CZ297860B6 - Pouzití prekursoru pohlavního steroidu pro prípravu farmaceutického prostredku - Google Patents

Abstract

Pouzití alespon jednoho prekursoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloucenin premenovaných in vivo na kteroukoliv z predcházejících látek, pro prípravu farmaceutického prostredku, který je ve forme transdermálního nebo perkutánního krému, masti nebo roztoku, pricemz prekursor je prítomen v koncentraci alespon 7 % hmotnostních vztazeno k celkové hmotnosti prostredku, která je vhodná pro dosazení a udrzení hladiny sérav koncentraci 4 az 14 .mi.g na litr.

Description

Použití prekursoru pohlavního steroidu pro přípravu farmaceutického prostředku

Oblast techniky

Vynález se týká použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidu vybraného z dehydroepiandrosteronu (DHEA) a dehydroepiandrosteron sulfátu (DHEA-S) nebo sloučenin, jež jsou in vivo konvertovány buď na DHEA, nebo na DHEA-S, pro přípravu léčiva pro prevenci nebo léčbu vaginální atrofie, hypogonadismu, sníženého libida, osteoporosy, neschopnosti udržet moč. rakoviny vaječníků, rakoviny dělohy a menopauzy nebo antikoncepce u vnímavých teplokrevných živočichů včetně lidí. Léčivo pak může být ve formě gelů, roztoků, krémů, mazání a transdermálních náplastí.

Dosavadní stav techniky

Primární jsou unikátní tím, že mají nadledvinky secemulící velká množství prekursorového steroidu dehydroepiandrosteronu (DHEA) a zvláště dehydroepiandrosteron sulfátu (DHEA-S), jež jsou konvertovány v periferních tkáních na adrostendion (D4-dion) nebo androstendiol (D5-diol) a pak na účinné androgeny a estrogeny (Adams, Mol. Cell. Endocrinol. 41: 1-17, 1985; Labrie et al., v Important Advances in Oncology (ed.: de Vita S., Hellman S. a Rosenberg S. A.), J. B. Lippincott, Philadelphia PA, str. 193-200, 1985). DHEA-S, hlavní steroid přítomný v krvi jak mužů, tak žen, jev periferních tkáních konvertován na DHEA a D5-diol, a takto jev krvi udržován těsný vztah koncentrací těchto tří steroidů (Adams, Mol. Cell. Endocrinol, 41: 1-17, 1985). V závislosti na relativních aktivitách 17b-hydroxysteroid dehydrogenasy (17b-HSD), aromatasy a 5a-reduktasy budou DHEA nebo jeho deriváty preferenčně konvertovány na androgeny nebo na estrogeny.

Nízké sérové hodnoty DHEA a DHEA-S nalézané při narození přetrvávají do věku šesti let. Obyčejně se sérové hladiny těchto dvou steroidů zvýší během sedmého roku věku a zvyšování pokračuje do věku 16 let jak u chlapců, tak u dívek (Orentreich et al., J. Clin. Endocr. Metab. 59: 551-555, 1984). Další zvýšení je pak pozorováno u mužů, u nichž je typicky dosaženo nejvyšších hladin mezi 20 a 24 léty věku. U žen obyčejně nebývá po 16 létech další zvýšení. DHEA a EHA-s klesají se stárnutím jak u mužů, tak u žen (Vermeulen a Verdoreck, J. Steroid. Biochem. 7: 1-10, 1976; Vermeulen et al., J. Clin. Endocr. Metab. 54: 187-191, 1982). Vskutku ve věku 70 let jsou sérové hladiny DHEA—S u přibližně 20 % jejich vrcholových hodnot, zatímco ve věku 85 až 90 let klesají až o 95 % (Migeon et al., J. Clin. Endocr. Metab. 17: 1051-1062, 1957). Tento 70 až 95% pokles v tvorbě DHEA-A nadledvinkami během stárnutí má za následek dramatický pokles ve tvorbě androgenů a estrogenů v periferních cílových tkáních a tak i značný pokles biochemických a buněčných funkcí indukovaných pohlavními steroidy.

Navíc k poklesu tvorby DHES-S byl u mužů pozorován postupující pokles koncentrace testosteronu v chámovodech (Giusti et al., Exp. Gerontol. 10: 444-448, 1976; Zumoff et al., J. Clin. Endocr. Metab. 55: 534-538, 1982) ve vodě po 60-70 létech. Takováto data jsou však předmětem kontroverse (Nieschlag et al., J. Clin. Endocr. Metab. 55: 676-681, 1982). U postmenopauzálních žen jsou hladiny sérového testosteronu nižší než během reproduktivního života (Forest M. G., Fyziologické změny oběhových androgenů, v Androgens in Childhood (ed., Forest M. G.), Karger Basel, str. 104-129, 1989).

Kůže je důležitým místem tvorby pohlavních steroidů a o její funkce se ví, zeje pohlavními steroidy regulována. Pohlavní steroidy mohou působit přímo v kůži nebo mohou stimulovat sekreci růstového hormonu a prolaktinu předním lalokem hypofysy. O atrofii kůže je skutečné známo, že nastává při nedostatku růstového hormonu, pravděpodobně prostřednictvím sekundárního poklesu v sekreci insulinu podobného růstového faktoru (IGF-1). O hladinách sérového růstového hor

- 1 CZ 297860 B6 monu (GH) a insulinu podobného růstového faktoru (IGF-1) se ví, že se snižuje během stárnutí u mužů a u žen.

Koncentrace plasmatického DHEA-S byla navržena jako hodnota pro predikci osteoporosy (Nordin et al., J. Clin. Endocr. Metab. 60: 651-657, 1985; Deutsch et al., Int. J. Gynecol. Obstet. 25: 217-220, 1987). Sérový DHEA byl skutečně nalezen významně nižší u osteoporotických jedinců než u normálních (Nordin et al., J. Clin. Endocr. Metab. 60: 651-657, 1985). Nízký tkáňový A4-dion též pravděpodobně provází nízké hladiny DHEA-S. Protože A4-dion je prekursorem estronu, jenž je hlavním zdrojem estradiolu u postmenopauzálních žen (Marshall et al., Clin. Endocrinol. 9: 407, 1978), takovéto sekundární nízké hladiny estrogenů jsou pravděpodobně spojeny s osteoporosou (Nordin et al., Lancet 2: 277, 1981).

Jako jiný mechanismus, by mohly nízké sérové hladiny DHEA-S, mající za následek nízkou tvorbu androgenů v periferních tkáních, mít také za následek nízkou tvorbu kosti, což je jedna charakteristika postmenopauzální osteoporosy (Meunier et al., v Hispatological heterogenity of apparently idiopathic osteoporosis and treatment (ed.“ DeLuca H.F., Frost H.M. Jee W. S.S., Johnston Jr. C.C., Parfítt A.M., University Park Press, Baltimore, str. 293). Deutsch et al. (Int. J. Gynecol. Obstet. 25: 217-220, 1987) skutečně našli významnou korelaci mezi sérovými hladinami DHEA-S a androsteronu a osteoporosou u pozdně postmenopauzálních žen, zatímco nebyla nalezena žádná korelace mezi sérovými estrogeny a hustotou kosti, což napovědělo značný význam androgenů v postmenopauzální ztrátě kosti.

Studie na zvířatech ukázaly, že nedostatek androgenů vede k osteopenii, přičemž podávání testosteronu zvyšuje celkovou kvantitu kosti (Silverberg a Silverberg, 1971; viz Finkelstein et al., Ann. Int. Med. 106: 354-361, 1987). Orchiektomie u potkanů může způsobit osteoporosu detekovatelnou během 2 měsíců (Winks a Felts, Calcif. Tissue Res. 32: 77-82, 1980; Verhas etal., Calcif. Tissue Res. 39: 74-77, 1986).

Jak bylo zmíněno dříve, u osteoporosy byly nalezeny snížené hladiny nadledvinkových androgenů (Nordin et al., J. Clin. Endocr. Metab. 60: 651, 1985). Navíc, pro zvýšené androgeny u postmenopauzálních žen bylo prokázáno, že chrání proti urychlené ztrátě kosti (Deutsch et al., Int., J. Gynecol. Obstet. 25: 217-220, 1987; Aloia at al., Arch. Int. Med. 143: 1700-1704, 1983). V souladu s takovouto rolí androgenů jsou hladiny androgenových metabolitů v moči u postmenopauzální symptomatické menopauzy nižší než u odpovídajících kontrol a v plasmě osteoporotických pacientů se nalézá významný pokles konjugovaného dehydroepiandrosteronu (DHEA) (Hollo a Feher, Acta Med. Hung. 20: 133, 1964; Urist a Vincent, J. Clin. Orthop, 18: 199, 1961; Hollo et al., Acta Med. Hung. 27: 155, 1970). Bylo navrženo, že postmenopauzální osteoporosa vzniká jak z hypoestrogenismu, tak z hypoandrogenismu (Hollo etal., Lancet, 1357, 1976). Protože stárnutí (a osteoporosa) jsou provázeny poklesem v téměř nekonečném počtu parametrů a každá tkáň odpovídá jinak (včetně žádné odpovědi) v závislosti na přítomných steroidogenických enzymech, korelace mezi změnami DHEA hladin a ztrátou kosti nebylo možné činit před současnými přihlašovatelovy nálezy o zpracování DHEA kostními buňkami, jak jsou popsány níže.

Jako mechanismus výše proponované role jak estrogenů, tak androgenů v osteoporose, by mohla přítomnost estrogenových (Komm et al., Science 241: 81-84, 1988; Eriksen et al., Science 241: 84-86, 1988) jakož i androgenových (Colvard et al., Proč. Nati. Acad. Sci. 86: 854-857, 1989) receptorů na osteoblastech vysvětlovat zvýšenou resorpci kosti pozorovanou po depleci estrogenů a androgenů.

Zatímco u žen dochází k rychlé ztrátě kosti počínaje menopauzou, ztrátu kosti u mužů lze pozorovat při věku asi 65 let (Riggs et al, J. Clin. Invest. 67: 328-335, 1987). Významnější ztráta kosti se pozoruje u mužů při věku asi 80 let, s průvodním výskytem zlomeni kyčle, páteře a zápěstí. Několik studií ukazuje, že osteoporosa u mužů je klinickým projevem nedostatku

-2CZ 297860 B6 androgenů (Baran et al., Calcif. Tissue Res. 26: 103-106, 1978; Oděli a Swerdloff, West J. Med.

124: 446^475, 1976; Smith a Walker, Calcif. Tissue Res. 22 (Suppl.): 225-228, 1976).

Terapie postmenopauzálních žen nandrolonem zvýšila minerální oblast kortexu kosti (Clin. Orthop. 225: 273-277). U 50 % pacientek byly však zaznamenány vedlejší androgenní účinky. Tato data jsou předmětem zájmu, protože zatímco většina terapií je omezena na zastavení úbytku kosti, při použití anabolického steroidu nandrolonu bylo nalezeno zvýšení hmotnosti kosti. Podobná stimulace tvorby kosti androgeny byla proponována u hypogonadického muže (Baran et al., Calcif. Tissue Res. 26: 103-106, 1978).

Pokles sérových hladin DHEA-S a DHEA s věkem vedl k neodkryté možnosti, že nízké sérové hladiny DHEA-S a DHEA by mohly být spojeny s rakovinou prsu a s kardiovaskulárními chorobami. Rada studií skutečně ukazuje, že subnormální hladiny DHEA jsou spojeny s vysokým rizikem rakoviny prsu (Bulbrook et al., Lancet 2: 395-398, 1971; Rose et al., Eur. J. Cancer 13: 4347, 1977; Thijssen et al., J. Steroid Biochem. 6: 729-734, 1975; Wang et al., Eur. J. Cancer 10: 477—482, 1974; Gomes et al., C.R. Acad. Sci. Paris 306: 261-264, 1978; Brownsez et al., Eur. J. Cancer 8: 131-137, 1972). U žen s rakovinou prsu bylo nalezeno, že mají nízké urinámí hladiny androsteronu a etiocholanolonu, dvou metabolitů DHEA (Bulbrook et al., Lancet 2. 1238-1240, 1962; Cameron et al., Br. Med. J. 4: 768-771, 1970). Bulbrook et al. (Lancet 2: 1238-1240, 1962) pak ohlásily, že ženy s primárním operabilním karcinomem prsu mají urinámí hladiny 11deoxy-17-kerosteroidů (odvozených hlavně od DHEA-S a DHEA) nižší než normál, což napovídá, že nízká sekrece DHEA-S a DHEA by mohla předcházet vyvinutí rakoviny prsu.

Hlavní přístupy k léčbě už vyvinuté rakoviny prsu se pojí k inhibici účinku nebo tvorby estrogenů. Role estrogenů v podpoře růstu k estrogenům citlivého karcinomu prsu byla uznána (Lippman, Semin. Oncol. 10 (Suppl. 4): 11-19, 1983; Sledge a McGuire, Cancer Res. 38: 61-75, 1984; Witliff, Cancer 53: 630-643,1984; Poulin a Labrie, Cancer Res. 46: 4933-4937,1986).

DHEA (450 mg/kg, b.w., 3 krát týdně) výrazně oddálil objevení se tumoru mléčné žlázy u C3H myší, jež jsou geneticky šlechtěny k vývoji rakoviny mléčné žlázy (Schwartz, Cancer Res. 39: 1129-1132, 1979). Navíc bylo u mužů majících nízké hladiny sérového DHEA nalezeno, že mají zvýšené riziko vyvinutí rakoviny močového měchýře (Gordon et al., Cancer Res. 51. 1366-1369, 1991).

Současně podaná patentová US přihláška 07/785 890 podaná 4. listopadu 1991 se týká metody léčby rakoviny prsu a endometria u vnímavých teplokrevných živočichů, jež může zahrnovat inhibici ovariální hormonální sekrece chirurgickými prostředky (ovariektomií) nebo chemickými prostředky (použití agonisty LHRH, např. [D-Trp⁶, des-Gly-NH₂ ¹⁰]LHRH ethylamidu, nebo antagonisty) jako části kombinované léčby. Altiestrogeny, androgeny, progestiny, inhibitory tvorby pohlavních steroidů (zvláště 17p~hydroxysteroid dehydrogenasou nebo aromatasou katalyzované tvorby pohlavních hormonů), inhibitory sekrece prolaktinu, sekrece růstového hormonu a sekrece ACTH jsou rozebírány. Protějšek tohoto byl uveřejněn pod mezinárodním publikačním číslem WO 90/10462.

Současně podané patentové US přihlášky 07/724 532 a 07/900 817 podané 28. června 1991 resp. 24. června 1992 se týkají metody používající nízké dávky androgenních sloučenin k prevenci a léčbě rakoviny prsu, rakoviny endometria, osteoporosy a endometriotidy. Protějšek přihlášky 1992 byl uveřejněn jako WO 93/00070.

Novější in vitro studie popisují relativní antiproliferační účinky androgenu na růst k estrogenům citlivé linie buněk lidského karcinomu prsu ZR-75-1 (Poulin et all., „Androgens inhibit basal and estrogen-induced cell proliferation in the ZR-75-1 human breast cancer cell line“, Breast Cancer Res. Treatm. 12: 213-225, 1989). Jak je zmíněno výše, Poulin et al. (Breast Cancer Res. Treatm. 12: 213-225, 1989), nalezli, že růst buněčné linie lidského karcinomu prsu ZR-75-1 je inhibován androgeny, přičemž inhibiční účinek androgenů je aditivní k účinku antiestrogenů.

-3CZ 297860 B6

Inhibiční účinek androgenů na růst buněk lidského karcinomu prsu ZR-75-1 byl pozorován také in vivo v „nahých“ myších (Dauvois a Labrie, Cancer Res. 51: 3131-3135, 1991).

O DHEA bylo proponováno, že má prospěšné účinky u obesity, diabetů, aterosklerosy, chemicky indukované rakoviny prsu, kůže a tlustého střeva (prevence), autoimunních onemocnění, únavy, ztráty svalové hmoty, onemocnění vazivových tkání, stárnutí a dlouhověkosti (Orentreich et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 59: 551-555, 1984; Regelson, Ann. N.Y. Acad. Sci. 521: 260-273, 1988; Gordon et al., Adv. Enzyme Regul. 26: 355-383, 1987; Schwartz, Adv. Cancer Res. 51: 391—423, 1988; Barrett-Connor et al., New Engl. J. Med. 213: 1519-1524, 1986).

U starých Sprague-Dawley potkanů Schwartz (v Kent, Geriatrics 37: 157-160, 1982) pozoroval, že tělesná váha byla DHEA snížena z 600 na 550 g bez ovlivnění příjmu potravy. Schwartz (Cancer Res. 39: 1129-1132, 1979) pozoroval, že CH3 myši, jimž byl podáván DHEA (450 mg/kg, 3 krát týdně), nabyly významně nižší váhy a dožily se vyššího věku jako kontrolní zvířata, měly méně tělního tuku a byly aktivnější. Snížení tělesné váhy bylo dosaženo bez ztráty chuti k jídlu nebo omezení potravy. Navíc by DHEA mohl bránit přibývání váhy u zvířat chovaných tak, aby se stala obézními v dospělosti (v Kent, Geriatrics 37: 157-160, 1982).

DHEA ve stravě se ukázala být účinným antihyperglykemickým a antidiabetickým činidlem u myší s dědičným syndromem obesity - glukosové intolerance (Coleman et al, Diabetes 33: 2632, 1984).

DHEA snižoval výskyt antherosklerosy u cholesterolem krmených králíků (Gordon et al., J. Clin. Invest. 82: 712-720, 1988; Arab et al., Arteriosclerosis 9: 159-166, 1989). Navíc se o vysokých koncentracích DHEA-A uvádí, že chrání proti úmrtí na kardiovaskulární choroby u lidí (BarrettConnor et al., New Engl. J. Med. 315: 1519-1924, 1986). O hladinách DHEA a DHEA-S v oběhu bylo takto nalezeno, že jsou ve vztahu nepřímé úměry s mortalitou kardiovaskulárních chorob (Barrett-Connor et al., New Engl. J. Med. 315: 1519-1524, 1986) a že se snižují paralelně se sníženou imunitní kompetencí (Thoman a Weigle, Adv. Immunol. 46: 221-222, 1989). Jedna studie ukázala vztah nepřímé úměry mezi hladinami fetálního sérového DHEA-S a lipoproteinu nízké hustoty (LDL, low density lipoprotein) (Parker et al., Science 208: 512, 1980).

Účinek denního orálního podávání 1,6 g DHEA po 28 dní byl u normálních mužů zkoumán v testu s placebo kontrolou. Hladiny sérového DHEA byly ve skupině s podávaným DHEA zvýšeny

2.5 až 3,5 krát, zatímco celkový cholesterol a sérový LDL cholesterol byly sníženy o 7,1 % resp.

7.5 % (Nestler et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 66: 57-61, 1988). Pokles tělního tuku byl zjištěn u 4 z 5 mužů, jimž byl podáván DHEA, s průměrem 31 % poklesu v procentu tělního tuku bez změny celkové váhy, což napovídá odpovídající zvýšení svalové hmoty.

Drucker et al. (J. Clin. Endocrinol. Metab. 35, 48, 1972), Bustler et al. (Am. J. Obstet. Gynecol. 166, 1163, 1992 a Welle et al. (J. Clin. Endocrinol Metab. 71, 1259, 1990) také podávali lidem orálně DHEA.

Bylo nalezeno, že obesita se zlepšovala u A'⁷ mutantních myší (Yen et al., Lipids 12: 409-413, 1977) a u Zuckerových potkanů (Cleary a zisk, Fed. Proč. 42: 536, 1983). C3H myši na něž bylo působeno DHEA, měly mladší vzhled než kontroly (Schwartz, Cancer Res. 39: 1129-1132, 1979).

Mozkové koncentrace DHEA jsou 6,5 krát vyšší než odpovídající koncentrace v plasmě (Lacroix et al., J. Steroid Biochem. 28: 317-325, 1987). DHEA a DHEA-A zlepšují paměť u stárnoucích myší (Flood a Roberts, Brain Res. 448: 178-181,1988). Koncentrace sérového RHEA u pacientů s Alzheimerovou chorobou byly nalezeny v průměru o 48 % nižší než u kontrol odpovídajícího věku (Sunderland et al., Lancet ii: 570, 1989). Jak je zmíněno výše, pro DHEA podávaný chronicky ve stravě se u určitých zvířecích kmenů ukázal prodloužený věk dožití, s oddálením některých chorob.

-4CZ 297860 B6

Patent US 4 496 556 popisuje použití DHEA nebo jeho derivátů k ošetření suché pokožky místním podáváním. Popsán byl jen lokální účinek na mazové žlázy a žádný systémový účinek nebyl pozorován.

Patent US 4 542 129 popisuje místní prostředek k ošetření suché pokožky pacientů obsahující kombinaci DHEA nebo jeho derivátů, keratolytického činidla a nejedovatého, dermatologicky přijatelného nosiče.

Britský patent GB 1246639 popisuje přípravu esterů dehydroepiandrosteronu k použití jako činidla při léčbě post- a premenopauzy, tachykardie a bolestí hlavy.

Jedním problémem, jemuž musí čelit použití DHEA u lidí, je, že jsou potřebné vysoké dávky, zřejmě proto, že velký podíl této sloučeniny je degradován v játrech dříve, než dosáhne po orálním podání do krevního oběhu.

Je známo, že dodávací účinnost některých léků může být zlepšena použitím určitých farmakologicky neaktivních derivátů, než jsou in vivo enzymatickými nebo spontánními reakcemi transformovány na aktivní léčiva (viz obecně H. Bundgaard, Design and application of prodrugs.

V Atextbook of Drug Design and Development, Ed.: P. Krogsgaard-Larsen a H. Bundgaard. Harwood Academie Publishers GmfH, Chur, Švýcarsko, 1991, str. 113-191). Například Druzgala et al., J. Steroid Biochem. Molec. Biol. 38, 149-154, 1991, popisují proléčiva glukokortikoidů. Bodor et al. v patentové US přihlášce 4 213 978 a v publikaci německé patentové přihlášky DE 29 48 733 uveřejňují použití thiazolidinových derivátů progesteronu jako místního léčiva. Perkutánní absorpce proléčivových derivátů estrogenů aprogestinů je ohlášena Friendem D.R. v Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, sv. 7 (2), str. 149-186, 1990. Informace o perkutánní absorpci léčiv mohou být nalezeny též v Skin permeability (ed.: H. Schaefer, A. Zesch a G. Stuttgen), Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, 1982, str. 896.

V současnosti je léčba nízkými dávkami estrogenů standardním přístupem používaným u perimenopauzálních a postmenopauzálních žen k odstraňování vasomotorických symptomů, urogenitální atrofie, osteoporosy a jiných symptomů a známek spojených s menopauzou (pro přehled viz Edman C.D., Estrogen Replacement Therapy. V. The menopauze, Springer-Verlag, New York (ed.: H.J. Buchsbaum), str. 77-84, 1983). Podrobné informace o menopauze a její léčbě mohou být nalezeny v jiných kapitolách této knihy. Zřejmé je, že tyto přístupy omezené na estrogenovou substituční terapii, provázenou nebo neprovázenou použitím progestinů, nereprodukují rovnováhy mezi estrogeny a androgeny, jež nastávají přirozeně po transformaci DHEA na jeho aktivní metabolity v různých cílových orgánech.

Některé estery DHEA v posici 3 jsou již popsány v literatuře (Rivea et al., J. Org. Chem. 54:3161-4, 1989; Parish a Christrakom, Synth. Commun. 15: 393-9, 1985; rum. patent RO 66924B; Jarosz a Zamojski, Tetrahedron 38: 1453-6, 1982; Heublin et al., Z. Chem. 22: 178, 1982; německá patentová přihláška DE 2534911; Khaidem et al., Indián J. Chem. Séct. B, 27B: 850-1, 1988; Pettit et al., J. Org. Chem. 52: 3573-8, 1987; Hanson a Reese, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1: 647-649, 1985); evropská patentová přihláška 84-105749; Heublein et al., Acta Polym. 35: 673-7, 1984; Seevers et al., J. Med. Chem. 25: 1500-3, 1982; Yamashita a Kurosawa, Agric. Biol. Chem. 39: 2243-4, 1975; japonská patentová přihláška JP 50005372; Pohlmann et al., Mol. Cryst. Liquid Cryst. 13. 243=54, 1971.

Alkansulfonáty DHEA jsou popsány jako inhibitory glukoso—6-fosfát dehydrogenaové aktivity aPharm. Sci. 73: 1643-5, 1984.

Britská patentová přihláška GB 1246639 a jihoafrická patentová přihláška ZA 6806112 popisují esteiy DHEA k léčbě post- a premenopauzální tachykardie resp. bolestí hlavy a klimakterických potíží.

-5CZ 297860 B6

Leszczynski et al., v Biochem. Biophys. Acta 1014: 90-7, 1989; a v tomtéž časopise 1083: 18-28

1991, ohlásili esterifikaci DHEA krevní plasmou a Katz et al. v buněčné linii MCF-7, v J. Steroid Biochem. 26: 687-92, 1987.

Ethylkarbonát DHEA ohlásili Weisz a Agocs v Arch. Pharm. (Weinheim, něm.) 319: 952-3 1986.

Některé halogenoestery DHEA popsali Challis a Heap vJ. Chromatogr. 50: 228-238, 1970 a Pinelly aNair v J. Chromatogr. 43: 223-228,1969.

I když pro DHEA bylo proponováno zapojení do různých biologických funkcí, jak je rozebráno výše, farmaceutické použití DHEA jako terapeutického nebo profylaktického činidla zůstalo poměrně omezené. Jeho role v prevenci, omezení nebo dokonce ve zvratu postupu některých chorob nebyla dříve plně pochopena. Předkládaný vynález nyní uveřejňuje řadu nových farmaceutických použití DHEA a HEA-S (nebo sloučenin konvertabilních in vivo na kterýkoli z nich). Vynález rovněž poskytuje zlepšené metody podávání těchto činidel, jež mohou překonat nevýhody spojené např. s orálním podáváním.

Podstata vynálezu

Předmětem předkládaného vynálezu je použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek, pro přípravu farmaceutického prostředku ve formě transdermálního nebo perkutánního krému, masti nebo roztoku, obsahujícího nosič, ve kterém je prekursor rozpuštěn, přičemž prekursor je přítomen v koncentraci alespoň 7 % hmotnostních vztaženo k celkové hmotnosti prostředku, která je vhodná pro dosažení a udržení hladiny séra v koncentraci 4 až 13 pg na litr, přičemž nosič je kompatibilní s kůží nebo sliznici a dovoluje penetraci prekursoru skrz kůži nebo sliznici, a má dostatečnou viskozitu k udržení prekursoru na lokalizovaném místě kůže nebo sliznice bez unikání neb odpaření po dostatečnou dobu umožňující podstatnou penetraci prekursoru skrz lokalizované místo kůže nebo sliznice.

Dalším předmětem vynálezu je tedy možnost jednoduchého a účinného systémového dodávání prekursorů pohlavních steroidů jako jsou dehydroepiandrosteron, dehydroepiandrosteron sulfát a analoga, jež jsou in vivo v konvertování buď na DHEA, nebo na DHEA-S.

Dalším předmětem vynálezu je poskytnutí nových metod k prevenci nebo léčbě menopauzy, vaginální atrofíe, hypogonadismu, sníženého libida, osteporosy, úbytku tloušťky kůže a celularity (kožní atrofíe), neschopnosti udržet moč, rakoviny vaječníků a rakoviny dělohy.

Dalším předmětem vynálezu je poskytnutí souprav a farmaceutických prostředků k použití v souladu a vynálezem.

Dalším předmětem vynálezu je poskytnutí nových antikoncepčních metod.

Dalším předmětem vynálezu je poskytnutí nových pohlavních steroidů a jejich a farmaceutických prostředků.

V jednom ohledu vynález poskytuje způsob léčby menopauzy zahrnující podávání (pacientce, u níž je potřebná takováto léčba) účinného množství přinejmenším jednoho prekursoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin, jež jsou konvertabilní in vivo na kteroukoli z předešlých sloučenin, v kombinaci s účinným množstvím estrogenu nebo estrogenu nebo progestinu nebo obou.

-6CZ 297860 B6

V dalším ohledu vynález poskytuje způsob léčby vaginální atrofie, hypogonadismu, sníženého libida, úbytku tloušťky kůže a celularity, zahrnující podávání (pacientovi, u nějž je potřebná taková léčba) účinného množství přinejmenším jednoho prekursoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin konvertovaných in vivo na kteroukoli z předcházejících.

V dalším ohledu vynález poskytuje způsob prevence nebo léčby osteoporosy, zahrnující podávání (pacientovi, u nějž je potřebná takováto prevence nebo léčba) terapeuticky účinného množství prekursoru pohlavního steroidu, s nebo bez farmaceutického zřeďovadla nebo nosiče, ze skupiny sestávající z DHEA, DHEA-S a sloučenin, jež jsou konvertovány in vivo na kteroukoli z nich.

V dalším ohledu vynálezu poskytuje způsob prevence nebo léčby neschopnosti zadržovat moč, zahrnující podávání (pacientovi, u nějž je potřebná takováto prevence nebo léčba) terapeuticky účinného množství prekursoru pohlavního steroidu, s nebo bez farmaceutického zřeďovadla nebo nosiče, ze strany sestávající z DHEA, DHEA-A a sloučenin, jež jsou konvertovány in vivo na kteroukoli z nich.

V dalším ohledu vynálezu poskytuje způsob antikoncepce, zahrnující podávání (subjektu ženského pohlaví, u nějž je potřebná antikoncepce) účinného množství prekursoru pohlavního steroidu, s nebo bez farmaceutického zřeďovadla nebo nosiče ze strany sestávající z DHEA, DHEA-S a sloučenin, jež jsou konvertovány in vivo na kteroukoli z nich. Ve výhodných provedeních je dále spolu s tímto prekursorem podáván estrogen a/nebo progestin jako součást kombinované metody antikoncepce.

V dalším ohledu vynález poskytuje farmaceutický prostředek prekursoru pohlavního steroidu ze strany sestávající z DHEA, DHEA-S a sloučenin, jež jsou konvertovány in vivo na kteroukoli z nich, a dodatkového činidla vybraného ze skupiny obsahující estrogen a progestin. V některých provedeních jsou zahrnuty společně estrogen a progestin. S výhodou je v někteiých provedeních přidáno též farmaceutické zřeďovadlo nebo nosič.

Je rovněž možné připravit v souladu s vynálezem soupravy, jež poskytují přinejmenším dvě oddělené nádobky, z nichž jedna obsahuje prekursor pohlavního steroidu a z nichž další obsahuje estrogen nebo progestin nebo oba. V některých provedeních mohou být poskytnuty tři oddělená nádobky, kde jedna má v sobě přinejmenším prekursor pohlavního steroidu, druhá má v sobě přinejmenším estrogen a další nádobka má v sobě přinejmenším progestin. Všechny indikace rozebrané zde jako vykazující odezvu na prekursory pohlavních steroidů (DHEA, DHEA-S a sloučeniny, jež jsou konvertovány in vivo na kterýkoli z nich), mohou, v určitých provedeních, dále vykazovat odezvu k podávání estrogenu a/nebo progestinu v kombinaci s tímto prekursorem (s výjimkou léčby u mužů, kde estrogen by mohl mít nevýhody). Takto soupravy a farmaceutické prostředky mají poskytovat kombinace předcházejících činidel vhodnou pro konkrétní vybranou indikaci, u které budou používány, a pro vybranou kombinovanou terapii.

V jiném provedení vynález poskytuje způsob prevence rakoviny vaječníků, zahrnující podávání, (pacientce, u níž je potřebná takováto prevence) terapeuticky účinného množství prekursoru pohlavního steroidu, s nebo bez farmaceutického zřeďovadla nebo nosiče, ze skupiny sestávající z DHEA, DHEA-S a sloučeniny, jež je konvertována in vivo na kterýkoliv z nich.

V jiném provedení vynález poskytuje způsob prevence rakoviny dělohy, zahrnující podávání (pacientce, u níž je potřebná takováto prevence) terapeuticky účinného množství prekursoru pohlavního steroidu, s nebo bez farmaceutického zřeďovadla nebo nosiče, ze skupiny sestávající z DHEA, DHEA-S a sloučeniny, jež je konvertována in vivo na kterýkoli z nich.

V jiném ohledu vynález poskytuje terapeutickou metodu k léčbě snížených nebo nevyrovnaných koncentrací pohlavních steroidů zahrnující aplikaci účinného množství farmaceutického prostřed

-7CZ 297860 B6 ku pro perkutánní nebo transmukosální dodávání na vnější povrch kůže nebo sliznice pacienta, u nějž je potřebná takováto léčba, přičemž ředěný farmaceutický prostředek, obsahuje nosič a má v nosiči rozpouštěn přinejmenším jeden prekursor pohlavního steroidu vybraný ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin konvertovaných in vivo na kteroukoli z předcházejících, řečený prekursor je přítomný v koncentraci přinejmenším 7 % hmotnosti, bráno na úplný farmaceutický prostředek, řečený nosič je kompatibilní s kůží nebo sliznicí a dovoluje průnik řečeného prekursoru kůží nebo sliznicí, řečený nosič má viskositu dostatečnou k udržení řečeného nosiče na lokalizované oblasti kůže nebo sliznice, bez toho, aby se pohnul nebo vypařil po časový úsek potřebný k tomu, aby umožnil podstatný pronik řečeného prekursoru řečenou lokalizovanou oblastí řečené kůže nebo sliznice. Tato předcházející metoda je užitečná u léčby a/nebo prevence stavů rozebíraných výše, menopauzálních symptomů a jiných stavů, jež vykazují odezvu na doplnění snížených hladin DHEA, a mezi něž patří, ale bez omezení, obesita, kardiovaskulární onemocnění, aterosklerosa, rakovina prsu, rakovina endometria, ztráta svalové hmoty, cukrovka, únava, onemocnění vazivových tkání a ztráta paměti.

V jiném ohledu vynález poskytuje farmaceutický prostředek pro perkutánní nebo transmukosální podávání řečeného farmaceutického prostředku obsahujícího nosič a majícího v nosiči rozpuštěný přinejmenším jeden prekursor pohlavního steroidu vybraný ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin konvertovaných in vivo na kteroukoli z předcházejících, přičemž řečený prekursor je přítomný v koncentraci přinejmenším 7 % hmotnosti, bráno na úplný farmaceutický prostředek, řečený nosič je kompatibilní s kůží nebo sliznicí a dovoluje průnik řečeného prekursoru kůží nebo sliznicí, řečený nosič má viskositu dostatečnou k udržení řečeného nosiče na lokalizované oblasti kůže nebo sliznice, bez toho, aby se pohnul nebo vypařil po časový úsek potřebný k tomu, aby umožnil podstatný průnik řečeného prekursoru řečenou lokalizovanou oblastí řečené kůže nebo sliznice.

V jiném ohledu vynález poskytuje nové sloučenina (a farmaceutické prostředky je obsahující) se vzorci uveřejňovanými níže s definicemi substituentů uveřejňovanými níže:

O

II kde Xje vybrán ze skupiny sestávající z H, ^R ~ C -, RCO2CHR^a- a R^bSO2R je vybrán ze skupiny sestávající z vodíkových, nevětvených a větvených alkylových, nevětvených a větvených alkenylových, nevětvených a větvených alkynylových, arylových, furylových, nevětvených a větvených alkoxylových, nevětvených a větvených alkenylových, nevětvených a větvených alkynylových, aryloxylových, furyloxylových a halogenových analog předešlého

R^a je vodík nebo (Ci-C₆)alkyl a

R^b je vybrán ze skupiny sestávající z hydroxylu (nebo jeho solí), methylu, fenylu a/Moluylu;

-8CZ 297860 B6 přičemž Y je divalentní, substituovaný nebo nesubstituovaný zbytek vzorce:

(Z je atom kyslíku nebo síry) a kde Y je uhlíkový atom, k němuž se váže, tvoří dohromady uzavřený nasycený 5-členný kruh.

kde R^c je vybrán ze skupiny sestávající z C₃-C₂₀ nevětvených a větvených alkylových, C₃-C₂₀ nevětvených a větvených alkenylových, C₃-C₂o nevětvených a větvených alkynylových, arylových a halogenem substituovaných analog předešlého.

kde R^d je vybrán ze skupiny sestávající z vodíkových, nevětvených a větvených alkylových, nevětvených a větvených alkenylových, nevětvených a větvených alkynylových, aiylových, furylových, nevětvených a větvených alkoxylových, nevětvených a větvených alkenyloxylových, nevětvených a větvených alkynyloxylových, aryloxylových, furyloxylových a halogenových analog předešlého

R^a je vodík nebo (Ci-C₆) alkyl.

COOR^e kde R³ je hydroxy nebo sulfát

-9CZ 297860 B6 kde R^e je vybrán ze skupiny sestávající z vodíku, benzylu, arylu, nevětveného nebo a větveného alkylu, nevětveného nebo větveného alkenylu a nevětveného nebo větveného alkynylu kde Z je kyslík nebo síra.

V jednom provedení je poskytnut způsob kompenzace značného poklesu v sekreci prekursorů pohlavních steroidů DHEA a DHEA-S nadledvinkami během stárnutí, jenž zahrnuje podávání DHEA, DHEA-S nebo analog konvertovaných na ně in vivo, jež kompenzují důsledky poklesu sekrece DHEA a DHEA-S stárnoucími nadledvinkami bez toho, že byl vykazovaly nežádoucí vedlejší účinky.

Má se za to, že metody podle vynálezu jsou vhodné jak pro profylaktické, tak pro léčebné použití. Sérové koncentrace, soupravy a prostředku zde rozebírané jsou stejně užitečné k oběma účelům.

V dalším ohledu vynález poskytuje transdermální přípravek obsahující:

(a) povrch adaptovaný ke kontaktu s lidskou kůží;

(b) prostředek k udržování řečeného povrchu na lokalizované oblasti kůže, na který je řečený přípravek aplikován;

(c) zásobní člen v tekutém kontaktu s řečeným povrchem, přičemž řečený člen obsahuje nosič a aktivní složku vybranou ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepinadrosteron sulfátu a analog, jež jsou konvertovány in vivo na kterýkoli z nich, a (d) prostředky k převodu farmaceutického prostředku z řečeného zásobního členu skrz řečený povrch a do kontaktu s řečenou lokalizovanou oblastí kůže.

Pro všechny indikace, kde je zde doporučován DHEA v souladu s předkládaným vynálezem se rozumí, že může být použit jakýkoliv prekursor pohlavního steroidů vybraný ze skupiny sestávající z DHEA, DHEA-A a sloučenin konvertovaných in vivo na kterýkoli z nich (např. prolékové formy DHEA nebo DHEA-A). Protože DHEA-S je přirozený prekursor DHEA, na místě DHEA může být použit DHEA-S (jakož i proléková forma DHEA a DHEA-S) u různých indikací rozebíraných zde pro použití DHEA. Výsledkem podávání těchto proléčiv nebo podávání DHEA-S jsou žádoucně zvýšené hladiny DHEA.

Přehled obrázků na výkresech

Obrázky 1 - 3 ukazují zvýšení hustoty kosti potkanů po devíti měsících působení DHEA (EM760). Obrázek 1 ukazuje celkovou kostní hmotnostní hustotu jak intaktních, tak ovariktomizovaných potkanů, na něž bylo 9 měsíců působeno DHEA proti kontrolní skupině potkanů bez tohoto působení. Obrázek 2 ukazuje totéž porovnání s měřením hmotnostní hustoty lumbální páteře a obrázek 3 ukazuje totéž porovnání s měřením hmotnostní hustoty stehenní kosti. V každém případě ovšem s výjimkou intaktní kontrolní skupiny, se měření provádělo devět měsíců po ovariktomii a/nebo perkutánním podávání DHEA. Tyto obrázky objasňují hodnotu předkládaného vynálezu při léčbě nebo prevenci osteporosy.

Obrázky 4 a 5 objasňují účinnost DHEA jako antikoncepčního prostředku nebo při léčbě a prevenci rakoviny vaječníků a dělohy. Obrázek 4 objasňuje snížení hmotnosti potkaních vaječníků dosažené po šesti měsících působení DHEA při perkutánním podávání dvakrát denně s dávkou 30 mg v 0,5 ml 50 % ethanolu-50 % propylenglykolu v oblasti dorsální páteře pokrývající asi její dva čtverečné centimetry. Obrázek 5 ilustruje histologii vaječníků intaktních kontrolních potkanů (Obr. 5A) a intaktních potkanů po působení DHEA dvakrát denně s dávkou U30 mg v roztoku

-10CZ 297860 B6 % ethanolu-50 % propylenglykolu aplikovaném na oblast 2 cm² dorsální kůže (Obr. 5B).

Obrázek 5B ukazuje výrazný pokles v počtu terciárních a sekundárních folikulů (F) a nepřítomnost corpora lutea (CL); intersticiální buňky (IC). Zvětšení x 250. Povšimni si atrofie intersticiální žlázy u potkanů s působením DHEA (obr. 5C) v porovnání s intaktními (Obr. 5D) při zvětšení x500.

Obrázek 6 ilustruje účinek jedno-, tří- a šestiměsíčního působení DHEA podávaného s dávkou 30 mg dvakrát denně v roztoku 50 % thanolu-50 % propylenglykolu aplikovaném v oblasti 2 cm² dorsální kůže na vaginální atrofii. Atrofické vaginální epithelium je ukázáno po jednom (obr. 6A), třech (Obr. 6B) a šesti měsících následujících po kastraci. Zvrat vaginální atrofie u potkanů, na něž se působilo DHEA, je ukázán v obrázcích 6D, 6E a 6F ilustrujících vaginální epithelium po působení 1, 3 resp. 6 měsíců. Zvětšení x 200. Takto je histopatologickou prohlídkou prokázána proliferace a murifikace vaginálního epithelia a zvrat vaginální atrofie u potkanů, v něž se působilo DHEA.

Obrázek 7 ukazuje histologii kůže potkaních samců po 3 až 6 měsících působení DHEA podávaného místní aplikací v oblasti 2 x 2 cm na dorsální kůže. Malá až mírná hypertrofie a hyperplasie mazových žláz v dorsální (b) a (c) jakož i ventrální (e) a (f) kůži intaktních potkanů po 3 měsících (b) a (E) a 6 měsících (c) a (f) působení je porovnána s intaktními kontrolami (a) a (d). Distence mazovodu (D).

Obrázek 8 ukazuje histologii kůže potkaních samců po 3 a 6 měsících působení DHEA podávaného místní aplikací v oblasti 2 x 2 cm na dorsální kůži. Malá až mírná hypertrofie a hyperplasie mazových žláz v dorsální (b) a (c) jakož i ventrální (e) a (f) kůži kastrovaných potkanů po 3 měsících (b) a (e) a 6 měsících (c) a (f) působení je porovnána s kastrovanými kontrolami (a) a (d). Povšimni si distence mazovodu (D) a zvýšeného počtu acinií (A) na vlasový folikul. Zvětšení x 100.

Obrázek 9. Účinek působení DHEA na dermis dorsální kůže (oblast místní aplikace DHEA) u potkaních kastrovaných samců po 3 (c) a 6 měsících (d) a (f). Kastrovaní potkani bez působení DHEA byli použiti jako kontroly (a), (b) a (e). Zvýšení tloušťky a celularity u potkanů, na něž se působilo DHEA (c), (d), a (f). a, b, c, d: zvětšení x 100 ; e, f: zvětšení x 500.

Obrázky 7 až 9 shora objasňují, že místní aplikace DHEA na dorsální kůži vede ke zvýšené tloušťce a celularitě dermis, což je účinek, jež by měl léčit kožní atrofii (stav vyznačující se mezi jiným ztrátou kolagenu vazivové tkáně) nebo jí zabraňovat. Účinek DHEA je viditelný též na rozměru mazových žláz, o němž se soudí, že je stimulován androgenními sloučeninami produkovanými z DHEA jako prekursoru.

Jak lze vidět v obr. 7 a 8, místní aplikace DHEA (30 mg v 50 % ethanolu-50 % propylenglykolu) po 3 nebo 6 měsíců na oblast 2x2 cm na dorsální kůži vede k malé až mírné hypertrofii a hyperplasii mazových žláz v oblastech jak dorsální, tak i ventrální kůže, což indikuje obecnější účinek tohoto působení na kůži. Tento účinek je pozorován jak u intaktních, tak u kastrovaných zvířat, zde značné atrofii následující po kastraci je plně zabráněno působením DHEA. Takovýto pokles v rozměru mazových žláz po kastraci může být srovnáván s atrofii nastávající během stárnutí.

Jak je ukázáno v obr. 9, účinek působení DHEA je provázen značným zvýšením tloušťky a celularity dermis jak u intaktních, tak u kastrovaných zvířat. Protože kolagen je důležitou složkou kožní dermis, současné údaje ukazují, že lze dosáhnout nápravy atrofie kůže, přinejmenším zčásti, zvýšenou tvorbou kolagenních tkání.

Pokud jde o účinnost DHEA jako antikoncepčního prostředku, místní podávání DHEA (30 mg) v 50 % ethanolu-50 % propylenglykolu dvakrát denně v oblasti 2 cm² dorsální kůže vede u intaktních potkanů k histopatologickým změnám, jež prokazují inhibici ovulace. Nejdůležitějšími pozorovanými změnami byly atrofie vaječníků (obr. 4) a histopatologické změny (Obr. 5)

-11 CZ 297860 B6 ukazují na absenci ovulačních cyklů. Výrazný byl pokles v počtu terciárních a sekundárních folikulů a nepřítomnost corpora lutea, což ukazuje na nepřítomnost ovulace. Tyto histopatologické známky nepřítomnosti ovulace jsou provázeny též zastavením cyklických histopatologických změn pozorovaných normálně v endometriu během estrového cyklu u potkanů. Tyto histopatologické změny ukazují, že působení DHEA vykazuje antikoncepční účinek.

Vynález je dále vysvětlován v následujícím neomezujícím popisu výhodných provedení.

Podrobný popis výhodných provedení

U vybraných pacientů, u nichž může být prospěšné zde popsané působení, lze sérové hladiny DHEA a jeho metabolitů měřit jak je popsáno v Belanger et al., v Steroid Formation, Degradation and Action in Peripheral, Normál and Neoplastic Tissues (ed.: H. Bradlow, L. Castagnetta, S. ďAquino a L. Gogliotti) Ann. N.Y. ACAD. sCI. 586: 93-100, 1990; Hanning et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 72: 1088, 1991. ViztéžLabrie et al., Endocrinology 123: 1412-1417, 1988. Sérové hladiny IGF-1 lze měřit jak je popsáno (Furlanetto et al., J. Clin. Invest. 60: 648, 1977).

V souladu s vynálezem, jakmile je stanoven nedostatek DHEA, je s výhodou podáván DHEA nebo jeho analoga v dávce dostatečné k zajištění nebo udržení sérových koncentrací DHEA mezi 4 a 10 mikrogramů na litr, zvláště mezi 4 a 7 mikrogramů na litr. U určitých indikací jsou žádoucí vyšší koncentrace, jak se rozebírá níže.

U některých výhodných provedení je sérová koncentrace mezi 5 a 7 nebo 6 a 7 mikrogramů na litr. Pro účel antikoncepce nebo prevence rakoviny vaječníků nebo dělohy je však výhodná koncentrace až do 13 mikrogramů na litr (např. mezi 7 a 13). Zde rozebírané výhodné dávky mohou být zvýšeny jak je vhodné pro dosažení těchto vyšších sérových koncentrací, např. s faktorem asi 30 % s variacemi pro odezvy jednotlivých pacientů, jak je sledována ošetřujícím klinickým lékařem. Pro DHEA podávaný výhodnou perkutánní nebo transmukosální technikou bylo zjištěno, že takto je DHEA absorbován do krve ke zvýšení sérových hladin velmi rychle. Například když se aplikuje krém Glaxal, obsahující základ Glaxal (dostupný z Glaxal Canada Limited) jako nosič a 10 % DHEA podle hmotnosti úplného prostředku, dvakrát denně na plochu 100 centimetrů čtverečných břišní oblasti v množství poskytujícím 100 mg aktivní složky (např. DHEA), je pravdě podobné, že odezvou typického pacienta bude zvýšení sérové koncentrace DHEA o 0,7 mikrogramu na litr na 50 kg tělesné váhy. Dodávaná dávka může být zvyšována nebo snižována známými způsoby pomocí změny místa, v kterém se mazání nebo mast aplikuje, změny velikosti plochy povrchu oblasti, kam se dává, změny koncentrace aktivní složky nebo změny nosiče. Například zvýšení povrchu oblasti bude normálně zvyšovat dávku dodané aktivní složky, když se zachová konstantní koncentrace aktivní složky. Stejně se dodaná dávka zvyšuje se zvyšující se koncentrací aktivní složky v podávacím základu, a snižuje se s klesající koncentrací. Dávka dodaná do krevního oběhu se také mění známým způsobem vzhledem k oblasti těla, kde se aplikuje na kůži systém k transdermálnímu průniku. Změna nosiče také mění dodávanou dávku známými cestami. S výhodou se sérová koncentrace DHEA měří, než se s působením začne, a zvolí se dávka, která rychle zvýší sérovou koncentraci DHEA k výhodnému cílovému rozsahu mezi 4 až 10 mikrogramů na litr nebo 7 až 13 mikrogramů na litr pro indikace s vyšším dávkováním, rozbírané výše. Následně je pacient sledován jak symptomatologicky, tak co do DHEA koncentrací, k ověření, že se dosáhlo žádoucí cílové koncentrace a zmírnění symptomů. Pak se DHEA udržuje v oběhu na konstantní koncentraci. Například pro typickou postmenopauzální pacientku je toto dávkování ekvivalentní aplikaci 400 mg aktivního prekursoru, jako součásti 10-ti procentního přípravku v Glaxalu, na 400 centimetrů čtverečních plochy břicha, dvakrát denně, na 50 kg tělesné váhy. Kdyby se zvolilo orální podávání, muselo by se podávat 800 mg dvakrát denně na 50 kg tělesné váhy.

V souladu s vynálezem se používají DHEA, DHEA-S nebo sloučeniny konvertované in vivo na kterýkoli z nich, k léčbě nebo prevenci menopauzálních symptomů, vaginální atrofie, atrofie kůže, hypogonadismu, sníženého libida, osteoporosy, neschopnosti zadržovat moč, rakoviny

- 12CZ 297860 B6 vaječníků nebo rakoviny dělohy. Navíc mohou být další stavy přidružené ke snížené sekreci DHEA nadledvinkami v průběhu stárnutí a vykazující odezvu na terapii DHEA léěeny účinněji pomocí transdermálně dodávaného DHEA, DHEA-S (nebo analog) v souladu s vynálezem. Stavy, u nichž se očekává odezva na takováto působení, lze diagnostikovat konvenčními způsoby. Například vznik rakoviny prsu je obyčejně zjištěn vlastní prohlídkou prsů, klinickou prohlídkou prsů nebo mapografíí. Rakovina endometria je na druhé straně obyčejně diagnostikována PAP výtěrem nebo odběrem endometriální tkáně. Oba druhy rakoviny mohou být diagnostikovány a hodnoceny standardními fyzikálními metodami dobře známými těm, co jsou zběhli v oboru, např. snímkováním kostí, hrudním rentgenovým vyšetřením, prohlídkou kostry, ultrazvukovým vyšetřením jater a snímkování jater (když je potřebné), tomografickým snímkováním, magnetickou resonancí a lékařskou prohlídkou.

Prvním projevem menopauzy jsou obvykle horká rudnutí. Další charakteristiky menopauzy mohou být stanoveny známými technikami. Viz například The Menopauze (ed.: Herbert J. Bauchsbaum), Springer Verlag, New York (1983). str. 222. Vaginální atrofie je často indikována dyspareunií a vaginálními infekcemi. Vaginální atrofie, hypogonadismus a snížené libido jsou vesměs charakterizovány dobře známými způsoby. K shora označeným chorobám viz, například, Stanley G. Korenman, „Sexual Dysfunctions“ ve Williams Textbook of Endocrinology (ed.: Jean D. Wilson a Daniel W. Foster), W. B. Saunders Co, Philadelphia, str. 1033-1048, 1992.

Hustota kosti může být na druhé straně měřena standardními metodami dobře známými těm, co jsou zběhlí v oboru, např. QDR (Quantitative Digital Radiography, kvantitativní číselnou radiografíí), duální fotonovou absorpciometrií a počítačovou tomografií. Užitečnými parametry tvorby a resorpce kosti jsou hladiny vápníku a fosfátů v plasmě a moči, alkalické fosfatasy v plasmě, koncentrace kalcitoninu a parathormonu, jakož i poměry hydroxyprolinu a vápníku/kreatinu v moči.

Ztráta kolagenu nebo vazivových tkání kůže často provází stárnutí, zvlášť u osob nad 50 let věku. Důkazem mohou být kožní vrásky nebo snížená pružnost kůže.

Osteoporosa neboli jinak nedostatečná hmota kosti a jiné nemoci léčitelné aktivací androgenového receptorů mohou být léčeny v souladu s předkládaným patentem nebojím může být profylakticky předcházeno v souladu s ním. Předkládaný patent může sloužit k prevenci rakoviny prsu, vaječníků a endometria.

Normální rozsah tělesné váhy je dobře znám těm, co jsou zběhlí v oboru, zatímco cholesterol a lipoproteiny jsou rutinně měřeny standardními technikami (Nestler et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 66: 57-61, 1988, jako odkaz).

Stav kůže může být zjištěn visuální prohlídkou, pohmatem a s větší přesností odběrem kousku a standardním histologickým vyšetřením.

Tradiční mechanismus antikoncepce pro ženy se v dosavadním stavu obou pojiv s podáváním estrogenu, jenž ve vyšších hladinách v oběhu snižoval sekreci LHRH z hypothalamu, což v důsledku snižovalo sekreci LH z hypofyzy. Výsledné snížení sekrece LH snižovalo funkci vaječníků, zvláště ovulaci. Přídavek progestinu řídil růst endometria měnil poševní a čípkovou sekreci k podmínkám nepříznivým pro kapacitaci spermií a plodnost.

V předkládaném vynálezu se používá DHEA místo estrogenu (i když estrogen se může též přidávat u určitých provedení rozebíraných níže). V souladu s vynálezem DHEA poskytuje estrogen pro antikoncepci, když současně a žádoucně poskytuje zvýšené hladiny androgenů, jež přispívají k antikoncepci, jelikož androgeny inhibují sekreci LHRH a LH. Tyto androgeny mohou, zvláště u žen v perimenopauze (jakož i u posmenopauzálních žen, kdy už antikoncepce není dále zapotřebí), zajišťovat velice potřebnou stimulaci tvorby kosti a odolnost ke ztrátě kosti. Estrogeny vytvářené z podávaného DHEA také přispívají ke snížené ztráty kosti. Jako u jiných použití zde

- 13 CZ 297860 B6 rozebíraných, použití DHEA místo pohlavního steroidu (zde estrogenu) odstraňuje vnější podávání poměrně vysokých dávek estrogenů a toto vylučuje přístup těchto estrogenů do každé tkáně, z nichž mnohá estrogeny nepotřebuje. Náhradou pomocí DHEA jsou místo tohoto estrogeny tvořeny přirozenými procesy v těch tkáních, které estrogeny a androgeny potřebují a které normálně přeměňují DHEA na estrogeny a androgeny. Relativní zastoupení estrogenů a androgenů v podstatě také zůstávají u každé konkrétní tkáně na přirozených hladinách.

Jako u jiných použití DHEA zde rozebíraných, náhradou DHEA nebo přídavkem kDHEA mohou být DHEA-A nebo pro-léčiva DHEA nebo DHEA-A. Protože funkce vaječníků je potlačena antikoncepční technikou zde popsanou, produkce estrogenu a progesteronu vaječníky je snížena. Proto je výhodné podávání progestinu (např. medroxygesteron-acetátu, megesteroacetátu, norethynodrelu, L-norgestrelu) k prevenci hypertrofie endometria jako část této antikoncepční metody. Přednost se dává androgenním progestinům. Progestiny se mohou podávat ve farmaceutickém prostředku, jež obsahuje DHEA, nebo zvlášť. U určitých provedení se progestiny mohou podávat přerušovaně každý měsíc po 12 až 14 dní, nebo 12 až 14 dní v některých měsících (např. každý 2. až 4. měsíc), nebo nepřetržitě. Dávkování progestinu může být v rozsahu používaném v dosavadním stavu oboru neboje s výhodou nižší, z důvodu vysvětlených níže.

Estrogeny mohou být také přidávány u antikoncepčního působení, protože produkce estrogenů ve vaječnících je snížena. V mnohých tkáních je však DHEA samotný přeměňován na estrogen a externí přidaný estrogen může být při výkonu předkládaného vynálezu minimalizován. Výhodné dávkování přidaného estrogenu při použití v této antikoncepční metodě je množství účinné při použití v té o antikoncepční metodě je množství účinné pro dosažení mezi 100 a 200 nanogramů estradiolu na litr nebo ekvivalentu. Poměr přidaného estradiolu k DHEA (w/w) se bude pohybovat od 1000 do 25 000, s výhodou 2000 až 15 000, zvláště 3000 až 12 000. Tak jak přidaný progestin přidaný estrogen se může podávat jako část farmaceutického prostředku, jenž obsahuje DHEA (nebo, když se používá, DHEA-S nebo pro-léčivo), nebo zvlášť. V určitých provedeních se jako součást kombinovaného působení podávají jak DHEA, tak progestin, tak estrogen, všechny dohromady nebo odděleně. Ke kombinovanému působení dochází vždy, když režim působení zvyšuje krevní hladiny těchto složek budou souběžné.

Používání kombinovaných antikoncepčních prostředků obsahujících estrogeny a progestiny se neukázalo snižovat riziko rakoviny prsu (Romiev et al., 1990, Cancer 66: 2253-63). Tato data jsou konsistentní se známým mitogenním účinkem jak estrogenu, tak progesteronu, na proliferací epithelových buněk prsu, což vysvětluje vrchol buněčné proliferace uprostřed luteální fáze (Masters et al., J. Nati. Cancer Inst. 1977, 58: 1263-1265; Anderson et al., 1982, Br. J. Cancer 46: 376-382). Skutečně, lychlost celkové proliferace buněk prsu u premenopauzálních žen používajících antikonceptiva se neliší od žen, jež je nepoužívají a mají normální cykly (Potter et al., 1988, r. J. Cancer 58: 163-170; Going et al., 1988, Am. J. Pathol. 130: 193-204).

Nedávno bylo objeveno, že DHEA se transformuje přednostně na androgeny v porovnání s transformací na estrogeny. Takto je v souladu s vynálezem používán jako antikoncepční prostředek tento prohormon místo současných pilulek, aby se žádoucně snížila proliferace buněk prsu. Androgeny skutečně vykazují inhibiční účinky na proliferací buněk prsu dvěma mechanismy, jmenovitě přímým inhibičním účinkem v buňkách prsu a inhibičním účinkem na sekreci gonadotropinu na hypothalamicko-hypofýsámí úrovni, s výsledkem poklesu činnosti vaječníků (tj. s menší sekrecí estrogenů a tedy s menším estrogeny indukovaným růstem buněk prsu).

Navíc k prospěšnému účinku na buňky prsu, DHEA-indukovaný pokles v sekreci gonadotropinu snižuje aktivitu vaječníků (obr. 4 a 5) a měl by tady bránit rakovině vaječníků jakož i rakovině dělohy. Zvýšená sekrece gonadotropinu, jež předchází menopauze, bude tedy vylepšena podáváním DHEA. V souladu s vynálezem může být proto DHEA používán preventivně proti vzniku rakoviny vaječníků nebo dělohy u pacientek s vysokým rizikem této rakoviny i tehdy, když antikoncepce není prvotním cílem.

- 14CZ 297860 B6

Antikonceptiva při dosavadního stavu v oboru dodávala významná množství estrogenů a progestinů. Současný přístup je však založen na tkáňově specifické tvorbě a účinku převažujících androgenů, syntetisovaných z DHEA. Skutečně, když jsou periferní tkáně exponovány prekursorovému steroidu DHEA, tyto tkáně tvoří v místě účinku převážně adrogeny, jakož i něco estrogenů, a rovnováha mezi těmito dvěma kategoriemi pohlavních steroidů je fyziologičtější. DHEA také blokuje sekreci gonadotropinu a tedy brání vaječník před hyperstimulací vysokými hladinami gonadotropinu, předcházejícími na provázejícími menopauzu. Vysoký podíl na inhibici sekrece gonadotropinu budou vykazovat přirozené androgeny odvozené z DHEA a takto se snižuje na minimum potřeba estrogenů a progestinů. Je to důležité, protože mnoho progestinů, včetně norethindronu a norethynodrelu má silnou estrogenní aktivitu (Poulin et al., Breast Cancer Res. Treatm. 13: 265-276, 1989).

Nyní bylo objeveno, že prekursorový steroid DHEA je přeměňován na androgeny (a estrogeny) v osteoblastech (buňkách tvorby kosti). Toto čištění vykazuje, že v souladu s vynálezem může nyní být při léčbě a prevenci osteoporosy používán DHEA místo androgenů a estrogenů. Androgeny vytvářené v kosti (konversí podávaného DHEA) stimulují tvorbu kosti a snižují ztrátu kosti, zatímco estrogeny vytvářené z podávaného DHEA také přispívají ke snížení ztráty kosti. Významné vedlejší účinky tradiční léčby androgeny jsou takto odstraněny. Například androgeny podávané externě podle dosavadní stavu v oboru zasahovaly do mnohých tkání, jež je ani neprodukují, ani nevyžadují, takto způsobovaly vedlejší účinky a porušovaly fysiologické rovnováhy pohlavních steroidů v těchto tikáních. Náhradou pomocí DHEA (nebo pro-léčiv nebo DHEA-S, když je to žádoucí v souladu s vynálezem je DHEA přeměňován na adrogeny jen přirozenými mechanismy v tkáních, ve kterých normálně přeměna probíhá podle jejich místních potřeb. Relativní poměr androgenů a estrogenů produkovaných z DHEA je v podstatě také normálním poměrem, místo abnormálně zvýšeného zastoupení jednoho typu pohlavního steroidu v případech, kdy se používá tento jeden typ samotný.

Ve výhodných provedeních se DHEA podává k prevenci nebo léčbě osteoporosy s dávkováním dostatečným k udržení sérových koncentrací v podstatě normálních pro mladé dospělé, přibližně až 10 mikrogramů na litr, nebo v některých provedeních 4 až 7 mikrogramů na litr, např. mezi a 7 nebo mezi 6 a 7 mikrogramů na litr. Toto jsou též žádoucí hladiny pro jiné, na DHEA odpovídající indikace, s výjimkou antikoncepce a prevence rakoviny vaječníku a dělohy, kde u některých provedení může být výhodné dávkování zvyšováno až na 13 mikrogramů na litr, jak je rozebíráno v souvislosti s těmito zvláštními indikacemi, aby se navíc inhibovala sekrece LH předním lalokem hypofysy.

V jednom výhodném provedení působení na menopauzu vyhledává tento vynález simultánní udržování krevních hladin estrogenů a prekursoru pohlavních steroidů (např. DHEA nebo DHEA-s) v rozmezí normálních premenopauzálních parametrů. Tělo přeměňuje DHEA-S na DHEA ve většině periferních tkání. Bez snahy vázat se na teorie má se za to, že udržování patřičných hladin prekursoru umožní přirozeným enzymům, jako jsou 17β-hydroxysteroid dehydrogenasa, 3fi-hydroxysteroid dehydrogenasa, aromatasa a 5oc-reduktasa, lépe regulovat tvorbu androgenů a estrogenů a udržovat je způsobem, jenž věrněji napodobuje jejich přirozené hladiny, převažující před menopauzou. Tento vynález uvažuje, že nejen estrogeny, ale i androgeny a prekursory budou udržovány v lepší rovnováze. Ve skutečnosti všechny cílové tkáně mají enzymovou mašinérii potřebnou k syntese androgenů a/nebo estrogenů podle místního řízení a potřeb (Labrie, Mol. Cell. Endocrinol. 78: Cl 13—C118, 1991).

Estrogen a prekursor (např. DHEA), když jsou podávány v souladu s vynálezem společně, mohou být podávány simultánně nebo odděleně. Druhá aktivní složka (prekursor) může být vskutku přidána k existující estrogenové léčbě, aby se dosáhlo kombinované terapie podle vynálezu.

Je potřebné jenom, aby jak estrogen, tak prekursor, byly podávány způsobem a s dávkováním postačujícím k tomu, aby koncentrace každého z nich v krevním séru mohla dosáhnout žádoucí hladiny. V souladu s kombinovanou terapií podle vynálezu se koncentrace prekursoru udržuje

- 15 CZ 297860 B6 v mezích nežádoucích parametrů a současně se udržuje v mezích žádoucích parametrů koncentrace estrogenu. Když se používá estradiol, sérová koncentrace estradiolu se typicky má udržovat mezi 50 a 300nanogramů na litr, s výhodou mezi 100 a 200 nanogramů na litr a nej výhodněji mezi 150 a 175 nanogramů na litr. Když se používá jiný estrogen, sérová koncentrace se může měnit známým způsobem, aby se vyhovělo rozdílu v estrogenní aktivitě v porovnání s estrodiolem a aby se dosahovalo normálních pre-menopauzálních hladin estrogenu. Menší koncentrace je například potřebná, když se použije Mestranol. Adekvátní hladiny sérového estrogenu mohou být též zjištěny podle vymizení symptomů menopauzy. Sérové koncentrace druhé sloučeniny (např. DHEA) jsou v kombinované terapii typicky udržovány mezi 4 a lOmikrogramů na litr, nebo v některých provedeních mezi 5 a 7 mikrogramů na litr, nebo mezi 6 a 7 mikrogramů na litr.

Estrogenem je s výhodou estradiol, ale může jím být estron sulfátu sodný nebo jiná sloučenina, která působí jako agonista estrogenového receptoru. Když se podávají odděleně, mohou se použít přídavky komerčně dostupných estrogenů, například PREMARIN dostupný od fy. Ayerst (St.-Laurent, Québec, Kanada). Jedním výhodným prekursorem je DHEA, i když DHEA-S a analoga rozebíraná níže jsou zvlášť účinná z důvodů uváděných níže. Když se používá DHEA, je jím například DHEA farmaceutické kvality, komerčně dostupný od fy SIGMA (St-Louis, Missouri, USA). Pro typické pacienty je dávkování estrogenu, patřičné pro dosažení žádoucích sérových koncentrací, mezi 0,3 a 2,5 mikrogramů PREMARINu na den na 50 kg tělesné váhy, když se podává orálně. U určitých provedení vynález může být estrogenem 17β—estradiol podávaný perkutánně v náplasti, která je dostupná od fý CIBA pod názvem ESTRADERM, přičemž denní dávka je mino 0,05 a 0,2 miligramů na den na 50 kg tělesné váhy. Pro typické pacienty je dávkování prekursoru pohlavního steroidu DHEA, patřičné pro dosažení žádoucích sérových koncentrací, mezi 0,25 a 2,5 gramů na den na 50 kg tělesné váhy, když se podává orálně. Jiné prekursory pohlavních steroidů budou podávány s dávkováním, které závisí na podílu jejich in vivo, konverse na DHEA. Prekursor může být také podáván transdermálně, jak je podrobněji popsáno níže, v množství dostačujícím pro dosažení cílové koncentrace v séru. Takovéto korelace jsou také podrobněji rozebírány níže.

V jiných provedeních se působí na menopauzu prekursorem, jak je uveřejněno výše, v kombinaci s periodickým podáváním progestinu, jako je medroxyprogesteron (např. Provera), jenž je s výhodou podáván přerušovaně, např. s dávkováním 2 až 10 mg denně po 12 posledních dní, s řečenými dvanáctidenními periodami oddělenými od sebe 20 dnů až 5 měsíců. Kombinovaná terapie používající prekursor, estrogen a progestin se může též používat, s výhodou s dávkováními rozebíranými zde u každé složky.

Prekursory pohlavních hormonů používané ve vynálezu mohou být orální cesty podávány s přidaným nosičem nebo bez něj, ale vyžadují přidaný nosič, když jsou podávány výhodnou perkutánní nebo transmukosální cestou. Ve farmaceutickém prostředku pro orální podávání je DHEA nebo jiný prekursor s výhodo přítomný v koncentraci mezi 5 a 98 % hmotnosti, bráno na celkovou hmotnost prostředku, výhodněji mezi 50 a 98 %, zvláště mezi 80 a 98 %. Když je přítomný estradiol jeho koncentrace je s výhodou 0,04 až 0,4 procent hmotnosti. Jeden prekursor, jako je DHEA, může být jedinou aktivní složkou, anebo se může používat více prekursorů nebo jejich analog (např. kombinace DHEA a DHEA—S, nebo kombinace dvou nebo více sloučenin přeměňovaných in vivo na DHEA nebo DHEA-A, nebo kombinace DHEA a jeho jednoho nebo více analog, jež jsou přeměňovány in vivo na DHEA, atd.). Když se používá některé kombinace, celkové dávkování všech prekursorů v souhrnu je stejné jako dávkování udávané výše pro DHEA používaný samostatně, s patřičnými úpravami pro rozdílné molekulové hmotnosti analog DHEA, jako jsou estery DHEA, a pro podíl jejich konverse na DHEA. Takto, když se používá ester DHEA místo DHEA, musí být dávkování zvýšeno s násobkem ekvivalentním podílu molekulární hmotnosti esteru DHEA k molekulární hmotnosti DHEA. Krevní hladina DHEA je konečným kritériem adekvátního dávkování, jež bere do úvahy individuální rozdíly v absorpci a metabolismu.

-16CZ 297860 B6

S výhodou, obzvláště na začátku léčby, bude ošetřující klinický lékař u jednotlivého pacienta sledovat celkovou odezvu a sérové hladiny jak estrogenu, tak DHEA (v porovnání s výhodnými koncentracemi rozebíranými výše) a sledovat celkovou pacientovu odezvu k léčbě s úpravami dávkování podle potřeb, pokud jsou pacientův metabolismus nebo odezva na léčbu atypické. Jedním přístupem by mohlo být začínat léčbu s DHEA nebo jeho analogem(gy) samotnými a přidat estrogen, jenom když zůstávají příliš nízké hladiny krevního estrogenu. Mnoho pacientů může být léčeno jen prekursorem podle vynálezu, bez přidaného estrogenu.

Léčba v souladu s vynálezem je vhodná k neomezenému pokračování. S výjimkou indikací s vyšším dávkováním, rozebíraných výše, se očekává, že působení DHEA bude jednoduše udržovat hladiny DHEA v rozmezí podobném rozmezí, jež nastává přirozeně u žen před menopauzou (sérové koncentrace mezi 4 a 10 mikrogramů na litr), nebo přirozeně u malých dospělých mužů (sérové koncentrace mezi 4 a 10 mikrogramů na litr). V souladu s tím, jsou očekávané nežádoucí vedlejší účinky prodlužovaného působení DHEA minimální nebo žádné. Vedlejším účinkům prodlužovaného použití estrogenu se lze úspěšně vyhnout cestami již známými v oboru, například přerušovaným (nebo v některých provedeních souvislým) podáváním protestinu (např. medroxyprogesteron acetátu) s denní orální dávkou 2 až 10 mg.

Pro lepší proveditelnost v ohledu kombinované terapie podle vynálezu, pro všechny zde rozebírané indikace, vynález zamýšlí farmaceutické prostředky, obsahující jak estrogen, tak, druhou aktivní sloučeninu (prekursor) v jednom prostředku pro současné podávání. Prostředek může být vhodný pro podávání kterýmkoli tradičním způsobem, včetně, ale bez omezení, orálního podávání, podkožních injekcí nebo nitrosvalových injekcí. Jiná provedení poskytují soupravy, přičemž souprava obsahuje estrogen a druhou sloučeninu (prekursor(y)) v oddělených nádobkách. Navíc k jiným druhům podávání, druhá sloučenina jakož i estrogen mohou být také podávány transdermálně v souladu s vynálezem, jak je to podrobněji rozebírá níže. Takto může souprava obsahovat patřičné materiály pro transdermální podávání, např. mazání, emulze, gely, krémy, náplasti s trvalým uvolňováním a podobně. Stejná strategie se týká progestinu. Jak je zmíněno výše, estrogeny se mají za nevýhodné u kombinovaných terapií mužských pacientů.

Bylo zjištěno, že podávání DHEA má uplatnění u léčby nebo prevence vaginální atrofíe, osteoporosy, atrofíe kůže, rakoviny dělohy, rakoviny pochvy, neschopnosti zadržovat moč, hypogonadismu a sníženého libida, a že zlepšuje celkovou rovnováhu oběhových pohlavních steroidů, včetně estrogenů a androgenů. Má se za to, že v dřívějším stavu techniky daného oboru nebylo dosud proponováno, že by tyto stavy odpovídaly na léčbu DHEA. Má se za to, že DHEA, DHEA-S nebo sloučeniny přeměňované in vivo na kterýkoli z nich mohou být užitečné k léčbě kterékoli z těchto poruch.

Metody stavu techniky zahrnovaly pro systémové podávání DHEA orální a injekční metodu. Protože léčení DHEA je často dlouhodobé nebo má neomezené trvání, opakované dodávání pomocí injekcí je velmi nepříjemné. Orální podávání se však ukázalo poměrně neúčinné, neboť orálně podávaný DHEA jde např. do jater, kde je místní degradací nebo velkému procentu zabráněn vstup do obecného oběhu.

Nedávno bylo pozorováno, že DHEA se velmi účinně systémově absorbuje jak u může resp. samců, tak u žen resp. samic, po aplikaci na kůži nebo sliznici (např. bukální, vaginální nebo rektální sliznici). Zjistilo se, že terapeuticky účinné dávky DHEA mohou být podávány perkutánní nebo transmukosální cestou, čímž se vyloučí počáteční průchod steroidů játry jako výsledek orálního podávání a dále se vyloučí diskomfort a nepříjemnosti podávání DHEA injekcemi.

V souladu s tím předkládaný vynález poskytuje dodávací systémy pro podávání DHEA, DHEA-S nebo analogických sloučenin, přeměňovaných in vivo na kterýkoli z nich, skrz kůži nebo sliznici. O těchto systémech se má za to, že jsou účinnější než orální podávání, protože se obcházejí játra. Tyto systémy jsou také významně méně bolestivé a příjemnější než injekce.

- 17CZ 297860 B6

Když jsou DHEA, DHEA-S nebo analogické sloučeniny, přeměňované in vivo na DHEA nebo DHEA-S formulovány pro transdermální průnik, použit může být kterýkoli z mnoha v oboru uznávaných transdermálních penetračních systémů. Například: DHEA může být připraven jako součást mazání, emulze, gelu nebo krému k natření na pacientovu kůži. Aktivní složka je s výhodou přítomna v koncentraci mezi 7 a 20 % hmotnosti, bráno na celkovou hmotnost farmaceutického prostředku, výhodněji mezi 8 a 12%. Alternativně může být aktivní složka umístěna v transdermální náplasti mající strukturu známou v oboru, například strukturu, jaká je publikována v patentu EP 0 279 982.

Pokud je formulována jako součást mazání, emulze, gelu nebo krému nebo podobně, aktivní sloučenina je smíchána s vhodným nosičem, jenž je kompatibilní s lidskou kůží nebo sliznici a dovoluje průnik této sloučeniny kůží nebo sliznici. Vhodné nosiče jsou v oboru známy a zahrnují, ale bez omezení základ Klucel HF a Glaxal. Některé jsou komerčně dostupné, např. základ. Glaxal, dostupný od Glaxal Canada Limited Company. Jiné vhodné vehikly lze nalézt v Koller a Buri, S.T.P. Pharma 3(2), 115-124, 1987. Nosičem je s výhodou takový nosič, v němž je (jsou) aktivní složka(y) rozpustné při teplotě místnosti v koncentraci, jež se pro aktivní složku používá. Nosič musí mít viskozitu dostatečnou k udržení prekursoru na lokalizované oblasti kůže nebo sliznice, na kterou byl prostředek aplikován, bez toho, aby se poznal nebo vypařil po časový úsek potřebný k tomu, aby umožnil podstatný průnik prekursoru skrz lokalizovanou oblast kůže nebo sliznice a do krevního oběhu, kde způsobí měřitelný a žádoucí vzrůst koncentrace sérového DHEA. Nosič je typicky směsí několika složek, např. farmaceuticky přijatelných rozpouštědel a zahušťovacích činidel. Směs organických a anorganických rozpouštědel, např. voda a alkohol, jako je ethanol, může sloužit hydrofilní a lipofilní rozpustnosti.

Je žádoucí, aby nosičem byl takový nosič, který bude, když je formulován jako 10 % DHEA a 90% nosiče (podle hmotnosti) a aplikován dvakrát denně v množství poskytujícím 100 mg DHEA na břišní oblast, zvyšovat u typického pacienta sérovou koncentraci DHEA přinejmenším o 0,35 mikrogramu na litr na 50 kg tělesné váhy. Jak je zmíněno výše, základ Glaxal, když se použije jako nosič za těchto podmínek, poskytuje zvýšení sérové koncentrace DHEA o asi 0,7 pg na litr na 50 kg tělesné váhy.

Nosič může také obsahovat různé přídavky běžně používané v mazáních a emulzích a dobře známé v kosmetických a lékařských oborech. Například mohou být přítomny vonné látky, antioxidanty, parfémy, gelační činidla, zahušťovadla jako je karboxymethylcelulosa, povrchově aktivní látky, stabilizátory, změkčovadla, barvicí činidla a jiná podobná činidla. Když se používá k léčbě systémových chorob, místo aplikace na kůži se má měnit, aby se předešlo nadbytečné místní koncentraci steroidů a nadměrné stimulaci může a mazových žláz androgenními metabolity DHEA.

Prekursor může být v některých případech podáván orální cestou a může být formulován s konvenčními farmaceutickými excipienty, například práškové sušenou laktosou a stearátem hořečnatým do tablet nebo kapslí pro orální podávání, v koncentracích poskytující lehce dávkování v rozmezí od 0,25 do 2,5 gramů na den na 50 kg tělesné váhy.

Aktivní látka může být zapracována do tablet nebo do jader dražé smícháním s pevnými, práškovitými nosičovými látkami, jako je citrát sodná, uhličitan vápenatý nebo hydrogenfosforečnan dvojvápenatý, vazebnými látkami jako jsou polyvinylpyrrolidon, želatina nebo deriváty celulosy s možností přidávat též lubrikanty jako jsou stearát hořečnatý, laurysulfát sodný, „Carbovax“ nebo polyethylenglykol. Samozřejmě se v případě forem pro orální podávání mohou přidávat látky zlepšující chuť.

Jako další formy lze použít uzavírací kapsle, např. z tvrdé želatiny, jakož i uzavřené kapsle obsahující změkčovač nebo plastifikátor, např. glycerin. Uzavírací kapsle s výhodou obsahující aktivní látku ve formě granulátu, např. ve směsi s plnidly, jako jsou laktosa, sacharosa, manitol, škroby (jako jsou bramborový škrob nebo amylopektin), deriváty celulosy nebo vysoce dispergovanou kyselinu křemičitou. V kapslích z měkké želatiny, je s výhodou aktivní látka rozpuštěna nebo

-18CZ 297860 B6 suspendována ve vhodných kapalinách, jako jsou rostlinné oleje nebo kapalné polyethylenglykoly·

Koncentrace aktivní složky v mazání, krému, gelu nebo emulzi je typicky od asi 7 do 20 procent, s výhodou od asi 8 do 12 procent a s výhodou 10 procent (podle hmotnosti, bráno na celkovou hmotnost emulze, krému, gelu nebo mazání). V rámci výhodných rozmezí vyšší koncentrace dovolují dosáhnout vhodného dávkování aplikací emulze, mazání gelu nebo krému na menší oblast povrchu kůže, než by bylo možné při nižších koncentracích, a dovolují větší volnost při výběru částí těla, na něž se bude mazání nebo emulze aplikovat. Například je v oboru dobře známo, že sloučenina, která je schopna transdermálního průniku normálně proniká účinněji v některých bodech těla než v jiných. Například průnik je velmi účinný na předloktích a značně méně účinný v dlaních.

Emulze, mazání, gel nebo krém se musí důkladně vetřít do kůže tak, aby nebyl přímo viditelný žádný přebytek, a kůže se nesmí v této oblasti umývat pokud nenastane většina transdermálního průniku, s výhodou přinejmenším 15 minut, výhodněji přinejmenším 30 minut.

Transdermální náplast se může používat k podávání prekursoru v souladu se známými technikami. Typicky se aplikuje na mnohem delší období, např. 1 až 4 dny, ale typicky dává aktivní složku do kontaktu s menší oblastí povrchu, čímž dovoluje pomalé a stálé dodávání aktivní složky.

Řada systémů pro transdermální podávání léčiv, jež byly vyvinuty a jež se používají, je vhodných pro dodávání aktivních složek podle předkládaného vynálezu. Rychlost uvolňování je typicky řízena difúzí z matrice nebo průnikem aktivní složky skrze řídicí membránu.

Mechanické aspekty transdermálních přípravků jsou v oboru dobře známo a jsou vysvětlovány např. v patentech US 5 162 037, US 5 154 922, US 5 135 480, US 4 624 665, US 3 742 951, US 3 797 444, US 4 568 343, US 5 064 654, US 5 071 644, US 5 071 657, jejichž uveřejnění je zde zaneseno odkazem. Další podklady poskytují evropský patent EP 0 279 982 a britská patentová přihláška GB 2185187.

Přípravek může patřit ke kterémukoli z obecných typů známých v oboru, včetně dodávaných přípravků typu přilnavé matrice a typu zásobníku. Přípravek může zahrnovat matrice obsahující léčivo včetně vláken, jež absorbují aktivní složku nebo nosič. U přípravků zásobníkového typu může být zásobník určen polymerovou membránou nepropustnou pro nosič a pro aktivní složku.

U transdermálních přípravků udržuje samotný přípravek aktivní složku v kontaktu s žádoucím lokalizovaným povrchem kůže. V takovémto přípravku je viskozita nosiče aktivní složky méně důležitá než v krému nebo gelu. Rozpouštědlový systém pro transdermální přípravek může zahrnovat například kyselinu oieovou, ester nevětveného alkoholu a kyseliny mléčné a dipropylenglykol, nebo jiné rozpouštědlové systémy známé v oboru. Aktivní složka může být v nosiči rozpouštěna nebo suspendována.

Pro upevnění ke kůži může transdermální náplast být přičiněna k chirurgické lepicí pásce, která má uprostřed vyraženou dírku. Lepivá část je s výhodou pokryta odstranitelným překrytím, jež ji chrání, dokud se nepoužije. Typické materiály vhodné k odstraňování zahrnují polyethylen a polyethylenem potažený papír, a s výhodou potažený silikonem pro lehké uvolňování. K aplikaci přípravku je odstranitelné překrytí jednoduše staženo a lepivá část upevněna ke kůži pacienta. V patentu US 5 135 480, jehož uveřejnění je zde zaneseno odkazem, Bannon et al. popisují alternativní přípravek, jenž má pro zajištění přípravku na kůži nelepivé prostředky.

S výjimkou indikací s vysokými dávkováními zmíněných výše (např. antikoncepce), cílové sérové koncentrace DHEA jsou srovnatelné, bez ohledu na to, zda se prekursor pohlavního steroidu používá jako součást kombinované terapie u léčby menopauzy, nebo zda se používá (samotný nebo v kombinované terapii s estrogenem a/nebo progestinem) k léčbě zhoršeného stavu kůže,

-19CZ 297860 B6 vaginální atrofie, neschopnosti zadržovat moč, rakoviny dělohy, rakoviny vaječníků, osteoporosy, hypogonadismu a sníženého libida v souladu s vynálezem, nebo k působení na řadu stavů, spojených se sníženou sekrecí DHEA nadledvinkami. Poznamenává se, že dávkování DHEA,

DHEA-S nebo jakéhokoli analoga, zde rozebíraného, lze korelovat s cílovou sérovou koncentrací

DHEA, protože všechny jsou in vivo konvertovány buď přímo, nebo nepřímo, na DHEA.

Systémy pro perkutánní nebo transmukosální podávání podle vynálezu mohou též být použity jako nové a zlepšené dodávací systémy u prevence nebo léčby osteoporosy a jiných chorob, jež mají příznivou odezvu na působení DHEA. Žádoucí cílové sérové hladiny pro tyto posledně jmenované účely jsou stejné jak je udáno výše.

DHEA používaný k perkutánní nebo transmukosální aplikaci může být ve formě volného alkoholu nebo jednoho nebo více jeho derivátů, např. valerátu, benzoátu, acetátu, enanthatu nebo derivátů, esterů mastných kyselin. Dodávání DHEA nebo jeho analog skrz kůži je přijatelnou, pohodlnou a neinvasivní cestou podávání takovéto sloučeniny. Předchází též gastrointestinálnímu podráždění a degradaci sloučeniny a toxikologických problémů spojených s počátečním průchodem játry před dosažením celkového oběhu.

Jednou metodou prevence a inhibice růstu karcinomů prsu a endometria je aktivní androgenového receptorů účinnou sloučeninou, jež má afinitu k receptorovému místu takovou, že se váže k androgenovému receptorů k nízkým koncentracím, přičemž významně neaktivuje jiné třídy steroidových receptorů, spojené s potenciálními vedlejšími účinky.

Protože DHEA je přirozeným zdrojem androgenů (Labrie, Mol Cell. Endocrinol. 78: Cl 13— Cl 18, 1991) a sekrece této sloučeniny se značně snižuje během stárnutí, jeho náhrada by měla mít minimální nežádoucí účinky.

Perkutánní a transmukosální dodávání DHEA v souladu s vynálezem tedy poskytuje nové způsoby prevence a léčby chorob, jež dávají odezvu na aktivaci androgenového receptorů, např. ztráty kosti, obesity, rakoviny prsu, rakoviny endometria, rakoviny vaječníků, neschopnosti zadržovat moč, hypogonadismu, ztráty libida, ztráty svalové hmoty, ztráty energie a jiných procesů stárnutí. Vynález je také vhodný pro mnoho chorob, u nichž bude aktivace estrogenového receptorů mít prospěšné účinky, zvláště osteoporosy a vaginální atrofie. Vynález také představuje zlepšenou metodu dodávání (např. transdermální) pro choroby, které již spadají do oboru a jsou kandidáty na léčení DHEA.

Příklady některých výhodných derivátů

Deriváty DHEA nebo DHEA-S, u nichž je očekávána in vivo konverze na DHEA nebo DHEA-S v souladu s předkládaným vynálezem, mohou být připravovány jedním z následujících přístupů:

- Esterifikací 3β funkce na ester, jenž může být štěpen esterasou (štěpení nevytváří toxické látky) a přeměnou 17-ketoskupiny na oxazolidiny a thiazolidiny, jež jsou v těle nestálé a regenerují přirozený prekursor.

- Tvorba α-acyloxyalkyetheru v pozici 3β, jenž může být štěpen esterasou na nestálý poloacetát. Rozklad tohoto poloacetalu regeneruje přirozený prekursor.

- Bez modifikace 3β funkce transformací 17-keto skupiny na oxazolidiny a thiazolidiny, jež jsou v těle neustálé a regenerují DHEA nebo DHEA-S.

U sloučenin uveřejněných níže je očekávána in vivo konverze na dehydroepiandrosteron (DHEA) nebo dehydroepiandrosteron sulfát DHEA-S.

-20CZ 297860 B6

COOR^e

I

kde R³ je hydroxy nebo sulfát, a kde R^e je vybrán ze skupiny sestávající z vodíku, benzylu, arylu, nevětveného nebo a větveného alkylu, nevětveného nebo větveného alkenylu a nevětveného nebo větveného alkynylu; a kde Z je kyslík nebo síra.

Některé deriváty DHEA, jež jsou lipofílnější než DHEA samotný, mohou být skladovány v kožním tuku a s výhodou uvolňovat DHEA pomalu v průběhu času.

V některých výhodných sloučeninách podle vynálezu je funkcí v posici 3 ester kyseliny sírové (nebo jejích solí), kyseliny mravenčí, kyseliny octové, kyseliny benzoové, kyseliny máselné, kyseliny děkanové, kyseliny enanthové, kyseliny furylové, kyseliny heptanové, kyseliny isokapronové, kyseliny undekanové, kyseliny undecylenové, kyseliny palmitové, kyseliny fenylpropionové, kyseliny pivalové, kyseliny propionové, kyseliny valerové, kyseliny uhličité (s výhodnou ethylkarbonát nebo benzylkarbonát).

V některých výhodných sloučeninách je DHEA (nebo DHEA-A) modifikován 17-substituentem následujícího vzorce nebo

H

kde R' je vybrán ze skupiny sestávající z vodíku, benzylu, nevětveného nebo větveného alkylu a nevětveného nebo větveného alkenylu.

-21 CZ 297860 B6

Některé výhodné 3p-esterové deriváty jsou v seznamu zde níže:

SLOUČENINY dehydroepiandrosteron-3/3-formiát dehydroepiandrosteron-30-acetát dehydroepiandrosteron-3/3-propionát dehydroepiandrosteron-3/3-butyrát dehydroepiandrosteron-3/3-valerát dehydroepiandrosteron-30-pivalát dehydroepiandrosteron-3(3-benzoát dehydroepiandrosteron-3/3-furoát dehydroepiandrosteron-3p-cypionát dehydroepiandrosteron-3jS-laktát dehydroepiandrosteron-30-dekanoát dehydroepiandrosteron-30-undekanoát dehydroepiandrosteron-30-palm:Ltát dehydroepiandrosteron-3p-ethylkarbonát dehydroepiandrosteron-3/3-benzylkarbonát dehydroepiandrosteron-3p-isokaproát dehydroepiandrosteron-3/3-undecylenát dehydroepiandrosteron-30-enantát dehydroepiandrosteron-3/3-fenylpropionát 3/3-hydroxymetoxy-5-androsten-17-on acetát 3/3-hydroxymetoxy-5-androsten-17-on dekanoát

HCO ch₃ CO ch₃ch₂co CH₃(CH₂)₂ ^co CH₃(CH₂)₃CO (CH₃)₃CCO c₅h₆co c₄h₃oco C₅H₉(CH₂)₂C0 ch₃chohco CH₃(CH₂)₈C0 ch₃(ch₂)₁₀co CH₃(CH₂)i₄C0 c₂h₅oco c₆h₅ch₂oco (CH₃)₂(CH₂)₃C0 H₂C=CH(CH₂)_bCO CH₃(CH₂)₅CO c₆h₅(ch₂)₂co ch₃co₂ch₂ CH₃(CH₂)₈CO₂CH₂

-22CZ 297860 B6

COOR’

Některé další výhodné deriváty DHEA jsou v seznamu zde níže:

SLOUČENINY	R'''	Z
3/3-hydroxy-5-androsten-17-spiro (l',3'- - thiazolidin-4'-ethyl karboxylát)	c2h5	s
3p-hydroxy-5-androsten-17-spiro(1',3 'thiazolidin-4'-benzyl karboxylát)	c6h5ch2	s
3)S-hydroxy-5-androsten-17-spiro( 1', 3 thiazolidin-4'-hexyl karboxylát)	C6H13	s
3/3-hydroxy-5-androsten-17-spiro( 1',3' - oxazolidin-4'-ethyl karboxylát)	C2H5	0
30-hydroxy-5-androsten-17-spiro(1',3'oxazolidin-4'-benzyl karboxylát)	WH2	0
3/3-hydroxy-5-androsten-17-spiro{ 1', 3'- oxazolidin-4'-hexyl karboxylát)	C6H13	0

Mohou být použita též příslušná 17-substituovaná analoga DHEA-S.

Příklady syntesy

Příklad 1 o 3 β-F ormyloxy-5-androsten-17-on

Postupem podle procedury popsané Ringoldem (Ringold et al., J. Am. Chem. Soc. 78, 816, 1956) dehydroepiandrosteron (2,88 g, 10 mmol) rozpuštěný v 85% kyselině mravenčí (100 ml) je zahříván na 60 °C po 1 h. Po ochlazení je směs nalita do ledově chladné vody a po 16 hodinách 15 jsou odfiltrovány krystaly a usušeny ve vakuu.

-23CZ 297860 B6

Příklad 2 [3-Acetoxy-5-androsten-l 7-on

Dehydroepiandrosteron (2,88 g, 10 mmol) je rozpouštěn ve směsi (100 ml) anhydridu kyseliny octové a pyridinu (1 : 1, objem/objem) a ponechán při teplotě místnosti po 16 h. Směs je pak opatrně nalita do ledově chladné vody a po 16 hodinách jsou odfiltrovány krystaly a vakuově vysušeny.

Příklad 3

Dehydroepiandrosten-3[3-undekanoát

Roztok undekanoylchloridu (10,2 g, 50 mmol) v CH2CI2 (50 ml) byl přidán ke směsi 5-androsten-3p-ol-17-onu (11,53 g, 40 mmol), Et₃N (14 ml, 100 mmol) a dimethylaminopyridinu (0,6 g, 5 mmol) v CH2CI2 (150 ml) při 5 °C. Po přidání byla směs míchána přes noc při teplotě místnosti. Vrstva CH₂C1₂ byla promyta postupně vodou, 2 N HC1 (dvakrát), 5 % K₂CO₃ (dvakrát), solným roztokem a vysušena. Odstranění rozpouštědla dalo surový produkt, jenž byl rekrystalován ze směsi «-hexan : benzen a poskytl čistý produkt (13,66 g; 75 %), t.t. 84 až 85 °C; ^lH-NMR (CDC13); Ó 0,83-0,86 (m, 6H, C]8-CH3 a CH3); 1,03 (s, 3H, C,9-CH3); 4,58-4,61 (m, 1H, C3-H); 5,37 (d, 1H, vinyl, J = 4,89 Hz). ¹³C-NMR (CDC13) δ: 220,90; 179,25; 139,99; 121,78; 73,38; 51,69; 50,14; 47,49, 38,12; 36,94; 36,72; 35,81; 34,68; 31,87; 31,47; 31,42; 30,76; 29,53; 29,44; 29,27; 29,23; 29,09; 27,73; 25,03; 22,66; 21,86; 20,31; 19,33; 14,09; 13,53.

Příklad 4

P-Acyloxy-5-androsten-l 7-on

Shora uvedené estery v posici 3β dehydroepiandrosteronu se připravují jak následuje:

Dehydroepiandrosteron (10 mmol) se rozpustí v pyridinu (50 ml) a přidá se k roztoku acylchloridu (připraveného z odpovídajícího oxalylchloridu) v témže rozpouštědle (50 ml). Pak se přidá dimethylaminopyridin (10 %) a směs se ponechá při pokojové teplotě po 16 h. Směs je pak opatrně nalita do ledově chladné vody a extrahována ethylacetátem. Organická fáze je pak promyta zředěno HC1, vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, a odpařena do sucha k získání esteru.

Příklad 5

P-Benzyloxykarbonyloxy-5-androsten-l 7-on

K míchanému roztoku dehydroepiandrosteronu (2,88 g, 10 mmol) v methylenchloridu (100 ml) je po kapkách v průběhu 30 min přidáván benzylchlormravenčan podle známé procedury (F. Reber a T. Reichstein, Helv. Chim. Acta 28, 1164, 1945). Po míchání po 3 h je směs promyta vodou a odpařena do sucha. Zbytek je pak rozpuštěn v acetonu a sražen v ledové chladné vodě. Po 16 hodinách jsou odfiltrovány krystaly a usušeny ve vakuu.

-24CZ 297860 B6

Příklad 6

P-Ethoxyoxykarbonyloxy-5-androsten-l 7-on

Stejný postup jaký je popsán v příkladu 5 stou výjimkou, že místo benzylchlormravenčanu se použije ethylchlormravenčan.

Příklad 7 (3-EIydroxy-5-androsten-l 7-spiro-2'-(l ',3thiazo 1 idin—4'-ethyl karboxylát)

Podle postupu popsaného Djerassim (C. Djerassi, N. Crossley a M. A. Kielczewski, J. Org. Chem. 27, 1112, 1962) je dehydroepiandrosteron (2,88 g, 10 mmol) rozpuštěn v bezvodém ethanolu, přidá se octan sodný a následně hydrochlorid L-cystein ethylesteru (18 g, 100 mmol), a směs se zahřívá přes noc pod argonovou atmosférou. Reakční směs je pak odpařena pod vakuem. Přidá se methylenchlorid kvysrážení přebytku hydrochloridu L-cystein ethylesteru. Roztok se pak přefiltruje a filtrát se promyje dvakrát vodou, vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a odpaří pod vakuem. Zbytek se pak rozetře s ethanolem k získání krystalů.

Příklad 8

3p-Hydroxy-5-androsten-l7-spiro-2'-(l',3'-thiazolidintol'-benzyl karboxylát)

Stejný postup jaký je pospán v příkladu 7 stou výjimkou, že místo hydrochloridu L-cystein ethylesteru se použije hydrochlorid L-cystein benzylesteru.

Příklad 9

P-Hydroxy-5-androsten-l 7-spiro-2'-( 1 ',3 '-thiazolidin-4'-alkyl karboxylát)

Stejný postup jaký je popsán v příkladu 7 s tou výjimkou, že místo hydrochloridu L-cystein ethylesteru se použije hydrochloridy jiných L-cystein alkylesterů (např. hydrochlorid L-cystein hexylesteru).

Příklad 10

3[3-Hydroxy-5-androsten-17-spiro-2'-(l',3'-oxazolidin-4'-ethyl karboxylát)

Stejný postup jaký je popsán v příkladu 7 s tou výjimkou, že oxazolidinový derivát je připravován s hydrochloridem serin ethylesteru místo hydrochloridu L-cystein ethylesteru.

Příklad 11

3|3-EIydroxy-5-androsten-17-spiro-2'-(l',3'-oxazolidÍn^l'-benzyl karboxylát)

Stejný postup jaký je popsán v příkladu 10 s tou výjimkou, že místo hydrochloridu serin ethylesteru se použije hydrochlorid serin benzylesteru.

-25CZ 297860 B6

Příklad 12

33-Hydroxy-5-androsten-l 7-spiro-2'-( 1 ',3'-oxazol idirM'-alkyl karboxylát)

Stejný postup jaký je popsán v příkladu 10 stou výjimkou, že místo hydrochloridu serin ethylesteru se použijí hydrochloridy jiných serin alkylesterů (např. hydrochlorid serin hexylesteru).

Příklad 13 p~Hydroxy-5-androsten-l 7-on acetát

K roztoku dehydroepiandrosteronu (2,88 g, 10 mmol) v THF (100 ml) je přidán hydrid sodný (11 mmol, 60 % v oleji) za teploty místnosti pod argonovou atmosférou. Když všechen hydrid sodný zreaguje, přidá se chlormethyl acetát (připravený z acetylchloridu a formaldehydu (nebo derivátu) s použitím ZnCl₂ jako katalyzátoru) a smě se zahřívá po několik hodin. Po ochlazení je směs nalita do vody a extrahována ethylacetátem. Organická fáze je pak promyta vodou, vysušena, přefiltrována a odpařena do sucha k získání žádané sloučeniny.

Příklady farmaceutických prostředků

V jednom ohledu předkládaný vynález zahrnuje aplikaci přípravků DHEA (nebo jeho analog) na kůži nebo jiné epitheliální tkáně po časový úsek potřebný ktomu, aby umožnil průnik této sloučeniny dostatečný k systémovému nebo místnímu účinku, jak je žádoucí. Prostředek může být aplikován jako gel, krém, mazání, emulze nebo podobně a může zahrnovat dodávací systém jak je popsán v patentech US 3 742 951, US 3 797 494 nebo US 4 568 343. Zařízení popsaná v patentech US 5 064 654, US 5 071 644 nebo US 5 071 657 mohou též být používány k ulehčení absorpce steroidu.

Všechny farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu mohou obsahovat patřičné konzervační látky známé v oboru.

Následující neomezující příklady popisují přípravu typických krémů, emulzí, gelů resp. mazání. Navíc k těmto vehiklům může ten, kdo je zběhlý v oboru, vybrat jiné vehikly pro přizpůsobení konkrétním dermatologickým potřebám.

Příklad 14

Typická emulze obsahuje (hmotn./hmotn.) 10 % DHEA, 15 % propylenglykolu a 70 % ethylenu a 5 % vody.

Příklad 15

Typický gel obsahuje (hmotn./hmotn.) 10 % DHEA, 5 % propylenglykolu, 0,2 % Carbomer 940 (dostupného jako Carbopol 940^R od fy. B.F. Goodrich), 40 % vody, 0,2% triethanolaminu, 2 % PPG-12-Buteh-16 (dostupného jako Ucon^R fluid 50 od fy Union Carbide), 1 % hydroxypropylu a 41,6 % ethanolu (95 % ethanol - 5 % voda).

Příklad 16

Typické mazání obsahuje (hmotn./hmotn.) 10% DHEA, 13 % propylenglykolu, 74% petrolatum, 2,9 % glycerylmonostearátu a 0,1 % polylparabenu.

-26CZ 297860 B6

Příklad 17

Typický krém obsahuje (hmotn./hmotn.) 10 % DHEA, 0,2 % propylparabenu, 5 % lanolinového oleje, 7,5 % sezamového oleje, 5 % cetylalkoholu, 2 % glycerylmonostearát, 1 % triethanolaminu, 5 % propylenglykolu, 0,1 % Carbomer 940^R a 64,2 % vody.

V každém z předcházejících příkladů 14-17 může být přidá progesti a/nebo estrogen. Například může být přidáno 0,005 až 0,02 % 17p-estrodiolu a/nebo 0,2 až 2 % medroxyprogesteron acetátu s odpovídajícími sníženími obsahu vody nebo ethanolu nebo petrolata. Permeabilita DHEA může být zvýšena různými technikami, aby se snížila používaná vádka. Způsoby a prostředky pro zvýšení permeability aktivních sloučenin mohou být nalezeny například v patentech US 5 051 260, US 4 006 218, US 3 551 554, US 3 472 931, US 4 568 343, US 3 989 816 a US 4 405 616.

I když předkládaný vynález byl popsán ve vztahu kjeho zvláštním provedením, mnohé jiné variace a modifikace a jiná použití se stanou zřejmými těm, co jsou zběhlí v oboru. Proto se dává přednost tomu, aby předkládaný vynález byl omezen ne svými konkrétními zveřejněními, ale pouze připojenými nároky.

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (15)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidů vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu vaginální atrofie, hypogonadismu, atrofie kůže, močové inkontinence, rakoviny vaječníků nebo rakoviny dělohy, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidů v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr nebo v případě prevence rakoviny vaječníků nebo dělohy byla mezi 7 až 14 pg na litr.
2. 2. Použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidů vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu vaginální atrofie, hypogonadismu, atrofie kůže, močové inkontinence, rakoviny vaječníků nebo rakoviny dělohy, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidů v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 7 pg na litr.
3. 3. Použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidů vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu vaginální antrofie, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidů v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr.
4. 4. Použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidů vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu hypogonadismu, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidů v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr.

   -27CZ 297860 B6
5. 5. Použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávajícího z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu atrofie kůže, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidu v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr.
6. 6. Použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu močové inkontinence, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidu v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr.
7. 7. Použití alespoň jednoho prekurzoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu rakoviny vaječníků, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidu v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 7 až 14 pg na litr.
8. 8. Použití alespoň jednoho prekurzoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a alespoň přeměňovaných in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu rakoviny dělohy, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidu v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 7 až 14 pg na litr.
9. 9. Použití prekurzoru pohlavního steroidu, kterým je dehydroepiandrosteron, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu vaginální atrofie, hypogonadismu, atrofie kůže, močové inkontinence, rakoviny vaječníků nebo rakoviny dělohy, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidu v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr nebo v případě prevence rakoviny vaječníků nebo dělohy byla mezi 7 až 14 pg na litr.
10. 10. Použití prekurzoru pohlavního steroidu, kterým je dehydroepiandrosteron sulfát, pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu vaginální atrofie, hypogonadismu, atrofie kůže, močové inkontinence, rakoviny vaječníků nebo rakoviny dělohy, přičemž se podá pacientovi prekursor pohlavního steroidu v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr nebo v případě prevence rakoviny vaječníků nebo dělohy byla mezi 7 až 14 pg na litr.
11. 11. Použití prekursoru pohlavního steroidu, kterým je dehydroepiandrosteron pro přípravu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu sníženého libida nebo osteoporózy, přičemž se podá pacientovi dehydroepinadrosteron v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr.
12. 12. Použití prekursoru pohlavního steroidu, kterým je dehydroepinadrosteron pro přípravu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu sníženého libida nebo osteoporózy, přičemž se podá pacientovi dehydroepinadrosteron v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 7 pg na litr.
13. 13. Použití prekursoru pohlavního steroidu, kterým je dehydroepiandrosteron pro přípravu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu sníženého libida, přičemž se podá pacientovi dehydroepiandrosteron v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr.

    -28CZ 297860 B6
14. 14. Použití prekursoru pohlavního steroidu, kterým je dehydroepiandrosteron pro přípravu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo léčbu osteoporózy, přičemž se podá pacientovi dehydroepiandrosteron v dávce, aby hladina séra dehydroepiandrosteronu v pacientovi byla mezi 4 až 10 pg na litr.
15. 15. Použití alespoň jednoho prekursoru pohlavního steroidu vybraného ze skupiny sestávající z dehydroepiandrosteronu, dehydroepiandrosteron sulfátu a sloučenin, které jsou přeměňované in vivo na kteroukoliv z předcházejících látek pro přípravu farmaceutického přípravku ve formě transdermální náplasti, přičemž transdermální náplast má prostředek pro připevnění k lidské kůži, io zásobník pro účinnou složku v nosiči a prostředek pro uvedení účinné složky v nosiči do kontaktu s kůží uživatele, pomocí něhož se získá a udrží hladina séra v rozmezí 4 až 13 pg na litr séra.