karbazollaktamová sloučenina, farmaceutický přípravek s jejím obsahem a její použití

Info

Publication number: CZ305350B6
Application number: CZ2011-756A
Authority: CZ
Inventors: Mark A. Ator; Ron Bihovski; Sankar Chatterjee; Derek Dunn; Robert L. Hudkins
Original assignee: Cephalon, Inc.
Priority date: 2000-05-09
Filing date: 2001-05-09
Publication date: 2015-08-12
Also published as: DE60136305D1; CN101560213A; CN101560213B; US7122679B2; ZA200209065B; NO20025376D0; CZ304911B6; HK1097841A1; EP2050750A2; EP2050750B1; JP2004501097A; CZ20023679A3; HK1129381A1; DE60116485D1; HU229448B1; CN100554268C; SK287591B6; ES2315789T3; CN1440409A; BG66036B1

Abstract

Jsou popsány nové multicyklické karbazolové a karbazollaktamové sloučeniny obecného vzorce IVa, které zprostředkovávají enzymatickou aktivitu, farmaceutické přípravky s jejich obsahem a použití takových sloučenin. Sloučeny jsou účinné pro léčení chorob a chorobných stavů souvisejících s aktivitou enzymu PARP, VEGFR2 a MLK3, včetně například neurodegenerativních onemocnění, zánětu, ischemie a rakoviny.

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká nových multicyklických karbazolových a karbazollaktamových sloučenin, farmaceutických přípravků s jejich obsahem a použití sloučenin s jejich obsahem, například pro zprostředkování enzymatické aktivity.

Dosavadní stav techniky

Poly(ADP-ribosa) polymerasa [PARP, též nazývána poly(ADP-ribosa) synthetasa nebo PARS] je enzym v jádru buňky, který katalyzuje syntézu poly(ADP-ribosových) řetězců zNAD⁺ jako odpověď na jednovláknové zlomy DNA při procesu opravy deoxyribonukleové kyseliny [de Murcia a kol., Trends Biochem. Sci., 19, 172 (1994), Alvarez-Gonzalez a kol., Mol. Cell. Biochem., 138, 33 (1994)]. Proteinové substráty související s chromatinem pro ribosylaci adenosíndifosfátu, které zahrnují histony, enzymy metabolizující deoxyribonukleové kyseliny a PARP samotnou, se modifikují na povrchových glutamátových zbytcích. PARP katalyzuje připojení jedné jednotky ADP-ribosy k proteinu (iniciace) s následující polymerizací až 200 ADP-ribosových monomerů (prodloužení) prostřednictvím glykosidických vazeb 2'-l. Navíc PARP katalyzuje větvení polymeru při nižší frekvenci.

Úloha PARP v procesu opravy deoxyribonukleové kyseliny je definovaná neúplně. Vazba PARP na dvouvláknovou deoxyribonukleovou kyselinu se zářezy se uvažuje tak, že usnadňuje proces opravy přechodným blokováním replikace či rekombinace deoxyribonukleové kyseliny. Následující poly(ADP-ribosyl)ace PARP a histonů může vést k zavedení podstatného negativního náboje způsobujícího odpuzování pozměněných proteinů od DNA. Poté se doporučuje relaxace chromatinové struktury zvyšující přístup enzymů pro opravu DNA k místu poškození.

Nadměrná aktivace PARP jako odpověď na poškození buňky či stres vede podle hypotézy k zániku buněk [Sims a kol., Biochemistry, 22, 5188 (1983), Yamamoto a kol., Nátuře, 294, 284 (1981)]. Aktivace PARP zlomy vlákna deoxyribonukleové kyseliny se může zprostředkovávat oxidem dusnatým nebo různými reaktivními kyslíkatými meziprodukty. Pokud je stupeň poškození DNA značný, může PARP katalyzovat masivní poly(ADP-ribossyl)aci s vyčerpáním buněčných hladin NAD⁺. Když se buňka snaží udržovat homeostasu resyntézou NAD⁺, mohou hladiny adenosin-difosfátu (ATP) náhle klesnout (jelikož syntéza jedné molekuly NAD⁺ požaduje čtyři molekuly ATP) a buňka může zahynout vyčerpáním svých energetických zásob.

Popisuje se, že aktivace PARP hraje svou úlohu při zániku buněk při řadě chorobných stavů s úvahou, že inhibitory PARP by při těchto stavech měly terapeutickou účinnost. Zvýšená poly(ADP-ribosyl)ace se pozoruje po ohniskové mozkové ischemii u krys, konzistentně s aktivací PARP při mrtvici [Tokime a kol., J. Cereb. Blood Flow Metab., 18, 991 (1998)]. Podstatné množství publikovaných farmakologických a genetických údajů podporuje hypotézu, že by inhibitory PARP mohly působit neuroprotektivně po mozkové ischemii či mrtvici. Inhibitory PARP ochraňují proti neurotoxicitě vyvolané NMDA- nebo oxidem dusnatým v krysích mozkových kortikálních kulturách [Zhang a kol., Science, 263, 687 (1994), Eliasson a kol., Nátuře Med., 3, 1089 (1997)]. Stupeň neuroprotekce pozorovaný pro řadu sloučenin je přímo paralelní s jejich aktivitou jako PARP inhibitorů.

Inhibitory PARP mohou též vykazovat neuroprotektivní účinnost ve zvířecích modelech mrtvice. Účinný inhibitor PARP DPQ (3,4-dihydro-5-[4-(l-piperidinyl)butoxy]l(2H)-isochinolinon) (Suto a kol., US patent 5 177 075) poskytuje 54% snížení objemu infarktu v krysím modelu ložiskové mozkové ischemie (permanentní MCAo a bilaterální okluze karotidy 90 min) po intraperi-1 CZ 305350 B6 toneálním podání (10 mg/kg) dvě h před a dvě h po iniciaci ischemie [Takahashi a kol., Brain Res., 829, 46 (1997)]. Intracerebroventrikulámí podání méně účinného inhibitoru PARP 3-aminobenzamidu (3-AB) poskytuje 47% pokles objemu infarktu u myší po okluzi MCA trvající dvě h při použití způsobu vytvoření švu šitím [Endres a kol., J. Cereb. Blood Flow Metab., 17, 1143 (1997)]. Léčení 3-AB též zvyšuje funkční zotavení 24 h po ischémii, zeslabuje pokles hladin NAD⁺ v ischemických tkáních a snižuje syntézu poly(ADP-ribosových) polymerů, jak potvrzuje imunohistochemie. Podobné 3-AB (10 mg/kg) významně snižuje objem infarktu v modelu ložiskové ischemie u krysy vytvořením švu [Lo a kol., Stroke, 29, 830 (1998)]. Neuroprotektivní účinek 3-AB (3 až 30 mg/kg intracerebroventrikulámě) lze též pozorovat na krysím modelu ischemie způsobené permanentní okluzi střední cerebrální arterie [Tokime a kol., J. Cereb. Blood Flow Metab., 18, 991 (1998)].

Dostupnost myší, u kterých se stal gen PARP nefunkčním (Wang, Genes Dev., 9, 509 (1995)] rovněž napomohla validaci úlohy PARP při neurodegeneraci. Neurotoxicita následkem NMDA, NO nebo oxygen-glukosové deprivace účinně vymizela v primárních cerebrálních kortikálních kulturách myší PARP ⁷ [Eliasson a kol., Nátuře Med., 3, 1089 (1997)]. V modelu ischemie myší s vytvořením švu lze pozorovat 80% snížení objemu infarktu u myší PARP ⁷ a 65% snížení u myší PARP“. Endres a kol. (1997) popisují 35% snížení objemu infarktu u myší PARP ““ a 31% snížení u myší PARP^+/ . Navíc k neuroprotekci vykazují myši PARP ⁷ zlepšení neurologického skóre a zvýšení hladin NAD⁺ po ischémii.

Existuje též preklinický důkaz o tom, že inhibitory PARP mohou být účinné při léčbě Parkinsonovy choroby. Je tomu tak proto, že hlavní známkou Parkinsonovy choroby je ztráta dopaminergních neuronů v substantia nigra. Léčení experimentálních zvířat nebo lidí neurotoxinem 1methyMl-fenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridinem (MPTP) nahrazuje ztrátu dopaminergních neuronů a potlačuje motorické symptomy Parkinsonovy choroby. MPTP aktivuje PARP v substantia nigra a myši s nedostatkem PARP jsou rezistentní na neurodegenerativní účinky MPTP [Mandir a kol., Proč. Nat. Acad. Sci., 96, 5774 (1999)]. Podobně se uvádí, že inhibitor PARP 3-aminobenzamid zeslabuje ztrátu NAD⁺ ve striátu po podání MPTP myším [Cosi a kol., Brain Res., 809, 58 (1998)].

Aktivace PARP se účastní funkčních deficitů, které mohou vyplývat z traumatického poškození mozku a poškození míchy. V kontrolovaném kortikálním modelu traumatického poškození mozku vykazují myši PARP“⁷ významně zlepšenou motorickou a kognitivní funkci ve srovnání se zvířaty PARP^+/+ [Whalan a kol., J. Cereb. Blood Flow Metab., 19, 835 (1999)]. Tvorba peroxynitritu a aktivace PARP se rovněž prokazuje u krys s poškozením míchy [Scott a kol., Ann. Neurol., 45, 120 (1999)]. Výsledky ukazují, že inhibitory PARP mohou poskytovat ochranu proti ztrátě funkce po poranění hlavy či páteře.

Úloha PARP jako mediátoru zániku buněk po ischémii a reperfuzi se nemusí omezovat na nervový systém. V této souvislosti uvádí nedávná publikace, že řada strukturně výrazných inhibitorů PARP včetně 3-AB a příbuzných sloučenin snižuje velikost infarktu po srdeční ischémii a reperfuzi u králíka [Thiemermann a kol., Proč. Nat. Acad. Sci., 94, 679 (1997)]. V modelu izolovaného promývaného králičího srdce snížila inhibice PARP objem infarktu a kontraktilní dysfunkci po globální ischémii a reperfuzi. Nekróza kosterního svalstva po ischémii a reperfuzi se rovněž snížila působením inhibitoru PARP. Podobné kardioprotektivní účinky 3-AB v modelu krysí myokardiální ischemie/reperfuze udávají Zingarelli a spolupracovníci [Zingarelli a kol., Cardiovascular Research, 36, 205 (1997)]. Tyto výsledky in vivo jsou dále podpořeny údaji z experimentů na kultuře krysích srdečních monocytů [Gilad a kol., J. Mol. Cell Cardiol., 29, 2585 (1997)]. Inhibitory PARP (3-AB a nikotinamid) ochraňují myocyty před snížením mitochondriálního dýchání pozorovaným po léčení oxidanty, jako je peroxid vodíku, peroxynitrit nebo dusíkaté donory kyslíku. Nedávno se ukázalo, že genetické porušení PARP u myší poskytuje ochranu proti opožděnému buněčnému poškození a tvorbě zánětlivých mediátorů po myokardiální ischémii a reperfuzi [Yang a kol., Shock, 13, 60 (2000)]. Tyto údaje podporují hypotézu o tom, že podávání inhibitoru PARP by mohlo přispět k pozitivnímu výsledku po infarktu myokar-2CZ 305350 B6 du. Zvláště užitečné použití inhibitoru PARP by mohlo zahrnovat podávání současně s léčením pro dosažení reperfuze v poškozené srdeční oblasti včetně angioplastiky a rozpouštění sraženiny lékem, jako je tPA.

Působení PARP se rovněž účastní poškození buněk, které se vyskytuje v řadě zánětlivých onemocnění. Aktivace makrofágů prozánětlivými podněty může vést ke tvorbě oxidu dusnatého a superoxidového aniontu, které spolu tvoří peroxynitrit, což vede ke zlomům jednovláknové deoxyribonukleové kyseliny a k aktivaci PARP. Úloha PARP jako mediátoru zánětlivého onemocnění se podporuje pokusy, které používají myši PARP““ nebo inhibitory PARP v četných zvířecích modelech. Například klouby myší podrobené artritidě vyvolané kolagenem obsahují nitrotyrosin, konzistentně s tvorbou peroxynitritu [Szabo a kol., J. Clin. Invest., 100, 723 (1998)]. Inhibitor PARP 5-jod-6-amino-l,2-benzopyron snižuje výskyt a závažnost artritidy u těchto zvířat s poklesem závažnosti nekrózy a hyperplázie synovia, jak ukazuje histologické vyšetření. V modelu akutního lokálního zánětu při pleuritidě vyvolané karrageenanem inhibuje 3-AB histologické poškození, tvorbu pleurálního výpotku a infiltraci mononukleámími buňkami jako jevy charakteristické pro zánětlivý proces [Cuzzocrea a kol., Eur. J. Pharmacology, 342, 67 (1998)].

Výsledky z modelů kolitidy u hlodavců ukazují, že se aktivace PARP může účastnit patogeneze zánětlivého střevního onemocnění [Zingarelli a kol., Gastroenterology, 116, 335 (1999)]. Podávání trinitrobenzensulfonové kyseliny do lumina střeva způsobuje erozi mukózy, infiltraci neutrofily a výskyt nitrotyrosinu. Delece genu PARP nebo inhibice PARP 3-AB snižuje poškození tkání a zeslabuje infiltraci neutrofily a tvorbu nitrotyrosinu, což ukazuje, že inhibitory PARP mohou být použitelné při léčení zánětlivého střevního onemocnění.

Uvažuje se též úloha PARP při patogenezi endotheliální dysfunkce v modelech endotoxického šoku [Szabo a kol., J. Clin. Invest., 100, 723 (1997)]. Je tomu tak proto, že inhibice PARP nebo genetická delece PARP může chránit proti poklesu mitochondriálního dýchání, který nastává po léčbě endotheliálních buněk peroxynitritem.

Aktivace PARP se účastní při indukci experimentálního diabetů vyvolaného selektivním beta buněčným toxinem streptozocinem (SZ). SZ může vyvolávat podstatné zlomy deoxyribonukleové kyseliny, což způsobuje aktivaci PARP a vyčerpání energetických zásob buněk, jak popisuje výše Yamamoto a kol. (1981). V buňkách odvozených od myší PARP ^z vede expozice reaktivním kyslíkatým meziproduktům ke sníženému vyčerpání NAD⁺ a zvýšené životnosti buněk oproti buňkám přirozeného typu [Heller a kol., J. Biol. Chem., 270, 11176 (1995)]. Podobné účinky lze pozorovat u buněk přirozeného typu léčených 3-AB. Následující studie u myší léčených SZ ukazují, že delece genu PARP poskytuje ochranu proti ztrátě beta buněk [Burkart a kol., Nátuře Med., 5, 314 (1999), Pieper a kol., Proč. Nati. Acad. Sci., 96, 3059 (1999)]. Tato pozorování podporují hypotézu, že PARP může nalézt terapeutické použití při léčení diabetů typu I.

Další možné terapeutické použití inhibitorů PARP zahrnuje zvýšení protitumorové aktivity záření nebo terapeutických prostředků poškozujících DNA [Griffin a kol., Biochem., 77, 408 (1995)]. Jelikož se polyADP-ribosylace objevuje jako odpověď na tyto způsoby léčení a je částí procesu reparace deoxyribonukleové kyseliny, lze očekávat, že inhibitor PARP poskytne synergní efekt.

Protein kinázy hrají, podobně jako PARP, kritickou úlohu při kontrole buněk. Zejména se kinázy účastní buněčného růstu a diferenciace. Odchylná exprese či mutace protein kináz rovněž vede k nekontrolované buněčné proliferací, jako je růst maligních tumorů a k různým vadám vývoje včetně buněčné migrace a invaze a angiogeneze. Protein kinázy jsou proto kritické pro ovládání, regulaci a modulaci buněčné proliferace při chorobách a poruchách souvisejících s abnormální buněčnou proliferací. Protein kinázy se též účastní jako cíle při poruchách centrálního nervového systému, jako je Alzheimerova choroba, při zánětlivých poruchách, jako je psoriáza, při kostních onemocněních, jako je osteoporóza, při ateroskleróze, restenóze, trombóze, při metabolických poruchách, jako je diabetes a při infekčních onemocněních, jako jsou virové a mykotické infekce.

-3 CZ 305350 B6

Jednou z nejběžněji studovaných cest zahrnujících regulaci kinázy je buněčná signalizace od receptorů na povrchu buňky k jádru. Obecně typ exprese, dostupnost ligandu a uspořádání sestupných cest převodu signálu, které se aktivují určitým receptorem, určují funkci každého receptoru. Jeden příklad cesty zahrnuje kaskádu kináz, ve kterých členové tyrosin kináz receptoru růstového faktoru dodávají signály prostřednictvím fosforylace k dalším kinázam, jako je Src tyrosin kináza a členové skupiny Raf, Mek a Erk serin/threonin kináz. Každá z těchto kináz je representovaná několika členy skupiny hrajícími příbuzné, avšak funkčně odlišné úlohy. Ztráta regulace cesty signalizace růstového faktoru se často vyskytuje při rakovině stejně tak jako při jiných chorobných stavech (Fearon, Genetic Lesions in Human Cancer, Molecular Oncology 1996, 143— 178).

Jedna z cest receptorové tyrosin kinázové signalizace zahrnuje receptorovou kinázu vaskulámího endotheliálního růstového faktoru (VEGF). Ukazuje se, že vazba VEGF na receptorovou VEGFR2 ovlivňuje buněčnou proliferací. Například vazba VEGF na receptor VEGFR-2/flt-l, který se primárně exprimuje na buňkách endothelu, vede k dimerizaci receptoru a zahájení složité kaskády, která způsobuje růst nových cév [Korpelainem a Alitalo, Curr. Opin. Cell. Biol., 10, 159 (1998)]. Potlačení tvorby nových cév inhibici tyrosin kináz VEGFR by bylo užitečné při řadě onemocnění včetně léčení solidních tumorů, diabetické retinopathie a dalších intraokulámích neovaskulámích syndromů, makulární degenerace, revmatické artritidy, psoriázy a endometriózy.

Přídavným způsobem převodu kinázového signálu je stresem aktivovaná cesta protein kinázy (SAPK) [Ip a Davis, Curr. Opin. Cell Biol., 10, 205 (1998)]. Jako odpověď na podněty, jako jsou cytokiny, osmotický šok, tepelný šok nebo jiné environmentální stresy, se tato cesta aktivuje a lze pozorovat dvojitou fosforylaci zbytků Thr a Tyr s motivem Thr-Pro-Tyr c-jun N-terminálních kináz (JNK). Fosforylace aktivuje JNK k následující fosforylaci a aktivaci různých transkripčních faktorů včetně c-Jun, ATF2 a ELK-1.

JNK jsou mitogenem aktivované protein kinázy (MAPK), které se kódují třemi rozdílnými geny jnkl, jnk2 a jnk3, které se mohou alternativně spojovat s obdržením řady různých isoforem JNK [Gupta a kol., EMBO J. 15, 2760 (1996)]. Tyto isoformy se liší svou schopností interagovat s cílovými substráty a fosforylovat je. Aktivace JNK se provádí dvěma kinázami MAPK (MAPKK), MKK4 a MKK7. MKK4 je aktivátorem JNK stejně tak jako další MAPK, p38, zatímco MKK7 je selektivním aktivátorem JNK. Rada kináz MAPKK je odpovědných za aktivaci MKK4 a MKK7 včetně skupiny MEKK a kinázy smíšené linie nebo skupiny MLK. Skupina MLK obsahuje šest členů včetně MLK1, MLK2, MLK3, MLK6, dvojité leucinové zipper kinázy (DLK) a leucinové zipper kinázy (LZK). MLK2 se též uvádí jako MST (Katoh, a kol., Oncogene, 10, 1447 (1994). Uvažuje se řady kináz vzestupně od MAPKK včetně, avšak bez omezení kinázy germinálního centra (GCK), hemopoetické progenitorové kinázy (HPK) a Rac/cdc42. Ke specifičnosti v rámci cesty přispívají alespoň částečně přemosťující proteiny, které vážou zvolené členy kaskády. Například protein—1 interagující s JNK (JIP—1) váže HPK1, DLK nebo MLK3, MKK7 a JNK, což vede k modulu, který zvyšuje aktivaci JNK [Dickens a kol., Science, 277, 693 (1997)].

Manipulace s aktivitou cesty SAPK může vést k širokému rozmezí účinků včetně podpory zániku i přežití buňky následkem různých proapoptických stimulů. Například sestupná regulace cesty genetickým porušením genu kódujícího JNK3 u myši poskytuje ochranu proti záchvatům vyvolaným kyselinou kainovou a brání apoptóze hipokampálních neuronů [Yang a kol., Nátuře, 389, 865 (1997)]. Podobně inhibitory cesty JNK, jako je JIP—1, inhibují apoptózu (Dickens, výše). Oproti tomu se ukazuje cesta JNK v některých případech jako ochranná. Thymocyty, ve kterých byla vypuštěna MKK4, vykazují zvýšenou citlivost na apoptózu zprostředkovanou CD95 a CD3 [Nishina a kol., Nátuře, 385, 350 (1997)]. Nadměrná exprese MLK3 vede k transformaci NIH 3T3 fibroblastů [Hartkamp a kol., Cancer Res., 59, 2195 (1999)].

Oblast tohoto vynálezu se zaměřuje na identifikaci sloučenin, které pozměňují členy MLK cesty SAPK a podporují buď buněčný zánik, nebo přežívání buněk. Inhibitory členů skupiny MLK by

-4CZ 305350 B6 měly podle předpokladu způsobovat přežívání buněk a vykazovat terapeutickou účinnost v řadě chorob včetně chronických neurodegenerativních onemocnění, jako je Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba a Huntingtonova choroba a akutních neurologických stavů, jako je mozková ischemie, traumatické poranění mozku a poranění páteře. Inhibitory členů skupiny MLK způsobujících inhibici cesty SAPK (aktivita JNK) by rovněž vykazovaly účinnost při zánětlivých chorobách a rakovině.

Dalším členem MAP kinázové skupiny bílkovin je kináza p38. Aktivace této kinázy se účastní tvorby prozánětlivých cytokinů, jako je IL—1 a TNF. Inhibice této kinázy by tedy nabízela léčení chorobných stavů, kterých se účastní disregulace cytokinové tvorby.

Signály zprostředkované kinázami rovněž kontrolují buněčný růst, zánik buněk a diferenciaci v buňce regulací procesu buněčného cyklu. Skupina kináz zvaná cyklin-dependentní kinázy (CDK) kontroluje průběh eukaryotického buněčného cyklu. Ztráta kontroly CDK regulace často nastává při hyperproliferativních onemocněních a rakovině.

Inhibitory kináz účastnících se zprostředkování či udržování konkrétních chorobných stavů představují nové způsoby léčby těchto poruch. Příklady takových kináz zahrnují Src, raf, cyklindependentní kinázy (CDK) 1, 2 a 4 a checkpoint kinázy Chkl a Cdsl při rakovině, CDK2 nebo PDGF-R kinázu při restenose, CDK5 a GSK3 kinázy při Alzheimerově chorobě, c-Src kinázu při osteoporose, GSK3 kinázu při diabetů typu 2, p38 kinázu při zánětu, VEGFR 1-3 a TIE-1 a 2 kinázy při angiogenezi, UL97 kinázu při virových infekcích, CSF-1R kinázu při kostních a hemopoetických chorobách a Lek kinázu při autoimunitních onemocněních a odmítnutí transplantátu.

V literatuře se uvádí řada sloučenin popisovaných jako PARP nebo kinázové inhibitory včetně prací Banasik a kol., J. Biol. Chem., 267, 1569 (1992) a Banasik a kol., Mol. Cell. Biochem., 138, 185 (1994). Mnohé další sloučeniny inhibující PARP jsou předmětem patentů. Například se sloučeniny popisované jako PARP inhibitory uveřejňují v publikacích WO 99/08680, WO 99/11622, WO 99/11623, WO 99/11624, WO 99/11628, WO 99/11644, WO 99/11645, WO 99/11649, WO 99/59973, WO 99/59975 a v US patentu 5 587 384.

Strukturně příbuzné sloučeniny, které se popisují jako látky s působením jiným než je inhibice PARP, se uveřejňují ve WO 99/47522, EP 0695755 a WO 96/28447. Další strukturně příbuzné sloučeniny, způsoby jejich přípravy a jejich prekurzory se popisují v pracích Piers a kol., J. Org. Chem., 65, 530 (2000), Berlinck a kol., J. Org. Chem., 63, 9850 (1998), McCort a kol., Tetrahedron Lett., 40, 6211 (1990), Mahboobi a kol., Tetrahedron, 52 6363 (1996), Rewcastle a kol., 39, 918 (1996), Harris a kol., Tetrahedron Lett., 34, 8361 (1993), Moody a kol., J. Org. Chem., 57, 2105 (1992), Ohno a kol., Heterocycles, 32, 1199 (1991), Eitel a kol., J. Org. Chem., 55, 5368 (1990), Krutošíková a kol., Coll. Czech. Chem. Commun., 53, 1770 (1988), Muchowski a kol., Tetrahedron Lett., 28, 3453 (1987), Jones a kol., J. Chem. Soc., Perkin Trans., I, 2541 (1984), Noland a kol., J. Org. Chem., 48, 2488 (1983), Jones a kol., J. Org. Chem., 45, 4515 (1980), Leonard a kol., J. Am. Chem. Soc., 98, 3987 (1976), Rashidan a kol., Arm. Khim. Zh., 21, 793 (1968), Abrash a kol., Biochemistry, 4, 99 (1965), US patent 5 728 709, US patent 4912 107, EP0768311, JP 04230385, WO 99/65911, WO99/41276, WO 98/09967 a WO 96/11933.

Vzhledem k potenciální úloze při terapeutickém léčení neurodegenerativních chorob, karcinomů a dalších chorob souvisejících s PARP a kinázami jsou inhibitory PARP a kinázy důležitou skupinou sloučenin vyžadujících další objevy, výzkumy a vývoj. I když je známo široké rozmezí inhibitorů PARP a kinázy, vyznačují se mnohé z nich problémy, jako je toxicita, špatná rozpustnost a omezená účinnost, které brání praktickému terapeutickému použití a znemožňují další vývoj pro obdržení účinných léků. Proto existuje současná a bezprostřední potřeba nových inhibitorů PARP a kinázy pro léčení chorob souvisejících s PARP a kinázou. Tento vynález se zaměřuje na tento cíl stejně tak jako na další důležité úkoly.

-5CZ 305350 B6

Podstata vynálezu

Předmětem nárokovaného vynálezu je multicyklická karbazolová a karbazollaktamová sloučenina obecného vzorce IVa

ve kterém

A a B je každý nezávisle na sobě skupina vzorce C(=O), CH(OR³), CH(SR³), CH₂, CHR³, CHR³CHR⁴, CR³R⁴ nebo C(=O)NR³, za předpokladu, že jak A, tak B nejsou oba skupiny C(=O),

E a F, dohromady s atomy uhlíku, ke kterým jsou připojeny, tvoří substituovanou ěi nesubstituovanou C₄ až C7 cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina obsahuje alespoň jeden substituent J,

V je skupina N(R*), atom kyslíku nebo atom síry,

R¹ je atom vodíku, Cj až C₆ alkylová skupina, Ci až C₆ alkylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J, formylová skupina, Ci až C₆ alkanoylová skupina, Cj až C₆ alkanoylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J, C] až Ce alkylsulfonylová skupina, arylsulfonylová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny,

R² je atom vodíku, Cj až C₆ alkylová skupina, Cj až C₆ alkylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J, formylová skupina, Ci až C₆ alkanoylová skupina, Ci až C₆ alkanoylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J, Cj až C₆ alkylsulfonylová skupina, arylsulfonylová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny,

R³ a R⁴ jsou každý nezávisle atom vodíku, C] až C<, alkylová skupina, arylová skupina, C] až C₆alkylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J nebo arylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J,

J je J³—(J²)_n—(J^)m, kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J¹ a J² jsou každý nezávisle karbonylová skupina, Ci až C₆ alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, Ci až C₆ alkylaminoskupina, C₂ až C_X2 dialkylaminoskupina, amidová skupina, CJ až C₆ alkylamidová skupina, C₂ až C_[2 dialkylamidová skupina, Ci až C₆ alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, Ci až C₆ alkoxyskupina, aryloxyskupina, aryl- C_f až C₆ alkoxyskupina, C, až C₆ alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, C₄ až C₆alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

-6CZ 305350 B6

J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina Ci až C₆ alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, Ci až C₆ alkyloxykarbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, Ci až C₆ alkylová skupina, skupina Cj až C₆ alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, aminokarbonyloxyskupina, heteroarylová skupina nebo heterocykloalkylová skupina, přičemž kterékoliv dvě přilehlé skupiny J mohou být spojeny za vytvoření skupiny -X-(CH₂)_PX-, kde X je nezávisle atom kyslíku nebo skupina NH a p je 1 nebo 2, s tím, že „aryl“ znamená aromatický kruhový systém vybraný ze skupiny zahrnující fenylovou skupinu, nafitylovou skupinu, anthracenylovou skupinu a fenanthrenylovou skupinu, „heteroaiyl“ znamená aromatický kruhový systém vybraný ze skupiny, ve které je zahrnuta pyrrolylová skupina, pyridylová skupina, furylová skupina, 1,2,4-thiadiazolylová skupina, pyrimidylová skupina, thienylová skupina, thiofenylová skupina, isothiazolylová skupina, imidazolylová skupina, tetrazolylová skupina, pyrazinylová skupina, pyrimidylová skupina, chinolylová skupina, isochinolylová skupina, thiofenylová skupina, benzothienylová skupina, isobenzofurylová (neboli isobenzofuranylová) skupina, pyrazolylová, indolylová skupina, purinylová skupina, karbazolylová skupina, benzimidazolylová skupina, isoxazolylová skupina a akridinylová skupina, „heterocykloalkyl“ znamená monocyklickou nasycenou nebo částečně nenasycenou skupinu, ve které je zahrnuta 2-pyrrolidinylová skupina, 3-pyrrolidinylová skupina, piperidinylová skupina, 2-tetrahydrofuranylová skupina, 3-tetrahydrofuranylová skupina, 2-tetrahydrothienylová skupina a 3-tetrahydrothienylová skupina, a „chránící skupina aminokyseliny“ (neboli skupina chráněné aminokyseliny) pro aminoskupinu aminokyseliny je terc-butoxykarbonylová skupina nebo benzyloxykarbonylová skupina, pro karboxylovou skupinu aminokyseliny je alkyl- nebo aralkylester, přičemž alkylová část obsahuje vždy 1 až 6 atomů uhlíku, a pro alkoholovou skupinu aminokyseliny je alkyletherová, aralkyletherová nebo silyletherová skupina, přičemž alkylová část obsahuje vždy 1 až 6 atomů uhlíku, nebo její sůl.

Výhodným provedením nárokovaného vynálezu je svrchu vymezená multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina obecného vzorce IVa, ve kterém J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, Ci až C₆ alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, Ci až C₆ alkyloxykarbonylová skupina, skupina fosfonové kyseliny, Ci až C₆ alkylová skupina, skupina Ci až C₆alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, přičemž „aryl“ má stejný význam, jako je definován svrchu.

Výhodným provedením nárokovaného vynálezu je svrchu vymezená multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina obecného vzorce IVa, ve kterém V je N(R?), skupiny E a F spolu s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří C₅ cykloalkylovou skupinu a A a B jsou nezávisle skupiny C(=O) nebo CH₂.

Výhodným provedením nárokovaného vynálezu je svrchu vymezená multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina obecného vzorce IVa, ve kterém B je skupina CO, J je atom vodíku, V je skupina vzorce NR¹ a E a F, dohromady s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří cyklopentylovou skupinu a A je CH2, R¹ je CH3, (BOC)2Lys nebo Lys a R² je atom vodíku, přičemž BOC znamená terc-butoxykarbonylovou skupinu.

-7CZ 305350 B6

Výhodným provedením nárokovaného vynálezu je svrchu vymezená multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina obecného vzorce IVa, ve kterém B je skupina CO, R² je atom vodíku, V je skupina vzorce NH a E a F, dohromady s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří cyklopentylovou skupinu a A a J mají významy, které jsou uvedeny v tabulce dále:

A	J
ch₂	Cl
ch₂	co₂h
ch₂	CO2CH3
ch₂	conhch₂ch₂n (CH₃) 2
ch₂	CONHCH₂CH₂NC4H8O
ch₂	CONC4H8O
ch₂	CON (CH₃) CH₂ (4-Pyr)

ch₂	CON (CH₃)CH₂CH₂ (1-imidazol)
ch₂	CON (CH₃) CH₂ (2-Pyr)
CHOH	H
CHOH	CH2NHCHO
CH₂	H
ch₂	Br
CH₂	CN
ch₂	ch₂nh₂
ch₂	ch₃
ch₂	(BOC)₂Lys-NHCH₂
ch₂	Lys-NHCH₂

Výhodným provedením nárokovaného vynálezu je svrchu vymezená multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina obecného vzorce IVa, ve kterém

V je skupina vzorce NR¹ a A, Β, E, F, R¹ a R² mají významy, které jsou uvedeny v tabulce dále:

-8CZ 305350 B6

A	B	E	F	J	R¹	R²
CH2	CO	(CH₂)3	H	H	H
CH2	CO	(CH₂)3	H	H	CHO
ch₂	co	(CH₂)3	3-Br	Lys	H
ch₂	CO	(CH₂) 3	3-CN	Lys	H
CO-NH	CO-NH	(CH₂)3	H	H	H
CO	CH2	(CH₂)3	H	H	H

Předmětem nárokovaného vynálezu je také farmaceutický přípravek, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje jakoukoli multicyklickou karbazolovou nebo karbazollaktamovou sloučeninu obecného vzorce IVa, vymezenou svrchu, a farmaceuticky přijatelný nosič.

Předmětem tohoto vynálezu je rovněž použití jakékoli multicyklické karbazolové nebo karbazollaktamové sloučeniny obecného vzorce IVa, vymezení svrchu, pro výrobu léčiva pro

a) inhibici aktivity PARP, VEGFR2 nebo MLK3 jejich přivedením do styku s uvedenou sloučeninou,

b) léčení nebo prevenci neurodegenerativního onemocnění, jako je Parkinsonova choroba, Huntingtonova choroba nebo Alzheimerova choroba,

c) léčení traumatických poškození centrální nervové soustavy nebo prevenci neuronové degenerace související s traumatickým poškozením centrální nervové soustavy,

d) léčení mozkové ischémie, srdeční ischémie, zánětu, endotoxického šoku nebo diabetů,

e) potlačování tvorby krevních cév u savce,

f) léčení buněčných proliferačních poruch, jako buněčné proliferační poruchy týkající se pevných nádorů, diabetické retinopatie, intraokulámích neovaskulámích syndromů, makulámí degenerace, revmatické artritidy, psoriázy nebo endometriózy nebo

g) léčení rakoviny u savce.

Předmět nárokovaného vynálezu je vyloučen z předmětu přihlášky vynálezu PV 2002-3679. Pokud jsou v tomto popisu uvedeny údaje, které jsou předmětem přihlášky vynálezu PV 20023679, jsou zde zahrnuty k účelům srovnávacím a pro poskytnutí informace o celém rozsahu nalezeného vynálezu. Vynález ve své úplnosti je v další části popisu označován jako „tento vynález“, zatímco pod označení „nárokovaný vynález“ spadají řešení, která jsou výlučně podle předmětu této přihlášky.

Přihlašovatel se vzdává úsilí o získání dvojí ochrany pro určitou část nalezeného řešení.

Objasnění výkresů

Obrázek 1 znázorňuje schéma zahrnující sloučeniny podle tohoto vynálezu a její prekurzory. Obrázek 2 ukazuje obecný způsob přípravy pro získání sloučenin v rámci tohoto vynálezu. Obrázek 3 ukazuje další obecný způsob přípravy pro získání sloučenin v rámci tohoto vynálezu. Obrázek 4 ukazuje další obecný způsob přípravy pro získání sloučenin v rámci tohoto vynálezu.

-9CZ 305350 B6

Obrázek 5 ukazuje další obecný způsob přípravy pro získání sloučenin v rámci tohoto vynálezu.

Obrázek 6 ukazuje další obecný způsob přípravy pro získání sloučenin v rámci tohoto vynálezu.

Obrázek 7 ukazuje způsob přípravy pro získání benzimidazolových derivátů podle tohoto vynálezu.

Obrázek 8 ukazuje způsob přípravy pro získání sloučenin podle tohoto vynálezu.

Dále se popisují preferovaná ztělesnění.

Tento vynález se částečně zaměřuje na nové multicyklické sloučeniny, které mohou být vysoce užitečné ve spojení s inhibici PARP, VEGFR2, MLK3 či dalších enzymů. Tyto nové sloučeniny se popisují podrobněji níže.

Konkrétně se jedno ztělesnění tohoto vynálezu týká nových multicyklických sloučenin obecného vzorce I

ve kterém

A a B jsou nezávisle na sobě skupiny C(=O), CH(OR³), CH(SR³), CH2, CHR³, CHR³CHR⁴, CR³R⁴, C(=O)NR³, N=CR³, SO nebo SO2,

Y a Z spolu s atomy uhlíku, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde tato arylová skupina je monocyklická či bicyklická a substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou bicyklickou heteroarylovou skupinu, kde tato substituovaná bicyklická heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo C₃ až C₅ heteroarylovou skupinu,

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C4 až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až C_f, heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

- 10CZ 305350 B6 · ·

R je atom vodíku, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, formylová skupina, acetylová skupina, nižší alkanoylová skupina, nižší alkanoylová skupina mající alespoň jeden substituent J, nižší alkylsulfonylová skupina, arylsulfonylová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny,

R³ a R⁴ jsou oba nezávisle atom vodíku, nižší alkylová skupina, arylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J nebo arylová skupina mající alespoň jeden substituent J,

G je atom kyslíku, atom síry, skupina SO, SO₂, NR², NR³, NR²CO, NR²CONR³, NR²SO2 nebo NR³SO2,

J je J³-(J²)_n(J' jm, kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J¹ a J² jsou oba nezávisle skupiny zvolené z následujících případů: karbonylová skupina, nižší alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, nižší alkylaminoskupina, nižší dialkylaminoskupina, amidová skupina, nižší alkylamidová skupina, nižší dialkylamidová skupina, nižší alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, nižší alkoxyskupina, nižší aryloxyskupina, aralkoxyskupina, nižší alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, nižší alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, nižší alkylová skupina, skupina nižšího alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny s podmínkami, že jestliže jeden ze substituentů A a B je skupina C(=O) a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří fenylovou skupinu, potom je druhý z A a B odlišný od skupiny C(=O) a pokud A a B jsou skupiny C(=O) a Y a Z spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří nesubstituovaný indol-2, 3-diyl a R² je atom vodíku, potom E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří jinou skupinu než je nesubstituovaná imidazolová či N-methylimidazolová skupina.

V dalším ztělesnění tento vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce la

ve kterém

- 11 CZ 305350 B6

A a B jsou nezávisle na sobě skupiny C(=O), CH(OR³), CH(SR³), CH₂, CHR³, CH³CHR⁴,

CR³R⁴, C(=0)NR³, N=CR³, SO nebo SO₂,

YaZ spolu s atomy uhlíku, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde tato arylová skupina je monocyklická či bicyklická a substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou bicyklickou heteroarylovou skupinu, kde tato substituovaná bicyklická heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo C₃ až C₅ heteroarylovou skupinu,

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C4 až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až C₆ heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

R² je atom vodíku, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, formylová skupina, acetylová skupina, nižší alkanoylová skupina, nižší alkanoylová skupina mající alespoň jeden substituent J, nižší alkylsulfonylová skupina, arylsulfonylová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny,

J je J³-(J²)n—(J¹ )m, kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J¹ aJ² jsou oba nezávisle skupiny zvolené z následujících případů: karbonylová skupina, nižší alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, nižší alkylaminoskupina, nižší dialkylaminoskupina, amidová skupina, nižší alkylamidová skupina, nižší dialkylamidová skupina, nižší alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylamioskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, nižší alkoxyskupina, nižší aryloxyskupina, aralkoxyskupina, nižší alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, trioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonová kyseliny karboxylová skupina, nižší alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, nižší alkylová skupina, skupina nižšího alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, aminokarbonyloxyskupina, heteroarylová skupina nebo heterocykloalkylová skupina a kterékoliv dvě přilehlé skupiny J se mohou spojovat s vytvářením -X-(CH₂)p-X-, kde X je nezávisle atom kyslíku nebo skupina NH a p je 1 nebo 2.

- 12CZ 305350 B6 s podmínkami, že jestliže jeden ze substituentů A a B je skupina C(=0) a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří fenylovou skupinu, potom je druhý z A a B odlišný od skupiny C(=O) a pokud A a B jsou skupiny C(=O) a Y a Z spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří nesubstituovaný indol —2,3—diyl a R² je atom vodíku, potom E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří jinou skupinu než je nesubstituovaná imidazolová či N-methylimidazolová skupina.

V dalších preferovaných ztělesněních tento vynález zahrnuje sloučeniny obecného vzorce I nebo a, ve kterých E a F ve spolu s atomy uhlíku, ke kterým se připojují, vytvářejí C_f cykloalkylovou skupinu.

V preferovaném ztělesnění tohoto vynálezu se poskytují multicyklické sloučeniny obecného vzorce Ila

ve kterém

A a B jsou nezávisle na sobě skupiny C(=O), CH(OR³), CEI(SR³), CH2, CHR³, CHR³CHR⁴, CR³R⁴, C(=O)NR³, N=CR³, SO nebo SO2,

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až C₆ heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná hetero cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

G je atom kyslíku, atom síry, skupina SO, NO₂, NR², NR³, NR²CO, NR²CONR³, NR²SO2 nebo NR³SO2,

R¹ je atom vodíku, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, formylová skupina, acetylová skupina, nižší alkanoylová skupina, nižší alkanoylová skupina mající alespoň jeden substituent J, nižší alkylsulfonylová skupina, arylsulfonylová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny, ·

-13 CZ 305350 B6

J je J³—(J²)_n—(j')m5 kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J¹ a J² jsou oba nezávisle skupiny zvolené z následujících případů: karbonylová skupina, nižší alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, nižší alkylaminoskupina, nižší dialkylaminoskupina, amidová skupina, nižší alkylamidová skupina, nižší dialkylamidová skupina, nižší alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, nižší alkoxyskupina, nižší aryloxyskupina, aralkoxyskupina, nižší alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné amino kyseliny a

J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, nižší alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, nižší alkylová skupina, skupina nižšího alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny,

D¹ a D² jsou nezávisle skupiny N(X'), N(X²), QRfyX¹), C(R')(X²), C(=O), atom síry nebo atom kyslíku a

X¹ a X² jsou oba nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupina J, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₃až C₇ cykloalkylová skupina, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₂ až C₆ heterocykloalkylová skupina, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná Či nesubstituovaná heteroarylová skupina, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo Xi a X₂ spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J.

V preferovaném ztělesnění tohoto vynálezu se poskytují multicyklické sloučeniny obecného vzorce Ilaa

- 14CZ 305350 B6 ve kterém

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ ažCe heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou ěi nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou ěi nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná aiylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

G je atom kyslíku, atom síry, skupina SO, SO₂, NR², NR³, NR²CO, NR²CONR³, NR²SO2 neboNR³SO2,

R¹ je atom vodíku, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, formylová skupina, acetylová skupina, nižší alkanoylová skupina, nižší alkanoylová skupina mající alespoň jeden substituent J, nižší alkylsulfonylová skupina, arylsulfonylová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny,

J je J³—(J²)_n—kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J¹ aJ² jsou oba nezávisle skupiny zvolené z následujících případů: karbonylová skupina, nižší alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, nižší alkylaminoskupina, nižší dialkylaminoskupina, amidová skupina, nižší alkylamidová skupina, nižší dialkylamidová skupina, nižší alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, nižší alkoxyskupina, nižší aryloxyskupina, aralkoxyskupina, nižší alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, nižší alkylová skupina, aiyloxykarbonylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, nižší alkylová skupina, skupina nižšího alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, aminokarbonyloxyskupina, heteroarylová skupina nebo heterocykloalkylová skupina a kterékoliv dvě přilehlé skupiny J se mohou spojovat s vytvořením -X-fCH₂)_p-X-, kde X je nezávisle atom kyslíku nebo skupina NH a p je 1 nebo 2.

- 15CZ 305350 B6

D¹ a D² jsou nezávisle skupiny N(X’), N(X²), C(R’)(X’), CCR^CX²), C(=O), atom síry nebo atom kyslíku a

X¹ a X² jsou oba nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupina J, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₃až C₇ cykloalkylová skupina, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₂ až Cý heterocykloalkylová skupina, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo Xj a X₂ spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J.

Preferovaná ztělesnění podle tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny obecného vzorce Ila nebo Ilaa, ve kterých

A a B jsou oba nezávisle skupiny C(=O), CH₂, CH(OR³) nebo CH(SR³) a

E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až C₆ heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky obsahující alespoň jednu skupinu G, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J a G je atom kyslíku, atom síry, skupina SO, SO₂, NR², NR³, NR²CO, NR²CONR³, NR²SO2 nebo NR³SO2.

A a B jsou oba nezávisle skupiny C(=O), CH₂, CH(OR³) nebo CH(SR³) a

E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J.

V alternativním preferovaném ztělesnění tohoto vynálezu se poskytují sloučeniny obecného vzorce lib

- 16CZ 305350 B6 ve kterém

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až C₆ heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

J je J³-(J²)_n-(J')_m, kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J¹ a J² jsou oba nezávisle skupiny zvolené z následujících případů: karbonylová skupina, nižší alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, nižší alkylaminoskupina, nižší dialkylaminoskupina, amidová skupina, nižší alkylamidová skupina, nižší dialkylamidová skupina, nižší alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, nižší alkoxyskupina, nižší aryloxyskupina, aralkoxyskupina, nižší alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, alkylsulfonylamidová skupina, aryl sulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

D¹ a D² jsou nezávisle skupiny C(X'), C(X²) nebo atom dusíku,

-17CZ 305350 B6

X¹ aX²jsou oba nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupina J, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₃až C₇ cykloalkylová skupina, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₂ až C₍₎ heterocykloalkylová skupina, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo X] a X₂ spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J s podmínkami, že jestliže jeden z A a B je skupina C(=O) a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří fenylovou skupinu, potom druhý z A a B je jiná skupina než C(=O) a pokud A a B jsou skupiny C(=O) a D¹ a D² jsou C(X*) nebo C(X²), ve kterých X¹ a X² spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří nesubstituovanou fenylovou skupinu a R² je atom vodíku, potom E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří skupinu jinou než je nesubstituovaná imidazolová nebo N-methylimidazolová skupina.

V alternativním preferovaném ztělesnění tohoto vynálezu se poskytují sloučeniny obecného vzorce llbb

(llbb) ve kterém

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až Ce heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

- 18CZ 305350 B6

J je J³-(J²)_n—(J')m, kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, nižší alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, nižší alkylová skupina, skupina nižšího alkylesterů fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, aminokarbonyloxyskupina, heteroarylová skupina nebo heterocykloalkylová skupina a kterékoliv dvě přilehlé skupiny J se mohou spojovat s vytvořením -X-(CH₂)_P-X-, kde X je nezávisle atom kyslíku nebo skupina NH a p je 1 nebo 2.

D¹ a D² jsou nezávisle skupiny C(X’), C(X²) nebo atom dusíku,

X¹ a X² jsou oba nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupina J, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₃až C₇ cykloalkylová skupina, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₂ až C₆ heterocykloalkylová skupina, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo X] a X₂ spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou ěi nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou ěi nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J s podmínkami, že jestliže jeden z A a B je skupina C(=O) a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří fenylovou skupinu, potom druhý z A a B je jiná skupina než C(=O) a pokud A a B jsou skupiny C(=O) a D¹ a D² jsou C(X^]) nebo C(X²), ve kterých X¹ a X² spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří nesubstituovanou fenylovou skupinu a R² je atom vodíku, potom E a F

- 19CZ 305350 B6 spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří skupinu jinou než je nesubstituované imidazolová nebo N-methylimidazolová skupina.

Preferovaná ztělesnění tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny obecného vzorce lib nebo Ilbb, ve kterých

A je C(=O), CH₂, CH(OR³) nebo CH(SR³),

B je C(=O) a

E a F jsou nezávisle na sobě methylová skupina nebo

E a F spolu s atomy uhlíku, ke kterým se připojují, tvoří C5 cykloalkylovou skupinu.

Další preferovaná ztělesnění tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny obecného vzorce lib nebo Ilbb, ve kterém

A je skupina C(=O),

B je skupina CH₂ a

E a F spolu s atomy uhlíku, ke kterým se připojují, tvoří C₅ cykloalkylovou skupinu.

A a B jsou oba nezávisle skupiny C(=O), CH₂, CH(OR³) nebo CH(SR³) a

E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C4 až C₇cykloalkylovou skupinu, kde substituovaná cykloalkylové skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až C₅ heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J.

G je skupina definovaná výše.

A a B jsou oba nezávisle skupiny C(=O), CH₂, CH(OR³) nebo CH(SR³) a

E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J s podmínkami, že jestliže jeden z A a B je skupina C(=O) a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří fenylovou skupinu, potom druhý z A a B je jiná skupina než C(=O) a pokud A a B jsou skupiny C(=O) a D¹ a D² jsou C(X*) nebo C(X²), ve kteiých X¹ a X² spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří nesubstituovanou fenylovou skupinu a R² je atom vodíku, potom E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří skupinu jinou než je nesubstituované imidazolová nebo N-methylimidazolová skupina.

-20CZ 305350 B6

V dalším ztělesnění tohoto vynálezu se poskytují sloučeniny obecného vzorce III

(III) ve kterém

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až C₆ heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou ěi nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

J je J³—(J²)_n—(J')_m, kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J¹ a J² jsou oba nezávisle skupiny zvolené z následujících případů: karbonylová skupina, nižší alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, nižší alkylaminoskupina, nižší dialkylaminoskupina, amidová

-21 CZ 305350 B6 skupina, nižší alkylamidová skupina, nižší dialkylamidová skupina, nižší alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, nižší alkoxyskupina, nižší aryloxyskupina, aralkoxyskupina, nižší alkylová skupina, C₃ až C7 cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

X¹ a X² jsou oba nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupina J, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₃až C₇ cykloalkylová skupina, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₂ až C₆ heterocykloalkylová skupina, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo Xi a X₂ spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J s podmínkami, že jestliže jeden z A a B je skupina C(=O) a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří fenylovou skupinu, potom druhý z A a B je jiná skupina než C(=O) a pokud A a B jsou skupiny C(=O) a D¹ a D² jsou C(X’) nebo C(X²), ve kterých X¹ a X² spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří nesubstituovanou fenylovou skupinu a R² je atom vodíku, potom E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří skupinu jinou než je nesubstituovaná imidazolová nebo N-methylimidazolová skupina.

V jednom preferovaném ztělesnění mají sloučeniny obecného vzorce III E a F spojené spolu s atomy, ke kterým se připojují, s vytvořením C₅ cykloalkylové skupiny.

V dalším ztělesnění tohoto vynálezu se poskytují sloučeniny obecného vzorce lila

(lila) ve kterém

-22CZ 305350 B6

A a B jsou nezávisle na sobě skupiny C(=O), CH(OR³), CH(SR³), CH2, CHR³, CHR³CHR⁴, CR³R⁴, C(=0)NR³, N=CR³, SO nebo SO2,

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C3 až C₆ heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou aiylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

J je J -{J )_n-(J )_m, kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

2

J aJ jsou oba nezávisle skupiny zvolené z následujících případů: karbonylová skupina, nižší alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, nižší alkylaminoskupina, nižší dialkylaminoskupina, amidová skupina, nižší alkylamidová skupina, nižší dialkylamidová skupina, nižší alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, nižší alkoxyskupina, nižší aryloxyskupina, aralkoxyskupina, nižší alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, nižší alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, alkyloxykarbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, nižší alkylová skupina, skupina nižšího alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, aminokarbonyloxyskupina, heteroarylová skupina nebo heterocykloalkylová skupina a kterékoliv dvě přilehlé skupiny J se mohou spojovat s vytvořením -X-(CH₂)_P-X-, kde X je nezávisle atom kyslíku nebo skupinu NH a p je 1 nebo 2.

12’ r · r

X aX jsou oba nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupina J, nižší alkylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₃

-23CZ 305350 B6 až C₇ cykloalkylové skupina, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná C₂ až C₆ heterocykloalkylová skupina, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná arylová skupina, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovaná či nesubstituovaná heteroarylová skupina, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo X] a X₂ spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde substituovaná alkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou arylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jeden substituent J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J s podmínkami, že jestliže jeden z A a B je skupina C(=O) a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří fenylovou skupinu, potom druhý z A a B je jiná skupina než C(=O) a pokud A a B jsou skupiny C(=O) a D¹ a D² jsou C(X’) nebo C(X²), ve kterých X¹ a X² spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří nesubstituovanou fenylovou skupinu a R² je atom vodíku, potom E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří skupinu jinou než je nesubstituovaná imidazolová nebo N-methylimidazolová skupina.

V jednom preferovaném ztělesnění mají sloučeniny obecného vzorce lila skupiny E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří C₅ cykloalkylovou skupinu.

Další preferovaná ztělesnění obecného vzorce III nebo lila zahrnují taková ztělesnění, ve kterých jsou X¹ a X² substituované či nesubstituovaná heteroarylové skupiny, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J.

Další preferovaná ztělesnění sloučenin obecného vzorce III nebo lila zahrnují taková ztělesnění, ve kterých A a B jsou nezávisle na sobě skupina C(=O) nebo CH₂.

Další preferovaná ztělesnění zahrnují sloučeniny obecného vzorce III nebo lila, ve kterých skupiny E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří C₅ cykloalkylovou skupinu, skupiny X¹ a X² jsou substituované či nesubstituovaná heteroarylové skupiny, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J a A a B jsou nezávisle na sobě skupiny C(=O) nebo CH₂. Přednostněji jsou X¹ a X² substituované či nesubstituované pyridylové či pyrimidylové skupiny, kde substituovaná pyridylová či pyrimidylová skupina má alespoň jeden substituent J a A a B jsou skupiny C(=O).

V jiném ztělesnění tohoto vynálezu se poskytují sloučeniny obecného vzorce IV

(IV) ve kterém

-24CZ 305350 B6

E a F jsou oba nezávisle nižší alkylové skupiny nebo E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou C₃ až Ce heterocykloalkylovou skupinu, kde substituovaná heterocykloalkylová skupina má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou heterocykloalkylovou skupinu obsahující endocyklicky alespoň jednu skupinu G, kde tato substituovaná heterocykloalkylová skupina obsahující skupinu G má alespoň jeden substituent J, substituovanou či nesubstituovanou aiylovou skupinu, kde substituovaná arylová skupina má alespoň jednu skupinu J nebo substituovanou či nesubstituovanou heteroarylovou skupinu, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jednu skupinu J,

V je skupina N(R^]), atom kyslíku nebo atom síry,

R³ a R⁴ jsou oba nezávisle atom vodíku, nižší alkylová skupina, aiylová skupina, nižší alkylová skupina mající alespoň jeden substituent J nebo arylová skupina mající alespoň jeden substituent J,

J je Ú-ČÚjn-čfbm, kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1, j’ a J² jsou oba nezávisle skupiny zvolené z následujících případů: karbonylová skupina, nižší alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, nižší alkylaminoskupina, nižší dialkylaminoskupina, amidová skupina, nižší alkylamidová skupina, nižší dialkylamidová skupina, nižší alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, nižší alkoxyskupina, nižší aryloxyskupina, aralkoxyskupina, nižší alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová nebo chráněné aminokyseliny a skupina, sulfonylamidová skupina, alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

J je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, nižší alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, alkyloxy- karbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, nižší alkylová skupina, skupina nižšího alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, s podmínkami, že jestliže jeden z A a B je skupina C(=O) a E a F spolu s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří fenylovou skupinu, potom druhý z A a B je jiná skupina než C(=O) a pokud A a B jsou skupiny (C=O) a D¹ a D² jsou C(X’) nebo C(X²), ve kterých X¹ a X² spolu s atomy, ke

-25 CZ 305350 B6 kterým jsou připojeny, tvoří nesubstituovanou fenylovou skupinu a R² je atom vodíku, potom E a F spolu s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří skupinu jinou než je nesubstituovaná imidazolová nebo N-methylimidazolová skupina.

Výhodné ztělesnění tohoto vynálezu poskytuje sloučeniny obecného vzorce IVa, které jsou předmětem nárokovaného vynálezu.

Určitá preferovaná ztělesnění zahrnují sloučeniny obecného vzorce IV nebo IVa, kde V je skupina N(R*), skupiny E a F spolu s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří C5 cykloalkylovou skupinu a A a B jsou nezávisle skupiny C(=O) nebo CH₂.

Další preferovaná ztělesnění zahrnují sloučeniny obecného vzorce IV, které mohou být zvláště důležité z hlediska inhibice PARP, ve kterých substituenty A a B jsou oba skupiny CO, R² a J jsou oba Η, E a F a spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří cyklopentylovou skupinu a V je buď skupina NH (la, viz tabulku 1) nebo N-(lysin.2 HC1) (lk, viz tabulku 1). Navíc sloučenina obecného vzorce IV, ve které oba substituenty A a B jsou skupiny CO, R² je Η, V je NH, E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří cyklopentylovou skupinu a J je substituent NH₂CH₂ v poloze 3 (2p, viz tabulku 2) zahrnuje další preferovaná ztělesnění.

Preferovaná ztělesnění tohoto vynálezu, která mohou být zvláště relevantní pro inhibici VEGFR2, zahrnují sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterých jsou oba substituenty A a B skupiny CO, E a F společně tvoří -CH=NCH=CH-, V je NH, R² je atom vodíku a J je buď H (12a, viz tabulku 5) nebo 3-CH₃ (12n, viz tabulku 5).

Další preferovaná ztělesnění sloučenin, které se zde popisují, zahrnují taková ztělesnění, ve kterých skupiny E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří jinou než imidazolylovou skupinu.

Další preferovaná ztělesnění sloučenin, která se zde popisují, zahrnují taková ztělesnění, ve kterých skupiny E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří C5 cykloalkylovou skupinu. Další ztělesnění sloučenin, které se zde popisují, zahrnují taková ztělesnění, ve kterých X¹ a X² jsou substituované či nesubstituovaná heteroarylové skupiny, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J. Další preferovaná ztělesnění sloučenin, které se zde popisují, zahrnují taková ztělesnění, ve kterých A a B jsou nezávisle skupiny C(=O) nebo CH₂.

Další preferovaná ztělesnění sloučenin, která se zde popisují, zahrnují taková ztělesnění, ve kterých skupiny E a F spolu s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří C₅ cyklo- alkylovou skupinu, X¹ a X² jsou nesubstituovaná či substituované heteroarylové skupiny, kde substituovaná heteroarylová skupina má alespoň jeden substituent J a A a B jsou nezávisle skupiny C(=O) nebo CH₂. Pojem „alkylová skupina“, jak se zde používá, pokud se neuvádí jinak, se vztahuje ke zbytku nasyceného přímého, rozvětveného či cyklického uhlovodíku, který obsahuje minimální možný počet atomů uhlíku až 20 atomů uhlíku. Alkylové skupiny zahrnují, avšak bez omezení, methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, isopropylovou skupinu, n-butylovou skupinu, isobutylovou skupinu, terc-butylovou skupinu, n-pentylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu, isopentylovou skupinu, neopentylovou skupinu, n-hexylovou skupinu, isohexylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, cyklooktylovou skupinu, adamantylovou skupinu, 3methylpentylovou skupinu, 2,2-dimethylbutylovou skupinu a 2,3-dimethylbutylovou skupinu.

Pojem „nižší alkylová skupina“, jak se zde užívá a pokud není uvedeno jinak, se týká nasyceného přímého, rozvětveného či cyklického zbytku uhlovodíku s až 6 atomy uhlíku. Nižší alkylové skupiny zahrnují, avšak bez omezení, methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, isopropylovou skupinu, n-butylovou skupinu, isobutylovou skupinu, terc-butylovou skupinu, n-pentylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu, isopentylovou skupinu, neopentylovou skupinu, n-hexylovou skupinu, isohexylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, 3-methylpentylovou skupinu, 2,2—dimethylbutylovou skupinu a 2,3—dimethylbutylovou skupinu.

-26CZ 305350 B6

Pojmy „cykloalkylová skupina“ a „C_n cykloalkylová skupina“ se týkají monocyklických nasycených či částečně nenasycených uhlovodíkových skupin. V této souvislosti označení „C_n“, kde n je celé číslo, značí počet atomů uhlíku v kruhu této cykloalkylové skupiny. Například C₆ cykloalkylová skupina označuje šestičlenný kruh. Vazby spojující endocyklické uhlíkové atomy cykloalkylové skupiny mohou být jednotlivé nebo tvořit část kondenzovaného aromatického zbytku, pokud cykloalkylová skupina není aromatická. Příklady cykloalkylových skupin zahrnují, avšak bez omezení, cyklopropylovou skupinu, cyklobutylovou skupinu cyklopentylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu a cykloheptylovou skupinu.

Pojmy „heterocykloalkylová skupina“ nebo „C_n heterocykloalkylová skupina“ se týkají monocyklické nasycené či částečně nenasycené cyklické skupiny, která kromě atomů uhlíku obsahuje alespoň jeden heteroatom jako člen kruhu. Obvykle heteroatomy zahrnují, avšak bez omezení, atom kyslíku, dusíku, síry, selenu a fosforu. V této souvislosti označení „C_n“, kde n je celé číslo, označuje počet atomů uhlíku v kruhu, avšak neudává celkový počet atomů v kruhu. Například C₄heterocykloalkylová skupina zahrnuje kruhy, ve kterých je pět či více členů kruhu, kde čtyři z členů kruhu jsou atomy uhlíku a zbývající členové kruhu jsou heteroatomy. Navíc vazby spojující endocyklické atomy heterocykloalkylové skupiny mohou být částí kondenzovaného aromatického zbytku, pokud heterocykloalkylová skupina není aromatická. Příklady heterocykloalkylových skupin zahrnují, avšak bez omezení, 2-pyrrolidinylovou skupinu, 3-pyrrolidinylovou skupinu, piperidinylovou skupinu, 2-tetrahydrofuranylovou skupinu, 3-tetrahydrofuranylovou skupinu, 2-tetrahydrothienylovou skupinu a 3-tetrahydrothienylovou skupinu.

Pojem „arylová skupina“, jak se zde používá, a pokud se neurčuje jinak, se týká mono-, di-, tri— či multinukleámího aromatického kruhového systému. Neomezující příklady zahrnují fenylovou skupinu, nafitylovou skupinu, anthracenylovou skupinu a fenanthrenylovou skupinu.

Pojem „heteroaiylová skupina“, jak se zde používá, se týká aromatického kruhového systému, který zahrnuje alespoň jeden heteroatom kruhu. Neomezující příklady jsou pyrrolová skupina, pyridylová skupina, furylová skupina, 1,2,4-thiadiazolylová skupina, pyrimidylová skupina, thienylová skupina, thiofenylová skupina, isothiazolylová skupina, imidazolylová skupina, tetrazolylová skupina, pyrazinylová skupina, pyrimidylová skupina, chinolylová skupina, isochinolylová skupina, thiofenylová skupina, benzothienylová skupina, isobenzofurylová skupina, pyrazolylová skupina, indolylová skupina, purinylová skupina, karbazolylová skupina, benzimidazolylová skupina, isoxazolylová skupina a akridinylová skupina.

Pojem „aralkylová skupina“, jak se zde používá, značí arylsubstituované alkylové skupiny, jako je benzylová skupina, difenylmethylová skupina, trifenylmethylová skupina, fenylethylová skupina a difenylethylová skupina.

Pojem „nižší aralkylová skupina“, jak se zde používá, značí aryl-substituované nižší alkylové skupiny. Neomezující příklady zahrnují benzylovou skupinu, difenylmethylovou skupinu, trifenylmethylovou skupinu, fenylethylovou skupinu a difenylethylovou skupinu.

Pojem „aralkoxyskupina“, jak se zde používá, značí skupinu RO-, ve které Rje aralkylová skupina podle definice popsaná výše.

Pojem „nižší aralkoxyskupina“, jak se zde používá, značí skupinu RO-, ve které Rje nižší aralkylová skupina podle definice popsaná výše.

Pojem „alkoxyskupina“, jak se zde používá, značí skupinu RO-, kde Rje alkylová skupina, podle definice popsané výše.

Pojem „nižší alkoxyskupina“, jak se zde používá, se týká skupiny RO-, kde R je nižší alkylová skupina podle definice popsané výše. Neomezující příklady zahrnují methoxyskupinu, ethoxyskupinu a terc-butyloxyskupinu.

-27CZ 305350 B6

Pojem „aryloxyskupina“, jak se zde používá, se týká skupiny RO-, kde Rje arylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „nižší alkylaminoskupina“ nebo „nižší dialkylaminoskupina“ se týká aminoskupiny, která má jeden či dva nižší alkylové substituenty.

Pojmy „amidová skupina“ a „karbonylaminoskupina“, jak se zde používají, se týkají skupiny -C(O)N(H)-.

Pojem „alkylamidová skupina“, jak se zde používá, se týká skupiny -C(O)NR-, ve které R je alkylová skupina podle definice popsané výše.

Pojem „dialkylamidová skupina“, jak se zde používá, se týká skupiny -C(O)NR'R, kde R' a R” jsou nezávisle alkylové skupiny podle definice popsané výše.

Pojem „nižší alkylamidová skupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny -C(O)NR-, ve které Rje nižší alkylová skupina tak, jak se definuje výše.

Pojem „nižší dialkylamidová skupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny -C(O)NR'R, ve které R' a R jsou nezávisle nižší alkylové skupiny, jak se definují výše.

Pojmy „alkanoyolová skupina“ a „alkylkarbonylová skupina“ tak, jak se zde používají, se týkají skupiny RC(O)-, ve které Rje alkylová skupina, jak se definuje výše.

Pojmy „nižší alkanoylová skupina“ a „nižší alkylkarbonylová skupina“ tak, jak se zde používají, se týkají skupiny RC(O)-, ve které Rje nižší alkylová skupina, jak se definuje výše. Neomezující příklady takových alkanoylových skupin zahrnují acetylovou skupinu, trifluoracetylovou skupinu, hydroxyacetylovou skupinu, propionylovou skupinu, butyrylovou skupinu, valerylovou skupinu a 4-methylvalerylovou skupinu.

Pojem „arylkarbonylová skupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny RC(O)-, ve které Rje arylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „aryloxykarbonylová skupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny ROC(O)-, ve které Rje arylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „halo“, jak se zde používá, zde značí fluor, chlor, brom nebo jod.

Pojem „alkylsulfonylová skupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny RSO₂-, ve které Rje alkylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem, „arylsulfonylová skupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny RSO₂-, ve které Rje arylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „alkyloxykarbonylaminoskupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny ROC(O)N(H)-, ve které Rje alkylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „nižší alkyloxykarbonylaminoskupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny ROC(O)N(H)-, ve které Rje nižší alkylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „aryloxykarbonylaminoskupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny ROC(O)N(H)-, ve které Rje arylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „sulfonylamidová skupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny -SO₂C(O)NH-28CZ 305350 B6

Pojem „alkylsulfonylamidová skupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny RSO₂C(O)NH-, ve které Rje alkylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „arylsulfonylamidoskupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny RSO₂C(O)NH-, ve které Rje arylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „nižší alkylester fosfonové kyseliny“ tak, jak se zde užívá, se týká skupiny -P(O)(OR')(OR), ve které R' a R jsou nižší alkylové skupiny, jak se definují výše.

Pojem „arylester fosfonové skupiny“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny -P(O)(OR')(OR), kde R' a R jsou arylové skupiny, jak se definují výše.

Pojem „aminokarbonyloxyskupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny RR'N-C(O)-O-, ve které R a R'jsou alkylové skupiny, jak se definují výše.

Pojem „arylaminokarbonyloxyskupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny Ar-N(R)-C(O)0-, ve které Ar je aiylová skupina, jak se definuje výše, a Rje alkylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „heteroarylaminokarbonyloxyskupina“ tak, jak se zde používá, se týká skupiny het-ArN(R)-C(O)-O-, ve které het-Ar je heteroarylová skupina, jak se definuje výše, a R je alkylová skupina, jak se definuje výše.

Pojem „aminokyselina“ tak, jak se zde používá, se týká molekuly obsahující aminoskupinu a karboxylovou skupinu. Zahrnuje „α-aminokyseliny“, které jsou dobře známy tomu, kdo má zkušenost v oboru, jako karboxylové kyseliny, které mají aminoskupinu na uhlíku přiléhajícím ke karboxylové skupině. Aminokyseliny mohou být takové, které se vyskytují v přírodě a takové, které se přirozeně nevyskytují.

Pojem „chráněné aminokyseliny“ tak, jak se zde používá, se týká aminokyselin, jak se definují výše, zahrnujících chránící skupinu. Například aminoskupinu aminokyseliny lze chránit tercbutoxykarbonylovou skupinu nebo benzyloxykarbonylovou skupinou. Navíc může být karboxylová skupina aminokyseliny chráněná ve formě alkylových a aralkylových esterů. Dále lze alkoholové skupiny aminokyselin chránit jako alkylethery, aralkylethery a silylethery.

Pojem „obsahující endocyklicky“ popisuje cyklický chemický zbytek, který zahrnuje určenou chemickou skupinu jako člen vytvářejícího kruh. Jako příklad furanylová skupina obsahuje endocyklicky atom kyslíku, protože atom kyslíku je členem struktury kruhu. V souvislosti s tímto vynálezem se mohou skupiny E a F spolu spojovat s atomy, ke kterým se připojují, s vytvořením heterocykloalkylové skupiny. Tato heterocykloalkylová skupina může endocyklicky zahrnovat chemickou skupinu G, což znamená, že alespoň jeden atom skupiny G je členem vytvářejícím kruh. Jako neomezující příklad znázorněný níže se mohou E a F spojovat spolu s atomy, ke kterým se připojují, s vytvořením heterocykloalkylového kruhu endocyklicky obsahujícího skupinu G, kde v tomto případě G je skupina N(CH₃).

-29CZ 305350 B6

Pojem „terapeuticky účinné množství“, jak se zde používá, značí množství sloučeniny podle tohoto vynálezu, které vykazuje požadovaný terapeutický či preventivní účinek či odpověď při podávání podle požadovaného léčebného režimu.

Pojem „přivedení do kontaktu“ tak, jak se zde používá, znamená uvést buď přímo či nepřímo jednu či více molekul do styku s jinými tak, aby se umožnily interakce mezi molekulami. Přivedení do kontaktu může nastat in vitro, ex vivo nebo in vivo.

Pojem „buněčné proliferační poruchy“ tak, jak se zde používá, se týká maligních i nemaligních buněčných populací, které se liší od okolní tkáně morfologicky i genotypicky. Typy buněčných proliferačních poruch zahrnují například solidní tumory, karcinomy, diabetickou retinopatii, íntraokulámí neovaskulámí syndromy, makulámí degeneraci, revmatickou artritidu, psoriázu a endometriózu.

Všechny ostatní pojmy používané při popisu sloučenin podle tohoto vynálezu mají svůj význam, který je dobře známý v oboru.

Tento vynález popisuje způsoby přípravy multicyklických sloučenin, které se zde popisují a které jsou použitelné jako inhibitory PAPR, VEGFR2 a MLK3. Tento způsob se skládá z přípravy o několika krocích s použitím potřebných heterocyklických sloučenin jako výchozích látek. Například obrázek 1 znázorňuje obecnou přípravu sloučenin podle tohoto vynálezu pro takový případ, při kterém je výchozí heterocyklickou látkou indol. Konkrétně indol A, který je substituovaný v polohách 4 až 7 na indolovém kruhu, se sériově zpracovává například butyllithiem, oxidem uhličitým, terc-butyllithiem a ketonem B (se substituenty E a F) s obdržením indolylového terciárního alkoholu C. Tento terciární alkohol se eliminuje například v kyselém prostředí s použitím kyseliny chlorovodíkové nebo kyseliny toluensulfonové s obdržením substituovaného 2vinylindolu D. Dielsova-Alderova cykloadice D s dienofilní látkou, jako je, avšak bez omezení, maleinimid E poskytuje meziprodukt cykloadice F. Aromatizace meziproduktu cykloadice, například kyslíkem za přítomnosti katalyzátoru, jako je palladium nebo platina, nebo oxidačním prostředkem, jako je DDQ nebo tetrachlorchinon, poskytuje karbazol G.

Další zpracování G alkylačním či acylačním činidlem poskytuje indol-N-substituované karbazolové deriváty podle tohoto vynálezu, jak ukazuje obrázek 2.

Zpracování karbazolu G (nebo karbazollaktamů na obrázku 5) různými elektrofilními prostředky, jako je R⁺, poskytuje 3-substituované karbazolové deriváty, jak ukazuje obrázek 3. Tímto způsobem lze zavést halogen nebo acylové skupiny a halogen lze vytěsnit různými nukleofilními skupinami včetně kyanoskupiny, jak ukazuje obrázek 5. Halogen lze též nahradit různými alkylovými, arylovými a heteroalkylovými skupinami. Substituent 3-kyano lze redukovat s obdržením 3aminomethylového substituentu, který lze alkylovat či acylovat na aminoskupině.

Pokud karbazol G obsahuje bromacetylové nebo substituované 2-bromacylové substituenty, jak ukazuje obrázek 4, lze brom vytěsnit různými nukleofilními prostředky s obdržením dalších ztělesnění tohoto vynálezu. Alternativně může 2-bromacylová skupina reagovat s různými thioamidy s obdržením substituovaných thiazolů.

Jak se diskutuje výše, použití substituovaných indolů jako výchozích látek poskytuje deriváty G opatřené funkčními skupinami, avšak pro přípravu substituovaných vinylindolů D lze též použít intramolekulámí Wittigovy reakce. Dále lze použít jiné dienofily než maleinimid E v DielsověAlderově reakci včetně například dialkyl-fumarátu, kyseliny fumarové, dialkyl-maleátu, kyseliny maleinové, maleinanhydridu, dialkyl-acetylendikarboxylátu nebo alkyl-3-kyanoakrylátu. Meziprodukty obdržené z cykloadice s těmito dienofily poskytují imídy nebo odpovídající laktamy, jak ukazuje obrázek 5. Například anhydridy obdržené z cykloadice maleinanhydridu nebo dehydratace dikarboxylových kyselin poskytuje imídy při zpracování bis(trimethylsilyl)aminem nebo močovinou. Anhydridy poskytují šestičlenné hydrazony při zpracování hydrazinem. Lakta-30CZ 305350 B6 my se obdrží oddělením kyanoesterových isomerů, aromatizací každého isomeru a redukcí kyanoesteru na laktam, jak ukazuje obrázek 5. Imidy lze též redukovat na laktamy dobře vypracovanými způsoby známými tomu, kdo má zkušenost v oboru.

Sloučeniny indolového typu podle tohoto vynálezu se připraví podle schématu znázorněného na obrázku 6. Zde se připraví vinylpyrrolové výchozí látky reakcí pyrrolu s enaminem nebo ketonem, jak se popisuje v literatuře [Heterocycles, 2, 575-584 (1974)]. Substituovaný 2-vinylpyrrol reaguje s různými dienofilními prostředky, jako jsou ty, které se popisují výše, s obdržením cykloadičního meziproduktu, který je prekurzorem pro látky podle ztělesnění tohoto vynálezu. Skupina chránící dusíkovou skupinu, jako je silylová chránící skupina, konkrétně triisopropylsilylová skupina, se může použít, jak znázorňuje obrázek 6.

Další heterocyklické prekurzory lze připravit analogickými reakcemi. Například 5-vinylimidazol reaguje s různými dienofilními sloučeninami, jako jsou ty, které se popisují výše, s obdržením cykloadičního meziproduktu, který lze dále modifikovat reakcemi dobře známými tomu, kdo má zkušenost v oboru, s obdržením benzimidazolových prekurzorů. Podobně může například reagovat substituovaný 5-vinyl-l,2,3-triazol nebo 4-vinylthiazol s různými dienofilními prostředky jako výše s obdržením cykloadičních meziproduktů vedoucích ke ztělesněním tohoto vynálezu. Sloučeniny benzimidazolového typu podle tohoto vynálezu lze též připravit podle způsobu znázorněného na obrázku 7, ve kterém slouží předem získané benzimidazoly jako výchozí látky.

Dále, jak ukazuje obrázek 8, může substituovaný 2-vinylbenzofuran nebo 2-vinylbenzothiofen reagovat s různými dienofilními prostředky, jako jsou ty, které jsou vyjmenované výše, s obdržením cykloadičního meziproduktu. Modifikace cykloadičního meziproduktu může vést k imidům, laktamům a příbuzným sloučeninám podle tohoto vynálezu.

V určitých preferovaných ztělesněních jsou sloučeniny podle tohoto vynálezu inhibitory PARP. Účinnost inhibitoru lze testovat měřením aktivity PARP in vitro nebo in vivo. Preferované monitory pro eseje přenášejí ADP-ribosové jednotky označené radionuklidem z [³²P]NAD⁺ k akceptoru proteinu, jako je histon nebo samotná PARP. Rutinní eseje pro PARP popisuje Pumell a Whish, Biochem. J., 185, 775 (1980) a tato práce se zde zahrnuje formou odkazu.

V dalších preferovaných ztělesněních jsou sloučeniny podle tohoto vynálezu též inhibitory VEGFR2 a MLK3. Účinnost inhibitoru lze testovat měřením aktivity VEGFR2 nebo MLK3 in vitro nebo in vivo. Preferovaná esej pro aktivitu VEGFR2 kinázy zahrnuje fosforylaci proteinového substrátu zachyceného na mikrotitrační desce. Výsledný fosfotyrosinový zbytek se detekuje protilátkou proti fosfotyrosinu připojenou na europiovém chelátu s umožněním kvantitativního vyjádření fluorometrie produktu s rozlišením času. Podobné způsoby eseje lze použít pro detekci tyrosin kinázy c-src, jak popisuje Braunwalder a kol., Anal. Biochem., 238, 159 (1996) a tato práce se zde zahrnuje formou odkazu. Preferovaný způsob eseje pro MLK3 využívá fosforylace proteinového substrátu, jako je myelinový bazický protein s [gama-³²P]ATP s následnou izolací ³²P-fosfoproteinového produktu nerozpustného v kyselině na filtrační desce. Analogické metody se používají pro esej protein kinázy C, jak popisuje Pitt a Lee, J. Biomol. Screening, i, 47 (1996) a tato práce se zahrnuj formou odkazu.

Způsoby inhibice PARP, VEGFR2 a MLK3 enzymatických aktivit se uvažují v rámci tohoto vynálezu. Aktivitu enzymu lze snížit či potlačit přivedením enzymu do styku s alespoň jednou ze sloučenin, které se zde popisují. Přivedení do styku může nastat buď in vitro, in vivo nebo ex vivo. Přivedení do styku lze též podpořit použitím kontaktního prostředí, které zvyšuje promísení enzymu a inhibitoru. Preferovaná média zahrnují vodu, roztoky na bázi vody, pufrované roztoky, rozpouštědla mísitelná s vodou, roztoky pro solubilizaci enzymů a jejich kombinace. Kontaktní buňky obsahující enzym in vivo přednostně využívají dodání inhibitoru do blízkosti enzymu souvisejícího s buňkou v biologicky kompatibilním médiu. Preferované biologicky kompatibilní média zahrnují vodu, roztoky na bázi vody, fyziologický roztok, biologické kapaliny a sekrety a

-31 CZ 305350 B6 další netoxické látky, které mohou účinně dodávat inhibitor do blízkosti enzymu v biologickém systému.

Sloučeniny, které se zde popisují, lze použít pro prevenci či léčení nástupu nebo progrese kterékoliv choroby či stavu, který souvisí s aktivitou PARP u savců, zejména u lidí. Tyto stavy zahrnují traumatické poškození centrálního nervového systému, jako je poškození mozku a míchy a degradaci neuronů související s traumatickým poškozením centrální nervové soustavy. Příbuzné stavy a choroby, které lze léčit způsoby podle tohoto vynálezu, zahrnují vaskulámí mrtvice, srdeční ischemii, mozkovou ischemii, cerebrovaskulámí poruchy, jako je mnohoěetná skleróza, a neurodegenerativní choroby, jako je Alzheimerova, Huntingtonova a Parkinsonova choroba. Další stavy související s PARP nebo choroby, které lze léčit sloučeninami, které se zde popisují, zahrnují zánět, jako je pleuritida a kolitida, endotoxický šok, diabetes, rakovinu, artritidu, srdeční ischemii, retinální ischemii, stárnutí kůže, chronickou a akutní bolest, hemoragický šok a další. Například po symptomech mrtvice lze pacientovi podat jednu či více sloučenin, které se zde popisují, aby se zabránilo či minimalizovalo poškození mozku. Pacienti se symptomy Alzheimerovy, Huntingtonovy nebo Parkinsonovy choroby se mohou léčit sloučeninami podle tohoto vynálezu pro zastavení progrese choroby či pro ulehčení symptomů. Inhibitory PARP lze rovněž používat pro léčení pacientů trpících rakovinou.

Například lze pacientům s rakovinou podávat tyto sloučeniny pro zesílení protitumorových účinků chemoterapie. Sloučeniny, které se zde popisují, lze použít pro prevenci nebo léčení progrese jakéhokoliv onemocnění nebo stavu, který souvisí s aktivitou kinázy (jako je aktivita VEGFR2 nebo MLK3) u savců, zejména u lidí. Například lze sloučeniny, které se zde popisují, použít pro léčení stavů týkajících se aktivity MLK3, jako jsou chronická neurodegenerativní onemocnění, jako je například Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba a Huntingtonova choroba, akutních neurologických stavů, jako je srdeční ischemie, mozková ischemie, stejně tak jako traumatické poranění mozku a míchy. Dále lze sloučeniny, které se zde popisují, též použít při léčení zánětlivých onemocnění a rakoviny související s aktivitou MLK3. Podobně lze sloučeniny, které se zde popisují, použít pro inhibici VEGFR2, která může vést k potlačení tvorby nových cév. Tyto sloučeniny mohou být proto použitelné při léčení stavů souvisejících s tvorbou nových cév, jako jsou například solidní tumory, diabetická retinopatie a další intraokulámí neovaskulámí syndromy, makulámí degenerace, revmatická artritida, psoriáza a endometrióza.

Sloučeniny, které se zde popisují, se přednostně podávají savcům v terapeuticky účinném množství. Dávkování se může měnit v závislosti na sloučenině a účinnosti této sloučeniny, na typu choroby a chorobného stavu pacienta kromě ostatních proměnných. Dávkové množství lze odměřovat podáváním předem změřených dávkových jednotek ve formě tablet, tobolek, čípků, prášků, emulzí, elixírů, sirupů, mastí, krémů nebo roztoků.

Při terapeutickém či profylaktickém použití lze podávat inhibitory PARP či kinázové inhibitory jakoukoliv cestou, kterou se léky konvenčně podávají. Toto podávání zahrnuje intraperitoneální, intravenózní, intramuskulámí, subkutánní, intrathekální, intratracheální, intraventrikulámí, perorální, bukální, rektální, parenterální, intranasální, transdermální či intradermální způsoby. Podávání může být systémové nebo lokální.

Sloučeniny, které se zde popisují, lze podávat v čisté formě, v kombinaci s jinými účinnými složkami nebo v kombinaci s farmaceuticky přijatelnými netoxickými pomocnými látkami či nosiči. Perorální přípravky budou obecně obsahovat inertní zřeďovací prostředek nebo poživatelný nosič. Farmaceuticky kompatibilní pojivá a/nebo adjuvantní látky mohou tvořit součást prostředku. Tablety, pilulky, tobolky, pastilky a podobně mohou obsahovat kteroukoliv z následujících složek či sloučenin podobné povahy: pojivo, jako je mikrokrystalická celulóza, klovatina tragakant či želatina, pomocnou látku, jako je škrob nebo laktóza, dispergační prostředek, jako je kyselina alginová. Primogel nebo kukuřičný škrob, mazivo, jako je stearát hořečnatý, leštící prostředek, jako je koloidní oxid křemičitý, sladidlo, jako je sacharóza či sacharin, nebo příchuť, jako je mátová příchuť, methyl-salicylát nebo pomerančová příchuť. Je-li dávková jednotka ve formě to-32CZ 305350 B6 bolky, může obsahovat navíc k látce výše popsaného typu kapalný nosič, jako je mastný olej. Navíc mohou dávkové jednotky obsahovat různé další látky, které pozměňují fyzikální formu dávkové jednotky, například potahy z cukru, šelaku nebo enterických prostředků. Dále může sirup obsahovat navíc k aktivním látkám sacharózu jako sladidlo a určité konzervační prostředky, barviva a příchutě.

Alternativní přípravky pro podávání zahrnují sterilní vodné či nevodné roztoky, suspenze a emulze. Příklady nevodných rozpouštědel jsou dimethylsulfoxid, alkoholy, propylenglykol, polyethylenglykol, rostlinné oleje, jako je olivový olej a injekční organické estery, jako je ethyl-oleát. Vodné nosiče zahrnují směsi alkoholů a vody, pufrovaná média a fyziologický roztok. Intravenózní vehikula zahrnují prostředky pro doplnění kapalin a živin, prostředky pro doplnění elektrolytů, jako je Ringerův roztok, roztok dextrózy a podobně. Konzervační prostředky a další přísady mohou být rovněž přítomny, jako jsou například prostředky proti mikrobům, antioxidanty, chelatotvomé prostředky, inertní plyny a podobně.

Preferované způsoby podávání sloučenin podle tohoto vynálezu savcům zahrnují intraperitoneální injekce, intramuskulámí injekce a intravenózní infuze. Pro tyto způsoby podávání jsou možné různé kapalné formulace včetně použití fyziologického roztoku, alkoholu, dimethylsulfoxidu a roztoků na bázi vody. Koncentrace inhibitoru se může měnit v závislosti na dávce a objemu, který se má podávat, a může být v rozmezí od zhruba 1 do zhruba 1000 mg/ml. Další složky kapalných formulací mohou zahrnovat konzervační prostředky, anorganické soli, kyseliny, báze, pufry, živiny, vitaminy nebo další farmaceutické látky, jako jsou analgetika nebo další inhibitory PARP a kináz. Zvláště preferované prostředky pro podávání těchto sloučenin se popisují podrobně v následujících publikacích, které popisují podávání známých inhibitorů PARP a tyto publikace se zde zahrnují formou odkazu v plném znění: T. Kato, a kol., Anticancer Res., 8(2), 239 (1988), K. Nakagawa, a kol., Carcinogenesis, 9, 1167 (1988), D. M. Brown, a kol., Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys., 1665 (1984), P. Masiello a kol., Diabetologia, 28(9), 683 (1985), P. Masiello a kol., Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol., 69(1), 17 (1990), T. Tsujiuchi a kol., Jpn. J. Cancer Res., 83(9), 985 (1992) a T. Tsujiuchi a kol., Jpn. J. Cancer Res., 82(7), 739 (1991).

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou též být ve formě farmakologicky přijatelné soli, hydrátu, solvátů či metabolitu. Farmaceuticky přijatelné soli zahrnují bazické soli anorganických a organických kyselin včetně, avšak bez omezení, kyseliny chlorovodíkové, kyseliny bromovodíkové, kyseliny sírové, kyseliny fosforečné, kyseliny methansulfonové, kyseliny ethansulfonové, kyseliny jablečné, kyseliny octové, kyseliny šťavelové, kyseliny vinné, kyseliny citrónové, kyseliny mléčné, kyseliny fumarové, kyseliny jantarové, kyseliny maleinové, kyseliny salicylové kyseliny benzoové, kyseliny fenyloctové, kyseliny mandlové a podobně. Pokud sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnují kyselou skupinu, jako je karboxylová skupina, potom vhodné farmaceuticky přijatelné kationtové protějšky pro tuto karboxylovou skupinu jsou dobře známy tomu, kdo má zkušenost v oboru, a zahrnují kationty alkalických kovů, alkalických zemin, amonný kationt, kvartémí amoniové kationty a podobně.

Ti, kteří mají zkušenost v oboru, si uvědomují, že lze zavést značné změny a modifikace preferovaných ztělesnění tohoto vynálezu a že tyto změny a modifikace lze provést bez odchylky od ducha tohoto vynálezu. Proto je záměrem, aby přiložené nároky pokrývaly veškeré tyto ekvivalentní odchylky v tom smyslu, že spadají do pravého ducha a rozsahu tohoto vynálezu.

Dále jsou uvedeny příklady, které ilustrují tento vynález. Nárokovaný vynález je doložen zvláště příklady popisujícími sloučeniny lt, lu, lv, 2af, 2ag, 2ah, 2ai, 2aj, 2ak, 2al, 2am, 2an, 2ay, 2cf, 5a, 5b, 5c, 5d, 5e, 5f, 5g, 6h, 6i, 6j, 6n, a 1 la.

Zkratky mají významy známé těm, kteří mají zkušenost v oboru. Tak dále uvedené zkratky znamenají:

-33 CZ 305350 B6

DDQ 2,3-dichlor-5,6-dikyan-l ,4-benzochinon

DTT dithiotreitol

HEPES 4-(2-hydroxyethyl)-l-piperazinethansulfonová kyselina HBST směs Tris pufrovaného fyziologického roztoku a Tween 20 EGTA ethylenglykoltetraoctová kyselina

TBTU O-(benzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronim tetrafluorborát

NMM N-methylmorfolin

HOBt 1-hydroxybenzotriazol

BOC terc-butyloxykarbonyl

EDCL l-ethyl-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimid

BHT butylovaný hydroxytoluen

DBU 1,8-diazabicyklo[5.4.0] undec-7-en

Příklady uskutečnění vynálezu

Příklad 1

Měření enzymatické aktivity PARP

Aktivita PARP se sleduje na základě přenosu ADP-ribosových jednotek značených radionuklidem [³²P]NAD⁺ na akceptor proteinu, jako je histon nebo samotná PARP. Směsi chloridu hořečnatého, 20 pg/ml DNA (upravená ultrazvukem), 20 mg/ml hístonu Hl, 5 ng rekombinantní lidské PARP a inhibitor nebo dimethylsulfoxid (<2,5 objemových %) v konečném objemu 100 pl. Reakce se zahajují přídavkem 100 pM NAD⁺, který je doplněný o 2 pCi [³²P]NAD⁺/ml a udržuje se při teplotě místnosti po dobu 12 min. Eseje se ukončí přídavkem 100 pM 50% kyseliny trichloroctové a sraženina označená radionuklidem se zachycuje na 96jamkové filtrační desce (Millipore, MADP NOB 50) a promyje 25% kyselinou trichloroctovou. Množství radioaktivity nerozpustné v kyselině odpovídající polyADP-ribosylovanému proteinu se vyjádří kvantitativně pomocí scintilačního čítače Wallac MicroBeta.

Příklad 2

Měření enzymatické aktivity kinázy VEGFR2

96jamková deska FluroNUNC MaxiSorp se potáhne 100 pl/jamka rekombinantního lidského roztoku substrátu PLC-gama/GST o koncentraci 40 pg/ml ve fyziologickém roztoku pufrovaném Tris (TBS). Aktivita VEGFR2 se stanoví ve směsi pro esej, 100 pl, obsahující 50 mM HEPES (pH 7,4), 30 pM ATP, 10 mM chloridu manganatého, 0,1 % bovinního sérumalbuminu, 2 % dimethylsulfoxidu a 150 ng/ml rekombinantní lidské bakulovirem exprimované cytoplasmatické domény VEGFR2 (předem fosforylované po dobu 60 min při teplotě 4 °C za přítomnosti 30 pM ATP a 10 mM chloridu manganatého před použitím). Kinázová reakce pokračuje při teplotě 37 °C po dobu 15 min. Detekční protilátka proti fosfotyrosinu značená europiem se přidá ve zředění 1:5000 v blokovacím pufru (3% bovinní sérum albumin v TBST). Po 1 h inkubace při teplotě 37 °C se přidá 100 pl zesilujícího roztoku (Wallac 1244-105) a deska se jemně třepe. Po 5 min se měří časově rozlišená fluorescence výsledného roztoku s použitím BMG PolarStar (Model 403) při excitačních a emisních vlnových délkách 340 nm respektive 615 nm se zpožděním 400 ps a integračním časem 400 ps.

-34CZ 305350 B6

Příklad 3

Měření enzymatické aktivity MLK3

Esej pro aktivitu MLK3 se provádí v miskách Millipore Multiscreen. Každých 50 μΐ směsi pro esej obsahuje 50 mM HEPES (pH 7,0), 1 mM EGTA, 10 mM chloridu hořečnatého, 1 mM DTT, 25 mM β-glycerofosfátu, 100 μΜ ATP, 1 pCi [gama-³²P]ATP, 0,1 % bovinního sérum albuminu, 500 μg/ml myelinového základního proteinu, 2 % dimethylsulfoxidu, různé koncentrace zkoušených látek a 2 pg/ml bakulovirové humánní GST-MLK1 kinázové domény. Vzorky se inkubují po dobu 15 min při teplotě 37 °C. Reakce se zastaví přídavkem ledově chladné 50% kyseliny trichloroctové a proteiny se vysráží v průběhu 30 min při teplotě 4 °C. Misky se ponechají stát po dobu 1 až 2 h pro dosažení rovnováhy před vyhodnocením na scintilačním čítači Wallac MicroBeta 1450 Plus.

Příklad 4

Stanovení IC₅o pro inhibitory

Údaje jednotlivých hodnot pro inhibici se vypočítají srovnáním aktivity PARP, VEGFR2 nebo MLK3 za přítomnosti inhibitoru aktivity a za přítomnosti samotného dimethylsulfoxidu. Inhibiční křivky sloučenin se získají vynesením procenta inhibice proti dekadickému logaritmu log_!0koncentrace sloučeniny. Hodnoty IC₅₀ se vypočítají nelineární regresí s použitím sigmoidální rovnice dávka-odpověď (proměnný sklon) v GraphPad Prism:

y = spodní + (vrchní-spodní)/(l + |o^(k>gIC5O ^x’*^,llllslope) kdy y je % aktivity při dané koncentraci sloučeniny, x je logaritmus koncentrace sloučeniny, spodní značí % inhibice při nejnižší testované koncentraci sloučeniny a horní je % inhibice při nejvyšší koncentraci sloučeniny. Hodnoty pro spodní a horní % inhibice se stanoví jako 0 a 100. Hodnoty IC₅₀ se udávají jako průměr z posledních tří oddělených stanovení.

Následující příklady 5 až 10 poskytují inhibiční údaje pro PARP, VEGFR2 a MLK3 se sloučeninami podle tohoto vynálezu. Hodnoty IC₅₀ se stanoví podle popisů v příkladech 1 a 2. Pro některé sloučeniny se poskytují inhibiční údaje jako procento inhibice při dané koncentraci. Seznam sloučenin je v tabulkách spolu s číslem sloučeniny, substituenty a údaji o inhibici enzymu.

Příklad 5

Údaje o inhibici PARP pro sloučeniny la až 1 v obecného vzorce IV, kde B je CO, R² je H, J je Η, V je NR¹ a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří cyklopentylovou skupinu, A a R¹se mění, jak se popisuje v tabulce

-35CZ 305350 B6

Tabulka 1

e.	A	Ř¹--	PARP IC₅o (nM)
Ia	CO	H	36
lb	CO	(CH₂)₃OCH₂Ph	720
lc	co	(CH₂)₃CN	38% @ 10 μΜ
ld	co	(CH₂)3C1	64% @ 10 μΜ
le	co	(CH₂)₃OH	946
lf	co	(CH₂)₃-piperidin	68% @ 10 μΜ
ig	co	(CH₂)₃-morfolin	67% @ 10 μΜ
lh	co	(CH₂)₃-NEt₂	819
li	co	(CH₂)₄-NHCOCH₃	10% @ 10 μΜ
ij	co	SO₂Ph	250
lk	co	Lysin (2HC1)	22
11	co	β-Alanin (HC1)	160
Im	co	Glycin (HC1)	38
ln	co	(CH₂)₂OCH₂Ph	1600
lo	co	(CH₂)₂NEt₂	12%@10μΜ
Ip	co	CH₂COOCH₂Ph	14%@10μΜ
iq	co	CH₂COOH	52% @ 10 μΜ
lr	co	ch₂conh₂	63% @ 10 μΜ
ls	co	CH₂-; ftalamid	25%@10μΜ
lt	ch₂	ch₃	800
lu	ch₂	(BOC)₂Lys	1500
Iv	ch₂	Lys	1400

Příklad 6

Údaje o inhibici PARP pro sloučeniny 2a až 5g obecného vzorce IV, kde B je CO, R je Η, V je NH a E a F spolu s atomy, ke kterým se připojují, tvoří cyklopentylovou skupinu, A a J se mění, jak se popisuje v tabulce.

-36CZ 305350 B6

Tabulka 2

č.	A	J (3-Substituent)	PARP ICso (nM)
2a	CO	Br	25
2b	CO	Cl	39
2c	CO	F	39
2d	CO	CH₃CO	17
2e	CO	BrCH₂CO	13
2f	CO	CH₃BrCHCO	21
2g	CO	A-Methylpiperizino-Ct^CO	16
2h	GO	Moipholino-CH₂CO	13
2i	CO	Piperidino-CřTCO	20
2j	CO	Diethylamino>CH₂CO	21
2k	CO	tBuO₂CCH₂N(CH₃)CH₂CO	19
21	CO	HO₂CCH₂N(CH₃)CH₂CO	8
2m	CO	ho₂cch₂ch₂co	Λ
2n	CO	l,2,4-Triazol-2-ylCH₂CO	15
2o	CO	CN	14
2p	CO	nh₂ch₂	13
2q	CO	Hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol- -7(6H)-on - 3-NHCH₂	167
2r	co	CH₃CONHCH₂	13
2s	co	CH₃CH₂CONHCH₂	28
2t	CO	ČH₃CH₂CH₂CONHCH₂	44
2u	CO	Benzoyl-NHCH₂	37
2v	CO	BOC-NHCH₂CONHCH₂	33
2w	CO	BÓC-NH(CH₂)₃CONHCH₂	33
2x	CO	h₂nch₂conhch₂	45
2y	co	H₂N(CH₂)₃CONHCH₂	54
2z	co	CH₃O₂C(CH₂)₂CONHCH₂	10
2aa	co	ČH₃O₂C(CH₂)3CONHCH₂	9

-37CZ 305350 B6

2ab	CO	HO₂C(CH₂)₂CONHCH₂	50
2ac	CO	HO₂C(CH₂)₃CONHCH₂	48
2ad	co	BOC-NHCHl	93
2ae	co	SO₃H	8
2af	ch₂	CI	120
2ag	ch₂	CO₂H	80
2ah	ch₂	CO₂CH₃	59
2ai	ch₂	CONHCH₂CH₂NMe2	165
2aj	čh₂	CONHCH₂CH₂NC4HgO	162
2ak	ch₂	CONC₄H₈O	83
2al	ch₂	CON(CH₃)CH₂(4-Pyr)	65
2am	ch₂	CON(CH₃)CH₂CH₂(l-imidazol)	161
2an	ch₂	CON(CH₃)CH₂(2-Pyr)	237
2ao	co	OH	27
2ap	co	OCH₃	32
2aq	co	OCH₂CH₂OCH₂CH₃	59
2ar	co	OCH₂CH₂NEt₂	88
2as	co	OCH₂CH₂CH₂NMe₂	100
2at	co	OCH₂CH₂NC4H8O	22
2au	co	OAe	33
2av	co	CHO	29
2aw	co	CH₂OH	22
2ax	co	chohch₃	102
2ay	CH- ΟΗ	H	408
2az	co	CH₂CH₃	116
2ba	co	coco₂ch₃	12
2bb	co	coco₂h	5
2bc	co	ch₂cn	24
2bd	co	co₂h	85
2be	co	ch₂ch₂nh₂	36

-38CZ 305350 B6

2bf	CO	ch₃	82
2bg	CO	CH₂OCOCH₂NMe₂	31
2bh	CO	CONH₂	31
2bi	CO	CO₂CH₃	27
2bj	CO	CH₂NMe₂	29
2bk	CO	CH₂NHEt	32
2bl	CO	CH₂NⁿPr	16
2bm	CO	CH₂NEt₂	17
2bn	CO		28
2bo	CO	CH₂N(CH₂Ph)₂	293
2bp	CÓ		25
2bq	CO	CH₂NHCH₂Ph	26
2br	CO		25
2bs	CO	CH₂N‘Pr₂	25
2bt	CO	CH₂NHMe	25
2bu	co	CH₂NMe₃	73
2bv	co	CH₂NC₄H₈O	32
2bw	co	CH₂NcC4H₈	35
2bx	co	CH₂NcC₅H₁₀	35
2by	co	CH₂NHCOCH₂(1 -tetrazol)	14
2bz	co	CH₂NHCO(CH₂)₄CO₂CH₃	62
2ca	co	CH₂NHCO(CH₂)₂NHCO₂tBu	95
2cb	co	CH₂NHCO(CH₂)₂NH₂	75
2cc	co	ch₂nhso₂ch₃	29
2cd	co	CH₂NHS0₂Ph	39
2ce	co	CH₂NHCHO	34
2cf	CHOH	CH2NHCHO	124
2cg	co	CONHCH₂CH₂NMe2	31
2ch	co	CONHCH₂CH₂CH₂NMe₂	33
2ci	CÓ	CONHCH₂(4-Pyr)	13
2cj	co	CONHCH₂CH₂(4-Ímidazol)	15

-39CZ 305350 B6

2ck	CO	CONH(CH₂)₅NMe₂	51
2cl	CO	CONHCH₂(3-Pyr)	21
2cm	CO	CONHCH₂CH₂NC₅Hio	148
2cn	CO	CONHCH₂CH₂NC4H₈O	26
2co	CO	CONH(CH₂)₂OCH₃	18
2cp	CO	CONC₄H_sO	12
2cq	CO	COŇČJÍgNCHa	12
2cr	CO	C0NHCH₂(24THF)	14
2cs	CO	CONHNC4H8NCH3	42
2ct	co	CONMeCH₂CH₂CH₂NMe₂	89
2cu	có	CONMeCH₂CH₂NMe₂	151
2cv	co	CONHCH₂CH₂(2-Pyr)	18
2cw	co	CONMeCH₂CH₂(2-Pyr)	24
2cx	co	CONMeCH₂(4-Pyr)	¹⁰
2cy	co	CONMeCH₂(4-Piperdinyl)	23
2cz	co	CO₂CH₂CH₂NMe₂	30
2da	co	CONH(CH₂)2ÓH	15
2db	co	CONC4HSC1 (ethylenketal)	11
2dc	co	CONH[(CH₂)₂OH]₂	18
2dd	co	CONC₄H_sCO	14
2de	co	CH₂OEt	43
2df	co	CH₂OCH₂CH₂(2-Pyr)	104
3a	co	2-Aminothiazol-4-yl	25
3b	co	2-Methylthiazol-4-yl	40
3c	co	2-Methyl-5-bromthiazol-4-yl	84
3d	co	2-Amino-5-methyltbiazol-4-yl	50
3e	co	2-[(BOCNH)CH(CO₂tBu)(CH₂)₃NH] thiazol-4-yl	46
3f	co	2-[NH2CH(CO₂H)(CH₂)₃NH] thiazol-4-yl	22
3g	co	2-Guanidinothiazol-4-yl	19
3h	co	2-(Methylanúno)thiazol-4-yl	54
3i	co	2-(Acetamino)thiazol-4-yl	54

-40CZ 305350 B6

3j	CO	2-(PhCH₂CONHCH₂)thiazol-4-yl	20
3k	CO	2-(Aminomethyl)thiazol-4-yl	42
31	CO	2-(Acetamino)imidazol-2-yl	47
3m	CO	2-(Methansulfonylanúnomethyl)thiazol-4-yl	18
3n	CO	2-(Acetanúnomethyl)thiazol-4-yl	20
3o	CO	2-(EťNHCONHCH₂)tiiiazol-4-yl	20
3p	CO	2-(ťBuSO₂CH₂)thiazol-4-yl	21
3q	CO	2-(tBuO₂CCH₂)tiúažol-4-yl	29
3r	CO	2-(IsopentanoylNHCH2)thiazol-4-yl	56
3s	CO	2-(PropanoylNHCH₂)tbiazol-4-yl	56
3t	CO	2-(IsobutanoylNHCH₂)thiazol-4-yl	32
3u	CO	2-(ButanoylNHCH₂)thiazol-4-yi	42
3v	co	2-(PentanoylNHCH₂)thiazol-4-yl	56
3w	co	2-(CyklopropankarbonylNHCH2)-thiazol-4-yl	49
3x	co	2-(Cj1dopentankarbonyINHCH₂)-thiazol-4-yl	52
3y	co	2-(tButylCO₂CH₂)thiazol-4-yl	60
3z	co	2-(CH₃SO₂CH₂)thiazol-4-yl	38
3aa	co	2-(Oxazol-5-yl)thiazol-4-yl	66
3ab	co	2<Glukosainino)thiazol-4-yl	17
4a	co	2-(CH₃O₂C)pyirolidin -CH₂CO	12
4b	co	2-(tBuO₂C)pyrrolidin -CH₂CO	12
4c	co	2-(HO₂C)pyrrolidin -CH₂CO	7
4d	co	íBocNH(CH₂)2NHCO(CH2)2CO	16
4e	co	H₂N(CH₂)₂NHCO(CH₂)₂CO	22
4f	co	Morfolino-CO(CH2)2CO	13
<g	co	HO(CH₂)₂NHCO(CH₂)₂CO	9
4h	co	2-(tBu0₂C)pyrrolidm-l-yl-CO(CH₂)₂CO	7
4i	co	Et₂NCÓ(CH₂)2CO	12
4j	co	2-(HO₂C)pyrrolidm-l-yl-CO(CH₂)₂CO	2
4k	co	3-(HO2C)pyrazm-2-yl-CO	1
41	co	6-Keto-4,5-dihydropyridazin-3-yl	17

-41 CZ 305350 B6

4m	CO	6-Keto-l-methyl-4,5-dihydropyridazm-3-yl	12
4n	CO	H0₂C(CH₂)3C0	2
4o	co	2-(H₂NCO)pyirolidin-l-yl-CO(CH₂)₂CO	13
4p	co	Piperidm-l-yl-CO(CH₂)₂CO	10
4q	co	4-BOC-Piperazin-l -yl-CO(CH₂)₂CO	10
4r	co	Piperazin-1 -yl-CO(CH₂)₂CO	15
4s	co	Ořttahydroazocm-l-yl-CO(CH₂)₂CO	26
4t	co	Pyrrolidin>l -yl-COCCIfehCO	16
5a	ch₂	H	108
5b	ch₂	Br	30
5c	ch₂	CN	18
5d	ch₂	ch₂nh₂	27
5e	ch₂	ch₃	800
5f	ch₂	(BOC)₂Lys-NHCH₂	670
5g	ch₂	Lys-NHCH₂	80

Příklad 7 5

Údaje o inhibici PARP pro sloučeniny la, 5a a 6b-p obecného vzorce IV, kde V je NR¹

-42CZ 305350 B6

Tabulka 3

č.	A	B	E	F	J		R^r	PARP ICso(nM)

la	CO	CO	(CH₂)₃	H	H	H	36
5a	ch₂	CO	(CH₂)₃	H	H	H	108
6b	CO	co	ch₃	ch₃	H	H	H	700
6e	co	co	(CH₂)₃	3-Br	Lys	H	69
6f	co	co	(CH₂)₃	3-C1	Lys	H	62
6g	co	co	(CH₂)₃	3-F	Lys	H	48
6h	ch₂	co	(CH₂)₃	H	H	CHO	3000
6i	ch₂	co	(CH₂)₃	3-Br	Lys	H	[35% @3 μΜ]
6j	ch₂	co	(CH₂)₃	3-CN	Lys	H	460
6k	co	co	(CH₂)3	H	H	CHO	78
61	co	co	(ch₂)₃	H	H	ch₂oh	138
6m	co	co	(CH₂)₃	H	ch₂- NMe₂	H	53
6n	co- NH	co	(CH₂)₃	H	H	Η	60% (10 μΜ)
6o	CH- OH/ CO	CO/CH- OH	(CH₂)₃	co₂h	H	H	287
6p	CO	CO	(CH₂)₃	CHoNMe 2	ch₂o H	Η	55

Příklad 8

Údaje o inhibici PARP pro sloučeniny 8b—j obecného vzorce lib, kde R¹ je H a R je H

-43CZ 305350 B6

Tabulka 4

c.	A	B			F-,F	TAM? ICse (,>M)
8h	CO	CG	CH	CH	(CH-Js	40
8c	CO	CO	Br-C	CH	(CHsfe	5
84	co	CO	NC-C	CH	(CH₂h	ó
8e	CONH	co	CH	CH	(Cífch	1820
ar	CO	co	C-Br	C-Bí	(CBjh	2S
	CO	co	C-CH.NH:	CH	j (Ofch	89
	CO	co	<-CH=CH-	HC-N-C	\| (CH₂h	3
81	co	co		•j tCK₃)₃	1522
8J	ch₂	čh₂	c-HC=CH-CH^CH-t	\| (CH₂)₃	42%(10uM)
Sk	co	co	£-CH<H-C(CH₃)=N-í	\|	..............TZj

Příklad 9

Údaje o inhibici VEGFR2 a MLK.3 pro sloučeniny 1 la až 13b obecného vzorce IV, kde V je NR¹

Tabulka 5 obsahuje údaje o procentu inhibice pro enzymy MLK3 a VEGFR2 při popsaných kon centracích, pokud se neurčuje jinak. Pro některé položky se udává hodnota IC50·

-44CZ 305350 B6

Tabulka 5

a * I 5 § ® ž?

θ' C» «> N· S O t—1

z—s 00 O\ KO o «Π u 1—<

o o fafa © £ o

00 r** t> S □ faH

vE^· KO KO o v> u fa-<

cn

00

1

z-*\ O <n co CS o v> o fa-4

N-

CN CN

o faH © o^x Γ CN

O

O fafa

CN CN

cs

2 a * s ® s

O\ fa>«4

Ό CN

KO ”4·

CN V)

<n m

CN Ό

\o T—<

1 1

<4· r-

co

N- «Ί

tn

o CN

N· fafa

m •-fa

<n co

es

s

tt

H

>-r< ►—(

tt

K

tt

cs

w·* fafa

tt

►t* w u

tt

w

W-f

HH

fafa WH

tt

t-fa fafa

fafa H-l

£ o S □ P4 X cj

X ί£ X C ° w *7* ČJ

X o J? ►fa u M s

fa* g

1-5

>t<

K

‘T* )fa

tt

K

tt

s

Τ» Ifa

tt

rfa W

tt

fa

*n X

CN ss u

w

nt 75 x o

tt o II X cj o SE s

sc o Ě? O

o & u 1 o

o 1 X o II X cj

X u 4 Q íF *r* MM u

X o n X o íf X O

X cj II X o íf s

s & CJ i u

X O X o l o

tc o II s ír 5

s A s l u

X o ss u f o

fa

fa &.

tt

g

o ϋ

o u

o □

o o

o CJ

o u

CN X u u, o O o

O CJ

X o \·ρΖ X o

o CJ

o. o

o o

o CJ

o u

o □

o u

o cj

o u

o CJ

O u

o cj

o o fa o CN w« fa O

Mj? ►fa u

o u

o o

o u

o CJ

es 7-í w

S V4 W

CJ fa-<

73

o T-4

U* faH faH

W) w r-í

Λ *—< r-H

CS cs

Λ CN ▼5

u cs 1-H

Ό CN fa

u CN fa

fa CN fa

W> CN fa

Λ CN fa

-45CZ 305350 B6

g = rS β ςρ o > ®

\o CM

oo

Ox

O r-

m

Ϊ Tf· σ\ o V» o ♦—<

*T>

CM CM

vn

CM

en

O\ rfe

XO 1—<

oo CM

CM

en

2 l J w £ ©

O Tt

CM

Tj“

XO CM

Γ—

VQ oo

en r-

S

vx

O

o 00

Γ- ΧΟ

M*

&

K

ffi

a

c « 1 o 3 1

a

W eí

«Μ 3 O ó CM ( ?2 'u cu

*T* ►M 8 □2 U M 3 O

I 8 £ u

e CS 1 2 1

C CS 1 o kfe t

a

•5

a

ffi

a

ΓΊ a u 1

m a u 1 FR

Ui CQ 1 m

c? <5 3 , U m ^5< G o 1'

č? Cl 0 Cl 3 υ tn J? 5 2 δ

z—*\ Ί>\ o •8 a o Ě 1 cn

3 -(1 -Me-pyrrol-2-yl)

/-s => Tř 1 *X3 K fe 1 cn

8 ó* u ^A s fe G o o

s ď o 8 áí o 1 m

fe ° 3 fe G ® e § 2 8 tt» jj

fe

3 o 33 O Z II 33 ϋ

u V 33 O iř 3 U

3 U II s 3 (_>

5 6 u 1 υ

5 4. □ ř 8

3 U II 3 O iT 3 O

3 U £ υ f 3 u

3 U II 3 υ z II 3 O

3 U Λ ►Jr u 3 O

I G I u

s á: u

s II 3 O 1? s

3 U 3! 2 33 ϋ

3 u 8 1 0

3 £ 8 ír 8

3 V 5 Z É 8

fe

S3

O u

O a

O u

o o

o u

O u

o u

O tj

O u

o □

o u

O u

§

o u

o υ

o o

o u

o o

o t_)

o o

o u

o o

<-~s 3 2- 3 U

o u

o o

o u

o Q

o u

O z:

cs >h

r7

ώί CM T—(

rs rH

S PM i-H

ES PM rH

o PM -H

CU rs rH

θ’ CM w—(

u fS rH

ca es w

•w rs *H

s PM »h

Λ rH

fc PM rH

w PM rH

-46CZ 305350 B6

3 2 ε ^c U o > ©	CN	CN CN	Γ4	in r—M	cn CN	o	r-H
2 í 2 ©		Z				O\	O CN
es	a	a	a	a	a	a	a
fa .	a	a	a	a	a	a	a
•5	*s· i u δ II a u 1 en	fN i o a u II a u 1 m	δ a u & o 1 m	3-CH=CH(3-Pyr)	¥ t II δ > en	♦-M	a
fa	a u & u δ	a u II a u I o	δ & o lf a υ	δ a υ 1 υ	δ δ Ir δ	a u 4 Š CN δ	«4 a v, O c CQ % T o
fa
tt	o o	o o	o o	o	O υ	o o	O u
	o o	o o	o o	o o	o u	o o	o υ
« o Z	>» CN —<	a r-«	« CS ťS 1—(	42 Λ CM W	u es CM rH	CS <*> tH	λ co rH

Příklad 10

Údaje o inhibici PARP, VEGFR2 a MLK3 pro sloučeniny 14 a 15 obecného vzorce IV, kde J ie 5 HaR²jeH

-47CZ 305350 B6

Tabulka 6

č.	A	B	E,F	v	PARP % @ 10 μΜ	MLK3 % @ 1 μΜ
14	CO	CO	(CH₂)₃	s	19	18
15	CO	co	(CH₂)₃	0	18	13

Příklad 10a

Údaje o inhibici PARP pro sloučeniny 14a a 14b obecného vzorce IV, kde R² je H Tabulka 7

Č.	A	B	E,F	J	V	PARP IC_So(nM)
14a	CO	CO	(CH,),	2-OCH₃	NH	224
14b	CO	co	(CH₂)₃	4-OCH₃	NH	19

ío Příklad 10b

Údaje o inhibici PARP pro sloučeniny 15a a 15m obecného vzorce IV, kde B je CO, V je NH, R²je H a E-F = (CH₂)₃

Tabulka 8

Příklad	A	J	PARP IC₅o (nM)
15a	CO	3-OCONC₄H₈O	35
15b	CO	3-0C0NC4HfsNCH₃	51
15c	CO	3-OCONH(CH₂)₂OCH₃	40
15d	CO	3-OCONH(CH₂)₃(l -imidazol)	32
15e	CO	3-OCONH(CH₂)₃(l-butyroiaktam)	28
15f	co	3-OCONHCH₂(3-pyridyl)	34
15g	co	3-OCONH(CH₂)2(2-pyridyl)	36
15h	co	3-OCONCH₃(CH₂)₂(2-pyridyl)	39
ISi	co	3-OCONCH₃[CH₂(4-pyridyl)]	30
	co	3-OCONHCH₂(5-tetrazol)	16
15k	co	3-OCONHNC4H₈O	20
151	co	3-OCONC4H₈N(CH₂)₂OH	15
15m	co	3-OCÓNH(CH₂)₂(2-pyridyl)	31

-48CZ 305350 B6

Příklad 11

Příprava výchozích látek a meziproduktů

Způsoby a látky použité při přípravě výchozích látek, meziproduktů a inhibitorů jsou následující. Chromatografie na tenké vrstvě se provádí na deskách silikagelu (MK6F, 60A, rozměr 25,4 x 76,2 cm, tloušťka vrstvy 250 pm, Whatman lne., Whatman House, UK). Preparativní chromatografie na tenké vrstvě se provádí na deskách silikagelu (rozměr 508 x 508 cm, tloušťka vrstvy 1000 pm, Analtech, Newark, NJ). Preparativní sloupcová chromatografie se provádí na silikagelu Merck, Whitehouse, Station, NJ, silikagel, 40 až 63 nm, 230 až 400 mes. Vysokovýkonná kapalinová chromatografie se provádí za následujících podmínek: 1) rozpouštědla A = 0,1% kyselina trifluoroctová ve vodě, B = 0,1 % kyselina trifluoroctová v acetonitrilu (10 až 100 % B v průběhu 20 min nebo 10 až 95 % B v průběhu 20,5 min), 2) sloupec zorbax Rx-C8 (4,6 mm x 15 cm), 3) průtok 1,6 ml/min. Spektra nukleární magnetické rezonance 'HNMR se zaznamenávají na přístroji GE QE Plus (300 MHz) s použitím tetrametylsilanu jako vnitřního standardu. Hmotnostní spektra ES se zaznamenávají na přístroji VG platform II (Fisons Instruments).

Obrázek 1 znázorňuje způsoby přípravy meziproduktů, prekurzorů a výchozích látek pro sloučeniny podle tohoto vynálezu. Rovněž se zde znázorňuje příprava la.

Meziprodukt C se připraví následujícím způsobem. K ochlazenému (-78 °C) roztoku indolu (A, 20 g, 171 mmol) v suchém tetrahydrofuranu (80 ml) se pomalu (v průběhu 30 min) přidává 2,5 M roztok n-butyllithia v hexanu (68,40 ml, 171 mmol). Směs se míchá při teplotě -78 °C po dobu dalších 30 min, ponechá se ohřát na teplotu místnosti a míchá se po dobu 10 min a ochladí se zpět na -78 °C. Do reakční směsi se zavádí plynný oxid uhličitý po dobu 15 min s následujícím mícháním po dobu 15 min. Přebytek oxidu uhličitého se (s určitou současnou ztrátou tetrahydrofuranu) odstraní při teplotě místnosti z reakční baňky s použitím vakua. Přidá se další suchý tetrahydrofuran (25 ml) do reakční směsi, která se ochladí zpět na -78 °C. K reakční směsi se pomalu přidává 1,7 M terc-butyllithium (100,6 ml, 171 mmol) v průběhu 30 min. Míchání pokračuje po dobu 2 h při teplotě -78 °C s následujícím pomalým přidáváním roztoku cyklopentanonu (B, 15,79 g, 188 mmol) v suchém tetrahydrofuranu (80 ml). Po dalším míchání po dobu 1 h při teplotě -78 °C se reakce ukončí přídavkem vody po kapkách (10 ml) a poté nasyceného roztoku chloridu amonného (100 ml). Do baňky se přidá 300 ml diethyletheru a směs se míchá po dobu 10 min při teplotě místnosti. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem hořečnatým, odpaří a trituruje diethyletherem (40 ml). Oddělená tuhá látka se zfiltruje, promyje chladným etherem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 22,40 g sloučeniny C ve formě bílé tuhé látky. Další podíl 4,88 g se obdrží z matečného louhu a promývacích podílů.

Fyzikální vlastnosti zahrnují teplotu tání 133 až 141 °C, retenční čas 8,68 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 8,46 (široký s, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,17 (t, 1H), 7,09 (t, 1H), 6,34 (s, 1H), 2,2 - 1,6 (m, 8H).

Analytický vzorek byl překiystalován z refluxující směsi methanol/voda.

Elementární analýza: vypočítané hodnoty pro C₁₃Hi₅NO (%) - C 77,58, H 7,51, N 6,96, nalezené hodnoty (%) - C 77,13, H 7,12, N, 6,96.

Meziprodukt D se připraví následujícím způsobem. K roztoku sloučeniny C (20 g, 99,50 mmol) v acetonu (150 ml) se pomalu přidává 2 N roztok kyseliny chlorovodíkové (20 ml) v průběhu 10 min. Směs se míchá po dobu dalších 10 min a přidá se k ní voda (300 ml). Při stání se pomalu objevuje sraženina. Tato sraženina se zfiltruje, promyje směsí voda-aceton (2:1, 3 x 50 ml) a vysuší ve vakuu s obdržením 13,57 g látky D, která se použije v dalším kroku bez jakékoliv další purifikace. Spojené promývací podíly a matečný louh poskytuje stáním dalších 3,72 g bílé tuhé látky.

-49CZ 305350 B6

Fyzikální vlastnosti D zahrnují teplotu tání 166 až 167 °C.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 8,12 (široký s, 1H), 7,57 (d, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,16 (t, 1H), 7,06 (t, 1H), 6,42 (s, 1H), 6,01 (s, 1H), 2,79 (m, 2H), 2,60 (m, 2H), 2,08 (kvintet, 2H).

Vzorek pro analýzu byl vyčištěn chromatografií na silikagelu (hexan/ether, 80:20).

Elementární analýza: vypočítané hodnoty pro C13H13N (%) - C 85,21, H 7,15, N 7,64, nalezené hodnoty (%) - C 85,08, H 7,16, N 7,64.

Meziprodukt F se připraví následujícím způsobem. Směs sloučeniny D (13,57 g, 74,20 mmol) a E (14,4 g, 148 mmol) se důkladně promíchá a zahřívá na teplotu 190 °C v zatavené trubici po dobu 1 h, ochladí se na teplotu místnosti, trituruje chladným methanolem a zfiltruje. Zbytek se promyje několikrát chladným methanolem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 10,30 g sloučeniny F, která se použije v dalším kroku bez jakékoliv další purifikace. Sloučeninu F lze charakterizovat jako žlutou amorfní tuhou látku.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 11,15 (s, 1H), 10,89 (s, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,23 (d, 2H), 6,91 (m, 2H), 4,24 (d, 1H), 3,30 (m, 2H), 2,60 (m, 1H), 2,14 (m, 1H), 1,92 (m, 1H), 1,45 (m, 3H), 1,13 (m, 1H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 279 (M-H)“.

Sloučenina G (la, 5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dion) se připraví následujícím způsobem. Směs sloučeniny F (10,20 g, 36,42 mmol), DDQ (20,7 g, 91,18 mmol) a toluenu (100 ml) se zahřívá na teplotu 60 °C v zatavené trubici přes noc, ochladí se na teplotu místnosti a zfiltruje. Filtrát se promyje několikrát methanolem (celkový objem 250 ml) pro odstranění veškerých vedlejších produktů. Sušení ve vysokém vakuu poskytuje 7,8 g sloučeniny G (la), která se použije bez jakékoliv další purifikace. Sloučenina G, též identifikovaná jako (la), je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,90 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 11,80 (s, 1H), 10,90 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,20 (t, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 275 (M-H).

Následující příklady způsobů příprav prekurzorů a sloučenin v rámci tohoto vynálezu.

Příklad 12

Příprava lb

K suspenzi hydridu sodného (60% voleji, 0,016 g, 0,4 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se pomalu přidává látka la (0,1 g, 0,36 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml). Po ukončení vyvíjení plynného vodíku se do reakční baňky přidá benzyl(3-mesylpropyl)ether (0,11 g, 0,45 mmol) v suchém dimethylformamidu (1 ml). Směs se míchá při teplotě 60 °C po dobu 1,5 h, vylije do ledové vody (zhruba 10 g) a extrahuje ethyl-acetátem (2x15 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí vodou (1x10 ml), nasyceným roztokem chloridu sodného (1x10 ml) a odpaří s obdržením zbytku, který se trituruje směsí ether/hexan (1:1, 5 ml) s obdržením tuhé látky. Tuhá látka se promyje methanolem, vysuší s obdržením 0,046 g sloučeniny lb. Sloučenina lb je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 17,92 min.

-50CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d_é) δ 11,90 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 7,10 (m, 5H), 4,30 (s, 2H), 3,70 (t, 2H), 3,50 (t, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (m, 2H), 1,80 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 423 (M-H).

Příklad 13

Příprava sloučeniny 1 c

K suspenzi hydridu sodného (60% voleji, 0,016 g, 0,4 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se pomalu přidává sloučenina la (0,1 g, 0,36 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml). Po skončení vyvíjení plynného vodíku se do reakční baňky přidá benzyl^t-brombutyronitril (0,08 g, 0,54 mmol) v suchém dimethylformamidu (1 ml). Směs se míchá při teplotě 60 °C po dobu 1,5 h, vylije se do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfdtruje. Zbytek se promyje methanolem a vysuší s obdržením 0,08 g sloučeniny lc. Sloučenina lc je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 14,31 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-dé) δ 11,90 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 3,70 (t, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,50 (t, 2H), 2,25 (m, 2H), 1,90 (m, 2H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 342 (M-H).

Příklad 14

Příprava sloučeniny ld

K suspenzi hydridu sodného (60% v oleji, 0,088 g, 2,2 mmol) v suchém dimethylformamidu (4 ml) se pomalu přidává sloučenina la (0,55 g, 2 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml). Po skončení vyvíjení plynného vodíku se do reakční baňky přidá l-chlor-3-jodpropan (0,49 g, 0,54 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml). Směs se míchá při teplotě 60 °C po dobu 6 h, odpaří na menší objem a vylije se do směsi ledu a vody (zhruba 20 g) a zfiltruje. Zbytek se promyje methanolem a vysuší s obdržením 0,4 g sloučeniny ld. Sloučenina ld je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 16,59 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 11,90 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 3,70 (m, 4H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (m, 2H), 2,10 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 351 a 353 (M-H pro různé izotopy chloru).

Příklad 15

Příprava sloučeniny 1 e

Roztok sloučeniny lb (0,042 g, 0,1 mmol) v dimethylformamidu (10 ml) se hydrogenuje v Paarově aparatuře za přítomnosti hydroxidu palladnatého (0,020 g) a 1 kapky koncentrované kyseliny chlorovodíkové při tlaku 276 kPa po dobu 2 h. Reakční směs se poté zfiltruje vrstvou Celitu® a odpaří s obdržením zbytku, který se trituruje methanolem s obdržením 0,018 g sloučeniny le. Sloučenina leje žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 12,18 min.

-51 CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dó) δ 11,90 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 3,70 (t, 2H), 3,50 (t, 2H), 3,40 (široký, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (m, 2H), 1,80 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 333 (M-H).

Příklad 16

Příprava sloučeniny 1 f

Směs sloučeniny ld (0,062 g, 0,18 mmol) a piperidinu (0,06 g, 0,7 mmol) v ethanolu (4 ml) se zahřívá na teplotu (80 až 85 °C) v zatavené trubici po dobu 3 d. Po ochlazení se reakční směs vylije na směs ledu a vody (zhruba 20 g) a zfiltruje. Zbytek se vysuší, rozpustí v methanolu (5 ml) a zpracuje aktivním uhlím. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytuje 0,005 g sloučeniny lf. Sloučenina lf je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,63 min.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 402 (M+H).

Příklad 17

Příprava sloučeniny lg

Směs sloučeniny 1 d (0,066 g, 0,19 mmol) a přebytku morfolinu v ethanolu (2 ml) se zahřívá na teplotu (80 až 85 °C) v zatavené trubici po dobu 3 d. Po ochlazení se reakční směs odpaří, vyjme methanolem (3 ml) a ochladí na teplotu 0 °C. Přidáváním vody po kapkách k roztoku se vytvoří tuhá látka, která se filtruje a znovu rozpustí v ethyl-acetátu. Vysušení a odpaření rozpouštědla poskytuje 0,019 g sloučeniny lg. Sloučenina 1 g je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 12,91 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 11,90 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 3,70 (t, 2H), 3,25 (m, 6H), 2,25 (m, 10H), 1,80 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 404 (M+H).

Příklad 18

Příprava sloučeniny lh

Směs sloučeniny ld (0,052 g, 0,15 mmol) a přebytek diethylaminu v ethanolu (2 ml) se zahřívá na teplotu (80 až 85 °C) v zatavené trubici po dobu 3 d. Po ochlazení se reakční směs vylije na směs ledu a vody (zhruba 20 g) a zfiltruje. Zbytek se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,015 g sloučeniny lh. Spojené promývací podíly a matečný louh poskytují stáním dalších 0,014 g sloučeniny lh. Sloučenina lh je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,47 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-de) δ 9,00 (d, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 3,70 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,10 (t, 2H), 2,25 (m, 6H), 2,30 (m, 2H), 1,90 (m, 2H), 1,00 (t, 6H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 390 (M+H).

-52CZ 305350 B6

Příklad 19

Příprava sloučeniny lj

K suspenzi hydridu sodného (60% v oleji, 0,008 g, 0,2 mmol) v suchém dimethylformamidu (1 ml) se pomalu přidává sloučenina la (0,05 g, 0,18 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml). Po skončení vyvíjení plynného vodíku se do reakční baňky přidá fenylsulfonylchlorid (0,035 g, 0,2 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml). Směs se míchá při teplotě 60 °C po dobu 1 h, vylije se do směsi ledu a vody (zhruba 20 g) a zfiltruje. Zbytek se postupně promyje vodou a methanolem a vysuší s obdržením 0,036 g sloučeniny lj. Sloučenina lj je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 16,19 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,10 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 8,10 (d, 2H), 7,70 (m, 3H), 7,50 (m, 2H), 7,30 (t, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 415 (M-H).

Příklad 20

Příprava sloučeniny 1 k

K suspenzi hydridu sodného (60% voleji, 0,048 g, 1,2 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se pomalu přidává sloučenina la (0,3 g, 1,1 mmol) v suchém dimethylformamidu (4 ml) a směs se míchá po dobu 30 min. V oddělené baňce se míchá směs Boc-Lys(Boc)-dicyklohexylaminové soli (1,16 ml, 2,2 mmol), TBTU (0,71 g, 2,2 mmol), NMM (0,22 g, 2,2 mmol) v suchém dimethylformamidu (5 ml) po dobu 30 min a přidá se do první reakční baňky. Směs se míchá po dobu 1 h (vysokovýkonná kapalinová chromatografie ukazuje 70 % nového produktu). Zbytek se promyje několikrát vodou, vysuší ve vysokém vakuu, rozpustí v dioxanu (3 ml) a přidá se 4 N roztok kyseliny chlorovodíkové v dioxanu (3 ml). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 1 h se reakční směs zfiltruje a zbytek se promyje několikrát dioxanem a poté etherem. Vysušení ve vysoké vakuu poskytuje 0,1 g sloučeniny lk. Sloučenina lk je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 5,93 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 8,80 (d, 1H), 8,70 (široký, 3H), 8,00 (široký, 3H), 7,60 (m, 2H), 7,30 (t, 1H), 5,00 (široký, 1H), 3,25 (m, 4H), 2,70 (široký, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,00 (2 soubory širokého signálu, 2H), 1,50 (široký m, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 406 (M+2H).

Příklad 21

Příprava sloučeniny 11

Tato sloučenina se připraví stejným způsobem, jako se popisuje výše pro přípravu sloučeniny lk. Tím se obdrží z 0,1 g sloučeniny la a 0,14 g Boc-(3-alaninu jako výchozích látek 0,025 g sloučeniny 11. Sloučenina lije žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,45 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dg) δ 12,20 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 8,00 (široký, 3H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 3,30 (t, 2H), 3,25 (m, 6H), 2,35 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 348 (M+H).

-53 CZ 305350 B6

Příklad 22

Příprava sloučeniny lm

Tato sloučenina se připraví stejným způsobem, jako se popisuje výše pro přípravu sloučeniny lk. Tím se obdrží z 0,1 g sloučeniny la a 0,13 g Boc-glycinu jako výchozích látek 0,028 g sloučeniny lm. Sloučenina lm je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,14 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 8,70 (d, 1H), 8,30 (široký, 3H), 7,60 (m, 2H), 7,30 (t, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,25 (m, 4H), 2,25 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 334 (M+H).

Příklad 23

Příprava sloučeniny 1 p

K suspenzi hydridu sodného (60% v oleji, 0,08 g, 2 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se pomalu přidává sloučenina la (0,5 g, 1,8 mmol) v suchém dimethylformamidu (4 ml). Po skončení vyvíjení plynného vodíku se do reakční baňky přidá benzyl-2-bromacetát (0,46 g, 2 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml). Směs se míchá při teplotě 60 °C po dobu 1 h, vylije se do směsi ledu a vody (zhruba 20 g) a zfiltruje. Surový zbytek se poté purifikuje mžikovou chromatografií (20% tetrahydrofuranu v toluenu) s obdržením 0,2 g sloučeniny lp. Sloučenina lp je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 14,59 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 8,50 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (m, 6H), 5,10 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 3,25 (m, 4H), 2,25 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 423 (M-H).

Příklad 24

Příprava sloučeniny 1 n

K suspenzi hydridu sodného (60% v oleji, 0,029 g, 0,72 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se pomalu přidává sloučenina la (0,17 g, 0,6 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml). Po skončení vyvíjení plynného vodíku se do reakční baňky přidá benzyl-2-bromethylether (0,16 g, 0,73 mmol) v suchém dimethylformamidu (1 ml). Směs se míchá při teplotě 60 °C po dobu 4 h, vylije se do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Surový zbytek se poté purifikuje mžikovou chromatografií (20 % tetrahydrofuranu v toluenu) s obdržením 0,13 g sloučeniny ln. Sloučenina ln je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 14,62 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dé) δ 11,90 (s, 1H), 8,50 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,20 (m, 6H), 4,50 (s, 2H), 3,70 (překrývající se dd, 2H), 3,60 (překrývající se dd, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 409 (M-H).

Příklad 25

Příprava sloučeniny lo

-54CZ 305350 B6

Roztok sloučeniny ln (0,1 g, 0,24 mmol) v dimethylformamidu (8 ml) se hydrogenuje v Paarově aparatuře za přítomnosti hydroxidu palladnatého (0,025 g) a 1 kapky koncentrované kyseliny chlorovodíkové při tlaku 310 kPa po dobu 16 h. Reakční směs se poté zfiltruje vrstvou Celitu® a odpaří s obdržením 0,077 g odpovídajícího debenzylovaného produktu ve formě žluté amorfní tuhé látky s retenčním časem 10,37 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 11,90 (s, 1H), 8,75 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 4,80 (t, 1H), 3,60 (m, 4H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (m,2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 319 (M-H).

Výše popsaný produkt (0,052 g, 0,163 mmol) se převede za přítomnosti p-toluensulfonylchloridu (0,214 g, 1,122 mmol) a pyridinu (3 ml) na odpovídající p-toluensulfonylový derivát (0,07 g). Roztok této sloučeniny (0,05 g) v tetrahydrofuranu (2 ml) a přebytek diethylaminu se podrobí refluxu v zatavené trubici po dobu 2 d. Přebytečné rozpouštědlo a reakční činidlo se odpaří. Zbytek se promyje několikrát methanolem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,20 g sloučeniny lo. Sloučenina loje žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,06 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-de) δ 11,90 (s, 1H), 8,75 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 3,60 (t, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,60 (t, 2H), 2,50 (q, 4H), 2,25 (m, 2H), 0,80 (t, 6H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 376 (M+H).

Příklad 26

Příprava sloučeniny 1 q

Roztok sloučeniny lp (0,030 g, 0,071 mmol) v směsi methanol/dimethylformamid (1:1, 10 ml) se hydrogenuje v Paarově aparatuře za přítomnosti 10% palladia na uhlíku (typ DeGussa, obsah vody 50 %) při tlaku 276 kPa po dobu 15 min. Reakční směs se poté zfiltruje vrstvou Celitu® a odpaří s obdržením 0,026 g sloučeniny lo. Sloučenina lp je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,36 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 8,75 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 4,25 (s, 2H), 4,00 - 3,00 (široký, 1H), 3,25 (m, 4H), 2,25 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 333 (M-H).

Příklad 27

Příprava sloučeniny lr

K roztoku lq (0,20, 0,060 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se při teplotě 0 °C přidá EDC1 (0,012 g, 0,063 mmol). Směs se míchá po dobu 10 min a přidá se komplex HOBt-amoniak (0,017 g, 0,112 mmol, 1,12 g komplexu se připraví reakcí 1,30 g HOBt a 1,1 ml 28% hydroxidu amonného v 10 ml acetonu s následným odpařením rozpouštědel). Ledová lázeň se odstraní a směs se míchá přes noc. Poté se nalije na směs ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Zbytek se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,012 g sloučeniny lr. Sloučenina lr je žlutá tuhá látka s retenčním časem 9,28 min.

Hmotnostní spektrometrie MS m/z 332 (M-H).

-55CZ 305350 B6

Příklad 28

Příprava sloučeniny 1 s

K suspenzi hydridu sodného (60% voleji, 0,016 g, 0,4 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se pomalu přidává sloučenina la (0,1 g, 0,36 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml). Po skončení vyvíjení plynného vodíku se do reakční baňky přidá N-brommethylftalimid (0,096 g, 0,4 mmol) v suchém dimethylformamidu (1 ml). Směs se míchá při teplotě 60 °C přes noc, vylije se do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Zbytek se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,1 g sloučeniny ls. Sloučenina ls je žlutá tuhá látka s retenčním časem 13,07 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 8,75 (d, 1H), 7,80 (m, 4H), 7,50 (m, 2H), 7,25 (t, 1H), 5,50 (s, 2H), 3,25 (m, 4H), 2,25 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 434 (M-H).

Příklad 29

Příprava sloučeniny lt l-Methyl-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on

Sloučenina 5a (20 mg, 0,076 mmol) v dimethylformamidu (0,2 ml) se zpracuje jodmethanem (11,4 mg, 0,08 mmol) a hydridem sodným (8,1 mg 60%, 0,2 mmol) v průběhu 18 h. Přidá se voda (1 ml). Výsledná sraženina se vaří pod zpětným chladičem s acetonem, ochladí a sraženina se sbírá s obdržením produktu ve formě bělavé tuhé látky (9 mg, výtěžek 43 %).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 277 (M+H)⁺.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 8,45 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,55 (t, 1H), 7,30 (t, 1H), 4,82 (s, 2H), 4,12 (s, 3H), 3,52 (t, 2H), 3,40 (t, 2H), 2,25 (kvintet, 2H).

Příklad 30

Příprava sloučeniny 1 u

-[Bis(terc-butoxykarbonyl)-L-lysyl]-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4c]karbazol-7(6H)-on

Bis-(terc-butoxykarbonyl)lysylový derivát se připraví podle popisu pro sloučeninu lk a purifikuje chromatografií směsí dichlorethan/ether s obdržením žluté sklovité látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 613 (M+Na)⁺.

Příklad 31

Příprava sloučeniny 1 v

Dihydrochlorid 11-L-lysyl-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)onu

-56CZ 305350 B6

Skupiny BOC sloučeniny lu se hydrolyzují 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxanu s obdržením produktu ve formě hnědé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 391 (M+H)⁺, 263 (M+H+Lysyl)⁺.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-dg) δ 12,1 (s, 1H), 8,6 (s, 3H), 8,4 (s, 3H), 8,08 (1H, d), 8,0 (s, 3H), 7,62 (d, 1H), 7,50 (t, 1H), 7,32 (t, 1H), 5,35 (s, 2H), 5,15 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 2,75 (m, 2H), 2,2 - 1,5 (m, 6H).

Příklad 32

Příprava sloučeniny 2a

Směs sloučeniny la (1 g, 3,6 mmol), N-bromsukcinimidu (0,64 g, 3,62 mmol) a suchého dimethylformamidu (20 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 h. Reakční směs se poté vylije do methanolu (100 ml) a zfiltruje. Vysrážená tuhá látka se promyje několikrát methanolem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,97 g sloučeniny 2a. Produkt je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 12,39 min.

Nukleární magnetická rezonance ^!H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,75 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 353 a 355 (M-H pro různé izotopy bromu).

Příklad 33

Příprava sloučeniny 2b

Směs sloučeniny la (0,20 g, 0,72 mmol), N-chlorsukcinimidu (0,106 g, 0,75 mmol) a suchého dimethylformamidu (5 ml) se míchá při teplotě 60 °C po dobu 1 h. Reakční směs se poté vylije do methanolu (10 ml) a zfiltruje. Vysrážená tuhá látka se promyje několikrát methanolem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,11 g sloučeniny 2b. Sloučenina 2b je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 14,06 min.

Nukleární magnetická rezonance ^]H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 7,50 (m, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 309 a 301 (M-H pro různé izotopy chloru).

Příklad 34

Příprava sloučeniny 2c

Tato sloučenina se připraví s použitím 5-fluorindolu jako výchozí látky stejným způsobem v několika krocích, jak se popisuje pro přípravu sloučeniny la z indolu. Sloučenina 2c je oranžová amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,50 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 8,50 (d, 1H), 7,50 (m, 1H), 7,30 (t, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 293 (M-H).

-57CZ 305350 B6

Příklad 35

Příprava sloučeniny 2d

K suspenzi chloridu hlinitého (0,072 g, 0,54 mmol) v 1,2-dichlorethanu (2 ml) o teplotě 0 °C se přidá acetylchlorid (0,042 g, 0,54 mmol). Do reakční baňky se pomalu přidává suspenze sloučeniny la (0,050 g, (0,18 mmol) v 1,2-dichlorethanu (4 ml). Chladicí lázeň se odstraní a směs se míchá po dobu 4 h, vylije se na směs ledu (zhruba 10 g) a 2 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (10 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou, míchá se přes noc ve směsi methanol/voda (4:1, 5 ml) a zfiltruje. Promyje se malými objemy methanolu a etheru a vysuší ve vakuu s obdržením 0,023 g sloučeniny 2d. Sloučenina 2d je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,82 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,25 (s, IH), 11,00 (s, IH), 9,30 (s, IH), 8,00 (d, IH), 7,50 (d, IH), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,70 (s, 3H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 317 (M-H).

Příklad 36

Příprava sloučeniny 2e

Tato sloučenina se připraví stejným způsobem, jako se popisuje výše pro přípravu sloučeniny 2d. S použitím 0,050 g sloučeniny la a 0,10 g bromacetylbromidu jako výchozích látek se tedy obdrží 0,045 g sloučeniny 2e. Sloučenina 2e je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,76 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,30 (s, IH), 11,00 (s, IH), 9,40 (s, IH), 8,10 (d, IH), 7,60 (d, IH), 4,80 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 396 (M-H).

Příklad 37

Příprava sloučeniny 2f

Tato sloučenina se připraví podle stejného způsobu, jako se popisuje výše pro přípravu sloučeniny 2e. S 0,2 g výchozí látky la se obdrží 0,2 g látky 2f. Sloučenina 2f je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,96 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, IH), 11,00 (s, IH), 9,50 (s, IH), 8,20 (d, IH), 7,50 (d, IH), 5,70 (q, IH), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,80 (d, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 410 (M-H).

Příklad 38

Příprava sloučeniny 2g

Směs sloučeniny 2e (0,036 g, 0,09 mmol) triethylaminu (0,010 g, 0,10 mmol) a N-methylpiperazinu (0,010 g, 0,10 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 0,5 h, vylije do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Vysrážená tuhá látka se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,010 g sloučeniny 2g. Sloučenina 2g je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 5,77 min.

-58CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,25 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,50 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,70 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,50 (široký m, 6H), 2,10 (t, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 417 (M+H).

Příklad 39

Příprava sloučeniny 2h

Směs sloučeniny 2e (0,040 g, 0,10 mmol) triethylaminu (0,011 g, 0,11 mmol) a morfolinu (0,0096 g, 0,11 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 h, vylije do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Vysrážená tuhá látka se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,19 g sloučeniny 2h. Sloučenina 2h je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,50 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,25 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,50 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 3,70 (s, 2H), 3,50 (široký, 4H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,40 (široký, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 404 (M+H).

Příklad 40

Příprava sloučeniny 2i

Směs sloučeniny 2e (0,040 g, 0,1 mmol), triethylaminu (0,011 g, 0,11 mmol) a piperidinu (0,009 g, 0,11 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 0,5 h, vylije do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Vysrážená tuhá látka se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,034 g sloučeniny 2i. Sloučenina 2i je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,32 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,25 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,50 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,50 (s, 2H), 3,50 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,40 (široký, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,50 (široký, 4H), 1,30 (široký, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 402 (M+H).

Příklad 41

Příprava sloučeniny 2j

Směs sloučeniny 2e (0,040 g, 0,1 mmol), triethylaminu (0,012 g, 0,12 mmol) a diethylaminu (0,009 g, 0,12 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 h, vylije do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Vysrážená tuhá látka se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,026 g sloučeniny 2j. Sloučenina 2j je tmavě hnědá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,04 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dé) δ 12,25 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,50 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,70 (s, 2H), 3,25 (2 souboiy t, 4H), 2,60 (q, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,00 (t, 6H).

-59CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 390 (M+H).

Příklad 42

Příprava sloučeniny 2k

Směs sloučeniny 2e (0,050 g, 0,13 mmol), triethylaminu (0,028 g, 0,27 mmol) a hydrochloridu sarkosin-terc-butylesteru (0,025 g, 0,135 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 72 h, vylije do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Vysrážená tuhá látka se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,035 g sloučeniny 2k. Sloučenina 2k je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,20 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,10 (s, 2H), 3,40 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,40 (s, 3H), 2,25 (široký m, 2H), 1,40 (s, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 461 (M+H).

Příklad 43

Příprava sloučeniny 21

Směs sloučeniny 2k (0,018 g, 0,039 mmol) a kyseliny trifluoroctové (0,3 ml) se míchá přes noc při teplotě místnosti. Odstraní se přebytečná kyselina trifluoroctová a do reakční baňky se přidá ethyl-acetát (5 ml). Tuhá látka, která se pomalu objevuje, se filtruje, promyje několikrát ethylacetátem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,016 g sloučeniny 21. Sloučenina 21 je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,34 min (široký interval).

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d_é) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,70 (s, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,50 (široký 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,70 (s, 3H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 406 (M+H).

Příklad 44

Příprava sloučeniny 2m

K suspenzi chloridu hlinitého (2,89 g, 21,7 mmol) v 1,2-dichlorethanu (5 ml) o teplotě 0 °C se přidá anhydrid kyseliny jantarové (1,086 g, 10,86 mmol). Do reakční baňky se pomalu přidává suspenze sloučeniny la (1 g, 3,62 mmol) v 1,2-dichlorethanu (10 ml). Chladící lázeň se odstraní a směs se míchá po dobu 5 h, vylije se na směs ledu (zhruba 10 g) a 2 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (10 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou, míchá se přes noc ve směsi methanol/voda (4:1, 10 ml) a zfiltruje. Produkt se postupně promyje malými objemy vody a etheru a vysuší ve vakuu s obdržením 1,16 g sloučeniny 2m. Sloučenina 2m je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,17 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,30 (s, 1H), 12,10 (široký s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,40 (m, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,60 (m, 2H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 375 (Μ—H).

-60CZ 305350 B6

Příklad 45

Příprava sloučeniny 2n

K roztoku sloučeniny 2e (0,040 g, 0,1 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se přidá 1,2,4-triazol, sodný derivát (0,014 g, 0,14 mmol). Směs se míchá po dobu 30 min při teplotě místnosti, vylije se do směsi ledu a vody (zhruba 10 g) a zfiltruje. Zbytek se promyje několikrát vodou a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,024 g sloučeniny 2n. Sloučenina 2n je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,28 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-de) δ 12,50 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 6,00 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 386 (M+H).

Příklad 46

Příprava sloučeniny 2o

Způsob s kyanidem měďným

Směs sloučeniny 2a (0,1 g, 0,28 mmol), kyanidu měďnatého (0,075 g, 0,85 mmol) a l-methyl-2pyrrolidinonu (4 ml) se zahřívá na teplotu místnosti, zfiltruje se vrstvou silikagelu a odpaří na malý objem a nalije do vody (20 ml). Vysrážená tuhá látka se zfiltruje, promyje vodou, vysuší a purifikuje sloupcovou chromatografií (elucí ethyl-acetátem) s obdržením 0,006 g sloučeniny 2o. Způsob s kyanidem zinečnatým

Směs sloučeniny 2a (2,33 g, 6,56 mmol) a kyanidu zinečnatého (1,56 g, 13,3 mmol) se rozpustí v dimethylformamidu (22 ml) pod atmosférou dusíku. Přidá se tetrakistrifenylfosfinpalladium (1,17 g, 0,10 mmol, 15 molámích %) a směs se míchá při teplotě 125 °C po dobu 80 min. Teplý roztok se zfiltruje ve vakuu Celitem® a vrstva Celitu se promyje horkým dimethylformamidem. Filtrát se zředí 2 objemy vody. Výsledná sraženina se sbírá, vysuší a trituruje ethyl-acetátem a promyje ethyl-acetátem, potom etherem a obdrží se slabě znečištěný produkt jako hnědavě oranžová tuhá látka (2,17 g). Tu lze purifikovat sloupcovou chromatografií jako výše. Sloučenina 2o je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,51 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,40 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 300 (M-H).

Příklad 47

Příprava sloučeniny 2p

Hydrochlorid 3-(aminomethyl)-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dionu

3-Kyano-5,7,8,9,10,l l-hexahydropent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dion, sloučenina 2o (580 mg) se rozpustí v dimethylformamidu (58 ml). Roztok se nasytí amoniakem a hydrogenuje při tlaku 380 kPa čerstvě připraveným [R. Mozingo, Org. Synth., 3, 181-183 (1955)] Raneyovým

-61 CZ 305350 B6 niklem W-2 (2,4 g) v průběhu 7 d. Přidá se další Raneyův nikl podle potřeby. Sraženina obsahující katalyzátor a malé množství produktu se odstraní a rozpouštědlo se odpaří z filtrátu s obdržením oranžového surového produktu (408 mg). Tento surový produkt se suspenduje ve vodě (70 ml) a 1M roztoku kyseliny chlorovodíkové (1,5 ml) a smísí s Celitem® 521 a poté se zfiltruje. Zbytek se lyofilizuje s obdržením produktu ve formě žluté tuhé látky (288 mg, výtěžek 44 %).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-dó) δ 12,20 (s, 1H), 11,02 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,36 (široký s, 3H), 7,65 (m, 2H), 4,19 (široký s, 2H), 4,00 (s, 2H), 3,28 (t, 2H), 3,21 (t, 2H), 2,31 (kvintet, 2H). NMR (D₂O) d 7,58 (s, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,03 (d, 1H), 4,07 (s, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,90 (m, 2H), 1,65 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 289 (M+H-NH₃), 306 (M+H)⁺.

Elementární analýza: výpočet pro Ci8Hi₅N₃O₂.2,l HCI. 1,6 H₂O (%) - C 52,64, H 4,98, N 10,23, Cl 18,13, nalezená hodnota (%)-C 52,38, H 4,61, N 10,03, Cl 18,29.

Příklad 48

Příprava sloučeniny 2q

Hydrochlorid bis-[5(6H),7-dioxo-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol3-ylmethyl]aminu

Při rozpuštění 3-kyano-5,7,8,9,10,l l-hexahydropent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dionu, 2o (115 mg) v dimethylformamidu a hydrogenaci jako výše, avšak za přítomnosti amoniaku, ukazuje vysokovýkonná kapalinová chromatografie směs 60:40 dimerů 2q a monomeru 2p. Směs se míchá s 0,01 M roztokem kyseliny chlorovodíkové (50 ml) a zfiltruje. Sraženina se extrahuje dimethylformamidem (15 ml) s obdržením produktu ve formě žluté tuhé látky.

Nukleární magnetická rezonance ^]H NMR (DMSO-de) δ 10,09 (s, 2H), 9,31 (s, 2H), 8,03 (d, 2H), 7,73 (d, 2H), 4,13 (široký s, 4H), 3,28 (t, 4H), 3,21 (t, 4H), 2,30 (kvintet, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 594 (M+H)⁺.

Příklad 49

Příprava sloučeniny 2r

3-{AcetyIamÍnomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7dion

EDCI (30 mg, 0,156 mmol) se přidá k suspenzi hydrochloridu 3-(aminomethyl)-5,7,8,9,10,l 1hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dionu (2p, 31 mg, 0,10 mmol), NMM (15 μΐ, 13 mmol), HOBT-H₂O (16 mg, 0,10 mmol) a kyseliny octové (10 mg, 0,17 mmol) v dimethylformamidu (0,5 ml). Veškeré tuhé látky se rozpouštějí v průběhu 10 min. Po 2 d se přidá voda (4 ml). Sraženina se sbírá a promývá vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou, 1 M roztokem kyseliny chlorovodíkové a vodou, poté se vysuší, obdrží se produkt (2r, 23 mg, 73 % výtěžku) ve formě zlatohnědé tuhé látky.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 11,92 (s, 1H), 10,95 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,43 (t, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,43 (d, 1H), 4,43 (d, 2H), 3,27 (t, 2H), 3,19 (t, 2H), 2,30 (kvintet, 2H), 1,91 (s, 3H).

-62CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 346 (M-H) .

Příklad 50

Příprava sloučeniny 2s

3-(Propanoylaminomethyl)-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dion

Připraví se z 2p a kyseliny propionové způsobem podobným způsobu při přípravě sloučeniny 2r.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 11,93 (s, 1H), 10,96 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,40 (t, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 4,42 (d, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,22 (t, 2H), 2,35 (kvintet, 2H), 2,22 (q, 2H), 1,11 (t, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 360 (M-H)“.

Příklad 51

Příprava sloučeniny 2t

3-(Butanoylaminomethyl)-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dion

Připraví se ze sloučeniny 2p a kyseliny máselné způsobem podobným způsobem přípravy sloučeniny 2r.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-ds) δ 11,90 (s, 1H), 10,96 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,40 (t, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,42 (d, 1H), 4,42 (d, 2H), 3,35 (t, 2H), 3,26 (t, 2H), 2,28 (kvintet, 2H), 2,15 (t, 2H), 1,60 (m, 2H), 0,89 (t, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 374 (M-H) .

Příklad 52

Příprava sloučeniny 2u

3-(Benzoylaminomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dion

Připraví se ze sloučeniny 2p a kyseliny benzoové způsobem podobným způsobu přípravy sloučeniny 2r.

Nukleární magnetická rezonance ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 11,94 (s, 1H), 10,95 (s, 1H), 9,18 (t, 1H), 9,82 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,50 (m, 6H), 4,67 (d, 2H), 3,27 (t, 2H), 3,19 (t, 2H), 2,30 (kvintet, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 408 (M-H) .

-63 CZ 305350 B6

Příklad 53

Příprava sloučeniny 2v

3-(N-(2-N-Boc-amino)acetyl)aminomethyl)-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4c]karbazol-5(6H),7-dion

Připraví se ze sloučeniny 2p a BOC-glycinu způsobem podobným způsobu přípravy sloučeniny 2r.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 11,93 (s, 1H), 10,96 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,38 (t, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,46 (d, 1H), 6,96 (široký s, 1H), 4,45 (d, 2H), 3,61 (d, 2H), 3,27 (t, 2H), 3,19 (t, 2H), 2,33 (kvintet, 2H), 1,40 (s, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 461 (M-H) .

Příklad 54

Příprava sloučeniny 2w

3-(N-(4-(N-Boc-amino)butanoyl)aminomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c] karbazol-5 (6H), 7-dion

Připraví se ze sloučeniny 2p a BOC-4-aminomáselné kyseliny způsobem podobným způsobu přípravy sloučeniny 2r.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 11,87 (s, 1H), 10,90 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,36 (t, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,43 (d, 1H), 6,77 (široký s, 1H), 4,41 (d, 2H), 3,24 (t, 2H), 3,17 (t, 2H), 2,93 (kvintet, 2H), 2,29 (kvintet, 2H), 2,15 (t, 2H), 1,65 (kvintet, 2H), 1,37 (s, 9H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 489 (M-H)“.

Příklad 55

Příprava sloučeniny 2x

3-(N-(2-(Amino)acetyl)aminomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dion

Tato sloučenina se připraví zpracováním sloučeniny 2v 2 M roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxanu.

Nukleární magnetická rezonance NMR (D₂O) δ 7,40 (s, 1H), 7,07 (d, 1H), 6,89 (d, 1H), 4,32 (široký s, 2H), 3,90 (široký s, 2H), 3,76 (m, 4H), 1,99 (m, 4H), 1,65 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 363 (M+H)⁺.

Příklad 56

Příprava sloučeniny 2y

-64CZ 305350 B6

3-(N-(4-(Amino)butanoyl)aminomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5 (6H), 7-dion

Tato sloučenina se připraví zpracováním sloučeniny 2w 2 M roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxanu.

Nukleární magnetická rezonance NMR (D₂O) δ 7,36 (s, 1H), 7,03 (d, 1H), 6,85 (d, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,84 (t, 2H), 3,76 (m, 2H), 3,68 (t, 2H), 3,09 (t, 2H), 2,45 (t, 2H), 2,02 (m, 4H), 2,15 (t, 2H), 1,61 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 391 (M+H)⁺.

Příklad 57

Příprava sloučeniny 2z

3-(N-(3-(Methoxykarbonyl)propanoyl)aminomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dion

Připraví se ze sloučeniny 2p a monomethyl-sukcinátu způsobem podobným způsobu popsanému pro přípravu sloučeniny 2r.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 418 (M-H) .

Příklad 58

Příprava sloučeniny 2aa

3-(N-(3-(Methoxykarbonyl)butanoyl)aminomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dion

Připraví se ze sloučeniny 2p a monomethyl-glutarátu způsobem podobným způsobu popsanému pro přípravu sloučeniny 2r.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 432 (M-H)“.

Příklad 59

Příprava sloučeniny 2ab

3-(N-(3-(Karboxy)propanoyl)aminomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4c]karbazol-5(6H),7-dion

Anhydrid kyseliny jantarové (3,1 mg, 0,031 mmol) se přidá k suspenzi hydrochloridu 3(aminomethyl)-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7-dionu (9,8 mg, 0,029 mmol) a NMM (9 μΐ, 0,082 mmol) v dimethylformamidu (0,2 ml). Tuhá látka se rozpustí v průběhu 30 min a poté se vytvoří nová sraženina. Po 1 h se přidá 1 M roztok kyseliny chlorovodíkové. Sraženina se sbírá, promývá vodou a poté se suší s obdržením produktu, sloučeniny 2ab (11,4 mg, výtěžek 98 %) ve formě žluté tuhé látky.

Hmotnostní objem MS m/e 404 (M-H)“.

-65 CZ 305350 B6

Příklad 60

Příprava sloučeniny 2ac

3-(N-(4-(Karboxy)butanoyI)aminomethyl)-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4c]karbazol-5(6H),7-dion

Připraví se z anhyridu kyseliny glutarové způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeniny 2ab.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 418 (M-H)'

Příklad 61

Příprava sloučeniny 2ad

3-(N-Boc-aminomethyl)-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocykopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7dion

NMM (14 mg, 0,14 mmol) se přidá ke směsi hydrochloridu 3-(aminomethyl)-5,7,8,9,10,l 1hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H), 7-dionu (2p, 15 mg, 0,045 mmol) a diterc-butyl-dikarbonátu (18 mg, 0,082 mmol) v dimethylformamidu (1 ml). Po 2 h se směs zfiltruje a přidá se voda (5 ml). Sraženina se sbírá a promývá 3% kyselinou citrónovou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou a poté se vysuší s obdržením produktu (12 mg, výtěžek 67 %) ve formě zlatohnědé tuhé látky. Tuto tuhou látku lze purifikovat chromatografii na silikagelu elucí ethylacetátem s obdržením žluté tuhé látky.

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDCfi) δ 8,78 (s, 1H), 8,34 (s, 2H), 7,49 (s, 1H), 7,31 (m, 1H), 5,00 (m, 1H), 4,51 (s, 1H), 3,40 (t, 2H), 3,16 (t, 2H), 2,39 (kvintet, 2H), 1,53 (s, 9H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 404 (M-H)'.

Příklad 62

Příprava sloučeniny 2ae

K suspenzi sloučeniny 5a (0,1 g, 0,36 mmol) v methylenchloridu (2 ml) o teplotě 0 °C se pomalu přidává kyselina chlorsulfonová (0,05 g, 0,4 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu dalších 30 min, poté se míchá při teplotě místnosti přes noc a zfiltruje. Zbytek se promyje postupně methylenchloridem a etherem. Poté se purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografii s obdržením 0,008 g sloučeniny 2ae. Sloučenina 2ae je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 4,89 min (široký).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,40 (d, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,50 (s, 1H), 2,25 (široký m, 2H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 355 (M-H).

Příklad 62a

Příprava sloučeniny 2af

-66CZ 305350 B6

K roztoku sloučeniny 5a (26 mg, 0,10 mmol) v dimethylformamidu (2 ml) se přidá Nchlorsukcinimid (15 mg, 0,11 mmol). Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 18 h a poté se přidává po kapkách do míchané baňky s vodou (10 ml). Výsledná sraženina se sbírá filtrací za odsávání, promyje se vodou (3x5 ml) a vysuší do konstantní hmotnosti s obdržením 15 mg (52 %) sloučeniny podle nadpisu ve formě bělavé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 295/297 (M+H)⁺.

Příklad 62b

Příprava sloučeniny 2ag

Suspenze sloučeniny 5c (305 mg, 1,06 mmol) v 1,4-dioxanu (15 ml) a koncentrované kyselině chlorovodíkové (15 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 72 h. Dioxan se odstraní odpařením na rotačním zařízení a produkt se sbírá filtrací s odsáváním, promývá vodou do neutrální reakce a vysuší na vzduchu do konstantní hmotnosti s obdržením 315 mg (97 %) sloučeniny podle nadpisu ve formě hnědé až světle hnědé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 305 (M-H)⁺.

Příklad 62c

Příprava sloučeniny 2ah

K roztoku sloučeniny 2ag (75 mg, 0,25 mmol) v dimethylformamidu (5 ml) a ethanolu (1 ml) se přidá roztok (trimethylsilyl)diazomethanu (2 M roztok v hexanu, 0,6 ml, 1,2 mmol). Po míchání po dobu 4 h se přidá několik kapek ledové kyseliny octové, rozpouštědla se odpaří ve vakuu a zbytek se suspenduje ve vodě (5 ml) a lyofilizuje s obdržením llmg (91 %) sloučeniny podle nadpisu ve formě hnědé či světle hnědé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 319 (M-H)⁺.

Příklad 62d

Příprava sloučenin 2ai

K roztoku sloučeniny 2ag (20 mg, 0,065 mmol) v dimethylformamidu (3 ml) se přidá 1-hydroxybenzotriazol (HOBt, 13 mg, 0,098 mmol) a benzotriazol-l-yloxytris(dimethylamino)fosfoniumjexafluorofosfát (BOP, 43 mg, 0,098 mmol). Směs se míchá po dobu 2 h, přidá se N,N-dimethylethylendiamin (9 mg, 0,098 mmol) a míchání pokračuje po dobu 1 až 3 h do ukončení reakce stanoveného na základě analýzy vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií. Směs se odpaří do olejovitého zbytku, promyje důkladně etherem, rozpustí v 0,5 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (5 ml) zfiltruje do vyčeření a lyofilizuje s obdržením 25 mg (93 %) sloučeniny podle nadpisu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 377 (M+H)⁺.

Příklad 62e

Příprava sloučeniny 2aj

-67CZ 305350 B6

Tato sloučenina se připraví podle způsobu popsaného výše pro příklad 2ai. Ze sloučeniny 2ag (20mg, 0,065 mmol) a 4-(2-aminoethyl)morfolinu (13 mg, 0,098 mmol) se obdrží 29 mg (97 %) sloučeniny podle nadpisu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 419 (M+H)⁺.

Příklad 62f

Příprava sloučeniny 2ak

Tato sloučeniny se připraví podle způsobu popsaného výše pro příklad 2ai s tím rozdílem, že se oddělení produktu dosáhne zředěním reakční směsi ethyl-acetátem (15 ml) a promytím výsledné sraženiny ethyl-acetátem (2x5 ml) a etherem (5 ml). Ze sloučeniny příkladu 2ag (20 mg, 0,065 mmol) a morfolinu (7 mg, 0,078 mmol) se obdrží 4 mg (17 %) sloučeniny podle nadpisu ve formě hnědé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 376 (M+H)⁺.

Příklad 62g

Příprava sloučeniny 2al

Tato sloučenina se připraví podle způsobu popsaného výše pro příklad 2ai s tím rozdílem, že se oddělení produktu dosáhne odpařením dimethylformamidu, mícháním zbytku s methanolem (3 ml) a promytím zbývající sraženiny 50% směsí methanol/ether (5 ml) a etherem (5 ml). Z látky z příkladu 2ag (20 mg, 0,065 mmol) a 4-(N-methyl-aminomethyl)pyridinu (12 mg, 0,098 mmol) se obdrží 18 mg (67 %) sloučeniny podle nadpisu ve formě světle hnědé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 411 (M+H)⁺.

Příklad 62h

Příprava sloučeniny 2am

Tato sloučenina se připraví podle způsobu popsaného výše pro příklad 2ai s tím rozdílem, že se produkt oddělí odpařením dimethylformamidu, mícháním zbytku s 50% směsí methanol/ether (2 ml) a promytím zbývající sraženiny etherem (2x3 ml). Ze sloučeniny příkladu 2ag (20 mg, 0,065 mmol) a dihydrochloridu N-methylhistaminu (21 mg, 0,104 mmol) se obdrží 5 mg (19 %) sloučeniny podle nadpisu ve formě světle hnědé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 414 (M+H)⁺.

Příklad 62i

Příprava sloučeniny 2an

Tato sloučenina se připraví podle způsobu popsaného výše pro příkladu 2ai. Ze sloučeniny příkladu 2ag (20 mg, 0,065 mmol) a 2-(N-methylaminomethyl)pyridinu (13 mg, 0,104 mmol) se obdrží 27 mg (99 %) sloučeniny podle nadpisu ve formě světle hnědé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 411 (M+H)⁺.

-68CZ 305350 B6

Příklad 62j

Příprava sloučeniny 2ao

Směs 5-triisopropylsilyloxy-2-(l-hydroxycyklopentyl)indolu (0,4 g, 1 mmol) a maleinamidu (0,15 g, 1,6 mmol) v kyselině octové se míchá po dobu 24 h při teplotě místnosti. Směs se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v methylenchloridu, promyje 10% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a suší síranem hořečnatým. Sušící prostředek se odfiltruje a zbytek se odpaří s obdržením 0,31 g produktu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 451 (M-H)⁺.

Dielsův-Alderův adukt (1,2 g, 2,6 mmol) v kyselině octové (60 ml) se přidá k30% peroxidu vodíku (15 ml) s následujícím zahříváním po dobu 90 min při teplotě 50 °C. Směs se odpaří a poté se přidá voda a oddělí se hnědá tuhá látka, 1,07 g.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 447 (M-H)⁺.

Výše popsaný karbazol (0,3 g, 0,66 mmol) a TBAF (1,67 ml 1 M roztoku, 1,67 mmol) v acetonitrilu (40 ml) se míchá po dobu 0,5 h při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozdělí mezi ethyl-acetát a vodu. Ethyl-acetátová vrstva se vysuší síranem hořečnatým a odpaří s obdržením 0,13 g 2ao.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 291 (M-H)⁺.

Příklad 62k

Příprava sloučeniny 2ap

Tato sloučenina se připraví stejným obecným způsobem, jako se popisuje pro 2ao nebo la s použitím 5-methoxy-2-(l-hydroxycyklopentyl)indolu jako výchozí látky s obdržením 2ap. Hmotnostní spektrometrie MS m/e 305 (M-H).

Příklad 621

Příprava sloučeniny 2aq

Tato sloučenina se připraví stejným obecným způsobem, jako se popisuje pro 2ao nebo la s použitím 5-ethoxyethoxy-2-(l-hydroxycyklopentyl)indolu jako výchozí látky s obdržením 2aq.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 363 (M-H).

Příklad 62m

Příprava sloučeniny 2ar

Tato sloučenina se připraví stejným obecným způsobem, jako se popisuje pro 2ao nebo la s použitím 5—diethylaminoethyloxy—2—(1—hydroxycyklopentyl)indolu s obdržením sloučeniny podle nadpisu.

-69CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 392 (M+H).⁺

Příklad 62n

Příprava sloučeniny 2as

Tato sloučenina se připraví stejným obecným způsobem, jako se popisuje pro 2ao nebo la s použitím 5-dimethylaminoethyloxy-2-(l-hydroxycyklopentyl)indolu s obdržením sloučeniny podle nadpisu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 378 (M+H).

Příklad 62o

Příprava sloučeniny 2at

Tato sloučenina se připraví stejným obecným způsobem, jako se popisuje pro 2ao nebo la s použitím 5-morfolinoethoxy-2-(l-hydroxycyklopentyl)indolu s obdržením sloučeniny podle nadpisu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 406 (M+H).

Příklad 62p až 62x

Údaje pro sloučeniny 2au až 2bc

Tabulka 9

Příklad	Slouč.	Hm. spektr, (m/e)

62p	2au	333 (M-H)'
62q	2av	303 (M+H)⁺
62r	2aw	305 (M-H)
62s	2ax	319 (M-H)'
62t	2ay	279 (M+H)’
62u	2az	303 (M-H)'
62v	2ba	361 (M-H)'
62w	2bb	347 (M-H)'
62x	2bc	314 (M-H)'

-70CZ 305350 B6

Příklady 62y

Příprava sloučeniny 2bd

Provede se karboxylace podle Neuberta a Fishela [Org. Synth. Col., 7, 420-424 (1990)]. Oxalylchlorid (1,0 ml, 1,45 g, 11,4 mmol) se přidá k míchané suspenzi chloridu hlinitého (1,50 g, 11,3 mmol) v 1,2-dichlorethanu (20 ml) při teplotě 20 °C. Po 1 min se přidá sloučenina la (1,00 g, 3,62 mmol) a směs se míchá po dobu 40 min, poté se nalije do 20 g ledu a vody (vyvíjí se plyn) a míchá se po dobu 10 min. Sraženina se sbírá vakuovou filtrací a promyje se vodou, 1M roztokem kyseliny chlorovodíkové a vodou, poté se vysuší s obdržením 1,11 g (výtěžek 95 %) surové sloučeniny 2bd kontaminované 17 % dimemího ketonu. Čistý vzorek 2bd se obdrží suspendováním ve zředěném vodném roztoku uhličitanu sodného a filtrací s následným okyselením kyselinou chlorovodíkovou. Po několika dnech poskytuje výsledný gel tuhou sraženinou, které se oddělí a vysuší.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 319 (M-H)“.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 2,29 (2H, m), 3,18 (2H, t), 3,26 (2H, t), 7,62 (1H, d), 8,11 (1H, d), 9,48 (1H, s), 11,02 (1H, s), 12,27 (1H, s).

Příklady 62z až 62ad

Údaje pro sloučeniny 2be až 2bi

Tabulka 10

Příklad	SIouč.	Hm. spektr, (m/e)

62z	2be	320 (M+H)'
62aa	2bf	289 (M-H)
62ab	2bg	392 (M+H)^T
62ac	2bh	318 (M-H)
62ad	2bi	333 (M-H)'

Příklad 62ae

Příprava sloučeniny 2bj

Natrium-kyanoborohydrid (60 mg, 0,95 mmol) se přidá k roztoku hydrochloridové soli sloučeniny 2p (300 mg, 0,88 mmol) a vodného formaldehydu (0,10 ml, 37 %, 1,23 mmol) ve vodě (6 ml). Po 2,5 h se roztok zalkalizuje nasyceným roztokem uhličitanu sodného. Sraženina se oddělí, promyje vodou a vysuší s obdržením sloučeniny 2bj (207 mg, výtěžek 71 %).

Hmotnostní spektrometrie MS m/z 334 (M+H)⁺, 289 (M-Me₂N)⁺.

-71 CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 2,30 (2H, m), 3,18 (2H, t), 3,26 (2H, t), 4,08 (2H, široký), 7,58 (2H, Abq), 8,82 (1H, s), 10,95 (1H, s), 12,01 (1H, s).

Příklady 62af až 62as

Obecný způsob přípravy sloučenin 2bk až 2bx io Tabulka 11

Příklad	Slouč.	Hm. spektr, (m/e)
62af	2bk	334(M+Hf
62ag	2bl	390 (MW
62ah	2bm	362 (MW
62ai	2bn	418 (MW
62aj	2bo	486 (MW
62ak	2bp	362 (MW
62al	2bq	396 (MW
62am	2br	348 (M+H)^T
62an	2bs	418 (MW
62ao	2bt	320 (MW
62ap	2bu	348 (MW
62aq	2bv	376 (MW
62ar	2bw	360 (MW
62as	2bx	374 (MW

Příklady 62at až 62ba

Obecný způsob přípravy sloučenin 2by až 2cf

-72CZ 305350 B6

Tabulka 12

Přiklad	Slouč.	Hni. spektr, (m/e)
62at	2by	416(M+Hf
62au	2bz	448 (M+H)⁺
62av	2ca	475 (M-H)*
62aw	2cb	377 (M-H)*
62ax	2cc	482 (M-H)'
62ay	2cd	444 (M-H)*
62az	2ce	356 (M+Na)
62ba	2cf	336 (M+H)

Příklad 62bb

Obecný způsob přípravy sloučeniny 2cg

Oxalylchlorid (0,010 ml, 14,5 mg, 0,114 mmol) se přidá k surové sloučenině 2bd (28 mg, 0,0875 mmol) v dimethylformamidu (0,28 ml) při teplotě 0 °C. Po 1 h při teplotě 20 °C se odstraní přebytečná kyselina chlorovodíková proudem dusíku a přidá se l-(N,N-dimethylamino)ethylamin (24 mg, 0,27 mmol). Po 1 h se sraženina oddělí, vysuší a suspenduje v 0,5 ml 0,1 M roztoku kyseliny chlorovodíkové. Sraženina (obsahující dimemí keton v surové výchozí látce) se odloží do odpadu a supematant se lyofilizuje s obdržením hydrochlorídu sloučeniny 2cg. Hmotnostní spektrometrie MS m/z 391 (M+H)⁺.

Nukleární magnetická rezonance ^]H NMR (DMSO-d_é) δ 2,31 (2H, m), 2,88 (6H, d), 3,20 (2H, t), 3,27 (2H, t), 7,62 (1H, d), 8,04 (1H, d), 8,71 (1H, široký s), 9,37 (1H, s), 9,65 (1H, široký s), 11,O2(1H, s), 12,24 (1H, s).

Příklady 62bc až 62ca

Obecný způsob přípravy sloučenin 2ch až 2df

-73CZ 305350 B6

Tabulka 13

Příklad	Slouč.	Hm. spektr, (m/e)

62bc	2ch	405 (M+H)
62bd	2ci	411 (M+H)
62be	2cj	414 (M+H)
62bf	2ck	451 (M+H)
62bg	2cl	411 (M+H)
62bh	2cm	431 (M+H
62bí	2cn	433 (M+H
62bj	2co	376 (M-H)
62bk	2cp	388 (M-H)
62bl	2cq	403 (M+H)
62bm	^r 2cr	404 (M+H)
62bn	2cs	388 (M+H)
62bo	2ct	418 (M+H)
62bp	2cu	405 (M+H)
62bq	2cv	425 (M+H)
62br	2cw	439 (M+H)
62bs	2cx	425 (M+H)
62bt	2cy	431 (M+H)
62bu	2cz	392 (M+H)
62bv	2da	392 (M+H)
62bw	2db	446 (M+H)
62bx	2dc	408 (M+H)
62by	2dd	400 (M-H)
62bz	2de	333 (M-H)
62 ca	2df	412 (M+H)

Příklad 63

Příprava sloučeniny 3 a

-74CZ 305350 B6

Směs sloučeniny 2e (0,03 g, 0,08 mmol), thiomočoviny (0,006 g, 0,08 mmol) a ethanolu (1 ml) se zahřívá na tepotu 70 °C v zatavené trubici po dobu 1 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se filtruje, promývá několikrát chladným ethanolem a etherem a vysuší se ve vysokém vakuu s obdržením 0,025 g sloučeniny 3a. Sloučenina 3a je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,68 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,00 (s, 1H), 3,50 (široký, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 375 (M+H).

Příklad 64

Příprava sloučeniny 3 b

Směs sloučeniny 2e (0,05 g, 0,13 mmol), thioacetamidu (0,01 g, 0,13 mmol) a ethanolu (1 ml) se zahřívá na teplotu 70 °C v zatavené trubici po dobu 1 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se filtruje, promývá několikrát chladným ethanolem a etherem a vysuší se ve vysokém vakuu s obdržením 0,025 g sloučeniny 3b. Sloučenina 3b je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,14 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,70 (s, 3H), 2,25 (široký m, 2H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 374 (M+H).

Příklad 65

Příprava sloučeniny 3e

Směs sloučeniny 2e (0,03 g, 0,07 mmol), Boc-L-thiocitrulin-OtBu (0,01 g, 0,13 mmol) a ethanolu (1 ml) se zahřívá na teplotu 70 °C v zatavené trubici po dobu 1 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se filtruje, promývá několikrát chladným ethanolem a etherem a vysuší se ve vysokém vakuu s obdržením 0,010 g sloučeniny 3e. Sloučenina 3e je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 12,23 min.

Nukleární magnetická rezonance ^]H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 10,90 (s, 1H), 9,20 (s, 1H), 8,20 (široký, 3H), 8,00 (d, 1H), 7,80 (široký, 1H), 7,50 (d, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,50 (široký, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,70 (široký, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 646 (M+H).

Příklad 66

Příprava sloučeniny 3 c

Směs sloučeniny 3b (0,051 g, 0,136 mmol), N-bromsukcinamidu (0,027 g, 0,152 mmol) a dimethylformamidu (3 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 72 h, nalije se do chladného methanolu (6 ml) a zfiltruje. Vysrážená tuhá látka se několikrát promyje malými podíly chladného methanolu a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,041 g sloučeniny 3c. Sloučenina 3c je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 12,90 min.

-75CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dň) δ 12,00 (s, IH), 10,90 (s, IH), 9,40 (s, IH), 8,00 (d, IH), 7,60 (s, IH), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,70 (s, 3H), 2,25 (široký m, 2H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 452 a 454 (M+H pro různé izotopy bromu).

Příklad 67

Směs sloučeniny 2f (0,1 g, 0,24 mmol), thiomočoviny (0,03 g, 0,4 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici přes noc. Při ochlazení se objeví sraženina, která se filtruje, promývá několikrát chladným ethanolem a etherem a vysuší se ve vysokém vakuu s obdržením 0,075 g sloučeniny 3d. Sloučenina 3d je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 8,07 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, IH), 11,00 (s, IH), 9,00 (s, IH), 8,80 (b, 2H), 7,70 (dd, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,40 (s, 3H), 2,25 (široký m, 2H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 389 (M+H).

Příklad 68

Příprava 3f

Směs sloučeniny 3e (0,060 g, 0,093 mmol), kyseliny trifluoroctové (1 ml) a vody (2 kapky) se míchá při teplotě místnosti po dobu 2 h. Přebytečná činidla se odpaří a zbytek se trituruje ethylacetátem (5 ml) s obdržením tuhé látky. Filtrace a sušení ve vysokém vakuu poskytuje 0,048 g sloučeniny 3f. Sloučenina 3f je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,64 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, IH), 10,90 (s, IH), 9,20 (s, IH), 7,90 (d, IH), 7,60 (d, 2H), 6,90 (s, IH), 3,70 (široký, IH), 3,60 (široký, 4H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,70 (široký, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 490 (M+H).

Příklad 69

Příprava sloučeniny 3g

Směs sloučeniny 2e (0,053 g, 0,133 mmol), 2-imino-4-thiobiuretu (0,017 g, 0,144 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 70 °C v zatavené trubici přes noc. Při ochlazení se objeví sraženina, která se filtruje, promývá několikrát chladným ethanolem a vysuší se ve vysokém vakuu s obdržením 0,055 g sloučeniny 3g. Sloučenina 3g je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 8,25 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dJ δ 12,00 (s, IH), 10,90 (s, IH), 9,30 (s, IH), 8,20 (široký, 4H), 8,00 (d, IH), 7,60 (d, IH), 7,50 (s, IH), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 417 (M+H).

-76CZ 305350 B6

Příklad 70

Příprava sloučeniny 3h

Směs sloučeniny 2e (0,05 g, 0,126 mmol), methylthiomočoviny (0,016 g, 0,133 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici po dobu 1 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se filtruje, promývá několikrát chladným ethanolem a vysuší se ve vysokém vakuu s obdržením 0,03 g sloučeniny 3h. Sloučenina 3h je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,92 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-dé) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,00 (s, 1H), 3,75 (široký, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,40 (s, 3H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 389 (M+H).

Příklad 71

Příprava sloučeniny 3 i

Směs sloučeniny 2e (0,05 g, 0,126 mmol), acetylthiomočoviny (0,012 g, 0,133 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici po dobu 1 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se filtruje, promývá několikrát chladným ethanolem a vysuší se ve vysokém vakuu s obdržením 0,044 g sloučeniny 3i. Sloučenina 3i je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,57 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,40 (s, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 2,10 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 415 (M+H).

Příklad 72

Příprava sloučeniny 3j

Směs sloučeniny 2e (0,037 g, 0,93 mmol), N-benzyloxythioglycinamidu (0,028 g, 0,125 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici po dobu 1 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se filtruje, promývá několikrát etherem a vysuší se ve vysokém vakuu s obdržením 0,029 g sloučeniny 3j. Sloučenina 3j je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 12,81 min.

Nukleární magnetická rezonance ‘H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,30 (t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,30 (m, 5H), 5,00 (s, 2H), 4,50 (široký, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 545 (M+Na), 523 (M+H).

Příklad 73

Příprava sloučeniny 3k

-77CZ 305350 B6

Směs sloučeniny 3j (0,06 g, 0,115 mmol) a 30% kyseliny bromovodíkové v kyselině octové (0,8 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 min. Přebytečné činidlo se odpaří a zbytek se trituruje etherem s obdržením 0,052 g sloučeniny 3k. Sloučenina 3k je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,36 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,60 (široký, 3H), 8,10 (d, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,50 (široký, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 389 (M+H).

Příklad 74

Příprava sloučeniny 31

Směs sloučeniny 3e (0,2 g, 5,037 mmol), acetylguanidinu (0,153 g, 1,51 mmol) a dimethylformamidu (3 ml) se zahřívá na teplotu 60 °C v zatavené trubici po dobu 1,5 h, odpaří ve vysokém vakuu a trituruje vodou s obdržením 0,189 g surové látky. Tato látka se promyje horkým ethanolem (3 x 75 ml) a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,039 g sloučeniny 31. Sloučenina 31 je hnědá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,41 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d_é) δ 11,80 (s, 1H), 11,60 (s, 1H), 11,30 (s, 1H), 10,80 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,20 (s, 1H), 3,25 (2 soubory t, 4H),

2,25 (široký m, 2H), 2,10 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 400 (M+H).

Příklad 75

Příprava sloučeniny 3m

Ke směsi sloučeniny 3k (0,015 g, 0,032 mmol) a triethylaminu (0,007 g, 0,07 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) se při teplotě místnosti přidá methansulfonylchlorid (0,004 g, 0,035 mmol). Směs se míchá po dobu 30 min, vylije na led s vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,005 g sloučeniny 3m. Sloučenina 3m je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,95 min.

Nukleární magnetická rezonance ^!H NMR (DMSO—dů) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,10 (m, 2H), 7,80 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,50 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,40 (s, 3H),

2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 489 (M+Na), 467 (M+H).

Příklad 76

Příprava sloučeniny 3n

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,019 g, 0,18 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) se při teplotě místnosti přidá acetylchlorid (0,007 g, 0,09 mmol). Směs se míchá po dobu 30 min, vylije na led s vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,01 g sloučeniny 3n. Sloučenina 3n je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,31 min.

-78CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,70 (t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,60 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H),

2,25 (široký m, 2H), 1,90 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 453 (M+Na), 431 (M+H).

Příklad 77

Příprava sloučeniny 3 o

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,01 g, 0,094 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) se při teplotě místnosti přidá ethylisokyanát (0,0066 g, 0,09 mmol). Směs se míchá po dobu 30 min, vylije na led s vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,008 g sloučeniny 3o. Sloučenina 3o je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,38 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,40 (široký, 1H), 6,70 (široký, 1H), 4,50 (s, 2H),

3,25 (2 soubory t, 4H), 3,10 (q, 2H), 2,25 (široký m, 2H), 1,00 (t, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 482 (M+Na), 460 (M+H).

Příklad 78

Příprava sloučeniny 3p

Směs sloučeniny 2e (0,05 g, 0,126 mmol), 2-(terc-butansulfonyl)thioacetamidu (0,026 g, 0,132 mmol) a ethanolu (2 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici přes noc. Při ochlazení se objeví sraženina, která se zfiltruje, promyje několikrát ethyl-acetátem a etherem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,02 g sloučeniny 3p. Sloučenina 3p je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,73 min.

Nukleární magnetická rezonance ^]H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 5,00 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,30 (s, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 516 (M+Na), 494 (M+H).

Příklad 79

Příprava sloučeniny 3p

Směs sloučeniny 3e (0,05 g, 0,126 mmol), 2-(terc-butoxykarbonyl)thioacetamidu (0,024 g, 0,137 mmol) a ethanolu (2 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici přes noc. Při ochlazení se objeví sraženina, která se zfiltruje, promyje několikrát ethyl-acetátem a etherem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,02 g sloučeniny 3q. Sloučenina 3q je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 14,48 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 5,50 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,20 (s, 9H).

-79CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 496 (M+Na), 474 (M+H).

Příklad 80

Příprava sloučeniny 3r

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,019 g, 0,18 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) o teplotě místnosti se přidá isovalerylchlorid (0,011 g, 0,094 mmol). Směs se míchá přes noc, odpaří na rotačním odpařovacím zařízení, trituruje vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,019 g sloučeniny 3r. Sloučenina 3r je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,25 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-de) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,70 (t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,60 (d, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,20 (m, 3H), 2,00 (široký, 2H), 0,90 (d, 6H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 495 (M+Na), 473 (M+H).

Příklad 81

Příprava sloučeniny 3s

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,019 g, 0,18 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) o teplotě místnosti se přidá propionylchlorid (0,009 g, 0,094 mmol). Směs se míchá přes noc, odpaří na rotačním odpařovacím zařízení, trituruje vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,019 g sloučeniny 3s. Sloučenina 3s je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,97 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,70 (t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,60 (d, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H),

2,25 (široký m, 4H), 1,00 (d, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 467 (M+Na), 445 (M+H).

Příklad 82

Příprava sloučeniny 3t

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,019 g, 0,18 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) o teplotě místnosti se přidá isobutyrylchlorid (0,010 g, 0,094 mmol). Směs se míchá přes noc, odpaří na rotačním odpařovacím zařízení, trituruje vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,007 g sloučeniny 3t. Sloučenina 3t je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,52 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,70 (široký t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,60 (d, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 3,00 (m, 1H), 2,25 (široký m, 4H), 1,00 (d, 6H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 481 (M+Na), 458 (M+H).

-80CZ 305350 B6

Příklad 83

Příprava sloučeniny 3u

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,019 g, 0,18 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) o teplotě místnosti se přidá butyrylchlorid (0,010 g, 0,094 mmol). Směs se míchá přes noc, odpaří na rotačním odpařovacím zařízení, trituruje vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,019 g sloučeniny 3u. Sloučenina 3u je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,64 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,70 (široký t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,60 (d, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 4H), 2,10 (t, 2H), 1,50 (m, 2H), 0,70 (t, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 481 (M+Na), 458 (M+H).

Příklad 84

Příprava sloučeniny 3v

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,019 g, 0,18 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) o teplotě místnosti se přidá valerylchlorid (0,011 g, 0,094 mmol). Směs se míchá přes noc, odpaří na rotačním odpařovacím zařízení, trituruje vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,021 g sloučeniny 3v. Sloučenina 3v je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,40 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,70 (široký t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,60 (d, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 2,10 (t, 2H), 1,50 (m, 2H), 0,70 (t, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 495 (M+Na), 473 (M+H).

Příklad 85

Příprava sloučeniny 3w

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,019 g, 0,18 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) o teplotě místnosti se přidá cyklopropankarbonylchlorid (0,010 g, 0,094 mmol). Směs se míchá přes noc, odpaří na rotačním odpařovacím zařízení, trituruje vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,017 g sloučeniny 3w. Sloučenina 3w je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,34 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 9,00 (široký t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,60 (d, 2H), 3,25 (m, 4H), 2,25 (široký m, 4H), 1,60 (m, 1H), 0,70 (široký, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 479 (M+Na), 457 (M+H).

Příklad 86

Příprava sloučeniny 3x

-81 CZ 305350 B6

Ke směsi sloučeniny 3k (0,04 g, 0,085 mmol) a triethylaminu (0,019 g, 0,18 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) o teplotě místnosti se přidá cyklopentankarbonylchlorid (0,012 g, 0,094 mmol). Směs se míchá přes noc, odpaří na rotačním odpařovacím zařízení, trituruje vodou (1 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší s obdržením 0,016 g sloučeniny 3x. Sloučenina 3xje žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,59 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dé) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,70 (široký t, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,50 (d, 2H), 3,25 (m, 4H), 2,60 (m, 1H), 2,25 (široký m, 4H), 1,80-1,30 (m, 8H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 507 (M+Na), 485 (M+H).

Příklad 87

Příprava sloučeniny 3y

Směs sloučeniny 2e (0,42 g, 0,106 mmol), 2-(terc-butylkarbonyloxy)thioacetamidu (0,022 g, 0,126 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici po dobu 2 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se zfiltruje a promyje několikrát chladným ethanolem. Spojené filtráty a promývací podíly se odpaří ve vysokém vakuu s obdržením 0,018 g sloučeniny 3y. Sloučenina 3yje žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 15,67 min.

Nukleární magnetická rezonance ^]H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 5,50 (s, 2H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,20 (s, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 472 (M-H).

Příklad 88

Příprava sloučeniny 3 z

Směs sloučeniny 2e (0,04 g, 0,1 mmol), 2-(methylsulfonyl)thioacetamidu (0,019 g, 0,12 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici po dobu 2 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se zfiltruje a promyje několikrát chladným ethanolem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,033 g sloučeniny 3z. Sloučenina 3z je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,24 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-dé) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 5,20 (s, 2H), 3,60 (s, 3H), 3,25 (2 soubory t, 4H),

2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 450 (M-H).

Příklad 89

Příprava sloučeniny 3aa

Směs sloučeniny 2e (0,044 g, 0,1108 mmol), isoxazol-5-thiokarboxamidu (0,017 g, 0,01328 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici po dobu 2 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se zfiltruje a promyje několikrát chladným ethanolem a

-82CZ 305350 B6 vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,036 g sloučeniny 3aa. Sloučenina 3aa je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 13,77 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,20 (s, 1H), 3,25 (2 soubory širokého signálu, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 425 (M-H).

Příklad 90

Příprava sloučeniny 3ab

Směs sloučeniny 2e (0,044 g, 0,1108 mmol), N-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl]thiomočoviny (0,032 g, 0,1344 mmol) a ethanolu (3 ml) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C v zatavené trubici po dobu 2 h. Při ochlazení se objeví sraženina, která se zfiltruje a promyje několikrát chladným ethanolem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,053 g sloučeniny 3ab. Sloučenina 3ab je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,88 min. Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) poskytuje složité spektrum.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 537 (M+H).

Příklad 91

Příprava sloučeniny 4a

Směs sloučeniny 2e (0,042 g, 0,106 mmol), hydrochloridu methylesteru L-prolinu (0,028 g, 0,169 mmol) a N-methylmorfolinu (0,032 g, 0,32 mmol) v suchém dimethylformamidu (3 ml) se míchá při teplotě 60 °C po dobu 4 h, vylije se do směsi ledu a vody (zhruba 20 g) a zfiltruje. Filtrát se poté extrahuje směsí ethyl-acetát/tetrahydrofuran (1:1, 2 x 20 ml). Spojené organické vrstvy se vysuší síranem hořečnatým a odpaří s obdržením zbytku, který triturací s ethyl-acetátem (4 ml) poskytuje 0,008 g sloučeniny 4a. Sloučenina 4a je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 8,82 min (široký).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d_ó) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,30 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,50 (s, 3H), 3,25 (2 soubory t, 4H), 2,70 (q, 1H), 2,25 (široký m, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,70 (m, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 446 (M-H).

Příklad 92

Příprava sloučeniny 4b

Směs sloučeniny 2e (0,1 g, 0,25 mmol), L-Pro-OtBu (0,048 g, 0,28 mmol), triethylaminu (0,028 g, 0,28 mmol) v dimethylformamidu (2 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 h, vylije na směs ledu a vody (4 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,068 g sloučeniny 4b. Sloučenina 4b je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,73 min.

- 83 CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,50 (s,

1H), 8,20 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,20 (dd, 2H), 3,50 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 3,25 (2 soubory t,

4H), 3,00 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,25 (široký m, 2H), 2,00 (m, 1H), 1,80 (m, 2H), 1,30 (s, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 488 (M+H).

Příklad 93

Příprava sloučeniny 4c

Směs sloučeniny 4b (0,063 g, 0,13 mmol) a kyseliny trifluoroctové (1 ml) se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přebytečné činidlo se odpaří a zbytek se trituruje ethyl-acetátem s obdržením 0,05 g sloučeniny 4c. Sloučenina 4c je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,64 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 4,80 (dd, 2H), 4,20 (široký, 1H), 3,50 (široký, 1H), 3,40-2,80 (m, 6H), 2,25 (široký m, 2H), 2,00 (m, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 432 (M+H).

Příklad 94

Příprava sloučeniny 4d

Směs sloučeniny 2m (0,02 g, 0,053 mmol), NMM (0,011 g, 0,1 mmol), TBTU (0,034 g, 0,1 mmol) v suchém dimethylformamidu (2 ml) se míchá po dobu 5 min. Do reakční baňky se přidá roztok H₂N(CH₂)₂NHtBoc (0,01 g, 0,054 mmol) v dimethylformamidu (1 ml) a směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Poté se vylije do vody (5 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje malými objemy vody a etheru a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,015 g sloučeniny 4d. Sloučenina 4d je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,19 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dó) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,00 (široký, 1H), 7,50 (d, 1H), 6,70 (široký, 1H), 3,40-2,70 (řadam, 8H), 2,50 (m, 4H), 2,25 (široký m, 2H), 1,20 (s, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 517 (M-H).

Příklad 95

Příprava sloučeniny 4e

Směs sloučeniny 4d (0,012 g, 0,2 mmol) a 4 N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu (3 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 min a zfiltruje. Zbytek se promyje malými objemy dioxanu a etheru a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,008 g sloučeniny 4e. Sloučenina 4e je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,23 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-dé) δ 12,30 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,20 (široký t, 1H), 8,00 (široký, 3H), 7,60 (d, 1H), 3,40-2,50 (řady m, 12H),

2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 417 (M-H).

-84CZ 305350 B6

Příklad 96

Příprava sloučeniny 4f

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,05 g) a morfolinem (0,015 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,012 g sloučeniny 4f. Sloučenina 4f je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,84 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, IH), 11,00 (s, IH), 9,50 (s, IH), 8,10 (d, IH), 7,60 (d, IH), 3,70-3,00 (řada m, 14H), 2,70 (m, 2H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 444 (M-H).

Příklad 97

Příprava sloučeniny 4g

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,05 g) a ethanolaminem (0,011 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,027 g sloučeniny 4g. Sloučenina 4g je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,62 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, IH), 11,00 (s, IH), 9,40 (s, IH), 8,10 (d, IH), 7,90 (široký, IH), 7,50 (d, IH), 4,60 (t, IH), 3,50-3,00 (řadam, 10H), 2,50 (t, 2H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 418 (M-H).

Příklad 98

Příprava sloučeniny 4h

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,05 g) a L-Pro-OtBu (0,030 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,058 g sloučeniny 4h. Sloučenina 4h je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,58 min.

Nukleární magnetická rezonance ‘H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, IH), 11,00 (s, IH), 9,40 (s, IH), 8,10 (d, IH), 7,50 (d, IH), 4,60 a 4,20 (2 soubory rotamemích m, IH), 3,70-1,70 (řadam, 16H), 1,50 a 1,30 (2 soubory rotamemích s, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 528 (M-H).

Příklad 99

Příprava sloučeniny 4i

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,05 g) a diethylaminem (0,010 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,030 g sloučeniny 4i. Sloučenina 4i je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 9,95 min.

-85CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance ^]H NMR (DMSO-dó) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s,

1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,50-3,00 (řada m, 10H), 2,70 (m, 2H), 2,20 (m, 2H), 1,20 a 1,00 (2 soubory rotamemích t, 6H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 430 (M-H).

Příklad 100

Příprava sloučeniny 4j

Směs sloučeniny 4h (0,05 g, 0,09 mmol), kyseliny trifluoroctové (1 ml) a vody (2 kapky) se míchá při teplotě místnosti po dobu 45 min. Přebytečná činidla se odpaří a zbytek se trituruje methanolem. Vysrážená tuhá látka se zfiltruje, promyje etherem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,017 g sloučeniny 4j. Sloučenina 4j je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,99 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 4,60 a 4,20 (2 soubory rotamemích m, 1H), 3,70-1,70 (řada m, 16H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 472 (M-H).

Příklad 101

Příprava sloučeniny 4k

K suspenzi chloridu hlinitého (0,8 g, 0,006 mol) v 1,2-dichlorethanu (5 ml) o teplotě 0 °C se přidá anhydrid 2,3-pyrazindikarboxylové kyseliny (0,49 g, 0,0033 mol) a směs se míchá po dobu 5 min. Suspenze la (0,3 g, 0,0011 mol) v 1,2-dichlorethanu (15 ml) se pomalu přidává do reakční baňky. Chladící lázeň se odstraní a směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Chromatografie reakční směsi na tenké vrstvě ukazuje nezreagované výchozí látky. Reakční směs se poté zahřívá na teplotu 80 °C po dobu 72 h, vylije na směs ledu (zhruba 10 g) a 2 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (10 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší ve vakuu s obdržením 0,372 g sloučeniny 4k. Sloučenina 4k je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,29 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-de) δ 12,30 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,20 (s, 1H), 9,00 (s, 2H), 8,00 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 3,25 (2 soubory m, 4H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 425 (M-H).

Příklad 102

Příprava sloučeniny 41

Směs sloučeniny 2m (0,05 g, 0,133 mmol), hydrazinu (0,006 g) a ethanolu se zahřívá na teplotu 80 °C v zatavené trubici přes noc, ochladí se na teplotu 0 °C a zfiltruje. Zbytek se promyje chladným ethanolem a etherem a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,023 g sloučeniny 41. Sloučenina 41 je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 8,03 min.

-86CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 10,90 (s, 1H), 10,80 (s,

1H), 9,10 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,40-3,25 (3 soubory t, 6H), 2,50 (t, 2H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 371 (M-H).

Příklad 103

Příprava sloučeniny 4m

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 41. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,05 g) a methylhydrazinem (0,012 g) v ethanolu poskytuje 0,017 g sloučeniny 4m. Sloučenina 4m je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,21 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,10 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,20 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,40-3,25 (m, 6H), 2,60 (t, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 385 (M-H).

Příklad 104

Příprava sloučeniny 4n

K suspenzi chloridu hlinitého (0,667 g, 0,005 mol) v 1,2-dichlorethanu (5 ml) o teplotě 0 °C se přidá anhydrid kyseliny glutarové (0,57 g, 0,005 mol) a směs se míchá po dobu 5 min. Suspenze la (0,276 g, 0,001 mol) v 1,2-dichlorethanu (15 ml) se pomalu přidává do reakční baňky. Chladící lázeň se odstraní a směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Chromatografie reakční směsi na tenké vrstvě ukazuje nezreagované výchozí látky. Reakční směs se poté zahřívá na teplotu 80 °C po dobu 24 h, vylije na směs ledu (zhruba 10 g) a 2 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (10 ml) a zfiltruje. Zbytek se promyje vodou a etherem a vysuší ve vakuu s obdržením 0,243 g sloučeniny 4n. Sloučenina 4n je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 8,84 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,30 (s, 1H), 12,00 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,50-3,25 (m, 6H), 2,30 (t, 2H), 2,25 (širokým, 2H), 2,00 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 389 (M-H).

Příklad 105

Příprava sloučeniny 4o

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,03 g) a L-Pro-NH₂ (0,016 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,007 g sloučeniny 4o. Sloučenina 4o je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,61 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,20 (d, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,40 a 4,20 (2 soubory rotamemích m, 1H), 3,70-2,50 (řada m, 10H), 2,25 (široký m, 2H), 1,80 (m, 4H).

-87CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 471 (M-H).

Příklad 106

Příprava sloučeniny 4p

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,03 g) a piperidinem (0,009 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,011 g sloučeniny 4p. Sloučenina 4p je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,61 min.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,50 (m, 2H), 3,30-3,00 (m, 8H), 2,60 (m, 2H), 2,25 (široký m, 2H), 1,60 (široký m, 4H), 1,40 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 442 (M-H).

Příklad 107

Příprava sloučeniny 4q

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,1 g) a 4-terc-butoxykarbonylpiperazinem (0,1 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,112 g sloučeniny 4q. Sloučenina 4q je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 11,87 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,50-2,70 (řada m, 16H), 2,25 (široký m, 2H), 1,40 (s, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 543 (M-H).

Příklad 108

Příprava sloučeniny 4r

Směs sloučeniny 4q (0,1 g, 0,184 mmol) a 4 N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu (3 ml) se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 min a zfiltruje. Zbytek se promyje malými objemy dioxanu a etheru a vysuší ve vysokém vakuu s obdržením 0,071 g sloučeniny 4r. Sloučenina 4r je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,68 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-dé) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 9,30 (2 soubory širokých signálů, 2H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,70-2,80 (řada m, 16H),

2,25 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 443 (M-H).

Příklad 109

Příprava sloučeniny 4s

-88CZ 305350 B6

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,05 g) a heptamethyleniminem (0,02 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,037 g sloučeniny 4s. Sloučenina 4s je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 12,95 min.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,50 (m, 2H), 3,30-3,00 (m, 8H), 2,60 (m, 2H), 2,25 (široký m, 2H), 1,80 (široký m, 2H), 1,60 (2 soubory m, 8H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 470 (M-H).

Příklad 110

Příprava sloučeniny 4t

Tato sloučenina se připraví způsobem podobným způsobu popsanému pro sloučeninu 4d. Podle tohoto způsobu reakce mezi sloučeninou 2m (0,05 g) a pyrrolidinem (0,013 g) za přítomnosti TBTU a NMM v dimethylformamidu poskytuje 0,033 g sloučeniny 4t. Sloučenina 4t je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 10,18 min.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 12,20 (s, 1H), 11,00 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,50 (m, 2H), 3,30-3,00 (m, 8H), 2,60 (m, 2H), 2,25 (široký m, 2H), 1,80 (2 soubory m, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 428 (M-H).

Příklad 111

Příprava sloučeniny 5a

Ethylester 5-kyano-l,2,3,4,5,10-hexahydrocyklopenta[a]karbazol-4-karboxylové kyseliny a ethylester 4-kyano-1,2,3,4,5,10-hexahydrocyklopenta[a]karbazol-5-karboxylové kyseliny

2-(Cyklopenten-l-yl)indol (13,6 g, 74 mmol), ethylester kyseliny cis-3-kyanoakrylové (17,8 g, 142 mmol) a BHT (70 mg) se zahřívá na teplotu 180 °C pod atmosférou dusíku po dobu 30 min. Těkavé složky se odstraní Kugelrohrovou destilací při teplotě 110 °C a tlaku 106 Pa s obdržením 19,7 g jantarově hnědé dehtovité látky. Přídavek etheru (50 ml) poskytuje sraženinu jednoho izomeru bílého krystalického ethylesteru 4-kyano-l,2,3,4,5,10-hexahydrocyklopenta[a]karbazol-5-karboxylové kyseliny (1,89 g, výtěžek 8,2 %) o teplotě tání 192 až 195 °C.

Nukleární magnetická rezonance ‘H NMR (DMSO-d₆) δ 7,91 (s, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,12 (m, 2H), 4,31 (d, 1H), 4,32 (m, 2H), 4,20 (d, 1H), 3,46 (t, 1H), 3,30 (q, 1H), 2,80 (m, 1H), 2,3-1,4 (m, 6H), 1,34 (t, 3H).

Elementární analýza: výpočet pro C19H20N2O2 (%) - C 74,00, H 6,54 , N 9,09, nalezené hodnoty (%)- C 73,84, H 6,53, N 9,03.

Filtrát se dělí chromatograficky na 500 g silikagelu (směsí ether/hexan 50:50 až 60:40) s obdržením 6,4 (výtěžek 28 %) diastereomemího ethylesteru 5-kyano-l,2,3,4,5,10-hexahydrocyklopenta[a]karbazol-4-karboxylové kyseliny ve formě žluté sklovité látky, jejíž jednotlivý bílý krystalický izomer (1,07 g, výtěžek 4,7 %) lze obdržet srážením z etheru (20 ml), teplota tání 164 až 167 °C.

-89CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 309 (M+H)⁺.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 8,08 (s, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,20 (m, 2H), 4,40 (d, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,16 (q, 1H), 3,02 (q, 1H), 2,80 (dd, 1H), 2,1 (m, 3H), 1,9-1,4 (m, 7H), 1,39 (t, 3H).

Elementární analýza: výpočet pro Ci9H₂oN₂02.0,3 Et₂O (%) - C 73,39, H 7,01 , N 8,47, nalezené hodnoty (%) - C 73,43, H 6,54, N 8,04.

Další eluce (směsí ether/hexan, 60:40) poskytuje více než 1,5 g (6,6 %) diastereomemího ethylesteru 4-kyano-l ,2,3,4,5,10-hexahydrocyklopenta[a]karbazol-5-karboxylové kyseliny. Hmotnostní spektrometrie MS m/e 309 (M+H)⁺.

Příklad 112

Příprava prekurzoru sloučeniny 5a

Ethyl-acetát 5-kyano-l ,2,3,10-tetrahydrocyklopenta[a]karbazoM-karboxylové kyseliny

DDQ (1,35 g, 5,95 mmol) se přidá k roztoku 5-kyano-l,2,3,4,5,10-hexahydrocyklopenta[a]karbazoM-karboxylátu (820 mg, 2,66 mmol) v toluenu (12 ml). Roztok ihned zhnědne a míchá se při teplotě 60 °C po dobu 3 h. Směs se ochladí přes noc na teplotu 20 °C a zfiltruje. Sraženina se promyje dvakrát hexanem s obdržením 2,04 g světle zelené tuhé látky. Ta se suspenduje v methanolu (8 ml), zfiltruje a sraženina se promyje methanolem (3 ml, po částech) a etherem s obdržením 603 mg (75% výtěžek) produktu ve formě světle zelené tuhé látky o teplotě tání 223 až 234 °C.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 8,80 (d, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,38 (t, 1H), 4,52 (q, 2H), 3,42 (t, 2H), 3,19 (t, 2H), 2,31 (kvintet, 2H), 1,51 (t, 3H).

Elementární analýza: výpočet pro Ci₉Hi6N₂O₂.0,2 H₂O (%) - C 74,11, H 5,37 , N 9,10, nalezené hodnoty (%) - C 74,03, H 5,06, N 9,04.

Příklad 113

Příprava sloučeniny 5a

5,7,8,9,10,1 l-Hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on

Ethylester 5-kyano-l,2,3,10-tetrahydrocyklopenta[a]karbazoM-karboxylové kyseliny (950 mg) v dimethylformamidu (60 ml) se hydrogenuje při tlaku 380 kPa na Raneyově niklu W2 po dobu 2 týdnů. Po částech se přidá celkem 15 g Raneyova niklu v průběhu hydrogenace až do spotřebování výchozí látky. Katalyzátor se odfiltruje a dimethylformamid se odpaří ve vakuu. Tuhý zbytek se vaří pod zpětným chladičem po dobu 10 min s 30 ml vody a ochladí. Sraženina se promyje 5 ml acetonu s obdržením produktu (640 mg, 78% výtěžek) ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 326 až 327 °C.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 11,6 (s, 1H), 7,96 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,43 (t, 1H), 7,24 (t, 1H), 4,79 (s, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,11 (t, 2H), 2,26 (kvintet, 2H).

Elementární analýza: výpočet pro Ci₇Hi₄N₂O (%) - C 77,84, H 5,38, N 10,68, nalezené hodnoty (%) - C 77,35, H 5,36, N 10,57.

-90CZ 305350 B6

Příklad 114

Příprava sloučeniny 5b

3-Brom-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on

N-Bromsukcinimid (190 mg, 1,07 mmol) se přidá k 5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu (250 mg, 0,954 mmol) rozpuštěnému v dimethylformamidu (7,5 ml). Po 24 h se rozpouštědlo odpaří a zbytek se vaří pod zpětným chladičem s vodou (5 ml) po dobu 5 min. Po ochlazení na teplotu 20 °C se sraženina oddělí s obdržením produktu (328 mg, výtěžek 100 %) ve formě žluté tuhé látky o teplotě tání zhruba 350 °C (s rozkladem).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 341, 343 (M+H)⁺.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 11,72 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,51 (ABq, 2H), 4,80 (s, 2H), 3,32 (t, 2H), 3,20 (t, 2H), 2,30 (kvintet, 2H).

Elementární analýza: výpočet pro Ci7Hi₃N₂OBr.0,75 H₂O (%) - C 57,56, H 4,12, N 7,90, nalezené hodnoty (%) - C 57,55, H 3,89, N 8,08.

Příklad 115

Příprava sloučeniny 5 c

3-Kyano-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on

Tetrakis(trifenylfosfin)palladiem (70 mg, 0,61 mmol) se přidá ke směsi 3-brom-5,7,8,9,10,l 1hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu (140 mg, 0,42 mmol) a kyanidu zinečnatému (100 mg, 0,85 mmol) suspendovanému v dimethylformamidu (2 ml). [Viz D. M. Tschaen, R. Desmond, A. O. King, M. C. Fortin, B. Pipik, S. King a T. R. Verhoeven, Synth. Commun., 24, 887 (1994)]. Směs se zahřívá na teplotu 125 °C po dobu 2 h, ochladí se na teplotu 20 °C a poté se zfiltruje filtrem tvořeným směsí infuzoriové hlinky a silikagelu. Filtrát se zředí 3 objemy vody. Sbírá se sraženina a trituruje se 2x etherem s obdržením produktu (116 mg, výtěžek 99 %) ve formě žluté tuhé látky o teplotě tání 369 až 370 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 12,19 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,69 (d, 1H), 4,85 (s, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,12 (t, 2H), 2,26 (kvintet, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 288 (M+H)⁺.

Příklad 116

Příprava sloučeniny 5d

3-Kyano-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on (95 mg,

0,33 mmol) rozpuštěný v dimethylformamidu (3 ml) se hydrogenuje při tlaku 380 kPa na čerstvě připraveném Raneyově niklu W2 (310 mg) [R. Mozingo, Org. Synth. Col., 3, 181-183 (1955)] po dobu 20 h. Katalyzátor se odstraní a rozpouštědlo se odpaří s obdržením zbytku, který se suspenduje ve vodě s obdržením surového produktu (58 mg, výtěžek 60%).

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 11,59 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,33 (ABq, 2H), 4,75 (s, 2H), 4,00 (s, 2H), 3,35 (t, 2H), 3,18 (t, 2H), 2,25 (kvintet, 2H).

-91 CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 275 (M+H-NH₃)⁺.

Podíl surového produktu (12 mg) se míchá s 0,1 M roztokem kyseliny chlorovodíkové (120 ml) a filtrát se lyofilizuje s obdržením hydrochloridu (9 mg).

Příklad 117

Příprava sloučeniny 5e

3-Methyl-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on

Tetrakis(trifenylfosfin)palladium (14 mg, 0,012 mmol) se přidá pod atmosférou dusíku ke směsi 3-brom-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu (59 mg,

0,17 mmol) a tetrametylcínu (38 mg, 0,20 mmol) v dimethylformamidu (2 ml). Směs se zahřívá na teplotu 140 °C po dobu 4 h. Ochladí se na teplotu 20 °C, poté se zfiltruje směsí infuzoriové hlinky a silikagelu. Z filtrátu se odpaří rozpouštědlo a získaná žlutá tuhá látka se izoluje chromatografií (ethyl-acetát/ethanol, 75:25).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 277 (M+H)⁺.

Příklad 118

Příprava sloučeniny 5f

3-[(Bis(terc-butoxykarbonyl)-L-lysyl)aminomethyl]-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklo-pent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on

Dicyklohexylaminová sůl di(BOC)-L-lysinu (70 mg, 0,133 mmol), HOBT hydrát (15 mg, 0,098 mmol) a BOP (60 mg, 0,136 mmol) se přidá k 3-(aminomethyl)-5,7,8,9,10,l 1-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu (25 mg, 0,0859 mmol) rozpuštěnému v dimethylformamidu (0,6 ml). Po 5 h se přidá voda (2,5 ml). Sraženina se suspenduje v ethylacetátu (10 ml) a výsledný filtrát se promyje 1 M roztokem kyseliny chlorovodíkové, vodou a nasyceným roztokem uhličitanu sodného a poté nasyceným roztokem chloridu sodného. Odpaření rozpouštědla s následující chromatografií (ethyl-acetát/ethanol 100:0 až 95:5) poskytuje produkt ve formě světle žluté tuhé látky (12 mg, výtěžek 22 %).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 620 (M+H)⁺.

Příklad 119

Příprava sloučeniny 5g

Dihydrochlorid 3-(L-lysylaminomethyl)-5,7,8,9,10,l l-hexahydrocyklo-pent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu

Skupiny BOC sloučeniny 5f se hydrolyzují 2 M roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxanu s obdržením produktu ve formě béžové tuhé látky (výtěžek 94 %).

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 11,67 (s, 1H), 9,70 (t, 1H), 8,45 (široký s, 3H), 8,37 (s, 1H), 8,05 (široký s, 3H), 7,87 (s, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,47 (d, 1H), 4,75 (s, 2H), 4,00 (d, 2H), 3,86 (m, 1H), 3,32 (t, 2H), 3,12 (t, 2H), 2,79 (m, 2H), 2,25 (kvintet, 2H), 1,85 (m, 2H), 1,78 (m, 2H), 1,45 (m, 2H).

-92CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 420 (M+H)⁺.

Příklad 120

Příprava 6a

5,6,7,10-Tetrahydropyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on

Připraví se z 2-vinylindolu [U. Pindur a M. Eitel, Helv. Chim. Acta, 71, 1060 (1988), M. Eitel a U. Pindur, Synthesis, 1989, 364-367] způsobem podobným způsobu popsanému pro přípravu sloučeniny la.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d6) δ 12,10 (široký s, 1H), 11,15 (široký s, 1H), 8,83 (d, 1H), 7,94 (m, 2H), 7,60 (m, 2H), 7,32 (t, 1H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 237 (M+H)⁺.

Příklad 121

Příprava sloučeniny 6b

8,9-Dimethyl-5,7-dihydropyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7( 10H)-dion

2-(But-2-en-2-yl)indol (87 mg, 0,51 mmol, připravený podle M. Eitela a U. Pindura, Synthesis, 1989, 364-367) se smísí s maleinimidem (97 mg, 1,0 mmol) a zahřívá na teplotu 190 až 200 °C v zatavené trubici po dobu 0,5 h. Směs se ochladí na teplotu místnosti a výsledná tuhá látka se promyje horkou vodou (10x5 ml) s obdržením Dielsova-Alderova aduktu [91 mg, 68 %, MS m/e 267 (M-H) ]. Tento adukt se vysuší ve vakuu v průběhu 3 h a přidá se k roztoku DDQ (2,5 ekvivalentu) v 5 ml toluenu. Tmavě hnědý roztok se míchá při teplotě 40 °C po dobu 7 h a při teplotě 20 °C přes noc a poté se odpaří do sucha. Zbytek se rozpustí v ethyl-acetátu a promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (5x5 ml), vodou, nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem hořečnatým. Surový produkt se trituruje ethyl-acetátem s obdržením 17 mg (28 %) produktu ve formě žluté tuhé látky.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 11,72 (s, 1H), 10,98 (s, 1H), 8,76 (d, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,48 (t, 1H), 7,23 (t, 1H), 2,69 (s, 3H), 2,53 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 263 (M-H)“.

Příklad 122

Příprava sloučeniny 6e

Tato sloučenina se připraví stejným způsobem jako sloučenina lk s tím rozdílem, že se jako výchozí látka použije sloučenina 2a. Sloučenina 6e je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,77 min.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 12,60 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,60 (široký, 3H), 8,00 (široký, 3H), 7,70 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 5,00 (široký, 1H), 3,25 (m, 4H), 2,70 (široký, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,00 - 1,70 (řada m, 6H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 483 až 485 (M+2H pro izotopy bromu).

-93CZ 305350 B6

Příklad 123

Příprava sloučeniny 6f

Tato sloučenina se připraví stejným způsobem jako sloučenina lk s tím rozdílem, že se jako výchozí látka použije sloučenina 2b. Sloučenina 6f je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 7,13 min.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-dé) δ 12,60 (s, IH), 8,80 (s, IH), 8,60 (široký, 3H), 8,00 (široký, 3H), 7,70 (dd, IH), 5,00 (široký, IH), 3,25 (m, 4H), 2,70 (široký, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,00 (2 soubory širokého signálu, 2H), 1,50 (široký m, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 439 až 441 (M+2H pro izotopy chloru).

Příklad 124

Příprava sloučeniny 6g

Tato sloučenina se připraví stejným způsobem jako sloučenina lk s tím rozdílem, že se jako výchozí látka použije sloučenina 2c. Sloučenina 6g je žlutá amorfní tuhá látka s retenčním časem 6,72 min.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 12,50 (s, IH), 8,60 (široký, 3H), 8,50 (d, IH), 8,00 (široký, 3H), 7,70 (m, IH), 7,50 (t, IH), 5,00 (široký, IH), 3,25 (m, 4H), 2,70 (široký, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,00 (2 soubory širokého signálu, 2H), 1,50 (široký m, 4H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 423 (M+2H).

Příklad 125

Příprava sloučeniny 6h

6-Formyl-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-on

Oxychlorid fosforečný (65,8 mg, 0,43 mmol) a dimethylformamid (200 μΐ, 2,59 mmol) se míchá po dobu 30 min a přidá k 5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)onu (39 mg, 0,15 mmol) suspendovanému v dimethylformmaidu (200 μΐ). Po míchání po dobu 1 h při teplotě 20 °C a 1 h při teplotě 60 °C se přidají 4 ml vody. Sraženina (36 mg) se sbírá a vaří pod zpětným chladičem s acetonem (40 ml). Odpaření filtrátu poskytuje produkt (18 mg, výtěžek 42 %) ve formě žlutohnědé tuhé látky o teplotě tání vyšší než 300 °C.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 11,6 (široký s, IH), 9,22 (s, IH), 8,02 (d, IH), 7,56 (d, IH), 7,43 (t, IH), 7,24 (t, IH), 5,20 (s, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 289 (M-H).

Příklad 126

Příprava sloučeniny 6i

Dihydrochlorid 3-brom-l 1—L—lysyl—5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6)-onu

-94CZ 305350 B6

Tento bis(terc-butoxykarbonyl)lysylový derivát se připraví ze sloučeniny 5b způsobem popsaným pro sloučeninu lk a purifikuje se chromatografií (dichlormethan/ethyl-acetát, 75:25) s obdržením oranžovožluté sklovité látky. Skupiny BOC se hydrolyzují zpracováním 2 M roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxanu v průběhu 2,5 h s obdržením produktu ve formě hnědé tuhé látky s retenčním časem 8,43 min.

Hmotnostní spektrometrie MS m/z 469 a 471 (M+H)⁺, 341 a 343 (M+H-Lysyl)⁺.

Příklad 127

Příprava sloučeniny 6j

Dihydrochlorid 3-kyano-l l-L-lysyl-5,7,8,9,10,1 l-hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu

Tento bis(terc-butoxykaronyl)lysylový derivát se připraví ze sloučeniny 5c způsobem popsaným pro lk. Skupiny BOC se hydrolyzují zpracováním 2 M roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxanu v průběhu 2,5 h s obdržením produktu s retenčním časem 7,40 min.

Hmotnostní spektrometrie MS m/z 416 (M+H)⁺, 310 (M+H-Lysyl)⁺.

Příklady 127a až 127f Údaje o sloučeninách 6k až 6p

Tabulka 14

Příklad	SlouČ.	Hm. spektr, (m/e)

127a	6k	325(M-H,+Na)
127b	61	275 (M-CH2OH)
127c	6m	334 (Μ+ΗΓ)
127d	6n	290 (M-H)·
127e	6o	321 (M-H)
127f t	6p	364 (M+H)’

Příklad 128

Příprava prekurzoru sloučeniny 8b

2-(Cyklopenten-l-yl)pyrrol a 3-(cyklopenten-l-yl)pyrrol

Použije se modifikace výše popsaného způsobu [M. Tashiro, Y. Yiru a O. Tsuge, Heterocycles, 2, 575-584 (1974)]. Pyrrol (20 g, 300 mmol) a l-(cyklopenten-l-yl)pyrrolidin (20 g, 150 mmol,

-95CZ 305350 B6 čerstvě připravený z cyklopentanonu a pyrrolidinu podle popisu [Μ. E. Kuehne, J. Amer. Soc., 81, 5400-5404 (1989)] se zahřívá na teplotu 145 °C po dobu 5 h. Těkavé složky se oddestilují při teplotě 40 až 45 °C a tlaku 1,6 kPa a produkt se podrobí destilaci v Kugelrohrově aparatuře při teplotě 100 až 140 °C a tlaku 133 Pa s obdržením 12,9 g (65 %) směsi 1- a 3-izomerů 2:1. Vzorky pro analýzu se obdrží chromatografický (hexan/ether, 90:10 až 85:15).

2- (Cyklopenten-l-yl)pyrrol: bílá tuhá látka (tmavnoucí na vzduchu) o teplotě tání 68 až 71 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 8,24 (široký s, 1H), 6,74 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,73 (s, 1H), 2,64 (t, 2H), 2,51 (t, 2H), 1,99 (kvintet, 2H).

Elementární analýza: výpočet pro C₉HnN.0,2 H₂O (%) - C 79,02, H 8,40, N 10,24, nalezené hodnoty (%) - C 79,00, H 8,12, N 10,09.

3- (Cyklopenten-l-yl)pyrrol: světle žlutá olejovitá kapalina (rychle tmavnoucí na vzduchu).

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 8,10 (široký s, 1H), 6,74 (s, 2H), 6,37 (s, 1H), 5,82 (s, 1H), 2,58 (t, 2H), 2,45 (t, 2H), 1,99 (kvintet, 2H).

Příklad 129

Příprava prekurzorů sloučeniny 8b

2- (Cyklopenten-1 -y 1)-1 -(tri isopropyl sily l)pyrrol a

3- (Cyklopenten-l-yl)-l-(triisopropylsilyl)pyrrol

Hydrid sodný (7,0 g, 60% v minerálním oleji, 176 mmol) se promyje hexanem a suspenduje v etheru (150 ml) a ochladí na teplotu 0 °C. Přidá se triisopropylsilylchlorid (23,3 g, 121 mmol) a směs 2-(cyklopenten-l-yl)pyrrolu a 3-(cyklopenten-l-yl)pyrrolu 2:1 (3,0 g, 22,5 mmol) a dimethylformamid (2 ml). Směs se míchá pod zpětným chladičem. Po ukončení vyvíjení vodíku se reakční směs míchá při teplotě 20 °C po dobu 1 h. Směs se vylije do ledové vody, promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší a odpaří s obdržením triisopropylsilylových derivátů (35,0 g, 104 % surového výtěžku).

2- Izomer: nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 6,83 (s, 1H), 6,26 (s, 1H), 6,19 (s, 1H), 5,70 (s, 1H), 2,66 (t, 2H), 2,48 (t, 2H), 1,94 (kvintet, 2H), 1,53 (m, 3H), 1,11 (d, 18H).

3- Izomer: nukleární magnetická rezonance podle údajů, které popisuje A. P. Kozikowski a X. M. Cheng, J. Org. Chem., 49, 3239-3240 (1984).

Příklad 130

Příprava prekurzoru sloučeniny 8b

Dimethyl-[l-(triisopropylsilyl)-l,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g]indol-4,5-dikarboxylát]

Směs 2-(cyklopenten-l-yl)-l-(triisopropylsilyl)pyrolu a 3-(cyklopenten-l-yl)-l-(triisopropylsilyl)pyrrolu (6,2 g, 21,4 mmol) a dimethyl-acetylendikarboxylátu (6,2 g, 43,7 mmol) se zahřívá na teplotu 110 °C po dobu 22 h. Přidá se další dimethyl-acetylendikarboxylát (6,2 g, 43,7 mmol) a zahřívání pokračuje po dobu dalších 6 h. Výsledná oranžovohnědá olejovitá kapalina se rozpustí v etheru (25 ml) a poté se zpracuje hexanem (50 ml). Stejný způsob se opakuje 3x se sraženinou. Spojené frakce rozpustné ve směsi ether/hexan se odpaří ve vakuu a poté se zahřívají ve

-96CZ 305350 B6 vakuu pro odstranění přebytku dimethyl-acetylendikarboxylátu. Zbytek (3,3 g) se čistí chromatografícky (hexan/ether 75:25) s obdržením 490 mg (výtěžek 5,3 %) produktu ve formě světle oranžové olejovité látky. Tentýž produkt se obdrží s výtěžkem 10 % z čistého 2-(cyklopenten-lyl)-l-(triisopropylsilyl)pyrrolu.

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 7,44 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 3,20 (t, 2H), 3,11 (t, 3H), 2,09 (kvintet, 2H), 1,70 (septet, 3H), 1,14 (d, 18H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 430 (M+H)⁺.

Elementární analýza: výpočet pro C₂₄H₃₅NO₄Si.0,5 H₂O (%) - C 65,71, H 8,27, N 3,19, nalezené hodnoty (%) - C 65,51, H 8,14, N, 2,83.

Příklad 131

Příprava prekurzoru sloučeniny 8b

Směs 2-(cyklopenten-l-yl)-l-(triisopropylsilyl)pyrrolu a 3-(cyklopenten-l-yl)-l-(triisopropylsilyl)pyrrolu 2:1 (1,16 g, 4,01 mmol) a diethyl-fumarátu (0,75 g, 4,36 mmol) se zahřívá pod atmosférou dusíku na teplotu 150 °C po dobu 64 h s obdržením surového Dielsova-Alderova aduktu ve formě jantarově zbarvené olejovité kapaliny. Čistý Dielsův-Alderův adukt lze izolovat chromatografií na silikagelu (hexan/ether 90:10).

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 6,68 (d, 1H), 6,16 (d, 1H), 4,20 (m, 4H), 3,95 (d, 1H), 2,91 (t, 2H), 2,49 (m, 1H), 2,09 (m, 1H), 1,73 (m, 2H), 1,48 (septet, 3H), 1,30 (2t, 6H), 1,27 (d, 9H), 1,07 (d, 9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 462 (M+H)⁺.

DDQ (2,2 g, 9,7 mmol) se přidá ve třech dílech k benzenovému roztoku (16 ml) surového Dielsova-Alderova aduktu při teplotě 50 °C, až nezbývá žádná výchozí látka (podle chromatografie na tenké vrstvě a nukleární magnetické resonance). Po 8 h se směs zfíltruje Celitem®. Sraženina se promyje benzenem a filtrát se odpaří s obdržením 1,52 g černé tuhé látky. Ta se dělí chromatograficky na silikagelu (hexan/ether 15:85 až 20:80) s obdržením produktu (380 mg, výtěžek 21 %, výtěžek 35 % z 2-izomeru) ve formě bezbarvé olejovité kapaliny.

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 7,42 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 4,40 (2q, 4H), 3,20 (t, 2H), 3,12 (t, 2H), 2,17 (kvintet, 2H), 1,67 (septet, 3H), 1,39 (t, 3H), 1,36 (t, 3H), 1,20 (d, 18H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 458 (M+H)⁺.

Příklad 132

Příprava prekurzoru sloučeniny 8b l,6,7,8-Tetrahydrocyklopent[g]indol-4,5-dikarboxylát

Směs diethyl-[l-(triisopropylsilyl)-l,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g]indoM,5-dikarboxylátu] (400 mg, 0,875 mmol) a 10 M roztoku hydroxidu sodného (0,4 ml) v ethanolu (5 ml) se vaří pod zpětným chladičem pod atmosférou dusíku po dobu 3 h. Rozpouštědlo se odpaří a hnědý zbytek

-97CZ 305350 B6 se rozpustí ve vodě a extrahuje 3x etherem. Vodná vrstva se okyselí kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje 3x ethyl-acetátem a spojené organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým s obdržením surového produktu (205 mg, 96 %) ve formě hnědé tuhé látky o teplotě tání 311 až 312 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 12,55 (široký s, 2H), 11,37 (s, 1H), 7,43 (d, 1H), 6,70 (d, 1H), 3,08 (t, 2H), 3,02 (t, 2H), 2,14 (kvintet, 2H).

Elementární analýza: výpočet pro Ci₃HnNO₄ (%) - C 63,67, H 4,52, N 5,71, nalezené hodnoty (%) - C 63,15, H 4,46, N 5,39.

Hydrolýza dimethylesteru hydroxidem sodným v methanolu vařeném pod zpětným chladičem po dobu 3 d poskytuje tentýž produkt.

Příklad 133

Příprava prekurzoru sloučeniny 8b

Anhydrid 1,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g] indol-4,5-dikarboxylové kyseliny

Suspenze dikarboxylové kyseliny (184 mg) v acetanhydridu (3 ml) se zahřívá na teplotu 73 °C po dobu 1 h a poté se ochladí na teplotu 0 °C. Sraženina se oddělí a promyje 2 ml etheru s obdržením produktu ve formě žluté tuhé látky (112 mg, 66 %) o teplotě tání 320 °C (sublimuje).

Nukleární magnetická rezonance NMR (CD₃COCD₃) δ 7,80 (d, 1H), 6,94 (d, 1H), 3,30 (t, 2H), 3,24 (t, 2H), 2,38 (kvintet, 2H).

Příklad 134

Příprava prekurzoru sloučeniny 8b

Diethyl-[l-(triisopropylsilyl)-l,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g]indol-4,5-dikarboxylát

Směs 2-(cyklopenten-l-yl)-l-(triisopropylsilyl)pyrrolu a 3-(cyklopenten-l-yl)-l-(triisopropylsilyl)pyrrolu 2:1 (1,16 g, 4,01 mmol) a diethyl-fumarátu (0,75 g, 4,36 mmol) se zahřívá pod atmosférou dusíku na teplotu 150 °C po dobu 64 s obdržením surového Dielsova-Alderova aduktu ve formě jantarově zbarvené kapaliny. Čistý Dielsův-Alderův adukt lze izolovat chromatografií na silikagelu (hexan/ether 90:10).

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 6,68 (d, 1H), 6,16 (d, 1H), 4,20 (m, 4H), 3,95 (d, 1H), 2,91 (t, 2H), 2,49 (m, 1H), 2,09 (m, 1H), 1,73 (m, 2H), 1,47 (septet, 3H), 1,30 (2t, 6H), 1,27 (d,9H), 1,07 (d,9H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 462 (M+H)⁺.

DDQ (2,2 g, 9,7 mmol) se přidá ve třech dílech k benzenovému roztoku (16 ml) surového Dielsova-Alderova aduktu při teplotě 50 °C, až nezbývá žádná výchozí látka (podle chromatografie na tenké vrstvě a nukleární magnetické resonance). Po 8 h se směs zfiltruje Celitem®. Sraženina se promyje benzenem a filtrát se odpaří s obdržením 1,52 g černé tuhé látky. Ta se dělí chromatografický na silikagelu (hexan/ether 15:85 až 20:80) s obdržením produktu (380 mg, výtěžek 21 %, výtěžek 35 % z 2-izomeru) ve formě bezbarvé olejovité kapaliny.

-98CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 458 (M+H)⁺.

Příklad 135

Příprava prekurzoru sloučeniny 8b

1,6,7,8-T etrahydrocyklopent[g] indol-4,5-dikarboxylát

Směs diethyl-[l-(triisopropylsilyl)-l,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g]indol-4,5-dikarboxylátu] (400 mg, 0,875 mmol) a 10 M roztoku hydroxidu sodného (0,4 ml) v ethanolu (5 ml) se vaří pod zpětným chladičem pod atmosférou dusíku po dobu 3 h. Rozpouštědlo se odpaří a hnědý zbytek se rozpustí ve vodě a extrahuje 3x etherem. Vodná vrstva se okyselí kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje 3x ethyl-acetátem a spojené organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým s obdržením surového produktu (205 mg, 96 %) ve formě hnědé tuhé látky o teplotě tání 311 až 312 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (CD₃COCD₃) δ 12,55 (široký s, 2H), 11,37 (s, 1H), 7,43 (d, 1H), 6,70 (d, 1H), 3,08 (t, 2H), 3,02 (t, 2H), 2,14 (kvintet, 2H).

Elementární analýza: výpočet pro Ci₃HnNO₄ (%) - C 63,67, H 4,52, N 5,71, nalezené hodnoty (%)-C 63,15, H 4,46, N 5,39.

Příklad 136

Příprava sloučeniny 8b l,6,7,8-Tetrahydrocyklopent[g]indol-4,5-dikarboxylátimid

Směs hexamethyldisilazanu (1,38 ml, 1,06 g, 6,56 mmol) a methanolu (0,135 ml, 107 mg, 3,33 mmol) se přidá kanhydridu l,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g]indol-4,5-dikarboxylové kyseliny rozpuštěnému v dimethylformamidu (3 ml). Směs se zahřívá na teplotu 73 °C po dobu 4 h a poté se ochladí. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se míchá se zředěnou kyselinou chlorovodíkovou. Sraženina se oddělí a promyje ethyl-acetátem s obdržením produktu (132 mg, výtěžek 88 %) ve formě žluté tuhé látky o teplotě tání vyšší než 350 °C.

/

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 11,81 (široký s, 1H), 10,71 (široký s, 1H), 7,67 (d, 1H), 6,75 (d, 1H), 3,18 (t, 2H), 3,10 (t, 2H), 2,22 (kvintet, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/z 225 (M-H).

Elementární analýza: výpočet pro Ci₃H₁₀N₂O₂.0,2 H₂O (%) - C 67,94, H 4,46, N 12,19, nalezené hodnoty (%) - C 67,81, H 4,50, N 12,04.

Příklad 137

Příprava sloučeniny 8c

-99CZ 305350 B6

3-Brom-l,6,7,8-tetrahydrocyklopent[gJindol-4,5-dikarboxyIátimid

Perbromid pyridinium-bromidu (60 mg, 0,187 mmol) se přidá k suspenzi 1,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g]indol-4,5-dikarboxylátimidu (40 mg, 0,177 mmol) v dimethylformamidu oddělí, promyje vodou a vysuší s obdržením produktu (54 mg, výtěžek 100 %) ve formě žluté tuhé látky o teplotě tání vyšší než 350 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDCfi) δ 12,18 (široký s, 1H), 10,71 (široký s, 1H), 7,83 (d, 1H), 3,18 (t, 2H), 3,10 (t, 2H), 2,22 (kvintet, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/z 303 a 305 (M-H)“.

Elementární analýza: výpočet pro Ci₃H₉N₂O₂Br (%) - C 51,17, H 2,97, N 9,18, Br 26,19, nalezené hodnoty (%) - C 50,91, H 3,19, N 8,99, Br 26,40.

Příklad 138

Příprava sloučeniny 8d

3-Kyano-l,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g]indoM,5-dikarboxylátimid

Směs 3-brom-l,6,7,8-tetrahydrocyklopent[g]indoM,5-dikarboxylátimidu (36 mg) a kyanidu měďného (31 mg) v dimethylformamidu (0,4 ml) se zahřívá na teplotu 155 °C po dobu 4 h a ochladí na teplotu 20 °C. Šedá sraženina obsahující produkt a soli mědi se chromatografuje na silikagelu (2 x 0,5 cm) dimethylformamidem. Odpařený eluát se vaří s vodou po dobu 5 min a poté se oddělí zlatě zbarvená sraženina. Výtěžek je 8 mg, 27 %, teplota tání vyšší než 350 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 12,86 (široký s, 1H), 10,94 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 3,17 (m, 4H), 2,24 (kvintet, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/z 250 (M-H) .

Další produkt se eluuje dimethylsulfoxidem.

Elementární analýza: výpočet pro Ci4H₉N₃O₂.l,2 H₂O (%) - C 61,63, H 4,21, N 15,40, nalezené hodnoty (%) - C 61,33, H 3,60, N 14,93.

Příklad 139

Příprava sloučeniny 8e l,6,7,8-Tetrahydrocyklopent[g]indol-4,5-dikarboxyláthydrazid

Dimethyl-[ 1—(triisopropylsily 1)—1,6,7,8-tetrahydrocyklopentfg]indol-4,5-dikarboxylát (34 mg, 0,079 mmol) a hydrazinhydrát (83 mg, 1,23 mmol) se vaří v ethanolu pod zpětným chladičem (0,6 ml) po dobu 24 h. Po odpaření rozpouštědla se zbytek suspenduje v ethyl-acetátu, promyje vodou, 1 M roztokem kyseliny chlorovodíkové a nasyceným roztokem chloridu sodného a poté se vysuší. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se suspenduje v chloroformuje s obdržením sraženiny produktu (2 mg, výtěžek 10 %), teplota tání vyšší než 250 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (aceton-d₆) δ 7,56 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 3,60 (t, 2H), 3,19 (t, 3H), 2,86 (široký s, 2H), 2,23 (kvintet, 2H).

-100CZ 305350 B6

Hmotnostní spektrometrie MS m/z 242 (M+H)⁺.

Příklad 139a až 139b Údaje pro sloučeniny 8f až 8g

Tabulka 15

Příklad	Slouč.	Hm. spektr, (m/e)

139a	8f	383,385,387 (M-H)'
139b	8g	250 (M-H)'

Příklad 139c

Příprava sloučeniny 8h

2-(l-Cyklopentenyl)-l-azaindol (500 mg, 2,72 mmol), maleinimid (527 mg, 5,44 mmol) a bromid ytterbitý (113 mg) v toluenu (10 ml) se míchá za varu pod zpětným chladičem pod atmosférou dusíku po dobu 1,5 h. Po ochlazení na teplotu místnosti se produkt oddělí, promyje methanolem a vysuší s obdržením 420 mg (55 %). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 380 (M-l). Tetrahydrokarbazolový meziprodukt (20 mg, 0,07 mmol) se suspenduje v kyselině octové, přidá se DDQ (80 mg, 0,36 mmol) a směs se udržuje na teplotě 55 °C po dobu 12 h. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, zbytek se trituruje methanolem a získá se produkt v množství 16 mg (84 %) ve formě červenavé tuhé látky.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 12,50 (s, 1H), 11,02 (s, 1H), 9,0 (m, 1H), 8,55 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 3,21 (m, 4H), 2,28 (široký m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 276 (M-H).

Příklad 139d

Příprava sloučeniny 8i

Sloučenina 8h (200 mg) a jodmethan (2 ml) v dimethylformamidu (10 ml) se zahřívá v zatavené reakční trubici při teplotě 110 °C po dobu 3 h. Po ochlazení směsi na teplotu místnosti se produkt vysráží přídavkem diethyletheru, oddělí a vysuší s obdržením 300 mg (100 %) sloučeniny 8i. Hmotnostní spektrometrie MS m/z 294 (M+H).

Příklad 139e

Příprava sloučeniny 8j

- 101 CZ 305350 B6

K roztoku z příkladu 1 (100 mg, 0,36 mmol) v tetrahydrofuranu (10 ml) se přidá hydrid boritý/tetrahydrofuran (1 ml 1 M roztoku) s následujícím zahříváním po dobu 2 h při teplotě 60 °C. Přidají se další 2 ml hydridu boritého/tetrahydrofuranu a zahřívání pokračuje po dobu 12 h. Roztok se odpaří za sníženého tlaku na tuhou látku. Ke zbytku se přidá 2N roztok kyseliny chlorovodíkové a směs se míchá po dobu 2 h. Produkt se oddělí a vysuší s obdržením 35 mg (39 %) bílé tuhé látky.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 249 (M+H).

Příklad 139f

Příprava sloučeniny 8k

Sloučenina 8k se připraví způsobem podobným způsobu popsanému v příkladu 139c s obdržením sloučeniny podle nadpisu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 301 (M+H).

Příklad 140

Příprava prekurzoru sloučeniny 11 a

Ethyl-[4-kyano-l,2,3,10-tetrahydrocyklopenta[a]karbazol-5-karboxylát]

DDQ (39 mg, 0,17 mmol, 220 molámích %) se přidá k roztoku ethyl-[4-kyano-l,2,3,4,5,10hexahydrocyklopenta[a]karbazol-5-karboxylátu] (24 mg, 0,078 mmol) v toluenu (12 ml). Roztok ihned zhnědne a míchá se při teplotě 20 °C po dobu 1,5 h. Rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se rozpustí v ethyl-acetátu a promyje zředěným vodným roztokem kyseliny askorbové a dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Odpaření rozpouštědla poskytuje surový produkt (21 mg), který se překrystaluje z ethyl-acetátu s obdržením produktu (9 mg, výtěžek 38 %) ve formě béžové tuhé látky o teplotě tání 229 až 231 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (CDC1₃) δ 8,28 (s, 1H), 7,49 (s, 2H), 7,26 (s, 2H), 4,64 (q, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,20 (t, 2H), 2,36 (kvintet, 2H), 1,54 (t, 3H).

Příklad 141

Příprava sloučeniny 11a

5,7,8,9,10,ll-Hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6)-on

Ethyl-[4-kyano-l,2,3,10-tetrahydrocyklopenta[a]karbazol-5-karboxylát] (14 mg) v dimethylformamidu (1,6 ml) se hydrogenuje při tlaku 380 kPa na Raneyově niklu W2 (150 mg) po dobu 2,5 d. Katalyzátor se odfiltruje a dimethylformamid se odpaří ve vakuu s obdržením produktu (12 mg, výtěžek 100 %) ve formě světle hnědých krystalů. Vzorek se překrystaluje z dimethylformamidu, vaří s ethanolem, ochladí a zfiltruje s obdržením produktu ve formě bělavé tuhé látky o teplotě tání vyšší než 300 °C.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 11,45 (s, 1H), 9,06 (d, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,40 (t, 1H), 7,16 (t, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,21 (t, 2H), 3,04 (t, 2H), 2,30 (kvintet, 2H).

-102CZ 305350 B6

Elementární analýza: výpočet pro Ci₇H_[4N₂O (%) - C 77,84, H 5,38, N 10,68, nalezené hodnoty (%) - C 77,40, H 5,66, N 10,49.

Příklad 142

Příprava sloučeniny 1 lb

5,7,8,9,10,1 l-Hexahydrocyklopent[a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7(8H)-dion

Připraví se z 2-(cyklohexen-l-yl)indolu způsobem podobným způsobu popsanému pro přípravu sloučeniny 5a.

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 11,73 (široký s, 1H), 10,90 (široký s, 1H), 8,77 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,27 (t, 1H), 3,22 (t, 2H), 3,03 (t, 2H), 1,90 (m, 2H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 289 (M-H) .

Příklad 143

Příprava sloučeniny 1 lc

9-Ethyl-8-propyl-5,7-dihydropyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7(10H)-dion

Připraví se z 2-(hept-3-en-3-yl)indolu podle obecného způsobu popsaného pro přípravu 8,9dimethyl-5,6,7,10-tetrahydropyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu. Purifikuje se preparativní chromatografií na tenké vrstvě (10 % methanolu v dichlormethanu) s obdržením 38 mg (40 %) produktu.

Nukleární magnetická rezonance *HNMR (CDC1₃) δ 11,77 (s, 1H), 10,91 (s, 1H), 8,77 (d, 1H), 7,58 (m, 2H), 7,25 (m, 1H), 3,10 - 3,30 (m, 4H), 1,56 (m, 2H), 1,05 (t, 3H), 1,16 (t, 3H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 305 (M-H)“.

Příklad 144

Příprava sloučeniny 11 d

Sloučenina lid se připraví z2-(cyklohexen-l-yl)-l-methylindolu způsobem podobným způsobu popsanému pro přípravu sloučeniny la. Teplota tání je 242 °C.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 303 (M-H)“.

Příklad 145

Příprava sloučeniny 1 lf

5,7,10,1 l-Tetrahydrofuran[a-3,2]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7(9H)-dion

Připraví se z 2-(2,3-dihydrofuran-4-yl)indolu obecným způsobem popsaným pro přípravu 8,9dimethyl-5,6,7,10-tetrahydropyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu. Purifikuje se preparativní chro- 103CZ 305350 B6 matografií na tenké vrstvě (10 % methanolu v dichlormethanu) s obdržením 0,15 mg (zhruba 1 %) produktu.

Nukleární magnetická rezonance 'HNMR (CD₃COCD₃) δ 9,08 (d, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,48 (t, 1H), 7,26 (t, 1H), 3,58 (m, 2H), 2,30 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 277 (M-H).

Příklad 146

Příprava sloučeniny 11 g

5,7-Dihydrorofuran[a-3,2]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5(6H),7(9H)-dion

Připraví se z 2-furan-3-yl)indolu obecným způsobem popsaným pro přípravu 8,9-dimethyl5,6,7,10-tetrahydropyrrolo[3,4-c]karbazol-7(6H)-onu. Purifikuje se preparativní chromatografií na tenké vrstvě (10 % methanolu v dichlormethanu) s obdržením 0,57 mg (zhruba 1 %) produktu.

Nukleární magnetická rezonance ^]HNMR (DMSO-d₆) δ 12,00 (s, 1H), 10,9 (s, 1H), 8,9 (d, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,8 (d, 1H), 7,6 (d, 1H), 7,58 (t, 1H), 7,26 (t, 1H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 275 (M-H)“.

Příklad 147

Příprava sloučeniny 12a

K roztoku indolu (10,72 g, 92,5 mmol) v tetrahydrofuranu (400 ml) se při teplotě -78 °C přidá 2,0 M roztok n-butyllithia (48,0 ml, 96 mmol). Po míchání po dobu 25 min se zavádí do roztoku oxid uhličitý po dobu 12 min. Směs se ohřeje na teplotu místnosti a rozpouštědlo (a přebytečný oxid uhličitý) se odstraní snížením objemu na 50 % odpařováním na rotačním zařízení. Přidá se další tetrahydrofuran (200 ml) a roztok se ochladí na teplotu -78 °C před přídavkem 1,7 M tercbutyllithia (54 ml, 91,8 mmol). Po míchání po dobu 2 h se přidá roztok benzyl-(4-oxo-lpiperidinkarboxylátu) (23,3 g, 99,9 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml). Po 1 h se reakce ukončí vodou (10 ml) a směs se vylije do 10% vodného roztoku chloridu amonného (200 ml). Směs se extrahuje ethyl-acetátem a organická vrstva se oddělí a promyje nasyceným roztokem chloridu sodného. Po vysušení síranem hořečnatým následuje odpaření na rotačním zařízení s obdržením tuhé látky, která se trituruje etherem (3 x 25 ml) a poskytuje odpovídající alkohol (18,5 g, 57 %).

K roztoku výše popsaného aduktu (11,2 g, 32,0 mmol) v acetonu (300 ml) se přidá 2 N roztok kyseliny chlorovodíkové (2,0 ml). Po míchání po dobu 3 h se přidá další 2 N roztok kyseliny chlorovodíkové (1 ml). Po 1 h se přidá nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a objem rozpouštědla se zmenší odpařením na rotačním zařízení. Zbytek se extrahuje dichlormethanem, promyje vodou a vysuší síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odstraní odpařením na rotačním zařízení a zbytek se trituruje etherem s obdržením odpovídajícího dienu ve formě bílé tuhé látky (9,5 g, 89 %).

Směs dienu popsaného výše (1,02 g, 3,1 mmol) a maleinimidu (0,59 g, 6,1 mmol) v xylenu (20 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 18 h. Vychlazená směs se zfiltruje a tuhá látka se postupně promyje vodou (3 x 20 ml), etherem (3x5 ml) a další vodou (3x10 ml). Po vysušení ve vakuu se získá cykloadukt, 1,35 g (100 %).

- 104CZ 305350 B6

Směs cykloaduktu získaného výše (325 mg, 0,76 mmol) a 10% palladia na uhlíku (375 mg) ve směsi diethylenglykol/diethylether (10 ml) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 3 h. Ochlazená směs se zfiltruje vrstvou celitu a filtrační koláč se promyje dimethylformamidem (3x15 ml). Filtrát se odpaří do sucha a výsledný zbytek se trituruje etherem s obdržením sloučeniny podle nadpisu (175 mg, 81 %) ve formě světle zeleného prášku.

Nukleární magnetická rezonance ‘HNMR (DMSO-d₆) δ 13,2 (s, IH), 11,32 (s, IH), 10,19 (s, IH), 8,92 (d, J = 7,9, IH), 8,81 (d, J = 5,8, IH), 8,51 (d, J = 5,8, IH), 7,78 (d, J = 7,9, IH), 7,60 (app. t, J = 7,3, IH), 7,41 (app. t, J = 7,3, IH).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 288 (M+H)⁺.

Příklad 148

Příprava sloučeniny 12b

Směs imidu 12a (28,5 mg, 0,10 mmol), práškového cínu (31,2 mg, 0,26 mmol), kyseliny octové (4 ml) a koncentrované kyseliny chlorovodíkové (2 ml) se vaří pod zpětným chladičem. Po 20 h se přidá další cín (42,5 mg, 0,35 mmol) a další se přidá po 26 h (65,0 mg, 55 mmol). Roztok se dekantuje a kovový zbytek se promyje dimethylformamidem. Supematant se odpaří a trituruje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Výsledná tuhá látka se suspenduje v dimethylsulfoxidu a zfiltruje. Filtrát se extrahuje ethyl-acetátem a promyje vodou (3 x 10 ml) a vysuší síranem hořečnatým. Po filtraci se rozpouštědlo odpaří na rotačním odpařovacím zařízení a zbytek se trituruje etherem s obdržením směsi laktamů (1,1 mg, 4 %).

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 13,0 (široký s, IH), lé,4 (s, 0,65H), 10,13 (s, 0,35H), 8,88 (d, 0,35H), 8,70 (m, 1,65H), 8,51 (d, 0,35H), 8,44 (d, 0,65H), 8,27 (d, 0,35H), 8,11 (d, 0,65H), 7,76 (m, IH), 7,53 (m, IH), 7,34 (m, IH), 4,97 (s, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 274 (M+H)⁺.

Příklad 149

Příprava sloučeniny 12c

K směsi hydroxylaktamu 12d (5,2 mg, 0,018 mmol) v dichlormethanu (4 ml) se přidá Et₃SIH (123 μΐ) a kyselina trifluoroctová (297 μΐ). Směs se míchá po dobu 20 h a rozpouštědlo se odstraní opakovaným odpařením na rotačním zařízení s isopropanolem. Triturace etherem poskytuje laktamový produkt (2,3 mg, 45 %).

Nukleární magnetická rezonance NMR (DMSO-d₆) δ 12,90 (s, IH), 10,40 (s, IH), 8,70 (m, 2H), 8,44 (d, J = 5,65, IH), 8,11 (d, J = 7,8, IH), 7,76 (d, J = 8,3, IH), 7,53 (m, IH), 7,34 (m, IH), 4,97 (s, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 274 (M+H)⁺.

Příklad 150

Příprava sloučeniny 12d

Ke směsi imidu 12a (28,5 mg, 0,10 mmol) v acetonu (7 ml) se přidá isopropyljodid (200 μΐ). Po míchání přes noc se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se vyjme methanolem (10

- 105 CZ 305350 B6 ml) a zpracuje natriumborohydridem (22,4 mg, 0,59 mmol). Po míchání přes noc se reakce ukončí 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové (5 ml) a směs se zahřeje na teplotu 50 °C. Zneutralizuje se vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, extrahuje ethyl-acetátem, promyje postupně vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem hořečnatým. Po zfiltrování se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií směsí acetonitril/voda s obsahem 0,1 % kyseliny trifluoroctové s obdržením hydroxylaktamového produktu (7,0 g, 25 %).

Nukleární magnetická rezonance ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 170,5, 148,6, 145,3, 144,0, 140,1,

136,6, 126,7, 124,5, 123,8, 121,0, 117,4, 116,1, 116,0, 115,8, 112,4, 78,3.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,90 (s, 1H), 10,37 (s, 1H), 8,95 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,37 (d, J = 7,9, 1H), 7,73 (d, J= 8,2, 1H), 7,52 (app. t, J =

7,4, 1H), 7,33 (app t, J = 7,4, 1H), 6,63 (d, J = 10,0, 1H), 6,40 (d, J = 10,0, 1H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 290 (M+H)⁺ a m/e 273 (M-0H)⁺.

Příklad 151

Příprava sloučeniny 12e

K imidové směsi 12a (50,1 mg, 0,17 mmol) v acetonitrilu (5,0 ml) se přidá ethyl-akrylát (50 μΐ) a DBU (50 μΐ). Směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 20 h, ochladí a zředí vodou (10 ml). Získaná tuhá látka se oddělí filtrací a promyje 50% vodným ethanolem (2x5 ml) a 95% ethanolem (3 x 1 ml) a vysuší ve vakuu (32 mg, 49 %).

Nukleární magnetická rezonance ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 171,1, 169,3, 168,8, 149,2, 145,3,

140,7, 138,7, 129,2, 128,1, 125,6, 124,7, 121,8, 121,2, 121,0, 118,3, 116,2, 114,6, 112,8, 60,7, 34,0, 33,2, 14,4.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dó) δ 13,90 (s, 1H), 10,10 (s, 1H), 8,83 (d, J = 8,0, 1H), 8,76 (d, J = 5,8, 1H), 8,42 (d, J = 5,8, 1H), 7,73 (d, J = 8,0, 1H), 7,59 (app. t, J = 7,2, 1H), 7,39 (app. t, J = 7,2, 1H), 4,00 (q, J = 7,1, 2H), 3,88 (t, J = 7,0, 2H), 2,73 (t, J = 7,0, 2H), 1,07 (t, J = 7,1,3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 388 (M+H)⁺.

Příklad 152

Příprava sloučeniny 12f

K roztoku imidu 12a (28,9 mg, 0,1 mmol) v dimethylformamidu (2,0 ml) se přidá hydrid sodný (60 %, 5,1 mg, 0,13 mmol). Po míchání po dobu 15 min se přidá (3-brompropoxy)-terc-butyldimethylsilan (30 μΐ) a reakční směs se zahřívá na teplotu 50 °C po dobu 2 h. Roztok se ochladí, vylije do 10% vodného roztoku chloridu amonného (10 ml) a extrahuje ethyl-acetátem. Organická vrstva se oddělí a promyje postupně vodou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se vyjme methanolem (10 ml) a zpracuje acetylchloridem (90 μΐ). Po 1 h se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se trituruje etherem (2 x 1 ml) a suší ve vakuu (21,7 mg, 57 %).

- 106CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 13,54 (s, 1H), 10,16 (s, 1H), 8,89 (d, J = 9,5, 1H), 8,84 (d, J = 6,7, 1H), 8,71 (d, J = 6,7, 1H), 7,77 (d, 8,2, 1H), 7,43 (app. t, J = 7,2, 1H), 5,00 (m, 1H), 3,72 (t, J = 7,0, 2H), 3,48 (d, J = 7,0, 2H), 1,82 (p, J = 7,4, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 404 (M+Na)⁺.

Příklad 153

Příprava sloučeniny 12g

K roztoku imidu 12a (28,9 mg, 0,1 mmol) v dimethylformamidu (2,0 ml) se přidá hydrid sodný (60 %, 5,1 mg, 0,13 mmol). Po míchání po dobu 15 min se přidá (3-brompropoxy)-terc-butyldimethylsilan (30 μΐ) a reakční směs se zahřívá na teplotu 50 °C po dobu 2 h. Roztok se ochladí, vylije do 10% vodného roztoku chloridu amonného (10 ml) a extrahuje ethyl-acetátem. Organická vrstva se oddělí a promyje postupně vodou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se vyjme methanolem (10 ml) a zpracuje acetylchloridem (90 μΐ). Po 1 h se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se trituruje etherem (2 x 1 ml) a suší ve vakuu (6,5 mg, 20 %).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 13,51 (s, 1H), 10,21 (s, 1H), 8,93 (d, J = 8,8, 1H), 8,81 (d, J = 5,7, 1H), 8,52 (d, J = 5,7, 1H), 7,79 (d, J = 8,8, 1H), 7,62 (app. t, J = 7,2, 1H), 7,43 (app. t, J = 7,2, 1H), 4,87 (m, 1H), 3,72 (m, 2H), 3,67 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 332 (M+H)⁺.

Příklad 154

Příprava sloučeniny 12h

K roztoku imidu 12a (28,9 mg, 0,1 mmol) v dimethylformamidu (2,0 ml) se přidá hydrid sodný (60 %, 5,2 mg, 0,13 mmol). Po míchání po dobu 15 min se přidá ethyl-bromacetát (14 μΐ) a reakční směs se zahřívá na teplotu 60 °C po dobu 1 h. Přidá se další hydrid sodný (5,8 mg) a poté další ethyl-bromacetát (15 μΐ). Tato směs se míchá při 60 °C po dobu 1 h. Roztok se ochladí, vylije do 10% vodného roztoku chloridu amonného (10 ml) a extrahuje ethyl-acetátem. Organická vrstva se oddělí a promyje postupně vodou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se vyjme methanolem (2 x 1 ml). Produkt se a suší ve vakuu (18,2 mg, 48 %).

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 13,35 (s, 1H), 10,16 (s, 1H), 8,83 (d, J = 5,9, 1H), 7,79 (d, J = 8,2, 1H), 7,63 (app. t, J = 8,2, 1H), 7,43 (app. t, J = 8,2, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,14 (q, J = 7,1, 2H), 1,20 (t, J = 7,1, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 374 (M+H)⁺.

Příklad 155

Příprava sloučeniny 12i

- 107CZ 305350 B6

K roztoku imidu 12a (28,9 mg, 0,1 mmol) v dimethylformamidu (2,0 ml) se přidá hydrid sodný (60 %, 12,8 mg, 0,32 mmol). Po míchání po dobu 15 min se přidá hydrochlorid 2-pikolylchloridu (19,6 mg, 0,12 mmol) a reakční směs se zahřívá na teplotu 65 °C po dobu 3 h. Roztok se ochladí, vylije do 10% vodného roztoku chloridu amonného (10 ml) a produkt se oddělí filtrací. Po promytí vodou (5 ml) a methanolem (2 x 1 ml) se produkt suší ve vakuu (20,5 mg, 54 %).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d_Ď) δ 13,38 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 8,87 - 8,80 (m, 2H), 8,50 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,76 (m, 2H), 7,61 (app. t, J = 7,4, 1H), 7,47 (d, J = 7,7, 1H), 7,39 (app. t, J = 7,4, 1H), 7,25 (app. t, J = 5,4), 4,99 (s, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 379 (M+H)⁺.

Příklad 156

Příprava sloučeniny 12j

K roztoku esteru 12e (2,1 mg, 0,05 mmol) v ethanolu (4,0 ml) se přidá 1 N roztok hydroxidu sodného (300 μΐ) a směs se zahřívá na teplotu 70 °C po dobu 0,5 h. Po vychlazení reakční směsi se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení. Zbytek se vyjme vodou (1 ml) a okyselí na pH 3 1 N vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové. Rozpouštědlo se odpaří na rotačním zařízení a zbytek se trituruje vodou. Produkt se vysuší ve vakuu (1,1 mg, 56 %).

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 12,78 (s, 1H), 9,35 (s, 1H), 8,78 - 8,53 (m, 2H), 8,39 (d, J = 5,5, 1H), 8,14 (d, J = 7,9, 1H), 7,70 (d, J = 7,9, 1H), 7,49 (app. t, J = 7,8, 1H), 7,25 (app. t, J = 7,8, 1H), 3,54 (t, J - , 2H), 2,57 (t, J = 7,1, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 360 (M+H)⁺.

Příklad 157

Příprava sloučeniny 12k

Ke směsi imidu 12a (28,9 mg, 0,1 mmol) v acetonitrilu (5,0 ml) se přidá akrylonitril (50 μΐ a DBU (5 μΐ). Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 15 h, ochladí a zředí vodou (10 ml). Tuhý produkt se oddělí filtrací a promyje 50% vodným ethanolem (2x5 ml) a 95% ethanolem (3 x 1 ml). Filtrát se odpaří a trituruje vodou (2 x 1 ml) a etherem (2 x 1 ml) a vysuší ve vakuu (4,0 mg, 12 %).

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 13,3 (s, 1H), 10,20 (s, 1H), 8,93 (d, J = 7,9, 1H), 8,83 (d, J = 5,8, 1H), 8,53 (d, J = 5,8, 1H), 7,80 (d, J = 7,9, 1H), 7,63 (app. t, J = 7,2, 1H), 7,44 (app. t, J = 7,2, 1H), 3,97 (t, J = 7,1, 2H), 3,00 (t, J = 7,0, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 341 (M+H)⁺.

Příklad 158

Příprava sloučeniny 121 a 12m

K roztoku imidu z příkladu 12a (28,6 mg, 0,1 mmol) v dimethylformamidu (2,0 ml) se přidá hydrid sodný (60 %, 5,0 mg, 0,13 mmol). Po míchání po dobu 15 min se přidá p-terc-butyldimethylsiloxy)benzylchlorid (29,7 mg) a reakční směs se zahřívá na teplotu 60 °C po dobu 4 h. Roztok se

-108CZ 305350 B6 ochladí, nalije do vody (5 ml) a zfiltruje. Tuhá látka se vyjme methanolem (10 ml) a zpracuje acetylchloridem (50 μΐ). Po 1 h se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se trituruje methanolem (2 x 1 ml) s obdržením monoalkylovaného produktu (121), který se vysuší ve vakuu (8,9 mg, 23 %).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 13,24 (s, 1H), 10,16 (s, 1H), 9,37 (s, 1H), 8,88 (d, J = 8,0, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,47 (d, J = 5,7, 1H), 7,75 (d, J = 8,2, 1H), 7,60 (app. t, J = 7,8, 1H), 7,40 (app. t, J = 7,8, 1H), 7,21 (d, J = 8,2, 2H), 6,69 (d, J = 8,2, 2H), 4,72 (s, 2H).

Odpaření methanolových promývacích podílů poskytuje zbytek, který se frakcionuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií (45% směs acetonitril/voda s 0,1 % kyseliny trifluoroctové) s obdržením dialkylovaného produktu (12m, 8,2 mg, 16 %).

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 10,28 (s, 1H), 9,36 (s, 2H), 9,14 (d, J = 8,0, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,35 (d, J = 5,7, 1H), 7,93 (d, J = 8,4, 1H), 7,66 (app. t, J = 7,4, 1H), 7,49 (app: t, J = 7,4, 1H), 7,22 (d, J = 8,2, 2H), 6,83 (d, J = 8,2, 2H), 6,69 (d, J = 8,2, 2H), 6,61 (d, J = 8,2, 2H), 6,15 (s, 2H), 4,75 (s, 2H).

Příklad 159

Příprava sloučeniny 12n

Způsob popsaný pro 12a se opakuje s použitím 5-methylindolu místo indolu.

Nukleární magnetická rezonance ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 171,3, 170,6, 149,3, 145,1, 139,0,

138,8, 130,6, 130,2. 129,4, 125,8, 124,4, 121,6, 121,1, 116,2, 114, 2, 112,3,21,6.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-dé) δ 13,07 (s, 1H), 11,27 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 8,75 (d, J = 5,8, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,44 (d, J = 5,8, 1H), 7,61 (d, J = 8,3, 1H), 7,39 (d, J = 8,3, 1H), 2,50 (s, 3H).

Příklad 160

Příprava sloučeniny 12o

Příprava popsaná pro sloučeninu 12a se provede se 7-methylindolem místo indolu s obdržením sloučeniny 12o.

Nukleární magnetická rezonance ^]H NMR (DMSO-d₆) δ 12,37 (s, 1H), 11,18 (s, 1H), 10,04 (s, 1H), 8,69 (d, J = 5,7, 1H), 8,63 - 8,50 (m, 2H), 7,29 (d, J = 6,9, 1H), 7,20 (app. t, J = 7,6, 1H), 2,53 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 302 (M+H)⁺.

Příklad 161

Příprava sloučeniny 12p

Ke směsi imidu 12a (496 mg, 1,73 mmol) v dimethylformamidu (30 ml) se přidá NBS (341 mg, 192 mmol) a reakční směs se zahřívá na teplotu 60 °C po dobu 2 h. Přidá se další NBS (85 mg, 0,48 mmol) a zahřívání pokračuje po dobu 1 h. Přidá se další NBS (25 mg, 0,14 mmol) a zahří- 109CZ 305350 B6 vání pokračuje po dobu 1 h. Reakční směs se ochladí a rozpouštědlo se odpaří na rotačním zařízení. Zbytek se trituruje 95% ethanolem (3x10 ml) a vysuší ve vakuu) 479 mg, 76 %).

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 13,25 (s, 1H), 11,33 (s, 1H), 10,08 (s, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,77 (d, J - 5,6, 1H), 8,38 (d, J = 5,6, 1H), 7,64 (s, 2H).

Příklad 162

Příprava sloučeniny 12q

Směs bromidové sloučeniny 12p (17,1 mg, 0,047 mmol), bis(trifenylfosfin)palladiumchloridu (3,2 mg, 0,005 mmol), octanu sodného (22,5 mg) a methoxyethanolu (2 ml) se promývá oxidem uhelnatým a zahřívá na teplotu 150 °C po dobu 2 h. Reakční směs se ochladí, zfiltruje vrstvou celitu s použitím methanolu (3 x 1 ml) a filtrát se odpaří na rotačním zařízení. Zbytek se trituruje vodou (3 x 10 ml), vysuší ve vakuu a purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií (30% směs acetonitril/voda s 0,1 % kyseliny trifluoroctové, 3,1 mg, 17 %).

HPLC (30% MeCN/H₂O w/0,1% TFA, 3,1 mg).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 13,77 (s, 1H), 11,41 (s, 1H), 10,18 (s, 1H), 9,66 (s, 1H), 8,88 (d, J = 5,6, 1H), 8,67 (d, J = 5,6, 1H), 8,21 (d, J = 7,5, 1H), 7,88 (d, J =

7,4, 2H), 4,44 (m, 2H), 3,65 (m, 2H), 3,34 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 390 (M+H)⁺.

Příklad 163

Příprava sloučeniny 12r

Ke směsi imidové sloučeniny 12q (20,1 mg, 0,052 mmol) v tetrahydrofuranu (2 ml) se přidá 2M roztok lithiumborohydridu v tetrahydrofuranu (200 μΐ). Po 2 h se reakce ukončí přídavkem methanolu a poté vody a dále 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (5 kapek). Směs se neutralizuje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje ethyl-acetátem. Organická vrstva se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří na rotačním zařízení. Zbytek se purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií (25% směs acetonitril/voda s 0,1 % kyseliny trifluoroctové, 2,0 mg, 10 %).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-dé) δ 13,18 (s, 1H), 10,39 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,60 (d, J = 5,6, 1H), 8,32 (d, J = 5,6, 1H), 7,97 (d, J = 7,5, 1H), 7,68 (d, J =

7,4, 2H), 6,44 (d, J = 6,5, 1H), 6,33 (d, J = 6,5, 1H), 4,30 (m, 2H), 3,51 (m, 2H), 3,16 (s, 3H). Hmotnostní spektrometrie MS m/e 392 (M+H)⁺.

Příklad 164

Příprava sloučeniny 12s

Směs bromidové sloučeniny 12p (21,2 mg, 0,058 mmol), bis(trifenylfosfin)palladiumchloridu (4,6 mg, 0,007 mmol), 2-(tributylstannyl)thiofenu (75 μΐ) a dimethylformamidu (2 ml) se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 20 h. Reakční směs se ochladí, zfiltruje vrstvou celitu, promyje dimethylformamidem (3 x 1 ml) a filtrát se odpaří na rotačním zařízení. Zbytek se trituruje etherem (3x3 ml) a pentanem (10x2 ml) a suší ve vakuu (8,1 mg, 38 %).

- 110CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 13,26 (s, 1H), 11,43 (s, 1H), 10,16 (s,

1H), 9,16 (s, 1H), 8,80 (d, J = 5,7, 1H), 8,47 (d, J = 5,7, 1H), 7,91 (d, J = 8,3, 1H), 7,78 (d, J =

8,3, 2H), 7,53 (d, J = 4,9, 1H), 7,48 (d, J = 3,0, 1H), 7,16 (app t, J = 4,2, 1H).

Příklad 165

Příprava sloučeniny 12t

Směs bromidové sloučeniny 12p (21,2 mg, 0,041 mmol), bis(trifenylfosfin)palladiumchloridu (4,6 mg, 0,007 mmol), 2-(tributylstannyl)-l-methylpyrrolu (55 μΐ) a dimethylformamidu (2 ml) se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 3 h. Reakční směs se ochladí, zfiltruje vrstvou celitu, promyje dimethylformamidem (3x1 ml) a filtrát se odpaří na rotačním zařízení. Zbytek se trituruje etherem (3x3 ml) a pentanem (10 x 2 m) a purifikuje chromatografií (silikagel, 7% methanol v dichlormethanu) (3,8 mg, 25 %).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 13,26 (s, 1H), 11,43 (s, 1H), 10,24 (s, 1H), 9,03 (s, 1H), 8,86 (d, 1H), 8,57 (d, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,71 (dd, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,24 (dd, 1H), 6,14 (dd, 1H), 3,75 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 367 (M+H)⁺.

Příklad 166

Příprava sloučeniny 12u

Směs bromidové sloučeniny 12p (21,2 mg, 0,058 mmol), bis(trifenylfosfin)palladiumchloridu (4,6 mg, 0,007 mmol), 2-(tributylstannyl)pyridinu (100 μΐ) a dimethylformamidu (2 ml) se zahřívá na teplotu 110 °C po dobu 12 h. Reakční směs se ochladí, zfiltruje vrstvou celitu, promyje dimethylformamidem (3x1 ml) a filtrát se odpaří na rotačním zařízení. Zbytek se purifikuje chromatografií (silikagel, 20% methanol v dichlormethanu), (1,8 mg, 8 %).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 13,18 (s, 1H), 11,20 (s, 1H), 10,01 (s, 1H), 9,13 (s, 1H), 8,65 (d, 1H), 8,46 (m, 2H), 8,33 (d, 1H), 7,83 (dd, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,66 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 365 (M+H)⁺.

Příklady 166a až 166d

Příprava sloučeniny 12v a 12y

Následující sloučeniny 12v až 12y se připraví způsobem podobným způsobu popsanému v příkladech 147 až 166.

- 111 CZ 305350 B6

Tabulka 16

Příklad	SIouč.	Hm. spektr, (m/e)

166a	12v	402 (M+H)
166b	12w	386 (M+H)
166c	12x	427 (M+H)
166d	12y	385 (M+H)

Příklad 166e

Údaje pro sloučeninu 12z

Sloučenina 12z se připraví způsobem podobným způsobu popsanému v příkladech 147 až 166.

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 13,4 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 10,2 (s, 1H),

9,1 (s, 1H), 8,86 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,54 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,83 - 7,67 (m, 2H), 7,66 (d, J = 15,8, 1H), 7,0 (m, 1H), 6,70 (d, J = 15,8 Hz, 1H).

Příklad 166f

Údaje pro sloučeninu 12aa

Sloučenina 12aa se připraví způsobem podobným způsobu popsanému v příkladech 147 až 166.

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-dé) δ 13,5 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 10,2 (s, 1H),

9,1 (s, 1H), 8,86 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,53 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,0 - 7,3 (m, 2H), 6,98 (m, 1H), 6,4 (d, J = 16,6 Hz, 1H).

Příklad 166g

Údaje pro sloučeninu 12ab

Sloučenina 12ab se připraví způsobem podobným způsobu popsanému v příkladech 147 až 166.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-dé) δ 13,3 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 10,2 (s, 1H),

9,1 (s, 1H), 8,85 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,54 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 10,1, 1H), 7,92 (d, J = 16,1, 1H), 7,84 - 7,80 (m, 2H), 7,65 (d, J = 8,0, 1H), 7,34 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 7,28 (m, 1H).

Příklad 166h

Údaje pro sloučeninu 12ac

Sloučenina 12ac se připraví způsobem podobným způsobu popsanému v příkladech 147 až 166.

- 112CZ 305350 B6

Nukleární magnetická rezonance ’H NMR (DMSO-d₆) δ 13,4 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 10,2 (s, 1H),

9,1 (s, 1H), 8,86 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,61 - 8,50 (m, 2H), 8,01 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 7,85 (d, J =

10,1, 1H), 7,80-7,25 (m, 5H).

Příklad 167

Příprava sloučeniny 13a

Ke směsi imidu 12a (28,5 mg, 0,10 mmol) v acetonu (7 ml) se přidá methyljodid (250 μΐ). Po míchání přes noc se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se vyjme methanolem (7 ml) a zpracuje natriumborohydridem (15,2 mg, 0,4 mmol). Po míchání přes noc se reakce ukončí přidáním 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (5 ml) a směs se zahřeje na teplotu 50 °C. Neutralizuje se vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, extrahuje ethyl-acetátem, promyje postupně vodou a nasyceným roztokem kuchyňské soli a vysuší se síranem hořečnatým. Po filtraci se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se trituruje etherem (3x3 ml) a vysuší ve vakuu (14,9 mg, 49 %).

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 11,84 (s, 1H), 10,96 (s, 1H), 8,74 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,49 (app. t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,25 (app t, J = 7,3 Hz, 1H), 3,95 (s, 2H), 3,25 - 3,00 (m, 2H), 2,85 - 2,65 (m, 2H), 2,41 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 306 (M+H)⁺.

Příklad 168

Příprava sloučeniny 13b

Ke směsi imidu 12a (28,5 mg, 0,10 mmol) v acetonu (7 ml) se přidá benzylbromid (300 μΐ). Po míchání přes noc se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se vyjme methanolem (7 ml) a zpracuje natriumborohydridem (15,2 mg, 0,4 mmol). Po míchání přes noc se reakce ukončí přidáním 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (5 ml) a směs se zahřeje na teplotu 50 °C. Neutralizuje se vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, extrahuje ethyl-acetátem, promyje postupně vodou a nasyceným roztokem kuchyňské soli a vysuší se síranem hořečnatým. Po filtraci se rozpouštědlo odpaří na rotačním zařízení a zbytek se purifikuje preparativní vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií (45% směs acetonitril/voda s 0,1 % kyseliny trifluoroctové, 6,5 mg, 17%).

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-dé) δ 11,87 (s, 1H), 10,93 (s, 1H), 8,74 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,60 - 7,20 (řada m, J = 7,8 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,60 - 7,20 (řada m, 8H), 4,05 (s, 2H), 3,74 (s, 2H), 3,44 - 3,10 (m, 2H), 2,85 - 2,65 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 382 (M+H)⁺.

Příklad 169

Příprava sloučeniny 14

Benzofuran se zpracuje butyllithiem v etheru a poté cyklopentanonem. Výsledný alkohol se dehydratuje kyselinou toluensulfonovou v toluenu s obdržením 2-cyklopenten-l-ylbenzofuranu. Zpracování maleinimidem poskytuje cykloadukt, který se aromatizuje zpracováním tetrachlorchinonem.

- 113 CZ 305350 Β6

Nukleární magnetická rezonance 'H NMR (DMSO-d₆) δ 11,29 (s, 1H), 8,60 (d, 1H), 7,82 (d,

1H), 7,66 (t, 1H), 7,52 (t, 1H), 3,23 (m, 4H), 2,30 (kvintet, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 276 (M-H)“.

Příklad 169a

Příprava sloučeniny 14a

Sloučenina 14a se připraví způsobem podobným způsobu popsanému v příkladu 62j s použitím 6-methoxy-2-(l-hydroxycyklopentyl)indolu s obdržením sloučeniny podle nadpisu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 305 (M-H)⁺.

Příklad 169b

Příprava sloučeniny 14b

Sloučenina 14b se připraví způsobem podobným způsobu popsanému v příkladu 62j s použitím

4-methoxy-2-(l-hydroxycyklopentyl)indolu s obdržením sloučeniny podle nadpisu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 305 (M-H)⁺.

Příklad 170

Příprava sloučeniny 15

Tato sloučenina se připraví z benzothiofenu způsobem, který se popisuje pro sloučeninu 14.

Nukleární magnetická rezonance *H NMR (DMSO-d₆) δ 11,36 (s, 1H), 9,60 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,63 (m, 2H), 3,11 (m, 4H), 2,31 (kvintet, 2H).

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 292 (M-H)⁺.

Příklady 170a až 170n

Příprava sloučenin 15a až 15n

Karbonátový meziprodukt

Sloučenina 2ao (0,55 g, 1,9 mmol) a bis(4-nitrofenyl)karbonát (1,4 g, 3,76 mmol) se promísí v zatavené reakční trubici a zahřívají na teplotu 140 °C po dobu 20 min. Tuhá látka se trituruje etherem a oddělí s obdržením 0,83 g produktu.

Hmotnostní spektrometrie MS m/e 456 (M-H).

Karbámáty

Směs aminu (0,09 mmol) a nitrofenylkarbonátového meziproduktu (0,18 mmol) v suchém tetrahydrofuranu (2 ml) se pod atmosférou dusíku zahřívá na teplotu 80 °C po dobu 6h. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se trituruje etherem a sbírá se produkt.

-114CZ 305350 B6

Tabulka 17

Příklad	Slouč.	Hm. spektr, (m/e)

170a	14a	404 (M-H)
170b	14b	417 (M-H)
170c	14c	392 (M-H)
170d	14d	442 (M-H)
170e	14e	459 (M-H)
170f	14f	425 (M-H)
170g	14g	439 (M-H)
170h	14h	453 (M-H)
1701	14Ϊ	425 (M-H)
170j	14j	402 (M-H)
170k	14k	404 (M-H)
1701	141	419 (M-H)
170m	14m	447 (M-H)
170n	14n	439 (M-H)

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Multicyklická karbazolová a karbazollaktamová sloučenina obecného vzorce IVa

Claims

15 ve kterém

A a B je každý nezávisle na sobě skupiny C(=O), CH(OR³), CH(SR³), CH₂, CHR³, CHR³CHR⁴, CR³R⁴ nebo C(=O)NR³, za předpokladu, že jak A, tak B nejsou oba skupiny C(=O),

- 115CZ 305350 B6

E a F, dohromady s atomy uhlíku, ke kterým jsou připojeny, tvoří substituovanou či nesubstituovanou C₄ až C₇ cykloalkylovou skupinu, kde tato substituovaná cykloalkylová skupina obsahuje alespoň jeden substituent J,

V je skupina N(R*), atom kyslíku nebo atom síry,

R¹ je atom vodíku, Q až C₆ alkylová skupina, CJ až C₆ alkylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J, formylová skupina, Ci až C₆ alkanoylová skupina, C] až C₆ alkanoylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J, Cj až C₆ alkylsulfonylová skupina, arylsulfonylová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny,

R² je atom vodíku, C| až C₆ alkylová skupina, Ci až C₆ alkylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J, formylová skupina, CJ až C₆ alkanoylová skupina, Ci až C₆ alkanoylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J, Ci až C₆ alkylsulfonylová skupina, arylsulfonylová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny,

R³ a R⁴ jsou každý nezávisle atom vodíku, C| až C₆ alkylová skupina, arylová skupina, C| až Ce alkylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J nebo arylová skupina obsahující alespoň jeden substituent J,

J je J³-(J²)_n—kde každé n a m je nezávisle 0 nebo 1,

J¹ a J² jsou každý nezávisle karbonylová skupina, C| až C₆ alkylkarbonylová skupina, arylkarbonylová skupina, karbonyloxyskupina, sulfonylová skupina, aminoskupina, Ci až C₆ alkylaminoskupina, C₂ až Ci₂ dialkylaminoskupina, amidová skupina, Ci až C₆ alkylamidová skupina, C₂ až C_[2 dialkylamidová skupina, Cj až C₆ alkyloxykarbonylaminoskupina, aryloxykarbonylaminoskupina, amidinová skupina, guanidinová skupina, atom kyslíku, atom síry, Ci až C₆ alkoxyskupina, aryloxyskupina, aryl- Ci až C₆ alkoxyskupina, Ci až C₆ alkylová skupina, C₃ až C₇ cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, sulfonylamidová skupina, Ci až C₆ alkylsulfonylamidová skupina, arylsulfonylamidová skupina, skupina aminokyseliny nebo chráněné aminokyseliny a

J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, Ci až C₆ alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, Ci až C₆ alkyloxykarbonylová skupina, skupina kyseliny fosfonové, Ci až Ce alkylová skupina, skupina CJ až Ce alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, aminokarbonyloxyskupina, heteroarylová skupina nebo heterocykloalkylová skupina a přičemž kterékoliv dvě přilehlé skupiny J mohou být spojeny za vytvoření skupiny -X-(CH₂)_pX-, kde Xje nezávisle atom kyslíku nebo skupina NH a p je 1 nebo 2, s tím, že „aryl“ znamená aromatický kruhový systém vybraný ze skupiny zahrnující fenylovou skupinu, naftylovou skupinu, anthracenylovou skupinu a fenanthrenylovou skupinu, „heteroaryl“ znamená aromatický kruhový systém vybraný ze skupiny, ve které je zahrnuta pyrrolylová skupina, pyridylová skupina, furylová skupina, 1,2,4-thiadiazolylová skupina, pyrimidylová skupina, thienylová skupina, thiofenylová skupina, isothiazolylová skupina, imidazolylová skupina, tetrazolylová skupina, pyrazinylová skupina, pyrimidylová skupina, chinolylová skupina, isochinolylová skupina, thiofenylová skupina, benzothienylová skupina, isobenzofurylová skupina, pyrazolylová skupina, indolylová skupina, purinylová skupina, karbazolylová skupina, benzimidazolylová skupina, isoxazolylová skupina a akridinylová skupina,

- 116CZ 305350 B6 „heterocykloalkyl“ znamená monocyklickou nasycenou nebo částečně nenasycenou skupinu, ve které je zahrnuta 2-pyrrolidinylová skupina, 3-pyrrolidinylová skupina, piperidinylová skupina, 2-tetrahydrofuranylová skupina, 3-tetrahydrofuranylová skupina, 2-tetrahydrothienylová skupina a 3-tetrahydrothienylová skupina, a „chránící skupina aminokyseliny“ pro aminoskupinu aminokyseliny je terc-butoxykarbonylová skupina nebo benzyloxykarbonylová skupina, pro karboxylovou skupinu aminokyseliny je alkyl— nebo aralkylester, přičemž alkylová část obsahuje vždy 1 až 6 atomů uhlíku, a pro alkoholovou skupinu aminokyseliny je alkyletherová, aralkyletherová nebo silyletherová skupina, přičemž alkylová část obsahuje vždy 1 až 6 atomů uhlíku, nebo její sůl.

2. Multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce IVa, ve kterém J³ je atom vodíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, thioskupina, kyanoskupina, skupina sulfonové kyseliny, karboxylová skupina, Či až C₆ alkylová skupina, aryloxykarbonylová skupina, Ci až C₆ alkyloxykarbonylová skupina, skupina fosfonové kyseliny, Ci až C₆ alkylová skupina, skupina C] až C₆ alkylesteru fosfonové kyseliny nebo arylesteru fosfonové kyseliny, přičemž „aiyl“ má stejný význam, jako je definován v nároku 1.

3. Multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce IVa, ve kterém V je N(R^!), skupiny E a F spolu s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří C₅ cykloalkylovou skupinu a A a B jsou nezávisle skupiny C(=O) nebo CH₂.

4. Multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce IVa ve kterém

B je skupina CO, J je atom vodíku, V je skupina vzorce NR¹ a E a F, dohromady s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří cyklopentylovou skupinu a A, R¹ a R² mají významy, které jsou uvedeny dále:

Čís. A R¹ R² It CH2 CH3 H lu CH2 (BOC)₂Lys H lv CH2 Lys H

přičemž BOC znamená terc-butoxykarbonylovou skupinu.

-117CZ 305350 B6

5. Multicyklická karbazolová nebo karbazollaktamová sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce IVa ve kterém

B je skupina CO, R² je atom vodíku, V je skupina vzorce NH a E a F, dohromady s atomy, ke kterým jsou připojeny, tvoří cyklopentylovou skupinu a A a J mají významy, které jsou uvedeny ío dále:

Čís. A J 2af ch₂ Cl 2ag ch₂ co₂h 2ah ch₂ C0₂CH₃ 2ai CH₂ CONHCH₂CH₂N(CH₃) ₂ 2a j ch₂ C0NHCH₂CH₂NC4H80 2 a k ch₂ CONC4H8O 2al ch₂ CON (CH₃)CH₂ (4-Pyr) 2am ch₂ CON(CH₃)CH₂CH₂ (1-imidazol) 2an ch₂ CON (CH₃)CH₂ (2-Pyr) 2ay CHOH H 2cf CHOH CH₂NHCHO 5a CH₂ H 5b CH₂ Br 5c CH₂ CN 5d ch₂ CH₂NH₂ 5e ch₂ ch₃ 5f ch₂ (BOC) ₂Lys-NHCH₂ 5g CH₂ Lys-NHCH₂

15 přičemž substituent J, s výjimkou významu atom vodíku, je vždy v poloze 3.

6. Multicyklická karbazolová a karbazollaktamová sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce IVa

- 118CZ 305350 B6 ve kterém

V je skupina vzorce NR¹ a A, Β, E, F, R¹ a R² mají významy, které jsou uvedeny dále:

Čís. A B E F J R¹ R² 5a CH2 CO (CH₂)₃ H H H 6h CH2 CO (ch₂)₃ H H CHO 6i CH2 co (CH₂)3 3-Br Lys H 6j CH2 co (CH₂) 3 3-CN Lys H 6n CO-NH CO-NH (CH₂) 3 H H H 11a CO CH2 (CHz) 3 H H H

7. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že obsahuje multicyklickou karbazolovou nebo karbazollaktamovou sloučeninu podle jakéhokoli z nároků 1 až 6, obecného vzorce IVa, a farmaceuticky přijatelný nosič.

8. Použití multicyklické karbazolové nebo karbazollaktamové sloučeniny vymezené v jakémkoli z nároků 1 až 6, obecného vzorce IVa, pro výrobu léčiva pro

e) potlačování tvorby krevních cév u savce,

g) léčení rakoviny u savce.