MXPA00011329A

MXPA00011329A - Composicion de dhea y metodo.

Info

Publication number: MXPA00011329A
Application number: MXPA00011329A
Authority: MX
Inventors: B Yonker Maxine
Original assignee: Genelabs Tech Inc
Priority date: 1999-03-18
Filing date: 2000-03-16
Publication date: 2002-04-17
Also published as: AU779138B2; IL139386A0; NO20005763L; CN101543500A; KR20010043716A; NO20005763D0; WO2000054763A2; CN1407897A; NO327981B1; BR0005392A; NZ507880A; JP2002539158A; CA2332767A1; EP2233141A1; IL139386A; WO2000054763A3; RU2220727C2; CN100544726C; EP1778246A2; ZA200006340B

Abstract

Se describen formulaciones farmaceuticas mejoradas que comprenden deshidroepiandrosterona (DHEA), enriquecidas con formas polimorficas seleccionadas para aplicaciones terapeuticas. En una modalidad, la formulacion comprende, en forma solida, DHEA, al menos 85% de la cual esta presente como un solo polimorfo seleccionado del polimorfo de la forma Ia del polimorfo de la forma II, y al menos un excipiente farmaceutico.Tambien se describen los metodos de fabricacion y uso de tales composiciones.

Description

COMPOSICIÓN DE DHEA Y MÉTODO Campo de la Invención La presente invención proporciona formulaciones farmacéuticas de DHEA enriquecidas con el polimorfo de la forma I o la forma II, los cuales son útiles para varias aplicaciones terapéuticas. En particular, la invención está dirigida a formulaciones de DHEA que tienen una biodisponibilidad más consistente que las formulaciones anteriormente utilizadas.

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Antecedentes de la Invención La deshidroepiandrosterona (DHEA) , también conocida como 3-beta-hidroxiandrost-5-en-17-ona, deshidroisoandrosterona, trans-deshidroandrosterona, ?5-androsten-3-ß-ol-17-ona, y prasterona, es un intermediario natural formado en el curso de la síntesis de varios esferoides del colesterol. La DHEA es la hormona esferoide más abundante en los humanos y es producida principalmente por la corteza adrenal como un éster de sulfato inactivo (DHEA-S) . La producción de DHEA también ocurre en los testículos, ovarios, y cerebro. Después de alcanzar un nivel estable durante la adultez inicial (edades de 16 a 24), la DHEA en suero total (DHEA + DHEA-S) declina uniformemente hasta aproximadamente el 5 a 10% de los valores pico en la edad de 60 a 70 (Orentreich et al . , 1984). La DHEA ha sido propuesta para utilizarse en el tratamiento de muchas condiciones médicas, tales como el lupus eritematoso sistémico (Patente Estadounidense No. 5,817,650), insuficiencia adrenal primaria (Patente Estadounidense No. 5,861,391), enfermedad de Addison (ibid), libido reducido (Patente Estadounidense No. 5,855,548), obesidad (Patente Estadounidense No. 5,846,962), osteoporosis (Patente Estadounidense No. 5,846,960 y 5,855,548) y fibromialgia (Patente Estadounidense No. 5,935,949). La DHEA puede ser administrada por varias rutas y es oralmente activa. La farmacocinética de la DHEA administrada exógenamente es complicada por la producción endógena de DHEA y por la interconversión reversible entre DHEA y DHEA-S, el metabolito principal de la DHEA, el cual actúa como un reservorio de DHEA. La DHEA exhibe amplias variaciones diurnas en la producción endógena, mientras que los niveles del DHEA-S muestran poca variación durante el día. Cambios de DHEA en plasma ocurren en paralelo en aquéllos de la ACTH y cortisol, con un máximo al inicio de la mañana, declinando los niveles durante el día, y una actividad secretora mínima en la parte inicial de la noche (van Cauter, 1990; Lacheline et al . ta 1979; Yen et al . , 1995) . Tanto la DHEA como la DHEA-S son unidas por la seroalbúmina, globulinas, y globulina de unión de la hormona sexual esteroidea (Meikle et al . , 1992; Longcope, 1995). Sólo una pequeña fracción de la DHEA administrada oralmente aparece en la sangre a cualquier tiempo dado como DHEA; la mayoría sufre conversión a DHEA-S por la sulfotransferasas en el hígado y tejidos extrahepáticos (Barker, 1994; Comer, 1992; Falany, 1995; Arlt, 1998) . La DHEA-S es convertida de nuevo a DHEA por tejidos periféricos que contiene DHEA sulfatasas, incluyendo los linfocitos y macrófagos. La DHEA es posteriormente metabolizada a androestendiona, así como los andrógenos potentes, testosterona y dihidrotestosterona, y los estrógenos, estrona y estradiol. El tejido adiposo puede servir como un reservorio sustancial para los adenógenos adrenales. Se piensa que la aromatización de la DHEA en tejido periférico contribuye a la mayoría de la biosíntesis estrogénica en las mujeres menopaúsicas (Grodin et al . , 1973). La biodisponibilidad de un fármaco puede jugar un papel importante en su eficacia. Se ha reportado que la DHEA se encuentra en al menos tres y hasta cinco formas polimórficas anhidras y al menos tres formas hidratadas, dependiendo de las condiciones y la forma de preparación (Chang et al . , 1995). Se ha reportado que las formas conocidas son distinguibles sobre la base de la espectrocopía infrarroja y el análisis de difracción de polvo, excepto que las formas S3 y S4 son indistinguibles utilizando el último método (ibid) . El trabajo conducido para apoyar la presente invención indica la existencia de una sexta forma de anhidrato designada aquí como la forma VI, la cual es detectable por RMN en estado sólido, pero no por espectroscopia infrarroja o análisis de difracción de polvo por rayos x.

Aunque la DHEA está disponible de una variedad de fuentes comerciales, esos materiales muestran una variación significativa en su composición polimórfica, lo cual puede causar variaciones en la biodisponibilidad debido a las diferencias de absorción durante el consumo in vivo. En consecuencia, un objeto de la presente invención es proporcionar formulaciones de DHEA enriquecidas con el polimorfo de la forma I o el poliformo de la forma II, para lograr una biodisponibilidad más consistente y una eficacia confiable. También se contemplaron las formulaciones enriquecidas con el polimorfo de la forma VI.

Descripción de la Invención La presente invención incluye, en un aspecto, una formulación farmacéutica que comprende deshidroepiandrosterona (DHEA) , al menos 85% de la cual está presente como polimorfo de la forma I, y al menos un excipiente farmacéutico. De manera preferible, al menos el 90% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma I, de manera más preferible el 95%, y de manera más preferible más del 99%. La invención también incluye una composición de materia que consiste, esencialmente del polimorfo de la forma I de la DHEA.

La invención también incluye, en una segunda modalidad general, una formulación farmacéutica que comprende DHEA, al menos 85% de la cual está presente como el polimorfo de la forma II y al menos un excipiente farmacéutico, de manera preferible, al menos el 90% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma II, de manera más preferible el 95%, y de manera más preferibles más de 99%. También se incluyen las formulaciones farmacéuticas que comprende DHEA, al menos 85% de la cual está presente como el polimorfo de la forma VI, y al menos un excipiente farmacéutico. De manera preferible, al menos el 90% de la DHEA está presente en el polimorfo de la forma VI, de manera más preferible 95%, y de manera más preferible más de 99%. La invención también incluye una composición de materia que consiste esencialmente del polimorfo de la forma VI de la DHEA. La invención también incluye un método para preparar una formulación de cápsula o tableta DHEA. En el método, se mezcla al menos un excipiente farmacéutico sólido con la DHEA, al menos 85% de la cual está presente como un solo polimorfo seleccionado de la forma I y la forma II, y la formulación sólida es colocada en un recipiente capsular adecuado para la liberación oral o comprimida para formar una tableta.

En otro aspecto, la invención incluye un método para administrar DHEA a un sujeto para obtener un resultado de alivio, donde la cantidad farmacéuticamente aceptable de DHEA es administrada de modo que al menos el 80% de la DHEA está presente como un solo polimorfo seleccionado de la forma I, la forma II y la forma VI, y preferiblemente seleccionado de las formas I y II. Esos métodos son útiles para tratar una variedad de condiciones médicas, tales como el lupus eritomatoso sistémico, pérdida de densidad ósea, osteoporosis, síndrome de fatiga crónica o fibromialgia, o en la terapia de reemplazo de DHEA. La invención también incluye un método para controlar la biodisponibilidad de la formulación de DHEA. En el método, se administra una cantidad terapéuticamente efectiva de una formulación de DHEA a un sujeto, donde la DHEA en la formulación consiste en la relación preseleccionada, conocida de polimorfos de DHEA. Las composiciones y métodos son útiles para lograr biodisponibilidades más uniformes en las formulaciones de DHEA que lo que se había logrado anteriormente, a la luz del descubrimiento del solicitante que la de la biodisponibilidad de la DHEA in vivo depende de la composición polimórfica de la DHEA.

Esos y otros objetos y características de la invención serán comprendidos mejor a la luz de la siguiente descripción.

Breve Descripción de los Dibujos Las Figuras 1 y 2 muestran las concentraciones en suero de la DHEA y DHEA-S ajustadas, básales, medias, respectivamente, en sujetos humanos hasta 72 horas después de recibir una sola dosis de DHEA (formulación 1, 2 ó 3, como se describe más adelante) que contienen diferentes proporciones de las formas I, II y VI de la DHEA; y Las Figuras 3 y 4 muestran las concentraciones de DHEA y DHEA-S en suero, ajustadas, básales, medias, respectivamente, en sujetos humanos en los días 7 a 10 de un estudio de dosis múltiples, comenzando a las 0.5 horas antes de la dosificación del día 7, utilizando formulaciones de DHEA, como se describe más adelante, que contienen una mezcla de las formas I, II y VI (formulación 3) o forma I pura (formulación 4).

Descripción Detallada de la Invención 1. Polimorfos de la DHEA La presente invención está dirigida a formulaciones farmacéuticas de DHEA que tienen biodisponibilidades y propiedades farmacocinéticas más consistentes que las preparaciones disponibles antes de la invención. En un aspecto, la invención está dirigida a composiciones farmacéuticas que comprende DHEA de modo que al menos el 85%, de manera preferible al menos el 90%, de manera más preferible al menos del 95% al 99% de la DHEA está presente en el polimorfo de la forma I. Tales composiciones exhiben buena absorción por el tracto GI tras la administración oral, muestran buena actividad terapéutica, y son altamente estables bajo condiciones ambientales . En otro aspecto, la invención está dirigida a una composición farmacéutica que comprende DHEA de modo que al menos el 85%, de manera preferible al menos el 90%, y de manera más preferible al menos del 95% a 99% de la DHEA está presente en el poliformo de la" forma II. Tales composiciones exhiben buena absorción por el tracto GI tras la administración oral, una velocidad de absorción rápida (mayor que la del polimorfo de la forma I) y buena actividad terapéutica, y también son estables bajo condiciones ambientales. Las composiciones así enriquecidas con la forma I o la forma II, como se describe aquí, proporcionan perfiles farmacocinéticos más predecibles que los proporcionados por las composiciones disponibles comercialmente que tienen composiciones polimórficas aleatorias. También se contemplaron las composiciones igualmente enriquecidas con la forma VI.

A. Preparación de los Polimorfos de la DHEA Se sabe que la DHEA, vía técnicas analíticas, tales como la difracción de rayos x, espectrocopía infrarroja (IR) y calorimetría de exploración diferencial (DSC) , se encuentra en varias formas cristalinas hidratadas y anhidratadas diferentes. Las formas anhidratadas incluyen las formas I, II, III IV y V, aunque las últimas dos formas han sido observadas únicamente de manera transitoria por DSC. Los anhidratos (solvatos) incluyen a las formas SI (1/4 hidrato) , S2 (monohidrato), S3 (monohidrato), S4 (1/2 metanolato) . La DHEA, y precursores tales como el acetato de DHEA, están comercialmente disponibles de varias fuentes (por ejemplo, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO; Aldrich Chemical Company, Inc.; Diosynth, Inc; Pfaltz & Bauer, Inc.; Schering AG) . Las composiciones de DHEA enriquecidas en polimorfos seleccionados pueden prepararse por cristalización de la DHEA comercial en solventes seleccionados bajo condiciones de enfriamiento o evaporación apropiadas. Aunque han sido reportadas condiciones por otros para preparar las formas estables por otros anteriormente mencionadas (Chang et al . , 1995), ha sido encontrado por los solicitantes de la presente que los métodos anteriormente preparados para preparar la forma I, incluyendo aquéllos descritos por Chang, dan productos que contiene un polimorfo adicional al que se designa aquí como la forma VI. En consecuencia, han sido desarrollados métodos mejorados descritos aquí para preparar la forma I pura para la exclusión de los otros polimorfos . En un método preferido, la forma I pura se prepara por (a) cristalización de DHEA de 2-propanol anhidro (o, de manera alternativa, acetona o acetonitrilo) bajo un flujo de nitrógeno a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 días, produciendo un precipitado cristalino que contiene predominantemente la forma I y alguna cantidad de la forma VI, seguida por (b) suspensión de precipitado en acetato de etilo (aproximadamente 100mL/30 g de DHEA) y agitando la suspensión resultante a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 semana, seguida por filtración. La torta de filtración se deja secar a temperatura ambiente durante la noche. El análisis 13C-RMNES (discutido más adelante) mostró que el producto preparado por este método consistió de la forma I pura o casi pura (>99%); no se detectaron otras formas por 13C-RMNES.

La DHEA altamente enriquecida con la forma II puede obtenerse por recristalización rápida de tetrahidrofurano (THF) , dioxano, cloroformo o mezclas de cloroformo y THF. El ejemplo I proporciona un procedimiento específico para la cristalización en THF, la cual produce un producto que la difracción de polvo por rayos x muestra en la forma II pura. Otros polimorfos pueden ser preparados como sigue. La forma III puede obtenerse por desolvatación de la forma S3 ó S4 a temperatura ambiente bajo vacío. La forma VI puede ser obtenida en forma pura o como una mezcla con la forma I, por cristalización de DHEA cruda (preparada por la saponificación del acetato de DHEA, como se describe en el Ejemplo 1, sin el paso de recritalización en metanol) de isopropanol, sin un paso de suspensión subsecuente. La forma SI puede ser obtenida por cristalización en cloruro de metileno bajo condiciones de humedad relativa del 50-60%, o triturando con metanol durante 30 minutos y secando en aire. La forma S2 puede ser preparada por cristalización en etanol a 40% o agua destilada, o por evaporación lenta en acetonitrilo, acetona, acetato de etilo, o THF. La forma S3 puede ser preparada reemplazando las moléculas de etanol de un semisolvato de metanol (forma S4) con agua bajo condiciones de una humedad relativa del 60%. La forma S4 (1/2 metanolato) puede ser obtenida enfriando una solución de metanol de DHEA. Los procedimientos adicionales para preparar los diferentes polimorfos pueden encontrarse en Chang et al . (1995) .

Caracterización de las Composiciones de DHEA Para preparar las composiciones DHEA que están enriquecidas con los polimorfos de DHEA seleccionados, de acuerdo con la invención, es importante poder determinar cuantitativamente el contenido del polimorfo de los materiales de DHEA para establecer el grado de enriquecimiento de polimorfo deseado en relación a otros polimorfos que puedan estar presentes. Puede ser utilizado cualquier método apropiado para este propósito, siempre que el método tenga un nivel de sensibilidad y exactitud suficiente para permitir la medición del contenido del polimorfo preferido principal dentro de ± 5%, y de manera preferible dentro de ± 2.5% o menos. Además, se apreciará que una técnica seleccionada para medir los polimorfos puede no ser capaz de medir todos los polimorfos posibles, o puede ser capaz de medir ciertos polimorfos individuales únicamente como una suma de dos o más polimorfos. Sin embargo, como se discute más adelante, para medir las formas I, II y VI, esas limitaciones no son una preocupación o pueden superarse combinando los resultados de métodos complementarios.

Bl . Difracción de Polvo por Rayos X La difracción de polvo por rayos X, el estándar industrial para determinar las formas polimórficas de sustancias cristalinas, puede ser utilizada para medir las cantidades relativas de las formas I + VI, II, III, SI, S2, S3 y S4. Sin embargo, esta técnica no es capaz de distinguir las formas I y VI, como lo muestra la resonancia magnética nuclear en estado sólido (véase más adelante) . En estudios conducidos para apoyar la presente invención, las muestras esencialmente homogéneas de las formas I, II, II, SI, S2, S3 y S4 de la DHEA fueron preparadas como se describió anteriormente. La forma VI fue estudiada como una mezcla 36:64 (VI: I) con la forma I. Se recolectaron los datos de difracción de polvo por rayos X, como se describe en la sección de materiales y métodos más adelante, para identificar los picos distintivos de cada polimorfo. Los patrones de difracción observados concordaron en general con las estructuras cristalinas reportadas anteriormente para las formas I, SI, S2 y S4 (Cox et al . , 1990, Caira et al . , 1995).

La Tabla 1 resume las distintas reflexiones encontradas para cada polimorfo. Las cantidades relativas de cada polimorfo en la muestra de DHEA pueden ser determinadas integrando las alturas de los picos o áreas de los picos de las reflexiones que son únicas a cada polimorfo de DHEA en la muestra, de acuerdo a los métodos de rayos X cuantitativos estándar, con integración de las áreas de los picos siendo generalmente preferida. Se encontró que los difractogramas de la muestra de forma I son los mismos que la mezcla de fórmula I/VI, indicando que la difracción por rayos X únicamente puede cuantificar sólo la suma de esos polimorfos. El nivel de una u otra forma debe ser medido independientemente por otra técnica, de manera preferible RMN en estado sólido, como se describe más adelante.

Tabla 1. Reflexiones Únicas de los Polimorfos Forma de la DHEA Picos Únicos I 15.0 (s), 16.8 (w) , 18.0 (m) , 18.7 (m) , 19.1 (w) , 19.3 (w) , 20.2 (w),24.8 (w) , 25.0 (w) , 25.2 (w) II 8.6 (w), 17.3 (w) , 20.9 (m) , 22.0 (w) , 22.2 (w), 27.1 (w) Tabla 1. Reflexiones Únicas de los Polimorfos (continuación) Forma de la DHEA Picos Únicos III 11.8, 12.0, 13.0, 14.8, 17.0, 24.6 SI 13.4, 25.8 S2 11.1, 12.4, 14.1, 19.2 S3 14.1, 14.8, 18.2, 25.0 S4 14.0, 14.5, 17.1 a Las posiciones de los picos se dan en grados 2?; s = fuerte, m = medio, w = débil.

Típicamente, el análisis DPRX puede ser simplificado inspeccionando visualmente el difractograma para determinar cuales polimorfos están presentes a niveles detectables, y limitando a continuación la integración a las reflexiones únicas correspondientes a aquellos polimorfos. üsualmente, para preparaciones anhidras, únicamente están presentes las formas I, II y/o VI, para la exclusión de los hidratos SI hasta S4. Los componentes polimórficos menores presentes a niveles de aproximadamente 5% pueden ser fácilmente cuantificados, con un límite inferior de detección de aproximadamente el 2%. Para medir el contenido polimórfico de la DHEA en formulaciones farmacéuticas que contienen materiales adicionales tales como excipientes farmacéuticos, pueden ser sustraídas las reflexiones que surjan de los materiales adicionales calculando un patrón de diferencia de los difractogramas de tales materiales adicionales en presencia y ausencia de DHEA.

B2. RMN en Estado Sólido (RMNES) La 13C-RMN en estado sólido también puede ser utilizada para detectar y cuantificar polimorfos o sustancias cristalinas y es una técnica más sensible que la DPRX. Sin embargo, puesto que es un procedimiento caro que consume tiempo, no se utiliza de manera rutinaria. En los estudios descritos aquí, la 13C-RMNES fue requerida para distinguir las formas I y VI de la DHEA, como se hizo notar anteriormente. Los picos de resonancia únicos que pueden ser utilizados para cuantificar los polimorfos I, II, VI y S1-S4 son proporcionados en la Tabla 2. En general, los diferentes polimorfos exhiben desviaciones de resonancia únicas en las regiones de 10-18 ppm (campo inferior) y 115-124 ppm (campo superior) (ppm en relación al adamantano) . Sin embargo, debido a que algunos de los picos se superponen en la región del campo inferior, la región del campo superior generalmente proporciona mejores resultados cuantitativos.

Tabla 2. Asignaciones de Picos 13CRMNES Pouchert, C.J., THE ALDRICH LIBRARY OF NMR SPECTRA, compuesto número 12, 578-4 (1983) .

BSe sabe que tiene 2 moléculas cristalográficamente independientes en la estructura.

Los picos de resonancia seleccionados pueden ser cuantificados por cualquier técnica de cuantificación conocida, tal como la técnica de ajuste de la curva descrita por MacDonald (1980) . Estudios en mezclas de las formas I y VI sobre un intervalo de diferentes concentraciones mostraron que las respuestas a los picos únicos para la forma VI son lineales, indicando que el método de integración es confiable para medir la proporción de la forma VI en una muestra en relación a otros polimorfos tales como la forma I. Estudios adicionales conducidos para apoyar la invención establecieron que existe una concordancia para las distribuciones de polimorfos por RMNES y difracción de rayos X.

B3. Espectroscopia Infrarroja La espectroscopia infrarroja proporciona otro método más para determinar el contenido de polimorfo de composiciones de DHEA. Los detalles de esta técnica pueden encontrarse en Chang et al . (1995). Sin embargo, al igual que la difracción de rayos x, parece ser que esta técnica no distingue la forma I de la forma VI.

C. Estabilidad de la Forma I y la Forma II de la DHEA Un estudio de esfuerzo de 14 días verificado por DPRX mostró que, a temperatura ambiente y 50 °C, ambas de las formas I y la forma II de la DHEA son estables a la conversión de la forma sólida durante dos semanas a humedades relativas (HR) tan altas como del 84%. Los datos de 14 días, dados en la Tabla 3, muestran que la forma I es estable durante dos semanas a 50 °C y una HR de 95%, la forma I se convirtió a S2; a 50 °C y una HR del 75% o mayor, la forma II se convierte parcialmente a SI. Se observó poca ganancia de peso (< 0.8%) en esas muestras. (Las pérdidas de peso observadas a 50 °C pudieron deberse a la pérdida de solvente residual, sublimación de la muestra, y/o degradación térmica) . Después de uno, dos, tres y seis meses ya sea a 25°C / HR del 58% o 40°C / HR del 75%, la forma I permaneció estable a la conversión de la forma sólida, como se muestra en la Tabla. En resumen, las formas I y II son ambas estables bajo condiciones ambientales y bajo calor y humedad no saturante; la forma I exhibe una estabilidad total mayor.

Tabla 3. Estabilidad de las Formas I y II de la DHEA Tabla 3. Estabilidad de las Formas I y II de la DHEA (a) no se determinó (b) la temperatura fue de 40 °C II . Formulación y Administración Las formulaciones que contienen las composiciones de DHEA de la invención pueden ser proporcionadas en varias formas de dosificación, tales como, tabletas, cápsulas, polvos, formulaciones de liberación controlada, suspensión, emulsiones, supositorios, cremas, ungüentos, lociones, o aerosoles, y se proporcionan preferiblemente en formas de dosificación sólidas adecuadas para una administración simple de las dosis precisas. Las composiciones típicamente incluyen un portador o excipiente farmacéutico convencional, y pueden adicionalmente incluir otros agentes, portadores, adyuvantes medicinales y similares. De manera preferible, la composición contendrá de aproximadamente 0.5% a 75% en peso, de manera más preferible de aproximadamente 5% hasta aproximadamente 25% en peso, de DHEA, con el resto consistiendo de excipientes farmacéuticos adecuados. Para la administración oral, tales excipientes pueden incluir los grados farmacéuticos de la lactosa, manitol, almidón, estearato de magnesio, sacarina sódica, talco, celulosa, glucosa, gelatina, sucrosa, carbonato de magnesio y similares . De manera conveniente, las formulaciones de la invención pueden ser administradas oralmente, por ejemplo, por medio de una cápsula o tableta, para la absorción rápida en el flujo sanguíneo y distribución a varios compartimientos del cuerpo. La cantidad y frecuencia de la administración variará, dependiendo del paciente y de la aplicación terapéutica como se describe de manera más detallada más adelante. En otro método, pueden administrarse formulaciones sólidas tales como un supositorio, por ejemplo, cuando la administración oral está contraindicada. Cuando la composición es empleada en forma de preparaciones sólidas para la administración oral, las preparaciones pueden ser tabletas, granulos, polvos, cápsulas o similares. Para la preparación de cápsulas liberables oralmente, la DHEA que tiene la composición polimórfica deseada se mezcla con al menos un excipiente farmacéutico, y la formulación sólida se coloca en un recipiente capsular adecuado para liberarse al tracto gastrointestinal. En las formas preferidas, al menos el 90%, de manera más preferible al menos el 95%, y de manera más preferible más del 99% de la DHEA está presente como un solo polimorfo seleccionado de la fórmula II, II o VI, de manera preferible la forma I o II, de manera más preferible la forma I. Para la preparación de tabletas liberables oralmente, la DHEA que tiene la composición polimórfica deseada es mezclada con al menos un excipiente farmacéutico, y la formulación sólida es comprimida para formar una tableta de acuerdo a los métodos conocidos, para liberarla al tracto gastrointestinal. La composición de la tableta es típicamente formulada con aditivos, por ejemplo, un portador de sacárido o celulosa, un aglutinante tal como la pasta de almidón o metilcelulosa, una carga o rellenador, un desintegrador, u otros aditivos típicamente utilizados en la manufactura de preparaciones médicas. La composición de la invención también puede ser administrada a un sujeto transdérmicamente o por inhalación. Los métodos para preparar las diferentes formas de dosificación convencionales son conocidos o serán evidentes a aquellos expertos en la técnica; por ejemplo, véase Remington r s Pharmaceutical Sciences (19ava Edición, Williams & Wilkins, 1995) .

III Fa macocinética Como lo demuestran los siguientes datos, las formulaciones de DHEA enriquecidas con polimorfo de la forma I o la forma II son ambas absorbidas bien in vivo y son terapéuticamente activas. Los solicitantes han descubierto además que los suministros de DHEA comercialmente disponibles pueden variar significativamente en sus composiciones polimórficas, dando potencialmente como resultado variaciones significativas en la biodisponibilidad y eficacia terapéuticas. Esos problemas son superados por la presente invención, la cual proporciona formulaciones de DHEA de composición conocida que tiene propiedades terapéuticas más confiables, particularmente una biodisponiblidad consistente.

A. Estudio de una Sola Dosis El Ejemplo 2 describe un estudio en el cual a 34 mujeres postmenopáusicas sanas se les administró oralmente una de las tres formulaciones de DHEA, cada una preparada a partir de la DHEA comercialmente disponible, en forma capsular. Las formulaciones fueron administradas en una sola dosis de cuatro cápsulas opacas de tamaño 2, cada cápsula contenía 50 mg de DHEA, 152 mg de lactosa (169 mg para la formulación 3), 108 mg de almidón de maíz, y 3 mg de estearato de magnesio. Las composiciones polimórficas de las formulaciones difirieron como se resume en la Tabla 4 más adelante. La formulación 1 contenía 82% de la forma I, 0% de la forma II, 18% de la forma VI, mientras que la formulación 2 contenía 22% de la forma I, 44% de la forma II y 33% de la forma VI (por RMNES) . La formulación 3, de manera muy similar a la formulación 2, contenía 18% de forma I, 42% de forma II, 39% de forma VI. Los tamaños de partícula promedio en esas formulaciones variaron de acuerdo a la técnica utilizada para la medición, pero generalmente cayeron dentro de un intervalo de 50-150 µm, con las partículas en la formulación 1 siendo un tanto más grandes (Tabla 5) .

Tabla 4. Relaciones Polimórficas en las Formulaciones 1-3 Tabla 4. Relaciones Polimórficas en las Formulaciones 1-3 (continuación) Tabla 5. Tamaño de Partícula Se recolectaron muestras de sangre antes de y a varios tiempos después de la administración, y se midieron los niveles de DHEA y DHEA-S por inmunoensayo . Las gráficas de los niveles de DHEA y DHEA-S se muestran en las Figuras 1 y 2, respectivamente. Con referencia a la Figura 1, el perfil para la formulación 1 muestra que se alcanzó una concentración máxima aproximadamente tres horas después de la administración, seguida por una declinación un tanto rápida a la mitad de la concentración máxima después de aproximadamente 12 horas y a continuación una declinación gradual hasta aproximadamente un tercio de la concentración máxima después de 72 horas. Las formulaciones 2 y 3 alcanzaron una concentración máxima más rápidamente, dentro de aproximadamente 1 hora después de la administración, seguida por una declinación en 2 etapas en la concentración similar a la mostrada por la formulación 1. Esos resultados muestran que ambas de la forma I y la forma II tienen alta biodisponibilidad cuando se administran oralmente. Los datos también indican que las formulaciones 2 y 3, que tienen una mayor proporción de la forma II, son absorbidas más rápidamente y parecen tener una biodisponibilidad mayor (de aproximadamente el 6-14% en base a las mediciones de ABC (Área Bajo la Curva) en relación a la fórmula 1. Los perfiles de DHEA-S mostraron patrones similares. Todas las formulaciones alcanzaron una concentración máxima después de aproximadamente tres horas, mostrando que la DHEA fue convertida rápidamente a su metabolito principal, la forma de sulfato. Las formas de los perfiles fueron también muy similares, excepto que la formulación 1 mostró consistentemente menores niveles de DHEA-S que las formulaciones 2 y 3, consistente con los resultados para la DHEA mostrados en la Figura 1. Esos resultados muestran nuevamente que la formulación 1 parece tener una biodisponibilidad menor que las formulaciones 2 y 3. Los parámetros farmacocinéticos medios estimados (véase el Ejemplo 1) para este estudio están representados en las Tablas 6 y 7 más adelante. La ABC (área bajo la curva) es un indicador del grado de absorción; Cmax y Tmax son indicadores de la velocidad de absorción. Las concentraciones del DHEA en suero para todas las muestras fueron superiores al límite de ensayo de cuantificación. Los valores ajustados al basal se obtuvieron sustrayendo la concentración de suero antes de la dosis al día 1 de cada valor de concentración en suero.

Tabla 6: Parámetros Farmacocinéticos Medios Ajustados, Básales , para DHEA en Suero : Estudio de una Sola Dosis Tabla 6 : Parámetros Farmacocinóticos Medios Ajustados , B sales, para DHEA en Suero : Estudio de una Sola Dosis (continuación) Tabla 7 : Parámetros Farmacocinéticos Medios Ajustados , Básales, para DHEA-S en Suero: Estudio de una Sola Dosis Tabla 7: Parámetros Farmacocinéticos Medios Ajustados, Básales , para DHEA-S en Suero : Estudio de una Sola Dosis (continuación) B . Estudio de Dosis Múltiples El Ejemplo 3 describe un estudio farmacocinético usado de tres periodos, 'aleatorio, marcado abierto, en el cual a 39 mujeres postmenopáusicas sanas se les administró oralmente una de las formulaciones de DHEA en forma capsular. Las formulaciones fueron administradas en una sola dosis de cuatro cápsulas de tamaño 2, opacas, y cada cápsula conteniendo 50 mg de DHEA, 152 mg (Formulación 4) o 169 mg (Formulación 3) de lactosa, 108 mg de almidón de maíz, y 3 mg de estearato de magnesio. La composición polimórfica de la DHEA de la formulación 3 fue como se muestra en la Tabla 4 superior (18% de forma I, 43% de forma II, 39% de forma VI por RMNES) . La formulación 4 contenía DHEA en forma 1 sustancialmente pura (~100%) , preparada por los métodos descritos aquí. Las dosis fueron administradas al mismo tiempo cada mañana de cada uno de los dos periodos de estudio de siete días, separadas por un periodo de lavado de siete días. Las muestras de suero se obtuvieron cinco minutos antes de la dosificación en los días 1 a 6, para la medición de los niveles totales de DHEA y DHEA-S. Al día 7 de cada periodo de estudio, las muestras de suero se obtuvieron 30 minutos antes de la dosificación, a continuación a varios intervalos de tiempo de hasta 72 horas después de la dosificación, y los niveles de DHEA y DHEA-S fueron medidos por inmunoensayo, como se describe en el Ejemplo 3. Las Tablas 8 y 9 muestran los parámetros farmacocinéticos ajustados básales ABC?44-i68 (grado de absorción) , Tmax y Cmax (velocidad de absorción) parA las dos formulaciones. El valor de la ABC?44_i68 representa un intervalo de una sola dosis (día 7), como es estándar para estudios de dosis múltiples.

Tabla 8 : Parámetros Farmacocinéticos Medios Ajustados , Básales , para DHEA en Suero : Estudio de Dosis Múltiples Tabla 9: Parámetros Farmacocinéticos Medios Ajustados, Básales , para DHEA-S en Suero : Estudio de Dosis Múltiples Consistente con los resultados mostrados en el estudio de una sola dosis anterior, la formulación 4 (-100% de la forma I) mostró una biodisponibilidad un tanto reducida, en términos de la velocidad y grado de absorción, en comparación con la formulación 3 (mezcla de polimorfos) . Las gráficas de tiempo de los niveles de DHEA y DHEA-S, de 0.5 horas antes de la dosificación del día 7 hasta el día 10, se muestran en las Figuras 3 y 4, respectivamente. Nuevamente, las gráficas muestran que, aunque ambas formulaciones son absorbidas rápidamente, la formulación 3, que tiene una mayor proporción de forma II, es absorbida más rápidamente y parece tener una mayor biodisponibilidad que la formulación 4, que contiene la forma I pura.

IV. Bioequivalencia en las Formulaciones de DHEA En un aspecto, la invención está dirigida a los métodos para controlar la biodisponibilidad de las formulaciones de DHEA y lograr la bioequivalencia entre las diferentes formulaciones. Por ejemplo, pueden prepararse diferentes formulaciones de DHEA que contengan DHEA y excipientes en las mismas proporciones a partir de diferentes lotes de DHEA y de este modo pueden exhibir diferentes biodisponibilidades in vivo. Como se discutió anteriormente, ha sido encontrado por los inventores que, debido a que las preparaciones de DHEA pueden variar significativamente en sus composiciones polimórficas (1) de los diferentes distribuidores, y (2) de lote a lote del mismo distribuidor, las formulaciones farmacéuticas preparadas de suministros de DHEA comercialmente disponibles pueden variar significativamente en sus biodisponibilidades in vivo. La invención también incluye un método para controlar la biodisponibilidad de una formulación de DHEA. En el método, se administra una cantidad terapéuticamente efectiva de una formulación de DHEA de modo que la formulación comprenda una relación conocida, preseleccionada, de polimorfos de DHEA. Es decir, que se prepara una formulación de DHEA que tiene proporciones (y cantidades) conocidas de uno o más polimorfos de DHEA, por ejemplo, utilizando las condiciones de cristalización apropiadas como se discutió anteriormente, o mezclando las cantidades apropiadas de los polimorfos deseados. La relación polimórfica puede ser seleccionada para proporcionar una biodisponibilidad deseada de la DHEA, por ejemplo, en base a una evaluación de la biodisponibilidad por métodos tales como los descritos anteriormente y en el Ejemplo 2. El método es útil para lograr biodisponibilidades más uniformes y más predecibles de formulaciones de DHEA que las que hayan sido previamente logradas, a la luz del descubrimiento de los solicitantes de que la biodisponibilidad de la DHEA in vivo depende de la composición polimórfica de la DHEA.

V. Indicaciones Se reporta que la DHEA es útil en el tratamiento de muchas condiciones médicas. Las condiciones ejemplares que pueden ser tratadas incluyen, por ejemplo, lupus eritematoso sistémico (McGuire et al . , Patente Estadounidense No. 5,817,650), donde se administra una dosis de aproximadamente 25 a 500 mg/día, de manera opcional concomitantemente con un glucocorticoide tal como la prednisona. Los corticosteroides también pueden ser utilizados para suple entar la DHEA, administrados de 0.25 a 2.0 mg/kg, en el tratamiento de la insuficiencia adrenal primaria o enfermedad de Addison (S.S.C. Yen et al . , Patente Estadounidense No. 5,861,391). La DHEA también puede ser utilizada para aumentar la respuesta inmune a infecciones virales (Patente Estadounidense No. 5,077,284), por ejemplo en el tratamiento de sujetos inmunocomprometidos, tales como pacientes con SIDA, por ejemplo con dosis de 400 mg/día. La diabetes puede ser tratada mediante la administración de 120-480 mg/kg diariamente, por ejemplo, o en una cantidad igualmente aproximada de 0.1% a 0.4% en peso de consumo de alimento, de acuerdo a Coleman et al . (Patente Estadounidense No. 4,518,595). La pérdida de densidad ósea, como en la osteoporosis u osteopenia, también puede ser tratada con DHEA (véase, por ejemplo, Labrie, Patente Estadounidense No. 5,776,923), con una dosis típica siendo de aproximadamente 32 mg/kg diariamente. La DHEA es también efectiva para el tratamiento del síndrome de fatiga crónica o fibromialgia; véase, por ejemplo White, Patente Estadounidense No. 5,935,949. Otras condiciones de interés y dosis sugeridas se resumen en la Tabla a continuación. Como siempre, las dosis óptimas, y frecuencia y duración del tratamiento, puede variar entre sujetos individuales y pueden determinarse por métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica.

Tabla 10 : Condiciones Seleccionadas Tratables con DHEA Tabla 10 : Condiciones Seleccionadas Tratables con DHEA (continuación) Tabla 10: Condiciones Seleccionadas Tratables con DHEA (continuación) Tabla 10 : Condiciones Seleccionadas Tratables con DHEA (continuación) Condición o Dosis Recomendada, Referencia Tratamiento diariamente Artritis 200 - 400 mg oral; R.F. Peat, Patente 800 - 2000 mg Estadounidense No. tópico 4, 628,052 Disminución del 100 - 1800 mg J.E. Nestler et colesterol LDL a l . , Patente Estadounidense No. 4,920,115 Infecciones 100 - 600 mg P.T. Prendergast, retrovirales, Patente especialmente por Estadounidense No.

VIH 4, 956,355 De lo anterior, puede observarse como los objetos y características de la invención se satisfacen. La invención proporciona formulaciones farmacéuticas de DHEA que son ricas en polimorfo de la forma I, forma II, o forma VI, de manera preferible forma I o forma II, y de manera más preferible forma I. Esas formulaciones proporcionan biodisponibilidades consistentes, en contraste con las formulaciones de DHEA utilizadas anteriormente que contienen varias cantidades de polimorfos de DHEA múltiples. Las formulaciones enriquecidas con la forma I de la DHEA son altamente estables y proporcionan composiciones farmacéuticas que retienen un nivel constante de actividad de DHEA durante periodos de tiempo prolongados (por ejemplo, más de 1 ó 2 años) . En consecuencia, las formulaciones enriquecidas con forma I tienen vidas de anaquel prolongadas, lo cual es altamente deseable en un producto farmacéutico. Las formulaciones enriquecidas con forma " II son estables, aunque un tanto menos estables que las formulaciones de la forma I, y puede tener una velocidad de absorción más rápida (y mayor eficacia) in vivo que las formulaciones de la forma I. En consecuencia, las formulaciones enriquecidas de la forma II son también terapéuticamente benéficas . La invención puede ser comprendida mejor a la luz de los siguientes ejemplos, los cuales se ilustran pero no pretenden limitar de ninguna manera la invención.

EJEMPLOS Materiales y Métodos Difracción de Polvo por Rayos X (DPRX) . Los análisis por DPRX se llevaron a cabo en un Difractómetro de Polvo por Rayos X Siemens D-500 Kristaloflex o un difractómetro de polvo por rayos X Shimadzu XRD-6000 utilizando la radiación Ka del Cu (1.5406 Á) . El instrumento Siemens estaba equipado con una interconexión compatible con IBM y utilizaba los programas y sistemas de programación DIFFRAC AT (SOCABIM, 1994) . Las ranuras I y II fueron fijadas a Io y la radiación fue filtrada electrónicamente por un detector de silicón enfriado Kevex Psi Peltier en las ranuras II a I Io en IV a 0.15°. Se utilizó una exploración teta a dos teta continua a 6°/min (0.4 seg/separación de 0.04°) de 4 a 40° 2?. Se analizó un estándar de silicón cada día para verificar la alineación del instrumento. Cada muestra se preparó comprimiendo una pequeña cantidad de polvo sobre un portamuestras de cuarzo en aluminio con un fondo de cero. El instrumento de Shimadzu estaba equipado con un tubo de rayos X de enfoque fino. El polvo del tubo fue colocado a 40 kV, 40 mA. Las ranuras de divergencia y difracción se colocaron a l°y la ranura receptora se colocó a 0.15 mm. La radiación difractada fue detectada por un detector de destellos de Nal. Se utilizó una exploración continua de teta dos teta a 3 o /min (0.4 seg/separación de 0.02°) de 4 a 40° '2?. Se analizó in estándar de silicón cada día para verificar la alineación del instrumento, y se analizó un estándar de alineación para verificar la salida del tubo de rayos X. Cada muestra se preparó para su análisis comprimiendo ésta con una espátula sobre un portamuestras de vidrio o cuarzo. El trabajo cuantitativo (mediciones de las alturas y áreas de los picos) se efectuó de manera general en el instrumento de Shimadzu. Las mediciones de las alturas y áreas de los picos de DPRX se llevaron a cabo utilizando la versión 5.05 del GRAMS/32 que funciona en Windows NT. Para cuantificar la relación de FII a Fl + FVI, se efectuaron exploraciones continuas de teta dos teta sobre un intervalo seleccionado (por ejemplo, °2? de 17 a 23) a un intervalo de exploración seleccionado de 0.5 a 3.0 °/min, típicamente Io /min (0.4 segmentación/O .02° de separación), tres veces por cada muestra. Los archivos de DPRX fueron convertidos a formato ASCII y leídos en la versión 5.05 del GRAMS/32 que funciona en Windows NT. Por cada exploración, se midieron las áreas y alturas de los picos de un pico de la forma I único (típicamente cualquiera de °2T de 18.5 a 20.2) y un pico de la forma II único (típicamente °2? de 20.8) de acuerdo a lo medido. Se generó una curva estándar utilizando mezclas estandarizadas de Fl y FII que fluctuaron de 0 a 100% de FII y Fl a intervalos del 10%, excepto que también se incluyó una muestra que contenía 5% de FII. Las tres alturas (o áreas) medidas por cada muestra fueron promediadas) , y los promedios fueron alimentados a la ecuación definida por la curva de calibración. Método de RMN en Estado Sólido (RMNES) . Los espectros de RMNES se obtuvieron en un espectrómetro General Electric Omega PSG, de 100 MHz utilizando aproximadamente 50 mg de muestra en un rotor de circonio de 5 mm de diámetro. Se utilizó desacoplamiento protónico de alta potencia y polarización cruzada con un giro del ángulo mágico a aproximadamente 5 kHz. El ángulo mágico se ajustó utilizando la señal del Br del KBr detectando las bandas laterales de acuerdo a lo descrito por Frye y Maciel, 1982. Las divisiones químicas fueron referidas externamente a la resonancia del CH y el adamantano a 29.50 ppm. El ajuste de la curva de los picos seleccionados para la integración se efectuó de acuerdo a lo descrito por MacDonald (1980) . Los siguientes picos fuero utilizados para medir las formas I, II y VI . Suma de los picos a 118.9 y 120.3 ppm (forma I); pico a 119.8 (forma II), y el pico a 118.5 ppm (forma VI). Determinación del Contenido Polimórfico . Para determinar las cantidades de los diferentes polimorfos posibles de la DHEA y los materiales que contienen DHEA, se utilizo el siguiente método de tres pasos. 1. Examen visual de un patrón de DRPX para confirmar cualitativamente que únicamente están presentes formas anhidras. 2. Análisis de DRPX para determinar la cantidad FII presente en una mezcla o formas Fl, FII y FVI. 3. Análisis de RMNES cuantitativos para determinar la cantidad de las formas Fl y FVI presentes.

Ejemplo 1: Preparación de la DHEA y los Polimorfos I y I Síntesis de la DHEA. La DHEA se preparó a partir del acetato de DHEA (obtenido de Diosynth, Chicago, II o Berlichem, Montville, NJ) por saponificación utilizando carbonato de potasio en etanol. El producto se disolvió en 6 partes de metanol a reflujo, y se le agregó carbón vegetal y se removió por filtración. El metanol fue evaporado hasta que permaneció un volumen de 3 partes, y la solución fue enfriada a 15°C, mantenida a esa temperatura durante una hora, y filtrada. El producto húmedo fue sometido a reflujo con 8.5 partes de agua para remover el etanol, se filtró bajo vacío a 90°C. La pérdida sobre la especificación del secado para el producto final fue de < 0.5%, y la especificación para metanol residual fue de <0.01%.

Preparación de la forma I. Se colocaron treinta gramos de DHEA, preparados anteriormente, en un matraz de 500 mL bajo una atmósfera de nitrógeno. Se agregó 2-propanol (isopropanol) anhidro hasta que se disolvió toda la DHEA. La solución resultante fue agitada bajo un flujo de nitrógeno durante 2 días, tiempo al cual todo el solvente se había evaporado. El análisis de RMNES indicó que el producto contenía una mezcla de las formas I y VI con la forma I predominando. Para convertir el componente en la forma VI a la forma I, el producto (aproximadamente 30 g) fue agregado a aproximadamente 100 mL de acetato de etilo, y la supensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 semana y se filtró. La torta de filtración se dejó filtrar bajo condiciones ambientales durante la noche y a continuación se hizo pasar a través de un solo tamiz (75 µm) produciendo 9.0 g de partículas con tamaño de > 75 µm y 3.2 g de partículas con tamaños de < 75 µm. El análisis 13C-RMNES de la fracción con tamapo de partícula < 75 µm mostró que solamente estaba presente la forma I.

Preparación de la forma II . Se colocaron treinta gramos de DHEA en un matraz de 500 ml bajo una atmósfera de nitrógeno. Se agregó tetrahidrofurano anhidro hasta que se disolvió toda la DHEA. La solución resultante se agitó bajo un flujo de nitrógeno durante 3 días, tiempo al cual todo el solvente se había evaporado. El sólido fue removido del matraz y se encontró por análisis de DPRX era únicamente la forma II (difractómetro de Siemens) .

Ejemplo 2 : Far acocinética de la Formulación de DHEA Administrada Oralmente: Estudio de Una Sola Dosis Este estudio fue un estudio farmacocinético cruzado en tres periodos, aleatorizado, marcado abierto, en 34 mujeres postmenopaúsicas sanas. Se hizo contacto con los sujetos en la noche antes de cada visita de dosificación y se les recordó comenzar un ayuno nocturno, sin nada de comer o beber (no se permitió agua) durante 10 horas antes de la dosificación. Las muestras de suero para la medición de DHEA y DHEA-S fueron extraídas 30 antes de la dosificación y a las 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 24, 48 y 72 horas después de que los sujetos habían recibido una dosis oral de 200 mg de DHEA (4 cápsulas de formulación 1 ó 2) con 8 onzas ( 226.8 g) de agua. Cada periodo de odsificación fue seguido por un periodo de lavado de 7 días antes de la siguiente administración. Los niveles de DHEA fueron determinados por radiooinmunoensayo (RÍA) en Endocrine Sciences Inc., después de la extracción en solvente no polar. Los datos de validación del método demostraron un intervalo de recuperación del 92-99%, un límite de detección (LOD) 18.9 ng/dL, un límite de cuantificación (LDS) de 87.5 ng/dL, una precisión intraensayo de < 5%, y una precisión interensayo de <10%. Los controles del ensayo interno fueron verificados vía etapas de control. Los niveles de DHEA-S se determinaron por radioinmunoensayo (RÍA) en Endocrine Sciences Inc., después de la enzimólisis de DHEA-S. Los datos de validación del método demostraron un intervalo de recuperación del 86-106%, un límite de detección (LOD) de 3.6 µg/dL, una precisión intraensayo <7% y una precisión interensayo de <10%. Los controles de ensayo internos fueron verificados vía etapas de control. Cada cápsula contenía 50 mg de DHEA (formulación 1, 2 ó 3) y excipientes que consistían de 152 mg de lactosa (169 mg para la formulación ' 3) , 108 mg de almidón de maíz, y 3 mg de estearato de magnesio. El contenido de polimorfo de DHEA de las formulaciones 1-3 se lista en la tabla 4 en la Sección III anterior. Las formulaciones fueron preparadas en cantidades a granel (por ejemplo, 150 kg) pesando y tamizando todos los componentes individuales a través de un tamiz de malla de acero inoxidable tamaño 14 par deshacer los terrones.

Todos los componentes excepto el estearato de magnesio fueron mezclados juntos durante al menos 10 minutos utilizando un mezclador en V seco de 10 pies cúbicos (0.283 m3) de doble coraza Patterson-Kelly . El estearato de magnesio fue agregado mezclado en la mezcla durante al menos 5 minutos. La homogeneidad se verificó tomando muestras de diferentes regiones del mezclador y verificando el contenido de DHEA sobre una base en peso en base a CLAP (isocratico, 1 mL/min de acetronitrilo: agua:metil butiléter, 45:45:10 con una columna Synchropak (C18 RP-P-100, 5 micrones, 250 x 4.6 mm i.d. de Thinchrom, Inc., Lafayette, IN) . Después de pesar, la mezcla fue colocada en cápsulas de gelatina opacas de tamaño 2 (Capsugel o Shionogi) con pesos de llenado de 313 mg.

Generación de Datos Farmacocinéticos y Análisis Estadísticos : Se utilizaron el Microsoft® Excel, SAS® y WinNonlin® para la generación de los conjuntos de datos, el análisis estadístico y la evaluación farmacocinética (PC) . Los niveles de suero ajustado se calcularon sustrayendo el valor basal (promedio de los valores de suero de -0.5 horas y 0 hr) . Cualquier valor ajustado menos de cero se ajustó a cero. Para la DHEA y DHEA-S, se evaluaron la concentración de suero pico (Cma?) y el tiempo para la concentración pico (Tmax) a partir de los datos de concentración - tiempo. La concentración de DHEA y DHEA-S en suero máxima observado (Cmax) y los tiempos de muestreo correspondiente (Tmax) se determinaron para todos los tratamientos, Tmax se expresa en horas después de comenzar cada tratamiento. Los valores de ABC de DHEA y DHEA-S (se determinaron por el método trapezoidal lineal de la hora 0 a la hora 72 (ABC¡o-72)) o la última concentración medida. El área bajo la concentración de tiempo de cero al infinito (ABC(o-oo)) se determinó utilizando la siguiente ecuación: (ABC (?-8) = ABCo-t + Cúitima/ kel donde ABCo-t es el área de concentración-tiempo de cero hasta la última concentración medida (Cúitima) es el método determinado por el método trapezoidal lineal y ke? es la constante de velocidad de eliminación terminal. La constante de velocidad de eliminación terminal se determinó utilizando la regresión lineal de logaritmos de las concentraciones individuales contra el tiempo de la fase de eliminación terminal. La constante de la velocidad de eliminación se estimó efectuando la regresión del logaritmo natural de las concentraciones sobre el tiempo de muestreo para tiempos en el intervalo especificado. Las regresiones se repitieron primero utilizando los últimos tres puntos, después los últimos cuatro puntos. La vida media (t?/2) puede ser calculada dividiendo 0.693 entre ke?- Los parámetros farmacocinéticos principales utilizados para describir la farmacocinética de la DHEA y DHEA-S durante los tratamientos son el área bajo la curva de concentraicón de suero de la hora 0 a la hora 72 (ABC¡o-2))/ la concentración máxima en suero (Cmax) , y el tiempo para la concentración máxima en suero (Tmax) . Las comparaciones de esos parámetros se hicieron con un análisis de modelo de varianza (ANOVA) utilizando los programas y sistemas de programación PROC GML (PC SAS, versión 6.10) .

Ejemplo 3: Farmacocinética de las Formulaciones de DHEA Administrada Oralmente: Estudio de Dosis Múltiple Este estudio fue un estudio cruzado de los tratamientos, en estado estacionario, aleatorizado, abierto de la farmacocinética/farmacodinámica de la DHEA en mujeres postmenopaúsicas sanas. La DHEA fue administrada en cada uno de los 7 días de los dos periodos de estudio, con un periodo de lavado de 7 días (Días 1 a 7 y Días 15 a 21) . Los sujetos recibieron una sola dosis oral de 200 mg (cuatro cápsulas de 50 mg) de DHEA al mismo tiempo cada mañana durante los 7 días de cada periodo de estudio. A los sujetos se les indicó ayunar durante 10 horas antes de cada dosis de DHEA. Cada cápsula contenía 50 mg de DHEA y excipientes farmacéuticos (169 mg (formulación 3) o 152 mg (Formulaicón 4) de lactosa, 108 mg de almidón de maíz, y 3 mg de estearato de magnesio) para dar como resultado un peso de llenado total de la cápsula de 330 y 313 mg para las formulaciones 3 y 4, respectivamente. Los sujetos fueron aleatorizados para recibir uno de las dos formulaciones durante cada periodo de estudio. La composición polimórfica de la DHEA de la formulación se conoce y muestra en la Tabla 4 anterior (18% de forma I, 43% de forma II, y 39% de forma VI) . La formulación IV contenía la forma I de la DHEA sustancialmente pura (-100%), preparada por los métodos descritos aquí. Se obtuvieron muestras de suero para la medición de los niveles totales de DHEA y DHEA-S cinco minutos antes de la dosis oral de 200 mg de DHEA los días 1 a 6 de cada periodo de estudio. En el día 7 de cada periodo de estudio, cada sujetro recibió el mismo desayuno (2 horas después de la dosificación), almuerzo (6 horas después de la dosificación) y cena (10 horas después de la dosificación) . Se condujo un estudio farmacocinético completo, con muestras de sangre para la medición de DHEA y DHEA-S obtenidas 30 minutos antes de la dosificación a las O, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6, 8, 12, 24, 36, 48, 60 y 72 horas después de la dosificación. Los niveles de DHEA se determinaron por radioinmunoensayo (RÍA), en Quest Diagnostics Inc., en el Instituto de Nichols. Los datos de validación del método demostraron que el límite inferior de cuantificación (LLEC) era de aproximadamente 10 ng/dL. Se generaron datos farmacocinéticos y se llevó a cabo el análisis estadístico esencialmente como se describió en el Ejemplo 2, anteriormente. Los parámetros farmacocinéticos medios estimados para las concentraciones de DHEA y DHEA-S en suero este estudio se resumen en las Tablas 8 y 9, anterior (Sección IIIB) . Aunque la invención ha sido descrita con referencia a métodos y modalidades específicas, será apreciado que pueden hacerse varias modificaciones sin apartarse del espíritu de la invención. Se hace constar que con relación a esta fehca, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la practica la citada invención es el que resulte claro de la descripción de la presente invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Una formulación farmacéutica, caracterizada porque comprende deshidroepiandrosterona (DHEA) , al menos 85% de la cual está presente como polimorfo de la forma I, y al menos un excipiente farmacéutico .

2. La formulación de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque al menos el 90% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma I.

3. La formulación de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque al menos el 95% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma I.

4. La formulación de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque al menos el 99% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma I.

5. Un método para preparar una formulación de DHEA, el método se caracteriza porque comprende: mezclar al menos un excipiente farmacéutico sólido con deshidroepiandrosterona (DHEA) , al menos el 85% de la cual está presente como el polimorfo de la forma I .

6. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque al menos el 90% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma I.

7. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque al menos el 95% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma I.

8. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque al menos el 99% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma I.

9. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque comprende, además, el paso de colocar la formulación sólida en un recipiente capsular adecuado para liberarse al tracto gastrointestinal .

10. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque comprende, además, el paso de comprimir la formulación sólida para formar una tableta.

11. En un método para administrar deshidroepiandrosterona (DHEA) para obtener un resultado de alivio, la mejorada caracterizada porque comprende administrar una cantidad farmacéuticamente aceptable de DHEA, donde el menos el 85% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma I.

12. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque al menos el 90% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma I .

13. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque al menos el 95% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma I.

14. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque al menos el 99% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma I.

15. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el resultado de alivio es el tratamiento del lupus eritomatoso sistémico.

16. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el resultado de alivio es la prevención o reducción de la pérdida de densidad ósea.

17. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el resultado de alivio es el tratamiento del síndrome de fatiga crónica o fibromialgia .

18. Una formulación farmacéutica, caracterizada porque comprende deshidroepiandrosterona (DHEA) , al menos 85% de la cual está presente como el polimorfo de la forma I, y al menos un excipiente farmacéutico .

19. La formulación de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque al menos el 90% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma II.

20. La formulación de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque al menos el 95% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma II.

21. La formulación de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque al menos el 99% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma II.

22. Un método para preparar una formulación de DHEA sólida, el método se caracteriza porque comprende: mezclar al menos un excipiente farmacéutico sólido con deshidroepiandrosterona (DHEA), al menos el 85% de la cual está presente como el polimorfo de la forma II.

23. El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque al menos el 90% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma II.

24. El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque al menos el 95% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma II.

25. El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque al menos el 99% de la deshidroepiandrosterona (DHEA) está presente como el polimorfo de la forma II.

26. El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque comprende, además, el paso de colocar la formulación sólida en un recipiente capsular adecuado para liberarse " al tracto gastrointestinal .

27. El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque comprende, además, el paso de comprimir la formulación sólida para formar una tableta.

28. En un método para administrar deshidroepiandrosterona (DHEA) para obtener un resultado de alivio, la mejorada caracterizada porque comprende administrar una cantidad farmacéuticamente aceptable de DHEA, donde el menos el 85% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma II.

29. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque al menos el 90% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma II.

30. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque al menos el 95% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma II.

31. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque al menos el 99% de la DHEA está presente como el polimorfo de la forma II.

32. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque el resultado de alivio es el tratamiento del lupus eritomatoso sistémico.

33. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque el resultado de alivio es la prevención o reducción de la pérdida de densidad ósea.

34. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque el resultado de alivio es el tratamiento del síndrome de fatiga crónica o fibromialgia.

35. Un método para controlar la biodisponibilidad de una formulación de DHEA, el método se caracteriza porque comprende: suministrar a un sujeto una formulación de DHEA que comprende DHEA y un excipiente farmacéutico, donde la DHEA en la formulación consiste de una relación conocida, preseleccionada de polimorfos de DHEA.